作为pi3k阻滞剂的吡咯并嘧啶衍生物及其用途的制作方法
专利名称：作为pi3k阻滞剂的吡咯并嘧啶衍生物及其用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种新型缩合嘧啶衍生物及其医药学上允许的盐、含有其的医药组合 物及它们的合成中间体等。
背景技术：
磷脂酰肌醇-3激酶(Phosphatidylinositol 3-kinase) (PI3K)为肌醇磷脂 质的磷酸化酶之一，作为将肌醇环的3位进行磷酸化的酶而广为所知，在生物体内广 泛地表达。该PI3K通过增殖因子、激素等刺激而被活化，促进Akt或PDKl的活化， 已知与抑制细胞死亡的生存信号、细胞骨架、葡萄糖代谢、小细胞传输等有关，另外， 由PI3K生成的3位进行了磷酸化的肌醇磷脂质作为这些信息传递系统的信使起作 用(Phosphatidylinositol 3-kinases in tumor progression.Eur.J.Biochem. 268, 487-498(2001) ；Phosphoinositide 3-kinase :the key switch mechanism in insulin signaling. Biochem. J. 333、471-490 (1998) ；Distinct roles of class I and class 11Iphosphatidyl inositol 3-kinase in phagosome formation and maturation. J. C. B., 155(1)，19-25(2001)等)。PI3K根据成为基质的肌醇磷脂质的种类分类为Class I、Class II, ClassIII 3 个等级。Class I 的酶在in vivo 巾，以 phosphatidylinositol (4, 5)-bisphosphate[PI(4,5)P2]为基质，生成 phosphatidylinositol(3， 4,5)-triphosphate[PI(3,4,5)P3],但在 in vitro 中，也可以以 phosphatidylinositol (PI) >、phosphatidylinositol (4)-phosphate[PI (4)P]为基质。另 外，Class I的酶根据活化机制进一步分类为Class la、lb。在Class Ia中含有ρΙΙΟα、 ρ110β、ρ110δ亚型，分别形成ρ85调节亚基(regulatory subunit)和杂二聚物复合体， 利用酪氨酸激酶型受容体等进行活化。在Class Ib中含有利用三聚物型G蛋白质的β γ 亚基Y)进行活化的pllO γ，形成plOl调节亚基(regulatory subunit)和杂二聚物。Class II的酶以PI、PI(4)P为基质，包含PI3KC2a、C2 0、C2 γ子类型。迄今 为止没有发现在C末端上具有C2区域、可被Class I的酶识别的调节亚基(regulatory subunit)ο有报道称Class III的酶仅以PI为基质，作为从酵母中分离的Vps34的人同源基 因的人Vps34与pl50相互作用，参与膜传输的控制。根据使用敲除这些PI3K的鼠的分析，有报道称Class Ia的pllO δ与T_cell、 B-cell的分化或功能等有关，Class Ib的ρΙΙΟγ与中性粒细胞趋化、肥大细胞(mast cell)、血小板、心肌细胞的异常有关(Phosphoinositide3-kinase signaling-which way to target ？ Trends in PharmacologicalScience,24(7),366-376 (2003))。基于这些结果，通过以class I的ρΙΙΟδ、ρ110γ为目标，期待对自身免疫疾病、 炎症、哮喘、心脏病疾等的有用性。
近年来，报道了在许多癌症种类(特别是卵巢癌、大肠癌、乳腺癌等)中，对PllO α 进行编码的基因PIK3CA的增幅、变异引起的永久的活化，在其基础上蛋白水平中的pllO α 的高表达，由此可以认为，生存信号的永久的活化引起的细胞凋亡的抑制担负癌化的机理
的一部分(PIK3CA isimplicated as an oncogene in ovarian cancer. Nature Genet. 21, 99-102, (1999) ；High frequency of mutations of the PIK3CA gene in human cancers. Science,304,554,(2004) ；Increased levels of phosphoinositol 3-Kinaseactivity in colorectal tumors. Cancer, 83,41—47(1998))。另外，以PI3K的产物之一的PI (3，4，5)P3作为基质的磷脂质磷酸酶的PTEN的缺 失、变异也在癌症中有众多报道。通过将PI (3，4，5)P3用作基质，PTEN是作为PI3K的抑制 物(suppressor)起作用的，因此可以认为，PTEN的缺失、变异与PI3K信号中的PI3K的活
化有关联。从这些理由出发，期待在PI3K活性提高了的癌症中通过特别地抑制PllO α的活 性来得到有用的抗癌作用。如上所述，作为在免疫疾病区域、抗炎症剂区域、抗癌剂区域等中被期待具有高有 用性的ΡΙ3Κ阻滞剂，已知有如下所述的Wortmarmin (非专利文献1)或LY294002 (非专利 文献2)作为特异的阻滞剂。最近，除此之外还报道有许多具有ΡΙ3Κ阻滞作用的化合物，迄今为止，以基于 ΡΙ3Κ阻滞作用的医药品来市售的产品还不存在，期望尽早开发可以临床使用的具有ΡΙ3Κ 阻滞作用的抗癌剂等。与此相对，对于如后述的通式⑴所示的以本化合物为代表的5-(2_吗 啉-4-基-7Η-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-嘧啶-2-基胺衍生物而言，后述的母核本身 目前不为人知，而且，作为具有PI3K阻滞作用的抗癌剂等的有用性也不为人知。专利文献1 美国专利5378700非专利文献1 :H Yano et al. , J. Biol. Chem.，268，25846，1993非专利文献2 :CJ Vlahos et al. , J. Biol. Chem.，269，5241，1994 本发明人等为了开发对于PI3K具有阻滞活性、同时安全性优异、因此作为抗癌剂 等有用的化合物，进行了潜心研究，结果发现，在下述式表示的通式(I’)中，以被口包围的 部分为母体的5- (2-吗啉-4-基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-嘧啶-2-基胺衍生物 具有优异的PI3K阻滞效果，同时，具有细胞增殖抑制阻滞效果，而且，体内的稳定性及水溶 解性优异，因此，可以成为作为癌症的预防或治疗剂有用的药剂，从而完成本发明。另外，还
发明内容发现作为其合成中间体有用的化合物，完成了本发明。
S即，本发明提供一种以下所示的式(I)表示的化合物或其医药学上允许的盐、式 (I)表示的化合物及其合成中间体的制造方法及含有式(I)表示的化合物或其医药学上允 许的盐的医药组合物。本发明涉及一种化合物或其医药学上允许的盐，所述化合物用式(I)表示， [式中，Q表示-X-Y-表示的连结基；X 表示单键、-CO-、-CONH-, -CON (C1^4 烷基)-、_CS_、-CSNH-, -CSN (C1^4 烷基)-、 或-SO2-；Y表示单键、亚芳基或杂亚芳基，(该亚芳基及杂亚芳基为无取代或可以用-商 素、-C1^6烷基、-0H、或-OCh烷基取代1 4处)；其中，X和Y不同时为单键；R1表示-CQ_6亚烷基-㈧^CV6烷基或-CQ_6亚烷基-㈧m_CQ_6亚烷基_ (杂环)；A 表示-CO-、-CS-、-CONH-, -CON^h 烷基)_、-CSNH-、-CSN (C1^4 烧 基)-、-NH-或-N((V4 烷基)_;
m表示0或1 ；
所述_(杂环)为杂芳基或以下的式(a)表示的基团； 式中，Ra及Rb相同或相互不同，表示氢原子、-C^6烷基、-卤素、-0H、或-OCV6烧 基；W 表示-CRcRd-、-0-、-S-、-SO-、-SO2-、或-NRe-；
η 表示 0 或 1 ；Rc及Rd相同或相互不同，表示氢原子、-卤素、-Cp6烷基、-OH、-OC1^6烷基或杂芳 基；Re表示氢原子、-C1^6烷基、-OH、-OCV6烷基或杂芳基(R。、Rd及Re中的-(^6烷基 及-OCh6烷基可以用-卤素或-OH取代)]。本发明还涉及一种化合物的制造方法，其制造上述式(I)表示的化合物， [式中，Q及R1如上述所定义的那样]其中，所述制造方法可以含有使式(Via)表示的化合物与氧化剂反应后、进一步 将氨基的保护基进行脱保护的工序。 [式中，Q及R1如上述所定义的那样；PG’表示氨基的保护基。]本发明进一步还涉及一种化合物的制造方法，其制造式(Via)表示的化合物， [式中，Q及R1如上述所定义的那样；PG’表示氨基的保护基]其中，包含在钯催化剂的存在下使式(Va)表示的化合物与以下的式子表示的硼 酸衍生物反应、得到式(Via)表示的化合物的工序。 [式中，M表示离去基团；Q及R1如上述所定义的那样] [式中，R’及R”各自独立，表示氢原子或CV6烷基，或者可以R’及R”在一起形 成-C2_3亚烷基_，此时，-c2_3亚烷基-可以用-甲基取代1 4处；PG’表示氨基的保护基]本发明进一步还涉及一种包含上述式(I)的化合物或医药学上允许的盐作为有 效成分的医药组合物。式(I)表示的本发明化合物具有优异的PI3K阻滞效果，具有细胞增殖阻滞作用， 同时，体内的稳定性及水溶解性优异，因此，可以用作增殖性疾病、例如癌症的预防或治疗 剂。另外，式(I)表示的化合物中的一部分化合物作为其它化合物的合成中间体也是有用 的。另外，式(via)的化合物作为用于得到上述式(I)的化合物的合成中间体为有用的化 合物。
具体实施例方式下面，对本发明的化合物、其制造方法、含有该化合物的医药进行说明。将本说明书中使用的用语作如下定义。本说明书中，所谓-CV6烷基，是指碳原子数1 6的直链或支链状的一价饱和烃 基。作为-Cp6烷基，优选列举碳原子数1 4的烷基(-Ch烷基)。作为-CV6烷基，具体列 举例如_甲基、“乙基、“正丙基、“异丙基、“正丁基、“异丁基、“叔丁基、“仲丁基、“正 戊基、-正己基、-1-甲基戊基、-2-甲基戊基、-3-甲基戊基、-4-甲基戊基、-1，1-二甲基丁 基、-1,2- 二甲基丁基、-1,3- 二甲基丁基、-2，2- 二甲基丁基、-2，3- 二甲基丁基、-3，3- 二 甲基丁基、-1-乙基丁基、-2-乙基丁基、-1，1，2-三甲基丙基、-1，2，2-三甲基丙基等，进一 步优选列举_甲基、_乙基、_正丙基、_异丙基，可以特别优选列举_甲基、_乙基。本说明书中，所谓-Cch6亚烷基_，为单键(碳原子数0)或碳原子数1 6的直 链状的二价饱和烃基(-CV6亚烷基-)。作为-Ch6亚烷基，具体列举亚甲基、亚乙基、亚 丙基、亚丁基、亚戊基、亚己基。优选列举碳原子数0 4的亚烷基(-Cch4亚烷基-)，具 体列举单键、亚甲基、亚乙基、亚丙基、亚丁基。另外，该-CV6亚烷基可以用选自-CV6烷 基、-OH、-CONH2、-NH2、-NH (C1^烷基)及-Nd6烷基)2中的基团取代。-CQ_6亚烷基-优选 为单键或可以用选自-0H、-甲基及-二甲基氨基中的基团取代的-Cp6亚烷基_，更优选为 单键或无取代的-Ch亚烷基_。
本说明书中，所谓-卤素，表示从卤原子(可列举例如F、Cl、Br或I)衍生的一价 基团。可列举例如-F、-Cl、-Br及-I，优选列举-F、-Cl、更优选列举-F。在本说明书中，所谓亚芳基，为由单或二环的芳香族烃环构成的二价环式基团。构 成环的原子数例如为5 10，优选为碳原子数6 10。作为亚芳基，具体可以列举亚苯基、 亚萘基等。更优选为亚苯基，特别优选列举的是，Y表示亚芳基的情况下，与从Y伸出的X键 合的键及与R1键合的键这2个键处于邻位或对位的关系的亚芳基。该亚芳基为无取代或可以用-卤素、-Cp6烷基、-OH或-OCh烷基取代例如1 4 处。在本说明书中，所谓杂亚芳基，为包含杂原子的从单或二环的芳香族杂环衍生的 二价环式基团。作为组成环的元素，除碳原子之外，含有至少1个氮原子，而且，可以含有选 自氮、氧及硫中的1 2个杂原子。构成环的原子数优选为3 12，更优选为5 6。环可 以为单环或二环，但优选单环。作为这样的由杂亚芳基衍生的杂环，具体列举吡咯、吡唑、 咪唑、三唑、噁唑、异噁唑、吲唑、噻唑、批啶、哒嗪、嘧啶、批嗪、噁嗪、三嗪、吲哚、苯并咪唑、 苯并噁唑、苯并噻唑、苯并吡唑、喹啉、异喹啉、喹喔啉、喹唑啉、酞嗪、嘌呤、蝶啶等芳香族杂 环，更优选列举吡咯、吡唑、咪唑、三唑、噁唑、异噁唑、吲唑、噻唑、吡啶、哒嗪、嘧啶、吡嗪、噁 嗪、三嗪等5 6元的芳香族杂环。进一步优选列举吡啶、哒嗪、嘧啶、吡嗪，特别优选为吡 啶。杂亚芳基从5元的芳香族杂环衍生时，2条键的取代位置优选为1，3位、2，4位或 3，5位，从6元的芳香族杂环衍生时，在Y表示杂亚芳基的情况下，与从Y伸出的X键合的键 及与R1键合的键的2条键的取代位置优选具有2，4位、2，5位、2，6位、3，5位的关系。该杂亚芳基为无取代或用-卤素、-CV6烷基、-OH或-OCV6烷基取代例如1 4处。在本说明书中，所谓杂芳基，为包含杂原子的从单或二环的芳香族杂环衍生的一 价环式基团。作为组成环的元素，除碳原子之外，含有至少1个氮原子，而且，可以含有选自 氮、氧及硫中的1 2个杂原子。构成环的原子数优选为3 12，更优选为5 6。环可以 为单环或二环，但优选单环。作为这样的由杂芳基衍生的杂环，具体列举吡咯、吡唑、咪唑、 三唑、噁唑、异噁唑、吲唑、噻唑、卩比啶、哒嗪、嘧啶、吡嗪、噁嗪、三嗪、吲哚、苯并咪唑、苯并噁 唑、苯并噻唑、苯并吡唑、喹啉、异喹啉、喹喔啉、喹唑啉、酞嗪、嘌呤、蝶啶等芳香族杂环，更 优选列举吡咯、批唑、咪唑、三唑、噁唑、异噁唑、吲唑、噻唑、批啶、哒嗪、嘧啶、批嗪、噁嗪、三 嗪等5 6元的芳香族杂环。进一步优选列举吡啶、哒嗪、嘧啶、吡嗪，特别优选为吡啶。在本说明书中，所谓_(杂环)，为由上述定义的杂芳基或以下的式(a)表示的基团。 式中，艮及Rb相同或相互不同，表示氢原子、-C1^烷基、-卤素、-OH或-OCV6烷基；W 表示-CRcRd-、-0-、-S-、_S0_、-SO2-或-NRe-；η 表示 0 或 1 ；R。及Rd相同或相互不同，表示氢原子、-卤素、-Cp6烷基、-OH、-OCh烷基或杂芳基；Re表示氢原子、-C1^6烷基、-OH、-OCh烷基或杂芳基.R。、Rd及Re中的-CV6烷基及-OCV6烷基可以用_卤素或-0H取代。优选用-F取 代1 3处或为无取代，更优选为无取代。作为上述的式(a)表示的基团中的各取代基优选的形态，可列举以下。Ra及Rb相同或相互不同，优选为氢原子或Ch烷基。W 优选为-0-、-S-、-SO2-或-NRe_。η优选为1。Rc及Rd相同或相互不同，优选为氢原子、-Ch烷基或-0Η。Re优选为氢原子、_(可以用卤原子取代的CV4烷基)或吡啶基，更优选为氢原 子、_(可以用-F取代1 3处的Ch烷基)、吡啶基，进一步优选为氢原子或-CV4烷基。另外，作为上述式(a)表示的基团的优选的形态，可列举具有以下的基团的组合 的式(a)表示的基团。艮及礼相同或相互不同，优选氢原子或Ch烷基；W 优选为-0-、-S-、-SO2-或-NRe-；η优选为1;而且，Re优选为氢原子或-C1^烷基。作为式(a)表示的基团，具体列举以下的式(a-1)、(a_2)、(a_3)、(a_4)、(a_5)、 (a-6)、(a-7)、或(a_8)表示的基团。 作为式(a)表示的基团，更优选列举(a-6)、(a-7)或(a_8)表示的基团。在此，作 为Re，优选列举氢原子、甲基、乙基、2-氟乙基、正丙基、异丙基、3，3，3-三氟正丙基、正丁基、 4_氟-正丁基、3-吡啶基及4-吡啶基，更优选列举氢原子、甲基、乙基、正丙基及异丙基。下面，对本发明的式(I)表示的化合物或其医药学上允许的盐进行说明。本发明的式(I)表示的化合物如上所述。该式(I)中，Q如上所述，表示以-X-Y-表 示的连结基，优选X或Y的任一个为单键。式(I)中，X如上所述，表示单键、-CO-、-CONH-、-CON((V4烷 基)_、-cs-、-CSNH-, -CSN(C1^4烷基)_、或-SO2- ；Y如上所述，表示单键、亚芳基或杂亚芳基 (该亚芳基及杂亚芳基为无取代或可以用_卤素、-CV6烷基、-OH或-OCh烷基取代1 4 处)。其中，X和Y不同时为单键。X及Y的优选的形态可以列举如下。
X为优选单键、-CO-、-CONH-, -CSNH-、或_S02_，更优选为单键或_S02_。Y如上所述，为单键、亚芳基或杂亚芳基(该亚芳基及杂亚芳基为无取代或可以 用_卤素、-C^6烷基、-OH或-OCV6烷基取代1 4处，优选为无取代或用-Ch烷基取代)， 更优选单键、亚苯基、或亚吡啶基(该亚苯基及亚吡啶基为无取代或可以用甲基、-F取代 1 2处)，进一步优选为单键、1，3_亚苯基、1，4_亚苯基、2-甲基-1，4-亚苯基、2-甲基-1， 5-亚苯基、2-氟-1，4-亚苯基、3-氟-1，4-亚苯基、2，6_ 二氟_1，4_亚苯基、2，4_亚吡啶 基、2，5-亚吡啶基，特别优选为单键、1，3-亚苯基、1，4-亚苯基、2-甲基-1，4-亚苯基或2， 4-亚吡啶基。另外，Y表示亚芳基或杂亚芳基时，该亚芳基或杂亚芳基优选是从苯、吡咯、吡唑、 咪唑、三唑、噁唑、异噁唑、吲唑、噻唑、批啶、哒嗪、嘧啶、吡嗪、噁嗪、三嗪、吲哚、苯并咪唑、 苯并噁唑、苯并噻唑、苯并吡唑、喹啉、异喹啉、喹喔啉、喹唑啉、酞嗪、嘌呤、及蝶啶衍生的， 更优选是从苯、吡啶衍生的。另外，式(I)中，队如上所述，表示-CQ_6亚烷基-(AHe烷基或-CQ_6亚烷基-㈧ m_CQ_6亚烷基-(杂环)，优选为-Cch4亚烷基-㈧m-CH烷基或-Cch4亚烷基-㈧^Cch4亚 烷基_(杂环)，更优选为-Ch亚烷基-A-(杂环)、-A-CV4亚烷基_(杂环)、-CV4亚烷 基-A-Ch亚烷基_ (杂环)、-CV4烷基、_ (杂环)，进一步优选为-CH烷基、-CV4亚烷基-(杂 环)、-C0-(杂环)或_(杂环)，特别优选为-甲基、-CH2-(杂环)或_(杂环)。需要说明 的是，这里的A及m如上所述，-(杂环)如上所述，用杂芳基或以下的式(a)表示。 式中的各基团如上所述。R1表示-CQ_6亚烷基-(A)m-CQ_6亚烷基_(杂环)时的该_(杂环)所表示的杂芳 基优选为吡啶基；另外，该_(杂环)所表示的上述式(a)的基团优选为以下的式(a-1)、 (a-2)、(a-3)、(a_4)、(a_5)、(a_6)、(a_7)或(a_8)表示的基团，更优选为(a_6)、(a_7)、或 (a-8)表示的基团。在以下的式(a-Ι) (a-8)的基团中，R。、Rd及R6如上所述，R。及Rd优 选为氢原子、-CV4烷基或-0H，更优选为氢原子或-0H，Re优选为氢原子、_(可以用卤原子 取代的Cy烷基)或吡啶基，更优选为氢原子、_(可以用-F取代1 3处的Cy烷基)或 吡啶基，进一步优选为氢原子或-Cy烷基。Re特别优选为甲基、乙基。
在R1中的A的优选的形态中，A优选为-CO-、-NH-, -CONH-或-COMC^烷基)-，
更优选为-CO-、-NH-, -CONH-或-COWe-。本发明的更优选的形态的通式(I)表示的化合物为以下的化合物X 为单键、-CO-、-CONH-、-CSNH-、或-SO2-；Y为单键、亚苯基或亚吡啶基；而且，R1为下述化学式表示的基团。
— —C<m亚烷基—Wm-Ciw亚烷基、或-Cl_4烷基
N[此时，A 表示-CO-、-NH-、-CONH-或-COWe-；m 为 0 或 1;R6表示氢原子、_(可以用卤原子取代的Cp6烷基)或吡啶基]。作为本发明的通式(I)所表示的化合物及其医药学上允许的盐，具体可以列举以 下所记载的化合物及以下的表中所记载的化合物(包含游离体及其盐)。但是，本发明并不 限定于这些例示化合物。式(I)的化合物5-{7-[2-(4-乙基-哌嗪-1-基)-吡啶-4-基]-2-吗啉-4-基-7H-吡咯并[2， 3-d]嘧啶-4-基}-嘧啶-2-基胺；{3- [4- (2-氨基-嘧啶-5-基)-2-吗啉_4_基-吡咯并[2，3-d]嘧啶_7_基]~4~甲 基-苯基}-吗啉-4-基-甲酮；5-{7-[4-(1，1_ 二氧代-1λ6-硫代吗啉-4-基甲基)-苯基]_2_吗 啉-4-基-7Η-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基}-嘧啶-2-基胺；以及5- (7-甲磺酰基-2-吗啉-4-基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶_4_基)-嘧啶_2_基胺。
另外，也可以列举以下的化合物。
在本发明的化合物及其医药学上可以允许的盐中，包含式(I)表示的本发明化合 物的全部的立体异构体(例如包含对映异构体、非对映异构体(包含顺及反几何异构体))、上述异构体的外消旋体及其它混合物。特别在本发明中，式(I)表示的化合物包含立体异 构体。另外，本发明的化合物及其医药学上可以允许的盐可以以几个互变异构形态例如 烯醇及亚胺形态、酮及烯胺形态以及它们的混合物来存在。互变异构体在溶液中以互变异 构体组(tautomer set)的混合物的形式存在。在固体的形态中，通常一种互变异构体为优 势。有时记载一方的互变异构体，但在本发明中，包含本发明的化合物的全部的互变异构 体。而且，在本发明中，也包含本发明的阻转异构体(atrop isomer ism)。所谓阻转异构 体，是指可以拆分为旋转被限制的异构体的式(I)表示的化合物I。这些异构体可以利用异构体间的物理化学的性质之差、利用常规方法分离。例如， 外消旋化合物可以利用一般的光学拆分法、例如衍生为与酒石酸等光学活性酸的非对映异 构盐并进行光学拆分的方法等立体地做成纯粹的异构体。非对映异构体的混合物可以通过 使用分别结晶化、各种色谱法(例如薄层色谱法、柱色谱法、气相色谱法等)来进行分离。另外，本发明所述的化合物可以为游离体，也可以为医药学上允许的盐，它们都包 含在本发明中。所谓这样的“盐”，只要与本发明所述的式(I)表示的化合物(有时称为化 合物I。)形成盐、且为医药学上允许的盐，就没有特别限定，可列举例如本发明的化合物I 和酸形成的酸盐、与碱形成的碱盐等。为了制备本发明的化合物I的医药学上可以允许的酸盐而使用的酸优选与本发 明的化合物I反应、形成无毒的酸盐的盐。作为酸盐，可列举例如盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸 盐、硝酸盐、硫酸盐、重硫酸盐、磷酸盐、酸性磷酸盐、醋酸盐、乳酸盐、柠檬酸盐、酸性柠檬酸 盐、酒石酸盐、重酒石酸盐、琥珀酸盐、草酸盐、马来酸盐、富马酸盐、葡糖酸盐、丙二酸盐、糖 酸盐、苯甲酸盐、扁桃酸盐、水杨酸盐、三氟醋酸盐、丙酸盐、戊二酸盐、甲烷磺酸盐、乙烷磺 酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐、1，1’ -亚甲基-双-(2-羟基-3-萘甲酸)盐等。为了制备本发明的化合物I的医药学上可以允许的碱盐而使用的碱优选与本发 明的化合物I反应、形成无毒的碱盐的盐。作为碱盐，可以列举例如钠盐、钾盐等碱金属 盐，钙盐、镁盐等碱土金属盐，铵盐，N-甲基葡糖胺盐等水溶性胺加成盐，低级链烷醇铵盐， 从医药学上可以允许的有机胺这些其它的碱衍生的盐。另外，本发明的化合物I通过放置在大气中，有时吸收水分并附着吸附水或成为 水合物，那样的盐也作为化合物I的盐包含在本发明中。而且，本发明的化合物I有时吸收其它某种溶剂而成为溶剂合物，那样的盐也作 为化合物I的盐包含在本发明中。本发明所述的式(I)的化合物作为游离体得到时，可以按照常规方法变换为式 (I)的化合物可以形成的盐或它们的水合物或溶剂合物的状态。另外，本发明所述的式⑴的化合物作为式⑴的化合物的盐、水合物或溶剂合物 得到时，可以按照常规方法变换为式(I)的化合物的游离体。本发明的式(I)表示的化合物可以通过使式(Via)表示的化合物与氧化剂反应的 方法来制造，本工序后，可以含有进一步将氨基的保护基进行脱保护的工序。
H2N 八 N( ι ,
O
或N^N
“.,Q-R1
(PG)2M N(V,a)[式中，Q及R1为如上述中所定义的那样；PG’表示氨基的保护基。]另外，在上述方法中，用作起始化合物的式(Via)所表示的化合物可以在钯催化 剂的存在下通过使式(Va)表示的化合物
XYX>,Q_R1
(PG)2M N(Via)[式中，Q及R1为如上述中所定义的那样；PG’表示氨基的保护基。]
O
N
N人N
(ν a) 与以下的式子表示的硼酸衍生物反应的工序来制造。
|^y 、ofr 或 |^y 、ofr H2N N{PG%H H[式中，R’及R”各自独立，表示氢原子或Cp6烷基，或者可以R’及R”一起形成_C2_3 亚烷基_，此时，_C2_3亚烷基-可以用-甲基取代1 4处；PG’表示氨基的保护基]。本发明的式(I)的化合物可以通过连续进行上述工序、由式(Va)表示的化合物经 过式(Via)表示的化合物来制造。
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式(I)的化合物的代表的合成方法下面，对本发明的式(I)的化合物的合成方法具体地进行说明。式(I)表示的本 发明化合物可以利用通常的有机合成方法、例如以下所示的方法来合成，但本发明的式(I) 表示的化合物的合成法并不限定于这些方法。需要说明的是，在以下所示的合成方法中， 定义的基团在实施方法的条件下接受不希望的化学变换时，只要在本文中没有特别记载， 可以通过使用例如官能团的保护、脱保护等方法来实施合成。在此，保护基的选择及脱吸操 作可以列举例如"Greene and ffuts, "Protective Groups in Organic Sythesis" ( % 3 版，Wiley-VCH，Inc.，1999) ”中记载的方法，根据反应条件适当使用这些即可。另外，也可 以根据需要改变取代基导入等反应工序的顺序。另外，在以下所示的合成方法中，也可以用 具有成为前体的官能团的原料进行反应后，在一系列的反应工序中的适当的阶段进行官能 团修饰反应，得到期望的生成物。作为官能团修饰反应，可以利用例如‘‘Smith and March, "March' s Advanced Organic Chemistry”(第 5 版，Wiley-VCH，Inc.，2001) ”或"Richard C. Larock, Comprehensive Organic Transformations (VCHPublishers, Inc. 1989)，，中记载 的方法实施。作为在合成时使用的原料化合物，可以使用市售的原料化合物，或可以根据需 要利用常规方法合成。另外，以下反应工序中记载的通式⑴表示的化合物为通式⑴表示的本发明化 合物、或用适当的保护基保护了取代基的该化合物。在通式(I)表示的化合物中，用保护 基保护的该化合物可以通过适当利用常规方法、经过脱保护工序而变换为通式(I)表示的 本发明化合物。另外，在以下反应工序中，适当包含利用常规方法的保护化工序及脱保护 工序。例如，作为用作氨基的保护基的基团，可以列举例如甲氧基羰基、环丙基甲氧基羰 基、乙氧基羰基、2，2，2-三氯乙氧基羰基、2-碘乙氧基羰基、2-三甲基甲硅烷基乙氧基羰 基、2-甲基硫代乙氧基羰基、2-甲基磺酰基乙氧基羰基、异丁氧基羰基、叔丁氧基羰基(B0C 基)、9_芴基甲氧基羰基(Fmoc)、苄氧基羰基(CBZ基)、对甲氧基苄氧基羰基、2，4_ 二氯苄 氧基羰基、对氰基苄氧基羰基等氨基甲酸酯类保护基；甲酰基、乙酰基、二氯乙酰基、三氯乙 酰基、三氟乙酰基、苯甲酰基(Bz)等酰胺类保护基；甲基、烯丙基等烃链类保护基、苄基、邻 甲氧基苄基(2-甲氧基苄基)、间甲氧基苄基(3-甲氧基苄基)、对甲氧基苄基(4-甲氧基苄 基或PMB基)、邻/间二甲氧基苄基(2，3- 二甲氧基苄基)、邻/对二甲氧基苄基(2，4- 二 甲氧基苄基)、间/对二甲氧基苄基(3，4- 二甲氧基苄基)、邻/间/对三甲氧基苄基(2，3， 4-三甲氧基苄基)等苄基类保护基等。其中，作为后述的氨基保护基的PG，优选列举苄基 类保护基，作为PG’，优选列举苄基类保护基，作为PG”，优选列举酰胺类保护基。[中间体化合物(Via)的合成] [式中，-OCV4表示-C^4烷氧基(优选为-甲氧基)，R’、R”各自独立，为氢原子 或Cp6烷基，或者R’及R”可以一起形成-c2_3亚烷基-，此时，-c2_3亚烷基_可以用-甲基 取代1 4处(优选为-(1，1，2，2-四甲基-亚乙基)-)，PG’表示氨基的保护基(优选为 PMB)，M表示离去基团，优选为氯原子、溴原子、碘原子等卤原子、或-甲磺酰氧基等烷基磺 酰氧基、“甲苯磺酰氧基等芳基磺酰氧基、-三氟甲磺酰氧基等商代烷基磺酰氧基，更优选 为氯原子。Q及R1如已经定义的那样]本合成法为如下方法将通过3-Cy烷氧基羰基-Y-内酯和吗啉代甲脒的缩合而 得到的三醇衍生物变换为三卤体或三磺酸酯体(优选三氯体)，接着，通过与具有所期望的 基团的伯胺(H2N-Q-R1)的环化缩合及与硼酸衍生物的偶联反应得到中间体化合物(Via)。3-(V4烷氧基羰基-Y-内酯(II)可以利用公知的方法制备(例如，可以根据 J. Org. Chem. (1978)，43 (2)，346-347 中记载的方法合成)。工序Ι-a为在惰性溶剂中、在碱存在下、通过3-Ch烷氧基羰基-Y-内酯(II)和 吗啉代单甲脒(优选吗啉代单甲脒氢氯酸盐或吗啉代单甲脒氢溴酸盐(Alfa Aesar公司 等))的缩合反应合成三醇衍生物(III)的工序(参考文献D. L. Dunn等、J. Org. Chem. 40 卷、3713 页、1975 年；K. Burdeska 等、Helv. Chim. Acta,64 卷、113 页、1981 年；P. Wang 等、 Huaxue Xuebao、42卷、722页、1984年)。作为惰性溶剂，可列举甲醇、乙醇、叔丁醇、四氢呋 喃、二甲氧基乙醇、1，4_ 二噁烷等，作为碱，可列举甲醇钠、乙醇钠、甲醇钾、乙醇钾、叔丁醇 钾、三乙基胺等。反应温度例如为室温 溶剂的沸点(所谓溶剂的沸点，是指在加热回流条 件下进行反应)，优选为室温 100度，作为反应时间，例如为30分钟 12小时。工序Ι-b为在惰性溶剂中或无溶剂下、在卤化剂或磺酰化剂存在下、通过三醇 衍生物(III)的卤化或磺酰化合成三卤衍生物或三磺酸酯衍生物(IV)的方法。作为惰 性溶剂，可列举例如二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷酮、甲苯、二甲苯、乙 腈及二氯甲烷，作为卤化剂，可列举例如氧氯化磷、亚硫酰氯及Vilsmeier reagent (J. C. S. Perkin 1 (1976)754-757)。可以使卤化剂与三乙基胺、二异丙基乙基胺等胺系碱或其 盐酸盐、或四乙基氯化铵、正四丁基氯化铵等季铵盐等共存。作为磺酰化剂，可列举例如甲烷磺酰氯、甲苯磺酰氯、三氟甲烷磺酸酐。可以使磺酰化剂与三乙基胺、二异丙基乙基胺等 胺系碱共存。反应温度例如为室温 溶剂或试剂的沸点(所谓溶剂的沸点，是指在加热回 流条件下进行反应)，优选为室温 200°C，作为反应时间，例如为30分钟 20小时。(参 考文献:A. Gangjee 等、J. Med. Chem. 43 卷、3837 页、2000 年；P. Rajamanickam 等、IndianJ. Chem. Section B :26B 卷、910 页、1987 年)。工序1-c为在惰性溶剂中、在碱存在下、通过三卤衍生物或三磺酸酯衍生物(IV) 和伯胺衍生物(H2N-Q-R1)的环化缩合反应得到中间体化合物(Va)的反应。作为惰性溶 剂，可列举例如二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷酮(NMP)、甲苯、1，4_ 二噁烷、 二甲氧基乙烷、乙腈等。作为碱，可列举例如碳酸钾、碳酸铯、氢氧化钠、叔丁醇钾、氢化钠、 磷酸钾(磷酸三钾)、双三甲基甲硅烷基酰胺锂(LiN(TMS)2)等(参考文献E.Bisagni等、 J. Org. Chem. 47 卷、1500 页、1982 年)。工序1-c的反应可以适当在钯催化剂或配体的存在下进行反应。作为这样的钯 催化剂，可列举例如PdCl2、Pd (OH) 2、Pd (OAc) 2、Pd2dba3、PdCl2 [P (o-tol)3]2> PdCl2 (PPh3) 2、 Pd (O2CCF3) 2 等，作为配体，可列举PPh3、P (o-tol) 3、P (t_Bu) 3、dppf、BINAP、2，，6，- 二甲氧 基-2-双环己基膦-联苯(S-Phos)、2_双环己基磷-2，，4，，6，_三异丙基联苯(X-Phos)、4， 5_双(二苯基膦)-9，9-二甲基咕吨(Xantphos)U, 3-双(2，6-二异丙基苯基)咪唑-2-甲 叉等。反应温度例如为室温 溶剂或试药的沸点(所谓溶剂的沸点，是指在加热回流条 件下进行反应)，反应时间例如为30分钟 20小时。工序Ι-d为在惰性溶剂中、在碱、钯催化剂或适当配体的存在下、通过中间体化 合物(Va)和硼酸衍生物(优选5-(4，4，5，5_四甲基_(1，3，2) 二氧硼戊环_2_基)嘧 啶-2-基胺或双-(4-甲氧基苄基)-[5-(4，4，5，5_四甲基(1，3，2) 二氧硼戊环_2_基)嘧 啶-2-基]胺)的偶联反应(例如铃木反应)得到中间体化合物(Via)的反应(参考文献 M-Havelkova 等、Synlett、1145 页、1999 年；G. Luo 等、Tetrahedron Lett. 43 卷、5739 页、 2002 年)。作为惰性溶剂，可列举例如二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷酮、甲 苯、四氢呋喃、1，4_ 二噁烷、二甲氧基乙烷等，可以含有 50%的水。作为钯催化剂，可 列举例如PdCl2、Pd (OH) 2、Pd (OAc) 2、Pd2dba3、PdCl2 [P (o-tol) 3] 2、Pd (O2CCF3) 2、PdCl2 (PPh3) 2 等，作为配体，可列举PPh3、P (o-tol) 3、P (t-Bu) 3、dppf、BINAP、2，，6，-2-双环己基膦-二 甲氧基-联苯(S-Phos)、2_双环己基磷-2，，4，，6，-三异丙基联苯(X-Phos)、4，5-双(二 苯基磷酸)-9，9-二甲基咕吨(Xantphos)、1，3-双(2，6_ 二异丙基苯基)咪唑-2-亚基等。 作为碱，可列举例如碳酸钠、碳酸钾、碳酸铯、氢氧化钠、叔丁醇钾、磷酸钾、双三甲基甲硅 烷基酰胺锂(LiN(TMS)2)等。反应温度例如为O 110°C，优选25 110°C，作为反应时间， 为30分钟 20小时。另外，代替硼酸，即使使用用公知的方法制备成的芳基锌化合物，也可 以合成中间体化合物(Via) (Metal-Catalyzed Cross-Coupling Reactions, 2nd Ed. 2004 年，2 卷、815)。另外，可以继续进行PG’的脱保护，也可以不进行。作为脱保护的方法，例如在PG’ 为苄基类保护基的情况下，可以在工序2-b中进行与后述的苄基类保护基的脱保护同样的 反应。
[中间体化合物(VIc)或(VId)的合成] [式中，PG、PG’及PG”表示氨基的保护基，L及L’表示离去基团，Μ、R’、R”、X、Y、 9及礼如已经定义的那样]本合成工序为在式(Via)所表示的中间体化合物中、特别分别表示Q为-Y-时(X 为单键时)的中间体化合物(VIc)的合成方法及Q为-X-Y-时(优选Y为单键)的中间体 化合物(VId)的合成方法。工序2_a为在惰性溶剂中、在碱存在下，进行三卤衍生物或三磺酸酯衍生物(IV) 和伯胺衍生物(H2N-PG)的环化缩合反应，适当进行胺的保护基的替换(PG —PG”)，得到中 间体化合物(Vb)的反应。本工序的环化缩合反应可以与上述工序1-c同样操作而进行反 应。作为这里的PG，可列举胺的保护基、例如甲氧基羰基、乙氧基羰基、叔丁氧基羰基、苄 氧基羰基、9-芴基甲氧基羰基(Fmoc)等氨基甲酸酯类保护基；甲酰基、乙酰基、氯乙酰基、 三氯乙酰基、三氟乙酰基、苯甲酰基等酰胺系；甲基、烯丙基等烃链类保护基；苄基、4-甲 氧基苄基、2，4-二甲氧基苄基等苄基类保护基等，优选列举苄基类保护基，更优选列举2， 4-二甲氧基苄基、4-甲氧基苄基。作为NH2PG,可列举例如4-甲氧基苄基胺、2，4-二甲氧 基苄基胺(Aldrich公司等)。在环化缩合反应之后，可以进行胺的保护基的替换(从PG向PG”)。作为此时的胺 的保护基的PG”，可列举与PG同样的保护基，优选表示酰胺类保护基，更优选列举乙酰基。在环化缩合反应之后，在胺的保护基的替换(从PG向PG”)中，可列举例如NH2PG 中的PG为苄基类保护基(优选2，4-二甲氧基苄基、4-甲氧基苄基)时的将PG脱保护的反 应的一例。通过将在环化缩合反应后得到的化合物在例如惰性溶剂中或无溶剂下、在酸存 在下进行反应，可以将PG脱保护。作为惰性溶剂，可列举例如二氯甲烷、醋酸乙酯等。作为 酸，可列举例如三氟醋酸、硫酸、盐酸、甲酸、醋酸等，可以使用不同的2种酸。优选为三氟醋 酸或硫酸。作为优选的脱保护方法，为在无溶剂下用三氟醋酸进行处理的方法或使用醋酸乙酯和硫酸的方法。可以使反应物(中间体化合物(Vb))的当量以上的N-乙酰基半胱氨 酸共存。反应温度通常为0°C 120°C，优选为室温 80°C。作为反应时间，例如为30分 钟 12小时。另外，利用使用钯碳等通过接触氢还原进行处理的方法等，也可以将PG脱保 护。接着，举出在将PG脱保护后、用PG”重新保护的反应的一例。例如，PG”为酰胺类 的情况，可以在惰性溶剂中、在碱存在下或非存在下，利用酰卤法、酸酐法、活性酯化法或缩 合法进行反应。可以优选使用酰卤法或酸酐法。作为酰卤法中的惰性溶剂，可列举例如 二氯甲烷、四氢呋喃、二噁烷、二乙基醚、二甲氧基乙烷、丙酮、乙腈、二甲基甲酰胺、二甲基 乙酰胺、二甲基亚砜、甲苯、苯等，优选列举二氯甲烷、四氢呋喃、二甲氧基乙烷、二甲基甲 酰胺、乙腈。作为酰卤，优选列举乙酰氯。在反应中可以使碱存在，作为这样的碱，可列举例 如三乙基胺、二异丙基乙基胺、吡啶、二甲基氨基吡啶、氢化钾、氢化钠、双三甲基甲硅烷基 酰胺钾、双三甲基甲硅烷基酰胺钠、金属钠、碳酸钾、碳酸铯、双三甲基甲硅烷基酰胺锂、二 异丙基酰胺锂等，优选列举三乙基胺、二异丙基乙基胺、吡啶、二甲基氨基吡啶、碳酸钾、碳 酸铯等。作为酸酐法中的惰性溶剂，可列举例如二氯甲烷、四氢呋喃、二噁烷、二乙基醚、 二甲氧基乙烷、丙酮、乙腈、二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、二甲基亚砜、甲苯、苯或无溶剂 等，优选为二氯甲烷、四氢呋喃、二甲氧基乙烷、二甲基甲酰胺、乙腈或无溶剂。作为酸酐，优 选列举醋酸酐。在反应中可以使碱存在，作为这样的碱，可列举例如三乙基胺、二异丙基乙 基胺、吡啶、二甲基氨基吡啶、氢化钾、氢化钠、双三甲基甲硅烷基酰胺钾、双三甲基甲硅烷 基酰胺钠、金属钠、碳酸钾、碳酸铯、双三甲基甲硅烷基酰胺锂、二异丙基酰胺锂等，优选列 举三乙基胺、二异丙基乙基胺、吡啶、二甲基氨基吡啶、碳酸钾、碳酸铯等。工序2_b为如下反应在惰性溶剂中，在碱、钯催化剂或适当配体的存在下，进 行中间体化合物(Vb)和硼酸衍生物(优选、5-(4，4，5，5_四甲基_(1，3，2) 二氧硼戊 环-2-基)嘧啶-2-基胺或双-(4-甲氧基苄基)-[5- (4，4，5，5-四甲基(1，3，2) 二氧硼戊 环-2-基)嘧啶-2-基]胺)的偶联反应(例如铃木反应)，接着，进行脱保护，得到中间体 化合物(VIb)的反应。中间体化合物(Vb)和硼酸衍生物的反应可以与工序Ι-d同样操作而进行。接着为脱保护工序，在PG或PG”为例如苄基类保护基(优选2，4- 二甲氧基苄基、 4-甲氧基苄基)的情况下，可以用与上述的方法同样的方法进行脱保护。另外，在PG或PG” 为例如酰胺类保护基的情况(优选乙酰基)下，可以通过使想要脱保护的化合物在惰性溶 剂中、在碱存在下反应来进行脱保护。作为惰性溶剂，可列举例如甲醇、乙醇、四氢呋喃、水 等，作为碱，可列举例如氢氧化钠、氢氧化锂、碳酸钠等。反应温度为0°C 120°C、优选为 室温 100°C，作为反应时间，例如为30分钟 15小时。工序2-c为Q特别为-Υ_(Χ为单键)时的中间体化合物(VIc)的合成方法。中间 体化合物(VIb)和L-Y-RJ在此，L表示离去基团，优选为氯原子、溴原子、碘原子等卤原子 或三氟甲磺酰氧基，更优选为溴原子)在惰性溶剂中、在碱的存在下或非存在下、在钯催化 剂或适当配体存在下进行反应，接着，进行适当保护基的PG’的脱保护，由此，可以合成中间 体化合物(Vic)。该反应可以以利用例如与公知的卤化环式基团的偶联反应，以导入环式 基团的反应为参考(Org. Lett.、2 卷、1101 页、2000 年；TetrahedronLett.、42 卷、7155 页、2001 年)。作为惰性溶剂，可列举例如四氢呋喃、二噁烷、二乙基醚、二甲氧基乙烷、二甲 基甲酰胺、二甲基乙酰胺、二甲基亚砜、丙酮、乙腈、甲苯、苯等，优选列举甲苯或1，4_ 二 噁烷、二甲氧基乙烷、四氢呋喃、二甲基甲酰胺等。作为钯催化剂，可列举例如PdCl2、 Pd(OAc)2, Pd2dba3、PdCl2(PPh3)2^ PdCl2[P(o_tol)3]2、Pd(O2CCF3)2、钯碳、钯黑、Pd(OH)2 等， 优选列举PdCl2、Pd (OAc)2, Pd2dba3、PdCl2 [P (o-tol) 3]2、Pd (O2CCF3) 2、PdCl2 (PPh3) 2 等，作为 配体，可列举例如三苯基膦、P(o-tol)3> BINAP, DPPF、P(t-Bu)3、2_双环己基膦_2，-(N， N-二甲基氨基)联苯、2-( 二-叔丁基膦)联苯、2-(双环己基膦)联苯、2’，6’ - 二甲氧 基-2-双环己基膦-联苯(S-Phos)、2_双环己基磷-2，，4，，6，-三异丙基联苯(X-Phos)、 2，，4，，6，-三异丙基_2-(双环己基膦)联苯、4，5-双(二苯基磷)-9，9_ 二甲基-9H-咕 吨(Xantphos)、4，5-双[双(3，5-双三氟甲基苯基)磷]-9，9-二甲基-9H-咕吨、1，3-二 烯丙基二氢咪唑盐、2，8，9-三异丁基-2，5，8，9-四氮杂-1-磷杂-双环[3. 3. 3] i^一碳烯、 1，3_双(2，6_ 二异丙基苯基)咪唑-2-甲叉等，优选列举三苯基膦、BINAP、2，，6，- 二甲 氧基-2-双环己基膦-联苯、2，，4，，6，-三异丙基-2-双环己基膦-联苯、2，8，9_三异丁 基-2，5，8，9-四氮杂-1-磷杂-双环[3.3.3]十一碳烯。作为碱，可列举例如氢氧化钠、 氢氧化钾、甲醇钠、乙醇钠、双三甲基甲硅烷基酰胺钾、双三甲基甲硅烷基酰胺钠、双三甲基 甲硅烷基酰胺(LiN(TMS)2)锂、二异丙基酰胺锂、碳酸铯、叔丁醇钠、叔丁醇钾、磷酸钾等， 优选列举碳酸铯、氢氧化钠、叔丁醇钠、叔丁醇钾、磷酸钾、双三甲基甲硅烷基酰胺锂等。反应温度因溶剂或碱的种类等而不同，例如为0°C 溶剂的沸点(所谓溶剂的沸 点，是指在加热回流条件下进行反应)，优选为室温 溶剂的沸点。另外，反应时间，因反应 温度等而不同，通常为30分钟 100小时，优选为30分钟 24小时。接着可以进行PG’的脱保护，也可以不进行。作为脱保护的方法，例如在PG’为 苄基类保护基的情况下，可以在工序2-b中进行与上述的苄基类保护基的脱保护同样的反 应。需要说明的是，在工序2-c中，在与L-Y-R1的偶联反应之后，进行PG’的脱保护时 (下述式的工序2-c’)，与PG’的脱保护反应同时，有时可以同时发生从吡咯烷环向吡咯环 的氧化反应，得到式(I’ )表示的化合物。
〔。〕 O
1) L-Y-R1IlJ^fi
2)脱保护
2<' H,NT "N' (W)(Vic·)
H2N^xN ·(式中，PG^LJJ1如上述所定义的那样。)作为这样的PG’的脱保护条件，可列举例如在PG’为4-甲氧基苄基时，使溶剂量 的三氟醋酸、进而相对中间体化合物(vib’)为当量以上的N-乙酰基半胱氨酸共存的情况。工序2-d为Q为-X-Y-时的中间体化合物(VId)的合成方法。此时的_X_特别 为-CO-的情况，为如下方法中间体化合物(VIb)和L’ -CO-Y-R1所表示的羧酸或羧酸的反应性衍生物(在此，L’表示离去基团，优选为氯原子、溴原子、碘原子等卤原子；或 为-OH、-OCV6烷基，更优选为氯原子或溴原子)在惰性溶剂中，在碱存在下或非存在下，利 用酰卤法、酸酐法、活性酯化法或缩合法进行反应，接着，适当进行PG’的脱保护，由此合成 中间体化合物(VId)。对PG’的脱保护在后叙述。酰卤法通过在惰性溶剂中或无溶剂中使具有所期望的基团的酸与卤化剂反应而 合成酰卤(Hal-Y-R1、Hal-CO-Y-R1、Hal-CONH-Y-RpHal-CON (Ch 烷基)-Y-R1、Hal-CS-Y-R1、 Hal-CSNH-Y-R1, Hal-CSN(C1^4 烷基 PY-R1 或 Hal-SO2-Y-R1 ；作为此时的 Hal，可列举例如氯 原子、溴原子)，再使该酰卤和中间体化合物(VIb)在惰性溶剂中反应来实现。本反应可以 在碱存在下进行反应。作为卤化剂，可列举例如亚硫酰氯、草酰氯、五氯化磷等。作为使用的惰性溶剂，可列举例如二氯甲烷、四氢呋喃、二噁烷、二乙基醚、二甲 氧基乙烷、丙酮、乙腈、二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、二甲基亚砜、甲苯、苯等，优选二氯甲 烷、四氢呋喃、二甲氧基乙烷、二甲基甲酰胺、乙腈等。作为使用的碱，可列举例如三乙基胺、二异丙基乙基胺、吡啶、二甲基氨基吡啶、 氢化钾、氢化钠、双三甲基甲硅烷基酰胺钾、双三甲基甲硅烷基酰胺钠、金属钠、碳酸钾、碳 酸铯、双三甲基甲硅烷基酰胺锂、二异丙基酰胺锂等，优选三乙基胺、二异丙基乙基胺、吡 啶、二甲基氨基吡啶、碳酸钾、碳酸铯等。反应温度因溶剂或碱的种类等而不同，在与卤化剂的反应产生的酰卤的合成以及 酰卤与中间体化合物(VIb)的反应中，可以分别在例如-20°c 溶剂的沸点(所谓溶剂的沸 点，是指在加热回流条件进行反应)下进行，优选为室温 溶剂的沸点。反应时间因反应温 度等而不同，为15分钟 100小时、优选30分钟 24小时。混合酸酐法通过卤代甲酸Cp6烷基酯或Cp6烷基羧酸酐(在此，CV6烷基是指碳原 子数1 6的直链或支链状的烷基)与具有所期望的基团的羧酸(HOOC-Y-R1)反应而合成 混合酸酐(Cp6烷基OOC-Y-R1),再使该混合酸酐和中间体化合物(VIb)反应来实现。合成 混合酸酐的反应通过使氯碳酸甲酯、氯碳酸乙酯、氯碳酸异丁酯、氯碳酸己酯之类的卤代碳 酸烷基酯(优选氯碳酸乙酯或氯碳酸异丁酯)、醋酸酐、丙酸酐等CV6烷基羧酸酐(优 选醋酸酐)之类的化合物反应来进行，优选在惰性溶剂中、在碱的存在下进行。使用的碱及惰性溶剂与本工序的酰卤法中使用的碱及惰性溶剂相同。反应温度因 溶剂的种类等而不同，通常为_20°C 50°C (优选0°C 30°C)。反应时间因反应温度等而 不同，通常为15分钟 24小时(优选30分钟 15小时)。缩合法通过使具有所期望的基团的羧酸(HOOC-Y-R1)和中间体化合物(VIb)在惰 性溶剂中、在缩合剂、碱存在下或碱不存在下(优选存在下)直接反应来进行。作为使用的上述惰性溶剂，可列举例如二氯甲烷、四氢呋喃、二噁烷、二乙基醚、 二甲氧基乙烷、二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、二甲基亚砜、丙酮、乙腈、甲苯、苯、等，优选列 举二氯甲烷、四氢呋喃、二甲氧基乙烷、二甲基甲酰胺、乙腈等。另外，作为可以使用的上述缩合剂，可以列举1，3_ 二环己基碳化二亚胺(DCC)、 2-乙氧基-1-乙氧基羰基-1，2- 二氢喹啉(EEDQ)、三(吡咯烷基)-溴化鳞六氟磷酸盐 (PYBrOP)U-乙基-3-(3，-二甲基氨基丙基)碳化二亚胺·盐酸盐(WSCl)或(苯并三唑基 氧基)三吡咯烷基鳞六氟磷酸盐(PyB0P)、3-羟基-4-氧代-3，4-二氢-1，2，3-苯并三嗪(HODhBt)、羟基苯并三唑(HOBt)等。另外，可以列举1-乙基-3-(3’_ 二甲基氨基丙基)碳 化二亚胺(EDC)和N-羟基苯并三唑(HOBt)的组合、或1-乙基-3-(3’_ 二甲基氨基丙基) 碳化二亚胺·盐酸盐(WSCl)和3-羟基-4-氧代-3,4- 二氢-1,2,3-苯并三嗪(HODhBt) 的组合。另外，作为使用的碱，可列举例如二异丙基乙基胺、三乙基胺、吡啶、二甲基氨基 吡啶、氢化钾、氢化钠、钾双三甲基甲硅烷基酰胺、钠双三甲基甲硅烷基酰胺、金属钠、碳酸 钾、碳酸铯、锂双三甲基甲硅烷基酰胺、锂二异丙基酰胺等，优选列举二异丙基乙基胺、三 乙基胺、吡啶、碳酸钾、碳酸铯、氢化钠等。反应温度因溶剂或碱的种类等而不同，例如为0°C 溶剂的沸点(所谓溶剂的沸 点，是指在加热回流条件下进行反应)，优选为室温 溶剂的沸点。另外，反应时间，因反应 温度等而不同，为30分钟 15小时。接着，特别对X为-SO2-时的工序2_d进行说明。以公知的磺酰化方法为参考，使 中间体化合物(VIb)和所期望的磺酰化剂在惰性溶剂中、在碱存在下进行反应，接着，适当 进行PG’的脱保护，由此，可以得到中间体化合物(VId) (M. Loegers等、J. Am. Chem Soc. 117 卷、9139 页、1995 年；H. Tanaka 等、Bull. Chem. Soc. Jpn. 61 卷、310 页、1988 年· J. -F. Rousseau 等、Heterocycles、55 卷、2289 页、2001 年)。作为惰性溶剂，可列举例如二氯甲烷、四氢呋喃、二噁烷、二乙基醚、二甲氧基乙 烷、二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、二甲基亚砜、丙酮、乙腈、甲苯、苯等，优选列举二氯甲 烷、四氢呋喃、二甲氧基乙烷、二甲基甲酰胺、乙腈等。作为碱，可列举例如氢化钾、氢化钠、双三甲基甲硅烷基酰胺钾、双三甲基甲硅烷 基酰胺钠、金属钠、双三甲基甲硅烷基酰胺锂、二异丙基酰胺锂、三乙基胺、碳酸钾、碳酸铯， 优选列举三乙基胺、碳酸钾、碳酸铯、氢化钠。作为所期望的磺酰化剂，可列举具有所期望的基团的例如磺酸氯(Cl-SO2-Y-R1)、 磺酸酐(R1-Y-SO2-O-SO2-Y-R1K氨磺酰酯(Cp6烷基O-SO2-Y-R1)等，优选列举磺酸氯。反应温度因溶剂或碱的种类等而不同，例如为0°C 溶剂的沸点(所谓溶剂的沸 点，是指在加热回流条件下进行反应)，优选为室温 溶剂的沸点。另外，反应时间因反应温 度等而不同，通常为30分钟 48小时，优选为30分钟 15小时。接着为PG’的脱保护反应，例如，在PG’为苄基类保护基(优选2，4-二甲氧基苄 基、4-甲氧基苄基)的情况下，可以在工序2-b中进行与后述的苄基类保护基的脱保护同样 的反应。另外，也可以不进行PG’的脱保护，进行以下的工序。[中间体化合物(VIf)的合成] (式中、Y、PG，、L、W、η、Ra、Rb如上述所定义的那样)在中间体化合物(VIc)中，特别是R1为-CH2-(杂环)时的中间体化合物(VIf)，如上所述，也可以由中间体化合物(VIb)经过2阶段来合成。在工序3-a中，替代上述工序2-c中的L-Y-R1，通过使用L-Y-CHO (Y、L如上述所定 义的那样，优选为氯原子、溴原子、碘原子等卤原子)或该等价物(保护了甲酰基的物质) 进行与工序2-c同样的反应，可以合成中间体化合物(Vie)。作为保护了 L-Y-CHO的甲酰基的等价体，可列举例如将甲酰基进行缩醛化成的等 价体。具体列举二甲基缩醛、二乙基缩醛等非环式缩醛；1，3_ 二噁烷、1，3_ 二氧杂戊环 等环式缩醛等。在使用保护了甲酰基的化合物进行工序3-a的情况下，在与中间体化合物 (VIb)的偶联后，需要再返回到甲酰基的脱保护工序。例如，作为将缩醛进行脱保护的反应， 可以通过在惰性溶剂中、在酸存在下进行反应来进行。作为惰性溶剂，可列举甲醇、乙醇等低级烷基醇、丙酮、THF、二噁烷、水等。作为酸，可列举硫酸、甲苯磺酸、三氟醋酸、盐酸等，优选为硫酸、盐酸。反应温度因溶剂或碱的种类等而不同，例如为0°C 溶剂的沸点(所谓溶剂的沸 点，是指在加热回流条件下进行反应)，优选为0°C 60°C。另外，反应时间因反应温度等而 不同，通常为30分钟 24小时，优选为30分钟 12小时。工序3_b是使中间体化合物(VIe)和下述式表示的杂环化合物在惰性溶剂中、在 氢化物还原剂的存在下，参与还原氨基化反应等实现的偶联反应，由此合成中间体化合物 (VIf)的工序(发生还原氨基化、得到对应的胺的反应)。接着，可以适当进行脱保护反应。 (式中，W、Ra、Rb、η如上述所定义的那样)作为惰性溶剂，可列举甲醇、乙醇、二氯甲烷、THF、二噁烷。作为氢化物还原剂，可以列举氰基硼氢化钠、三乙酰氧基硼氢化钠等，优选列举
三乙酰氧基硼氢化钠。反应温度例如为-20°C 溶剂的沸点(所谓溶剂的沸点，是指在加热回流条件下 进行反应)，优选为0°c 60°C。反应时间为30分钟 12小时。接着，为PG’脱保护反应，例如，在PG’为苄基类保护基(优选2，4- 二甲氧基苄基、 4-甲氧基苄基)的情况下，也可以在工序2-b中进行与上述的苄基类保护基的脱保护同样 的反应。另外，也可以不进行PG’的脱保护，进行以下的工序。[中间体化合物(VIh)的合成] [式中，PG，、L (优选为碘原子)、Hal (优选为氯)、Y、Ra、Rb、η及W如已经定义的那样]在中间体化合物(Via)中，如上所述，特别是Q中的X为单键时的中间体化合物 (VIh)也可以由中间体化合物(VIb)经过2阶段来合成。使用本工序时，优选Y为杂亚芳基。工序4-a及4_b可以与上述工序2_c同样地进行。接着的PG’的脱保护可以进行，也可以不进行。作为脱保护的方法，例如在PG’为 苄基类保护基的情况下，可以在工序2-b中进行与上述的苄基类保护基的脱保护同样的反应。[式(I)化合物的一般的合成方法] (式中，Q、R1如上述所定义的那样)工序5-a为如下方法在惰性溶剂中、在氧化剂存在下，进行中间体化合物(Via)、 (Vic)、(VId)、(VIf)或(VIh)的氧化反应(Heterocycles，22(2)，379-86 ;1984)，接着，适 当进行脱保护，由此合成式(I)表示的化合物。在氧化反应中，作为氧化剂，可列举例如氧、2，3，5，6_四氯_1，4_ 二苯甲酮、2， 3-二氯-5，6-二氰基-1，4-二苯甲酮(DDQ)、二氧化锰、二氧化硒、硝酸铈铵(IV)等，优选 列举2，3- 二氯-5，6- 二氰基-1，4- 二苯甲酮等。作为所使用的惰性溶剂，可列举例如甲醇、乙醇、二氯甲烷、氯仿、四氢呋喃、二噁 烷、二乙基醚、二甲氧基乙烷、二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、二甲基亚砜、丙酮、乙腈、甲苯、 苯、水等，优选列举二氯甲烷、氯仿、四氢呋喃、二甲基甲酰胺、乙腈、甲苯等。另外，作为溶 剂，可以使用混合溶剂，可列举例如二氯甲烷和二甲基甲酰胺的混合溶剂(例如9 1 1 1的混合比)、二氯甲烷和乙腈和二甲基甲酰胺的混合溶剂(例如1 1 3的混合 比)、氯仿和水的混合溶剂(例如20 1的混合比)。反应温度因溶剂的种类等而不同，通常为-20°C 100°C，优选为0°C 50°C。反 应时间因反应温度等而不同，通常为15分钟 24小时，优选为30分钟 15小时。接着进行的PG’的脱保护反应例如在PG’为苄基类保护基(优选2，4- 二甲氧基 苄基、4-甲氧基苄基)的情况下，可以在工序2-b中进行与上述的苄基类保护基的脱保护同 样的反应。由于本发明所述的式(I)的化合物或其医药学上可以允许的盐具有优异的PI3K 阻滞作用，特别是对PI3K的Classla的ρΙΙΟ α具有优异的阻滞作用，因此，作为增殖性疾 病的预防剂或治疗剂是有用的，在增殖性疾病中，通过本发明化合物单独地使用或与各种 抗癌剂并用，作为癌症的预防剂或治疗剂是特别有用的。需要说明的是，在本说明书中，所谓“增殖性疾病”，是指由细胞内信号传递系统或某种蛋白质的信号传递机构中的缺陷引起的疾病，包含例如癌症、干癣、再狭窄、自身免疫 疾病及粉瘤性动脉硬化症。作为癌症，可列举例如固形癌症，而且，作为固形癌症，可列举例 如大肠、前列腺及非小细胞肺癌等。另外，本发明的式(I)的化合物作为干癣、再狭窄、自免疫疾病及粉瘤性动脉硬化 症、还有心功能不全并发症、异种移植物排斥症、变形性关节病、慢性关节风湿症、哮喘等呼 吸器官疾病、囊性纤维化、肝肿大、心脏肥大、阿尔兹海默症、糖尿病、败血症性休克、HIV感 染症、过敏引起的炎症、心脏疾病等疾病的预防剂或治疗剂(特别是治疗剂)也是有用的。本发明的式(I)的化合物作为PI3K、其中PI3K的Classla的ρΙΙΟ α高度表达的 癌症的预防剂或治疗剂(特别为治疗剂)是特别有用的。而且，本发明涉及一种预防或治疗上述的增殖性疾病、例如癌症的方法。本发明的 其它形态包含固形或造血性的与ΡΙ3Κ-有关联的癌症的预防或治疗的方法。这些方法包含将含有以式(I)的化合物或医药学上允许的其盐作为有效成分的 医药组合物给药于需要这种治疗或患有这种疾病或处于该状态的患者的工序。本发明的医药组合物可以进行制剂化而经口或非经口(静脉内、肌肉内、皮下、直 肠内、鼻内、池内、阴道内、腹腔内、膀胱内、局部给药等)给药。作为经口给药用剂型，可以 列举例如片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、丸剂、水性及非水性的经口用溶液以及悬浮液等。作 为非经口给药用剂型，可列举例如注射剂、软膏剂、凝胶剂、霜剂、栓剂、口腔内或鼻喷雾齐U、 乳剂、油性剂或悬浮剂等以及填充于与细分成每个给药量相适应的容器的非经口用溶液。 另外，给药方式也可以与皮下移植那样的包含调节了的放出处方物的各种给药方法相适 应。上述制剂可以使用赋形剂、润滑剂(包衣剂)、粘合剂、崩解剂、稳定剂、矫味矫臭 齐U、稀释剂、表面活性剂或乳化剂等通常用于制剂的添加剂用公知的方法合成。例如，作为赋形剂可以列举淀粉、马铃薯淀粉、玉米淀粉等淀粉、乳糖、结晶纤维 素、磷酸氢钙等。作为包衣剂可以列举例如乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、虫胶、 滑石、巴西棕榈蜡、石蜡等。作为粘合剂可以列举例如聚乙烯基吡咯烷酮、聚乙二醇及与上述赋形剂同样的化 合物。作为崩解剂可以列举例如与上述赋形剂同样的化合物及交联羧甲基纤维素钠、羧 甲基淀粉钠、交联聚乙烯基吡咯烷酮之类的被化学修饰了的淀粉、纤维素类。作为稳定剂可列举例如对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯之类的对羟基苯 甲酸酯类；氯丁醇、苄醇、苯基乙醇之类的醇类；苯扎氯铵；苯酚、甲酚、氯甲酚之类的苯酚 类；硫柳汞；去氢醋酸；及山梨酸。作为矫味矫臭剂，可以列举例如通常使用的甜味料、酸味料、香料等。作为表面活性剂或乳化剂，可以列举例如聚山梨醇酯80、硬脂酸聚烃氧40酯、聚
桂醇等。另外，作为用于制造液体状的制剂的溶剂，可以使用乙醇、苯酚、精制水、蒸馏水等。将本发明的医药组合物用作ΡΙ3Κ阻滞剂或癌症等增殖性疾病的治疗剂或预防剂时，本发明的式(I)的化合物或其医药学上可以允许的盐的使用量可以根据症状、年龄、体 重、相对的健康状态、其它给药的存在、给药方法等而适当变更。例如，相对于患者(温血动 物、特别是人)，一般而言，作为式(I)的化合物在经口剂的情况，有效的量每日每体重Ikg 优选为0. 01 500mg，进一步优选为每体重Ikg为0. 05 50mg。非经口剂的情况，每日每 体重Ikg优选为0. 01 500mg，进一步优选每体重Ikg为0. 05 50mg。优选将其分成1 日1次或数次，根据症状进行给药。本发明的上述医药组合物可以与其它放射线疗法、化学疗法、血管新生阻滞剂、抗 癌剂合并使用。实施例下面，利用实施例进一步详细地说明本发明，但本发明并不限定于这些实施例。在 本说明书中“N”表示规定浓度，“M”表示mol/L。需要说明的是，匪R分析使用JEOL公司制JW-EX270 (270MHz)、 JW-GSX400 (400MHz)或 Bruker 公司制 NMR(400MHz)进行，NMR 数据用 ppm(parts per million)表示，将四甲基硅烷作为内部标准物质(Oppm)，参照来自样本溶剂的氘锁定信号。质谱数据使用JEOL 公司制 JMS-DX303、JMS-SX/SX102A 或 Micromass 公司制 Quttromicro来得到，另外备有高效液相色谱仪的质谱数据使用Waters公司制996-600E带 梯度高效液相色谱仪的微质谱(micromass公司制ZMD)或Waters公司制2525带梯度高效 液相色谱仪的微质谱(micromass公司制ZQ)来得到。高效液相色谱仪(LC-MS)的条件使用下述条件。高效液相饩谱仪的条件柱Combi ODS (0DS, 5 μ m, 4. 6mml. D. X50mm，和光纯药工业公司制)、COSMOS IL (0DS， 5 μ m,4. 6mml. D. x50mm, Nacalai Tesque 公司制)> InertsilC18(0DS,5 μ m,4. 6mml. D. x50mm,GL SCIENCE 公司制)或 SunFireC18 (0DS, 5 μ m，4. 6mml. D. x50mm, Waters 公司制)流动相含有0. 05%三氟醋酸的水㈧及含有0. 05%三氟醋酸的乙腈(B)洗脱方法10%B 95% B (3. 5 分)、95% B 10% B (1 分)、保持在 10% B (0. 5 分)的逐步式的溶剂梯度洗脱流速4.OmL/ 分钟在化合物的制备中，根据需要利用保护基保护官能团制备目标分子的保护体，之 后除去保护基。保护基的选择及脱除吸附操作利用例如“Greeneand Wuts, "Protective Groups in Organic Synthesis，，第 3 版、John ffiley&Sons 1999” 中记载的方法实施。实施例15-{7-[2-(4-乙基-哌嗪基)-吡啶_4_基]_2_吗啉_4_基_7H_吡咯并[2， 3-d]嘧啶-4-基}-嘧啶-2-基胺(1-1)的合成 工序 A5- (2-羟基-乙基)-2-吗啉-4-基-嘧啶-4，6_ 二醇 在300ml的2 口烧瓶中连接冷却管和橡胶塞，放入搅拌用磁力棒。用氮气置换体系 内部之后，加入吗啉-4-羧酸脒溴化氢盐(42. 2g、0. 20mol)及Me0H(160ml)。在室温下搅拌 10分钟使其溶解，在室温下加入28% NaOMe-MeOH(120ml、0. 62mol)。一边在氮氛围下搅拌， 一边加入 2-氧代四氢呋喃-3-羧酸甲酯(Journal of Organic Chemistry (1978), 43 (2), 346) (34. 8g、0. 24mol)，使用MeOH(IOml)将其洗入体系中。使用油浴将该混合物加热回流 3小时。冷却至室温后，在反应混合物中加入水(300ml)，在室温下搅拌30分钟。在该浓橙 红色的溶液中在室温下加入醋酸(24ml、0.42mol)，搅拌2小时。滤取析出的固体，使用水 (30ml)进行清洗。将得到的固体在减压下进行干燥，得到作为白色粉体的5-(2_羟基-乙 基)-2_ 吗啉-4-基-嘧啶-4，6-二醇(35. 2g、0. 146mol,73% )。1H-WR(DMSO-CW) δ (ppm) :2· 39 (2Η, t, J = 7. 63Hz)，3· 33 (2Η, t, J = 7. 63Ηζ)， 3. 51 (4Η, t, J = 4. 70Ηζ) ,3. 61 (4Η, t, J = 4. 70Ηζ)，10. 54 (2Η, bs) · ESI (LC-MS 正极模式) m/z :242[(M+H)+],工序 B 4- [4，6- 二氯-5- (2_氯乙基)_嘧啶_2_基]-吗啉 在3L的3 口烧瓶中连接温度传感器和橡胶塞，加入由工序A制备成的5_(2_羟 基-乙基)-2-吗啉-4-基-嘧啶-4，6-二醇(50g、0. 207mol)、甲苯(250ml) ,DIPEA (53. 2ml、 0. 311mol)。将其在冰浴中冷却至0°C，一边在氮气流下用机械搅拌器进行搅拌，一边以内部 温度为30°C以下的方式缓慢地滴加POCl3 (77. 3ml,0. 829mmol)。除掉冰浴，升温至室温，升 温至10(TC。搅拌7小时后，在室温下搅拌一整夜。进一步在iocrc下搅拌4小时，在冰浴下
冷却至0°C。其中以内部温度为30°C以下的方式缓慢地滴加水(750ml)。搅拌1小时后，用 甲苯(750ml)萃取有机层。用饱和食盐水(750ml)清洗有机层后，进行浓缩，进一步进行两 次使用有甲苯IL的共沸，得到作为淡茶色的粉末(55. 5g,91%)的4-[4，6-二氯-5-(2-氯 乙基)_嘧啶-2-基]-吗啉。1H-WR(CDCl3) δ :3. 20 (2Η，t，J = 7. 9Hz)，3. 66 (2Η，t，J = 7. 9Hz)，3. 70-3. 81 (8Η， m).ESI(LC_MS 正极模式)m/z 296 [ (M+H)+].工序C[6-氯-5-(2-氯乙基)-2_吗啉_4_基]-嘧啶_4_基_(4_甲氧基苄基)_胺 将由工序B制备成的4- [4，6- 二氯_5_ (2_氯乙基)_嘧啶_2_基]-吗啉(2. 9g)、 4-甲氧基苄基胺(1. 91ml)及二异丙基乙基胺(3. 40ml)溶解于乙腈(40ml)，回流10小时。 进一步加入4-甲氧基苄基胺(0. 64ml)及二异丙基乙基胺(0. 85ml)后，回流1小时。将溶 剂进行减压浓缩后，将残渣溶解于醋酸乙酯(150ml)，用饱和氯化铵水溶液(200ml)、饱和 食盐水(200ml)清洗，用硫酸钠进行干燥。将过滤除去干燥剂，浓缩而得到的残渣用硅胶柱 色谱法(二氯甲烷/甲醇=100/0 100/1)进行精制，得到作为黄色固体(2. 13g,55% ) 的目的物。1H-WrotomHzJDCI3) δ (ppm) :7. 23 (2H，d，J = 8. 7Hz)，6. 87 (2H，d，J = 8. 7Hz)， 5. 16 (1H, t, J = 5. 4Hz)，4. 55 (2H, d, J = 5. 4Hz)，3. 80 (3H, s)，3. 68-3. 78 (8H, m)，3. 62 (2H, t, J = 7. 3Hz)，2. 91 (2H, t, J = 7. 3Hz) ·ESI(LC_MS 正极模式)m/z 361 [(M+H)+],工序 D4-氯-7-(4-甲氧基苄基)-2-吗啉-4-基-6，7-二氢-5H-吡咯并[2, 3-d]嘧啶 将由工序C制备成的[6-氯-5-(2_氯乙基)-2-吗啉-4-基]-嘧啶-4-基-(4-甲 氧基苄基)-胺溶解于乙腈(290ml)，加入碳酸铯(5. 65g)和碘化钠(1. 83g)，回流10小时。 用水(200ml)稀释反应液，用醋酸乙酯(200mlX2)萃取。用饱和食盐水清洗有机层后，用硫酸钠进行干燥，过滤除去干燥剂后，将滤液进行减压浓缩，得到淡黄色粉末(2. IOg)。粗生成 物不进行精制而用于以下的反应。1H-WrotomHzJDCI3) δ (pprn) :7. 19 (2H，d，J = 8. 5Hz)，6. 86 (2H，d，J = 8. 5Hz)， 4. 48 (2H, s)，3. 80 (3H, s)，3. 70-3. 80 (8H, m)，3. 43 (2H, t, J = 8. 4Hz)，2. 87 (2H, t, J = 8. 4Hz).ESI(LC_MS 正极模式)m/z 361 [(M+H)+],工序 E4-氯-2-吗啉-4-基-6，7- 二氢 _5H_ 吡咯并[2，3-d]嘧啶 将由工序D制备成的4-氯-7- (4-甲氧基苄基)_2_吗啉_4_基_6，7_ 二氢_5H_吡 咯并[2，3-d]嘧啶(1. 87g)溶解于三氟醋酸(5. 2ml)，加入浓硫酸(290μ 1、1· 05当量)，回 流3小时。将过剩的溶剂进行减压浓缩而得到到残渣注入到冰水(约25ml)上，在冰冷下 用5M氢氧化钠进行中和。将反应液用醋酸乙酯/四氢呋喃(4/1，150ml)萃取2次，用饱和 食盐水清洗有机层后，用硫酸钠进行干燥。过滤除去干燥剂后，将滤液进行减压浓缩，得到 淡褐色粉末(1.78g)。粗生成物不进行精制而用于以下反应。1H-NMR (270MHz, CDCl3) δ (ppm) 4. 91 (1H, brs), 3. 70 (8H, s) ,3. 64 (2H, t, J = 8. 4Hz)，2. 99 (2H, t, J = 8. 4Hz) ·ESI(LC_MS 正极模式)m/z 241 [(M+H)+],工序 F1-(4-氯-2-吗啉-4-基-5，6-二氢-吡咯并[2，3_d]嘧啶_7_基)-乙酮
在乙腈(50ml)中加入由工序E制备成的4_氯_2_吗啉_4_基-6，7_ 二氢_5H_吡 咯并[2, 3-d]嘧啶(2.94g)、二甲基氨基吡啶(28mg)及吡啶(2. 48ml)，在冰冷下缓慢地滴 加乙酰氯(1.67ml)。使反应液升温至室温后，搅拌30分钟。将反应液用水(200ml)和醋 酸乙酯(200ml)稀释，用硅藻土制品过滤除去不溶物，用醋酸乙酯清洗硅藻土滤饼(celite pad)。将滤液的有机层进行分离，用醋酸乙酯(200ml)萃取水层。合并有机层并用饱和食盐 水清洗后，用硫酸钠进行干燥。过滤除去干燥剂后，将减压浓缩滤液而得到的残渣用硅胶柱 色谱法(醋酸乙酯/己烷=3/0 2/1)进行精制，得到作为淡黄色粉末的目的物(1. 67g)。1H-WrOTOMHz, CDCl3) δ (ppm) 4. 04 (2H, t, J = 8. 5Hz)，3. 66-3. 78 (8H，brs), 2. 92 (2H, t, J = 8. 5Hz)，2. 62 (3H, s) ·
ESI(LC-MS 正极模式)m/z 283 [ (M+H)+].工序 G 1-(4- {2-[双-(4-甲氧基-苄基)-氨基]-嘧啶-5-基} _2_吗啉~4~基_5，6_
氢-吡咯并[2，3-d]嘧啶-7-基)-乙酮 在由工序F制备成的1-(4-氯-2-吗啉-4-基-5，6-二氢-吡咯并[2, 3-d]嘧 啶-7-基)_ 乙酮(300mgU. 06mmolU. 0 当量)、双 _(4_ 甲氧基苄基)-[5-(4，4，5，5-四 甲基-[1，3，2] 二氧杂硼戊环-2-基)-嘧啶-2-基]胺(538mg、l. 17mmolU. 1当量)、醋 酸钯(2. 4mg、0. 0106mmolUmol% )、S-Phos (8. 7mg、0. 0212mmol,2mol % )、磷酸钾(450mg、 2. 12mmol、2.0当量)中加入二甲基甲酰胺(5ml)，在超声波照射下进行脱气。将其在100°C 下搅拌1. 5小时后，加入水而滤取固体，将其溶解于二氯甲烷，用无水硫酸钠进行干燥。在 减压下浓缩后，用柱色谱法(二氯甲烷/甲醇=50/1)进行精制，得到作为无色固体的目的 化合物(560mg、收率91% )。1H-WR(CDCl3) δ (ppm) 8. 98 (2H, s)，7. 19 (4H, d, J = 8. 8Hz)，6. 85 (4H，d, J = 8. 8Hz)，4. 84 (4H, s)，4. 10 (2H, t, J = 8. 5Hz)，3. 84-3. 76 (8. OH, m)，3. 80 (6H, s)，3. 18 (2H, t, J = 8. 5Hz) ,2. 69(3. OH, s).ESI(LC_MS 正极模式)m/z 582[(M+H)+].工序 H双-(4-甲氧基-苄基)-[5-(2_吗啉-4-基-6，7_ 二氢-5H-吡咯并[2, 3-d]嘧 啶-4-基)-嘧啶-2-基]-胺 在由工序G制备成的1-(4-{2_[双-(4-甲氧基-苄基)_氨基]-嘧 啶-5-基} -2-吗啉-4-基-5，6- 二氢-吡咯并[2，3-d]嘧啶_7_基)-乙酮(335mg、 0. 576mmol)的四氢呋喃(12ml)溶液中加入5M氢氧化钠水溶液(6ml)，回流一整夜。其中 加入IN盐酸进行中和，滤取生成的固体，将其用乙腈清洗，得到作为无色固体的目的化合 物(290mg、收率 93% )。 1H-WR(CDCl3) δ (ppm) 8. 97 (2H, s)，7. 18 (4H, d, J = 8. 3Hz) ,6. 85 (4H, d, J = 8. 3Hz)，4. 83 (4H, s)，3. 79 (6H, s)，3. 79-3. 73 (8H, m)，3. 68 (2H, t, J = 8. 3Hz)，3. 24 (2H, t, J = 8. 3Hz).ESI(LC_MS 正极模式)m/z 540 [ (M+H)+].工序I{5-[7-(2-氯-吡啶-4-基)-2-吗啉-4-基-6，7-二氢-5H-吡咯并[2, 3-d]嘧 啶-4-基]-嘧啶-2-基}_双-(4-甲氧基-苄基)_胺 使由工序H制备成的双-(4-甲氧基苄基)_ [5- (2-吗啉_4_基_6，7_ 二氢_5H_吡 咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-嘧啶-2-基]-胺(1.65g)悬浮于二甲基甲酰胺(20ml)，加 入2-氯-4-碘吡啶(805mg)、醋酸钯(35mg)、三苯基膦(Slmg)及磷酸钾(1.95g)，一边进 行超声波照射，一边吹入氩气10分钟。将反应液在100°C条件下搅拌1小时，在室温下冷 却后，加入水(50ml)。将混合液用醋酸乙酯(100ml)、二氯甲烷(IOOml)萃取，将合并的有 机层用饱和食盐水清洗后，用硫酸钠进行干燥。过滤除去干燥剂后，将减压浓缩滤液而得 到的残渣用硅胶柱色谱法(二氯甲烷/甲醇=50/1)进行精制，使残渣悬浮于醋酸乙酯/ 己烷(10ml/50ml)。滤取沉淀物，进行己烷清洗，在减压下进行干燥，得到黄色粉末目的物 (1. 75g,88% )。1H-WrGOOMHz, CDCl3) δ (ppm) 8. 99 (2H, s) ,8. 27 (1H, d, J = 5. 7Hz)，7. 82 (1H， d, J = 1. 9Hz)，7. 71 (1H, dd，J = 5. 7，1. 9Hz)，7. 20 (4H, d, J = 8. 4Hz)，6. 86 (4H, d, J = 8. 4Hz)，4. 84 (4H, s)，4. 08 (2H, t, J = 8. 4Hz)，3. 81-3. 89 (8H, m)，3. 80 (6H, s)，3. 36 (2H, t, J = 8. 4Hz).ESI(LC_MS 正极模式)m/z 651 [(M+H) +].工序J(5- {7- [2- (4-乙基-哌嗪 基)-吡啶 _4_基]_2_ 吗啉 _4_ 基 _6，7_ 二氢 _5H_ 吡 咯并[2，3-d]嘧啶-4-基}-嘧啶-2-基)-双-(4-甲氧基-苄基)_胺
在使由工序I制备成的{5-[7-(2_氯-吡啶-4-基)-2_吗啉-4-基-6，7_氢-5H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-嘧啶-2-基}-双-(4-甲氧基-苄基)-胺(200mg)、 叔丁醇钠(59mg)、钯二亚苄基丙酮络合物(16mg)悬浮于甲苯(4ml)中形成溶液，向该溶液 中吹入5分钟氩气。加入1-乙基哌嗪(59111)、2，8，9-三异丁基-2，5，8，9_四氮杂磷 杂-双环[3. 3. 3]十一碳烯(26mg)，在100°C下搅拌5小时。将反应液冷却至室温并加入 水后，用二氯甲烷萃取。将合并的有机层用饱和食盐水清洗，用硫酸镁进行干燥。过滤除去 干燥剂后，将减压浓缩滤液而得到的残渣用硅胶柱色谱法(二氯甲烷/甲醇=100/1)进行 精制，得到黄色固体(211mg，94% )。1H-WrGOOMHz, CDCl3) δ (ppm) 8. 99 (2H, s)，8. 13 (1H，d, J = 5. 7Hz)，7. 47 (1H， bs)，7. 28 (1H, bs)，7. 20 (4H, m)，6. 85 (4H, m)，4. 84 (4H, s)，4. 09 (2H, m)，3. 87 (4H, m)， 3. 80 (10H, s)，3. 59 (4H, m)，3. 31 (2H, m)，2. 47 (4H, m)，2. 48 (2H, q, J = 7. 25Hz)，1. 12 (3H, t, J = 7. 25Hz).ESI(LC_MS 正极模式)m/z 730 [ (M+H) +].工序 K(5- {7- [2- (4-乙基-哌嗪 基)-吡啶 _4_基]_2_ 吗啉 _4_ 基 _6，7_ 二氢 _5H_ 吡 咯并[2，3-d]嘧啶-4-基}-嘧啶-2-基)-(4-甲氧基-苄基)-胺 将由工序J制备成的(5-{7-[2-(4_乙基-哌嗪-1-基)_吡啶-4-基]-2-吗 啉-4-基-6，7- 二氢-5H-吡咯并[2，3-d]嘧啶_4_基}-嘧啶-2-基)-双-(4-甲氧基-苄 基)-胺(211mg)溶解于三氟醋酸(1ml)，在50°C下搅拌5小时。加入水后，用二氯甲烷萃 取，将有机层用饱和碳酸氢钠水、饱和食盐水清洗，用硫酸镁进行干燥。过滤除去干燥剂后， 将减压浓缩滤液而得到的残渣用硅胶柱色谱法(二氯甲烷/甲醇=10/1)进行精制，得到 作为淡黄色固体的(5-{7-[2-(4_乙基-哌嗪-1-基)_吡啶-4-基]-2-吗啉-4-基-6， 7- 二氢-5H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基}-嘧啶-2-基)-(4-甲氧基-苄基)-胺(197mg)。1H-NMR(CDCl3) δ (ppm) 8. 88 (2H, s)，8.05(lH，d, J = 5. 7Hz)，7· 73 (1H，s)， 7. 30 (2H, m)，7. 19 (1H, s)，6. 99 (2H, m)，4. 63 (2H, s)，4. 17 (2H, m)，3. 85 (11H, m)，3. 40 (8H, m)，3. 19 (2H, q, J = 7. 25Hz)，1. 41 (3H, t, J = 7. 25Hz).工序 L5-{7-[2-(4-乙基-哌嗪基)-吡啶_4_基]_2_吗啉_4_基_7H_吡咯并[2， 3-d]嘧啶-4-基}-嘧啶-2-基胺将由工序K制备成的(5-{7-[2-(4_乙基-哌嗪-1-基)_吡啶-4-基]-2-吗 啉-4-基-6，7-二氢-5H-吡咯并[2，3-d]嘧啶_4_基}-嘧啶-2-基)-(4_甲氧基-苄 基)_胺(30mg)溶解于氯仿/水=20/1 (2. Iml)，加入DDQ(33mg)，在室温下搅拌4小时。加 入IN-NaOH后，用氯仿萃取，将有机层用硫酸镁进行干燥。过滤除去干燥剂后，将减压浓缩 滤液而得到的残渣用硅胶柱色谱法(二氯甲烷/甲醇=30/1)进行精制，得到作为淡黄白
色固体的5-{7-[2-(4-乙基-哌嗪-1-基)_吡啶-4-基]-2-吗啉-4-基-7H-吡咯并[2， 3-d]嘧啶-4-基}-嘧啶-2-基胺(9mg,38% )。1H-WR(CDCl3) δ (ppm) :9. 05 (s，2H)，8. 27 (d，1H，J = 5. 7Hz)，7. 46 (d，1H，J = 1. 1Hz)，7. 33 (d, 1H, J = 3. 8Hz)，7. 02 (dd, 1H, J = 5. 7Hz，J = 1. 9Hz)，6. 72 (d, 1H, J = 3. 8Hz)，5. 37 (s，2H)，3. 89 (m, 8H)，3. 69 (t,4H, J = 5. 3Hz)，2. 62 (t,4H, J = 4. 5Hz)，2. 52 (q, 2H, J = 7. 2Hz)，1. 17 (t, 3H, J = 7. 2Hz)ESI (LC-MS 正极模式)m/z 487 [ (M+H) +].实施例2{3-[4-(2-氨基-嘧啶-5-基)-2-吗啉-4-基-卩比咯并[2，3_d]嘧啶_7_基]_4_甲 基-苯基}-吗啉-4-基-甲酮(2-1)的合成 在3-溴-4-甲基苯甲酸(2. 8g、13. Ommo 1)的二氯甲烷溶液(80ml)中加入 WSCl (3. 5g、18. 2mmol)、吗啉(1. 36ml、15. 6mmol)、N，N- 二 甲基氨基吡啶(794mg、6. 5mmol)， 在室温下搅拌1小时。在反应液中加入饱和氯化铵水溶液，用醋酸乙酯(IOOml)萃取两次。 将有机层用饱和食盐水(IOOml)清洗，用硫酸钠进行干燥。过滤除去干燥剂后，将减压浓缩 滤液而得到的残渣用硅胶柱色谱法(二氯甲烷/甲醇=50/1)进行精制，由此得到作为黄 褐色固体的(3-溴-4-甲基-苯基)-吗啉-4-基-甲酮(3. 2g、86% )。1H-WR(CDCl3) δ (ppm) 7. 59 (1H, d, J = 1. 5Hz)，7. 26 (1H，s), 7. 25 (1H, d, J = 1. 5Hz)，3. 69 (8H, s)，2. 42 (3H, s) ·ESI(LC-MS 正极模式)m/z 284，286 (M)+.工序 B{3-[4-(2-氨基-嘧啶-5-基)-2-吗啉-4-基-吡咯并[2，3_d]嘧啶_7_基]_4_甲 基-苯基}-吗啉-4-基-甲酮将按照实施例1工序H制备成的双-(4-甲氧基-苄基)-[5-(2_吗啉_4_基-6， 7-二氢-5H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-嘧啶-2-基]-胺(3. 0g、5. 56mmol)、由工序A 得到的(3-溴-4-甲基-苯基)-吗啉-4-基-甲酮(2. 4g、8. 34mmol)、Pd(OAc)2(125mg、 0. 556mmol)、X-Phos(529mg、l. llmmol)、磷酸钾(2.4g、ll. 12mmol)的二甲基甲酰胺(50ml) 溶液在超声波照射下进行脱气，在100°C下搅拌14小时。将反应液冷却至室温后，加入 饱和氯化铵水溶液，用醋酸乙酯(200ml)萃取两次。将有机层用饱和食盐水(200ml)清工序 A(3-溴-4-甲基-苯基)-吗啉-4-基-甲酮洗，用硫酸钠进行干燥。过滤除去干燥剂后，将减压浓缩滤液而得到的残渣用硅胶柱 色谱法(二氯甲烷/甲醇=100/1 30/1)进行精制，由此得到作为褐色油状物质的 [3- (4- {2-[双-(4-甲氧基-苄基)-氨基]-嘧啶-5-基} -2-吗啉-4-基-5，6- 二氢-吡 咯并[2，3-d]嘧啶-7-基)-4-甲基-苯基]-吗啉-4-基-甲酮(5. 2g、100% )。将其溶解于TFA (25ml)，在N-乙酰基半胱氨酸(1.8g、ll. lmmol)存在下回流14小 时。将减压浓缩反应液而得到的残渣用硅胶柱色谱法(二氯甲烷/甲醇=5/1)进行精制， 由此得到作为黄色粉末的目的化合物(124mg、4% )。1H-NMR(CDCl3) δ (ppm) 9. 08 (2H, s)，7. 43 (2H，d, J = 1. 2Hz)，7. 37 (1H，s)， 7. 03 (1H, d, J = 3. 8Hz)，6. 71 (1H, d, J = 3. 8Hz)，5. 30 (2H, s)，3. 76 (16H, br s)，2. 22 (3H, s).ESI(LC-MS 正极模式)m/z 501 (M+H)+.另外，在上述的反应中，除目的化合物之外，得到作为生成物的{3-[4-(2_氨 基-嘧啶-5-基)-2-吗啉-4-基-5，6- 二氢-吡咯并[2，3-d]嘧啶-7-基]~4~甲基-苯 基}-吗啉-4-基-甲酮(ESI (LC-MS正极性模式)m/z 503 (M+H) +)。使得到的{3-[4- (2-氨 基-嘧啶-5-基)-2-吗啉-4-基-5，6- 二氢-吡咯并[2，3-d]嘧啶-7-基]~4~甲基-苯 基}-吗啉-4-基-甲酮和与其相对的1 3当量的DDQ在二氯甲烷和二甲基甲酰胺的混 合溶剂下(例如9 1 1 1的混合比。可以进一步混合乙腈)进行反应，由此，也可 以合成目的化合物的{3-[4-(2-氨基-嘧啶-5-基)-2-吗啉-4-基-吡咯并[2，3-d]嘧 啶-7-基]-4-甲基-苯基}-吗啉-4-基-甲酮。实施例35-{7-[4-(1，1_ 二氧代_1 λ 6-硫代吗啉-4-基甲基)-苯基]_2_吗 啉-4-基-7Η-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基}-嘧啶-2-基胺(3_1)的合成 工序 A4- (4- {2-[双-(4-甲氧基-苄基)-氨基]-嘧啶_5_基} _2_吗啉~4~基_5，6_ 氢-吡咯并[2，3-d]嘧啶-7-基)-苯甲醛 将按照实施例1工序H制备成的双-(4-甲氧基-苄基)-[5-(2_吗啉_4_基-6， 7-二氢-5H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-嘧啶-2-基]-胺(50mg、0. 093mmol)、4_溴-苯 甲醛(22mg、0. 121mmol)、Pd2dba3(8. 5mg、0. 0093mmol) ,S-Phos (7. 6mg、0. 0186mmol)、磷酸钾 (39mg、0. 186mmol)的二甲基甲酰胺(Iml)溶液在超声波照射下进行脱气，在100°C下搅拌 16小时。将反应液冷却至室温后，加入饱和氯化铵水溶液，用醋酸乙酯(IOml)萃取两次。 将有机层用饱和食盐水(IOml)清洗，用硫酸钠干燥后，进行减压馏去，将由此得到的残渣 用乙醚清洗，由此得到茶褐色粉末的目的化合物(29mg、49% )。1H-WR(DMSO-D6) δ (ppm) :9·87(1Η，s) ,8. 99 (2H, s), 8. 06 (2Η, d, J = 8· 8Hz)， 7. 91 (2Η, d, J = 8. 8Ηζ)，7. 21 (4Η, d, J = 8. 3Ηζ)，6. 89 (4Η, d, J = 8. 3Ηζ)，4. 79 (4Η, s)， 3. 73 (6Η, s)，3· 34 (4Η, s) ·ESI(LC_MS 正极模式)m/z 644 (M+H)+.工序 B(5- {7- [4- (1，1- 二氧代-I λ 6-硫代吗啉_4_基甲基)-苯基]_2_吗啉_4_基_6， 7- 二氢-5H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基}-嘧啶-2-基)-双-(4-甲氧基-苄基)-胺 在由工序A制备成的4-(4-{2_[双_(4_甲氧基-苄基)_氨基]-嘧 啶-5-基}-2-吗啉-4-基-5，6-二氢-吡咯并[2，3-d]嘧啶-7-基)-苯甲醛(0. 80g、 1. 24mmol)的二氯甲烷溶液(80ml)中，加入硫代吗啉_1，1_ 二氧化物(0. 34g、2. 49mmol)、 三乙酰氧基硼氢化钠(0. 55g、2.49mmol)及醋酸(0. 14ml、2. 49mmol)，加热回流24小时。 将反应体系冷却后，过滤分离析出的固体，用二氯甲烷(20ml)进行清洗。将滤液的洗液合 并，将其依次用饱和氯化铵水溶液(50mL)和饱和氯化钠水溶液(50mL)清洗后，将有机层 用硫酸镁进行干燥。过滤除去干燥剂后，将减压浓缩滤液而得到的残渣用氨基硅胶柱色谱 法(二氯甲烷/N-己烷=4/1)进行精制，由此得到作为黄色固体的[(5-{7-[4-(1，1_ 二氧 代-1 λ 6-硫代吗啉-4-基甲基)-苯基]-2-吗啉-4-基-6，7- 二氢-5Η-吡咯并[2，3-d] 嘧啶-4-基}_嘧啶-2-基)-双-(4-甲氧基-苄基)_胺(0.71g、75% )。1H-WR(CDCl3) δ :9. 00 (2Η, s)，7. 78 (2H, d, J = 8. 6Hz)，7. 32 (2H, d, J = 8. 6Hz)， 7. 19 (4H, d, J = 8. 6Ηζ)，6· 90-6. 82 (4Η, m)，4· 84 (4Η, s)，4· 11 (2Η, t, J = 8. 2Ηζ)， 3. 89-3. 76 (14Η, m)，3. 64 (2Η, s)，3. 31 (2H, t, J = 8. 2Hz)，3. 10-2. 97 (8H, m) ·ESI(LC_MS 正极模式)m/z 763 (M+H)+.工序 C(5- {7- [4- (1，1- 二氧代-1 λ 6-硫代吗啉-4-基甲基)-苯基]_2_吗啉_4_基_6， 7- 二氢-5H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基}-嘧啶-2-基)-胺 在由工序B制备成的[(5-{7-[4-(1，1-二氧代-1入6-硫代吗啉-4-基甲基)_苯 基]-2-吗啉-4-基-6，7- 二氢-5H-吡咯并[2，3-d]嘧啶_4_基}-嘧啶-2-基)-双-(4-甲 氧基-苄基)-胺(100. 5mg、0. 132mmol)的醋酸乙酯溶液(2ml)中，加入浓硫酸(0.50ml、 9. 35mmol)，在70°C下搅拌3小时。冷却至室温后，在反应液中加入5 %磷酸钾水溶液 (30ml)。滤取析出的固体，用水(5ml)进行清洗。将其悬浮于二氯甲烷(2. 5ml)，滤取生成 的固体后，用二氯甲烷(3ml)进行清洗，由此得到作为淡黄色固体的(5-{7-[4-(1，1_ 二氧 代-1 λ 6-硫代吗啉-4-基甲基)-苯基]-2-吗啉-4-基-6，7- 二氢-5Η-吡咯并[2，3-d] 嘧啶-4-基}-嘧啶-2-基)-胺(48. 5mg,70% )。1H-WR(DMSO-D6) δ :8. 81 (2Η，s)，7. 81 (2Η，d，J = 8. 6Hz)，7. 34 (2Η，d，J = 8. 6Hz)， 7. 06 (2Η, s)，4. 08 (2Η, t, J = 8. 1Hz)，3. 70 (8H, br s)，3. 63 (2H, s)，3. 31-3. 24 (2H, m)， 3. 14-3. 07 (4H, m)，2. 91-2. 84 (4H, m).ESI(LC-MS 正极模式)m/z 523 (M+H)+.工序D5-{7-[4-(l，l- 二氧代_1 λ 6-硫代吗啉-4-基甲基)-苯基]_2_吗 啉-4-基-7Η-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基}-嘧啶-2-基-胺在由工序C制备成的(5-{7-[4-(1，1_ 二氧代-1λ6-硫代吗啉-4-基甲基)_苯 基]-2-吗啉-4-基-6，7- 二氢-5Η-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基}-嘧啶-2-基)-胺 (8.6mg、0.017mmol)的二氯甲烷/乙腈/ 二甲基甲酰胺混合溶液(1 1 3.5ml)中，加 入DDQ(5.6mg、0.025mmol)，在室温下搅拌1小时。将反应液进行减压浓缩，将得到的残 渣用制备型薄层色谱法(二氯甲烷/甲醇=9/1)进行精制，由此得到作为淡黄色固体的 5-{7-[4-(1，1- 二氧代-1 λ 6-硫代吗啉-4-基甲基)-苯基]-2-吗啉-4-基-7Η-吡咯并 [2，3-d]嘧啶-4-基}-嘧啶-2-基-胺(6. 2mg,72% )。1H-WR (DMSO-D6) δ :9. 04 (2Η, s)，7. 88 (2H, d，J = 8. OHz)，7. 67 (1H, d，J = 3. OHz)， 7. 50 (2H, d, J = 8. 0Hz)，7. 23 (2H, br s)，6. 96 (1H, d, J = 3. OHz)，3. 75-3. 71 (10H, br m)， 3. 18-3. 10 (4H, m)，2. 96-2. 89 (4H, m).ESI(LC_MS 正极模式)m/z 521 (M+H)+.实施例45- (7-甲磺酰基-2-吗啉-4-基_7H_吡咯并[2，3-d]嘧啶_4_基)-嘧啶_2_基 胺(4-1)的合成 工序 A4-氯-7-甲磺酰基-2-吗啉-4-基_6，7_ 二氢_5H_吡咯并[2，3-d]嘧啶 使甲磺酰胺(4.76g、50mmol)和碳酸钾(3. 45g、25mmol)在 NMP(IOml)中悬浮，一 边在70°C下搅拌，一边用5分钟滴加按照实施例1工序B制备成的4-[4，6- 二氯-5- (2-氯 乙基)_嘧啶-2-基]-吗啉的NMP溶液(20ml)。将反应液在100°C下搅拌5小时后，自然 冷却至25°C，进一步搅拌12小时。一边在加热到70°C的上述反应液中进行搅拌，一边滴加 水(30ml)将反应液的内部温度保持在70°C，目视确认在反应液中观察不到不溶物后，自然 冷却至25°C (自50°C开始晶析)。在得到的悬浮液中一边进一步搅拌、一边加入水(30ml) 后，搅拌30分钟。滤取生成的沉淀物并进行水洗(10ml)，得到4-氯-7-甲磺酰基-2-吗 啉-4-基-6,7- 二氢-5H-吡咯并[2，3-d]嘧啶的无色粉末(2. 13g,67% ))。1H-WR(CDCl3) δ :4· 08 (2Η, dd, J = 9· 0，7. 8Ηζ)，3. 80-3. 71 (8Η, m)，3. 29 (3Η, s)， 3. 02 (2H, dd, J = 9. 0,7. 8Hz).ESI(LC_MS 正极模式)m/z 319，321 (M+H)+·工序 B[5-(7_甲磺酰基-2-吗啉-4-基-6，7_二氢-5H-吡咯并[2，3_d]嘧啶_4_基)-嘧 啶-2-基]-双-(4-甲氧基-苄基)_胺将由工序A制备成的4-氯-7-甲磺酰基-2-吗啉_4_基_6，7_ 二氢_5H_吡咯并 [2，3-d]嘧啶(80. 0mg、0. 251mmol)、双-(4-甲氧基-苄基)-[5- (4，4，5，5-四甲基-[1，3， 2] 二氧硼戊环-2-基)-嘧啶-2-基]-胺(138. 9mg、0. 30Immo 1)、磷酸钾(213mg、1. OOmmo 1) 及二氯双(三苯基膦)钯(II)(1.8mg、2. 56ymol)溶解于水/ 二甲基甲酰胺混合溶剂 (1 15、80(^1)，将其在超声波照射下进行脱气，在氩氛围下在601下搅拌2小时。将反 应液冷却至室温后，加入水(800 μ 1)，在室温下搅拌30分钟。滤取析出的固体，依次用水 (1. 5ml)、甲醇(1. 5ml)、叔丁基甲基醚(1. 5ml)清洗，由此得到作为白色固体的[5-(7-甲磺 酰基-2-吗啉-4-基-6，7- 二氢-5H-吡咯并[2，3-d]嘧啶_4_基)-嘧啶-2-基]-双-(4-甲 氧基-苄基)-胺(151.6mg、98% )。1H-WR (DMSO-D6) δ :8. 97 (2. OH, s)，7. 20 (4. OH, d, J = 8. 6Hz)，6. 88 (4. OH, d, J =8. 6Hz)，4. 79 (4. OH, s)，3. 99 (2. OH, t, J = 8. 2Hz)，3. 73 (6. OH, s)，3. 75-3. 68 (8. OH, m)， 3. 34 (3. OH, s)，3. 27 (1. 9H, t, J = 8. 2Hz). ESI(LC_MS 正极模式)m/z 618 (M+H)+.另外，在本工序中，替代双-(4-甲氧基-苄基)-[5-(4，4，5，5_四甲基_[1，3，2] 二氧硼戊环-2-基)-嘧啶-2-基]-胺，使用2-氨基-5- (4，4，5，5-四甲基-1，3，2- 二氧 硼戊环-2-基)嘧啶来合成5-(7-甲磺酰基-2-吗啉-4-基-6，7- 二氢-5H-吡咯并[2， 3-d]嘧啶-4-基)-嘧啶-2-基胺。 在按照实施例4的工序A制备成的4-氯-7-甲磺酰基_2_吗啉_4_基_6，7_ 二 氢-5H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(57. 9g、181. 6mmol)的 DMF 溶液(550ml)中，加入 2-氨 基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧硼戊环-2-基)嘧啶(48. 2g、218. Ommol)、磷酸钾 (42.4g、199.8mmol)、水(30ml)，在氮氛围下进行脱气。进一步加入二氯双(三苯基膦)钯 (II) (1. 3g、l. Smmol)，在氮氛围下进行脱气后，在60°C下搅拌2小时。将反应液在冰冷下 冷却后，加入水(750ml)，搅拌2小时。滤取生成的沉淀物，用水(240ml)、丙酮(240ml)清 洗，得到粗固体(75. 6g)。使得到的固体(62. Og)悬浮于水(1500ml)，在50°C下搅拌1小 时。滤取沉淀物，用水(400ml)、丙酮(400ml)清洗，得到作为灰白色固体的5-(7-甲磺酰 基-2-吗啉-4-基-6，7- 二氢-5H-吡咯并[2，3-d]嘧啶_4_基)-嘧啶-2-基胺(53. 7g、 96% )。ESI(LC_MS 正极模式)m/z 378[(M+H)+].使用5- (7-甲磺酰基-2-吗啉-4-基-6，7- 二氢_5H_吡咯并[2，3-d]嘧 啶-4-基)_嘧啶-2-基胺，替代后述的工序C中的[5-(7-甲磺酰基-2-吗啉-4-基-6， 7- 二氢-5H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-嘧啶-2-基]-双-(4-甲氧基-苄基)_胺，进 行按照工序C的方法的氧化反应，由此，也可以得到5-(7-甲磺酰基-2-吗啉-4-基-7H-吡 咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-嘧啶-2-基胺。工序 C[5-(7-甲磺酰基-2-吗啉-4-基_7H_吡咯并[2，3_d]嘧啶_4_基)-嘧 啶-2-基]-双-(4-甲氧基-苄基)_胺 在由工序B制备成的[5-(7-甲磺酰基-2-吗啉-4-基-6，7-二氢-5H-吡咯并[2， 3-d]嘧啶-4-基)-嘧啶-2-基]-双-(4-甲氧基-苄基)-胺(101.3mg、0. 164mmol)的二氯甲烷溶液(3ml)中，加入DDQ(48.4mg、0.213mmol)，在室温下搅拌30分钟。在反应液中加 入饱和氯化钠水溶液(25ml)，用二氯甲烷(50ml)萃取，将有机层用硫酸镁进行干燥。过滤 除去干燥剂后，将减压浓缩滤液而得到的残渣用硅胶柱色谱法(二氯甲烷/甲醇=150/1) 进行精制，由此得到作为黄色固体的[5-(7-甲磺酰基-2-吗啉-4-基-7H-吡咯并[2，3-d] 嘧啶-4-基)-嘧啶-2-基]-双-(4-甲氧基-苄基)-胺(84. 5mg,84% )。1H-WR(CDCl3) δ :9· 10 (2Η, s)，7. 33 (1H, d, J = 4. 1Hz)，7. 21 (4H, d, J = 8. 3Hz)，
6.87 (4H, d, J = 8. 3Hz)，6. 72 (1H, d, J = 4. 1Hz)，4. 86 (4H, br s)，3. 95-3. 88 (4H, m)， 3. 85-3. 78 (10H, m)，3. 56 (3H, s).ESI(LC-MS 正极模式)m/z 616 (M+H)+.工序 D5- (7-甲磺酰基-2-吗啉-4-基_7H_吡咯并[2，3-d]嘧啶_4_基)-嘧啶_2_基 胺在由工序C制备成的[5-(7-甲磺酰基-2-吗啉-4-基_7H_吡咯并[2，3_d]嘧 啶-4-基)-嘧啶-2-基]-双-(4-甲氧基-苄基)_胺(81.5mg、0. 132mmol)的醋酸乙酯 溶液(3ml)中，加入浓硫酸(0. 751111、14.0讓01)，在701下搅拌3小时。冷却至室温后，在 反应液中加入10%磷酸钾水溶液(50ml)。滤取析出的固体，用水(5ml)进行清洗。将其悬 浮于二氯甲烷(1ml)，滤取生成的固体后，用二氯甲烷(3ml)清洗。将得到的固体用制备型 薄层色谱法(二氯甲烷/甲醇=10/1)进行精制，由此得到作为淡黄色固体的5-(7_甲磺 酰基-2-吗啉-4-基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-嘧啶-2-基胺(22. 5mg,45% )。1H-WR (DMSO-D6) δ :9· 00 (2Η, s)，7. 39 (1H, dd, J = 4. 1,1. 2Hz)，7. 32 (2H, br s)，
7.01 (1H, dd, J = 4. 1，1. 2Hz)，3. 84-3. 70(11H, m).ESI(LC_MS 正极模式)m/z 376 (M+H)+.[试验例1][PI3K阻滞活性的测定]关于式⑴表示的本发明化合物，用由baculovirus表达系制备成的人 PI3K (pi 10 α/ρ85 α)，使用 AlphaScreen GST Detection Kit (PerkinElmer, Inc.)测定阻 滞活性。在384孔分析用板上将溶解于二甲基亚砜(DMSO)的规定浓度的本发明化合物和 PI3K 混合，在室温下放置 20 分钟后，添加 4 μ MPI (4，5) P2 (Echelon Corporation)、10 μ M ATP (5mM Hepes ρΗ7. 5，2. 5mMMgCl2)，引发反应。在37°C下反应15分钟后，添加由大肠杆菌
GST-GRPU Anti-GST Acceptor Beads (PerkinElmer, Inc.) > Streptavidin Donor Beads (PerkinElmer, Inc. )、biotin-PI(3,4,5)P3(EchelonCorpoRation) (IOmM Tris-HCl pH7. 4，150mM NaCl，7. 5mM EDTA, lmMDTT,0. 1% Tween20)，在室温下放置 1 小时 后，利用Envision测定机(PerkinElmer, Inc.)测定由680nm的激发光放出的520_620nm 的发光。就化合物的阻滞活性而言，将仅添加有DMSO时的测定值设定为0%、将没有添加 ATP时的测定值设定为100%阻滞活性，算出表示50%阻滞活性的浓度作为IC5(l(yM)。上述试验例1 可以以 Analytical Biochemistry, 2003, 313, 234-245 ；Alexander GRay et al为参考。[试验例2]
[细胞增殖抑制活性的测定]关于式(I)表示的本发明化合物，测定了细胞增殖抑制活性。癌症细胞增殖抑制 活性使用株式会社同仁化学研究所制Cell Counting Kit_8进行测定。将由American Type Culture Collection (美国弗吉尼亚州)购入的人大肠癌症细胞株HCT116，以每孔2000个 接种于96孔培养板的1个孔中，添加规定浓度的化合物后，在37°C、5% CO2环境下培养4 天。在培养第4天添加Cell Counting Kit_8的溶液，根据试剂盒附带的操作流程测定吸 光度(测定波长450nm、参照波长615nm)。将不含有被验物质时的测定值设定为0%阻滞， 将不含有被验物质及细胞时的测定值设定为100%阻滞，算出表示50%阻滞活性的浓度作 为 IC5tl(PM)。关于人肺癌细胞株NC1-H460、人前列腺癌症细胞株PC3，也由American Type Culture Collection购入，测定癌症细胞增殖抑制活性。关于NC1-H460、PC3，分别以每孔 1000个、3000个接种于96孔培养板的1个孔中，进行与人大肠癌症细胞株同样的试验，算 出表示50%阻滞活性的浓度作为IC5tl ( μ M)。将酶阻滞活性及细胞增殖抑制活性示于以下表中。如表所示，本发明化合物均显 示良好的酶阻滞活性及细胞增殖抑制活性。
权利要求
一种化合物或其医药学上允许的盐，其用式(I)表示，式(I)式中，Q表示 X Y 表示的连结基；X表示单键、 CO 、 CONH 、 CON(C1 4烷基) 、 CS 、 CSNH 、 CSN(C1 4烷基) 、或 SO2 ；Y表示单键、亚芳基、或杂亚芳基，所述亚芳基及杂亚芳基为无取代或可以利用 卤素、 C1 6烷基、 OH或 OC1 6烷基取代1～4处；其中，X和Y不同时为单键；R1表示 C0 6亚烷基 (A)m C1 6烷基、或 C0 6亚烷基 (A)m C0 6亚烷基 (杂环)；A表示 CO 、 CS 、 CONH 、 CON(C1 4烷基) 、 CSNH 、 CSN(C1 4烷基) 、 NH 、或 N(C1 4烷基) ；m表示0或1；所述 (杂环)为杂芳基或以下式(a)表示的基团；式中，Ra及Rb相同或相互不同，表示氢原子、 C1 6烷基、 卤素、 OH、或 OC1 6烷基；W表示 CRcRd 、 O 、 S 、 SO 、 SO2 、或 NRe ；n表示0或1；Rc及Rd相同或相互不同，表示氢原子、 卤素、 C1 6烷基、 OH、 OC1 6烷基或杂芳基；Re表示氢原子、 C1 6烷基、 OH、 OC1 6烷基、或杂芳基，Rc、Rd及Re中的 C1 6烷基及 OC1 6烷基可以用 卤素或 OH取代。FPA00001189034700011.tif,FPA00001189034700012.tif
2.如权利要求1所述的化合物或其医药学上允许的盐，其中，在式⑴中，X或Y的任 一个为单键。
3.如权利要求1所述的化合物或其医药学上允许的盐，其中，X为单 键、-co-、-CONH-、-CSNH-、或-SO2-。
4.如权利要求1所述的化合物或其医药学上允许的盐，其在式(I)中，Y表示的亚芳 基或杂亚芳基是由选自苯、吡咯、吡唑、咪唑、三唑、噁唑、异噁唑、吲唑、噻唑、吡啶、哒嗪、 嘧啶、吡嗪、噁嗪、三嗪、吲哚、苯并咪唑、苯并噁唑、苯并噻唑、苯并吡唑、喹啉、异喹啉、喹喔 啉、喹唑啉、酞嗪、嘌呤及蝶啶中的环衍生的。
5.如权利要求1所述的化合物或其医药学上允许的盐，其中，在式(I)中，R1中的_(杂环)为吡啶基或以下(a_l)、(a-2)、(a-3)、(a_4)、(a_5)、(a_6)、(a_7)、或(a_8)表示的基 团， 式中，R。、Rd、及Re如权利要求1中所定义的那样。
6.如权利要求1所述的化合物或其医药学上允许的盐，其在式(I)中，X为单 键、-co-、-CONH-、-CSNH-、或-SO2-；Y为单键、亚苯基、或亚吡啶基；而且， R1为 —Ccm亚烷基 一(A)m—CtM亚烷基-N、^NRe(a-6·)-C0.4亚烷基"~<A>m_Co_4亚烧基-I(a-7")-CtM亚烷基""(A)m-CtM亚烷基—NO〇2一Ccm亚烷基一(A)m-Cw亚烷基(a-8')或-Ch烷基此时，A 表示-CO-、-NH-、-CONH-或-CONMe- ；m 为 O 或 1 ； Re表示氢原子、_(可以用卤原子取代的CV6烷基)或吡啶基。
7.如权利要求1所述的化合物或其医药学上允许的盐，其中，所述化合物选自 5-{7-[2-(4-乙基-哌嗪-1-基)_吡啶-4-基]-2-吗啉-4-基-7H-吡咯并[2，3_d]嘧 啶-4-基}_嘧啶-2-基胺；{3-[4-(2-氨基-嘧啶-5-基)-2-吗啉-4-基-吡咯并[2，3-d]嘧啶_7_基]-4-甲 基-苯基}-吗啉-4-基-甲酮；5- {7-[4- (1，1- 二氧代-1 λ 6-硫代吗啉-4-基甲基)-苯基]-2-吗啉-4-基-7Η-吡 咯并[2，3-d]嘧啶-4-基}-嘧啶-2-基胺；以及5- (7-甲磺酰基-2-吗啉-4-基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶_4_基)-嘧啶-2-基胺。
8.一种化合物的制造方法，其制造权利要求1所述的式(I)表示的化合物， 式中，Q及R1如权利要求1中所定义的那样，其中，所述制造方法可以包含使式(Via)表示的化合物与氧化剂反应后、进一步将氨 基的保护基进行脱保护的工序， 式中，Q及R1如权利要求1中所定义的那样；PG’表示氨基的保护基。
9.一种医药组合物，其包含权利要求1 7中任一项所述的化合物或医药学上允许的 盐作为有效成分。
10.一种PI3K阻滞剂，其包含权利要求1 7中任一项所述的化合物或医药学上允许 的盐作为有效成分。
11.一种增殖性疾病的预防剂或治疗剂，其包含权利要求1 7中任一项所述的化合物 或医药学上允许的盐作为有效成分。
12.如权利要求11所述的预防剂或治疗剂，其中，所述增殖性疾病为癌症。
13.如权利要求12所述的预防剂或治疗剂，其中，所述癌症为大肠、前列腺或非小细胞肺癌。
全文摘要
本发明提供一种增殖性疾病例如癌症的预防或治疗剂，其具有优异的PI3K阻滞效果、具有细胞增殖阻滞作用、同时在体内的稳定性及水溶解性优异。一种化合物或其医药学上允许的盐，其用式(I)表示，式(I)[式中，Q表示-X-Y-表示的连结基；X表示单键、-CO-、-CONH-、-CON(C1-4烷基)-、-CS-、-CSNH-、-CSN(C1-4烷基)-、或-SO2-；Y表示单键、亚芳基或杂亚芳基；其中，X和Y不同时为单键；R1表示-C0-6亚烷基-(A)m-C1-6烷基或-C0-6亚烷基-(A)m-C0-6亚烷基-(杂环)]。
文档编号A61K31/5377GK101932584SQ20098010397
公开日2010年12月29日 申请日期2009年2月6日 优先权日2008年2月7日
发明者大和田润, 小山耕平, 村田毅, 洪右上, 海老池启达 申请人:中外制药株式会社
技术领域：
本发明涉及一种新型缩合嘧啶衍生物及其医药学上允许的盐、含有其的医药组合 物及它们的合成中间体等。
背景技术：
磷脂酰肌醇-3激酶(Phosphatidylinositol 3-kinase) (PI3K)为肌醇磷脂 质的磷酸化酶之一，作为将肌醇环的3位进行磷酸化的酶而广为所知，在生物体内广 泛地表达。该PI3K通过增殖因子、激素等刺激而被活化，促进Akt或PDKl的活化， 已知与抑制细胞死亡的生存信号、细胞骨架、葡萄糖代谢、小细胞传输等有关，另外， 由PI3K生成的3位进行了磷酸化的肌醇磷脂质作为这些信息传递系统的信使起作 用(Phosphatidylinositol 3-kinases in tumor progression.Eur.J.Biochem. 268, 487-498(2001) ；Phosphoinositide 3-kinase :the key switch mechanism in insulin signaling. Biochem. J. 333、471-490 (1998) ；Distinct roles of class I and class 11Iphosphatidyl inositol 3-kinase in phagosome formation and maturation. J. C. B., 155(1)，19-25(2001)等)。PI3K根据成为基质的肌醇磷脂质的种类分类为Class I、Class II, ClassIII 3 个等级。Class I 的酶在in vivo 巾，以 phosphatidylinositol (4, 5)-bisphosphate[PI(4,5)P2]为基质，生成 phosphatidylinositol(3， 4,5)-triphosphate[PI(3,4,5)P3],但在 in vitro 中，也可以以 phosphatidylinositol (PI) >、phosphatidylinositol (4)-phosphate[PI (4)P]为基质。另 外，Class I的酶根据活化机制进一步分类为Class la、lb。在Class Ia中含有ρΙΙΟα、 ρ110β、ρ110δ亚型，分别形成ρ85调节亚基(regulatory subunit)和杂二聚物复合体， 利用酪氨酸激酶型受容体等进行活化。在Class Ib中含有利用三聚物型G蛋白质的β γ 亚基Y)进行活化的pllO γ，形成plOl调节亚基(regulatory subunit)和杂二聚物。Class II的酶以PI、PI(4)P为基质，包含PI3KC2a、C2 0、C2 γ子类型。迄今 为止没有发现在C末端上具有C2区域、可被Class I的酶识别的调节亚基(regulatory subunit)ο有报道称Class III的酶仅以PI为基质，作为从酵母中分离的Vps34的人同源基 因的人Vps34与pl50相互作用，参与膜传输的控制。根据使用敲除这些PI3K的鼠的分析，有报道称Class Ia的pllO δ与T_cell、 B-cell的分化或功能等有关，Class Ib的ρΙΙΟγ与中性粒细胞趋化、肥大细胞(mast cell)、血小板、心肌细胞的异常有关(Phosphoinositide3-kinase signaling-which way to target ？ Trends in PharmacologicalScience,24(7),366-376 (2003))。基于这些结果，通过以class I的ρΙΙΟδ、ρ110γ为目标，期待对自身免疫疾病、 炎症、哮喘、心脏病疾等的有用性。
近年来，报道了在许多癌症种类(特别是卵巢癌、大肠癌、乳腺癌等)中，对PllO α 进行编码的基因PIK3CA的增幅、变异引起的永久的活化，在其基础上蛋白水平中的pllO α 的高表达，由此可以认为，生存信号的永久的活化引起的细胞凋亡的抑制担负癌化的机理
的一部分(PIK3CA isimplicated as an oncogene in ovarian cancer. Nature Genet. 21, 99-102, (1999) ；High frequency of mutations of the PIK3CA gene in human cancers. Science,304,554,(2004) ；Increased levels of phosphoinositol 3-Kinaseactivity in colorectal tumors. Cancer, 83,41—47(1998))。另外，以PI3K的产物之一的PI (3，4，5)P3作为基质的磷脂质磷酸酶的PTEN的缺 失、变异也在癌症中有众多报道。通过将PI (3，4，5)P3用作基质，PTEN是作为PI3K的抑制 物(suppressor)起作用的，因此可以认为，PTEN的缺失、变异与PI3K信号中的PI3K的活
化有关联。从这些理由出发，期待在PI3K活性提高了的癌症中通过特别地抑制PllO α的活 性来得到有用的抗癌作用。如上所述，作为在免疫疾病区域、抗炎症剂区域、抗癌剂区域等中被期待具有高有 用性的ΡΙ3Κ阻滞剂，已知有如下所述的Wortmarmin (非专利文献1)或LY294002 (非专利 文献2)作为特异的阻滞剂。最近，除此之外还报道有许多具有ΡΙ3Κ阻滞作用的化合物，迄今为止，以基于 ΡΙ3Κ阻滞作用的医药品来市售的产品还不存在，期望尽早开发可以临床使用的具有ΡΙ3Κ 阻滞作用的抗癌剂等。与此相对，对于如后述的通式⑴所示的以本化合物为代表的5-(2_吗 啉-4-基-7Η-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-嘧啶-2-基胺衍生物而言，后述的母核本身 目前不为人知，而且，作为具有PI3K阻滞作用的抗癌剂等的有用性也不为人知。专利文献1 美国专利5378700非专利文献1 :H Yano et al. , J. Biol. Chem.，268，25846，1993非专利文献2 :CJ Vlahos et al. , J. Biol. Chem.，269，5241，1994 本发明人等为了开发对于PI3K具有阻滞活性、同时安全性优异、因此作为抗癌剂 等有用的化合物，进行了潜心研究，结果发现，在下述式表示的通式(I’)中，以被口包围的 部分为母体的5- (2-吗啉-4-基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-嘧啶-2-基胺衍生物 具有优异的PI3K阻滞效果，同时，具有细胞增殖抑制阻滞效果，而且，体内的稳定性及水溶 解性优异，因此，可以成为作为癌症的预防或治疗剂有用的药剂，从而完成本发明。另外，还
发明内容发现作为其合成中间体有用的化合物，完成了本发明。
S即，本发明提供一种以下所示的式(I)表示的化合物或其医药学上允许的盐、式 (I)表示的化合物及其合成中间体的制造方法及含有式(I)表示的化合物或其医药学上允 许的盐的医药组合物。本发明涉及一种化合物或其医药学上允许的盐，所述化合物用式(I)表示， [式中，Q表示-X-Y-表示的连结基；X 表示单键、-CO-、-CONH-, -CON (C1^4 烷基)-、_CS_、-CSNH-, -CSN (C1^4 烷基)-、 或-SO2-；Y表示单键、亚芳基或杂亚芳基，(该亚芳基及杂亚芳基为无取代或可以用-商 素、-C1^6烷基、-0H、或-OCh烷基取代1 4处)；其中，X和Y不同时为单键；R1表示-CQ_6亚烷基-㈧^CV6烷基或-CQ_6亚烷基-㈧m_CQ_6亚烷基_ (杂环)；A 表示-CO-、-CS-、-CONH-, -CON^h 烷基)_、-CSNH-、-CSN (C1^4 烧 基)-、-NH-或-N((V4 烷基)_;
m表示0或1 ；
所述_(杂环)为杂芳基或以下的式(a)表示的基团； 式中，Ra及Rb相同或相互不同，表示氢原子、-C^6烷基、-卤素、-0H、或-OCV6烧 基；W 表示-CRcRd-、-0-、-S-、-SO-、-SO2-、或-NRe-；
η 表示 0 或 1 ；Rc及Rd相同或相互不同，表示氢原子、-卤素、-Cp6烷基、-OH、-OC1^6烷基或杂芳 基；Re表示氢原子、-C1^6烷基、-OH、-OCV6烷基或杂芳基(R。、Rd及Re中的-(^6烷基 及-OCh6烷基可以用-卤素或-OH取代)]。本发明还涉及一种化合物的制造方法，其制造上述式(I)表示的化合物， [式中，Q及R1如上述所定义的那样]其中，所述制造方法可以含有使式(Via)表示的化合物与氧化剂反应后、进一步 将氨基的保护基进行脱保护的工序。 [式中，Q及R1如上述所定义的那样；PG’表示氨基的保护基。]本发明进一步还涉及一种化合物的制造方法，其制造式(Via)表示的化合物， [式中，Q及R1如上述所定义的那样；PG’表示氨基的保护基]其中，包含在钯催化剂的存在下使式(Va)表示的化合物与以下的式子表示的硼 酸衍生物反应、得到式(Via)表示的化合物的工序。 [式中，M表示离去基团；Q及R1如上述所定义的那样] [式中，R’及R”各自独立，表示氢原子或CV6烷基，或者可以R’及R”在一起形 成-C2_3亚烷基_，此时，-c2_3亚烷基-可以用-甲基取代1 4处；PG’表示氨基的保护基]本发明进一步还涉及一种包含上述式(I)的化合物或医药学上允许的盐作为有 效成分的医药组合物。式(I)表示的本发明化合物具有优异的PI3K阻滞效果，具有细胞增殖阻滞作用， 同时，体内的稳定性及水溶解性优异，因此，可以用作增殖性疾病、例如癌症的预防或治疗 剂。另外，式(I)表示的化合物中的一部分化合物作为其它化合物的合成中间体也是有用 的。另外，式(via)的化合物作为用于得到上述式(I)的化合物的合成中间体为有用的化 合物。
具体实施例方式下面，对本发明的化合物、其制造方法、含有该化合物的医药进行说明。将本说明书中使用的用语作如下定义。本说明书中，所谓-CV6烷基，是指碳原子数1 6的直链或支链状的一价饱和烃 基。作为-Cp6烷基，优选列举碳原子数1 4的烷基(-Ch烷基)。作为-CV6烷基，具体列 举例如_甲基、“乙基、“正丙基、“异丙基、“正丁基、“异丁基、“叔丁基、“仲丁基、“正 戊基、-正己基、-1-甲基戊基、-2-甲基戊基、-3-甲基戊基、-4-甲基戊基、-1，1-二甲基丁 基、-1,2- 二甲基丁基、-1,3- 二甲基丁基、-2，2- 二甲基丁基、-2，3- 二甲基丁基、-3，3- 二 甲基丁基、-1-乙基丁基、-2-乙基丁基、-1，1，2-三甲基丙基、-1，2，2-三甲基丙基等，进一 步优选列举_甲基、_乙基、_正丙基、_异丙基，可以特别优选列举_甲基、_乙基。本说明书中，所谓-Cch6亚烷基_，为单键(碳原子数0)或碳原子数1 6的直 链状的二价饱和烃基(-CV6亚烷基-)。作为-Ch6亚烷基，具体列举亚甲基、亚乙基、亚 丙基、亚丁基、亚戊基、亚己基。优选列举碳原子数0 4的亚烷基(-Cch4亚烷基-)，具 体列举单键、亚甲基、亚乙基、亚丙基、亚丁基。另外，该-CV6亚烷基可以用选自-CV6烷 基、-OH、-CONH2、-NH2、-NH (C1^烷基)及-Nd6烷基)2中的基团取代。-CQ_6亚烷基-优选 为单键或可以用选自-0H、-甲基及-二甲基氨基中的基团取代的-Cp6亚烷基_，更优选为 单键或无取代的-Ch亚烷基_。
本说明书中，所谓-卤素，表示从卤原子(可列举例如F、Cl、Br或I)衍生的一价 基团。可列举例如-F、-Cl、-Br及-I，优选列举-F、-Cl、更优选列举-F。在本说明书中，所谓亚芳基，为由单或二环的芳香族烃环构成的二价环式基团。构 成环的原子数例如为5 10，优选为碳原子数6 10。作为亚芳基，具体可以列举亚苯基、 亚萘基等。更优选为亚苯基，特别优选列举的是，Y表示亚芳基的情况下，与从Y伸出的X键 合的键及与R1键合的键这2个键处于邻位或对位的关系的亚芳基。该亚芳基为无取代或可以用-卤素、-Cp6烷基、-OH或-OCh烷基取代例如1 4 处。在本说明书中，所谓杂亚芳基，为包含杂原子的从单或二环的芳香族杂环衍生的 二价环式基团。作为组成环的元素，除碳原子之外，含有至少1个氮原子，而且，可以含有选 自氮、氧及硫中的1 2个杂原子。构成环的原子数优选为3 12，更优选为5 6。环可 以为单环或二环，但优选单环。作为这样的由杂亚芳基衍生的杂环，具体列举吡咯、吡唑、 咪唑、三唑、噁唑、异噁唑、吲唑、噻唑、批啶、哒嗪、嘧啶、批嗪、噁嗪、三嗪、吲哚、苯并咪唑、 苯并噁唑、苯并噻唑、苯并吡唑、喹啉、异喹啉、喹喔啉、喹唑啉、酞嗪、嘌呤、蝶啶等芳香族杂 环，更优选列举吡咯、吡唑、咪唑、三唑、噁唑、异噁唑、吲唑、噻唑、吡啶、哒嗪、嘧啶、吡嗪、噁 嗪、三嗪等5 6元的芳香族杂环。进一步优选列举吡啶、哒嗪、嘧啶、吡嗪，特别优选为吡 啶。杂亚芳基从5元的芳香族杂环衍生时，2条键的取代位置优选为1，3位、2，4位或 3，5位，从6元的芳香族杂环衍生时，在Y表示杂亚芳基的情况下，与从Y伸出的X键合的键 及与R1键合的键的2条键的取代位置优选具有2，4位、2，5位、2，6位、3，5位的关系。该杂亚芳基为无取代或用-卤素、-CV6烷基、-OH或-OCV6烷基取代例如1 4处。在本说明书中，所谓杂芳基，为包含杂原子的从单或二环的芳香族杂环衍生的一 价环式基团。作为组成环的元素，除碳原子之外，含有至少1个氮原子，而且，可以含有选自 氮、氧及硫中的1 2个杂原子。构成环的原子数优选为3 12，更优选为5 6。环可以 为单环或二环，但优选单环。作为这样的由杂芳基衍生的杂环，具体列举吡咯、吡唑、咪唑、 三唑、噁唑、异噁唑、吲唑、噻唑、卩比啶、哒嗪、嘧啶、吡嗪、噁嗪、三嗪、吲哚、苯并咪唑、苯并噁 唑、苯并噻唑、苯并吡唑、喹啉、异喹啉、喹喔啉、喹唑啉、酞嗪、嘌呤、蝶啶等芳香族杂环，更 优选列举吡咯、批唑、咪唑、三唑、噁唑、异噁唑、吲唑、噻唑、批啶、哒嗪、嘧啶、批嗪、噁嗪、三 嗪等5 6元的芳香族杂环。进一步优选列举吡啶、哒嗪、嘧啶、吡嗪，特别优选为吡啶。在本说明书中，所谓_(杂环)，为由上述定义的杂芳基或以下的式(a)表示的基团。 式中，艮及Rb相同或相互不同，表示氢原子、-C1^烷基、-卤素、-OH或-OCV6烷基；W 表示-CRcRd-、-0-、-S-、_S0_、-SO2-或-NRe-；η 表示 0 或 1 ；R。及Rd相同或相互不同，表示氢原子、-卤素、-Cp6烷基、-OH、-OCh烷基或杂芳基；Re表示氢原子、-C1^6烷基、-OH、-OCh烷基或杂芳基.R。、Rd及Re中的-CV6烷基及-OCV6烷基可以用_卤素或-0H取代。优选用-F取 代1 3处或为无取代，更优选为无取代。作为上述的式(a)表示的基团中的各取代基优选的形态，可列举以下。Ra及Rb相同或相互不同，优选为氢原子或Ch烷基。W 优选为-0-、-S-、-SO2-或-NRe_。η优选为1。Rc及Rd相同或相互不同，优选为氢原子、-Ch烷基或-0Η。Re优选为氢原子、_(可以用卤原子取代的CV4烷基)或吡啶基，更优选为氢原 子、_(可以用-F取代1 3处的Ch烷基)、吡啶基，进一步优选为氢原子或-CV4烷基。另外，作为上述式(a)表示的基团的优选的形态，可列举具有以下的基团的组合 的式(a)表示的基团。艮及礼相同或相互不同，优选氢原子或Ch烷基；W 优选为-0-、-S-、-SO2-或-NRe-；η优选为1;而且，Re优选为氢原子或-C1^烷基。作为式(a)表示的基团，具体列举以下的式(a-1)、(a_2)、(a_3)、(a_4)、(a_5)、 (a-6)、(a-7)、或(a_8)表示的基团。 作为式(a)表示的基团，更优选列举(a-6)、(a-7)或(a_8)表示的基团。在此，作 为Re，优选列举氢原子、甲基、乙基、2-氟乙基、正丙基、异丙基、3，3，3-三氟正丙基、正丁基、 4_氟-正丁基、3-吡啶基及4-吡啶基，更优选列举氢原子、甲基、乙基、正丙基及异丙基。下面，对本发明的式(I)表示的化合物或其医药学上允许的盐进行说明。本发明的式(I)表示的化合物如上所述。该式(I)中，Q如上所述，表示以-X-Y-表 示的连结基，优选X或Y的任一个为单键。式(I)中，X如上所述，表示单键、-CO-、-CONH-、-CON((V4烷 基)_、-cs-、-CSNH-, -CSN(C1^4烷基)_、或-SO2- ；Y如上所述，表示单键、亚芳基或杂亚芳基 (该亚芳基及杂亚芳基为无取代或可以用_卤素、-CV6烷基、-OH或-OCh烷基取代1 4 处)。其中，X和Y不同时为单键。X及Y的优选的形态可以列举如下。
X为优选单键、-CO-、-CONH-, -CSNH-、或_S02_，更优选为单键或_S02_。Y如上所述，为单键、亚芳基或杂亚芳基(该亚芳基及杂亚芳基为无取代或可以 用_卤素、-C^6烷基、-OH或-OCV6烷基取代1 4处，优选为无取代或用-Ch烷基取代)， 更优选单键、亚苯基、或亚吡啶基(该亚苯基及亚吡啶基为无取代或可以用甲基、-F取代 1 2处)，进一步优选为单键、1，3_亚苯基、1，4_亚苯基、2-甲基-1，4-亚苯基、2-甲基-1， 5-亚苯基、2-氟-1，4-亚苯基、3-氟-1，4-亚苯基、2，6_ 二氟_1，4_亚苯基、2，4_亚吡啶 基、2，5-亚吡啶基，特别优选为单键、1，3-亚苯基、1，4-亚苯基、2-甲基-1，4-亚苯基或2， 4-亚吡啶基。另外，Y表示亚芳基或杂亚芳基时，该亚芳基或杂亚芳基优选是从苯、吡咯、吡唑、 咪唑、三唑、噁唑、异噁唑、吲唑、噻唑、批啶、哒嗪、嘧啶、吡嗪、噁嗪、三嗪、吲哚、苯并咪唑、 苯并噁唑、苯并噻唑、苯并吡唑、喹啉、异喹啉、喹喔啉、喹唑啉、酞嗪、嘌呤、及蝶啶衍生的， 更优选是从苯、吡啶衍生的。另外，式(I)中，队如上所述，表示-CQ_6亚烷基-(AHe烷基或-CQ_6亚烷基-㈧ m_CQ_6亚烷基-(杂环)，优选为-Cch4亚烷基-㈧m-CH烷基或-Cch4亚烷基-㈧^Cch4亚 烷基_(杂环)，更优选为-Ch亚烷基-A-(杂环)、-A-CV4亚烷基_(杂环)、-CV4亚烷 基-A-Ch亚烷基_ (杂环)、-CV4烷基、_ (杂环)，进一步优选为-CH烷基、-CV4亚烷基-(杂 环)、-C0-(杂环)或_(杂环)，特别优选为-甲基、-CH2-(杂环)或_(杂环)。需要说明 的是，这里的A及m如上所述，-(杂环)如上所述，用杂芳基或以下的式(a)表示。 式中的各基团如上所述。R1表示-CQ_6亚烷基-(A)m-CQ_6亚烷基_(杂环)时的该_(杂环)所表示的杂芳 基优选为吡啶基；另外，该_(杂环)所表示的上述式(a)的基团优选为以下的式(a-1)、 (a-2)、(a-3)、(a_4)、(a_5)、(a_6)、(a_7)或(a_8)表示的基团，更优选为(a_6)、(a_7)、或 (a-8)表示的基团。在以下的式(a-Ι) (a-8)的基团中，R。、Rd及R6如上所述，R。及Rd优 选为氢原子、-CV4烷基或-0H，更优选为氢原子或-0H，Re优选为氢原子、_(可以用卤原子 取代的Cy烷基)或吡啶基，更优选为氢原子、_(可以用-F取代1 3处的Cy烷基)或 吡啶基，进一步优选为氢原子或-Cy烷基。Re特别优选为甲基、乙基。
在R1中的A的优选的形态中，A优选为-CO-、-NH-, -CONH-或-COMC^烷基)-，
更优选为-CO-、-NH-, -CONH-或-COWe-。本发明的更优选的形态的通式(I)表示的化合物为以下的化合物X 为单键、-CO-、-CONH-、-CSNH-、或-SO2-；Y为单键、亚苯基或亚吡啶基；而且，R1为下述化学式表示的基团。
— —C<m亚烷基—Wm-Ciw亚烷基、或-Cl_4烷基
N[此时，A 表示-CO-、-NH-、-CONH-或-COWe-；m 为 0 或 1;R6表示氢原子、_(可以用卤原子取代的Cp6烷基)或吡啶基]。作为本发明的通式(I)所表示的化合物及其医药学上允许的盐，具体可以列举以 下所记载的化合物及以下的表中所记载的化合物(包含游离体及其盐)。但是，本发明并不 限定于这些例示化合物。式(I)的化合物5-{7-[2-(4-乙基-哌嗪-1-基)-吡啶-4-基]-2-吗啉-4-基-7H-吡咯并[2， 3-d]嘧啶-4-基}-嘧啶-2-基胺；{3- [4- (2-氨基-嘧啶-5-基)-2-吗啉_4_基-吡咯并[2，3-d]嘧啶_7_基]~4~甲 基-苯基}-吗啉-4-基-甲酮；5-{7-[4-(1，1_ 二氧代-1λ6-硫代吗啉-4-基甲基)-苯基]_2_吗 啉-4-基-7Η-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基}-嘧啶-2-基胺；以及5- (7-甲磺酰基-2-吗啉-4-基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶_4_基)-嘧啶_2_基胺。
另外，也可以列举以下的化合物。
在本发明的化合物及其医药学上可以允许的盐中，包含式(I)表示的本发明化合 物的全部的立体异构体(例如包含对映异构体、非对映异构体(包含顺及反几何异构体))、上述异构体的外消旋体及其它混合物。特别在本发明中，式(I)表示的化合物包含立体异 构体。另外，本发明的化合物及其医药学上可以允许的盐可以以几个互变异构形态例如 烯醇及亚胺形态、酮及烯胺形态以及它们的混合物来存在。互变异构体在溶液中以互变异 构体组(tautomer set)的混合物的形式存在。在固体的形态中，通常一种互变异构体为优 势。有时记载一方的互变异构体，但在本发明中，包含本发明的化合物的全部的互变异构 体。而且，在本发明中，也包含本发明的阻转异构体(atrop isomer ism)。所谓阻转异构 体，是指可以拆分为旋转被限制的异构体的式(I)表示的化合物I。这些异构体可以利用异构体间的物理化学的性质之差、利用常规方法分离。例如， 外消旋化合物可以利用一般的光学拆分法、例如衍生为与酒石酸等光学活性酸的非对映异 构盐并进行光学拆分的方法等立体地做成纯粹的异构体。非对映异构体的混合物可以通过 使用分别结晶化、各种色谱法(例如薄层色谱法、柱色谱法、气相色谱法等)来进行分离。另外，本发明所述的化合物可以为游离体，也可以为医药学上允许的盐，它们都包 含在本发明中。所谓这样的“盐”，只要与本发明所述的式(I)表示的化合物(有时称为化 合物I。)形成盐、且为医药学上允许的盐，就没有特别限定，可列举例如本发明的化合物I 和酸形成的酸盐、与碱形成的碱盐等。为了制备本发明的化合物I的医药学上可以允许的酸盐而使用的酸优选与本发 明的化合物I反应、形成无毒的酸盐的盐。作为酸盐，可列举例如盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸 盐、硝酸盐、硫酸盐、重硫酸盐、磷酸盐、酸性磷酸盐、醋酸盐、乳酸盐、柠檬酸盐、酸性柠檬酸 盐、酒石酸盐、重酒石酸盐、琥珀酸盐、草酸盐、马来酸盐、富马酸盐、葡糖酸盐、丙二酸盐、糖 酸盐、苯甲酸盐、扁桃酸盐、水杨酸盐、三氟醋酸盐、丙酸盐、戊二酸盐、甲烷磺酸盐、乙烷磺 酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐、1，1’ -亚甲基-双-(2-羟基-3-萘甲酸)盐等。为了制备本发明的化合物I的医药学上可以允许的碱盐而使用的碱优选与本发 明的化合物I反应、形成无毒的碱盐的盐。作为碱盐，可以列举例如钠盐、钾盐等碱金属 盐，钙盐、镁盐等碱土金属盐，铵盐，N-甲基葡糖胺盐等水溶性胺加成盐，低级链烷醇铵盐， 从医药学上可以允许的有机胺这些其它的碱衍生的盐。另外，本发明的化合物I通过放置在大气中，有时吸收水分并附着吸附水或成为 水合物，那样的盐也作为化合物I的盐包含在本发明中。而且，本发明的化合物I有时吸收其它某种溶剂而成为溶剂合物，那样的盐也作 为化合物I的盐包含在本发明中。本发明所述的式(I)的化合物作为游离体得到时，可以按照常规方法变换为式 (I)的化合物可以形成的盐或它们的水合物或溶剂合物的状态。另外，本发明所述的式⑴的化合物作为式⑴的化合物的盐、水合物或溶剂合物 得到时，可以按照常规方法变换为式(I)的化合物的游离体。本发明的式(I)表示的化合物可以通过使式(Via)表示的化合物与氧化剂反应的 方法来制造，本工序后，可以含有进一步将氨基的保护基进行脱保护的工序。
H2N 八 N( ι ,
O
或N^N
“.,Q-R1
(PG)2M N(V,a)[式中，Q及R1为如上述中所定义的那样；PG’表示氨基的保护基。]另外，在上述方法中，用作起始化合物的式(Via)所表示的化合物可以在钯催化 剂的存在下通过使式(Va)表示的化合物
XYX>,Q_R1
(PG)2M N(Via)[式中，Q及R1为如上述中所定义的那样；PG’表示氨基的保护基。]
O
N
N人N
(ν a) 与以下的式子表示的硼酸衍生物反应的工序来制造。
|^y 、ofr 或 |^y 、ofr H2N N{PG%H H[式中，R’及R”各自独立，表示氢原子或Cp6烷基，或者可以R’及R”一起形成_C2_3 亚烷基_，此时，_C2_3亚烷基-可以用-甲基取代1 4处；PG’表示氨基的保护基]。本发明的式(I)的化合物可以通过连续进行上述工序、由式(Va)表示的化合物经 过式(Via)表示的化合物来制造。
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式(I)的化合物的代表的合成方法下面，对本发明的式(I)的化合物的合成方法具体地进行说明。式(I)表示的本 发明化合物可以利用通常的有机合成方法、例如以下所示的方法来合成，但本发明的式(I) 表示的化合物的合成法并不限定于这些方法。需要说明的是，在以下所示的合成方法中， 定义的基团在实施方法的条件下接受不希望的化学变换时，只要在本文中没有特别记载， 可以通过使用例如官能团的保护、脱保护等方法来实施合成。在此，保护基的选择及脱吸操 作可以列举例如"Greene and ffuts, "Protective Groups in Organic Sythesis" ( % 3 版，Wiley-VCH，Inc.，1999) ”中记载的方法，根据反应条件适当使用这些即可。另外，也可 以根据需要改变取代基导入等反应工序的顺序。另外，在以下所示的合成方法中，也可以用 具有成为前体的官能团的原料进行反应后，在一系列的反应工序中的适当的阶段进行官能 团修饰反应，得到期望的生成物。作为官能团修饰反应，可以利用例如‘‘Smith and March, "March' s Advanced Organic Chemistry”(第 5 版，Wiley-VCH，Inc.，2001) ”或"Richard C. Larock, Comprehensive Organic Transformations (VCHPublishers, Inc. 1989)，，中记载 的方法实施。作为在合成时使用的原料化合物，可以使用市售的原料化合物，或可以根据需 要利用常规方法合成。另外，以下反应工序中记载的通式⑴表示的化合物为通式⑴表示的本发明化 合物、或用适当的保护基保护了取代基的该化合物。在通式(I)表示的化合物中，用保护 基保护的该化合物可以通过适当利用常规方法、经过脱保护工序而变换为通式(I)表示的 本发明化合物。另外，在以下反应工序中，适当包含利用常规方法的保护化工序及脱保护 工序。例如，作为用作氨基的保护基的基团，可以列举例如甲氧基羰基、环丙基甲氧基羰 基、乙氧基羰基、2，2，2-三氯乙氧基羰基、2-碘乙氧基羰基、2-三甲基甲硅烷基乙氧基羰 基、2-甲基硫代乙氧基羰基、2-甲基磺酰基乙氧基羰基、异丁氧基羰基、叔丁氧基羰基(B0C 基)、9_芴基甲氧基羰基(Fmoc)、苄氧基羰基(CBZ基)、对甲氧基苄氧基羰基、2，4_ 二氯苄 氧基羰基、对氰基苄氧基羰基等氨基甲酸酯类保护基；甲酰基、乙酰基、二氯乙酰基、三氯乙 酰基、三氟乙酰基、苯甲酰基(Bz)等酰胺类保护基；甲基、烯丙基等烃链类保护基、苄基、邻 甲氧基苄基(2-甲氧基苄基)、间甲氧基苄基(3-甲氧基苄基)、对甲氧基苄基(4-甲氧基苄 基或PMB基)、邻/间二甲氧基苄基(2，3- 二甲氧基苄基)、邻/对二甲氧基苄基(2，4- 二 甲氧基苄基)、间/对二甲氧基苄基(3，4- 二甲氧基苄基)、邻/间/对三甲氧基苄基(2，3， 4-三甲氧基苄基)等苄基类保护基等。其中，作为后述的氨基保护基的PG，优选列举苄基 类保护基，作为PG’，优选列举苄基类保护基，作为PG”，优选列举酰胺类保护基。[中间体化合物(Via)的合成] [式中，-OCV4表示-C^4烷氧基(优选为-甲氧基)，R’、R”各自独立，为氢原子 或Cp6烷基，或者R’及R”可以一起形成-c2_3亚烷基-，此时，-c2_3亚烷基_可以用-甲基 取代1 4处(优选为-(1，1，2，2-四甲基-亚乙基)-)，PG’表示氨基的保护基(优选为 PMB)，M表示离去基团，优选为氯原子、溴原子、碘原子等卤原子、或-甲磺酰氧基等烷基磺 酰氧基、“甲苯磺酰氧基等芳基磺酰氧基、-三氟甲磺酰氧基等商代烷基磺酰氧基，更优选 为氯原子。Q及R1如已经定义的那样]本合成法为如下方法将通过3-Cy烷氧基羰基-Y-内酯和吗啉代甲脒的缩合而 得到的三醇衍生物变换为三卤体或三磺酸酯体(优选三氯体)，接着，通过与具有所期望的 基团的伯胺(H2N-Q-R1)的环化缩合及与硼酸衍生物的偶联反应得到中间体化合物(Via)。3-(V4烷氧基羰基-Y-内酯(II)可以利用公知的方法制备(例如，可以根据 J. Org. Chem. (1978)，43 (2)，346-347 中记载的方法合成)。工序Ι-a为在惰性溶剂中、在碱存在下、通过3-Ch烷氧基羰基-Y-内酯(II)和 吗啉代单甲脒(优选吗啉代单甲脒氢氯酸盐或吗啉代单甲脒氢溴酸盐(Alfa Aesar公司 等))的缩合反应合成三醇衍生物(III)的工序(参考文献D. L. Dunn等、J. Org. Chem. 40 卷、3713 页、1975 年；K. Burdeska 等、Helv. Chim. Acta,64 卷、113 页、1981 年；P. Wang 等、 Huaxue Xuebao、42卷、722页、1984年)。作为惰性溶剂，可列举甲醇、乙醇、叔丁醇、四氢呋 喃、二甲氧基乙醇、1，4_ 二噁烷等，作为碱，可列举甲醇钠、乙醇钠、甲醇钾、乙醇钾、叔丁醇 钾、三乙基胺等。反应温度例如为室温 溶剂的沸点(所谓溶剂的沸点，是指在加热回流条 件下进行反应)，优选为室温 100度，作为反应时间，例如为30分钟 12小时。工序Ι-b为在惰性溶剂中或无溶剂下、在卤化剂或磺酰化剂存在下、通过三醇 衍生物(III)的卤化或磺酰化合成三卤衍生物或三磺酸酯衍生物(IV)的方法。作为惰 性溶剂，可列举例如二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷酮、甲苯、二甲苯、乙 腈及二氯甲烷，作为卤化剂，可列举例如氧氯化磷、亚硫酰氯及Vilsmeier reagent (J. C. S. Perkin 1 (1976)754-757)。可以使卤化剂与三乙基胺、二异丙基乙基胺等胺系碱或其 盐酸盐、或四乙基氯化铵、正四丁基氯化铵等季铵盐等共存。作为磺酰化剂，可列举例如甲烷磺酰氯、甲苯磺酰氯、三氟甲烷磺酸酐。可以使磺酰化剂与三乙基胺、二异丙基乙基胺等 胺系碱共存。反应温度例如为室温 溶剂或试剂的沸点(所谓溶剂的沸点，是指在加热回 流条件下进行反应)，优选为室温 200°C，作为反应时间，例如为30分钟 20小时。(参 考文献:A. Gangjee 等、J. Med. Chem. 43 卷、3837 页、2000 年；P. Rajamanickam 等、IndianJ. Chem. Section B :26B 卷、910 页、1987 年)。工序1-c为在惰性溶剂中、在碱存在下、通过三卤衍生物或三磺酸酯衍生物(IV) 和伯胺衍生物(H2N-Q-R1)的环化缩合反应得到中间体化合物(Va)的反应。作为惰性溶 剂，可列举例如二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷酮(NMP)、甲苯、1，4_ 二噁烷、 二甲氧基乙烷、乙腈等。作为碱，可列举例如碳酸钾、碳酸铯、氢氧化钠、叔丁醇钾、氢化钠、 磷酸钾(磷酸三钾)、双三甲基甲硅烷基酰胺锂(LiN(TMS)2)等(参考文献E.Bisagni等、 J. Org. Chem. 47 卷、1500 页、1982 年)。工序1-c的反应可以适当在钯催化剂或配体的存在下进行反应。作为这样的钯 催化剂，可列举例如PdCl2、Pd (OH) 2、Pd (OAc) 2、Pd2dba3、PdCl2 [P (o-tol)3]2> PdCl2 (PPh3) 2、 Pd (O2CCF3) 2 等，作为配体，可列举PPh3、P (o-tol) 3、P (t_Bu) 3、dppf、BINAP、2，，6，- 二甲氧 基-2-双环己基膦-联苯(S-Phos)、2_双环己基磷-2，，4，，6，_三异丙基联苯(X-Phos)、4， 5_双(二苯基膦)-9，9-二甲基咕吨(Xantphos)U, 3-双(2，6-二异丙基苯基)咪唑-2-甲 叉等。反应温度例如为室温 溶剂或试药的沸点(所谓溶剂的沸点，是指在加热回流条 件下进行反应)，反应时间例如为30分钟 20小时。工序Ι-d为在惰性溶剂中、在碱、钯催化剂或适当配体的存在下、通过中间体化 合物(Va)和硼酸衍生物(优选5-(4，4，5，5_四甲基_(1，3，2) 二氧硼戊环_2_基)嘧 啶-2-基胺或双-(4-甲氧基苄基)-[5-(4，4，5，5_四甲基(1，3，2) 二氧硼戊环_2_基)嘧 啶-2-基]胺)的偶联反应(例如铃木反应)得到中间体化合物(Via)的反应(参考文献 M-Havelkova 等、Synlett、1145 页、1999 年；G. Luo 等、Tetrahedron Lett. 43 卷、5739 页、 2002 年)。作为惰性溶剂，可列举例如二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷酮、甲 苯、四氢呋喃、1，4_ 二噁烷、二甲氧基乙烷等，可以含有 50%的水。作为钯催化剂，可 列举例如PdCl2、Pd (OH) 2、Pd (OAc) 2、Pd2dba3、PdCl2 [P (o-tol) 3] 2、Pd (O2CCF3) 2、PdCl2 (PPh3) 2 等，作为配体，可列举PPh3、P (o-tol) 3、P (t-Bu) 3、dppf、BINAP、2，，6，-2-双环己基膦-二 甲氧基-联苯(S-Phos)、2_双环己基磷-2，，4，，6，-三异丙基联苯(X-Phos)、4，5-双(二 苯基磷酸)-9，9-二甲基咕吨(Xantphos)、1，3-双(2，6_ 二异丙基苯基)咪唑-2-亚基等。 作为碱，可列举例如碳酸钠、碳酸钾、碳酸铯、氢氧化钠、叔丁醇钾、磷酸钾、双三甲基甲硅 烷基酰胺锂(LiN(TMS)2)等。反应温度例如为O 110°C，优选25 110°C，作为反应时间， 为30分钟 20小时。另外，代替硼酸，即使使用用公知的方法制备成的芳基锌化合物，也可 以合成中间体化合物(Via) (Metal-Catalyzed Cross-Coupling Reactions, 2nd Ed. 2004 年，2 卷、815)。另外，可以继续进行PG’的脱保护，也可以不进行。作为脱保护的方法，例如在PG’ 为苄基类保护基的情况下，可以在工序2-b中进行与后述的苄基类保护基的脱保护同样的 反应。
[中间体化合物(VIc)或(VId)的合成] [式中，PG、PG’及PG”表示氨基的保护基，L及L’表示离去基团，Μ、R’、R”、X、Y、 9及礼如已经定义的那样]本合成工序为在式(Via)所表示的中间体化合物中、特别分别表示Q为-Y-时(X 为单键时)的中间体化合物(VIc)的合成方法及Q为-X-Y-时(优选Y为单键)的中间体 化合物(VId)的合成方法。工序2_a为在惰性溶剂中、在碱存在下，进行三卤衍生物或三磺酸酯衍生物(IV) 和伯胺衍生物(H2N-PG)的环化缩合反应，适当进行胺的保护基的替换(PG —PG”)，得到中 间体化合物(Vb)的反应。本工序的环化缩合反应可以与上述工序1-c同样操作而进行反 应。作为这里的PG，可列举胺的保护基、例如甲氧基羰基、乙氧基羰基、叔丁氧基羰基、苄 氧基羰基、9-芴基甲氧基羰基(Fmoc)等氨基甲酸酯类保护基；甲酰基、乙酰基、氯乙酰基、 三氯乙酰基、三氟乙酰基、苯甲酰基等酰胺系；甲基、烯丙基等烃链类保护基；苄基、4-甲 氧基苄基、2，4-二甲氧基苄基等苄基类保护基等，优选列举苄基类保护基，更优选列举2， 4-二甲氧基苄基、4-甲氧基苄基。作为NH2PG,可列举例如4-甲氧基苄基胺、2，4-二甲氧 基苄基胺(Aldrich公司等)。在环化缩合反应之后，可以进行胺的保护基的替换(从PG向PG”)。作为此时的胺 的保护基的PG”，可列举与PG同样的保护基，优选表示酰胺类保护基，更优选列举乙酰基。在环化缩合反应之后，在胺的保护基的替换(从PG向PG”)中，可列举例如NH2PG 中的PG为苄基类保护基(优选2，4-二甲氧基苄基、4-甲氧基苄基)时的将PG脱保护的反 应的一例。通过将在环化缩合反应后得到的化合物在例如惰性溶剂中或无溶剂下、在酸存 在下进行反应，可以将PG脱保护。作为惰性溶剂，可列举例如二氯甲烷、醋酸乙酯等。作为 酸，可列举例如三氟醋酸、硫酸、盐酸、甲酸、醋酸等，可以使用不同的2种酸。优选为三氟醋 酸或硫酸。作为优选的脱保护方法，为在无溶剂下用三氟醋酸进行处理的方法或使用醋酸乙酯和硫酸的方法。可以使反应物(中间体化合物(Vb))的当量以上的N-乙酰基半胱氨 酸共存。反应温度通常为0°C 120°C，优选为室温 80°C。作为反应时间，例如为30分 钟 12小时。另外，利用使用钯碳等通过接触氢还原进行处理的方法等，也可以将PG脱保 护。接着，举出在将PG脱保护后、用PG”重新保护的反应的一例。例如，PG”为酰胺类 的情况，可以在惰性溶剂中、在碱存在下或非存在下，利用酰卤法、酸酐法、活性酯化法或缩 合法进行反应。可以优选使用酰卤法或酸酐法。作为酰卤法中的惰性溶剂，可列举例如 二氯甲烷、四氢呋喃、二噁烷、二乙基醚、二甲氧基乙烷、丙酮、乙腈、二甲基甲酰胺、二甲基 乙酰胺、二甲基亚砜、甲苯、苯等，优选列举二氯甲烷、四氢呋喃、二甲氧基乙烷、二甲基甲 酰胺、乙腈。作为酰卤，优选列举乙酰氯。在反应中可以使碱存在，作为这样的碱，可列举例 如三乙基胺、二异丙基乙基胺、吡啶、二甲基氨基吡啶、氢化钾、氢化钠、双三甲基甲硅烷基 酰胺钾、双三甲基甲硅烷基酰胺钠、金属钠、碳酸钾、碳酸铯、双三甲基甲硅烷基酰胺锂、二 异丙基酰胺锂等，优选列举三乙基胺、二异丙基乙基胺、吡啶、二甲基氨基吡啶、碳酸钾、碳 酸铯等。作为酸酐法中的惰性溶剂，可列举例如二氯甲烷、四氢呋喃、二噁烷、二乙基醚、 二甲氧基乙烷、丙酮、乙腈、二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、二甲基亚砜、甲苯、苯或无溶剂 等，优选为二氯甲烷、四氢呋喃、二甲氧基乙烷、二甲基甲酰胺、乙腈或无溶剂。作为酸酐，优 选列举醋酸酐。在反应中可以使碱存在，作为这样的碱，可列举例如三乙基胺、二异丙基乙 基胺、吡啶、二甲基氨基吡啶、氢化钾、氢化钠、双三甲基甲硅烷基酰胺钾、双三甲基甲硅烷 基酰胺钠、金属钠、碳酸钾、碳酸铯、双三甲基甲硅烷基酰胺锂、二异丙基酰胺锂等，优选列 举三乙基胺、二异丙基乙基胺、吡啶、二甲基氨基吡啶、碳酸钾、碳酸铯等。工序2_b为如下反应在惰性溶剂中，在碱、钯催化剂或适当配体的存在下，进 行中间体化合物(Vb)和硼酸衍生物(优选、5-(4，4，5，5_四甲基_(1，3，2) 二氧硼戊 环-2-基)嘧啶-2-基胺或双-(4-甲氧基苄基)-[5- (4，4，5，5-四甲基(1，3，2) 二氧硼戊 环-2-基)嘧啶-2-基]胺)的偶联反应(例如铃木反应)，接着，进行脱保护，得到中间体 化合物(VIb)的反应。中间体化合物(Vb)和硼酸衍生物的反应可以与工序Ι-d同样操作而进行。接着为脱保护工序，在PG或PG”为例如苄基类保护基(优选2，4- 二甲氧基苄基、 4-甲氧基苄基)的情况下，可以用与上述的方法同样的方法进行脱保护。另外，在PG或PG” 为例如酰胺类保护基的情况(优选乙酰基)下，可以通过使想要脱保护的化合物在惰性溶 剂中、在碱存在下反应来进行脱保护。作为惰性溶剂，可列举例如甲醇、乙醇、四氢呋喃、水 等，作为碱，可列举例如氢氧化钠、氢氧化锂、碳酸钠等。反应温度为0°C 120°C、优选为 室温 100°C，作为反应时间，例如为30分钟 15小时。工序2-c为Q特别为-Υ_(Χ为单键)时的中间体化合物(VIc)的合成方法。中间 体化合物(VIb)和L-Y-RJ在此，L表示离去基团，优选为氯原子、溴原子、碘原子等卤原子 或三氟甲磺酰氧基，更优选为溴原子)在惰性溶剂中、在碱的存在下或非存在下、在钯催化 剂或适当配体存在下进行反应，接着，进行适当保护基的PG’的脱保护，由此，可以合成中间 体化合物(Vic)。该反应可以以利用例如与公知的卤化环式基团的偶联反应，以导入环式 基团的反应为参考(Org. Lett.、2 卷、1101 页、2000 年；TetrahedronLett.、42 卷、7155 页、2001 年)。作为惰性溶剂，可列举例如四氢呋喃、二噁烷、二乙基醚、二甲氧基乙烷、二甲 基甲酰胺、二甲基乙酰胺、二甲基亚砜、丙酮、乙腈、甲苯、苯等，优选列举甲苯或1，4_ 二 噁烷、二甲氧基乙烷、四氢呋喃、二甲基甲酰胺等。作为钯催化剂，可列举例如PdCl2、 Pd(OAc)2, Pd2dba3、PdCl2(PPh3)2^ PdCl2[P(o_tol)3]2、Pd(O2CCF3)2、钯碳、钯黑、Pd(OH)2 等， 优选列举PdCl2、Pd (OAc)2, Pd2dba3、PdCl2 [P (o-tol) 3]2、Pd (O2CCF3) 2、PdCl2 (PPh3) 2 等，作为 配体，可列举例如三苯基膦、P(o-tol)3> BINAP, DPPF、P(t-Bu)3、2_双环己基膦_2，-(N， N-二甲基氨基)联苯、2-( 二-叔丁基膦)联苯、2-(双环己基膦)联苯、2’，6’ - 二甲氧 基-2-双环己基膦-联苯(S-Phos)、2_双环己基磷-2，，4，，6，-三异丙基联苯(X-Phos)、 2，，4，，6，-三异丙基_2-(双环己基膦)联苯、4，5-双(二苯基磷)-9，9_ 二甲基-9H-咕 吨(Xantphos)、4，5-双[双(3，5-双三氟甲基苯基)磷]-9，9-二甲基-9H-咕吨、1，3-二 烯丙基二氢咪唑盐、2，8，9-三异丁基-2，5，8，9-四氮杂-1-磷杂-双环[3. 3. 3] i^一碳烯、 1，3_双(2，6_ 二异丙基苯基)咪唑-2-甲叉等，优选列举三苯基膦、BINAP、2，，6，- 二甲 氧基-2-双环己基膦-联苯、2，，4，，6，-三异丙基-2-双环己基膦-联苯、2，8，9_三异丁 基-2，5，8，9-四氮杂-1-磷杂-双环[3.3.3]十一碳烯。作为碱，可列举例如氢氧化钠、 氢氧化钾、甲醇钠、乙醇钠、双三甲基甲硅烷基酰胺钾、双三甲基甲硅烷基酰胺钠、双三甲基 甲硅烷基酰胺(LiN(TMS)2)锂、二异丙基酰胺锂、碳酸铯、叔丁醇钠、叔丁醇钾、磷酸钾等， 优选列举碳酸铯、氢氧化钠、叔丁醇钠、叔丁醇钾、磷酸钾、双三甲基甲硅烷基酰胺锂等。反应温度因溶剂或碱的种类等而不同，例如为0°C 溶剂的沸点(所谓溶剂的沸 点，是指在加热回流条件下进行反应)，优选为室温 溶剂的沸点。另外，反应时间，因反应 温度等而不同，通常为30分钟 100小时，优选为30分钟 24小时。接着可以进行PG’的脱保护，也可以不进行。作为脱保护的方法，例如在PG’为 苄基类保护基的情况下，可以在工序2-b中进行与上述的苄基类保护基的脱保护同样的反 应。需要说明的是，在工序2-c中，在与L-Y-R1的偶联反应之后，进行PG’的脱保护时 (下述式的工序2-c’)，与PG’的脱保护反应同时，有时可以同时发生从吡咯烷环向吡咯环 的氧化反应，得到式(I’ )表示的化合物。
〔。〕 O
1) L-Y-R1IlJ^fi
2)脱保护
2<' H,NT "N' (W)(Vic·)
H2N^xN ·(式中，PG^LJJ1如上述所定义的那样。)作为这样的PG’的脱保护条件，可列举例如在PG’为4-甲氧基苄基时，使溶剂量 的三氟醋酸、进而相对中间体化合物(vib’)为当量以上的N-乙酰基半胱氨酸共存的情况。工序2-d为Q为-X-Y-时的中间体化合物(VId)的合成方法。此时的_X_特别 为-CO-的情况，为如下方法中间体化合物(VIb)和L’ -CO-Y-R1所表示的羧酸或羧酸的反应性衍生物(在此，L’表示离去基团，优选为氯原子、溴原子、碘原子等卤原子；或 为-OH、-OCV6烷基，更优选为氯原子或溴原子)在惰性溶剂中，在碱存在下或非存在下，利 用酰卤法、酸酐法、活性酯化法或缩合法进行反应，接着，适当进行PG’的脱保护，由此合成 中间体化合物(VId)。对PG’的脱保护在后叙述。酰卤法通过在惰性溶剂中或无溶剂中使具有所期望的基团的酸与卤化剂反应而 合成酰卤(Hal-Y-R1、Hal-CO-Y-R1、Hal-CONH-Y-RpHal-CON (Ch 烷基)-Y-R1、Hal-CS-Y-R1、 Hal-CSNH-Y-R1, Hal-CSN(C1^4 烷基 PY-R1 或 Hal-SO2-Y-R1 ；作为此时的 Hal，可列举例如氯 原子、溴原子)，再使该酰卤和中间体化合物(VIb)在惰性溶剂中反应来实现。本反应可以 在碱存在下进行反应。作为卤化剂，可列举例如亚硫酰氯、草酰氯、五氯化磷等。作为使用的惰性溶剂，可列举例如二氯甲烷、四氢呋喃、二噁烷、二乙基醚、二甲 氧基乙烷、丙酮、乙腈、二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、二甲基亚砜、甲苯、苯等，优选二氯甲 烷、四氢呋喃、二甲氧基乙烷、二甲基甲酰胺、乙腈等。作为使用的碱，可列举例如三乙基胺、二异丙基乙基胺、吡啶、二甲基氨基吡啶、 氢化钾、氢化钠、双三甲基甲硅烷基酰胺钾、双三甲基甲硅烷基酰胺钠、金属钠、碳酸钾、碳 酸铯、双三甲基甲硅烷基酰胺锂、二异丙基酰胺锂等，优选三乙基胺、二异丙基乙基胺、吡 啶、二甲基氨基吡啶、碳酸钾、碳酸铯等。反应温度因溶剂或碱的种类等而不同，在与卤化剂的反应产生的酰卤的合成以及 酰卤与中间体化合物(VIb)的反应中，可以分别在例如-20°c 溶剂的沸点(所谓溶剂的沸 点，是指在加热回流条件进行反应)下进行，优选为室温 溶剂的沸点。反应时间因反应温 度等而不同，为15分钟 100小时、优选30分钟 24小时。混合酸酐法通过卤代甲酸Cp6烷基酯或Cp6烷基羧酸酐(在此，CV6烷基是指碳原 子数1 6的直链或支链状的烷基)与具有所期望的基团的羧酸(HOOC-Y-R1)反应而合成 混合酸酐(Cp6烷基OOC-Y-R1),再使该混合酸酐和中间体化合物(VIb)反应来实现。合成 混合酸酐的反应通过使氯碳酸甲酯、氯碳酸乙酯、氯碳酸异丁酯、氯碳酸己酯之类的卤代碳 酸烷基酯(优选氯碳酸乙酯或氯碳酸异丁酯)、醋酸酐、丙酸酐等CV6烷基羧酸酐(优 选醋酸酐)之类的化合物反应来进行，优选在惰性溶剂中、在碱的存在下进行。使用的碱及惰性溶剂与本工序的酰卤法中使用的碱及惰性溶剂相同。反应温度因 溶剂的种类等而不同，通常为_20°C 50°C (优选0°C 30°C)。反应时间因反应温度等而 不同，通常为15分钟 24小时(优选30分钟 15小时)。缩合法通过使具有所期望的基团的羧酸(HOOC-Y-R1)和中间体化合物(VIb)在惰 性溶剂中、在缩合剂、碱存在下或碱不存在下(优选存在下)直接反应来进行。作为使用的上述惰性溶剂，可列举例如二氯甲烷、四氢呋喃、二噁烷、二乙基醚、 二甲氧基乙烷、二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、二甲基亚砜、丙酮、乙腈、甲苯、苯、等，优选列 举二氯甲烷、四氢呋喃、二甲氧基乙烷、二甲基甲酰胺、乙腈等。另外，作为可以使用的上述缩合剂，可以列举1，3_ 二环己基碳化二亚胺(DCC)、 2-乙氧基-1-乙氧基羰基-1，2- 二氢喹啉(EEDQ)、三(吡咯烷基)-溴化鳞六氟磷酸盐 (PYBrOP)U-乙基-3-(3，-二甲基氨基丙基)碳化二亚胺·盐酸盐(WSCl)或(苯并三唑基 氧基)三吡咯烷基鳞六氟磷酸盐(PyB0P)、3-羟基-4-氧代-3，4-二氢-1，2，3-苯并三嗪(HODhBt)、羟基苯并三唑(HOBt)等。另外，可以列举1-乙基-3-(3’_ 二甲基氨基丙基)碳 化二亚胺(EDC)和N-羟基苯并三唑(HOBt)的组合、或1-乙基-3-(3’_ 二甲基氨基丙基) 碳化二亚胺·盐酸盐(WSCl)和3-羟基-4-氧代-3,4- 二氢-1,2,3-苯并三嗪(HODhBt) 的组合。另外，作为使用的碱，可列举例如二异丙基乙基胺、三乙基胺、吡啶、二甲基氨基 吡啶、氢化钾、氢化钠、钾双三甲基甲硅烷基酰胺、钠双三甲基甲硅烷基酰胺、金属钠、碳酸 钾、碳酸铯、锂双三甲基甲硅烷基酰胺、锂二异丙基酰胺等，优选列举二异丙基乙基胺、三 乙基胺、吡啶、碳酸钾、碳酸铯、氢化钠等。反应温度因溶剂或碱的种类等而不同，例如为0°C 溶剂的沸点(所谓溶剂的沸 点，是指在加热回流条件下进行反应)，优选为室温 溶剂的沸点。另外，反应时间，因反应 温度等而不同，为30分钟 15小时。接着，特别对X为-SO2-时的工序2_d进行说明。以公知的磺酰化方法为参考，使 中间体化合物(VIb)和所期望的磺酰化剂在惰性溶剂中、在碱存在下进行反应，接着，适当 进行PG’的脱保护，由此，可以得到中间体化合物(VId) (M. Loegers等、J. Am. Chem Soc. 117 卷、9139 页、1995 年；H. Tanaka 等、Bull. Chem. Soc. Jpn. 61 卷、310 页、1988 年· J. -F. Rousseau 等、Heterocycles、55 卷、2289 页、2001 年)。作为惰性溶剂，可列举例如二氯甲烷、四氢呋喃、二噁烷、二乙基醚、二甲氧基乙 烷、二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、二甲基亚砜、丙酮、乙腈、甲苯、苯等，优选列举二氯甲 烷、四氢呋喃、二甲氧基乙烷、二甲基甲酰胺、乙腈等。作为碱，可列举例如氢化钾、氢化钠、双三甲基甲硅烷基酰胺钾、双三甲基甲硅烷 基酰胺钠、金属钠、双三甲基甲硅烷基酰胺锂、二异丙基酰胺锂、三乙基胺、碳酸钾、碳酸铯， 优选列举三乙基胺、碳酸钾、碳酸铯、氢化钠。作为所期望的磺酰化剂，可列举具有所期望的基团的例如磺酸氯(Cl-SO2-Y-R1)、 磺酸酐(R1-Y-SO2-O-SO2-Y-R1K氨磺酰酯(Cp6烷基O-SO2-Y-R1)等，优选列举磺酸氯。反应温度因溶剂或碱的种类等而不同，例如为0°C 溶剂的沸点(所谓溶剂的沸 点，是指在加热回流条件下进行反应)，优选为室温 溶剂的沸点。另外，反应时间因反应温 度等而不同，通常为30分钟 48小时，优选为30分钟 15小时。接着为PG’的脱保护反应，例如，在PG’为苄基类保护基(优选2，4-二甲氧基苄 基、4-甲氧基苄基)的情况下，可以在工序2-b中进行与后述的苄基类保护基的脱保护同样 的反应。另外，也可以不进行PG’的脱保护，进行以下的工序。[中间体化合物(VIf)的合成] (式中、Y、PG，、L、W、η、Ra、Rb如上述所定义的那样)在中间体化合物(VIc)中，特别是R1为-CH2-(杂环)时的中间体化合物(VIf)，如上所述，也可以由中间体化合物(VIb)经过2阶段来合成。在工序3-a中，替代上述工序2-c中的L-Y-R1，通过使用L-Y-CHO (Y、L如上述所定 义的那样，优选为氯原子、溴原子、碘原子等卤原子)或该等价物(保护了甲酰基的物质) 进行与工序2-c同样的反应，可以合成中间体化合物(Vie)。作为保护了 L-Y-CHO的甲酰基的等价体，可列举例如将甲酰基进行缩醛化成的等 价体。具体列举二甲基缩醛、二乙基缩醛等非环式缩醛；1，3_ 二噁烷、1，3_ 二氧杂戊环 等环式缩醛等。在使用保护了甲酰基的化合物进行工序3-a的情况下，在与中间体化合物 (VIb)的偶联后，需要再返回到甲酰基的脱保护工序。例如，作为将缩醛进行脱保护的反应， 可以通过在惰性溶剂中、在酸存在下进行反应来进行。作为惰性溶剂，可列举甲醇、乙醇等低级烷基醇、丙酮、THF、二噁烷、水等。作为酸，可列举硫酸、甲苯磺酸、三氟醋酸、盐酸等，优选为硫酸、盐酸。反应温度因溶剂或碱的种类等而不同，例如为0°C 溶剂的沸点(所谓溶剂的沸 点，是指在加热回流条件下进行反应)，优选为0°C 60°C。另外，反应时间因反应温度等而 不同，通常为30分钟 24小时，优选为30分钟 12小时。工序3_b是使中间体化合物(VIe)和下述式表示的杂环化合物在惰性溶剂中、在 氢化物还原剂的存在下，参与还原氨基化反应等实现的偶联反应，由此合成中间体化合物 (VIf)的工序(发生还原氨基化、得到对应的胺的反应)。接着，可以适当进行脱保护反应。 (式中，W、Ra、Rb、η如上述所定义的那样)作为惰性溶剂，可列举甲醇、乙醇、二氯甲烷、THF、二噁烷。作为氢化物还原剂，可以列举氰基硼氢化钠、三乙酰氧基硼氢化钠等，优选列举
三乙酰氧基硼氢化钠。反应温度例如为-20°C 溶剂的沸点(所谓溶剂的沸点，是指在加热回流条件下 进行反应)，优选为0°c 60°C。反应时间为30分钟 12小时。接着，为PG’脱保护反应，例如，在PG’为苄基类保护基(优选2，4- 二甲氧基苄基、 4-甲氧基苄基)的情况下，也可以在工序2-b中进行与上述的苄基类保护基的脱保护同样 的反应。另外，也可以不进行PG’的脱保护，进行以下的工序。[中间体化合物(VIh)的合成] [式中，PG，、L (优选为碘原子)、Hal (优选为氯)、Y、Ra、Rb、η及W如已经定义的那样]在中间体化合物(Via)中，如上所述，特别是Q中的X为单键时的中间体化合物 (VIh)也可以由中间体化合物(VIb)经过2阶段来合成。使用本工序时，优选Y为杂亚芳基。工序4-a及4_b可以与上述工序2_c同样地进行。接着的PG’的脱保护可以进行，也可以不进行。作为脱保护的方法，例如在PG’为 苄基类保护基的情况下，可以在工序2-b中进行与上述的苄基类保护基的脱保护同样的反应。[式(I)化合物的一般的合成方法] (式中，Q、R1如上述所定义的那样)工序5-a为如下方法在惰性溶剂中、在氧化剂存在下，进行中间体化合物(Via)、 (Vic)、(VId)、(VIf)或(VIh)的氧化反应(Heterocycles，22(2)，379-86 ;1984)，接着，适 当进行脱保护，由此合成式(I)表示的化合物。在氧化反应中，作为氧化剂，可列举例如氧、2，3，5，6_四氯_1，4_ 二苯甲酮、2， 3-二氯-5，6-二氰基-1，4-二苯甲酮(DDQ)、二氧化锰、二氧化硒、硝酸铈铵(IV)等，优选 列举2，3- 二氯-5，6- 二氰基-1，4- 二苯甲酮等。作为所使用的惰性溶剂，可列举例如甲醇、乙醇、二氯甲烷、氯仿、四氢呋喃、二噁 烷、二乙基醚、二甲氧基乙烷、二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、二甲基亚砜、丙酮、乙腈、甲苯、 苯、水等，优选列举二氯甲烷、氯仿、四氢呋喃、二甲基甲酰胺、乙腈、甲苯等。另外，作为溶 剂，可以使用混合溶剂，可列举例如二氯甲烷和二甲基甲酰胺的混合溶剂(例如9 1 1 1的混合比)、二氯甲烷和乙腈和二甲基甲酰胺的混合溶剂(例如1 1 3的混合 比)、氯仿和水的混合溶剂(例如20 1的混合比)。反应温度因溶剂的种类等而不同，通常为-20°C 100°C，优选为0°C 50°C。反 应时间因反应温度等而不同，通常为15分钟 24小时，优选为30分钟 15小时。接着进行的PG’的脱保护反应例如在PG’为苄基类保护基(优选2，4- 二甲氧基 苄基、4-甲氧基苄基)的情况下，可以在工序2-b中进行与上述的苄基类保护基的脱保护同 样的反应。由于本发明所述的式(I)的化合物或其医药学上可以允许的盐具有优异的PI3K 阻滞作用，特别是对PI3K的Classla的ρΙΙΟ α具有优异的阻滞作用，因此，作为增殖性疾 病的预防剂或治疗剂是有用的，在增殖性疾病中，通过本发明化合物单独地使用或与各种 抗癌剂并用，作为癌症的预防剂或治疗剂是特别有用的。需要说明的是，在本说明书中，所谓“增殖性疾病”，是指由细胞内信号传递系统或某种蛋白质的信号传递机构中的缺陷引起的疾病，包含例如癌症、干癣、再狭窄、自身免疫 疾病及粉瘤性动脉硬化症。作为癌症，可列举例如固形癌症，而且，作为固形癌症，可列举例 如大肠、前列腺及非小细胞肺癌等。另外，本发明的式(I)的化合物作为干癣、再狭窄、自免疫疾病及粉瘤性动脉硬化 症、还有心功能不全并发症、异种移植物排斥症、变形性关节病、慢性关节风湿症、哮喘等呼 吸器官疾病、囊性纤维化、肝肿大、心脏肥大、阿尔兹海默症、糖尿病、败血症性休克、HIV感 染症、过敏引起的炎症、心脏疾病等疾病的预防剂或治疗剂(特别是治疗剂)也是有用的。本发明的式(I)的化合物作为PI3K、其中PI3K的Classla的ρΙΙΟ α高度表达的 癌症的预防剂或治疗剂(特别为治疗剂)是特别有用的。而且，本发明涉及一种预防或治疗上述的增殖性疾病、例如癌症的方法。本发明的 其它形态包含固形或造血性的与ΡΙ3Κ-有关联的癌症的预防或治疗的方法。这些方法包含将含有以式(I)的化合物或医药学上允许的其盐作为有效成分的 医药组合物给药于需要这种治疗或患有这种疾病或处于该状态的患者的工序。本发明的医药组合物可以进行制剂化而经口或非经口(静脉内、肌肉内、皮下、直 肠内、鼻内、池内、阴道内、腹腔内、膀胱内、局部给药等)给药。作为经口给药用剂型，可以 列举例如片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、丸剂、水性及非水性的经口用溶液以及悬浮液等。作 为非经口给药用剂型，可列举例如注射剂、软膏剂、凝胶剂、霜剂、栓剂、口腔内或鼻喷雾齐U、 乳剂、油性剂或悬浮剂等以及填充于与细分成每个给药量相适应的容器的非经口用溶液。 另外，给药方式也可以与皮下移植那样的包含调节了的放出处方物的各种给药方法相适 应。上述制剂可以使用赋形剂、润滑剂(包衣剂)、粘合剂、崩解剂、稳定剂、矫味矫臭 齐U、稀释剂、表面活性剂或乳化剂等通常用于制剂的添加剂用公知的方法合成。例如，作为赋形剂可以列举淀粉、马铃薯淀粉、玉米淀粉等淀粉、乳糖、结晶纤维 素、磷酸氢钙等。作为包衣剂可以列举例如乙基纤维素、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、虫胶、 滑石、巴西棕榈蜡、石蜡等。作为粘合剂可以列举例如聚乙烯基吡咯烷酮、聚乙二醇及与上述赋形剂同样的化 合物。作为崩解剂可以列举例如与上述赋形剂同样的化合物及交联羧甲基纤维素钠、羧 甲基淀粉钠、交联聚乙烯基吡咯烷酮之类的被化学修饰了的淀粉、纤维素类。作为稳定剂可列举例如对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯之类的对羟基苯 甲酸酯类；氯丁醇、苄醇、苯基乙醇之类的醇类；苯扎氯铵；苯酚、甲酚、氯甲酚之类的苯酚 类；硫柳汞；去氢醋酸；及山梨酸。作为矫味矫臭剂，可以列举例如通常使用的甜味料、酸味料、香料等。作为表面活性剂或乳化剂，可以列举例如聚山梨醇酯80、硬脂酸聚烃氧40酯、聚
桂醇等。另外，作为用于制造液体状的制剂的溶剂，可以使用乙醇、苯酚、精制水、蒸馏水等。将本发明的医药组合物用作ΡΙ3Κ阻滞剂或癌症等增殖性疾病的治疗剂或预防剂时，本发明的式(I)的化合物或其医药学上可以允许的盐的使用量可以根据症状、年龄、体 重、相对的健康状态、其它给药的存在、给药方法等而适当变更。例如，相对于患者(温血动 物、特别是人)，一般而言，作为式(I)的化合物在经口剂的情况，有效的量每日每体重Ikg 优选为0. 01 500mg，进一步优选为每体重Ikg为0. 05 50mg。非经口剂的情况，每日每 体重Ikg优选为0. 01 500mg，进一步优选每体重Ikg为0. 05 50mg。优选将其分成1 日1次或数次，根据症状进行给药。本发明的上述医药组合物可以与其它放射线疗法、化学疗法、血管新生阻滞剂、抗 癌剂合并使用。实施例下面，利用实施例进一步详细地说明本发明，但本发明并不限定于这些实施例。在 本说明书中“N”表示规定浓度，“M”表示mol/L。需要说明的是，匪R分析使用JEOL公司制JW-EX270 (270MHz)、 JW-GSX400 (400MHz)或 Bruker 公司制 NMR(400MHz)进行，NMR 数据用 ppm(parts per million)表示，将四甲基硅烷作为内部标准物质(Oppm)，参照来自样本溶剂的氘锁定信号。质谱数据使用JEOL 公司制 JMS-DX303、JMS-SX/SX102A 或 Micromass 公司制 Quttromicro来得到，另外备有高效液相色谱仪的质谱数据使用Waters公司制996-600E带 梯度高效液相色谱仪的微质谱(micromass公司制ZMD)或Waters公司制2525带梯度高效 液相色谱仪的微质谱(micromass公司制ZQ)来得到。高效液相色谱仪(LC-MS)的条件使用下述条件。高效液相饩谱仪的条件柱Combi ODS (0DS, 5 μ m, 4. 6mml. D. X50mm，和光纯药工业公司制)、COSMOS IL (0DS， 5 μ m,4. 6mml. D. x50mm, Nacalai Tesque 公司制)> InertsilC18(0DS,5 μ m,4. 6mml. D. x50mm,GL SCIENCE 公司制)或 SunFireC18 (0DS, 5 μ m，4. 6mml. D. x50mm, Waters 公司制)流动相含有0. 05%三氟醋酸的水㈧及含有0. 05%三氟醋酸的乙腈(B)洗脱方法10%B 95% B (3. 5 分)、95% B 10% B (1 分)、保持在 10% B (0. 5 分)的逐步式的溶剂梯度洗脱流速4.OmL/ 分钟在化合物的制备中，根据需要利用保护基保护官能团制备目标分子的保护体，之 后除去保护基。保护基的选择及脱除吸附操作利用例如“Greeneand Wuts, "Protective Groups in Organic Synthesis，，第 3 版、John ffiley&Sons 1999” 中记载的方法实施。实施例15-{7-[2-(4-乙基-哌嗪基)-吡啶_4_基]_2_吗啉_4_基_7H_吡咯并[2， 3-d]嘧啶-4-基}-嘧啶-2-基胺(1-1)的合成 工序 A5- (2-羟基-乙基)-2-吗啉-4-基-嘧啶-4，6_ 二醇 在300ml的2 口烧瓶中连接冷却管和橡胶塞，放入搅拌用磁力棒。用氮气置换体系 内部之后，加入吗啉-4-羧酸脒溴化氢盐(42. 2g、0. 20mol)及Me0H(160ml)。在室温下搅拌 10分钟使其溶解，在室温下加入28% NaOMe-MeOH(120ml、0. 62mol)。一边在氮氛围下搅拌， 一边加入 2-氧代四氢呋喃-3-羧酸甲酯(Journal of Organic Chemistry (1978), 43 (2), 346) (34. 8g、0. 24mol)，使用MeOH(IOml)将其洗入体系中。使用油浴将该混合物加热回流 3小时。冷却至室温后，在反应混合物中加入水(300ml)，在室温下搅拌30分钟。在该浓橙 红色的溶液中在室温下加入醋酸(24ml、0.42mol)，搅拌2小时。滤取析出的固体，使用水 (30ml)进行清洗。将得到的固体在减压下进行干燥，得到作为白色粉体的5-(2_羟基-乙 基)-2_ 吗啉-4-基-嘧啶-4，6-二醇(35. 2g、0. 146mol,73% )。1H-WR(DMSO-CW) δ (ppm) :2· 39 (2Η, t, J = 7. 63Hz)，3· 33 (2Η, t, J = 7. 63Ηζ)， 3. 51 (4Η, t, J = 4. 70Ηζ) ,3. 61 (4Η, t, J = 4. 70Ηζ)，10. 54 (2Η, bs) · ESI (LC-MS 正极模式) m/z :242[(M+H)+],工序 B 4- [4，6- 二氯-5- (2_氯乙基)_嘧啶_2_基]-吗啉 在3L的3 口烧瓶中连接温度传感器和橡胶塞，加入由工序A制备成的5_(2_羟 基-乙基)-2-吗啉-4-基-嘧啶-4，6-二醇(50g、0. 207mol)、甲苯(250ml) ,DIPEA (53. 2ml、 0. 311mol)。将其在冰浴中冷却至0°C，一边在氮气流下用机械搅拌器进行搅拌，一边以内部 温度为30°C以下的方式缓慢地滴加POCl3 (77. 3ml,0. 829mmol)。除掉冰浴，升温至室温，升 温至10(TC。搅拌7小时后，在室温下搅拌一整夜。进一步在iocrc下搅拌4小时，在冰浴下
冷却至0°C。其中以内部温度为30°C以下的方式缓慢地滴加水(750ml)。搅拌1小时后，用 甲苯(750ml)萃取有机层。用饱和食盐水(750ml)清洗有机层后，进行浓缩，进一步进行两 次使用有甲苯IL的共沸，得到作为淡茶色的粉末(55. 5g,91%)的4-[4，6-二氯-5-(2-氯 乙基)_嘧啶-2-基]-吗啉。1H-WR(CDCl3) δ :3. 20 (2Η，t，J = 7. 9Hz)，3. 66 (2Η，t，J = 7. 9Hz)，3. 70-3. 81 (8Η， m).ESI(LC_MS 正极模式)m/z 296 [ (M+H)+].工序C[6-氯-5-(2-氯乙基)-2_吗啉_4_基]-嘧啶_4_基_(4_甲氧基苄基)_胺 将由工序B制备成的4- [4，6- 二氯_5_ (2_氯乙基)_嘧啶_2_基]-吗啉(2. 9g)、 4-甲氧基苄基胺(1. 91ml)及二异丙基乙基胺(3. 40ml)溶解于乙腈(40ml)，回流10小时。 进一步加入4-甲氧基苄基胺(0. 64ml)及二异丙基乙基胺(0. 85ml)后，回流1小时。将溶 剂进行减压浓缩后，将残渣溶解于醋酸乙酯(150ml)，用饱和氯化铵水溶液(200ml)、饱和 食盐水(200ml)清洗，用硫酸钠进行干燥。将过滤除去干燥剂，浓缩而得到的残渣用硅胶柱 色谱法(二氯甲烷/甲醇=100/0 100/1)进行精制，得到作为黄色固体(2. 13g,55% ) 的目的物。1H-WrotomHzJDCI3) δ (ppm) :7. 23 (2H，d，J = 8. 7Hz)，6. 87 (2H，d，J = 8. 7Hz)， 5. 16 (1H, t, J = 5. 4Hz)，4. 55 (2H, d, J = 5. 4Hz)，3. 80 (3H, s)，3. 68-3. 78 (8H, m)，3. 62 (2H, t, J = 7. 3Hz)，2. 91 (2H, t, J = 7. 3Hz) ·ESI(LC_MS 正极模式)m/z 361 [(M+H)+],工序 D4-氯-7-(4-甲氧基苄基)-2-吗啉-4-基-6，7-二氢-5H-吡咯并[2, 3-d]嘧啶 将由工序C制备成的[6-氯-5-(2_氯乙基)-2-吗啉-4-基]-嘧啶-4-基-(4-甲 氧基苄基)-胺溶解于乙腈(290ml)，加入碳酸铯(5. 65g)和碘化钠(1. 83g)，回流10小时。 用水(200ml)稀释反应液，用醋酸乙酯(200mlX2)萃取。用饱和食盐水清洗有机层后，用硫酸钠进行干燥，过滤除去干燥剂后，将滤液进行减压浓缩，得到淡黄色粉末(2. IOg)。粗生成 物不进行精制而用于以下的反应。1H-WrotomHzJDCI3) δ (pprn) :7. 19 (2H，d，J = 8. 5Hz)，6. 86 (2H，d，J = 8. 5Hz)， 4. 48 (2H, s)，3. 80 (3H, s)，3. 70-3. 80 (8H, m)，3. 43 (2H, t, J = 8. 4Hz)，2. 87 (2H, t, J = 8. 4Hz).ESI(LC_MS 正极模式)m/z 361 [(M+H)+],工序 E4-氯-2-吗啉-4-基-6，7- 二氢 _5H_ 吡咯并[2，3-d]嘧啶 将由工序D制备成的4-氯-7- (4-甲氧基苄基)_2_吗啉_4_基_6，7_ 二氢_5H_吡 咯并[2，3-d]嘧啶(1. 87g)溶解于三氟醋酸(5. 2ml)，加入浓硫酸(290μ 1、1· 05当量)，回 流3小时。将过剩的溶剂进行减压浓缩而得到到残渣注入到冰水(约25ml)上，在冰冷下 用5M氢氧化钠进行中和。将反应液用醋酸乙酯/四氢呋喃(4/1，150ml)萃取2次，用饱和 食盐水清洗有机层后，用硫酸钠进行干燥。过滤除去干燥剂后，将滤液进行减压浓缩，得到 淡褐色粉末(1.78g)。粗生成物不进行精制而用于以下反应。1H-NMR (270MHz, CDCl3) δ (ppm) 4. 91 (1H, brs), 3. 70 (8H, s) ,3. 64 (2H, t, J = 8. 4Hz)，2. 99 (2H, t, J = 8. 4Hz) ·ESI(LC_MS 正极模式)m/z 241 [(M+H)+],工序 F1-(4-氯-2-吗啉-4-基-5，6-二氢-吡咯并[2，3_d]嘧啶_7_基)-乙酮
在乙腈(50ml)中加入由工序E制备成的4_氯_2_吗啉_4_基-6，7_ 二氢_5H_吡 咯并[2, 3-d]嘧啶(2.94g)、二甲基氨基吡啶(28mg)及吡啶(2. 48ml)，在冰冷下缓慢地滴 加乙酰氯(1.67ml)。使反应液升温至室温后，搅拌30分钟。将反应液用水(200ml)和醋 酸乙酯(200ml)稀释，用硅藻土制品过滤除去不溶物，用醋酸乙酯清洗硅藻土滤饼(celite pad)。将滤液的有机层进行分离，用醋酸乙酯(200ml)萃取水层。合并有机层并用饱和食盐 水清洗后，用硫酸钠进行干燥。过滤除去干燥剂后，将减压浓缩滤液而得到的残渣用硅胶柱 色谱法(醋酸乙酯/己烷=3/0 2/1)进行精制，得到作为淡黄色粉末的目的物(1. 67g)。1H-WrOTOMHz, CDCl3) δ (ppm) 4. 04 (2H, t, J = 8. 5Hz)，3. 66-3. 78 (8H，brs), 2. 92 (2H, t, J = 8. 5Hz)，2. 62 (3H, s) ·
ESI(LC-MS 正极模式)m/z 283 [ (M+H)+].工序 G 1-(4- {2-[双-(4-甲氧基-苄基)-氨基]-嘧啶-5-基} _2_吗啉~4~基_5，6_
氢-吡咯并[2，3-d]嘧啶-7-基)-乙酮 在由工序F制备成的1-(4-氯-2-吗啉-4-基-5，6-二氢-吡咯并[2, 3-d]嘧 啶-7-基)_ 乙酮(300mgU. 06mmolU. 0 当量)、双 _(4_ 甲氧基苄基)-[5-(4，4，5，5-四 甲基-[1，3，2] 二氧杂硼戊环-2-基)-嘧啶-2-基]胺(538mg、l. 17mmolU. 1当量)、醋 酸钯(2. 4mg、0. 0106mmolUmol% )、S-Phos (8. 7mg、0. 0212mmol,2mol % )、磷酸钾(450mg、 2. 12mmol、2.0当量)中加入二甲基甲酰胺(5ml)，在超声波照射下进行脱气。将其在100°C 下搅拌1. 5小时后，加入水而滤取固体，将其溶解于二氯甲烷，用无水硫酸钠进行干燥。在 减压下浓缩后，用柱色谱法(二氯甲烷/甲醇=50/1)进行精制，得到作为无色固体的目的 化合物(560mg、收率91% )。1H-WR(CDCl3) δ (ppm) 8. 98 (2H, s)，7. 19 (4H, d, J = 8. 8Hz)，6. 85 (4H，d, J = 8. 8Hz)，4. 84 (4H, s)，4. 10 (2H, t, J = 8. 5Hz)，3. 84-3. 76 (8. OH, m)，3. 80 (6H, s)，3. 18 (2H, t, J = 8. 5Hz) ,2. 69(3. OH, s).ESI(LC_MS 正极模式)m/z 582[(M+H)+].工序 H双-(4-甲氧基-苄基)-[5-(2_吗啉-4-基-6，7_ 二氢-5H-吡咯并[2, 3-d]嘧 啶-4-基)-嘧啶-2-基]-胺 在由工序G制备成的1-(4-{2_[双-(4-甲氧基-苄基)_氨基]-嘧 啶-5-基} -2-吗啉-4-基-5，6- 二氢-吡咯并[2，3-d]嘧啶_7_基)-乙酮(335mg、 0. 576mmol)的四氢呋喃(12ml)溶液中加入5M氢氧化钠水溶液(6ml)，回流一整夜。其中 加入IN盐酸进行中和，滤取生成的固体，将其用乙腈清洗，得到作为无色固体的目的化合 物(290mg、收率 93% )。 1H-WR(CDCl3) δ (ppm) 8. 97 (2H, s)，7. 18 (4H, d, J = 8. 3Hz) ,6. 85 (4H, d, J = 8. 3Hz)，4. 83 (4H, s)，3. 79 (6H, s)，3. 79-3. 73 (8H, m)，3. 68 (2H, t, J = 8. 3Hz)，3. 24 (2H, t, J = 8. 3Hz).ESI(LC_MS 正极模式)m/z 540 [ (M+H)+].工序I{5-[7-(2-氯-吡啶-4-基)-2-吗啉-4-基-6，7-二氢-5H-吡咯并[2, 3-d]嘧 啶-4-基]-嘧啶-2-基}_双-(4-甲氧基-苄基)_胺 使由工序H制备成的双-(4-甲氧基苄基)_ [5- (2-吗啉_4_基_6，7_ 二氢_5H_吡 咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-嘧啶-2-基]-胺(1.65g)悬浮于二甲基甲酰胺(20ml)，加 入2-氯-4-碘吡啶(805mg)、醋酸钯(35mg)、三苯基膦(Slmg)及磷酸钾(1.95g)，一边进 行超声波照射，一边吹入氩气10分钟。将反应液在100°C条件下搅拌1小时，在室温下冷 却后，加入水(50ml)。将混合液用醋酸乙酯(100ml)、二氯甲烷(IOOml)萃取，将合并的有 机层用饱和食盐水清洗后，用硫酸钠进行干燥。过滤除去干燥剂后，将减压浓缩滤液而得 到的残渣用硅胶柱色谱法(二氯甲烷/甲醇=50/1)进行精制，使残渣悬浮于醋酸乙酯/ 己烷(10ml/50ml)。滤取沉淀物，进行己烷清洗，在减压下进行干燥，得到黄色粉末目的物 (1. 75g,88% )。1H-WrGOOMHz, CDCl3) δ (ppm) 8. 99 (2H, s) ,8. 27 (1H, d, J = 5. 7Hz)，7. 82 (1H， d, J = 1. 9Hz)，7. 71 (1H, dd，J = 5. 7，1. 9Hz)，7. 20 (4H, d, J = 8. 4Hz)，6. 86 (4H, d, J = 8. 4Hz)，4. 84 (4H, s)，4. 08 (2H, t, J = 8. 4Hz)，3. 81-3. 89 (8H, m)，3. 80 (6H, s)，3. 36 (2H, t, J = 8. 4Hz).ESI(LC_MS 正极模式)m/z 651 [(M+H) +].工序J(5- {7- [2- (4-乙基-哌嗪 基)-吡啶 _4_基]_2_ 吗啉 _4_ 基 _6，7_ 二氢 _5H_ 吡 咯并[2，3-d]嘧啶-4-基}-嘧啶-2-基)-双-(4-甲氧基-苄基)_胺
在使由工序I制备成的{5-[7-(2_氯-吡啶-4-基)-2_吗啉-4-基-6，7_氢-5H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基]-嘧啶-2-基}-双-(4-甲氧基-苄基)-胺(200mg)、 叔丁醇钠(59mg)、钯二亚苄基丙酮络合物(16mg)悬浮于甲苯(4ml)中形成溶液，向该溶液 中吹入5分钟氩气。加入1-乙基哌嗪(59111)、2，8，9-三异丁基-2，5，8，9_四氮杂磷 杂-双环[3. 3. 3]十一碳烯(26mg)，在100°C下搅拌5小时。将反应液冷却至室温并加入 水后，用二氯甲烷萃取。将合并的有机层用饱和食盐水清洗，用硫酸镁进行干燥。过滤除去 干燥剂后，将减压浓缩滤液而得到的残渣用硅胶柱色谱法(二氯甲烷/甲醇=100/1)进行 精制，得到黄色固体(211mg，94% )。1H-WrGOOMHz, CDCl3) δ (ppm) 8. 99 (2H, s)，8. 13 (1H，d, J = 5. 7Hz)，7. 47 (1H， bs)，7. 28 (1H, bs)，7. 20 (4H, m)，6. 85 (4H, m)，4. 84 (4H, s)，4. 09 (2H, m)，3. 87 (4H, m)， 3. 80 (10H, s)，3. 59 (4H, m)，3. 31 (2H, m)，2. 47 (4H, m)，2. 48 (2H, q, J = 7. 25Hz)，1. 12 (3H, t, J = 7. 25Hz).ESI(LC_MS 正极模式)m/z 730 [ (M+H) +].工序 K(5- {7- [2- (4-乙基-哌嗪 基)-吡啶 _4_基]_2_ 吗啉 _4_ 基 _6，7_ 二氢 _5H_ 吡 咯并[2，3-d]嘧啶-4-基}-嘧啶-2-基)-(4-甲氧基-苄基)-胺 将由工序J制备成的(5-{7-[2-(4_乙基-哌嗪-1-基)_吡啶-4-基]-2-吗 啉-4-基-6，7- 二氢-5H-吡咯并[2，3-d]嘧啶_4_基}-嘧啶-2-基)-双-(4-甲氧基-苄 基)-胺(211mg)溶解于三氟醋酸(1ml)，在50°C下搅拌5小时。加入水后，用二氯甲烷萃 取，将有机层用饱和碳酸氢钠水、饱和食盐水清洗，用硫酸镁进行干燥。过滤除去干燥剂后， 将减压浓缩滤液而得到的残渣用硅胶柱色谱法(二氯甲烷/甲醇=10/1)进行精制，得到 作为淡黄色固体的(5-{7-[2-(4_乙基-哌嗪-1-基)_吡啶-4-基]-2-吗啉-4-基-6， 7- 二氢-5H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基}-嘧啶-2-基)-(4-甲氧基-苄基)-胺(197mg)。1H-NMR(CDCl3) δ (ppm) 8. 88 (2H, s)，8.05(lH，d, J = 5. 7Hz)，7· 73 (1H，s)， 7. 30 (2H, m)，7. 19 (1H, s)，6. 99 (2H, m)，4. 63 (2H, s)，4. 17 (2H, m)，3. 85 (11H, m)，3. 40 (8H, m)，3. 19 (2H, q, J = 7. 25Hz)，1. 41 (3H, t, J = 7. 25Hz).工序 L5-{7-[2-(4-乙基-哌嗪基)-吡啶_4_基]_2_吗啉_4_基_7H_吡咯并[2， 3-d]嘧啶-4-基}-嘧啶-2-基胺将由工序K制备成的(5-{7-[2-(4_乙基-哌嗪-1-基)_吡啶-4-基]-2-吗 啉-4-基-6，7-二氢-5H-吡咯并[2，3-d]嘧啶_4_基}-嘧啶-2-基)-(4_甲氧基-苄 基)_胺(30mg)溶解于氯仿/水=20/1 (2. Iml)，加入DDQ(33mg)，在室温下搅拌4小时。加 入IN-NaOH后，用氯仿萃取，将有机层用硫酸镁进行干燥。过滤除去干燥剂后，将减压浓缩 滤液而得到的残渣用硅胶柱色谱法(二氯甲烷/甲醇=30/1)进行精制，得到作为淡黄白
色固体的5-{7-[2-(4-乙基-哌嗪-1-基)_吡啶-4-基]-2-吗啉-4-基-7H-吡咯并[2， 3-d]嘧啶-4-基}-嘧啶-2-基胺(9mg,38% )。1H-WR(CDCl3) δ (ppm) :9. 05 (s，2H)，8. 27 (d，1H，J = 5. 7Hz)，7. 46 (d，1H，J = 1. 1Hz)，7. 33 (d, 1H, J = 3. 8Hz)，7. 02 (dd, 1H, J = 5. 7Hz，J = 1. 9Hz)，6. 72 (d, 1H, J = 3. 8Hz)，5. 37 (s，2H)，3. 89 (m, 8H)，3. 69 (t,4H, J = 5. 3Hz)，2. 62 (t,4H, J = 4. 5Hz)，2. 52 (q, 2H, J = 7. 2Hz)，1. 17 (t, 3H, J = 7. 2Hz)ESI (LC-MS 正极模式)m/z 487 [ (M+H) +].实施例2{3-[4-(2-氨基-嘧啶-5-基)-2-吗啉-4-基-卩比咯并[2，3_d]嘧啶_7_基]_4_甲 基-苯基}-吗啉-4-基-甲酮(2-1)的合成 在3-溴-4-甲基苯甲酸(2. 8g、13. Ommo 1)的二氯甲烷溶液(80ml)中加入 WSCl (3. 5g、18. 2mmol)、吗啉(1. 36ml、15. 6mmol)、N，N- 二 甲基氨基吡啶(794mg、6. 5mmol)， 在室温下搅拌1小时。在反应液中加入饱和氯化铵水溶液，用醋酸乙酯(IOOml)萃取两次。 将有机层用饱和食盐水(IOOml)清洗，用硫酸钠进行干燥。过滤除去干燥剂后，将减压浓缩 滤液而得到的残渣用硅胶柱色谱法(二氯甲烷/甲醇=50/1)进行精制，由此得到作为黄 褐色固体的(3-溴-4-甲基-苯基)-吗啉-4-基-甲酮(3. 2g、86% )。1H-WR(CDCl3) δ (ppm) 7. 59 (1H, d, J = 1. 5Hz)，7. 26 (1H，s), 7. 25 (1H, d, J = 1. 5Hz)，3. 69 (8H, s)，2. 42 (3H, s) ·ESI(LC-MS 正极模式)m/z 284，286 (M)+.工序 B{3-[4-(2-氨基-嘧啶-5-基)-2-吗啉-4-基-吡咯并[2，3_d]嘧啶_7_基]_4_甲 基-苯基}-吗啉-4-基-甲酮将按照实施例1工序H制备成的双-(4-甲氧基-苄基)-[5-(2_吗啉_4_基-6， 7-二氢-5H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-嘧啶-2-基]-胺(3. 0g、5. 56mmol)、由工序A 得到的(3-溴-4-甲基-苯基)-吗啉-4-基-甲酮(2. 4g、8. 34mmol)、Pd(OAc)2(125mg、 0. 556mmol)、X-Phos(529mg、l. llmmol)、磷酸钾(2.4g、ll. 12mmol)的二甲基甲酰胺(50ml) 溶液在超声波照射下进行脱气，在100°C下搅拌14小时。将反应液冷却至室温后，加入 饱和氯化铵水溶液，用醋酸乙酯(200ml)萃取两次。将有机层用饱和食盐水(200ml)清工序 A(3-溴-4-甲基-苯基)-吗啉-4-基-甲酮洗，用硫酸钠进行干燥。过滤除去干燥剂后，将减压浓缩滤液而得到的残渣用硅胶柱 色谱法(二氯甲烷/甲醇=100/1 30/1)进行精制，由此得到作为褐色油状物质的 [3- (4- {2-[双-(4-甲氧基-苄基)-氨基]-嘧啶-5-基} -2-吗啉-4-基-5，6- 二氢-吡 咯并[2，3-d]嘧啶-7-基)-4-甲基-苯基]-吗啉-4-基-甲酮(5. 2g、100% )。将其溶解于TFA (25ml)，在N-乙酰基半胱氨酸(1.8g、ll. lmmol)存在下回流14小 时。将减压浓缩反应液而得到的残渣用硅胶柱色谱法(二氯甲烷/甲醇=5/1)进行精制， 由此得到作为黄色粉末的目的化合物(124mg、4% )。1H-NMR(CDCl3) δ (ppm) 9. 08 (2H, s)，7. 43 (2H，d, J = 1. 2Hz)，7. 37 (1H，s)， 7. 03 (1H, d, J = 3. 8Hz)，6. 71 (1H, d, J = 3. 8Hz)，5. 30 (2H, s)，3. 76 (16H, br s)，2. 22 (3H, s).ESI(LC-MS 正极模式)m/z 501 (M+H)+.另外，在上述的反应中，除目的化合物之外，得到作为生成物的{3-[4-(2_氨 基-嘧啶-5-基)-2-吗啉-4-基-5，6- 二氢-吡咯并[2，3-d]嘧啶-7-基]~4~甲基-苯 基}-吗啉-4-基-甲酮(ESI (LC-MS正极性模式)m/z 503 (M+H) +)。使得到的{3-[4- (2-氨 基-嘧啶-5-基)-2-吗啉-4-基-5，6- 二氢-吡咯并[2，3-d]嘧啶-7-基]~4~甲基-苯 基}-吗啉-4-基-甲酮和与其相对的1 3当量的DDQ在二氯甲烷和二甲基甲酰胺的混 合溶剂下(例如9 1 1 1的混合比。可以进一步混合乙腈)进行反应，由此，也可 以合成目的化合物的{3-[4-(2-氨基-嘧啶-5-基)-2-吗啉-4-基-吡咯并[2，3-d]嘧 啶-7-基]-4-甲基-苯基}-吗啉-4-基-甲酮。实施例35-{7-[4-(1，1_ 二氧代_1 λ 6-硫代吗啉-4-基甲基)-苯基]_2_吗 啉-4-基-7Η-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基}-嘧啶-2-基胺(3_1)的合成 工序 A4- (4- {2-[双-(4-甲氧基-苄基)-氨基]-嘧啶_5_基} _2_吗啉~4~基_5，6_ 氢-吡咯并[2，3-d]嘧啶-7-基)-苯甲醛 将按照实施例1工序H制备成的双-(4-甲氧基-苄基)-[5-(2_吗啉_4_基-6， 7-二氢-5H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-嘧啶-2-基]-胺(50mg、0. 093mmol)、4_溴-苯 甲醛(22mg、0. 121mmol)、Pd2dba3(8. 5mg、0. 0093mmol) ,S-Phos (7. 6mg、0. 0186mmol)、磷酸钾 (39mg、0. 186mmol)的二甲基甲酰胺(Iml)溶液在超声波照射下进行脱气，在100°C下搅拌 16小时。将反应液冷却至室温后，加入饱和氯化铵水溶液，用醋酸乙酯(IOml)萃取两次。 将有机层用饱和食盐水(IOml)清洗，用硫酸钠干燥后，进行减压馏去，将由此得到的残渣 用乙醚清洗，由此得到茶褐色粉末的目的化合物(29mg、49% )。1H-WR(DMSO-D6) δ (ppm) :9·87(1Η，s) ,8. 99 (2H, s), 8. 06 (2Η, d, J = 8· 8Hz)， 7. 91 (2Η, d, J = 8. 8Ηζ)，7. 21 (4Η, d, J = 8. 3Ηζ)，6. 89 (4Η, d, J = 8. 3Ηζ)，4. 79 (4Η, s)， 3. 73 (6Η, s)，3· 34 (4Η, s) ·ESI(LC_MS 正极模式)m/z 644 (M+H)+.工序 B(5- {7- [4- (1，1- 二氧代-I λ 6-硫代吗啉_4_基甲基)-苯基]_2_吗啉_4_基_6， 7- 二氢-5H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基}-嘧啶-2-基)-双-(4-甲氧基-苄基)-胺 在由工序A制备成的4-(4-{2_[双_(4_甲氧基-苄基)_氨基]-嘧 啶-5-基}-2-吗啉-4-基-5，6-二氢-吡咯并[2，3-d]嘧啶-7-基)-苯甲醛(0. 80g、 1. 24mmol)的二氯甲烷溶液(80ml)中，加入硫代吗啉_1，1_ 二氧化物(0. 34g、2. 49mmol)、 三乙酰氧基硼氢化钠(0. 55g、2.49mmol)及醋酸(0. 14ml、2. 49mmol)，加热回流24小时。 将反应体系冷却后，过滤分离析出的固体，用二氯甲烷(20ml)进行清洗。将滤液的洗液合 并，将其依次用饱和氯化铵水溶液(50mL)和饱和氯化钠水溶液(50mL)清洗后，将有机层 用硫酸镁进行干燥。过滤除去干燥剂后，将减压浓缩滤液而得到的残渣用氨基硅胶柱色谱 法(二氯甲烷/N-己烷=4/1)进行精制，由此得到作为黄色固体的[(5-{7-[4-(1，1_ 二氧 代-1 λ 6-硫代吗啉-4-基甲基)-苯基]-2-吗啉-4-基-6，7- 二氢-5Η-吡咯并[2，3-d] 嘧啶-4-基}_嘧啶-2-基)-双-(4-甲氧基-苄基)_胺(0.71g、75% )。1H-WR(CDCl3) δ :9. 00 (2Η, s)，7. 78 (2H, d, J = 8. 6Hz)，7. 32 (2H, d, J = 8. 6Hz)， 7. 19 (4H, d, J = 8. 6Ηζ)，6· 90-6. 82 (4Η, m)，4· 84 (4Η, s)，4· 11 (2Η, t, J = 8. 2Ηζ)， 3. 89-3. 76 (14Η, m)，3. 64 (2Η, s)，3. 31 (2H, t, J = 8. 2Hz)，3. 10-2. 97 (8H, m) ·ESI(LC_MS 正极模式)m/z 763 (M+H)+.工序 C(5- {7- [4- (1，1- 二氧代-1 λ 6-硫代吗啉-4-基甲基)-苯基]_2_吗啉_4_基_6， 7- 二氢-5H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基}-嘧啶-2-基)-胺 在由工序B制备成的[(5-{7-[4-(1，1-二氧代-1入6-硫代吗啉-4-基甲基)_苯 基]-2-吗啉-4-基-6，7- 二氢-5H-吡咯并[2，3-d]嘧啶_4_基}-嘧啶-2-基)-双-(4-甲 氧基-苄基)-胺(100. 5mg、0. 132mmol)的醋酸乙酯溶液(2ml)中，加入浓硫酸(0.50ml、 9. 35mmol)，在70°C下搅拌3小时。冷却至室温后，在反应液中加入5 %磷酸钾水溶液 (30ml)。滤取析出的固体，用水(5ml)进行清洗。将其悬浮于二氯甲烷(2. 5ml)，滤取生成 的固体后，用二氯甲烷(3ml)进行清洗，由此得到作为淡黄色固体的(5-{7-[4-(1，1_ 二氧 代-1 λ 6-硫代吗啉-4-基甲基)-苯基]-2-吗啉-4-基-6，7- 二氢-5Η-吡咯并[2，3-d] 嘧啶-4-基}-嘧啶-2-基)-胺(48. 5mg,70% )。1H-WR(DMSO-D6) δ :8. 81 (2Η，s)，7. 81 (2Η，d，J = 8. 6Hz)，7. 34 (2Η，d，J = 8. 6Hz)， 7. 06 (2Η, s)，4. 08 (2Η, t, J = 8. 1Hz)，3. 70 (8H, br s)，3. 63 (2H, s)，3. 31-3. 24 (2H, m)， 3. 14-3. 07 (4H, m)，2. 91-2. 84 (4H, m).ESI(LC-MS 正极模式)m/z 523 (M+H)+.工序D5-{7-[4-(l，l- 二氧代_1 λ 6-硫代吗啉-4-基甲基)-苯基]_2_吗 啉-4-基-7Η-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基}-嘧啶-2-基-胺在由工序C制备成的(5-{7-[4-(1，1_ 二氧代-1λ6-硫代吗啉-4-基甲基)_苯 基]-2-吗啉-4-基-6，7- 二氢-5Η-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基}-嘧啶-2-基)-胺 (8.6mg、0.017mmol)的二氯甲烷/乙腈/ 二甲基甲酰胺混合溶液(1 1 3.5ml)中，加 入DDQ(5.6mg、0.025mmol)，在室温下搅拌1小时。将反应液进行减压浓缩，将得到的残 渣用制备型薄层色谱法(二氯甲烷/甲醇=9/1)进行精制，由此得到作为淡黄色固体的 5-{7-[4-(1，1- 二氧代-1 λ 6-硫代吗啉-4-基甲基)-苯基]-2-吗啉-4-基-7Η-吡咯并 [2，3-d]嘧啶-4-基}-嘧啶-2-基-胺(6. 2mg,72% )。1H-WR (DMSO-D6) δ :9. 04 (2Η, s)，7. 88 (2H, d，J = 8. OHz)，7. 67 (1H, d，J = 3. OHz)， 7. 50 (2H, d, J = 8. 0Hz)，7. 23 (2H, br s)，6. 96 (1H, d, J = 3. OHz)，3. 75-3. 71 (10H, br m)， 3. 18-3. 10 (4H, m)，2. 96-2. 89 (4H, m).ESI(LC_MS 正极模式)m/z 521 (M+H)+.实施例45- (7-甲磺酰基-2-吗啉-4-基_7H_吡咯并[2，3-d]嘧啶_4_基)-嘧啶_2_基 胺(4-1)的合成 工序 A4-氯-7-甲磺酰基-2-吗啉-4-基_6，7_ 二氢_5H_吡咯并[2，3-d]嘧啶 使甲磺酰胺(4.76g、50mmol)和碳酸钾(3. 45g、25mmol)在 NMP(IOml)中悬浮，一 边在70°C下搅拌，一边用5分钟滴加按照实施例1工序B制备成的4-[4，6- 二氯-5- (2-氯 乙基)_嘧啶-2-基]-吗啉的NMP溶液(20ml)。将反应液在100°C下搅拌5小时后，自然 冷却至25°C，进一步搅拌12小时。一边在加热到70°C的上述反应液中进行搅拌，一边滴加 水(30ml)将反应液的内部温度保持在70°C，目视确认在反应液中观察不到不溶物后，自然 冷却至25°C (自50°C开始晶析)。在得到的悬浮液中一边进一步搅拌、一边加入水(30ml) 后，搅拌30分钟。滤取生成的沉淀物并进行水洗(10ml)，得到4-氯-7-甲磺酰基-2-吗 啉-4-基-6,7- 二氢-5H-吡咯并[2，3-d]嘧啶的无色粉末(2. 13g,67% ))。1H-WR(CDCl3) δ :4· 08 (2Η, dd, J = 9· 0，7. 8Ηζ)，3. 80-3. 71 (8Η, m)，3. 29 (3Η, s)， 3. 02 (2H, dd, J = 9. 0,7. 8Hz).ESI(LC_MS 正极模式)m/z 319，321 (M+H)+·工序 B[5-(7_甲磺酰基-2-吗啉-4-基-6，7_二氢-5H-吡咯并[2，3_d]嘧啶_4_基)-嘧 啶-2-基]-双-(4-甲氧基-苄基)_胺将由工序A制备成的4-氯-7-甲磺酰基-2-吗啉_4_基_6，7_ 二氢_5H_吡咯并 [2，3-d]嘧啶(80. 0mg、0. 251mmol)、双-(4-甲氧基-苄基)-[5- (4，4，5，5-四甲基-[1，3， 2] 二氧硼戊环-2-基)-嘧啶-2-基]-胺(138. 9mg、0. 30Immo 1)、磷酸钾(213mg、1. OOmmo 1) 及二氯双(三苯基膦)钯(II)(1.8mg、2. 56ymol)溶解于水/ 二甲基甲酰胺混合溶剂 (1 15、80(^1)，将其在超声波照射下进行脱气，在氩氛围下在601下搅拌2小时。将反 应液冷却至室温后，加入水(800 μ 1)，在室温下搅拌30分钟。滤取析出的固体，依次用水 (1. 5ml)、甲醇(1. 5ml)、叔丁基甲基醚(1. 5ml)清洗，由此得到作为白色固体的[5-(7-甲磺 酰基-2-吗啉-4-基-6，7- 二氢-5H-吡咯并[2，3-d]嘧啶_4_基)-嘧啶-2-基]-双-(4-甲 氧基-苄基)-胺(151.6mg、98% )。1H-WR (DMSO-D6) δ :8. 97 (2. OH, s)，7. 20 (4. OH, d, J = 8. 6Hz)，6. 88 (4. OH, d, J =8. 6Hz)，4. 79 (4. OH, s)，3. 99 (2. OH, t, J = 8. 2Hz)，3. 73 (6. OH, s)，3. 75-3. 68 (8. OH, m)， 3. 34 (3. OH, s)，3. 27 (1. 9H, t, J = 8. 2Hz). ESI(LC_MS 正极模式)m/z 618 (M+H)+.另外，在本工序中，替代双-(4-甲氧基-苄基)-[5-(4，4，5，5_四甲基_[1，3，2] 二氧硼戊环-2-基)-嘧啶-2-基]-胺，使用2-氨基-5- (4，4，5，5-四甲基-1，3，2- 二氧 硼戊环-2-基)嘧啶来合成5-(7-甲磺酰基-2-吗啉-4-基-6，7- 二氢-5H-吡咯并[2， 3-d]嘧啶-4-基)-嘧啶-2-基胺。 在按照实施例4的工序A制备成的4-氯-7-甲磺酰基_2_吗啉_4_基_6，7_ 二 氢-5H-吡咯并[2，3-d]嘧啶(57. 9g、181. 6mmol)的 DMF 溶液(550ml)中，加入 2-氨 基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧硼戊环-2-基)嘧啶(48. 2g、218. Ommol)、磷酸钾 (42.4g、199.8mmol)、水(30ml)，在氮氛围下进行脱气。进一步加入二氯双(三苯基膦)钯 (II) (1. 3g、l. Smmol)，在氮氛围下进行脱气后，在60°C下搅拌2小时。将反应液在冰冷下 冷却后，加入水(750ml)，搅拌2小时。滤取生成的沉淀物，用水(240ml)、丙酮(240ml)清 洗，得到粗固体(75. 6g)。使得到的固体(62. Og)悬浮于水(1500ml)，在50°C下搅拌1小 时。滤取沉淀物，用水(400ml)、丙酮(400ml)清洗，得到作为灰白色固体的5-(7-甲磺酰 基-2-吗啉-4-基-6，7- 二氢-5H-吡咯并[2，3-d]嘧啶_4_基)-嘧啶-2-基胺(53. 7g、 96% )。ESI(LC_MS 正极模式)m/z 378[(M+H)+].使用5- (7-甲磺酰基-2-吗啉-4-基-6，7- 二氢_5H_吡咯并[2，3-d]嘧 啶-4-基)_嘧啶-2-基胺，替代后述的工序C中的[5-(7-甲磺酰基-2-吗啉-4-基-6， 7- 二氢-5H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-嘧啶-2-基]-双-(4-甲氧基-苄基)_胺，进 行按照工序C的方法的氧化反应，由此，也可以得到5-(7-甲磺酰基-2-吗啉-4-基-7H-吡 咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-嘧啶-2-基胺。工序 C[5-(7-甲磺酰基-2-吗啉-4-基_7H_吡咯并[2，3_d]嘧啶_4_基)-嘧 啶-2-基]-双-(4-甲氧基-苄基)_胺 在由工序B制备成的[5-(7-甲磺酰基-2-吗啉-4-基-6，7-二氢-5H-吡咯并[2， 3-d]嘧啶-4-基)-嘧啶-2-基]-双-(4-甲氧基-苄基)-胺(101.3mg、0. 164mmol)的二氯甲烷溶液(3ml)中，加入DDQ(48.4mg、0.213mmol)，在室温下搅拌30分钟。在反应液中加 入饱和氯化钠水溶液(25ml)，用二氯甲烷(50ml)萃取，将有机层用硫酸镁进行干燥。过滤 除去干燥剂后，将减压浓缩滤液而得到的残渣用硅胶柱色谱法(二氯甲烷/甲醇=150/1) 进行精制，由此得到作为黄色固体的[5-(7-甲磺酰基-2-吗啉-4-基-7H-吡咯并[2，3-d] 嘧啶-4-基)-嘧啶-2-基]-双-(4-甲氧基-苄基)-胺(84. 5mg,84% )。1H-WR(CDCl3) δ :9· 10 (2Η, s)，7. 33 (1H, d, J = 4. 1Hz)，7. 21 (4H, d, J = 8. 3Hz)，
6.87 (4H, d, J = 8. 3Hz)，6. 72 (1H, d, J = 4. 1Hz)，4. 86 (4H, br s)，3. 95-3. 88 (4H, m)， 3. 85-3. 78 (10H, m)，3. 56 (3H, s).ESI(LC-MS 正极模式)m/z 616 (M+H)+.工序 D5- (7-甲磺酰基-2-吗啉-4-基_7H_吡咯并[2，3-d]嘧啶_4_基)-嘧啶_2_基 胺在由工序C制备成的[5-(7-甲磺酰基-2-吗啉-4-基_7H_吡咯并[2，3_d]嘧 啶-4-基)-嘧啶-2-基]-双-(4-甲氧基-苄基)_胺(81.5mg、0. 132mmol)的醋酸乙酯 溶液(3ml)中，加入浓硫酸(0. 751111、14.0讓01)，在701下搅拌3小时。冷却至室温后，在 反应液中加入10%磷酸钾水溶液(50ml)。滤取析出的固体，用水(5ml)进行清洗。将其悬 浮于二氯甲烷(1ml)，滤取生成的固体后，用二氯甲烷(3ml)清洗。将得到的固体用制备型 薄层色谱法(二氯甲烷/甲醇=10/1)进行精制，由此得到作为淡黄色固体的5-(7_甲磺 酰基-2-吗啉-4-基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-4-基)-嘧啶-2-基胺(22. 5mg,45% )。1H-WR (DMSO-D6) δ :9· 00 (2Η, s)，7. 39 (1H, dd, J = 4. 1,1. 2Hz)，7. 32 (2H, br s)，
7.01 (1H, dd, J = 4. 1，1. 2Hz)，3. 84-3. 70(11H, m).ESI(LC_MS 正极模式)m/z 376 (M+H)+.[试验例1][PI3K阻滞活性的测定]关于式⑴表示的本发明化合物，用由baculovirus表达系制备成的人 PI3K (pi 10 α/ρ85 α)，使用 AlphaScreen GST Detection Kit (PerkinElmer, Inc.)测定阻 滞活性。在384孔分析用板上将溶解于二甲基亚砜(DMSO)的规定浓度的本发明化合物和 PI3K 混合，在室温下放置 20 分钟后，添加 4 μ MPI (4，5) P2 (Echelon Corporation)、10 μ M ATP (5mM Hepes ρΗ7. 5，2. 5mMMgCl2)，引发反应。在37°C下反应15分钟后，添加由大肠杆菌
GST-GRPU Anti-GST Acceptor Beads (PerkinElmer, Inc.) > Streptavidin Donor Beads (PerkinElmer, Inc. )、biotin-PI(3,4,5)P3(EchelonCorpoRation) (IOmM Tris-HCl pH7. 4，150mM NaCl，7. 5mM EDTA, lmMDTT,0. 1% Tween20)，在室温下放置 1 小时 后，利用Envision测定机(PerkinElmer, Inc.)测定由680nm的激发光放出的520_620nm 的发光。就化合物的阻滞活性而言，将仅添加有DMSO时的测定值设定为0%、将没有添加 ATP时的测定值设定为100%阻滞活性，算出表示50%阻滞活性的浓度作为IC5(l(yM)。上述试验例1 可以以 Analytical Biochemistry, 2003, 313, 234-245 ；Alexander GRay et al为参考。[试验例2]
[细胞增殖抑制活性的测定]关于式(I)表示的本发明化合物，测定了细胞增殖抑制活性。癌症细胞增殖抑制 活性使用株式会社同仁化学研究所制Cell Counting Kit_8进行测定。将由American Type Culture Collection (美国弗吉尼亚州)购入的人大肠癌症细胞株HCT116，以每孔2000个 接种于96孔培养板的1个孔中，添加规定浓度的化合物后，在37°C、5% CO2环境下培养4 天。在培养第4天添加Cell Counting Kit_8的溶液，根据试剂盒附带的操作流程测定吸 光度(测定波长450nm、参照波长615nm)。将不含有被验物质时的测定值设定为0%阻滞， 将不含有被验物质及细胞时的测定值设定为100%阻滞，算出表示50%阻滞活性的浓度作 为 IC5tl(PM)。关于人肺癌细胞株NC1-H460、人前列腺癌症细胞株PC3，也由American Type Culture Collection购入，测定癌症细胞增殖抑制活性。关于NC1-H460、PC3，分别以每孔 1000个、3000个接种于96孔培养板的1个孔中，进行与人大肠癌症细胞株同样的试验，算 出表示50%阻滞活性的浓度作为IC5tl ( μ M)。将酶阻滞活性及细胞增殖抑制活性示于以下表中。如表所示，本发明化合物均显 示良好的酶阻滞活性及细胞增殖抑制活性。
权利要求
一种化合物或其医药学上允许的盐，其用式(I)表示，式(I)式中，Q表示 X Y 表示的连结基；X表示单键、 CO 、 CONH 、 CON(C1 4烷基) 、 CS 、 CSNH 、 CSN(C1 4烷基) 、或 SO2 ；Y表示单键、亚芳基、或杂亚芳基，所述亚芳基及杂亚芳基为无取代或可以利用 卤素、 C1 6烷基、 OH或 OC1 6烷基取代1～4处；其中，X和Y不同时为单键；R1表示 C0 6亚烷基 (A)m C1 6烷基、或 C0 6亚烷基 (A)m C0 6亚烷基 (杂环)；A表示 CO 、 CS 、 CONH 、 CON(C1 4烷基) 、 CSNH 、 CSN(C1 4烷基) 、 NH 、或 N(C1 4烷基) ；m表示0或1；所述 (杂环)为杂芳基或以下式(a)表示的基团；式中，Ra及Rb相同或相互不同，表示氢原子、 C1 6烷基、 卤素、 OH、或 OC1 6烷基；W表示 CRcRd 、 O 、 S 、 SO 、 SO2 、或 NRe ；n表示0或1；Rc及Rd相同或相互不同，表示氢原子、 卤素、 C1 6烷基、 OH、 OC1 6烷基或杂芳基；Re表示氢原子、 C1 6烷基、 OH、 OC1 6烷基、或杂芳基，Rc、Rd及Re中的 C1 6烷基及 OC1 6烷基可以用 卤素或 OH取代。FPA00001189034700011.tif,FPA00001189034700012.tif
2.如权利要求1所述的化合物或其医药学上允许的盐，其中，在式⑴中，X或Y的任 一个为单键。
3.如权利要求1所述的化合物或其医药学上允许的盐，其中，X为单 键、-co-、-CONH-、-CSNH-、或-SO2-。
4.如权利要求1所述的化合物或其医药学上允许的盐，其在式(I)中，Y表示的亚芳 基或杂亚芳基是由选自苯、吡咯、吡唑、咪唑、三唑、噁唑、异噁唑、吲唑、噻唑、吡啶、哒嗪、 嘧啶、吡嗪、噁嗪、三嗪、吲哚、苯并咪唑、苯并噁唑、苯并噻唑、苯并吡唑、喹啉、异喹啉、喹喔 啉、喹唑啉、酞嗪、嘌呤及蝶啶中的环衍生的。
5.如权利要求1所述的化合物或其医药学上允许的盐，其中，在式(I)中，R1中的_(杂环)为吡啶基或以下(a_l)、(a-2)、(a-3)、(a_4)、(a_5)、(a_6)、(a_7)、或(a_8)表示的基 团， 式中，R。、Rd、及Re如权利要求1中所定义的那样。
6.如权利要求1所述的化合物或其医药学上允许的盐，其在式(I)中，X为单 键、-co-、-CONH-、-CSNH-、或-SO2-；Y为单键、亚苯基、或亚吡啶基；而且， R1为 —Ccm亚烷基 一(A)m—CtM亚烷基-N、^NRe(a-6·)-C0.4亚烷基"~<A>m_Co_4亚烧基-I(a-7")-CtM亚烷基""(A)m-CtM亚烷基—NO〇2一Ccm亚烷基一(A)m-Cw亚烷基(a-8')或-Ch烷基此时，A 表示-CO-、-NH-、-CONH-或-CONMe- ；m 为 O 或 1 ； Re表示氢原子、_(可以用卤原子取代的CV6烷基)或吡啶基。
7.如权利要求1所述的化合物或其医药学上允许的盐，其中，所述化合物选自 5-{7-[2-(4-乙基-哌嗪-1-基)_吡啶-4-基]-2-吗啉-4-基-7H-吡咯并[2，3_d]嘧 啶-4-基}_嘧啶-2-基胺；{3-[4-(2-氨基-嘧啶-5-基)-2-吗啉-4-基-吡咯并[2，3-d]嘧啶_7_基]-4-甲 基-苯基}-吗啉-4-基-甲酮；5- {7-[4- (1，1- 二氧代-1 λ 6-硫代吗啉-4-基甲基)-苯基]-2-吗啉-4-基-7Η-吡 咯并[2，3-d]嘧啶-4-基}-嘧啶-2-基胺；以及5- (7-甲磺酰基-2-吗啉-4-基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶_4_基)-嘧啶-2-基胺。
8.一种化合物的制造方法，其制造权利要求1所述的式(I)表示的化合物， 式中，Q及R1如权利要求1中所定义的那样，其中，所述制造方法可以包含使式(Via)表示的化合物与氧化剂反应后、进一步将氨 基的保护基进行脱保护的工序， 式中，Q及R1如权利要求1中所定义的那样；PG’表示氨基的保护基。
9.一种医药组合物，其包含权利要求1 7中任一项所述的化合物或医药学上允许的 盐作为有效成分。
10.一种PI3K阻滞剂，其包含权利要求1 7中任一项所述的化合物或医药学上允许 的盐作为有效成分。
11.一种增殖性疾病的预防剂或治疗剂，其包含权利要求1 7中任一项所述的化合物 或医药学上允许的盐作为有效成分。
12.如权利要求11所述的预防剂或治疗剂，其中，所述增殖性疾病为癌症。
13.如权利要求12所述的预防剂或治疗剂，其中，所述癌症为大肠、前列腺或非小细胞肺癌。
全文摘要
本发明提供一种增殖性疾病例如癌症的预防或治疗剂，其具有优异的PI3K阻滞效果、具有细胞增殖阻滞作用、同时在体内的稳定性及水溶解性优异。一种化合物或其医药学上允许的盐，其用式(I)表示，式(I)[式中，Q表示-X-Y-表示的连结基；X表示单键、-CO-、-CONH-、-CON(C1-4烷基)-、-CS-、-CSNH-、-CSN(C1-4烷基)-、或-SO2-；Y表示单键、亚芳基或杂亚芳基；其中，X和Y不同时为单键；R1表示-C0-6亚烷基-(A)m-C1-6烷基或-C0-6亚烷基-(A)m-C0-6亚烷基-(杂环)]。
文档编号A61K31/5377GK101932584SQ20098010397
公开日2010年12月29日 申请日期2009年2月6日 优先权日2008年2月7日
发明者大和田润, 小山耕平, 村田毅, 洪右上, 海老池启达 申请人:中外制药株式会社
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