取代的n－酰基－2－氨基噻唑的制作方法
专利名称：取代的n－酰基－2－氨基噻唑的制作方法
技术领域：
本发明涉及新型的式(I)的取代的N-酰基-2-氨基噻唑或其药用盐， 其中X、R和R1如本申请所述。据信这些化合物主要起腺苷2B受体拮抗剂作用，因此具有治疗糖尿病、糖尿病性视网膜病、哮喘和腹泻的潜力。
腺苷是在许多组织中产生的内分泌物，用于通过四种受体亚型A1、A2A、A2B和A3介导各种功能。所有四种受体均属于G-蛋白偶联受体(GPCRs)类，其含有7个螺旋疏水结构域，这些结构域跨过质膜，由亲水性细胞外和细胞内环连接。A1和A3受体偶联到Gi和Go蛋白，而A2A和A2B受体偶联到Gs蛋白。因为这些差异，腺苷由其通过A2A和A2B受体的作用发出细胞内cAMP水平增加的信号，并且通过A1和A3受体发出减少的信号。另外，腺苷经由A2B受体增加细胞内钙离子水平，因为其偶联于Gq蛋白。
式I的化合物在CHO-A2B-cAMP试验中测量时具有强力的腺苷人A2B受体拮抗剂活性。这些化合物在放射标记的配体结合试验中测量时还具有残余有效的人A1和人A2A拮抗剂活性。
A2B受体对各种细胞类型的功能活性的作用的研究是复杂的，因为对于另外三种受体缺乏选择性A2B激动剂和拮抗剂。典型地，A2B受体的功能活性是由其它三种腺苷受体的选择性激动剂和拮抗剂的缺乏，同时引发NECA，一种强力非选择性腺苷受体激动剂的响应的效果推论出来的。通常，当观察到激动剂效力的以下独特次序时，确定A2B受体对给定细胞类型的功能；NECA(非选择性)＞PIA(A1-选择性激动剂)＞IB-MECA(A3-选择性激动剂)＞CGS-21680(A2A-选择性激动剂)。
腺苷对于四种受体的相对激动剂效力被确定为A1(EC50-0.31μM)＞A3(EC50-0.29μM)＞A2A(EC50-0.7)＞A2B(EC50-24μM)，表明A2B受体在包括但不限于高血糖、肥大细胞激活和胃肠道炎症的慢性、高氧化应激病情中的独特作用。尽管腺苷对A2B受体的激动剂效力低，但是已经报道了具有高A2B受体拮抗剂效力的多种化合物。
采用特异性激动剂和拮抗剂，Eisai研究人员证明了A2B受体拮抗作用在抑制肝葡萄糖产生中的关键作用，并且强力A2B受体拮抗剂和大鼠初级肝细胞中葡萄糖产生的抑制剂同样显示出能够降低KKAy小鼠(一种公认的2型糖尿病模型)的禁食和进食时的葡萄糖水平。因此，本发明的化合物具有预防和/或治疗2型糖尿病的效用。
A2B受体还存在于内皮细胞的质膜中，并且发现能够刺激它们的生长。由于这将导致新血管的生长(血管生成)，本发明的一个目的是预防和/或治疗以异常血管生长为特征的疾病，如糖尿病性视网膜病。
采用特异性抗人A2B-抗体，运用免疫-荧光技术，由支气管肺泡灌洗细胞(bronchoalveolar lavage cells)证明，在从哮喘病人获得的人肺肥大细胞中存在A2B受体。因此，式I化合物提供了一种预防和/或治疗哮喘、支气管痉挛和变应性疾病以及其它梗阻性气道型糖尿病的方法。
还发现A2B受体存在于肠上皮细胞基底外侧区域的结肠中，并且在例如腹泻的疾病中，在胃肠道炎症的反应中增加氯离子分泌。因此，式I化合物提供了治疗炎性胃肠道疾病包括腹泻的方法。
除了A2B受体外，本发明的化合物还对A1和A2A受体具有强力拮抗剂活性。因此，式I化合物提供了治疗腺苷A1、A2A和A2B受体拮抗作用在其中起作用的疾病，如抑郁症、帕金森病和高血压的方法。
一些取代的N-酰基氨基噻唑是本领域已知的，例如，在美国专利No.5,480,874中公开的茚并噻唑基膦酸酯；美国专利No.4,929,623中公开的2-氨基-6-羟基苯并噻唑；Synthetic Communications(1993)，23(17)，2347-53中公开的2-苯甲酰基氨基萘并[1，2-d]噻唑；Indian Drugs，(1985)，23(3)，146-51中公开的苯甲酰氨基-和2-乙酰氨基苯并噻唑衍生物，以及在美国专利5,189,049中公开的某些酰基氨基噻唑衍生物。在美国专利No.4,877,876中公开了与本发明要求保护的化合物类似的2-取代的-8H-茚并(1，2-d)-噻唑衍生物。
具体而言，本发明涉及式(I)的化合物或其药用盐， 其中X是-CH2-、-CH2CH2-、-CHCH-、-(CH2)3-和-O(CH2)-；R是烷基，链烯基，-NHR′或5-或6-元饱和或不饱和的碳环或杂环，所述的环可以任选含有一个或多个杂原子，并且所述环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基选自卤素，羟基，低级烷基，乙酰氨基甲基，烷氧羰基酰氨基甲基，腈基，磺酰氨基，烷基磺酰基，烷氧基，苄基，苯甲酰基，芳基磺酰基和酰基，其中苄基，苯甲酰基或芳基磺酰基任选被卤素、三卤代-低级烷基、低级烷基、烷氧基、烷基磺酰基或氰基取代；R1选自氢，卤素，低级烷基，烷氧基或腈基；R′是烷基或5-或6-元饱和或不饱和的碳环或杂环，所述环可以任选含有一个或多个杂原子，并且所述环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基选自卤素，低级烷基，腈基，烷基磺酰基，烷氧基和酰基。
根据本发明的化合物显示出作为腺苷A2B拮抗剂的主要活性，因此可用于治疗由该受体介导的疾病。本发明的化合物可用作预防和治疗例如糖尿病、糖尿病性视网膜病、哮喘和腹泻的活性药剂。腺苷A1和A2A受体的次要拮抗作用使得这些化合物可用于抑郁症、帕金森病和高血压。
本发明的目的是式I化合物及其药用盐和对映体形式，上述化合物的制剂，含有它们的药物和它们的制备方法，以及在控制或预防疾病，特别是控制或预防上述疾病和紊乱，或者在制备相应的药物中使用上述化合物的方法。
式(I)化合物是独自优选的，并且其生理上可接受的盐也是独自优选的，其中特别优选式(I)化合物。
式(I)化合物可以含有一个或多个不对称C原子，因此可以以对映体混合物、非对映异构体混合物或光学纯化合物的形式存在。
优选的如上所述的式(I)化合物是式(IA)表示的化合物或其药用盐， 其中X是-CH2-、-CH2CH2-、-CHCH-、-(CH2)3-和-O(CH2)-；R是烷基，-NHR′或5-或6-元饱和或不饱和的碳环或杂环，所述的环可以任选含有一个或多个杂原子，并且所述环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基选自卤素，低级烷基，腈基，烷基磺酰基，烷氧基和酰基，且R′是烷基或5-或6-元饱和或不饱和的碳环或杂环，所述环可以任选含有一个或多个杂原子，并且所述环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基选自卤素，低级烷基，腈基，烷基磺酰基，烷氧基和酰基。
优选如上所述的式(I)化合物，其中R是烷基，链烯基或5-或6-元饱和或不饱和的碳环或杂环，所述环可以任选含有一个或多个杂原子，并且所述环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基选自卤素，羟基，低级烷基，乙酰氨基甲基，烷氧羰基酰氨基甲基，腈基，磺酰氨基，烷基磺酰基，烷氧基，苄基，苯甲酰基，芳基磺酰基和酰基，其中苄基，苯甲酰基或芳基磺酰基任选被卤素、三卤代-低级烷基、低级烷基、烷氧基、烷基磺酰基或氰基取代。
进一步优选的化合物是这些化合物，其中X是-CH2-。其它优选的化合物是这样的化合物，其中R1是氢，卤素或低级烷氧基。氢，卤素和低级烷氧基各自构成R1的优选实施方案。
本发明另一优选的实施方案涉及如上所述的式(I)化合物，其中R是低级烷基，低级链烯基，苯基或杂环，所述杂环选自噻吩基，吡啶基，吡唑基，咪唑基，呋喃基或哌啶基，其中苯基或杂环任选被1至3个取代基取代，所述取代基选自卤素、羟基、腈基、低级烷基、磺酰氨基、低级烷基-磺酰基、低级烷氧基-羰基、低级烷氧基-C(O)-NH-CH2-、任选被CF3取代的苄基、任选被CF3取代的苯甲酰基或任选被CF3取代的苯磺酰基。
其它优选的如上所述的化合物是这些化合物，其中R是低级链烯基或选自噻吩基、吡啶基、吡唑基、咪唑基、呋喃基或哌啶基的杂环，所述杂环任选被1至3个取代基取代，所述取代基选自卤素、羟基、腈基、低级烷基、磺酰氨基、低级烷基-磺酰基、低级烷氧基-羰基、低级烷氧基-C(O)-NH-CH2-、任选被CF3取代的苄基、任选被CF3取代的苯甲酰基或任选被CF3取代的苯磺酰基。
如上所述的式(I)化合物中，优选R不是苯基、4-NO2-苯基或4-Cl-苯基，特别是当X为-CH2-并且R1是氢时。而且，在如上所述的式(I)化合物中，优选R不是苯基、4-NO2-苯基或4-Cl-苯基，特别是当X为-CH2CH2-并且R1是氢或烷氧基时。而且，在如上所述的式(I)化合物中，优选R不是烷基，特别是当X为-CH2CH2-并且R1是氢时。
下述化合物和实施例中的示例性的取代基X、R和R1中的每一个，单独的和在各组合中的，各自构成优选实施方案，优选在上述化合物和实施例中的具体组合。
特别优选的化合物包括N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-苯甲酰胺，4-氟-N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-苯甲酰胺，4-氰基-N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-苯甲酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-4-甲基-苯甲酰胺，噻吩-2-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)烟酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)异烟酰胺，2-甲基-2H-吡唑-3-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺，N-(6-氯-8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-异烟酰胺，1H-吡唑-4-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺，N-(4，5-二氢-萘并[1，2-d]噻唑-2-基)-异烟酰胺，
N-(5，6-二氢-4H-3-硫杂-1-氮杂-苯并[e]薁-2-基)-异烟酰胺，N-(4H-色烯并[4，3-d]噻唑-2-基)-异烟酰胺，N-萘并[1，2-d]噻唑-2-基-异烟酰胺，3-甲基-3H-咪唑-4-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺三氟乙酸盐，4-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基氨基甲酰基)-哌啶-1-羧酸叔丁酯，3-(三氟甲基-苯甲酰基)-哌啶-4-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺，1-(3-三氟甲基-苄基)-哌啶-4-羧酸(9H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺，1-(3-三氟甲基-苯磺酰基)-哌啶-4-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基-酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)3-氟苯甲酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)3-羟基苯甲酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)2-甲基戊-5-烯酰基酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)2-甲基丁酰基酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)5-甲基磺酰基噻吩-2-甲酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)2-糠酰基酰胺，N-(6-氟-8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)4-羟基烟酰胺，N-(6-氟-8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)(4-氨基磺酰基)苯甲酰胺，N-(6-氟-8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)(4-叔丁氧羰基甲基)苯甲酰胺，N-(6-氟-8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)噻吩-3-甲酰胺，N-(4，5-二氢-萘并[1，2-d]噻唑-2-基)4-羟基烟酰胺，N-(4，5-二氢-萘并[1，2-d]噻唑-2-基)噻吩-3-甲酰胺，N-(4，5-二氢-7-甲氧基萘并[1，2-d]噻唑-2-基)4-羟基烟酰胺，N-(4，5-二氢-7-甲氧基萘并[1，2-d]噻唑-2-基)5-甲基磺酰基噻吩-2-甲酰胺，N-(5，6-二氢-4H-3-硫杂-1-氮杂-苯并[e]薁-2-基)4-羟基烟酰胺，N-(5，6-二氢-4H-3-硫杂-1-氮杂-苯并[e]薁-2-基)噻吩-3-甲酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)3-氯-4-羟基苯甲酰胺，和N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)(4-氨基磺酰基)苯甲酰胺。
上述化合物中的每一个单独构成优选实施方案。
优选的如上所述的式(I)化合物选自N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-苯甲酰胺，
4-氟-N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-苯甲酰胺，4-氰基-N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-苯甲酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-4-甲基-苯甲酰胺，噻吩-2-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)烟酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)异烟酰胺，2-甲基-2H-吡唑-3-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺，N-(6-氯-8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-异烟酰胺，1H-吡唑-4-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺，N-(4，5-二氢-萘并[1，2-d]噻唑-2-基)-异烟酰胺，N-(5，6-二氢-4H-3-硫杂-1-氮杂-苯并[e]薁-2-基)-异烟酰胺，N-(4H-色烯并[4，3-d]噻唑-2-基)-异烟酰胺，N-萘并[1，2-d]噻唑-2-基-异烟酰胺，和3-甲基-3H-咪唑-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺三氟乙酸盐。
其它优选的如上所述的式(I)化合物选自4-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基氨基甲酰基)-哌啶-1-羧酸叔丁酯，3-(三氟甲基-苯甲酰基)-哌啶-4-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺，1-(3-三氟甲基-苄基)-哌啶-4-羧酸(9H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺，1-(3-三氟甲基-苯磺酰基))-哌啶-4-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基-酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)3-氟苯甲酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)3-羟基苯甲酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)2-甲基戊-5-烯酰基酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)2-甲基丁酰基酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)5-甲基磺酰基噻吩-2-甲酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)2-糠酰基酰胺，和N-(6-氟-8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)4-羟基烟酰胺。
其它优选的如上所述的式(I)化合物选自N-(6-氟-8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)(4-氨基磺酰基)苯甲酰胺，
N-(6-氟-8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)(4-叔丁氧羰基甲基)苯甲酰胺，N-(6-氟-8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)噻吩-3-甲酰胺，N-(4，5-二氢-萘并[1，2-d]噻唑-2-基)4-羟基烟酰胺，N-(4，5-二氢-萘并[1，2-d]噻唑-2-基)噻吩-3-甲酰胺，N-(4，5-二氢-7-甲氧基萘并[1，2-d]噻唑-2-基)4-羟基烟酰胺，N-(4，5-二氢-7-甲氧基萘并[1，2-d]噻唑-2-基)5-甲基磺酰基噻吩-2-甲酰胺，N-(5，6-二氢-4H-3-硫杂-1-氮杂-苯并[e]薁-2-基)4-羟基烟酰胺，N-(5，6-二氢-4H-3-硫杂-1-氮杂-苯并[e]薁-2-基)噻吩-3-甲酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)3-氯-4-羟基苯甲酰胺，和N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)(4-氨基磺酰基)苯甲酰胺。
应理解，本发明的通式(I)化合物可以在官能团处衍生以提供在体内能够转化回母体化合物的衍生物。
本发明的另一实施方案涉及如上所述的式(I)化合物的制备方法，该方法包括将式(II)化合物， 与化合物R-C(O)Cl反应，其中R、R1和X如上定义。
合适的反应条件描述于方案1和2以及实施例中。
而且，本发明涉及用根据权利要求9的方法制备的如上定义的式(I)化合物。
除非另外声明，如下定义用于解释和定义用于描述本发明的各种术语的含义和范围。
在本说明书中，术语″低级″用于表示由1至6个，优选1至4个碳原子组成的基团。
″烷基″表示直链或支链饱和脂肪族烃。烷基优选含有1至20个碳原子，更优选1至16个碳原子，还更优选1至10个碳原子。下述的低级烷基也是优选的烷基。
″低级烷基″表示C1至C6烷基，并且包括甲基，乙基，丙基，异丙基，丁基，叔丁基，2-丁基，戊基，己基等。通常，低级烷基优选为C1-C4烷基，更优选为C1-C3烷基。
″三卤代低级烷基″表示被3个卤素原子取代的低级烷基。CF3是优选的三卤代低级烷基。
″烷氧基″表示-O-烷基。″低级烷氧基″表示-O-低级烷基。
″链烯基″表示直链或支链烃残基，其包含烯键和至多7个，优选至多4个碳原子，例如2-丙烯基。
术语″碳环″是指5-或6-元饱和或不饱和的含碳的环，例如芳基环。
术语″杂环″是指可以包含1、2或3个选自氮、氧和/或硫的原子的5-或6-元环，如四氢吡啶，二氢呋喃，二氢吡喃，呋喃基，吡咯基，吡啶基，1，2-、1，3-和1，4-二嗪基，噻吩基，噁唑基，噁二唑基，异噁唑基，噻唑基，异噻唑基，或者咪唑基。杂环基团可以任选被芳基取代。如上所指出的，杂环基团可以被多种取代基取代，并且在苄基、苯甲酰基和芳基磺酰基取代基的情况下，这些取代基可以进一步被卤代基、三卤代低级烷基、低级烷基、烷氧基、烷基磺酰基或氰基取代。
术语″卤素″表示选自氯、氟和溴的原子。
″有效量″是指有效防止、减轻或改善疾病症状或者延长治疗对象存活时间的量。
″杂原子″是指选自N，O和S的原子。
″IC50″是指将具体测量的活性抑制50％所需的具体化合物的浓度。其中，可以如下所述测量IC50。
″芳基″表示一价、单环或双环、芳族碳环烃基，优选为5至6元芳环体系。这种基团的一个实例是苯基。
″酰基″表示-C(O)-C1-C6-烷基，-C(O)H或C(O)-O烷基。
″药用酯″是指常规酯化的含有羧基的式I化合物，该酯保留了式I化合物的生物有效性和性能，并且在体内(有机体内)分裂成相应的活性羧酸。
关于酯和酯在药物化合物输送中的应用的信息可参见Design ofProdrugs.Bundgaard H编辑，(Elsevier，1985)。还可参见H.Ansel等，Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems(6th Ed.1995)108-109页；Krogsgaard-Larsen等，Textbook of Drug Design and Development(2d Ed.1996)152-191页。
″药用盐″指的是保持本发明化合物的生物有效性和性能且由适宜的非毒性有机酸或无机酸或有机碱或无机碱形成的常规酸加成盐或碱加成盐。酸加成盐实例包括来源于无机酸和来源于有机酸的那些酸加成盐，所述的无机酸诸如盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸和硝酸；所述的有机酸诸如对甲苯磺酸、水杨酸、甲磺酸、草酸、琥珀酸、柠檬酸、苹果酸、乳酸、富马酸等。碱加成盐实例包括那些来源于铵、钾、钠的盐和季铵氢氧化物，诸如氢氧化四甲基铵。将药物化合物(即药物)化学改性成盐是药物化学工作者众所周知的技术，目的是为使化合物获得改善的物理和化学稳定性、吸湿性、流动性和溶解性。参见例如，H.Ansel等，Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems(6th Ed.1995)196和1456-1457页。
″可药用的″如可药用载体、赋形剂等，是指药理上可接受的并且对特定化合物的给药对象基本上无毒。
″取代的″是指取代可以发生在一个或多个位置，除非另外声明，每个取代位置的取代基独立地选自特定的选项。
式(I)化合物可以采用下面给出的方法、采用在实施例给出的方法或者类似方法制备。各个反应步骤的合适的反应条件是本领域技术人员已知的。原料可以是商购的，也可以通过类似于下面给出的或者实施例中的方法或者本领域已知的方法制备。
可以将式I化合物和/或它们的药用盐作为药物使用，例如以药物制剂形式用于经肠的、非肠道或局部给药。可以通过口服，例如以片剂、包衣片、锭剂、硬和软明胶胶囊、溶液、乳剂或混悬剂形式给予所述药物制剂。还可以通过直肠，例如以栓剂形式，或通过非肠道、例如以注射液或输液形式进行给药。或者，局部给药，例如以软膏、乳或油形式。优选口服给药。
可以用本领域任何技术人员熟悉的方式进行药物制剂的制备将所述的式(I)化合物和/或它们的药用盐，任选与其它有治疗价值的物质组合，将它们一起与合适的无毒惰性的治疗相容的固体或液体载体材料，以及如果需要，常用的药物辅料制成盖伦给药形式。
适宜的载体材料不仅有无机载体材料，而且还包括有机载体材料。因此，例如，可以将乳糖、玉米淀粉或其衍生物、滑石、硬脂酸或其盐用作片剂、包衣片、锭剂和硬胶囊的载体。用于软明胶胶囊的适宜载体材料例如植物油、蜡、脂肪、半固体和液体多元醇类等。然而，随活性成分特性的不同，就软明胶胶囊而言可能不需要载体。用于生产溶液和糖浆剂的适宜载体材料例如有水、多元醇类、蔗糖、转化糖等。注射液的合适载体材料为，例如水，醇类，多元醇，甘油和植物油。栓剂的合适载体材料为，例如天然或硬化油、蜡、脂肪、半液体或液体多元醇。局部制剂的合适的载体材料为甘油酯类，半合成和合成甘油酯类，氢化油，液体蜡，液体石蜡，液体脂肪醇，甾醇类，聚乙二醇和纤维素衍生物。还可以考虑常用的稳定剂、防腐剂、湿润和乳化剂、稠度改善剂、增香剂、用于改变渗透压的盐、缓冲物质、增溶剂、着色剂和掩蔽剂以及抗氧化剂作为药物辅料。
根据将要控制的疾病、患者的年龄和个体条件以及给药方式，式(I)化合物的剂量可以在宽范围内变化，当然，在每个具体病例中将和个体需求相适合。对于成年患者，可考虑约1至1000mg、特别是约1至100mg的日剂量。根据疾病严重性和精确的药代动力学曲线，所述化合物可以以一个或数个日剂量单位，例如以1至4个剂量单位给药。
如上所述，已经发现本发明的新型化合物为腺苷A2B受体的拮抗剂。因此，本发明的化合物可用于治疗和/或预防由腺苷A2B受体拮抗作用介导的疾病，特别是糖尿病、糖尿病性视网膜病、哮喘和腹泻，尤其是糖尿病。
因此本发明还涉及包含如上定义的化合物和可药用载体和/或辅料的药物组合物。
本发明还包括用作治疗活性物质的如上所述的化合物，尤其是用作用于治疗和/或预防由腺苷A2B受体拮抗作用介导的疾病的治疗活性物质，特别是用作用于治疗和/或预防糖尿病、糖尿病性视网膜病、哮喘和腹泻，尤其是糖尿病的治疗活性物质。
在另一优选实施方案中，本发明涉及一种治疗和/或预防性治疗由腺苷A2B受体拮抗作用介导的疾病的方法，特别是治疗和/或预防性治疗糖尿病、糖尿病性视网膜病、哮喘和腹泻，尤其是糖尿病的方法，该方法包括将如上定义的化合物向人或动物给药。
本发明还包括如上定义的化合物的用途，所述化合物用于治疗和/或预防性治疗由腺苷A2B受体拮抗作用介导的疾病，特别是治疗和/或预防性治疗糖尿病、糖尿病性视网膜病、哮喘和腹泻，尤其是糖尿病。
本发明还涉及如上所述的化合物用于制备药物的用途，所述药物用于治疗和/或预防性治疗由腺苷A2B受体拮抗作用介导的疾病，特别是用于治疗和/或预防性治疗糖尿病、糖尿病性视网膜病、哮喘和腹泻，尤其是糖尿病。这种药物包含如上所述的化合物。
预防和/或治疗糖尿病是优选的适应症。
如下的反应方案和相关叙述说明了制备本发明新型化合物的通用方法。
方案1 方案1的描述在不存在溶剂的情况下，将合适的酮1与硫脲及碘的混合物加热到90-100℃，得到噻唑中间体II。在碱如碳酸钾或吡啶存在下，在加热的情况下用芳酰氯或杂芳酰氯酰化II，得到酰基产物III。备选地，用强碱如氢化钠将II去保护，然后用芳酰氯或杂芳酰氯酰化，也可得到酰基产物III。
结构III的化合物还可以通过以下方法制备使用O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲鎓六氟磷酸盐(HATU)或对甲苯磺酰氯和N-甲基咪唑的组合作为偶联剂，将胺II与芳基羧酸偶联。
方案2 方案2的描述用三氟乙酸将化合物IV去保护，得到中间体哌啶化合物V。然后化合物V可以在碱如三乙胺存在下，与合适的芳基卤、苯甲酰卤或芳基磺酰卤反应，得到化合物VI、VII和VIII。
上述反应的反应条件可以在一定范围内变化。进行上述反应和处理的方法是本领域已知的，或者可以由实施例类似推导。原料是可商购的，或者可以通过与实施例中描述的方法类似的方法制备。
如下实施例将举例说明本发明的优选实施方案，但是其意图不在于限制本发明的范围。
实施例1N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-苯甲酰胺步骤18H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基胺氢碘酸盐将1-茚满酮(6.00g；45.4mmol)，硫脲(6.92g；90.8mmol)和碘(11.52g；45.4mmol)的混合物于搅拌下加热到95℃。3小时后，让混合物冷却到室温。粗的固体用无水乙醇研磨并且过滤。将浅黄色固体用无水乙醇洗涤两次，然后空气干燥，得到9.13g的8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基胺氢碘酸盐1a。
步骤28H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基胺将茚并[1，2-d]噻唑-2-基胺氢碘酸盐1a(9.13g)与100ml的1N氢氧化钠在室温下搅拌1小时然后过滤。将固体用水(3×20mL)洗涤，然后空气干燥，得到5.30g的8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基胺1b。
步骤3N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-苯甲酰胺向茚并[1，2-d]噻唑-2-基胺氢碘酸盐1a(100mg；0.32mmol)在吡啶(2mL)中的混合物中逐滴加入苯甲酰氯(0.12mL；0.96mmol)。然后将混合物在密封管中于80℃搅拌过夜。将混合物冷却到室温并且真空除去溶剂。将残余物置于乙酸乙酯中，并且将萃取物与2M碳酸钠溶液一起在室温搅拌2小时。然后将有机层用盐水溶液洗涤，硫酸钠干燥并且真空浓缩。粗产物经过硅胶色谱(洗脱液10％乙酸乙酯己烷至40％乙酸乙酯梯度)得到53mg的N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-苯甲酰胺2。EI-HRMS m/eC17H12N2OS计算值292.0670，实测292.0666。
实施例24-氟-N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-苯甲酰胺以与实施例1步骤3中所述类似的方式，用4-氟苯甲酰氯(0.116mL；0.96mmol)酰化8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基胺氢碘酸盐1a(实施例1的步骤1中制备，100mg；0.32mmol)，得到35mg的4-氟-N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-苯甲酰胺3。EI-HRMS m/eC17H11FN2OS计算值310.0576，实测310.0577。
实施例34-氰基-N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-苯甲酰胺以与实施例1步骤3中所述类似的方式，用4-氰基苯甲酰氯(164mg；0.96mmol)酰化8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基胺氢碘酸盐1a(实施例1的步骤1中制备，100mg；0.32mmol)，得到26mg的4-氰基-N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-苯甲酰胺4。EI-HRMS m/eC18H14N2OS(M+)计算值306.0827，实测306.0827。
实施例4N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-4-甲基-苯甲酰胺以与实施例1步骤3中所述类似的方式，用4-甲基苯甲酰氯(0.0.130mL；0.96mmol)酰化8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基胺氢碘酸盐1a(实施例1的步骤1中制备，100mg；0.32mmol)，得到25mg的N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-4-甲基-苯甲酰胺5。EI-HRMS m/eC16H11N3OS(M+)计算值293.0623，实测293.0621。
实施例5噻吩-2-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺以与实施例1步骤3中所述类似的方式，用2-噻吩碳酰氯(0.106mL；0.96mmol)酰化8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基胺氢碘酸盐1a(实施例1的步骤1中制备，100mg；0.32mmol)，得到17mg噻吩-2-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺6。EI-HRMS m/eC15H10N2OS2(M+)计算值298.0235，实测298.0233。
实施例6N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-烟酰胺将8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基胺氢碘酸盐1a(实施例1的步骤1中制备，mg；mmol)，烟酰氯盐酸盐(92mg；0.50mmol)和二异丙基乙胺(0.50mL；2.77mmol)在二氯乙烷中的悬浮液在密封管中用微波炉加热到120℃10分钟。将混合物冷却到室温并且真空除去溶剂。将残余物置于2M碳酸钠溶液中，并且用乙酸乙酯萃取。将萃取物干燥(硫酸钠)、过滤并且真空浓缩。粗产物经过硅胶色谱(洗脱液＝50％乙酸乙酯/己烷至100％乙酸乙酯/己烷梯度)得到43mg的N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-烟酰胺7。EI-HRMS m/eC16H11N4OS(M+)计算值293.0623，实测293.0620。
实施例7N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-异烟酰胺向在氮气下的8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基胺1b(实施例1的步骤2中制备，640mg；3.4mmol)和碳酸钾(5.40g；39.1mmol)在无水四氢呋喃(20mL)中的混合物中加入异烟酰氯盐酸盐(959mg；5.10mmol)。然后将淤浆加热到回流18hr。此时，加入碳酸钾(5.40g；39.1mmol)和异烟酰氯盐酸盐(959mg；5.10mmol)并且继续回流22hr，然后冷却到室温。真空除去溶剂，将残余物用水稀释并且用二氯甲烷萃取。滤出不溶物，用二氯甲烷和水洗涤，并且最后用乙醚研磨，得到253mg的N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-异烟酰胺8。EI-HRMS m/eC16H11N3OS(M+)计算值293.0623，实测293.0621。
实施例82-甲基-2H-吡唑-3-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺向在氮气下的8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基胺1b(实施例1的步骤2中制备，320mg；1.70mmol)和碳酸钾(3.10g；22.4mmol)在无水四氢呋喃(10mL)中的混合物中加入2-甲基-2H-吡唑-3-碳酰氯(516mg；3.57mmol)。然后将淤浆加热到回流3hr。真空除去溶剂，将残余物用水稀释并且用乙酸乙酯萃取。有机层用50mL的1N盐酸溶液接着用盐水溶液洗涤，然后干燥(硫酸钠)、过滤并且真空浓缩。通过用乙醚研磨纯化粗产物，得到155mg的2-甲基-2H-吡唑-3-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺9。EI-HRMS m/eC15H12N4OS(M+)计算值296.0732，实测296.0731。
实施例9N-(6-氯-8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-异烟酰胺步骤16-氯-8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基胺氢碘酸盐将5-氯-1-茚满酮(1.00g；6.00mmol)，硫脲(0.917g；12.0mmol)和碘(1.55g；6.10mmol)的混合物在密封管中加热到100℃。1小时后，让混合物冷却到室温。固体用水研磨并且过滤。然后将固体用无水乙醇研磨，过滤并且用无水乙醇洗涤几次，得到0.60g的6-氯-8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基胺氢碘酸盐10。
步骤2N-(6-氯-8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-异烟酰胺将6-氯-8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基胺氢碘酸盐10(80mg；0.23mmol)，碳酸钾(138mg；1.0mmol)和异烟酰氯盐酸盐(89mg；0.5mmol)在无水四氢呋喃中的混合物在密封管中加热到80℃。20hr.后，让混合物冷却到室温并且真空浓缩。残余物用二氯甲烷稀释并且用水洗涤。将有机层干燥(硫酸钠)、过滤并且真空浓缩。粗产物用反相HPLC(洗脱液乙腈/水/0.1％三氟乙酸)纯化，得到20mg的N-(6-氯-8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-异烟酰胺11，为三氟乙酸盐。EI-HRMS m/eC16H10ClN3OS(M+)计算值327.0233，实测327.0217。
实施例101H-吡唑-4-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺步骤14-吡唑碳酰氯将4-吡唑羧酸(600mg)在亚硫酰二氯(5mL)中的混合物在氮气下加热到90℃。18hr.后，让混合物冷却到室温并且真空除去溶剂，得到579mg的4-吡唑碳酰氯12，该产物不经进一步纯化在下一步骤(步骤2)中使用。EI-HRMS m/eC16H11N3OS(M+)计算值293.0623，实测293.0621。
步骤21H-吡唑-4-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺以类似实施例7中所述的方式，用4-吡唑碳酰氯12(208mg；1.6mmol)酰化8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基胺1b(实施例1的步骤2中制备，377mg；2.00mmol)，得到190mg的1H-吡唑-4-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺13，为暗色粉末。
实施例113-甲基-3H-咪唑-4-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺三氟乙酸盐在室温下向8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基胺1b(实施例1的步骤2中制备，94mg；0.50mmol)，1-甲基-1H-咪唑-5-羧酸(65mg；0.50mmol)和BOP试剂(443mg；1.0mmol)在无水二氯甲烷中的混合物滴加二异丙基乙胺(0.55ml；3.13mmol)。96小时后，将反应混合物用二氯甲烷稀释，并且用水接着用盐水溶液洗涤。将有机层干燥(硫酸钠)、过滤并且真空浓缩。使用反相HPLC(洗脱液乙腈/水/0.1％三氟乙酸)纯化，得到70mg的14。EI-HRMS m/eC15H12N4OS(M+)计算值296.0732，实测296.0728。
实施例12N-(4，5-二氢-萘并[1，2-d]噻唑-2-基)-异烟酰胺步骤14，5-二氢-萘并[1，2-d]噻唑-2-基胺氢碘酸盐将1-四氢萘酮(5.00ml；37.6mmol)，硫脲(5.72g；75.2mmol)和碘(9.54g；37.6mmol)的混合物在搅拌下加热到95℃。4hr.后，混合物凝固并且冷却到室温。将混合物用200ml的水稀释，并且将固体物质滤出，用无水乙醇研磨。将固体用无水乙醇洗涤几次，得到4.00g的4，5-二氢-萘并[1，2-d]噻唑-2-基胺氢碘酸盐15，为灰白色粉末。
步骤2N-(4，5-二氢-萘并[1，2-d]噻唑-2-基)-异烟酰胺在室温、氮气下，向搅拌着的4，5-二氢-萘并[1，2-d]噻唑-2-基胺氢碘酸盐15在无水四氢呋喃中的悬浮液中加入氢化钠(26mg；1.1mmol)。15分钟后，加入异烟酰氯盐酸盐(107mg；0.60mmol)，并且将混合物在室温搅拌2hr.，然后真空浓缩。残余物用水稀释并且滤出固体物质。使用反相HPLC(洗脱液乙腈/水/0.1％三氟乙酸)纯化，得到20mg的N-(4，5-二氢-萘并[1，2-d]噻唑-2-基)-异烟酰胺16，为三氟乙酸盐。ES-HRMS m/eC17H13N3OS(M+H)计算值308.0852，实测308.0851。
实施例13N-(5，6-二氢-4H-3-硫杂-1-氮杂-苯并[e]薁-2-基)-异烟酰胺步骤15，6-二氢-4H-3-硫杂-1-氮杂-苯并[e]薁-2-基胺氢碘酸盐将1-苯并环庚酮(1.00ml；6.7mmol)，硫脲(1.02g；13.4mmol)和碘(1.70g；6.7mmol)的混合物在搅拌下加热到95℃。20hr.后，让混合物冷却到室温，用200ml水稀释，将滤出的固体物质用25ml水洗涤两次，接着用乙醚洗涤(3×20ml)，得到1.50g的5，6-二氢-4H-3-硫杂-1-氮杂-苯并[e]薁-2-基胺氢碘酸盐17，为灰白色粉末。
步骤2N-(5，6-二氢-4H-3-硫杂-1-氮杂-苯并[e]薁-2-基)-异烟酰胺在室温、氮气下，向搅拌着的5，6-二氢-4H-3-硫杂-1-氮杂-苯并[e]薁-2-基胺氢碘酸盐17(80mg；0.23mmol)在无水四氢呋喃的悬浮液中加入氢化钠(17mg；0.7mmol)。15分钟后，加入异烟酰氯盐酸盐(62mg；0.35mmol)，将混合物在室温搅拌1小时，然后真空浓缩。残余物用水研磨，并且滤出固体物质。使用反相HPLC(洗脱液乙腈/水/0.1％三氟乙酸)纯化，得到20mg的N-(5，6-二氢-4H-3-硫杂-1-氮杂-苯并[e]薁-2-基)-异烟酰胺18，为三氟乙酸盐。EI-HRMS m/eC18H15N3OS(M+)计算值321.0936，实测321.0935。
实施例14N-(4H-色烯并[4，3-d]噻唑-2-基)-异烟酰胺步骤14H-色烯并[4，3-d]噻唑-2-基胺氢碘酸盐将4-苯并二氢吡喃酮(2.00g；13.5mmol)，硫脲(2.06g；27.0mmol)和碘(3.43g；13.5mmol)的混合物在搅拌下加热到95℃。4.5hr.后，将混合物冷却到室温，用二氯甲烷研磨，滤出固体物质。将该固体用乙酸乙酯进一步研磨，过滤并且用乙酸乙酯洗涤，得到3.00g的4H-色烯并[4，3-d]噻唑-2-基胺氢碘酸盐19，为灰白色粉末。
步骤2N-(4H-色烯并[4，3-d]噻唑-2-基)-异烟酰胺在室温、氮气下向搅拌着的4H-色烯并[4，3-d]噻唑-2-基胺氢碘酸盐19(90mg；0.27mmol)在无水四氢呋喃中的悬浮液加入氢化钠(19mg；0.8mmol)。15分钟后，加入异烟酰氯盐酸盐(62mg；0.35mmol)，并且将混合物在室温搅拌3hr.，然后真空浓缩。残余物用水稀释，并且用乙酸乙酯萃取。将萃取物干燥(硫酸钠)、过滤并且真空浓缩。使用反相HPLC(洗脱液乙腈/水/0.1％三氟乙酸)纯化，得到12mg的N-(4H-色烯并[4，3-d]噻唑-2-基)-异烟酰胺20，为三氟乙酸盐。ES-HRMS m/eC16H11N3OS(M+H)计算值310.0645，实测310.0646。
实施例15N-萘并[1，2-d]噻唑-2-基-异烟酰胺步骤1萘并[1，2-d]噻唑-2-基胺氢溴酸盐在室温下将溴(0.26ml；5.14mmol)滴加到搅拌着的2-萘硫脲(800mg；3.96mmol)在无水二氯甲烷(10ml)中的混合物中。然后将混合物加热到回流。2hr.后，让混合物冷却到室温。滤出固体，并且用二氯甲烷洗涤几次，得到1.12g的萘并[1，2-d]噻唑-2-基胺氢溴酸盐21。
步骤2N-萘并[1，2-d]噻唑-2-基-异烟酰胺在室温、氮气下，向搅拌着的21(90mg；0.27mmol)在无水四氢呋喃中的悬浮液加入氢化钠(73mg；2.89mmol)。30分钟后，加入异烟酰氯盐酸盐(150mg；0.84mmol)，并且将混合物在室温搅拌72hr.。将混合物真空浓缩，残余物置于乙酸乙酯中并且用饱和氯化铵溶液洗涤。将有机层干燥(硫酸钠)、过滤并且真空浓缩。使用反相HPLC(洗脱液乙腈/水/0.1％三氟乙酸)纯化，得到26mg的N-萘并[1，2-d]噻唑-2-基-异烟酰胺22。ES-HRMSm/eC17H11N3OS(M+H)计算值306.0696，实测306.0691。
实施例164-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基氨基甲酰基)-哌啶-1-羧酸叔丁酯向室温下磁力搅拌着的哌啶-1，4-二羧酸一叔丁酯(195mg，0.848mmol)在CH3CN(10ml)中的混合物加入1-甲基咪唑(200ml，2.52mmol，Aldrich)。将反应混合物在冰浴中冷却，然后加入对甲苯磺酰氯(192mg，1.01mmol，Aldrich)。在冰浴中搅拌30分钟后，加入8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基胺(160mg，0.84mmol)。除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌2小时。LC/MS分析显示原料完全消耗。将反应混合物过滤，得到的固体用乙腈洗涤，得到4-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基氨基甲酰基)-哌啶-1-羧酸叔丁酯(330mg，99％产率)，为灰白色固体。HRMSC21H25N3O3S(M+H)+计算值400.169，实测400.169。
实施例173-(三氟甲基-苯甲酰基)-哌啶-4-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺(44mg，55.2％产率)步骤1按照已知的程序，用TFA将4-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基氨基甲酰基)-哌啶-1-羧酸叔丁酯(350mg，0.876mmol)去保护，得到哌啶-4-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺TFA盐，为白色粉末(306mg，84.5％产率)；C16H17N3OS(M+H)+的HRMS为m/z＝300.12。
步骤2向室温下的哌啶-4-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺(70mg；0.169mmol)和三乙胺(59mL；0.42mmol)在10mL二氯甲烷中的混合物滴加3-(三氟甲基)苯甲酰氯(25mL；0.169mmol)。室温下24小时后，将反应混合物用乙酸乙酯稀释，然后用1N HCl、饱和NaHCO3水溶液、水和盐水洗涤。将有机层干燥(硫酸钠)、过滤和真空浓缩。粗产物用色谱纯化(用75％乙酸乙酯/己烷至100％乙酸乙酯梯度洗脱)，得到3-(三氟甲基-苯甲酰基)-哌啶-4-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺(44mg，55.2％产率)；HRMSC24H20N3O3F3S(M+H)+计算值472.1301，实测472.1301。
实施例18以类似的方式获得1-(3-三氟甲基-苯磺酰基))-哌啶-4-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基-酰胺由哌啶-4-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺(来自实施例17，步骤1)(60mg，0.145mmol)和3-(三氟甲基)苯磺酰氯(42.6mg，0.174mmol)及三乙胺获得，为白色固体(58mg，78.9％产率)；HRMSC23H20N3O3F3S2(M+H)+计算值508.0971，实测508.0971。
实施例191-(3-三氟甲基-苄基)-哌啶-4-羧酸(9H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺向室温下磁力搅拌的哌啶-4-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺(来自实施例17，步骤1)(70mg，0.169mmol)在DMF(15ml，Aldrich)中的混合物加入碳酸铯(0.5g，0.0153mmol)，接着加入3-(三氟甲基)苄基氯(26ml，0.169mmol，Aldrich)。将反应混合物在室温搅拌3小时，将粗的反应混合物过滤并且浓缩。使用反相HPLC(洗脱液乙腈/水/0.1％三氟乙酸)纯化，得到1-(3-三氟甲基-苄基)-哌啶-4-羧酸(9H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺TFA盐(33mg，34.1％产率)，为白色固体。HRMSC24H22N3OF3S(M+H)+计算值458.1509，实测458.1506。
实施例20以平行方式按照上述方案1和以下程序，制备产物1-19酰胺。
将在12ml管中的羧酸(0.3M，1ml，0.3mmol)的N-甲基吡咯烷-2-酮(NMP)溶液、O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N′N′-四甲基脲鎓六氟磷酸盐、HATU(0.3M，1ml，0.3mmol)和纯二异丙基乙胺(0.05ml，0.3mmol)的混合物在RT振荡20分钟，然后加入在NMP中的氨基噻唑(0.2M，1ml，0.2mmol)。将该管用帽子密封并且在90C振荡12小时。待冷却到室温后，将反应混合物用乙酸乙酯(2ml)和氢氧化钠溶液(0.5M，2ml)稀释。涡旋所述的管进行萃取，并且离心以进行层分离。将有机层转移到20ml闪烁管中。如上用乙酸乙酯再次萃取水层。然后将含有合并的乙酸乙酯萃取物的闪烁管装在Genevac蒸发仪上以除去所有有机溶剂。粗产物用HPLC检测纯度，然后用HPLC纯化，得到纯的酰胺。
产物1N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)3-氟苯甲酰胺。37mg(60％产率)。100％纯度(LR-LCMS，计算值311.06，实测311.03)。
产物2N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)3-羟基苯甲酰胺。2mg(3％产率)。100％纯度(LR-LCMS，计算值309.07，实测309.05)。
产物3N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)2-甲基戊-5-烯酰基酰胺。31mg(55％产率)。100％纯度(LR-LCMS，计算值285.1，实测285.08)。
产物4N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)2-甲基丁酰基酰胺。28mg(51％产率)。100％纯度(LR-LCMS，计算值273.1，实测273.09)。
产物5N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)5-甲基磺酰基噻吩-2-甲酰胺。63mg(84％产率)。100％纯度(LR-LCMS，计算值377.01，实测377.03)。
产物6N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)2-糠酰基酰胺。53mg(95％产率)。100％纯度(LR-LCMS，计算值283.05，实测283.04)。
产物7N-(6-氟-8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)4-羟基烟酰胺。2mg(3％产率)。100％纯度(LR-LCMS，计算值328.05，实测328.06)。
产物8N-(6-氟-8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)(4-氨基磺酰基)苯甲酰胺。7mg(9％产率)。100％纯度(LR-LCMS，计算值390.03，实测390.03)。
产物9N-(6-氟-8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)(4-叔丁氧羰基甲基)苯甲酰胺。14mg(16％产率)。100％纯度(LR-LCMS，计算值440.14，实测440.19)。
产物10N-(6-氟-8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)噻吩-3-甲酰胺。10mg(16％产率)。100％纯度(LR-LCMS，计算值317.08，实测317.07)。
产物11N-(4，5-二氢-萘并[1，2-d]噻唑-2-基)4-羟基烟酰胺。4mg(6％产率)。100％纯度(LR-LCMS，计算值234.08，实测324.08)。
产物12N-(4，5-二氢-萘并[1，2-d]噻唑-2-基)噻吩-3-甲酰胺。10mg(16％产率)。100％纯度(LR-LCMS，计算值213.04，实测313.03)。
产物13N-(4，5-二氢-7-甲氧基萘并[1，2-d]噻唑-2-基)4-羟基烟酰胺。2mg(3％产率)。100％纯度(LR-LCMS，计算值354.09，实测354.09)。
产物14N-(4，5-二氢-7-甲氧基萘并[1，2-d]噻唑-2-基)5-甲基磺酰基噻吩-2-甲酰胺。15mg(18％产率)。100％纯度(LR-LCMS，计算值421.03，实测421.02)。
产物16N-(5，6-二氢-4H-3-硫杂-1-氮杂-苯并[e]薁-2-基)4-羟基烟酰胺。10mg(15％产率)。100％纯度(LR-LCMS，计算值338.09，实测338.19)。
产物17N-(5，6-二氢-4H-3-硫杂-1-氮杂-苯并[e]薁-2-基)噻吩-3-甲酰胺。22mg(34％产率)。100％纯度(LR-LCMS，计算值327.06，实测327.12)。
产物18N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)3-氯-4-羟基苯甲酰胺。16mg(23％产率)。100％纯度(LR-LCMS，计算值343.03，实测343.07)。
产物19N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)(4-氨基磺酰基)苯甲酰胺。10mg(13％产率)。100％纯度(LR-LCMS，计算值372.04，实测373.06)。
实施例21对表达人腺苷A2B受体的CHO.K1细胞中NECA-诱导的环状AMP生产的抑制活性该试验中使用的是用人腺苷A2B受体cDNA 4b稳定转染的中国仓鼠卵巢(CHO.K1)细胞。在5％CO2/95％O2气氛和37℃的条件下，在含有10％胎牛血清(Invitrogen，Grand Island，NY)、100U/mL青霉素(Invitrogen，GrandIsland，NY)、100U/mL链霉素(Invitrogen，Grand Island，NY)、1mg/mL G418(Invitrogen，Grand Island NY)和0.2mg/ml潮霉素B(Invitrogen，Carlsbad，CA)的DMEM和D-MEM/F-12(1∶1混合物)培养基(Invitrogen，Grand Island，NY)中培养细胞。将实验培养细胞在384孔组织培养板上以单层形式生长过夜(0.06ml/孔-7500细胞/孔)。每个孔用0.1ml的Krebs缓冲液洗涤一次。向每个孔中加入含有100μM磷酸二酯酶抑制剂Ro20-1724(Roche)、100nMNECA(Sigma-Aldrich，St.Louis，MO)、0.02％BSA Fraction V(RocheBiochemicals)、测试化合物(适宜的浓度)的50μL Krebs缓冲液。DMSO的最终浓度为1.1％。在孵育30-45分钟后，将孔倒空并且在纸巾上吸干以除去残余溶液。使用获自DiscoverX的用于附着细胞的HitHunter(TM)cAMPAssay Kit(Fremont，CA)溶解细胞，并且测量cAMP浓度。实施例1-20的化合物的IC50值＜5μM。下表显示了一些实施例的IC50值
实施例A可以用常规方式制造含有如下成分的薄膜包衣片剂
成分每片核式(I)化合物 10.0mg 200.0mg微晶纤维素 23.5mg 43.5mg乳糖水合物 60.0mg 70.0mg聚乙烯吡咯烷酮K30 12.5mg 15.0mg淀粉羟乙酸钠12.5mg 17.0mg硬脂酸镁1.5mg4.5mg(核重) 120.0mg 350.0mg薄膜包衣羟丙基甲基纤维素3.5mg7.0mg聚乙二醇60000.8mg1.6mg滑石1.3mg2.6mg氧化铁(Iron oxyde)(黄) 0.8mg1.6mg二氧化钛0.8mg1.6mg将活性成分过筛并和微晶纤维素混合，用聚乙烯吡咯烷酮水溶液将混合物造粒。将颗粒与淀粉羟乙酸钠和硬脂酸镁混合并压缩，得到分别重120或350mg的核。将该核用上述薄膜包衣的水溶液/悬浮液涂覆。
实施例B可以用常规方式制造含有如下成分的胶囊剂成分每个胶囊式(I)化合物 25.0mg乳糖150.0mg玉米淀粉20.0mg滑石5.0mg将所述组分过筛并混合，然后装入2号胶囊中。
实施例C注射液可以具有如下组成式(I)化合物3.0mg聚乙二醇400150.0mg乙酸 适量至pH5.0注射液用水 补足1.0ml将活性成分溶解在聚乙二醇400和注射用水(部分)的混合物中。用乙酸将pH调到5.0。加入余量的水将体积调到1.0ml。过滤该溶液，适当过量地装入小瓶中并灭菌。
实施例D可以用常规方式制造含有如下成分的软明胶胶囊胶囊内容物式(I)化合物 5.0mg黄蜡8.0mg氢化大豆油 8.0mg部分氢化的植物油34.0mg大豆油 110.0mg胶囊内容物重量 165.0mg明胶胶囊明胶75.0mg甘油85％32.0mgKarion 83 8.0mg(干物质)二氧化钛0.4mg氧化铁黄1.1mg
将活性成分溶解在其它成分的温热熔融体中，将混合物装入合适大小的软明胶胶囊中。将填充后的软明胶胶囊按照通常的程序进行处理。
实施例E可以用常规方式制造含有如下成分的小药囊式(I)化合物50.0mg乳糖，细粉 1015.0mg微晶纤维素(AVICEL PH 102) 1400.0mg羧甲基纤维素钠 14.0mg聚乙烯吡咯烷酮K30 10.0mg硬脂酸镁 10.0mg香味添加剂 1.0mg将活性成分与乳糖、微晶纤维素和羧甲基纤维素钠混合，并用聚乙烯吡咯烷酮和水的混合液将其造粒。将颗粒与硬脂酸镁和香味添加剂混合，并装入小药囊中。
权利要求
1.式(I)的化合物或其药用盐， 其中X是-CH2-、-CH2CH2-、-CHCH-、-(CH2)3-和O(CH2)-；R是烷基，链烯基，-NHR′或5-或6-元饱和或不饱和的碳环或杂环，所述的环可以任选含有一个或多个杂原子，并且所述环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基选自卤素，羟基，低级烷基，乙酰氨基甲基，烷氧羰基酰氨基甲基，腈基，磺酰氨基，烷基磺酰基，烷氧基，苄基，苯甲酰基，芳基磺酰基和酰基，其中苄基、苯甲酰基或芳基磺酰基任选被卤素、三卤代-低级烷基、低级烷基、烷氧基、烷基磺酰基或氰基取代；R1选自氢，卤素，低级烷基，烷氧基或腈基；R′是烷基或5-或6-元饱和或不饱和的碳环或杂环，所述环可以任选含有一个或多个杂原子，并且所述环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基选自卤素，低级烷基，腈基，烷基磺酰基，烷氧基和酰基。
2.根据权利要求1的化合物，其特征在于为式(IA)化合物或其药用盐， 其中X是-CH2-、-CH2CH2-、-CHCH-、-(CH2)3-和O(CH2)-；R是烷基，-NHR′或5-或6-元饱和或不饱和的碳环或杂环，所述的环可以任选含有一个或多个杂原子，并且所述环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基选自卤素，低级烷基，腈基，烷基磺酰基，烷氧基和酰基，并且R′是烷基或5-或6-元饱和或不饱和的碳环或杂环，所述环可以任选含有一个或多个杂原子，并且所述环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基选自卤素，低级烷基，腈基，烷基磺酰基，烷氧基和酰基。
3.根据权利要求1的化合物，其中R是烷基，链烯基或5-或6-元饱和或不饱和的碳环或杂环，所述的环可以任选含有一个或多个杂原子，并且所述的环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基选自卤素，羟基，低级烷基，乙酰氨基甲基，烷氧羰基酰氨基甲基，腈基，磺酰氨基，烷基磺酰基，烷氧基，苄基，苯甲酰基，芳基磺酰基和酰基，其中苄基，苯甲酰基或芳基磺酰基任选被卤素、三卤代-低级烷基、低级烷基、烷氧基、烷基磺酰基或氰基取代。
4.根据权利要求1-3中任一项的化合物，其中X是-CH2-。
5.根据权利要求1-4中任一项的化合物，其中R1是氢，卤素或低级烷氧基。
6.根据权利要求1-5中任一项的化合物，其中R是低级烷基，低级链烯基，苯基或杂环，所述杂环选自噻吩基，吡啶基，吡唑基，咪唑基，呋喃基或哌啶基，其中苯基或杂环任选被1至3个取代基取代，所述取代基选自卤素、羟基、腈基、低级烷基、磺酰氨基、低级烷基-磺酰基、低级烷氧基-羰基、低级烷氧基-C(O)-NH-CH2-、任选被CF3取代的苄基、任选被CF3取代的苯甲酰基或任选被CF3取代的苯磺酰基。
7.根据权利要求1-6中任一项的化合物，其中R是低级链烯基或选自噻吩基、吡啶基、吡唑基、咪唑基、呋喃基或哌啶基的杂环，所述杂环任选被1至3个取代基取代，所述取代基选自卤素、羟基、腈基、低级烷基、磺酰氨基、低级烷基-磺酰基、低级烷氧基-羰基、低级烷氧基-C(O)-NH-CH2-、任选被CF3取代的苄基、任选被CF3取代的苯甲酰基或任选被CF3取代的苯磺酰基。
8.根据权利要求1-7中任一项的化合物，其选自N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-苯甲酰胺，4-氟-N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-苯甲酰胺，4-氰基-N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-苯甲酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-4-甲基-苯甲酰胺，噻吩-2-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)烟酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)异烟酰胺，2-甲基-2H-吡唑-3-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺，N-(6-氯-8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-异烟酰胺，1H-吡唑-4-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺，N-(4，5-二氢-萘并[1，2-d]噻唑-2-基)-异烟酰胺，N-(5，6-二氢-4H-3-硫杂-1-氮杂-苯并[e]薁-2-基)-异烟酰胺，N-(4H-色烯并[4，3-d]噻唑-2-基)-异烟酰胺，N-萘并[1，2-d]噻唑-2-基-异烟酰胺，和3-甲基-3H-咪唑-4-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺三氟乙酸盐。
9.根据权利要求1-7中任一项的化合物，其选自4-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基氨基甲酰基)-哌啶-1-羧酸叔丁酯，3-(三氟甲基-苯甲酰基)-哌啶-4-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺，1-(3-三氟甲基-苄基)-哌啶-4-羧酸(9H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺，1-(3-三氟甲基-苯磺酰基))-哌啶-4-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基-酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)3-氟苯甲酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)3-羟基苯甲酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)2-甲基戊-5-烯酰基酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)2-甲基丁酰基酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)5-甲基磺酰基噻吩-2-甲酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)2-糠酰基酰胺，和N-(6-氟-8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)4-羟基烟酰胺。
10.根据权利要求1-7中任一项的化合物，其选自N-(6-氟-8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)(4-氨基磺酰基)苯甲酰胺，N-(6-氟-8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)(4-叔丁氧羰基甲基)苯甲酰胺，N-(6-氟-8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)噻吩-3-甲酰胺，N-(4，5-二氢-萘并[1，2-d]噻唑-2-基)4-羟基烟酰胺，N-(4，5-二氢-萘并[1，2-d]噻唑-2-基)噻吩-3-甲酰胺，N-(4，5-二氢-7-甲氧基萘并[1，2-d]噻唑-2-基)4-羟基烟酰胺，N-(4，5-二氢-7-甲氧基萘并[1，2-d]噻唑-2-基)5-甲基磺酰基噻吩-2-甲酰胺，N-(5，6-二氢-4H-3-硫杂-1-氮杂-苯并[e]薁-2-基)4-羟基烟酰胺，N-(5，6-二氢-4H-3-硫杂-1-氮杂-苯并[e]薁-2-基)噻吩-3-甲酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)3-氯-4-羟基苯甲酰胺，和N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)(4-氨基磺酰基)苯甲酰胺。
11.一种用于制备根据权利要求1-10中任一项的化合物的方法，该方法包括将式(II)化合物， 与化合物R-C(O)Cl反应，其中R、R1和X如权利要求1至10中任一项所定义。
12.用根据权利要求11的方法制备的根据权利要求1-10中任一项的化合物。
13.药物组合物，其包含根据权利要求1-10中任一项的化合物和可药用载体和/或辅料。
14.根据权利要求1-10中任一项的化合物，其用作治疗活性物质。
15.根据权利要求1-10中任一项的化合物，其用作用于治疗和/或预防由腺苷A2B受体的拮抗作用介导的疾病的治疗活性物质。
16.一种用于治疗和/或预防性治疗由腺苷A2B受体的拮抗作用介导的疾病的方法，特别是治疗和/或预防性治疗糖尿病、糖尿病性视网膜病、哮喘和腹泻的方法，该方法包括将根据权利要求1-10中任一项的化合物向人或动物给药。
17.根据权利要求1-10中任一项的化合物用于治疗和/或预防性治疗由腺苷A2B受体的拮抗作用介导的疾病的用途。
18.根据权利要求1-10中任一项的化合物用于治疗和/或预防性治疗糖尿病、糖尿病性视网膜病、哮喘和腹泻的用途。
19.根据权利要求1-10中任一项的化合物用于制备药物的用途，所述药物用于治疗和/或预防性治疗由腺苷A2B受体的拮抗作用介导的疾病。
20.根据权利要求1-10中任一项的化合物用于制备药物的用途，所述药物用于治疗和/或预防性治疗糖尿病、糖尿病性视网膜病、哮喘和腹泻。
21.如此前定义的本发明。
全文摘要
本发明涉及新型的式(I)的取代的N－酰基－2－氨基噻唑及其药用盐，其中R、R
文档编号A61P3/10GK1993336SQ200580026471
公开日2007年7月4日 申请日期2005年7月28日 优先权日2004年8月5日
发明者蔡建平, F·菲罗厄兹尼亚, K·R·格廷, 齐莉达 申请人:霍夫曼-拉罗奇有限公司
技术领域：
本发明涉及新型的式(I)的取代的N-酰基-2-氨基噻唑或其药用盐， 其中X、R和R1如本申请所述。据信这些化合物主要起腺苷2B受体拮抗剂作用，因此具有治疗糖尿病、糖尿病性视网膜病、哮喘和腹泻的潜力。
腺苷是在许多组织中产生的内分泌物，用于通过四种受体亚型A1、A2A、A2B和A3介导各种功能。所有四种受体均属于G-蛋白偶联受体(GPCRs)类，其含有7个螺旋疏水结构域，这些结构域跨过质膜，由亲水性细胞外和细胞内环连接。A1和A3受体偶联到Gi和Go蛋白，而A2A和A2B受体偶联到Gs蛋白。因为这些差异，腺苷由其通过A2A和A2B受体的作用发出细胞内cAMP水平增加的信号，并且通过A1和A3受体发出减少的信号。另外，腺苷经由A2B受体增加细胞内钙离子水平，因为其偶联于Gq蛋白。
式I的化合物在CHO-A2B-cAMP试验中测量时具有强力的腺苷人A2B受体拮抗剂活性。这些化合物在放射标记的配体结合试验中测量时还具有残余有效的人A1和人A2A拮抗剂活性。
A2B受体对各种细胞类型的功能活性的作用的研究是复杂的，因为对于另外三种受体缺乏选择性A2B激动剂和拮抗剂。典型地，A2B受体的功能活性是由其它三种腺苷受体的选择性激动剂和拮抗剂的缺乏，同时引发NECA，一种强力非选择性腺苷受体激动剂的响应的效果推论出来的。通常，当观察到激动剂效力的以下独特次序时，确定A2B受体对给定细胞类型的功能；NECA(非选择性)＞PIA(A1-选择性激动剂)＞IB-MECA(A3-选择性激动剂)＞CGS-21680(A2A-选择性激动剂)。
腺苷对于四种受体的相对激动剂效力被确定为A1(EC50-0.31μM)＞A3(EC50-0.29μM)＞A2A(EC50-0.7)＞A2B(EC50-24μM)，表明A2B受体在包括但不限于高血糖、肥大细胞激活和胃肠道炎症的慢性、高氧化应激病情中的独特作用。尽管腺苷对A2B受体的激动剂效力低，但是已经报道了具有高A2B受体拮抗剂效力的多种化合物。
采用特异性激动剂和拮抗剂，Eisai研究人员证明了A2B受体拮抗作用在抑制肝葡萄糖产生中的关键作用，并且强力A2B受体拮抗剂和大鼠初级肝细胞中葡萄糖产生的抑制剂同样显示出能够降低KKAy小鼠(一种公认的2型糖尿病模型)的禁食和进食时的葡萄糖水平。因此，本发明的化合物具有预防和/或治疗2型糖尿病的效用。
A2B受体还存在于内皮细胞的质膜中，并且发现能够刺激它们的生长。由于这将导致新血管的生长(血管生成)，本发明的一个目的是预防和/或治疗以异常血管生长为特征的疾病，如糖尿病性视网膜病。
采用特异性抗人A2B-抗体，运用免疫-荧光技术，由支气管肺泡灌洗细胞(bronchoalveolar lavage cells)证明，在从哮喘病人获得的人肺肥大细胞中存在A2B受体。因此，式I化合物提供了一种预防和/或治疗哮喘、支气管痉挛和变应性疾病以及其它梗阻性气道型糖尿病的方法。
还发现A2B受体存在于肠上皮细胞基底外侧区域的结肠中，并且在例如腹泻的疾病中，在胃肠道炎症的反应中增加氯离子分泌。因此，式I化合物提供了治疗炎性胃肠道疾病包括腹泻的方法。
除了A2B受体外，本发明的化合物还对A1和A2A受体具有强力拮抗剂活性。因此，式I化合物提供了治疗腺苷A1、A2A和A2B受体拮抗作用在其中起作用的疾病，如抑郁症、帕金森病和高血压的方法。
一些取代的N-酰基氨基噻唑是本领域已知的，例如，在美国专利No.5,480,874中公开的茚并噻唑基膦酸酯；美国专利No.4,929,623中公开的2-氨基-6-羟基苯并噻唑；Synthetic Communications(1993)，23(17)，2347-53中公开的2-苯甲酰基氨基萘并[1，2-d]噻唑；Indian Drugs，(1985)，23(3)，146-51中公开的苯甲酰氨基-和2-乙酰氨基苯并噻唑衍生物，以及在美国专利5,189,049中公开的某些酰基氨基噻唑衍生物。在美国专利No.4,877,876中公开了与本发明要求保护的化合物类似的2-取代的-8H-茚并(1，2-d)-噻唑衍生物。
具体而言，本发明涉及式(I)的化合物或其药用盐， 其中X是-CH2-、-CH2CH2-、-CHCH-、-(CH2)3-和-O(CH2)-；R是烷基，链烯基，-NHR′或5-或6-元饱和或不饱和的碳环或杂环，所述的环可以任选含有一个或多个杂原子，并且所述环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基选自卤素，羟基，低级烷基，乙酰氨基甲基，烷氧羰基酰氨基甲基，腈基，磺酰氨基，烷基磺酰基，烷氧基，苄基，苯甲酰基，芳基磺酰基和酰基，其中苄基，苯甲酰基或芳基磺酰基任选被卤素、三卤代-低级烷基、低级烷基、烷氧基、烷基磺酰基或氰基取代；R1选自氢，卤素，低级烷基，烷氧基或腈基；R′是烷基或5-或6-元饱和或不饱和的碳环或杂环，所述环可以任选含有一个或多个杂原子，并且所述环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基选自卤素，低级烷基，腈基，烷基磺酰基，烷氧基和酰基。
根据本发明的化合物显示出作为腺苷A2B拮抗剂的主要活性，因此可用于治疗由该受体介导的疾病。本发明的化合物可用作预防和治疗例如糖尿病、糖尿病性视网膜病、哮喘和腹泻的活性药剂。腺苷A1和A2A受体的次要拮抗作用使得这些化合物可用于抑郁症、帕金森病和高血压。
本发明的目的是式I化合物及其药用盐和对映体形式，上述化合物的制剂，含有它们的药物和它们的制备方法，以及在控制或预防疾病，特别是控制或预防上述疾病和紊乱，或者在制备相应的药物中使用上述化合物的方法。
式(I)化合物是独自优选的，并且其生理上可接受的盐也是独自优选的，其中特别优选式(I)化合物。
式(I)化合物可以含有一个或多个不对称C原子，因此可以以对映体混合物、非对映异构体混合物或光学纯化合物的形式存在。
优选的如上所述的式(I)化合物是式(IA)表示的化合物或其药用盐， 其中X是-CH2-、-CH2CH2-、-CHCH-、-(CH2)3-和-O(CH2)-；R是烷基，-NHR′或5-或6-元饱和或不饱和的碳环或杂环，所述的环可以任选含有一个或多个杂原子，并且所述环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基选自卤素，低级烷基，腈基，烷基磺酰基，烷氧基和酰基，且R′是烷基或5-或6-元饱和或不饱和的碳环或杂环，所述环可以任选含有一个或多个杂原子，并且所述环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基选自卤素，低级烷基，腈基，烷基磺酰基，烷氧基和酰基。
优选如上所述的式(I)化合物，其中R是烷基，链烯基或5-或6-元饱和或不饱和的碳环或杂环，所述环可以任选含有一个或多个杂原子，并且所述环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基选自卤素，羟基，低级烷基，乙酰氨基甲基，烷氧羰基酰氨基甲基，腈基，磺酰氨基，烷基磺酰基，烷氧基，苄基，苯甲酰基，芳基磺酰基和酰基，其中苄基，苯甲酰基或芳基磺酰基任选被卤素、三卤代-低级烷基、低级烷基、烷氧基、烷基磺酰基或氰基取代。
进一步优选的化合物是这些化合物，其中X是-CH2-。其它优选的化合物是这样的化合物，其中R1是氢，卤素或低级烷氧基。氢，卤素和低级烷氧基各自构成R1的优选实施方案。
本发明另一优选的实施方案涉及如上所述的式(I)化合物，其中R是低级烷基，低级链烯基，苯基或杂环，所述杂环选自噻吩基，吡啶基，吡唑基，咪唑基，呋喃基或哌啶基，其中苯基或杂环任选被1至3个取代基取代，所述取代基选自卤素、羟基、腈基、低级烷基、磺酰氨基、低级烷基-磺酰基、低级烷氧基-羰基、低级烷氧基-C(O)-NH-CH2-、任选被CF3取代的苄基、任选被CF3取代的苯甲酰基或任选被CF3取代的苯磺酰基。
其它优选的如上所述的化合物是这些化合物，其中R是低级链烯基或选自噻吩基、吡啶基、吡唑基、咪唑基、呋喃基或哌啶基的杂环，所述杂环任选被1至3个取代基取代，所述取代基选自卤素、羟基、腈基、低级烷基、磺酰氨基、低级烷基-磺酰基、低级烷氧基-羰基、低级烷氧基-C(O)-NH-CH2-、任选被CF3取代的苄基、任选被CF3取代的苯甲酰基或任选被CF3取代的苯磺酰基。
如上所述的式(I)化合物中，优选R不是苯基、4-NO2-苯基或4-Cl-苯基，特别是当X为-CH2-并且R1是氢时。而且，在如上所述的式(I)化合物中，优选R不是苯基、4-NO2-苯基或4-Cl-苯基，特别是当X为-CH2CH2-并且R1是氢或烷氧基时。而且，在如上所述的式(I)化合物中，优选R不是烷基，特别是当X为-CH2CH2-并且R1是氢时。
下述化合物和实施例中的示例性的取代基X、R和R1中的每一个，单独的和在各组合中的，各自构成优选实施方案，优选在上述化合物和实施例中的具体组合。
特别优选的化合物包括N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-苯甲酰胺，4-氟-N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-苯甲酰胺，4-氰基-N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-苯甲酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-4-甲基-苯甲酰胺，噻吩-2-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)烟酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)异烟酰胺，2-甲基-2H-吡唑-3-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺，N-(6-氯-8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-异烟酰胺，1H-吡唑-4-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺，N-(4，5-二氢-萘并[1，2-d]噻唑-2-基)-异烟酰胺，
N-(5，6-二氢-4H-3-硫杂-1-氮杂-苯并[e]薁-2-基)-异烟酰胺，N-(4H-色烯并[4，3-d]噻唑-2-基)-异烟酰胺，N-萘并[1，2-d]噻唑-2-基-异烟酰胺，3-甲基-3H-咪唑-4-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺三氟乙酸盐，4-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基氨基甲酰基)-哌啶-1-羧酸叔丁酯，3-(三氟甲基-苯甲酰基)-哌啶-4-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺，1-(3-三氟甲基-苄基)-哌啶-4-羧酸(9H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺，1-(3-三氟甲基-苯磺酰基)-哌啶-4-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基-酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)3-氟苯甲酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)3-羟基苯甲酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)2-甲基戊-5-烯酰基酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)2-甲基丁酰基酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)5-甲基磺酰基噻吩-2-甲酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)2-糠酰基酰胺，N-(6-氟-8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)4-羟基烟酰胺，N-(6-氟-8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)(4-氨基磺酰基)苯甲酰胺，N-(6-氟-8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)(4-叔丁氧羰基甲基)苯甲酰胺，N-(6-氟-8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)噻吩-3-甲酰胺，N-(4，5-二氢-萘并[1，2-d]噻唑-2-基)4-羟基烟酰胺，N-(4，5-二氢-萘并[1，2-d]噻唑-2-基)噻吩-3-甲酰胺，N-(4，5-二氢-7-甲氧基萘并[1，2-d]噻唑-2-基)4-羟基烟酰胺，N-(4，5-二氢-7-甲氧基萘并[1，2-d]噻唑-2-基)5-甲基磺酰基噻吩-2-甲酰胺，N-(5，6-二氢-4H-3-硫杂-1-氮杂-苯并[e]薁-2-基)4-羟基烟酰胺，N-(5，6-二氢-4H-3-硫杂-1-氮杂-苯并[e]薁-2-基)噻吩-3-甲酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)3-氯-4-羟基苯甲酰胺，和N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)(4-氨基磺酰基)苯甲酰胺。
上述化合物中的每一个单独构成优选实施方案。
优选的如上所述的式(I)化合物选自N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-苯甲酰胺，
4-氟-N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-苯甲酰胺，4-氰基-N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-苯甲酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-4-甲基-苯甲酰胺，噻吩-2-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)烟酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)异烟酰胺，2-甲基-2H-吡唑-3-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺，N-(6-氯-8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-异烟酰胺，1H-吡唑-4-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺，N-(4，5-二氢-萘并[1，2-d]噻唑-2-基)-异烟酰胺，N-(5，6-二氢-4H-3-硫杂-1-氮杂-苯并[e]薁-2-基)-异烟酰胺，N-(4H-色烯并[4，3-d]噻唑-2-基)-异烟酰胺，N-萘并[1，2-d]噻唑-2-基-异烟酰胺，和3-甲基-3H-咪唑-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺三氟乙酸盐。
其它优选的如上所述的式(I)化合物选自4-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基氨基甲酰基)-哌啶-1-羧酸叔丁酯，3-(三氟甲基-苯甲酰基)-哌啶-4-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺，1-(3-三氟甲基-苄基)-哌啶-4-羧酸(9H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺，1-(3-三氟甲基-苯磺酰基))-哌啶-4-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基-酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)3-氟苯甲酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)3-羟基苯甲酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)2-甲基戊-5-烯酰基酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)2-甲基丁酰基酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)5-甲基磺酰基噻吩-2-甲酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)2-糠酰基酰胺，和N-(6-氟-8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)4-羟基烟酰胺。
其它优选的如上所述的式(I)化合物选自N-(6-氟-8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)(4-氨基磺酰基)苯甲酰胺，
N-(6-氟-8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)(4-叔丁氧羰基甲基)苯甲酰胺，N-(6-氟-8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)噻吩-3-甲酰胺，N-(4，5-二氢-萘并[1，2-d]噻唑-2-基)4-羟基烟酰胺，N-(4，5-二氢-萘并[1，2-d]噻唑-2-基)噻吩-3-甲酰胺，N-(4，5-二氢-7-甲氧基萘并[1，2-d]噻唑-2-基)4-羟基烟酰胺，N-(4，5-二氢-7-甲氧基萘并[1，2-d]噻唑-2-基)5-甲基磺酰基噻吩-2-甲酰胺，N-(5，6-二氢-4H-3-硫杂-1-氮杂-苯并[e]薁-2-基)4-羟基烟酰胺，N-(5，6-二氢-4H-3-硫杂-1-氮杂-苯并[e]薁-2-基)噻吩-3-甲酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)3-氯-4-羟基苯甲酰胺，和N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)(4-氨基磺酰基)苯甲酰胺。
应理解，本发明的通式(I)化合物可以在官能团处衍生以提供在体内能够转化回母体化合物的衍生物。
本发明的另一实施方案涉及如上所述的式(I)化合物的制备方法，该方法包括将式(II)化合物， 与化合物R-C(O)Cl反应，其中R、R1和X如上定义。
合适的反应条件描述于方案1和2以及实施例中。
而且，本发明涉及用根据权利要求9的方法制备的如上定义的式(I)化合物。
除非另外声明，如下定义用于解释和定义用于描述本发明的各种术语的含义和范围。
在本说明书中，术语″低级″用于表示由1至6个，优选1至4个碳原子组成的基团。
″烷基″表示直链或支链饱和脂肪族烃。烷基优选含有1至20个碳原子，更优选1至16个碳原子，还更优选1至10个碳原子。下述的低级烷基也是优选的烷基。
″低级烷基″表示C1至C6烷基，并且包括甲基，乙基，丙基，异丙基，丁基，叔丁基，2-丁基，戊基，己基等。通常，低级烷基优选为C1-C4烷基，更优选为C1-C3烷基。
″三卤代低级烷基″表示被3个卤素原子取代的低级烷基。CF3是优选的三卤代低级烷基。
″烷氧基″表示-O-烷基。″低级烷氧基″表示-O-低级烷基。
″链烯基″表示直链或支链烃残基，其包含烯键和至多7个，优选至多4个碳原子，例如2-丙烯基。
术语″碳环″是指5-或6-元饱和或不饱和的含碳的环，例如芳基环。
术语″杂环″是指可以包含1、2或3个选自氮、氧和/或硫的原子的5-或6-元环，如四氢吡啶，二氢呋喃，二氢吡喃，呋喃基，吡咯基，吡啶基，1，2-、1，3-和1，4-二嗪基，噻吩基，噁唑基，噁二唑基，异噁唑基，噻唑基，异噻唑基，或者咪唑基。杂环基团可以任选被芳基取代。如上所指出的，杂环基团可以被多种取代基取代，并且在苄基、苯甲酰基和芳基磺酰基取代基的情况下，这些取代基可以进一步被卤代基、三卤代低级烷基、低级烷基、烷氧基、烷基磺酰基或氰基取代。
术语″卤素″表示选自氯、氟和溴的原子。
″有效量″是指有效防止、减轻或改善疾病症状或者延长治疗对象存活时间的量。
″杂原子″是指选自N，O和S的原子。
″IC50″是指将具体测量的活性抑制50％所需的具体化合物的浓度。其中，可以如下所述测量IC50。
″芳基″表示一价、单环或双环、芳族碳环烃基，优选为5至6元芳环体系。这种基团的一个实例是苯基。
″酰基″表示-C(O)-C1-C6-烷基，-C(O)H或C(O)-O烷基。
″药用酯″是指常规酯化的含有羧基的式I化合物，该酯保留了式I化合物的生物有效性和性能，并且在体内(有机体内)分裂成相应的活性羧酸。
关于酯和酯在药物化合物输送中的应用的信息可参见Design ofProdrugs.Bundgaard H编辑，(Elsevier，1985)。还可参见H.Ansel等，Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems(6th Ed.1995)108-109页；Krogsgaard-Larsen等，Textbook of Drug Design and Development(2d Ed.1996)152-191页。
″药用盐″指的是保持本发明化合物的生物有效性和性能且由适宜的非毒性有机酸或无机酸或有机碱或无机碱形成的常规酸加成盐或碱加成盐。酸加成盐实例包括来源于无机酸和来源于有机酸的那些酸加成盐，所述的无机酸诸如盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸和硝酸；所述的有机酸诸如对甲苯磺酸、水杨酸、甲磺酸、草酸、琥珀酸、柠檬酸、苹果酸、乳酸、富马酸等。碱加成盐实例包括那些来源于铵、钾、钠的盐和季铵氢氧化物，诸如氢氧化四甲基铵。将药物化合物(即药物)化学改性成盐是药物化学工作者众所周知的技术，目的是为使化合物获得改善的物理和化学稳定性、吸湿性、流动性和溶解性。参见例如，H.Ansel等，Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems(6th Ed.1995)196和1456-1457页。
″可药用的″如可药用载体、赋形剂等，是指药理上可接受的并且对特定化合物的给药对象基本上无毒。
″取代的″是指取代可以发生在一个或多个位置，除非另外声明，每个取代位置的取代基独立地选自特定的选项。
式(I)化合物可以采用下面给出的方法、采用在实施例给出的方法或者类似方法制备。各个反应步骤的合适的反应条件是本领域技术人员已知的。原料可以是商购的，也可以通过类似于下面给出的或者实施例中的方法或者本领域已知的方法制备。
可以将式I化合物和/或它们的药用盐作为药物使用，例如以药物制剂形式用于经肠的、非肠道或局部给药。可以通过口服，例如以片剂、包衣片、锭剂、硬和软明胶胶囊、溶液、乳剂或混悬剂形式给予所述药物制剂。还可以通过直肠，例如以栓剂形式，或通过非肠道、例如以注射液或输液形式进行给药。或者，局部给药，例如以软膏、乳或油形式。优选口服给药。
可以用本领域任何技术人员熟悉的方式进行药物制剂的制备将所述的式(I)化合物和/或它们的药用盐，任选与其它有治疗价值的物质组合，将它们一起与合适的无毒惰性的治疗相容的固体或液体载体材料，以及如果需要，常用的药物辅料制成盖伦给药形式。
适宜的载体材料不仅有无机载体材料，而且还包括有机载体材料。因此，例如，可以将乳糖、玉米淀粉或其衍生物、滑石、硬脂酸或其盐用作片剂、包衣片、锭剂和硬胶囊的载体。用于软明胶胶囊的适宜载体材料例如植物油、蜡、脂肪、半固体和液体多元醇类等。然而，随活性成分特性的不同，就软明胶胶囊而言可能不需要载体。用于生产溶液和糖浆剂的适宜载体材料例如有水、多元醇类、蔗糖、转化糖等。注射液的合适载体材料为，例如水，醇类，多元醇，甘油和植物油。栓剂的合适载体材料为，例如天然或硬化油、蜡、脂肪、半液体或液体多元醇。局部制剂的合适的载体材料为甘油酯类，半合成和合成甘油酯类，氢化油，液体蜡，液体石蜡，液体脂肪醇，甾醇类，聚乙二醇和纤维素衍生物。还可以考虑常用的稳定剂、防腐剂、湿润和乳化剂、稠度改善剂、增香剂、用于改变渗透压的盐、缓冲物质、增溶剂、着色剂和掩蔽剂以及抗氧化剂作为药物辅料。
根据将要控制的疾病、患者的年龄和个体条件以及给药方式，式(I)化合物的剂量可以在宽范围内变化，当然，在每个具体病例中将和个体需求相适合。对于成年患者，可考虑约1至1000mg、特别是约1至100mg的日剂量。根据疾病严重性和精确的药代动力学曲线，所述化合物可以以一个或数个日剂量单位，例如以1至4个剂量单位给药。
如上所述，已经发现本发明的新型化合物为腺苷A2B受体的拮抗剂。因此，本发明的化合物可用于治疗和/或预防由腺苷A2B受体拮抗作用介导的疾病，特别是糖尿病、糖尿病性视网膜病、哮喘和腹泻，尤其是糖尿病。
因此本发明还涉及包含如上定义的化合物和可药用载体和/或辅料的药物组合物。
本发明还包括用作治疗活性物质的如上所述的化合物，尤其是用作用于治疗和/或预防由腺苷A2B受体拮抗作用介导的疾病的治疗活性物质，特别是用作用于治疗和/或预防糖尿病、糖尿病性视网膜病、哮喘和腹泻，尤其是糖尿病的治疗活性物质。
在另一优选实施方案中，本发明涉及一种治疗和/或预防性治疗由腺苷A2B受体拮抗作用介导的疾病的方法，特别是治疗和/或预防性治疗糖尿病、糖尿病性视网膜病、哮喘和腹泻，尤其是糖尿病的方法，该方法包括将如上定义的化合物向人或动物给药。
本发明还包括如上定义的化合物的用途，所述化合物用于治疗和/或预防性治疗由腺苷A2B受体拮抗作用介导的疾病，特别是治疗和/或预防性治疗糖尿病、糖尿病性视网膜病、哮喘和腹泻，尤其是糖尿病。
本发明还涉及如上所述的化合物用于制备药物的用途，所述药物用于治疗和/或预防性治疗由腺苷A2B受体拮抗作用介导的疾病，特别是用于治疗和/或预防性治疗糖尿病、糖尿病性视网膜病、哮喘和腹泻，尤其是糖尿病。这种药物包含如上所述的化合物。
预防和/或治疗糖尿病是优选的适应症。
如下的反应方案和相关叙述说明了制备本发明新型化合物的通用方法。
方案1 方案1的描述在不存在溶剂的情况下，将合适的酮1与硫脲及碘的混合物加热到90-100℃，得到噻唑中间体II。在碱如碳酸钾或吡啶存在下，在加热的情况下用芳酰氯或杂芳酰氯酰化II，得到酰基产物III。备选地，用强碱如氢化钠将II去保护，然后用芳酰氯或杂芳酰氯酰化，也可得到酰基产物III。
结构III的化合物还可以通过以下方法制备使用O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲鎓六氟磷酸盐(HATU)或对甲苯磺酰氯和N-甲基咪唑的组合作为偶联剂，将胺II与芳基羧酸偶联。
方案2 方案2的描述用三氟乙酸将化合物IV去保护，得到中间体哌啶化合物V。然后化合物V可以在碱如三乙胺存在下，与合适的芳基卤、苯甲酰卤或芳基磺酰卤反应，得到化合物VI、VII和VIII。
上述反应的反应条件可以在一定范围内变化。进行上述反应和处理的方法是本领域已知的，或者可以由实施例类似推导。原料是可商购的，或者可以通过与实施例中描述的方法类似的方法制备。
如下实施例将举例说明本发明的优选实施方案，但是其意图不在于限制本发明的范围。
实施例1N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-苯甲酰胺步骤18H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基胺氢碘酸盐将1-茚满酮(6.00g；45.4mmol)，硫脲(6.92g；90.8mmol)和碘(11.52g；45.4mmol)的混合物于搅拌下加热到95℃。3小时后，让混合物冷却到室温。粗的固体用无水乙醇研磨并且过滤。将浅黄色固体用无水乙醇洗涤两次，然后空气干燥，得到9.13g的8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基胺氢碘酸盐1a。
步骤28H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基胺将茚并[1，2-d]噻唑-2-基胺氢碘酸盐1a(9.13g)与100ml的1N氢氧化钠在室温下搅拌1小时然后过滤。将固体用水(3×20mL)洗涤，然后空气干燥，得到5.30g的8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基胺1b。
步骤3N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-苯甲酰胺向茚并[1，2-d]噻唑-2-基胺氢碘酸盐1a(100mg；0.32mmol)在吡啶(2mL)中的混合物中逐滴加入苯甲酰氯(0.12mL；0.96mmol)。然后将混合物在密封管中于80℃搅拌过夜。将混合物冷却到室温并且真空除去溶剂。将残余物置于乙酸乙酯中，并且将萃取物与2M碳酸钠溶液一起在室温搅拌2小时。然后将有机层用盐水溶液洗涤，硫酸钠干燥并且真空浓缩。粗产物经过硅胶色谱(洗脱液10％乙酸乙酯己烷至40％乙酸乙酯梯度)得到53mg的N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-苯甲酰胺2。EI-HRMS m/eC17H12N2OS计算值292.0670，实测292.0666。
实施例24-氟-N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-苯甲酰胺以与实施例1步骤3中所述类似的方式，用4-氟苯甲酰氯(0.116mL；0.96mmol)酰化8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基胺氢碘酸盐1a(实施例1的步骤1中制备，100mg；0.32mmol)，得到35mg的4-氟-N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-苯甲酰胺3。EI-HRMS m/eC17H11FN2OS计算值310.0576，实测310.0577。
实施例34-氰基-N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-苯甲酰胺以与实施例1步骤3中所述类似的方式，用4-氰基苯甲酰氯(164mg；0.96mmol)酰化8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基胺氢碘酸盐1a(实施例1的步骤1中制备，100mg；0.32mmol)，得到26mg的4-氰基-N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-苯甲酰胺4。EI-HRMS m/eC18H14N2OS(M+)计算值306.0827，实测306.0827。
实施例4N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-4-甲基-苯甲酰胺以与实施例1步骤3中所述类似的方式，用4-甲基苯甲酰氯(0.0.130mL；0.96mmol)酰化8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基胺氢碘酸盐1a(实施例1的步骤1中制备，100mg；0.32mmol)，得到25mg的N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-4-甲基-苯甲酰胺5。EI-HRMS m/eC16H11N3OS(M+)计算值293.0623，实测293.0621。
实施例5噻吩-2-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺以与实施例1步骤3中所述类似的方式，用2-噻吩碳酰氯(0.106mL；0.96mmol)酰化8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基胺氢碘酸盐1a(实施例1的步骤1中制备，100mg；0.32mmol)，得到17mg噻吩-2-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺6。EI-HRMS m/eC15H10N2OS2(M+)计算值298.0235，实测298.0233。
实施例6N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-烟酰胺将8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基胺氢碘酸盐1a(实施例1的步骤1中制备，mg；mmol)，烟酰氯盐酸盐(92mg；0.50mmol)和二异丙基乙胺(0.50mL；2.77mmol)在二氯乙烷中的悬浮液在密封管中用微波炉加热到120℃10分钟。将混合物冷却到室温并且真空除去溶剂。将残余物置于2M碳酸钠溶液中，并且用乙酸乙酯萃取。将萃取物干燥(硫酸钠)、过滤并且真空浓缩。粗产物经过硅胶色谱(洗脱液＝50％乙酸乙酯/己烷至100％乙酸乙酯/己烷梯度)得到43mg的N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-烟酰胺7。EI-HRMS m/eC16H11N4OS(M+)计算值293.0623，实测293.0620。
实施例7N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-异烟酰胺向在氮气下的8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基胺1b(实施例1的步骤2中制备，640mg；3.4mmol)和碳酸钾(5.40g；39.1mmol)在无水四氢呋喃(20mL)中的混合物中加入异烟酰氯盐酸盐(959mg；5.10mmol)。然后将淤浆加热到回流18hr。此时，加入碳酸钾(5.40g；39.1mmol)和异烟酰氯盐酸盐(959mg；5.10mmol)并且继续回流22hr，然后冷却到室温。真空除去溶剂，将残余物用水稀释并且用二氯甲烷萃取。滤出不溶物，用二氯甲烷和水洗涤，并且最后用乙醚研磨，得到253mg的N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-异烟酰胺8。EI-HRMS m/eC16H11N3OS(M+)计算值293.0623，实测293.0621。
实施例82-甲基-2H-吡唑-3-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺向在氮气下的8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基胺1b(实施例1的步骤2中制备，320mg；1.70mmol)和碳酸钾(3.10g；22.4mmol)在无水四氢呋喃(10mL)中的混合物中加入2-甲基-2H-吡唑-3-碳酰氯(516mg；3.57mmol)。然后将淤浆加热到回流3hr。真空除去溶剂，将残余物用水稀释并且用乙酸乙酯萃取。有机层用50mL的1N盐酸溶液接着用盐水溶液洗涤，然后干燥(硫酸钠)、过滤并且真空浓缩。通过用乙醚研磨纯化粗产物，得到155mg的2-甲基-2H-吡唑-3-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺9。EI-HRMS m/eC15H12N4OS(M+)计算值296.0732，实测296.0731。
实施例9N-(6-氯-8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-异烟酰胺步骤16-氯-8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基胺氢碘酸盐将5-氯-1-茚满酮(1.00g；6.00mmol)，硫脲(0.917g；12.0mmol)和碘(1.55g；6.10mmol)的混合物在密封管中加热到100℃。1小时后，让混合物冷却到室温。固体用水研磨并且过滤。然后将固体用无水乙醇研磨，过滤并且用无水乙醇洗涤几次，得到0.60g的6-氯-8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基胺氢碘酸盐10。
步骤2N-(6-氯-8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-异烟酰胺将6-氯-8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基胺氢碘酸盐10(80mg；0.23mmol)，碳酸钾(138mg；1.0mmol)和异烟酰氯盐酸盐(89mg；0.5mmol)在无水四氢呋喃中的混合物在密封管中加热到80℃。20hr.后，让混合物冷却到室温并且真空浓缩。残余物用二氯甲烷稀释并且用水洗涤。将有机层干燥(硫酸钠)、过滤并且真空浓缩。粗产物用反相HPLC(洗脱液乙腈/水/0.1％三氟乙酸)纯化，得到20mg的N-(6-氯-8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-异烟酰胺11，为三氟乙酸盐。EI-HRMS m/eC16H10ClN3OS(M+)计算值327.0233，实测327.0217。
实施例101H-吡唑-4-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺步骤14-吡唑碳酰氯将4-吡唑羧酸(600mg)在亚硫酰二氯(5mL)中的混合物在氮气下加热到90℃。18hr.后，让混合物冷却到室温并且真空除去溶剂，得到579mg的4-吡唑碳酰氯12，该产物不经进一步纯化在下一步骤(步骤2)中使用。EI-HRMS m/eC16H11N3OS(M+)计算值293.0623，实测293.0621。
步骤21H-吡唑-4-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺以类似实施例7中所述的方式，用4-吡唑碳酰氯12(208mg；1.6mmol)酰化8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基胺1b(实施例1的步骤2中制备，377mg；2.00mmol)，得到190mg的1H-吡唑-4-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺13，为暗色粉末。
实施例113-甲基-3H-咪唑-4-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺三氟乙酸盐在室温下向8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基胺1b(实施例1的步骤2中制备，94mg；0.50mmol)，1-甲基-1H-咪唑-5-羧酸(65mg；0.50mmol)和BOP试剂(443mg；1.0mmol)在无水二氯甲烷中的混合物滴加二异丙基乙胺(0.55ml；3.13mmol)。96小时后，将反应混合物用二氯甲烷稀释，并且用水接着用盐水溶液洗涤。将有机层干燥(硫酸钠)、过滤并且真空浓缩。使用反相HPLC(洗脱液乙腈/水/0.1％三氟乙酸)纯化，得到70mg的14。EI-HRMS m/eC15H12N4OS(M+)计算值296.0732，实测296.0728。
实施例12N-(4，5-二氢-萘并[1，2-d]噻唑-2-基)-异烟酰胺步骤14，5-二氢-萘并[1，2-d]噻唑-2-基胺氢碘酸盐将1-四氢萘酮(5.00ml；37.6mmol)，硫脲(5.72g；75.2mmol)和碘(9.54g；37.6mmol)的混合物在搅拌下加热到95℃。4hr.后，混合物凝固并且冷却到室温。将混合物用200ml的水稀释，并且将固体物质滤出，用无水乙醇研磨。将固体用无水乙醇洗涤几次，得到4.00g的4，5-二氢-萘并[1，2-d]噻唑-2-基胺氢碘酸盐15，为灰白色粉末。
步骤2N-(4，5-二氢-萘并[1，2-d]噻唑-2-基)-异烟酰胺在室温、氮气下，向搅拌着的4，5-二氢-萘并[1，2-d]噻唑-2-基胺氢碘酸盐15在无水四氢呋喃中的悬浮液中加入氢化钠(26mg；1.1mmol)。15分钟后，加入异烟酰氯盐酸盐(107mg；0.60mmol)，并且将混合物在室温搅拌2hr.，然后真空浓缩。残余物用水稀释并且滤出固体物质。使用反相HPLC(洗脱液乙腈/水/0.1％三氟乙酸)纯化，得到20mg的N-(4，5-二氢-萘并[1，2-d]噻唑-2-基)-异烟酰胺16，为三氟乙酸盐。ES-HRMS m/eC17H13N3OS(M+H)计算值308.0852，实测308.0851。
实施例13N-(5，6-二氢-4H-3-硫杂-1-氮杂-苯并[e]薁-2-基)-异烟酰胺步骤15，6-二氢-4H-3-硫杂-1-氮杂-苯并[e]薁-2-基胺氢碘酸盐将1-苯并环庚酮(1.00ml；6.7mmol)，硫脲(1.02g；13.4mmol)和碘(1.70g；6.7mmol)的混合物在搅拌下加热到95℃。20hr.后，让混合物冷却到室温，用200ml水稀释，将滤出的固体物质用25ml水洗涤两次，接着用乙醚洗涤(3×20ml)，得到1.50g的5，6-二氢-4H-3-硫杂-1-氮杂-苯并[e]薁-2-基胺氢碘酸盐17，为灰白色粉末。
步骤2N-(5，6-二氢-4H-3-硫杂-1-氮杂-苯并[e]薁-2-基)-异烟酰胺在室温、氮气下，向搅拌着的5，6-二氢-4H-3-硫杂-1-氮杂-苯并[e]薁-2-基胺氢碘酸盐17(80mg；0.23mmol)在无水四氢呋喃的悬浮液中加入氢化钠(17mg；0.7mmol)。15分钟后，加入异烟酰氯盐酸盐(62mg；0.35mmol)，将混合物在室温搅拌1小时，然后真空浓缩。残余物用水研磨，并且滤出固体物质。使用反相HPLC(洗脱液乙腈/水/0.1％三氟乙酸)纯化，得到20mg的N-(5，6-二氢-4H-3-硫杂-1-氮杂-苯并[e]薁-2-基)-异烟酰胺18，为三氟乙酸盐。EI-HRMS m/eC18H15N3OS(M+)计算值321.0936，实测321.0935。
实施例14N-(4H-色烯并[4，3-d]噻唑-2-基)-异烟酰胺步骤14H-色烯并[4，3-d]噻唑-2-基胺氢碘酸盐将4-苯并二氢吡喃酮(2.00g；13.5mmol)，硫脲(2.06g；27.0mmol)和碘(3.43g；13.5mmol)的混合物在搅拌下加热到95℃。4.5hr.后，将混合物冷却到室温，用二氯甲烷研磨，滤出固体物质。将该固体用乙酸乙酯进一步研磨，过滤并且用乙酸乙酯洗涤，得到3.00g的4H-色烯并[4，3-d]噻唑-2-基胺氢碘酸盐19，为灰白色粉末。
步骤2N-(4H-色烯并[4，3-d]噻唑-2-基)-异烟酰胺在室温、氮气下向搅拌着的4H-色烯并[4，3-d]噻唑-2-基胺氢碘酸盐19(90mg；0.27mmol)在无水四氢呋喃中的悬浮液加入氢化钠(19mg；0.8mmol)。15分钟后，加入异烟酰氯盐酸盐(62mg；0.35mmol)，并且将混合物在室温搅拌3hr.，然后真空浓缩。残余物用水稀释，并且用乙酸乙酯萃取。将萃取物干燥(硫酸钠)、过滤并且真空浓缩。使用反相HPLC(洗脱液乙腈/水/0.1％三氟乙酸)纯化，得到12mg的N-(4H-色烯并[4，3-d]噻唑-2-基)-异烟酰胺20，为三氟乙酸盐。ES-HRMS m/eC16H11N3OS(M+H)计算值310.0645，实测310.0646。
实施例15N-萘并[1，2-d]噻唑-2-基-异烟酰胺步骤1萘并[1，2-d]噻唑-2-基胺氢溴酸盐在室温下将溴(0.26ml；5.14mmol)滴加到搅拌着的2-萘硫脲(800mg；3.96mmol)在无水二氯甲烷(10ml)中的混合物中。然后将混合物加热到回流。2hr.后，让混合物冷却到室温。滤出固体，并且用二氯甲烷洗涤几次，得到1.12g的萘并[1，2-d]噻唑-2-基胺氢溴酸盐21。
步骤2N-萘并[1，2-d]噻唑-2-基-异烟酰胺在室温、氮气下，向搅拌着的21(90mg；0.27mmol)在无水四氢呋喃中的悬浮液加入氢化钠(73mg；2.89mmol)。30分钟后，加入异烟酰氯盐酸盐(150mg；0.84mmol)，并且将混合物在室温搅拌72hr.。将混合物真空浓缩，残余物置于乙酸乙酯中并且用饱和氯化铵溶液洗涤。将有机层干燥(硫酸钠)、过滤并且真空浓缩。使用反相HPLC(洗脱液乙腈/水/0.1％三氟乙酸)纯化，得到26mg的N-萘并[1，2-d]噻唑-2-基-异烟酰胺22。ES-HRMSm/eC17H11N3OS(M+H)计算值306.0696，实测306.0691。
实施例164-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基氨基甲酰基)-哌啶-1-羧酸叔丁酯向室温下磁力搅拌着的哌啶-1，4-二羧酸一叔丁酯(195mg，0.848mmol)在CH3CN(10ml)中的混合物加入1-甲基咪唑(200ml，2.52mmol，Aldrich)。将反应混合物在冰浴中冷却，然后加入对甲苯磺酰氯(192mg，1.01mmol，Aldrich)。在冰浴中搅拌30分钟后，加入8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基胺(160mg，0.84mmol)。除去冰浴，将反应混合物在室温搅拌2小时。LC/MS分析显示原料完全消耗。将反应混合物过滤，得到的固体用乙腈洗涤，得到4-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基氨基甲酰基)-哌啶-1-羧酸叔丁酯(330mg，99％产率)，为灰白色固体。HRMSC21H25N3O3S(M+H)+计算值400.169，实测400.169。
实施例173-(三氟甲基-苯甲酰基)-哌啶-4-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺(44mg，55.2％产率)步骤1按照已知的程序，用TFA将4-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基氨基甲酰基)-哌啶-1-羧酸叔丁酯(350mg，0.876mmol)去保护，得到哌啶-4-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺TFA盐，为白色粉末(306mg，84.5％产率)；C16H17N3OS(M+H)+的HRMS为m/z＝300.12。
步骤2向室温下的哌啶-4-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺(70mg；0.169mmol)和三乙胺(59mL；0.42mmol)在10mL二氯甲烷中的混合物滴加3-(三氟甲基)苯甲酰氯(25mL；0.169mmol)。室温下24小时后，将反应混合物用乙酸乙酯稀释，然后用1N HCl、饱和NaHCO3水溶液、水和盐水洗涤。将有机层干燥(硫酸钠)、过滤和真空浓缩。粗产物用色谱纯化(用75％乙酸乙酯/己烷至100％乙酸乙酯梯度洗脱)，得到3-(三氟甲基-苯甲酰基)-哌啶-4-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺(44mg，55.2％产率)；HRMSC24H20N3O3F3S(M+H)+计算值472.1301，实测472.1301。
实施例18以类似的方式获得1-(3-三氟甲基-苯磺酰基))-哌啶-4-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基-酰胺由哌啶-4-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺(来自实施例17，步骤1)(60mg，0.145mmol)和3-(三氟甲基)苯磺酰氯(42.6mg，0.174mmol)及三乙胺获得，为白色固体(58mg，78.9％产率)；HRMSC23H20N3O3F3S2(M+H)+计算值508.0971，实测508.0971。
实施例191-(3-三氟甲基-苄基)-哌啶-4-羧酸(9H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺向室温下磁力搅拌的哌啶-4-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺(来自实施例17，步骤1)(70mg，0.169mmol)在DMF(15ml，Aldrich)中的混合物加入碳酸铯(0.5g，0.0153mmol)，接着加入3-(三氟甲基)苄基氯(26ml，0.169mmol，Aldrich)。将反应混合物在室温搅拌3小时，将粗的反应混合物过滤并且浓缩。使用反相HPLC(洗脱液乙腈/水/0.1％三氟乙酸)纯化，得到1-(3-三氟甲基-苄基)-哌啶-4-羧酸(9H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺TFA盐(33mg，34.1％产率)，为白色固体。HRMSC24H22N3OF3S(M+H)+计算值458.1509，实测458.1506。
实施例20以平行方式按照上述方案1和以下程序，制备产物1-19酰胺。
将在12ml管中的羧酸(0.3M，1ml，0.3mmol)的N-甲基吡咯烷-2-酮(NMP)溶液、O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N′N′-四甲基脲鎓六氟磷酸盐、HATU(0.3M，1ml，0.3mmol)和纯二异丙基乙胺(0.05ml，0.3mmol)的混合物在RT振荡20分钟，然后加入在NMP中的氨基噻唑(0.2M，1ml，0.2mmol)。将该管用帽子密封并且在90C振荡12小时。待冷却到室温后，将反应混合物用乙酸乙酯(2ml)和氢氧化钠溶液(0.5M，2ml)稀释。涡旋所述的管进行萃取，并且离心以进行层分离。将有机层转移到20ml闪烁管中。如上用乙酸乙酯再次萃取水层。然后将含有合并的乙酸乙酯萃取物的闪烁管装在Genevac蒸发仪上以除去所有有机溶剂。粗产物用HPLC检测纯度，然后用HPLC纯化，得到纯的酰胺。
产物1N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)3-氟苯甲酰胺。37mg(60％产率)。100％纯度(LR-LCMS，计算值311.06，实测311.03)。
产物2N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)3-羟基苯甲酰胺。2mg(3％产率)。100％纯度(LR-LCMS，计算值309.07，实测309.05)。
产物3N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)2-甲基戊-5-烯酰基酰胺。31mg(55％产率)。100％纯度(LR-LCMS，计算值285.1，实测285.08)。
产物4N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)2-甲基丁酰基酰胺。28mg(51％产率)。100％纯度(LR-LCMS，计算值273.1，实测273.09)。
产物5N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)5-甲基磺酰基噻吩-2-甲酰胺。63mg(84％产率)。100％纯度(LR-LCMS，计算值377.01，实测377.03)。
产物6N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)2-糠酰基酰胺。53mg(95％产率)。100％纯度(LR-LCMS，计算值283.05，实测283.04)。
产物7N-(6-氟-8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)4-羟基烟酰胺。2mg(3％产率)。100％纯度(LR-LCMS，计算值328.05，实测328.06)。
产物8N-(6-氟-8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)(4-氨基磺酰基)苯甲酰胺。7mg(9％产率)。100％纯度(LR-LCMS，计算值390.03，实测390.03)。
产物9N-(6-氟-8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)(4-叔丁氧羰基甲基)苯甲酰胺。14mg(16％产率)。100％纯度(LR-LCMS，计算值440.14，实测440.19)。
产物10N-(6-氟-8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)噻吩-3-甲酰胺。10mg(16％产率)。100％纯度(LR-LCMS，计算值317.08，实测317.07)。
产物11N-(4，5-二氢-萘并[1，2-d]噻唑-2-基)4-羟基烟酰胺。4mg(6％产率)。100％纯度(LR-LCMS，计算值234.08，实测324.08)。
产物12N-(4，5-二氢-萘并[1，2-d]噻唑-2-基)噻吩-3-甲酰胺。10mg(16％产率)。100％纯度(LR-LCMS，计算值213.04，实测313.03)。
产物13N-(4，5-二氢-7-甲氧基萘并[1，2-d]噻唑-2-基)4-羟基烟酰胺。2mg(3％产率)。100％纯度(LR-LCMS，计算值354.09，实测354.09)。
产物14N-(4，5-二氢-7-甲氧基萘并[1，2-d]噻唑-2-基)5-甲基磺酰基噻吩-2-甲酰胺。15mg(18％产率)。100％纯度(LR-LCMS，计算值421.03，实测421.02)。
产物16N-(5，6-二氢-4H-3-硫杂-1-氮杂-苯并[e]薁-2-基)4-羟基烟酰胺。10mg(15％产率)。100％纯度(LR-LCMS，计算值338.09，实测338.19)。
产物17N-(5，6-二氢-4H-3-硫杂-1-氮杂-苯并[e]薁-2-基)噻吩-3-甲酰胺。22mg(34％产率)。100％纯度(LR-LCMS，计算值327.06，实测327.12)。
产物18N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)3-氯-4-羟基苯甲酰胺。16mg(23％产率)。100％纯度(LR-LCMS，计算值343.03，实测343.07)。
产物19N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)(4-氨基磺酰基)苯甲酰胺。10mg(13％产率)。100％纯度(LR-LCMS，计算值372.04，实测373.06)。
实施例21对表达人腺苷A2B受体的CHO.K1细胞中NECA-诱导的环状AMP生产的抑制活性该试验中使用的是用人腺苷A2B受体cDNA 4b稳定转染的中国仓鼠卵巢(CHO.K1)细胞。在5％CO2/95％O2气氛和37℃的条件下，在含有10％胎牛血清(Invitrogen，Grand Island，NY)、100U/mL青霉素(Invitrogen，GrandIsland，NY)、100U/mL链霉素(Invitrogen，Grand Island，NY)、1mg/mL G418(Invitrogen，Grand Island NY)和0.2mg/ml潮霉素B(Invitrogen，Carlsbad，CA)的DMEM和D-MEM/F-12(1∶1混合物)培养基(Invitrogen，Grand Island，NY)中培养细胞。将实验培养细胞在384孔组织培养板上以单层形式生长过夜(0.06ml/孔-7500细胞/孔)。每个孔用0.1ml的Krebs缓冲液洗涤一次。向每个孔中加入含有100μM磷酸二酯酶抑制剂Ro20-1724(Roche)、100nMNECA(Sigma-Aldrich，St.Louis，MO)、0.02％BSA Fraction V(RocheBiochemicals)、测试化合物(适宜的浓度)的50μL Krebs缓冲液。DMSO的最终浓度为1.1％。在孵育30-45分钟后，将孔倒空并且在纸巾上吸干以除去残余溶液。使用获自DiscoverX的用于附着细胞的HitHunter(TM)cAMPAssay Kit(Fremont，CA)溶解细胞，并且测量cAMP浓度。实施例1-20的化合物的IC50值＜5μM。下表显示了一些实施例的IC50值
实施例A可以用常规方式制造含有如下成分的薄膜包衣片剂
成分每片核式(I)化合物 10.0mg 200.0mg微晶纤维素 23.5mg 43.5mg乳糖水合物 60.0mg 70.0mg聚乙烯吡咯烷酮K30 12.5mg 15.0mg淀粉羟乙酸钠12.5mg 17.0mg硬脂酸镁1.5mg4.5mg(核重) 120.0mg 350.0mg薄膜包衣羟丙基甲基纤维素3.5mg7.0mg聚乙二醇60000.8mg1.6mg滑石1.3mg2.6mg氧化铁(Iron oxyde)(黄) 0.8mg1.6mg二氧化钛0.8mg1.6mg将活性成分过筛并和微晶纤维素混合，用聚乙烯吡咯烷酮水溶液将混合物造粒。将颗粒与淀粉羟乙酸钠和硬脂酸镁混合并压缩，得到分别重120或350mg的核。将该核用上述薄膜包衣的水溶液/悬浮液涂覆。
实施例B可以用常规方式制造含有如下成分的胶囊剂成分每个胶囊式(I)化合物 25.0mg乳糖150.0mg玉米淀粉20.0mg滑石5.0mg将所述组分过筛并混合，然后装入2号胶囊中。
实施例C注射液可以具有如下组成式(I)化合物3.0mg聚乙二醇400150.0mg乙酸 适量至pH5.0注射液用水 补足1.0ml将活性成分溶解在聚乙二醇400和注射用水(部分)的混合物中。用乙酸将pH调到5.0。加入余量的水将体积调到1.0ml。过滤该溶液，适当过量地装入小瓶中并灭菌。
实施例D可以用常规方式制造含有如下成分的软明胶胶囊胶囊内容物式(I)化合物 5.0mg黄蜡8.0mg氢化大豆油 8.0mg部分氢化的植物油34.0mg大豆油 110.0mg胶囊内容物重量 165.0mg明胶胶囊明胶75.0mg甘油85％32.0mgKarion 83 8.0mg(干物质)二氧化钛0.4mg氧化铁黄1.1mg
将活性成分溶解在其它成分的温热熔融体中，将混合物装入合适大小的软明胶胶囊中。将填充后的软明胶胶囊按照通常的程序进行处理。
实施例E可以用常规方式制造含有如下成分的小药囊式(I)化合物50.0mg乳糖，细粉 1015.0mg微晶纤维素(AVICEL PH 102) 1400.0mg羧甲基纤维素钠 14.0mg聚乙烯吡咯烷酮K30 10.0mg硬脂酸镁 10.0mg香味添加剂 1.0mg将活性成分与乳糖、微晶纤维素和羧甲基纤维素钠混合，并用聚乙烯吡咯烷酮和水的混合液将其造粒。将颗粒与硬脂酸镁和香味添加剂混合，并装入小药囊中。
权利要求
1.式(I)的化合物或其药用盐， 其中X是-CH2-、-CH2CH2-、-CHCH-、-(CH2)3-和O(CH2)-；R是烷基，链烯基，-NHR′或5-或6-元饱和或不饱和的碳环或杂环，所述的环可以任选含有一个或多个杂原子，并且所述环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基选自卤素，羟基，低级烷基，乙酰氨基甲基，烷氧羰基酰氨基甲基，腈基，磺酰氨基，烷基磺酰基，烷氧基，苄基，苯甲酰基，芳基磺酰基和酰基，其中苄基、苯甲酰基或芳基磺酰基任选被卤素、三卤代-低级烷基、低级烷基、烷氧基、烷基磺酰基或氰基取代；R1选自氢，卤素，低级烷基，烷氧基或腈基；R′是烷基或5-或6-元饱和或不饱和的碳环或杂环，所述环可以任选含有一个或多个杂原子，并且所述环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基选自卤素，低级烷基，腈基，烷基磺酰基，烷氧基和酰基。
2.根据权利要求1的化合物，其特征在于为式(IA)化合物或其药用盐， 其中X是-CH2-、-CH2CH2-、-CHCH-、-(CH2)3-和O(CH2)-；R是烷基，-NHR′或5-或6-元饱和或不饱和的碳环或杂环，所述的环可以任选含有一个或多个杂原子，并且所述环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基选自卤素，低级烷基，腈基，烷基磺酰基，烷氧基和酰基，并且R′是烷基或5-或6-元饱和或不饱和的碳环或杂环，所述环可以任选含有一个或多个杂原子，并且所述环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基选自卤素，低级烷基，腈基，烷基磺酰基，烷氧基和酰基。
3.根据权利要求1的化合物，其中R是烷基，链烯基或5-或6-元饱和或不饱和的碳环或杂环，所述的环可以任选含有一个或多个杂原子，并且所述的环任选被一个或多个取代基取代，所述取代基选自卤素，羟基，低级烷基，乙酰氨基甲基，烷氧羰基酰氨基甲基，腈基，磺酰氨基，烷基磺酰基，烷氧基，苄基，苯甲酰基，芳基磺酰基和酰基，其中苄基，苯甲酰基或芳基磺酰基任选被卤素、三卤代-低级烷基、低级烷基、烷氧基、烷基磺酰基或氰基取代。
4.根据权利要求1-3中任一项的化合物，其中X是-CH2-。
5.根据权利要求1-4中任一项的化合物，其中R1是氢，卤素或低级烷氧基。
6.根据权利要求1-5中任一项的化合物，其中R是低级烷基，低级链烯基，苯基或杂环，所述杂环选自噻吩基，吡啶基，吡唑基，咪唑基，呋喃基或哌啶基，其中苯基或杂环任选被1至3个取代基取代，所述取代基选自卤素、羟基、腈基、低级烷基、磺酰氨基、低级烷基-磺酰基、低级烷氧基-羰基、低级烷氧基-C(O)-NH-CH2-、任选被CF3取代的苄基、任选被CF3取代的苯甲酰基或任选被CF3取代的苯磺酰基。
7.根据权利要求1-6中任一项的化合物，其中R是低级链烯基或选自噻吩基、吡啶基、吡唑基、咪唑基、呋喃基或哌啶基的杂环，所述杂环任选被1至3个取代基取代，所述取代基选自卤素、羟基、腈基、低级烷基、磺酰氨基、低级烷基-磺酰基、低级烷氧基-羰基、低级烷氧基-C(O)-NH-CH2-、任选被CF3取代的苄基、任选被CF3取代的苯甲酰基或任选被CF3取代的苯磺酰基。
8.根据权利要求1-7中任一项的化合物，其选自N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-苯甲酰胺，4-氟-N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-苯甲酰胺，4-氰基-N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-苯甲酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-4-甲基-苯甲酰胺，噻吩-2-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)烟酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)异烟酰胺，2-甲基-2H-吡唑-3-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺，N-(6-氯-8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-异烟酰胺，1H-吡唑-4-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺，N-(4，5-二氢-萘并[1，2-d]噻唑-2-基)-异烟酰胺，N-(5，6-二氢-4H-3-硫杂-1-氮杂-苯并[e]薁-2-基)-异烟酰胺，N-(4H-色烯并[4，3-d]噻唑-2-基)-异烟酰胺，N-萘并[1，2-d]噻唑-2-基-异烟酰胺，和3-甲基-3H-咪唑-4-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺三氟乙酸盐。
9.根据权利要求1-7中任一项的化合物，其选自4-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基氨基甲酰基)-哌啶-1-羧酸叔丁酯，3-(三氟甲基-苯甲酰基)-哌啶-4-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺，1-(3-三氟甲基-苄基)-哌啶-4-羧酸(9H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)-酰胺，1-(3-三氟甲基-苯磺酰基))-哌啶-4-羧酸(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基-酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)3-氟苯甲酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)3-羟基苯甲酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)2-甲基戊-5-烯酰基酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)2-甲基丁酰基酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)5-甲基磺酰基噻吩-2-甲酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)2-糠酰基酰胺，和N-(6-氟-8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)4-羟基烟酰胺。
10.根据权利要求1-7中任一项的化合物，其选自N-(6-氟-8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)(4-氨基磺酰基)苯甲酰胺，N-(6-氟-8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)(4-叔丁氧羰基甲基)苯甲酰胺，N-(6-氟-8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)噻吩-3-甲酰胺，N-(4，5-二氢-萘并[1，2-d]噻唑-2-基)4-羟基烟酰胺，N-(4，5-二氢-萘并[1，2-d]噻唑-2-基)噻吩-3-甲酰胺，N-(4，5-二氢-7-甲氧基萘并[1，2-d]噻唑-2-基)4-羟基烟酰胺，N-(4，5-二氢-7-甲氧基萘并[1，2-d]噻唑-2-基)5-甲基磺酰基噻吩-2-甲酰胺，N-(5，6-二氢-4H-3-硫杂-1-氮杂-苯并[e]薁-2-基)4-羟基烟酰胺，N-(5，6-二氢-4H-3-硫杂-1-氮杂-苯并[e]薁-2-基)噻吩-3-甲酰胺，N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)3-氯-4-羟基苯甲酰胺，和N-(8H-茚并[1，2-d]噻唑-2-基)(4-氨基磺酰基)苯甲酰胺。
11.一种用于制备根据权利要求1-10中任一项的化合物的方法，该方法包括将式(II)化合物， 与化合物R-C(O)Cl反应，其中R、R1和X如权利要求1至10中任一项所定义。
12.用根据权利要求11的方法制备的根据权利要求1-10中任一项的化合物。
13.药物组合物，其包含根据权利要求1-10中任一项的化合物和可药用载体和/或辅料。
14.根据权利要求1-10中任一项的化合物，其用作治疗活性物质。
15.根据权利要求1-10中任一项的化合物，其用作用于治疗和/或预防由腺苷A2B受体的拮抗作用介导的疾病的治疗活性物质。
16.一种用于治疗和/或预防性治疗由腺苷A2B受体的拮抗作用介导的疾病的方法，特别是治疗和/或预防性治疗糖尿病、糖尿病性视网膜病、哮喘和腹泻的方法，该方法包括将根据权利要求1-10中任一项的化合物向人或动物给药。
17.根据权利要求1-10中任一项的化合物用于治疗和/或预防性治疗由腺苷A2B受体的拮抗作用介导的疾病的用途。
18.根据权利要求1-10中任一项的化合物用于治疗和/或预防性治疗糖尿病、糖尿病性视网膜病、哮喘和腹泻的用途。
19.根据权利要求1-10中任一项的化合物用于制备药物的用途，所述药物用于治疗和/或预防性治疗由腺苷A2B受体的拮抗作用介导的疾病。
20.根据权利要求1-10中任一项的化合物用于制备药物的用途，所述药物用于治疗和/或预防性治疗糖尿病、糖尿病性视网膜病、哮喘和腹泻。
21.如此前定义的本发明。
全文摘要
本发明涉及新型的式(I)的取代的N－酰基－2－氨基噻唑及其药用盐，其中R、R
文档编号A61P3/10GK1993336SQ200580026471
公开日2007年7月4日 申请日期2005年7月28日 优先权日2004年8月5日
发明者蔡建平, F·菲罗厄兹尼亚, K·R·格廷, 齐莉达 申请人:霍夫曼-拉罗奇有限公司
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