增加肽、肽模拟物和其他胃肠道转运蛋白底物吸收的方法
专利名称：增加肽、肽模拟物和其他胃肠道转运蛋白底物吸收的方法
增加肽、肽模拟物和其他胃肠道转运蛋白底物吸收的方法相关申请的交叉参考本申请要求2008年3月27日提交的美国临时申请序列号61/072069的优先权， 其公开的内容引入本文作为参考。发明背景发明领域本发明一般性地涉及增加动物吸收化合物的方法，尤其是使用诸如5-甲氧 基-N-乙酰基色胺的激素来增加肽、肽模拟物以及其他胃肠道转运蛋白底物在动物中的吸 收。相关技术描述肽转运蛋白是介导二肽和三肽和多种肽模拟物以及其他化合物的细胞吸收的膜 结合蛋白质。它们发现于细菌、酵母、植物、无脊椎动物和脊椎动物中。在脊椎动物中，两种 转运蛋白，肽转运蛋白1和2，分别称为P印Tl和P印T2，主要在小肠(P印Tl)、肾(P印Tl和 PepT2)和肺(P印1 的刷状缘膜中表达。P印T转运蛋白是质子偶联的转运蛋白，其能转运 多种二肽和三肽以及多种诸如内酰胺抗生素、选择的血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂 和肽酶抑制剂的治疗药物。据认为，底物流与沿着膜电位的质子电化学梯度的质子运动偶 联，作为迁移的主要驱动力。哺乳动物寡肽转运蛋白是膜转运蛋白的PTR2家族的一部分。其特征为在所有已 知的家族成员中保守的两个标记性基序。第一个保守基序是在第二推定跨膜结构域末端开 始的区域，包括随后的第一细胞质环和第三跨膜结构域。第二个保守基序对应于第五跨膜 区域的核心区域。除了哺乳动物P印Tl和P印Τ2转运蛋白外，PTR2家族还包括酵母肽转运 蛋白PTR2、来自乳酸乳球菌的DtpT以及多种具有未知功能的“孤儿”转运蛋白。大部分孤 儿转运蛋白发现于原核生物例如大肠杆菌中。在哺乳动物中，P印Tl在蛋白质(包括小寡肽)的吸收中具有重要作用。P印Tl主 要在肠上皮细胞的刷状缘膜中表达，此处其介导诸如消化物中的寡肽从消化腔到细胞的吸 收。此外，由于相对较宽的底物特异性，PepTl能接受包括内酰胺抗生素在内的多种药 物活性化合物，并作为这些化合物的吸收途径。功能研究显示，除利用H+电化学梯度作为 驱动力外，P印Tl具有ρΗ依赖性，已报道是高速的低亲和转运蛋白。据称P印Tl还是可诱 导的转运蛋白。诱导物包括底物、底物类似物和各种激素。生理应激，包括肠内疾病、机体应激、手术、损伤和/或心理应激能负面影响肠道 健康和功能，直接或间接影响氨基酸吸收。例如，已显示1型糖尿病的大鼠(即天然的低或 无胰岛素生成)与健康大鼠相比PepTl活性下降。已尝试改善氨基酸吸收。例如预消化的食物蛋白和向食物例如病危护理食物中添 加水解的食物蛋白。然而该方法主要增加了可吸收的氨基酸或肽库，而未必能增强吸收过 程。某些特定的小肽能明显刺激肽的吸收。美国专利号6，803，186中披露了饲喂特定肽、尤 其是甘氨酰肌氨酸或β-丙氨酰-L-组氨酸(肌肽)增加犬细胞系中的肽吸收的方法。然而在体内，与单独的标准饮食相比，这些肽在刺激肽吸收中的应用并不成功。已显示单独的 二肽，即丙氨酰-谷氨酸不足以刺激肽吸收活性；然而当与生长激素(GH)结合时，当用过氧 化氢使人细胞系产生氧化应激时，肽吸收得以维持。在肽和GH存在下，过氧化物诱导的氧 化应激减少了肽吸收。某些科学文献表明特定的生物活性肽或激素能通过直接刺激PepTl 的活性来刺激小肽吸收。胰岛素、表皮生长因子、瘦素、干扰素Y和甲状腺激素均显示某些 刺激效应。已报道了关于生长激素的任何刺激效应的争议数据。
除甲状腺激素外，刺激性肽激素是物种特异性的蛋白。因此，这些激素的实际应用 或使用需要例如针对要使用的各物种通过化学或重组基因技术合成。此外，这些激素表现 为通过皮下注射的方式施用，这在实际应用中是不合适的。为了各种目的，进行了其他尝试以特异性调节PepTl转运活性。例如美国专利申 请US20030170748A1披露了编码犬P印Tl的核酸。该公开物还评价了亮氨酸和色氨酸的某 些肽结合形式的吸收，以及各种小肽抑制模型底物甘氨酰肌氨酸(GlySar)转运的能力。提 供了确定具体的肽是否对动物具有有益的营养性质的方法，以及通过使细胞接触P印Tl底 物来刺激细胞内PepTl活性的方法。类似的，美国专利申请US20060210569A1披露了抑制 P印Tl，从而抑制细胞生长的方法。因此，仍然需要增加动物吸收或摄取一种或多种特定或非特定的肽、肽模拟物和 其他胃肠道转运蛋白底物的方法，尤其是通过转运蛋白例如P印Tl转运蛋白的方法。发明概述因此，本发明的一个目的是提供增强、改善或增加肽、肽模拟物或其他胃肠道转运 蛋白底物在动物中吸收、转运、摄取和/或同化的方法。本发明的另一目的是提供支持和/或改善胃肠道健康、促进动物的健康或保健、 对患有吸收不良症的动物提供改善的氨基酸营养、递送作为胃肠道转运蛋白底物的药物或 前药，以及维持老年动物或紧张体力活动，例如锻炼的动物中的肌肉量的有益方法。这些和其他目的中的一个或多个通过使用新的组合物和用于增强动物中肽、肽模 拟物或其他胃肠道转运蛋白底物转运的方法来实现。所述方法包括施用有效增强肽、肽模 拟物或其他胃肠道转运蛋白底物的转运的量的一种或多种褪黑激素，其通过动物中的肠道 转运蛋白、例如PepTl进行。该方法改善了这些化合物的吸收，并增加了这些化合物可被动 物利用以达到既定目的(例如构建蛋白或抑制感染)的量。当食物组合物与足以增强所述 组合物中一种或多种二肽或三肽或其天然消化产物吸收的量的褪黑激素一起施用至动物 时，所述方法还增强了食物组合物在体内的营养价值。所述组合物包括褪黑激素和一种或 多种肽、肽模拟物或其他胃肠道转运蛋白底物。本发明的其他目的、特征和优点对于本领域技术人员来说也是显而易见的。发明详述定义术语“褪黑激素”表示5-甲氧基-N-乙酰基色胺及其基本上与5-甲氧基-N-乙 酰基色胺具有同样生物学活性的衍生物和类似物，以及其体内前体。5-甲氧基-N-乙酰基 色胺是其量在每日周期内变化的化合物。该化合物由松果体、视网膜、免疫细胞和胃肠道产 生。其经血清素的合成从氨基酸色氨酸天然合成。松果体从视网膜接收关于光和暗的日夜 信息，从而合成褪黑激素。该化合物也可通过各种植物例如大米、细菌、原生动物、藻类和其他生物体合成。该术语还表示具有与5-甲氧基-N-乙酰基色胺对胃肠道转运蛋白如P印Tl 和PepT2基本上相同的生物学活性的任何其他激素。术语“肽模拟物”表示模拟天然寡肽一个或多个结构方面或生物学活性，但包含一 个或多个非肽或非天然化学结构或键的化合物。本文所用肽模拟物具有与动物中寡肽转运 有关的一种或多种生物学性质。在一个优选的实施方案中，本文所用肽模拟物由一种或多 种寡肽转运蛋白识别，例如作为底物、抑制剂、激动剂或拮抗剂。在另一个实施方案中，肽模 拟物是一种或多种寡肽转运蛋白的诱导物，即，肽模拟物诱导所述寡肽转运蛋白的量或活 性，而不直接识别为该蛋白的底物或激动剂。肽模拟物常用于模拟肽的生物学作用，因此它 们可以是设计为模拟一种或多种肽的小蛋白样链。肽模拟物通常基于现有的相关肽进行合 成，进行一个或多个修饰以改变分子的结构或性质。修饰可改变肽分子的稳定性、半衰期、 生物活性、吸收或副作用(例如毒性、溶解性、疏水性、侧链电荷或柔性)。肽模拟物可用作 合理开发的或基于对已知或推定生物学活性的现有肽的修饰开发的药物或药物类化合物。 本文所用肽模拟物优选包含一个或多个非天然存在的修饰，即修饰或改变的肽骨架结构、 掺入非天然的氨基酸等。在某些实施方案中，本文所用肽模拟物是药物。已知在药物递送领域中，某些药 物或某类药物可通过蛋白或肽转运分子递送。例如某些抗生素、血压调节药物(例如抗高 血压药物)、抗病毒药和其他药物是其底物或可在体内通过一种或多种PTR2家族肽转运分 子进行转运。例如肽模拟物抗生素例如内酰胺类抗生素在体内可通过寡肽转运蛋白 转运。内酰胺类抗生素是一类范围很广的抗生素，在其分子结构中含有内酰胺环。 这类抗生素包括青霉素类、头孢菌素类、单酰胺菌素类、碳青霉烯类，包括其衍生物。应当注 意，本文中关于化合物诸如“肽模拟物”的讨论包括所有公认的形式和所述化合物的商用制 剂，例如盐、酸、碱，尤其是所述化合物可药用的盐。其他包含内酰胺环结构的肽模拟物 化合物包括内酰胺酶抑制剂，其可能不是天然的抗菌剂或抗生素，但可抑制微生物产 生的β-内酰胺酶以防止降解环境中的含β-内酰胺的化合物。β-内酰胺抗生素是广谱 的和最广泛使用的抗生素。头孢氨苄是本文举例说明的头孢菌素抗生素的一个例子。本文所用肽模拟物还包括通过多种药物或前药的例如氨基酸酯化进行的修饰。这 些修饰的药物，例如氨基酸酯在本文中是有用的，因为它们能使相关的药物或前药作为肠 内寡肽转运蛋白的底物或诱导物被转运。该方法特别用于当药物难以吸收时。例如抗高血 压剂前药米多君在体内通过切割甘氨酰残基转化成其活性形式DMAE。米多君而非DMAE是 PepTl转运蛋白的底物。其他对DMAE的氨基酸修饰也能被P印Tl转运，已知能作为肠内寡 肽转运蛋白底物的其他药物包括伐昔洛韦和缬更昔洛韦，其分别是抗病毒剂阿昔洛韦和更 昔洛韦的氨基酸酯前药。本领域技术人员应当了解，可通过本领域公知的方法确定具体的化合物是否是前 文所定义的肽模拟物。例如，肽模拟物化合物可以是对寡肽转运蛋白转运一种或多种已知 底物的有效抑制剂，例如竞争性抑制剂。PepTl的一种所述底物是模式底物甘氨酰肌氨酸。 肽模拟物的转运、结合或吸收也可直接通过体外模型系统、膜、囊泡、细胞或体内动物系统 评价。其他功能性分析可基于某些优选的肠内寡肽转运蛋白是质子依赖性的转运蛋白这一 事实进行。因此，肽模拟物底物的分析可基于例如质子移动、肠内寡肽转运蛋白所在之处膜 的去极化进行。
本文所用关于吸收、转运、摄取或同化肽、肽模拟物、其他胃肠道转运蛋白底物或 其他化合物的术语“增强”表示具体的组合物或方法对于所述吸收、转运、摄取或同化具有 某些可测量的效应，例如对吸收、转运、摄取或同化的时间、过程、速率、量、程度等的效应。 化合物或方法也可通过任何若干途径“增强”转运、摄取或吸收，包括通过增加与吸收、转 运、摄取或同化特定氨基酸、肽或相关化合物有关的转运蛋白的活性、量、效率、结合或其他 动力学参数。化合物或方法也可通过增加特定底物进入转运分子、离开已转运的转运分子 的速率，或通过增加特定底物在特定的时间内或到特定的测定时间点为止转运的程度来增 强吸收、转运、摄取或同化。由于使用组合物或方法后，任何可测量的直接或间接的吸收、转 运、摄取或同化的增加“增强” 了造成损伤的体力活动的恢复。关于吸收、转运、摄取或同化 的任何效应方面，术语“改善”是“增强”的同义词。术语“有效量”表示一定量的化合物、材料、组合物、药物或其他物质，例如褪黑激 素，其对于获得具体的生物学结果是有效的。所述结果包括但不限于一种或多种下列结果 增加具体的肽、肽模拟物或相关化合物从动物的胃肠腔内吸收到一种或多种位于胃肠道内 层的细胞，例如刷状缘细胞内的速率或程度。因此，有效量是在特定的时间点或在特定的时 期内，相对于未接受有效量化合物的对照动物而言足以增加转运蛋白底物吸收、转运、摄取 或同化等的速率或程度的量。有效量的其他可能结果包括增加一种或多种细胞或细胞类型 中寡肽转运蛋白的量。这样的增加可通过增加转运蛋白的半衰期进行，例如通过增加转运 蛋白的产生速率或减少降解或代谢回转速率进行。增加吸收、转运等也可通过诱导转运蛋 白生成进行，例如通过增加细胞内转运蛋白的转录和翻译速率，或通过增加细胞内编码转 运蛋白的mRNA的半衰期进行。增加也可通过前述的任意组合，以及本领域技术人员已知的 增加生物活性蛋白量或活性的其他方法进行。在本文的某些实施方案中，在施用要吸收或 转运的底物或化合物之前施用或消耗有效量的用于增强或改善底物例如肽、肽模拟物或有 关化合物吸收的化合物。在其他实施方案中，可在施用要吸收或转运的底物或化合物的同 时施用或消耗有效的量，其单独或作为同一食物组合物或制剂或药物的一部分施用。在另 一些实施方案中，可以在消耗大部分或全部要吸收或转运的底物或化合物之后特定的时间 窗口内施用或消耗有效的量。也可使用上述的组合，以便在消耗或施用要吸收或转运的底 物或化合物之前、期间或之后施用或消耗有效的量。总有效量可以以超过一批或一剂来施 用或消耗，有效量可在消耗要吸收或转运的底物或化合物之前、期间或之后的一个以上时 间点施用或消耗。由于多种原因，优选在消耗或施用要吸收或转运的底物或化合物前后约 60-120分钟内施用或消耗所述有效量。优选的，口服时在消耗或施用要吸收或转运的底物 或化合物前1、5、10、15、20、30、40、45、50或55分钟内或低于约1小时的任何中间值内施用 所述有效量。在其他实施方案中，在消耗或施用要吸收或转运的底物或化合物前60、70、80、 90分钟或更少时间内施用或消耗所述有效量。在另一些实施方案中，在消耗或施用要吸收 或转运的底物或化合物前100、110或甚至2小时内消耗所述有效量。在消耗或施用要吸收 或转运的底物或化合物前后约2小时的时间窗以外施用可能会产生某些影响，然而，本领 域技术人员应当理解，可能的益处由于超出该窗口的施用时间的延长而降低。术语“抗生素”表示任何能被肽转运蛋白转运的抗生素。术语“动物”表示任何能从一种或多种本发明的组合物和方法中受益的动物，尤其 是能从增强、改善或增加下列物质的体内吸收、转运、摄取、同化等的方法和组合物中受益的动物二肽、三肽和其他寡肽；肽模拟物，包括药物或前药的氨基酸酯；肠内寡肽转运蛋 白的底物，尤其是位于动物胃肠道中并且其活性被褪黑激素或其他肽类或激素增强、刺激 等的寡肽转运蛋白。因此，本发明涉及任何动物，优选哺乳动物。除非另外说明或由上下文 清晰判定，否则这里的术语“动物”或“哺乳动物”包括人类。术语“动物”以广义使用，表示 人或其他动物，包括鸟类、牛、犬、马、猫、山羊、狼、鼠、羊和猪类。本文所用“伴侣动物”表示 任何家养的动物，包括但不限于猫、狗、兔、豚鼠、雪貂、仓鼠、小鼠、沙鼠、马、牛、山羊、绵羊、 驴、猪等。可以优选特别排除或由上下文清楚地排除了人的特定实施方案。在某些实施方 案中，优选伴侣动物，例如狗和猫。术语“老年”表示动物已到达其预计寿命的约50%，即此类、种、属的动物的预计寿 命的50%。在一个优选的实施方案中，老年动物年龄为根据其类、种、属等预计或计算的寿 命的至少 60%、66. 6%、70%、75%或 80%。术语“食物”或“食物组合物”表示用于由包括人在内的动物摄取的产品或组合物， 其向动物提供营养。术语“食物”包括任何人或其他动物的食物、饲料、小吃、食物补充剂、 宴食、膳食替代品或代餐。“食物”包括任何形式的所述产品，固体、液体、凝胶或其混合物或 组合。“动物食物”包括用于任何家养或野生物种的食物或饲料。在优选的实施方案中，动 物食物表示全营养食物组合物，例如压片、挤出或干燥的食物。所述动物食物的实例包括挤 出的宠物食物，例如狗或猫的食物。术语“施用”除施用至另一动物外还包括自我施用。例如看护人可将食物、组合物、 药物等施用给伴侣动物。看护人也可摄取或消耗食物、组合物、药物等，由此自我施用所述 产品、组合物或药物。本文中施用考虑任何可接受的途径。许多实施方案中优选口服施用。 要吸收或转运的底物或化合物还优选通过口服施用，例如作为食物、饮料、食品添加物被消 耗。可以定期或长期施用。在实施本文提供的方法中涉及施用有效量时，或涉及施用本文提供的组合物时， 术语“定期”表示在消耗要吸收或转运的底物或化合物之前、同时或之后的施用可周期性重 复进行。因此，可至少每日一次，或甚至两次、三次或更多次施用，例如在每次饲喂时施用。 定期也可以较低频率地施用有效量，例如每周2或3次，或者甚至每周一次。优选地，有效 量例如褪黑激素的施用频率至少与要吸收或转运的底物或化合物的消耗一致。在某些实施 方案中优选更频繁的给药或消耗，例如每周2或3次。一个实施方案包括至少每天一次施 用有效量，即使要吸收或转运的底物或化合物的消耗频率低于每天一次或者仅仅是偶然的 消耗也是如此，如前文所定义。术语“长期施用”表示与要吸收或转运的底物或化合物的重复消耗相伴的重复施 用或消耗的时期超过一个月。某些实施方案优选超过2、3或4个月的时期，例如对于需要 最佳的蛋白质/氨基酸营养的某些动物。例如老年动物或必须维持或建立肌肉重量，或抵 抗减少或降解肌肉蛋白的分解代谢的工作动物。同样优选更长的时期，包括超过5、6、7、8、9 或10个月，尤其是对于可能从延长或长期施用中获益的动物群体来说，包括老年动物以及 具有营养性病症或胃肠道疾病的动物，例如吸收不良症。超过11个月或1年，以及超过1、 2、3或更多年的更长时期也是合适的。术语“ 口服施用”表示动物摄取，或人被指导对动物饲喂一种或多种本文所述组合 物。其中人被指导以喂养所述组合物，该指导可以指示和/或通知所述组合物的使用可以和/或将提供参考的益处，例如增强吸收、转运、摄取或同化。在某些实施方案中，净结果是 通过改善的、增加的或优化的氨基酸同化而产生在动物中改善的蛋白质营养。在其他实施 方案中，预期的益处是对受影响的动物或动物体内组织或器官的改善的药物分布。该指导 可以是口头指导(例如来自医师、兽医或其他保健专业人员，或收音机或电视媒体(例如广 告)的口头指示)，或书面指导(例如来自医师、兽医或其他保健专业人员的书面指导(例 如处方)，或来自销售专业人员或组织(例如通过销售宣传材料、小册子或其他指导性的读 物)，书面媒体(例如互联网、电子邮件、网站或其他计算机相关的媒体)，和/或伴随组合 物的包装(例如在装有所述组合物的容器上的标签)，或其组合(例如标签或包装说明书， 其指示网站以获取更多信息)。当涉及动物时，术语“体力活动”包括任何减少或降低肝脏和/或肌肉糖原的活 动。“紧张的体力活动”是当从事长时间或高频率的活动或没有充分的休息时，趋向于基本 上或完全耗尽了肝脏和/或肌肉糖原的体力活动。本领域技术人员将理解，任何部分地、 基本上或完全耗尽糖原的活动的趋势是活动持续时间和强度的函数。需要的时间(时期) 长度依赖于强度而变化，其可以是体力活动类型、阻力量或所需要的肌肉工作程度(不论 该活动需要使用大或小肌肉群或全身肌肉)、活动进行的速率等的函数。显而易见，当从事 足够时间或足够强度时，大多数体力活动都是紧张的。体力活动的实例包括各种类型的工 作、游戏、锻炼、条件反射、身体技巧开发或改良、机能恢复、步行、跑步(或其他方式或自身 移动加速)、竞争性或非竞争性运动以及有关活动。许多生物学功能或过程也是身体需求 的，因此本文所述体力活动包括分娩和对生理或心理应激源的“逃避”反应(即应激反应)、 受伤和/或创伤愈合、感染等，以及多种其他生物学活动。本领域技术人员将理解，由于遗 传差别、个体适应、条件反射等因素，一种体力活动对于任何两只动物来说都不是同等紧张 的。因此，在确定特定的活动是否紧张，或恢复是否受到特定组合物或方法的影响时，对照 研究和客观测量通常优于(在合适时)无对照的证据或自感用力度的测定。术语“锻炼”表示动物从事的或由于某特定目的，例如全身健康、体型勻称、体重控 制、改善健康或体型勻称的特定方面，加强、改善身体技巧或技巧组合，改善功能，伤口复原 等而从事的一类体力活动。锻炼可以定期进行，例如每天一次、每周一次或每周两次。锻炼 频率低于每周一次被认为是“偶然”的锻炼。本文还涉及并包括其他模式的锻炼。术语“与...联合”表示将增强剂，例如用于增强或改善化合物通过肠内转运蛋白 的吸收、转运、摄取或同化的组合物，或者本文所述具有所述效应的食物组合物、药物或其 他化合物或组合物，(1)在食物组合物中一起或( 单独地以相同或不同的频率，使用相同 或不同的施用途径，在大约相同的时间或定时施用至动物。“定时”表示按照特定试剂可接 受的给药日程施用所述试剂，且食物按照对特定动物通常合适的方式进行饲喂。“大约相同 的时间”通常表示用于增强吸收或转运的组合物在与施用或消耗要吸收或转运的底物或化 合物同时或约2小时内施用。“与...联合”尤其包括这样的施用方案，其中如前所述增强 或改善吸收、转运、摄取或同化的增强剂、组合物、食物等在预定的、处方建议的或期望的时 期施用，并且该施用在施用或消耗要吸收或转运的底物或化合物之前、期间或之后确定的 时间窗口内进行，包括定期和长期施用。所述时间窗口优选在要吸收或转运的底物或化合 物的施用或消耗开始前约60-120分钟到完成后约60-120分钟之间。术语“单一包装”表示药盒的成分位于物理相关的一个或多个容器中，被认为是生产、分配、销售或使用的单位。容器包括但不限于袋、盒或纸箱、瓶、任何类型或设计或材料 的包装、大包装、小包装、所附组件(例如钉上、粘附的等)或任何前述组合。例如，单一包 装药盒可提供物理相关的单独组分和/或食物组分的容器，从而认为它们是生产、分配、销 售或使用的单位。单一包装可包含褪黑激素、一种或多种肽或肽模拟物等的容器，其是物理 相关的，从而被认为是生产、分配、销售或使用的单位。术语“虚拟包装”表示药盒的成分伴随一种或多种指导使用者如何获得其他成分 的物理或虚拟的药盒成分的说明书，例如含有一种成分的袋或其他容器以及指导使用者进 入某一网站、接触记录的信息或回传服务、浏览视频信息、或联系指导人员以获得例如如何 使用药盒的说明书，或关于药盒一种或多种成分的安全性或技术信息。可作为虚拟药盒 一部分提供的信息的实例包括使用说明；安全性信息例如物质安全性数据表；毒性控制信 息；可能不良反应的信息；临床研究结果；饮食信息例如食物组分或热组分；体内氨基酸、 肽和/或蛋白质营养、吸收、转运或同化的一般信息；影响体内氨基酸、肽和/或蛋白质营 养、吸收、转运或同化的疾病或病症，包括吸收不良症；治疗肌肉组织损失或保持肌肉重量 的一般信息，包括特定的群体例如工作动物、从事体力锻炼或活动的动物，或老年动物；涉 及氨基酸和蛋白质营养、吸收、转运或同化的自助；用于照顾具有变化或改变的氨基酸和/ 或蛋白质营养需求的动物的看护者信息，提供最佳氨基酸、肽和/或蛋白质营养的要求；增 强或改善体内的蛋白质、肽或氨基酸营养、吸收、转运或同化的药物或肽模拟物化合物的应 用、益处、潜在的副作用或禁忌症；以及在体内通过胃肠道吸收的或通过肠内肽转运蛋白转 运递送的药物或肽模拟物化合物的应用、益处、潜在的副作用或禁忌症。术语“mg/kg”表示毫克每公斤动物体重。除非特别说明，否则本文中表述的所有百分比是基于干物质的组合物重量。本领 域技术人员将理解，术语“基于干物质”表示在除去组合物中任何游离水分后测量或确定成 分的浓度或百分比。在本文中，范围使用速记法，以避免必须详尽地列出和描述该范围中的每一值。该 范围内的任何合适的值均可酌情选择作为范围上限、下限或末端。术语“约”表示给定的值加减10%。因此，“约”使用速记法表示距离所述精确值 的小偏差依然落在本发明的范围内。如本文和所附的权利要求中所用，除非上下文清楚地说明，否则单数形式的词包 括复数，反之亦然。因此，参考语“一种”、“一个”、“该”通常包括复数形式的相应术语。例 如，关于“一条小狗”、“一种方法”或“一种食物”包括复数形式的“小狗”、“方法”或“食物”。 本文中，例如“一种抗氧化剂”包括复数形式的所述抗氧化剂，而“片”包括单独的一片。类 似的，词语“包含”应理解为包含有而非排他性的。同样，术语“包括”和“或”应理解为包括 在内的，除非该组成根据上下文清楚地排除在外。本文所用“例子”或“例如”，尤其是在术 语列表后使用时，仅仅是示范性和说明性的，不应理解为排他性和综合性的。本文公开的方法和组合物以及其他实例并不限于本文所述的具体方法、方案和试 剂，因为它们能以本领域技术人员明白的多种途径变化。此外，本文中使用的术语仅用于描 述特定的实施方案，不意味着限制所公开和要求保护的范围。除非另外定义，所有的技术和科学术语、本领域术语以及本文所用缩写具有本发 明领域或该术语应用领域的技术人员通常所理解的含义。尽管在实施本发明过程中可使用任何类似于或等价于本文所公开的那些组合物、方法、生产环节或其他方式或材料，但优选 的是本文描述的某些组合物、方法、生产环节或其他方式或材料。本文中所有引用或参考的专利、专利申请、出版物、技术和/或学术文章，以及其 他参考文献均整体引入本文作为参考，其程度为适用法律所允许的范围。那些参考文献的 讨论仅意图概述其断言性结论。任何所述专利、专利申请、出版物或参考文献或其任何部分 均未承认是相关材料或现有技术。特别保留质疑所述专利、专利申请、出版物和其他参考文 献的任何断言作为相关材料或现有技术的精确性和适当性的权利。本说明书中未全文引用 的完整引文在说明书末尾列出。本发明本发明提供了可用于增强、改善或增加肽、肽模拟物或其他胃肠道转运蛋白底物 的吸收、转运、摄取和/或同化的组合物和方法，所述转运蛋白例如PTR2家族的寡肽转运蛋 白，如P印Tl。所述组合物和方法在支持和/或改善胃肠道健康、促进动物健康或良好状态、 向吸收不良症动物提供改善的氨基酸营养、递送作为胃肠道转运蛋白底物或经修饰成为所 述转运蛋白底物的药物或前药、以及改善或维持例如老年动物或从事紧张体力活动例如锻 炼的动物中的肌肉重量中具有有益的应用。所述方法和组合物同样可用于任何最佳蛋白质 和/或氨基酸营养或同化促成动物整体健康的情况。一方面，本发明提供了增强肽、肽模拟物或其他胃肠道转运蛋白底物在动物中转 运的方法。所述方法包括施用有效增加通过动物肠内转运蛋白进行的肽转运的量的激素。 在一个优选的实施方案中，所述激素是非肽激素，优选褪黑激素。该激素可使用任何途径施 用，优选口服施用。在一个实施方案中，褪黑激素被制成或加入设计用于动物消耗的食物组 合物中。所述食物组合物可在任何时间饲喂给动物，包括动物正常睡觉时间前。在一个实 施方案中，有效量的褪黑激素足以诱导动物的睡眠或睡意。在另一个实施方案中，褪黑激素 的有效量是不诱导动物睡眠或睡意的量。在不同的实施方案中，食物组合物与药物、前药或 药剂联合施用。药物、前药或药剂的吸收被食物组合物中的褪黑激素或其他激素增强。本发明基于以下令人惊讶的发现褪黑激素能增强、改善或增加肽、肽模拟物和其 他胃肠道转运蛋白底物在动物中的吸收、转运、摄取和/或同化。褪黑激素通过肠内寡肽转 运蛋白增强或增加所述底物的吸收、转运、摄取或同化。这些底物包括但不限于特定药物、 前药和药剂，例如作为动物肠内寡肽转运蛋白底物的抗生素和其他药物或前药。在某些实施方案中，肠内转运蛋白是膜转运蛋白PTR2家族成员。胃肠道寡肽转运 蛋白是本领域公知的。目前优选的是肽转运蛋白1 (PepTl)。褪黑激素可以以任何能有效增强肽、肽模拟物和其他胃肠道转运蛋白在动物中 转运的量施用。在一个实施方案中，施用给动物的褪黑激素量为至少约0. lmg/kg，优选约 0.5mg/kg，最优选lmg/kg。在某些实施方案中，褪黑激素的量可以是2、3、4或5mg/kg。在 其他实施方案中，褪黑激素的量可高达6、7、8、9或甚至10mg/kg或以上。通常，褪黑激素以 约0. 5mg/kg至约50mg/kg的量施用给动物，优选约lmg/kg至约25mg/kg。当在食物组合物 中施用时，可以在动物正常睡觉时间前1-3小时施用褪黑激素。在该实施方案中，褪黑激素 天然诱导睡眠或睡意的能力可通过改善休息、改善营养和改善药剂例如抗生素的吸收/递 送来帮助患病或应激状态的动物恢复更健康的状态。即使在施用胃肠道转运蛋白底物之前口服施用褪黑激素也能增加动物中的底物转运和吸收速率以及总的底物吸收量。此外，某些情况下可在不导致动物困倦或睡眠的情 况下达到该效应，尽管这是褪黑激素公知的功能。因此，在一个实施方案中，褪黑激素的量 不诱导动物睡眠或困倦。本领域技术人员应当了解，当食物组合物作为动物睡醒后的第一 餐，或在动物清醒期间当中服用以不中断或打扰动物的昼夜循环时，所述实施方案更为有 效。对这些实施方案来说，施用的褪黑激素量低于约:3mg/kg，优选低于约lmg/kg。在一个实施方案中，增强的肠内转运通过增加胃肠道转运蛋白的活性来实现。本 领域技术人员将了解，转运蛋白的活性可包括若干方面，其共同限定了底物从肠腔到腔内 侧细胞的转运。因此，肽转运速率、转运蛋白对一种或多种肽的亲和性、或转运蛋白的效率、 或所转运底物的总水平或量中的任意一种或多种在本文中均认为是转运蛋白活性的方面。在一个实施方案中，褪黑激素与一种或多种肽、肽模拟物或其他胃肠道转运蛋白 底物联合施用。在某些实施方案中，所述方法增强了底物的吸收，而在其他情况下肽本身可 以是另一种吸收增强剂，例如刺激通过肠内转运蛋白转运的肽。当所述肽、肽模拟物或底物提供营养或药剂时，所述方法是非常有效的。在某些情 况下，所述肽模拟物是药剂，例如抗生素或其他药物。当昂贵或救命的药物由于难以吸收而 无法安全地进入患者体内时，这些方法尤其有效。当所述肽、肽模拟物或底物是营养物时，该方法对吸收不良症动物尤其有效。营养 紊乱或胃肠道疾病领域的技术人员应当了解多种所述病症是已知的。向受吸收不良症困扰 的动物定期提供适量营养是非常复杂的。在某些实施方案中，褪黑激素与一种或多种兴奋剂诸如咖啡因、烟碱、麻黄碱、苯 丙胺、安帕金等联合施用。这些实施方案可能在以下情况时最为有效重要的是动物不经历 嗜睡，或者动物需要更大剂量的褪黑激素以便从增强吸收中充分获益。在不同的实施方案中，动物是人类；非人类例如奶牛、马或猪，或伴侣动物例如狗 或猫。另一方面，本发明提供了包含褪黑激素和一种或多种肽、肽模拟物以及其他胃肠 道转运蛋白底物的组合物。在一个实施方案中，至少一种肽、肽模拟物或底物在动物胃肠道 中通过肠内肽转运蛋白转运，其活性被褪黑激素增强、增加或改善。所述组合物优选是适于 口服的可食用组合物。在一个实施方案中，褪黑激素和底物(例如肽和/或肽模拟物)被 合并成单剂型，例如丸剂或胶囊。在另一个实施方案中，褪黑激素和底物是控释或定时释放 的制剂。在一个实施方案中，至少一种肽模拟物包含β内酰胺环。在优选的实施方案中， 所述肽模拟物包括青霉素、头孢菌素、单酰胺菌素、碳青霉烯、内酰胺酶抑制剂，上述的 任何一种的衍生物或盐，或其任意组合。在另一个实施方案中，所述肽模拟物包括抗生素、 抗高血压剂或抗病毒药或前药。另一方面，本发明提供了减少对抗抗生素敏感型微生物所需要的抗生素用量的方 法，例如预防或治疗感染、疾病或其他通常适用抗生素的医学病症。所述方法包括口服施 用一种或多种抗生素，其与有效增强所述抗生素的胃肠道转运蛋白转运的量的褪黑激素联 合。褪黑激素增加了给定时间内通过胃肠道转运蛋白转运到动物体内的抗生素的量，从而 减少了需要施用给动物以产生效果(例如对抗感染)的抗生素的量。使用更少的抗生素降 低了需要对抗微生物的抗生素的成本，并且减少了抗生素施用带来的任何不良副作用。此外，使用较少的抗生素减少了形成抗生素抗性的微生物的风险。基本上，若抗生素与褪黑激 素联合施用，使用较少的抗生素即可获得同样的效果。另一方面，本发明提供了提高给定量或剂量的抗生素施用到动物中来对抗抗生素 敏感型微生物的效率的方法。所述方法包括施用一种或多种抗生素，其与有效增强所述抗 生素的胃肠道转运蛋白转运的量的褪黑激素联合。褪黑激素增加了给定时间内通过胃肠道 转运蛋白转运到动物体内的抗生素的量。其通过使更多的抗生素进入动物体内杀灭微生物 而提高了效率。提高给定量的抗生素的效率意味着由抗生素敏感型微生物引起的感染、疾 病或其他病症对动物产生的不良反应更少。因此，具有同样感染的两只动物将以不同速率 康复并具有不同的症状。施用抗生素和褪黑激素的动物将比仅施用抗生素的动物在更短的 时间内从感染中恢复。类似的，施用抗生素和褪黑激素的动物将比仅施用抗生素的动物具 有更少的不良反应，例如更少的发热、寒冷、恶心、呕吐、抽筋、疼痛、疲劳、不适或其他具体 感染或疾病特征性的症状。此外，更有效的抗生素也减少了感染或疾病的其他并发症的风 险，例如败血症。基本上，若抗生素与褪黑激素联合施用，相同量的抗生素可获得更好的结果。另一方面，本发明提供了减少由抗生素敏感型微生物引起的感染或疾病产生并发 症的可能性的方法。所述方法包括施用一种或多种抗生素，其与有效增强所述抗生素的胃 肠道转运蛋白转运的量的褪黑激素联合。当褪黑激素与抗生素联合施用时，更多的抗生素 被转运到体内以对抗微生物，若单独施用抗生素的话其可能会侵入体内。该额外的量能对 抗微生物并减少微生物引发并发症例如败血症或慢性病的可能性。另一方面，本发明提供了降低发展成抗生素抗性的微生物的风险的方法。所述方 法包括口服施用一种或多种抗生素，其与有效增强所述抗生素的胃肠道转运蛋白转运的量 的褪黑激素联合。褪黑激素增加了通过胃肠道转运蛋白转运到动物体内的抗生素的量，由 此减少了达到其效果所需要的抗生素的量，即降低了需要的剂量。当与褪黑激素联合施用 时，可减少施用给动物以达到需要效果的量和/或可降低施用的频率。基本上，由于增强了 胃肠道转运蛋白对抗生素的转运，在给定的时间内更多的抗生素被肠道吸收，因此治疗感 染或其他需要抗生素的病症所需要的抗生素更少。使用更少的抗生素总体上使进入环境的 抗生素更少，降低了发展成抗生素抗性的微生物的几率，尤其是感染性微生物例如金黄色 葡萄球菌或屎肠球菌。当与抗生素联合施用时，褪黑激素以适合于使抗生素从动物肠道内到血流中的吸 收增加的量施用。一般而言，褪黑激素以至少约0. lmg/kg的量施用，优选约0. 5mg/kg，最优 选lmg/kg。通常，褪黑激素施用至动物中的量为约0. 5mg/kg至约50mg/kg，优选约lmg/kg 至约25mg/kg。抗生素是任何可用于预防或治疗由受所述抗生素影响的微生物引起的疾病 或病症的抗生素。在多种实施方案中，所述抗生素是青霉素、头孢菌素、单酰胺菌素、碳青霉 烯、β -内酰胺酶抑制剂，上述的任何一种的衍生物或盐，或其任意组合。另一方面，本发明提供了改善P印Tl底物在动物胃肠道内吸收的方法。所述方法 包括向动物施用能有效改善PepTl底物吸收的褪黑激素。在一个实施方案中，所述褪黑激 素的量不足以诱导动物睡眠或困倦。当褪黑激素的量不足以诱导动物睡眠或困倦时，所述 方法优选在动物正常睡眠期内约1、2或3小时进行，以便任何诱导的睡眠或困倦将自然引 起动物的正常昏睡或睡眠期，从而基本上不破坏动物原有的昼夜周期。在另一个实施方案中，作为所述方法对象的其吸收得到改善的P印Tl底物是二肽、三肽或此前所定义的肽模 拟物。在多个实施方案中，所述P印Tl底物包含色氨酸、谷氨酰胺、精氨酸、或支链氨基酸残 基。在支链氨基酸中有时优选缬氨酸。在一个优选的实施方案中，所述方法还包括联合施 用褪黑激素和至少一种PepTl底物。在多个实施方案中，要改善或增强吸收的PepTl底物可用于任何与动物健康或保 健有关的特别的或一般性的病症。在一个实施方案中，PepTl底物可用于在老年动物中促 进最佳的蛋白质/肽/氨基酸营养、吸收或同化。这样的实施方案可用于维持肌肉组织，建 立肌肉重量或逆转或减缓老龄对肌肉蛋白的代谢结果。在另一个实施方案中，PepTl底物 有助于在吸收不良症动物中促进最佳的蛋白质/肽/氨基酸营养、吸收或同化。在某些实 施方案中，褪黑激素以一个或多个剂量口服施用。所述一个或多个剂量优选与P印Tl底物 联合提供。在某些实施方案中，褪黑激素优选存在于动物正常睡眠时间前消耗的食物中。所 述实施方案倾向于使用更大剂量或更多量的褪黑激素，这样褪黑激素可诱导动物的困倦、 朦胧状态或甚至深睡眠。在一个实施方案中，褪黑激素的量在约1至10mg/kg之间。所述 实施方案更优选5-10mg/kg。lmg/kg或更少的褪黑激素优选用于不需要诱导睡眠或困倦的 实施方案。所述方法和组合物也可与一种或多种兴奋剂联合使用/施用以克服敏感动物中 可能的困倦效应。因此，本文可适合使用咖啡因或类似的兴奋剂。另一方面，本发明提供了改善肽模拟物在动物中吸收的方法。所述方法尤其可用 于改善某些药物和前药在体内的递送、吸收或应用。所述方法包括在动物中联合施用以一 个或多个剂量的有效改善肽模拟物吸收的量的褪黑激素和所述肽模拟物。步骤可按任何顺 序进行。在优选的实施方案中，施用褪黑激素的量不引起动物的睡眠或困倦。在优选的实施方案中，所述褪黑激素以一个或多个剂量口服施用。本方法的一个 优点是口服施用诸如褪黑激素或其前体的化合物提供了改善递送、吸收、转运或摄取的安 全、经济、有效和简单的途径，从而通过使更多的活性成分最终到达动物细胞和/或循环系 统来改善给定剂量或量的某些药物的效果。因此，在某些实施方案中，在施用肽模拟物之前 或与之联合施用至少一种所述一个或多个剂量。在多个实施方案中，肽模拟物包括抗生素或其他药物或前药。本文中，包含β -内 酰胺环的肽模拟物是有效的。含有内酰胺环的抗生素是尤其有效的。例如，青霉素、头 孢菌素、单酰胺菌素、碳青霉烯、内酰胺酶抑制剂，上述的任何一种的衍生物或盐，或其 任意组合。在其他实施方案中，肽模拟物是氨基酸修饰物，例如药物或前药的氨基酸酯。本领 域技术人员将理解，某些药物或某类药物是寡肽或含有某种肽或肽样结构。已知许多此类 化合物是肠内肽转运蛋白的底物。其他药物可被修饰，例如通过制成在体内转化成活性药 物的前药。在某些情况下，所述药物前药是或含有足以作为肠内转运蛋白底物的结构。在 其他情况下，酯化氨基酸足以提供作为肠内寡肽转运蛋白底物的性质。目前，除前文讨论的 抗生素外，本文中公开的方法优选使用抗高血压药和抗病毒药。在又一方面，本发明提供了提高食物组合物在体内营养价值的方法。所述方法包 括向动物联合施用食物组合物与足以增强食物或其天然消化产物中存在的一种或多种二 肽或三肽在动物中的吸收的量的褪黑激素。15
在一个实施方案中，所述方法适合于动物从改善的蛋白质营养或氨基酸同化中获 益的情况。在某些实施方案中，动物是工作动物，或从事紧张体力活动或锻炼的动物。在另 一个实施方案中，所述动物是老年动物。在另一个实施方案中，所述动物具有吸收不良症。 在其他实施方案中，动物正经历来自疾病的应激。在某些实施方案中，该方法采用不诱导睡眠或困倦的量的褪黑激素进行，例如不 超过约lmg/kg的剂量或量。在其他实施方案中，褪黑激素的量可诱导睡眠或困倦，并且褪 黑激素在动物正常睡眠时间前约1、2或3小时内施用，或在基本上不破坏动物昼夜循环的 任何时间施用。在另一方面，本发明提供了适合于改善底物通过胃肠道转运蛋白转运的药盒。所 述药盒在单个包装或虚拟包装中的分开的容器中包含适当的药盒成分，褪黑激素和至少一 种其他下列成分(1)肽模拟物；(2) 二肽或三肽；(3)寡肽；(4)药物或前药的氨基酸酯； (5)另一种胃肠道转运蛋白底物；(6)另一种适于动物消耗的成分，以及(7)使用褪黑激素 和所述至少一种其他成分改善底物通过胃肠道转运蛋白在动物中转运的说明书或其他信 肩、ο在一个实施方案中，所述说明书指出可以通过基本上不破坏或干扰动物的昼夜循 环的方式使用该药盒。在一个实施方案中，所述说明书教导使用者如何以不诱导动物睡眠 或困倦的方式使用药盒。例如，说明书可指出为避免困倦，动物不应接受超过特定剂量或量 的褪黑激素，例如约lmg/kg褪黑激素。在另一个实施方案中，至少一部分的说明书或其他 信息以虚拟方式提供。在另一方面，本发明提供了交流关于一种或多种下列信息或其使用说明的手段 (a)增强肽在动物中转运的方法；(b)改善PepTl底物在动物胃肠道内吸收的方法；(c)改 善肽模拟物在动物中吸收的方法；(d)增强食物在体内的营养价值的方法；(e)包含褪黑激 素和一种或多种肽、肽模拟物和其他胃肠道转运蛋白底物的组合物；(f)包含实施所述方 法所需要的成分的药盒，或(g)制备或使用本文公开的方法、组合物或药盒。在一个实施方案中，上述手段包括网站、视觉显示的报栏(visual display kiosk)、印刷品、小册子、产品标签、包装说明书、广告、分发的印刷品、公告、录音带、录像 带、DVD、⑶-ROM、计算机可读芯片、计算机可读卡、计算机可读磁盘、计算机内存或其组合。在另一方面，本发明提供了包含标签装置的包装，其指明可使用褪黑激素增强肽、 肽模拟物或其他胃肠道转运蛋白底物的吸收。在多个实施方案中所述底物是P印Tl底物， 包括二肽和三肽；肽模拟物，包括药物或前药的氨基酸酯；抗生素；以及其组合。标签可以 是任何字或词，图片、设计、缩略语、标语、短语或其他装置或其组合，表明褪黑激素可用于 增强P印Tl底物的吸收。通常，所述装置包括打印在包装上的“增强抗生素吸收”或“增强 肽吸收”或等价的表述。任何适于包含褪黑激素的包装或包装材料均可用于本发明，例如由 纸、塑料、箔、金属等制备的袋、盒、瓶、罐、囊等。在一个优选的实施方案中，所述包装含有包 含褪黑激素的食物组合物，优选人或伴侣动物的食物组合物。另一方面，本发明提供了促进动物健康和/或保健的方法。所述方法包括向动物 施用促进健康或保健量的褪黑激素和一种或多种肽、肽模拟物或其他胃肠道转运蛋白底 物。褪黑激素和底物可通过任何适当的方式施用，优选口服，更优选在食物组合物中口服。 褪黑激素和底物可以单剂型施用或联合施用。施用的褪黑激素量为至少约0. lmg/kg，优选约0. 5mg/kg,最优选lmg/kg。通常，褪黑激素以约0. lmg/kg至约50mg/kg的量施用给动物， 优选约lmg/kg至约25mg/kg。另一方面，本发明提供了促进动物健康和/或保健的方法。所述方法包括向动物 施用促进健康或保健量的褪黑激素和一种或多种肽、肽模拟物或其他胃肠道转运蛋白底 物。褪黑激素增加了动物对这些底物的吸收。动物利用这些底物促进动物的保健，例如治 疗疾病(抗生素)和获得瘦体重(肽)。另一方面，本发明提供了增加动物瘦体重的方法。所述方法包括向动物施用褪黑 激素和能有效使动物获得瘦体重的肽、肽模拟物或其他胃肠道转运蛋白底物，例如二肽和 三肽。这些底物可以是食品添加物、单个化合物或可由动物通过食物组合物或其消化物获得。另一方面，本发明提供了包括褪黑激素和至少一种以下成分的组合物的药物(1) 肽模拟物；(2) 二肽或三肽；(3)寡肽；(4)药物或前药的氨基酸酯；或( 另一种胃肠道转 运蛋白底物。所述药物使用制备药物组合物的标准方法制备。所述药物使用可药用的赋形 剂、稀释剂、载体、填充剂、盐等制备。在多个实施方案中，所述药物包括包含褪黑激素和肽模拟物的组合物，所述肽模 拟物是抗生素、抗高血压剂或抗病毒剂。在另一个实施方案中，肽模拟物包括内酰胺 环，可以是青霉素、头孢菌素、单酰胺菌素、碳青霉烯、β -内酰胺酶抑制剂，上述的任何一种 的衍生物或盐，或其任意组合。在一个实施方案中，所述药物包括褪黑激素和内酰胺抗生素。在本发明的所有方面，所述肽、肽模拟物和其他胃肠道转运蛋白底物以适合于适 当的肽、肽模拟物或底物及其预期目的的量施用给动物。所述量是本领域技术人员能够确 定的。类似的，本领域技术人员基于本领域的知识和本文公开的内容能够确定要施用的褪黑激素的量。这些和本发明的其他方面可通过下列实施例进一步说明。应当理解，这些实施例 仅被提供用于说明具体方面的目的，因此，除非另外具体说明，否则它们就整体而言不限制 本发明的范围。实施例实施例1进行研究以评价5-甲氧基-N-乙酰基色胺(实施例中为褪黑激素)改善小肽和 /或肽模拟物的吸收的能力。方法研究设计为测定褪黑激素对头孢氨苄吸收的作用。将狗(n = 24,体重(BW) 范围7-14kg，年龄范围1. 5-14岁)分成试验组和对照组。各组进行性别平衡。试验组在12:00pm接受单剂量的褪黑激素(lmg/kg Bff)，随后在1 00-2 OOpm接 受单剂量的头孢氨苄(15mg/kg BW)。褪黑激素和头孢氨苄给药均通过狗的口服投药进 行。研究通过测定施用褪黑激素后血清中头孢氨苄出现的药代动力学来评价头孢氨苄的 吸收。对照组与试验组同时接受头孢氨苄，但未接受口服褪黑激素。在口服给药头孢氨苄 后第15、30、45和60分钟，以及1. 5、2、2. 5、3、3. 5、4、6和8小时后取样进行药代动力学分 析。通过高压液相色谱测定头孢氨苄浓度。在口服施用时间前后，例如在口服给药褪黑激17素前-5、-3、-1、-0· 5小时，0 (给药时间)和给药0. 5、1、2、3、4和6小时后分析血清中褪黑 激素的浓度。通过放射免疫测定法量化褪黑激素。结果如表1、2、3所示。根据表1、2、3，数据显示口服施用褪黑激素增加了头孢氨苄的吸收。表1显示了 头孢氨苄的药代动力学数据。数据显示了给药后时间(h)头孢氨苄在狗血清中的出现和消 除。各时间点的平均血浓度数据分析表明，从给药后2. Oh到他的所有时间点的数值均具 有统计学差异(P <0.05)。药代动力学数据被用于计算出现速率和峰高，如表2所示，其 用于差异分析。接受褪黑激素组的头孢氨苄计算值比未接受褪黑激素的组峰高高8. 8% (P =0. 05 ；表2、。基于表1中所示平均药代动力学浓度数据，接受褪黑激素补充的狗在给药 后2小时(峰值时间)的头孢氨苄浓度高19%。此外，接受褪黑激素的狗的总吸收量(根 据总曲线下面积测定)增加了 10. 6% (P = O. 03)。从表3中可以看出，在摄入褪黑激素的狗中，摄入后直到6小时血清中褪黑激素的 出现显著增加，未施用褪黑激素的对照组狗具有基线水平。表3中还列出了各处理组的标 准误差(SE)。表 1头孢氨苄药代动力学数据接受或未接受口服褪黑激素处理的狗在口服给药头孢 氨苄后的头孢氨苄血清浓度(yg/mL)
权利要求
1.一种增强肽、肽模拟物和其他胃肠道转运蛋白底物在动物中转运的方法，包括施用 有效增强肽、肽模拟物或底物通过动物肠内转运蛋白进行转运的量的褪黑激素。
2.权利要求1的方法，其中所述褪黑激素与肽、肽模拟物或底物联合施用。
3.权利要求1的方法，其中褪黑激素在食物组合物中施用。
4.权利要求3的方法，其中所述食物组合物与肽、肽模拟物或底物联合施用。
5.权利要求1的方法，其中施用的褪黑激素量为至少约0.lmg/kg。
6.权利要求1的方法，其中施用的褪黑激素量为约0.lmg/kg至约50/mg/kg。
7.权利要求1的方法，其中肠内转运蛋白是膜转运蛋白PTR2家族的成员。
8.权利要求1的方法，其中肠内转运蛋白是肽转运蛋白1(P印Tl)。
9.权利要求1的方法，其中肽、肽模拟物或底物是营养物或药物。
10.权利要求9的方法，其中所述药物是抗生素。
11.权利要求1的方法，其中所述动物具有吸收不良症。
12.权利要求1的方法，其中褪黑激素与一种或多种兴奋剂联合施用。
13.权利要求1的方法，其中所述动物是伴侣动物。
14.包含褪黑激素和一种或多种肽、肽模拟物或其他胃肠道转运蛋白底物的组合物。
15.权利要求14的组合物，其包含至少一种含有β-内酰胺环的肽模拟物。
16.权利要求15的组合物，其中所述肽模拟物包括青霉素、头孢菌素、单酰胺菌素、碳 青霉烯、内酰胺酶抑制剂，上述的任何一种的衍生物或盐，或其任意组合。
17.权利要求14的组合物，其中所述肽模拟物包括抗生素、抗高血压剂或抗病毒剂或 前药。
18.减少对抗抗生素敏感型微生物所需要的抗生素量的方法，包括口服施用一种或多 种抗生素，其与有效增强所述抗生素的胃肠道转运蛋白转运的量的褪黑激素联合。
19.权利要求18的方法，其中褪黑激素的施用量至少为约0.lmg/kg。
20.权利要求18的方法，其中所述抗生素是青霉素、头孢菌素、单酰胺菌素、碳青霉烯、 β -内酰胺酶抑制剂，上述的任何一种的衍生物或盐，或其任意组合。
21.减少发展成抗生素抗性微生物风险的方法，包括口服施用一种或多种抗生素，其与 有效增强所述抗生素的胃肠道转运蛋白转运的量的褪黑激素联合。
22.权利要求21的方法，其中褪黑激素的施用量至少为约0.lmg/kg。
23.权利要求21的方法，其中所述抗生素是青霉素、头孢菌素、单酰胺菌素、碳青霉烯、 β -内酰胺酶抑制剂，上述的任何一种的衍生物或盐，或其任意组合。
24.改善P印Tl底物在动物胃肠道中吸收的方法，包括向动物施用有效改善P印Tl底物 吸收的量的褪黑激素。
25.权利要求对的方法，其中褪黑激素的量不诱导动物睡眠或困倦。
26.权利要求对的方法，其中所述P印Tl底物是二肽、三肽或肽模拟物。
27.权利要求M的方法，其中所述P印Tl底物包括色氨酸、谷氨酰胺、精氨酸或支链氨 基酸残基。
28.权利要求M的方法，其中施用步骤包括施用至少一种PepTl底物。
29.权利要求M的方法，其中PepTl底物用于促进老年动物的最佳营养。
30.权利要求对的方法，其中所述动物具有吸收不良症。
31.权利要求M的方法，其中褪黑激素以一个或多个剂量提供，其与PepTl底物联合口 服施用。
32.权利要求对的方法，其中褪黑激素存在于食物中，配制为在动物正常睡眠时间前 消耗。
33.改善肽模拟物在动物中吸收的方法，包括向动物联合施用有效改善所述肽模拟物 的吸收的量的褪黑激素和所述肽模拟物。
34.权利要求33的方法，其中褪黑激素的施用量不诱导动物睡眠或困倦。
35.权利要求34的方法，其中褪黑激素以一个或多个剂量口服施用。
36.权利要求35的方法，其中褪黑激素的总剂量低于约:3mg/kg。
37.权利要求33的方法，其中所述肽模拟物是抗生素。
38.权利要求33的方法，其中所述肽模拟物含有β-内酰胺环。
39.权利要求33的方法，其中所述肽模拟物是青霉素、头孢菌素、单酰胺菌素、碳青霉 烯、β -内酰胺酶抑制剂，上述的任何一种的衍生物或盐，或其任意组合。
40.增强食物组合物的体内营养价值的方法，所述方法包括向动物联合施用食物组合 物与足以增强食物或其天然消化产物中存在的一种或多种二肽或三肽的吸收的量的褪黑 激素。
41.权利要求40的方法，其中所述动物将从改善的蛋白质营养或氨基酸同化中获益。
42.权利要求41的方法，其中所述动物具有吸收不良症。
43.权利要求41的方法，其中所述动物正经历来自疾病的应激。
44.权利要求41的方法，其中所述动物是工作的动物或从事锻炼的伴侣动物。
45.权利要求41的方法，其中褪黑激素的量不诱导睡眠或困倦。
46.权利要求45的方法，其中褪黑激素的剂量为约lmg/kg。
47.权利要求41的方法，其中褪黑激素的量可诱导睡眠或困倦，且褪黑激素在动物正 常睡眠时间前约3小时内施用。
48.适合于改善底物通过胃肠道转运蛋白转运的药盒，其在单个包装或虚拟包装中的 分开的容器中包含褪黑激素和至少一种其他下列成分⑴肽模拟物；⑵二肽或三肽；⑶ 寡肽；(4)药物或前药的氨基酸酯；( 另一种胃肠道转运蛋白底物；(6)另一种适合于动 物消耗的成分，以及(7)使用褪黑激素和所述至少一种其他成分改善底物通过胃肠道转运 蛋白在动物中转运的说明书或其他信息。
49.权利要求48的药盒，其中说明书指出所述药盒可以以诱导动物睡眠或困倦的方式 使用。
50.权利要求49的药盒，其中说明书指出动物不应接受超过约:3mg/kg的褪黑激素。
51.权利要求48的药盒，其中至少一部分的说明书或其他信息以虚拟方式提供。
52.交流关于一种或多种下列信息或其使用说明的手段(a)增强肽在动物中转运的 方法；(b)改善PepTl底物在动物胃肠道内吸收的方法；(c)改善肽模拟物在动物中吸收的 方法；(d)增强食物的体内营养价值的方法；(e)包含褪黑激素和一种或多种肽、肽模拟物 或者药物或前药的氨基酸酯的组合物；(f)包含实施所述方法所需要的成分的药盒，或(g) 制备或使用组合物或药盒。
53.权利要求52的手段，包括网站、视觉显示的报栏、印刷品、小册子、产品标签、包装说明书、广告、分发的印刷品、公告、录音带、录像带、DVD、CD-ROM、计算机可读芯片、计算机 可读卡、计算机可读磁盘、计算机内存或其组合。
54.包含标签装置的包装，其指明可使用褪黑激素来增强肽、肽模拟物或其他胃肠道转 运蛋白底物的吸收。
55.权利要求M的包装，其中所述底物是一种或多种二肽和三肽、抗生素、药物或前药 的氨基酸酯及其组合。
56.促进动物健康或保健的方法，包括向动物施用促进健康或保健的量的褪黑激素和 一种或多种肽、肽模拟物或其他胃肠道转运蛋白底物。
57.权利要求56的方法，其中褪黑激素与所述肽、肽模拟物或底物联合施用。
58.包含褪黑激素和至少一种下述成分的组合物在制备药物中的用途(1)肽模拟物； (2) 二肽或三肽；C3)寡肽；(4)药物或前药的氨基酸酯；或( 另一种胃肠道转运蛋白底 物。
59.权利要求58的用途，其中所述组合物包含褪黑激素和抗生素。
60.权利要求58的用途，其中所述组合物包含褪黑激素和含有内酰胺环的肽模拟物。
61.提高给定量的抗生素施用到动物中来对抗抗生素敏感型微生物的效率的方法，包 括口服施用一种或多种抗生素，其与有效增强所述抗生素的胃肠道转运蛋白转运的量的褪 黑激素联合。
62.权利要求61的方法，其中褪黑激素以至少约0.lmg/kg的量施用。
63.权利要求61的方法，其中所述抗生素是青霉素、头孢菌素、单酰胺菌素、碳青霉烯、 β -内酰胺酶抑制剂，上述的任何一种的衍生物或盐，或其任意组合。
64.减少由抗生素敏感型微生物引起的感染或疾病产生并发症的可能性的方法，包括 口服施用一种或多种抗生素，其与有效增强所述抗生素的胃肠道转运蛋白转运的量的褪黑 激素联合。
65.权利要求65的方法，其中褪黑激素以至少约0.lmg/kg的量施用。
66.权利要求65的方法，其中所述抗生素是青霉素、头孢菌素、单酰胺菌素、碳青霉烯、 β -内酰胺酶抑制剂，上述的任何一种的衍生物或盐，或其任意组合。
全文摘要
提供了用于增强肽、肽模拟物和其他胃肠道转运蛋白底物通过胃肠道转运蛋白的吸收和/或转运的方法和组合物。所述方法包括使用激素例如褪黑激素来增加肽、肽模拟物和底物的转运。所述组合物包括一种或多种激素和一种或多种肽、肽模拟物以及其他胃肠道转运蛋白底物。
文档编号A61K31/405GK102046169SQ200980119444
公开日2011年5月4日 申请日期2009年3月26日 优先权日2008年3月27日
发明者B·M·赞吉 申请人:雀巢产品技术援助有限公司
增加肽、肽模拟物和其他胃肠道转运蛋白底物吸收的方法相关申请的交叉参考本申请要求2008年3月27日提交的美国临时申请序列号61/072069的优先权， 其公开的内容引入本文作为参考。发明背景发明领域本发明一般性地涉及增加动物吸收化合物的方法，尤其是使用诸如5-甲氧 基-N-乙酰基色胺的激素来增加肽、肽模拟物以及其他胃肠道转运蛋白底物在动物中的吸 收。相关技术描述肽转运蛋白是介导二肽和三肽和多种肽模拟物以及其他化合物的细胞吸收的膜 结合蛋白质。它们发现于细菌、酵母、植物、无脊椎动物和脊椎动物中。在脊椎动物中，两种 转运蛋白，肽转运蛋白1和2，分别称为P印Tl和P印T2，主要在小肠(P印Tl)、肾(P印Tl和 PepT2)和肺(P印1 的刷状缘膜中表达。P印T转运蛋白是质子偶联的转运蛋白，其能转运 多种二肽和三肽以及多种诸如内酰胺抗生素、选择的血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂 和肽酶抑制剂的治疗药物。据认为，底物流与沿着膜电位的质子电化学梯度的质子运动偶 联，作为迁移的主要驱动力。哺乳动物寡肽转运蛋白是膜转运蛋白的PTR2家族的一部分。其特征为在所有已 知的家族成员中保守的两个标记性基序。第一个保守基序是在第二推定跨膜结构域末端开 始的区域，包括随后的第一细胞质环和第三跨膜结构域。第二个保守基序对应于第五跨膜 区域的核心区域。除了哺乳动物P印Tl和P印Τ2转运蛋白外，PTR2家族还包括酵母肽转运 蛋白PTR2、来自乳酸乳球菌的DtpT以及多种具有未知功能的“孤儿”转运蛋白。大部分孤 儿转运蛋白发现于原核生物例如大肠杆菌中。在哺乳动物中，P印Tl在蛋白质(包括小寡肽)的吸收中具有重要作用。P印Tl主 要在肠上皮细胞的刷状缘膜中表达，此处其介导诸如消化物中的寡肽从消化腔到细胞的吸 收。此外，由于相对较宽的底物特异性，PepTl能接受包括内酰胺抗生素在内的多种药 物活性化合物，并作为这些化合物的吸收途径。功能研究显示，除利用H+电化学梯度作为 驱动力外，P印Tl具有ρΗ依赖性，已报道是高速的低亲和转运蛋白。据称P印Tl还是可诱 导的转运蛋白。诱导物包括底物、底物类似物和各种激素。生理应激，包括肠内疾病、机体应激、手术、损伤和/或心理应激能负面影响肠道 健康和功能，直接或间接影响氨基酸吸收。例如，已显示1型糖尿病的大鼠(即天然的低或 无胰岛素生成)与健康大鼠相比PepTl活性下降。已尝试改善氨基酸吸收。例如预消化的食物蛋白和向食物例如病危护理食物中添 加水解的食物蛋白。然而该方法主要增加了可吸收的氨基酸或肽库，而未必能增强吸收过 程。某些特定的小肽能明显刺激肽的吸收。美国专利号6，803，186中披露了饲喂特定肽、尤 其是甘氨酰肌氨酸或β-丙氨酰-L-组氨酸(肌肽)增加犬细胞系中的肽吸收的方法。然而在体内，与单独的标准饮食相比，这些肽在刺激肽吸收中的应用并不成功。已显示单独的 二肽，即丙氨酰-谷氨酸不足以刺激肽吸收活性；然而当与生长激素(GH)结合时，当用过氧 化氢使人细胞系产生氧化应激时，肽吸收得以维持。在肽和GH存在下，过氧化物诱导的氧 化应激减少了肽吸收。某些科学文献表明特定的生物活性肽或激素能通过直接刺激PepTl 的活性来刺激小肽吸收。胰岛素、表皮生长因子、瘦素、干扰素Y和甲状腺激素均显示某些 刺激效应。已报道了关于生长激素的任何刺激效应的争议数据。
除甲状腺激素外，刺激性肽激素是物种特异性的蛋白。因此，这些激素的实际应用 或使用需要例如针对要使用的各物种通过化学或重组基因技术合成。此外，这些激素表现 为通过皮下注射的方式施用，这在实际应用中是不合适的。为了各种目的，进行了其他尝试以特异性调节PepTl转运活性。例如美国专利申 请US20030170748A1披露了编码犬P印Tl的核酸。该公开物还评价了亮氨酸和色氨酸的某 些肽结合形式的吸收，以及各种小肽抑制模型底物甘氨酰肌氨酸(GlySar)转运的能力。提 供了确定具体的肽是否对动物具有有益的营养性质的方法，以及通过使细胞接触P印Tl底 物来刺激细胞内PepTl活性的方法。类似的，美国专利申请US20060210569A1披露了抑制 P印Tl，从而抑制细胞生长的方法。因此，仍然需要增加动物吸收或摄取一种或多种特定或非特定的肽、肽模拟物和 其他胃肠道转运蛋白底物的方法，尤其是通过转运蛋白例如P印Tl转运蛋白的方法。发明概述因此，本发明的一个目的是提供增强、改善或增加肽、肽模拟物或其他胃肠道转运 蛋白底物在动物中吸收、转运、摄取和/或同化的方法。本发明的另一目的是提供支持和/或改善胃肠道健康、促进动物的健康或保健、 对患有吸收不良症的动物提供改善的氨基酸营养、递送作为胃肠道转运蛋白底物的药物或 前药，以及维持老年动物或紧张体力活动，例如锻炼的动物中的肌肉量的有益方法。这些和其他目的中的一个或多个通过使用新的组合物和用于增强动物中肽、肽模 拟物或其他胃肠道转运蛋白底物转运的方法来实现。所述方法包括施用有效增强肽、肽模 拟物或其他胃肠道转运蛋白底物的转运的量的一种或多种褪黑激素，其通过动物中的肠道 转运蛋白、例如PepTl进行。该方法改善了这些化合物的吸收，并增加了这些化合物可被动 物利用以达到既定目的(例如构建蛋白或抑制感染)的量。当食物组合物与足以增强所述 组合物中一种或多种二肽或三肽或其天然消化产物吸收的量的褪黑激素一起施用至动物 时，所述方法还增强了食物组合物在体内的营养价值。所述组合物包括褪黑激素和一种或 多种肽、肽模拟物或其他胃肠道转运蛋白底物。本发明的其他目的、特征和优点对于本领域技术人员来说也是显而易见的。发明详述定义术语“褪黑激素”表示5-甲氧基-N-乙酰基色胺及其基本上与5-甲氧基-N-乙 酰基色胺具有同样生物学活性的衍生物和类似物，以及其体内前体。5-甲氧基-N-乙酰基 色胺是其量在每日周期内变化的化合物。该化合物由松果体、视网膜、免疫细胞和胃肠道产 生。其经血清素的合成从氨基酸色氨酸天然合成。松果体从视网膜接收关于光和暗的日夜 信息，从而合成褪黑激素。该化合物也可通过各种植物例如大米、细菌、原生动物、藻类和其他生物体合成。该术语还表示具有与5-甲氧基-N-乙酰基色胺对胃肠道转运蛋白如P印Tl 和PepT2基本上相同的生物学活性的任何其他激素。术语“肽模拟物”表示模拟天然寡肽一个或多个结构方面或生物学活性，但包含一 个或多个非肽或非天然化学结构或键的化合物。本文所用肽模拟物具有与动物中寡肽转运 有关的一种或多种生物学性质。在一个优选的实施方案中，本文所用肽模拟物由一种或多 种寡肽转运蛋白识别，例如作为底物、抑制剂、激动剂或拮抗剂。在另一个实施方案中，肽模 拟物是一种或多种寡肽转运蛋白的诱导物，即，肽模拟物诱导所述寡肽转运蛋白的量或活 性，而不直接识别为该蛋白的底物或激动剂。肽模拟物常用于模拟肽的生物学作用，因此它 们可以是设计为模拟一种或多种肽的小蛋白样链。肽模拟物通常基于现有的相关肽进行合 成，进行一个或多个修饰以改变分子的结构或性质。修饰可改变肽分子的稳定性、半衰期、 生物活性、吸收或副作用(例如毒性、溶解性、疏水性、侧链电荷或柔性)。肽模拟物可用作 合理开发的或基于对已知或推定生物学活性的现有肽的修饰开发的药物或药物类化合物。 本文所用肽模拟物优选包含一个或多个非天然存在的修饰，即修饰或改变的肽骨架结构、 掺入非天然的氨基酸等。在某些实施方案中，本文所用肽模拟物是药物。已知在药物递送领域中，某些药 物或某类药物可通过蛋白或肽转运分子递送。例如某些抗生素、血压调节药物(例如抗高 血压药物)、抗病毒药和其他药物是其底物或可在体内通过一种或多种PTR2家族肽转运分 子进行转运。例如肽模拟物抗生素例如内酰胺类抗生素在体内可通过寡肽转运蛋白 转运。内酰胺类抗生素是一类范围很广的抗生素，在其分子结构中含有内酰胺环。 这类抗生素包括青霉素类、头孢菌素类、单酰胺菌素类、碳青霉烯类，包括其衍生物。应当注 意，本文中关于化合物诸如“肽模拟物”的讨论包括所有公认的形式和所述化合物的商用制 剂，例如盐、酸、碱，尤其是所述化合物可药用的盐。其他包含内酰胺环结构的肽模拟物 化合物包括内酰胺酶抑制剂，其可能不是天然的抗菌剂或抗生素，但可抑制微生物产 生的β-内酰胺酶以防止降解环境中的含β-内酰胺的化合物。β-内酰胺抗生素是广谱 的和最广泛使用的抗生素。头孢氨苄是本文举例说明的头孢菌素抗生素的一个例子。本文所用肽模拟物还包括通过多种药物或前药的例如氨基酸酯化进行的修饰。这 些修饰的药物，例如氨基酸酯在本文中是有用的，因为它们能使相关的药物或前药作为肠 内寡肽转运蛋白的底物或诱导物被转运。该方法特别用于当药物难以吸收时。例如抗高血 压剂前药米多君在体内通过切割甘氨酰残基转化成其活性形式DMAE。米多君而非DMAE是 PepTl转运蛋白的底物。其他对DMAE的氨基酸修饰也能被P印Tl转运，已知能作为肠内寡 肽转运蛋白底物的其他药物包括伐昔洛韦和缬更昔洛韦，其分别是抗病毒剂阿昔洛韦和更 昔洛韦的氨基酸酯前药。本领域技术人员应当了解，可通过本领域公知的方法确定具体的化合物是否是前 文所定义的肽模拟物。例如，肽模拟物化合物可以是对寡肽转运蛋白转运一种或多种已知 底物的有效抑制剂，例如竞争性抑制剂。PepTl的一种所述底物是模式底物甘氨酰肌氨酸。 肽模拟物的转运、结合或吸收也可直接通过体外模型系统、膜、囊泡、细胞或体内动物系统 评价。其他功能性分析可基于某些优选的肠内寡肽转运蛋白是质子依赖性的转运蛋白这一 事实进行。因此，肽模拟物底物的分析可基于例如质子移动、肠内寡肽转运蛋白所在之处膜 的去极化进行。
本文所用关于吸收、转运、摄取或同化肽、肽模拟物、其他胃肠道转运蛋白底物或 其他化合物的术语“增强”表示具体的组合物或方法对于所述吸收、转运、摄取或同化具有 某些可测量的效应，例如对吸收、转运、摄取或同化的时间、过程、速率、量、程度等的效应。 化合物或方法也可通过任何若干途径“增强”转运、摄取或吸收，包括通过增加与吸收、转 运、摄取或同化特定氨基酸、肽或相关化合物有关的转运蛋白的活性、量、效率、结合或其他 动力学参数。化合物或方法也可通过增加特定底物进入转运分子、离开已转运的转运分子 的速率，或通过增加特定底物在特定的时间内或到特定的测定时间点为止转运的程度来增 强吸收、转运、摄取或同化。由于使用组合物或方法后，任何可测量的直接或间接的吸收、转 运、摄取或同化的增加“增强” 了造成损伤的体力活动的恢复。关于吸收、转运、摄取或同化 的任何效应方面，术语“改善”是“增强”的同义词。术语“有效量”表示一定量的化合物、材料、组合物、药物或其他物质，例如褪黑激 素，其对于获得具体的生物学结果是有效的。所述结果包括但不限于一种或多种下列结果 增加具体的肽、肽模拟物或相关化合物从动物的胃肠腔内吸收到一种或多种位于胃肠道内 层的细胞，例如刷状缘细胞内的速率或程度。因此，有效量是在特定的时间点或在特定的时 期内，相对于未接受有效量化合物的对照动物而言足以增加转运蛋白底物吸收、转运、摄取 或同化等的速率或程度的量。有效量的其他可能结果包括增加一种或多种细胞或细胞类型 中寡肽转运蛋白的量。这样的增加可通过增加转运蛋白的半衰期进行，例如通过增加转运 蛋白的产生速率或减少降解或代谢回转速率进行。增加吸收、转运等也可通过诱导转运蛋 白生成进行，例如通过增加细胞内转运蛋白的转录和翻译速率，或通过增加细胞内编码转 运蛋白的mRNA的半衰期进行。增加也可通过前述的任意组合，以及本领域技术人员已知的 增加生物活性蛋白量或活性的其他方法进行。在本文的某些实施方案中，在施用要吸收或 转运的底物或化合物之前施用或消耗有效量的用于增强或改善底物例如肽、肽模拟物或有 关化合物吸收的化合物。在其他实施方案中，可在施用要吸收或转运的底物或化合物的同 时施用或消耗有效的量，其单独或作为同一食物组合物或制剂或药物的一部分施用。在另 一些实施方案中，可以在消耗大部分或全部要吸收或转运的底物或化合物之后特定的时间 窗口内施用或消耗有效的量。也可使用上述的组合，以便在消耗或施用要吸收或转运的底 物或化合物之前、期间或之后施用或消耗有效的量。总有效量可以以超过一批或一剂来施 用或消耗，有效量可在消耗要吸收或转运的底物或化合物之前、期间或之后的一个以上时 间点施用或消耗。由于多种原因，优选在消耗或施用要吸收或转运的底物或化合物前后约 60-120分钟内施用或消耗所述有效量。优选的，口服时在消耗或施用要吸收或转运的底物 或化合物前1、5、10、15、20、30、40、45、50或55分钟内或低于约1小时的任何中间值内施用 所述有效量。在其他实施方案中，在消耗或施用要吸收或转运的底物或化合物前60、70、80、 90分钟或更少时间内施用或消耗所述有效量。在另一些实施方案中，在消耗或施用要吸收 或转运的底物或化合物前100、110或甚至2小时内消耗所述有效量。在消耗或施用要吸收 或转运的底物或化合物前后约2小时的时间窗以外施用可能会产生某些影响，然而，本领 域技术人员应当理解，可能的益处由于超出该窗口的施用时间的延长而降低。术语“抗生素”表示任何能被肽转运蛋白转运的抗生素。术语“动物”表示任何能从一种或多种本发明的组合物和方法中受益的动物，尤其 是能从增强、改善或增加下列物质的体内吸收、转运、摄取、同化等的方法和组合物中受益的动物二肽、三肽和其他寡肽；肽模拟物，包括药物或前药的氨基酸酯；肠内寡肽转运蛋 白的底物，尤其是位于动物胃肠道中并且其活性被褪黑激素或其他肽类或激素增强、刺激 等的寡肽转运蛋白。因此，本发明涉及任何动物，优选哺乳动物。除非另外说明或由上下文 清晰判定，否则这里的术语“动物”或“哺乳动物”包括人类。术语“动物”以广义使用，表示 人或其他动物，包括鸟类、牛、犬、马、猫、山羊、狼、鼠、羊和猪类。本文所用“伴侣动物”表示 任何家养的动物，包括但不限于猫、狗、兔、豚鼠、雪貂、仓鼠、小鼠、沙鼠、马、牛、山羊、绵羊、 驴、猪等。可以优选特别排除或由上下文清楚地排除了人的特定实施方案。在某些实施方 案中，优选伴侣动物，例如狗和猫。术语“老年”表示动物已到达其预计寿命的约50%，即此类、种、属的动物的预计寿 命的50%。在一个优选的实施方案中，老年动物年龄为根据其类、种、属等预计或计算的寿 命的至少 60%、66. 6%、70%、75%或 80%。术语“食物”或“食物组合物”表示用于由包括人在内的动物摄取的产品或组合物， 其向动物提供营养。术语“食物”包括任何人或其他动物的食物、饲料、小吃、食物补充剂、 宴食、膳食替代品或代餐。“食物”包括任何形式的所述产品，固体、液体、凝胶或其混合物或 组合。“动物食物”包括用于任何家养或野生物种的食物或饲料。在优选的实施方案中，动 物食物表示全营养食物组合物，例如压片、挤出或干燥的食物。所述动物食物的实例包括挤 出的宠物食物，例如狗或猫的食物。术语“施用”除施用至另一动物外还包括自我施用。例如看护人可将食物、组合物、 药物等施用给伴侣动物。看护人也可摄取或消耗食物、组合物、药物等，由此自我施用所述 产品、组合物或药物。本文中施用考虑任何可接受的途径。许多实施方案中优选口服施用。 要吸收或转运的底物或化合物还优选通过口服施用，例如作为食物、饮料、食品添加物被消 耗。可以定期或长期施用。在实施本文提供的方法中涉及施用有效量时，或涉及施用本文提供的组合物时， 术语“定期”表示在消耗要吸收或转运的底物或化合物之前、同时或之后的施用可周期性重 复进行。因此，可至少每日一次，或甚至两次、三次或更多次施用，例如在每次饲喂时施用。 定期也可以较低频率地施用有效量，例如每周2或3次，或者甚至每周一次。优选地，有效 量例如褪黑激素的施用频率至少与要吸收或转运的底物或化合物的消耗一致。在某些实施 方案中优选更频繁的给药或消耗，例如每周2或3次。一个实施方案包括至少每天一次施 用有效量，即使要吸收或转运的底物或化合物的消耗频率低于每天一次或者仅仅是偶然的 消耗也是如此，如前文所定义。术语“长期施用”表示与要吸收或转运的底物或化合物的重复消耗相伴的重复施 用或消耗的时期超过一个月。某些实施方案优选超过2、3或4个月的时期，例如对于需要 最佳的蛋白质/氨基酸营养的某些动物。例如老年动物或必须维持或建立肌肉重量，或抵 抗减少或降解肌肉蛋白的分解代谢的工作动物。同样优选更长的时期，包括超过5、6、7、8、9 或10个月，尤其是对于可能从延长或长期施用中获益的动物群体来说，包括老年动物以及 具有营养性病症或胃肠道疾病的动物，例如吸收不良症。超过11个月或1年，以及超过1、 2、3或更多年的更长时期也是合适的。术语“ 口服施用”表示动物摄取，或人被指导对动物饲喂一种或多种本文所述组合 物。其中人被指导以喂养所述组合物，该指导可以指示和/或通知所述组合物的使用可以和/或将提供参考的益处，例如增强吸收、转运、摄取或同化。在某些实施方案中，净结果是 通过改善的、增加的或优化的氨基酸同化而产生在动物中改善的蛋白质营养。在其他实施 方案中，预期的益处是对受影响的动物或动物体内组织或器官的改善的药物分布。该指导 可以是口头指导(例如来自医师、兽医或其他保健专业人员，或收音机或电视媒体(例如广 告)的口头指示)，或书面指导(例如来自医师、兽医或其他保健专业人员的书面指导(例 如处方)，或来自销售专业人员或组织(例如通过销售宣传材料、小册子或其他指导性的读 物)，书面媒体(例如互联网、电子邮件、网站或其他计算机相关的媒体)，和/或伴随组合 物的包装(例如在装有所述组合物的容器上的标签)，或其组合(例如标签或包装说明书， 其指示网站以获取更多信息)。当涉及动物时，术语“体力活动”包括任何减少或降低肝脏和/或肌肉糖原的活 动。“紧张的体力活动”是当从事长时间或高频率的活动或没有充分的休息时，趋向于基本 上或完全耗尽了肝脏和/或肌肉糖原的体力活动。本领域技术人员将理解，任何部分地、 基本上或完全耗尽糖原的活动的趋势是活动持续时间和强度的函数。需要的时间(时期) 长度依赖于强度而变化，其可以是体力活动类型、阻力量或所需要的肌肉工作程度(不论 该活动需要使用大或小肌肉群或全身肌肉)、活动进行的速率等的函数。显而易见，当从事 足够时间或足够强度时，大多数体力活动都是紧张的。体力活动的实例包括各种类型的工 作、游戏、锻炼、条件反射、身体技巧开发或改良、机能恢复、步行、跑步(或其他方式或自身 移动加速)、竞争性或非竞争性运动以及有关活动。许多生物学功能或过程也是身体需求 的，因此本文所述体力活动包括分娩和对生理或心理应激源的“逃避”反应(即应激反应)、 受伤和/或创伤愈合、感染等，以及多种其他生物学活动。本领域技术人员将理解，由于遗 传差别、个体适应、条件反射等因素，一种体力活动对于任何两只动物来说都不是同等紧张 的。因此，在确定特定的活动是否紧张，或恢复是否受到特定组合物或方法的影响时，对照 研究和客观测量通常优于(在合适时)无对照的证据或自感用力度的测定。术语“锻炼”表示动物从事的或由于某特定目的，例如全身健康、体型勻称、体重控 制、改善健康或体型勻称的特定方面，加强、改善身体技巧或技巧组合，改善功能，伤口复原 等而从事的一类体力活动。锻炼可以定期进行，例如每天一次、每周一次或每周两次。锻炼 频率低于每周一次被认为是“偶然”的锻炼。本文还涉及并包括其他模式的锻炼。术语“与...联合”表示将增强剂，例如用于增强或改善化合物通过肠内转运蛋白 的吸收、转运、摄取或同化的组合物，或者本文所述具有所述效应的食物组合物、药物或其 他化合物或组合物，(1)在食物组合物中一起或( 单独地以相同或不同的频率，使用相同 或不同的施用途径，在大约相同的时间或定时施用至动物。“定时”表示按照特定试剂可接 受的给药日程施用所述试剂，且食物按照对特定动物通常合适的方式进行饲喂。“大约相同 的时间”通常表示用于增强吸收或转运的组合物在与施用或消耗要吸收或转运的底物或化 合物同时或约2小时内施用。“与...联合”尤其包括这样的施用方案，其中如前所述增强 或改善吸收、转运、摄取或同化的增强剂、组合物、食物等在预定的、处方建议的或期望的时 期施用，并且该施用在施用或消耗要吸收或转运的底物或化合物之前、期间或之后确定的 时间窗口内进行，包括定期和长期施用。所述时间窗口优选在要吸收或转运的底物或化合 物的施用或消耗开始前约60-120分钟到完成后约60-120分钟之间。术语“单一包装”表示药盒的成分位于物理相关的一个或多个容器中，被认为是生产、分配、销售或使用的单位。容器包括但不限于袋、盒或纸箱、瓶、任何类型或设计或材料 的包装、大包装、小包装、所附组件(例如钉上、粘附的等)或任何前述组合。例如，单一包 装药盒可提供物理相关的单独组分和/或食物组分的容器，从而认为它们是生产、分配、销 售或使用的单位。单一包装可包含褪黑激素、一种或多种肽或肽模拟物等的容器，其是物理 相关的，从而被认为是生产、分配、销售或使用的单位。术语“虚拟包装”表示药盒的成分伴随一种或多种指导使用者如何获得其他成分 的物理或虚拟的药盒成分的说明书，例如含有一种成分的袋或其他容器以及指导使用者进 入某一网站、接触记录的信息或回传服务、浏览视频信息、或联系指导人员以获得例如如何 使用药盒的说明书，或关于药盒一种或多种成分的安全性或技术信息。可作为虚拟药盒 一部分提供的信息的实例包括使用说明；安全性信息例如物质安全性数据表；毒性控制信 息；可能不良反应的信息；临床研究结果；饮食信息例如食物组分或热组分；体内氨基酸、 肽和/或蛋白质营养、吸收、转运或同化的一般信息；影响体内氨基酸、肽和/或蛋白质营 养、吸收、转运或同化的疾病或病症，包括吸收不良症；治疗肌肉组织损失或保持肌肉重量 的一般信息，包括特定的群体例如工作动物、从事体力锻炼或活动的动物，或老年动物；涉 及氨基酸和蛋白质营养、吸收、转运或同化的自助；用于照顾具有变化或改变的氨基酸和/ 或蛋白质营养需求的动物的看护者信息，提供最佳氨基酸、肽和/或蛋白质营养的要求；增 强或改善体内的蛋白质、肽或氨基酸营养、吸收、转运或同化的药物或肽模拟物化合物的应 用、益处、潜在的副作用或禁忌症；以及在体内通过胃肠道吸收的或通过肠内肽转运蛋白转 运递送的药物或肽模拟物化合物的应用、益处、潜在的副作用或禁忌症。术语“mg/kg”表示毫克每公斤动物体重。除非特别说明，否则本文中表述的所有百分比是基于干物质的组合物重量。本领 域技术人员将理解，术语“基于干物质”表示在除去组合物中任何游离水分后测量或确定成 分的浓度或百分比。在本文中，范围使用速记法，以避免必须详尽地列出和描述该范围中的每一值。该 范围内的任何合适的值均可酌情选择作为范围上限、下限或末端。术语“约”表示给定的值加减10%。因此，“约”使用速记法表示距离所述精确值 的小偏差依然落在本发明的范围内。如本文和所附的权利要求中所用，除非上下文清楚地说明，否则单数形式的词包 括复数，反之亦然。因此，参考语“一种”、“一个”、“该”通常包括复数形式的相应术语。例 如，关于“一条小狗”、“一种方法”或“一种食物”包括复数形式的“小狗”、“方法”或“食物”。 本文中，例如“一种抗氧化剂”包括复数形式的所述抗氧化剂，而“片”包括单独的一片。类 似的，词语“包含”应理解为包含有而非排他性的。同样，术语“包括”和“或”应理解为包括 在内的，除非该组成根据上下文清楚地排除在外。本文所用“例子”或“例如”，尤其是在术 语列表后使用时，仅仅是示范性和说明性的，不应理解为排他性和综合性的。本文公开的方法和组合物以及其他实例并不限于本文所述的具体方法、方案和试 剂，因为它们能以本领域技术人员明白的多种途径变化。此外，本文中使用的术语仅用于描 述特定的实施方案，不意味着限制所公开和要求保护的范围。除非另外定义，所有的技术和科学术语、本领域术语以及本文所用缩写具有本发 明领域或该术语应用领域的技术人员通常所理解的含义。尽管在实施本发明过程中可使用任何类似于或等价于本文所公开的那些组合物、方法、生产环节或其他方式或材料，但优选 的是本文描述的某些组合物、方法、生产环节或其他方式或材料。本文中所有引用或参考的专利、专利申请、出版物、技术和/或学术文章，以及其 他参考文献均整体引入本文作为参考，其程度为适用法律所允许的范围。那些参考文献的 讨论仅意图概述其断言性结论。任何所述专利、专利申请、出版物或参考文献或其任何部分 均未承认是相关材料或现有技术。特别保留质疑所述专利、专利申请、出版物和其他参考文 献的任何断言作为相关材料或现有技术的精确性和适当性的权利。本说明书中未全文引用 的完整引文在说明书末尾列出。本发明本发明提供了可用于增强、改善或增加肽、肽模拟物或其他胃肠道转运蛋白底物 的吸收、转运、摄取和/或同化的组合物和方法，所述转运蛋白例如PTR2家族的寡肽转运蛋 白，如P印Tl。所述组合物和方法在支持和/或改善胃肠道健康、促进动物健康或良好状态、 向吸收不良症动物提供改善的氨基酸营养、递送作为胃肠道转运蛋白底物或经修饰成为所 述转运蛋白底物的药物或前药、以及改善或维持例如老年动物或从事紧张体力活动例如锻 炼的动物中的肌肉重量中具有有益的应用。所述方法和组合物同样可用于任何最佳蛋白质 和/或氨基酸营养或同化促成动物整体健康的情况。一方面，本发明提供了增强肽、肽模拟物或其他胃肠道转运蛋白底物在动物中转 运的方法。所述方法包括施用有效增加通过动物肠内转运蛋白进行的肽转运的量的激素。 在一个优选的实施方案中，所述激素是非肽激素，优选褪黑激素。该激素可使用任何途径施 用，优选口服施用。在一个实施方案中，褪黑激素被制成或加入设计用于动物消耗的食物组 合物中。所述食物组合物可在任何时间饲喂给动物，包括动物正常睡觉时间前。在一个实 施方案中，有效量的褪黑激素足以诱导动物的睡眠或睡意。在另一个实施方案中，褪黑激素 的有效量是不诱导动物睡眠或睡意的量。在不同的实施方案中，食物组合物与药物、前药或 药剂联合施用。药物、前药或药剂的吸收被食物组合物中的褪黑激素或其他激素增强。本发明基于以下令人惊讶的发现褪黑激素能增强、改善或增加肽、肽模拟物和其 他胃肠道转运蛋白底物在动物中的吸收、转运、摄取和/或同化。褪黑激素通过肠内寡肽转 运蛋白增强或增加所述底物的吸收、转运、摄取或同化。这些底物包括但不限于特定药物、 前药和药剂，例如作为动物肠内寡肽转运蛋白底物的抗生素和其他药物或前药。在某些实施方案中，肠内转运蛋白是膜转运蛋白PTR2家族成员。胃肠道寡肽转运 蛋白是本领域公知的。目前优选的是肽转运蛋白1 (PepTl)。褪黑激素可以以任何能有效增强肽、肽模拟物和其他胃肠道转运蛋白在动物中 转运的量施用。在一个实施方案中，施用给动物的褪黑激素量为至少约0. lmg/kg，优选约 0.5mg/kg，最优选lmg/kg。在某些实施方案中，褪黑激素的量可以是2、3、4或5mg/kg。在 其他实施方案中，褪黑激素的量可高达6、7、8、9或甚至10mg/kg或以上。通常，褪黑激素以 约0. 5mg/kg至约50mg/kg的量施用给动物，优选约lmg/kg至约25mg/kg。当在食物组合物 中施用时，可以在动物正常睡觉时间前1-3小时施用褪黑激素。在该实施方案中，褪黑激素 天然诱导睡眠或睡意的能力可通过改善休息、改善营养和改善药剂例如抗生素的吸收/递 送来帮助患病或应激状态的动物恢复更健康的状态。即使在施用胃肠道转运蛋白底物之前口服施用褪黑激素也能增加动物中的底物转运和吸收速率以及总的底物吸收量。此外，某些情况下可在不导致动物困倦或睡眠的情 况下达到该效应，尽管这是褪黑激素公知的功能。因此，在一个实施方案中，褪黑激素的量 不诱导动物睡眠或困倦。本领域技术人员应当了解，当食物组合物作为动物睡醒后的第一 餐，或在动物清醒期间当中服用以不中断或打扰动物的昼夜循环时，所述实施方案更为有 效。对这些实施方案来说，施用的褪黑激素量低于约:3mg/kg，优选低于约lmg/kg。在一个实施方案中，增强的肠内转运通过增加胃肠道转运蛋白的活性来实现。本 领域技术人员将了解，转运蛋白的活性可包括若干方面，其共同限定了底物从肠腔到腔内 侧细胞的转运。因此，肽转运速率、转运蛋白对一种或多种肽的亲和性、或转运蛋白的效率、 或所转运底物的总水平或量中的任意一种或多种在本文中均认为是转运蛋白活性的方面。在一个实施方案中，褪黑激素与一种或多种肽、肽模拟物或其他胃肠道转运蛋白 底物联合施用。在某些实施方案中，所述方法增强了底物的吸收，而在其他情况下肽本身可 以是另一种吸收增强剂，例如刺激通过肠内转运蛋白转运的肽。当所述肽、肽模拟物或底物提供营养或药剂时，所述方法是非常有效的。在某些情 况下，所述肽模拟物是药剂，例如抗生素或其他药物。当昂贵或救命的药物由于难以吸收而 无法安全地进入患者体内时，这些方法尤其有效。当所述肽、肽模拟物或底物是营养物时，该方法对吸收不良症动物尤其有效。营养 紊乱或胃肠道疾病领域的技术人员应当了解多种所述病症是已知的。向受吸收不良症困扰 的动物定期提供适量营养是非常复杂的。在某些实施方案中，褪黑激素与一种或多种兴奋剂诸如咖啡因、烟碱、麻黄碱、苯 丙胺、安帕金等联合施用。这些实施方案可能在以下情况时最为有效重要的是动物不经历 嗜睡，或者动物需要更大剂量的褪黑激素以便从增强吸收中充分获益。在不同的实施方案中，动物是人类；非人类例如奶牛、马或猪，或伴侣动物例如狗 或猫。另一方面，本发明提供了包含褪黑激素和一种或多种肽、肽模拟物以及其他胃肠 道转运蛋白底物的组合物。在一个实施方案中，至少一种肽、肽模拟物或底物在动物胃肠道 中通过肠内肽转运蛋白转运，其活性被褪黑激素增强、增加或改善。所述组合物优选是适于 口服的可食用组合物。在一个实施方案中，褪黑激素和底物(例如肽和/或肽模拟物)被 合并成单剂型，例如丸剂或胶囊。在另一个实施方案中，褪黑激素和底物是控释或定时释放 的制剂。在一个实施方案中，至少一种肽模拟物包含β内酰胺环。在优选的实施方案中， 所述肽模拟物包括青霉素、头孢菌素、单酰胺菌素、碳青霉烯、内酰胺酶抑制剂，上述的 任何一种的衍生物或盐，或其任意组合。在另一个实施方案中，所述肽模拟物包括抗生素、 抗高血压剂或抗病毒药或前药。另一方面，本发明提供了减少对抗抗生素敏感型微生物所需要的抗生素用量的方 法，例如预防或治疗感染、疾病或其他通常适用抗生素的医学病症。所述方法包括口服施 用一种或多种抗生素，其与有效增强所述抗生素的胃肠道转运蛋白转运的量的褪黑激素联 合。褪黑激素增加了给定时间内通过胃肠道转运蛋白转运到动物体内的抗生素的量，从而 减少了需要施用给动物以产生效果(例如对抗感染)的抗生素的量。使用更少的抗生素降 低了需要对抗微生物的抗生素的成本，并且减少了抗生素施用带来的任何不良副作用。此外，使用较少的抗生素减少了形成抗生素抗性的微生物的风险。基本上，若抗生素与褪黑激 素联合施用，使用较少的抗生素即可获得同样的效果。另一方面，本发明提供了提高给定量或剂量的抗生素施用到动物中来对抗抗生素 敏感型微生物的效率的方法。所述方法包括施用一种或多种抗生素，其与有效增强所述抗 生素的胃肠道转运蛋白转运的量的褪黑激素联合。褪黑激素增加了给定时间内通过胃肠道 转运蛋白转运到动物体内的抗生素的量。其通过使更多的抗生素进入动物体内杀灭微生物 而提高了效率。提高给定量的抗生素的效率意味着由抗生素敏感型微生物引起的感染、疾 病或其他病症对动物产生的不良反应更少。因此，具有同样感染的两只动物将以不同速率 康复并具有不同的症状。施用抗生素和褪黑激素的动物将比仅施用抗生素的动物在更短的 时间内从感染中恢复。类似的，施用抗生素和褪黑激素的动物将比仅施用抗生素的动物具 有更少的不良反应，例如更少的发热、寒冷、恶心、呕吐、抽筋、疼痛、疲劳、不适或其他具体 感染或疾病特征性的症状。此外，更有效的抗生素也减少了感染或疾病的其他并发症的风 险，例如败血症。基本上，若抗生素与褪黑激素联合施用，相同量的抗生素可获得更好的结果。另一方面，本发明提供了减少由抗生素敏感型微生物引起的感染或疾病产生并发 症的可能性的方法。所述方法包括施用一种或多种抗生素，其与有效增强所述抗生素的胃 肠道转运蛋白转运的量的褪黑激素联合。当褪黑激素与抗生素联合施用时，更多的抗生素 被转运到体内以对抗微生物，若单独施用抗生素的话其可能会侵入体内。该额外的量能对 抗微生物并减少微生物引发并发症例如败血症或慢性病的可能性。另一方面，本发明提供了降低发展成抗生素抗性的微生物的风险的方法。所述方 法包括口服施用一种或多种抗生素，其与有效增强所述抗生素的胃肠道转运蛋白转运的量 的褪黑激素联合。褪黑激素增加了通过胃肠道转运蛋白转运到动物体内的抗生素的量，由 此减少了达到其效果所需要的抗生素的量，即降低了需要的剂量。当与褪黑激素联合施用 时，可减少施用给动物以达到需要效果的量和/或可降低施用的频率。基本上，由于增强了 胃肠道转运蛋白对抗生素的转运，在给定的时间内更多的抗生素被肠道吸收，因此治疗感 染或其他需要抗生素的病症所需要的抗生素更少。使用更少的抗生素总体上使进入环境的 抗生素更少，降低了发展成抗生素抗性的微生物的几率，尤其是感染性微生物例如金黄色 葡萄球菌或屎肠球菌。当与抗生素联合施用时，褪黑激素以适合于使抗生素从动物肠道内到血流中的吸 收增加的量施用。一般而言，褪黑激素以至少约0. lmg/kg的量施用，优选约0. 5mg/kg，最优 选lmg/kg。通常，褪黑激素施用至动物中的量为约0. 5mg/kg至约50mg/kg，优选约lmg/kg 至约25mg/kg。抗生素是任何可用于预防或治疗由受所述抗生素影响的微生物引起的疾病 或病症的抗生素。在多种实施方案中，所述抗生素是青霉素、头孢菌素、单酰胺菌素、碳青霉 烯、β -内酰胺酶抑制剂，上述的任何一种的衍生物或盐，或其任意组合。另一方面，本发明提供了改善P印Tl底物在动物胃肠道内吸收的方法。所述方法 包括向动物施用能有效改善PepTl底物吸收的褪黑激素。在一个实施方案中，所述褪黑激 素的量不足以诱导动物睡眠或困倦。当褪黑激素的量不足以诱导动物睡眠或困倦时，所述 方法优选在动物正常睡眠期内约1、2或3小时进行，以便任何诱导的睡眠或困倦将自然引 起动物的正常昏睡或睡眠期，从而基本上不破坏动物原有的昼夜周期。在另一个实施方案中，作为所述方法对象的其吸收得到改善的P印Tl底物是二肽、三肽或此前所定义的肽模 拟物。在多个实施方案中，所述P印Tl底物包含色氨酸、谷氨酰胺、精氨酸、或支链氨基酸残 基。在支链氨基酸中有时优选缬氨酸。在一个优选的实施方案中，所述方法还包括联合施 用褪黑激素和至少一种PepTl底物。在多个实施方案中，要改善或增强吸收的PepTl底物可用于任何与动物健康或保 健有关的特别的或一般性的病症。在一个实施方案中，PepTl底物可用于在老年动物中促 进最佳的蛋白质/肽/氨基酸营养、吸收或同化。这样的实施方案可用于维持肌肉组织，建 立肌肉重量或逆转或减缓老龄对肌肉蛋白的代谢结果。在另一个实施方案中，PepTl底物 有助于在吸收不良症动物中促进最佳的蛋白质/肽/氨基酸营养、吸收或同化。在某些实 施方案中，褪黑激素以一个或多个剂量口服施用。所述一个或多个剂量优选与P印Tl底物 联合提供。在某些实施方案中，褪黑激素优选存在于动物正常睡眠时间前消耗的食物中。所 述实施方案倾向于使用更大剂量或更多量的褪黑激素，这样褪黑激素可诱导动物的困倦、 朦胧状态或甚至深睡眠。在一个实施方案中，褪黑激素的量在约1至10mg/kg之间。所述 实施方案更优选5-10mg/kg。lmg/kg或更少的褪黑激素优选用于不需要诱导睡眠或困倦的 实施方案。所述方法和组合物也可与一种或多种兴奋剂联合使用/施用以克服敏感动物中 可能的困倦效应。因此，本文可适合使用咖啡因或类似的兴奋剂。另一方面，本发明提供了改善肽模拟物在动物中吸收的方法。所述方法尤其可用 于改善某些药物和前药在体内的递送、吸收或应用。所述方法包括在动物中联合施用以一 个或多个剂量的有效改善肽模拟物吸收的量的褪黑激素和所述肽模拟物。步骤可按任何顺 序进行。在优选的实施方案中，施用褪黑激素的量不引起动物的睡眠或困倦。在优选的实施方案中，所述褪黑激素以一个或多个剂量口服施用。本方法的一个 优点是口服施用诸如褪黑激素或其前体的化合物提供了改善递送、吸收、转运或摄取的安 全、经济、有效和简单的途径，从而通过使更多的活性成分最终到达动物细胞和/或循环系 统来改善给定剂量或量的某些药物的效果。因此，在某些实施方案中，在施用肽模拟物之前 或与之联合施用至少一种所述一个或多个剂量。在多个实施方案中，肽模拟物包括抗生素或其他药物或前药。本文中，包含β -内 酰胺环的肽模拟物是有效的。含有内酰胺环的抗生素是尤其有效的。例如，青霉素、头 孢菌素、单酰胺菌素、碳青霉烯、内酰胺酶抑制剂，上述的任何一种的衍生物或盐，或其 任意组合。在其他实施方案中，肽模拟物是氨基酸修饰物，例如药物或前药的氨基酸酯。本领 域技术人员将理解，某些药物或某类药物是寡肽或含有某种肽或肽样结构。已知许多此类 化合物是肠内肽转运蛋白的底物。其他药物可被修饰，例如通过制成在体内转化成活性药 物的前药。在某些情况下，所述药物前药是或含有足以作为肠内转运蛋白底物的结构。在 其他情况下，酯化氨基酸足以提供作为肠内寡肽转运蛋白底物的性质。目前，除前文讨论的 抗生素外，本文中公开的方法优选使用抗高血压药和抗病毒药。在又一方面，本发明提供了提高食物组合物在体内营养价值的方法。所述方法包 括向动物联合施用食物组合物与足以增强食物或其天然消化产物中存在的一种或多种二 肽或三肽在动物中的吸收的量的褪黑激素。15
在一个实施方案中，所述方法适合于动物从改善的蛋白质营养或氨基酸同化中获 益的情况。在某些实施方案中，动物是工作动物，或从事紧张体力活动或锻炼的动物。在另 一个实施方案中，所述动物是老年动物。在另一个实施方案中，所述动物具有吸收不良症。 在其他实施方案中，动物正经历来自疾病的应激。在某些实施方案中，该方法采用不诱导睡眠或困倦的量的褪黑激素进行，例如不 超过约lmg/kg的剂量或量。在其他实施方案中，褪黑激素的量可诱导睡眠或困倦，并且褪 黑激素在动物正常睡眠时间前约1、2或3小时内施用，或在基本上不破坏动物昼夜循环的 任何时间施用。在另一方面，本发明提供了适合于改善底物通过胃肠道转运蛋白转运的药盒。所 述药盒在单个包装或虚拟包装中的分开的容器中包含适当的药盒成分，褪黑激素和至少一 种其他下列成分(1)肽模拟物；(2) 二肽或三肽；(3)寡肽；(4)药物或前药的氨基酸酯； (5)另一种胃肠道转运蛋白底物；(6)另一种适于动物消耗的成分，以及(7)使用褪黑激素 和所述至少一种其他成分改善底物通过胃肠道转运蛋白在动物中转运的说明书或其他信 肩、ο在一个实施方案中，所述说明书指出可以通过基本上不破坏或干扰动物的昼夜循 环的方式使用该药盒。在一个实施方案中，所述说明书教导使用者如何以不诱导动物睡眠 或困倦的方式使用药盒。例如，说明书可指出为避免困倦，动物不应接受超过特定剂量或量 的褪黑激素，例如约lmg/kg褪黑激素。在另一个实施方案中，至少一部分的说明书或其他 信息以虚拟方式提供。在另一方面，本发明提供了交流关于一种或多种下列信息或其使用说明的手段 (a)增强肽在动物中转运的方法；(b)改善PepTl底物在动物胃肠道内吸收的方法；(c)改 善肽模拟物在动物中吸收的方法；(d)增强食物在体内的营养价值的方法；(e)包含褪黑激 素和一种或多种肽、肽模拟物和其他胃肠道转运蛋白底物的组合物；(f)包含实施所述方 法所需要的成分的药盒，或(g)制备或使用本文公开的方法、组合物或药盒。在一个实施方案中，上述手段包括网站、视觉显示的报栏(visual display kiosk)、印刷品、小册子、产品标签、包装说明书、广告、分发的印刷品、公告、录音带、录像 带、DVD、⑶-ROM、计算机可读芯片、计算机可读卡、计算机可读磁盘、计算机内存或其组合。在另一方面，本发明提供了包含标签装置的包装，其指明可使用褪黑激素增强肽、 肽模拟物或其他胃肠道转运蛋白底物的吸收。在多个实施方案中所述底物是P印Tl底物， 包括二肽和三肽；肽模拟物，包括药物或前药的氨基酸酯；抗生素；以及其组合。标签可以 是任何字或词，图片、设计、缩略语、标语、短语或其他装置或其组合，表明褪黑激素可用于 增强P印Tl底物的吸收。通常，所述装置包括打印在包装上的“增强抗生素吸收”或“增强 肽吸收”或等价的表述。任何适于包含褪黑激素的包装或包装材料均可用于本发明，例如由 纸、塑料、箔、金属等制备的袋、盒、瓶、罐、囊等。在一个优选的实施方案中，所述包装含有包 含褪黑激素的食物组合物，优选人或伴侣动物的食物组合物。另一方面，本发明提供了促进动物健康和/或保健的方法。所述方法包括向动物 施用促进健康或保健量的褪黑激素和一种或多种肽、肽模拟物或其他胃肠道转运蛋白底 物。褪黑激素和底物可通过任何适当的方式施用，优选口服，更优选在食物组合物中口服。 褪黑激素和底物可以单剂型施用或联合施用。施用的褪黑激素量为至少约0. lmg/kg，优选约0. 5mg/kg,最优选lmg/kg。通常，褪黑激素以约0. lmg/kg至约50mg/kg的量施用给动物， 优选约lmg/kg至约25mg/kg。另一方面，本发明提供了促进动物健康和/或保健的方法。所述方法包括向动物 施用促进健康或保健量的褪黑激素和一种或多种肽、肽模拟物或其他胃肠道转运蛋白底 物。褪黑激素增加了动物对这些底物的吸收。动物利用这些底物促进动物的保健，例如治 疗疾病(抗生素)和获得瘦体重(肽)。另一方面，本发明提供了增加动物瘦体重的方法。所述方法包括向动物施用褪黑 激素和能有效使动物获得瘦体重的肽、肽模拟物或其他胃肠道转运蛋白底物，例如二肽和 三肽。这些底物可以是食品添加物、单个化合物或可由动物通过食物组合物或其消化物获得。另一方面，本发明提供了包括褪黑激素和至少一种以下成分的组合物的药物(1) 肽模拟物；(2) 二肽或三肽；(3)寡肽；(4)药物或前药的氨基酸酯；或( 另一种胃肠道转 运蛋白底物。所述药物使用制备药物组合物的标准方法制备。所述药物使用可药用的赋形 剂、稀释剂、载体、填充剂、盐等制备。在多个实施方案中，所述药物包括包含褪黑激素和肽模拟物的组合物，所述肽模 拟物是抗生素、抗高血压剂或抗病毒剂。在另一个实施方案中，肽模拟物包括内酰胺 环，可以是青霉素、头孢菌素、单酰胺菌素、碳青霉烯、β -内酰胺酶抑制剂，上述的任何一种 的衍生物或盐，或其任意组合。在一个实施方案中，所述药物包括褪黑激素和内酰胺抗生素。在本发明的所有方面，所述肽、肽模拟物和其他胃肠道转运蛋白底物以适合于适 当的肽、肽模拟物或底物及其预期目的的量施用给动物。所述量是本领域技术人员能够确 定的。类似的，本领域技术人员基于本领域的知识和本文公开的内容能够确定要施用的褪黑激素的量。这些和本发明的其他方面可通过下列实施例进一步说明。应当理解，这些实施例 仅被提供用于说明具体方面的目的，因此，除非另外具体说明，否则它们就整体而言不限制 本发明的范围。实施例实施例1进行研究以评价5-甲氧基-N-乙酰基色胺(实施例中为褪黑激素)改善小肽和 /或肽模拟物的吸收的能力。方法研究设计为测定褪黑激素对头孢氨苄吸收的作用。将狗(n = 24,体重(BW) 范围7-14kg，年龄范围1. 5-14岁)分成试验组和对照组。各组进行性别平衡。试验组在12:00pm接受单剂量的褪黑激素(lmg/kg Bff)，随后在1 00-2 OOpm接 受单剂量的头孢氨苄(15mg/kg BW)。褪黑激素和头孢氨苄给药均通过狗的口服投药进 行。研究通过测定施用褪黑激素后血清中头孢氨苄出现的药代动力学来评价头孢氨苄的 吸收。对照组与试验组同时接受头孢氨苄，但未接受口服褪黑激素。在口服给药头孢氨苄 后第15、30、45和60分钟，以及1. 5、2、2. 5、3、3. 5、4、6和8小时后取样进行药代动力学分 析。通过高压液相色谱测定头孢氨苄浓度。在口服施用时间前后，例如在口服给药褪黑激17素前-5、-3、-1、-0· 5小时，0 (给药时间)和给药0. 5、1、2、3、4和6小时后分析血清中褪黑 激素的浓度。通过放射免疫测定法量化褪黑激素。结果如表1、2、3所示。根据表1、2、3，数据显示口服施用褪黑激素增加了头孢氨苄的吸收。表1显示了 头孢氨苄的药代动力学数据。数据显示了给药后时间(h)头孢氨苄在狗血清中的出现和消 除。各时间点的平均血浓度数据分析表明，从给药后2. Oh到他的所有时间点的数值均具 有统计学差异(P <0.05)。药代动力学数据被用于计算出现速率和峰高，如表2所示，其 用于差异分析。接受褪黑激素组的头孢氨苄计算值比未接受褪黑激素的组峰高高8. 8% (P =0. 05 ；表2、。基于表1中所示平均药代动力学浓度数据，接受褪黑激素补充的狗在给药 后2小时(峰值时间)的头孢氨苄浓度高19%。此外，接受褪黑激素的狗的总吸收量(根 据总曲线下面积测定)增加了 10. 6% (P = O. 03)。从表3中可以看出，在摄入褪黑激素的狗中，摄入后直到6小时血清中褪黑激素的 出现显著增加，未施用褪黑激素的对照组狗具有基线水平。表3中还列出了各处理组的标 准误差(SE)。表 1头孢氨苄药代动力学数据接受或未接受口服褪黑激素处理的狗在口服给药头孢 氨苄后的头孢氨苄血清浓度(yg/mL)
权利要求
1.一种增强肽、肽模拟物和其他胃肠道转运蛋白底物在动物中转运的方法，包括施用 有效增强肽、肽模拟物或底物通过动物肠内转运蛋白进行转运的量的褪黑激素。
2.权利要求1的方法，其中所述褪黑激素与肽、肽模拟物或底物联合施用。
3.权利要求1的方法，其中褪黑激素在食物组合物中施用。
4.权利要求3的方法，其中所述食物组合物与肽、肽模拟物或底物联合施用。
5.权利要求1的方法，其中施用的褪黑激素量为至少约0.lmg/kg。
6.权利要求1的方法，其中施用的褪黑激素量为约0.lmg/kg至约50/mg/kg。
7.权利要求1的方法，其中肠内转运蛋白是膜转运蛋白PTR2家族的成员。
8.权利要求1的方法，其中肠内转运蛋白是肽转运蛋白1(P印Tl)。
9.权利要求1的方法，其中肽、肽模拟物或底物是营养物或药物。
10.权利要求9的方法，其中所述药物是抗生素。
11.权利要求1的方法，其中所述动物具有吸收不良症。
12.权利要求1的方法，其中褪黑激素与一种或多种兴奋剂联合施用。
13.权利要求1的方法，其中所述动物是伴侣动物。
14.包含褪黑激素和一种或多种肽、肽模拟物或其他胃肠道转运蛋白底物的组合物。
15.权利要求14的组合物，其包含至少一种含有β-内酰胺环的肽模拟物。
16.权利要求15的组合物，其中所述肽模拟物包括青霉素、头孢菌素、单酰胺菌素、碳 青霉烯、内酰胺酶抑制剂，上述的任何一种的衍生物或盐，或其任意组合。
17.权利要求14的组合物，其中所述肽模拟物包括抗生素、抗高血压剂或抗病毒剂或 前药。
18.减少对抗抗生素敏感型微生物所需要的抗生素量的方法，包括口服施用一种或多 种抗生素，其与有效增强所述抗生素的胃肠道转运蛋白转运的量的褪黑激素联合。
19.权利要求18的方法，其中褪黑激素的施用量至少为约0.lmg/kg。
20.权利要求18的方法，其中所述抗生素是青霉素、头孢菌素、单酰胺菌素、碳青霉烯、 β -内酰胺酶抑制剂，上述的任何一种的衍生物或盐，或其任意组合。
21.减少发展成抗生素抗性微生物风险的方法，包括口服施用一种或多种抗生素，其与 有效增强所述抗生素的胃肠道转运蛋白转运的量的褪黑激素联合。
22.权利要求21的方法，其中褪黑激素的施用量至少为约0.lmg/kg。
23.权利要求21的方法，其中所述抗生素是青霉素、头孢菌素、单酰胺菌素、碳青霉烯、 β -内酰胺酶抑制剂，上述的任何一种的衍生物或盐，或其任意组合。
24.改善P印Tl底物在动物胃肠道中吸收的方法，包括向动物施用有效改善P印Tl底物 吸收的量的褪黑激素。
25.权利要求对的方法，其中褪黑激素的量不诱导动物睡眠或困倦。
26.权利要求对的方法，其中所述P印Tl底物是二肽、三肽或肽模拟物。
27.权利要求M的方法，其中所述P印Tl底物包括色氨酸、谷氨酰胺、精氨酸或支链氨 基酸残基。
28.权利要求M的方法，其中施用步骤包括施用至少一种PepTl底物。
29.权利要求M的方法，其中PepTl底物用于促进老年动物的最佳营养。
30.权利要求对的方法，其中所述动物具有吸收不良症。
31.权利要求M的方法，其中褪黑激素以一个或多个剂量提供，其与PepTl底物联合口 服施用。
32.权利要求对的方法，其中褪黑激素存在于食物中，配制为在动物正常睡眠时间前 消耗。
33.改善肽模拟物在动物中吸收的方法，包括向动物联合施用有效改善所述肽模拟物 的吸收的量的褪黑激素和所述肽模拟物。
34.权利要求33的方法，其中褪黑激素的施用量不诱导动物睡眠或困倦。
35.权利要求34的方法，其中褪黑激素以一个或多个剂量口服施用。
36.权利要求35的方法，其中褪黑激素的总剂量低于约:3mg/kg。
37.权利要求33的方法，其中所述肽模拟物是抗生素。
38.权利要求33的方法，其中所述肽模拟物含有β-内酰胺环。
39.权利要求33的方法，其中所述肽模拟物是青霉素、头孢菌素、单酰胺菌素、碳青霉 烯、β -内酰胺酶抑制剂，上述的任何一种的衍生物或盐，或其任意组合。
40.增强食物组合物的体内营养价值的方法，所述方法包括向动物联合施用食物组合 物与足以增强食物或其天然消化产物中存在的一种或多种二肽或三肽的吸收的量的褪黑 激素。
41.权利要求40的方法，其中所述动物将从改善的蛋白质营养或氨基酸同化中获益。
42.权利要求41的方法，其中所述动物具有吸收不良症。
43.权利要求41的方法，其中所述动物正经历来自疾病的应激。
44.权利要求41的方法，其中所述动物是工作的动物或从事锻炼的伴侣动物。
45.权利要求41的方法，其中褪黑激素的量不诱导睡眠或困倦。
46.权利要求45的方法，其中褪黑激素的剂量为约lmg/kg。
47.权利要求41的方法，其中褪黑激素的量可诱导睡眠或困倦，且褪黑激素在动物正 常睡眠时间前约3小时内施用。
48.适合于改善底物通过胃肠道转运蛋白转运的药盒，其在单个包装或虚拟包装中的 分开的容器中包含褪黑激素和至少一种其他下列成分⑴肽模拟物；⑵二肽或三肽；⑶ 寡肽；(4)药物或前药的氨基酸酯；( 另一种胃肠道转运蛋白底物；(6)另一种适合于动 物消耗的成分，以及(7)使用褪黑激素和所述至少一种其他成分改善底物通过胃肠道转运 蛋白在动物中转运的说明书或其他信息。
49.权利要求48的药盒，其中说明书指出所述药盒可以以诱导动物睡眠或困倦的方式 使用。
50.权利要求49的药盒，其中说明书指出动物不应接受超过约:3mg/kg的褪黑激素。
51.权利要求48的药盒，其中至少一部分的说明书或其他信息以虚拟方式提供。
52.交流关于一种或多种下列信息或其使用说明的手段(a)增强肽在动物中转运的 方法；(b)改善PepTl底物在动物胃肠道内吸收的方法；(c)改善肽模拟物在动物中吸收的 方法；(d)增强食物的体内营养价值的方法；(e)包含褪黑激素和一种或多种肽、肽模拟物 或者药物或前药的氨基酸酯的组合物；(f)包含实施所述方法所需要的成分的药盒，或(g) 制备或使用组合物或药盒。
53.权利要求52的手段，包括网站、视觉显示的报栏、印刷品、小册子、产品标签、包装说明书、广告、分发的印刷品、公告、录音带、录像带、DVD、CD-ROM、计算机可读芯片、计算机 可读卡、计算机可读磁盘、计算机内存或其组合。
54.包含标签装置的包装，其指明可使用褪黑激素来增强肽、肽模拟物或其他胃肠道转 运蛋白底物的吸收。
55.权利要求M的包装，其中所述底物是一种或多种二肽和三肽、抗生素、药物或前药 的氨基酸酯及其组合。
56.促进动物健康或保健的方法，包括向动物施用促进健康或保健的量的褪黑激素和 一种或多种肽、肽模拟物或其他胃肠道转运蛋白底物。
57.权利要求56的方法，其中褪黑激素与所述肽、肽模拟物或底物联合施用。
58.包含褪黑激素和至少一种下述成分的组合物在制备药物中的用途(1)肽模拟物； (2) 二肽或三肽；C3)寡肽；(4)药物或前药的氨基酸酯；或( 另一种胃肠道转运蛋白底 物。
59.权利要求58的用途，其中所述组合物包含褪黑激素和抗生素。
60.权利要求58的用途，其中所述组合物包含褪黑激素和含有内酰胺环的肽模拟物。
61.提高给定量的抗生素施用到动物中来对抗抗生素敏感型微生物的效率的方法，包 括口服施用一种或多种抗生素，其与有效增强所述抗生素的胃肠道转运蛋白转运的量的褪 黑激素联合。
62.权利要求61的方法，其中褪黑激素以至少约0.lmg/kg的量施用。
63.权利要求61的方法，其中所述抗生素是青霉素、头孢菌素、单酰胺菌素、碳青霉烯、 β -内酰胺酶抑制剂，上述的任何一种的衍生物或盐，或其任意组合。
64.减少由抗生素敏感型微生物引起的感染或疾病产生并发症的可能性的方法，包括 口服施用一种或多种抗生素，其与有效增强所述抗生素的胃肠道转运蛋白转运的量的褪黑 激素联合。
65.权利要求65的方法，其中褪黑激素以至少约0.lmg/kg的量施用。
66.权利要求65的方法，其中所述抗生素是青霉素、头孢菌素、单酰胺菌素、碳青霉烯、 β -内酰胺酶抑制剂，上述的任何一种的衍生物或盐，或其任意组合。
全文摘要
提供了用于增强肽、肽模拟物和其他胃肠道转运蛋白底物通过胃肠道转运蛋白的吸收和/或转运的方法和组合物。所述方法包括使用激素例如褪黑激素来增加肽、肽模拟物和底物的转运。所述组合物包括一种或多种激素和一种或多种肽、肽模拟物以及其他胃肠道转运蛋白底物。
文档编号A61K31/405GK102046169SQ200980119444
公开日2011年5月4日 申请日期2009年3月26日 优先权日2008年3月27日
发明者B·M·赞吉 申请人:雀巢产品技术援助有限公司
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