清肺化痰丸的质量检测方法
专利名称：清肺化痰丸的质量检测方法
技术领域：
本发明涉及《中华人民共和国卫生部药品标准》(中药成方制剂)第十二册中清肺
化痰丸的质量检测方法。
背景技术：
《中华人民共和国卫生部药品标准》(中药成方制剂)第十二册中的药物清肺化痰 丸，具有降气化痰，止咳平喘的作用，主要用于肺热咳嗽，痰多作喘，痰涎壅盛，肺气不畅。。 该复方制剂由中药材黄芩(酒炙)60g、苦杏仁60g、瓜蒌子60g、川贝母30g、胆南星(砂 炒)30g、法半夏(砂炒)60g、陈皮60g、茯苓60g、枳壳(炒)60g、麻黄(炙)30g、桔梗60g、紫 苏子30g、莱菔子(炒)30g、款冬花(炙)30g、甘草30g组成。黄芩为方中主药，为唇形科植 物黄芩Scutellaria baicalensis Georgi的干燥根，具有清热燥湿，泻火解毒之功效；苦杏 仁为蔷凝禾斗植物山杏Pru皿s armeniaca L var. ansu Maxim.、西伯利亚杏Pru皿ssibirica L 、东北杏Pru皿s mandshurica(Maxim.)Koehne或杏Pru皿s armeniaca L 的干燥成 熟种子，具有降气止咳平喘之功效；瓜蒌子为葫芦科植物栝楼Trichosanthes kirilowii Maxim.或双边栝楼Trichosanthes rosthornii Harms的干燥成熟种子，具有润肺化痰之 功效;川贝母为百合科植物川贝母Fritillaria cirrhosa D. Don、暗紫贝母Fritillaria unibracteata Hsiao etK. C. Hsia、甘肃贝母Fritillaria przewalskii Maxim.或梭砂贝 母Fritillaria delavayi Franch.的干燥鳞茎，具有清热润肺，化痰止咳之功效；胆南星为 制天南星的细粉与牛、羊或猪胆汁经加工而成，或为生天南星细粉与牛、羊或猪胆汁经发酵 加工而成(天南星为天南星科植物天南星Arisaema erubescens (Wall. ) Schott、异叶天南 星Arisaema heterophyllum Bl.或东北天南星Arisaema amurense Maxim.的干燥块蓬)， 具有清热化痰之功效；法半夏为半夏的炮制加工品(半夏为天南星科植物半夏Pinellia ternata(Thunb. )Breit.的干燥块茎)，具有燥湿化痰之功效；陈皮为芸香科植物橘Citrus reticulate Blanco及其栽培变种的干燥成熟果皮，具有理气健脾，燥湿化痰之功效。茯苓 为多孔菌科真菌茯苓Poria cocos (Schw. ) Wolf的干燥菌核，具有利水渗湿，健脾宁心之功 效；枳壳为芸香科植物酸橙Citrus aurantium L.及其栽培变种的干燥未成熟果实，具理气 宽中，行滞消胀之功效；麻黄为麻黄科植物草麻黄Ephedrasinica Stapf、中麻黄Ephedra intermedia Schrenk et C. A. Mey.或木贼麻黄Ephedra equisetinaBge.的干燥草质蓬， 具发汗散寒，宣肺平喘之功效；桔梗为桔梗科植物桔梗Platycodongrandiflorum(Jacq.) A. DC.的干燥根，具有宣肺，利咽，祛痰，排脓之功效；白苏子为唇形科植物白苏Perilla frutescens (L. ) Britt.的干燥成熟果实，具有下气，消痰，润肺之功效；莱菔子为十字花科 植物萝卜Rapha皿s sativus L.的干燥成熟种子，具有消食除胀，降气化痰之功效；款冬花 为菊科植物款东Tussilago farfara L.的干燥花蕾，具有润肺下气，止咳化痰之功效。甘 草为豆科植物甘草Glycyrrhiza inflata Bat.、胀果甘草Glycyrrhiza in flata Bat或光 果甘草Glycyrrhiza glabra L.的干燥根及根茎，具有补脾益气，清热解毒，祛痰止咳，调和 诸药之功效。《中华人民共和国卫生部药品标准》第十二册颁布了清肺化痰丸的质量控制标准(WS3-B-2425-97)，但卫生部颁发的现有的清肺化痰丸质量控制方法中，只有显微鉴别和 薄层鉴别，局限性很大，难以准确控制清肺化痰丸的质量。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种清肺化痰丸的质量检测方法，以 提高清肺化痰丸的质量控制标准。 清肺化痰丸的药物由黄芩(酒炙)60g，苦杏仁60g，瓜蒌子60g，川贝母30g，胆南 星(砂炒)30g，法半夏(砂炒)60g，陈皮60g，茯苓60g，枳壳(炒)60g，麻黄(炙)30g，桔 梗60g，紫苏子30g，莱菔子(炒)30g，款冬花(炙)30g，甘草30g组成，并制成水蜜丸或大 蜜丸。 本发明的清肺化痰丸的质量控制方法为 1、取清肺化痰丸，置显微镜下观察不规则分枝状团块无色，遇水合氯醛试液溶 化，菌丝无色或淡棕色，直径4 6um。纤维淡黄色，梭形，壁厚，孔沟细。纤维束周围薄壁细 胞含草酸钙方晶，形成晶纤维。花粉粒球形，直径约至32um，外壁有剌，较尖。
2、陈皮、枳壳的薄层色谱定性鉴别方法取清肺化痰丸水蜜丸10g，研细，加水 10-15ml，搅匀；或取大蜜丸18g，剪碎，加硅藻土 7-9g、水5_7ml，研匀，再加水12_20ml，超声 处理15-30分钟，加乙酸乙酯20-40ml ，搅匀，超声处理20-40分钟，倾出上清液，残渣再加乙 酸乙酯15-20ml，超声处理10-20分钟，倾出上清液，合并上清液，用氨试液洗涤1_3次，每次 10-20ml，再用水洗涤1-3次，每次10-20ml，乙酸乙酯液蒸干，残渣加乙酸乙酯lml使溶解， 作为供试品溶液；另取陈皮对照药材、枳壳对照药材各0. 5g，分别加乙酸乙酯15-25ml，超 声处理15-30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣分别加乙酸乙酯lml使溶解，作为对照药材溶液； 照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液8 12 ii 1、对照 药材溶液各5iU，分别点于同一以含lX (g/ml)氢氧化钠溶液的羧甲基纤维素钠为黏合剂 的硅胶G薄层板上，以正己烷-丙酮-乙酸乙酯(体积配比2-4 : 0.8-1.2 : 2. 5-3. 5)为 展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱 相应的位置上，显相同颜色的荧光主斑点； 3、盐酸麻黄碱的薄层色谱定性鉴别方法取清肺化痰丸水蜜丸10g，研细；或取 大蜜丸18g，剪碎，加硅藻土 5-8g，研匀，加浓氨溶液1. 5-2. 5ml，乙醚40_60ml，加热回流 20-40分钟，滤过，滤液加盐酸乙醇液1 — 20(指lml盐酸加乙醇使成20ml溶液)3-5ml， 摇匀，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，脱脂棉滤过，滤液作为供试品溶液；另取盐酸麻黄碱对 照品，加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2005 年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液10 15iU，对照品溶液5iU，分别点于同一以 羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷_甲醇_浓氨溶液(体积配比 18-22 : 3.5-4.5 : 0.4-0.6)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，在100-ll(TC 加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
4、桔梗的薄层色谱定性鉴别方法取清肺化痰丸水蜜丸10g，研细；或取大蜜丸 18g，剪碎，加硅藻土 3-5g，研匀，加正丁醇40-60ml，超声处理20-60min，滤过，滤液蒸干，残 渣加20-40ml水微热溶解，用石油醚(60 90°C )洗涤1_3次，每次10_20ml，弃去醚液，水 液加7% (g/ml)硫酸乙醇溶液8-12ml，加热回流2. 5_3. 5小时，放冷，用三氯甲烷振摇提取2-3次，每次20-40ml ，合并三氯甲烷液，加水30_50ml洗涤，弃去洗液，三氯甲烷液用无水硫 酸钠2g脱水，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取桔梗对照药材 lg，加7X (g/ml)硫酸乙醇-水(体积配比1 : 3)混合液15-25ml，加热回流2. 5_3. 5小时， 放冷，滤过，滤液用三氯甲烷振摇提取2-3次，每次15-25ml ，合并三氯甲烷液，加水15_25ml 洗涤，弃去洗液，三氯甲烷液用无水硫酸钠2g脱水，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶 解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VIB)试验，吸取上 述两种溶液各15 20ia，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上， 以三氯甲烷-乙醚(体积配比0.8-1.2 : 0.9-1.1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10% (g/ml)硫酸乙醇溶液，在lOO-ll(TC加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色 谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； 5、清肺化痰丸中黄芩苷的含量测定照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部 附录VID)测定。 1)色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲 醇-0. 3%磷酸(g/ml)(体积配比39 : 61)为流动相，检测波长为278士2nm，理论板数按黄 吝苷峰计算应不低于2000 ; 2)对照品溶液的制备精密称取黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每lml含40-60ug 的溶液，即得； 3)供试品溶液的制备取清肺化痰丸水蜜丸适量，研细，取约0. 3g，精密称定；或 取清肺化痰丸大蜜丸，剪碎，混匀，取约0. 5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50% (g/ml)甲醇25ml，密塞，称定重量，超声处理(功率160w，频率50KHz) 20-50分钟，取出，放 冷，再称定重量，用50% (g/ml)甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
4)测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10iU，注入液相色谱仪，测 定，即得；本品含黄芩以黄芩苷(C12H18Ou)计，水蜜丸每lg不得少于3. 8mg ;大蜜丸每丸不得 少于18. Omg。 其中，"％ (g/ml)"表示溶液每100ml中含有溶质若干克。 本发明的清肺化痰丸的质量检测方法，提高了清肺化痰丸的质量控制标准，建立 制剂中主药的含量测定检测指标及其检测方法，增加了陈皮、枳壳和盐酸麻黄碱及桔梗的 薄层色谱定性鉴别方法，保证了本复方制剂较高的质量标准水平。
具体实施方式
实施例 清肺化痰丸的药物配方由黄芩(酒炙)60g，苦杏仁60g，瓜蒌子60g，川贝母30g，
胆南星(砂炒)30g法半夏(砂炒)60g，陈皮60g，茯苓60g，枳壳(炒)60g，麻黄(炙)30g，
桔梗60g，紫苏子30g，莱菔子(炒)30g，款冬花(炙)30g，甘草30g组成， 制法以上十五味，苦杏仁榨油，残渣与其余十四味混合粉碎成细粉，过筛，混匀。
每100g粉末用炼蜜35 50g加适量的水，泛丸，泛丸时加入适量苦杏仁油，干燥，制成水蜜
丸；或加炼蜜140 160g和适量苦杏仁油制成大蜜丸，即得。 本发明的清肺化痰丸的质量检测方法为 1、取清肺化痰丸，置显微镜下观察不规则分枝状团块无色，遇水合氯醛试液溶
6化，菌丝无色或淡棕色，直径4 6um。纤维淡黄色，梭形，壁厚，孔沟细。纤维束周围薄壁细 胞含草酸钙方晶，形成晶纤维。花粉粒球形，直径约至32um，外壁有剌，较尖。
2、陈皮、枳壳的薄层色谱鉴别方法取清肺化痰丸水蜜丸10g，研细，加水10ml，搅 匀；或取大蜜丸18g，剪碎，加硅藻土 8g、水6ml，研匀，再加水15ml，超声处理15分钟，加乙 酸乙酯30ml，搅匀，超声处理30分钟，倾出上清液，残渣再加乙酸乙酯15ml，超声处理10分 钟，倾出上清液，合并上清液，用氨试液洗涤2次，每次15ml，再用水洗涤2次，每次15ml，乙 酸乙酯液蒸干，残渣加乙酸乙酯lml使溶解，作为供试品溶液；另取陈皮对照药材、枳壳对 照药材各0. 5g，分别加乙酸乙酯20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣分别加乙酸 乙酯lml使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试 验，吸取供试品溶液8 12ia、对照药材溶液各5iU，分别点于同一以含1%氢氧化钠溶 液的羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正己烷_丙酮_乙酸乙酯(体积配比 3:1: 3)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对 照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光主斑点； 3、麻黄中盐酸麻黄碱的薄层色谱鉴别方法取清肺化痰丸水蜜丸10g，研细；或取 大蜜丸18g，剪碎，加硅藻土 6g，研匀，加浓氨溶液2ml，乙醚50ml，加热回流30分钟，滤过， 滤液加盐酸乙醇液(1 — 20)(指lml盐酸加乙醇使成20ml溶液)4ml，摇匀，蒸干，残渣加 甲醇lml使溶解，脱脂棉滤过，滤液作为供试品溶液；另取盐酸麻黄碱对照品，加甲醇制成 每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB) 试验，吸取供试品溶液10 15 iU，对照品溶液5 iU，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏 合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-浓氨溶液(体积配比20 : 4 : 0.5)为展开
剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，在105t:加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与
对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； 4、桔梗的薄层色谱鉴别方法取清肺化痰丸水蜜丸10g，研细；或取大蜜丸18g，剪 碎，加硅藻土 4g，研匀，加正丁醇50ml，超声处理30min，滤过，滤液蒸干，残渣加30ml水微 热溶解，用石油醚(60 90°C )洗涤2次，每次15ml，弃去醚液，水液加7%硫酸乙醇溶液 10ml，加热回流3小时，放冷，用三氯甲烷振摇提取2次，每次30ml，合并三氯甲烷液，加水 40ml洗涤，弃去洗液，三氯甲烷液用无水硫酸钠2g脱水，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml 使溶解，作为供试品溶液；另取桔梗对照药材lg，加7X (g/ml)硫酸乙醇-水(体积配比 1 : 3)混合液20ml，加热回流3小时，放冷，滤过，滤液用三氯甲烷振摇提取2次，每次20ml， 合并三氯甲烷液，加水20ml洗涤，弃去洗液，三氯甲烷液用无水硫酸钠2g脱水，滤过，滤液 蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法(《中国药典2005年版一 部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各15 20iU，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏 合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙醚(体积配比1 : 1)为展开剂，展开，取出，晾干， 喷以10% (g/ml)硫酸乙醇溶液，在105t:加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药 材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； 5、清肺化痰丸中黄芩苷的含量测定方法照高效液相色谱法(中国药典2005年版 一部附录VID)测定。 1)色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲 醇-O. 3% (g/ml)磷酸(体积配比39 : 61)为流动相，检测波长为278nm，理论板数按黄吝苷峰计算应不低于2000 ; 2)对照品溶液的制备精密称取黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含50ug的 溶液，即得； 3)供试品溶液的制备取清肺化痰丸水蜜丸适量，研细，取约0. 3g，精密称定；或 取清肺化痰丸大蜜丸，剪碎，混匀，取约0. 5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50% (g/ml)甲醇25ml，密塞，称定重量，超声处理(功率160w，频率50KHz) 30分钟，取出，放冷， 再称定重量，用50% (g/ml)甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
4)测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10iU，注入液相色谱仪，测 定，即得；本品含黄芩以黄芩苷(C12H180u)计，水蜜丸每lg不得少于3. 8mg ;大蜜丸每丸不得 少于18. 0mg。 其中，"％ (g/ml)"表示溶液每100ml中含有溶质若干克。 改进后的清肺化痰丸的质量控制标准如下 清肺化痰丸质量标准 清肺化痰丸 Qingfei Huatan Wan处方黄芩(酒炙)60g苦杏仁60g 瓜蒌子60g 川贝母30g 胆南星(砂炒)30g法半夏(砂炒)60g 陈皮60g 茯苓60g 枳壳(炒)60g 麻黄(炙)30g 桔梗60g 紫苏子30g 莱菔子(炒)30g 款冬花(炙)30g 甘草30g制法以上十五味，苦杏仁榨油，残渣与其余十四味混合粉碎成细粉，过筛，混匀。
每100g粉末用炼蜜35 50g加适量的水，泛丸，泛丸时加入适量苦杏仁油，干燥，制成水蜜
丸；或加炼蜜140 160g和适量苦杏仁油制成大蜜丸，即得。性状本品为棕褐色至黑褐色的水蜜丸或大蜜丸；味甜、苦、微麻。鉴别(1)取本品，置显微镜下观察不规则分枝状团块无色，遇水合氯醛试液溶
化，菌丝无色或淡棕色，直径4 6um。纤维淡黄色，梭形，壁厚，孔沟细。纤维束周围薄壁细
胞含草酸钙方晶，形成晶纤维。花粉粒球形，直径约至32um，外壁有剌，较尖。 (2)取本品水蜜丸10g，研细，加水10ml，搅匀；或取大蜜丸18g，剪碎，加硅藻土
8g、水6ml，研匀，再加水15ml，超声处理15分钟，加乙酸乙酯30ml，搅匀，超声处理30分
钟，倾出上清液，残渣再加乙酸乙酯15ml，超声处理10分钟，倾出上清液，合并上清液，用氨
试液洗涤2次，每次15ml，再用水洗涤2次，每次15ml，乙酸乙酯液蒸干，残渣加乙酸乙酯
lml使溶解，作为供试品溶液。另取陈皮对照药材、枳壳对照药材各0. 5g，分别加乙酸乙酯
20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣分别加乙酸乙酯lml使溶解，作为对照药材溶
液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液8 12 iU、
对照药材溶液各5iU，分别点于同一以含1%氢氧化钠溶液的羧甲基纤维素钠为黏合剂的
硅胶G薄层板上，以正己烷-丙酮-乙酸乙酯(3 :1:3)为展开剂，展开，取出，晾干，置
紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的
荧光主斑点。 (3)取本品水蜜丸10g，研细；或取大蜜丸18g，剪碎，加硅藻土6g，研匀，加浓氨溶液2ml ，乙醚50ml，加热回流30分钟，滤过，滤液加盐酸乙醇液(1 — 20) 4ml，摇匀，蒸干，残 渣加甲醇1ml使溶解，脱脂棉滤过，滤液作为供试品溶液。另取盐酸麻黄碱对照品，加甲醇 制成每1ml含lmg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录 VIB)试验，吸取供试品溶液10 15ia，对照品溶液5iU，分别点于同一以羧甲基纤维素钠 为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-浓氨溶液(20 : 4 : 0.5)为展开剂，展
开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，在i05t:加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品
色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。 (4)取本品水蜜丸10g，研细；或取大蜜丸18g，剪碎，加硅藻土4g，研匀，加正丁醇 50ml，超声处理30min，滤过，滤液蒸干，残渣加30ml水微热溶解，用石油醚(60 90°C )洗 涤2次，每次15ml，弃去醚液，水液加7%硫酸乙醇溶液10ml，加热回流3小时，放冷，用三氯 甲烷振摇提取2次，每次30ml，合并三氯甲烷液，加水40ml洗涤，弃去洗液，三氯甲烷液用无 水硫酸钠2g脱水，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液。另取桔梗对 照药材lg，加7%硫酸乙醇-水(1 : 3)混合液20ml，加热回流3小时，放冷，滤过，滤液用 三氯甲烷振摇提取2次，每次20ml ，合并三氯甲烷液，加水20ml洗涤，弃去洗液，三氯甲烷液 用无水硫酸钠2g脱水，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为对照药材溶液。照薄 层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各15 20iU， 分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙醚(1 : 1) 为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在1051:加热至斑点显色清晰。供试 品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。检查应符合丸剂项下有关的各项规定(中国药典2005年版一部附录IA)。
含量测定照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VID)测定。
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇_0.3% 磷酸(39 : 61)为流动相，检测波长为278nm。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2000。
对照品溶液的制备精密称取黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每lml含50ug的溶 液，即得。 供试品溶液的制备取本品水蜜丸适量，研细，取约0. 3g，精密称定；或取重量差 异项下的大蜜丸，剪碎，混匀，取约O. 5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50X甲醇 25ml，密塞，称定重量，超声处理(功率160w，频率50KHz) 30分钟，取出，放冷，再称定重量， 用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10iU，注入液相色谱仪，测 定，即得。 本品含黄芩以黄芩苷(C12H18Ou)计，水蜜丸每lg不得少于3.8mg;大蜜丸每丸不得 少于18. Omg。功能与主治降气化痰，止咳平喘。用于肺热咳嗽，痰多作喘，痰涎壅盛，肺气不 畅。用法与用量口服，水蜜丸一次6g，大蜜丸一次1丸；一日2次。
规格水蜜丸每袋装6g ;大蜜丸每丸重9g。
贮藏密封。
权利要求
一种清肺化痰丸的质量控制方法，清肺化痰丸的药物由黄芩(酒炙)60g，苦杏仁60g，瓜蒌子60g，川贝母30g，胆南星(砂炒)30g，法半夏(砂炒)60g，陈皮60g，茯苓60g，枳壳(炒)60g，麻黄(炙)30g，桔梗60g，紫苏子30g，莱菔子(炒)30g，款冬花(炙)30g，甘草30g组成，并制成水蜜丸或大蜜丸；其特征在于清肺化痰丸的质量检测方法为1)取清肺化痰丸，置显微镜下观察不规则分枝状团块无色，遇水合氯醛试液溶化，菌丝无色或淡棕色，直径4～6um；纤维淡黄色，梭形，壁厚，孔沟细；纤维束周围薄壁细胞含草酸钙方晶，形成晶纤维。花粉粒球形，直径约至32um，外壁有刺，较尖；2)陈皮、枳壳的薄层色谱鉴别方法取清肺化痰丸水蜜丸10g，研细，加水10-15ml，搅匀；或取大蜜丸18g，剪碎，加硅藻土7-9g、水5-7ml，研匀，再加水12-20ml，超声处理15-30分钟，加乙酸乙酯20-40ml，搅匀，超声处理20-40分钟，倾出上清液，残渣再加乙酸乙酯15-20ml，超声处理10-20分钟，倾出上清液，合并上清液，用氨试液洗涤1-3次，每次10-20ml，再用水洗涤1-3次，每次10-20ml，乙酸乙酯液蒸干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液；另取陈皮对照药材、枳壳对照药材各0.5g，分别加乙酸乙酯15-25ml，超声处理15-30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣分别加乙酸乙酯1ml使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液8～12μl、对照药材溶液各5μl，分别点于同一以含1％(g/ml)氢氧化钠溶液的羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正己烷-丙酮-乙酸乙酯按体积配比2-4∶0.8-1.2∶2.5-3.5作为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光主斑点；3)麻黄中盐酸麻黄碱的薄层色谱鉴别方法取清肺化痰丸水蜜丸10g，研细；或取大蜜丸18g，剪碎，加硅藻土5-8g，研匀，加浓氨溶液1.5-2.5ml，乙醚40-60ml，加热回流20-40分钟，滤过，滤液加盐酸乙醇液1→20即1ml盐酸加乙醇使成20ml溶液3-5ml，摇匀，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，脱脂棉滤过，滤液作为供试品溶液；另取盐酸麻黄碱对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10～15μl，对照品溶液5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-浓氨溶液按体积配比18-22∶3.5-4.5∶0.4-0.6作为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，在100-110℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；4)桔梗的薄层色谱定性鉴别方法取清肺化痰丸水蜜丸10g，研细；或取大蜜丸18g，剪碎，加硅藻土3-5g，研匀，加正丁醇40-60ml，超声处理20-60min，滤过，滤液蒸干，残渣加20-40ml水微热溶解，用石油醚在60～90℃下洗涤1-3次，每次10-20ml，弃去醚液，水液加7％(g/ml)硫酸乙醇溶液8-12ml，加热回流2.5-3.5小时，放冷，用三氯甲烷振摇提取2-3次，每次20-40ml，合并三氯甲烷液，加水30-50ml洗涤，弃去洗液，三氯甲烷液用无水硫酸钠2g脱水，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取桔梗对照药材1g，加7％(g/ml)硫酸乙醇-水按体积配比1∶3混合液15-25ml，加热回流2.5-3.5小时，放冷，滤过，滤液用三氯甲烷振摇提取2-3次，每次15-25ml，合并三氯甲烷液，加水15-25ml洗涤，弃去洗液，三氯甲烷液用无水硫酸钠2g脱水，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各15～20μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙醚按体积配比0.8-1.2∶0.9-1.1作为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％(g/ml)硫酸乙醇溶液，在100-110℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；5)清肺化痰丸中黄芩苷的含量测定照高效液相色谱法测定(1)色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.3％磷酸(g/ml)按体积配比39∶61作为流动相，检测波长为278±2nm；(2)对照品溶液的制备精密称取黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含40-60ug的溶液，即得；(3)供试品溶液的制备取清肺化痰丸水蜜丸适量，研细，取约0.3g，或取清肺化痰丸大蜜丸，剪碎，混匀，取约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加入50％(g/ml)甲醇25ml，密塞，称定重量，超声处理20-50分钟，取出，放冷，再称定重量，用50％(g/ml)甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；(4)测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本品含黄芩以黄芩苷计，水蜜丸每1g不得少于3.8mg；大蜜丸每丸不得少于18.0mg；其中，“％(g/ml)”表示溶液每100ml中含有溶质若干克。
全文摘要
本发明涉及《中华人民共和国卫生部药品标准》(中药成方制剂)第十二册中清肺化痰丸的质量检测方法。本发明的清肺化痰丸的质量检测方法包括显微鉴别、陈皮、枳壳的薄层色谱鉴别方法、麻黄中盐酸麻黄碱的薄层色谱鉴别方法、桔梗的薄层色谱定性鉴别方法、黄芩苷的含量测定。本发明提高了清肺化痰丸的质量控制标准，建立制剂中主药的含量测定检测指标及其检测方法，增加了陈皮、枳壳和盐酸麻黄碱及桔梗的薄层色谱定性鉴别方法，保证了本复方制剂较高的质量标准水平。
文档编号A61K36/88GK101732552SQ20101010146
公开日2010年6月16日 申请日期2010年1月27日 优先权日2010年1月27日
发明者孙蓉, 田婷婷, 钱进 申请人:昆明中药厂有限公司
技术领域：
本发明涉及《中华人民共和国卫生部药品标准》(中药成方制剂)第十二册中清肺
化痰丸的质量检测方法。
背景技术：
《中华人民共和国卫生部药品标准》(中药成方制剂)第十二册中的药物清肺化痰 丸，具有降气化痰，止咳平喘的作用，主要用于肺热咳嗽，痰多作喘，痰涎壅盛，肺气不畅。。 该复方制剂由中药材黄芩(酒炙)60g、苦杏仁60g、瓜蒌子60g、川贝母30g、胆南星(砂 炒)30g、法半夏(砂炒)60g、陈皮60g、茯苓60g、枳壳(炒)60g、麻黄(炙)30g、桔梗60g、紫 苏子30g、莱菔子(炒)30g、款冬花(炙)30g、甘草30g组成。黄芩为方中主药，为唇形科植 物黄芩Scutellaria baicalensis Georgi的干燥根，具有清热燥湿，泻火解毒之功效；苦杏 仁为蔷凝禾斗植物山杏Pru皿s armeniaca L var. ansu Maxim.、西伯利亚杏Pru皿ssibirica L 、东北杏Pru皿s mandshurica(Maxim.)Koehne或杏Pru皿s armeniaca L 的干燥成 熟种子，具有降气止咳平喘之功效；瓜蒌子为葫芦科植物栝楼Trichosanthes kirilowii Maxim.或双边栝楼Trichosanthes rosthornii Harms的干燥成熟种子，具有润肺化痰之 功效;川贝母为百合科植物川贝母Fritillaria cirrhosa D. Don、暗紫贝母Fritillaria unibracteata Hsiao etK. C. Hsia、甘肃贝母Fritillaria przewalskii Maxim.或梭砂贝 母Fritillaria delavayi Franch.的干燥鳞茎，具有清热润肺，化痰止咳之功效；胆南星为 制天南星的细粉与牛、羊或猪胆汁经加工而成，或为生天南星细粉与牛、羊或猪胆汁经发酵 加工而成(天南星为天南星科植物天南星Arisaema erubescens (Wall. ) Schott、异叶天南 星Arisaema heterophyllum Bl.或东北天南星Arisaema amurense Maxim.的干燥块蓬)， 具有清热化痰之功效；法半夏为半夏的炮制加工品(半夏为天南星科植物半夏Pinellia ternata(Thunb. )Breit.的干燥块茎)，具有燥湿化痰之功效；陈皮为芸香科植物橘Citrus reticulate Blanco及其栽培变种的干燥成熟果皮，具有理气健脾，燥湿化痰之功效。茯苓 为多孔菌科真菌茯苓Poria cocos (Schw. ) Wolf的干燥菌核，具有利水渗湿，健脾宁心之功 效；枳壳为芸香科植物酸橙Citrus aurantium L.及其栽培变种的干燥未成熟果实，具理气 宽中，行滞消胀之功效；麻黄为麻黄科植物草麻黄Ephedrasinica Stapf、中麻黄Ephedra intermedia Schrenk et C. A. Mey.或木贼麻黄Ephedra equisetinaBge.的干燥草质蓬， 具发汗散寒，宣肺平喘之功效；桔梗为桔梗科植物桔梗Platycodongrandiflorum(Jacq.) A. DC.的干燥根，具有宣肺，利咽，祛痰，排脓之功效；白苏子为唇形科植物白苏Perilla frutescens (L. ) Britt.的干燥成熟果实，具有下气，消痰，润肺之功效；莱菔子为十字花科 植物萝卜Rapha皿s sativus L.的干燥成熟种子，具有消食除胀，降气化痰之功效；款冬花 为菊科植物款东Tussilago farfara L.的干燥花蕾，具有润肺下气，止咳化痰之功效。甘 草为豆科植物甘草Glycyrrhiza inflata Bat.、胀果甘草Glycyrrhiza in flata Bat或光 果甘草Glycyrrhiza glabra L.的干燥根及根茎，具有补脾益气，清热解毒，祛痰止咳，调和 诸药之功效。《中华人民共和国卫生部药品标准》第十二册颁布了清肺化痰丸的质量控制标准(WS3-B-2425-97)，但卫生部颁发的现有的清肺化痰丸质量控制方法中，只有显微鉴别和 薄层鉴别，局限性很大，难以准确控制清肺化痰丸的质量。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种清肺化痰丸的质量检测方法，以 提高清肺化痰丸的质量控制标准。 清肺化痰丸的药物由黄芩(酒炙)60g，苦杏仁60g，瓜蒌子60g，川贝母30g，胆南 星(砂炒)30g，法半夏(砂炒)60g，陈皮60g，茯苓60g，枳壳(炒)60g，麻黄(炙)30g，桔 梗60g，紫苏子30g，莱菔子(炒)30g，款冬花(炙)30g，甘草30g组成，并制成水蜜丸或大 蜜丸。 本发明的清肺化痰丸的质量控制方法为 1、取清肺化痰丸，置显微镜下观察不规则分枝状团块无色，遇水合氯醛试液溶 化，菌丝无色或淡棕色，直径4 6um。纤维淡黄色，梭形，壁厚，孔沟细。纤维束周围薄壁细 胞含草酸钙方晶，形成晶纤维。花粉粒球形，直径约至32um，外壁有剌，较尖。
2、陈皮、枳壳的薄层色谱定性鉴别方法取清肺化痰丸水蜜丸10g，研细，加水 10-15ml，搅匀；或取大蜜丸18g，剪碎，加硅藻土 7-9g、水5_7ml，研匀，再加水12_20ml，超声 处理15-30分钟，加乙酸乙酯20-40ml ，搅匀，超声处理20-40分钟，倾出上清液，残渣再加乙 酸乙酯15-20ml，超声处理10-20分钟，倾出上清液，合并上清液，用氨试液洗涤1_3次，每次 10-20ml，再用水洗涤1-3次，每次10-20ml，乙酸乙酯液蒸干，残渣加乙酸乙酯lml使溶解， 作为供试品溶液；另取陈皮对照药材、枳壳对照药材各0. 5g，分别加乙酸乙酯15-25ml，超 声处理15-30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣分别加乙酸乙酯lml使溶解，作为对照药材溶液； 照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液8 12 ii 1、对照 药材溶液各5iU，分别点于同一以含lX (g/ml)氢氧化钠溶液的羧甲基纤维素钠为黏合剂 的硅胶G薄层板上，以正己烷-丙酮-乙酸乙酯(体积配比2-4 : 0.8-1.2 : 2. 5-3. 5)为 展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱 相应的位置上，显相同颜色的荧光主斑点； 3、盐酸麻黄碱的薄层色谱定性鉴别方法取清肺化痰丸水蜜丸10g，研细；或取 大蜜丸18g，剪碎，加硅藻土 5-8g，研匀，加浓氨溶液1. 5-2. 5ml，乙醚40_60ml，加热回流 20-40分钟，滤过，滤液加盐酸乙醇液1 — 20(指lml盐酸加乙醇使成20ml溶液)3-5ml， 摇匀，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，脱脂棉滤过，滤液作为供试品溶液；另取盐酸麻黄碱对 照品，加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2005 年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液10 15iU，对照品溶液5iU，分别点于同一以 羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷_甲醇_浓氨溶液(体积配比 18-22 : 3.5-4.5 : 0.4-0.6)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，在100-ll(TC 加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
4、桔梗的薄层色谱定性鉴别方法取清肺化痰丸水蜜丸10g，研细；或取大蜜丸 18g，剪碎，加硅藻土 3-5g，研匀，加正丁醇40-60ml，超声处理20-60min，滤过，滤液蒸干，残 渣加20-40ml水微热溶解，用石油醚(60 90°C )洗涤1_3次，每次10_20ml，弃去醚液，水 液加7% (g/ml)硫酸乙醇溶液8-12ml，加热回流2. 5_3. 5小时，放冷，用三氯甲烷振摇提取2-3次，每次20-40ml ，合并三氯甲烷液，加水30_50ml洗涤，弃去洗液，三氯甲烷液用无水硫 酸钠2g脱水，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取桔梗对照药材 lg，加7X (g/ml)硫酸乙醇-水(体积配比1 : 3)混合液15-25ml，加热回流2. 5_3. 5小时， 放冷，滤过，滤液用三氯甲烷振摇提取2-3次，每次15-25ml ，合并三氯甲烷液，加水15_25ml 洗涤，弃去洗液，三氯甲烷液用无水硫酸钠2g脱水，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶 解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VIB)试验，吸取上 述两种溶液各15 20ia，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上， 以三氯甲烷-乙醚(体积配比0.8-1.2 : 0.9-1.1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10% (g/ml)硫酸乙醇溶液，在lOO-ll(TC加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色 谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； 5、清肺化痰丸中黄芩苷的含量测定照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部 附录VID)测定。 1)色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲 醇-0. 3%磷酸(g/ml)(体积配比39 : 61)为流动相，检测波长为278士2nm，理论板数按黄 吝苷峰计算应不低于2000 ; 2)对照品溶液的制备精密称取黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每lml含40-60ug 的溶液，即得； 3)供试品溶液的制备取清肺化痰丸水蜜丸适量，研细，取约0. 3g，精密称定；或 取清肺化痰丸大蜜丸，剪碎，混匀，取约0. 5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50% (g/ml)甲醇25ml，密塞，称定重量，超声处理(功率160w，频率50KHz) 20-50分钟，取出，放 冷，再称定重量，用50% (g/ml)甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
4)测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10iU，注入液相色谱仪，测 定，即得；本品含黄芩以黄芩苷(C12H18Ou)计，水蜜丸每lg不得少于3. 8mg ;大蜜丸每丸不得 少于18. Omg。 其中，"％ (g/ml)"表示溶液每100ml中含有溶质若干克。 本发明的清肺化痰丸的质量检测方法，提高了清肺化痰丸的质量控制标准，建立 制剂中主药的含量测定检测指标及其检测方法，增加了陈皮、枳壳和盐酸麻黄碱及桔梗的 薄层色谱定性鉴别方法，保证了本复方制剂较高的质量标准水平。
具体实施方式
实施例 清肺化痰丸的药物配方由黄芩(酒炙)60g，苦杏仁60g，瓜蒌子60g，川贝母30g，
胆南星(砂炒)30g法半夏(砂炒)60g，陈皮60g，茯苓60g，枳壳(炒)60g，麻黄(炙)30g，
桔梗60g，紫苏子30g，莱菔子(炒)30g，款冬花(炙)30g，甘草30g组成， 制法以上十五味，苦杏仁榨油，残渣与其余十四味混合粉碎成细粉，过筛，混匀。
每100g粉末用炼蜜35 50g加适量的水，泛丸，泛丸时加入适量苦杏仁油，干燥，制成水蜜
丸；或加炼蜜140 160g和适量苦杏仁油制成大蜜丸，即得。 本发明的清肺化痰丸的质量检测方法为 1、取清肺化痰丸，置显微镜下观察不规则分枝状团块无色，遇水合氯醛试液溶
6化，菌丝无色或淡棕色，直径4 6um。纤维淡黄色，梭形，壁厚，孔沟细。纤维束周围薄壁细 胞含草酸钙方晶，形成晶纤维。花粉粒球形，直径约至32um，外壁有剌，较尖。
2、陈皮、枳壳的薄层色谱鉴别方法取清肺化痰丸水蜜丸10g，研细，加水10ml，搅 匀；或取大蜜丸18g，剪碎，加硅藻土 8g、水6ml，研匀，再加水15ml，超声处理15分钟，加乙 酸乙酯30ml，搅匀，超声处理30分钟，倾出上清液，残渣再加乙酸乙酯15ml，超声处理10分 钟，倾出上清液，合并上清液，用氨试液洗涤2次，每次15ml，再用水洗涤2次，每次15ml，乙 酸乙酯液蒸干，残渣加乙酸乙酯lml使溶解，作为供试品溶液；另取陈皮对照药材、枳壳对 照药材各0. 5g，分别加乙酸乙酯20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣分别加乙酸 乙酯lml使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试 验，吸取供试品溶液8 12ia、对照药材溶液各5iU，分别点于同一以含1%氢氧化钠溶 液的羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正己烷_丙酮_乙酸乙酯(体积配比 3:1: 3)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视，供试品色谱中，在与对 照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光主斑点； 3、麻黄中盐酸麻黄碱的薄层色谱鉴别方法取清肺化痰丸水蜜丸10g，研细；或取 大蜜丸18g，剪碎，加硅藻土 6g，研匀，加浓氨溶液2ml，乙醚50ml，加热回流30分钟，滤过， 滤液加盐酸乙醇液(1 — 20)(指lml盐酸加乙醇使成20ml溶液)4ml，摇匀，蒸干，残渣加 甲醇lml使溶解，脱脂棉滤过，滤液作为供试品溶液；另取盐酸麻黄碱对照品，加甲醇制成 每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB) 试验，吸取供试品溶液10 15 iU，对照品溶液5 iU，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏 合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-浓氨溶液(体积配比20 : 4 : 0.5)为展开
剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，在105t:加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与
对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； 4、桔梗的薄层色谱鉴别方法取清肺化痰丸水蜜丸10g，研细；或取大蜜丸18g，剪 碎，加硅藻土 4g，研匀，加正丁醇50ml，超声处理30min，滤过，滤液蒸干，残渣加30ml水微 热溶解，用石油醚(60 90°C )洗涤2次，每次15ml，弃去醚液，水液加7%硫酸乙醇溶液 10ml，加热回流3小时，放冷，用三氯甲烷振摇提取2次，每次30ml，合并三氯甲烷液，加水 40ml洗涤，弃去洗液，三氯甲烷液用无水硫酸钠2g脱水，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml 使溶解，作为供试品溶液；另取桔梗对照药材lg，加7X (g/ml)硫酸乙醇-水(体积配比 1 : 3)混合液20ml，加热回流3小时，放冷，滤过，滤液用三氯甲烷振摇提取2次，每次20ml， 合并三氯甲烷液，加水20ml洗涤，弃去洗液，三氯甲烷液用无水硫酸钠2g脱水，滤过，滤液 蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法(《中国药典2005年版一 部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各15 20iU，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏 合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙醚(体积配比1 : 1)为展开剂，展开，取出，晾干， 喷以10% (g/ml)硫酸乙醇溶液，在105t:加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药 材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； 5、清肺化痰丸中黄芩苷的含量测定方法照高效液相色谱法(中国药典2005年版 一部附录VID)测定。 1)色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲 醇-O. 3% (g/ml)磷酸(体积配比39 : 61)为流动相，检测波长为278nm，理论板数按黄吝苷峰计算应不低于2000 ; 2)对照品溶液的制备精密称取黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含50ug的 溶液，即得； 3)供试品溶液的制备取清肺化痰丸水蜜丸适量，研细，取约0. 3g，精密称定；或 取清肺化痰丸大蜜丸，剪碎，混匀，取约0. 5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50% (g/ml)甲醇25ml，密塞，称定重量，超声处理(功率160w，频率50KHz) 30分钟，取出，放冷， 再称定重量，用50% (g/ml)甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
4)测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10iU，注入液相色谱仪，测 定，即得；本品含黄芩以黄芩苷(C12H180u)计，水蜜丸每lg不得少于3. 8mg ;大蜜丸每丸不得 少于18. 0mg。 其中，"％ (g/ml)"表示溶液每100ml中含有溶质若干克。 改进后的清肺化痰丸的质量控制标准如下 清肺化痰丸质量标准 清肺化痰丸 Qingfei Huatan Wan处方黄芩(酒炙)60g苦杏仁60g 瓜蒌子60g 川贝母30g 胆南星(砂炒)30g法半夏(砂炒)60g 陈皮60g 茯苓60g 枳壳(炒)60g 麻黄(炙)30g 桔梗60g 紫苏子30g 莱菔子(炒)30g 款冬花(炙)30g 甘草30g制法以上十五味，苦杏仁榨油，残渣与其余十四味混合粉碎成细粉，过筛，混匀。
每100g粉末用炼蜜35 50g加适量的水，泛丸，泛丸时加入适量苦杏仁油，干燥，制成水蜜
丸；或加炼蜜140 160g和适量苦杏仁油制成大蜜丸，即得。性状本品为棕褐色至黑褐色的水蜜丸或大蜜丸；味甜、苦、微麻。鉴别(1)取本品，置显微镜下观察不规则分枝状团块无色，遇水合氯醛试液溶
化，菌丝无色或淡棕色，直径4 6um。纤维淡黄色，梭形，壁厚，孔沟细。纤维束周围薄壁细
胞含草酸钙方晶，形成晶纤维。花粉粒球形，直径约至32um，外壁有剌，较尖。 (2)取本品水蜜丸10g，研细，加水10ml，搅匀；或取大蜜丸18g，剪碎，加硅藻土
8g、水6ml，研匀，再加水15ml，超声处理15分钟，加乙酸乙酯30ml，搅匀，超声处理30分
钟，倾出上清液，残渣再加乙酸乙酯15ml，超声处理10分钟，倾出上清液，合并上清液，用氨
试液洗涤2次，每次15ml，再用水洗涤2次，每次15ml，乙酸乙酯液蒸干，残渣加乙酸乙酯
lml使溶解，作为供试品溶液。另取陈皮对照药材、枳壳对照药材各0. 5g，分别加乙酸乙酯
20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣分别加乙酸乙酯lml使溶解，作为对照药材溶
液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液8 12 iU、
对照药材溶液各5iU，分别点于同一以含1%氢氧化钠溶液的羧甲基纤维素钠为黏合剂的
硅胶G薄层板上，以正己烷-丙酮-乙酸乙酯(3 :1:3)为展开剂，展开，取出，晾干，置
紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的
荧光主斑点。 (3)取本品水蜜丸10g，研细；或取大蜜丸18g，剪碎，加硅藻土6g，研匀，加浓氨溶液2ml ，乙醚50ml，加热回流30分钟，滤过，滤液加盐酸乙醇液(1 — 20) 4ml，摇匀，蒸干，残 渣加甲醇1ml使溶解，脱脂棉滤过，滤液作为供试品溶液。另取盐酸麻黄碱对照品，加甲醇 制成每1ml含lmg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录 VIB)试验，吸取供试品溶液10 15ia，对照品溶液5iU，分别点于同一以羧甲基纤维素钠 为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-浓氨溶液(20 : 4 : 0.5)为展开剂，展
开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，在i05t:加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品
色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。 (4)取本品水蜜丸10g，研细；或取大蜜丸18g，剪碎，加硅藻土4g，研匀，加正丁醇 50ml，超声处理30min，滤过，滤液蒸干，残渣加30ml水微热溶解，用石油醚(60 90°C )洗 涤2次，每次15ml，弃去醚液，水液加7%硫酸乙醇溶液10ml，加热回流3小时，放冷，用三氯 甲烷振摇提取2次，每次30ml，合并三氯甲烷液，加水40ml洗涤，弃去洗液，三氯甲烷液用无 水硫酸钠2g脱水，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液。另取桔梗对 照药材lg，加7%硫酸乙醇-水(1 : 3)混合液20ml，加热回流3小时，放冷，滤过，滤液用 三氯甲烷振摇提取2次，每次20ml ，合并三氯甲烷液，加水20ml洗涤，弃去洗液，三氯甲烷液 用无水硫酸钠2g脱水，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为对照药材溶液。照薄 层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各15 20iU， 分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙醚(1 : 1) 为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在1051:加热至斑点显色清晰。供试 品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。检查应符合丸剂项下有关的各项规定(中国药典2005年版一部附录IA)。
含量测定照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VID)测定。
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇_0.3% 磷酸(39 : 61)为流动相，检测波长为278nm。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于2000。
对照品溶液的制备精密称取黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每lml含50ug的溶 液，即得。 供试品溶液的制备取本品水蜜丸适量，研细，取约0. 3g，精密称定；或取重量差 异项下的大蜜丸，剪碎，混匀，取约O. 5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50X甲醇 25ml，密塞，称定重量，超声处理(功率160w，频率50KHz) 30分钟，取出，放冷，再称定重量， 用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10iU，注入液相色谱仪，测 定，即得。 本品含黄芩以黄芩苷(C12H18Ou)计，水蜜丸每lg不得少于3.8mg;大蜜丸每丸不得 少于18. Omg。功能与主治降气化痰，止咳平喘。用于肺热咳嗽，痰多作喘，痰涎壅盛，肺气不 畅。用法与用量口服，水蜜丸一次6g，大蜜丸一次1丸；一日2次。
规格水蜜丸每袋装6g ;大蜜丸每丸重9g。
贮藏密封。
权利要求
一种清肺化痰丸的质量控制方法，清肺化痰丸的药物由黄芩(酒炙)60g，苦杏仁60g，瓜蒌子60g，川贝母30g，胆南星(砂炒)30g，法半夏(砂炒)60g，陈皮60g，茯苓60g，枳壳(炒)60g，麻黄(炙)30g，桔梗60g，紫苏子30g，莱菔子(炒)30g，款冬花(炙)30g，甘草30g组成，并制成水蜜丸或大蜜丸；其特征在于清肺化痰丸的质量检测方法为1)取清肺化痰丸，置显微镜下观察不规则分枝状团块无色，遇水合氯醛试液溶化，菌丝无色或淡棕色，直径4～6um；纤维淡黄色，梭形，壁厚，孔沟细；纤维束周围薄壁细胞含草酸钙方晶，形成晶纤维。花粉粒球形，直径约至32um，外壁有刺，较尖；2)陈皮、枳壳的薄层色谱鉴别方法取清肺化痰丸水蜜丸10g，研细，加水10-15ml，搅匀；或取大蜜丸18g，剪碎，加硅藻土7-9g、水5-7ml，研匀，再加水12-20ml，超声处理15-30分钟，加乙酸乙酯20-40ml，搅匀，超声处理20-40分钟，倾出上清液，残渣再加乙酸乙酯15-20ml，超声处理10-20分钟，倾出上清液，合并上清液，用氨试液洗涤1-3次，每次10-20ml，再用水洗涤1-3次，每次10-20ml，乙酸乙酯液蒸干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解，作为供试品溶液；另取陈皮对照药材、枳壳对照药材各0.5g，分别加乙酸乙酯15-25ml，超声处理15-30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣分别加乙酸乙酯1ml使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液8～12μl、对照药材溶液各5μl，分别点于同一以含1％(g/ml)氢氧化钠溶液的羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正己烷-丙酮-乙酸乙酯按体积配比2-4∶0.8-1.2∶2.5-3.5作为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光主斑点；3)麻黄中盐酸麻黄碱的薄层色谱鉴别方法取清肺化痰丸水蜜丸10g，研细；或取大蜜丸18g，剪碎，加硅藻土5-8g，研匀，加浓氨溶液1.5-2.5ml，乙醚40-60ml，加热回流20-40分钟，滤过，滤液加盐酸乙醇液1→20即1ml盐酸加乙醇使成20ml溶液3-5ml，摇匀，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，脱脂棉滤过，滤液作为供试品溶液；另取盐酸麻黄碱对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10～15μl，对照品溶液5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-浓氨溶液按体积配比18-22∶3.5-4.5∶0.4-0.6作为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，在100-110℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；4)桔梗的薄层色谱定性鉴别方法取清肺化痰丸水蜜丸10g，研细；或取大蜜丸18g，剪碎，加硅藻土3-5g，研匀，加正丁醇40-60ml，超声处理20-60min，滤过，滤液蒸干，残渣加20-40ml水微热溶解，用石油醚在60～90℃下洗涤1-3次，每次10-20ml，弃去醚液，水液加7％(g/ml)硫酸乙醇溶液8-12ml，加热回流2.5-3.5小时，放冷，用三氯甲烷振摇提取2-3次，每次20-40ml，合并三氯甲烷液，加水30-50ml洗涤，弃去洗液，三氯甲烷液用无水硫酸钠2g脱水，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取桔梗对照药材1g，加7％(g/ml)硫酸乙醇-水按体积配比1∶3混合液15-25ml，加热回流2.5-3.5小时，放冷，滤过，滤液用三氯甲烷振摇提取2-3次，每次15-25ml，合并三氯甲烷液，加水15-25ml洗涤，弃去洗液，三氯甲烷液用无水硫酸钠2g脱水，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各15～20μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙醚按体积配比0.8-1.2∶0.9-1.1作为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％(g/ml)硫酸乙醇溶液，在100-110℃加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；5)清肺化痰丸中黄芩苷的含量测定照高效液相色谱法测定(1)色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.3％磷酸(g/ml)按体积配比39∶61作为流动相，检测波长为278±2nm；(2)对照品溶液的制备精密称取黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含40-60ug的溶液，即得；(3)供试品溶液的制备取清肺化痰丸水蜜丸适量，研细，取约0.3g，或取清肺化痰丸大蜜丸，剪碎，混匀，取约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加入50％(g/ml)甲醇25ml，密塞，称定重量，超声处理20-50分钟，取出，放冷，再称定重量，用50％(g/ml)甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；(4)测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本品含黄芩以黄芩苷计，水蜜丸每1g不得少于3.8mg；大蜜丸每丸不得少于18.0mg；其中，“％(g/ml)”表示溶液每100ml中含有溶质若干克。
全文摘要
本发明涉及《中华人民共和国卫生部药品标准》(中药成方制剂)第十二册中清肺化痰丸的质量检测方法。本发明的清肺化痰丸的质量检测方法包括显微鉴别、陈皮、枳壳的薄层色谱鉴别方法、麻黄中盐酸麻黄碱的薄层色谱鉴别方法、桔梗的薄层色谱定性鉴别方法、黄芩苷的含量测定。本发明提高了清肺化痰丸的质量控制标准，建立制剂中主药的含量测定检测指标及其检测方法，增加了陈皮、枳壳和盐酸麻黄碱及桔梗的薄层色谱定性鉴别方法，保证了本复方制剂较高的质量标准水平。
文档编号A61K36/88GK101732552SQ20101010146
公开日2010年6月16日 申请日期2010年1月27日 优先权日2010年1月27日
发明者孙蓉, 田婷婷, 钱进 申请人:昆明中药厂有限公司
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