草莓的茎尖离体快速培养方法
专利名称：草莓的茎尖离体快速培养方法
技术领域：
本发明涉及一种草莓的茎尖离体快速培养方法，利用当年抽生的匍匐茎上的茎尖生长点经消毒后诱导丛生芽，再经过培养后得到完整的试管苗，属于草莓培养方法技术领域。
背景技术：
草莓是一种优质高档水果，营养丰富，经济价值高。长久以来，草莓的繁殖方式一直以分株繁殖和腋芽扦插繁殖为主，但这些传统的繁殖方式很容易使草莓感染病毒，使其产量和质量下降，无法满足生产用种苗之需。
发明内容
本发明的目的是提供一种繁殖率高、繁殖速度快、繁殖效果优异的草莓培养方法。为了达到上述目的，本发明提供了一种草莓的茎尖离体快速培养方法，其特征在于，具体步骤为
第一步选取草莓当年萌发的匍匐茎，冲洗干净，消毒备用；
第二步将消毒干净的草莓匍匐茎在解剖镜下切取0. 1 0. 5mm长的茎尖，接种于发生培养基中进行生芽培养，待茎尖上长出0. 5 1. 5cm长的新芽后，将新芽切下，接种到增殖培养基中进行丛生芽诱导，其中，所述发生培养基是在MS培养基的基础上添加了 6-苄基氨基嘌呤(6-BA)和萘乙酸(NAA)，所述增殖培养基是在MS培养基的基础上添加了 6-苄基氨基嘌呤(6-BA)、激动素(KT)和吲哚丁酸(IBA)；
第三步将丛生芽切成单芽，接种于生根培养基中进行生根培养，所述生根培养基是在 1/2MS培养基的基础上添加了萘乙酸(NAA)；
第四步，将生根的试管苗移入由质量比为4 6 :1的珍珠岩和泥炭混合而成的基质中， 浇足水后用塑料薄膜覆盖保温保湿，5 9天后揭开薄膜逐步炼苗，每天叶面喷水2 3次， 10 20天后施加肥料液，50 70天后将幼苗移至灌满纯泥炭的塑料穴盘，浇水后用塑料薄膜覆盖保温保湿，经1. 5 2. 5个月培养后直接移栽至大田中。优选地，所述第一步中的消毒的具体操作为在超净工作台上先用70 SOvoW)乙醇溶液消毒，然后用0. 05 0. 15vol%的洁尔敏溶液消毒，最后用0. 05 0. 15vd%氯化汞溶液消毒，用无菌水冲洗，再用无菌滤纸吸干水分。优选地，所述发生培养基中6-苄基氨基嘌呤的浓度为1 :3mg/L，萘乙酸的浓度为 0. 1 0. 3mg/L, pH 值为 5 6。优选地，所述增殖培养基中6-苄基氨基嘌呤的浓度为0. 1 1. Omg/L,激动素的浓度为0. 1 0. 3mg/L,吲哚丁酸的浓度为0. 1 0. 3mg/L。优选地，所述生根培养基中萘乙酸的浓度为0. 1 1. Omg/L。所述第一步中生芽培养是在20 30°C、光照强度2000 3000LX以及光照时间 8 16小时/天的条件下进行。
3
所述第二步中丛生芽诱导是在20 30°C、光照强度3000 4000LX以及光照时间 8 16小时/天的条件下进行。所述第二步进行丛生芽诱导后进行继代增殖，每30-35天增殖一次，增殖率为1 3-4。所述第三步中生根培养是在20 30°C、光照强度3000 4000LX，光照时间8 16小时/天的条件下进行。所述第四步中用到的肥料液中含有0. 05 0. 15衬％硝酸铵和0. 05 0. 15衬％磷
酸二氢钾。与现有技术相比，本发明具有如下有益效果
1、脱毒率高(采用解剖镜下剥取0. 3mm大小茎尖)，茎尖生长快，茎尖发生率高，一般高达96%。繁殖率高，繁殖速度快，可以在短时期内工厂化生产种苗。2、试管苗生长旺盛，可消除“玻璃化”现象。3、试管苗生根率高，一般可达99%。
具体实施例方式下面结合实施例来具体说明本发明。实施例1
MS培养基成分如下
权利要求
1.一种草莓的茎尖离体快速培养方法，其特征在于，具体步骤为第一步选取草莓当年萌发的匍匐茎，冲洗干净，消毒备用；第二步将消毒干净的草莓匍匐茎在解剖镜下切取0. 1 0. 5mm长的茎尖，接种于发生培养基中进行生芽培养，待茎尖上长出0. 5 1. 5cm长的新芽后，将新芽切下，接种到增殖培养基中进行丛生芽诱导，其中，所述发生培养基是在MS培养基的基础上添加了 6-苄基氨基嘌呤和萘乙酸，所述增殖培养基是在MS培养基的基础上添加了 6-苄基氨基嘌呤、激动素和吲哚丁酸；第三步将丛生芽切成单芽，接种于生根培养基中进行生根培养，所述生根培养基是在 1/2MS培养基的基础上添加了萘乙酸；第四步，将生根的试管苗移入由质量比为4 6 :1的珍珠岩和泥炭混合而成的基质中， 浇足水后用塑料薄膜覆盖保温保湿，5 9天后揭开薄膜逐步炼苗，每天叶面喷水2 3次， 10 20天后施加肥料液，50 70天后将幼苗移至灌满纯泥炭的塑料穴盘，浇水后用塑料薄膜覆盖保温保湿，经1. 5 2. 5个月培养后直接移栽至大田中。
2.如权利要求1所述的草莓的茎尖离体快速培养方法，其特征在于，所述第一步中的消毒的具体操作为在超净工作台上先用70 SOvoW)乙醇溶液消毒，然后用0. 05 0. 15vol%的洁尔敏溶液消毒，最后用0. 05 0. 15vol%氯化汞溶液消毒，用无菌水冲洗，再用无菌滤纸吸干水分。
3.如权利要求1所述的草莓的茎尖离体快速培养方法，其特征在于，所述发生培养基中6-苄基氨基嘌呤的浓度为1 :3mg/L，萘乙酸的浓度为0. 1 0. 3mg/L, pH值为5 6。
4.如权利要求1所述的草莓的茎尖离体快速培养方法，其特征在于，所述增殖培养基中6-苄基氨基嘌呤的浓度为0. 1 1. Omg/L,激动素的浓度为0. 1 0. 3mg/L,吲哚丁酸的浓度为0. 1 0. 3mg/L。
5.如权利要求1所述的草莓的茎尖离体快速培养方法，其特征在于，所述生根培养基中萘乙酸的浓度为0. 1 1. Omg/L。
6.如权利要求1所述的草莓的茎尖离体快速培养方法，其特征在于，所述第二步中生芽培养是在20 30°C、光照强度2000 3000LX以及光照时间8 16小时/天的条件下进行。
7.如权利要求1所述的草莓的茎尖离体快速培养方法，其特征在于，所述第二步中丛生芽诱导是在20 30°C、光照强度3000 4000LX以及光照时间8 16小时/天的条件下进行。
8.如权利要求1所述的草莓的茎尖离体快速培养方法，其特征在于，所述第三步中生根培养是在20 30°C、光照强度3000 4000LX，光照时间8 16小时/天的条件下进行。
9.如权利要求1所述的草莓的茎尖离体快速培养方法，其特征在于，所述第二步进行丛生芽诱导后进行继代增殖，每30-35天增殖一次，增殖率为1 :3-4。
10.如权利要求1所述的草莓的茎尖离体快速培养方法，其特征在于，所述第四步中用到的肥料液中含有0. 05 0. 15wt%硝酸铵和0. 05 0. 15wt%磷酸二氢钾。
全文摘要
本发明提供了一种草莓的茎尖离体快速培养方法，其特征在于，具体步骤为第一步选取草莓当年萌发的匍匐茎，冲洗干净，消毒备用；第二步将消毒干净的草莓匍匐茎在解剖镜下切取0.1～0.5mm长的茎尖，接种于发生培养基中进行生芽培养，待茎尖上长出0.5～1.5cm长的新芽后，将新芽切下，接种到增殖培养基中进行丛生芽诱导；第三步将丛生芽切成单芽，接种于生根培养基中进行生根培养；将生根的试管苗移入珍珠岩和泥炭混合而成的基质中，浇足水后用塑料薄膜覆盖保温保湿揭开薄膜逐步炼苗，将幼苗移至灌满纯泥炭的塑料穴盘，浇水后用塑料薄膜覆盖保温保湿，培养后移栽至大田中。本发明具有繁殖率高，繁殖速度快、存活率高的优点。
文档编号A01H4/00GK102422816SQ20111032742
公开日2012年4月25日 申请日期2011年10月25日 优先权日2011年10月25日
发明者张媁, 胡海峰 申请人:上海航育种子基地场
技术领域：
本发明涉及一种草莓的茎尖离体快速培养方法，利用当年抽生的匍匐茎上的茎尖生长点经消毒后诱导丛生芽，再经过培养后得到完整的试管苗，属于草莓培养方法技术领域。
背景技术：
草莓是一种优质高档水果，营养丰富，经济价值高。长久以来，草莓的繁殖方式一直以分株繁殖和腋芽扦插繁殖为主，但这些传统的繁殖方式很容易使草莓感染病毒，使其产量和质量下降，无法满足生产用种苗之需。
发明内容
本发明的目的是提供一种繁殖率高、繁殖速度快、繁殖效果优异的草莓培养方法。为了达到上述目的，本发明提供了一种草莓的茎尖离体快速培养方法，其特征在于，具体步骤为
第一步选取草莓当年萌发的匍匐茎，冲洗干净，消毒备用；
第二步将消毒干净的草莓匍匐茎在解剖镜下切取0. 1 0. 5mm长的茎尖，接种于发生培养基中进行生芽培养，待茎尖上长出0. 5 1. 5cm长的新芽后，将新芽切下，接种到增殖培养基中进行丛生芽诱导，其中，所述发生培养基是在MS培养基的基础上添加了 6-苄基氨基嘌呤(6-BA)和萘乙酸(NAA)，所述增殖培养基是在MS培养基的基础上添加了 6-苄基氨基嘌呤(6-BA)、激动素(KT)和吲哚丁酸(IBA)；
第三步将丛生芽切成单芽，接种于生根培养基中进行生根培养，所述生根培养基是在 1/2MS培养基的基础上添加了萘乙酸(NAA)；
第四步，将生根的试管苗移入由质量比为4 6 :1的珍珠岩和泥炭混合而成的基质中， 浇足水后用塑料薄膜覆盖保温保湿，5 9天后揭开薄膜逐步炼苗，每天叶面喷水2 3次， 10 20天后施加肥料液，50 70天后将幼苗移至灌满纯泥炭的塑料穴盘，浇水后用塑料薄膜覆盖保温保湿，经1. 5 2. 5个月培养后直接移栽至大田中。优选地，所述第一步中的消毒的具体操作为在超净工作台上先用70 SOvoW)乙醇溶液消毒，然后用0. 05 0. 15vol%的洁尔敏溶液消毒，最后用0. 05 0. 15vd%氯化汞溶液消毒，用无菌水冲洗，再用无菌滤纸吸干水分。优选地，所述发生培养基中6-苄基氨基嘌呤的浓度为1 :3mg/L，萘乙酸的浓度为 0. 1 0. 3mg/L, pH 值为 5 6。优选地，所述增殖培养基中6-苄基氨基嘌呤的浓度为0. 1 1. Omg/L,激动素的浓度为0. 1 0. 3mg/L,吲哚丁酸的浓度为0. 1 0. 3mg/L。优选地，所述生根培养基中萘乙酸的浓度为0. 1 1. Omg/L。所述第一步中生芽培养是在20 30°C、光照强度2000 3000LX以及光照时间 8 16小时/天的条件下进行。
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所述第二步中丛生芽诱导是在20 30°C、光照强度3000 4000LX以及光照时间 8 16小时/天的条件下进行。所述第二步进行丛生芽诱导后进行继代增殖，每30-35天增殖一次，增殖率为1 3-4。所述第三步中生根培养是在20 30°C、光照强度3000 4000LX，光照时间8 16小时/天的条件下进行。所述第四步中用到的肥料液中含有0. 05 0. 15衬％硝酸铵和0. 05 0. 15衬％磷
酸二氢钾。与现有技术相比，本发明具有如下有益效果
1、脱毒率高(采用解剖镜下剥取0. 3mm大小茎尖)，茎尖生长快，茎尖发生率高，一般高达96%。繁殖率高，繁殖速度快，可以在短时期内工厂化生产种苗。2、试管苗生长旺盛，可消除“玻璃化”现象。3、试管苗生根率高，一般可达99%。
具体实施例方式下面结合实施例来具体说明本发明。实施例1
MS培养基成分如下
权利要求
1.一种草莓的茎尖离体快速培养方法，其特征在于，具体步骤为第一步选取草莓当年萌发的匍匐茎，冲洗干净，消毒备用；第二步将消毒干净的草莓匍匐茎在解剖镜下切取0. 1 0. 5mm长的茎尖，接种于发生培养基中进行生芽培养，待茎尖上长出0. 5 1. 5cm长的新芽后，将新芽切下，接种到增殖培养基中进行丛生芽诱导，其中，所述发生培养基是在MS培养基的基础上添加了 6-苄基氨基嘌呤和萘乙酸，所述增殖培养基是在MS培养基的基础上添加了 6-苄基氨基嘌呤、激动素和吲哚丁酸；第三步将丛生芽切成单芽，接种于生根培养基中进行生根培养，所述生根培养基是在 1/2MS培养基的基础上添加了萘乙酸；第四步，将生根的试管苗移入由质量比为4 6 :1的珍珠岩和泥炭混合而成的基质中， 浇足水后用塑料薄膜覆盖保温保湿，5 9天后揭开薄膜逐步炼苗，每天叶面喷水2 3次， 10 20天后施加肥料液，50 70天后将幼苗移至灌满纯泥炭的塑料穴盘，浇水后用塑料薄膜覆盖保温保湿，经1. 5 2. 5个月培养后直接移栽至大田中。
2.如权利要求1所述的草莓的茎尖离体快速培养方法，其特征在于，所述第一步中的消毒的具体操作为在超净工作台上先用70 SOvoW)乙醇溶液消毒，然后用0. 05 0. 15vol%的洁尔敏溶液消毒，最后用0. 05 0. 15vol%氯化汞溶液消毒，用无菌水冲洗，再用无菌滤纸吸干水分。
3.如权利要求1所述的草莓的茎尖离体快速培养方法，其特征在于，所述发生培养基中6-苄基氨基嘌呤的浓度为1 :3mg/L，萘乙酸的浓度为0. 1 0. 3mg/L, pH值为5 6。
4.如权利要求1所述的草莓的茎尖离体快速培养方法，其特征在于，所述增殖培养基中6-苄基氨基嘌呤的浓度为0. 1 1. Omg/L,激动素的浓度为0. 1 0. 3mg/L,吲哚丁酸的浓度为0. 1 0. 3mg/L。
5.如权利要求1所述的草莓的茎尖离体快速培养方法，其特征在于，所述生根培养基中萘乙酸的浓度为0. 1 1. Omg/L。
6.如权利要求1所述的草莓的茎尖离体快速培养方法，其特征在于，所述第二步中生芽培养是在20 30°C、光照强度2000 3000LX以及光照时间8 16小时/天的条件下进行。
7.如权利要求1所述的草莓的茎尖离体快速培养方法，其特征在于，所述第二步中丛生芽诱导是在20 30°C、光照强度3000 4000LX以及光照时间8 16小时/天的条件下进行。
8.如权利要求1所述的草莓的茎尖离体快速培养方法，其特征在于，所述第三步中生根培养是在20 30°C、光照强度3000 4000LX，光照时间8 16小时/天的条件下进行。
9.如权利要求1所述的草莓的茎尖离体快速培养方法，其特征在于，所述第二步进行丛生芽诱导后进行继代增殖，每30-35天增殖一次，增殖率为1 :3-4。
10.如权利要求1所述的草莓的茎尖离体快速培养方法，其特征在于，所述第四步中用到的肥料液中含有0. 05 0. 15wt%硝酸铵和0. 05 0. 15wt%磷酸二氢钾。
全文摘要
本发明提供了一种草莓的茎尖离体快速培养方法，其特征在于，具体步骤为第一步选取草莓当年萌发的匍匐茎，冲洗干净，消毒备用；第二步将消毒干净的草莓匍匐茎在解剖镜下切取0.1～0.5mm长的茎尖，接种于发生培养基中进行生芽培养，待茎尖上长出0.5～1.5cm长的新芽后，将新芽切下，接种到增殖培养基中进行丛生芽诱导；第三步将丛生芽切成单芽，接种于生根培养基中进行生根培养；将生根的试管苗移入珍珠岩和泥炭混合而成的基质中，浇足水后用塑料薄膜覆盖保温保湿揭开薄膜逐步炼苗，将幼苗移至灌满纯泥炭的塑料穴盘，浇水后用塑料薄膜覆盖保温保湿，培养后移栽至大田中。本发明具有繁殖率高，繁殖速度快、存活率高的优点。
文档编号A01H4/00GK102422816SQ20111032742
公开日2012年4月25日 申请日期2011年10月25日 优先权日2011年10月25日
发明者张媁, 胡海峰 申请人:上海航育种子基地场
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