一种提取威灵仙总皂苷的方法
一种提取威灵仙总皂苷的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种提取威灵仙总皂苷的方法，属于中草药有效成分提取分离领域。
【背景技术】
[0002]威灵仙，属毛莨科植物。在临床上，它用于治疗痛风顽痹、肢体麻木、筋脉拘挛、减弱风湿痹痛、诸骨鲠咽，减少水肿、降血压和治疗外伤等。有关威灵仙的化学成分，近年来陆续有一些报道，但研宄主要集中威灵仙的大极性组分。此外，从威灵仙的根部提取物中分离得到一系列三萜苷。威灵仙中所发现的大多数皂苷的苷元均为齐墩果酸，其总皂苷具有抗肿瘤及抗炎镇痛的作用。
[0003]目前，对威灵仙的研宄主要集中在总皂苷药理作用上，对其总皂苷的提取方法研宄较少。皂苷提取常用的方法有:常规加热回流提取法、索氏提取法、渗漉提取法等。对提取威灵仙总皂苷来讲，都有其局限性，如索氏提取就很难控制提取液溶剂浓度的改变；渗漏提取又无法控制提取温度的改变；而加热回流提取法虽可控制提取溶剂浓度，但只有经过2次或3次提取才能较完全的提出皂苷，需要较多的提取溶剂，且提取时间较长。
【发明内容】
[0004]本发明的目的是针对现有技术的不足，提供一种提取威灵仙总皂苷的方法，该方法具有工艺简单、能耗低、生产周期短等特点。
[0005]本发明包括以下步骤:
(1)以威灵仙为原料，干燥、粉碎，过20目筛，加入3-5倍的pH为4.0-5.0的乙醇溶液，将相当于原料1~2%的纤维素酶加入其中，于40~50°C酶解2~3h ；
(2)将酶解后的物料置于连续逆流超声装置中，于70~80°C、20~40KHz的条件下提取60~120min，过滤；
(3)将提取液用滤布孔径为50~1.0Mm板框机过滤，其中压力为0.1-1.0MPa，板框机过滤后的液体经0.2-0.02Mfli的微滤装置进行微滤，其中保持微滤装置压力为0.1-0.6MPa ;
(4)微滤透过液经过预处理的0.5-1.5倍原料重量的大孔吸附树脂柱后，用2~3BV的蒸馏水洗脱，再改用4~6BV的60~80%的乙醇溶液洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩并真空干燥，得到威灵仙总皂苷。
[0006]步骤(I)中所述的调节乙醇溶液的酸为乙酸。
[0007]步骤(4)中所述的大孔树脂型号为八8-8、0-101、爾六-9。
[0008]本发明的有益效果在于:(1)采用纤维素酶处理，能破坏植物的细胞壁，有利于有效成分的溶出，大大缩短处理时间，提高生产效率；(2)采用连续逆流超声提取，利用超声的空化作用，加速威灵仙总皂苷的溶出；(3)本发明操作方便，工艺简单，得率高，且生产安全可靠。(4)该法工艺简单、能耗低、萃取溶剂无毒、易回收。
[0009]下面将结合【具体实施方式】进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
[0010]【具体实施方式】:
实施例1:
以威灵仙为原料，干燥、粉碎，过20目筛，加入3倍的pH为4.0的乙醇溶液，将相当于原料1%的纤维素酶加入其中，于40°C酶解2h ;将酶解后的物料置于连续逆流超声装置中，于70°C、20KHz的条件下提取60min，过滤；将提取液用滤布孔径为50Mm板框机过滤，其中压力为1.0MPa，板框机过滤后的液体经0.2Mffl的微滤装置进行微滤，其中保持微滤装置压力为
0.6MPa ;微滤透过液经过预处理的0.5倍原料重量的AB-8的大孔吸附树脂柱后，用2BV的蒸馏水洗脱，再改用4BV的60%的乙醇溶液洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩并真空干燥，得到威灵仙总皂苷，含量为67.8%。
[0011]实施例2:
以威灵仙为原料，干燥、粉碎，过20目筛，加入5倍的pH为4.5的乙醇溶液，将相当于原料2%的纤维素酶加入其中，于45°C酶解3h ;将酶解后的物料置于连续逆流超声装置中，于75°C、40KHz的条件下提取90min，过滤；将提取液用滤布孔径为30Mm板框机过滤，其中压力为0.5MPa，板框机过滤后的液体经0.02Mffl的微滤装置进行微滤，其中保持微滤装置压力为0.3MPa ;微滤透过液经过预处理的I倍原料重量的D-101的大孔吸附树脂柱后，用3BV的蒸馏水洗脱，再改用6BV的70%的乙醇溶液洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩并真空干燥，得到威灵仙总皂苷，含量为76.5%。
[0012]实施例3:
以威灵仙为原料，干燥、粉碎，过20目筛，加入4倍的pH为5.0的乙醇溶液，将相当于原料1.5%的纤维素酶加入其中，于50°C酶解3h ;将酶解后的物料置于连续逆流超声装置中，于80°C、40KHz的条件下提取120min，过滤；将提取液用滤布孔径为1.0Mm板框机过滤，其中压力为0.1MPa，板框机过滤后的液体经0.1Mm的微滤装置进行微滤，其中保持微滤装置压力为0.1MPa ;微滤透过液经过预处理的1.5倍原料重量的NKA-9大孔吸附树脂柱后，用3BV的蒸馏水洗脱，再改用5BV的80%的乙醇溶液洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩并真空干燥，得到威灵仙总皂苷，含量为71.2%。
【主权项】
1.一种提取威灵仙总皂苷的方法，其特征在于，包括以下步骤: (1)以威灵仙为原料，干燥、粉碎，过20目筛，加入3-5倍的pH为4.0-5.0的乙醇溶液，将相当于原料1~2%的纤维素酶加入其中，于40~50°C酶解2~3h ； (2)将酶解后的物料置于连续逆流超声装置中，于70~80°C、20~40KHz的条件下提取60~120min，过滤； (3)将提取液用滤布孔径为50~1.0Mm板框机过滤，其中压力为0.1-1.0MPa，板框机过滤后的液体经0.2-0.02Mfli的微滤装置进行微滤，其中保持微滤装置压力为0.1-0.6MPa ; (4)微滤透过液经过预处理的0.5-1.5倍原料重量的大孔吸附树脂柱后，用2~3BV的蒸馏水洗脱，再改用4~6BV的60~80%的乙醇溶液洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩并真空干燥，得到威灵仙总皂苷。2.根据权利要求1所述的一种提取威灵仙总皂苷的方法，其特征在于，步骤(I)中所述的调节乙醇溶液的酸为乙酸。3.根据权利要求1所述的一种提取威灵仙总皂苷的方法，其特征在于，步骤(4)中所述的大孔树脂型号为AB-8、D-101、NKA-9。
【专利摘要】本发明涉及一种提取威灵仙总皂苷的方法，其处理步骤包括：（1）以威灵仙为原料，干燥、粉碎过筛，纤维素酶酶解；（2）连续逆流超声提取；（3）提取液经过板框过滤机过滤和微滤装置纯化；（3）微滤透过液再经大孔吸附树脂进一步纯化，浓缩干燥，即得威灵仙总皂苷。本发明所得威灵仙总皂苷具有得率高、生产过程简化、生产周期短、生产效率高等特点。
【IPC分类】A61K36/716
【公开号】CN104906209
【申请号】CN201510270040
【发明人】刘东锋, 杨成东
【申请人】南京泽朗医药科技有限公司
【公开日】2015年9月16日
【申请日】2015年5月26日
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种提取威灵仙总皂苷的方法，属于中草药有效成分提取分离领域。
【背景技术】
[0002]威灵仙，属毛莨科植物。在临床上，它用于治疗痛风顽痹、肢体麻木、筋脉拘挛、减弱风湿痹痛、诸骨鲠咽，减少水肿、降血压和治疗外伤等。有关威灵仙的化学成分，近年来陆续有一些报道，但研宄主要集中威灵仙的大极性组分。此外，从威灵仙的根部提取物中分离得到一系列三萜苷。威灵仙中所发现的大多数皂苷的苷元均为齐墩果酸，其总皂苷具有抗肿瘤及抗炎镇痛的作用。
[0003]目前，对威灵仙的研宄主要集中在总皂苷药理作用上，对其总皂苷的提取方法研宄较少。皂苷提取常用的方法有:常规加热回流提取法、索氏提取法、渗漉提取法等。对提取威灵仙总皂苷来讲，都有其局限性，如索氏提取就很难控制提取液溶剂浓度的改变；渗漏提取又无法控制提取温度的改变；而加热回流提取法虽可控制提取溶剂浓度，但只有经过2次或3次提取才能较完全的提出皂苷，需要较多的提取溶剂，且提取时间较长。
【发明内容】
[0004]本发明的目的是针对现有技术的不足，提供一种提取威灵仙总皂苷的方法，该方法具有工艺简单、能耗低、生产周期短等特点。
[0005]本发明包括以下步骤:
(1)以威灵仙为原料，干燥、粉碎，过20目筛，加入3-5倍的pH为4.0-5.0的乙醇溶液，将相当于原料1~2%的纤维素酶加入其中，于40~50°C酶解2~3h ；
(2)将酶解后的物料置于连续逆流超声装置中，于70~80°C、20~40KHz的条件下提取60~120min，过滤；
(3)将提取液用滤布孔径为50~1.0Mm板框机过滤，其中压力为0.1-1.0MPa，板框机过滤后的液体经0.2-0.02Mfli的微滤装置进行微滤，其中保持微滤装置压力为0.1-0.6MPa ;
(4)微滤透过液经过预处理的0.5-1.5倍原料重量的大孔吸附树脂柱后，用2~3BV的蒸馏水洗脱，再改用4~6BV的60~80%的乙醇溶液洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩并真空干燥，得到威灵仙总皂苷。
[0006]步骤(I)中所述的调节乙醇溶液的酸为乙酸。
[0007]步骤(4)中所述的大孔树脂型号为八8-8、0-101、爾六-9。
[0008]本发明的有益效果在于:(1)采用纤维素酶处理，能破坏植物的细胞壁，有利于有效成分的溶出，大大缩短处理时间，提高生产效率；(2)采用连续逆流超声提取，利用超声的空化作用，加速威灵仙总皂苷的溶出；(3)本发明操作方便，工艺简单，得率高，且生产安全可靠。(4)该法工艺简单、能耗低、萃取溶剂无毒、易回收。
[0009]下面将结合【具体实施方式】进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
[0010]【具体实施方式】:
实施例1:
以威灵仙为原料，干燥、粉碎，过20目筛，加入3倍的pH为4.0的乙醇溶液，将相当于原料1%的纤维素酶加入其中，于40°C酶解2h ;将酶解后的物料置于连续逆流超声装置中，于70°C、20KHz的条件下提取60min，过滤；将提取液用滤布孔径为50Mm板框机过滤，其中压力为1.0MPa，板框机过滤后的液体经0.2Mffl的微滤装置进行微滤，其中保持微滤装置压力为
0.6MPa ;微滤透过液经过预处理的0.5倍原料重量的AB-8的大孔吸附树脂柱后，用2BV的蒸馏水洗脱，再改用4BV的60%的乙醇溶液洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩并真空干燥，得到威灵仙总皂苷，含量为67.8%。
[0011]实施例2:
以威灵仙为原料，干燥、粉碎，过20目筛，加入5倍的pH为4.5的乙醇溶液，将相当于原料2%的纤维素酶加入其中，于45°C酶解3h ;将酶解后的物料置于连续逆流超声装置中，于75°C、40KHz的条件下提取90min，过滤；将提取液用滤布孔径为30Mm板框机过滤，其中压力为0.5MPa，板框机过滤后的液体经0.02Mffl的微滤装置进行微滤，其中保持微滤装置压力为0.3MPa ;微滤透过液经过预处理的I倍原料重量的D-101的大孔吸附树脂柱后，用3BV的蒸馏水洗脱，再改用6BV的70%的乙醇溶液洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩并真空干燥，得到威灵仙总皂苷，含量为76.5%。
[0012]实施例3:
以威灵仙为原料，干燥、粉碎，过20目筛，加入4倍的pH为5.0的乙醇溶液，将相当于原料1.5%的纤维素酶加入其中，于50°C酶解3h ;将酶解后的物料置于连续逆流超声装置中，于80°C、40KHz的条件下提取120min，过滤；将提取液用滤布孔径为1.0Mm板框机过滤，其中压力为0.1MPa，板框机过滤后的液体经0.1Mm的微滤装置进行微滤，其中保持微滤装置压力为0.1MPa ;微滤透过液经过预处理的1.5倍原料重量的NKA-9大孔吸附树脂柱后，用3BV的蒸馏水洗脱，再改用5BV的80%的乙醇溶液洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩并真空干燥，得到威灵仙总皂苷，含量为71.2%。
【主权项】
1.一种提取威灵仙总皂苷的方法，其特征在于，包括以下步骤: (1)以威灵仙为原料，干燥、粉碎，过20目筛，加入3-5倍的pH为4.0-5.0的乙醇溶液，将相当于原料1~2%的纤维素酶加入其中，于40~50°C酶解2~3h ； (2)将酶解后的物料置于连续逆流超声装置中，于70~80°C、20~40KHz的条件下提取60~120min，过滤； (3)将提取液用滤布孔径为50~1.0Mm板框机过滤，其中压力为0.1-1.0MPa，板框机过滤后的液体经0.2-0.02Mfli的微滤装置进行微滤，其中保持微滤装置压力为0.1-0.6MPa ; (4)微滤透过液经过预处理的0.5-1.5倍原料重量的大孔吸附树脂柱后，用2~3BV的蒸馏水洗脱，再改用4~6BV的60~80%的乙醇溶液洗脱，收集乙醇洗脱液，浓缩并真空干燥，得到威灵仙总皂苷。2.根据权利要求1所述的一种提取威灵仙总皂苷的方法，其特征在于，步骤(I)中所述的调节乙醇溶液的酸为乙酸。3.根据权利要求1所述的一种提取威灵仙总皂苷的方法，其特征在于，步骤(4)中所述的大孔树脂型号为AB-8、D-101、NKA-9。
【专利摘要】本发明涉及一种提取威灵仙总皂苷的方法，其处理步骤包括：（1）以威灵仙为原料，干燥、粉碎过筛，纤维素酶酶解；（2）连续逆流超声提取；（3）提取液经过板框过滤机过滤和微滤装置纯化；（3）微滤透过液再经大孔吸附树脂进一步纯化，浓缩干燥，即得威灵仙总皂苷。本发明所得威灵仙总皂苷具有得率高、生产过程简化、生产周期短、生产效率高等特点。
【IPC分类】A61K36/716
【公开号】CN104906209
【申请号】CN201510270040
【发明人】刘东锋, 杨成东
【申请人】南京泽朗医药科技有限公司
【公开日】2015年9月16日
【申请日】2015年5月26日
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