滇白珠在制备治疗和/或预防胃溃疡药物方面的应用
滇白珠在制备治疗和/或预防胃溃疡药物方面的应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及滇白珠的新用途，即在制备治疗和/或预防胃溃疡药物方面的应用。
【背景技术】
[0002] 胃溃疡为临床常见的慢性消化系统疾病，多由急性消化不良、胃出血、幽门螺杆菌 感染、非留体类消炎药的使用不当和精神压力过大等原因引起，表现为胃黏膜局部组织糜 烂、坏死，或自体消化，形成溃疡面，严重者胃穿孔。胃溃疡发病机理尚不完全明了，一般认 为与胃粘膜侵袭因子（胃蛋白酶、盐酸等）和胃粘膜保护因子（前列腺素、NO、S0D、胃黏膜 血流、黏液_碳酸氢盐屏障、细胞膜的完整性和细胞再生等）的作用失衡有关。胃溃疡发病 率高，治愈慢，且易复发，而少数胃溃疡病人可发展成胃癌，严重影响患者的身心健康。
[0003] 现代医学治疗胃溃疡以西药为主，根据药物作用机理可分为：铝碳酸镁等酸抑制 剂，西咪替丁等H受体拮抗剂，奥美拉唑等质子泵抑制剂，甲硝唑等幽门螺杆菌抑制剂，硫 糖铝等胃黏膜保护剂，多潘立酮片等胃动力药，等。中药治疗常用健胃愈疡片等中药复方制 剂。
[0004] 西药治疗胃溃疡，近期溃疡愈合率比较高，但远期复发率高，且副作用多，患者依 从性差。中医从整体观念辨证论治，可望弥补西药治疗的不足，但目前临床中药治疗胃溃疡 愈合率不及西药。因此，急需研制高效、低毒的抗胃溃疡药物；从中医中药中寻求治疗胃溃 疡的安全有效的药物和制剂是一种趋势，也符合临床诊治的需要。
[0005] 滇白珠，别名：透骨草、小透骨草、透骨消、满山香、下山虎等，为杜鹃花科植物滇白 ^GaultherialeucocarpaBI.var.yunnanensis(Franch. )T.Z.HsuetR.C.Fang^tlzP 燥全株。现有文献资料显示滇白珠或其同属植物具有抗炎，抗菌，镇痛，祛痰化瘀和抗肿瘤 等药理活性，但未见有关抗胃溃疡作用的文献报道。
【发明内容】
[0006] 本发明的目的是提供滇白珠在制备治疗和/或预防胃溃疡药物方面的应用； 本发明的另一目的是提供滇白珠提取物在制备治疗和/或预防胃溃疡药物方面的应 用； 本发明的另一目的是提供滇白珠乙醇提取物在制备治疗和/或预防胃溃疡药物方面 的应用； 滇白珠，别名：透骨草、小透骨草、透骨消、满山香、下山虎等，为杜鹃花科植物滇白珠GaultherialeucocarpaBI.var.yunnanensis(Franch. )T.Z.HsuetR.C.Fang的干燥 全株。辛、苦，温。有小毒。归肝、肾经。祛风除湿，解毒止痛。用于风湿关节痛；外用治疮 疡肿毒。
[0007] 发明人通过对幽门结扎型胃溃疡大鼠模型、乙醇所致胃溃疡大鼠模型、小鼠应激 性胃溃疡模型进行滇白珠药理实验研宄，发现滇白珠提取物高剂量能够显著降低大鼠胃液 量、胃液总酸度以及总酸排出量，低剂量能够显著降低胃液总酸度；滇白珠提取物高、低剂 量均能够显著降低大鼠胃溃疡发生率以及显著减少大鼠胃溃疡指数；滇白珠提取物高剂量 组能够显著减少小鼠应激性胃溃疡点数。
[0008] 因此，申请人提供滇白珠在制备治疗和/或预防胃溃疡药物方面的应用；特别是 滇白珠提取物、滇白珠乙醇提取物在制备治疗和/或预防胃溃疡药物方面的应用。
[0009] 本发明的另一目的是提供滇白珠乙醇提取物的制备方法。
[0010] 所述的滇白珠乙醇提取物是采用体积百分浓度为30%及以上的乙醇提取制备而 成。
[0011] 本发明所述滇白珠乙醇提取物的提取方法为：将滇白珠粉碎后用体积百分浓度为 30%及以上的乙醇加热回流提取，提取液过滤、回收乙醇，浓缩成膏，即得所述滇白珠乙醇提 取物。
[0012] 优选地，滇白珠乙醇提取物的提取方法为： a. 取滇白珠药材，粉碎过筛，用乙醇浸泡后，加热回流提取，滤过； b. 将步骤a中滤过后的药渣加入乙醇，再加热回流提取两次，分别滤过； c. 合并步骤a、b所得滤液，回收乙醇至无醇味，浓缩成浸膏，即得所述滇白珠乙醇提 取物。
[0013] 更优选地，滇白珠乙醇提取物的提取方法为： a. 取滇白珠药材，粉碎过筛，用相当于药材重量5-10倍乙醇浸泡0. 5-3h后，加热回流 提取l_3h，滤过； b. 将步骤a中滤过后的药渣加入相当于药材重量4-8倍乙醇加热回流提取l-3h，滤 过； c. 将步骤b中滤过后的药渣加入相当于药材重量4-6倍乙醇加热回流提取l-3h，滤 过； d. 合并步骤a、b、c所得滤液，回收乙醇至无醇味，水浴浓缩成浸膏，即得所述滇白珠乙 醇提取物。
[0014] 本发明还提供滇白珠提取物与医药学上可接受的载体配合制成在制备治疗和/ 或预防胃溃疡药物方面的新用途。滇白珠提取物配合医药学上可接受的载体，按本领域常 规方法制备成片剂、颗粒剂、胶囊剂、滴丸、酊剂等剂型。
[0015] 本发明的药学上可接受的载体包括但不限于以下： 稀释剂：淀粉、乳糖、糊精、微晶纤维素、无机盐等。
[0016] 润湿剂与粘合剂：纯化水、乙醇、明胶、聚乙二醇、纤维素衍生物等。
[0017]崩解剂：淀粉、羧甲基淀粉钠、纤维素衍生物、交联聚维酮等。
[0018] 润滑剂：硬脂酸镁、微粉硅胶、滑石粉、聚乙二醇等。
[0019] 助溶剂：水、乙醇、甘油、丙二醇、液状石蜡、植物油等。
[0020] 矫味剂：鹿糖、单糖、芳香剂等。
[0021] 防腐剂：苯甲酸、山梨酸、甲酯、乙酯、丙酯等。
[0022] 在现有文献资料中显示，滇白珠或其同属植物具有抗炎，抗菌，镇痛，祛痰化瘀和 抗肿瘤等药理活性，但未见有关抗胃溃疡作用的文献报道。
[0023] 本发明提供的滇白珠、滇白珠提取物制备治疗和/或预防胃溃疡药物方面的新用 途具有以下优点： 1、滇白珠提取物防治胃溃疡效果理想，对幽门结扎型胃溃疡大鼠溃疡、幽门结扎大鼠 胃液分泌、乙醇所致大鼠胃溃疡以及小鼠应激性胃溃疡的影响等试验结果显示：本发明 滇白珠提取物能够显著降低大鼠胃溃疡发生率，显著减少大鼠胃溃疡点数(或溃疡指数)， 显著降低大鼠胃液量、胃液总酸度以及总酸排出量(显著削弱胃黏膜损伤因子一胃酸的作 用)，显著减少小鼠应激性胃溃疡点数。提示本发明能够有效治疗和/或预防胃溃疡疾病， 为开发成为防治胃溃疡药物提供了新的物质基础，具有潜在巨大的社会效益和经济效益。
[0024]2、滇白珠药材资源丰富，提取制备方法简单易行、原料来源方便易得、可用于滇白 珠提取物的大量制备。
[0025]3、本发明制作成本较低、污染小，利于节能减排条件下的大规模生产，产业化前景 十分明确。
【具体实施方式】
[0026] 实施例1 a.取滇白珠药材lkg，粉碎过筛，用相当于药材重量10倍30%乙醇浸泡0. 5h后，加热 回流提取Ih，滤过； b. 将步骤a中滤过后的药渣加入相当于药材重量4倍30%乙醇加热回流提取lh，滤 过； c. 将步骤b中滤过后的药渣加入相当于药材重量4倍30%乙醇加热回流提取lh，滤 过； d. 合并步骤a、b、c所得滤液，回收乙醇至无醇味，然后水浴浓缩成膏，即得所述滇白 珠乙醇提取物。
[0027] 实施例2 a. 取滇白珠药材lkg，粉碎过筛，用相当于药材重量5倍的无水乙醇浸泡3h后，加热回 流提取3h，滤过； b. 将步骤a中滤过后的药渣加入相当于药材重量8倍的无水乙醇加热回流提取3h，滤 过； c. 将步骤b中滤过后的药渣加入相当于药材重量6倍的无水乙醇加热回流提取3h，滤 过； d. 合并步骤a、b、c所得滤液，回收乙醇至无醇味，然后水浴浓缩成膏，即得所述滇白 珠乙醇提取物。
[0028] 实施例3 a. 取滇白珠药材lkg，粉碎过筛，用相当于药材重量8倍95%乙醇浸泡I. 5h后，加热回 流提取1.5h，滤过； b. 将步骤a中滤过后的药渣加入相当于药材重量7倍95%乙醇加热回流提取I. 5h，滤 过； c. 将步骤b中滤过后的药渣加入相当于药材重量5倍95%乙醇加热回流提取I. 5h，滤 过； d. 合并步骤a、b、c所得滤液，回收乙醇至无醇味，然后水浴浓缩成膏，即得所述滇白 珠乙醇提取物。
[0029] 实施例4 a. 取滇白珠药材lkg，粉碎过筛，用相当于药材重量7倍50%乙醇浸泡a后，加热回流 提取2h，滤过； b. 将步骤a中滤过后的药渣加入相当于药材重量7倍60%乙醇加热回流提取I. 5h，滤 过； c. 将步骤b中滤过后的药渣加入相当于药材重量5倍70%乙醇加热回流提取I. 5h，滤 过； d. 合并步骤a、b、c所得滤液，回收乙醇至无醇味，然后水浴浓缩成膏，即得所述滇白 珠乙醇提取物。
[0030] 实施例5 a. 取滇白珠药材lkg，粉碎过筛，用相当于药材重量9倍75%乙醇浸泡0. 75h后，加热 回流提取I. 2h，滤过； b. 将步骤a中滤过后的药渣加入相当于药材重量6倍75%乙醇加热回流提取lh，滤 过； c. 将步骤b中滤过后的药渣加入相当于药材重量4倍75%乙醇加热回流提取lh，滤 过； d. 合并步骤a、b、c所得滤液，回收乙醇至无醇味，然后水浴浓缩成膏，即得所述滇白 珠乙醇提取物。
[0031]实验例1:滇白珠提取物对幽门结扎型胃溃疡大鼠溃疡发生率和溃疡点数的影响 1供试品： I. 1试验药物：本发明实施例3制备所得滇白珠乙醇提取物。
[0032] 1. 2动物：SD大鼠，雄性，SPF级，由广西医科大学实验动物中心提供，动物合格证 证号：SCXK桂 2009-0002。
[0033] 1. 3试剂：西咪替丁片，批号131202,成都锦华药业有限责任公司。
[0034] 1. 4仪器：XYH_2A解剖显微镜+冷光源，上海光学仪器一厂。
[0035] 2实验分组 空白对照组：蒸馏水 实 验1组：实施例3滇白珠乙醇提取物低剂量组，9.Og生药/kg实验2组：实施例3滇白珠乙醇提取物高剂量组，18.Og生药/kg 对比例1组：西咪替丁，0. 8g/kg。
[0036] 3实验方法 取体重200~250g大鼠40只，随机分为4组，每组10只，分别为空白对照组、实验1组、 实验2组、对比例1组。
[0037] 灌胃给药，1次M连续3d，空白对照组给予等容量蒸馏水。第2d给药后大鼠禁 食（不禁水）48h。第4d将大鼠用乙醚麻醉，进行胃幽门结扎手术，并经十二指肠给药，空白 对照组给予等容量蒸馏水，缝合腹壁切口，禁食禁水。18h后用过量乙醚麻醉处死大鼠，开腹 取胃，从喷门放出胃内容物，然后向胃内注入lOmllO%甲醛溶液，并将胃置于10%甲醛溶液 中固定24小时，沿胃大弯剪开胃，观察瘤胃部等部位的溃疡状况，记录出现胃溃疡的动物 数及其溃疡点的数量(个)。计算溃疡发生率，溃疡点数及其抑制率。统计方法：溃疡动物数 组间比较，采用Fisher直接概率法；其他指标采用组间t检验。下同。
[0038] 4结果：结果见表1。
[0039]表1滇白珠提取物对幽门结扎型胃溃疡大鼠溃疡发生率和溃疡点数的影响O
注：与空白对照组比较：*P〈〇. 05，#P〈0. 01。
[0040] 由表1可知：与空白对照组比较，本发明滇白珠提取物能够显著降低大鼠胃溃疡 发生率、显著减少大鼠胃溃疡点数。
[0041] 实验例2 :滇白珠提取物对幽门结扎大鼠胃液分泌的影响 1供试品： I. 1试验药物：本发明实施例3制备所得滇白珠乙醇提取物。
[0042] 1. 2动物：SD大鼠，雌性，SPF级，由广西医科大学实验动物中心提供，动物合格证 证号：SCXK桂 2009-0002。
[0043] 1. 3试剂：西咪替丁片，批号131202,成都锦华药业有限责任公司。
[0044] 1. 4仪器：碱式滴定管等。
[0045] 2实验分组 空白对照组：蒸馏水 实验1组：实施例3滇白珠乙醇提取物低剂量组，9.Og生药/kg实验2组：实施例3滇白珠乙醇提取物高剂量组，18.Og生药/kg 对比例2组：西咪替丁，0. 8g/kg。
[0046] 3实验方法 取体重200~230g大鼠32只，随机分为4组，每组8只，分别为空白对照组、实验1组、 实验2组、对比例2组。
[0047] 灌胃给药，1次M连续3d，空白对照组给予等容量蒸馏水。第3d给药后大鼠禁 食（不禁水）24h。第4d将大鼠用乙醚麻醉，进行胃幽门结扎手术，并经十二指肠给药，空白 对照组给予等容量蒸馏水，缝合腹壁切口，禁食禁水。手术6h后用过量乙醚麻醉处死大鼠， 开腹夹住喷门，取胃，收集胃内容物，3500转/分，尚心10分钟，测量胃液体积，用酸碱中和 滴定法测定胃液总酸度并计算总酸排出量。
[0048] 4结果：结果见表2 表2滇白珠提取物对幽门结扎大鼠胃液分泌的影响（n=8，y
注：与空白对照组比较：*P〈〇. 05，#P〈0. 01。
[0049] 由表2可知：与空白对照组比较，本发明滇白珠提取物高剂量组能够显著降低大 鼠胃液量、胃液总酸度以及总酸排出量，本发明滇白珠提取物低剂量组能够显著降低胃液 总酸度。试验结果显示滇白珠提取物能够显著削弱胃黏膜损伤因子（胃酸）的作用。
[0050] 实验例3:滇白珠提取物对乙醇所致大鼠胃溃疡模型的影响 1供试品： I. 1试验药物：本发明实施例3制备所得滇白珠乙醇提取物。
[0051] 1. 2动物：SD大鼠，雄性，SPF级，由广西医科大学实验动物中心提供，动物合格证 证号：SCXK桂 2009-0002。
[0052] 1. 3试剂：硫酸铝咀嚼片，批号130502,山东仁和堂药业有限公司。
[0053] 1. 4仪器：XYH_2A解剖显微镜+冷光源，上海光学仪器一厂；等。
[0054] 2实验分组 空白对照组：蒸馏水 实验1组：实施例3滇白珠乙醇提取物低剂量组，9.Og生药/kg实验2组：实施例3滇白珠乙醇提取物高剂量组，18.Og生药/kg 对比例3组：硫糖铝咀嚼片，0. 42g/kg。
[0055] 3实验方法 大鼠32只，禁食不禁水12h，随机分为4组，每组8只，分别为空白对照组、实验1组、实 验2组、对比例3组。
[0056] 灌胃给药，对照组给予等容量蒸馏水，再禁食禁水12h，然后第2次灌胃给药，末次 给药5h后，各组大鼠灌胃无水乙醇，Iml/只，1.5h后用过量乙醚麻醉处死大鼠，取胃，沿胃 大弯剖开胃，清理干净胃内表面，显微镜下观察腺胃部的溃疡状况，按照Guth标准评定溃 疡指数。
[0057] 4结果：结果见表3。
[0058] 表3滇白珠提取物对乙醇所致大鼠胃溃疡模型的影响(i±P
注：与空白对照组比较：*P〈〇. 05，#P〈0. 01。
[0059] 由表3可知，与空白对照组比较，本发明滇白珠提取物高、低剂量均能够显著降低 大鼠胃溃疡发生率以及显著减少大鼠胃溃疡指数。
[0060] 实验例4:滇白珠提取物对小鼠应激性胃溃疡的影响(束缚水浸应激法） 1供试品： I. 1试验药物：本实验例中所述滇白珠提取物由实施例3中所述方法提取得到。
[0061] 1.2动物：昆明种小鼠，雌性，SPF级，由广西医科大学实验动物中心提供，动物合 格证号：SCXK桂 2009-0002。
[0062] 1. 3试剂：西咪替丁片，批号131202,成都锦华药业有限责任公司。
[0063] 2实验分组 空白对照组：蒸馏水 实验1组：实施例3滇白珠乙醇提取物低剂量组，9.Og生药/kg实验2组：实施例3滇白珠乙醇提取物高剂量组，18.Og生药/kg 对比例4组：西咪替丁片，0. 8g/kg。
[0064] 3实验方法 小鼠40只，随机分为4组，每组10只，分别为空白对照组、实验1组、实验2组、对比例 4组。灌胃给药，1次/d，连续7d;对照组灌胃同容积蒸馏水。末次给药后5h，将小鼠四肢 固定在木板上，置（18±1) °C恒温水中浸泡(水面齐剑突)21小时，然后处死小鼠，结扎胃喷 门，从胃幽门注入10%甲醛溶液2ml，结扎幽门，取胃，置10%甲醛溶液中固定24小时，沿胃 大弯剪开胃，洗净杂物，显微镜下观察记录腺胃部溃疡点的数量(个)。
[0065] 4结果：结果见表4。
[0066] 表4滇白珠提取物对小鼠应激性胃溃疡的影响(i± y
注：与空白对照组比较：*P〈〇. 05，#P〈0. 01。
[0067] 由表4可知：与空白对照组比较，本发明滇白珠提取物高剂量组能够显著减少小 鼠应激性胃溃疡点数。
[0068] 结论：滇白珠提取物对幽门结扎型胃溃疡大鼠溃疡、幽门结扎大鼠胃液分泌、乙醇 所致大鼠胃溃疡以及小鼠应激性胃溃疡的影响等试验结果显示：本发明滇白珠提取物能够 显著降低大鼠胃溃疡发生率，显著减少大鼠胃溃疡点数（或溃疡指数)，显著降低大鼠胃液 量、胃液总酸度以及总酸排出量（显著削弱胃黏膜损伤因子一胃酸的作用），显著减少小鼠 应激性胃溃疡点数。提示本发明能够有效治疗和/或预防胃溃疡疾病。
[0069] 虽然，上文中已经用一般性说明、【具体实施方式】及试验，对本发明作了详尽的描 述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见 的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的 范围。
【主权项】
1. 滇白珠在制备治疗和/或预防胃溃疡药物方面的应用。2. 滇白珠提取物在制备治疗和/或预防胃溃疡药物方面的应用。3. 滇白珠乙醇提取物在制备治疗和/或预防胃溃疡药物方面的应用。4. 根据权利要求3所述的应用，其特征在于：所述的滇白珠乙醇提取物是采用体积百 分浓度为30%及以上的乙醇提取制备而成。5. 根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述滇白珠乙醇提取物的提取方法为：将 滇白珠粉碎后用体积百分浓度为30%及以上的乙醇加热回流提取，提取液过滤、回收乙醇， 浓缩成膏，即得所述滇白珠乙醇提取物。6. 根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述滇白珠乙醇提取物的提取方法包括 以下步骤： a. 取滇白珠药材，粉碎过筛，用乙醇浸泡后，加热回流提取，滤过； b. 将步骤a中滤过后的药渣加入乙醇，再加热回流提取两次，分别滤过； c. 合并步骤a、b所得滤液，回收乙醇至无醇味，浓缩成浸膏，即得所述滇白珠乙醇提 取物。7. 根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述滇白珠乙醇提取物的提取方法包括 以下步骤： a. 取滇白珠药材，粉碎过筛，用相当于药材重量5-10倍乙醇浸泡0. 5-3h后，加热回流 提取l_3h，滤过； b. 将步骤a中滤过后的药渣加入相当于药材重量4-8倍乙醇加热回流提取l-3h，滤 过； c. 将步骤b中滤过后的药渣加入相当于药材重量4-6倍乙醇加热回流提取l-3h，滤 过； d. 合并步骤a、b、c所得滤液，回收乙醇至无醇味，水浴浓缩成浸膏，即得所述滇白珠乙 醇提取物。8. 滇白珠提取物与医药学上可接受的载体配合制成在制备治疗和/或预防胃溃疡药 物方面的新用途。
【专利摘要】本发明公开了一种滇白珠在制备治疗胃溃疡药物的应用，特别是滇白珠提取物在制备治疗和/或预防胃溃疡药物方面的新用途。
【IPC分类】A61P1/04, A61K36/45
【公开号】CN104906169
【申请号】CN201510283326
【发明人】何飞, 韦桂宁, 苏华
【申请人】广西壮族自治区中医药研究院
【公开日】2015年9月16日
【申请日】2015年5月29日
【技术领域】
[0001] 本发明涉及滇白珠的新用途，即在制备治疗和/或预防胃溃疡药物方面的应用。
【背景技术】
[0002] 胃溃疡为临床常见的慢性消化系统疾病，多由急性消化不良、胃出血、幽门螺杆菌 感染、非留体类消炎药的使用不当和精神压力过大等原因引起，表现为胃黏膜局部组织糜 烂、坏死，或自体消化，形成溃疡面，严重者胃穿孔。胃溃疡发病机理尚不完全明了，一般认 为与胃粘膜侵袭因子（胃蛋白酶、盐酸等）和胃粘膜保护因子（前列腺素、NO、S0D、胃黏膜 血流、黏液_碳酸氢盐屏障、细胞膜的完整性和细胞再生等）的作用失衡有关。胃溃疡发病 率高，治愈慢，且易复发，而少数胃溃疡病人可发展成胃癌，严重影响患者的身心健康。
[0003] 现代医学治疗胃溃疡以西药为主，根据药物作用机理可分为：铝碳酸镁等酸抑制 剂，西咪替丁等H受体拮抗剂，奥美拉唑等质子泵抑制剂，甲硝唑等幽门螺杆菌抑制剂，硫 糖铝等胃黏膜保护剂，多潘立酮片等胃动力药，等。中药治疗常用健胃愈疡片等中药复方制 剂。
[0004] 西药治疗胃溃疡，近期溃疡愈合率比较高，但远期复发率高，且副作用多，患者依 从性差。中医从整体观念辨证论治，可望弥补西药治疗的不足，但目前临床中药治疗胃溃疡 愈合率不及西药。因此，急需研制高效、低毒的抗胃溃疡药物；从中医中药中寻求治疗胃溃 疡的安全有效的药物和制剂是一种趋势，也符合临床诊治的需要。
[0005] 滇白珠，别名：透骨草、小透骨草、透骨消、满山香、下山虎等，为杜鹃花科植物滇白 ^GaultherialeucocarpaBI.var.yunnanensis(Franch. )T.Z.HsuetR.C.Fang^tlzP 燥全株。现有文献资料显示滇白珠或其同属植物具有抗炎，抗菌，镇痛，祛痰化瘀和抗肿瘤 等药理活性，但未见有关抗胃溃疡作用的文献报道。
【发明内容】
[0006] 本发明的目的是提供滇白珠在制备治疗和/或预防胃溃疡药物方面的应用； 本发明的另一目的是提供滇白珠提取物在制备治疗和/或预防胃溃疡药物方面的应 用； 本发明的另一目的是提供滇白珠乙醇提取物在制备治疗和/或预防胃溃疡药物方面 的应用； 滇白珠，别名：透骨草、小透骨草、透骨消、满山香、下山虎等，为杜鹃花科植物滇白珠GaultherialeucocarpaBI.var.yunnanensis(Franch. )T.Z.HsuetR.C.Fang的干燥 全株。辛、苦，温。有小毒。归肝、肾经。祛风除湿，解毒止痛。用于风湿关节痛；外用治疮 疡肿毒。
[0007] 发明人通过对幽门结扎型胃溃疡大鼠模型、乙醇所致胃溃疡大鼠模型、小鼠应激 性胃溃疡模型进行滇白珠药理实验研宄，发现滇白珠提取物高剂量能够显著降低大鼠胃液 量、胃液总酸度以及总酸排出量，低剂量能够显著降低胃液总酸度；滇白珠提取物高、低剂 量均能够显著降低大鼠胃溃疡发生率以及显著减少大鼠胃溃疡指数；滇白珠提取物高剂量 组能够显著减少小鼠应激性胃溃疡点数。
[0008] 因此，申请人提供滇白珠在制备治疗和/或预防胃溃疡药物方面的应用；特别是 滇白珠提取物、滇白珠乙醇提取物在制备治疗和/或预防胃溃疡药物方面的应用。
[0009] 本发明的另一目的是提供滇白珠乙醇提取物的制备方法。
[0010] 所述的滇白珠乙醇提取物是采用体积百分浓度为30%及以上的乙醇提取制备而 成。
[0011] 本发明所述滇白珠乙醇提取物的提取方法为：将滇白珠粉碎后用体积百分浓度为 30%及以上的乙醇加热回流提取，提取液过滤、回收乙醇，浓缩成膏，即得所述滇白珠乙醇提 取物。
[0012] 优选地，滇白珠乙醇提取物的提取方法为： a. 取滇白珠药材，粉碎过筛，用乙醇浸泡后，加热回流提取，滤过； b. 将步骤a中滤过后的药渣加入乙醇，再加热回流提取两次，分别滤过； c. 合并步骤a、b所得滤液，回收乙醇至无醇味，浓缩成浸膏，即得所述滇白珠乙醇提 取物。
[0013] 更优选地，滇白珠乙醇提取物的提取方法为： a. 取滇白珠药材，粉碎过筛，用相当于药材重量5-10倍乙醇浸泡0. 5-3h后，加热回流 提取l_3h，滤过； b. 将步骤a中滤过后的药渣加入相当于药材重量4-8倍乙醇加热回流提取l-3h，滤 过； c. 将步骤b中滤过后的药渣加入相当于药材重量4-6倍乙醇加热回流提取l-3h，滤 过； d. 合并步骤a、b、c所得滤液，回收乙醇至无醇味，水浴浓缩成浸膏，即得所述滇白珠乙 醇提取物。
[0014] 本发明还提供滇白珠提取物与医药学上可接受的载体配合制成在制备治疗和/ 或预防胃溃疡药物方面的新用途。滇白珠提取物配合医药学上可接受的载体，按本领域常 规方法制备成片剂、颗粒剂、胶囊剂、滴丸、酊剂等剂型。
[0015] 本发明的药学上可接受的载体包括但不限于以下： 稀释剂：淀粉、乳糖、糊精、微晶纤维素、无机盐等。
[0016] 润湿剂与粘合剂：纯化水、乙醇、明胶、聚乙二醇、纤维素衍生物等。
[0017]崩解剂：淀粉、羧甲基淀粉钠、纤维素衍生物、交联聚维酮等。
[0018] 润滑剂：硬脂酸镁、微粉硅胶、滑石粉、聚乙二醇等。
[0019] 助溶剂：水、乙醇、甘油、丙二醇、液状石蜡、植物油等。
[0020] 矫味剂：鹿糖、单糖、芳香剂等。
[0021] 防腐剂：苯甲酸、山梨酸、甲酯、乙酯、丙酯等。
[0022] 在现有文献资料中显示，滇白珠或其同属植物具有抗炎，抗菌，镇痛，祛痰化瘀和 抗肿瘤等药理活性，但未见有关抗胃溃疡作用的文献报道。
[0023] 本发明提供的滇白珠、滇白珠提取物制备治疗和/或预防胃溃疡药物方面的新用 途具有以下优点： 1、滇白珠提取物防治胃溃疡效果理想，对幽门结扎型胃溃疡大鼠溃疡、幽门结扎大鼠 胃液分泌、乙醇所致大鼠胃溃疡以及小鼠应激性胃溃疡的影响等试验结果显示：本发明 滇白珠提取物能够显著降低大鼠胃溃疡发生率，显著减少大鼠胃溃疡点数(或溃疡指数)， 显著降低大鼠胃液量、胃液总酸度以及总酸排出量(显著削弱胃黏膜损伤因子一胃酸的作 用)，显著减少小鼠应激性胃溃疡点数。提示本发明能够有效治疗和/或预防胃溃疡疾病， 为开发成为防治胃溃疡药物提供了新的物质基础，具有潜在巨大的社会效益和经济效益。
[0024]2、滇白珠药材资源丰富，提取制备方法简单易行、原料来源方便易得、可用于滇白 珠提取物的大量制备。
[0025]3、本发明制作成本较低、污染小，利于节能减排条件下的大规模生产，产业化前景 十分明确。
【具体实施方式】
[0026] 实施例1 a.取滇白珠药材lkg，粉碎过筛，用相当于药材重量10倍30%乙醇浸泡0. 5h后，加热 回流提取Ih，滤过； b. 将步骤a中滤过后的药渣加入相当于药材重量4倍30%乙醇加热回流提取lh，滤 过； c. 将步骤b中滤过后的药渣加入相当于药材重量4倍30%乙醇加热回流提取lh，滤 过； d. 合并步骤a、b、c所得滤液，回收乙醇至无醇味，然后水浴浓缩成膏，即得所述滇白 珠乙醇提取物。
[0027] 实施例2 a. 取滇白珠药材lkg，粉碎过筛，用相当于药材重量5倍的无水乙醇浸泡3h后，加热回 流提取3h，滤过； b. 将步骤a中滤过后的药渣加入相当于药材重量8倍的无水乙醇加热回流提取3h，滤 过； c. 将步骤b中滤过后的药渣加入相当于药材重量6倍的无水乙醇加热回流提取3h，滤 过； d. 合并步骤a、b、c所得滤液，回收乙醇至无醇味，然后水浴浓缩成膏，即得所述滇白 珠乙醇提取物。
[0028] 实施例3 a. 取滇白珠药材lkg，粉碎过筛，用相当于药材重量8倍95%乙醇浸泡I. 5h后，加热回 流提取1.5h，滤过； b. 将步骤a中滤过后的药渣加入相当于药材重量7倍95%乙醇加热回流提取I. 5h，滤 过； c. 将步骤b中滤过后的药渣加入相当于药材重量5倍95%乙醇加热回流提取I. 5h，滤 过； d. 合并步骤a、b、c所得滤液，回收乙醇至无醇味，然后水浴浓缩成膏，即得所述滇白 珠乙醇提取物。
[0029] 实施例4 a. 取滇白珠药材lkg，粉碎过筛，用相当于药材重量7倍50%乙醇浸泡a后，加热回流 提取2h，滤过； b. 将步骤a中滤过后的药渣加入相当于药材重量7倍60%乙醇加热回流提取I. 5h，滤 过； c. 将步骤b中滤过后的药渣加入相当于药材重量5倍70%乙醇加热回流提取I. 5h，滤 过； d. 合并步骤a、b、c所得滤液，回收乙醇至无醇味，然后水浴浓缩成膏，即得所述滇白 珠乙醇提取物。
[0030] 实施例5 a. 取滇白珠药材lkg，粉碎过筛，用相当于药材重量9倍75%乙醇浸泡0. 75h后，加热 回流提取I. 2h，滤过； b. 将步骤a中滤过后的药渣加入相当于药材重量6倍75%乙醇加热回流提取lh，滤 过； c. 将步骤b中滤过后的药渣加入相当于药材重量4倍75%乙醇加热回流提取lh，滤 过； d. 合并步骤a、b、c所得滤液，回收乙醇至无醇味，然后水浴浓缩成膏，即得所述滇白 珠乙醇提取物。
[0031]实验例1:滇白珠提取物对幽门结扎型胃溃疡大鼠溃疡发生率和溃疡点数的影响 1供试品： I. 1试验药物：本发明实施例3制备所得滇白珠乙醇提取物。
[0032] 1. 2动物：SD大鼠，雄性，SPF级，由广西医科大学实验动物中心提供，动物合格证 证号：SCXK桂 2009-0002。
[0033] 1. 3试剂：西咪替丁片，批号131202,成都锦华药业有限责任公司。
[0034] 1. 4仪器：XYH_2A解剖显微镜+冷光源，上海光学仪器一厂。
[0035] 2实验分组 空白对照组：蒸馏水 实 验1组：实施例3滇白珠乙醇提取物低剂量组，9.Og生药/kg实验2组：实施例3滇白珠乙醇提取物高剂量组，18.Og生药/kg 对比例1组：西咪替丁，0. 8g/kg。
[0036] 3实验方法 取体重200~250g大鼠40只，随机分为4组，每组10只，分别为空白对照组、实验1组、 实验2组、对比例1组。
[0037] 灌胃给药，1次M连续3d，空白对照组给予等容量蒸馏水。第2d给药后大鼠禁 食（不禁水）48h。第4d将大鼠用乙醚麻醉，进行胃幽门结扎手术，并经十二指肠给药，空白 对照组给予等容量蒸馏水，缝合腹壁切口，禁食禁水。18h后用过量乙醚麻醉处死大鼠，开腹 取胃，从喷门放出胃内容物，然后向胃内注入lOmllO%甲醛溶液，并将胃置于10%甲醛溶液 中固定24小时，沿胃大弯剪开胃，观察瘤胃部等部位的溃疡状况，记录出现胃溃疡的动物 数及其溃疡点的数量(个)。计算溃疡发生率，溃疡点数及其抑制率。统计方法：溃疡动物数 组间比较，采用Fisher直接概率法；其他指标采用组间t检验。下同。
[0038] 4结果：结果见表1。
[0039]表1滇白珠提取物对幽门结扎型胃溃疡大鼠溃疡发生率和溃疡点数的影响O
注：与空白对照组比较：*P〈〇. 05，#P〈0. 01。
[0040] 由表1可知：与空白对照组比较，本发明滇白珠提取物能够显著降低大鼠胃溃疡 发生率、显著减少大鼠胃溃疡点数。
[0041] 实验例2 :滇白珠提取物对幽门结扎大鼠胃液分泌的影响 1供试品： I. 1试验药物：本发明实施例3制备所得滇白珠乙醇提取物。
[0042] 1. 2动物：SD大鼠，雌性，SPF级，由广西医科大学实验动物中心提供，动物合格证 证号：SCXK桂 2009-0002。
[0043] 1. 3试剂：西咪替丁片，批号131202,成都锦华药业有限责任公司。
[0044] 1. 4仪器：碱式滴定管等。
[0045] 2实验分组 空白对照组：蒸馏水 实验1组：实施例3滇白珠乙醇提取物低剂量组，9.Og生药/kg实验2组：实施例3滇白珠乙醇提取物高剂量组，18.Og生药/kg 对比例2组：西咪替丁，0. 8g/kg。
[0046] 3实验方法 取体重200~230g大鼠32只，随机分为4组，每组8只，分别为空白对照组、实验1组、 实验2组、对比例2组。
[0047] 灌胃给药，1次M连续3d，空白对照组给予等容量蒸馏水。第3d给药后大鼠禁 食（不禁水）24h。第4d将大鼠用乙醚麻醉，进行胃幽门结扎手术，并经十二指肠给药，空白 对照组给予等容量蒸馏水，缝合腹壁切口，禁食禁水。手术6h后用过量乙醚麻醉处死大鼠， 开腹夹住喷门，取胃，收集胃内容物，3500转/分，尚心10分钟，测量胃液体积，用酸碱中和 滴定法测定胃液总酸度并计算总酸排出量。
[0048] 4结果：结果见表2 表2滇白珠提取物对幽门结扎大鼠胃液分泌的影响（n=8，y
注：与空白对照组比较：*P〈〇. 05，#P〈0. 01。
[0049] 由表2可知：与空白对照组比较，本发明滇白珠提取物高剂量组能够显著降低大 鼠胃液量、胃液总酸度以及总酸排出量，本发明滇白珠提取物低剂量组能够显著降低胃液 总酸度。试验结果显示滇白珠提取物能够显著削弱胃黏膜损伤因子（胃酸）的作用。
[0050] 实验例3:滇白珠提取物对乙醇所致大鼠胃溃疡模型的影响 1供试品： I. 1试验药物：本发明实施例3制备所得滇白珠乙醇提取物。
[0051] 1. 2动物：SD大鼠，雄性，SPF级，由广西医科大学实验动物中心提供，动物合格证 证号：SCXK桂 2009-0002。
[0052] 1. 3试剂：硫酸铝咀嚼片，批号130502,山东仁和堂药业有限公司。
[0053] 1. 4仪器：XYH_2A解剖显微镜+冷光源，上海光学仪器一厂；等。
[0054] 2实验分组 空白对照组：蒸馏水 实验1组：实施例3滇白珠乙醇提取物低剂量组，9.Og生药/kg实验2组：实施例3滇白珠乙醇提取物高剂量组，18.Og生药/kg 对比例3组：硫糖铝咀嚼片，0. 42g/kg。
[0055] 3实验方法 大鼠32只，禁食不禁水12h，随机分为4组，每组8只，分别为空白对照组、实验1组、实 验2组、对比例3组。
[0056] 灌胃给药，对照组给予等容量蒸馏水，再禁食禁水12h，然后第2次灌胃给药，末次 给药5h后，各组大鼠灌胃无水乙醇，Iml/只，1.5h后用过量乙醚麻醉处死大鼠，取胃，沿胃 大弯剖开胃，清理干净胃内表面，显微镜下观察腺胃部的溃疡状况，按照Guth标准评定溃 疡指数。
[0057] 4结果：结果见表3。
[0058] 表3滇白珠提取物对乙醇所致大鼠胃溃疡模型的影响(i±P
注：与空白对照组比较：*P〈〇. 05，#P〈0. 01。
[0059] 由表3可知，与空白对照组比较，本发明滇白珠提取物高、低剂量均能够显著降低 大鼠胃溃疡发生率以及显著减少大鼠胃溃疡指数。
[0060] 实验例4:滇白珠提取物对小鼠应激性胃溃疡的影响(束缚水浸应激法） 1供试品： I. 1试验药物：本实验例中所述滇白珠提取物由实施例3中所述方法提取得到。
[0061] 1.2动物：昆明种小鼠，雌性，SPF级，由广西医科大学实验动物中心提供，动物合 格证号：SCXK桂 2009-0002。
[0062] 1. 3试剂：西咪替丁片，批号131202,成都锦华药业有限责任公司。
[0063] 2实验分组 空白对照组：蒸馏水 实验1组：实施例3滇白珠乙醇提取物低剂量组，9.Og生药/kg实验2组：实施例3滇白珠乙醇提取物高剂量组，18.Og生药/kg 对比例4组：西咪替丁片，0. 8g/kg。
[0064] 3实验方法 小鼠40只，随机分为4组，每组10只，分别为空白对照组、实验1组、实验2组、对比例 4组。灌胃给药，1次/d，连续7d;对照组灌胃同容积蒸馏水。末次给药后5h，将小鼠四肢 固定在木板上，置（18±1) °C恒温水中浸泡(水面齐剑突)21小时，然后处死小鼠，结扎胃喷 门，从胃幽门注入10%甲醛溶液2ml，结扎幽门，取胃，置10%甲醛溶液中固定24小时，沿胃 大弯剪开胃，洗净杂物，显微镜下观察记录腺胃部溃疡点的数量(个)。
[0065] 4结果：结果见表4。
[0066] 表4滇白珠提取物对小鼠应激性胃溃疡的影响(i± y
注：与空白对照组比较：*P〈〇. 05，#P〈0. 01。
[0067] 由表4可知：与空白对照组比较，本发明滇白珠提取物高剂量组能够显著减少小 鼠应激性胃溃疡点数。
[0068] 结论：滇白珠提取物对幽门结扎型胃溃疡大鼠溃疡、幽门结扎大鼠胃液分泌、乙醇 所致大鼠胃溃疡以及小鼠应激性胃溃疡的影响等试验结果显示：本发明滇白珠提取物能够 显著降低大鼠胃溃疡发生率，显著减少大鼠胃溃疡点数（或溃疡指数)，显著降低大鼠胃液 量、胃液总酸度以及总酸排出量（显著削弱胃黏膜损伤因子一胃酸的作用），显著减少小鼠 应激性胃溃疡点数。提示本发明能够有效治疗和/或预防胃溃疡疾病。
[0069] 虽然，上文中已经用一般性说明、【具体实施方式】及试验，对本发明作了详尽的描 述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见 的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的 范围。
【主权项】
1. 滇白珠在制备治疗和/或预防胃溃疡药物方面的应用。2. 滇白珠提取物在制备治疗和/或预防胃溃疡药物方面的应用。3. 滇白珠乙醇提取物在制备治疗和/或预防胃溃疡药物方面的应用。4. 根据权利要求3所述的应用，其特征在于：所述的滇白珠乙醇提取物是采用体积百 分浓度为30%及以上的乙醇提取制备而成。5. 根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述滇白珠乙醇提取物的提取方法为：将 滇白珠粉碎后用体积百分浓度为30%及以上的乙醇加热回流提取，提取液过滤、回收乙醇， 浓缩成膏，即得所述滇白珠乙醇提取物。6. 根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述滇白珠乙醇提取物的提取方法包括 以下步骤： a. 取滇白珠药材，粉碎过筛，用乙醇浸泡后，加热回流提取，滤过； b. 将步骤a中滤过后的药渣加入乙醇，再加热回流提取两次，分别滤过； c. 合并步骤a、b所得滤液，回收乙醇至无醇味，浓缩成浸膏，即得所述滇白珠乙醇提 取物。7. 根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述滇白珠乙醇提取物的提取方法包括 以下步骤： a. 取滇白珠药材，粉碎过筛，用相当于药材重量5-10倍乙醇浸泡0. 5-3h后，加热回流 提取l_3h，滤过； b. 将步骤a中滤过后的药渣加入相当于药材重量4-8倍乙醇加热回流提取l-3h，滤 过； c. 将步骤b中滤过后的药渣加入相当于药材重量4-6倍乙醇加热回流提取l-3h，滤 过； d. 合并步骤a、b、c所得滤液，回收乙醇至无醇味，水浴浓缩成浸膏，即得所述滇白珠乙 醇提取物。8. 滇白珠提取物与医药学上可接受的载体配合制成在制备治疗和/或预防胃溃疡药 物方面的新用途。
【专利摘要】本发明公开了一种滇白珠在制备治疗胃溃疡药物的应用，特别是滇白珠提取物在制备治疗和/或预防胃溃疡药物方面的新用途。
【IPC分类】A61P1/04, A61K36/45
【公开号】CN104906169
【申请号】CN201510283326
【发明人】何飞, 韦桂宁, 苏华
【申请人】广西壮族自治区中医药研究院
【公开日】2015年9月16日
【申请日】2015年5月29日
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