可用于治疗外周动脉疾病并且作为磷酸二酯酶抑制剂的喹唑啉衍生物的制作方法
专利名称：可用于治疗外周动脉疾病并且作为磷酸二酯酶抑制剂的喹唑啉衍生物的制作方法
技术领域：
本发明涉及可用于抑制磷酸二酯酶的化合物。更具体而言，本发明还提供了可用于治疗或预防外周动脉疾病的化合物。
背景技术：
外周动脉疾病的特征在于因脂肪沉积、尤其是在腿部血管中的脂肪沉积导致的动脉硬化或动脉粥样硬化。该病症影响了10％以上的成年人群，主要是超过55岁的人。间歇性跛行是外周动脉疾病的一种症状，其特征在于在运动过程中腿部或臀部疼痛。间歇性跛行仍然代表了很大程度上未得到满足的医疗需求，对这种需求而言，除使用球囊血管成形术的外科干预外，其他的主要治疗手段似乎仅为己酮可可碱和烟酸肌醇酯—既古老而又非特异性的药物。动脉粥样硬化是“动脉硬化”的另一名称并且导致外周动脉疾病。它是一种胆固醇沉积物在动脉壁上形成的疾病过程。这些脂肪沉积物限制血流并且减少对各种身体器官及组织的氧和营养物的递送。当动脉粥样硬化发生在腿部动脉中时，它可导致间歇性跛行。
磷酸二酯酶(PDE)是一类涉及第二信使核苷酸环腺苷酸(cAMP)和环鸟苷酸(cGMP)代谢的胞内酶(例如参见Doherty，1997，“勃起机能障碍的口服、透皮和经尿道疗法”-男性不育和性功能障碍，Hellstrom编辑，第34章，Springer-Verlag纽约)。在先的文献中已经描述了大量磷酸二酯酶抑制剂的各种治疗应用，包括治疗阻塞性肺病、变态反应、高血压、心绞痛、充血性心力衰竭和抑郁症(例如参见Goodman和Gilman的“治疗药物的药理学基础”，1996，第9版，第34章，McGraw-Hill纽约)。PDEIII抑制与周围血管舒张和抗-聚集(anti-aggregatory)以及由此的抗血栓形成作用相关。
本发明的用途所涵盖的化合物为3-羟基阿那格雷。其为阿那格雷的代谢物(例如参见美国专利申请顺序号US10/762,566，以US20040209907公布)。
文献中已经研究了各种阿那格雷的代谢物Erusalimsky等(2002)“阿那格雷的血小板减少活性是其主要代谢物2-氨基-5，6-二氯-3，4-二氢喹唑啉(RL603)介导的吗？”-Exp Hematol.30625-7；Lane等(2001)“阿那格雷代谢物通过抑制巨核细胞成熟但不诱导血小板聚集而诱导小鼠血小板减少”-Exp Hematol.291417-241；和Gaver等(1981)“血小板聚集抑制剂阿那格雷的性能”-Clin Pharmacol Ther29381-6。
本发明的目的之一是提供可选的治疗外周动脉疾病、包括间歇性跛行的方法并且提供新的磷酸二酯酶抑制剂。
发明概述本发明的一个实施方案提供了治疗外周动脉疾病的方法，包括对需要这类治疗的对象给予治疗有效量的式(I)化合物、其平衡形式、其药学上可接受的盐或其平衡形式的药学上可接受的盐 其中X、Y、R1和R2如下文所定义。
在一个实施方案中，本发明提供了下式化合物、其平衡形式、其药学上可接受的盐或其平衡形式的药学上可接受的盐，
其中R1为H、C1-6烷基、C2-6链烯基、C2-6炔基、C1-6烷氧基或C6-10芳基；R2为 或 R3为OH、卤素、SH、O-C1-6烷基或羟基模拟基团；且X和Y独立地为H或卤素。
优选上述化合物在苄基环的5和6位上包括X和Y取代基。
在其它实施方案中，提供了用于抑制磷酸二酯酶、治疗或预防外周动脉疾病、抑制血小板聚集和治疗或预防充血性心力衰竭的方法，包括对有需要的对象给予治疗有效量的式(I)-(III)的化合物。
在另一个实施方案中，提供了药物制剂，包含本发明的化合物与药学上可接受的载体或赋形剂。
在另一个实施方案中，提供了药物制剂，包含至少一种式(I)-(III)的化合物与至少一种另外的治疗剂。
在另一个实施方案中，提供了式(I)-(III)的化合物在制备用于治疗外周动脉疾病的药物中的用途。
发明详述除非另有定义，本文所用的所有技术和科学术语具有与本发明所属领域技术人员通常理解相同的含义。将本文提及的所有公开文献、专利申请、专利和其它参考文献完整地引入作为参考。如果存在矛盾，则以本说明书、包括定义为准。此外，材料、方法和实施例仅为说明性的，而非起限定作用。
在本发明的一个实施方案中，本发明的化合物包括其中存在独立或组合形式的如下实施方案的那些化合物。
在一个实施方案中，本发明提供了下式化合物、其平衡形式、其药学上可接受的盐或其平衡形式的药学上可接受的盐 其中R1为H、C1-6烷基、C2-6链烯基、C2-6炔基、C1-6烷氧基或C6-10芳基；R2为 或 R3为OH、卤素、SH、O-C1-6烷基或羟基模拟基团；且X和Y独立地为H或卤素。
优选的实施方案在苄基环的5和6位上包括X和Y取代基。
在一个实施方案中，R1为H或C1-6烷基。在另一个实施方案中，R1为H或CH3。在一个优选的实施方案中，R1为H。
在一个实施方案中，R3为OH或O-C1-6烷基。在另一个实施方案中，R3为OH或OCH3。在一个优选的实施方案中，R3为OH。
在一个实施方案中，X为H或卤素。在一个优选的实施方案中，X为H。在另一个实施方案中，X为CL在另一个实施方案中，Y为H或Cl。在一个优选的实施方案中，Y为H。在另一个优选的实施方案中，Y为Cl。
本发明的化合物包括 化合物#1其为N-(5，6-二氯-3，4-二氢喹唑啉-2-基)-2-氧代乙酰胺； 化合物#2其为N-(5，6-二氯-3，4-二氢喹唑啉-2-基)-2-氧代乙酰胺水合物； 化合物#3其为6，7-二氯-3-羟基-1，5-二氢-咪唑并[2，1-b]喹唑啉-2-酮；
化合物#4其为6，7-二氯-3-羟基-1，5-二氢-咪唑并[2，1-b]喹唑啉-2-酮；和 化合物#5其为(6，7-二氯-1-羟基-3，5-二氢-咪唑并[1，2-a]喹唑啉-2-酮)。
根据本发明，对患者给予基本上纯形式的化合物。
根据本发明，化合物为基本上纯的形式。
本申请中使用的术语“基本上纯的形式”意指如通过标准分析方法测定的化合物至少为80％纯、优选至少为85％纯、更优选至少为90％纯、更优选至少为95％纯且最优选至少为99％纯。
不受任何理论约束(对机理的理解对实施本发明而言并非必需并且本发明不限于任何特定的机理)，本发明人认为本发明的化合物为平衡形式。本发明化合物的平衡形式如下所示 本文所用的术语“平衡形式”包括式(I)-(III)化合物的互变异构体。
本发明化合物的平衡形式还可以表示如下
所有这类平衡形式均包括在本发明范围内。
本领域技术人员理解式(I)-(III)的化合物可以作为互变异构体或旋光异构体存在。这类化合物的所有平衡形式和互变异构体均包括在本发明范围内。单个的旋光异构体或对映体可以通过本领域已知的方法获得，如手性HPLC、酶促拆分和手性助剂，或可通过立体选择性合成。
本文所用的“羟基模拟”描述的是与羟基(-OH)相关的化学官能基团。它们是可以作为氢键供体和受体的官能基团。羟基模拟基团的非限制性实例包括-NH2和-SH。
还提供了本发明化合物的药学上可接受的盐。所谓术语式(I)-(III)化合物的“药学上可接受的盐”意指那些衍生自药学上可接受的无机和有机酸和碱的化合物。适合的酸的实例包括盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、高氯酸、富马酸、马来酸、磷酸、乙醇酸、乳酸、水杨酸、琥珀酸、对甲苯磺酸、酒石酸、乙酸、柠檬酸、甲磺酸、甲酸、苯甲酸、丙二酸、萘-2-磺酸和苯磺酸。其它酸如草酸，尽管自身并非是药学上可接受的，但是可以用作获得本发明化合物及其药学上可接受的酸加成盐的中间体。
衍生自适合的碱的盐包括碱金属(例如钠)、碱土金属(例如镁)、铵和NR4+(其中R为C1-4烷基)盐。
本申请中使用的术语“烷基”表示未被取代或(被卤素、硝基、CONH2、COOH、O-C1-6烷基、O-C2-6链烯基、O-C2-6炔基、羟基、氨基或COOQ，其中Q为C1-6烷基、C2-6链烯基、C2-6炔基)取代的直链、支链或环状烃部分(例如异丙基、乙基、氟己基或环丙基)。术语烷基还意指包括其中一个或多个氢原子被卤素替代的烷基，更优选地，所述卤素是氟(例如-CF3或-CH2CF3)。
本文所用的术语“链烯基”和“炔基”表示含有至少一个不饱和基团的(如上所述)烷基(例如烯丙基)。
当存在硫原子时，硫原子可以处于不同的氧化水平S、SO或SO2。所有这类氧化水平均包括在本发明范围内。
本文的卤素意指氟、氯、溴和碘。
本发明还提供了治疗对象(例如哺乳动物、特别是人)的方法，包括对需要这类治疗的对象给予治疗有效量的各自如本文所述的式(I)-(III)化合物、其制剂或其单位剂型。式(I)-(III)的化合物用于抑制细胞磷酸二酯酶，特别是磷酸二酯酶III和IV。更具体而言，式(I)-(III)的化合物用于抑制细胞磷酸二酯酶III。式(I)-(III)的化合物的主要用途在于减轻这类对象的间歇性跛行，一般表现为步行距离增加。本发明的化合物还可以用于治疗其它与血管舒张相关的疾病状态，包括例如中风和抗血小板作用。这类活性成分还可以增加需要这类治疗的对象的血浆高密度脂蛋白胆固醇和载脂蛋白，并且用于治疗性功能障碍。
状态、病症或疾病的“治疗”包括(1)预防或延缓发生在哺乳动物中的状态、病症或疾病的临床症状的出现，所述哺乳动物可能患有或易患所述状态、病症或疾病但尚未经历或显示该状态、病症或疾病的临床或亚临床症状；(2)抑制所述状态、病症或疾病，即阻止、减轻或延缓疾病或其复发(就维持治疗而言)或其至少一种临床或亚临床症状的发生；或(3)缓解疾病，即导致所述状态、病症或疾病或其至少一种临床或亚临床症状消退。
在一个实施方案中，本发明提供了治疗间歇性跛行的方法。
“治疗有效量”意指对对象给药以治疗状态、病症或疾病时足以进行这类治疗的化合物的量。“治疗有效量”根据化合物、疾病及其严重程度以及所治疗对象的年龄、体重、身体情况和反应性的不同而异。
有需要的对象为个体，例如可以得益于给予本发明化合物的人或其它哺乳动物。
对所治疗对象的益处是统计学上显著的或至少对患者或临床医师而言是可感知的。
应该理解治疗所需的本发明化合物的量不仅随所选择的特定化合物而异，而且取决于给药途径、需要治疗的疾病的性质以及患者的年龄和病情，并且最终由参与的临床医师或兽医决定。不过，一般而言，合适的剂量为约0.001至约50mg/kg体重/天、优选约0.001至约5mg/kg体重/天、更优选约0.001至约理想的0.5mg/kg体重/天或最理想的是约0.001至约0.1mg/kg体重/天。在另外的实施方案中，该范围可以为约0.1至约750mg/kg体重/天、0.5至60mg/kg/天和1至20mg/kg/天。
所需剂量可以便利地作为单剂量或在适当间隔作为分次剂量呈递，例如每天2次、3次、4次或更多次的剂量。如果以透皮或以延长释放剂型给予化合物，则化合物可以每天给药1次或少于每天1次。
化合物便利地以单位剂型给予，例如含有0.1至50mg、便利地0.1至5mg或最为便利地0.1至5mg活性成分/单位剂型。在另一个实施方案中，化合物可以便利地以单位剂型给予，例如含有10至1500mg、优选20至1000mg或更优选50至700mg活性成分/单位剂型。
理想的是，所给予的活性成分应该达到活性化合物的峰值血浆浓度，为约0.01至约5μM、约0.01至约1μM、约1至约75μM、约2至50μM或约3至约30μM。这可以例如通过静脉内注射0.1至5％的任选在盐水中的活性成分溶液或口服给予含有约0.1至约5mg或约1至约500mg活性成分的大丸剂来实现。可以通过连续输注以便提供约0.0001至约1.0mg/kg/小时或约0.0001至约0.5mg/kg/小时或通过含有约0.001至约0.1mg/kg活性成分的间歇式输注液来维持理想的血药浓度。在另一个实施方案中，可以通过连续输注以便提供约0.01至约5.0mg/kg/小时或通过含有约0.4至约15mg/kg活性成分的间歇式输注液来维持理想的血药浓度。尽管对于治疗应用可以将本发明的化合物作为原料药给予，但是优选以药物制剂呈递活性成分。本发明由此进一步提供了药物制剂，它包含式(I)-(III)的化合物或其类似物与一种或多种药学上可接受的载体并且任选包含其它治疗和/或预防成分。载体必需是的“可接受的”的含义是与制剂中的其它成分相容并且对其接受者而言无害。
药物制剂包括那些适合于口服、直肠、鼻部、局部(包括口含和舌下)、透皮、阴道或胃肠外(包括肌内、皮下和静脉内)给药或适合于通过吸入或吹入的形式。如果合适，制剂可以方便地以离散的剂量单位呈递，并且可以通过制药领域熟知的任意方法制备。所有方法均包括将活性化合物与液体载体或细碎的固体载体或它们两者混合的步骤，然后如果必要，使产物成形为所需制剂。
适合于口服给药的药物制剂可以便利地制成离散单位，如胶囊、扁囊剂或片剂(各自含有预定量的活性成分)；粉末或颗粒；或溶液、混悬液或乳剂。活性成分还可以制成大丸剂、药糖剂或糊剂。用于口服给药的片剂和胶囊可以含有常用的赋形剂，如粘合剂、填充剂、润滑剂、崩解剂或湿润剂。片剂可以使用本领域熟知的方法包衣。口服液体制剂可以为例如水或油混悬液、溶液、乳剂、糖浆剂或酏剂的形式，或可以制成在使用前用水或其它合适的媒介物复原的干品。这类液体制剂可以含有常用的添加剂，如悬浮剂、乳化剂、非水媒介物(可以包括可食用油)或防腐剂。
本发明的化合物还可以配制用于胃肠外给药(例如通过注射，例如快速浓注或连续输注)，并且可以以单位剂量形式呈递在安瓿、预装注射器、小体积输注液中或在含有添加的防腐剂的多剂量容器中。组合物可以采取这类形式如油或水媒介物中的混悬液、溶液或乳剂，并且可以含有配制试剂如悬浮剂、稳定剂和/或分散剂。或者，活性成分可以为通过无菌分离无菌固体或通过从溶液中冻干的粉末形式，以便在使用前用适合的媒介物、例如灭菌无热原的水复原。
对表皮局部给药而言，可以将本发明的化合物配制成软膏剂、霜剂或洗剂或透皮贴剂。这类透皮贴剂可以含有渗透促进剂，如里哪醇、香芹酚、麝香草酚、柠檬醛、薄荷醇或t-茴香脑。例如，软膏剂和霜剂可以用水性或油性基质、添加合适的增稠剂和/或胶凝剂配制。洗剂可以用水性或油性基质配制并且一般还含有一种或多种乳化剂、稳定剂、分散剂、悬浮剂、增稠剂或着色剂。
适合于在口内局部给药的制剂包括在矫味基质、通常为蔗糖和阿拉伯胶或西黄蓍胶中含有活性成分的锭剂；在惰性基质如明胶和甘油或蔗糖和阿拉伯胶中含有活性成分的软锭剂；和在适合的液体载体中含有活性成分的漱口剂。
最优选将载体为固体的适合于直肠给药的药物制剂制成单位剂量栓剂。适合的载体包括可可脂和其它常用于本领域中的材料，并且栓剂可以便利地通过将活性化合物与软化或熔化的载体混合、随后冷却并在模具中成形而制成。
适合于阴道给药的制剂可以制成阴道栓剂、棉塞、霜剂、凝胶、糊剂、泡沫或喷雾剂，除含有活性成分外还含有本领域公知适合的这类载体。
就鼻内给药而言，本发明的化合物可以作为液体喷雾剂或可分散粉末或滴剂形式使用。滴剂可以用水性或非水性基质配制，还包含一种或多种分散剂、增溶剂或悬浮剂。液体喷雾剂便利地从加压药包中递送。
对于吸入给药，本发明化合物便利地从吹入器、雾化器或加压药包或递送喷雾剂的其它便利装置中递送。加压药包可以包括合适的抛射剂，如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳或其它合适的气体。就加压气溶胶而言，剂量单位可以通过安装递送计量用量的阀门来确定。
或者，对于吸入或吹入给药，本发明的化合物可以采取干粉组合物形式，例如化合物与合适的粉末基质如乳糖或淀粉的粉末混合物。粉末组合物可以制成单位剂型，例如胶囊或药筒，或例如明胶或泡罩包，从中借助于吸入器或吹入器可给予粉末。
如果需要，可以改变上述制剂以提供活性成分的持续释放。
在另一个实施方案中，提供了包含本发明化合物与一种或多种磷酸二酯酶抑制剂的组合。已知各种化合物为磷酸二酯酶抑制剂，包括长春西汀、米力农、氨力农、匹莫苯、斯台酰胺、依诺昔酮、匹罗昔酮、维司力农、咯利普兰、RO20-1724、扎普司特、双嘧达莫、己酮可可碱、枸橼酸西地那非(Viagra_)、多沙唑嗪、罂粟碱、哌唑嗪、特拉唑嗪、曲马唑嗪和肼苯哒嗪。PCT公开号WO 94/28902披露了一系列吡唑[4，3-d]嘧啶-7-酮类cGMP磷酸二酯酶抑制剂。PCT公开号WO 96/16644也披露了各种cGMP磷酸二酯酶抑制剂，包括griseolic acid衍生物、2-苯基嘌呤酮衍生物、苯基吡啶酮衍生物、稠合和缩合的嘧啶类、嘧啶并嘧啶衍生物、嘌呤化合物、喹唑啉化合物、苯基嘧啶酮衍生物、咪唑并喹喔啉酮衍生物或其氮杂类似物、苯基吡啶酮衍生物等。
本发明的化合物还可以与西洛他唑(PletalTM)联用。以上所涉及的组合可以便利地制成药物制剂形式使用，并由此药物制剂包含如上所定义的组合以及药学上可接受的载体，由此构成本发明的另一个实施方案。
这类组合的各个成分可以相继或同时、在分别或组合的药物制剂中施用。
当式(I)-(III)的化合物或其类似物与第二种治疗剂联用时，化合物各自的剂量可以与该化合物单独使用时的剂量相同或不同。合适的剂量易于由本领域技术人员确定。
本发明化合物与第二种治疗剂的比例易于由本领域技术人员确定。例如，可以使用约1∶5000至约1∶500、约1∶500至约1∶100、约1∶1至约1∶50、约1∶1至约1∶30、约1∶1至约1∶20、约1∶1至约1∶15，约1∶1至约1∶10、约1∶1至约1∶5或约1∶1至约1∶3的本发明化合物第二种治疗剂。如果加入另一种治疗剂，则可以相应地调整比例。
美国临时申请顺序号US60/598,437(2004年8月日提交)及其与之同时提交的非临时申请均涉及这类化合物和用于治疗血小板增多症的这类化合物，将这些文献完整地引入本文作为参考。
提供下列实施例是为了解释本发明的各种实施方案，但不应视为限制范围。
实施例1本发明化合物#1的制备合成了化合物#1即N-(5，6-二氯-3，4-二氢喹唑啉-2-基)-2-氧代乙酰胺(1)，m/z为271。化合物#1也可以作为其水合物(2)存在。
化合物#1的制备 这种获得所需醛(1)的方法包括使用二环己基碳二亚胺(DCC)-型偶联法使2-氨基-5，6-二氯-3，4-二氢喹唑啉(A)与乙醛酸水合物(B)反应。
(A)与乙醛酸(B)的偶联使用二环己基碳二亚胺(DCC)、二甲氨基吡啶(DMAP)在二氯甲烷(DCM)中进行。产物(A)可以通过本领域中公知的方法获得(例如参见美国专利US6,194,420，2001年2月27日授权)。加入少量二甲基甲酰胺(DMF)以便有助于产物(A)的溶解。当将这些试剂在二氯甲烷溶剂中混合时，形成沉淀。过滤该沉淀并且蒸发溶剂。通过LC-MS分析该粗反应混合物，显示90％原料和7％质量为271的物质。
以150mg规模进行该反应。收集该反应中形成的沉淀(170mg)并且与滤液的内含物一起分析。通过LC-MS分析，沉淀由两种主要成分组成产物(A)(按照峰面积计25％)和质量271的物质(按照峰面积计66％)；然而，对相同物质的NMR分析显示主要成分实际上为二环己脲(DCU)，即偶联试剂DCC的反应形式。通过HPLC尝试纯化该物质，导致除去DCU(如NMR分析测定)，但得到(A)(按照峰面积计18％)和质量271的物质(按照峰面积计73％)的混合物。然而，仅在NMR光谱中观察到1个含有产物的芳族峰。
使用反相色谱法成功地纯化了化合物#1。从水开始到甲醇的梯度洗脱得到三种不同的级分首先是(A)，其次是质量为271的物质，最终为DCU(如NMR和HPLC分析测定)。
如上所示，化合物#1为化合物#3和化合物#4的平衡形式。因此，如上所述，在这些实施例的条件下，认为所述化合物为互变的并且还存在化合物#3和化合物#4(均称作3-羟基阿那格雷)。
实施例2化合物#1的备选合成步骤1方案1原料(RL603) 通过使用2.2当量的氢化钠和1.1当量的2，3-异亚丙基甘油酸乙酯，可以可靠地以中等到良好产率酰化RL603，得到产物B(方案1)。通过在50℃和惰性气氛中、在THF中与氢化钠一起加热30分钟形成RL603的阴离子。然后将该混合物冷却至室温，加入所述酯，将反应搅拌3天。优选快速纯化并且使用产物，以避免形成荧光氧化杂质。通过常规水提取和硅胶色谱(使用40-50％乙酸乙酯/60-50％汽油洗脱)纯化。
方案22，3-异亚丙基甘油酸乙酯的合成
制备2，3-异亚丙基甘油酸乙酯。使用高碘酸钠或高碘酸四丁基铵、随后使用高锰酸钾处理1，25，6-二-异亚丙基-甘露糖醇，得到异亚丙基-甘油酸钾粗品，其可以通过从乙醇中重结晶纯化。优选将其用在DMF中的碘乙烷或硫酸二乙酯处理(后者的应用使得更难以回收产物)，形成乙酯(方案2)。如果需要，然后蒸馏该酯。
步骤2方案3化合物B水解成化合物C 在50∶50水∶THF混合物中用0.1M HCl处理缩醛-酰化的RL603衍生物B，得到RL603和所需二醇(C)的近似等量的混合物(方案3)。将5∶3水∶三氟乙酸应用1小时，极为明显和选择性地得到了所需二醇(C)，除除去溶剂外无需纯化。
步骤3化合物(C)转化成化合物#1和HPLC通过使用在甲醇或丙酮水溶液中的高碘酸钠，将二醇(C)转化成化合物#1。该二醇为难溶性的。反向水解成RL603，注意到形成了看起来是化合物#1的异构体的物质(看起来这种异构-化合物#1来源于由高碘酸盐裂解二醇(C)形成的中间体醛的闭环的可选方式)。
化合物#1的异构化和异构-化合物#1(化合物#5的互变异构体)如下所下 异构-化合物#1实施例36，7-二氯-3-羟基-1，5-二氢-咪唑并[2，1-b]喹唑啉-2-酮(化合物#3)的合成 试剂与条件步骤(i)KMnO4，KOH，水，室温(rt)，4小时，过滤和蒸发，然后DMF，乙基碘，rt，过夜，水处理，总产率56％。
步骤(ii)2-氨基-5，6-二氯-3，4-二氢喹唑啉 NaH，THF，50℃，30分钟，然后rt，48小时，水处理和柱色谱，产率50％。
步骤(iii)CF3CO2H，水，rt，1小时，蒸发，冷冻干燥和与乙醚研磨，产率100％。
步骤(iv)NaIO4，pH5.1缓冲液，丙酮，10℃，20分钟，蒸发，冷冻干燥和柱色谱，产率31％。
纯化在压缩空气压力下和玻璃柱中的正相硅胶上进行产物色谱分离(从异构体化合物#5(6，7-二氯-1-羟基-3，5-二氢-咪唑并[1，2-a]喹唑啉-2-酮中拆分)，使用0-10％甲醇/100-90％乙酸乙酯梯度洗脱。通过TLC(薄层色谱法)分析级分，使用含有几滴浓氨水的THF(四氢呋喃)洗脱。
分析数据NMR1H NMR(300MHz，DMSO-D6)7.47(1H，d，J＝8.7Hz)，6.96(1H，d，J＝8.7Hz)，6.91(1H，d，J＝8.7Hz)，5.01(1H，d，J＝6.7Hz)，4.58+4.47(2H，AB系统，J＝14.6Hz).
13C NMR(75MHz，DMSO-D6)130.00，129.49，125.32，120.41，113.05，81.29，41.89(弱样品，一些信号未拆分)红外光谱IR(净)1643，1563，1471cm-1.
质谱(EI)271(M+，100％)，214(86％)，199(34％).％)，199(35％).
分子量测定Hi-Res.MS计算值270.991532。测定值270.992371熔点M.p170℃(分解)实施例4(6，7-二氯-1-羟基-3，5-二氢-咪唑并[1，2-a]喹唑啉-2-酮)化合物#5的化学合成
试剂与条件步骤(i)KMnO4，KOH，水，室温(rt)，4小时，过滤和蒸发，然后DMF，乙基碘，rt，过夜，水处理，总产率56％。
步骤(ii)RL603，NaH，THF，50℃，30分钟，然后rt，48小时，水处理和柱色谱，产率50％。
步骤(iii)CF3CO2H，水，rt，1小时，蒸发，冷冻干燥和与醚研磨，产率100％。
步骤(iv)NaIO4，pH10.8缓冲液，丙酮，10℃，20分钟，蒸发，冷冻干燥和柱色谱，产率57％。
在压缩空气压力下和玻璃柱中的正相硅胶上进行色谱，使用0-20％甲醇/100-80％乙酸乙酯的以2％递增的梯度洗脱。首先洗脱下化合物#3(6，7-二氯-3-羟基-1，5-二氢-咪唑并[2，1-b]喹唑啉-2-酮)，随后是化合物#5。通过TLC(薄层色谱法)分析级分，使用含有几滴浓氨水的THF(四氢呋喃)洗脱。注意到在该溶剂系统中，化合物#5洗脱得比化合物#3快，即与从柱色谱上洗脱顺序颠倒。
分析数据NMR1H NMR(300MHz，DMSO-D6)9.40(1H，s)，7.59(1H，d，J＝8.8Hz)，7.15(1H，d，J＝9.2Hz)，6.99(1H，d，J＝8.8Hz)，5.38(1H，d，J＝9.2Hz)，4.62+4.56(2H，AB系统，J＝16.8Hz).
13C NMR(75MHz，DMSO-D6)182.90，162.97，134.02，129.97，129.26，125.21，118.89，113.05，79.87，41.46.
红外光谱IR(净)1653，1472cm-1质谱MS(EI)271(M+，100％)，214(87％)，199(35％).
分子量测定Hi-Res.MS计算值270.991532。测定值270.991783熔点M.p190℃(分解)实施例5本发明化合物对磷酸二酯酶作用的评价研究了对一系列磷酸二酯酶(I-VI)的活性特性。用于评价生物活性的方法均为本领域所熟知。例如参见Weishaar等；Biochem.Pharmacol.，35787-800。
在两种单独的情况中，对人PDEIII筛选了化合物#1，发现其IC50为0.69至1.1nM(平均值0.9nM)。
测定了对PDEVI的IC50值。发现它为360nM(参见下表)。
权利要求
1.用于治疗外周动脉疾病的方法，包括对有需要的对象给予治疗有效量的下式化合物、其平衡形式、该化合物或其平衡形式的药学上可接受的盐的步骤 其中R1为H、C1-6烷基、C2-6链烯基、C2-6炔基、C1-6烷氧基或C6-10芳基；R2为 或 R3为OH、卤素、SH、O-C1-6烷基或羟基模拟基团；且X和Y独立地为H或卤素。
2.权利要求1的方法，其中的化合物具有下式
3.权利要求1的方法，其中R2为
4.权利要求1的方法，其中R1为H或C1-6烷基。
5.权利要求1的方法，其中R1为H。
6.权利要求1的方法，其中X为H或卤素。
7.权利要求1的方法，其中Y为H或Cl。
8.权利要求1的方法，其中X为Cl。
9.权利要求1的方法，其中Y为Cl。
10.权利要求1的方法，其中的化合物为
11.用于抑制磷酸二酯酶的方法，包括对有需要的对象给予治疗有效量的下式化合物、其平衡形式、该化合物或其平衡形式的药学上可接受的盐的步骤 其中R1为H、C1-6烷基、C2-6链烯基、C2-6炔基、C1-6烷氧基或C6-10芳基；R2为 或 R3为OH、卤素、SH、O-C1-6烷基或羟基模拟基团；且X和Y独立为H或卤素。
12.权利要求11的方法，其中的化合物具有下式
13.权利要求11的方法，其中R2为
14.权利要求11的方法，其中R1为H或C1-6烷基。
15.权利要求11的方法，其中R1为H。
16.权利要求11的方法，其中X为H或卤素。
17.权利要求11的方法，其中Y为H或Cl。
18.权利要求11的方法，其中X为Cl。
19.权利要求11的方法，其中Y为Cl。
20.权利要求11的方法，其中的化合物为
全文摘要
本发明提供了用于治疗宿主外周动脉疾病的方法，包括给予治疗有效量的具有式(I)－(III)的化合物或其类似物。
文档编号A61K31/505GK101014344SQ200580029489
公开日2007年8月8日 申请日期2005年8月4日 优先权日2004年8月4日
发明者R·富兰克林 申请人:夏尔控股公司
技术领域：
本发明涉及可用于抑制磷酸二酯酶的化合物。更具体而言，本发明还提供了可用于治疗或预防外周动脉疾病的化合物。
背景技术：
外周动脉疾病的特征在于因脂肪沉积、尤其是在腿部血管中的脂肪沉积导致的动脉硬化或动脉粥样硬化。该病症影响了10％以上的成年人群，主要是超过55岁的人。间歇性跛行是外周动脉疾病的一种症状，其特征在于在运动过程中腿部或臀部疼痛。间歇性跛行仍然代表了很大程度上未得到满足的医疗需求，对这种需求而言，除使用球囊血管成形术的外科干预外，其他的主要治疗手段似乎仅为己酮可可碱和烟酸肌醇酯—既古老而又非特异性的药物。动脉粥样硬化是“动脉硬化”的另一名称并且导致外周动脉疾病。它是一种胆固醇沉积物在动脉壁上形成的疾病过程。这些脂肪沉积物限制血流并且减少对各种身体器官及组织的氧和营养物的递送。当动脉粥样硬化发生在腿部动脉中时，它可导致间歇性跛行。
磷酸二酯酶(PDE)是一类涉及第二信使核苷酸环腺苷酸(cAMP)和环鸟苷酸(cGMP)代谢的胞内酶(例如参见Doherty，1997，“勃起机能障碍的口服、透皮和经尿道疗法”-男性不育和性功能障碍，Hellstrom编辑，第34章，Springer-Verlag纽约)。在先的文献中已经描述了大量磷酸二酯酶抑制剂的各种治疗应用，包括治疗阻塞性肺病、变态反应、高血压、心绞痛、充血性心力衰竭和抑郁症(例如参见Goodman和Gilman的“治疗药物的药理学基础”，1996，第9版，第34章，McGraw-Hill纽约)。PDEIII抑制与周围血管舒张和抗-聚集(anti-aggregatory)以及由此的抗血栓形成作用相关。
本发明的用途所涵盖的化合物为3-羟基阿那格雷。其为阿那格雷的代谢物(例如参见美国专利申请顺序号US10/762,566，以US20040209907公布)。
文献中已经研究了各种阿那格雷的代谢物Erusalimsky等(2002)“阿那格雷的血小板减少活性是其主要代谢物2-氨基-5，6-二氯-3，4-二氢喹唑啉(RL603)介导的吗？”-Exp Hematol.30625-7；Lane等(2001)“阿那格雷代谢物通过抑制巨核细胞成熟但不诱导血小板聚集而诱导小鼠血小板减少”-Exp Hematol.291417-241；和Gaver等(1981)“血小板聚集抑制剂阿那格雷的性能”-Clin Pharmacol Ther29381-6。
本发明的目的之一是提供可选的治疗外周动脉疾病、包括间歇性跛行的方法并且提供新的磷酸二酯酶抑制剂。
发明概述本发明的一个实施方案提供了治疗外周动脉疾病的方法，包括对需要这类治疗的对象给予治疗有效量的式(I)化合物、其平衡形式、其药学上可接受的盐或其平衡形式的药学上可接受的盐 其中X、Y、R1和R2如下文所定义。
在一个实施方案中，本发明提供了下式化合物、其平衡形式、其药学上可接受的盐或其平衡形式的药学上可接受的盐，
其中R1为H、C1-6烷基、C2-6链烯基、C2-6炔基、C1-6烷氧基或C6-10芳基；R2为 或 R3为OH、卤素、SH、O-C1-6烷基或羟基模拟基团；且X和Y独立地为H或卤素。
优选上述化合物在苄基环的5和6位上包括X和Y取代基。
在其它实施方案中，提供了用于抑制磷酸二酯酶、治疗或预防外周动脉疾病、抑制血小板聚集和治疗或预防充血性心力衰竭的方法，包括对有需要的对象给予治疗有效量的式(I)-(III)的化合物。
在另一个实施方案中，提供了药物制剂，包含本发明的化合物与药学上可接受的载体或赋形剂。
在另一个实施方案中，提供了药物制剂，包含至少一种式(I)-(III)的化合物与至少一种另外的治疗剂。
在另一个实施方案中，提供了式(I)-(III)的化合物在制备用于治疗外周动脉疾病的药物中的用途。
发明详述除非另有定义，本文所用的所有技术和科学术语具有与本发明所属领域技术人员通常理解相同的含义。将本文提及的所有公开文献、专利申请、专利和其它参考文献完整地引入作为参考。如果存在矛盾，则以本说明书、包括定义为准。此外，材料、方法和实施例仅为说明性的，而非起限定作用。
在本发明的一个实施方案中，本发明的化合物包括其中存在独立或组合形式的如下实施方案的那些化合物。
在一个实施方案中，本发明提供了下式化合物、其平衡形式、其药学上可接受的盐或其平衡形式的药学上可接受的盐 其中R1为H、C1-6烷基、C2-6链烯基、C2-6炔基、C1-6烷氧基或C6-10芳基；R2为 或 R3为OH、卤素、SH、O-C1-6烷基或羟基模拟基团；且X和Y独立地为H或卤素。
优选的实施方案在苄基环的5和6位上包括X和Y取代基。
在一个实施方案中，R1为H或C1-6烷基。在另一个实施方案中，R1为H或CH3。在一个优选的实施方案中，R1为H。
在一个实施方案中，R3为OH或O-C1-6烷基。在另一个实施方案中，R3为OH或OCH3。在一个优选的实施方案中，R3为OH。
在一个实施方案中，X为H或卤素。在一个优选的实施方案中，X为H。在另一个实施方案中，X为CL在另一个实施方案中，Y为H或Cl。在一个优选的实施方案中，Y为H。在另一个优选的实施方案中，Y为Cl。
本发明的化合物包括 化合物#1其为N-(5，6-二氯-3，4-二氢喹唑啉-2-基)-2-氧代乙酰胺； 化合物#2其为N-(5，6-二氯-3，4-二氢喹唑啉-2-基)-2-氧代乙酰胺水合物； 化合物#3其为6，7-二氯-3-羟基-1，5-二氢-咪唑并[2，1-b]喹唑啉-2-酮；
化合物#4其为6，7-二氯-3-羟基-1，5-二氢-咪唑并[2，1-b]喹唑啉-2-酮；和 化合物#5其为(6，7-二氯-1-羟基-3，5-二氢-咪唑并[1，2-a]喹唑啉-2-酮)。
根据本发明，对患者给予基本上纯形式的化合物。
根据本发明，化合物为基本上纯的形式。
本申请中使用的术语“基本上纯的形式”意指如通过标准分析方法测定的化合物至少为80％纯、优选至少为85％纯、更优选至少为90％纯、更优选至少为95％纯且最优选至少为99％纯。
不受任何理论约束(对机理的理解对实施本发明而言并非必需并且本发明不限于任何特定的机理)，本发明人认为本发明的化合物为平衡形式。本发明化合物的平衡形式如下所示 本文所用的术语“平衡形式”包括式(I)-(III)化合物的互变异构体。
本发明化合物的平衡形式还可以表示如下
所有这类平衡形式均包括在本发明范围内。
本领域技术人员理解式(I)-(III)的化合物可以作为互变异构体或旋光异构体存在。这类化合物的所有平衡形式和互变异构体均包括在本发明范围内。单个的旋光异构体或对映体可以通过本领域已知的方法获得，如手性HPLC、酶促拆分和手性助剂，或可通过立体选择性合成。
本文所用的“羟基模拟”描述的是与羟基(-OH)相关的化学官能基团。它们是可以作为氢键供体和受体的官能基团。羟基模拟基团的非限制性实例包括-NH2和-SH。
还提供了本发明化合物的药学上可接受的盐。所谓术语式(I)-(III)化合物的“药学上可接受的盐”意指那些衍生自药学上可接受的无机和有机酸和碱的化合物。适合的酸的实例包括盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、高氯酸、富马酸、马来酸、磷酸、乙醇酸、乳酸、水杨酸、琥珀酸、对甲苯磺酸、酒石酸、乙酸、柠檬酸、甲磺酸、甲酸、苯甲酸、丙二酸、萘-2-磺酸和苯磺酸。其它酸如草酸，尽管自身并非是药学上可接受的，但是可以用作获得本发明化合物及其药学上可接受的酸加成盐的中间体。
衍生自适合的碱的盐包括碱金属(例如钠)、碱土金属(例如镁)、铵和NR4+(其中R为C1-4烷基)盐。
本申请中使用的术语“烷基”表示未被取代或(被卤素、硝基、CONH2、COOH、O-C1-6烷基、O-C2-6链烯基、O-C2-6炔基、羟基、氨基或COOQ，其中Q为C1-6烷基、C2-6链烯基、C2-6炔基)取代的直链、支链或环状烃部分(例如异丙基、乙基、氟己基或环丙基)。术语烷基还意指包括其中一个或多个氢原子被卤素替代的烷基，更优选地，所述卤素是氟(例如-CF3或-CH2CF3)。
本文所用的术语“链烯基”和“炔基”表示含有至少一个不饱和基团的(如上所述)烷基(例如烯丙基)。
当存在硫原子时，硫原子可以处于不同的氧化水平S、SO或SO2。所有这类氧化水平均包括在本发明范围内。
本文的卤素意指氟、氯、溴和碘。
本发明还提供了治疗对象(例如哺乳动物、特别是人)的方法，包括对需要这类治疗的对象给予治疗有效量的各自如本文所述的式(I)-(III)化合物、其制剂或其单位剂型。式(I)-(III)的化合物用于抑制细胞磷酸二酯酶，特别是磷酸二酯酶III和IV。更具体而言，式(I)-(III)的化合物用于抑制细胞磷酸二酯酶III。式(I)-(III)的化合物的主要用途在于减轻这类对象的间歇性跛行，一般表现为步行距离增加。本发明的化合物还可以用于治疗其它与血管舒张相关的疾病状态，包括例如中风和抗血小板作用。这类活性成分还可以增加需要这类治疗的对象的血浆高密度脂蛋白胆固醇和载脂蛋白，并且用于治疗性功能障碍。
状态、病症或疾病的“治疗”包括(1)预防或延缓发生在哺乳动物中的状态、病症或疾病的临床症状的出现，所述哺乳动物可能患有或易患所述状态、病症或疾病但尚未经历或显示该状态、病症或疾病的临床或亚临床症状；(2)抑制所述状态、病症或疾病，即阻止、减轻或延缓疾病或其复发(就维持治疗而言)或其至少一种临床或亚临床症状的发生；或(3)缓解疾病，即导致所述状态、病症或疾病或其至少一种临床或亚临床症状消退。
在一个实施方案中，本发明提供了治疗间歇性跛行的方法。
“治疗有效量”意指对对象给药以治疗状态、病症或疾病时足以进行这类治疗的化合物的量。“治疗有效量”根据化合物、疾病及其严重程度以及所治疗对象的年龄、体重、身体情况和反应性的不同而异。
有需要的对象为个体，例如可以得益于给予本发明化合物的人或其它哺乳动物。
对所治疗对象的益处是统计学上显著的或至少对患者或临床医师而言是可感知的。
应该理解治疗所需的本发明化合物的量不仅随所选择的特定化合物而异，而且取决于给药途径、需要治疗的疾病的性质以及患者的年龄和病情，并且最终由参与的临床医师或兽医决定。不过，一般而言，合适的剂量为约0.001至约50mg/kg体重/天、优选约0.001至约5mg/kg体重/天、更优选约0.001至约理想的0.5mg/kg体重/天或最理想的是约0.001至约0.1mg/kg体重/天。在另外的实施方案中，该范围可以为约0.1至约750mg/kg体重/天、0.5至60mg/kg/天和1至20mg/kg/天。
所需剂量可以便利地作为单剂量或在适当间隔作为分次剂量呈递，例如每天2次、3次、4次或更多次的剂量。如果以透皮或以延长释放剂型给予化合物，则化合物可以每天给药1次或少于每天1次。
化合物便利地以单位剂型给予，例如含有0.1至50mg、便利地0.1至5mg或最为便利地0.1至5mg活性成分/单位剂型。在另一个实施方案中，化合物可以便利地以单位剂型给予，例如含有10至1500mg、优选20至1000mg或更优选50至700mg活性成分/单位剂型。
理想的是，所给予的活性成分应该达到活性化合物的峰值血浆浓度，为约0.01至约5μM、约0.01至约1μM、约1至约75μM、约2至50μM或约3至约30μM。这可以例如通过静脉内注射0.1至5％的任选在盐水中的活性成分溶液或口服给予含有约0.1至约5mg或约1至约500mg活性成分的大丸剂来实现。可以通过连续输注以便提供约0.0001至约1.0mg/kg/小时或约0.0001至约0.5mg/kg/小时或通过含有约0.001至约0.1mg/kg活性成分的间歇式输注液来维持理想的血药浓度。在另一个实施方案中，可以通过连续输注以便提供约0.01至约5.0mg/kg/小时或通过含有约0.4至约15mg/kg活性成分的间歇式输注液来维持理想的血药浓度。尽管对于治疗应用可以将本发明的化合物作为原料药给予，但是优选以药物制剂呈递活性成分。本发明由此进一步提供了药物制剂，它包含式(I)-(III)的化合物或其类似物与一种或多种药学上可接受的载体并且任选包含其它治疗和/或预防成分。载体必需是的“可接受的”的含义是与制剂中的其它成分相容并且对其接受者而言无害。
药物制剂包括那些适合于口服、直肠、鼻部、局部(包括口含和舌下)、透皮、阴道或胃肠外(包括肌内、皮下和静脉内)给药或适合于通过吸入或吹入的形式。如果合适，制剂可以方便地以离散的剂量单位呈递，并且可以通过制药领域熟知的任意方法制备。所有方法均包括将活性化合物与液体载体或细碎的固体载体或它们两者混合的步骤，然后如果必要，使产物成形为所需制剂。
适合于口服给药的药物制剂可以便利地制成离散单位，如胶囊、扁囊剂或片剂(各自含有预定量的活性成分)；粉末或颗粒；或溶液、混悬液或乳剂。活性成分还可以制成大丸剂、药糖剂或糊剂。用于口服给药的片剂和胶囊可以含有常用的赋形剂，如粘合剂、填充剂、润滑剂、崩解剂或湿润剂。片剂可以使用本领域熟知的方法包衣。口服液体制剂可以为例如水或油混悬液、溶液、乳剂、糖浆剂或酏剂的形式，或可以制成在使用前用水或其它合适的媒介物复原的干品。这类液体制剂可以含有常用的添加剂，如悬浮剂、乳化剂、非水媒介物(可以包括可食用油)或防腐剂。
本发明的化合物还可以配制用于胃肠外给药(例如通过注射，例如快速浓注或连续输注)，并且可以以单位剂量形式呈递在安瓿、预装注射器、小体积输注液中或在含有添加的防腐剂的多剂量容器中。组合物可以采取这类形式如油或水媒介物中的混悬液、溶液或乳剂，并且可以含有配制试剂如悬浮剂、稳定剂和/或分散剂。或者，活性成分可以为通过无菌分离无菌固体或通过从溶液中冻干的粉末形式，以便在使用前用适合的媒介物、例如灭菌无热原的水复原。
对表皮局部给药而言，可以将本发明的化合物配制成软膏剂、霜剂或洗剂或透皮贴剂。这类透皮贴剂可以含有渗透促进剂，如里哪醇、香芹酚、麝香草酚、柠檬醛、薄荷醇或t-茴香脑。例如，软膏剂和霜剂可以用水性或油性基质、添加合适的增稠剂和/或胶凝剂配制。洗剂可以用水性或油性基质配制并且一般还含有一种或多种乳化剂、稳定剂、分散剂、悬浮剂、增稠剂或着色剂。
适合于在口内局部给药的制剂包括在矫味基质、通常为蔗糖和阿拉伯胶或西黄蓍胶中含有活性成分的锭剂；在惰性基质如明胶和甘油或蔗糖和阿拉伯胶中含有活性成分的软锭剂；和在适合的液体载体中含有活性成分的漱口剂。
最优选将载体为固体的适合于直肠给药的药物制剂制成单位剂量栓剂。适合的载体包括可可脂和其它常用于本领域中的材料，并且栓剂可以便利地通过将活性化合物与软化或熔化的载体混合、随后冷却并在模具中成形而制成。
适合于阴道给药的制剂可以制成阴道栓剂、棉塞、霜剂、凝胶、糊剂、泡沫或喷雾剂，除含有活性成分外还含有本领域公知适合的这类载体。
就鼻内给药而言，本发明的化合物可以作为液体喷雾剂或可分散粉末或滴剂形式使用。滴剂可以用水性或非水性基质配制，还包含一种或多种分散剂、增溶剂或悬浮剂。液体喷雾剂便利地从加压药包中递送。
对于吸入给药，本发明化合物便利地从吹入器、雾化器或加压药包或递送喷雾剂的其它便利装置中递送。加压药包可以包括合适的抛射剂，如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳或其它合适的气体。就加压气溶胶而言，剂量单位可以通过安装递送计量用量的阀门来确定。
或者，对于吸入或吹入给药，本发明的化合物可以采取干粉组合物形式，例如化合物与合适的粉末基质如乳糖或淀粉的粉末混合物。粉末组合物可以制成单位剂型，例如胶囊或药筒，或例如明胶或泡罩包，从中借助于吸入器或吹入器可给予粉末。
如果需要，可以改变上述制剂以提供活性成分的持续释放。
在另一个实施方案中，提供了包含本发明化合物与一种或多种磷酸二酯酶抑制剂的组合。已知各种化合物为磷酸二酯酶抑制剂，包括长春西汀、米力农、氨力农、匹莫苯、斯台酰胺、依诺昔酮、匹罗昔酮、维司力农、咯利普兰、RO20-1724、扎普司特、双嘧达莫、己酮可可碱、枸橼酸西地那非(Viagra_)、多沙唑嗪、罂粟碱、哌唑嗪、特拉唑嗪、曲马唑嗪和肼苯哒嗪。PCT公开号WO 94/28902披露了一系列吡唑[4，3-d]嘧啶-7-酮类cGMP磷酸二酯酶抑制剂。PCT公开号WO 96/16644也披露了各种cGMP磷酸二酯酶抑制剂，包括griseolic acid衍生物、2-苯基嘌呤酮衍生物、苯基吡啶酮衍生物、稠合和缩合的嘧啶类、嘧啶并嘧啶衍生物、嘌呤化合物、喹唑啉化合物、苯基嘧啶酮衍生物、咪唑并喹喔啉酮衍生物或其氮杂类似物、苯基吡啶酮衍生物等。
本发明的化合物还可以与西洛他唑(PletalTM)联用。以上所涉及的组合可以便利地制成药物制剂形式使用，并由此药物制剂包含如上所定义的组合以及药学上可接受的载体，由此构成本发明的另一个实施方案。
这类组合的各个成分可以相继或同时、在分别或组合的药物制剂中施用。
当式(I)-(III)的化合物或其类似物与第二种治疗剂联用时，化合物各自的剂量可以与该化合物单独使用时的剂量相同或不同。合适的剂量易于由本领域技术人员确定。
本发明化合物与第二种治疗剂的比例易于由本领域技术人员确定。例如，可以使用约1∶5000至约1∶500、约1∶500至约1∶100、约1∶1至约1∶50、约1∶1至约1∶30、约1∶1至约1∶20、约1∶1至约1∶15，约1∶1至约1∶10、约1∶1至约1∶5或约1∶1至约1∶3的本发明化合物第二种治疗剂。如果加入另一种治疗剂，则可以相应地调整比例。
美国临时申请顺序号US60/598,437(2004年8月日提交)及其与之同时提交的非临时申请均涉及这类化合物和用于治疗血小板增多症的这类化合物，将这些文献完整地引入本文作为参考。
提供下列实施例是为了解释本发明的各种实施方案，但不应视为限制范围。
实施例1本发明化合物#1的制备合成了化合物#1即N-(5，6-二氯-3，4-二氢喹唑啉-2-基)-2-氧代乙酰胺(1)，m/z为271。化合物#1也可以作为其水合物(2)存在。
化合物#1的制备 这种获得所需醛(1)的方法包括使用二环己基碳二亚胺(DCC)-型偶联法使2-氨基-5，6-二氯-3，4-二氢喹唑啉(A)与乙醛酸水合物(B)反应。
(A)与乙醛酸(B)的偶联使用二环己基碳二亚胺(DCC)、二甲氨基吡啶(DMAP)在二氯甲烷(DCM)中进行。产物(A)可以通过本领域中公知的方法获得(例如参见美国专利US6,194,420，2001年2月27日授权)。加入少量二甲基甲酰胺(DMF)以便有助于产物(A)的溶解。当将这些试剂在二氯甲烷溶剂中混合时，形成沉淀。过滤该沉淀并且蒸发溶剂。通过LC-MS分析该粗反应混合物，显示90％原料和7％质量为271的物质。
以150mg规模进行该反应。收集该反应中形成的沉淀(170mg)并且与滤液的内含物一起分析。通过LC-MS分析，沉淀由两种主要成分组成产物(A)(按照峰面积计25％)和质量271的物质(按照峰面积计66％)；然而，对相同物质的NMR分析显示主要成分实际上为二环己脲(DCU)，即偶联试剂DCC的反应形式。通过HPLC尝试纯化该物质，导致除去DCU(如NMR分析测定)，但得到(A)(按照峰面积计18％)和质量271的物质(按照峰面积计73％)的混合物。然而，仅在NMR光谱中观察到1个含有产物的芳族峰。
使用反相色谱法成功地纯化了化合物#1。从水开始到甲醇的梯度洗脱得到三种不同的级分首先是(A)，其次是质量为271的物质，最终为DCU(如NMR和HPLC分析测定)。
如上所示，化合物#1为化合物#3和化合物#4的平衡形式。因此，如上所述，在这些实施例的条件下，认为所述化合物为互变的并且还存在化合物#3和化合物#4(均称作3-羟基阿那格雷)。
实施例2化合物#1的备选合成步骤1方案1原料(RL603) 通过使用2.2当量的氢化钠和1.1当量的2，3-异亚丙基甘油酸乙酯，可以可靠地以中等到良好产率酰化RL603，得到产物B(方案1)。通过在50℃和惰性气氛中、在THF中与氢化钠一起加热30分钟形成RL603的阴离子。然后将该混合物冷却至室温，加入所述酯，将反应搅拌3天。优选快速纯化并且使用产物，以避免形成荧光氧化杂质。通过常规水提取和硅胶色谱(使用40-50％乙酸乙酯/60-50％汽油洗脱)纯化。
方案22，3-异亚丙基甘油酸乙酯的合成
制备2，3-异亚丙基甘油酸乙酯。使用高碘酸钠或高碘酸四丁基铵、随后使用高锰酸钾处理1，25，6-二-异亚丙基-甘露糖醇，得到异亚丙基-甘油酸钾粗品，其可以通过从乙醇中重结晶纯化。优选将其用在DMF中的碘乙烷或硫酸二乙酯处理(后者的应用使得更难以回收产物)，形成乙酯(方案2)。如果需要，然后蒸馏该酯。
步骤2方案3化合物B水解成化合物C 在50∶50水∶THF混合物中用0.1M HCl处理缩醛-酰化的RL603衍生物B，得到RL603和所需二醇(C)的近似等量的混合物(方案3)。将5∶3水∶三氟乙酸应用1小时，极为明显和选择性地得到了所需二醇(C)，除除去溶剂外无需纯化。
步骤3化合物(C)转化成化合物#1和HPLC通过使用在甲醇或丙酮水溶液中的高碘酸钠，将二醇(C)转化成化合物#1。该二醇为难溶性的。反向水解成RL603，注意到形成了看起来是化合物#1的异构体的物质(看起来这种异构-化合物#1来源于由高碘酸盐裂解二醇(C)形成的中间体醛的闭环的可选方式)。
化合物#1的异构化和异构-化合物#1(化合物#5的互变异构体)如下所下 异构-化合物#1实施例36，7-二氯-3-羟基-1，5-二氢-咪唑并[2，1-b]喹唑啉-2-酮(化合物#3)的合成 试剂与条件步骤(i)KMnO4，KOH，水，室温(rt)，4小时，过滤和蒸发，然后DMF，乙基碘，rt，过夜，水处理，总产率56％。
步骤(ii)2-氨基-5，6-二氯-3，4-二氢喹唑啉 NaH，THF，50℃，30分钟，然后rt，48小时，水处理和柱色谱，产率50％。
步骤(iii)CF3CO2H，水，rt，1小时，蒸发，冷冻干燥和与乙醚研磨，产率100％。
步骤(iv)NaIO4，pH5.1缓冲液，丙酮，10℃，20分钟，蒸发，冷冻干燥和柱色谱，产率31％。
纯化在压缩空气压力下和玻璃柱中的正相硅胶上进行产物色谱分离(从异构体化合物#5(6，7-二氯-1-羟基-3，5-二氢-咪唑并[1，2-a]喹唑啉-2-酮中拆分)，使用0-10％甲醇/100-90％乙酸乙酯梯度洗脱。通过TLC(薄层色谱法)分析级分，使用含有几滴浓氨水的THF(四氢呋喃)洗脱。
分析数据NMR1H NMR(300MHz，DMSO-D6)7.47(1H，d，J＝8.7Hz)，6.96(1H，d，J＝8.7Hz)，6.91(1H，d，J＝8.7Hz)，5.01(1H，d，J＝6.7Hz)，4.58+4.47(2H，AB系统，J＝14.6Hz).
13C NMR(75MHz，DMSO-D6)130.00，129.49，125.32，120.41，113.05，81.29，41.89(弱样品，一些信号未拆分)红外光谱IR(净)1643，1563，1471cm-1.
质谱(EI)271(M+，100％)，214(86％)，199(34％).％)，199(35％).
分子量测定Hi-Res.MS计算值270.991532。测定值270.992371熔点M.p170℃(分解)实施例4(6，7-二氯-1-羟基-3，5-二氢-咪唑并[1，2-a]喹唑啉-2-酮)化合物#5的化学合成
试剂与条件步骤(i)KMnO4，KOH，水，室温(rt)，4小时，过滤和蒸发，然后DMF，乙基碘，rt，过夜，水处理，总产率56％。
步骤(ii)RL603，NaH，THF，50℃，30分钟，然后rt，48小时，水处理和柱色谱，产率50％。
步骤(iii)CF3CO2H，水，rt，1小时，蒸发，冷冻干燥和与醚研磨，产率100％。
步骤(iv)NaIO4，pH10.8缓冲液，丙酮，10℃，20分钟，蒸发，冷冻干燥和柱色谱，产率57％。
在压缩空气压力下和玻璃柱中的正相硅胶上进行色谱，使用0-20％甲醇/100-80％乙酸乙酯的以2％递增的梯度洗脱。首先洗脱下化合物#3(6，7-二氯-3-羟基-1，5-二氢-咪唑并[2，1-b]喹唑啉-2-酮)，随后是化合物#5。通过TLC(薄层色谱法)分析级分，使用含有几滴浓氨水的THF(四氢呋喃)洗脱。注意到在该溶剂系统中，化合物#5洗脱得比化合物#3快，即与从柱色谱上洗脱顺序颠倒。
分析数据NMR1H NMR(300MHz，DMSO-D6)9.40(1H，s)，7.59(1H，d，J＝8.8Hz)，7.15(1H，d，J＝9.2Hz)，6.99(1H，d，J＝8.8Hz)，5.38(1H，d，J＝9.2Hz)，4.62+4.56(2H，AB系统，J＝16.8Hz).
13C NMR(75MHz，DMSO-D6)182.90，162.97，134.02，129.97，129.26，125.21，118.89，113.05，79.87，41.46.
红外光谱IR(净)1653，1472cm-1质谱MS(EI)271(M+，100％)，214(87％)，199(35％).
分子量测定Hi-Res.MS计算值270.991532。测定值270.991783熔点M.p190℃(分解)实施例5本发明化合物对磷酸二酯酶作用的评价研究了对一系列磷酸二酯酶(I-VI)的活性特性。用于评价生物活性的方法均为本领域所熟知。例如参见Weishaar等；Biochem.Pharmacol.，35787-800。
在两种单独的情况中，对人PDEIII筛选了化合物#1，发现其IC50为0.69至1.1nM(平均值0.9nM)。
测定了对PDEVI的IC50值。发现它为360nM(参见下表)。
权利要求
1.用于治疗外周动脉疾病的方法，包括对有需要的对象给予治疗有效量的下式化合物、其平衡形式、该化合物或其平衡形式的药学上可接受的盐的步骤 其中R1为H、C1-6烷基、C2-6链烯基、C2-6炔基、C1-6烷氧基或C6-10芳基；R2为 或 R3为OH、卤素、SH、O-C1-6烷基或羟基模拟基团；且X和Y独立地为H或卤素。
2.权利要求1的方法，其中的化合物具有下式
3.权利要求1的方法，其中R2为
4.权利要求1的方法，其中R1为H或C1-6烷基。
5.权利要求1的方法，其中R1为H。
6.权利要求1的方法，其中X为H或卤素。
7.权利要求1的方法，其中Y为H或Cl。
8.权利要求1的方法，其中X为Cl。
9.权利要求1的方法，其中Y为Cl。
10.权利要求1的方法，其中的化合物为
11.用于抑制磷酸二酯酶的方法，包括对有需要的对象给予治疗有效量的下式化合物、其平衡形式、该化合物或其平衡形式的药学上可接受的盐的步骤 其中R1为H、C1-6烷基、C2-6链烯基、C2-6炔基、C1-6烷氧基或C6-10芳基；R2为 或 R3为OH、卤素、SH、O-C1-6烷基或羟基模拟基团；且X和Y独立为H或卤素。
12.权利要求11的方法，其中的化合物具有下式
13.权利要求11的方法，其中R2为
14.权利要求11的方法，其中R1为H或C1-6烷基。
15.权利要求11的方法，其中R1为H。
16.权利要求11的方法，其中X为H或卤素。
17.权利要求11的方法，其中Y为H或Cl。
18.权利要求11的方法，其中X为Cl。
19.权利要求11的方法，其中Y为Cl。
20.权利要求11的方法，其中的化合物为
全文摘要
本发明提供了用于治疗宿主外周动脉疾病的方法，包括给予治疗有效量的具有式(I)－(III)的化合物或其类似物。
文档编号A61K31/505GK101014344SQ200580029489
公开日2007年8月8日 申请日期2005年8月4日 优先权日2004年8月4日
发明者R·富兰克林 申请人:夏尔控股公司
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