黄刺果实及其提取物降血糖的用图
黄刺果实及其提取物降血糖的用图
【技术领域】
[0001] 本发明属于保健品领域，具体涉及黄刺果实及其提取物的医药新用途。 技术背景
[0002] 据统计，目前我国糖尿病的患病人数已经达到了 9240万，居全球之首（YangW，et al.NEnglJMed，2010,362(12) :1090-1101)。中国糖尿病治疗费用每年高达1734亿元， 糖尿病所致的直接医疗开支已经占到中国医疗总开支的13%(AlcornT，etal.Lancet， 2012,379(9833) :2227-2228)。由此可见，糖尿病不仅严重危害人民的健康，而且为国家带 来沉重的经济负担。因而，防治糖尿病刻不容缓。
[0003]黄刺，小檗科植物直穗小檗BerberisdasystachyaMaxim.，是与白刺、沙棘（黑 刺）一样为蒙、藏、维吾尔等少数民族药用与食用的传统野生浆果，统称为"青海三刺"。《青 海常用中草药手册》中对黄刺皮（即根皮）有详细记载：黄刺皮即为双子叶植物药小檗科 植物直穗小檗的茎皮。其果实医药功能也做了简要的记述，其具有治疗腹痛，消化不良，腹 胀，痢疾等功能。
[0004] 目前还未见对黄刺果实降血糖的报道。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的在于提供黄刺果实及其提取物的新用途。
[0006] 具体地，本发明提供了黄刺果实或其提取物在制备降血糖的药物、保健品或食品 中的用途。
[0007] 进一步地，所述药物、保健品或食品是预防或治疗I型、II型糖尿病或/和糖尿病 并发症的药物、保健品或食品。
[0008] 更进一步地，所述药物、保健品或食品是预防或治疗肝功能正常或受损患者的药 物、保健品或食品。
[0009] 本发明研宄发现，黄刺果实不会导致肝功能受损，同样适合用于肝功能受损糖尿 病患者的治疗。
[0010] 其中，所述药物、保健品或食品是提高胰岛素水平的药物、保健品或食品。
[0011] 进一步地，所述黄刺果实提取物为黄刺果实的水提物。根据黄刺果实和水溶性成 分一一多糖都具有降血糖作用的这一结果可以毫无疑问地推定，黄刺果实的水提物也具备 降血糖作用。
[0012] 其中，所述黄刺为小檗科植物直穗小檗BerberisdasystachyaMaxim.。
[0013] 其中，所述药物、保健品或食品为口服剂型；进一步地，所述口服剂型选自片剂、胶 囊剂、丸剂、颗粒剂、散剂、浸膏剂或口服液。
[0014] 本发明研宄发现，黄刺果实及其提取物具有良好的降血糖功能，可升高胰岛素量， 其降血糖作用与糖尿病一线化学药物格列本脲相当，但与之不同的是，黄刺果实物不会导 致肝脏损伤，安全性良好，适用范围更广，更适合作为治疗和预防糖尿病的食品、保健品或 药物。
【具体实施方式】
[0015] 实施例1本发明黄刺果实的药效学研宄
[0016] 1)实验药物：取黄刺果实，干燥后直接粉碎得到果粉备用。给药量按大鼠体重计， 灌胃低剂量、高剂量分别为〇. 4g/kg，I. 6g/kg(以黄刺果粉用量）。
[0017] 2)动物：四周龄昆明大鼠，雄性，普通级，135g，由甘肃中医学院提供。于实验室内 安置于鼠笼中饲养一周后进行实验（每笼8只，温度22± 1°C，湿度42% ±2% )。分为五 组：分别为空白组（静脉注射柠檬酸缓冲液未造模，超纯水灌胃），模型组（尾静脉注射STZ 造模，超纯水灌胃），阳性药组（尾静脉注射STZ造模，格列本脲20mg/kg灌胃），黄刺果粉 低剂量组（尾静脉注射STZ造模，黄刺果粉灌胃0. 4g/kg)，黄刺果粉高剂量组（尾静脉注射 STZ造模，黄刺果粉灌胃I. 6g/kg)。造模方法：提前禁食16h，而后对其进行STZ(柠檬酸缓 冲液配制）尾静脉注射60mg/kg，注射后，72小时测其血糖，检验模型成功与否。
[0018] 3)实验试剂：95%医用酒精，南京宁氏化学试剂有限公司；生理盐水，山东齐都药 业有限公司；胆固醇、甘油三脂、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白，谷草转氨酶、谷丙转氨酶、月旨 蛋白酯酶、肝酯酶试剂盒，南京建成生物科技有限公司。
[0019] 4)实验仪器：Bi〇-Rad680型酶标仪，美国伯乐公司；DS-I型组织匀浆仪，上海正慧 工贸有限公司；TGL-16G-A型管式离心机，上海安亭科学仪器厂；UV-722N可见紫外分光光 度计，上海尼柯有限公司；HD型恒温水浴锅，辽阳市恒温仪器厂。
[0020] 5)实验过程：取健康SD大鼠40只，按体重随机分为5组，分为空白组、模型组、阳 性药组和低、高剂量组。空白组和模型组每天灌胃给予蒸馏水；阳性药组每天灌胃给予格列 本脲1次；给受试药物组每天灌胃给予黄刺果粉1次，六组均连续给予28d;同时，每隔7天 测定其胰岛素和血糖；末次给予受试物后，麻醉后，经颈动脉取血，所取得血离心取上清，用 于检测血脂指标和谷草转氨酶，谷丙转氨酶。至其死亡后，取大鼠肝脏组织，用生理盐水洗 去表面血污，用滤纸吸干，组织匀浆仪进行匀浆，收集匀浆液到离心管中，以3000rpm离心 lOmin，吸取上清液，进行脂蛋白酯酶和肝酯酶活性测定。
[0021] 6)黄刺果粉降低患糖尿病大鼠体内的血糖的测定及结果
[0022] 表1黄刺果粉对STZ诱导的大鼠血糖的影响（Mean土SD)
[0023]
[0027] 注：与正常组比较组ap< 0. 05 ;与成模组比较bp< 0. 05 ;
[0028] 由表1、2可知，黄刺果实能够有效降低STZ糖尿病大鼠血糖，升高胰岛素量，且作 用与阳性药物相当，表明黄刺果实可用于对糖尿病的治疗。
[0029] 7)黄刺果粉降低患糖尿病大鼠体内的血脂的测定及结果
[0030]STZ诱导的糖尿病，会使得大鼠胰岛细胞发生核固缩，和玻璃样病变。其脂代谢随 之发生紊乱。同时大鼠的脂代谢发生紊乱，相关血脂指标及脂代谢相关的酶活性亦发生紊 乱。
[0031] 表3黄刺果粉对STZ诱导的大鼠胆固醇TC、甘油三酯TG、高密度脂蛋白HDL，低密 度脂蛋白LDL的影响（Mean土SD)
[0032]
[0033] 注：与正常组比较ap< 0. 05 ;与成模组比较bp< 0. 05
[0034] 由表3可知，本发明黄刺果粉低、高剂量组对STZ诱导的糖尿病大鼠的胆固醇、甘 油三酯、低密度脂蛋白均有调节降低作用，对高密度脂蛋白由调节上升作用。且呈剂量效应 关系，高剂量组与模型组有显著性差异（P< 〇. 05)。同时，实验表明，高剂量组的效果与格 列本脲的效果相当，而格列本脲作为化学合成的药品，其对机体有一定的副作用，因此，建 议采用天然植物即黄刺果粉可做替代保健品使用。
[0035] HL是由肝实质细胞合成的一种具有磷Al和甘油三醋水解酶活性，对血浆脂质转 运有重要作用的胞外蛋白，主要参与HDL-C的重构和乳糜微粒残骸、低密度脂蛋白的代谢 以及胆固醇的逆向转运。HL活力异常与动脉粥样硬化及糖尿病有较高的相关性。LPL是脂 蛋白代谢的关键酶，是水解富含甘油三酷蛋白中甘油三醋的关键酶。其主要功能是水解CM 和VLDL中的甘油三醋为甘油和脂肪酸。脂蛋白酯酶LPL和肝酯酶HL可以分解甘油三酯TG 并且分解为甘油和游离脂肪酸FFA，采用铜试剂测定其分解产生的游离脂肪酸就可以分别 计算出脂蛋白酯酶和肝酯酶的活性。
[0036] AST与ALT含量在一些药物的刺激下，其体内肝组织收到脂肪细胞侵润，影响相关 肝细胞酶活性，而在一般情况下，像辛伐他汀和格列本脲等都会对肝组织有一定的影响。
[00 37] 表4黄刺果粉对STZ诱导的大鼠脂蛋白酯酶LPL、肝酯酶HL、谷草转氨酶AST、谷 丙转氨酶ALT的影响（Mean土SD)
[0038]
[0039] 注：与正常组比较ap< 0. 05 ;与成模组比较bp< 0. 05 ;与正常组相比。p< 0. 05. [0040] 黄刺果粉能够使实验大鼠的HL和LPL活性增加，LPL是清除富含TG脂蛋白的限 速酶，从而发挥了其在脂蛋白循环中的重要作用。同时可使糖尿病大鼠的HL活性增加，从 而通过HL作为配体，促进肝细胞摄取胆固醇和乳糜微粒残粒，降低血浆中总胆固醇和甘油 三醋浓度，进而达到调节机体脂代谢紊乱的作用。
[0041] 而对于AST和ALT活性相比格列本脲阳性药组，均有不同程度的降低，说明阳性药 组对于肝脏由损伤作用，而黄刺果粉对肝脏则没有损伤作用，且存在明显的差异。
[0042] 实施例2黄刺果实多糖降血糖作用实验
[0043] 1)实验药物：黄刺果实多糖，由如下方法制备得到：
[0044]A、黄刺果实脱脂：取成熟的黄刺（即直穗小檗）的果实400g烘干，粉碎后过筛；取 黄刺果实与石油醚混合，混合后超声提取，离心除去提取液，残渣过滤，挥干石油醚，得已除 脂黄刺果实残渣；
[0045] B、黄刺果实除单糖：已除脂黄刺果实残渣与乙醇混合，所述乙醇浓度为70~85% v/v，回流提取，离心除去提取液，残渣过滤后挥干乙醇，得已除单糖黄刺果实残渣；
[0046] C、黄刺粗多糖提取：将步骤B所得已除单糖黄刺果实残渣与纯水混合，微波辅助 提取，离心得到提取液，残渣过滤后弃去；提取液浓缩得到粗多糖提取液；
[0047] D、黄刺粗多糖的纯化：粗多糖提取液中依次采用H2O2，进行脱色、Savege法除去蛋 白质，再透析除去3500Da以下小分子物质，得到纯化的多糖水提液；
[0048] E、黄刺果实多糖的制备：将步骤D所得的已纯化的多糖水提液浓缩液加入乙醇溶 液，使乙醇终浓度达到75%v/v，所得沉淀干燥后，即得到黄刺果实多糖BDP共计2. 06g。
[0049] 对本发明方法制备的黄刺果实多糖进行蒽酮-硫酸法测定，其中多糖含量为93% ±2w/w。给药量按大鼠体重计，灌胃低剂量、中剂量、高剂量分别为75mg/kg，150mg/kg， 300mg/kg(以制备所得多糖质量计）
[0050] 2)动物：四周龄昆明大鼠，雄性，普通级，135g，由甘肃中医学院提供。于实验室内 安置于鼠笼中饲养一周后进行实验（每笼8只，温度22± 1°C，湿度42% ±2% )。分为六 组：分别为空白组（静脉注射柠檬酸缓冲液未造模，超纯水灌胃），模型组（尾静脉注射STZ 造模，超纯水灌胃），阳性药组（尾静脉注射STZ造模，格列本脲20mg/kg灌胃），黄刺果实 多糖低剂量组BDP-L(尾静脉注射STZ造模，黄刺果实多糖灌胃75mg/kg)，黄刺果实多糖中 剂量组BDP-M(尾静脉注射STZ造模，黄刺果实多糖灌胃150mg/kg)，黄刺果实多糖高剂量 组BDP-H(尾静脉注射STZ造模，黄刺果实多糖灌胃300mg/kg)。造模方法：提前禁食16h， 而后对其进行STZ(柠檬酸缓冲液配制）尾静脉注射60mg/kg，注射后，72小时测其血糖，检 验模型成功与否。
[0051] 3)实验试剂：95%医用酒精，南京宁氏化学试剂有限公司；生理盐水，山东齐都药 业有限公司；超氧化物歧化酶（SOD)、过氧化氢酶（CAT)/谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX)，丙 二醛（MDA)南京建成生物科技有限公司。
[0052] 4)实验仪器：Bi〇-Rad680型酶标仪，美国伯乐公司；DS-I型组织匀浆仪，上海正慧 工贸有限公司；TGL-16G-A型管式离心机，上海安亭科学仪器厂；UV-722N可见紫外分光光 度计，上海尼柯有限公司；HD型恒温水浴锅，辽阳市恒温仪器厂。
[0053] 5)实验过程：取健康SD大鼠48只，按体重随机分为6组，分为空白组、模型组、阳 性药组和低，中，高剂量组。空白组和模型组每天灌胃给予蒸馏水；阳性药组每天灌胃给予 格列本脲1次；给受试药物组每天灌胃给予黄刺果实多糖1次，六组均连续给予28d，其中 每组保持每隔7天测一次血糖，并记录；末次给予受试物后，麻醉后，经颈动脉取血，所取得 血离心取上清，用于检测末次血糖和胰岛素。
[0054] 6)黄刺果实多糖降低患糖尿病大鼠体内的血糖、胰岛素的测定及结果
[0055] 表5黄刺果实多糖对STZ诱导的大鼠血糖的影响（Mean土SD)
[0056]
[0057] 注：与正常组比较ap< 0. 05 ;与成模组比较bp< 0. 05 ;
[0058] 表6黄刺果粉对STZ诱导的大鼠胰岛素的影响（Mean土SD)
[0059]
[0060] 注：与正常组比较ap< 0. 05 ;与成模组比较bp< 0. 05 ;
[0061] 由表5、6可知，本发明黄刺果实多糖各剂量组对STZ诱导的糖尿病大鼠的血糖具 有降低作用，对胰岛素、体重具调节上升作用，且呈剂量效应关系，高剂量组与模型组有显 著性差异（P< 〇. 05)。同时，实验表明，高剂量组的效果与格列本脲的效果相当，而格列本 脲作为化学合成的药品，其对机体有一定的副作用，因此，建议采用天然植物中提取的黄刺 果实多糖可做替代药物使用。
[0062] 实验结论：使用黄刺果实多糖对STZ诱导的糖尿病大鼠进行灌胃，患糖尿病大鼠 的血糖具有降低作用，对胰岛素、体重具调节上升作用，且呈剂量效应关系，高剂量组与模 型组有显著性差异（P< 0. 05)。多糖易溶于热水，根据黄刺果实和黄刺果实多糖均具有降 血糖作用的这一结果可以毫无疑问地推定，黄刺果实的水提物也具备降血糖作用。
【主权项】
1. 黄刺果实或其提取物在制备降血糖的药物、保健品或食品中的用途。2. 根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述药物、保健品或食品是预防或治疗I 型、II型糖尿病或/和糖尿病并发症的药物、保健品或食品。3.根据权利要求1或2所述的用途，其特征在于：所述药物、保健品或食品是预防或治 疗肝功能正常或受损患者的药物、保健品或食品。4.根据权利要求1-3任意一项所述的用途，其特征在于：所述药物、保健品或食品是提 高胰岛素水平的药物、保健品或食品。5.根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述黄刺果实提取物为黄刺果实的水提 物。6. 根据权利要求1~5任意一项所述的用途，其特征在于：所述黄刺为小檗科植物直 糖、小藥BerberisdasystachyaMaxim. 〇7.根据权利要求1~4任意一项所述的用途，其特征在于：所述药物、保健品或食品 为口服剂型；进一步地，所述口服剂型选自片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、散剂、浸膏剂或口服 液。
【专利摘要】本发明提供了黄刺果实或其提取物在制备降血糖的药物、保健品或食品中的用途。本发明研究发现，黄刺果实具有良好的降血糖功能，可升高胰岛素量，其降血糖作用与糖尿病一线化学药物格列本脲相当，但与之不同的是，黄刺果实物不会导致肝脏损伤，安全性良好，适用范围更广，更适合作为治疗和预防糖尿病的食品、保健品或药物。
【IPC分类】A23L1/29, A61P3/10, A61K36/29
【公开号】CN104906163
【申请号】CN201510323281
【发明人】索有瑞, 韩丽娟, 杨芳, 杨永晶
【申请人】中国科学院西北高原生物研究所
【公开日】2015年9月16日
【申请日】2015年6月9日
【技术领域】
[0001] 本发明属于保健品领域，具体涉及黄刺果实及其提取物的医药新用途。 技术背景
[0002] 据统计，目前我国糖尿病的患病人数已经达到了 9240万，居全球之首（YangW，et al.NEnglJMed，2010,362(12) :1090-1101)。中国糖尿病治疗费用每年高达1734亿元， 糖尿病所致的直接医疗开支已经占到中国医疗总开支的13%(AlcornT，etal.Lancet， 2012,379(9833) :2227-2228)。由此可见，糖尿病不仅严重危害人民的健康，而且为国家带 来沉重的经济负担。因而，防治糖尿病刻不容缓。
[0003]黄刺，小檗科植物直穗小檗BerberisdasystachyaMaxim.，是与白刺、沙棘（黑 刺）一样为蒙、藏、维吾尔等少数民族药用与食用的传统野生浆果，统称为"青海三刺"。《青 海常用中草药手册》中对黄刺皮（即根皮）有详细记载：黄刺皮即为双子叶植物药小檗科 植物直穗小檗的茎皮。其果实医药功能也做了简要的记述，其具有治疗腹痛，消化不良，腹 胀，痢疾等功能。
[0004] 目前还未见对黄刺果实降血糖的报道。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的在于提供黄刺果实及其提取物的新用途。
[0006] 具体地，本发明提供了黄刺果实或其提取物在制备降血糖的药物、保健品或食品 中的用途。
[0007] 进一步地，所述药物、保健品或食品是预防或治疗I型、II型糖尿病或/和糖尿病 并发症的药物、保健品或食品。
[0008] 更进一步地，所述药物、保健品或食品是预防或治疗肝功能正常或受损患者的药 物、保健品或食品。
[0009] 本发明研宄发现，黄刺果实不会导致肝功能受损，同样适合用于肝功能受损糖尿 病患者的治疗。
[0010] 其中，所述药物、保健品或食品是提高胰岛素水平的药物、保健品或食品。
[0011] 进一步地，所述黄刺果实提取物为黄刺果实的水提物。根据黄刺果实和水溶性成 分一一多糖都具有降血糖作用的这一结果可以毫无疑问地推定，黄刺果实的水提物也具备 降血糖作用。
[0012] 其中，所述黄刺为小檗科植物直穗小檗BerberisdasystachyaMaxim.。
[0013] 其中，所述药物、保健品或食品为口服剂型；进一步地，所述口服剂型选自片剂、胶 囊剂、丸剂、颗粒剂、散剂、浸膏剂或口服液。
[0014] 本发明研宄发现，黄刺果实及其提取物具有良好的降血糖功能，可升高胰岛素量， 其降血糖作用与糖尿病一线化学药物格列本脲相当，但与之不同的是，黄刺果实物不会导 致肝脏损伤，安全性良好，适用范围更广，更适合作为治疗和预防糖尿病的食品、保健品或 药物。
【具体实施方式】
[0015] 实施例1本发明黄刺果实的药效学研宄
[0016] 1)实验药物：取黄刺果实，干燥后直接粉碎得到果粉备用。给药量按大鼠体重计， 灌胃低剂量、高剂量分别为〇. 4g/kg，I. 6g/kg(以黄刺果粉用量）。
[0017] 2)动物：四周龄昆明大鼠，雄性，普通级，135g，由甘肃中医学院提供。于实验室内 安置于鼠笼中饲养一周后进行实验（每笼8只，温度22± 1°C，湿度42% ±2% )。分为五 组：分别为空白组（静脉注射柠檬酸缓冲液未造模，超纯水灌胃），模型组（尾静脉注射STZ 造模，超纯水灌胃），阳性药组（尾静脉注射STZ造模，格列本脲20mg/kg灌胃），黄刺果粉 低剂量组（尾静脉注射STZ造模，黄刺果粉灌胃0. 4g/kg)，黄刺果粉高剂量组（尾静脉注射 STZ造模，黄刺果粉灌胃I. 6g/kg)。造模方法：提前禁食16h，而后对其进行STZ(柠檬酸缓 冲液配制）尾静脉注射60mg/kg，注射后，72小时测其血糖，检验模型成功与否。
[0018] 3)实验试剂：95%医用酒精，南京宁氏化学试剂有限公司；生理盐水，山东齐都药 业有限公司；胆固醇、甘油三脂、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白，谷草转氨酶、谷丙转氨酶、月旨 蛋白酯酶、肝酯酶试剂盒，南京建成生物科技有限公司。
[0019] 4)实验仪器：Bi〇-Rad680型酶标仪，美国伯乐公司；DS-I型组织匀浆仪，上海正慧 工贸有限公司；TGL-16G-A型管式离心机，上海安亭科学仪器厂；UV-722N可见紫外分光光 度计，上海尼柯有限公司；HD型恒温水浴锅，辽阳市恒温仪器厂。
[0020] 5)实验过程：取健康SD大鼠40只，按体重随机分为5组，分为空白组、模型组、阳 性药组和低、高剂量组。空白组和模型组每天灌胃给予蒸馏水；阳性药组每天灌胃给予格列 本脲1次；给受试药物组每天灌胃给予黄刺果粉1次，六组均连续给予28d;同时，每隔7天 测定其胰岛素和血糖；末次给予受试物后，麻醉后，经颈动脉取血，所取得血离心取上清，用 于检测血脂指标和谷草转氨酶，谷丙转氨酶。至其死亡后，取大鼠肝脏组织，用生理盐水洗 去表面血污，用滤纸吸干，组织匀浆仪进行匀浆，收集匀浆液到离心管中，以3000rpm离心 lOmin，吸取上清液，进行脂蛋白酯酶和肝酯酶活性测定。
[0021] 6)黄刺果粉降低患糖尿病大鼠体内的血糖的测定及结果
[0022] 表1黄刺果粉对STZ诱导的大鼠血糖的影响（Mean土SD)
[0023]
[0027] 注：与正常组比较组ap< 0. 05 ;与成模组比较bp< 0. 05 ;
[0028] 由表1、2可知，黄刺果实能够有效降低STZ糖尿病大鼠血糖，升高胰岛素量，且作 用与阳性药物相当，表明黄刺果实可用于对糖尿病的治疗。
[0029] 7)黄刺果粉降低患糖尿病大鼠体内的血脂的测定及结果
[0030]STZ诱导的糖尿病，会使得大鼠胰岛细胞发生核固缩，和玻璃样病变。其脂代谢随 之发生紊乱。同时大鼠的脂代谢发生紊乱，相关血脂指标及脂代谢相关的酶活性亦发生紊 乱。
[0031] 表3黄刺果粉对STZ诱导的大鼠胆固醇TC、甘油三酯TG、高密度脂蛋白HDL，低密 度脂蛋白LDL的影响（Mean土SD)
[0032]
[0033] 注：与正常组比较ap< 0. 05 ;与成模组比较bp< 0. 05
[0034] 由表3可知，本发明黄刺果粉低、高剂量组对STZ诱导的糖尿病大鼠的胆固醇、甘 油三酯、低密度脂蛋白均有调节降低作用，对高密度脂蛋白由调节上升作用。且呈剂量效应 关系，高剂量组与模型组有显著性差异（P< 〇. 05)。同时，实验表明，高剂量组的效果与格 列本脲的效果相当，而格列本脲作为化学合成的药品，其对机体有一定的副作用，因此，建 议采用天然植物即黄刺果粉可做替代保健品使用。
[0035] HL是由肝实质细胞合成的一种具有磷Al和甘油三醋水解酶活性，对血浆脂质转 运有重要作用的胞外蛋白，主要参与HDL-C的重构和乳糜微粒残骸、低密度脂蛋白的代谢 以及胆固醇的逆向转运。HL活力异常与动脉粥样硬化及糖尿病有较高的相关性。LPL是脂 蛋白代谢的关键酶，是水解富含甘油三酷蛋白中甘油三醋的关键酶。其主要功能是水解CM 和VLDL中的甘油三醋为甘油和脂肪酸。脂蛋白酯酶LPL和肝酯酶HL可以分解甘油三酯TG 并且分解为甘油和游离脂肪酸FFA，采用铜试剂测定其分解产生的游离脂肪酸就可以分别 计算出脂蛋白酯酶和肝酯酶的活性。
[0036] AST与ALT含量在一些药物的刺激下，其体内肝组织收到脂肪细胞侵润，影响相关 肝细胞酶活性，而在一般情况下，像辛伐他汀和格列本脲等都会对肝组织有一定的影响。
[00 37] 表4黄刺果粉对STZ诱导的大鼠脂蛋白酯酶LPL、肝酯酶HL、谷草转氨酶AST、谷 丙转氨酶ALT的影响（Mean土SD)
[0038]
[0039] 注：与正常组比较ap< 0. 05 ;与成模组比较bp< 0. 05 ;与正常组相比。p< 0. 05. [0040] 黄刺果粉能够使实验大鼠的HL和LPL活性增加，LPL是清除富含TG脂蛋白的限 速酶，从而发挥了其在脂蛋白循环中的重要作用。同时可使糖尿病大鼠的HL活性增加，从 而通过HL作为配体，促进肝细胞摄取胆固醇和乳糜微粒残粒，降低血浆中总胆固醇和甘油 三醋浓度，进而达到调节机体脂代谢紊乱的作用。
[0041] 而对于AST和ALT活性相比格列本脲阳性药组，均有不同程度的降低，说明阳性药 组对于肝脏由损伤作用，而黄刺果粉对肝脏则没有损伤作用，且存在明显的差异。
[0042] 实施例2黄刺果实多糖降血糖作用实验
[0043] 1)实验药物：黄刺果实多糖，由如下方法制备得到：
[0044]A、黄刺果实脱脂：取成熟的黄刺（即直穗小檗）的果实400g烘干，粉碎后过筛；取 黄刺果实与石油醚混合，混合后超声提取，离心除去提取液，残渣过滤，挥干石油醚，得已除 脂黄刺果实残渣；
[0045] B、黄刺果实除单糖：已除脂黄刺果实残渣与乙醇混合，所述乙醇浓度为70~85% v/v，回流提取，离心除去提取液，残渣过滤后挥干乙醇，得已除单糖黄刺果实残渣；
[0046] C、黄刺粗多糖提取：将步骤B所得已除单糖黄刺果实残渣与纯水混合，微波辅助 提取，离心得到提取液，残渣过滤后弃去；提取液浓缩得到粗多糖提取液；
[0047] D、黄刺粗多糖的纯化：粗多糖提取液中依次采用H2O2，进行脱色、Savege法除去蛋 白质，再透析除去3500Da以下小分子物质，得到纯化的多糖水提液；
[0048] E、黄刺果实多糖的制备：将步骤D所得的已纯化的多糖水提液浓缩液加入乙醇溶 液，使乙醇终浓度达到75%v/v，所得沉淀干燥后，即得到黄刺果实多糖BDP共计2. 06g。
[0049] 对本发明方法制备的黄刺果实多糖进行蒽酮-硫酸法测定，其中多糖含量为93% ±2w/w。给药量按大鼠体重计，灌胃低剂量、中剂量、高剂量分别为75mg/kg，150mg/kg， 300mg/kg(以制备所得多糖质量计）
[0050] 2)动物：四周龄昆明大鼠，雄性，普通级，135g，由甘肃中医学院提供。于实验室内 安置于鼠笼中饲养一周后进行实验（每笼8只，温度22± 1°C，湿度42% ±2% )。分为六 组：分别为空白组（静脉注射柠檬酸缓冲液未造模，超纯水灌胃），模型组（尾静脉注射STZ 造模，超纯水灌胃），阳性药组（尾静脉注射STZ造模，格列本脲20mg/kg灌胃），黄刺果实 多糖低剂量组BDP-L(尾静脉注射STZ造模，黄刺果实多糖灌胃75mg/kg)，黄刺果实多糖中 剂量组BDP-M(尾静脉注射STZ造模，黄刺果实多糖灌胃150mg/kg)，黄刺果实多糖高剂量 组BDP-H(尾静脉注射STZ造模，黄刺果实多糖灌胃300mg/kg)。造模方法：提前禁食16h， 而后对其进行STZ(柠檬酸缓冲液配制）尾静脉注射60mg/kg，注射后，72小时测其血糖，检 验模型成功与否。
[0051] 3)实验试剂：95%医用酒精，南京宁氏化学试剂有限公司；生理盐水，山东齐都药 业有限公司；超氧化物歧化酶（SOD)、过氧化氢酶（CAT)/谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX)，丙 二醛（MDA)南京建成生物科技有限公司。
[0052] 4)实验仪器：Bi〇-Rad680型酶标仪，美国伯乐公司；DS-I型组织匀浆仪，上海正慧 工贸有限公司；TGL-16G-A型管式离心机，上海安亭科学仪器厂；UV-722N可见紫外分光光 度计，上海尼柯有限公司；HD型恒温水浴锅，辽阳市恒温仪器厂。
[0053] 5)实验过程：取健康SD大鼠48只，按体重随机分为6组，分为空白组、模型组、阳 性药组和低，中，高剂量组。空白组和模型组每天灌胃给予蒸馏水；阳性药组每天灌胃给予 格列本脲1次；给受试药物组每天灌胃给予黄刺果实多糖1次，六组均连续给予28d，其中 每组保持每隔7天测一次血糖，并记录；末次给予受试物后，麻醉后，经颈动脉取血，所取得 血离心取上清，用于检测末次血糖和胰岛素。
[0054] 6)黄刺果实多糖降低患糖尿病大鼠体内的血糖、胰岛素的测定及结果
[0055] 表5黄刺果实多糖对STZ诱导的大鼠血糖的影响（Mean土SD)
[0056]
[0057] 注：与正常组比较ap< 0. 05 ;与成模组比较bp< 0. 05 ;
[0058] 表6黄刺果粉对STZ诱导的大鼠胰岛素的影响（Mean土SD)
[0059]
[0060] 注：与正常组比较ap< 0. 05 ;与成模组比较bp< 0. 05 ;
[0061] 由表5、6可知，本发明黄刺果实多糖各剂量组对STZ诱导的糖尿病大鼠的血糖具 有降低作用，对胰岛素、体重具调节上升作用，且呈剂量效应关系，高剂量组与模型组有显 著性差异（P< 〇. 05)。同时，实验表明，高剂量组的效果与格列本脲的效果相当，而格列本 脲作为化学合成的药品，其对机体有一定的副作用，因此，建议采用天然植物中提取的黄刺 果实多糖可做替代药物使用。
[0062] 实验结论：使用黄刺果实多糖对STZ诱导的糖尿病大鼠进行灌胃，患糖尿病大鼠 的血糖具有降低作用，对胰岛素、体重具调节上升作用，且呈剂量效应关系，高剂量组与模 型组有显著性差异（P< 0. 05)。多糖易溶于热水，根据黄刺果实和黄刺果实多糖均具有降 血糖作用的这一结果可以毫无疑问地推定，黄刺果实的水提物也具备降血糖作用。
【主权项】
1. 黄刺果实或其提取物在制备降血糖的药物、保健品或食品中的用途。2. 根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述药物、保健品或食品是预防或治疗I 型、II型糖尿病或/和糖尿病并发症的药物、保健品或食品。3.根据权利要求1或2所述的用途，其特征在于：所述药物、保健品或食品是预防或治 疗肝功能正常或受损患者的药物、保健品或食品。4.根据权利要求1-3任意一项所述的用途，其特征在于：所述药物、保健品或食品是提 高胰岛素水平的药物、保健品或食品。5.根据权利要求1所述的用途，其特征在于：所述黄刺果实提取物为黄刺果实的水提 物。6. 根据权利要求1~5任意一项所述的用途，其特征在于：所述黄刺为小檗科植物直 糖、小藥BerberisdasystachyaMaxim. 〇7.根据权利要求1~4任意一项所述的用途，其特征在于：所述药物、保健品或食品 为口服剂型；进一步地，所述口服剂型选自片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、散剂、浸膏剂或口服 液。
【专利摘要】本发明提供了黄刺果实或其提取物在制备降血糖的药物、保健品或食品中的用途。本发明研究发现，黄刺果实具有良好的降血糖功能，可升高胰岛素量，其降血糖作用与糖尿病一线化学药物格列本脲相当，但与之不同的是，黄刺果实物不会导致肝脏损伤，安全性良好，适用范围更广，更适合作为治疗和预防糖尿病的食品、保健品或药物。
【IPC分类】A23L1/29, A61P3/10, A61K36/29
【公开号】CN104906163
【申请号】CN201510323281
【发明人】索有瑞, 韩丽娟, 杨芳, 杨永晶
【申请人】中国科学院西北高原生物研究所
【公开日】2015年9月16日
【申请日】2015年6月9日
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