用于同步授精时间的方法和组合物的制作方法
用于同步授精时间的方法和组合物的制作方法
【专利说明】用于同步授精时间的方法和组合物
[0001] 本申请是申请日2010年4月23日，申请号201080029042. 8 (PCT/ US2010/032258)，发明名称为"用于同步授精时间的方法和组合物"的发明专利申请的分案 申请。
[0002] 相关申请的交叉引用
[0003] 对于2009年4月23日提交的美国临时申请第61/172, 009号，本申请要求35U. S.C. § 119(e)下的优先权，该申请特别地通过引用结合到本文中。 发明领域
[0004] 本发明设及用于在动物中同步授精时间的方法和组合物。更具体而言，该发明设 及没有发情检测化eatdetection)的同步猪的授精时间的方法和组合物。
[000引发明背景
[0006] 促性腺素释放激素是一种10个氨基酸的肤，也被称为促黄体激素释放激素 (LHRH)。促性腺素释放激素在下丘脑中生成，负责滤泡刺激激素和促黄体激素从垂体释放。 促性腺素释放激素从下丘脑的神经元中释放，在滤泡刺激激素和促黄体激素释放的复杂调 节中起作用。滤泡刺激激素和促黄体激素W结合形式调节性腺的功能，在睾丸产生睾酬和 在卵巢产生孕酬和雌激素，和调节配子的产生和成熟。例如，滤泡刺激激素在卵巢刺激未成 熟的卵泡的生长和补充，促黄体激素触发排卵。
[0007] 雌性和雄性的促性腺素释放激素的分泌具有差别。在雄性中，促性腺素释放激素 W恒频脉冲分泌，但在雌性中，该脉冲频率在发情周期期间变化，并且临排卵时有大量高涨 的促性腺素释放激素。促性腺素释放激素的分泌在所有脊椎动物中是脉动的，且对恰当的 生殖功能是必须的。因此，促性腺素释放激素控制雌性的滤泡生长、排卵和黄体保持和雄性 的精子发生的复杂过程。
[0008] 促性腺素释放激素已被分离，并具有十肤的特征。可应用合成形式的促性腺素释 放激素，并且对促性腺素释放激素的十肤结构的修饰已得到多种促性腺素释放激素类似 物，它们刺激（例如促性腺素释放激素激动剂）或抑制（例如促性腺素释放激素括抗剂） 促性腺素类（比如促黄体激素和滤泡刺激激素）的释放。
[0009] 对于商业猪的生产而言，重要的是最大化生殖的效率，W使得猪生产更有利润。已 经严重依赖个体雌性猪的每日发情检测，相关的劳动成本用于雌性猪中发情的人工检测， 基于小母猪或母猪的每日检查，W达到对例如人工授精的最好的结果。用劳动密集的方法 (比如每日检查）的发情检测增加人工授精成功的可能性。因此，必需对发情检测的每日检 查投入时间、人工劳动和物质成本，因为不使用需要每日计划W监测发情检测的方法难W 预测发情的时间（即最好的授精时间）。因此，需要优化动物的授精成功的方法，其没有发 情检测，W减少劳动成本，并增加猪生产的收益性。
[0010] 发明简述
[0011] 申请人已作出W下意外发现；经给予激素控制排卵时间可淘汰基于发情期检测的 配种，并且允许猪只接受一次授精W优化生育率和优化成本消耗。在一实施方案中，描述了 没有发情检测的同步猪的授精时间的方法。该方法包括在断奶后第四天给予猪一定剂量 激素的步骤，所述激素选自促性腺素释放激素、促黄体激素、人绒毛膜促性腺素和它们的组 合，其中该猪只在给予激素后约15-约24小时授精一次，且其中没有发情检测。
[0012] 在W上描述的实施方案中，适用W下特征或它们的任何组合。在上述实施方案中， 1)所述猪可W是产后母猪；2)所述猪可W是小母猪；3)所述授精可W是人工授精；4)所 述授精可W通过自然配种；5)排卵可W同步；6)所述激素可W按有效刺激卵泡排卵的量给 予；7)该剂量的激素可W使用选自W下的方法给予：放置导管（expositioncatheter)的 使用、人工给药和注射；8)所述猪可W在给予激素后约15-约18小时授精；9)所述猪可W 在给予激素后约18小时授精；10)相对于未给予激素的猪，所述猪的怀孕率可增大；11)相 对于未给予激素的猪，所述猪的胎仔数可增加；12)所述激素可给予多于一只的猪；13)相 对于未给予激素的猪，在给予激素后约48小时排卵的猪的百分率可增大；15)所述激素可 W经阴道内给药；16)所述激素可W给予至阴道前部；17)所述激素可W是促性腺素释放激 素受体激动剂；18)所述激素可W是促黄体激素受体激动剂；19)所述激素可W是人绒毛膜 促性腺素受体激动剂；20)所述激素可W是曲普瑞林；21)所述激素可W是曲普瑞林盐；22) 所述激素可W是合成物质；23)所述激素可W是己酸盐形式；24)所述激素可W在包含凝胶 的组合物中给药；25)所述凝胶可包含多糖；26)所述多糖可W选自；纤维素、右旋糖酢和海 藻酸盐；27)所述凝胶可W包含纤维素；和28)所述纤维素可W是甲基纤维素。预期上段 [0007]的实施方案与1-28或其任何组合的任何组合。
[0013] 在另一实施方案中，描述了包含一定剂量激素的试剂盒，所述激素选自促性腺素 释放激素、促黄体激素、人绒毛膜促性腺素和它们的组合。该试剂盒进一步包含使用的说明 书，其中该激素在包含凝胶的组合物中，W及该组合物具有的抑为约5-约6。
[0014] 在上段[0009]描述的实施方案中，适用W下特征或它们的任何组合。在段[0009] 描述的实施方案中，1)所述说明书可W指出，应将激素在断奶后约第四天给予猪，并且猪可 在给予激素后约15-约24小时授精一次；2)所述说明书可W指出，所述授精应是人工授 精；3)所述说明书可W指出，所述授精应是通过自然配种；4)所述试剂盒可进一步包含放 置导管、用于手工给药的涂药器或注射器；5)所述说明书可W指出，该猪应在给予激素后 约15-约18小时授精；6)所述说明书可W指出，该猪应在给予激素后约18小时授精；7)所 述说明书可W指出，所述激素应经阴道内给予；8)所述说明书可W指出，所述激素应给予 至阴道前部；9)所述激素可W是促性腺素释放激素受体激动剂；10)所述激素可W是促黄 体激素受体激动剂；11)所述激素可W是人绒毛膜促性腺素受体激动剂；所述激素可W是 曲普瑞林；12)所述激素可W是曲普瑞林盐；13)所述激素可W是合成物质；14)所述激素 可W是己酸盐形式；15)所述凝胶可W包含糖类；16)所述凝胶可W包含多糖；17)所述多 糖可W选自纤维素、右旋糖酢和海藻酸盐；18)所述凝胶可包含纤维素；和19)所述纤维素 可W是甲基纤维素。考虑上段[0009]的实施方案和1-19或其任何组合的任何组合。
[0015] 在另一实施方案中，描述了包含促性腺素释放激素受体激动剂和凝胶的组合物， 其中所述组合物具有的抑为约5. 0-约6. 0。
[0016] 上段[0011]描述的实施方案中，适用W下特征或它们的任何组合。段[0011]描 述的实施方案中，1)所述组合物可进一步包含防腐剂；2)所述防腐剂选自对哲基苯甲酸甲 醋和对哲基苯甲酸丙醋；3)所述组合物可进一步包含稳定剂；4)所述稳定剂可^是k氨 基酸；5)所述稳定剂可^是心甲硫氨酸；6)所述凝胶可包含多糖；7)所述多糖可W选自纤 维素、右旋糖酢和海藻酸盐；8)所述凝胶可包含纤维素；9)所述纤维素可W是甲基纤维素； 10)所述组合物可进一步包含张度剂；11)所述激动剂可W是曲普瑞林；12)所述组合物还 可结合使用的说明书；13)与组合物结合的说明书可W指出，应将激动剂给予猪和猪应在 给予激动剂后约15-约24小时授精一次；和14)所述说明书可W指出，该猪应在给予激动 剂后约18小时授精一次。考虑上段[0011]的实施方案与1-14或其任何组合的任何组合。
[0017] 提供W下各种实施方案。
[0018] 1.描述了没有发情检测的同步猪的授精的时间的方法。所述方法包含在断奶后第 四天给予猪一定剂量激素的步骤，所述激素选自促性腺素释放激素、促黄体激素、人绒毛膜 促性腺素和它们的组合，其中猪只在给予激素后约15-约24小时授精一次，且其中没有发 情检测。
[001引 2.条款1的方法，其中所述猪是产后的母猪。
[0020] 3.条款1的方法，其中所述猪是小母猪。
[002。 4.条款1至3的方法，其中所述授精是人工授精。
[002引 5.条款1至4的方法，其中所述授精是通过自然配种。
[002引 6.条款1至5的方法，其中使排卵同步。
[0024] 7.条款1至6的方法，其中所述激素是W有效刺激卵泡排卵的量给药。
[002引 8.条款1至7的方法，其中所述激素的有效量为约10yg-约1000yg。
[002引 9.条款1至7的方法，其中所述激素的有效量为约10yg-约500yg。
[0027] 10.条款1至9的方法，其中该剂量的激素是应用选自W下的方法给予：放置导管 的使用、手工给药和注射。
[002引11.条款1至10的方法，其中所述猪在给予激素后约15-约18小时授精。
[0029] 12.条款1至10的方法，其中所述猪在给予激素后约16-约24小时授精。
[0030] 13.条款1至10的方法，其中所述猪在给予激素后约18-约22小时授精。
[0031] 14.条款1至13的方法，其中所述猪在给予激素后约18小时授精。
[003引15.条款1至14的方法，其中相对于未给予激素的猪，所述猪的怀孕率增大。
[003引16.条款1至15的方法，其中相对于未给予激素的猪，健康胎的总数增大。
[0034] 17.条款1至16的方法，其中相对于未给予激素的猪，产仔的百分率增大。
[003引18.条款1至17的方法，其中相对于未给予激素的猪，出生小猪的总数增大。
[0036] 19.条款1至18的方法，其中相对于未给予激素的猪，每精液剂量的出生小猪的总 数增大。
[0037] 20.条款1至19的方法，其中相对于按照发情检测授精的猪，每精液剂量的出生小 猪的总数增大。
[003引 21.条款1至20的方法，其中相对于未给予激素的猪，小猪指数增加。
[0039] 22.条款1至21的方法，其中相对于按照发情检测授精的猪，小猪指数增加。
[0040] 23.条款1至22的方法，其中相对于未给予激素的猪，所述猪的胎仔数增加。
[0041] 24.条款1至23的方法，其中所述激素给予多于一只的猪。
[0042] 25.条款1至24的方法，其中相对于未给予激素的猪，在给予激素后约48小时，排 卵的猪的百分率增大。
[0043] 26.条款1至25的方法，其中所述激素经阴道内给药。
[0044] 27.条款1至26的方法，其中所述激素给予至阴道前部。
[0045] 28.条款1至27的方法，其中所述激素是促性腺素释放激素受体激动剂。
[0046] 29.条款1至28的方法，其中所述激素是促黄体激素受体激动剂。
[0047] 30.条款1至29的方法，其中所述激素是人绒毛膜促性腺素受体激动剂。
[0048] 31.条款1至30的方法，其中所述激素是曲普瑞林。
[0049] 32.条款1至31的方法，其中所述激素是曲普瑞林盐。
[0050] 33.条款1至32的方法，其中所述促性腺素释放激素具有式pGlu-His-T巧-Ser-T yr-Gly-Leu-Arg-Pro-GlyNH^。
[0051] 34.条款1至33的方法，其中所述促性腺素释放激素受体激动剂具有式
[0052]
[0053] 或其溶剂合物、水合物或药学上可接受的盐，
[0054] 其中
[00巧]Ri和R2独立地在每种情况下是氨，或是独立选自；烷基、杂烷基、环烷基、杂环烧 基、面代烷基、芳基、杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷基，其各自任选地取代，或Ri和R2与连接 的碳形成碳环或杂环；
[0056]X是氨，或X是选自；烷基、环烷基、杂烷基、任选取代的亚烷基駿酷胺；和
[0057]HNC(0)NR3R4,其中R3和R4在每种情况下独立选自氨、烷基、杂烷基和面代烷基。
[0058] 35.条款34的方法，其中R1是亚甲基-杂芳基，其中杂芳基选自；化晚基、唾挫基、 横胺化晚基（pyridazol^)、喀晚基、嗟咐基、化挫基、咪挫基、化咯基、嘲噪基、苯并化挫基 和苯并咪挫基；和
[005引 R2是氨或甲基。
[0060] 36.条款34至35的方法，其中X是C&C做畑2。
[0061] 37.条款1至36的方法，其中所述激素是合成物质。
[0062] 38.条款1至37的方法，其中所述激素是己酸盐形式。
[0063] 39.条款1至38的方法，其中所述激素是在包含凝胶的组合物中给药。
[0064] 40.条款39的方法，其中所述凝胶包含多糖。
[0065]41.条款40的方法，其中所述多糖是选自；纤维素、右旋糖酢和海藻酸盐。
[0066] 42.条款39至41的方法，其中所述凝胶包含纤维素。
[0067] 43.条款42的方法，其中所述纤维素是甲基纤维素。
[0068] 44.条款39至43的方法，其中所述凝胶包含约0. 25重量％ -约10重量％的甲基 纤维素。
[0069] 45.条款39至43的方法，其中所述凝胶包含约0.5重量％-约4.0重量％的甲基 纤维素。
[0070] 46.条款1至45的方法，其中所述激素是与稳定剂一起给药，其中所述稳定剂是 k甲硫氨酸。
[0071] 47.描述了包含一定剂量的激素的试剂盒，所述激素选自；促性腺素释放激素、促 黄体激素、人绒毛膜促性腺素和它们的组合，和使用说明书，其中所述激素是在包含凝胶的 组合物中，所述组合物具有的抑为约5-约6。
[0072] 48.条款47的试剂盒，其中所述说明书指出，应将激素在断奶后约第四天给予猪， 和该猪应在给予激素后约15-约24小时授精。
[007引 49.条款47至48的试剂盒，其中所述说明书指出，所述授精应是人工授精。
[0074] 50.条款47至49的试剂盒，其中所述说明书指出，所述授精应是通过自然配种。
[00巧]51.条款47至50的试剂盒，其中所述试剂盒还包含放置导管、用于手工给药的涂 药器或注射器。
[0076] 52.条款47至51的试剂盒，其中所述说明书指出，该猪应在给予激素后约15-约 18小时授精。
[0077] 53.条款47至51的试剂盒，其中所述说明书指出，该猪应在给予激素后约16-约 24小时授精。
[007引 54.条款47至51的试剂盒，其中所述说明书指出，该猪应在给予激素后约18-约 22小时授精。
[0079] 55.条款47至54的试剂盒，其中所述说明书指出，该猪应在给予激素后约18小时 按精。
[0080] 56.条款47至55的试剂盒，其中所述说明书指出，所述激素应经阴道内给药。
[0081] 57.条款47至56的试剂盒，其中所述说明书指出，所述激素应W为约10yg-约 1000yg的有效量给药。
[0082] 58.条款47至56的试剂盒，其中所述说明书指出，所述激素应W为约lOyg-约 500yg的有效量给药。
[0083] 59.条款47至58的试剂盒，其中所述说明书指出，所述激素应给予至阴道前部。
[0084] 60.条款47至59的试剂盒，其中所述激素是促性腺素释放激素受体激动剂。
[0085] 61.条款47至60的试剂盒，其中所述其中激素是促黄体激素受体激动剂。
[0086] 62.条款47至61的试剂盒，其中所述激素是人绒毛膜促性腺素受体激动剂。
[0087] 63.条款47至62的试剂盒，其中所述激素是曲普瑞林。
[0088] 64.条款47至63的试剂盒，其中所述激素是曲普瑞林盐。
[0089] 65.条款47至64的试剂盒，其中所述促性腺素释放激素具有式pGlu-His-hp-Se r-Tyr-G1y-Leu-Arg-Pr0-G17畑2。
[0090] 66.条款47至65的试剂盒，其中所述促性腺素释放激素受体激动剂具有式
[0091]
[0092] 或其溶剂合物、水合物或药学上可接受的盐，
[0093] 其中
[0094] Ri和R2独立地在每种情况下是氨，或是独立选自；烷基、杂烷基、环烷基、杂环烧 基、面代烷基、芳基、杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷基，其各自任选地取代，或Ri和R2与连接 的碳形成碳环或杂环；
[0095] X是氨，或X是选自；烷基、环烷基、杂烷基、任选取代的亚烷基駿酷胺；和
[0096] HNC(0)NR3r4,其中r3和R4在每种情况下独立选自：氨、烷基、杂烷基和面代烷基。
[0097] 67.条款66的试剂盒，其中Ri是亚甲基-杂芳基，其中杂芳基是选自；化晚基、唾 挫基、横胺化晚基、喀晚基、嗟咐基、化挫基、咪挫基、化咯基、嘲噪基、苯并化挫基和苯并咪 挫基讯
[009引 R2是氨或甲基。
[009引68.条款66至67的试剂盒，其中X是C&C做畑2。
[0100] 69.条款47至68的试剂盒，其中所述激素是合成物质。
[0101] 70.条款47至69的试剂盒，其中所述激素是己酸盐形式。
[0102] 71.条款47至70的试剂盒，其中所述凝胶包含糖。
[0103] 72.条款47至71的试剂盒，其中所述凝胶包含多糖。
[0104] 73.条款72的试剂盒，其中所述多糖是选自纤维素、右旋糖酢和海藻酸盐。
[0105] 74.条款47至73的试剂盒，其中所述凝胶包含纤维素。
[0106] 75.条款74的试剂盒，其中所述纤维素是甲基纤维素。
[0107] 76.条款47至75的试剂盒，其中所述凝胶包含约0.25重量％-约10重量％的甲 基纤维素。
[0108] 77.条款47至75的试剂盒，其中所述凝胶包含约0. 5重量％ -约4. 0重量％的甲 基纤维素。
[0109] 78.条款47至77的试剂盒，其进一步包含稳定剂，其中所述稳定剂是k甲硫氨 酸。
[0110]79.描述了组合物，其包含促性腺素释放激素受体激动剂和凝胶，其中所述组合物 具有的抑为约5.0-约6.0。
[0111] 80.条款79的组合物，其进一步包含防腐剂。
[0112] 81.条款79至80的组合物，其中所述防腐剂是选自；对哲基苯甲酸甲醋和对哲基 苯甲酸丙醋。
[0113] 82.条款79至81的组合物，其进一步包含稳定剂。
[0114] 83.条款82的组合物，其中所述稳定剂是心氨基酸。
[0115] 84.条款82至83的组合物，其中所述稳定剂是k甲硫氨酸。
[0116] 85.条款79至84的组合物，其中所述凝胶包含多糖。
[0117] 86.条款85的组合物，其中所述多糖是选自；纤维素、右旋糖酢和海藻酸盐。
[0118] 87.条款79至86的组合物，其中所述凝胶包含纤维素。
[0119] 88.条款87的组合物，其中所述纤维素是甲基纤维素。
[0120] 89.条款79至88的组合物，其中所述凝胶包含约0.25重量％-约10重量％的甲 基纤维素。
[0121] 90.条款79至88的组合物，其中所述凝胶包含约0.5重量％-约4.0重量％的甲 基纤维素。
[0122] 91.条款79至90的组合物，其进一步包含张度剂。
[0123] 92.条款79至91的组合物，其中所述激动剂是曲普瑞林。
[0124] 93.条款79至92的组合物，其结合使用说明书。
[0125] 94.条款93的组合物，其中与所述组合物结合的说明书指出，应将所述激动剂给 予猪，和该猪应在给予该激动剂后约15-约24小时授精一次。
[0126] 95.条款93的组合物，其中与所述组合物结合的说明书指出，应将所述激动剂给 予猪，和该猪应在给予该激动剂后约16-约22小时授精一次。
[0127] 96.条款93的组合物，其中与所述组合物结合的说明书指出，应将所述激动剂给 予猪，和该猪应在给予该激动剂后约18-约22小时授精一次。
[012引 97.条款93至96的组合物，其中所述说明书指出，猪应在给予该激动剂后约18-2 约22小时授精一次
[0129] 98.条款79至97的组合物，其中所述促性腺素释放激素受体激动剂是促性腺素释 放激素，和其中所述促性腺素释放激素具有式pGlu-His-T;rp-Se;r-Ty;r-Gly-Leu-Arg-P;r〇-G lyN&D
[0130] 99.条款79至98的组合物，其中所述促性腺素释放激素受体激动剂具有式
[0131]
[0132] 或其溶剂合物、水合物或药学上可接受的盐，
[0133] 其中
[0134]Ri和R2独立地在每种情况下是氨，或是独立选自；烷基、杂烷基、环烷基、杂环烧 基、面代烷基、芳基、杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷基，其各自任选地取代，或Ri和R2与连接 的碳形成碳环或杂环；
[0135]X是氨，或X是选自；烷基、环烷基、杂烷基、任选取代的亚烷基駿酷胺；和
[0136]HNC(0)NR3R4,其中R3和R4在每种情况下独立选自：氨、烷基、杂烷基和面代烷基。
[0137] 100.条款99的组合物，其中Ri是亚甲基-杂芳基，和其中杂芳基是选自：化晚基、 唾挫基、横胺化晚基、喀晚基、嗟咐基、化挫基、咪挫基、化咯基、嘲噪基、苯并化挫基和苯并 咪挫基讯
[0138] R2是氨或甲基。
[01測 101.条款99至100的组合物，其中X是C&C做畑2。
[0140] 102.条款79至101的组合物，其中所述促性腺素释放激素受体激动剂为约 10yg-约1000yg的有效量。
[0141] 103.条款79至101的组合物，其中所述促性腺素释放激素受体激动剂为约 lOyg-约500yg的有效量。
[0142] 104.条款79至103的组合物，其包含对哲基苯甲酸甲醋、对哲基苯甲酸丙醋、氯化 钢、巧樣酸钢、L-甲硫氨酸、巧樣酸、曲普瑞林和甲基纤维素。
[0143] 105.条款79至104的组合物，其中所述组合物包含对哲基苯甲酸甲醋的量为 约0.09%重量每体积，对哲基苯甲酸丙醋的量为约0.01 %重量每体积，氯化钢的量为约 0. 91 %重量每体积，巧樣酸钢的量为约0. 186%重量每体积，L-甲硫氨酸的量为约0. 1 %重 量每体积，巧樣酸的量为约0. 07%重量每体积，曲普瑞林的量为约0. 01 %重量每体积，和 甲基纤维素的量为约1. 2%重量每体积。
[0144] 附图简述
[0145] 图1表明在断奶后96+/-2小时给予治疗（0-小时）后排卵母猪的百分率。
[0146] 图2表明在0-4°C(S角形）、30°C(四方形）和50°C(菱形）下13天后的曲普 瑞林稳定性。
[0147] 例证性实施方案详述
[0148] 在一实施方案中，描述了没有发情检测的同步猪授精时间的方法。所述方法包含 在断奶后第四天将一定剂量激素给予猪的步骤，所述激素选自；促性腺素释放激素、促黄体 激素、人绒毛膜促性腺素和它们的组合，其中该猪只在给予激素后约15-约24小时授精一 次，且其中没有发情检测。
[0149] 在一实施方案中，描述了包含一定剂量的激素的试剂盒，所述激素选自；例如，促 性腺素释放激素、促黄体激素、人绒毛膜促性腺素和它们的组合。在另一实施方案中，所述 试剂盒还包含使用说明书。在另一实施方案中，所述激素在如本文描述的包含凝胶的组合 物中。所述组合物典型的抑为约5-约6,但该抑的范围可为约4-约9。
[0150] 在一实施方案中，描述了包含促性腺素释放激素受体激动剂的组合物。在另一实 施方案中，描述了所述组合物还包含凝胶。所述组合物典型的抑为约5-约6,但该抑的范 围可为约4-约9。
[0151] W下描述的所有例证性实施方案、其变体和其备选形式将用于之前在详述部分中 的段[001引至[0017]所描述的实施方案和用于发明简述中描述的实施方案。
[0152] 没有发情检测的同步猪授精的时间的方法，包括将一定剂量的激素给予猪的步 骤，所述激素为，例如，促性腺素释放激素、促黄体激素、人绒毛膜促性腺素；促性腺素释放 激素、促黄体激素或人绒毛膜促性腺素的衍生物或类似物；或它们的组合物。根据一实施方 案，将所述激素给予猪。任何猪的种类可W用于本文描述的方法和给予本文描述的组合物， 例如，包括青春期小母猪的小母猪（即第一次交配前的雌性猪），和母猪（包括产后母猪）， 或任何其它类型的猪。
[0153] 例证性的，如文本描述的那样，猪在0天断奶。在断奶后4天（即断奶后第四天）， 动物典型地接受单一剂量的激素。接受治疗的动物典型地在予给激素后15小时（或15 小时±2小时）、16小时（或16小时±2小时）、17小时（或17小时±2小时）、18小时 (或18小时±2小时）、19小时（或19小时±2小时）、20小时（或20小时±2小时）、 21小时（或21小时±2小时）、22小时（或22小时±2小时）、23小时（或23小时±2 小时）、24小时（或24小时±2小时）、27小时（或27小时±2小时）或30小时（或30 小时±2小时）授精单次。
[0154] 动物配种可通人工授精（AI)的任何方式或通过自然配种。在本文描述的任何实 施方案中，可进行第二次配种或随后的配种。然而在另一个实施方案中，猪只授精一次。在 另一例证性方面，没有发情检测。在另一方面，在给予激素和排卵后48小时之间没有发情 检测。
[0155] 在本文描述的任何实施方案中，所述激素是在（例如）断奶后第四天即断奶后约 96小时给予。在各种例证性实施方案中，所述激素可在断奶后例如约80、约82、约84、约 86、约 88、约 90、约 91、约 92、约 93、约 94、约 95、约 96、约 97、约 98、约 99、约 100、约 102、约 104或约108小时给予。更典型的，将所述激素在断奶后约94-约98小时给予，即断奶后 约94、约95、约96、约97或约98小时。在另一实施方案中，将所述激素在断奶后约92-约 106小时给予。
[0156] 在本文描述的任何实施方案中，例如，在给予激素后约15-约24小时给猪授精一 次。在各种进一步的例证性实施方案中，猪在给予激素后约15-约18小时，在给予激素后 约13-约18小时、约15-约2 0小时或约13-约20小时授精。在其他例证性方面，猪在给 予激素后约13小时、约14小时、约15小时、约16小时、约17小时、约18小时、约19小时、 约20小时、约21小时、约22小时、约23小时或约24小时授精。例证性的，猪在给予激素 后约15小时、约18小时、约20小时、约22小时或约24小时授精。
[0157]在本文描述的任何实施方案中，相对于未给予激素的猪（例如给予其安慰剂），所 述猪的怀孕率可增大。例如，激素治疗的动物中怀孕率可W是约75%-约90%。在另一实 施方案中，相对于未给予激素的猪（例如给予其安慰剂），所述猪的胎仔数增大。例如激素 治疗的动物中典型的胎仔数可W是每次怀孕约20-约24胎。在另一实施方案中，激素治疗 的动物中胎仔数可W是每次怀孕约14-约18、约14-约24或约14-约20胎。然而在另一 实施方案中，相对于未给予激素的猪（例如给予其安慰剂），在给予激素后约48小时，排卵 的猪的百分率可增大。例如，在给予激素后约48小时，排卵的动物的百分率可为约65%-约 85%。
[015引在本文描述的其他实施方案中，相对于未给予激素的猪，键康胎的总数可增大。例 如，激素治疗的动物的健康胎的数量可为约9-约18、约9-约16、约9-约14或约9-约12。 在本文描述的其他实施方案中，当与未给予激素的猪相比时，激素治疗的动物的产仔百分 率可增加。例如，激素治疗的动物的产仔百分率可为约76% -约90%、约76% -约85%或 约76% -约80%。在本文描述的其他实施方案中，相对于未给予激素的猪，激素治疗的动物 的出生小猪的总数可增大。例如，出生小猪的数量可为约13-约18、约13-约17、约13-约 16、约13-约15或约13-约14。在本文描述的任何实施方案中，对于激素治疗动物，猪的怀 孕率、猪的胎仔数、健康胎的总数、产仔百分率和出生小猪的总数可与依靠发情检测授精的 动物相似。
[0159]在本文描述的任何实施方案中，相对于未给予激素的猪，每一精液剂量的出生小 猪总数可增大，并且相对于依靠发情检测授精的动物，每一精液剂量的出生小猪总数可增 大。例如，每一精液剂量的出生小猪总数可为约6、约7、约8、约9、约10、约11、约12、约14、 约16、约18或约20。在本文描述的任何实施方案中，相对于未给予激素的猪，小猪指数（出 生存活小猪/分配的100母猪）可增加，并且相对于依靠发情检测授精的动物，小猪指数可 增加。
[0160]在本文描述的任何实施方案中，用于没有发情检测的同步猪授精的时间的组合物 包含；a)激素；和b)药学上可接受的抑缓冲剂，W提供范围为约抑4-约抑9的抑。本 文描述的组合物的抑可在为从约4-约9的范围内。在其他实施方案中，所述抑可在范围 为约4-约8、约4-约7、约4. 5-约6. 5、约4. 5-约6或约5-约6。
[0161]此外，所述激素组合物根据剂型可通过常规方法生产，所述常规方法通过适当 地混合、稀释或溶解进添加剂，比如各种赋形剂、崩解剂、粘合剂、盐类、润滑剂、局部麻醉 药（例如利多卡因）、稀释剂、防腐剂（preservative)、聲合剂、缓冲剂、张度剂、抗菌剂 (antiseptiCagent)、湿润剂、乳化剂、分散剂、稳定剂、助溶剂或它们的组合。
[0162]例证性地，包含激素的组合物可W是凝胶形式，该组合物可W具有粘度为约 10 (厘泊）cP-约300,OOOcP。在各种的例证性实施方案中，组合物的粘度可为约lOOcP-约 100,OOOcP、约 250cP-约 400cP、约 300cP-约 400cP、约 500cP-约 100,OOOcP、约 700cP-约 100,OOOcP、约 200cP-约 20,OOOcP、约 200cP-约 10,OOOcP、约 200cP-约 5,OOOcP、约 200-约 1，OOOcP、约 200cP-约 600cP、约lOOcP-约 600cP、约lOOcP-约 500cP、约 200cP-约 500cP、 约200cP-约450cP或约100,OOOcP-约250,OOOcP。根据本文描述的各种实施方案，组合 物的粘度可为约 200cP、约 250cP、约 300cP、约 400cP、约 500cP、约 1，OOOcP、约 15,OOOcP、 约 20,OOOcP、约 30,OOOcP、约 40,OOOcP、约 50,OOOcP、约 75,OOOcP、约 100,OOOcP、约 200,OOOcP或约300,OOOcP。溶液的粘度可用粘度计（比如流变计）基于本技术领域已知 技术测量。
[0163] 典型地，本文描述的凝胶包含：约0. 001-约3. 0%重量/重量（w/w)的激素或它 的盐，更典型地约0.5-5. 0 % (w/w)或约0.1-5. 0% (w/w)的激素或它的盐，防腐剂，凝胶 (即粘性调节剂），用W保持抑在约5-约6之间的缓冲剂，和用W保持张度在约200-约 400m0sm/kG之间的张度剂。
[0164] 根据本文描述的任何实施方案，所述组合物有充分的粘性W使得组合物保持吸附 在祀组织足够时间W释放有效量的激素。例如，典型粘度依赖（比如）例如应用的激素的 渗透率和激素的数量的因素。适用的粘度调制剂包括（但不限制于）；离子或非离子水溶性 聚合物；交联的丙締酸聚合物；亲水聚合物比如聚氧化己締、聚氧己締-聚氧丙締共聚物和 聚己締醇；纤维素聚合物和纤维素聚合物衍生物比如哲丙基纤维素、哲己基纤维素、哲丙基 甲基纤维素、苯二甲酸哲丙基甲基纤维素醋、甲基纤维素、駿甲基纤维素和離化纤维素；胶 比如黄著胶和黄原胶；海藻酸钢；明胶、透明质酸和其盐类、壳聚糖、胶凝糖或它们的任何 组合。
[0165] 所述粘度调制剂可W是凝胶、糊状、乳膏、软膏等形式。在一实施方案中，所述组合 物包含激素和凝胶，所述凝胶作为粘度调节剂，和所述激素在包含所述凝胶的组合物中给 药。在一实施方案中，所述凝胶是水凝胶、脂质体凝胶（lipogel)或粘稠的溶液。在另一实 施方案中，所述凝胶是水凝胶。所述凝胶可W用任何本技术领域已知的方法制备，例如，比 如在美国专利号6, 908, 623和7, 456, 207中描述的那些，其通过引用结合到本文中。
[0166] 在本文描述的任何实施方案中，所述凝胶（即粘度调节剂）包含多糖。根据本文 描述的方法和组合物，多糖可包括（例如）海藻酸盐和葡萄糖，比如糖原、淀淀（例如直链 淀粉和支链淀粉）、纤维素和右旋糖酢。所述多糖可W是（例如）甲基、己基或丙基纤维素 醋、離、哲基離、哲基烷基或哲基醋。为达到需要的粘度，可W使用足量的一种或多种多糖。 典型地，约0.25-约10重量％的多糖（基于组合物的总重量）是合宜的。在另一实施方案 中，多糖的重量％为约0. 25重量％ -约3. 0重量％、约1. 0重量％ -约7重量％、约1. 0重 量％ -约4. 0重量％或约1. 0重量％ -约2. 0重量％。在其他实施方案中，多糖的重量％为 约 0. 1%、约 0. 5%、约 0. 75%、约 0. 8%、约 0. 9%、约 1. 0%、约 1. 1%、约 1. 2%、约 1. 4%、约 1. 8%、约2. 0%、约5%、约8%或约10% (所有均W重量/重量计）。为增加组合物的粘度， 所述多糖可与一种或多种本技术领域已知的非多糖增粘剂一起使用。可与一种或多种多糖 一起使用的可能的非多糖增粘剂的例子包括黄原胶、海藻酸和其盐、娃酸儀侣、糊精类、庶 糖和其衍生物和它们的混合物。非多糖增粘剂（如果存在）的量可为约0. 1重量％ -约10 重量％，该随需要的粘度而定。
[0167] 在本文描述的任何实施方案中，所述凝胶包含纤维素。本文描述的例证性实施方 案的纤维素包括甲基纤维素、己基纤维素、哲丙基纤维素、駿甲基（carbomethyl)纤维素、 哲丙基甲基纤维素和哲己基甲基纤维素。所述纤维素可W是纤维素衍生物，优选非离子纤 维素醋、離、哲基離或哲基醋，或非离子淀粉衍生物。典型地，合宜的纤维素为约0. 25重 量％-约10重量％ (基于组合物的总重量）。在另一实施方案中，纤维素的重量％为约0.25 重量％ -约3. 0重量％、约0. 5重量％ -约3. 0重量％、约0. 5重量％ -约4. 0重量％、约 1. 0重量％ -约7重量％、约1. 0重量％ -约4. 0重量％或约1. 0重量％ -约2. 0重量％。 在其他实施方案中，纤维素的重量％为约0. 1 %、约0. 5 %、约0. 75 %、约0. 8 %、约0. 9 %、约 1. 0%、约 1. 1 %、约 1. 2%、约 1.4%、约 1.8%、约 2.0%、约 5%、约 8%或约 10% (全部W 重量/重量计）。如果需要均匀的凝胶，可加入分散剂比如醇、山梨醇或甘油，或可通过粉碎 (ti化ration)、机械混合或揽拌或它们的组合来分散胶凝剂。
[0168] 用于描述的方法和组合物的可接受的稳定剂包括k氨基酸和k甲硫氨酸。在其 他实施方案中，可使用的稳定剂包括（但不限制于）；多糖（比如阿拉伯胶、琼脂、海藻酸、 瓜尔胶和黄著胶）、明胶和合成和半合成的聚合物（比如卡波姆树脂、纤维素離类和駿甲基 壳多糖）。所述稳定剂的量通常为约0. 05-约10%、约0. 05-约5%、约0. 05-约2. 0%、约 0. 05-约 1.0%、约 0.05-约 0.5%、约 0.05-约 0.2%、约 0. 1-约 5%、约 0. 1-约 10%、约 0.1-约20%、约1-约5%、约1-约10%、约1-约20% (全部W重量/体积计）。在一实 施方案中，在本文描述的稳定剂存在下，所述组合物的贬存期限可为至少12个月、至少18 个月或至少24个月。在另一实施方案中，所述组合物的贬存温度范围可为约2°C-约8°C。 还可包括惰性载体，比如乳糖、淀粉、糊精、磯酸二巧、和硫酸巧。在包括稳定剂的一实施方 案中，所述组合物是化学稳定的，并保持至少99%纯度、至少99. 5%纯度或至少99. 7%纯 度至少S个月。
[0169] 所述张度剂可W是非离子的或离子的。例证性地，使用于描述的方法和组合物的 可接受的张度剂包括，例如，离子试剂，比如氯化钢、氯化钟或平衡盐溶液。根据一实施方 案，张度剂W达到约 200-400m0sm/kG、约 220-380m0sm/kG或约 250-340m0sm/kG张度的量 存在。非离子张度剂包括二醇，比如甘油、甘露醇、赤薛醇、聚己二醇、丙二醇；和糖类，比如 庶糖和右旋糖。张度剂的量通常为约0. 05-约10%、约0. 05-约5%、约0. 05-约2. 0%、 约 0. 05-约 1. 0%、约 0. 05-约 0. 5%、约 0. 05-约 0. 2%、约 0. 1-约 5%、约 0. 1-约 10%、 约 0. 1-约 20 %、0. 5-约 2. 0 %、约 0. 6-约 2. 0 %、约 0. 5-约 1. 8 %、约 0. 6-约 1. 8 %、约 1.0-约5.0%、约1.0-约10%或约1.0-约20% (全部W重量/体积计）。
[0170] 在本文描述的任何实施方案中，用于本文描述的组合物和方法的抑缓冲剂是 技术人员公知作为抑缓冲剂或组合物的那些，并包括，例如，己酸盐、棚酸盐、碳酸盐、巧 樣酸盐和磯酸盐缓冲液，W及各种生物学缓冲液，例如，TAPS、N，N-二（哲己基）甘氨酸 炬icine)、S哲甲基氨基甲烧（Tris)、N-S(哲甲基）甲基甘氨酸（Tricine)、肥阳S、TES、 M0PS、PI阳S、二甲肿酸盐和MES。其他抑缓冲剂包括盐酸、氨氧化钢、氧化儀、磯酸二氨钟、 碳酸氨盐、氨、碳酸、巧樣酸钢、巧樣酸、己酸、磯酸氨二钢、棚砂、棚酸等。缓冲剂的量通常为 约 0. 01-约 10%、约 0. 02-约 10%、约 0. 02-约 5%、约 0. 02-约 2. 0%、约 0. 02-约 1. 0%、 约 0. 02-约 0. 5 %、约 0. 05-约 10. 0 %、约 0. 05-约 1. 0 %、约 0. 05-约 0. 5 %、约 0. 05-约 0. 2%、约 0. 1-约 5%、约 0. 1-约 10%、约 0. 1-约 20%、约 1-约 5%、约 1-约 10%、约 1-约 20% (全部W重量/体积计）。
[017。 用于本文描述的配方的缓冲剂可W获得要求的抑范围所需的任何浓度使用。例 如，缓冲剂可下浓度使用：约0.001M-约1M、约0.001M-约2M、约0.001M-约5M、约 0. 05M-约 0. 1M、约 0. 05M-约 0. 2M、约 0. 05M-约 1M、0. 05M-约 2M、约 0. 05-约 5M、约 0. 1M-约 IM、约0.IM-约2M、约0.IM-约5M。获得要求的抑范围所需的缓冲剂的任何的量可用于 本文描述的配方。典型地，药学上可接受的抑缓冲剂可用于提供抑范围为约抑4-约抑 9。本文描述的组合物的抑的范围可W为约3-约10或约4-约9。在本文描述的任何实施 方案中，所述抑范围可为约4-约8、约4-约7、约4. 5-约6. 5、约4. 5-约6、约5-约6、约 5-约5. 5、约4-约6或约4. 5-约5. 5。
[0172] 在本文描述的任何实施方案中，本文描述的组合物包含一种或多种药学上可接 受的防腐剂。如本文所用的那样，术语"防腐剂"包括试剂或试剂组合物，其有助于稳定 组合物、抑制微生物生长，或两者。适用的防腐剂的例子包括对哲基苯甲酸醋类（例如对 哲基苯甲酸的甲基、己基、丙基和了基醋）、没食子酸丙醋、山梨酸和它的钢盐和钟盐、丙酸 和它的巧盐和钢盐、"二曠英"化-己酷氧基-2, 4 -二甲基-间-二氧六环）、"漠硝丙二 醇"(2-漠-2-硝基丙烷-1，3-二醇）和水杨酷苯胺类（比如二漠水杨酷苯胺、=漠水杨酷苯 胺）、"Cina巧r'lOO和 200 或"Dowicir'lOO和 200 (1- (3-氯締丙基-3, 5, 7-S氮杂-1-氮 鐵金刚烧（azanidadamantane)氯化物的顺式异构体）、六氯酪、苯甲酸钢、巧樣酸、己二胺 四己酸和它的碱金属和碱±金属盐、了哲茵離、了哲甲苯、酪类化合物（比如氯代-和漠代 甲酪和氯代-和漠代-二甲酪（oxylenol))、季胺化合物（如苯扎氯锭）、芳香醇（比如苯 己醇、苯甲醇等）、氯了醇、嗟咐衍生物（比如舰氯代哲基嗟咐）等。当防腐剂存在时，总量 为约0. 005重量％ -约2重量％、约0. 001重量％ -1. 0重量％、约0. 005重量％ -约0. 25 重量％或约0. 05重量％ -约0. 2重量％，典型的为约0. 01重量％ -约0. 1重量％ (全部 W重量/重量计）。
[0173] 在本文描述的任何实施方案中，药用的组合物含有馨合剂，比如在本技术领域技 术人员公知的那些，例如，己二胺四己酸盐（邸TA)、二己締S胺五己酸值TPA)和N，N-二 (駿甲基）甘氨酸（NTA)或它们的盐。所述组合物可含有约0.003重量％-约1.0重量％、 约0. 02重量％ -约0. 2重量％、约0. 01重量％ -约1. 0重量％或约0. 02重量％ -约0. 5 重量％(全部W重量/体积计）的馨合剂。
[0174] 在本文描述的任何实施方案中，在本文描述的组合物中可包括抗微生物剂。该样 的剂可包括（但不限制于）5-氯-2-(2, 4-二氯苯氧基）-苯酪、8-哲基嗟咐、铜II化合 物、苯二甲酸、氯己定、阿来西定、海克替晚、血根碱、苯扎氯锭、水杨酷苯胺、漠化度米芬、西 化氯锭、十四基氯化化晚、N-十四基-4-己基氯化化晚、奥替巧晚、舰、横胺类、双缩二脈类 化isbiguanide)、酪类化合物、地莫匹醇、辛嗽醇和其他嗽晚基衍生物，和烟酸制备物、任何 适用的抗生素比如力百汀、阿莫西林、四环素、多西环素、米诺环素、甲硝化挫、新霉素、卡那 霉素和克林霉素，和适用的该些任何化合物的任何盐，和该些化合物的任何组合。然而在 另一实施方案中可包括抗真菌化合物，其单独或与任何上述抗微生物剂组合。适用于本文 描述的组合物的抗真菌剂包括（但不限制于）；制霉菌素、咪康挫、硝酸益康挫、克霉挫和 氣胞喀晚。可加入到本文描述的配方中的抗微生物或抗真菌剂的量为约0. 01-约10%、约 0. 01-约 5%、约 0. 01-约 2. 0%、约 0. 01-约 1. 0%、约 0. 01-约 0. 5%、约 0. 01-约 0. 2%、 0. 05-约 10 %、约 0. 05-约 5 %、约 0. 05-约 2. 0 %、约 0. 05-约 1. 0 %、约 0. 05-约 0. 5 %、 约 0. 05-约 0. 2%、约 0. 1-约 5%、约 0. 1-约 10%、约 0. 1-约 20%、约 1-约 5%、约 1-约 10%、约1-约20% (全部W重量/体积计）。
[01巧]在本文描述的任何实施方案中，还可加入抗氧化剂。例如，本文用的抗氧化剂包 括e-胡萝h素、维生素E、维生素C、维生素A、生育酪、了哲甲苯、了哲茵離、叔了基对苯二 酪、没食子酸丙醋、抗坏血酸、偏亚硫酸氨钢、尿酸、类胡萝h素类、黄酬类化合物、稱黑激素 和己氧嗟。抗氧化剂可W下述的量加入本文描述的配方中；约0.01-约10%、约0.01-约 5%、约0.01-约2.0%、约0.01-约1.0%、约0.01-约0.5%、约0.01-约0.2%、0.05-约 10 %、约 0. 05-约 5 %、约 0. 05-约 2. 0 %、约 0. 05-约 1. 0 %、约 0. 05-约 0. 5 %、约 0. 05-约 0. 2%、约 0. 1-约 5%、约 0. 1-约 10%、约 0. 1-约 20%、约 1-约 5%、约 1-约 10%、约 1-约 20% (全部W重量/体积计）。
[0176] 如本文所描述的那样，所述组合物含有激素，其选自，例如，促性腺素释放激素、促 黄体激素、人绒毛膜促性腺素、它们的衍生物或类似物，和它们的组合，当在本文描述的方 法中使用时，按有效地同步猪授精时间的量使用，没有发情检测。其他用于本文描述的方法 和组合物的可接受的激素的例子包括；前列腺素、孕激素、孕酬、雄激素、睾酬、雌激素、雌二 醇、促性腺素、它们的衍生物或类似物、它们的组合等。所述激素可W为己酸盐形式。此外， 所述激素可W是促性腺素释放激素、促黄体激素或人绒毛膜促性腺素激动剂，或促性腺素 释放激素、促黄体激素或人绒毛膜促性腺素括抗剂。如本文所用的那样，"促性腺素释放激 素"指的是任何促性腺素释放激素，包括促性腺素释放激素类似物和衍生物，和促性腺素释 放激素激动剂和括抗剂。在一实施方案中，所述促性腺素释放激素可W是合成物质。在另 一实施方案中，所述促性腺素释放激素可W是GnRH(pGlu-His-T;rp-Se;r-Ty;r-Gly-Leu-Arg-Pro-GlyNHs)(例如见美国专利号5, 688, 506,其通过引用结合到本文中）或曲普瑞林。如本 文所用的那样，"促黄体激素"指的是任何促黄体激素，包括促黄体激素类似物和衍生物和 促黄体激素激动剂和括抗剂。在一实施方案中，所述促黄体激素可为合成物质。在另一实 施方案中，所述促黄体激素可W是LH(例如见美国专利号5, 444, 167,其通过引用结合到本 文中）。如本文所用的那样，"人绒毛膜促性腺素"指的是任何人绒毛膜促性腺素，包括人绒 毛膜促性腺素类似物和衍生物，和人绒毛膜促性腺素激动剂和括抗剂。在一实施方案中，所 述人绒毛膜促性腺素可W是合成物质。在另一实施方案中，所述人绒毛膜促性腺素可W是 hCG(例如见U.S.专利号6, 469, 139、4, 400, 316和4, 804, 626,其通过引用结合到本文中）。
[0177] 用于本文的促性腺素释放激素激动剂的例子包括（但不限制于）；亮丙瑞林 (leuprolide)、那法瑞林、布舍瑞林、[DAla6,去Gly-N&iiGnRH、[DLys6]GnRH, [DAla6]GnRH、 巧-Me-Ala6]GnRH、[D-a-氨基了酷基6,去-GlyN&iiGnRH、曲普瑞林、黄体瑞林、戈舍瑞林、 地洛瑞林和组氨瑞林。通常，促性腺素释放激素激动剂模仿天然促性腺素释放激素十肤，典 型地在6和10位由特定氨基酸置换而塑造的。曲普瑞林是促性腺素释放激素激动剂的一 个例子，其只在6-位单一置换。
[017引促性腺素释放激素括抗剂的例子包括安肤（用式D-Ac-D-2-Nali-DpClPhe2-D-3-P al3-Ser4-NiLys5-D-NicLys6-Leu7-ILys8-Pr09-D-Alai°表示的十肤）、[Ac-D4ClDPhe1，D4C1D Phe2,DTrp3,DArgS,DAlaW]GnRH、[Ac-4ClDPhe2, 化 13,ArgS,化化 16,DAlai°]GnRH、[Ac-D2-化 1 1，4ClDPhe2,DT巧3,DArgS,DAlaW]GnRH、[Ac-D2化 4抑化e2,DhpS,DArg6]GnRH、[Ac-D2化li ，4ClDPhe2,DT巧3,DMrg巧t2)e，DAlaW]GnRH和[Ac-化4,DME4ClPhe2,DPal],Se/，TyfS,DArg 6,Le7,ILys?,Pr〇9,DAlai°]GnRH。
[0179] 在本文描述的任何实施方案中，描述了下式的促性腺素释放激素激动剂
[0180]
[0181]或其溶剂合物、水合物或药学上可接受的盐的用途，
[0182] 其中
[0183]R1和R2独立地在每种情况下是氨，或是独立选自；烷基、杂烷基、环烷基、杂环烧 基、面代烷基、芳基、杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷基，其各自任选地取代，或Ri和R2与连接 的碳形成碳环或杂环；和
[0184]X是氨，或X选自；烷基、环烷基、杂烷基、任选取代的亚烷基-駿酷胺，和HNC(O) NR3R4,其中R3和R4在每种情况下独立选自：氨、烷基、杂烷基和面代烷基。
[0185] 在另一实施方案中，描述了上述用途，其中Ri是亚甲基-杂芳基，其中杂芳基是选 自：化晚基、唾挫基、横胺化晚基、喀晚基、嗟咐基、化挫基、咪挫基、化咯基、嘲噪基、苯并化 挫基和苯并咪挫基；和R2是氨或甲基。
[0186] 在又一实施方案中，描述了之前描述的任一用途，其中X是CH2C(0)NH2。
[0187] 本文所用的促性腺素释放激素激动剂和括抗剂及其类似物，比如上式描述的类似 物，可按药学可接受的无毒盐或复合物形式给药。所述盐包括酸加成盐，比如盐酸化物、氨 漠化物、硫酸盐、磯酸盐、硝酸盐、草酸盐、延胡索酸盐、葡糖酸盐、踩酸盐、马来酸盐、己酸 盐、苯甲酸盐、班巧酸盐、海藻酸盐、苹果酸盐、抗坏血酸盐、酒石酸盐等。所述复合物可W带 有金属，比如锋、领、巧、儀、侣等。
[018引用于根据本文描述的方法和组合物中的激素的有效的量随许多参数而定，包括激 素的分子量、它的给药途径，和它是否在它的天然形式。在本文的描述中，激素的"有效量" 是通过使用本文描述的方法足W同步猪的授精时间而没有发情检测的量。给予猪的激素的 有效量可在W下范围：约10yg-约2000yg、约10yg-约1000yg、约10yg-约500yg、 约 10yg-约 100yg、约 10yg-约 50yg、约 50yg-约 2000yg、约 50yg-约 1000yg、 约 50yg-约 500yg、约 50yg-约 300yg、约 50yg-约 200yg、约 100yg-约 200yg、约 100yg-约 300yg、约 100yg-约 500yg、约 100yg-约 1000yg、约 200yg-约 2000yg 或约0. 05mg-约50mg。在各种例证性方面，给予猪的激素的剂量为约20yg、约50yg、 约 75yg、约 100yg、约 150yg、约 180yg、约 200yg、约 225yg、约 250yg、约 300yg、约 400yg、约500yg、约750yg、约1000yg、约1500yg或约2000yg的激素。所述激素可W 一个或多个剂量给药。
[0189]在本文描述的组合物中的激素可W按浓度为约50^3/1111^-约500yg/mL、约 50yg/mL-约 400yg/mL、约 50yg/mL-约 300yg/mL、约 50yg/mL-约 200yg/mL、约 50yg/ 血-约150yg/mL、约50yg/mL-约250yg/mL，或约100yg/mL给药。所述组合物可W按各 种体积给药，例如包括为1血、2血、3血、4mL或5血的剂量体积。
[0190] 在本文描述的任何实施方案中，所述激素是根据本文描述的方法，按有效地刺激 卵泡排卵和有效地同步排卵的量给药。该剂量的激素可W应用选自W下的方法给药；1)放 置导管的使用，2)手工给药，3)注射，或任何其他本领域已知用于给予药用组合物的手段， 例如，任何其他本领域已知用于阴道给予药用组合物（比如包含激素的组合物）的手段。在 一实施方案中，所述激素可W给予多于一只的猪。
[0191] 用于有效激素给药的方法的例子，除了阴道给药外，包括肠胃外给药至动物，例 如，皮下、肌内、腹膜内、銷内或静脉内给药，或与可接受的载体结合。肠胃外给药的适用方 法包括针（包括显微操作针）注射、无针注射和灌输技术。用于本发明的肠胃外组合物可 W是可复水的冻干形式，其包含一个或多个剂量的激素组合物。肠胃外剂型的例子包括所 述组合物处在公知的可接受的液体载体中的水溶液，比如液体醇类、二醇类（例如聚己二 醇）、葡萄糖溶液（例如，5% )、醋类、酷胺类、无菌水、缓冲盐水（包括缓冲剂如磯酸盐或己 酸盐；例如等渗盐水）。
[0192] 在本文描述的任何实施方案中，可W将所述组合物给予至动物的局部。用于本文 的局部给药方法的例子包括；表面、阴道内和直肠内给药。用在本实施方案的剂型的例子包 括乳膏剂、软膏、凝胶、糊剂、粉剂、洗剂、透皮贴剂、子宫内装置、阴道环和阴道片剂。在一例 证性实施方案中，将所述组合物给予至动物的阴道前部。所述化合物还可配制成阴道的或 直肠的组合物比如栓剂，例如，包含一般的栓剂基质，比如可可豆脂、碳蜡、聚己二醇类或其 他甘油醋，其全部在体温下烙融，而在室温下固化。
[0193] 可通过任何有用的程序和可用任何有效剂量和适用的剂型，包括本技术领域已知 的口服剂型，比如丸剂、片剂或胶囊将激素给予动物，并可将有效剂量按标准剂型或缓释剂 型给药。缓释剂型配方包括延缓的、持续的、脉冲的、受控的、定向的和程序性的释放配方。
[0194] 所述组合物还可包含适合的固体或凝胶相载体或赋形剂。该样的载体或赋形剂的 例子包括（但不限制于）碳酸巧、磯酸巧、各种糖、淀粉、纤维素衍生物、明胶和聚合物（比 如聚己二醇类）。
[0195] 在本发明的另一例证性方面，提供试剂盒。所述试剂盒包含一个剂量或多个剂量 的本文描述的激素。在本实施方案中，所述试剂盒还可包含用于手工给药的涂药器、放置导 管和/或用于将激素组合物施用于动物的注射器。在另一实施方案中，所述激素在包含本 文描述的凝胶的组合物中。在一例证性实施方案中，所述试剂盒可包含分开的激素和凝胶， 用W在给予动物前混合。在另一实施方案中，所述试剂盒包含在容器中混合的激素和凝胶， 用于直接给药。
[0196] 而在另一实施方案中，所述试剂盒含有使用说明书。所述说明书可指出，所述授精 应通过自然配种；所述授精应通过人工授精；所述猪应在给予激素后约15-约18、约18-约 22或约15-约24小时授精，或猪应在给予激素后约15、约16、约17、约18、约19、约20、 约21、约22、约23、约24或约30小时授精。其他适用的试剂盒成分包括；赋形剂、崩解剂、 粘合剂、盐类、润滑剂、局部麻醉药（例如利多卡因）、稀释剂、防腐剂、馨合剂、缓冲剂、张度 剂、抗菌剂、湿润剂、乳化剂、分散剂、稳定剂等。该些成分可W是分开可用或是在必需时与 激素和/或凝胶混合。本文描述的任何激素实施方案和任何组合物实施方案可用于配制试 剂盒。
[0197]在另一实施方案中，提供制造的物品。所述制造的物品可包含本文描述的任何组 合物。所述组合物可W处在主容器中，例如，玻璃管瓶（比如带橡皮塞和/或揭开性侣封口 的栋色玻璃管瓶）。在另一实施方案中，所述主容器可W是塑料的或是侣的，和该主容器可 被封口。在另一实施方案中，所述主容器可W包含在第二容器内，W进一步保护组合物免受 光照。所述第二容器可W是（例如）卡纸板。该些实施方案的任一个还可用于上述的试剂 盒实施方案，并且本文描述的激素和组合物实施方案中的任一个都可用于制造的物品。 实施例 阳19引连施例1 阳19引研究巧计巧治抒紀
[0200] 用约120只产次为一至走的母猪（每治疗组内30只母猪）W获得排卵和生殖道 数据。所有的母猪是相同基因型（PICC22)。在哺乳的16-24天，根据哺乳的长度和产次将 母猪分区，并随机分配到四个治疗组之一 ；1)安慰剂组，其在断奶后96±2小时接受安慰剂 凝胶和在其后24小时接受单次AI，2)在断奶后96 + 2小时接受曲普瑞林凝胶和其后18-20 小时接受AI。3)在断奶后96 + 2小时接受曲普瑞林凝胶和其后24-26小时接受AI，和4) 在断奶后96±2小时接受曲普瑞林凝胶和其后30-32小时接受AI。安慰剂配方与活性配方 相同但没有激素存在。将所有治疗物放置进入阴道前部宫颈2cm内。在治疗后24、32、40、 48和56小时用超声实时显像监测卵泡发育和排卵。在授精后=十（30)天，将所有猪屠宰 并且获取生殖道。测定怀孕率和胚胎存活。
[0201] 连施例2 阳20引试輪物质
[0203]活性成分为曲普瑞林（pGlu-His-T;rp-Se;r-Ty;r-D-T;rp-Leu-Arg-P;r〇-Gly-畑2)，其W己酸盐形式（分子量；1371. 6)提供，其来自Bachem，Torrance,CA(目 录号H-4075CGMP级）。曲普瑞林凝胶（200yg/2血），批次054023833-1，由Chem L油oratoriesLtd(Auckland，NewZealand)配制，其处于由在巧樣酸钢、pH5. 5 中的 1.2% Methocel?PremiumA4000值OWChemicals)与对哲基苯甲酸甲醋和丙醋、化化、邸TA和 心甲硫氨酸组成的凝胶中。配方载体，批次054006645-1，是在化emL油oratoriesLtd.配 审lJ，并由在巧樣酸钢、pH5.5中的1.2%Methocel?PremiumA4000值ow化emicals)与^JaCl 和对哲基苯甲酸甲醋和丙醋组成。将五十毫升的曲普瑞林凝胶（200yg曲普瑞林己酸盐/ mL)或配方载体包装在50mL栋色棚娃玻璃血清瓶化10206-50)中，带有灰色了基橡胶药用 血清瓶塞（73828A-S巧和标准侣封口（SAS20NAT)。该试验物质冷冻贬存（约5°C)和在带 有适当冰袋的绝热容器内运输。 阳204]连施例3。20引连施例配方
[0206] 用于本申请所述组合物的实施例配方显示于表1和表2。
[0207]表1 [020引
阳20引表2.
[0210]
[0211] *标称量
[0212] ** 经测试至药典标准（compendialstandard) 阳21引 连施例4 邮14] 发倍期观察
[0215] 在断奶（第0天）后将猪关养于怀孕箱中。将公猪关养在单独的室里，和/或至 少12m距离并且顺风。为测定发情期的起始和持续期，每日观察母猪的发情期，（1)从第3 天直到确认发情期结束，或（2)直到第6天，看哪个首先到来。为引出发情期信号，让成熟 的公猪缓慢走过母猪箱前面的通道，让每只试验母猪接受公猪发出的视觉的、听觉的和嗅 觉的信号长达5分钟。为与商业农场的标准实践一致，当该公猪靠近母猪箱前面时，通过有 经验的人员对母猪中部施加背压结合侧部摩擦试验发情期。当母猪对背压表现刚直站立、 没有发声，和具有一些耳朵反射的迹象时，证实是发情期。
[021引连施例5邮17] 给药巧暢精
[021引在断奶后96小时（±2小时）作为单个2mL剂量将曲普瑞林用改良的人工授精导 管放置于宫颈后部约1-约2cm。在第（0)天的上午10点和中午之间对猪断奶。按实验设 计中所示给定每组母猪的授精时间安排。那些已预定将在给予曲普瑞林后18小时授精的 母猪普遍在接下来的那天的上午6:00和上午8:00之间授精，那些已预定将在给予曲普瑞 林后24小时授精的母猪普遍在接下来的那天的中午和下午2:00之间授精，那些已预定将 在给予曲普瑞林后30小时授精的母猪普遍在接下来的那天的下午6:00和下午8:00之间 授精。每只母猪的单次授精如它们在农场常规进行的那样进行。 阳21引 连施例6 阳220] 排邮巧发倍期测定
[0221] 通过经直肠超声扫描观察所有母猪。在第5天治疗后24小时（±1. 5小时）进行超 声扫描并在第5天的下午8:00 (± 1. 5小时）再进行一次。在第6天上午4:00 (± 1小时）、 中午（±1小时）和下午8:00(±1小时）进行经直肠超声扫描，直到排卵结束或直到第6天 (从断奶后96小时动物治疗为起点的56小时）的下午8:00的超声扫描，无论哪个先到来。 将Aloka500超声仪器用于此目的，其带有连接至固定角度PVC稳定杆的7. 5MHz线阵式传 感器，W便于插入直肠。该传感器和PVC杆涂有妇科润滑剂并轻轻地插入直肠直到卵巢可 视。每次扫描记录S个最大的滤泡（至最接近0. 1mm)的直径。当大滤泡数量6. 5mm) 降至少于3时，称母猪已经排卵。
[0222] 在断奶后第5天，最大的滤泡的平均尺寸是7. 3mm，并且不受治疗影响。在断奶的 7天内发情期表现率平均为79%，并且在治疗之中没有显著差异。治疗对从断奶至发情期 的间隔也无影响（平均112小时）。
[0223] 在治疗后24小时、32小时或40小时，已经排卵的母猪的百分率没有显著受治疗影 响（见表3和图1)。然而，在所有曲普瑞林治疗组中治疗后48小时的排卵母猪的百分率 [74. 0% (在18小时AI)、77. 0% (在24小时AI)和76.8% (在30小时AI)]，相比于载体 治疗母猪（42.6% )增大（P= 0. 0054)。治疗不影响治疗后56小时的排卵母猪百分率（P =0. 10)，然而，相比用载体治疗治疗的母猪巧8. 3% )，用曲普瑞林治疗的母猪具有更高的 排卵母猪百分率（平均为80. 4% )。在曲普瑞林治疗和载体治疗动物之间断奶至排卵的平 均间隔时间没有差异，但观察到曲普瑞林治疗的母猪的排卵更为同步，其中70-77%的母猪 在它们最同步的24小时周期（断奶后120-144小时）期间排卵，相比之下载体治疗的母猪 只有39. 9%的母猪在它们最同步的周期（断奶后128-156小时）排卵。 阳224] 连施例7 阳2巧]怀孕率巧胎化撒
[0226] 怀孕率，按分配至每个治疗组的动物在屠宰时怀孕的百分率计算，平均为66.6%， 并且在治疗组之中没有显著差异，虽然在曲普瑞林治疗的治疗后18小时授精的母猪 的怀孕率在数量上最高（74.4% )，随后是曲普瑞林治疗的治疗后24小时授精的母猪 化8. 1% )、曲普瑞林治疗的治疗后30小时授精的母猪化2. 3% )和安慰剂治疗的治疗后24 小时授精的母猪化1.8% )。相比曲普瑞林治疗的治疗后30小时授精巧.6胎）的母猪和载 体治疗的治疗后24小时授精巧.6胎）的母猪，曲普瑞林治疗的治疗后18小时授精（12. 4 胎）和24小时授精（11.8胎）的母猪存在具有较高数量的健康胎的趋势（P= 0. 09)。在 治疗组之中健康胎的重量没有显著差异。
[0227] 表3.最小二乘法（L巧均值，用于反应变量 [022引
[0229] -行内具有不同上标的均值表示p= 0. 05下的显著差异
[0230] 缩写如下：N(母猪数量），发情期（在第3天直到第6天周期内的发情 期），0V24 (在治疗后24小时的排卵母猪百分率），和怀孕（所有分配母猪中的怀孕母猪）。
[0231]AICMi标准误差：1. 8379 1. 5804 1. 5483 1. 5700
[0232] # 健康胎标准误差：1. 3966 1. 3966 1. 3968 1. 4105 阳23引连施例8 阳234]研究1-巧合伺养研究农场
[0235] 在一个800只母猪的研究农场进行=个研究平行测定。所有平行测定包括发情期 和排卵的数据，并且两个平行测定包括AI、怀孕和产仔的结果。在断奶时，混合产次的母猪 (n= 32/治疗）在断奶后9化接受载体和其后2化单次AI(安慰剂）、在断奶后9化接受 试验物质0VUGEL?和其后1她单次AI(0G18)、在断奶后9化接受0VUGEL?和其后2化单次 AI(0G24)或在断奶后9化接受0VUGEL?和其后30h单次AI(0G30)。用放置导管将0VUGEL? 给予至宫颈后部~2cm。从断奶后第3天（d3)直到第7天（d7)每日进行一次发情期检测。 从d5至d6,每她进行超声。在怀孕的d30,处死该些猪并检查生殖道。
[0236] 治疗对断奶7天内对母猪表现发情期（79% )或对断奶至发情期的间隔时间（4. 7 天）没有影响。相比安慰剂治疗，在0G18、0G24和0G30中，治疗后4她排卵母猪的百分率 更大（P= 0. 005)(表4)。在治疗组之中从AI至排卵的间隔时间有差别（P<0. 001，表4)， 并且离排卵最远出现于0G18、居中出现于安慰剂和0G24,最近出现于0G30。怀孕率不受治 疗影响（P= 0.60,表4)，但受AI至排卵间隔时间的影响（P= 0.02)。治疗对第30天的 健康胎数量有显著影响（P= 0. 003)，OG18和OG24比0G30和安慰剂治疗具有更多健康胎 (表4)。治疗对化的数量没有影响（P= 0. 30)，但对胚胎存活有影响的趋势（P= 0. 09) (表 4)。
[0237]结果表明0VUGEL?有效地同步排卵而不影响怀孕率，W及0VUGEL?后18或24小 时单次AI相比0VUGEL?后30小时AI或相比安慰剂治疗后单次授精在怀孕第30天的胎仔 数更大。
[023引表4.未调节均值，用于治疗反应
[0239]
[0240]AI=人工授精
[0241] 化=黄体
[024引 ES=胚胎存活
[0243] 0G= 0VUGEL?
[0244]连施例9 阳24引 研究2-Bache农场研究
[0246] 母猪断奶（0天）并筛选编入该研究中，记录身体状况并分配至治疗组。根据产后 长度、产次和身体状况评分将产次1-10的产后母猪分区。不使用身体状况评分低于2. 5或 高于3. 5的母猪。使用的基因型是在美国和加拿大的商业上典型应用的那些。将治疗组关 在各自分开的区域，使得当天稍迟配种的那些母猪不会接受与公猪接触的多次碰面。在断 奶后第4天每只治疗母猪接受单剂量的曲普瑞林组合物（0VUGEL?)。对照母猪未治疗。
[0247] 在第4天进行发情期测定，并连续每天一次，直到治疗后4天（第8天）或直到母 猪不再显示发情期。对照母猪（未治疗）如在农场常规实行的那样在发情期检测后的间 隔期间授精。在治疗后15小时（上午6:00+/-0. 5小时）、18小时（上午9:00+/-0. 5小 时）、21小时（下午12:00+/-0. 5小时）、24小时（下午3:00+/-0. 5小时）和27小时（下 午6:00+/-0. 5小时）用单次授精对0VUGEL?治疗的母猪授精。
[024引授精后在18-24天之间每日进行一次发情期测定W确定母猪是否再循环。记录已 回复发情期的母猪，然后依照标准农场标准操作（SCP)下重新配种（该些动物离开本研究， 而接受休药期（with化awalperiod))。在授精后28-32天用经腹超声（一次）确定那些没 回复发情期的母猪的怀孕。休药期证实为治疗后51天。记录产仔日期、在出生后24小时 的出生存活小猪数量和死胎小猪数量的数据。根据平常的农场方案养育小猪。
[0249] 将至少90只母猪分配至W下每个组。对照母猪不治疗。给予所有其他母猪含有 200yg为己酸盐的曲普瑞林的0VUGEL?。
[0250] 1)对照；未治疗并且如每个场所常规实施的那样在发情期检测后的间隔时间授 精；
[0251] 2)曲普瑞林；在曲普瑞林治疗后15小时（+/-0. 5小时）授精一次；
[0252] 3)曲普瑞林；在曲普瑞林治疗后18小时（+/-0. 5小时）授精一次；
[0253] 4)曲普瑞林；在曲普瑞林治疗后21小时（+/-0. 5小时）授精一次；
[0254] 5) 曲普瑞林；在曲普瑞林治疗后24小时（+/-0. 5小时）授精一次；
[0255] 6)曲普瑞林；在曲普瑞林治疗后27小时（+/-0. 5小时）授精一次。
[0巧引表5.给予OvuGel后的授精时间
[0 巧 7]
[0巧引从366只母猪中收集数据（每治疗组61只母猪）。
[0巧9] LS均值使用SAS的PR0CGLM程序计算，并假设具有处理和群组的模型。
[0260] 对于任何测试的变量，没有通过群组交互作用的处理。
[0261] 带有不同上标的LS均值差异为P<0. 05。
[026引连施例10 阳26引激素稳定忡
[0264]图 2 显示曲普瑞林的稳定性（250yg/mL-i)。在 0-4°C、30°C和 50°C(Mcllvaine缓 冲剂）下分析抑的影响。图2表明对于激素稳定性，最佳的抑范围为约5-约6。 阳2巧]连施例11 阳26引稳定忡分析
[0267] 在3个月的时间点上研究含有各种稳定剂的配方的稳定性。汇总于表6的数据指 明k甲硫氨酸提供最稳定的配方。
[026引表6.含有稳定剂的配方的稳定性汇总
[0269]
[0270] 其中P-80是聚山梨醇醋80 。的1]连施例12 制各激素紀合物的方法
[0273] 在一制备方法的实施方案中，将激素在含有巧樣酸和水但与其他成分分开的容器 中溶解。然后将其他成分加入到激素组合物中，并在加入甲基纤维素组分前加入水。在高 剪切混合下缓慢加入甲基纤维素组分W确保组合物的均匀性和避免凝集。 。的4]连施例13 。的引产后母猪在阴道内GnRH激动剂治抒后同巧暢精
[0276] 本研究显示，相比于在发情期开始和发情期间的每日配种的对照母猪，给予GnRH 后单次、定时授精对其后的产仔率和胎仔数的影响（表7和8)。根据产次（产次1至6;平 均产次2. 9)、W前的哺乳长度（范围13-23d;平均持续时间19d)和身体条件评分（范围 为2. 0至4. 0 ;平均评分3. 1)将一百九十九只断奶的母猪（PIC)分区并分配至两种治疗之 一。对对照母猪观察断奶后7d的行为上的发情期，并在它们观察到处于发情期的那天和在 发情持续期的2化间隔时间授精。在断奶后四天的早上将描述于实施例2和3的GnRH激 动剂制剂（OvuGel?)经阴道内给予GnRH治疗组的母猪（GnRH母猪），并在OvuGel?治疗后 21-2化授精一次。也对GnRH母猪观察断奶后7d行为上的发情期迹象，但其授精不考虑持 续的发情期迹象。
[0277] 相比于在断奶后7d100% (100)配种的GnRH母猪，对于99只对照母猪，在断奶后 7d90. 9%巧0)配种（P<0. 01)。对照母猪的每只母猪平均2. 1次授精，而所有GnRH母猪具 有每只母猪1次授精（P<〇. 01)。对照和GnRH母猪在产仔母猪的数量上没有差异（P〉0. 75)， 分别为79. 2% (79只母猪）和80. 7% (81只母猪）。治疗对死胎的（P〉0. 45)和木乃伊胎 的（P〉0. 15)数量没有影响。相比于对照母猪的11. 4只出生存活小猪，GnRH母猪产仔为平 均11. 2只出生存活小猪（P〉0. 65)。对照和GnRH母猪的每一精液剂量的出生小猪分别为 5.6和9.6(P<0. 01)。该些数据指明用OvuGel?治疗和在治疗后授精一次的治疗母猪得到 的产仔率和胎仔数比得上在行为发情期间接受多次授精的母猪，W及OvuGel?治疗的动物 的每一精液剂量的出生小猪数量更高。
[027引表7.对治疗的反应和在对照与GnRH母猪之间的比较1[0279]
[0280]iGnRH母猪在断奶后99和102小时之间治疗，和在治疗后21和22小时之间授精。 对照母猪不治疗并且正常地配种。在表格中的数是未调节的均值并且是原始数据。
[02引]表8.对治疗的反应（LS均值±SEM)和对照与GnRH母猪之间的比较1[0282]
[0284]胃1数据收集自199只母猪巧9只对照，100只GnRHK按照常规农场SOP配种对照 母猪。在断奶后第4天治疗GnRH母猪并在其后21-22小时授精一次。
[0285] LS均值使用SAS的PROC GLM程序计算，并假设具有处理和群组的模型。对于任何 测试变量，没有通过群组交互作用的处理。 阳28引 连施例14 阳287] 给予断奶猪GNRH激动剂后定时暢精
[0288] 本研究显示在给予GnRH后单次、固定时间授精对其后的产仔率和胎仔数的影响 (表9和10)。根据产次（产次1至6;平均产次2. 8)、W前的哺乳长度（范围17-25d;平 均持续时间21d)和身体条件评分（范围为2. 5至3. 5 ;平均评分2.8)将S百只断奶的母猪 (PIC)分区并分配至两种治疗之一。对对照母猪观察断奶后7d的行为上的发情期，并在它 们观察到处于发情期的那天和在发情持续期的2化间隔时间授精。也对在GnRH治疗组的 母猪（GnRH母猪）观察断奶后7d行为上的发情期迹象，但在断奶后第4天用描述于实施例 2和3的GnRH激动剂制剂（OvuGel?)阴道内治疗，并随后在OvuGel?治疗后24 +化授精 一次，不管它们是否表现出持续的发情期迹象。相比于断奶后7dl00% (150)配种的GnRH 母猪，150只对照母猪在断奶后7d80. 7% (121)配种（P<0. 01)。
[0289] 对照母猪的每只母猪平均2. 3次授精，而所有GnRH母猪具有每只母猪1次授精 任<0.01)。对照和GnRH母猪中产仔母猪的数量上没有差异（P〉0. 40)，分别为72.7% (109 只母猪）和76. 7% (115只母猪）。治疗对死胎的（P〉0. 30)和木乃伊胎的（P〉0. 45)数量 没有影响。相比于产仔的对照母猪的10. 9只出生存活小猪，产仔的GnRH母猪为平均11. 3 只出生存活小猪（P<〇. 37)。对照和GnRH母猪的每一精液剂量的出生小猪分别为5.6和 9.6(P<0. 01)。该些数据指明用GnRH激动剂OvuGel?治疗和相对GnRH治疗的时间授精一 次的治疗母猪得到的产仔率和胎仔数比得上在行为发情期间接受多次授精的母猪。该些结 果还表明OvuGel?治疗的动物比对照动物的每一精液剂量的出生小猪数量更高。
[0290] 表9.对治疗的反应和在对照与GnRH母猪之间的比较1
[0291]
[029引1母猪在断奶后96小时治疗和其后24 + 2小时在断奶后第5天（断奶后120-122 小时）授精。对照母猪不治疗并且正常地配种。在表格中的数是未调节的均值并且是原始 数据。
[029引表10.对治疗的反应（LS均值±SEM)和对照与GnRH母猪之间的比较1
[0294]
[029引1数据收集自300只母猪（150只对照，150只Gnim)。按照常规农场SOP配种对照 母猪。在断奶后第4天治疗GnRH母猪并在其后24+/-2小时授精一次。
[0296]LS均值用SAS的PR0CGLM程序计算，并假设具有处理和群组的模型。对于任何测 试变量，没有通过群组交互作用的处理。 阳297] 连施例15 阳29引统计学分析
[0299] 对于连续和离散变量，用SAS(Cary,NC)的ProcMIX邸和普通线性模型程序分析 数据。对于所有的分析，模型包含治疗（治疗后24小时授精的安慰剂对照，治疗后18小 时授精的曲普瑞林治疗母猪，治疗后24小时授精的曲普瑞林治疗母猪和治疗后30小时授 精的曲普瑞林治疗母猪）和平行测定的固定效应。将母猪产次和哺乳长度的记录作为协变 量（covariate)而包括。测试治疗和平行测定的一阶交互作用，并且当不显著时去除。用 P<0. 05下的T检验，对最小二乘法均值估值测试治疗之间的差异性。
【主权项】
1. 一种同步猪排卵的方法，所述方法包含以下步骤： 在断奶后的第四天给予猪一定剂量的激素，其中所述激素为曲普瑞林或其溶剂合物、 水合物或药学上可接受的盐，并且其中所述猪只在给予该激素后约15-约24小时授精一 次。2. 权利要求1的方法，其中所述激素是曲普瑞林乙酸盐。3. 权利要求1-2中任一项的方法，其中所述激素使用放置导管给予猪。4. 权利要求1-2中任一项的方法，其中所述激素通过注射给予。5. 权利要求1-4中任一项的方法，其中所述激素以有效量给予，该激素的有效量是约 10Mg-约 500l^g。6. 权利要求1-5中任一项的方法，其中给予猪单一的激素。7. 权利要求1-6中任一项的方法，其中所述激素在包含凝胶的组合物中给予，并且其 中所述组合物具有为约5. 0-约6. 0的pH。8. 权利要求1-7中任一项的方法，其中所述猪在给予该激素后约18-约22小时授精。9. 权利要求1-8中任一项的方法，其中所述猪在给予该激素后约22小时授精。10. 权利要求1-9中任一项的方法，其中所述方法在没有发情检测下进行。11. 权利要求1-10中任一项的方法，其中所述激素是在断奶后约96小时给予。12. -种组合物，其包含激素和凝胶，其中所述激素具有式或其溶剂合物、水合物或药学上可接受的盐， 其中 R1和R2独立地在每种情况下是氣，或是独立选自：烷基、杂烷基、环烷基、杂环烷基、齒 代烷基、芳基、杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷基，其各自任选取代，或R1和R2与连接的碳形 成碳环或杂环； X是氢，或X是选自：烷基、环烷基、杂烷基、任选取代的亚烷基羧酰胺；和 HNC(0)NR3R4,其中R3和R4在每种情况下独立选自：氢、烷基、杂烷基和卤代烷基；且 其中所述组合物具有为约5. 0-约6. 0的pH。13. 权利要求12的组合物，其中R1是亚甲基-杂芳基，和其中杂芳基是选自：吡啶基、 噻唑基、磺胺吡啶基、嘧啶基、喹啉基、吡唑基、咪唑基、吡咯基、剛噪基、苯并吡唑基和苯并 咪唑基；和 R2是氢或甲基。14. 权利要求12-13中任一项的组合物，其中X是CH2C(0)NH2。15. 权利要求12-14中任一项的组合物，其中所述激素为曲普瑞林，或其溶剂合物、水 合物或药学上可接受的盐。16. 权利要求12-15中任一项的组合物，其中所述激素为曲普瑞林或曲普瑞林乙酸盐。17. 权利要求12-16中任一项的组合物，其中所述激素为曲普瑞林乙酸盐。18. 权利要求12-17中任一项的组合物，其中X是H2CC(0)NH2,札是氢，且1?2是19. 权利要求12-18中任一项的组合物，其进一步包含稳定剂。20. 权利要求19的组合物，其中所述稳定剂是L-甲硫氨酸。21. 权利要求12-20中任一项的组合物，其中所述凝胶包含多糖。22. 权利要求21的组合物，其中所述多糖是选自：纤维素、右旋糖酐和海藻酸盐。23. 权利要求22的组合物，其中所述多糖是纤维素。24. 权利要求23的组合物，其中所述纤维素是甲基纤维素。25. 权利要求24的组合物，其中所述凝胶包含约0. 5重量％-约4. 0重量％的甲基纤维 素。26. 权利要求12-25中任一项的组合物，其进一步包含防腐剂。27. 权利要求26的组合物，其中所述防腐剂是选自：对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲 酸丙酯。28. 权利要求12-27中任一项的组合物，其进一步包含张度剂。29. 权利要求12-28中任一项的组合物，其中所述激素为约10约500呢的有效 量。30. 权利要求12-29中任一项的组合物，其中所述组合物包含100Pg/mL的激素。31. 权利要求12-30中任一项的组合物，其用于使用放置导管经阴道内给予猪。32. 权利要求12-31中任一项的组合物，其结合使用说明书。33. 权利要求32的组合物，其中所述说明书指出，该猪应在给予该激素后约18-约22 小时授精一次。34. 权利要求12-33中任一项的组合物，其用于同步猪排卵，而不进行用于同步的发情 检测。35. -种组合物，其中所述组合物包含约0. 09%重量每体积的量的对羟基苯甲酸甲 酯，约0. 01%重量每体积的量的对羟基苯甲酸丙酯，约0. 91%重量每体积的量的氯化钠，约 0. 186%重量每体积的量的柠檬酸钠，约0. 1%重量每体积的量的L-甲硫氨酸，约0. 07%重量 每体积的量的柠檬酸，约〇. 01%重量曲普瑞林每体积的量的曲普瑞林或其溶剂合物、水合 物或药学上可接受的盐，和约1. 2%重量每体积的量的甲基纤维素。36. 权利要求35的组合物，其中所述曲普瑞林为曲普瑞林乙酸盐。37. 包含权利要求12-36中任一项的组合物的试剂盒，其中所述试剂盒进一步包含放 置导管。
【专利摘要】描述了用于同步猪的授精时间的组合物和方法。更具体地，描述了通过给予包含激素的组合物用于同步授精时间的方法，其中所述猪只在给予该激素后授精一次，且其中没有发情检测。
【IPC分类】A61P15/08, A61K38/09
【公开号】CN104906556
【申请号】CN201510141363
【发明人】S.K.韦贝尔, M.E.斯万森
【申请人】Jbs联合动物健康二有限公司
【公开日】2015年9月16日
【申请日】2010年4月23日
【公告号】CA2758532A1, CN102596215A, CN102596215B, EP2421545A1, EP2421545A4, US8905913, US20120046519, US20150057225, WO2010124220A1
【专利说明】用于同步授精时间的方法和组合物
[0001] 本申请是申请日2010年4月23日，申请号201080029042. 8 (PCT/ US2010/032258)，发明名称为"用于同步授精时间的方法和组合物"的发明专利申请的分案 申请。
[0002] 相关申请的交叉引用
[0003] 对于2009年4月23日提交的美国临时申请第61/172, 009号，本申请要求35U. S.C. § 119(e)下的优先权，该申请特别地通过引用结合到本文中。 发明领域
[0004] 本发明设及用于在动物中同步授精时间的方法和组合物。更具体而言，该发明设 及没有发情检测化eatdetection)的同步猪的授精时间的方法和组合物。
[000引发明背景
[0006] 促性腺素释放激素是一种10个氨基酸的肤，也被称为促黄体激素释放激素 (LHRH)。促性腺素释放激素在下丘脑中生成，负责滤泡刺激激素和促黄体激素从垂体释放。 促性腺素释放激素从下丘脑的神经元中释放，在滤泡刺激激素和促黄体激素释放的复杂调 节中起作用。滤泡刺激激素和促黄体激素W结合形式调节性腺的功能，在睾丸产生睾酬和 在卵巢产生孕酬和雌激素，和调节配子的产生和成熟。例如，滤泡刺激激素在卵巢刺激未成 熟的卵泡的生长和补充，促黄体激素触发排卵。
[0007] 雌性和雄性的促性腺素释放激素的分泌具有差别。在雄性中，促性腺素释放激素 W恒频脉冲分泌，但在雌性中，该脉冲频率在发情周期期间变化，并且临排卵时有大量高涨 的促性腺素释放激素。促性腺素释放激素的分泌在所有脊椎动物中是脉动的，且对恰当的 生殖功能是必须的。因此，促性腺素释放激素控制雌性的滤泡生长、排卵和黄体保持和雄性 的精子发生的复杂过程。
[0008] 促性腺素释放激素已被分离，并具有十肤的特征。可应用合成形式的促性腺素释 放激素，并且对促性腺素释放激素的十肤结构的修饰已得到多种促性腺素释放激素类似 物，它们刺激（例如促性腺素释放激素激动剂）或抑制（例如促性腺素释放激素括抗剂） 促性腺素类（比如促黄体激素和滤泡刺激激素）的释放。
[0009] 对于商业猪的生产而言，重要的是最大化生殖的效率，W使得猪生产更有利润。已 经严重依赖个体雌性猪的每日发情检测，相关的劳动成本用于雌性猪中发情的人工检测， 基于小母猪或母猪的每日检查，W达到对例如人工授精的最好的结果。用劳动密集的方法 (比如每日检查）的发情检测增加人工授精成功的可能性。因此，必需对发情检测的每日检 查投入时间、人工劳动和物质成本，因为不使用需要每日计划W监测发情检测的方法难W 预测发情的时间（即最好的授精时间）。因此，需要优化动物的授精成功的方法，其没有发 情检测，W减少劳动成本，并增加猪生产的收益性。
[0010] 发明简述
[0011] 申请人已作出W下意外发现；经给予激素控制排卵时间可淘汰基于发情期检测的 配种，并且允许猪只接受一次授精W优化生育率和优化成本消耗。在一实施方案中，描述了 没有发情检测的同步猪的授精时间的方法。该方法包括在断奶后第四天给予猪一定剂量 激素的步骤，所述激素选自促性腺素释放激素、促黄体激素、人绒毛膜促性腺素和它们的组 合，其中该猪只在给予激素后约15-约24小时授精一次，且其中没有发情检测。
[0012] 在W上描述的实施方案中，适用W下特征或它们的任何组合。在上述实施方案中， 1)所述猪可W是产后母猪；2)所述猪可W是小母猪；3)所述授精可W是人工授精；4)所 述授精可W通过自然配种；5)排卵可W同步；6)所述激素可W按有效刺激卵泡排卵的量给 予；7)该剂量的激素可W使用选自W下的方法给予：放置导管（expositioncatheter)的 使用、人工给药和注射；8)所述猪可W在给予激素后约15-约18小时授精；9)所述猪可W 在给予激素后约18小时授精；10)相对于未给予激素的猪，所述猪的怀孕率可增大；11)相 对于未给予激素的猪，所述猪的胎仔数可增加；12)所述激素可给予多于一只的猪；13)相 对于未给予激素的猪，在给予激素后约48小时排卵的猪的百分率可增大；15)所述激素可 W经阴道内给药；16)所述激素可W给予至阴道前部；17)所述激素可W是促性腺素释放激 素受体激动剂；18)所述激素可W是促黄体激素受体激动剂；19)所述激素可W是人绒毛膜 促性腺素受体激动剂；20)所述激素可W是曲普瑞林；21)所述激素可W是曲普瑞林盐；22) 所述激素可W是合成物质；23)所述激素可W是己酸盐形式；24)所述激素可W在包含凝胶 的组合物中给药；25)所述凝胶可包含多糖；26)所述多糖可W选自；纤维素、右旋糖酢和海 藻酸盐；27)所述凝胶可W包含纤维素；和28)所述纤维素可W是甲基纤维素。预期上段 [0007]的实施方案与1-28或其任何组合的任何组合。
[0013] 在另一实施方案中，描述了包含一定剂量激素的试剂盒，所述激素选自促性腺素 释放激素、促黄体激素、人绒毛膜促性腺素和它们的组合。该试剂盒进一步包含使用的说明 书，其中该激素在包含凝胶的组合物中，W及该组合物具有的抑为约5-约6。
[0014] 在上段[0009]描述的实施方案中，适用W下特征或它们的任何组合。在段[0009] 描述的实施方案中，1)所述说明书可W指出，应将激素在断奶后约第四天给予猪，并且猪可 在给予激素后约15-约24小时授精一次；2)所述说明书可W指出，所述授精应是人工授 精；3)所述说明书可W指出，所述授精应是通过自然配种；4)所述试剂盒可进一步包含放 置导管、用于手工给药的涂药器或注射器；5)所述说明书可W指出，该猪应在给予激素后 约15-约18小时授精；6)所述说明书可W指出，该猪应在给予激素后约18小时授精；7)所 述说明书可W指出，所述激素应经阴道内给予；8)所述说明书可W指出，所述激素应给予 至阴道前部；9)所述激素可W是促性腺素释放激素受体激动剂；10)所述激素可W是促黄 体激素受体激动剂；11)所述激素可W是人绒毛膜促性腺素受体激动剂；所述激素可W是 曲普瑞林；12)所述激素可W是曲普瑞林盐；13)所述激素可W是合成物质；14)所述激素 可W是己酸盐形式；15)所述凝胶可W包含糖类；16)所述凝胶可W包含多糖；17)所述多 糖可W选自纤维素、右旋糖酢和海藻酸盐；18)所述凝胶可包含纤维素；和19)所述纤维素 可W是甲基纤维素。考虑上段[0009]的实施方案和1-19或其任何组合的任何组合。
[0015] 在另一实施方案中，描述了包含促性腺素释放激素受体激动剂和凝胶的组合物， 其中所述组合物具有的抑为约5. 0-约6. 0。
[0016] 上段[0011]描述的实施方案中，适用W下特征或它们的任何组合。段[0011]描 述的实施方案中，1)所述组合物可进一步包含防腐剂；2)所述防腐剂选自对哲基苯甲酸甲 醋和对哲基苯甲酸丙醋；3)所述组合物可进一步包含稳定剂；4)所述稳定剂可^是k氨 基酸；5)所述稳定剂可^是心甲硫氨酸；6)所述凝胶可包含多糖；7)所述多糖可W选自纤 维素、右旋糖酢和海藻酸盐；8)所述凝胶可包含纤维素；9)所述纤维素可W是甲基纤维素； 10)所述组合物可进一步包含张度剂；11)所述激动剂可W是曲普瑞林；12)所述组合物还 可结合使用的说明书；13)与组合物结合的说明书可W指出，应将激动剂给予猪和猪应在 给予激动剂后约15-约24小时授精一次；和14)所述说明书可W指出，该猪应在给予激动 剂后约18小时授精一次。考虑上段[0011]的实施方案与1-14或其任何组合的任何组合。
[0017] 提供W下各种实施方案。
[0018] 1.描述了没有发情检测的同步猪的授精的时间的方法。所述方法包含在断奶后第 四天给予猪一定剂量激素的步骤，所述激素选自促性腺素释放激素、促黄体激素、人绒毛膜 促性腺素和它们的组合，其中猪只在给予激素后约15-约24小时授精一次，且其中没有发 情检测。
[001引 2.条款1的方法，其中所述猪是产后的母猪。
[0020] 3.条款1的方法，其中所述猪是小母猪。
[002。 4.条款1至3的方法，其中所述授精是人工授精。
[002引 5.条款1至4的方法，其中所述授精是通过自然配种。
[002引 6.条款1至5的方法，其中使排卵同步。
[0024] 7.条款1至6的方法，其中所述激素是W有效刺激卵泡排卵的量给药。
[002引 8.条款1至7的方法，其中所述激素的有效量为约10yg-约1000yg。
[002引 9.条款1至7的方法，其中所述激素的有效量为约10yg-约500yg。
[0027] 10.条款1至9的方法，其中该剂量的激素是应用选自W下的方法给予：放置导管 的使用、手工给药和注射。
[002引11.条款1至10的方法，其中所述猪在给予激素后约15-约18小时授精。
[0029] 12.条款1至10的方法，其中所述猪在给予激素后约16-约24小时授精。
[0030] 13.条款1至10的方法，其中所述猪在给予激素后约18-约22小时授精。
[0031] 14.条款1至13的方法，其中所述猪在给予激素后约18小时授精。
[003引15.条款1至14的方法，其中相对于未给予激素的猪，所述猪的怀孕率增大。
[003引16.条款1至15的方法，其中相对于未给予激素的猪，健康胎的总数增大。
[0034] 17.条款1至16的方法，其中相对于未给予激素的猪，产仔的百分率增大。
[003引18.条款1至17的方法，其中相对于未给予激素的猪，出生小猪的总数增大。
[0036] 19.条款1至18的方法，其中相对于未给予激素的猪，每精液剂量的出生小猪的总 数增大。
[0037] 20.条款1至19的方法，其中相对于按照发情检测授精的猪，每精液剂量的出生小 猪的总数增大。
[003引 21.条款1至20的方法，其中相对于未给予激素的猪，小猪指数增加。
[0039] 22.条款1至21的方法，其中相对于按照发情检测授精的猪，小猪指数增加。
[0040] 23.条款1至22的方法，其中相对于未给予激素的猪，所述猪的胎仔数增加。
[0041] 24.条款1至23的方法，其中所述激素给予多于一只的猪。
[0042] 25.条款1至24的方法，其中相对于未给予激素的猪，在给予激素后约48小时，排 卵的猪的百分率增大。
[0043] 26.条款1至25的方法，其中所述激素经阴道内给药。
[0044] 27.条款1至26的方法，其中所述激素给予至阴道前部。
[0045] 28.条款1至27的方法，其中所述激素是促性腺素释放激素受体激动剂。
[0046] 29.条款1至28的方法，其中所述激素是促黄体激素受体激动剂。
[0047] 30.条款1至29的方法，其中所述激素是人绒毛膜促性腺素受体激动剂。
[0048] 31.条款1至30的方法，其中所述激素是曲普瑞林。
[0049] 32.条款1至31的方法，其中所述激素是曲普瑞林盐。
[0050] 33.条款1至32的方法，其中所述促性腺素释放激素具有式pGlu-His-T巧-Ser-T yr-Gly-Leu-Arg-Pro-GlyNH^。
[0051] 34.条款1至33的方法，其中所述促性腺素释放激素受体激动剂具有式
[0052]
[0053] 或其溶剂合物、水合物或药学上可接受的盐，
[0054] 其中
[00巧]Ri和R2独立地在每种情况下是氨，或是独立选自；烷基、杂烷基、环烷基、杂环烧 基、面代烷基、芳基、杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷基，其各自任选地取代，或Ri和R2与连接 的碳形成碳环或杂环；
[0056]X是氨，或X是选自；烷基、环烷基、杂烷基、任选取代的亚烷基駿酷胺；和
[0057]HNC(0)NR3R4,其中R3和R4在每种情况下独立选自氨、烷基、杂烷基和面代烷基。
[0058] 35.条款34的方法，其中R1是亚甲基-杂芳基，其中杂芳基选自；化晚基、唾挫基、 横胺化晚基（pyridazol^)、喀晚基、嗟咐基、化挫基、咪挫基、化咯基、嘲噪基、苯并化挫基 和苯并咪挫基；和
[005引 R2是氨或甲基。
[0060] 36.条款34至35的方法，其中X是C&C做畑2。
[0061] 37.条款1至36的方法，其中所述激素是合成物质。
[0062] 38.条款1至37的方法，其中所述激素是己酸盐形式。
[0063] 39.条款1至38的方法，其中所述激素是在包含凝胶的组合物中给药。
[0064] 40.条款39的方法，其中所述凝胶包含多糖。
[0065]41.条款40的方法，其中所述多糖是选自；纤维素、右旋糖酢和海藻酸盐。
[0066] 42.条款39至41的方法，其中所述凝胶包含纤维素。
[0067] 43.条款42的方法，其中所述纤维素是甲基纤维素。
[0068] 44.条款39至43的方法，其中所述凝胶包含约0. 25重量％ -约10重量％的甲基 纤维素。
[0069] 45.条款39至43的方法，其中所述凝胶包含约0.5重量％-约4.0重量％的甲基 纤维素。
[0070] 46.条款1至45的方法，其中所述激素是与稳定剂一起给药，其中所述稳定剂是 k甲硫氨酸。
[0071] 47.描述了包含一定剂量的激素的试剂盒，所述激素选自；促性腺素释放激素、促 黄体激素、人绒毛膜促性腺素和它们的组合，和使用说明书，其中所述激素是在包含凝胶的 组合物中，所述组合物具有的抑为约5-约6。
[0072] 48.条款47的试剂盒，其中所述说明书指出，应将激素在断奶后约第四天给予猪， 和该猪应在给予激素后约15-约24小时授精。
[007引 49.条款47至48的试剂盒，其中所述说明书指出，所述授精应是人工授精。
[0074] 50.条款47至49的试剂盒，其中所述说明书指出，所述授精应是通过自然配种。
[00巧]51.条款47至50的试剂盒，其中所述试剂盒还包含放置导管、用于手工给药的涂 药器或注射器。
[0076] 52.条款47至51的试剂盒，其中所述说明书指出，该猪应在给予激素后约15-约 18小时授精。
[0077] 53.条款47至51的试剂盒，其中所述说明书指出，该猪应在给予激素后约16-约 24小时授精。
[007引 54.条款47至51的试剂盒，其中所述说明书指出，该猪应在给予激素后约18-约 22小时授精。
[0079] 55.条款47至54的试剂盒，其中所述说明书指出，该猪应在给予激素后约18小时 按精。
[0080] 56.条款47至55的试剂盒，其中所述说明书指出，所述激素应经阴道内给药。
[0081] 57.条款47至56的试剂盒，其中所述说明书指出，所述激素应W为约10yg-约 1000yg的有效量给药。
[0082] 58.条款47至56的试剂盒，其中所述说明书指出，所述激素应W为约lOyg-约 500yg的有效量给药。
[0083] 59.条款47至58的试剂盒，其中所述说明书指出，所述激素应给予至阴道前部。
[0084] 60.条款47至59的试剂盒，其中所述激素是促性腺素释放激素受体激动剂。
[0085] 61.条款47至60的试剂盒，其中所述其中激素是促黄体激素受体激动剂。
[0086] 62.条款47至61的试剂盒，其中所述激素是人绒毛膜促性腺素受体激动剂。
[0087] 63.条款47至62的试剂盒，其中所述激素是曲普瑞林。
[0088] 64.条款47至63的试剂盒，其中所述激素是曲普瑞林盐。
[0089] 65.条款47至64的试剂盒，其中所述促性腺素释放激素具有式pGlu-His-hp-Se r-Tyr-G1y-Leu-Arg-Pr0-G17畑2。
[0090] 66.条款47至65的试剂盒，其中所述促性腺素释放激素受体激动剂具有式
[0091]
[0092] 或其溶剂合物、水合物或药学上可接受的盐，
[0093] 其中
[0094] Ri和R2独立地在每种情况下是氨，或是独立选自；烷基、杂烷基、环烷基、杂环烧 基、面代烷基、芳基、杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷基，其各自任选地取代，或Ri和R2与连接 的碳形成碳环或杂环；
[0095] X是氨，或X是选自；烷基、环烷基、杂烷基、任选取代的亚烷基駿酷胺；和
[0096] HNC(0)NR3r4,其中r3和R4在每种情况下独立选自：氨、烷基、杂烷基和面代烷基。
[0097] 67.条款66的试剂盒，其中Ri是亚甲基-杂芳基，其中杂芳基是选自；化晚基、唾 挫基、横胺化晚基、喀晚基、嗟咐基、化挫基、咪挫基、化咯基、嘲噪基、苯并化挫基和苯并咪 挫基讯
[009引 R2是氨或甲基。
[009引68.条款66至67的试剂盒，其中X是C&C做畑2。
[0100] 69.条款47至68的试剂盒，其中所述激素是合成物质。
[0101] 70.条款47至69的试剂盒，其中所述激素是己酸盐形式。
[0102] 71.条款47至70的试剂盒，其中所述凝胶包含糖。
[0103] 72.条款47至71的试剂盒，其中所述凝胶包含多糖。
[0104] 73.条款72的试剂盒，其中所述多糖是选自纤维素、右旋糖酢和海藻酸盐。
[0105] 74.条款47至73的试剂盒，其中所述凝胶包含纤维素。
[0106] 75.条款74的试剂盒，其中所述纤维素是甲基纤维素。
[0107] 76.条款47至75的试剂盒，其中所述凝胶包含约0.25重量％-约10重量％的甲 基纤维素。
[0108] 77.条款47至75的试剂盒，其中所述凝胶包含约0. 5重量％ -约4. 0重量％的甲 基纤维素。
[0109] 78.条款47至77的试剂盒，其进一步包含稳定剂，其中所述稳定剂是k甲硫氨 酸。
[0110]79.描述了组合物，其包含促性腺素释放激素受体激动剂和凝胶，其中所述组合物 具有的抑为约5.0-约6.0。
[0111] 80.条款79的组合物，其进一步包含防腐剂。
[0112] 81.条款79至80的组合物，其中所述防腐剂是选自；对哲基苯甲酸甲醋和对哲基 苯甲酸丙醋。
[0113] 82.条款79至81的组合物，其进一步包含稳定剂。
[0114] 83.条款82的组合物，其中所述稳定剂是心氨基酸。
[0115] 84.条款82至83的组合物，其中所述稳定剂是k甲硫氨酸。
[0116] 85.条款79至84的组合物，其中所述凝胶包含多糖。
[0117] 86.条款85的组合物，其中所述多糖是选自；纤维素、右旋糖酢和海藻酸盐。
[0118] 87.条款79至86的组合物，其中所述凝胶包含纤维素。
[0119] 88.条款87的组合物，其中所述纤维素是甲基纤维素。
[0120] 89.条款79至88的组合物，其中所述凝胶包含约0.25重量％-约10重量％的甲 基纤维素。
[0121] 90.条款79至88的组合物，其中所述凝胶包含约0.5重量％-约4.0重量％的甲 基纤维素。
[0122] 91.条款79至90的组合物，其进一步包含张度剂。
[0123] 92.条款79至91的组合物，其中所述激动剂是曲普瑞林。
[0124] 93.条款79至92的组合物，其结合使用说明书。
[0125] 94.条款93的组合物，其中与所述组合物结合的说明书指出，应将所述激动剂给 予猪，和该猪应在给予该激动剂后约15-约24小时授精一次。
[0126] 95.条款93的组合物，其中与所述组合物结合的说明书指出，应将所述激动剂给 予猪，和该猪应在给予该激动剂后约16-约22小时授精一次。
[0127] 96.条款93的组合物，其中与所述组合物结合的说明书指出，应将所述激动剂给 予猪，和该猪应在给予该激动剂后约18-约22小时授精一次。
[012引 97.条款93至96的组合物，其中所述说明书指出，猪应在给予该激动剂后约18-2 约22小时授精一次
[0129] 98.条款79至97的组合物，其中所述促性腺素释放激素受体激动剂是促性腺素释 放激素，和其中所述促性腺素释放激素具有式pGlu-His-T;rp-Se;r-Ty;r-Gly-Leu-Arg-P;r〇-G lyN&D
[0130] 99.条款79至98的组合物，其中所述促性腺素释放激素受体激动剂具有式
[0131]
[0132] 或其溶剂合物、水合物或药学上可接受的盐，
[0133] 其中
[0134]Ri和R2独立地在每种情况下是氨，或是独立选自；烷基、杂烷基、环烷基、杂环烧 基、面代烷基、芳基、杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷基，其各自任选地取代，或Ri和R2与连接 的碳形成碳环或杂环；
[0135]X是氨，或X是选自；烷基、环烷基、杂烷基、任选取代的亚烷基駿酷胺；和
[0136]HNC(0)NR3R4,其中R3和R4在每种情况下独立选自：氨、烷基、杂烷基和面代烷基。
[0137] 100.条款99的组合物，其中Ri是亚甲基-杂芳基，和其中杂芳基是选自：化晚基、 唾挫基、横胺化晚基、喀晚基、嗟咐基、化挫基、咪挫基、化咯基、嘲噪基、苯并化挫基和苯并 咪挫基讯
[0138] R2是氨或甲基。
[01測 101.条款99至100的组合物，其中X是C&C做畑2。
[0140] 102.条款79至101的组合物，其中所述促性腺素释放激素受体激动剂为约 10yg-约1000yg的有效量。
[0141] 103.条款79至101的组合物，其中所述促性腺素释放激素受体激动剂为约 lOyg-约500yg的有效量。
[0142] 104.条款79至103的组合物，其包含对哲基苯甲酸甲醋、对哲基苯甲酸丙醋、氯化 钢、巧樣酸钢、L-甲硫氨酸、巧樣酸、曲普瑞林和甲基纤维素。
[0143] 105.条款79至104的组合物，其中所述组合物包含对哲基苯甲酸甲醋的量为 约0.09%重量每体积，对哲基苯甲酸丙醋的量为约0.01 %重量每体积，氯化钢的量为约 0. 91 %重量每体积，巧樣酸钢的量为约0. 186%重量每体积，L-甲硫氨酸的量为约0. 1 %重 量每体积，巧樣酸的量为约0. 07%重量每体积，曲普瑞林的量为约0. 01 %重量每体积，和 甲基纤维素的量为约1. 2%重量每体积。
[0144] 附图简述
[0145] 图1表明在断奶后96+/-2小时给予治疗（0-小时）后排卵母猪的百分率。
[0146] 图2表明在0-4°C(S角形）、30°C(四方形）和50°C(菱形）下13天后的曲普 瑞林稳定性。
[0147] 例证性实施方案详述
[0148] 在一实施方案中，描述了没有发情检测的同步猪授精时间的方法。所述方法包含 在断奶后第四天将一定剂量激素给予猪的步骤，所述激素选自；促性腺素释放激素、促黄体 激素、人绒毛膜促性腺素和它们的组合，其中该猪只在给予激素后约15-约24小时授精一 次，且其中没有发情检测。
[0149] 在一实施方案中，描述了包含一定剂量的激素的试剂盒，所述激素选自；例如，促 性腺素释放激素、促黄体激素、人绒毛膜促性腺素和它们的组合。在另一实施方案中，所述 试剂盒还包含使用说明书。在另一实施方案中，所述激素在如本文描述的包含凝胶的组合 物中。所述组合物典型的抑为约5-约6,但该抑的范围可为约4-约9。
[0150] 在一实施方案中，描述了包含促性腺素释放激素受体激动剂的组合物。在另一实 施方案中，描述了所述组合物还包含凝胶。所述组合物典型的抑为约5-约6,但该抑的范 围可为约4-约9。
[0151] W下描述的所有例证性实施方案、其变体和其备选形式将用于之前在详述部分中 的段[001引至[0017]所描述的实施方案和用于发明简述中描述的实施方案。
[0152] 没有发情检测的同步猪授精的时间的方法，包括将一定剂量的激素给予猪的步 骤，所述激素为，例如，促性腺素释放激素、促黄体激素、人绒毛膜促性腺素；促性腺素释放 激素、促黄体激素或人绒毛膜促性腺素的衍生物或类似物；或它们的组合物。根据一实施方 案，将所述激素给予猪。任何猪的种类可W用于本文描述的方法和给予本文描述的组合物， 例如，包括青春期小母猪的小母猪（即第一次交配前的雌性猪），和母猪（包括产后母猪）， 或任何其它类型的猪。
[0153] 例证性的，如文本描述的那样，猪在0天断奶。在断奶后4天（即断奶后第四天）， 动物典型地接受单一剂量的激素。接受治疗的动物典型地在予给激素后15小时（或15 小时±2小时）、16小时（或16小时±2小时）、17小时（或17小时±2小时）、18小时 (或18小时±2小时）、19小时（或19小时±2小时）、20小时（或20小时±2小时）、 21小时（或21小时±2小时）、22小时（或22小时±2小时）、23小时（或23小时±2 小时）、24小时（或24小时±2小时）、27小时（或27小时±2小时）或30小时（或30 小时±2小时）授精单次。
[0154] 动物配种可通人工授精（AI)的任何方式或通过自然配种。在本文描述的任何实 施方案中，可进行第二次配种或随后的配种。然而在另一个实施方案中，猪只授精一次。在 另一例证性方面，没有发情检测。在另一方面，在给予激素和排卵后48小时之间没有发情 检测。
[0155] 在本文描述的任何实施方案中，所述激素是在（例如）断奶后第四天即断奶后约 96小时给予。在各种例证性实施方案中，所述激素可在断奶后例如约80、约82、约84、约 86、约 88、约 90、约 91、约 92、约 93、约 94、约 95、约 96、约 97、约 98、约 99、约 100、约 102、约 104或约108小时给予。更典型的，将所述激素在断奶后约94-约98小时给予，即断奶后 约94、约95、约96、约97或约98小时。在另一实施方案中，将所述激素在断奶后约92-约 106小时给予。
[0156] 在本文描述的任何实施方案中，例如，在给予激素后约15-约24小时给猪授精一 次。在各种进一步的例证性实施方案中，猪在给予激素后约15-约18小时，在给予激素后 约13-约18小时、约15-约2 0小时或约13-约20小时授精。在其他例证性方面，猪在给 予激素后约13小时、约14小时、约15小时、约16小时、约17小时、约18小时、约19小时、 约20小时、约21小时、约22小时、约23小时或约24小时授精。例证性的，猪在给予激素 后约15小时、约18小时、约20小时、约22小时或约24小时授精。
[0157]在本文描述的任何实施方案中，相对于未给予激素的猪（例如给予其安慰剂），所 述猪的怀孕率可增大。例如，激素治疗的动物中怀孕率可W是约75%-约90%。在另一实 施方案中，相对于未给予激素的猪（例如给予其安慰剂），所述猪的胎仔数增大。例如激素 治疗的动物中典型的胎仔数可W是每次怀孕约20-约24胎。在另一实施方案中，激素治疗 的动物中胎仔数可W是每次怀孕约14-约18、约14-约24或约14-约20胎。然而在另一 实施方案中，相对于未给予激素的猪（例如给予其安慰剂），在给予激素后约48小时，排卵 的猪的百分率可增大。例如，在给予激素后约48小时，排卵的动物的百分率可为约65%-约 85%。
[015引在本文描述的其他实施方案中，相对于未给予激素的猪，键康胎的总数可增大。例 如，激素治疗的动物的健康胎的数量可为约9-约18、约9-约16、约9-约14或约9-约12。 在本文描述的其他实施方案中，当与未给予激素的猪相比时，激素治疗的动物的产仔百分 率可增加。例如，激素治疗的动物的产仔百分率可为约76% -约90%、约76% -约85%或 约76% -约80%。在本文描述的其他实施方案中，相对于未给予激素的猪，激素治疗的动物 的出生小猪的总数可增大。例如，出生小猪的数量可为约13-约18、约13-约17、约13-约 16、约13-约15或约13-约14。在本文描述的任何实施方案中，对于激素治疗动物，猪的怀 孕率、猪的胎仔数、健康胎的总数、产仔百分率和出生小猪的总数可与依靠发情检测授精的 动物相似。
[0159]在本文描述的任何实施方案中，相对于未给予激素的猪，每一精液剂量的出生小 猪总数可增大，并且相对于依靠发情检测授精的动物，每一精液剂量的出生小猪总数可增 大。例如，每一精液剂量的出生小猪总数可为约6、约7、约8、约9、约10、约11、约12、约14、 约16、约18或约20。在本文描述的任何实施方案中，相对于未给予激素的猪，小猪指数（出 生存活小猪/分配的100母猪）可增加，并且相对于依靠发情检测授精的动物，小猪指数可 增加。
[0160]在本文描述的任何实施方案中，用于没有发情检测的同步猪授精的时间的组合物 包含；a)激素；和b)药学上可接受的抑缓冲剂，W提供范围为约抑4-约抑9的抑。本 文描述的组合物的抑可在为从约4-约9的范围内。在其他实施方案中，所述抑可在范围 为约4-约8、约4-约7、约4. 5-约6. 5、约4. 5-约6或约5-约6。
[0161]此外，所述激素组合物根据剂型可通过常规方法生产，所述常规方法通过适当 地混合、稀释或溶解进添加剂，比如各种赋形剂、崩解剂、粘合剂、盐类、润滑剂、局部麻醉 药（例如利多卡因）、稀释剂、防腐剂（preservative)、聲合剂、缓冲剂、张度剂、抗菌剂 (antiseptiCagent)、湿润剂、乳化剂、分散剂、稳定剂、助溶剂或它们的组合。
[0162]例证性地，包含激素的组合物可W是凝胶形式，该组合物可W具有粘度为约 10 (厘泊）cP-约300,OOOcP。在各种的例证性实施方案中，组合物的粘度可为约lOOcP-约 100,OOOcP、约 250cP-约 400cP、约 300cP-约 400cP、约 500cP-约 100,OOOcP、约 700cP-约 100,OOOcP、约 200cP-约 20,OOOcP、约 200cP-约 10,OOOcP、约 200cP-约 5,OOOcP、约 200-约 1，OOOcP、约 200cP-约 600cP、约lOOcP-约 600cP、约lOOcP-约 500cP、约 200cP-约 500cP、 约200cP-约450cP或约100,OOOcP-约250,OOOcP。根据本文描述的各种实施方案，组合 物的粘度可为约 200cP、约 250cP、约 300cP、约 400cP、约 500cP、约 1，OOOcP、约 15,OOOcP、 约 20,OOOcP、约 30,OOOcP、约 40,OOOcP、约 50,OOOcP、约 75,OOOcP、约 100,OOOcP、约 200,OOOcP或约300,OOOcP。溶液的粘度可用粘度计（比如流变计）基于本技术领域已知 技术测量。
[0163] 典型地，本文描述的凝胶包含：约0. 001-约3. 0%重量/重量（w/w)的激素或它 的盐，更典型地约0.5-5. 0 % (w/w)或约0.1-5. 0% (w/w)的激素或它的盐，防腐剂，凝胶 (即粘性调节剂），用W保持抑在约5-约6之间的缓冲剂，和用W保持张度在约200-约 400m0sm/kG之间的张度剂。
[0164] 根据本文描述的任何实施方案，所述组合物有充分的粘性W使得组合物保持吸附 在祀组织足够时间W释放有效量的激素。例如，典型粘度依赖（比如）例如应用的激素的 渗透率和激素的数量的因素。适用的粘度调制剂包括（但不限制于）；离子或非离子水溶性 聚合物；交联的丙締酸聚合物；亲水聚合物比如聚氧化己締、聚氧己締-聚氧丙締共聚物和 聚己締醇；纤维素聚合物和纤维素聚合物衍生物比如哲丙基纤维素、哲己基纤维素、哲丙基 甲基纤维素、苯二甲酸哲丙基甲基纤维素醋、甲基纤维素、駿甲基纤维素和離化纤维素；胶 比如黄著胶和黄原胶；海藻酸钢；明胶、透明质酸和其盐类、壳聚糖、胶凝糖或它们的任何 组合。
[0165] 所述粘度调制剂可W是凝胶、糊状、乳膏、软膏等形式。在一实施方案中，所述组合 物包含激素和凝胶，所述凝胶作为粘度调节剂，和所述激素在包含所述凝胶的组合物中给 药。在一实施方案中，所述凝胶是水凝胶、脂质体凝胶（lipogel)或粘稠的溶液。在另一实 施方案中，所述凝胶是水凝胶。所述凝胶可W用任何本技术领域已知的方法制备，例如，比 如在美国专利号6, 908, 623和7, 456, 207中描述的那些，其通过引用结合到本文中。
[0166] 在本文描述的任何实施方案中，所述凝胶（即粘度调节剂）包含多糖。根据本文 描述的方法和组合物，多糖可包括（例如）海藻酸盐和葡萄糖，比如糖原、淀淀（例如直链 淀粉和支链淀粉）、纤维素和右旋糖酢。所述多糖可W是（例如）甲基、己基或丙基纤维素 醋、離、哲基離、哲基烷基或哲基醋。为达到需要的粘度，可W使用足量的一种或多种多糖。 典型地，约0.25-约10重量％的多糖（基于组合物的总重量）是合宜的。在另一实施方案 中，多糖的重量％为约0. 25重量％ -约3. 0重量％、约1. 0重量％ -约7重量％、约1. 0重 量％ -约4. 0重量％或约1. 0重量％ -约2. 0重量％。在其他实施方案中，多糖的重量％为 约 0. 1%、约 0. 5%、约 0. 75%、约 0. 8%、约 0. 9%、约 1. 0%、约 1. 1%、约 1. 2%、约 1. 4%、约 1. 8%、约2. 0%、约5%、约8%或约10% (所有均W重量/重量计）。为增加组合物的粘度， 所述多糖可与一种或多种本技术领域已知的非多糖增粘剂一起使用。可与一种或多种多糖 一起使用的可能的非多糖增粘剂的例子包括黄原胶、海藻酸和其盐、娃酸儀侣、糊精类、庶 糖和其衍生物和它们的混合物。非多糖增粘剂（如果存在）的量可为约0. 1重量％ -约10 重量％，该随需要的粘度而定。
[0167] 在本文描述的任何实施方案中，所述凝胶包含纤维素。本文描述的例证性实施方 案的纤维素包括甲基纤维素、己基纤维素、哲丙基纤维素、駿甲基（carbomethyl)纤维素、 哲丙基甲基纤维素和哲己基甲基纤维素。所述纤维素可W是纤维素衍生物，优选非离子纤 维素醋、離、哲基離或哲基醋，或非离子淀粉衍生物。典型地，合宜的纤维素为约0. 25重 量％-约10重量％ (基于组合物的总重量）。在另一实施方案中，纤维素的重量％为约0.25 重量％ -约3. 0重量％、约0. 5重量％ -约3. 0重量％、约0. 5重量％ -约4. 0重量％、约 1. 0重量％ -约7重量％、约1. 0重量％ -约4. 0重量％或约1. 0重量％ -约2. 0重量％。 在其他实施方案中，纤维素的重量％为约0. 1 %、约0. 5 %、约0. 75 %、约0. 8 %、约0. 9 %、约 1. 0%、约 1. 1 %、约 1. 2%、约 1.4%、约 1.8%、约 2.0%、约 5%、约 8%或约 10% (全部W 重量/重量计）。如果需要均匀的凝胶，可加入分散剂比如醇、山梨醇或甘油，或可通过粉碎 (ti化ration)、机械混合或揽拌或它们的组合来分散胶凝剂。
[0168] 用于描述的方法和组合物的可接受的稳定剂包括k氨基酸和k甲硫氨酸。在其 他实施方案中，可使用的稳定剂包括（但不限制于）；多糖（比如阿拉伯胶、琼脂、海藻酸、 瓜尔胶和黄著胶）、明胶和合成和半合成的聚合物（比如卡波姆树脂、纤维素離类和駿甲基 壳多糖）。所述稳定剂的量通常为约0. 05-约10%、约0. 05-约5%、约0. 05-约2. 0%、约 0. 05-约 1.0%、约 0.05-约 0.5%、约 0.05-约 0.2%、约 0. 1-约 5%、约 0. 1-约 10%、约 0.1-约20%、约1-约5%、约1-约10%、约1-约20% (全部W重量/体积计）。在一实 施方案中，在本文描述的稳定剂存在下，所述组合物的贬存期限可为至少12个月、至少18 个月或至少24个月。在另一实施方案中，所述组合物的贬存温度范围可为约2°C-约8°C。 还可包括惰性载体，比如乳糖、淀粉、糊精、磯酸二巧、和硫酸巧。在包括稳定剂的一实施方 案中，所述组合物是化学稳定的，并保持至少99%纯度、至少99. 5%纯度或至少99. 7%纯 度至少S个月。
[0169] 所述张度剂可W是非离子的或离子的。例证性地，使用于描述的方法和组合物的 可接受的张度剂包括，例如，离子试剂，比如氯化钢、氯化钟或平衡盐溶液。根据一实施方 案，张度剂W达到约 200-400m0sm/kG、约 220-380m0sm/kG或约 250-340m0sm/kG张度的量 存在。非离子张度剂包括二醇，比如甘油、甘露醇、赤薛醇、聚己二醇、丙二醇；和糖类，比如 庶糖和右旋糖。张度剂的量通常为约0. 05-约10%、约0. 05-约5%、约0. 05-约2. 0%、 约 0. 05-约 1. 0%、约 0. 05-约 0. 5%、约 0. 05-约 0. 2%、约 0. 1-约 5%、约 0. 1-约 10%、 约 0. 1-约 20 %、0. 5-约 2. 0 %、约 0. 6-约 2. 0 %、约 0. 5-约 1. 8 %、约 0. 6-约 1. 8 %、约 1.0-约5.0%、约1.0-约10%或约1.0-约20% (全部W重量/体积计）。
[0170] 在本文描述的任何实施方案中，用于本文描述的组合物和方法的抑缓冲剂是 技术人员公知作为抑缓冲剂或组合物的那些，并包括，例如，己酸盐、棚酸盐、碳酸盐、巧 樣酸盐和磯酸盐缓冲液，W及各种生物学缓冲液，例如，TAPS、N，N-二（哲己基）甘氨酸 炬icine)、S哲甲基氨基甲烧（Tris)、N-S(哲甲基）甲基甘氨酸（Tricine)、肥阳S、TES、 M0PS、PI阳S、二甲肿酸盐和MES。其他抑缓冲剂包括盐酸、氨氧化钢、氧化儀、磯酸二氨钟、 碳酸氨盐、氨、碳酸、巧樣酸钢、巧樣酸、己酸、磯酸氨二钢、棚砂、棚酸等。缓冲剂的量通常为 约 0. 01-约 10%、约 0. 02-约 10%、约 0. 02-约 5%、约 0. 02-约 2. 0%、约 0. 02-约 1. 0%、 约 0. 02-约 0. 5 %、约 0. 05-约 10. 0 %、约 0. 05-约 1. 0 %、约 0. 05-约 0. 5 %、约 0. 05-约 0. 2%、约 0. 1-约 5%、约 0. 1-约 10%、约 0. 1-约 20%、约 1-约 5%、约 1-约 10%、约 1-约 20% (全部W重量/体积计）。
[017。 用于本文描述的配方的缓冲剂可W获得要求的抑范围所需的任何浓度使用。例 如，缓冲剂可下浓度使用：约0.001M-约1M、约0.001M-约2M、约0.001M-约5M、约 0. 05M-约 0. 1M、约 0. 05M-约 0. 2M、约 0. 05M-约 1M、0. 05M-约 2M、约 0. 05-约 5M、约 0. 1M-约 IM、约0.IM-约2M、约0.IM-约5M。获得要求的抑范围所需的缓冲剂的任何的量可用于 本文描述的配方。典型地，药学上可接受的抑缓冲剂可用于提供抑范围为约抑4-约抑 9。本文描述的组合物的抑的范围可W为约3-约10或约4-约9。在本文描述的任何实施 方案中，所述抑范围可为约4-约8、约4-约7、约4. 5-约6. 5、约4. 5-约6、约5-约6、约 5-约5. 5、约4-约6或约4. 5-约5. 5。
[0172] 在本文描述的任何实施方案中，本文描述的组合物包含一种或多种药学上可接 受的防腐剂。如本文所用的那样，术语"防腐剂"包括试剂或试剂组合物，其有助于稳定 组合物、抑制微生物生长，或两者。适用的防腐剂的例子包括对哲基苯甲酸醋类（例如对 哲基苯甲酸的甲基、己基、丙基和了基醋）、没食子酸丙醋、山梨酸和它的钢盐和钟盐、丙酸 和它的巧盐和钢盐、"二曠英"化-己酷氧基-2, 4 -二甲基-间-二氧六环）、"漠硝丙二 醇"(2-漠-2-硝基丙烷-1，3-二醇）和水杨酷苯胺类（比如二漠水杨酷苯胺、=漠水杨酷苯 胺）、"Cina巧r'lOO和 200 或"Dowicir'lOO和 200 (1- (3-氯締丙基-3, 5, 7-S氮杂-1-氮 鐵金刚烧（azanidadamantane)氯化物的顺式异构体）、六氯酪、苯甲酸钢、巧樣酸、己二胺 四己酸和它的碱金属和碱±金属盐、了哲茵離、了哲甲苯、酪类化合物（比如氯代-和漠代 甲酪和氯代-和漠代-二甲酪（oxylenol))、季胺化合物（如苯扎氯锭）、芳香醇（比如苯 己醇、苯甲醇等）、氯了醇、嗟咐衍生物（比如舰氯代哲基嗟咐）等。当防腐剂存在时，总量 为约0. 005重量％ -约2重量％、约0. 001重量％ -1. 0重量％、约0. 005重量％ -约0. 25 重量％或约0. 05重量％ -约0. 2重量％，典型的为约0. 01重量％ -约0. 1重量％ (全部 W重量/重量计）。
[0173] 在本文描述的任何实施方案中，药用的组合物含有馨合剂，比如在本技术领域技 术人员公知的那些，例如，己二胺四己酸盐（邸TA)、二己締S胺五己酸值TPA)和N，N-二 (駿甲基）甘氨酸（NTA)或它们的盐。所述组合物可含有约0.003重量％-约1.0重量％、 约0. 02重量％ -约0. 2重量％、约0. 01重量％ -约1. 0重量％或约0. 02重量％ -约0. 5 重量％(全部W重量/体积计）的馨合剂。
[0174] 在本文描述的任何实施方案中，在本文描述的组合物中可包括抗微生物剂。该样 的剂可包括（但不限制于）5-氯-2-(2, 4-二氯苯氧基）-苯酪、8-哲基嗟咐、铜II化合 物、苯二甲酸、氯己定、阿来西定、海克替晚、血根碱、苯扎氯锭、水杨酷苯胺、漠化度米芬、西 化氯锭、十四基氯化化晚、N-十四基-4-己基氯化化晚、奥替巧晚、舰、横胺类、双缩二脈类 化isbiguanide)、酪类化合物、地莫匹醇、辛嗽醇和其他嗽晚基衍生物，和烟酸制备物、任何 适用的抗生素比如力百汀、阿莫西林、四环素、多西环素、米诺环素、甲硝化挫、新霉素、卡那 霉素和克林霉素，和适用的该些任何化合物的任何盐，和该些化合物的任何组合。然而在 另一实施方案中可包括抗真菌化合物，其单独或与任何上述抗微生物剂组合。适用于本文 描述的组合物的抗真菌剂包括（但不限制于）；制霉菌素、咪康挫、硝酸益康挫、克霉挫和 氣胞喀晚。可加入到本文描述的配方中的抗微生物或抗真菌剂的量为约0. 01-约10%、约 0. 01-约 5%、约 0. 01-约 2. 0%、约 0. 01-约 1. 0%、约 0. 01-约 0. 5%、约 0. 01-约 0. 2%、 0. 05-约 10 %、约 0. 05-约 5 %、约 0. 05-约 2. 0 %、约 0. 05-约 1. 0 %、约 0. 05-约 0. 5 %、 约 0. 05-约 0. 2%、约 0. 1-约 5%、约 0. 1-约 10%、约 0. 1-约 20%、约 1-约 5%、约 1-约 10%、约1-约20% (全部W重量/体积计）。
[01巧]在本文描述的任何实施方案中，还可加入抗氧化剂。例如，本文用的抗氧化剂包 括e-胡萝h素、维生素E、维生素C、维生素A、生育酪、了哲甲苯、了哲茵離、叔了基对苯二 酪、没食子酸丙醋、抗坏血酸、偏亚硫酸氨钢、尿酸、类胡萝h素类、黄酬类化合物、稱黑激素 和己氧嗟。抗氧化剂可W下述的量加入本文描述的配方中；约0.01-约10%、约0.01-约 5%、约0.01-约2.0%、约0.01-约1.0%、约0.01-约0.5%、约0.01-约0.2%、0.05-约 10 %、约 0. 05-约 5 %、约 0. 05-约 2. 0 %、约 0. 05-约 1. 0 %、约 0. 05-约 0. 5 %、约 0. 05-约 0. 2%、约 0. 1-约 5%、约 0. 1-约 10%、约 0. 1-约 20%、约 1-约 5%、约 1-约 10%、约 1-约 20% (全部W重量/体积计）。
[0176] 如本文所描述的那样，所述组合物含有激素，其选自，例如，促性腺素释放激素、促 黄体激素、人绒毛膜促性腺素、它们的衍生物或类似物，和它们的组合，当在本文描述的方 法中使用时，按有效地同步猪授精时间的量使用，没有发情检测。其他用于本文描述的方法 和组合物的可接受的激素的例子包括；前列腺素、孕激素、孕酬、雄激素、睾酬、雌激素、雌二 醇、促性腺素、它们的衍生物或类似物、它们的组合等。所述激素可W为己酸盐形式。此外， 所述激素可W是促性腺素释放激素、促黄体激素或人绒毛膜促性腺素激动剂，或促性腺素 释放激素、促黄体激素或人绒毛膜促性腺素括抗剂。如本文所用的那样，"促性腺素释放激 素"指的是任何促性腺素释放激素，包括促性腺素释放激素类似物和衍生物，和促性腺素释 放激素激动剂和括抗剂。在一实施方案中，所述促性腺素释放激素可W是合成物质。在另 一实施方案中，所述促性腺素释放激素可W是GnRH(pGlu-His-T;rp-Se;r-Ty;r-Gly-Leu-Arg-Pro-GlyNHs)(例如见美国专利号5, 688, 506,其通过引用结合到本文中）或曲普瑞林。如本 文所用的那样，"促黄体激素"指的是任何促黄体激素，包括促黄体激素类似物和衍生物和 促黄体激素激动剂和括抗剂。在一实施方案中，所述促黄体激素可为合成物质。在另一实 施方案中，所述促黄体激素可W是LH(例如见美国专利号5, 444, 167,其通过引用结合到本 文中）。如本文所用的那样，"人绒毛膜促性腺素"指的是任何人绒毛膜促性腺素，包括人绒 毛膜促性腺素类似物和衍生物，和人绒毛膜促性腺素激动剂和括抗剂。在一实施方案中，所 述人绒毛膜促性腺素可W是合成物质。在另一实施方案中，所述人绒毛膜促性腺素可W是 hCG(例如见U.S.专利号6, 469, 139、4, 400, 316和4, 804, 626,其通过引用结合到本文中）。
[0177] 用于本文的促性腺素释放激素激动剂的例子包括（但不限制于）；亮丙瑞林 (leuprolide)、那法瑞林、布舍瑞林、[DAla6,去Gly-N&iiGnRH、[DLys6]GnRH, [DAla6]GnRH、 巧-Me-Ala6]GnRH、[D-a-氨基了酷基6,去-GlyN&iiGnRH、曲普瑞林、黄体瑞林、戈舍瑞林、 地洛瑞林和组氨瑞林。通常，促性腺素释放激素激动剂模仿天然促性腺素释放激素十肤，典 型地在6和10位由特定氨基酸置换而塑造的。曲普瑞林是促性腺素释放激素激动剂的一 个例子，其只在6-位单一置换。
[017引促性腺素释放激素括抗剂的例子包括安肤（用式D-Ac-D-2-Nali-DpClPhe2-D-3-P al3-Ser4-NiLys5-D-NicLys6-Leu7-ILys8-Pr09-D-Alai°表示的十肤）、[Ac-D4ClDPhe1，D4C1D Phe2,DTrp3,DArgS,DAlaW]GnRH、[Ac-4ClDPhe2, 化 13,ArgS,化化 16,DAlai°]GnRH、[Ac-D2-化 1 1，4ClDPhe2,DT巧3,DArgS,DAlaW]GnRH、[Ac-D2化 4抑化e2,DhpS,DArg6]GnRH、[Ac-D2化li ，4ClDPhe2,DT巧3,DMrg巧t2)e，DAlaW]GnRH和[Ac-化4,DME4ClPhe2,DPal],Se/，TyfS,DArg 6,Le7,ILys?,Pr〇9,DAlai°]GnRH。
[0179] 在本文描述的任何实施方案中，描述了下式的促性腺素释放激素激动剂
[0180]
[0181]或其溶剂合物、水合物或药学上可接受的盐的用途，
[0182] 其中
[0183]R1和R2独立地在每种情况下是氨，或是独立选自；烷基、杂烷基、环烷基、杂环烧 基、面代烷基、芳基、杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷基，其各自任选地取代，或Ri和R2与连接 的碳形成碳环或杂环；和
[0184]X是氨，或X选自；烷基、环烷基、杂烷基、任选取代的亚烷基-駿酷胺，和HNC(O) NR3R4,其中R3和R4在每种情况下独立选自：氨、烷基、杂烷基和面代烷基。
[0185] 在另一实施方案中，描述了上述用途，其中Ri是亚甲基-杂芳基，其中杂芳基是选 自：化晚基、唾挫基、横胺化晚基、喀晚基、嗟咐基、化挫基、咪挫基、化咯基、嘲噪基、苯并化 挫基和苯并咪挫基；和R2是氨或甲基。
[0186] 在又一实施方案中，描述了之前描述的任一用途，其中X是CH2C(0)NH2。
[0187] 本文所用的促性腺素释放激素激动剂和括抗剂及其类似物，比如上式描述的类似 物，可按药学可接受的无毒盐或复合物形式给药。所述盐包括酸加成盐，比如盐酸化物、氨 漠化物、硫酸盐、磯酸盐、硝酸盐、草酸盐、延胡索酸盐、葡糖酸盐、踩酸盐、马来酸盐、己酸 盐、苯甲酸盐、班巧酸盐、海藻酸盐、苹果酸盐、抗坏血酸盐、酒石酸盐等。所述复合物可W带 有金属，比如锋、领、巧、儀、侣等。
[018引用于根据本文描述的方法和组合物中的激素的有效的量随许多参数而定，包括激 素的分子量、它的给药途径，和它是否在它的天然形式。在本文的描述中，激素的"有效量" 是通过使用本文描述的方法足W同步猪的授精时间而没有发情检测的量。给予猪的激素的 有效量可在W下范围：约10yg-约2000yg、约10yg-约1000yg、约10yg-约500yg、 约 10yg-约 100yg、约 10yg-约 50yg、约 50yg-约 2000yg、约 50yg-约 1000yg、 约 50yg-约 500yg、约 50yg-约 300yg、约 50yg-约 200yg、约 100yg-约 200yg、约 100yg-约 300yg、约 100yg-约 500yg、约 100yg-约 1000yg、约 200yg-约 2000yg 或约0. 05mg-约50mg。在各种例证性方面，给予猪的激素的剂量为约20yg、约50yg、 约 75yg、约 100yg、约 150yg、约 180yg、约 200yg、约 225yg、约 250yg、约 300yg、约 400yg、约500yg、约750yg、约1000yg、约1500yg或约2000yg的激素。所述激素可W 一个或多个剂量给药。
[0189]在本文描述的组合物中的激素可W按浓度为约50^3/1111^-约500yg/mL、约 50yg/mL-约 400yg/mL、约 50yg/mL-约 300yg/mL、约 50yg/mL-约 200yg/mL、约 50yg/ 血-约150yg/mL、约50yg/mL-约250yg/mL，或约100yg/mL给药。所述组合物可W按各 种体积给药，例如包括为1血、2血、3血、4mL或5血的剂量体积。
[0190] 在本文描述的任何实施方案中，所述激素是根据本文描述的方法，按有效地刺激 卵泡排卵和有效地同步排卵的量给药。该剂量的激素可W应用选自W下的方法给药；1)放 置导管的使用，2)手工给药，3)注射，或任何其他本领域已知用于给予药用组合物的手段， 例如，任何其他本领域已知用于阴道给予药用组合物（比如包含激素的组合物）的手段。在 一实施方案中，所述激素可W给予多于一只的猪。
[0191] 用于有效激素给药的方法的例子，除了阴道给药外，包括肠胃外给药至动物，例 如，皮下、肌内、腹膜内、銷内或静脉内给药，或与可接受的载体结合。肠胃外给药的适用方 法包括针（包括显微操作针）注射、无针注射和灌输技术。用于本发明的肠胃外组合物可 W是可复水的冻干形式，其包含一个或多个剂量的激素组合物。肠胃外剂型的例子包括所 述组合物处在公知的可接受的液体载体中的水溶液，比如液体醇类、二醇类（例如聚己二 醇）、葡萄糖溶液（例如，5% )、醋类、酷胺类、无菌水、缓冲盐水（包括缓冲剂如磯酸盐或己 酸盐；例如等渗盐水）。
[0192] 在本文描述的任何实施方案中，可W将所述组合物给予至动物的局部。用于本文 的局部给药方法的例子包括；表面、阴道内和直肠内给药。用在本实施方案的剂型的例子包 括乳膏剂、软膏、凝胶、糊剂、粉剂、洗剂、透皮贴剂、子宫内装置、阴道环和阴道片剂。在一例 证性实施方案中，将所述组合物给予至动物的阴道前部。所述化合物还可配制成阴道的或 直肠的组合物比如栓剂，例如，包含一般的栓剂基质，比如可可豆脂、碳蜡、聚己二醇类或其 他甘油醋，其全部在体温下烙融，而在室温下固化。
[0193] 可通过任何有用的程序和可用任何有效剂量和适用的剂型，包括本技术领域已知 的口服剂型，比如丸剂、片剂或胶囊将激素给予动物，并可将有效剂量按标准剂型或缓释剂 型给药。缓释剂型配方包括延缓的、持续的、脉冲的、受控的、定向的和程序性的释放配方。
[0194] 所述组合物还可包含适合的固体或凝胶相载体或赋形剂。该样的载体或赋形剂的 例子包括（但不限制于）碳酸巧、磯酸巧、各种糖、淀粉、纤维素衍生物、明胶和聚合物（比 如聚己二醇类）。
[0195] 在本发明的另一例证性方面，提供试剂盒。所述试剂盒包含一个剂量或多个剂量 的本文描述的激素。在本实施方案中，所述试剂盒还可包含用于手工给药的涂药器、放置导 管和/或用于将激素组合物施用于动物的注射器。在另一实施方案中，所述激素在包含本 文描述的凝胶的组合物中。在一例证性实施方案中，所述试剂盒可包含分开的激素和凝胶， 用W在给予动物前混合。在另一实施方案中，所述试剂盒包含在容器中混合的激素和凝胶， 用于直接给药。
[0196] 而在另一实施方案中，所述试剂盒含有使用说明书。所述说明书可指出，所述授精 应通过自然配种；所述授精应通过人工授精；所述猪应在给予激素后约15-约18、约18-约 22或约15-约24小时授精，或猪应在给予激素后约15、约16、约17、约18、约19、约20、 约21、约22、约23、约24或约30小时授精。其他适用的试剂盒成分包括；赋形剂、崩解剂、 粘合剂、盐类、润滑剂、局部麻醉药（例如利多卡因）、稀释剂、防腐剂、馨合剂、缓冲剂、张度 剂、抗菌剂、湿润剂、乳化剂、分散剂、稳定剂等。该些成分可W是分开可用或是在必需时与 激素和/或凝胶混合。本文描述的任何激素实施方案和任何组合物实施方案可用于配制试 剂盒。
[0197]在另一实施方案中，提供制造的物品。所述制造的物品可包含本文描述的任何组 合物。所述组合物可W处在主容器中，例如，玻璃管瓶（比如带橡皮塞和/或揭开性侣封口 的栋色玻璃管瓶）。在另一实施方案中，所述主容器可W是塑料的或是侣的，和该主容器可 被封口。在另一实施方案中，所述主容器可W包含在第二容器内，W进一步保护组合物免受 光照。所述第二容器可W是（例如）卡纸板。该些实施方案的任一个还可用于上述的试剂 盒实施方案，并且本文描述的激素和组合物实施方案中的任一个都可用于制造的物品。 实施例 阳19引连施例1 阳19引研究巧计巧治抒紀
[0200] 用约120只产次为一至走的母猪（每治疗组内30只母猪）W获得排卵和生殖道 数据。所有的母猪是相同基因型（PICC22)。在哺乳的16-24天，根据哺乳的长度和产次将 母猪分区，并随机分配到四个治疗组之一 ；1)安慰剂组，其在断奶后96±2小时接受安慰剂 凝胶和在其后24小时接受单次AI，2)在断奶后96 + 2小时接受曲普瑞林凝胶和其后18-20 小时接受AI。3)在断奶后96 + 2小时接受曲普瑞林凝胶和其后24-26小时接受AI，和4) 在断奶后96±2小时接受曲普瑞林凝胶和其后30-32小时接受AI。安慰剂配方与活性配方 相同但没有激素存在。将所有治疗物放置进入阴道前部宫颈2cm内。在治疗后24、32、40、 48和56小时用超声实时显像监测卵泡发育和排卵。在授精后=十（30)天，将所有猪屠宰 并且获取生殖道。测定怀孕率和胚胎存活。
[0201] 连施例2 阳20引试輪物质
[0203]活性成分为曲普瑞林（pGlu-His-T;rp-Se;r-Ty;r-D-T;rp-Leu-Arg-P;r〇-Gly-畑2)，其W己酸盐形式（分子量；1371. 6)提供，其来自Bachem，Torrance,CA(目 录号H-4075CGMP级）。曲普瑞林凝胶（200yg/2血），批次054023833-1，由Chem L油oratoriesLtd(Auckland，NewZealand)配制，其处于由在巧樣酸钢、pH5. 5 中的 1.2% Methocel?PremiumA4000值OWChemicals)与对哲基苯甲酸甲醋和丙醋、化化、邸TA和 心甲硫氨酸组成的凝胶中。配方载体，批次054006645-1，是在化emL油oratoriesLtd.配 审lJ，并由在巧樣酸钢、pH5.5中的1.2%Methocel?PremiumA4000值ow化emicals)与^JaCl 和对哲基苯甲酸甲醋和丙醋组成。将五十毫升的曲普瑞林凝胶（200yg曲普瑞林己酸盐/ mL)或配方载体包装在50mL栋色棚娃玻璃血清瓶化10206-50)中，带有灰色了基橡胶药用 血清瓶塞（73828A-S巧和标准侣封口（SAS20NAT)。该试验物质冷冻贬存（约5°C)和在带 有适当冰袋的绝热容器内运输。 阳204]连施例3。20引连施例配方
[0206] 用于本申请所述组合物的实施例配方显示于表1和表2。
[0207]表1 [020引
阳20引表2.
[0210]
[0211] *标称量
[0212] ** 经测试至药典标准（compendialstandard) 阳21引 连施例4 邮14] 发倍期观察
[0215] 在断奶（第0天）后将猪关养于怀孕箱中。将公猪关养在单独的室里，和/或至 少12m距离并且顺风。为测定发情期的起始和持续期，每日观察母猪的发情期，（1)从第3 天直到确认发情期结束，或（2)直到第6天，看哪个首先到来。为引出发情期信号，让成熟 的公猪缓慢走过母猪箱前面的通道，让每只试验母猪接受公猪发出的视觉的、听觉的和嗅 觉的信号长达5分钟。为与商业农场的标准实践一致，当该公猪靠近母猪箱前面时，通过有 经验的人员对母猪中部施加背压结合侧部摩擦试验发情期。当母猪对背压表现刚直站立、 没有发声，和具有一些耳朵反射的迹象时，证实是发情期。
[021引连施例5邮17] 给药巧暢精
[021引在断奶后96小时（±2小时）作为单个2mL剂量将曲普瑞林用改良的人工授精导 管放置于宫颈后部约1-约2cm。在第（0)天的上午10点和中午之间对猪断奶。按实验设 计中所示给定每组母猪的授精时间安排。那些已预定将在给予曲普瑞林后18小时授精的 母猪普遍在接下来的那天的上午6:00和上午8:00之间授精，那些已预定将在给予曲普瑞 林后24小时授精的母猪普遍在接下来的那天的中午和下午2:00之间授精，那些已预定将 在给予曲普瑞林后30小时授精的母猪普遍在接下来的那天的下午6:00和下午8:00之间 授精。每只母猪的单次授精如它们在农场常规进行的那样进行。 阳21引 连施例6 阳220] 排邮巧发倍期测定
[0221] 通过经直肠超声扫描观察所有母猪。在第5天治疗后24小时（±1. 5小时）进行超 声扫描并在第5天的下午8:00 (± 1. 5小时）再进行一次。在第6天上午4:00 (± 1小时）、 中午（±1小时）和下午8:00(±1小时）进行经直肠超声扫描，直到排卵结束或直到第6天 (从断奶后96小时动物治疗为起点的56小时）的下午8:00的超声扫描，无论哪个先到来。 将Aloka500超声仪器用于此目的，其带有连接至固定角度PVC稳定杆的7. 5MHz线阵式传 感器，W便于插入直肠。该传感器和PVC杆涂有妇科润滑剂并轻轻地插入直肠直到卵巢可 视。每次扫描记录S个最大的滤泡（至最接近0. 1mm)的直径。当大滤泡数量6. 5mm) 降至少于3时，称母猪已经排卵。
[0222] 在断奶后第5天，最大的滤泡的平均尺寸是7. 3mm，并且不受治疗影响。在断奶的 7天内发情期表现率平均为79%，并且在治疗之中没有显著差异。治疗对从断奶至发情期 的间隔也无影响（平均112小时）。
[0223] 在治疗后24小时、32小时或40小时，已经排卵的母猪的百分率没有显著受治疗影 响（见表3和图1)。然而，在所有曲普瑞林治疗组中治疗后48小时的排卵母猪的百分率 [74. 0% (在18小时AI)、77. 0% (在24小时AI)和76.8% (在30小时AI)]，相比于载体 治疗母猪（42.6% )增大（P= 0. 0054)。治疗不影响治疗后56小时的排卵母猪百分率（P =0. 10)，然而，相比用载体治疗治疗的母猪巧8. 3% )，用曲普瑞林治疗的母猪具有更高的 排卵母猪百分率（平均为80. 4% )。在曲普瑞林治疗和载体治疗动物之间断奶至排卵的平 均间隔时间没有差异，但观察到曲普瑞林治疗的母猪的排卵更为同步，其中70-77%的母猪 在它们最同步的24小时周期（断奶后120-144小时）期间排卵，相比之下载体治疗的母猪 只有39. 9%的母猪在它们最同步的周期（断奶后128-156小时）排卵。 阳224] 连施例7 阳2巧]怀孕率巧胎化撒
[0226] 怀孕率，按分配至每个治疗组的动物在屠宰时怀孕的百分率计算，平均为66.6%， 并且在治疗组之中没有显著差异，虽然在曲普瑞林治疗的治疗后18小时授精的母猪 的怀孕率在数量上最高（74.4% )，随后是曲普瑞林治疗的治疗后24小时授精的母猪 化8. 1% )、曲普瑞林治疗的治疗后30小时授精的母猪化2. 3% )和安慰剂治疗的治疗后24 小时授精的母猪化1.8% )。相比曲普瑞林治疗的治疗后30小时授精巧.6胎）的母猪和载 体治疗的治疗后24小时授精巧.6胎）的母猪，曲普瑞林治疗的治疗后18小时授精（12. 4 胎）和24小时授精（11.8胎）的母猪存在具有较高数量的健康胎的趋势（P= 0. 09)。在 治疗组之中健康胎的重量没有显著差异。
[0227] 表3.最小二乘法（L巧均值，用于反应变量 [022引
[0229] -行内具有不同上标的均值表示p= 0. 05下的显著差异
[0230] 缩写如下：N(母猪数量），发情期（在第3天直到第6天周期内的发情 期），0V24 (在治疗后24小时的排卵母猪百分率），和怀孕（所有分配母猪中的怀孕母猪）。
[0231]AICMi标准误差：1. 8379 1. 5804 1. 5483 1. 5700
[0232] # 健康胎标准误差：1. 3966 1. 3966 1. 3968 1. 4105 阳23引连施例8 阳234]研究1-巧合伺养研究农场
[0235] 在一个800只母猪的研究农场进行=个研究平行测定。所有平行测定包括发情期 和排卵的数据，并且两个平行测定包括AI、怀孕和产仔的结果。在断奶时，混合产次的母猪 (n= 32/治疗）在断奶后9化接受载体和其后2化单次AI(安慰剂）、在断奶后9化接受 试验物质0VUGEL?和其后1她单次AI(0G18)、在断奶后9化接受0VUGEL?和其后2化单次 AI(0G24)或在断奶后9化接受0VUGEL?和其后30h单次AI(0G30)。用放置导管将0VUGEL? 给予至宫颈后部~2cm。从断奶后第3天（d3)直到第7天（d7)每日进行一次发情期检测。 从d5至d6,每她进行超声。在怀孕的d30,处死该些猪并检查生殖道。
[0236] 治疗对断奶7天内对母猪表现发情期（79% )或对断奶至发情期的间隔时间（4. 7 天）没有影响。相比安慰剂治疗，在0G18、0G24和0G30中，治疗后4她排卵母猪的百分率 更大（P= 0. 005)(表4)。在治疗组之中从AI至排卵的间隔时间有差别（P<0. 001，表4)， 并且离排卵最远出现于0G18、居中出现于安慰剂和0G24,最近出现于0G30。怀孕率不受治 疗影响（P= 0.60,表4)，但受AI至排卵间隔时间的影响（P= 0.02)。治疗对第30天的 健康胎数量有显著影响（P= 0. 003)，OG18和OG24比0G30和安慰剂治疗具有更多健康胎 (表4)。治疗对化的数量没有影响（P= 0. 30)，但对胚胎存活有影响的趋势（P= 0. 09) (表 4)。
[0237]结果表明0VUGEL?有效地同步排卵而不影响怀孕率，W及0VUGEL?后18或24小 时单次AI相比0VUGEL?后30小时AI或相比安慰剂治疗后单次授精在怀孕第30天的胎仔 数更大。
[023引表4.未调节均值，用于治疗反应
[0239]
[0240]AI=人工授精
[0241] 化=黄体
[024引 ES=胚胎存活
[0243] 0G= 0VUGEL?
[0244]连施例9 阳24引 研究2-Bache农场研究
[0246] 母猪断奶（0天）并筛选编入该研究中，记录身体状况并分配至治疗组。根据产后 长度、产次和身体状况评分将产次1-10的产后母猪分区。不使用身体状况评分低于2. 5或 高于3. 5的母猪。使用的基因型是在美国和加拿大的商业上典型应用的那些。将治疗组关 在各自分开的区域，使得当天稍迟配种的那些母猪不会接受与公猪接触的多次碰面。在断 奶后第4天每只治疗母猪接受单剂量的曲普瑞林组合物（0VUGEL?)。对照母猪未治疗。
[0247] 在第4天进行发情期测定，并连续每天一次，直到治疗后4天（第8天）或直到母 猪不再显示发情期。对照母猪（未治疗）如在农场常规实行的那样在发情期检测后的间 隔期间授精。在治疗后15小时（上午6:00+/-0. 5小时）、18小时（上午9:00+/-0. 5小 时）、21小时（下午12:00+/-0. 5小时）、24小时（下午3:00+/-0. 5小时）和27小时（下 午6:00+/-0. 5小时）用单次授精对0VUGEL?治疗的母猪授精。
[024引授精后在18-24天之间每日进行一次发情期测定W确定母猪是否再循环。记录已 回复发情期的母猪，然后依照标准农场标准操作（SCP)下重新配种（该些动物离开本研究， 而接受休药期（with化awalperiod))。在授精后28-32天用经腹超声（一次）确定那些没 回复发情期的母猪的怀孕。休药期证实为治疗后51天。记录产仔日期、在出生后24小时 的出生存活小猪数量和死胎小猪数量的数据。根据平常的农场方案养育小猪。
[0249] 将至少90只母猪分配至W下每个组。对照母猪不治疗。给予所有其他母猪含有 200yg为己酸盐的曲普瑞林的0VUGEL?。
[0250] 1)对照；未治疗并且如每个场所常规实施的那样在发情期检测后的间隔时间授 精；
[0251] 2)曲普瑞林；在曲普瑞林治疗后15小时（+/-0. 5小时）授精一次；
[0252] 3)曲普瑞林；在曲普瑞林治疗后18小时（+/-0. 5小时）授精一次；
[0253] 4)曲普瑞林；在曲普瑞林治疗后21小时（+/-0. 5小时）授精一次；
[0254] 5) 曲普瑞林；在曲普瑞林治疗后24小时（+/-0. 5小时）授精一次；
[0255] 6)曲普瑞林；在曲普瑞林治疗后27小时（+/-0. 5小时）授精一次。
[0巧引表5.给予OvuGel后的授精时间
[0 巧 7]
[0巧引从366只母猪中收集数据（每治疗组61只母猪）。
[0巧9] LS均值使用SAS的PR0CGLM程序计算，并假设具有处理和群组的模型。
[0260] 对于任何测试的变量，没有通过群组交互作用的处理。
[0261] 带有不同上标的LS均值差异为P<0. 05。
[026引连施例10 阳26引激素稳定忡
[0264]图 2 显示曲普瑞林的稳定性（250yg/mL-i)。在 0-4°C、30°C和 50°C(Mcllvaine缓 冲剂）下分析抑的影响。图2表明对于激素稳定性，最佳的抑范围为约5-约6。 阳2巧]连施例11 阳26引稳定忡分析
[0267] 在3个月的时间点上研究含有各种稳定剂的配方的稳定性。汇总于表6的数据指 明k甲硫氨酸提供最稳定的配方。
[026引表6.含有稳定剂的配方的稳定性汇总
[0269]
[0270] 其中P-80是聚山梨醇醋80 。的1]连施例12 制各激素紀合物的方法
[0273] 在一制备方法的实施方案中，将激素在含有巧樣酸和水但与其他成分分开的容器 中溶解。然后将其他成分加入到激素组合物中，并在加入甲基纤维素组分前加入水。在高 剪切混合下缓慢加入甲基纤维素组分W确保组合物的均匀性和避免凝集。 。的4]连施例13 。的引产后母猪在阴道内GnRH激动剂治抒后同巧暢精
[0276] 本研究显示，相比于在发情期开始和发情期间的每日配种的对照母猪，给予GnRH 后单次、定时授精对其后的产仔率和胎仔数的影响（表7和8)。根据产次（产次1至6;平 均产次2. 9)、W前的哺乳长度（范围13-23d;平均持续时间19d)和身体条件评分（范围 为2. 0至4. 0 ;平均评分3. 1)将一百九十九只断奶的母猪（PIC)分区并分配至两种治疗之 一。对对照母猪观察断奶后7d的行为上的发情期，并在它们观察到处于发情期的那天和在 发情持续期的2化间隔时间授精。在断奶后四天的早上将描述于实施例2和3的GnRH激 动剂制剂（OvuGel?)经阴道内给予GnRH治疗组的母猪（GnRH母猪），并在OvuGel?治疗后 21-2化授精一次。也对GnRH母猪观察断奶后7d行为上的发情期迹象，但其授精不考虑持 续的发情期迹象。
[0277] 相比于在断奶后7d100% (100)配种的GnRH母猪，对于99只对照母猪，在断奶后 7d90. 9%巧0)配种（P<0. 01)。对照母猪的每只母猪平均2. 1次授精，而所有GnRH母猪具 有每只母猪1次授精（P<〇. 01)。对照和GnRH母猪在产仔母猪的数量上没有差异（P〉0. 75)， 分别为79. 2% (79只母猪）和80. 7% (81只母猪）。治疗对死胎的（P〉0. 45)和木乃伊胎 的（P〉0. 15)数量没有影响。相比于对照母猪的11. 4只出生存活小猪，GnRH母猪产仔为平 均11. 2只出生存活小猪（P〉0. 65)。对照和GnRH母猪的每一精液剂量的出生小猪分别为 5.6和9.6(P<0. 01)。该些数据指明用OvuGel?治疗和在治疗后授精一次的治疗母猪得到 的产仔率和胎仔数比得上在行为发情期间接受多次授精的母猪，W及OvuGel?治疗的动物 的每一精液剂量的出生小猪数量更高。
[027引表7.对治疗的反应和在对照与GnRH母猪之间的比较1[0279]
[0280]iGnRH母猪在断奶后99和102小时之间治疗，和在治疗后21和22小时之间授精。 对照母猪不治疗并且正常地配种。在表格中的数是未调节的均值并且是原始数据。
[02引]表8.对治疗的反应（LS均值±SEM)和对照与GnRH母猪之间的比较1[0282]
[0284]胃1数据收集自199只母猪巧9只对照，100只GnRHK按照常规农场SOP配种对照 母猪。在断奶后第4天治疗GnRH母猪并在其后21-22小时授精一次。
[0285] LS均值使用SAS的PROC GLM程序计算，并假设具有处理和群组的模型。对于任何 测试变量，没有通过群组交互作用的处理。 阳28引 连施例14 阳287] 给予断奶猪GNRH激动剂后定时暢精
[0288] 本研究显示在给予GnRH后单次、固定时间授精对其后的产仔率和胎仔数的影响 (表9和10)。根据产次（产次1至6;平均产次2. 8)、W前的哺乳长度（范围17-25d;平 均持续时间21d)和身体条件评分（范围为2. 5至3. 5 ;平均评分2.8)将S百只断奶的母猪 (PIC)分区并分配至两种治疗之一。对对照母猪观察断奶后7d的行为上的发情期，并在它 们观察到处于发情期的那天和在发情持续期的2化间隔时间授精。也对在GnRH治疗组的 母猪（GnRH母猪）观察断奶后7d行为上的发情期迹象，但在断奶后第4天用描述于实施例 2和3的GnRH激动剂制剂（OvuGel?)阴道内治疗，并随后在OvuGel?治疗后24 +化授精 一次，不管它们是否表现出持续的发情期迹象。相比于断奶后7dl00% (150)配种的GnRH 母猪，150只对照母猪在断奶后7d80. 7% (121)配种（P<0. 01)。
[0289] 对照母猪的每只母猪平均2. 3次授精，而所有GnRH母猪具有每只母猪1次授精 任<0.01)。对照和GnRH母猪中产仔母猪的数量上没有差异（P〉0. 40)，分别为72.7% (109 只母猪）和76. 7% (115只母猪）。治疗对死胎的（P〉0. 30)和木乃伊胎的（P〉0. 45)数量 没有影响。相比于产仔的对照母猪的10. 9只出生存活小猪，产仔的GnRH母猪为平均11. 3 只出生存活小猪（P<〇. 37)。对照和GnRH母猪的每一精液剂量的出生小猪分别为5.6和 9.6(P<0. 01)。该些数据指明用GnRH激动剂OvuGel?治疗和相对GnRH治疗的时间授精一 次的治疗母猪得到的产仔率和胎仔数比得上在行为发情期间接受多次授精的母猪。该些结 果还表明OvuGel?治疗的动物比对照动物的每一精液剂量的出生小猪数量更高。
[0290] 表9.对治疗的反应和在对照与GnRH母猪之间的比较1
[0291]
[029引1母猪在断奶后96小时治疗和其后24 + 2小时在断奶后第5天（断奶后120-122 小时）授精。对照母猪不治疗并且正常地配种。在表格中的数是未调节的均值并且是原始 数据。
[029引表10.对治疗的反应（LS均值±SEM)和对照与GnRH母猪之间的比较1
[0294]
[029引1数据收集自300只母猪（150只对照，150只Gnim)。按照常规农场SOP配种对照 母猪。在断奶后第4天治疗GnRH母猪并在其后24+/-2小时授精一次。
[0296]LS均值用SAS的PR0CGLM程序计算，并假设具有处理和群组的模型。对于任何测 试变量，没有通过群组交互作用的处理。 阳297] 连施例15 阳29引统计学分析
[0299] 对于连续和离散变量，用SAS(Cary,NC)的ProcMIX邸和普通线性模型程序分析 数据。对于所有的分析，模型包含治疗（治疗后24小时授精的安慰剂对照，治疗后18小 时授精的曲普瑞林治疗母猪，治疗后24小时授精的曲普瑞林治疗母猪和治疗后30小时授 精的曲普瑞林治疗母猪）和平行测定的固定效应。将母猪产次和哺乳长度的记录作为协变 量（covariate)而包括。测试治疗和平行测定的一阶交互作用，并且当不显著时去除。用 P<0. 05下的T检验，对最小二乘法均值估值测试治疗之间的差异性。
【主权项】
1. 一种同步猪排卵的方法，所述方法包含以下步骤： 在断奶后的第四天给予猪一定剂量的激素，其中所述激素为曲普瑞林或其溶剂合物、 水合物或药学上可接受的盐，并且其中所述猪只在给予该激素后约15-约24小时授精一 次。2. 权利要求1的方法，其中所述激素是曲普瑞林乙酸盐。3. 权利要求1-2中任一项的方法，其中所述激素使用放置导管给予猪。4. 权利要求1-2中任一项的方法，其中所述激素通过注射给予。5. 权利要求1-4中任一项的方法，其中所述激素以有效量给予，该激素的有效量是约 10Mg-约 500l^g。6. 权利要求1-5中任一项的方法，其中给予猪单一的激素。7. 权利要求1-6中任一项的方法，其中所述激素在包含凝胶的组合物中给予，并且其 中所述组合物具有为约5. 0-约6. 0的pH。8. 权利要求1-7中任一项的方法，其中所述猪在给予该激素后约18-约22小时授精。9. 权利要求1-8中任一项的方法，其中所述猪在给予该激素后约22小时授精。10. 权利要求1-9中任一项的方法，其中所述方法在没有发情检测下进行。11. 权利要求1-10中任一项的方法，其中所述激素是在断奶后约96小时给予。12. -种组合物，其包含激素和凝胶，其中所述激素具有式或其溶剂合物、水合物或药学上可接受的盐， 其中 R1和R2独立地在每种情况下是氣，或是独立选自：烷基、杂烷基、环烷基、杂环烷基、齒 代烷基、芳基、杂芳基、芳基烷基和杂芳基烷基，其各自任选取代，或R1和R2与连接的碳形 成碳环或杂环； X是氢，或X是选自：烷基、环烷基、杂烷基、任选取代的亚烷基羧酰胺；和 HNC(0)NR3R4,其中R3和R4在每种情况下独立选自：氢、烷基、杂烷基和卤代烷基；且 其中所述组合物具有为约5. 0-约6. 0的pH。13. 权利要求12的组合物，其中R1是亚甲基-杂芳基，和其中杂芳基是选自：吡啶基、 噻唑基、磺胺吡啶基、嘧啶基、喹啉基、吡唑基、咪唑基、吡咯基、剛噪基、苯并吡唑基和苯并 咪唑基；和 R2是氢或甲基。14. 权利要求12-13中任一项的组合物，其中X是CH2C(0)NH2。15. 权利要求12-14中任一项的组合物，其中所述激素为曲普瑞林，或其溶剂合物、水 合物或药学上可接受的盐。16. 权利要求12-15中任一项的组合物，其中所述激素为曲普瑞林或曲普瑞林乙酸盐。17. 权利要求12-16中任一项的组合物，其中所述激素为曲普瑞林乙酸盐。18. 权利要求12-17中任一项的组合物，其中X是H2CC(0)NH2,札是氢，且1?2是19. 权利要求12-18中任一项的组合物，其进一步包含稳定剂。20. 权利要求19的组合物，其中所述稳定剂是L-甲硫氨酸。21. 权利要求12-20中任一项的组合物，其中所述凝胶包含多糖。22. 权利要求21的组合物，其中所述多糖是选自：纤维素、右旋糖酐和海藻酸盐。23. 权利要求22的组合物，其中所述多糖是纤维素。24. 权利要求23的组合物，其中所述纤维素是甲基纤维素。25. 权利要求24的组合物，其中所述凝胶包含约0. 5重量％-约4. 0重量％的甲基纤维 素。26. 权利要求12-25中任一项的组合物，其进一步包含防腐剂。27. 权利要求26的组合物，其中所述防腐剂是选自：对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲 酸丙酯。28. 权利要求12-27中任一项的组合物，其进一步包含张度剂。29. 权利要求12-28中任一项的组合物，其中所述激素为约10约500呢的有效 量。30. 权利要求12-29中任一项的组合物，其中所述组合物包含100Pg/mL的激素。31. 权利要求12-30中任一项的组合物，其用于使用放置导管经阴道内给予猪。32. 权利要求12-31中任一项的组合物，其结合使用说明书。33. 权利要求32的组合物，其中所述说明书指出，该猪应在给予该激素后约18-约22 小时授精一次。34. 权利要求12-33中任一项的组合物，其用于同步猪排卵，而不进行用于同步的发情 检测。35. -种组合物，其中所述组合物包含约0. 09%重量每体积的量的对羟基苯甲酸甲 酯，约0. 01%重量每体积的量的对羟基苯甲酸丙酯，约0. 91%重量每体积的量的氯化钠，约 0. 186%重量每体积的量的柠檬酸钠，约0. 1%重量每体积的量的L-甲硫氨酸，约0. 07%重量 每体积的量的柠檬酸，约〇. 01%重量曲普瑞林每体积的量的曲普瑞林或其溶剂合物、水合 物或药学上可接受的盐，和约1. 2%重量每体积的量的甲基纤维素。36. 权利要求35的组合物，其中所述曲普瑞林为曲普瑞林乙酸盐。37. 包含权利要求12-36中任一项的组合物的试剂盒，其中所述试剂盒进一步包含放 置导管。
【专利摘要】描述了用于同步猪的授精时间的组合物和方法。更具体地，描述了通过给予包含激素的组合物用于同步授精时间的方法，其中所述猪只在给予该激素后授精一次，且其中没有发情检测。
【IPC分类】A61P15/08, A61K38/09
【公开号】CN104906556
【申请号】CN201510141363
【发明人】S.K.韦贝尔, M.E.斯万森
【申请人】Jbs联合动物健康二有限公司
【公开日】2015年9月16日
【申请日】2010年4月23日
【公告号】CA2758532A1, CN102596215A, CN102596215B, EP2421545A1, EP2421545A4, US8905913, US20120046519, US20150057225, WO2010124220A1
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