具有苯并菲啶结构的抗肿瘤药及包含它们的制剂的制作方法
专利名称：具有苯并菲啶结构的抗肿瘤药及包含它们的制剂的制作方法
具有苯并菲啶结构的抗肿瘤药及包含它们的制剂本发明涉及苯并菲啶生物碱类及其盐用于制备肿瘤治疗药物的用途。本发明还涉及所述生物碱的新的盐及包含它们的组合物。
现有技术肿瘤学的首要目标是通过任何手段根除肿瘤，即使当这样做带来严重副作用，“首先不能伤害”("primum non nocere")的格言不用作肿瘤的治疗指南，而是优选换之以“首 先促进以帮助”(“primum succerere”)。肿瘤治疗常涉及到根除手术、靶向放疗(包括光动力疗法)、高剂量的化疗药物、 放射治疗和用细胞因子(IL2)和单克隆抗体的治疗。尽管有庞大、不断增加数量的可利用 的治疗方法，治愈成功率仍然不能满意，特别是在发生药物耐药性的化疗情况下。在实体肿瘤中，化疗迅速降低了瘤块，但并不完全，少数特别抗药的细胞可保持肿 瘤活跃，然后发展，常带来致命的结果。这些细胞最近被分类为肿瘤干细胞，其拥有强的增 殖潜力与适应性。所述细胞构成约占5%的瘤块，并且抵抗当前使用的所有已知的化疗药。 肿瘤干细胞的存在最先在髓性白血病中被确立(Bonnet D，Dick JE. Nature Medicine, 3, 730-737 (1997)，并相继在乳腺肿瘤与脑肿瘤中被证实(Al-Hajj M，等人，Natl Acad Sci, USA，100. 3983-3988，2003，Sing SK，等人.，432，396-401，Nature 2004)。最近，已经从黑色素瘤、结肠肿瘤和肺切片(microtomes)中分离出干细胞 (Ricci-Vitali,Nature 445，111-115 (2007) ；Fang D. , Cancer Res.，65，9328-9337 2005， Eramo,Cell Death and Differentiation,advance online publication 2007 ^11^ 30 日，Doi :10.1038/sj.cdd. 4402283)。如上文所述的这些细胞，不能通过标准治疗得到控制，并产生了肿瘤。因此明确需 要开发能够可能通过诱导细胞凋亡而抑制肿瘤干细胞的化合物。发明描述现已发现苯并菲啶生物碱类、特别是血根碱、白屈菜红碱、白屈菜碱及其与淡黄青 霉酸、磷脂酸或透明质酸的盐对多药抗药的肿瘤干细胞具有抗增殖作用。具体而言，与淡黄青霉酸的盐得到对癌细胞的强效细胞毒作用及同样强效的抗血 管形成、抗炎和镇痛作用。第一方面，本发明因此涉及苯并菲啶生物碱或其盐用于制备治疗肿瘤的药物的用 途。第二方面，本发明提供了苯并菲啶生物碱与磷脂酸或透明质酸的新的盐。所述盐 特别用于靶向局部施用或全身施用。另一方面，本发明提供了以纳米粒形式的苯并菲啶或异喹啉生物碱与人体白蛋白 的复合物及包含所述复合物的混悬液，其可静脉或口服施用。纳米粒选择性地达到肿瘤，在 肿瘤处它们可进行细胞毒与抗血管新生瘤块降低作用。该制剂被特别用于实体肿瘤与更常 见形式的白血病的治疗。磷脂酸包含脂肪酸残基，其可以是相同的或不同的，有包含12至22个碳原子的饱和或不饱和直链。优选二棕榈酰_和二硬脂酰_磷脂酸，其大大增加了 口服和局部生物利用度。血根碱与磷脂酸的盐是特别优选的。根据本发明的盐能够以微摩尔以下浓度诱导肿瘤干细胞的细胞凋亡。血根碱与淡黄青霉酸的盐已被体外证实了在200ng/ml浓度下对黑色素瘤与结肠 干细胞的强效抑制活性。其对其他肿瘤干细胞的行为是相同的。这些生物碱可因此被视为 新一代抗肿瘤药，其能够有效地治疗人体肿瘤。对结肠、肝脏、胰与宫颈肿瘤而言，最适合的 形式是分散在适宜溶媒的与淡黄青霉酸的盐，然而对皮肤肿瘤如黑色素瘤的肿瘤，与磷脂 酸的盐可有利地直接局部施用在受肿瘤影响的区域。与白蛋白的复合物适于以比中毒剂量低得多的剂量、且非常长时期地局部注射施 用；与正常细胞相比选择性地针对肿瘤干细胞，且强效抗血管新生作用对瘤块产生了迅速 的降低作用并最终根除。最适合口服与局部施用的产品是血根碱与淡黄青霉酸的盐。所述盐已被证实在 口咽肿瘤、头颈肿瘤、黑色素瘤与宫颈肿瘤的治疗中特别有效，有效程度大于未成盐的生物 碱，且同样作用于与肿瘤相关的任何病毒。与透明质酸的盐也是有利的，其可增加生物碱的细胞摄取并使得肿瘤根除。将通过众所周知的方法，如在“雷明顿药物手册”(("Remington' s Pharmaceutical Handbook”)，Mack Publishing Co·，美国纽约)中描述的那些方法，连同 适宜的赋形剂制备所述制剂。下文列出的实施例详细阐释了本发明。实施例I-淡黄青霉酸血根碱盐的制备将3. 68g的氯化血根碱溶于IOOmL的乙醇中，并在搅拌下加入3. 6g的淡黄青霉酸 钾，将混合物反应3小时。滤除生成的氯化钾，将溶液浓缩至小体积，得到5. 6g的盐。实施例11-1，2- 二棕榈酰-sn-甘油基_3_ 二氧磷基-rac-(l-甘油)血根碱盐的 制备将3. 7g的氯化血根碱溶于50ml甲醇中，在搅拌下加入含7. 5g的1，2_ 二棕榈 酰-sn-甘油基-3- 二氧磷基-rac-(l-甘油基)1，2_ 二棕榈酰-sn-甘油基_3_ 二氧磷 基-raC-(l-甘油)钠盐的该溶液，使该混合物搅拌2小时。得到的溶液用等体积的二氯甲 烷稀释，使混合物搅拌0. 5h。滤除沉淀的氯化钠，将滤液真空下在不高于35°C的温度下浓 缩至干。得到了 IOg熔点70°C的带红色固体。实施例III-白蛋白与血根碱的纳米粒的制备在室温下将Ig血根碱溶于15ml的二噁烷中，并加至5g的人体白蛋白在300ml盐 水中的溶液中。使混合物在无菌环境下搅拌4小时。得到的混浊溶液接受超声1分钟。混 悬液的物理外观与颜色发生变化。无需加入赋形剂将溶液冷冻干燥。实施例IV按照实施例III的方法，制备血根碱溶液，溶质在无菌条件下在容器中被冻干，在 完成该过程后容器中将包含IOmg的血根碱。冻干物被用在口咽部肿瘤的局部(loco-regional)治疗。实施例V-用于头颈肿瘤治疗的1克咀嚼片
4[0035大豆磷脂30.OOmg[0036无水枸橼酸10.OOmg[0037乳糖240. OOmg[0038甘露醇550.OOmg[0039甲基纤维素40. OOmg[0040棕榈酰硬脂酸酯50. OOmg[0041浆果味香精40.OOmg[0042甘草酸铵0. 5mg[0043滑石粉10.OOmg[0044实施例VI-用于宫颈肿瘤治疗的软明胶胶囊[0045血根碱淡黄青霉酸盐10.OOmg[0046大豆磷脂50.OOmg[0047蜂蜡50.OOmg[0048甘草酸铵10.OOmg[0049植物油适量至800. OOmg[0050实施例VII-用于宫颈肿賴討台疗的软明胶胶囊[0051血根碱淡黄青霉酸盐10.OOmg[0052大豆磷脂50.OOmg[0053蜂蜡50.OOmg[0054琥珀酰-甘草酸钠10.OOmg[0055植物油适量至800. OOmg[0056实施例VIII-用于黑色素瘤局部治疗的磷脂S[0057二棕榈酰磷脂酸血根碱盐0. 40g[0058丙二醇10. OOg[0059肉豆蔻酸异丙酯5. OOg[0060十六醇5. OOg[0061吐温803. OOg[0062卡波姆0. 40g[0063对羟基苯甲酸甲酯0. IOg[0064对羟基苯甲酸丙酯0. 05g[0065纯化水适量至IOOg
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权利要求
苯并菲啶生物碱或其盐用于制备治疗肿瘤的药物的用途。
2.如权利要求1所述的用途，其中苯并菲啶生物碱选自血根碱、白屈菜红碱、白屈菜碱。
3.如权利要求2所述的用途，其中所述的生物碱是血根碱。
4.如权利要求1-3的任意一项所述的用途，其中所述的生物碱为与淡黄青霉酸或磷脂 酸成盐的形式。
5.如权利要求4所述的血根碱淡黄青霉酸盐的用途。
6.如权利要求4所述的与磷脂酸形成的血根碱盐的用途。
7.如权利要求1-3的任意一项所述的用途，其中所述的生物碱以纳米粒形式存在，所 述的纳米粒包含所述生物碱与白蛋白的复合物。
8.如权利要求1-7的任意一项所述的用途，其中肿瘤来自于多药抗药肿瘤干细胞的过度增殖。
9.如权利要求1-8的任意一项所述的用途，其中肿瘤为口咽肿瘤、头颈肿瘤、宫颈肿瘤 或黑色素瘤。
10.苯并菲啶生物碱与磷脂酸或透明质酸所成的盐。
11.如权利要求10所述的与磷脂酸所成的盐。
12.如权利要求11所述的盐，其中所述的磷脂酸为二棕榈酰-或二硬脂酰-磷脂酸。
13.如权利要求11或12所述的血根碱盐。
14.作为抗黑色素瘤药物的权利要求11、12或13的盐。
15.药物组合物，其包含作为活性成分的权利要求10-14的盐。
全文摘要
公开了苯并菲啶生物碱和其盐用于制备治疗肿瘤的药物的用途。
文档编号A61P35/00GK101951907SQ200980105648
公开日2011年1月19日 申请日期2009年2月16日 优先权日2008年2月22日
发明者A·里瓦, E·邦巴尔代利, G·丰塔纳, P·莫拉佐尼 申请人:因德纳有限公司
具有苯并菲啶结构的抗肿瘤药及包含它们的制剂本发明涉及苯并菲啶生物碱类及其盐用于制备肿瘤治疗药物的用途。本发明还涉及所述生物碱的新的盐及包含它们的组合物。
现有技术肿瘤学的首要目标是通过任何手段根除肿瘤，即使当这样做带来严重副作用，“首先不能伤害”("primum non nocere")的格言不用作肿瘤的治疗指南，而是优选换之以“首 先促进以帮助”(“primum succerere”)。肿瘤治疗常涉及到根除手术、靶向放疗(包括光动力疗法)、高剂量的化疗药物、 放射治疗和用细胞因子(IL2)和单克隆抗体的治疗。尽管有庞大、不断增加数量的可利用 的治疗方法，治愈成功率仍然不能满意，特别是在发生药物耐药性的化疗情况下。在实体肿瘤中，化疗迅速降低了瘤块，但并不完全，少数特别抗药的细胞可保持肿 瘤活跃，然后发展，常带来致命的结果。这些细胞最近被分类为肿瘤干细胞，其拥有强的增 殖潜力与适应性。所述细胞构成约占5%的瘤块，并且抵抗当前使用的所有已知的化疗药。 肿瘤干细胞的存在最先在髓性白血病中被确立(Bonnet D，Dick JE. Nature Medicine, 3, 730-737 (1997)，并相继在乳腺肿瘤与脑肿瘤中被证实(Al-Hajj M，等人，Natl Acad Sci, USA，100. 3983-3988，2003，Sing SK，等人.，432，396-401，Nature 2004)。最近，已经从黑色素瘤、结肠肿瘤和肺切片(microtomes)中分离出干细胞 (Ricci-Vitali,Nature 445，111-115 (2007) ；Fang D. , Cancer Res.，65，9328-9337 2005， Eramo,Cell Death and Differentiation,advance online publication 2007 ^11^ 30 日，Doi :10.1038/sj.cdd. 4402283)。如上文所述的这些细胞，不能通过标准治疗得到控制，并产生了肿瘤。因此明确需 要开发能够可能通过诱导细胞凋亡而抑制肿瘤干细胞的化合物。发明描述现已发现苯并菲啶生物碱类、特别是血根碱、白屈菜红碱、白屈菜碱及其与淡黄青 霉酸、磷脂酸或透明质酸的盐对多药抗药的肿瘤干细胞具有抗增殖作用。具体而言，与淡黄青霉酸的盐得到对癌细胞的强效细胞毒作用及同样强效的抗血 管形成、抗炎和镇痛作用。第一方面，本发明因此涉及苯并菲啶生物碱或其盐用于制备治疗肿瘤的药物的用 途。第二方面，本发明提供了苯并菲啶生物碱与磷脂酸或透明质酸的新的盐。所述盐 特别用于靶向局部施用或全身施用。另一方面，本发明提供了以纳米粒形式的苯并菲啶或异喹啉生物碱与人体白蛋白 的复合物及包含所述复合物的混悬液，其可静脉或口服施用。纳米粒选择性地达到肿瘤，在 肿瘤处它们可进行细胞毒与抗血管新生瘤块降低作用。该制剂被特别用于实体肿瘤与更常 见形式的白血病的治疗。磷脂酸包含脂肪酸残基，其可以是相同的或不同的，有包含12至22个碳原子的饱和或不饱和直链。优选二棕榈酰_和二硬脂酰_磷脂酸，其大大增加了 口服和局部生物利用度。血根碱与磷脂酸的盐是特别优选的。根据本发明的盐能够以微摩尔以下浓度诱导肿瘤干细胞的细胞凋亡。血根碱与淡黄青霉酸的盐已被体外证实了在200ng/ml浓度下对黑色素瘤与结肠 干细胞的强效抑制活性。其对其他肿瘤干细胞的行为是相同的。这些生物碱可因此被视为 新一代抗肿瘤药，其能够有效地治疗人体肿瘤。对结肠、肝脏、胰与宫颈肿瘤而言，最适合的 形式是分散在适宜溶媒的与淡黄青霉酸的盐，然而对皮肤肿瘤如黑色素瘤的肿瘤，与磷脂 酸的盐可有利地直接局部施用在受肿瘤影响的区域。与白蛋白的复合物适于以比中毒剂量低得多的剂量、且非常长时期地局部注射施 用；与正常细胞相比选择性地针对肿瘤干细胞，且强效抗血管新生作用对瘤块产生了迅速 的降低作用并最终根除。最适合口服与局部施用的产品是血根碱与淡黄青霉酸的盐。所述盐已被证实在 口咽肿瘤、头颈肿瘤、黑色素瘤与宫颈肿瘤的治疗中特别有效，有效程度大于未成盐的生物 碱，且同样作用于与肿瘤相关的任何病毒。与透明质酸的盐也是有利的，其可增加生物碱的细胞摄取并使得肿瘤根除。将通过众所周知的方法，如在“雷明顿药物手册”(("Remington' s Pharmaceutical Handbook”)，Mack Publishing Co·，美国纽约)中描述的那些方法，连同 适宜的赋形剂制备所述制剂。下文列出的实施例详细阐释了本发明。实施例I-淡黄青霉酸血根碱盐的制备将3. 68g的氯化血根碱溶于IOOmL的乙醇中，并在搅拌下加入3. 6g的淡黄青霉酸 钾，将混合物反应3小时。滤除生成的氯化钾，将溶液浓缩至小体积，得到5. 6g的盐。实施例11-1，2- 二棕榈酰-sn-甘油基_3_ 二氧磷基-rac-(l-甘油)血根碱盐的 制备将3. 7g的氯化血根碱溶于50ml甲醇中，在搅拌下加入含7. 5g的1，2_ 二棕榈 酰-sn-甘油基-3- 二氧磷基-rac-(l-甘油基)1，2_ 二棕榈酰-sn-甘油基_3_ 二氧磷 基-raC-(l-甘油)钠盐的该溶液，使该混合物搅拌2小时。得到的溶液用等体积的二氯甲 烷稀释，使混合物搅拌0. 5h。滤除沉淀的氯化钠，将滤液真空下在不高于35°C的温度下浓 缩至干。得到了 IOg熔点70°C的带红色固体。实施例III-白蛋白与血根碱的纳米粒的制备在室温下将Ig血根碱溶于15ml的二噁烷中，并加至5g的人体白蛋白在300ml盐 水中的溶液中。使混合物在无菌环境下搅拌4小时。得到的混浊溶液接受超声1分钟。混 悬液的物理外观与颜色发生变化。无需加入赋形剂将溶液冷冻干燥。实施例IV按照实施例III的方法，制备血根碱溶液，溶质在无菌条件下在容器中被冻干，在 完成该过程后容器中将包含IOmg的血根碱。冻干物被用在口咽部肿瘤的局部(loco-regional)治疗。实施例V-用于头颈肿瘤治疗的1克咀嚼片
4[0035大豆磷脂30.OOmg[0036无水枸橼酸10.OOmg[0037乳糖240. OOmg[0038甘露醇550.OOmg[0039甲基纤维素40. OOmg[0040棕榈酰硬脂酸酯50. OOmg[0041浆果味香精40.OOmg[0042甘草酸铵0. 5mg[0043滑石粉10.OOmg[0044实施例VI-用于宫颈肿瘤治疗的软明胶胶囊[0045血根碱淡黄青霉酸盐10.OOmg[0046大豆磷脂50.OOmg[0047蜂蜡50.OOmg[0048甘草酸铵10.OOmg[0049植物油适量至800. OOmg[0050实施例VII-用于宫颈肿賴討台疗的软明胶胶囊[0051血根碱淡黄青霉酸盐10.OOmg[0052大豆磷脂50.OOmg[0053蜂蜡50.OOmg[0054琥珀酰-甘草酸钠10.OOmg[0055植物油适量至800. OOmg[0056实施例VIII-用于黑色素瘤局部治疗的磷脂S[0057二棕榈酰磷脂酸血根碱盐0. 40g[0058丙二醇10. OOg[0059肉豆蔻酸异丙酯5. OOg[0060十六醇5. OOg[0061吐温803. OOg[0062卡波姆0. 40g[0063对羟基苯甲酸甲酯0. IOg[0064对羟基苯甲酸丙酯0. 05g[0065纯化水适量至IOOg
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权利要求
苯并菲啶生物碱或其盐用于制备治疗肿瘤的药物的用途。
2.如权利要求1所述的用途，其中苯并菲啶生物碱选自血根碱、白屈菜红碱、白屈菜碱。
3.如权利要求2所述的用途，其中所述的生物碱是血根碱。
4.如权利要求1-3的任意一项所述的用途，其中所述的生物碱为与淡黄青霉酸或磷脂 酸成盐的形式。
5.如权利要求4所述的血根碱淡黄青霉酸盐的用途。
6.如权利要求4所述的与磷脂酸形成的血根碱盐的用途。
7.如权利要求1-3的任意一项所述的用途，其中所述的生物碱以纳米粒形式存在，所 述的纳米粒包含所述生物碱与白蛋白的复合物。
8.如权利要求1-7的任意一项所述的用途，其中肿瘤来自于多药抗药肿瘤干细胞的过度增殖。
9.如权利要求1-8的任意一项所述的用途，其中肿瘤为口咽肿瘤、头颈肿瘤、宫颈肿瘤 或黑色素瘤。
10.苯并菲啶生物碱与磷脂酸或透明质酸所成的盐。
11.如权利要求10所述的与磷脂酸所成的盐。
12.如权利要求11所述的盐，其中所述的磷脂酸为二棕榈酰-或二硬脂酰-磷脂酸。
13.如权利要求11或12所述的血根碱盐。
14.作为抗黑色素瘤药物的权利要求11、12或13的盐。
15.药物组合物，其包含作为活性成分的权利要求10-14的盐。
全文摘要
公开了苯并菲啶生物碱和其盐用于制备治疗肿瘤的药物的用途。
文档编号A61P35/00GK101951907SQ200980105648
公开日2011年1月19日 申请日期2009年2月16日 优先权日2008年2月22日
发明者A·里瓦, E·邦巴尔代利, G·丰塔纳, P·莫拉佐尼 申请人:因德纳有限公司
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