刺激毛发生长的制剂的制作方法
专利名称：刺激毛发生长的制剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种用来传递下列化合物的局部制剂6-[[(3S，4R)-3，4-二氢-3-羟基-6-[(3-羟基苯基)磺酰基]-2，2，3-三甲基-2H-1-苯并吡喃-4-基]氧基]-2-甲基-3(2H)-哒嗪酮。这些制剂可用来促进毛发生长。
背景技术：
美国专利案号5,912,244揭示出一种化合物6-[[(3S，4R)-3，4-二氢-3-羟基-6-[(3-羟基苯基)磺酰基]-2，2，3-三甲基-2H-1-苯并吡喃-4-基]氧基]-2-甲基-3(2H)-哒嗪酮(于此之后称为″该化合物″)、其制备方法及其作为钾通道开放剂的用途。
2004年2月12日所提出的共审查中、共同让予的美国专利申请案序号60/544,116揭示出该化合物可用于促进人类毛发生长的局部应用。动物研究已显露出该化合物可通过引发毛发生长期来改变毛发生长循环。毛发生长期为一生长阶段，在此期间毛囊(即，发根)会深深穿入真皮且毛囊细胞会快速分裂及分化。在该毛发生长阶段期间，毛发细胞会合成角质(毛发的占支配的蛋白质组分)。在非秃头的人类中，毛发生长期会持续一至五年。过渡期为该循环的转变阶段，其特征为细胞有丝分裂终止。过渡期通常会持续约二至三周。毛发生长静止期为该循环的休息阶段，其中毛发会保留在头皮内最高达12周，直到其由头皮下所生长出的新毛囊取代。在健康的年轻人类中，大部分的毛囊都在毛发生长阶段。在这类个体中，毛发生长对毛发生长静止的比率可高达9∶1。在具有秃发的个体中，此比率会降低至2∶1。
皮肤主要由三层组成表皮、真皮及皮下脂肪层。表皮包含角质层及能生长的表皮。角质层(表皮的最外层)主要由角质化的死细胞所构成。其为外部涂布物质渗透过皮肤的主要障碍。真皮由结缔组织的基质组成，其由血管、神经及皮肤附件穿透。毛囊(其为毛发生长期开始处)位于真皮层的深处。第I图阐明这三层及毛囊在皮肤中的相对位置。
为了起始化毛发生长期，该化合物必需能穿透过角质层、能生长的表皮，更是需通过(若非全部的话)真皮以到达毛囊。预计本制剂将提高该化合物渗透过角质层进入真皮及最后到达毛囊的比率，以提高该化合物的活性。
发明概要根据本发明，已提供一种可提高6-[[(3S，4R)-3，4-二氢-3-羟基-6-[(3-羟基苯基)磺酰基]-2，2，3-三甲基-2H-1-苯并吡喃-4-基]氧基]-2-甲基-3(2H)-哒嗪酮的传递的局部制剂。此制剂可增加该化合物被皮肤吸收。提供此制剂可增加该化合物在真皮中的浓度。预计所提高的这些浓度应该可通过提高毛发的生长速率而对秃发提供更有效的治疗。
本发明涉及一种局部制剂，其包括(a)该化合物；(b)一皮肤可接受的载体；及(c)该制剂表现出的该化合物其穿过死人尸体皮肤进入法兰次(Franz)扩散槽的接收腔的流通量，比参考制剂(即70％乙醇/30％丙二醇w/w)的流通量高至少三倍。
该局部制剂可为水性、醇或水-醇溶液形式；或其可为乳膏、凝胶、乳液或摩丝(mousses)形式；或再者，其也可为一包含一在加压下的推进剂的气溶胶组合物形式。根据本发明的组合物也可为一毛发护理组合物，特别是洗发精、发雕露、治疗洗剂、造型乳膏或发胶、染料组合物、防止脱发用的洗剂或凝胶等等。
该化合物存在于该局部制剂中的量可变化，只要其足以促进毛发生长(即有效量)。该化合物的典型存在量约0.001至约10％(w/w)。其典型可每日给药1至4次或较不频繁(例如一周一次)。
该制剂典型可使用来减轻秃发，特别是雄性秃。在进一步具体实施方案中，本发明涉及一种制造的物品，该物品包含该局部制剂、零售销售用的包装、且其结合可告知消费者如何使用该产品来促进毛发生长的用法说明(即一成套用具)。
图式简单说明第I图描绘出皮肤结构。
第II图描绘出法兰次扩散槽装置。
第III图描绘出流通量计算。
发明的详细说明A)化合物如上述提及，本发明的全部制剂都包含化合物6-[[(3S，4R)-3，4-二氢-3-羟基-6-((3-羟基苯基)磺酰基]-2，2，3-三甲基-2H-1-苯并吡喃-4-基]氧基]-2-甲基-3(2H)-哒嗪酮，其结构描绘在下列 此化合物也通常指为(3S，4R)-[6-(3-羟基苯基)磺酰基]-2，2，3-三甲基-4-(2-甲基-3-氧代-2，3-二氢哒嗪-6-基-氧基)-3-色原烷醇及(3S，4R)-3，4-二氢-4-(2，3-二氢-2-甲基-3-氧代哒嗪-6-基)氧基-3-羟基-6-(3-羟基苯基)磺酰基-2，2，3-三甲基-2H-苯并[b]吡喃)。美国专利案号5,912,244的实施例7揭示出该化合物的制造方法。
″本发明的化合物″及″该化合物″可交替使用且应该视为同义字。其每种都指为6-[[(3S，4R)-3，4-二氢-3-羟基-6-[(3-羟基苯基)磺酰基]-2，2，3-三甲基-2H-1-苯并吡喃-4-基]氧基]-2-甲基-3(2H)-哒嗪酮。额外的是，名称″该化合物″于全部时刻都应该了解为包括6-[[(3S，4R)-3，4-二氢-3-羟基-6-[(3-羟基苯基)磺酰基]-2，2，3-三甲基-2H-1-苯并吡喃-4-基]氧基]-2-甲基-3(2H)-哒嗪酮的全部活性形式，其包括例如其自由态形式，例如，自由态酸或碱；及也包括全部的多形体、水合物、溶剂化物、互变体、立体异构体(例如，非对映异构体及对映异构体)及其类似物；及全部药学上可接受的盐类；及此物理形式的混合物，除非其另外有特别描述。
B)定义如遍及此申请案(包括权利要求)所使用，下列名称具有下列所定义的意义，除非其它方面有特别指出。复数及单数应该视为可交替使用，除非有指示出特定数目。
a.″参考溶液″指为一包含预定浓度的该化合物(参见节D的浓度)的局部制剂，该化合物溶解在由70％乙醇/30％丙二醇w/w所组成的溶液中。
b.″哺乳动物″包括人类、灵长类动物(诸如短尾猕猴)、陪伴动物(诸如狗、猫、沙鼠等等)及家畜(诸如牛、猪、马、驼羊及羊)。
c.″促进毛发生长″包括刺激总毛发质量及/或长度增加。此增加包括毛干(即毛囊)的长度及/或生长速率增加、毛发的数量增加及/或毛发的厚度(从毫毛至全层毛发)增加。上述的最后结果某些或全部可通过延长或活化毛发循环的毛发生长期、生长阶段；或通过缩短或延迟过渡期及毛发生长静止阶段而达成。″促进毛发生长″也应该考虑包括防止、遏制、减少、延迟及/或逆转脱发。
d.″秃发″，如使用于本文包括部分或完全秃头、脱发及/或掉发。
e.″治疗或减轻秃发″指为促进已经历或视为会有经历秃发风险的哺乳动物的毛发生长。
f.″药学上可接受″意谓着合适于使用在哺乳动物中或上。
g.″皮肤可接受″指为一可涂布至皮肤或毛发的物质，其包括最后制剂。
h.″药学上可接受的盐″意欲指为″药学上可接受的酸加成盐″或″药学上可接受的碱加成盐″。
i.″药学上可接受的酸加成盐″意欲适用至任何由式I所表示的基础化合物或其任何中间体的无毒的有机或无机酸加成盐。可形成合适的盐类的作为例证的无机酸包括氢氯酸、氢溴酸、硫酸及磷酸；及酸金属盐，诸如正磷酸单氢钠及硫酸氢钾。可形成合适的盐类的作为例证的有机酸包括单、二及三羧酸。此酸的例证有例如醋酸、羟基乙酸、乳酸、丙酮酸、丙二酸、琥珀酸、戊二酸、反丁烯二酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、马来酸、羟马来酸、苯甲酸、羟基苯甲酸、苯基醋酸、肉桂酸、水杨酸、2-苯氧基苯甲酸、对-甲苯磺酸及磺酸类(诸如甲烷磺酸及2-羟基乙烷磺酸)。此盐类可以水合或实质上无水的形式存在。这些化合物的酸加成盐通常可溶于水及多种亲水性有机溶剂中。
j.″药学上可接受的碱加成盐″意欲适用至任何由式I所表示的化合物或其任何中间体的无毒的有机或无机碱加成盐。可形成合适的盐类的作为例证的碱包括碱金属或碱土金属氢氧化物，诸如氢氧化钠、钾、钙、镁或钡；氨；及脂肪族、脂环族或芳香族有机胺，诸如甲胺、二甲胺、三甲胺及甲基吡啶。
k.名称″溶剂化物″为一化合物或其盐的结晶形式，其包括一或多种结晶的溶剂分子，即，该化合物或其盐在其分子形式中包括结合的溶剂。该化合物的乙醇溶剂化物为一溶剂为乙醇的溶剂化物。″水合物″为一溶剂为水的溶剂化物。
C)流通量药物通过被动扩散而吸收进入皮肤。药物传输过角质层的速率遵循菲克(Fick’s)扩散定律。换句话说，药物传输速率会依药物在皮肤与制剂间的分配系数、药物通过角质层的扩散性、药物在制剂中的浓度及皮肤曝露的表面积而定。其与角质层的厚度呈反比。
该流通量可通过测量药物随着时间渗透进入法兰次槽的接收腔中的量来实验测量。然后，绘制每平方厘米所渗入的药物渐增量对时间的图形；及根据菲克第1扩散定律，从该曲线的线性部分的斜率来计算出稳定状态的渗透速率(流通量，J)。
在下面的实施例2-5中，绘制该化合物渗透过皮肤的渐增量(如为每表面积的量(微克/平方厘米))对时间(小时)的图形。流通量(微克/平方厘米/小时)可通过计算该渗透曲线的线性部分的斜率来测量。第III图描绘出此计算。在10个复制样品的流通量测量上的典型变异约30-50％。但是，若该制剂对该化合物提供低的流通量(此指示出差的皮肤渗透率)时，该变异可能比典型的30-50％更高。
D)法兰次扩散方法已证明活体外死人尸体皮肤模型为一有用的工具，其可用于经局部涂布的化合物其经皮吸收的研究。此模型也通常指为法兰次扩散方法。(法兰次，TJ，在皮肤中药物涂布及环境危害物的评估，皮肤医学的现在问题，Vol.7，G.赛蒙(Simon)，Z.配斯特(Paster)，M.林保(Klingberg)，M.卡也(Kaye)(Eds.)，Basel，瑞士，S.Karger，1978，pp.58-68)。
此方法使用一种熟知为法兰次扩散槽的装置。典型的装置描绘在第II图中。使用下列的一般方法来进行试验。将死人尸体皮肤样品塞入标定为皮肤的区域中。皮肤应该经定向，以便角质层面对供应腔及真皮面对接收腔。接收腔则根据试验药剂的溶解度填充预定的溶液。将该试验药剂的剂量以所定义的体积充入供应腔，以便其可与皮肤样品接触及潜在扩散通过皮肤而进入接收腔。然后，在所定义的时间点处将样品溶液从接收腔移出，及测量该试验药剂的浓度。以每平方厘米皮肤所渗透的试验药剂的量对时间绘图，及如上所述般计算该试验药剂的流通量。关于此试验的更详细讨论，读者可参见实施例2。
任何试验方法其结果都会依试验如何进行而变化。包含相同浓度的相同试验药剂的相同制剂，若未控制所选择的试验参数则也会提供明显不同的流通量。因此，当使用在包括本权利要求的本申请中时，应该通过控制下列参数来进行任何流通量测量1)装置该装置应该为法兰次扩散槽。每个槽应该具有5.4至5.5毫升的槽体积。每种制剂(即试验制剂及参考制剂二者)应该使用十个(10)槽。至于在此范围中的标准值，则以平均来报导结果。
2)皮肤使用来试验该制剂及参考制剂二者的皮肤样品应该为从单一供应者所获得的死人尸体皮肤，其为年龄在50至75的间的男性，且该皮肤从实验对象的背部获得。皮肤的厚度范围应该从700微米至1100微米(平均厚度变化应该不多于20％)。皮肤样品的表面积应该为0.635平方厘米(开口内径为9毫米)。供应腔应该维持在室温(详情参见表A)。
3)试验试验应该进行24小时。应该在起始试验时及在起始试验后2、4、12、16及24小时处移出样品。样品体积应该为0.5毫升。该化合物在试验该制剂及参考制剂二者中的浓度应该相同(液体为w/v及半固体为w/w)。此浓度应该等于在最后剂量形式中所使用的浓度(即，正开发可用于最终的人类应用上)。应该使用10微升/0.635平方厘米的剂量体积。
4)接收溶液0.1％(w/v)的布里依(Brij)-98，其在达佩扣氏(Dulbecco’s)磷酸盐缓冲盐液中，pH 6.9(KH2PO414.7mM及Na2HPO480.9mM)。
5)阻碍完整性评估人类尸体供应者皮肤的阻碍完整性，以保证流通量的改变可归因于该制剂而非皮肤阻碍的缺陷(例如，切割、擦痕、病灶等等)。将经放射性同位素示踪的水或不容易渗透过死人尸体皮肤的甘露醇涂布在皮肤的表皮边。化验接收流体中的这些化合物。在接收流体中高程度的这些化合物指示出该阻碍有缺陷，及应该摒弃该试验皮肤。
6)分析方法-放射性这些变量总整理在下列表A中。
表A.法兰次扩散研究的参数*
*变量可由于研究计划的较早阶段而与实施例2-5的那些不同。
E)制剂如上述提及，本发明涉及一种局部制剂，其包括(a)该化合物；(b)一皮肤可接受的载体；及(c)具有一流通量，其中该化合物穿过死人尸体皮肤进入法兰次扩散槽接收腔的流通量，比参考制剂(即浓度相同的该化合物在70％乙醇/30％丙二醇w/w中)的流通量高至少三倍。在另一个具体实施方案中，该制剂的该化合物其穿过死人尸体皮肤进入法兰次扩散槽接收腔的流通量，比参考制剂的流通量高至少五倍。在进一步具体实施方案中，该制剂的该化合物穿过死人尸体皮肤进入法兰次扩散槽接收腔的流通量，比参考制剂的流通量高至少十倍。
该制剂的类型非为本发明的关键。其可为水性、醇或水-醇溶液形式；或其可为乳膏、凝胶、乳液或摩丝形式；或再者，其也可为一包含一在加压下的推进剂的气溶胶组合物形式。根据本发明的组合物也可为一毛发护理组合物，特别是洗发精、发雕露、治疗洗剂、造型乳膏或凝胶、染料组合物、用来防止脱发的洗剂或凝胶等等。
该化合物包含在该制剂中的量非为关键。应该使用足以促进哺乳动物(特别是人类)毛发生长的量。对半固体剂量形式来说，此量的范围可从0.001至约10％(w/w)。在进一步具体实施方案中，此量可从约0.01％至约5％(w/w)。在更另一个具体实施方案中，此量可从约0.5％至约3％(w/w)。在典型的具体实施方案中，此量可从约0.5％至约1.5％(w/w)。对液体剂量形式来说，上述的量应该表示为％w/v。
除了该化合物外，该制剂将包括至少一种载体。如使用于本文，载体指为一或多种合适于局部给药至人类的半固体或液体充填剂、稀释剂、媒剂等等。可使用在该制剂中的载体量可变化，及将依例如所使用的特别载体、所使用的该化合物量等等而定。可存在于该制剂中的载体量的范围从约1％(w/w)至约99.9％(w/w)，及范围和特定的量的全部的组合及次组合。在一个具体实施方案中，可使用在本制剂中的载体量从约20％(w/w)至约99％(w/w)，且浓度范围从约30％(w/w)至约90％(w/w)特别有用。
除了载体外，该制剂可选择性包括一渗透促进剂。该渗透促进剂为一能促进真皮吸收该试验药剂的物质。此化合物也经常称为加速剂或吸收促进剂。该渗透促进剂的量可变化且非为本发明的关键。其存在量约0.1％至约40％(w/w)。该渗透促进剂的存在量也可为约0.5％至约30％(w/w)；或再者，其可为约5％至约25％(w/w)。在更另一个具体实施方案中，该制剂包含20％(w/w)的渗透促进剂。
此渗透促进剂的实例包括烃类(例如正壬烷、正癸烷、鲨烷)、烷醇类及烯醇类(例如乙醇、丙醇、丁醇、聚乙二醇类、丙二醇、月桂醇、乙二醇单乙基醚(transcutol)、甘油、油醇)、酸类(例如油酸、亚油酸、月桂酸、肉豆蔻酸、棕榈酸、硬脂酸、α-羟基酸类、β-羟基酸类)、酯类(例如肉豆蔻酸异丙酯、二辛酸/二癸酸丙二醇酯、己二酸二丁酯、水杨酸甲酯、单油酸甘油酯、单辛酸甘油酯、辛酸/癸酸甘油酯)、烷基胺基酯类(例如，(N，N-二甲基胺基)异丙酸癸酯、(N，N-二甲基胺基)异丙酸肉豆蔻酯、(N，N-二甲基胺基)丙酸十二烷酯、(N，N-二甲基胺基)醋酸十二烷酯)、酰胺类(例如N，N-二乙基-间-甲苯酰胺)、尿素、胺基酸类(例如缬胺酸)、芳香族化合物(例如百里酚)、亚砜类(例如癸基甲基亚砜)、萜烯类(例如α-萜品烯、d-苧烯、薄荷醇)、吡咯烷酮及咪唑衍生物(例如N-甲基-吡咯烷酮)、1-十二烷基-六氢-2H-吖庚因-2-酮、环十五内酯、水杨酸盐及许多其它物种，如编列在经皮及局部药物传输系统(Transdermal and Topical Drug DeliverySystems)(Eds.够许(Ghosh)，T.K.及飞斯特(Pfister)，W.R.)及药物渗透率提高(Drug Permeation Enhancement)(Eds.谢(Hsieh)，D.S.)中那些。
在一个具体实施方案中，该制剂为醇溶液。在此制剂中，该载体典型为单羟基醇与多元醇的混合物。该制剂可选择性包括至少一种渗透促进剂。
合适的单羟基醇实例包括例如乙醇、丙醇、丁醇及苄醇。于本文中的称谓″乙醇″包括绝对酒精、和″USP酒精″及95％乙醇的全部变性形式。如使用于本文，名称″丙醇″指为全部的异构形式，包括正丙醇及异丙醇；及名称″丁醇″指为全部的异构形式，包括例如正丁醇、异丁醇及仲丁醇。在一个具体实施方案中，该醇可选自于由下列所组成乙醇、异丙醇及苄醇，而乙醇特别有用。
合适的多元醇实例包括例如丙二醇、双丙二醇、己二醇、1，3-丁二醇、液体聚乙二醇类(诸如聚乙二醇200(PEG-200)及聚乙二醇400(PEG-400))。特别有用的多元醇为丙二醇。
对那些醇溶液或水-醇溶液制剂来说，多元醇的存在量典型约0至约80％w/w，更典型约10至约25％w/w。单羟基醇的存在量约10至约99.9％w/w，更典型约40至约90％w/w。此醇溶液的一实例为一包含约1％w/v的化合物、约10至30％w/w的多元醇及约40至约90％w/w的单羟基醇的制剂。也可在该制剂中包含少量的水。
可将该渗透促进剂选择性掺入这些醇溶液中。在一个具体实施方案中，该制剂包含约10％至约25％(w/w)的多元醇、约50％至约70％(w/w)的单羟基醇及约1％至约30％(w/w)的渗透促进剂。在第二具体实施方案中，该制剂包含约10％至约25％(w/w)选自于由下列所组成的多元醇丙二醇、双丙二醇、己二醇、1，3-丁二醇、聚乙二醇及甘油；约50％至约70％(w/w)选自于由下列所组成的单羟基醇乙醇、异丙醇及苄醇；及约1％至约30％(w/w)选自于由下列所组成的渗透促进剂肉豆蔻酸异丙酯、环十五内酯及二辛酸/二癸酸丙二醇酯。在更特定的具体实施方案中，该制剂包含约10％至约25％(w/w)的丙二醇、约50％至约70％(w/w)的乙醇及约1％至约30％(w/w)的肉豆蔻酸异丙酯。更特别的是，该制剂包含约0.5至约3w/v％的化合物、约20％(w/w)的丙二醇、约60％(w/w)的乙醇及约20％(w/w)的肉豆蔻酸异丙酯。
除了溶液外，该制剂也可为半固体，诸如乳膏、软膏或凝胶。包含在这些半固体内的该化合物量可变化，但是典型范围约0.5％w/w至约3％w/w，更典型约1％w/w。
该凝胶可通过将大量水性或水-醇液体捕获在胶体固体颗粒的网状物(共同载体)中而形成。这些胶体的存在浓度典型低于10％w/w及其也可称为胶凝剂。合适的胶凝剂实例包括羧基 基纤维素、羟基丙基甲基纤维素、羟乙基纤维素、甲基纤维素、藻酸钠、藻酸、果胶、黄蓍胶、角叉菜、琼脂、黏土、硅酸铝、卡波姆(carbomers)等等。该水一醇溶液可为类似于上述描述的那些，除了其水含量可最高为60％w/w，且相应地减少醇含量外。
也可使用乳膏。它们为含油物质与水(即载体)的悬浮液。已有二种乳膏类型。第一种为水在油中的乳膏″w/o″，其中水相分散在油相中。这些可通过混合相等份的羊毛醇软膏与水来制备。再者，它们可从蜂蜡、蜂蜡与矿物油的混合物或蜂蜡与植物油的混合物来制备。其它与此制剂有关的细节可在药物及医药科学(Drugs and thePharmaceutical Sciences)，第18册，皮肤科制剂，经由皮吸收(Dermatological Formulations，Percutaneous Absorption)，布瑞安贝瑞(Brian Barry)，(1983)，第314页中发现。
油在水中的乳膏(o/w)具有油分散在水性基质中。o/w乳膏典型会在涂布后看不见、可清洗掉及受消费者欢迎。此乳膏的油相典型包括最高约20％w/w的硬脂酸、长链蜡状醇、植物油或蜡。水相(其包含该化合物、润肤剂、稳定剂、抗氧化剂等等)则构成剩余组分。该化合物同样也可直接掺入商业所制备的乳膏基质，诸如水性乳膏(AqueousCream)BP、溴化十六烷基三甲铵乳膏(Cetrimide Cream)BP、聚乙二醇单醋醚(Cetomacrogol)BP或二甲聚硅氧烷(Dimethicone)BP。更详细的o/w乳膏可在前述的贝瑞的第314-322页中发现。
软膏为另一种可使用的半固体剂量形式。传统的软膏基质(即载体)包括烃类(矿脂、蜂蜡等等)、植物油、脂肪醇(胆固醇、羊毛脂、羊毛醇、硬脂醇等等)或硅酮类。更详细的软膏可在前述的贝瑞的第304-312页中发现。
糊膏基本上为一软膏，其已加入高百分比的不溶微粒固体，最高50重量％。其可使用诸如淀粉、氧化锌、碳酸钙或滑石的不溶固体。可如上述般制备该软膏。更详细的糊膏可在前述的贝瑞的第322页中发现。
也可使用气溶胶。该化合物可溶解在一推进剂及一共溶剂(诸如乙醇、丙酮、十六烷基醇等等)中。可掺入发泡剂以产生摩丝。更详细的气溶胶可在前述的贝瑞的第323-324页中发现。
可使用广泛多种方法来制备上述描述的制剂。广泛来说，该制剂可通过在一定温度下，将如于本文中所描述的制剂的组分结合在一起一段足以提供一药学上有效及精致的组合物的时间而制备。如使用于本文，名称″结合在一起″意谓着将该组合物的全部组分结合及混合在一起约相同时间。名称″结合在一起″也意谓着可以一或多种顺序来结合不同组分，以提供想要的产物。该制剂可以重量/重量(w/w)或重量/体积(w/v)为基础来制备，视最后剂量形式的形式而定。
该制剂可经包装以直接零售销售至消费者(即，制造的物品或成套用具)。此类物品将以可告知患者如何使用该产品来促进毛发生长的方式标定及包装。此用法说明将包括治疗周期、剂量计划表、预防措施等等。这些用法说明可为图像形式、书写说明或其组合。它们可印刷在包装侧边、可为一塞入物或可为任何其它合适于零售市场流通的形式。
F)治疗用途本发明的制剂可使用来促进毛发生长。其典型为每日涂布1至4次或较不频繁(如可由医生推荐)。在一个具体实施方案中，该制剂可使用来治疗或防止秃发。最平常的秃发型式为雄性秃。此症状也通常称为男性型秃头及女性型秃头。也可通过本发明的制剂来治疗其它型式的秃发。
再生期脱发为由于化学物质或辐射(诸如用于癌症的化学疗法或辐射疗法)所造成的脱发。此也通常称为″药物引起″或″辐射引起″的秃发。该制剂可使用来治疗此症状。
簇圆秃为一种自体免疫性疾病，其最初会在头皮上显现出圆形斑脱发。其会发展成整头毛发脱落(其已熟知为全部秃发)及会造成整头及身体毛发脱落(其已熟知为全身秃毛)。该制剂可使用来治疗或防止这些型式的秃发。
外伤性秃发为毛囊伤害的结果。其也通常称为″疤痕性秃发″。精神性秃发由于严重的感情压力所造成。通过引发毛发生长期，该化合物同样可在这些型式的秃发上提供利益。因此，本发明应该不推断为仅限于治疗雄性秃。该制剂可使用来减轻任何型式的脱发。
在进一步具体实施方案中，包含该化合物的制剂也可使用于尚未经历脱发，但是相信他们有经历秃发风险的患者。此患者的实例包括用熟知会引发秃发的药物将接受癌症化学疗法的那些人。经历心理压迫的年轻成年人在认为开始秃头(特别是具有秃头家族历史那些人)时，也可通过此预防性治疗受惠。此预防性治疗包括在名称″促进毛发生长″中。
虽然本发明已以特定具体实施方案来说明，但可了解的是其能有进一步的改变，且此申请案意欲涵盖本发明的任何变化、用途或适应情况，且这些变化通常可遵循本发明的原理及包括与本公开的偏差，而如在本发明的技术领域内所熟知或习惯的实践。陈述下列实施例及生物学数据，以进一步阐明本发明。此公开不应该理解为以任何方式限制本发明。
实施例实施例1使用w/v及w/w方法来制备包含该化合物与乙醇、丙二醇及肉豆蔻酸异丙酯的局部制剂。
实施例1Aw/v方法如下制备在本发明的范围内及包含0.96％w/v的该化合物的制剂将在表I中所提出的组分，以编列在表中的顺序加入至一锥形管，及涡旋直到该混合物呈均相。在小玻瓶中称入大约65.9毫克呈溶剂化物形式的该化合物。将六毫升显示在表I的载体溶液加入至该小玻瓶，以在该制剂中提供大约0.96％w/v的该化合物。
表I
可根据上述提出的程序来制备在表II至IV中所提供的制剂用的载体溶液。
实施例1Bw/v方法如下制备在本发明的范围内及包括大约1％的该化合物的制剂在小玻瓶中称入大约11毫克的呈溶剂化物形式的该化合物。将一毫升显示在表II中的载体溶液加入至该小玻瓶，以提供大约0.96％w/v的该化合物。
表II
实施例1Cw/v方法如下制备在本发明的范围内及包括0.96％的该化合物的制剂在小玻瓶中称入该化合物(11毫克)。将一毫升如显示在表III或IV中及如上述制备的载体溶液加入至该小玻瓶，以提供包含大约0.96％w/v的该化合物的制剂。
表III
表IV
实施例2进行活体外死人尸体皮肤渗透研究的方法使用法兰次扩散槽系统来测量活体外经皮吸收。法兰次扩散槽的槽体积为5.5至5.7毫升，供应表面积为0.635平方厘米及开口内径为9毫米。已移除皮下层的经冷冻保存的死人尸体皮肤可从俄亥俄谷组织及皮肤中心(Ohio Valley Tissue and Skin Center)购得，及贮存在-65℃下直到使用。在实验前，在室温下解冻该皮肤。接收腔完全填充0.1％w/v在达佩扣氏磷酸盐缓冲盐液中的布里依-98，pH6.9(KH2PO414.7mM及Na2HPO480.9mM)。使用水浴将接收腔维持在37℃及使用磁搅拌子搅拌。让该供应腔留在室温下。使用中空打孔器移出7/8″的圆形片人类尸体组织及将其放置在槽中，其表皮侧面对供应腔及真皮侧面对接收腔。然后，将供应罩钳合到该槽上。通过倒转该槽来移除任何在真皮/接收界面处所引进的气泡。
在使用具放射性的该化合物的测试中，将15微升具有15Ci/毫摩尔的特定活性且已溶解在乙醇中的该3H化合物转入依潘朵夫(Eppendorf)管中。通过让N2气体通过该溶液上方来干燥该化合物。将150微升在实施例1中所制备包含0.96％w/v的该化合物的制剂加入至该具放射性的化合物。使用涡旋来混合该些成分。
在施加剂量前，让该皮肤平衡30分钟。使用正置换移液管，将10微升大约0.96％w/v的该化合物溶液涂布到皮肤上(在0.635平方厘米的注入面积上)。在放射性的该化合物的实例中，10微升的特定活性大约25-30微Ci/毫克。在大约0、2、5、8、18及24小时处，从接收腔的取样口移出0.5毫升的样品，且以等体积的接收溶液置换。通过倒转该槽来移除任何引进该接收器/真皮的界面处的气泡。
在最后的样品后，以0.5毫升(每次)的乙醇来清洗皮肤表面四次。在乙醇洗涤后，以干棉花拭子轻轻擦拭注入表面，移除供应罩，及以经乙醇弄湿的棉花拭子来擦拭皮肤表面两次，及最后以干棉花拭子轻轻擦拭皮肤表面。将全部的拭子及乙醇洗液都放在一锥形管中。将供应罩放置在该锥形管中。
从该槽移出皮肤，及利用切削来分离注入区域的表皮部分，及将其放置在配衡的闪烁小玻瓶中。钳取穿过真皮的活组织切片，及将其放置在配衡的闪烁小玻瓶中。记录真皮及表皮的重量。过多的皮肤部分放置在闪烁小玻瓶中或加入该含表面洗液的锥形管中。
样品的制备及分析处理样品，以分析其放射性*接收样品将15毫升的闪烁液体加入至该接收样品及测量该样品的放射性。
*表面清洗将23毫升的乙醇加入至该包含醇洗液、拭子及供应罩的锥形管中。全部的管子都涡旋45秒及经声波处理15分钟。将0.5毫升的上述溶液转移至一闪烁小玻瓶中；将15毫升的闪烁液体加入至该小玻瓶及测量其放射性。
*表皮样品将1毫升的沙伏伯(Solvable)TM加入至该包含表皮的小玻瓶，在水浴中将该样品保持在60℃下且设定为30rpm，直到组织溶解(少于20小时)。让小玻璃瓶冷却，及将15毫升的闪烁液体(阿提玛(Ultima)黄金XR)加入至该小玻瓶。在测量放射性前，让该样品静置在暗处3-4小时。
*真皮样品将2毫升的沙伏伯TM加入至该包含真皮的小玻瓶，在水浴中将该样品保持在60℃下且设定为30rpm，直到组织溶解(少于24小时)。让该小玻璃瓶冷却，及将15毫升的闪烁液体加入至该小玻瓶。在测量放射性前，将样品静置在暗处3-4小时。
*过多皮肤将过多的皮肤部分分成二片及将每片放置在个别的闪烁小玻瓶中。在每个小玻瓶中，加入3毫升的沙伏伯TM。将该样品保持在60℃的水浴中且设定在30rpm，直到组织溶解(大约24小时)。让该小玻璃瓶冷却，及将15毫升的闪烁液体加入至该小玻瓶。在测量放射性前，让该样品静置在暗处3-4小时。
使用液体闪烁分析器(三卡伯(TriCarb)2500TR，来自博精(PerkinElmer))来分析样品。
该化合物的流通量及真皮量的计算流通量计算绘制该化合物渗透过皮肤的量(如为每表面积的量(微克/平方厘米))对时间(小时)的图形。通过计算渗透曲线的线性部分的斜率来测量流通量(微克/平方厘米/小时)。计算该化合物在不同皮肤薄层及接收腔中的量
通过放射性分析来测量该化合物的渗透量在闪烁计数器中计数所收集的样品，及侦测在每层皮肤层中的具放射性的该化合物的百分比；及在接收腔中的量为在移除样品时，该化合物在特定腔中的量。例如，为了在固定时间处(24小时)测量该化合物的渗透率，在涂布3H的该化合物后的24小时处测量在每层中的放射性量。该化合物在皮肤表面上的量代表该化合物超过24小时后不渗透过角质层的量。在表皮样品中所回收的具放射性的该化合物的量代表该化合物在该时间点前渗透过角质层，但是不渗透过真皮的量。该化合物在真皮中的量代表该化合物在24小时处渗透过角质层及表皮且保留在真皮层中的量。该化合物在接收腔中的量代表该式的化合物其在24小时的试验期间，已渗透过角质层、表皮及真皮的量。
如上所述处理及分析样品。以局部涂布的该化合物的总量为准，计算该化合物在样品中的该化合物平均百分比的量。
实施例3该化合物在包含63.5％的乙醇∶20％的丙二醇∶8％的环十五内酯(CPE-215)∶7.5％的水(w/w/w/w)的载体中，与在包含70％的乙醇∶30％的丙二醇(w/w)的载体中的流通量速率的比较为了测量该渗透促进剂增加该化合物渗透过人类皮肤的速率的效率，使用描述在实施例2中的法兰次扩散槽系统来测量该化合物于二种不同载体中的流通量速率。该人类皮肤的厚度为0.71-0.96毫米及0.90-1.04毫米。比较该化合物在包含0.96％w/v的该化合物的参考制剂中或在包含乙醇∶丙二醇∶环十五内酯∶水(63.5∶20∶8∶7.5％w/w/w/w)的载体中的渗透率。
显示在第1图的结果指示出该化合物在包含一渗透促进剂的载体中的皮肤渗透率已大大提高(与参考制剂比较)。第1图阐明该化合物在某一定时间后(定义为滞缓时间)显露于该接收媒质中的量。滞缓时间为该化合物穿过在皮肤中的主要阻碍(角质层)，然后在进入接收相前扩散过表皮及真皮所需的时间的结果。所应用的该化合物在参考制剂中的流通量为0.004±0.006微克/平方厘米/小时。所应用的该化合物在载体(其也包含一渗透促进剂，乙醇∶丙二醇∶环十五内酯∶水＝63.5∶20∶8∶7.5％w/w/w/w)中的流通量为0.053±0.003微克/平方厘米/小时。因此，包含该渗透促进剂(环十五内酯)的制剂可提供该化合物穿透过皮肤层的流通量比该参考制剂高。
表2.环十五内酯在该化合物(0.96％w/v)的活体外死人尸体皮肤渗透率上的效应
SD＝标准偏差。
第1图。该化合物(0.96％w/v)从含或不含CPE-215的媒剂系统渗透过死人尸体皮肤的渐增量
实施例4
比较在描述于实施例2的法兰次扩散槽试验中，当使用IPM作为渗透促进剂所获得的流通量与使用环十五内酯作为渗透促进剂所获得的流通量利用描述在实施例1中的方法来制备包含该化合物及乙醇∶丙二醇∶IPM(60∶20∶20％w/w/w)或乙醇∶丙二醇∶环十五内酯∶水(63.5∶20∶8∶7.5％w/w/w/w)的载体。如实施例2所描述般来测量流通量速率。在此研究中的皮肤厚度为0.71-0.96毫米及0.90-1.04毫米。
第2图为该化合物在不同时间点处穿透过皮肤而吸收进入接收器的渐增量。该化合物施加在包含乙醇∶丙二醇∶IPM(60∶20∶20％w/w/w)的载体中的流通量为0.017±0.008微克/平方厘米/小时。该化合物施加在包含环十五内酯(乙醇∶丙二醇∶环十五内酯∶水(63.5∶20∶8∶7.5％w/w/w/w)的载体中的流通量速率为0.022±0.007微克/平方厘米/小时。包含IPM的制剂可提供该化合物穿透过皮肤的流通量类似于包含环十五内酯渗透促进剂的制剂。
在固定时间(24小时)后，在个别的皮肤层及在接收腔中所测量的该化合物的渗透率则表示于表3中。
表3.包含IPM或CPE-215的媒剂系统在该化合物(0.96％w/v)的活体外死人尸体皮肤渗透率上的效应
SD＝标准偏差第2图。该化合物(0.96％w/w)从包含IPM或CPE-215的媒剂系统渗透过死人尸体皮肤的渐增量
实施例5变化IPM量在该化合物的皮肤渗透率上的效应根据描述在实施例2中的方法，使用1.03-1.19毫米厚的死人尸体皮肤来试验变化在载体中的IPM程度于该化合物的渗透率上的效应。第3图描绘出该式的化合物在不同时间点处穿透过皮肤而吸收进入接收器的渐增量。该化合物施加在由乙醇∶丙二醇∶IPM(60∶20∶20％w/w/w)所组成的载体中的流通量为0.011±0.003微克/平方厘米/小时。该化合物施加在包含乙醇∶丙二醇∶IPM(70∶20∶10％w/w/w)的载体中的流通量为0.007±0.003微克/平方厘米/小时。
表4.IPM程度在该化合物(0.96％w/v)的活体外死人尸体皮肤渗透率上的效应
SD＝标准偏差。
第3图。该化合物(0.96％w/w)从包含不同IPM程度的媒剂渗透过死人尸体皮肤的渐增量 实施例6不同渗透促进剂在该化合物的渗透率上的比较试验数种根据本发明包含渗透促进剂的其它制剂，以测量其在该化合物的渗透率上的影响。使用描述在实施例2中的试验来检测该化合物(1.86％w/v)于下列载体中的渗透率。当给药在一包含EtOH/PG/DMI(二甲基异山梨醇)(60∶30∶10％w/w)的载体中的该化合物时，其流通量为0.036±0.0336微克/平方厘米/小时。该化合物施加在乙醇∶丙二醇∶IPM(50∶30∶20％w/w/w)的载体中的流通量为191±0.026微克/平方厘米/小时。该化合物施加在由(EtOH/PG/米格莱欧(Miglyol)840(50∶30∶20％w/w/w)所组成的载体中的流通量为0.11±0.007微克/平方厘米/小时。
虽然未在每个例子中进行直接比较，但趋势显示出包含渗透促进剂的制剂可增加该化合物穿过死人尸体皮肤进入接收器的流通量(当与参考制剂比较时)。
权利要求
1.一种局部制剂，其包含(a)一有效量的6-[[(3S，4R)-3，4-二氢-3-羟基-6-[(3-羟基苯基)磺酰基]-2，2，3-三甲基-2H-1-苯并吡喃-4-基]氧基]-2-甲基-3(2H)-哒嗪酮或其药学上可接受的盐；(b)一皮肤可接受的载体；及c)一流通量，其中该制剂的该化合物在法兰次扩散槽试验中穿过死人尸体皮肤的流通量，至少等于或大于由参考制剂所提供的流通量的三倍。
2.如权利要求第1项的局部制剂，其中该制剂的该化合物在法兰次扩散槽试验中穿过死人尸体皮肤的流通量，至少等于或大于由参考制剂所提供的流通量的五倍。
3.如权利要求第1项的局部制剂，其中该制剂的该化合物在法兰次扩散槽试验中穿过死人尸体皮肤的流通量，至少等于或大于由参考制剂所提供的流通量的十倍。
4.如权利要求第1、2或3项的任一项的局部制剂，其中该制剂为一液体。
5.如权利要求第1、2、3或4项的任一项的局部制剂，其中该化合物的存在量约0.5％至约3％(w/v)。
6.如权利要求第1、2、3或4项的任一项的局部制剂，其中该制剂为醇溶液或水-醇溶液。
7.如权利要求第1至6项的任一项的局部制剂，其中该制剂包含约10％至约25％(w/w)的多元醇、约50％至约70％(w/w)的单羟基醇及约1％至约30％(w/w)的渗透促进剂。
8.如权利要求第1至7项的任一项的局部制剂，其中该制剂包含约10％至约25％(w/w)选自于由下列所组成的多元醇丙二醇、双丙二醇、己二醇、1，3-丁二醇、聚乙二醇及甘油；约50％至约70％(w/w)选自于由下列所组成的单羟基醇乙醇、异丙醇及苄醇；及约1％至约30％(w/w)选自于由下列所组成的渗透促进剂肉豆蔻酸异丙酯、环十五内酯、二辛酸/二癸酸丙二醇酯。
9.如权利要求第1至6项的任一项的制剂，其中该制剂包含(a)约60％的乙醇(w/w)；(b)约20％的丙二醇(w/w)；及(c)约20％(w/w)的肉豆蔻酸异丙酯。
10.如权利要求第1至3项的任一项的制剂，其中该剂量形式为一选自于由下列所组成的半固体剂量形式乳膏、凝胶、软膏及糊膏。
11.如权利要求第10项的制剂，其中该化合物的存在量约0.5至约3％w/w。
12.如权利要求第10项的制剂，其中该制剂包含一渗透促进剂，其量约1至30％w/w。
13.一种如权利要求第1至12项的任一项的制剂的用途，其可用来促进哺乳动物的毛发生长。
14.一种包含一如权利要求第1至12项的任一项的制剂的制造物品，其中该制剂可经包装而用于零售销售，以告知患者如何使用该产品来促进毛发生长。
全文摘要
本发明涉及一种局部制剂，其在包含至少一种药学上可接受的载体的制剂中，包含化合物6－[[(3S，4R)－3，4－二氢－3－羟基－6－[(3－羟基苯基)磺酰基]－2，2，3－三甲基－2H－1－苯并吡喃－4－基]氧基]－2－甲基－3(2H)－哒嗪酮。该制剂特别可使用来促进毛发生长，包括减轻秃发。
文档编号A61K31/353GK1988900SQ200580024498
公开日2007年6月27日 申请日期2005年7月11日 优先权日2004年7月19日
发明者S·M·西奥迪, D·K·帕里克 申请人:沃尼尔·朗伯有限责任公司
技术领域：
本发明涉及一种用来传递下列化合物的局部制剂6-[[(3S，4R)-3，4-二氢-3-羟基-6-[(3-羟基苯基)磺酰基]-2，2，3-三甲基-2H-1-苯并吡喃-4-基]氧基]-2-甲基-3(2H)-哒嗪酮。这些制剂可用来促进毛发生长。
背景技术：
美国专利案号5,912,244揭示出一种化合物6-[[(3S，4R)-3，4-二氢-3-羟基-6-[(3-羟基苯基)磺酰基]-2，2，3-三甲基-2H-1-苯并吡喃-4-基]氧基]-2-甲基-3(2H)-哒嗪酮(于此之后称为″该化合物″)、其制备方法及其作为钾通道开放剂的用途。
2004年2月12日所提出的共审查中、共同让予的美国专利申请案序号60/544,116揭示出该化合物可用于促进人类毛发生长的局部应用。动物研究已显露出该化合物可通过引发毛发生长期来改变毛发生长循环。毛发生长期为一生长阶段，在此期间毛囊(即，发根)会深深穿入真皮且毛囊细胞会快速分裂及分化。在该毛发生长阶段期间，毛发细胞会合成角质(毛发的占支配的蛋白质组分)。在非秃头的人类中，毛发生长期会持续一至五年。过渡期为该循环的转变阶段，其特征为细胞有丝分裂终止。过渡期通常会持续约二至三周。毛发生长静止期为该循环的休息阶段，其中毛发会保留在头皮内最高达12周，直到其由头皮下所生长出的新毛囊取代。在健康的年轻人类中，大部分的毛囊都在毛发生长阶段。在这类个体中，毛发生长对毛发生长静止的比率可高达9∶1。在具有秃发的个体中，此比率会降低至2∶1。
皮肤主要由三层组成表皮、真皮及皮下脂肪层。表皮包含角质层及能生长的表皮。角质层(表皮的最外层)主要由角质化的死细胞所构成。其为外部涂布物质渗透过皮肤的主要障碍。真皮由结缔组织的基质组成，其由血管、神经及皮肤附件穿透。毛囊(其为毛发生长期开始处)位于真皮层的深处。第I图阐明这三层及毛囊在皮肤中的相对位置。
为了起始化毛发生长期，该化合物必需能穿透过角质层、能生长的表皮，更是需通过(若非全部的话)真皮以到达毛囊。预计本制剂将提高该化合物渗透过角质层进入真皮及最后到达毛囊的比率，以提高该化合物的活性。
发明概要根据本发明，已提供一种可提高6-[[(3S，4R)-3，4-二氢-3-羟基-6-[(3-羟基苯基)磺酰基]-2，2，3-三甲基-2H-1-苯并吡喃-4-基]氧基]-2-甲基-3(2H)-哒嗪酮的传递的局部制剂。此制剂可增加该化合物被皮肤吸收。提供此制剂可增加该化合物在真皮中的浓度。预计所提高的这些浓度应该可通过提高毛发的生长速率而对秃发提供更有效的治疗。
本发明涉及一种局部制剂，其包括(a)该化合物；(b)一皮肤可接受的载体；及(c)该制剂表现出的该化合物其穿过死人尸体皮肤进入法兰次(Franz)扩散槽的接收腔的流通量，比参考制剂(即70％乙醇/30％丙二醇w/w)的流通量高至少三倍。
该局部制剂可为水性、醇或水-醇溶液形式；或其可为乳膏、凝胶、乳液或摩丝(mousses)形式；或再者，其也可为一包含一在加压下的推进剂的气溶胶组合物形式。根据本发明的组合物也可为一毛发护理组合物，特别是洗发精、发雕露、治疗洗剂、造型乳膏或发胶、染料组合物、防止脱发用的洗剂或凝胶等等。
该化合物存在于该局部制剂中的量可变化，只要其足以促进毛发生长(即有效量)。该化合物的典型存在量约0.001至约10％(w/w)。其典型可每日给药1至4次或较不频繁(例如一周一次)。
该制剂典型可使用来减轻秃发，特别是雄性秃。在进一步具体实施方案中，本发明涉及一种制造的物品，该物品包含该局部制剂、零售销售用的包装、且其结合可告知消费者如何使用该产品来促进毛发生长的用法说明(即一成套用具)。
图式简单说明第I图描绘出皮肤结构。
第II图描绘出法兰次扩散槽装置。
第III图描绘出流通量计算。
发明的详细说明A)化合物如上述提及，本发明的全部制剂都包含化合物6-[[(3S，4R)-3，4-二氢-3-羟基-6-((3-羟基苯基)磺酰基]-2，2，3-三甲基-2H-1-苯并吡喃-4-基]氧基]-2-甲基-3(2H)-哒嗪酮，其结构描绘在下列 此化合物也通常指为(3S，4R)-[6-(3-羟基苯基)磺酰基]-2，2，3-三甲基-4-(2-甲基-3-氧代-2，3-二氢哒嗪-6-基-氧基)-3-色原烷醇及(3S，4R)-3，4-二氢-4-(2，3-二氢-2-甲基-3-氧代哒嗪-6-基)氧基-3-羟基-6-(3-羟基苯基)磺酰基-2，2，3-三甲基-2H-苯并[b]吡喃)。美国专利案号5,912,244的实施例7揭示出该化合物的制造方法。
″本发明的化合物″及″该化合物″可交替使用且应该视为同义字。其每种都指为6-[[(3S，4R)-3，4-二氢-3-羟基-6-[(3-羟基苯基)磺酰基]-2，2，3-三甲基-2H-1-苯并吡喃-4-基]氧基]-2-甲基-3(2H)-哒嗪酮。额外的是，名称″该化合物″于全部时刻都应该了解为包括6-[[(3S，4R)-3，4-二氢-3-羟基-6-[(3-羟基苯基)磺酰基]-2，2，3-三甲基-2H-1-苯并吡喃-4-基]氧基]-2-甲基-3(2H)-哒嗪酮的全部活性形式，其包括例如其自由态形式，例如，自由态酸或碱；及也包括全部的多形体、水合物、溶剂化物、互变体、立体异构体(例如，非对映异构体及对映异构体)及其类似物；及全部药学上可接受的盐类；及此物理形式的混合物，除非其另外有特别描述。
B)定义如遍及此申请案(包括权利要求)所使用，下列名称具有下列所定义的意义，除非其它方面有特别指出。复数及单数应该视为可交替使用，除非有指示出特定数目。
a.″参考溶液″指为一包含预定浓度的该化合物(参见节D的浓度)的局部制剂，该化合物溶解在由70％乙醇/30％丙二醇w/w所组成的溶液中。
b.″哺乳动物″包括人类、灵长类动物(诸如短尾猕猴)、陪伴动物(诸如狗、猫、沙鼠等等)及家畜(诸如牛、猪、马、驼羊及羊)。
c.″促进毛发生长″包括刺激总毛发质量及/或长度增加。此增加包括毛干(即毛囊)的长度及/或生长速率增加、毛发的数量增加及/或毛发的厚度(从毫毛至全层毛发)增加。上述的最后结果某些或全部可通过延长或活化毛发循环的毛发生长期、生长阶段；或通过缩短或延迟过渡期及毛发生长静止阶段而达成。″促进毛发生长″也应该考虑包括防止、遏制、减少、延迟及/或逆转脱发。
d.″秃发″，如使用于本文包括部分或完全秃头、脱发及/或掉发。
e.″治疗或减轻秃发″指为促进已经历或视为会有经历秃发风险的哺乳动物的毛发生长。
f.″药学上可接受″意谓着合适于使用在哺乳动物中或上。
g.″皮肤可接受″指为一可涂布至皮肤或毛发的物质，其包括最后制剂。
h.″药学上可接受的盐″意欲指为″药学上可接受的酸加成盐″或″药学上可接受的碱加成盐″。
i.″药学上可接受的酸加成盐″意欲适用至任何由式I所表示的基础化合物或其任何中间体的无毒的有机或无机酸加成盐。可形成合适的盐类的作为例证的无机酸包括氢氯酸、氢溴酸、硫酸及磷酸；及酸金属盐，诸如正磷酸单氢钠及硫酸氢钾。可形成合适的盐类的作为例证的有机酸包括单、二及三羧酸。此酸的例证有例如醋酸、羟基乙酸、乳酸、丙酮酸、丙二酸、琥珀酸、戊二酸、反丁烯二酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、马来酸、羟马来酸、苯甲酸、羟基苯甲酸、苯基醋酸、肉桂酸、水杨酸、2-苯氧基苯甲酸、对-甲苯磺酸及磺酸类(诸如甲烷磺酸及2-羟基乙烷磺酸)。此盐类可以水合或实质上无水的形式存在。这些化合物的酸加成盐通常可溶于水及多种亲水性有机溶剂中。
j.″药学上可接受的碱加成盐″意欲适用至任何由式I所表示的化合物或其任何中间体的无毒的有机或无机碱加成盐。可形成合适的盐类的作为例证的碱包括碱金属或碱土金属氢氧化物，诸如氢氧化钠、钾、钙、镁或钡；氨；及脂肪族、脂环族或芳香族有机胺，诸如甲胺、二甲胺、三甲胺及甲基吡啶。
k.名称″溶剂化物″为一化合物或其盐的结晶形式，其包括一或多种结晶的溶剂分子，即，该化合物或其盐在其分子形式中包括结合的溶剂。该化合物的乙醇溶剂化物为一溶剂为乙醇的溶剂化物。″水合物″为一溶剂为水的溶剂化物。
C)流通量药物通过被动扩散而吸收进入皮肤。药物传输过角质层的速率遵循菲克(Fick’s)扩散定律。换句话说，药物传输速率会依药物在皮肤与制剂间的分配系数、药物通过角质层的扩散性、药物在制剂中的浓度及皮肤曝露的表面积而定。其与角质层的厚度呈反比。
该流通量可通过测量药物随着时间渗透进入法兰次槽的接收腔中的量来实验测量。然后，绘制每平方厘米所渗入的药物渐增量对时间的图形；及根据菲克第1扩散定律，从该曲线的线性部分的斜率来计算出稳定状态的渗透速率(流通量，J)。
在下面的实施例2-5中，绘制该化合物渗透过皮肤的渐增量(如为每表面积的量(微克/平方厘米))对时间(小时)的图形。流通量(微克/平方厘米/小时)可通过计算该渗透曲线的线性部分的斜率来测量。第III图描绘出此计算。在10个复制样品的流通量测量上的典型变异约30-50％。但是，若该制剂对该化合物提供低的流通量(此指示出差的皮肤渗透率)时，该变异可能比典型的30-50％更高。
D)法兰次扩散方法已证明活体外死人尸体皮肤模型为一有用的工具，其可用于经局部涂布的化合物其经皮吸收的研究。此模型也通常指为法兰次扩散方法。(法兰次，TJ，在皮肤中药物涂布及环境危害物的评估，皮肤医学的现在问题，Vol.7，G.赛蒙(Simon)，Z.配斯特(Paster)，M.林保(Klingberg)，M.卡也(Kaye)(Eds.)，Basel，瑞士，S.Karger，1978，pp.58-68)。
此方法使用一种熟知为法兰次扩散槽的装置。典型的装置描绘在第II图中。使用下列的一般方法来进行试验。将死人尸体皮肤样品塞入标定为皮肤的区域中。皮肤应该经定向，以便角质层面对供应腔及真皮面对接收腔。接收腔则根据试验药剂的溶解度填充预定的溶液。将该试验药剂的剂量以所定义的体积充入供应腔，以便其可与皮肤样品接触及潜在扩散通过皮肤而进入接收腔。然后，在所定义的时间点处将样品溶液从接收腔移出，及测量该试验药剂的浓度。以每平方厘米皮肤所渗透的试验药剂的量对时间绘图，及如上所述般计算该试验药剂的流通量。关于此试验的更详细讨论，读者可参见实施例2。
任何试验方法其结果都会依试验如何进行而变化。包含相同浓度的相同试验药剂的相同制剂，若未控制所选择的试验参数则也会提供明显不同的流通量。因此，当使用在包括本权利要求的本申请中时，应该通过控制下列参数来进行任何流通量测量1)装置该装置应该为法兰次扩散槽。每个槽应该具有5.4至5.5毫升的槽体积。每种制剂(即试验制剂及参考制剂二者)应该使用十个(10)槽。至于在此范围中的标准值，则以平均来报导结果。
2)皮肤使用来试验该制剂及参考制剂二者的皮肤样品应该为从单一供应者所获得的死人尸体皮肤，其为年龄在50至75的间的男性，且该皮肤从实验对象的背部获得。皮肤的厚度范围应该从700微米至1100微米(平均厚度变化应该不多于20％)。皮肤样品的表面积应该为0.635平方厘米(开口内径为9毫米)。供应腔应该维持在室温(详情参见表A)。
3)试验试验应该进行24小时。应该在起始试验时及在起始试验后2、4、12、16及24小时处移出样品。样品体积应该为0.5毫升。该化合物在试验该制剂及参考制剂二者中的浓度应该相同(液体为w/v及半固体为w/w)。此浓度应该等于在最后剂量形式中所使用的浓度(即，正开发可用于最终的人类应用上)。应该使用10微升/0.635平方厘米的剂量体积。
4)接收溶液0.1％(w/v)的布里依(Brij)-98，其在达佩扣氏(Dulbecco’s)磷酸盐缓冲盐液中，pH 6.9(KH2PO414.7mM及Na2HPO480.9mM)。
5)阻碍完整性评估人类尸体供应者皮肤的阻碍完整性，以保证流通量的改变可归因于该制剂而非皮肤阻碍的缺陷(例如，切割、擦痕、病灶等等)。将经放射性同位素示踪的水或不容易渗透过死人尸体皮肤的甘露醇涂布在皮肤的表皮边。化验接收流体中的这些化合物。在接收流体中高程度的这些化合物指示出该阻碍有缺陷，及应该摒弃该试验皮肤。
6)分析方法-放射性这些变量总整理在下列表A中。
表A.法兰次扩散研究的参数*
*变量可由于研究计划的较早阶段而与实施例2-5的那些不同。
E)制剂如上述提及，本发明涉及一种局部制剂，其包括(a)该化合物；(b)一皮肤可接受的载体；及(c)具有一流通量，其中该化合物穿过死人尸体皮肤进入法兰次扩散槽接收腔的流通量，比参考制剂(即浓度相同的该化合物在70％乙醇/30％丙二醇w/w中)的流通量高至少三倍。在另一个具体实施方案中，该制剂的该化合物其穿过死人尸体皮肤进入法兰次扩散槽接收腔的流通量，比参考制剂的流通量高至少五倍。在进一步具体实施方案中，该制剂的该化合物穿过死人尸体皮肤进入法兰次扩散槽接收腔的流通量，比参考制剂的流通量高至少十倍。
该制剂的类型非为本发明的关键。其可为水性、醇或水-醇溶液形式；或其可为乳膏、凝胶、乳液或摩丝形式；或再者，其也可为一包含一在加压下的推进剂的气溶胶组合物形式。根据本发明的组合物也可为一毛发护理组合物，特别是洗发精、发雕露、治疗洗剂、造型乳膏或凝胶、染料组合物、用来防止脱发的洗剂或凝胶等等。
该化合物包含在该制剂中的量非为关键。应该使用足以促进哺乳动物(特别是人类)毛发生长的量。对半固体剂量形式来说，此量的范围可从0.001至约10％(w/w)。在进一步具体实施方案中，此量可从约0.01％至约5％(w/w)。在更另一个具体实施方案中，此量可从约0.5％至约3％(w/w)。在典型的具体实施方案中，此量可从约0.5％至约1.5％(w/w)。对液体剂量形式来说，上述的量应该表示为％w/v。
除了该化合物外，该制剂将包括至少一种载体。如使用于本文，载体指为一或多种合适于局部给药至人类的半固体或液体充填剂、稀释剂、媒剂等等。可使用在该制剂中的载体量可变化，及将依例如所使用的特别载体、所使用的该化合物量等等而定。可存在于该制剂中的载体量的范围从约1％(w/w)至约99.9％(w/w)，及范围和特定的量的全部的组合及次组合。在一个具体实施方案中，可使用在本制剂中的载体量从约20％(w/w)至约99％(w/w)，且浓度范围从约30％(w/w)至约90％(w/w)特别有用。
除了载体外，该制剂可选择性包括一渗透促进剂。该渗透促进剂为一能促进真皮吸收该试验药剂的物质。此化合物也经常称为加速剂或吸收促进剂。该渗透促进剂的量可变化且非为本发明的关键。其存在量约0.1％至约40％(w/w)。该渗透促进剂的存在量也可为约0.5％至约30％(w/w)；或再者，其可为约5％至约25％(w/w)。在更另一个具体实施方案中，该制剂包含20％(w/w)的渗透促进剂。
此渗透促进剂的实例包括烃类(例如正壬烷、正癸烷、鲨烷)、烷醇类及烯醇类(例如乙醇、丙醇、丁醇、聚乙二醇类、丙二醇、月桂醇、乙二醇单乙基醚(transcutol)、甘油、油醇)、酸类(例如油酸、亚油酸、月桂酸、肉豆蔻酸、棕榈酸、硬脂酸、α-羟基酸类、β-羟基酸类)、酯类(例如肉豆蔻酸异丙酯、二辛酸/二癸酸丙二醇酯、己二酸二丁酯、水杨酸甲酯、单油酸甘油酯、单辛酸甘油酯、辛酸/癸酸甘油酯)、烷基胺基酯类(例如，(N，N-二甲基胺基)异丙酸癸酯、(N，N-二甲基胺基)异丙酸肉豆蔻酯、(N，N-二甲基胺基)丙酸十二烷酯、(N，N-二甲基胺基)醋酸十二烷酯)、酰胺类(例如N，N-二乙基-间-甲苯酰胺)、尿素、胺基酸类(例如缬胺酸)、芳香族化合物(例如百里酚)、亚砜类(例如癸基甲基亚砜)、萜烯类(例如α-萜品烯、d-苧烯、薄荷醇)、吡咯烷酮及咪唑衍生物(例如N-甲基-吡咯烷酮)、1-十二烷基-六氢-2H-吖庚因-2-酮、环十五内酯、水杨酸盐及许多其它物种，如编列在经皮及局部药物传输系统(Transdermal and Topical Drug DeliverySystems)(Eds.够许(Ghosh)，T.K.及飞斯特(Pfister)，W.R.)及药物渗透率提高(Drug Permeation Enhancement)(Eds.谢(Hsieh)，D.S.)中那些。
在一个具体实施方案中，该制剂为醇溶液。在此制剂中，该载体典型为单羟基醇与多元醇的混合物。该制剂可选择性包括至少一种渗透促进剂。
合适的单羟基醇实例包括例如乙醇、丙醇、丁醇及苄醇。于本文中的称谓″乙醇″包括绝对酒精、和″USP酒精″及95％乙醇的全部变性形式。如使用于本文，名称″丙醇″指为全部的异构形式，包括正丙醇及异丙醇；及名称″丁醇″指为全部的异构形式，包括例如正丁醇、异丁醇及仲丁醇。在一个具体实施方案中，该醇可选自于由下列所组成乙醇、异丙醇及苄醇，而乙醇特别有用。
合适的多元醇实例包括例如丙二醇、双丙二醇、己二醇、1，3-丁二醇、液体聚乙二醇类(诸如聚乙二醇200(PEG-200)及聚乙二醇400(PEG-400))。特别有用的多元醇为丙二醇。
对那些醇溶液或水-醇溶液制剂来说，多元醇的存在量典型约0至约80％w/w，更典型约10至约25％w/w。单羟基醇的存在量约10至约99.9％w/w，更典型约40至约90％w/w。此醇溶液的一实例为一包含约1％w/v的化合物、约10至30％w/w的多元醇及约40至约90％w/w的单羟基醇的制剂。也可在该制剂中包含少量的水。
可将该渗透促进剂选择性掺入这些醇溶液中。在一个具体实施方案中，该制剂包含约10％至约25％(w/w)的多元醇、约50％至约70％(w/w)的单羟基醇及约1％至约30％(w/w)的渗透促进剂。在第二具体实施方案中，该制剂包含约10％至约25％(w/w)选自于由下列所组成的多元醇丙二醇、双丙二醇、己二醇、1，3-丁二醇、聚乙二醇及甘油；约50％至约70％(w/w)选自于由下列所组成的单羟基醇乙醇、异丙醇及苄醇；及约1％至约30％(w/w)选自于由下列所组成的渗透促进剂肉豆蔻酸异丙酯、环十五内酯及二辛酸/二癸酸丙二醇酯。在更特定的具体实施方案中，该制剂包含约10％至约25％(w/w)的丙二醇、约50％至约70％(w/w)的乙醇及约1％至约30％(w/w)的肉豆蔻酸异丙酯。更特别的是，该制剂包含约0.5至约3w/v％的化合物、约20％(w/w)的丙二醇、约60％(w/w)的乙醇及约20％(w/w)的肉豆蔻酸异丙酯。
除了溶液外，该制剂也可为半固体，诸如乳膏、软膏或凝胶。包含在这些半固体内的该化合物量可变化，但是典型范围约0.5％w/w至约3％w/w，更典型约1％w/w。
该凝胶可通过将大量水性或水-醇液体捕获在胶体固体颗粒的网状物(共同载体)中而形成。这些胶体的存在浓度典型低于10％w/w及其也可称为胶凝剂。合适的胶凝剂实例包括羧基 基纤维素、羟基丙基甲基纤维素、羟乙基纤维素、甲基纤维素、藻酸钠、藻酸、果胶、黄蓍胶、角叉菜、琼脂、黏土、硅酸铝、卡波姆(carbomers)等等。该水一醇溶液可为类似于上述描述的那些，除了其水含量可最高为60％w/w，且相应地减少醇含量外。
也可使用乳膏。它们为含油物质与水(即载体)的悬浮液。已有二种乳膏类型。第一种为水在油中的乳膏″w/o″，其中水相分散在油相中。这些可通过混合相等份的羊毛醇软膏与水来制备。再者，它们可从蜂蜡、蜂蜡与矿物油的混合物或蜂蜡与植物油的混合物来制备。其它与此制剂有关的细节可在药物及医药科学(Drugs and thePharmaceutical Sciences)，第18册，皮肤科制剂，经由皮吸收(Dermatological Formulations，Percutaneous Absorption)，布瑞安贝瑞(Brian Barry)，(1983)，第314页中发现。
油在水中的乳膏(o/w)具有油分散在水性基质中。o/w乳膏典型会在涂布后看不见、可清洗掉及受消费者欢迎。此乳膏的油相典型包括最高约20％w/w的硬脂酸、长链蜡状醇、植物油或蜡。水相(其包含该化合物、润肤剂、稳定剂、抗氧化剂等等)则构成剩余组分。该化合物同样也可直接掺入商业所制备的乳膏基质，诸如水性乳膏(AqueousCream)BP、溴化十六烷基三甲铵乳膏(Cetrimide Cream)BP、聚乙二醇单醋醚(Cetomacrogol)BP或二甲聚硅氧烷(Dimethicone)BP。更详细的o/w乳膏可在前述的贝瑞的第314-322页中发现。
软膏为另一种可使用的半固体剂量形式。传统的软膏基质(即载体)包括烃类(矿脂、蜂蜡等等)、植物油、脂肪醇(胆固醇、羊毛脂、羊毛醇、硬脂醇等等)或硅酮类。更详细的软膏可在前述的贝瑞的第304-312页中发现。
糊膏基本上为一软膏，其已加入高百分比的不溶微粒固体，最高50重量％。其可使用诸如淀粉、氧化锌、碳酸钙或滑石的不溶固体。可如上述般制备该软膏。更详细的糊膏可在前述的贝瑞的第322页中发现。
也可使用气溶胶。该化合物可溶解在一推进剂及一共溶剂(诸如乙醇、丙酮、十六烷基醇等等)中。可掺入发泡剂以产生摩丝。更详细的气溶胶可在前述的贝瑞的第323-324页中发现。
可使用广泛多种方法来制备上述描述的制剂。广泛来说，该制剂可通过在一定温度下，将如于本文中所描述的制剂的组分结合在一起一段足以提供一药学上有效及精致的组合物的时间而制备。如使用于本文，名称″结合在一起″意谓着将该组合物的全部组分结合及混合在一起约相同时间。名称″结合在一起″也意谓着可以一或多种顺序来结合不同组分，以提供想要的产物。该制剂可以重量/重量(w/w)或重量/体积(w/v)为基础来制备，视最后剂量形式的形式而定。
该制剂可经包装以直接零售销售至消费者(即，制造的物品或成套用具)。此类物品将以可告知患者如何使用该产品来促进毛发生长的方式标定及包装。此用法说明将包括治疗周期、剂量计划表、预防措施等等。这些用法说明可为图像形式、书写说明或其组合。它们可印刷在包装侧边、可为一塞入物或可为任何其它合适于零售市场流通的形式。
F)治疗用途本发明的制剂可使用来促进毛发生长。其典型为每日涂布1至4次或较不频繁(如可由医生推荐)。在一个具体实施方案中，该制剂可使用来治疗或防止秃发。最平常的秃发型式为雄性秃。此症状也通常称为男性型秃头及女性型秃头。也可通过本发明的制剂来治疗其它型式的秃发。
再生期脱发为由于化学物质或辐射(诸如用于癌症的化学疗法或辐射疗法)所造成的脱发。此也通常称为″药物引起″或″辐射引起″的秃发。该制剂可使用来治疗此症状。
簇圆秃为一种自体免疫性疾病，其最初会在头皮上显现出圆形斑脱发。其会发展成整头毛发脱落(其已熟知为全部秃发)及会造成整头及身体毛发脱落(其已熟知为全身秃毛)。该制剂可使用来治疗或防止这些型式的秃发。
外伤性秃发为毛囊伤害的结果。其也通常称为″疤痕性秃发″。精神性秃发由于严重的感情压力所造成。通过引发毛发生长期，该化合物同样可在这些型式的秃发上提供利益。因此，本发明应该不推断为仅限于治疗雄性秃。该制剂可使用来减轻任何型式的脱发。
在进一步具体实施方案中，包含该化合物的制剂也可使用于尚未经历脱发，但是相信他们有经历秃发风险的患者。此患者的实例包括用熟知会引发秃发的药物将接受癌症化学疗法的那些人。经历心理压迫的年轻成年人在认为开始秃头(特别是具有秃头家族历史那些人)时，也可通过此预防性治疗受惠。此预防性治疗包括在名称″促进毛发生长″中。
虽然本发明已以特定具体实施方案来说明，但可了解的是其能有进一步的改变，且此申请案意欲涵盖本发明的任何变化、用途或适应情况，且这些变化通常可遵循本发明的原理及包括与本公开的偏差，而如在本发明的技术领域内所熟知或习惯的实践。陈述下列实施例及生物学数据，以进一步阐明本发明。此公开不应该理解为以任何方式限制本发明。
实施例实施例1使用w/v及w/w方法来制备包含该化合物与乙醇、丙二醇及肉豆蔻酸异丙酯的局部制剂。
实施例1Aw/v方法如下制备在本发明的范围内及包含0.96％w/v的该化合物的制剂将在表I中所提出的组分，以编列在表中的顺序加入至一锥形管，及涡旋直到该混合物呈均相。在小玻瓶中称入大约65.9毫克呈溶剂化物形式的该化合物。将六毫升显示在表I的载体溶液加入至该小玻瓶，以在该制剂中提供大约0.96％w/v的该化合物。
表I
可根据上述提出的程序来制备在表II至IV中所提供的制剂用的载体溶液。
实施例1Bw/v方法如下制备在本发明的范围内及包括大约1％的该化合物的制剂在小玻瓶中称入大约11毫克的呈溶剂化物形式的该化合物。将一毫升显示在表II中的载体溶液加入至该小玻瓶，以提供大约0.96％w/v的该化合物。
表II
实施例1Cw/v方法如下制备在本发明的范围内及包括0.96％的该化合物的制剂在小玻瓶中称入该化合物(11毫克)。将一毫升如显示在表III或IV中及如上述制备的载体溶液加入至该小玻瓶，以提供包含大约0.96％w/v的该化合物的制剂。
表III
表IV
实施例2进行活体外死人尸体皮肤渗透研究的方法使用法兰次扩散槽系统来测量活体外经皮吸收。法兰次扩散槽的槽体积为5.5至5.7毫升，供应表面积为0.635平方厘米及开口内径为9毫米。已移除皮下层的经冷冻保存的死人尸体皮肤可从俄亥俄谷组织及皮肤中心(Ohio Valley Tissue and Skin Center)购得，及贮存在-65℃下直到使用。在实验前，在室温下解冻该皮肤。接收腔完全填充0.1％w/v在达佩扣氏磷酸盐缓冲盐液中的布里依-98，pH6.9(KH2PO414.7mM及Na2HPO480.9mM)。使用水浴将接收腔维持在37℃及使用磁搅拌子搅拌。让该供应腔留在室温下。使用中空打孔器移出7/8″的圆形片人类尸体组织及将其放置在槽中，其表皮侧面对供应腔及真皮侧面对接收腔。然后，将供应罩钳合到该槽上。通过倒转该槽来移除任何在真皮/接收界面处所引进的气泡。
在使用具放射性的该化合物的测试中，将15微升具有15Ci/毫摩尔的特定活性且已溶解在乙醇中的该3H化合物转入依潘朵夫(Eppendorf)管中。通过让N2气体通过该溶液上方来干燥该化合物。将150微升在实施例1中所制备包含0.96％w/v的该化合物的制剂加入至该具放射性的化合物。使用涡旋来混合该些成分。
在施加剂量前，让该皮肤平衡30分钟。使用正置换移液管，将10微升大约0.96％w/v的该化合物溶液涂布到皮肤上(在0.635平方厘米的注入面积上)。在放射性的该化合物的实例中，10微升的特定活性大约25-30微Ci/毫克。在大约0、2、5、8、18及24小时处，从接收腔的取样口移出0.5毫升的样品，且以等体积的接收溶液置换。通过倒转该槽来移除任何引进该接收器/真皮的界面处的气泡。
在最后的样品后，以0.5毫升(每次)的乙醇来清洗皮肤表面四次。在乙醇洗涤后，以干棉花拭子轻轻擦拭注入表面，移除供应罩，及以经乙醇弄湿的棉花拭子来擦拭皮肤表面两次，及最后以干棉花拭子轻轻擦拭皮肤表面。将全部的拭子及乙醇洗液都放在一锥形管中。将供应罩放置在该锥形管中。
从该槽移出皮肤，及利用切削来分离注入区域的表皮部分，及将其放置在配衡的闪烁小玻瓶中。钳取穿过真皮的活组织切片，及将其放置在配衡的闪烁小玻瓶中。记录真皮及表皮的重量。过多的皮肤部分放置在闪烁小玻瓶中或加入该含表面洗液的锥形管中。
样品的制备及分析处理样品，以分析其放射性*接收样品将15毫升的闪烁液体加入至该接收样品及测量该样品的放射性。
*表面清洗将23毫升的乙醇加入至该包含醇洗液、拭子及供应罩的锥形管中。全部的管子都涡旋45秒及经声波处理15分钟。将0.5毫升的上述溶液转移至一闪烁小玻瓶中；将15毫升的闪烁液体加入至该小玻瓶及测量其放射性。
*表皮样品将1毫升的沙伏伯(Solvable)TM加入至该包含表皮的小玻瓶，在水浴中将该样品保持在60℃下且设定为30rpm，直到组织溶解(少于20小时)。让小玻璃瓶冷却，及将15毫升的闪烁液体(阿提玛(Ultima)黄金XR)加入至该小玻瓶。在测量放射性前，让该样品静置在暗处3-4小时。
*真皮样品将2毫升的沙伏伯TM加入至该包含真皮的小玻瓶，在水浴中将该样品保持在60℃下且设定为30rpm，直到组织溶解(少于24小时)。让该小玻璃瓶冷却，及将15毫升的闪烁液体加入至该小玻瓶。在测量放射性前，将样品静置在暗处3-4小时。
*过多皮肤将过多的皮肤部分分成二片及将每片放置在个别的闪烁小玻瓶中。在每个小玻瓶中，加入3毫升的沙伏伯TM。将该样品保持在60℃的水浴中且设定在30rpm，直到组织溶解(大约24小时)。让该小玻璃瓶冷却，及将15毫升的闪烁液体加入至该小玻瓶。在测量放射性前，让该样品静置在暗处3-4小时。
使用液体闪烁分析器(三卡伯(TriCarb)2500TR，来自博精(PerkinElmer))来分析样品。
该化合物的流通量及真皮量的计算流通量计算绘制该化合物渗透过皮肤的量(如为每表面积的量(微克/平方厘米))对时间(小时)的图形。通过计算渗透曲线的线性部分的斜率来测量流通量(微克/平方厘米/小时)。计算该化合物在不同皮肤薄层及接收腔中的量
通过放射性分析来测量该化合物的渗透量在闪烁计数器中计数所收集的样品，及侦测在每层皮肤层中的具放射性的该化合物的百分比；及在接收腔中的量为在移除样品时，该化合物在特定腔中的量。例如，为了在固定时间处(24小时)测量该化合物的渗透率，在涂布3H的该化合物后的24小时处测量在每层中的放射性量。该化合物在皮肤表面上的量代表该化合物超过24小时后不渗透过角质层的量。在表皮样品中所回收的具放射性的该化合物的量代表该化合物在该时间点前渗透过角质层，但是不渗透过真皮的量。该化合物在真皮中的量代表该化合物在24小时处渗透过角质层及表皮且保留在真皮层中的量。该化合物在接收腔中的量代表该式的化合物其在24小时的试验期间，已渗透过角质层、表皮及真皮的量。
如上所述处理及分析样品。以局部涂布的该化合物的总量为准，计算该化合物在样品中的该化合物平均百分比的量。
实施例3该化合物在包含63.5％的乙醇∶20％的丙二醇∶8％的环十五内酯(CPE-215)∶7.5％的水(w/w/w/w)的载体中，与在包含70％的乙醇∶30％的丙二醇(w/w)的载体中的流通量速率的比较为了测量该渗透促进剂增加该化合物渗透过人类皮肤的速率的效率，使用描述在实施例2中的法兰次扩散槽系统来测量该化合物于二种不同载体中的流通量速率。该人类皮肤的厚度为0.71-0.96毫米及0.90-1.04毫米。比较该化合物在包含0.96％w/v的该化合物的参考制剂中或在包含乙醇∶丙二醇∶环十五内酯∶水(63.5∶20∶8∶7.5％w/w/w/w)的载体中的渗透率。
显示在第1图的结果指示出该化合物在包含一渗透促进剂的载体中的皮肤渗透率已大大提高(与参考制剂比较)。第1图阐明该化合物在某一定时间后(定义为滞缓时间)显露于该接收媒质中的量。滞缓时间为该化合物穿过在皮肤中的主要阻碍(角质层)，然后在进入接收相前扩散过表皮及真皮所需的时间的结果。所应用的该化合物在参考制剂中的流通量为0.004±0.006微克/平方厘米/小时。所应用的该化合物在载体(其也包含一渗透促进剂，乙醇∶丙二醇∶环十五内酯∶水＝63.5∶20∶8∶7.5％w/w/w/w)中的流通量为0.053±0.003微克/平方厘米/小时。因此，包含该渗透促进剂(环十五内酯)的制剂可提供该化合物穿透过皮肤层的流通量比该参考制剂高。
表2.环十五内酯在该化合物(0.96％w/v)的活体外死人尸体皮肤渗透率上的效应
SD＝标准偏差。
第1图。该化合物(0.96％w/v)从含或不含CPE-215的媒剂系统渗透过死人尸体皮肤的渐增量
实施例4
比较在描述于实施例2的法兰次扩散槽试验中，当使用IPM作为渗透促进剂所获得的流通量与使用环十五内酯作为渗透促进剂所获得的流通量利用描述在实施例1中的方法来制备包含该化合物及乙醇∶丙二醇∶IPM(60∶20∶20％w/w/w)或乙醇∶丙二醇∶环十五内酯∶水(63.5∶20∶8∶7.5％w/w/w/w)的载体。如实施例2所描述般来测量流通量速率。在此研究中的皮肤厚度为0.71-0.96毫米及0.90-1.04毫米。
第2图为该化合物在不同时间点处穿透过皮肤而吸收进入接收器的渐增量。该化合物施加在包含乙醇∶丙二醇∶IPM(60∶20∶20％w/w/w)的载体中的流通量为0.017±0.008微克/平方厘米/小时。该化合物施加在包含环十五内酯(乙醇∶丙二醇∶环十五内酯∶水(63.5∶20∶8∶7.5％w/w/w/w)的载体中的流通量速率为0.022±0.007微克/平方厘米/小时。包含IPM的制剂可提供该化合物穿透过皮肤的流通量类似于包含环十五内酯渗透促进剂的制剂。
在固定时间(24小时)后，在个别的皮肤层及在接收腔中所测量的该化合物的渗透率则表示于表3中。
表3.包含IPM或CPE-215的媒剂系统在该化合物(0.96％w/v)的活体外死人尸体皮肤渗透率上的效应
SD＝标准偏差第2图。该化合物(0.96％w/w)从包含IPM或CPE-215的媒剂系统渗透过死人尸体皮肤的渐增量
实施例5变化IPM量在该化合物的皮肤渗透率上的效应根据描述在实施例2中的方法，使用1.03-1.19毫米厚的死人尸体皮肤来试验变化在载体中的IPM程度于该化合物的渗透率上的效应。第3图描绘出该式的化合物在不同时间点处穿透过皮肤而吸收进入接收器的渐增量。该化合物施加在由乙醇∶丙二醇∶IPM(60∶20∶20％w/w/w)所组成的载体中的流通量为0.011±0.003微克/平方厘米/小时。该化合物施加在包含乙醇∶丙二醇∶IPM(70∶20∶10％w/w/w)的载体中的流通量为0.007±0.003微克/平方厘米/小时。
表4.IPM程度在该化合物(0.96％w/v)的活体外死人尸体皮肤渗透率上的效应
SD＝标准偏差。
第3图。该化合物(0.96％w/w)从包含不同IPM程度的媒剂渗透过死人尸体皮肤的渐增量 实施例6不同渗透促进剂在该化合物的渗透率上的比较试验数种根据本发明包含渗透促进剂的其它制剂，以测量其在该化合物的渗透率上的影响。使用描述在实施例2中的试验来检测该化合物(1.86％w/v)于下列载体中的渗透率。当给药在一包含EtOH/PG/DMI(二甲基异山梨醇)(60∶30∶10％w/w)的载体中的该化合物时，其流通量为0.036±0.0336微克/平方厘米/小时。该化合物施加在乙醇∶丙二醇∶IPM(50∶30∶20％w/w/w)的载体中的流通量为191±0.026微克/平方厘米/小时。该化合物施加在由(EtOH/PG/米格莱欧(Miglyol)840(50∶30∶20％w/w/w)所组成的载体中的流通量为0.11±0.007微克/平方厘米/小时。
虽然未在每个例子中进行直接比较，但趋势显示出包含渗透促进剂的制剂可增加该化合物穿过死人尸体皮肤进入接收器的流通量(当与参考制剂比较时)。
权利要求
1.一种局部制剂，其包含(a)一有效量的6-[[(3S，4R)-3，4-二氢-3-羟基-6-[(3-羟基苯基)磺酰基]-2，2，3-三甲基-2H-1-苯并吡喃-4-基]氧基]-2-甲基-3(2H)-哒嗪酮或其药学上可接受的盐；(b)一皮肤可接受的载体；及c)一流通量，其中该制剂的该化合物在法兰次扩散槽试验中穿过死人尸体皮肤的流通量，至少等于或大于由参考制剂所提供的流通量的三倍。
2.如权利要求第1项的局部制剂，其中该制剂的该化合物在法兰次扩散槽试验中穿过死人尸体皮肤的流通量，至少等于或大于由参考制剂所提供的流通量的五倍。
3.如权利要求第1项的局部制剂，其中该制剂的该化合物在法兰次扩散槽试验中穿过死人尸体皮肤的流通量，至少等于或大于由参考制剂所提供的流通量的十倍。
4.如权利要求第1、2或3项的任一项的局部制剂，其中该制剂为一液体。
5.如权利要求第1、2、3或4项的任一项的局部制剂，其中该化合物的存在量约0.5％至约3％(w/v)。
6.如权利要求第1、2、3或4项的任一项的局部制剂，其中该制剂为醇溶液或水-醇溶液。
7.如权利要求第1至6项的任一项的局部制剂，其中该制剂包含约10％至约25％(w/w)的多元醇、约50％至约70％(w/w)的单羟基醇及约1％至约30％(w/w)的渗透促进剂。
8.如权利要求第1至7项的任一项的局部制剂，其中该制剂包含约10％至约25％(w/w)选自于由下列所组成的多元醇丙二醇、双丙二醇、己二醇、1，3-丁二醇、聚乙二醇及甘油；约50％至约70％(w/w)选自于由下列所组成的单羟基醇乙醇、异丙醇及苄醇；及约1％至约30％(w/w)选自于由下列所组成的渗透促进剂肉豆蔻酸异丙酯、环十五内酯、二辛酸/二癸酸丙二醇酯。
9.如权利要求第1至6项的任一项的制剂，其中该制剂包含(a)约60％的乙醇(w/w)；(b)约20％的丙二醇(w/w)；及(c)约20％(w/w)的肉豆蔻酸异丙酯。
10.如权利要求第1至3项的任一项的制剂，其中该剂量形式为一选自于由下列所组成的半固体剂量形式乳膏、凝胶、软膏及糊膏。
11.如权利要求第10项的制剂，其中该化合物的存在量约0.5至约3％w/w。
12.如权利要求第10项的制剂，其中该制剂包含一渗透促进剂，其量约1至30％w/w。
13.一种如权利要求第1至12项的任一项的制剂的用途，其可用来促进哺乳动物的毛发生长。
14.一种包含一如权利要求第1至12项的任一项的制剂的制造物品，其中该制剂可经包装而用于零售销售，以告知患者如何使用该产品来促进毛发生长。
全文摘要
本发明涉及一种局部制剂，其在包含至少一种药学上可接受的载体的制剂中，包含化合物6－[[(3S，4R)－3，4－二氢－3－羟基－6－[(3－羟基苯基)磺酰基]－2，2，3－三甲基－2H－1－苯并吡喃－4－基]氧基]－2－甲基－3(2H)－哒嗪酮。该制剂特别可使用来促进毛发生长，包括减轻秃发。
文档编号A61K31/353GK1988900SQ200580024498
公开日2007年6月27日 申请日期2005年7月11日 优先权日2004年7月19日
发明者S·M·西奥迪, D·K·帕里克 申请人:沃尼尔·朗伯有限责任公司
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