灰树花在制备抗抑郁症的制品中的用图
灰树花在制备抗抑郁症的制品中的用图
【技术领域】
[0001] 本发明属于制药领域，特别是涉及灰树花在制备抗抑郁症的制品中的用途。
【背景技术】
[0002] 抑郁症已成为现代社会的常见病和多发病，以情绪低落、兴趣减退、思维迟缓以及 言语与动作减少为特征，重症抑郁有厌世或自杀的念头。这类疾病对患者及其家属造成的 痛苦，以及对社会造成的损失，是许多其它疾病所无法比拟的。根据世界卫生组织（WHO)发 表的报告，情感障碍目前已成为世界第四大疾患，全球的抑郁症患者已达3. 4亿人。目前抑 郁症在中国的发病率大约为4%，而且还在不断升高。中国至少有2600万人患有抑郁症，抑 郁症在中国造成的总经济负担达到622亿元人民币。美国估计有1700万人患有抑郁症，300 万人患躁郁症，每年治疗情感障碍的费用高达440亿美元（冠心病为430亿美元）。在过 去对情感障碍研宄的40年中，特别引人注目的是其发病率和死亡率高，据报道自杀率高达 10%以上，中国每年有25万人自杀。
[0003] 当前的抗抑郁药大致可分为三类：即单胺氧化酶抑制剂、三环类抗抑郁剂及杂环 类抗抑郁剂。主要使用的是五羟色胺再摄取抑制剂等，其不足之处集中表现为起效慢、抗抑 郁谱窄、副作用大、停药后易复发等。现有的抗抑郁药物远远不能满足病人的需求，开发起 效快、抗抑郁谱广泛、毒副作用较小的新药，已成为本领域迫切的需要，将带来巨大的经济 回报。
[0004] 本发明涉及到的灰树花（如图1所示），别名又称贝叶多孔菌、云蕈、千佛菌、栗子 蘑、莲花葫。拉丁学名为Griflolafrondosa(Dick.Fr.)S.F.Gray)。灰树花在分类地位上 隶属于属于真菌界、担子菌亚门（Basidiomycotina)、层菌纲（Hgmenomycetes)、无隔担子 菌亚纲（Holobasidiomyceidae)、非裙菌目（Aphyllophrales)、多孔菌科（Polyporaceae)、 树花菌属（Grigola)，是一种大型食、药两用真菌，原产于北美，在日本东北部也有发现。灰 树花（舞茸）作为一个真菌物种，最早由意大利人发现，因此，舞茸是以意大利人命名的。
[0005] 目前灰树花（舞茸）的提取物已制备成药物，包括灰树花（舞茸）地复仙，英文名 为maitaked-fraction(或舞鸾D-fraction)，是从灰树花（舞鸾）中提取的蛋白多糖体，这 种成分可有效提高人体免疫力，有效控制肿瘤细胞生长，防止肿瘤的转移和复发，减轻化疗 副作用，在多个国家已为治疗癌症通过了临床试验。
[0006] 灰树花中含有以e-(1-6)结合为主链(6-(1-3)结合为侧链的葡聚糖，和以 0-(1-3)结合为主链(6-(1-6)结合为侧链的活性葡聚糖，实验证明这些活性葡聚糖可通 过活化免疫功能而显著抑制肿瘤的生长。
[0007]日本学者最早进行灰树花提取物的研宄。Ohno等从灰树花（舞茸）子实体中提取 得到一种具有抗肿瘤活性的多糖Grifolan(GRN)，证实其结构为每隔3个糖基的C6上具有 一个链的0-1，3-葡聚糖，分子量约为500000。接着Ohno研宄了这种多糖的构象，发现其 在固体状态下表现为两种构象，即天然型和螺旋型。提取得到的多糖为天然型，而剧烈条件 下为螺旋型，两种构象的多糖均具有显著的抗肿瘤活性。
[0008] 我国也己开展对灰树花提取物的研宄，从灰树花（舞茸）子实体和菌丝体中分别 提取得到子实体多糖F-D和菌丝体多搪M-D;F-D和M-D都是含蛋白质的蛋白聚糖，均存在 日-1，3和p-1，6糖昔键，F-D由岩藻糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖组成，M-D 由鼠李糖、岩藻糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖组成。
[0009] 我国就是最早利用真菌治病的国家，真菌具有很高的药用价值，野生的灰树花 (舞茸）呈淡灰色，在我国北方长在柿树、板栗树、榆树的根部周围，所以在我国北方又称为 栗蘑，我国科学家从灰树花（舞茸）中也曾发现可以高效抗癌的物质灰树花提取物，研宄表 明其抗癌活性比化疗药物丝裂霉素还高35%，是灵芝的16. 5倍。
[0010] 美国国家癌症研宄院早在1992年证实，灰树花的萃取物有抵抗艾滋病病毒的功 效。日本的难波宏彰博士除在实验中发现灰树花（舞茸）对乳腺癌、肺癌、肝癌也有疗效； 还可改善肿瘤的化学疗法带来的种种不良反应，如缺乏食欲、呕吐、恶心、头发脱落以及白 细胞减少等等；此外，研宄还证实灰树花（舞茸）的提取物一灰树花（舞茸）地复仙有助于 控制血糖、抑制脂肪细胞堆积、降低血压、增强免疫力的功效。1986年，日本神户药科大学难 波宏彰教授在日本药学杂志上发表了关于灰树花（舞茸）提取物一D(Maitake-D)的研宄 报告。报告指出：舞茸多糖有A、B、C、D四种，它们都有抗癌作用，但D组分的效果最好。舞 茸多糖的单独应用抑瘤率为86. 6% (I.Omg/kg体重），和国际上通用的化疗药物丝裂霉素 的药效对比实验则舞茸提取物单独给药，抑瘤率80 %，丝裂霉素单独给药，抑瘤率45 %，而 二者合并给药，抑瘤率98%。该方法在美国、加拿大、日本已经作为临床抗癌的首选方法，被 称为"第四种癌症治疗法"。
[0011] 经美国、日本对多糖的免疫特性研宄，包括众多临床实验研宄发现，灰树花提取物 可有效激活人体免疫系统，活化免疫细胞，如NK细胞，抗毒T细胞，吞噬细胞等，活化吞噬细 胞、自然杀手细胞等免疫细胞，诱导白细胞介素，干扰素_Y，肿瘤坏死因子_a等细胞因子 的分泌。与免疫治疗药物（干扰素_a2b)有协同作用，从而可以达到抑制肿瘤细胞生长，诱 导癌细胞凋亡的功效。
[0012] 今天，在世界上已经有美国、日本、加拿大和中国等二十多个国家的3000多名肿 瘤医生应用并验证了灰树花的临床疗效，灰树花也被欧美等西方国家作为肿瘤治疗的一线 临床用药。但是经过广泛的文献查询，应用灰树花治疗抑郁症者尚未见有文献报道。
【发明内容】
[0013] 本发明提供一种抗抑郁症的制品，该制品的药效材料为灰树花，具有抗抑郁效果 显著、药食同源，长期服用而副作用甚微，可防/治兼备等优点，技术方案如下：
[0014] 灰树花在制备抗抑郁症的制品中的用途，其特征在于，所述制品的药效组分包括 灰树花全草。
[0015] 所述制品的剂型为片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂或粉剂。
[0016] 所述制品为可即时冲泡的茶包。
[0017] -种抗抑郁症的制品，其特征在于：其药效组分包括灰树花全草。
[0018] -种抗抑郁症的制品，其特征在于：其药效组分为灰树花全草。
[0019] 所述抗抑郁症是指预防或治疗抑郁症。
[0020] 其剂型为片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂或粉剂。
[0021] 所述的制品，还包括制备剂型所需的且可食用的辅助成分。
[0022] 所述的制品，还包括与灰树花全草同时服用后对治疗抑郁症有积极作用的组分， 或包括使灰树花的药效活性稳定性提高的成分。
[0023] 一种制备抗抑郁症的制品的方法，其特征在于：制备过程中采用灰树花全草作为 所述制品的药效组分。
[0024] 上述方法，所述按时提供治疗有效剂量的药剂指每天0. 5mg~1000 mg灰树花/kg 体重，给药方式为口服、滴注或注射；给药对象为哺乳动物，所述哺乳动物包括人。
[0025] 本发明发明人发现灰树花对哺乳动物具有显著的抗抑郁效果。经实验研宄发现， 在哺乳动物小鼠实验中，灰树花具有显著的、较强的、可持续产生的抗抑郁症效果。抑郁症 患者普遍主诉有炎性疼痛症状，如头痛，胃痛，背痛等等。灰树花在抗抑郁的同时，还能改善 病人的炎性症状。许多肿瘤疾病患者经化疗、放疗治疗后，并发抑郁症，灰树花可同时起到 抗肿瘤和抗抑郁的作用。因此灰树花能够综合性地改善抑郁症病人的各种症状，包括精神 抑郁症状、疼痛、炎症等等。目前使用的抗抑郁药物见效很慢，一般需要几个星期，而灰树花 的抗抑郁效果在动物模型中显著、快速、并且持久。
[0026] 本发明所采用的灰树花（Griflolafrondosa)，可商购获得，能长期被人类服用， 它的毒副作用至今未见报道，在试验过程未见常规抗抑郁药物的镇定、诱发癫痫、共济失调 等缺点。具有成为快速的、高效的、无毒副作用的抗抑郁新药的潜力，具有很强的工业实用 性和巨大的商业价值。
[0027] 本发明采用的药物筛选试验为：小鼠悬尾试验和强迫游泳试验，是常用的两种动 物行为绝望抑郁症模型试验，能较好保证筛选结果的可靠性。
[0028] 小鼠悬尾试验是小鼠在悬尾状态下不再挣扎，呈现特有的安静不动状态，抗抑郁 药可明显缩短不动状态的持续时间。测试时，将小鼠尾部用夹子固定、倒悬。勿使小鼠尾部 扭曲折叠。计录不动时间。不动指标为："动物除呼吸外所有肢体均不动"。悬尾试验对各 种抗抑郁药均很敏感，而且避免了游泳试验中温度和动物运动功能障碍的干扰，因而在用 一些鼠种筛选抗抑郁药物时，可以有效地验证和补充强迫游泳实验的结果。
[0029] 小鼠强迫游泳试验已用于很多抗抑郁药物的筛选试验。而且大多数有临床治疗作 用的抗抑郁药也被证实在强迫游泳试验中能有效地减少不动时间。所谓不动是指"动物在 水中停止挣扎，或呈漂浮状态，仅露出鼻孔保持呼吸，仅有细小的肢体运动，以保持头部浮 在水面"。在测试前给拟筛选的药物。由于动物在强迫状态下游泳使动物不能逃出恶劣环 境，导致动物行为绝望。此种模型方法简便，可靠，已广泛用于抗抑郁药剂的筛选和评价。
[0030] 本发明提供的灰树花制备抗抑郁症药物的用途，所制备而得的抗抑郁症药物，可 以基于制药领域的技术人员的常识而加入不影响药物药效的辅助成分，如载体、赋形剂等。 由于该药物通过口服、注射、皮下包埋等方式均可见效，因此，剂型可以是多样的。也可以制 成食品，如饼干、饮品、压片糖果等。
[0031] 本发明提供的抗抑郁症药物还可以是混合有其它与灰树花或其衍生物配合使用 对治疗抑郁症有积极作用的药物成分。
[0032] 本发明所提供的抗抑郁症药物，所述抗抑郁症包括预防和治疗两个阶段。
[0033] 在专利法允许的范围内，本发明还要求保护灰树花在抗抑郁症治疗中的用途，在 动物模型试验中稳定达到抗抑郁治疗效果的剂量范围是每天摄入的灰树花与食物比例为 I:4、1 :2 或I:1〇
[0034] 由于经典抑郁动物模型中的动物不动时间的缩短可能是由于药物的中枢兴奋性 的作用所引起，为了鉴别灰树花是否会增加动物活动性的作用，本发明还同时进行了小鼠 旷野实验（Openfieldtest)，以检验小鼠的自主活动性，避免中枢兴奋药的干扰。经验证 结果表明，各剂量灰树花对小鼠自主活动均无显著影响，故可排除其假阳性结果的可能性， 证明药物抗抑郁作用是可靠的。
[0035] 本发明还请求保护制备抗抑郁症的制品的方法，任何规模的以销售为目的生产行 为都属于本发明请求保护的范围，这种生产行为的特点在于生产过程中采用灰树花全草作 为所述制品的药效组分。
[0036] 在一些国家的专利法允许的情况下，本发 明还请求保护本发明的制品在抗抑郁症 中的用途。
[0037] 本发明中，灰树花为制品的"药效组分"，指灰树花全草作为最终制品的组分，在 制备所述制品过程中，仅对灰树花进行一般的物理加工，如干燥、粉碎等工序以保证全草入 药，不进行浸泡、萃取等化学加工工序。
【附图说明】
[0038] 图1.灰树花图片。
[0039] 图2.小鼠悬尾试验进食一天，60分钟后结果：
[0040] 竖坐标：悬尾试验小鼠不动时间（％对照）；
[0041] 横坐标：从左到右依次为：阴性对照（0. 9%生理盐水），丙咪嘆阳性对照（15mg/ kg)，灰树花（1:4)，灰树花（1:2)，灰树花（1:1)组。
[0042] 图3.小鼠强迫游泳试验进食五天，60分钟后结果，
[0043] 竖坐标：强迫游泳试验小鼠不动时间（％对照）；
[0044]横坐标：从左到右依次为：阴性对照（0.9%生理盐水），丙咪嘆阳性对照（15mg/ kg)，灰树花（1:4)，灰树花（1:2)，灰树花（1:1)组。
[0045] 图4.旷野试验总框移动距离结果一进食三天，1小时后结果，
[0046] 竖坐标：总框移动距离（米）；
[0047]横坐标：从左到右依次为：阴性对照（0.9%生理盐水），灰树花（1:4)，灰树花 (1:2)，灰树花（1:1)。
[0048] 图5.旷野试验中间框移动距离结果一进食三天，1小时后结果，
[0049] 竖坐标：中间框移动距离（米）；
[0050]横坐标：从左到右依次为：阴性对照（0.9%生理盐水），灰树花（1:4)，灰树花 (1:2)，灰树花（1:1)。
【具体实施方式】
[0051] 下述实施例仅用于详细说明和证明本发明所发现的灰树花在抗抑郁症中的新用 途，而不以任何方式限制本发明。
[0052] 实施例
[0053] -、试验材料与方法
[0054](一）实验动物详细信息
[0055] 1.动物品种品系：小鼠，CD-I(ICR)
[0056] 2?等级：SPF级
[0057] 3.动物规格：购买初始周龄和体重（6周龄：22_25g)
[0058] 正式试验周龄和体重（7周龄：30-37g)
[0059] 4?性别：雄性
[0060] 5.质量检测单位：北京维通利华实验动物技术有限公司
[0061] 6?用途：科学研宄
[0062] 7.出售单位：北京维通利华实验动物技术有限公司
[0063] 8?许可证号：SCXK(京）2012- 0001
[0064](二）实验动物饲养条件
[0065] 1.试验动物2015年4月21日从北京首都机场发航空早航班（7 :40起飞），下午 13 :30到昆明长水机场货流中心。包车从云南大学到昆明长水机场货流中心接取实验动物 到云南大学生物馆东楼301室动物饲养房，让小鼠在原装盒子里休息2小时后分笼饲养。
[0066] 2.每笼4只小鼠饲养，饮水和取食自由。
[0067] 3.小鼠饮用蒸馏水（实验室设备自制），小鼠食用的饲料来自于昆明医科大学动 物实验部。
[0068] 4?每天12小时的Light/dark循环，早上9 :00开灯，晚上21 :00关灯。
[0069] 5?室温 23°C饲养。
[0070] 6.每隔两天给小鼠更换垫料，让小鼠有一个舒适的居住环境。
[0071] 7.小鼠在新的饲养环境中适应一周后开始正式实验。
[0072] (三）灰树花详细信息
[0073] 1.灰树花：购买于云南野菌谷菌业有限公司
[0074] 生长地：福建省
[0075] (四）灰树花和正常鼠料不同配比生产含灰树花的实验鼠粮
[0076] 1.把购买的干货灰树花装在事先高温灭过菌的干净布袋里放入灭菌锅中，设置恒 温l〇〇°C蒸30分钟。
[0077] 2.然后取出被蒸过的灰树花放置于干净的纱布上晾晒于自然太阳光照下，直至晒 干为止。
[0078] 3.把晒干的灰树花用万能粉碎机粉碎成粉末，装于干净的塑料袋中。
[0079] 4.把准备好的灰树花粉拿到昆明医科大学实验动物部鼠粮生产室制作不同配比 的含灰树花的鼠粮，按重量比称重，具体如下：
[0080] 灰树花干粉：正常鼠粮基础料 1:4
[0081] 灰树花干粉：正常鼠粮基础料 1:2
[0082] 灰树花干粉：正常鼠粮基础料 1:1
[0083] (五）实验不同处理组设置如下，每组有15只小鼠：
[0084] 阴性对照组：进食正常的鼠粮，每天按体重腹腔注射0. 9%生理盐水
[0085] 阳性对照组：进食正常的鼠粮，每天按体重腹腔注射丙咪嗪（15mg/kg)
[0086] 灰树花鼠粮：进食I:4含灰树花的鼠粮，每天按体重腹腔注射0. 9%生理盐水
[0087] 灰树花鼠粮：进食I:2含灰树花的鼠粮，每天按体重腹腔注射0. 9%生理盐水
[0088] 灰树花鼠粮：进食1 :1含灰树花的鼠粮，每天按体重腹腔注射0. 9%生理盐水
[0089] 为了保证实验的一致性，因设置了阳性对照为腹腔注射丙咪嗪，因此其他组都相 应的每天按体重腹腔注射〇. 9 %生理盐水。
[0090] (六）小鼠注射用的阳性对照药物丙咪嗪所需浓度配置方法：
[0091]
[0092] 先称取粉末状的丙咪嗪60mg放置于无菌的7ml的离心管中，然后加入4ml的 0.9%的生理盐水溶解（最终丙咪嗪溶液的浓度为60mg/4ml= 15mg/ml)，震荡混匀后按稀 释倍数分装在1. 5毫升的离心管中，用锡箔纸包住整个1. 5毫升的离心管，再用封口膜封好 管口后放置于_80°C冰箱冻存，每天注射前按需取出来解冻，然后按计算好的稀释比例加入 0. 9%的生理盐水稀释成所需要的注射剂量，震荡混匀后即可注射使用。
[0093](七）行为学实验操作：
[0094] 1.让小鼠在我们新的动物房饲养环境条件中适应一周后开始实验；
[0095] 2.从2015年4月28日开始实验，上午10点之前先配好药品和准备好实验所需要 的器材，每天都在上午10 :〇〇时开始小鼠称重和注射；
[0096] 3?实验安排
[0097]
[0098] 4.实验环境条件
[0099] (1)悬尾试验条件：室温：24°C、湿度：62- 67%。
[0100] (2)强迫游泳试验条件：室温：24°C、水温：24°C、湿度：62-67%、每做两组更换一 次水。二、试验结果及分析
[0101] (1)试验结果
[0102] 灰树花不同剂量处理⑶-1小鼠后的行为学试验结果：
[0103] 1)灰树花（15个重复）处理一天，60分钟后的悬尾试验结果，如图2所示。
[0104] 2)灰树花（15个重复）处理五天，60分钟后的强迫游泳试验结果，如图3所示。
[0105] 3)灰树花（15个重复）处理三天，60分钟后的旷野试验结果（总框移动距离和中 框移动距离），如图4和图5所示。
[0106] (2)试验结果分析：
[0107] 悬尾试验结果分析：从灰树花（15个重复）处理一天，60分钟后悬尾试验结果的 柱状图（图2)可以看出灰树花（1:4)较0. 9%的生理盐水相比显示出显著性的抗抑郁样的 效果（P= 〇. 〇449，P〈0. 05)、灰树花（1:2)较0. 9%的生理盐水相比显示出较显著性的抗抑 郁样的效果（P= 〇. 〇〇75，P〈0. 01)以及灰树花（1:1)较0. 9%的生理盐水相比显示出显著 性的抗抑郁样的效果（P= 〇? 0128,P〈0. 05)。（如图2所示）
[0108] 强迫游泳试验结果分析：从灰树花（15个重复）处理五天，60分钟后强迫游泳试 验结果的柱状图（图3)可以看出灰树花（1:4)较0.9%的生理盐水相比显示出较显著性的 抗抑郁样的效果（P= 〇. 〇〇79，P〈0. 01)、灰树花（1:2)较0.9%的生理盐水相比显示出较显 著性的抗抑郁样的效果（P= 〇. 0030,P〈0. 01)以及灰树花（I: 1)较0. 9%的生理盐水相比 显示出显著性的抗抑郁样的效果（P= 0. 0186,P〈0. 05)。（如图3所示）
[0109] 旷野试验结果分析：1)从灰树花（15个重复）处理三天，60分钟后旷野试验总框 移动距离结果的柱状图（图4)可以看出灰树花（1:4)、灰树花（1:2)、灰树花（I: 1)较0. 9% 的生理盐水相比没有显著性差（P>〇. 05)，该结果表明了不是由于药物（灰树花）的中枢兴 奋性作用引起小鼠不动时间的缩短（如图4所示）。2)从灰树花（15个重复）处理三天， 60分钟后旷野试验中间框移动距离结果的柱状图（图5)可以看出灰树花（1:4)、灰树花 (1:2)、灰树花（1:1)较0.9%的生理盐水相比没有显著性差（P>0. 05)，该结果进一步表明 了不是由于药物（灰树花）的中枢兴奋性作用引起小鼠不动时间的缩短。（如图5所示）
【主权项】
1. 灰树花在制备抗抑郁症的制品中的用途，其特征在于：所述制品的药效组分包括灰 树花全草。2. 根据权利要求1所述的用途，所述制品的剂型为片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂或粉剂。3.根据权利要求1所述的用途，所述制品为可即时冲泡的茶包。4. 一种抗抑郁症的制品，其特征在于：其药效组分包括灰树花全草。5. -种抗抑郁症的制品，其特征在于：其药效组分为灰树花全草。6. 根据权利要求4或5所述的制品，所述抗抑郁症是指预防或治疗抑郁症。7.根据权利要求4或5所述的制品，其剂型为片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂或粉剂。8. 根据权利要求7所述的制品，还包括制备剂型所需的且可食用的辅助成分。9.根据权利要求5~8任一所述的制品，还包括与灰树花全草同时服用后对治疗抑郁 症有积极作用的组分，或包括使灰树花的药效活性稳定性提高的成分。10. -种制备抗抑郁症的制品的方法，其特征在于：制备过程中采用灰树花全草作为 所述制品的药效组分。
【专利摘要】本发明涉及灰树花在制备抗抑郁症的制品中的用途，属于制药领域，其特征在于，所述制品的药效组分包括灰树花全草，所述药物可用于预防或治疗抑郁症，具有显著的抗抑郁效果，不仅起效快，而且药食同源，可长期服用，防治兼备，因此，可作为优良的抗抑郁症的候选药物。
【IPC分类】A61P25/24, A61K36/07, A23L1/30, A23F3/34
【公开号】CN104906150
【申请号】CN201510315301
【发明人】杜静, 肖春杰, 保红坤, 朱明
【申请人】云南大学
【公开日】2015年9月16日
【申请日】2015年6月10日
【技术领域】
[0001] 本发明属于制药领域，特别是涉及灰树花在制备抗抑郁症的制品中的用途。
【背景技术】
[0002] 抑郁症已成为现代社会的常见病和多发病，以情绪低落、兴趣减退、思维迟缓以及 言语与动作减少为特征，重症抑郁有厌世或自杀的念头。这类疾病对患者及其家属造成的 痛苦，以及对社会造成的损失，是许多其它疾病所无法比拟的。根据世界卫生组织（WHO)发 表的报告，情感障碍目前已成为世界第四大疾患，全球的抑郁症患者已达3. 4亿人。目前抑 郁症在中国的发病率大约为4%，而且还在不断升高。中国至少有2600万人患有抑郁症，抑 郁症在中国造成的总经济负担达到622亿元人民币。美国估计有1700万人患有抑郁症，300 万人患躁郁症，每年治疗情感障碍的费用高达440亿美元（冠心病为430亿美元）。在过 去对情感障碍研宄的40年中，特别引人注目的是其发病率和死亡率高，据报道自杀率高达 10%以上，中国每年有25万人自杀。
[0003] 当前的抗抑郁药大致可分为三类：即单胺氧化酶抑制剂、三环类抗抑郁剂及杂环 类抗抑郁剂。主要使用的是五羟色胺再摄取抑制剂等，其不足之处集中表现为起效慢、抗抑 郁谱窄、副作用大、停药后易复发等。现有的抗抑郁药物远远不能满足病人的需求，开发起 效快、抗抑郁谱广泛、毒副作用较小的新药，已成为本领域迫切的需要，将带来巨大的经济 回报。
[0004] 本发明涉及到的灰树花（如图1所示），别名又称贝叶多孔菌、云蕈、千佛菌、栗子 蘑、莲花葫。拉丁学名为Griflolafrondosa(Dick.Fr.)S.F.Gray)。灰树花在分类地位上 隶属于属于真菌界、担子菌亚门（Basidiomycotina)、层菌纲（Hgmenomycetes)、无隔担子 菌亚纲（Holobasidiomyceidae)、非裙菌目（Aphyllophrales)、多孔菌科（Polyporaceae)、 树花菌属（Grigola)，是一种大型食、药两用真菌，原产于北美，在日本东北部也有发现。灰 树花（舞茸）作为一个真菌物种，最早由意大利人发现，因此，舞茸是以意大利人命名的。
[0005] 目前灰树花（舞茸）的提取物已制备成药物，包括灰树花（舞茸）地复仙，英文名 为maitaked-fraction(或舞鸾D-fraction)，是从灰树花（舞鸾）中提取的蛋白多糖体，这 种成分可有效提高人体免疫力，有效控制肿瘤细胞生长，防止肿瘤的转移和复发，减轻化疗 副作用，在多个国家已为治疗癌症通过了临床试验。
[0006] 灰树花中含有以e-(1-6)结合为主链(6-(1-3)结合为侧链的葡聚糖，和以 0-(1-3)结合为主链(6-(1-6)结合为侧链的活性葡聚糖，实验证明这些活性葡聚糖可通 过活化免疫功能而显著抑制肿瘤的生长。
[0007]日本学者最早进行灰树花提取物的研宄。Ohno等从灰树花（舞茸）子实体中提取 得到一种具有抗肿瘤活性的多糖Grifolan(GRN)，证实其结构为每隔3个糖基的C6上具有 一个链的0-1，3-葡聚糖，分子量约为500000。接着Ohno研宄了这种多糖的构象，发现其 在固体状态下表现为两种构象，即天然型和螺旋型。提取得到的多糖为天然型，而剧烈条件 下为螺旋型，两种构象的多糖均具有显著的抗肿瘤活性。
[0008] 我国也己开展对灰树花提取物的研宄，从灰树花（舞茸）子实体和菌丝体中分别 提取得到子实体多糖F-D和菌丝体多搪M-D;F-D和M-D都是含蛋白质的蛋白聚糖，均存在 日-1，3和p-1，6糖昔键，F-D由岩藻糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖组成，M-D 由鼠李糖、岩藻糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖组成。
[0009] 我国就是最早利用真菌治病的国家，真菌具有很高的药用价值，野生的灰树花 (舞茸）呈淡灰色，在我国北方长在柿树、板栗树、榆树的根部周围，所以在我国北方又称为 栗蘑，我国科学家从灰树花（舞茸）中也曾发现可以高效抗癌的物质灰树花提取物，研宄表 明其抗癌活性比化疗药物丝裂霉素还高35%，是灵芝的16. 5倍。
[0010] 美国国家癌症研宄院早在1992年证实，灰树花的萃取物有抵抗艾滋病病毒的功 效。日本的难波宏彰博士除在实验中发现灰树花（舞茸）对乳腺癌、肺癌、肝癌也有疗效； 还可改善肿瘤的化学疗法带来的种种不良反应，如缺乏食欲、呕吐、恶心、头发脱落以及白 细胞减少等等；此外，研宄还证实灰树花（舞茸）的提取物一灰树花（舞茸）地复仙有助于 控制血糖、抑制脂肪细胞堆积、降低血压、增强免疫力的功效。1986年，日本神户药科大学难 波宏彰教授在日本药学杂志上发表了关于灰树花（舞茸）提取物一D(Maitake-D)的研宄 报告。报告指出：舞茸多糖有A、B、C、D四种，它们都有抗癌作用，但D组分的效果最好。舞 茸多糖的单独应用抑瘤率为86. 6% (I.Omg/kg体重），和国际上通用的化疗药物丝裂霉素 的药效对比实验则舞茸提取物单独给药，抑瘤率80 %，丝裂霉素单独给药，抑瘤率45 %，而 二者合并给药，抑瘤率98%。该方法在美国、加拿大、日本已经作为临床抗癌的首选方法，被 称为"第四种癌症治疗法"。
[0011] 经美国、日本对多糖的免疫特性研宄，包括众多临床实验研宄发现，灰树花提取物 可有效激活人体免疫系统，活化免疫细胞，如NK细胞，抗毒T细胞，吞噬细胞等，活化吞噬细 胞、自然杀手细胞等免疫细胞，诱导白细胞介素，干扰素_Y，肿瘤坏死因子_a等细胞因子 的分泌。与免疫治疗药物（干扰素_a2b)有协同作用，从而可以达到抑制肿瘤细胞生长，诱 导癌细胞凋亡的功效。
[0012] 今天，在世界上已经有美国、日本、加拿大和中国等二十多个国家的3000多名肿 瘤医生应用并验证了灰树花的临床疗效，灰树花也被欧美等西方国家作为肿瘤治疗的一线 临床用药。但是经过广泛的文献查询，应用灰树花治疗抑郁症者尚未见有文献报道。
【发明内容】
[0013] 本发明提供一种抗抑郁症的制品，该制品的药效材料为灰树花，具有抗抑郁效果 显著、药食同源，长期服用而副作用甚微，可防/治兼备等优点，技术方案如下：
[0014] 灰树花在制备抗抑郁症的制品中的用途，其特征在于，所述制品的药效组分包括 灰树花全草。
[0015] 所述制品的剂型为片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂或粉剂。
[0016] 所述制品为可即时冲泡的茶包。
[0017] -种抗抑郁症的制品，其特征在于：其药效组分包括灰树花全草。
[0018] -种抗抑郁症的制品，其特征在于：其药效组分为灰树花全草。
[0019] 所述抗抑郁症是指预防或治疗抑郁症。
[0020] 其剂型为片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂或粉剂。
[0021] 所述的制品，还包括制备剂型所需的且可食用的辅助成分。
[0022] 所述的制品，还包括与灰树花全草同时服用后对治疗抑郁症有积极作用的组分， 或包括使灰树花的药效活性稳定性提高的成分。
[0023] 一种制备抗抑郁症的制品的方法，其特征在于：制备过程中采用灰树花全草作为 所述制品的药效组分。
[0024] 上述方法，所述按时提供治疗有效剂量的药剂指每天0. 5mg~1000 mg灰树花/kg 体重，给药方式为口服、滴注或注射；给药对象为哺乳动物，所述哺乳动物包括人。
[0025] 本发明发明人发现灰树花对哺乳动物具有显著的抗抑郁效果。经实验研宄发现， 在哺乳动物小鼠实验中，灰树花具有显著的、较强的、可持续产生的抗抑郁症效果。抑郁症 患者普遍主诉有炎性疼痛症状，如头痛，胃痛，背痛等等。灰树花在抗抑郁的同时，还能改善 病人的炎性症状。许多肿瘤疾病患者经化疗、放疗治疗后，并发抑郁症，灰树花可同时起到 抗肿瘤和抗抑郁的作用。因此灰树花能够综合性地改善抑郁症病人的各种症状，包括精神 抑郁症状、疼痛、炎症等等。目前使用的抗抑郁药物见效很慢，一般需要几个星期，而灰树花 的抗抑郁效果在动物模型中显著、快速、并且持久。
[0026] 本发明所采用的灰树花（Griflolafrondosa)，可商购获得，能长期被人类服用， 它的毒副作用至今未见报道，在试验过程未见常规抗抑郁药物的镇定、诱发癫痫、共济失调 等缺点。具有成为快速的、高效的、无毒副作用的抗抑郁新药的潜力，具有很强的工业实用 性和巨大的商业价值。
[0027] 本发明采用的药物筛选试验为：小鼠悬尾试验和强迫游泳试验，是常用的两种动 物行为绝望抑郁症模型试验，能较好保证筛选结果的可靠性。
[0028] 小鼠悬尾试验是小鼠在悬尾状态下不再挣扎，呈现特有的安静不动状态，抗抑郁 药可明显缩短不动状态的持续时间。测试时，将小鼠尾部用夹子固定、倒悬。勿使小鼠尾部 扭曲折叠。计录不动时间。不动指标为："动物除呼吸外所有肢体均不动"。悬尾试验对各 种抗抑郁药均很敏感，而且避免了游泳试验中温度和动物运动功能障碍的干扰，因而在用 一些鼠种筛选抗抑郁药物时，可以有效地验证和补充强迫游泳实验的结果。
[0029] 小鼠强迫游泳试验已用于很多抗抑郁药物的筛选试验。而且大多数有临床治疗作 用的抗抑郁药也被证实在强迫游泳试验中能有效地减少不动时间。所谓不动是指"动物在 水中停止挣扎，或呈漂浮状态，仅露出鼻孔保持呼吸，仅有细小的肢体运动，以保持头部浮 在水面"。在测试前给拟筛选的药物。由于动物在强迫状态下游泳使动物不能逃出恶劣环 境，导致动物行为绝望。此种模型方法简便，可靠，已广泛用于抗抑郁药剂的筛选和评价。
[0030] 本发明提供的灰树花制备抗抑郁症药物的用途，所制备而得的抗抑郁症药物，可 以基于制药领域的技术人员的常识而加入不影响药物药效的辅助成分，如载体、赋形剂等。 由于该药物通过口服、注射、皮下包埋等方式均可见效，因此，剂型可以是多样的。也可以制 成食品，如饼干、饮品、压片糖果等。
[0031] 本发明提供的抗抑郁症药物还可以是混合有其它与灰树花或其衍生物配合使用 对治疗抑郁症有积极作用的药物成分。
[0032] 本发明所提供的抗抑郁症药物，所述抗抑郁症包括预防和治疗两个阶段。
[0033] 在专利法允许的范围内，本发明还要求保护灰树花在抗抑郁症治疗中的用途，在 动物模型试验中稳定达到抗抑郁治疗效果的剂量范围是每天摄入的灰树花与食物比例为 I:4、1 :2 或I:1〇
[0034] 由于经典抑郁动物模型中的动物不动时间的缩短可能是由于药物的中枢兴奋性 的作用所引起，为了鉴别灰树花是否会增加动物活动性的作用，本发明还同时进行了小鼠 旷野实验（Openfieldtest)，以检验小鼠的自主活动性，避免中枢兴奋药的干扰。经验证 结果表明，各剂量灰树花对小鼠自主活动均无显著影响，故可排除其假阳性结果的可能性， 证明药物抗抑郁作用是可靠的。
[0035] 本发明还请求保护制备抗抑郁症的制品的方法，任何规模的以销售为目的生产行 为都属于本发明请求保护的范围，这种生产行为的特点在于生产过程中采用灰树花全草作 为所述制品的药效组分。
[0036] 在一些国家的专利法允许的情况下，本发 明还请求保护本发明的制品在抗抑郁症 中的用途。
[0037] 本发明中，灰树花为制品的"药效组分"，指灰树花全草作为最终制品的组分，在 制备所述制品过程中，仅对灰树花进行一般的物理加工，如干燥、粉碎等工序以保证全草入 药，不进行浸泡、萃取等化学加工工序。
【附图说明】
[0038] 图1.灰树花图片。
[0039] 图2.小鼠悬尾试验进食一天，60分钟后结果：
[0040] 竖坐标：悬尾试验小鼠不动时间（％对照）；
[0041] 横坐标：从左到右依次为：阴性对照（0. 9%生理盐水），丙咪嘆阳性对照（15mg/ kg)，灰树花（1:4)，灰树花（1:2)，灰树花（1:1)组。
[0042] 图3.小鼠强迫游泳试验进食五天，60分钟后结果，
[0043] 竖坐标：强迫游泳试验小鼠不动时间（％对照）；
[0044]横坐标：从左到右依次为：阴性对照（0.9%生理盐水），丙咪嘆阳性对照（15mg/ kg)，灰树花（1:4)，灰树花（1:2)，灰树花（1:1)组。
[0045] 图4.旷野试验总框移动距离结果一进食三天，1小时后结果，
[0046] 竖坐标：总框移动距离（米）；
[0047]横坐标：从左到右依次为：阴性对照（0.9%生理盐水），灰树花（1:4)，灰树花 (1:2)，灰树花（1:1)。
[0048] 图5.旷野试验中间框移动距离结果一进食三天，1小时后结果，
[0049] 竖坐标：中间框移动距离（米）；
[0050]横坐标：从左到右依次为：阴性对照（0.9%生理盐水），灰树花（1:4)，灰树花 (1:2)，灰树花（1:1)。
【具体实施方式】
[0051] 下述实施例仅用于详细说明和证明本发明所发现的灰树花在抗抑郁症中的新用 途，而不以任何方式限制本发明。
[0052] 实施例
[0053] -、试验材料与方法
[0054](一）实验动物详细信息
[0055] 1.动物品种品系：小鼠，CD-I(ICR)
[0056] 2?等级：SPF级
[0057] 3.动物规格：购买初始周龄和体重（6周龄：22_25g)
[0058] 正式试验周龄和体重（7周龄：30-37g)
[0059] 4?性别：雄性
[0060] 5.质量检测单位：北京维通利华实验动物技术有限公司
[0061] 6?用途：科学研宄
[0062] 7.出售单位：北京维通利华实验动物技术有限公司
[0063] 8?许可证号：SCXK(京）2012- 0001
[0064](二）实验动物饲养条件
[0065] 1.试验动物2015年4月21日从北京首都机场发航空早航班（7 :40起飞），下午 13 :30到昆明长水机场货流中心。包车从云南大学到昆明长水机场货流中心接取实验动物 到云南大学生物馆东楼301室动物饲养房，让小鼠在原装盒子里休息2小时后分笼饲养。
[0066] 2.每笼4只小鼠饲养，饮水和取食自由。
[0067] 3.小鼠饮用蒸馏水（实验室设备自制），小鼠食用的饲料来自于昆明医科大学动 物实验部。
[0068] 4?每天12小时的Light/dark循环，早上9 :00开灯，晚上21 :00关灯。
[0069] 5?室温 23°C饲养。
[0070] 6.每隔两天给小鼠更换垫料，让小鼠有一个舒适的居住环境。
[0071] 7.小鼠在新的饲养环境中适应一周后开始正式实验。
[0072] (三）灰树花详细信息
[0073] 1.灰树花：购买于云南野菌谷菌业有限公司
[0074] 生长地：福建省
[0075] (四）灰树花和正常鼠料不同配比生产含灰树花的实验鼠粮
[0076] 1.把购买的干货灰树花装在事先高温灭过菌的干净布袋里放入灭菌锅中，设置恒 温l〇〇°C蒸30分钟。
[0077] 2.然后取出被蒸过的灰树花放置于干净的纱布上晾晒于自然太阳光照下，直至晒 干为止。
[0078] 3.把晒干的灰树花用万能粉碎机粉碎成粉末，装于干净的塑料袋中。
[0079] 4.把准备好的灰树花粉拿到昆明医科大学实验动物部鼠粮生产室制作不同配比 的含灰树花的鼠粮，按重量比称重，具体如下：
[0080] 灰树花干粉：正常鼠粮基础料 1:4
[0081] 灰树花干粉：正常鼠粮基础料 1:2
[0082] 灰树花干粉：正常鼠粮基础料 1:1
[0083] (五）实验不同处理组设置如下，每组有15只小鼠：
[0084] 阴性对照组：进食正常的鼠粮，每天按体重腹腔注射0. 9%生理盐水
[0085] 阳性对照组：进食正常的鼠粮，每天按体重腹腔注射丙咪嗪（15mg/kg)
[0086] 灰树花鼠粮：进食I:4含灰树花的鼠粮，每天按体重腹腔注射0. 9%生理盐水
[0087] 灰树花鼠粮：进食I:2含灰树花的鼠粮，每天按体重腹腔注射0. 9%生理盐水
[0088] 灰树花鼠粮：进食1 :1含灰树花的鼠粮，每天按体重腹腔注射0. 9%生理盐水
[0089] 为了保证实验的一致性，因设置了阳性对照为腹腔注射丙咪嗪，因此其他组都相 应的每天按体重腹腔注射〇. 9 %生理盐水。
[0090] (六）小鼠注射用的阳性对照药物丙咪嗪所需浓度配置方法：
[0091]
[0092] 先称取粉末状的丙咪嗪60mg放置于无菌的7ml的离心管中，然后加入4ml的 0.9%的生理盐水溶解（最终丙咪嗪溶液的浓度为60mg/4ml= 15mg/ml)，震荡混匀后按稀 释倍数分装在1. 5毫升的离心管中，用锡箔纸包住整个1. 5毫升的离心管，再用封口膜封好 管口后放置于_80°C冰箱冻存，每天注射前按需取出来解冻，然后按计算好的稀释比例加入 0. 9%的生理盐水稀释成所需要的注射剂量，震荡混匀后即可注射使用。
[0093](七）行为学实验操作：
[0094] 1.让小鼠在我们新的动物房饲养环境条件中适应一周后开始实验；
[0095] 2.从2015年4月28日开始实验，上午10点之前先配好药品和准备好实验所需要 的器材，每天都在上午10 :〇〇时开始小鼠称重和注射；
[0096] 3?实验安排
[0097]
[0098] 4.实验环境条件
[0099] (1)悬尾试验条件：室温：24°C、湿度：62- 67%。
[0100] (2)强迫游泳试验条件：室温：24°C、水温：24°C、湿度：62-67%、每做两组更换一 次水。二、试验结果及分析
[0101] (1)试验结果
[0102] 灰树花不同剂量处理⑶-1小鼠后的行为学试验结果：
[0103] 1)灰树花（15个重复）处理一天，60分钟后的悬尾试验结果，如图2所示。
[0104] 2)灰树花（15个重复）处理五天，60分钟后的强迫游泳试验结果，如图3所示。
[0105] 3)灰树花（15个重复）处理三天，60分钟后的旷野试验结果（总框移动距离和中 框移动距离），如图4和图5所示。
[0106] (2)试验结果分析：
[0107] 悬尾试验结果分析：从灰树花（15个重复）处理一天，60分钟后悬尾试验结果的 柱状图（图2)可以看出灰树花（1:4)较0. 9%的生理盐水相比显示出显著性的抗抑郁样的 效果（P= 〇. 〇449，P〈0. 05)、灰树花（1:2)较0. 9%的生理盐水相比显示出较显著性的抗抑 郁样的效果（P= 〇. 〇〇75，P〈0. 01)以及灰树花（1:1)较0. 9%的生理盐水相比显示出显著 性的抗抑郁样的效果（P= 〇? 0128,P〈0. 05)。（如图2所示）
[0108] 强迫游泳试验结果分析：从灰树花（15个重复）处理五天，60分钟后强迫游泳试 验结果的柱状图（图3)可以看出灰树花（1:4)较0.9%的生理盐水相比显示出较显著性的 抗抑郁样的效果（P= 〇. 〇〇79，P〈0. 01)、灰树花（1:2)较0.9%的生理盐水相比显示出较显 著性的抗抑郁样的效果（P= 〇. 0030,P〈0. 01)以及灰树花（I: 1)较0. 9%的生理盐水相比 显示出显著性的抗抑郁样的效果（P= 0. 0186,P〈0. 05)。（如图3所示）
[0109] 旷野试验结果分析：1)从灰树花（15个重复）处理三天，60分钟后旷野试验总框 移动距离结果的柱状图（图4)可以看出灰树花（1:4)、灰树花（1:2)、灰树花（I: 1)较0. 9% 的生理盐水相比没有显著性差（P>〇. 05)，该结果表明了不是由于药物（灰树花）的中枢兴 奋性作用引起小鼠不动时间的缩短（如图4所示）。2)从灰树花（15个重复）处理三天， 60分钟后旷野试验中间框移动距离结果的柱状图（图5)可以看出灰树花（1:4)、灰树花 (1:2)、灰树花（1:1)较0.9%的生理盐水相比没有显著性差（P>0. 05)，该结果进一步表明 了不是由于药物（灰树花）的中枢兴奋性作用引起小鼠不动时间的缩短。（如图5所示）
【主权项】
1. 灰树花在制备抗抑郁症的制品中的用途，其特征在于：所述制品的药效组分包括灰 树花全草。2. 根据权利要求1所述的用途，所述制品的剂型为片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂或粉剂。3.根据权利要求1所述的用途，所述制品为可即时冲泡的茶包。4. 一种抗抑郁症的制品，其特征在于：其药效组分包括灰树花全草。5. -种抗抑郁症的制品，其特征在于：其药效组分为灰树花全草。6. 根据权利要求4或5所述的制品，所述抗抑郁症是指预防或治疗抑郁症。7.根据权利要求4或5所述的制品，其剂型为片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂或粉剂。8. 根据权利要求7所述的制品，还包括制备剂型所需的且可食用的辅助成分。9.根据权利要求5~8任一所述的制品，还包括与灰树花全草同时服用后对治疗抑郁 症有积极作用的组分，或包括使灰树花的药效活性稳定性提高的成分。10. -种制备抗抑郁症的制品的方法，其特征在于：制备过程中采用灰树花全草作为 所述制品的药效组分。
【专利摘要】本发明涉及灰树花在制备抗抑郁症的制品中的用途，属于制药领域，其特征在于，所述制品的药效组分包括灰树花全草，所述药物可用于预防或治疗抑郁症，具有显著的抗抑郁效果，不仅起效快，而且药食同源，可长期服用，防治兼备，因此，可作为优良的抗抑郁症的候选药物。
【IPC分类】A61P25/24, A61K36/07, A23L1/30, A23F3/34
【公开号】CN104906150
【申请号】CN201510315301
【发明人】杜静, 肖春杰, 保红坤, 朱明
【申请人】云南大学
【公开日】2015年9月16日
【申请日】2015年6月10日
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