一种头孢匹胺/苯甲酸钠/碳酸氢钠药物组合物脂质体注射剂的制作方法
专利名称：一种头孢匹胺/苯甲酸钠/碳酸氢钠药物组合物脂质体注射剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及了一种西药制剂，具体的说涉及到了一种头孢匹胺/苯甲酸钠/碳酸氢钠药物组合物脂质体注射剂，属于医药技术领域。
背景技术：
头孢匹胺，其化学名称为(6R，7R)-7-[(R)-2-(4-羟基-6-甲基-3-吡啶羰基氨基)-2-(对羟基苯基)乙酰氨基]-3-[[(1-甲基-1H-四唑-5-基)硫]甲基]-8-氧代-5-硫杂-1-氮杂双环[4，2，0]辛-2-烯-2-羧酸，分子式C25H24N807S2，分子量612.63，结构式为
头孢匹胺抗菌谱广，具有良好的药动学特征，对β-内酰胺酶稳定性好，对革兰氏阳性菌有很强的抗菌活性，对包括革兰氏阴性菌在内的细菌亦有广谱抗菌活性，具有完美的平衡性的抗菌谱。适用于由金黄色葡萄球菌属、链球菌属(除肠球菌外)、厌氧球菌属、厌氧链球菌属、大肠杆菌、柠檬酸杆菌属、克雷白氏杆菌属、肠杆菌属、变形杆菌属、摩根氏变形菌属、假单胞菌属、流感嗜血杆菌、不动杆菌、拟杆菌属引起的各种感染。
中国专利CN1552329A、CN1706387A、CN1823783A公开了一种简单无菌混合的头孢匹胺粉针制剂，其中CN1823783A公开了一种注射用头孢匹胺无菌混合粉针剂的制备方法，其步骤是，在一百级洁净区，相对湿度＜60％，将无菌头孢匹胺、无菌碳酸钠分别粉碎过100目筛；再在一百级洁净区，相对湿度＜60％条件下，先将头孢匹胺无菌分装到20ml的抗生素管制瓶中，按无水物计每瓶1.0g，再将碳酸钠分装到上述管制瓶中，按无水物计每瓶0.2g，加工基胶胶塞，压铝塑盖即得本发明。采用本发明制得的无菌分装产品，收率高，工艺损失少，产品的纯度接近原料药的纯度，制备过程降解少，纯度高。
中国专利CN 101317822A公开了一种头孢匹胺钠冻干粉针，其特征在于将苯甲酸钠、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠溶于注射用水中，再向上述溶液中加头孢匹胺酸；然后向上述头孢匹胺酸浑浊液中滴加4％氢氧化钠溶液，调节溶液的pH为6.5-7.3；加活性炭脱色30分钟，抽滤，滤液放入冻干机中进行冷冻干燥，将所得的头孢匹胺钠冻干产品在无菌车间按规格分装即可。
中国专利CN101332188A公开了一种采用超微粉碎技术制备头孢匹胺钠无菌粉末的方法，将头孢匹胺钠经超微粉碎机，通过气流粉碎技术，粉碎成粒径为通过1340目的超微细粉，再进行无菌分装，制得注射用无菌粉末。该方法只是改变了分装过程中的流动性差和复溶慢的缺点，在水溶液中同样会水解氧化，并没有完全改变稳定性差的问题。
上述专利均为传统的制备工艺制得，没有对头孢匹胺实施保护措施，稳定性差，不能满足有效期的质量要求。目前上市销售的头孢匹胺制剂有两种，一种是头孢匹胺和碳酸氢钠等混合分装，一种是直接用头孢匹胺钠原料分装或冻干制得，但是这两种制剂存在一共同特点就是稳定性差，因为头孢匹胺本身对光、热不稳定，长期放置会导致有关物质明显增大，影响了用药的安全性。
显然现有技术没有较好解决头孢匹胺的稳定性问题。因此，对质量优良的头孢匹胺/苯甲酸钠/碳酸氢钠药物组合物的制剂依然存在需求。本发明提供了一种稳定的头孢匹胺/苯甲酸钠/碳酸氢钠药物组合物的注射剂，通过对头孢匹胺进行脂质体包裹，大大提高了头孢匹胺的稳定性，解决了头孢匹胺稳定性差、有效期短的问题，获得了令人满意的技术效果，满足了市场需求。
脂质体(liposomes)最初是由英国学者Bangham和Standish将磷脂分散在水中进行电镜观察时发现的。磷脂分散在水中自然形成多层泡囊，每层均为脂质的双分子层；囊泡中央和各层之间被水相隔开，双分子层厚度约4nm，后来将这种类似生物膜结构的双分子小囊成为脂质体。
脂质体研究是当前一个十分活跃的领域，脂质体最早是指天然脂类化合物悬浮在水中形成的具有双层封闭结构的泡囊，现在也可以由人工合成的磷脂化合物来制备。20世纪60年代末Rahman等人首先将脂质体作为药物载体应用，近年来，随着生物技术的不断进展，脂质体制备工艺逐步完善，脂质体作用机制进一步阐明，加之脂质体适合体内降解、无毒性和无免疫原性，特别是大量试验数据证明脂质体作为药物载体可以提高药物治疗指数、降低药物毒性和减少药物副作用，并减少药物剂量等优点。然而脂质体普遍存在容易聚集、融合，导致包封药物泄漏，脂质体的不稳定已成为其制药工业的主要问题，因此需要优化脂质体处方，以获得稳定性优良的脂质体。
实际上，制药领域具有一般经验的技术人员清楚地知道在制备脂质体-药物复合物方面面临的种种困难，所有这些困难绝非现有的理论就可以预期解决的，要得到符合稳定性的药物脂质体需要克服许多难题。
制备脂质体注射剂常用的膜材料为磷脂和胆固醇，其中磷脂通常可选用天然磷脂和合成磷脂，所述天然磷脂为蛋黄卵磷脂、氢化蛋黄磷脂、蛋黄磷脂酰甘油、蛋黄磷脂酰丝氨酸、蛋黄磷脂酰肌醇、大豆卵磷脂、氢化大豆磷脂、大豆磷脂酰甘油、大豆磷脂酰丝氨酸、大豆磷脂酰肌醇中的一种或几种；所述合成磷脂为二油酰磷脂酰胆碱、二硬脂酸磷脂酰胆碱、二棕榈酰磷脂酰胆碱、二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱、二月桂酰磷脂酰胆碱、二油酰磷脂酰甘油、二硬脂酸磷脂酰甘油、二棕榈酰磷脂酰甘油、二肉豆蔻酰磷脂酰甘油、二月桂酰磷脂酰甘油中的一种或几种。
发明内容
针对目前上市的本品稳定性差和生物利用度低的缺点，本发明的目的在于提供一种头孢匹胺/苯甲酸钠/碳酸氢钠药物组合物脂质体注射剂，通过对头孢匹胺进行脂质体包裹以改变其药学性质，大大提高了头孢匹胺的稳定性，保证了用药的安全性。
为了制备，治疗优良的头孢匹胺脂质体，本发明人进行了大量的预试验，根据优化处方制备脂质体的实质性特点且为了方便描述，本文将制备头孢匹胺的空白脂质体的基本材料，定义为脂质体基质。
发明人在采用一般脂质体注射剂常用的磷脂和胆固醇为膜材料制备头孢匹胺脂质体的试验中，发现这样得到的头孢匹胺脂质体在高温40℃、相对湿度75％±5％加速试验下，头孢匹胺脂质体的稳定性和包封率不佳，因此应用常规磷脂和胆固醇的脂质体基质无法得到合格的头孢匹胺脂质体。
不受理论限制，本发明人出乎意料地发现了将磷脂、胆固醇和吐温80三种材料进行组合的脂质体基质，具有意想不到的效果，从而获得了稳定性优良的头孢匹胺脂质体，其具有良好的制剂稳定性，冻干过程中脂质体不会因脱水、融合、冰晶生成等发生破裂，水化复溶之后，脂质体同样保持良好的包封率。
本发明的技术方案如下 一种头孢匹胺/苯甲酸钠/碳酸氢钠药物组合物脂质体注射剂，其组分包括头孢匹胺、苯甲酸钠、碳酸氢钠、脂质体基质、渗透压调节剂、抗氧化剂。
根据上面所述，其中脂质体基质选择为磷脂、胆固醇和吐温80的混合物，其中磷脂可以选择为大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂、氢化大豆卵磷脂、氢化蛋黄卵磷脂，最优化选择为大豆卵磷脂和蛋黄卵磷脂。
根据上面所述，其中所述的脂质体基质中磷脂、胆固醇与吐温80的质量之比1～3∶2∶1，优选为2∶2∶1。
根据上面所述，其中头孢匹胺与脂质体基质质量之比为1∶3～15，优选为1∶4～8。
根据上面所述，其中头孢匹胺、苯甲酸钠、碳酸氢钠的质量之比为1∶0.05～0.06∶0.6～0.8，优选为1∶0.054∶0.68。
据上面所述，其中渗透压调节剂选自氯化钠、葡萄糖、甘油、甘露醇、丙二醇、木糖醇、山梨醇中的一种或几种，最优化选择为葡萄糖、氯化钠、甘露醇。
据上面所述，其中抗氧化剂可以选择为维生素E、亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、硫脲、焦亚硫酸钠、L-半胱氨酸、硫脲、甲醛合亚硫酸氢钠、抗坏血酸棕榈酸酯、叔丁基对羟基茴香醚中的一种或几种，最优化选择为硫脲、维生素E、亚硫酸钠。
本发明还提供了一种种头孢匹胺/苯甲酸钠/碳酸氢钠药物组合物脂质体注射剂的制备方法，具体步骤为 (1)将磷脂、胆固醇、吐温80和抗氧化剂溶于适量有机溶剂中，混合均匀，于旋转薄膜蒸发器上减压除去有机溶剂，制得磷脂膜； (2)向制得的磷脂膜中加入缓冲溶液，振摇，搅拌使磷脂膜完全水化，高速匀质乳化，微孔滤膜过滤，制得空白脂质体混悬液； (3)将头孢匹胺溶于水，微孔滤膜过滤，滤液加入空白脂质体混悬液中，在保温下搅拌，再加入渗透压调节剂，搅拌使其溶解，然后转移至冻干机内进行冷冻干燥，制的头孢匹胺脂质体； (4)将头孢匹胺脂质体粉碎过80目筛，和苯甲酸钠、碳酸氢钠混合均匀无菌分装，获得了头孢匹胺/苯甲酸钠/碳酸氢钠药物组合物脂质体注射剂。
根据上述所述的制备方法，其中所述的有机溶剂可以选择为甲醇、乙醇、异丙醇、乙醚、丙酮、正己醇、乙酸乙酯、氯仿、苯甲醇中的一种或几种，优选为甲醇和异丙醇。
根据上述所述的制备方法，其中所述的缓冲溶液可以选择为磷酸盐缓冲液、枸橼盐缓冲液、硼酸盐缓冲液、碳酸盐缓冲液、醋酸盐缓冲液中的一种或几种，缓冲溶液的pH值为5.6-6.8，优选为pH值为6.0的磷酸二氢钠-磷酸氢二钠缓冲溶液。
本发明所具有的优点总结如下 1.生产工艺所涉及的设备简单常见，易于实施；所涉及到的原辅料生产工艺成熟，价格廉价易得。
2.本发明所制备的脂质体注射制剂，性质稳定，复溶性好，不仅方便了临床的使用，还确保了用药的安全性。
3.本发明所制备的药品中由于脂质体的载体和包裹作用，改善了头孢匹胺的药学性质，提高生物利用度，使得药品的效价更高。
现有技术报道了头孢匹胺和有关物质的含量测定，例如参见赵艳霞，HPLC法测定注射用头孢匹胺钠的含量和有关物质，《齐鲁药事》，2007，26(2)82-84，其中应用高效液相色谱法，可有效地控制注射用头孢匹胺钠质量，并可检测包含5-巯基-1-甲基-1H-四唑的有关物质。
对本发明所制备的样品参照中国药典(2005版)，进行了影响因素、加速试验考察，统计结果显示，各项检测指标均符合规定。在与上市样品做比较时，更是体现了本品的优越性。
对本发明所制备的样品进行急性毒理、异常毒理和热源、微生物限度检查各项检测指标均符合规定，证明了本品的安全性。
对本发明所制备的脂质体进行电镜观察，结果显示型状规则，包裹率较高，对残留有机溶剂进行检测，符合要求，说明了本发明的制备工艺的可行性。
具体实施例方式 实施例1 处方(规格0.1g) 头孢匹胺10g 苯甲酸钠0.54g 碳酸氢钠6.8g 大豆卵磷脂 16g 胆固醇 16g 吐温80 8g 葡萄糖 18g 维生素E 7g 制备工艺 (1)将16g大豆卵磷脂、16g胆固醇、7g维生素E和8g吐温80溶于200ml甲醇中，混合均匀，于旋转薄膜蒸发器上减压除去有机溶剂，制得磷脂膜； (2)向制得的磷脂膜中加入200mlpH值为6.0的磷酸二氢钠-磷酸氢二钠缓冲溶液，振摇，搅拌使磷脂膜完全水化，高速匀质乳化，微孔滤膜过滤，制得空白脂质体混悬液； (3)将10g头孢匹胺溶于100ml注射用水，微孔滤膜过滤，滤液加入空白脂质体混悬液中，在保温下搅拌，再加入18g葡萄糖，搅拌使其溶解，然后转移至冻干机内进行冷冻干燥，制的头孢匹胺脂质体； (4)将头孢匹胺脂质体粉碎过80目筛，和0.54g苯甲酸钠、6.8g碳酸氢钠混合均匀无菌分装，获得了头孢匹胺/苯甲酸钠/碳酸氢钠药物组合物脂质体注射剂。
实施例2 处方(规格0.2g) 头孢匹胺20g 苯甲酸钠1.2g 碳酸氢钠12g 蛋黄卵磷脂 60g 胆固醇 40g 吐温80 20g 氯化钠 22g 亚硫酸钠6g 制备工艺 (1)将60g蛋黄卵磷脂、40g胆固醇、6g亚硫酸钠和20g吐温80溶于400ml异丙醇中，混合均匀，于旋转薄膜蒸发器上减压除去有机溶剂，制得磷脂膜； (2)向制得的磷脂膜中加入300mlpH值为6.2的枸橼酸-枸橼酸钠缓冲溶液，振摇，搅拌使磷脂膜完全水化，高速匀质乳化，微孔滤膜过滤，制得空白脂质体混悬液； (3)将20g头孢匹胺溶于200ml注射用水，微孔滤膜过滤，滤液加入空白脂质体混悬液中，在保温下搅拌，再加入22g氯化钠，搅拌使其溶解，然后转移至冻干机内进行冷冻干燥，制的头孢匹胺脂质体； (4)将头孢匹胺脂质体粉碎过80目筛，和1.2g苯甲酸钠、12g碳酸氢钠混合均匀无菌分装，获得了头孢匹胺/苯甲酸钠/碳酸氢钠药物组合物脂质体注射剂。
实施例3 处方(规格0.05g) 头孢匹胺5g 苯甲酸钠0.25g 碳酸氢钠4g 蛋黄卵磷脂 10g 胆固醇 20g 吐温80 10g 甘露醇 34g 硫脲10g 制备工艺 (1)将10g蛋黄卵磷脂、20g胆固醇、10g硫脲和10g吐温80溶于600ml异丙醇中，混合均匀，于旋转薄膜蒸发器上减压除去有机溶剂，制得磷脂膜； (2)向制得的磷脂膜中加入500mlpH值5.8的磷酸二氢钠-磷酸氢二钠缓冲溶液，振摇，搅拌使磷脂膜完全水化，高速匀质乳化，微孔滤膜过滤，制得空白脂质体混悬液； (3)将5g头孢匹胺溶于100ml注射用水，微孔滤膜过滤，滤液加入空白脂质体混悬液中，在保温下搅拌，再加入34g甘露醇，搅拌使其溶解，然后转移至冻干机内进行冷冻干燥，制的头孢匹胺脂质体； (4)将头孢匹胺脂质体粉碎过80目筛，和0.25g苯甲酸钠、4g碳酸氢钠混合均匀无菌分装，获得了头孢匹胺/苯甲酸钠/碳酸氢钠药物组合物脂质体注射剂。
试验例1 将以上实施例中所制备的三批样品和购于吉林省辉南长龙生化药业股份有限公司生产的批号为20080216的注射用头孢匹胺样品进行影响因素、加速试验考察。有关物质和含量的测定可采用本领域熟知的常规技术，例如HPLC进行。
试验检测结果统计制备表格如下 表1 影响因素结果
表2 加速试验结果
以上试验结果显示，在加速6个月上市样品的澄明度已不符合规定，且上市样品的酸度、含量和有关物质发生较大的变化，本发明实施例制备的样品没有明显变化。说明了本发明脂质体的包裹大大稳定了主药的性质，提高了药效和生物利用度，用药安全性更高。
试验例2脂质体的稳定性考察 1、脂质体制备 处方 头孢匹胺 10g 大豆卵磷脂 16g 胆固醇 16g 吐温80 8g 葡萄糖 18g 维生素E7g 制备工艺 (1)将16g大豆卵磷脂、16g胆固醇、7g维生素E和8g吐温80溶于200ml甲醇中，混合均匀，于旋转薄膜蒸发器上减压除去有机溶剂，制得磷脂膜； (2)向制得的磷脂膜中加入200mlpH值为6.0的磷酸二氢钠-磷酸氢二钠缓冲溶液，振摇，搅拌使磷脂膜完全水化，高速匀质乳化，微孔滤膜过滤，制得空白脂质体混悬液； (3)将10g头孢匹胺溶于100ml注射用水，微孔滤膜过滤，滤液加入空白脂质体混悬液中，在保温下搅拌，再加入18g葡萄糖，搅拌使其溶解，然后转移至冻干机内进行冷冻干燥，制的头孢匹胺脂质体。
2、取本试验例中所制备的脂质体，分别溶解在适量0.9％氯化钠注射液、5％葡萄糖注射液中，获得了1.0mg/ml的混悬溶液。定时取样，对脂质体的粒径和包封率进行检测，同时用显微镜对脂质体中药物的析出情况进行考察，统计结果，如下表 表3 0.9％氯化钠注射液中头孢匹胺脂质体稳定性考察结果
表4 5％葡萄糖注射液中头孢匹胺脂质体稳定性考察结果
以上两组统计结果清晰的反映出了本发明所制备的头孢匹胺脂质体包封率较高，且在0.9％氯化钠和5％葡萄糖注射液中稳定。说明了磷脂、胆固醇和吐温80三种材料进行组合的脂质体基质，意外地具有令人满意的技术效果。为了进一步说明，类似地，还可以制备以下头孢匹胺的脂质体 处方 头孢匹胺 10g 蛋黄卵磷脂18g 胆固醇18g 吐温809g 甘露醇34g 硫脲 10g 制备工艺 (1)将18g蛋黄卵磷脂、18g胆固醇、10g硫脲和9g吐温80溶于600ml异丙醇中，混合均匀，于旋转薄膜蒸发器上减压除去有机溶剂，制得磷脂膜； (2)向制得的磷脂膜中加入500mlpH值为6.1的磷酸二氢钠-磷酸氢二钠缓冲溶液，振摇，搅拌使磷脂膜完全水化，高速匀质乳化，微孔滤膜过滤，制得空白脂质体混悬液； (3)将10g头孢匹胺溶于100ml注射用水，微孔滤膜过滤，滤液加入空白脂质体混悬液中，在保温下搅拌，再加入34g甘露醇，搅拌使其溶解，然后转移至冻干机内进行冷冻干燥，制的头孢匹胺脂质体。
并如上进行脂质体的稳定性考察，得到试验例2相同的结果，头孢匹胺脂质体包封率高，且在0.9％氯化钠和5％葡萄糖注射液中稳定。
应该理解，虽然本发明结合实例进行了详细的说明，但上述说明旨在举例说明，而不以任何方式限制其发明内容。相信不需要进一步阐述，本领域的技术人员可以基于本文的说明最大程度地利用本发明，并可在权利要求范围内进行修改或修饰。本文引用的所有参考文献，在此都将明确地以其整体引入作为参考。
权利要求
1.一种头孢匹胺/苯甲酸钠/碳酸氢钠药物组合物脂质体注射剂，其特征在于其组分包括头孢匹胺、苯甲酸钠、碳酸氢钠、脂质体基质、渗透压调节剂、抗氧化剂，所述脂质体基质为磷脂、胆固醇和吐温80的混合物。
2.根据权利要求1所述头孢匹胺/苯甲酸钠/碳酸氢钠药物组合物脂质体注射剂，其中磷脂可以选择为大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂、氢化大豆卵磷脂、氢化蛋黄卵磷脂。
3.根据权利要求1-2所述头孢匹胺/苯甲酸钠/碳酸氢钠药物组合物脂质体注射剂，其特征在于所述的脂质体基质中磷脂、胆固醇与吐温80的质量之比1～3∶2∶1。
4.根据权利要求1-3所述头孢匹胺/苯甲酸钠/碳酸氢钠药物组合物脂质体注射剂，其特征在于头孢匹胺、苯甲酸钠、碳酸氢钠的质量之比为1∶0.05～0.06∶0.6～0.8。
5.根据权利要求1-4所述头孢匹胺/苯甲酸钠/碳酸氢钠药物组合物脂质体注射剂，其特征在于渗透压调节剂选自氯化钠、葡萄糖、甘油、甘露醇、丙二醇、木糖醇、山梨醇中的一种或几种。
6.根据权利要求1-5所述头孢匹胺/苯甲酸钠/碳酸氢钠药物组合物脂质体注射剂，其特征在于抗氧化剂可以选择为维生素E、亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、硫脲、焦亚硫酸钠、L-半胱氨酸、硫脲、甲醛合亚硫酸氢钠、抗坏血酸棕榈酸酯、叔丁基对羟基茴香醚中的一种或几种。
7.根据权利要求1-6所述头孢匹胺/苯甲酸钠/碳酸氢钠药物组合物脂质体注射剂，其特征在于具体的制备方法为
(1)将磷脂、胆固醇、吐温80和抗氧化剂溶于适量有机溶剂中，混合均匀，于旋转薄膜蒸发器上减压除去有机溶剂，制得磷脂膜；
(2)向制得的磷脂膜中加入缓冲溶液，振摇，搅拌使磷脂膜完全水化，高速匀质乳化，微孔滤膜过滤，制得空白脂质体混悬液；
(3)将头孢匹胺溶于水，微孔滤膜过滤，滤液加入空白脂质体混悬液中，在保温下搅拌，再加入渗透压调节剂，搅拌使其溶解，然后转移至冻干机内进行冷冻干燥，制的头孢匹胺脂质体；
(4)将头孢匹胺脂质体粉碎过80目筛，和苯甲酸钠、碳酸氢钠混合均匀无菌分装，获得了头孢匹胺/苯甲酸钠/碳酸氢钠药物组合物脂质体注射剂。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于所述的有机溶剂可以选择为甲醇、乙醇、异丙醇、乙醚、丙酮、正己醇、乙酸乙酯、氯仿、苯甲醇中的一种或几种。
9.根据权利要求7-8所述的方法，其特征在于所述的缓冲溶液可以选择为磷酸盐缓冲液、枸橼盐缓冲液、硼酸盐缓冲液、碳酸盐缓冲液、醋酸盐缓冲液中的一种或几种。
全文摘要
本发明公开了一种头孢匹胺/苯甲酸钠/碳酸氢钠药物组合物脂质体注射剂及其制法，所述头孢匹胺/苯甲酸钠/碳酸氢钠药物组合物脂质体注射剂包括头孢匹胺、苯甲酸钠、碳酸氢钠、脂质体基质、渗透压调节剂、抗氧化剂，所述脂质体基质为磷脂、胆固醇和吐温80的混合物。优选地，所述的脂质体基质中磷脂、胆固醇与吐温80的质量之比1～3∶2∶1，所述头孢匹胺与脂质体基质质量之比为1∶2～11，优选为1∶2～11，头孢匹胺、苯甲酸钠、碳酸氢钠的质量之比为1∶0.05～0.06∶0.6～0.8。
文档编号A61K31/546GK101766571SQ201010106379
公开日2010年7月7日 申请日期2010年2月5日 优先权日2010年2月5日
发明者王明 申请人:王明
技术领域：
本发明涉及了一种西药制剂，具体的说涉及到了一种头孢匹胺/苯甲酸钠/碳酸氢钠药物组合物脂质体注射剂，属于医药技术领域。
背景技术：
头孢匹胺，其化学名称为(6R，7R)-7-[(R)-2-(4-羟基-6-甲基-3-吡啶羰基氨基)-2-(对羟基苯基)乙酰氨基]-3-[[(1-甲基-1H-四唑-5-基)硫]甲基]-8-氧代-5-硫杂-1-氮杂双环[4，2，0]辛-2-烯-2-羧酸，分子式C25H24N807S2，分子量612.63，结构式为
头孢匹胺抗菌谱广，具有良好的药动学特征，对β-内酰胺酶稳定性好，对革兰氏阳性菌有很强的抗菌活性，对包括革兰氏阴性菌在内的细菌亦有广谱抗菌活性，具有完美的平衡性的抗菌谱。适用于由金黄色葡萄球菌属、链球菌属(除肠球菌外)、厌氧球菌属、厌氧链球菌属、大肠杆菌、柠檬酸杆菌属、克雷白氏杆菌属、肠杆菌属、变形杆菌属、摩根氏变形菌属、假单胞菌属、流感嗜血杆菌、不动杆菌、拟杆菌属引起的各种感染。
中国专利CN1552329A、CN1706387A、CN1823783A公开了一种简单无菌混合的头孢匹胺粉针制剂，其中CN1823783A公开了一种注射用头孢匹胺无菌混合粉针剂的制备方法，其步骤是，在一百级洁净区，相对湿度＜60％，将无菌头孢匹胺、无菌碳酸钠分别粉碎过100目筛；再在一百级洁净区，相对湿度＜60％条件下，先将头孢匹胺无菌分装到20ml的抗生素管制瓶中，按无水物计每瓶1.0g，再将碳酸钠分装到上述管制瓶中，按无水物计每瓶0.2g，加工基胶胶塞，压铝塑盖即得本发明。采用本发明制得的无菌分装产品，收率高，工艺损失少，产品的纯度接近原料药的纯度，制备过程降解少，纯度高。
中国专利CN 101317822A公开了一种头孢匹胺钠冻干粉针，其特征在于将苯甲酸钠、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠溶于注射用水中，再向上述溶液中加头孢匹胺酸；然后向上述头孢匹胺酸浑浊液中滴加4％氢氧化钠溶液，调节溶液的pH为6.5-7.3；加活性炭脱色30分钟，抽滤，滤液放入冻干机中进行冷冻干燥，将所得的头孢匹胺钠冻干产品在无菌车间按规格分装即可。
中国专利CN101332188A公开了一种采用超微粉碎技术制备头孢匹胺钠无菌粉末的方法，将头孢匹胺钠经超微粉碎机，通过气流粉碎技术，粉碎成粒径为通过1340目的超微细粉，再进行无菌分装，制得注射用无菌粉末。该方法只是改变了分装过程中的流动性差和复溶慢的缺点，在水溶液中同样会水解氧化，并没有完全改变稳定性差的问题。
上述专利均为传统的制备工艺制得，没有对头孢匹胺实施保护措施，稳定性差，不能满足有效期的质量要求。目前上市销售的头孢匹胺制剂有两种，一种是头孢匹胺和碳酸氢钠等混合分装，一种是直接用头孢匹胺钠原料分装或冻干制得，但是这两种制剂存在一共同特点就是稳定性差，因为头孢匹胺本身对光、热不稳定，长期放置会导致有关物质明显增大，影响了用药的安全性。
显然现有技术没有较好解决头孢匹胺的稳定性问题。因此，对质量优良的头孢匹胺/苯甲酸钠/碳酸氢钠药物组合物的制剂依然存在需求。本发明提供了一种稳定的头孢匹胺/苯甲酸钠/碳酸氢钠药物组合物的注射剂，通过对头孢匹胺进行脂质体包裹，大大提高了头孢匹胺的稳定性，解决了头孢匹胺稳定性差、有效期短的问题，获得了令人满意的技术效果，满足了市场需求。
脂质体(liposomes)最初是由英国学者Bangham和Standish将磷脂分散在水中进行电镜观察时发现的。磷脂分散在水中自然形成多层泡囊，每层均为脂质的双分子层；囊泡中央和各层之间被水相隔开，双分子层厚度约4nm，后来将这种类似生物膜结构的双分子小囊成为脂质体。
脂质体研究是当前一个十分活跃的领域，脂质体最早是指天然脂类化合物悬浮在水中形成的具有双层封闭结构的泡囊，现在也可以由人工合成的磷脂化合物来制备。20世纪60年代末Rahman等人首先将脂质体作为药物载体应用，近年来，随着生物技术的不断进展，脂质体制备工艺逐步完善，脂质体作用机制进一步阐明，加之脂质体适合体内降解、无毒性和无免疫原性，特别是大量试验数据证明脂质体作为药物载体可以提高药物治疗指数、降低药物毒性和减少药物副作用，并减少药物剂量等优点。然而脂质体普遍存在容易聚集、融合，导致包封药物泄漏，脂质体的不稳定已成为其制药工业的主要问题，因此需要优化脂质体处方，以获得稳定性优良的脂质体。
实际上，制药领域具有一般经验的技术人员清楚地知道在制备脂质体-药物复合物方面面临的种种困难，所有这些困难绝非现有的理论就可以预期解决的，要得到符合稳定性的药物脂质体需要克服许多难题。
制备脂质体注射剂常用的膜材料为磷脂和胆固醇，其中磷脂通常可选用天然磷脂和合成磷脂，所述天然磷脂为蛋黄卵磷脂、氢化蛋黄磷脂、蛋黄磷脂酰甘油、蛋黄磷脂酰丝氨酸、蛋黄磷脂酰肌醇、大豆卵磷脂、氢化大豆磷脂、大豆磷脂酰甘油、大豆磷脂酰丝氨酸、大豆磷脂酰肌醇中的一种或几种；所述合成磷脂为二油酰磷脂酰胆碱、二硬脂酸磷脂酰胆碱、二棕榈酰磷脂酰胆碱、二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱、二月桂酰磷脂酰胆碱、二油酰磷脂酰甘油、二硬脂酸磷脂酰甘油、二棕榈酰磷脂酰甘油、二肉豆蔻酰磷脂酰甘油、二月桂酰磷脂酰甘油中的一种或几种。
发明内容
针对目前上市的本品稳定性差和生物利用度低的缺点，本发明的目的在于提供一种头孢匹胺/苯甲酸钠/碳酸氢钠药物组合物脂质体注射剂，通过对头孢匹胺进行脂质体包裹以改变其药学性质，大大提高了头孢匹胺的稳定性，保证了用药的安全性。
为了制备，治疗优良的头孢匹胺脂质体，本发明人进行了大量的预试验，根据优化处方制备脂质体的实质性特点且为了方便描述，本文将制备头孢匹胺的空白脂质体的基本材料，定义为脂质体基质。
发明人在采用一般脂质体注射剂常用的磷脂和胆固醇为膜材料制备头孢匹胺脂质体的试验中，发现这样得到的头孢匹胺脂质体在高温40℃、相对湿度75％±5％加速试验下，头孢匹胺脂质体的稳定性和包封率不佳，因此应用常规磷脂和胆固醇的脂质体基质无法得到合格的头孢匹胺脂质体。
不受理论限制，本发明人出乎意料地发现了将磷脂、胆固醇和吐温80三种材料进行组合的脂质体基质，具有意想不到的效果，从而获得了稳定性优良的头孢匹胺脂质体，其具有良好的制剂稳定性，冻干过程中脂质体不会因脱水、融合、冰晶生成等发生破裂，水化复溶之后，脂质体同样保持良好的包封率。
本发明的技术方案如下 一种头孢匹胺/苯甲酸钠/碳酸氢钠药物组合物脂质体注射剂，其组分包括头孢匹胺、苯甲酸钠、碳酸氢钠、脂质体基质、渗透压调节剂、抗氧化剂。
根据上面所述，其中脂质体基质选择为磷脂、胆固醇和吐温80的混合物，其中磷脂可以选择为大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂、氢化大豆卵磷脂、氢化蛋黄卵磷脂，最优化选择为大豆卵磷脂和蛋黄卵磷脂。
根据上面所述，其中所述的脂质体基质中磷脂、胆固醇与吐温80的质量之比1～3∶2∶1，优选为2∶2∶1。
根据上面所述，其中头孢匹胺与脂质体基质质量之比为1∶3～15，优选为1∶4～8。
根据上面所述，其中头孢匹胺、苯甲酸钠、碳酸氢钠的质量之比为1∶0.05～0.06∶0.6～0.8，优选为1∶0.054∶0.68。
据上面所述，其中渗透压调节剂选自氯化钠、葡萄糖、甘油、甘露醇、丙二醇、木糖醇、山梨醇中的一种或几种，最优化选择为葡萄糖、氯化钠、甘露醇。
据上面所述，其中抗氧化剂可以选择为维生素E、亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、硫脲、焦亚硫酸钠、L-半胱氨酸、硫脲、甲醛合亚硫酸氢钠、抗坏血酸棕榈酸酯、叔丁基对羟基茴香醚中的一种或几种，最优化选择为硫脲、维生素E、亚硫酸钠。
本发明还提供了一种种头孢匹胺/苯甲酸钠/碳酸氢钠药物组合物脂质体注射剂的制备方法，具体步骤为 (1)将磷脂、胆固醇、吐温80和抗氧化剂溶于适量有机溶剂中，混合均匀，于旋转薄膜蒸发器上减压除去有机溶剂，制得磷脂膜； (2)向制得的磷脂膜中加入缓冲溶液，振摇，搅拌使磷脂膜完全水化，高速匀质乳化，微孔滤膜过滤，制得空白脂质体混悬液； (3)将头孢匹胺溶于水，微孔滤膜过滤，滤液加入空白脂质体混悬液中，在保温下搅拌，再加入渗透压调节剂，搅拌使其溶解，然后转移至冻干机内进行冷冻干燥，制的头孢匹胺脂质体； (4)将头孢匹胺脂质体粉碎过80目筛，和苯甲酸钠、碳酸氢钠混合均匀无菌分装，获得了头孢匹胺/苯甲酸钠/碳酸氢钠药物组合物脂质体注射剂。
根据上述所述的制备方法，其中所述的有机溶剂可以选择为甲醇、乙醇、异丙醇、乙醚、丙酮、正己醇、乙酸乙酯、氯仿、苯甲醇中的一种或几种，优选为甲醇和异丙醇。
根据上述所述的制备方法，其中所述的缓冲溶液可以选择为磷酸盐缓冲液、枸橼盐缓冲液、硼酸盐缓冲液、碳酸盐缓冲液、醋酸盐缓冲液中的一种或几种，缓冲溶液的pH值为5.6-6.8，优选为pH值为6.0的磷酸二氢钠-磷酸氢二钠缓冲溶液。
本发明所具有的优点总结如下 1.生产工艺所涉及的设备简单常见，易于实施；所涉及到的原辅料生产工艺成熟，价格廉价易得。
2.本发明所制备的脂质体注射制剂，性质稳定，复溶性好，不仅方便了临床的使用，还确保了用药的安全性。
3.本发明所制备的药品中由于脂质体的载体和包裹作用，改善了头孢匹胺的药学性质，提高生物利用度，使得药品的效价更高。
现有技术报道了头孢匹胺和有关物质的含量测定，例如参见赵艳霞，HPLC法测定注射用头孢匹胺钠的含量和有关物质，《齐鲁药事》，2007，26(2)82-84，其中应用高效液相色谱法，可有效地控制注射用头孢匹胺钠质量，并可检测包含5-巯基-1-甲基-1H-四唑的有关物质。
对本发明所制备的样品参照中国药典(2005版)，进行了影响因素、加速试验考察，统计结果显示，各项检测指标均符合规定。在与上市样品做比较时，更是体现了本品的优越性。
对本发明所制备的样品进行急性毒理、异常毒理和热源、微生物限度检查各项检测指标均符合规定，证明了本品的安全性。
对本发明所制备的脂质体进行电镜观察，结果显示型状规则，包裹率较高，对残留有机溶剂进行检测，符合要求，说明了本发明的制备工艺的可行性。
具体实施例方式 实施例1 处方(规格0.1g) 头孢匹胺10g 苯甲酸钠0.54g 碳酸氢钠6.8g 大豆卵磷脂 16g 胆固醇 16g 吐温80 8g 葡萄糖 18g 维生素E 7g 制备工艺 (1)将16g大豆卵磷脂、16g胆固醇、7g维生素E和8g吐温80溶于200ml甲醇中，混合均匀，于旋转薄膜蒸发器上减压除去有机溶剂，制得磷脂膜； (2)向制得的磷脂膜中加入200mlpH值为6.0的磷酸二氢钠-磷酸氢二钠缓冲溶液，振摇，搅拌使磷脂膜完全水化，高速匀质乳化，微孔滤膜过滤，制得空白脂质体混悬液； (3)将10g头孢匹胺溶于100ml注射用水，微孔滤膜过滤，滤液加入空白脂质体混悬液中，在保温下搅拌，再加入18g葡萄糖，搅拌使其溶解，然后转移至冻干机内进行冷冻干燥，制的头孢匹胺脂质体； (4)将头孢匹胺脂质体粉碎过80目筛，和0.54g苯甲酸钠、6.8g碳酸氢钠混合均匀无菌分装，获得了头孢匹胺/苯甲酸钠/碳酸氢钠药物组合物脂质体注射剂。
实施例2 处方(规格0.2g) 头孢匹胺20g 苯甲酸钠1.2g 碳酸氢钠12g 蛋黄卵磷脂 60g 胆固醇 40g 吐温80 20g 氯化钠 22g 亚硫酸钠6g 制备工艺 (1)将60g蛋黄卵磷脂、40g胆固醇、6g亚硫酸钠和20g吐温80溶于400ml异丙醇中，混合均匀，于旋转薄膜蒸发器上减压除去有机溶剂，制得磷脂膜； (2)向制得的磷脂膜中加入300mlpH值为6.2的枸橼酸-枸橼酸钠缓冲溶液，振摇，搅拌使磷脂膜完全水化，高速匀质乳化，微孔滤膜过滤，制得空白脂质体混悬液； (3)将20g头孢匹胺溶于200ml注射用水，微孔滤膜过滤，滤液加入空白脂质体混悬液中，在保温下搅拌，再加入22g氯化钠，搅拌使其溶解，然后转移至冻干机内进行冷冻干燥，制的头孢匹胺脂质体； (4)将头孢匹胺脂质体粉碎过80目筛，和1.2g苯甲酸钠、12g碳酸氢钠混合均匀无菌分装，获得了头孢匹胺/苯甲酸钠/碳酸氢钠药物组合物脂质体注射剂。
实施例3 处方(规格0.05g) 头孢匹胺5g 苯甲酸钠0.25g 碳酸氢钠4g 蛋黄卵磷脂 10g 胆固醇 20g 吐温80 10g 甘露醇 34g 硫脲10g 制备工艺 (1)将10g蛋黄卵磷脂、20g胆固醇、10g硫脲和10g吐温80溶于600ml异丙醇中，混合均匀，于旋转薄膜蒸发器上减压除去有机溶剂，制得磷脂膜； (2)向制得的磷脂膜中加入500mlpH值5.8的磷酸二氢钠-磷酸氢二钠缓冲溶液，振摇，搅拌使磷脂膜完全水化，高速匀质乳化，微孔滤膜过滤，制得空白脂质体混悬液； (3)将5g头孢匹胺溶于100ml注射用水，微孔滤膜过滤，滤液加入空白脂质体混悬液中，在保温下搅拌，再加入34g甘露醇，搅拌使其溶解，然后转移至冻干机内进行冷冻干燥，制的头孢匹胺脂质体； (4)将头孢匹胺脂质体粉碎过80目筛，和0.25g苯甲酸钠、4g碳酸氢钠混合均匀无菌分装，获得了头孢匹胺/苯甲酸钠/碳酸氢钠药物组合物脂质体注射剂。
试验例1 将以上实施例中所制备的三批样品和购于吉林省辉南长龙生化药业股份有限公司生产的批号为20080216的注射用头孢匹胺样品进行影响因素、加速试验考察。有关物质和含量的测定可采用本领域熟知的常规技术，例如HPLC进行。
试验检测结果统计制备表格如下 表1 影响因素结果
表2 加速试验结果
以上试验结果显示，在加速6个月上市样品的澄明度已不符合规定，且上市样品的酸度、含量和有关物质发生较大的变化，本发明实施例制备的样品没有明显变化。说明了本发明脂质体的包裹大大稳定了主药的性质，提高了药效和生物利用度，用药安全性更高。
试验例2脂质体的稳定性考察 1、脂质体制备 处方 头孢匹胺 10g 大豆卵磷脂 16g 胆固醇 16g 吐温80 8g 葡萄糖 18g 维生素E7g 制备工艺 (1)将16g大豆卵磷脂、16g胆固醇、7g维生素E和8g吐温80溶于200ml甲醇中，混合均匀，于旋转薄膜蒸发器上减压除去有机溶剂，制得磷脂膜； (2)向制得的磷脂膜中加入200mlpH值为6.0的磷酸二氢钠-磷酸氢二钠缓冲溶液，振摇，搅拌使磷脂膜完全水化，高速匀质乳化，微孔滤膜过滤，制得空白脂质体混悬液； (3)将10g头孢匹胺溶于100ml注射用水，微孔滤膜过滤，滤液加入空白脂质体混悬液中，在保温下搅拌，再加入18g葡萄糖，搅拌使其溶解，然后转移至冻干机内进行冷冻干燥，制的头孢匹胺脂质体。
2、取本试验例中所制备的脂质体，分别溶解在适量0.9％氯化钠注射液、5％葡萄糖注射液中，获得了1.0mg/ml的混悬溶液。定时取样，对脂质体的粒径和包封率进行检测，同时用显微镜对脂质体中药物的析出情况进行考察，统计结果，如下表 表3 0.9％氯化钠注射液中头孢匹胺脂质体稳定性考察结果
表4 5％葡萄糖注射液中头孢匹胺脂质体稳定性考察结果
以上两组统计结果清晰的反映出了本发明所制备的头孢匹胺脂质体包封率较高，且在0.9％氯化钠和5％葡萄糖注射液中稳定。说明了磷脂、胆固醇和吐温80三种材料进行组合的脂质体基质，意外地具有令人满意的技术效果。为了进一步说明，类似地，还可以制备以下头孢匹胺的脂质体 处方 头孢匹胺 10g 蛋黄卵磷脂18g 胆固醇18g 吐温809g 甘露醇34g 硫脲 10g 制备工艺 (1)将18g蛋黄卵磷脂、18g胆固醇、10g硫脲和9g吐温80溶于600ml异丙醇中，混合均匀，于旋转薄膜蒸发器上减压除去有机溶剂，制得磷脂膜； (2)向制得的磷脂膜中加入500mlpH值为6.1的磷酸二氢钠-磷酸氢二钠缓冲溶液，振摇，搅拌使磷脂膜完全水化，高速匀质乳化，微孔滤膜过滤，制得空白脂质体混悬液； (3)将10g头孢匹胺溶于100ml注射用水，微孔滤膜过滤，滤液加入空白脂质体混悬液中，在保温下搅拌，再加入34g甘露醇，搅拌使其溶解，然后转移至冻干机内进行冷冻干燥，制的头孢匹胺脂质体。
并如上进行脂质体的稳定性考察，得到试验例2相同的结果，头孢匹胺脂质体包封率高，且在0.9％氯化钠和5％葡萄糖注射液中稳定。
应该理解，虽然本发明结合实例进行了详细的说明，但上述说明旨在举例说明，而不以任何方式限制其发明内容。相信不需要进一步阐述，本领域的技术人员可以基于本文的说明最大程度地利用本发明，并可在权利要求范围内进行修改或修饰。本文引用的所有参考文献，在此都将明确地以其整体引入作为参考。
权利要求
1.一种头孢匹胺/苯甲酸钠/碳酸氢钠药物组合物脂质体注射剂，其特征在于其组分包括头孢匹胺、苯甲酸钠、碳酸氢钠、脂质体基质、渗透压调节剂、抗氧化剂，所述脂质体基质为磷脂、胆固醇和吐温80的混合物。
2.根据权利要求1所述头孢匹胺/苯甲酸钠/碳酸氢钠药物组合物脂质体注射剂，其中磷脂可以选择为大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂、氢化大豆卵磷脂、氢化蛋黄卵磷脂。
3.根据权利要求1-2所述头孢匹胺/苯甲酸钠/碳酸氢钠药物组合物脂质体注射剂，其特征在于所述的脂质体基质中磷脂、胆固醇与吐温80的质量之比1～3∶2∶1。
4.根据权利要求1-3所述头孢匹胺/苯甲酸钠/碳酸氢钠药物组合物脂质体注射剂，其特征在于头孢匹胺、苯甲酸钠、碳酸氢钠的质量之比为1∶0.05～0.06∶0.6～0.8。
5.根据权利要求1-4所述头孢匹胺/苯甲酸钠/碳酸氢钠药物组合物脂质体注射剂，其特征在于渗透压调节剂选自氯化钠、葡萄糖、甘油、甘露醇、丙二醇、木糖醇、山梨醇中的一种或几种。
6.根据权利要求1-5所述头孢匹胺/苯甲酸钠/碳酸氢钠药物组合物脂质体注射剂，其特征在于抗氧化剂可以选择为维生素E、亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、硫脲、焦亚硫酸钠、L-半胱氨酸、硫脲、甲醛合亚硫酸氢钠、抗坏血酸棕榈酸酯、叔丁基对羟基茴香醚中的一种或几种。
7.根据权利要求1-6所述头孢匹胺/苯甲酸钠/碳酸氢钠药物组合物脂质体注射剂，其特征在于具体的制备方法为
(1)将磷脂、胆固醇、吐温80和抗氧化剂溶于适量有机溶剂中，混合均匀，于旋转薄膜蒸发器上减压除去有机溶剂，制得磷脂膜；
(2)向制得的磷脂膜中加入缓冲溶液，振摇，搅拌使磷脂膜完全水化，高速匀质乳化，微孔滤膜过滤，制得空白脂质体混悬液；
(3)将头孢匹胺溶于水，微孔滤膜过滤，滤液加入空白脂质体混悬液中，在保温下搅拌，再加入渗透压调节剂，搅拌使其溶解，然后转移至冻干机内进行冷冻干燥，制的头孢匹胺脂质体；
(4)将头孢匹胺脂质体粉碎过80目筛，和苯甲酸钠、碳酸氢钠混合均匀无菌分装，获得了头孢匹胺/苯甲酸钠/碳酸氢钠药物组合物脂质体注射剂。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于所述的有机溶剂可以选择为甲醇、乙醇、异丙醇、乙醚、丙酮、正己醇、乙酸乙酯、氯仿、苯甲醇中的一种或几种。
9.根据权利要求7-8所述的方法，其特征在于所述的缓冲溶液可以选择为磷酸盐缓冲液、枸橼盐缓冲液、硼酸盐缓冲液、碳酸盐缓冲液、醋酸盐缓冲液中的一种或几种。
全文摘要
本发明公开了一种头孢匹胺/苯甲酸钠/碳酸氢钠药物组合物脂质体注射剂及其制法，所述头孢匹胺/苯甲酸钠/碳酸氢钠药物组合物脂质体注射剂包括头孢匹胺、苯甲酸钠、碳酸氢钠、脂质体基质、渗透压调节剂、抗氧化剂，所述脂质体基质为磷脂、胆固醇和吐温80的混合物。优选地，所述的脂质体基质中磷脂、胆固醇与吐温80的质量之比1～3∶2∶1，所述头孢匹胺与脂质体基质质量之比为1∶2～11，优选为1∶2～11，头孢匹胺、苯甲酸钠、碳酸氢钠的质量之比为1∶0.05～0.06∶0.6～0.8。
文档编号A61K31/546GK101766571SQ201010106379
公开日2010年7月7日 申请日期2010年2月5日 优先权日2010年2月5日
发明者王明 申请人:王明
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