一种能同时富集丹参脂溶性与水溶性有效部位的提取方法
专利名称：一种能同时富集丹参脂溶性与水溶性有效部位的提取方法
技术领域：
本发明涉及一种丹参的提取方法。
背景技术：
丹参(Salvia miltionrrhiza Bge)为双子叶唇形科植物，以根入药，主要有祛瘀止痛、活血调经、养血安神之功效，被广泛应用于心血管疾病的治疗。
丹参的主要活性成分包括脂溶性的丹参酮类和水溶性的丹参酚酸类，其中丹参酮类以丹参酮IIA为代表，具有良好的抗菌消炎、抗氧化、抗肿瘤等作用；丹参酚酸类主要以丹参酚酸B为代表，具有抗血小板聚集、抗血栓形成的作用，对脂质过氧化引起的细胞膜损伤有明显保护作用。这两种主要活性成分在治疗心血管疾病时起协同作用，一般被制成片剂、滴丸等。
目前生产上丹参制剂的提取工艺部分是基于2005年版中国药典规定的复方丹参片的制法上加以改进。如艾相平等人在每次提取前都用溶剂浸泡1小时(中国药事，2009，23(7)694-695)；如黄琳等人则改用70％乙醇先浸泡6小时，再分别提取2次，每次2小时(中成药，2006，28(9)1385-1387)。这些制备工艺都经过多次提取，工艺繁琐、耗时长。也有是用同时含有丹参酮与丹参酚酸的提取物按要求进行制剂。现有文献与专利报道的丹参提取物是分别得到丹参酮与丹参酚酸固体物后再进行混合勾兑配制；而且纯化工艺主要采用醇沉法、絮凝法、大孔树脂法、溶剂萃取法、超临界二氧化碳萃取法等一种或多种方法联合应用分别对酚酸类与丹参酮类进行纯化，这些方法成本较高、设备投入大、工艺繁琐、生产周期长，常引起溶剂残留问题，容易在纯化过程中造成有效成分的破坏或损失，特别是丹参酚酸类由于性质不稳定、易于氧化，常在纯化过程中分解。如夏炎等人先用超临界二氧化碳萃取工艺提取丹参酮IIA后，残渣再用水和有机溶剂的混合液提取两次得到丹参酚酸B(公开号为CN1951953A)；如石任兵等人则先用体积分数50％～90％乙醇先提取总丹参酮，残渣再用体积分数0～50％乙醇提取总丹酚酸，分别经过大孔树脂法纯化后再合并(公开号为CN101073599A)。
因此，目前报道纯化丹参提取物的方法均不同程度存在成本高、设备投入大、工艺繁琐、生产周期长、溶剂残留、有效成分损失等问题，均难实现大规模的产业化生产。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术存在的不足，提供一种提取效率高，能耗低，工艺简单，能同时富集丹参脂溶性与水溶性有效部位的提取方法。
本发明的提取方法包括以下步骤 (1)将丹参药材粉碎成细粉； (2)药材细粉加入水，在低于25℃下搅拌提取，提取过程控制提取液pH值，过滤，弃去滤液；丹参药材中存在三大类成分丹参多糖类，丹参酚酸类，丹参酮类。据现有报道，丹参药材祛瘀止痛、活血调经、养血安神的成分为酚酸类与丹参酮类，所以在丹参治疗心脑血管疾病制剂中，丹参多糖一般视为杂质成分需除去。由于丹参多糖类，丹参酚酸类均为水溶性成分，酚酸类成分在低温酸性水溶液中受pKa值影响以酸结合态形式存在，溶解度变小，在一定时间内丹参多糖优先溶出，本发明利用此原理成功纯化丹参活性成分； (3)残渣加入C1～C4低级醇或C1～C4低级醇水溶液，搅拌提取，过滤，滤液浓缩； (4)浓缩液干燥，粉碎，即得提取物。
在上述提取方法中，所述步骤(1)中细粉是采用生化的方法或机械破碎而成。
在上述提取方法中，所述步骤(2)中加入的水量是药材的1～30倍体积，在低于25℃下搅拌提取10～300min，提取过程控制提取液pH＝1～7。最佳的条件是加入的水量是药材的2～8倍体积，在5～20℃下搅拌提取10～40min，提取1次，提取过程控制提取液pH＝2～5。
在上述提取方法中，所述步骤(2)中的控制提取液pH值的酸溶液优选为盐酸、磷酸、硫酸、草酸中的一种或两种以上的混合酸。
在上述提取方法中，所述C1～C4低级醇水溶液为体积百分比50％～95％甲醇水溶液或体积百分比50％～95％乙醇水溶液。
在上述提取方法中，所述步骤(3)中提取条件为加入残渣5～40倍体积量的溶剂搅拌提取10～300min。
在上述提取方法中，所述步骤(3)中提取条件为加入残渣10～20倍体积量的溶剂在40～90℃下搅拌提取30～90min，提取1次。
在上述提取方法中，所述步骤(4)的提取物加入辅料或不加辅料直接制成制剂。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果 1.中药有效成分的溶出速度与药物粉碎程度有关，用破碎技术粉碎而成的细粉对有效成分破坏或损失少，同时又能最大限度的快速溶出有效成份。本发明采用破碎技术粉碎原药材，增加了药材与溶剂的接触面积，提高了有效成分的溶出率，提高了药物的提取效率。
2.本发明在丹参有效成分提取前采用低温除杂法，采用水在低温下一步到位除杂，纯化方式简单，操作时间短，不会造成纯化过程中破坏或改变有效成分问题。
3.本发明采用低级醇为溶剂进行提取，能高倍富集丹参药材中的有效成分，所得提取物中丹参酮与丹参酚酸的百分含量是原药材的4～10倍。最大限度的保护了丹参酚酸与丹参酮的稳定性。本发明无需其它有机溶剂，真正做到无污染、安全、绿色生产。
4.本发明除用到传统的提取、浓缩、干燥设备外，无需其它设备，简单可行。
具体实施例方式 以下实施例中所用的丹参药材中丹参酚酸类、丹参酮类含量见表1。
下述醇的浓度为体积百分比浓度。
实施例1 取破碎的丹参药材细粉1000克加入2倍体积量的水，于5℃搅拌提取10min，提取过程用盐酸控制提取液pH在2.0～2.5，过滤，药渣加入药材10倍体积量的80％乙醇于60℃提取30min，过滤，滤液减压浓缩、干燥、粉碎即得丹参提取物。
丹参酮类含量测定方法高效液相色谱法测定丹参酮中丹参酮I、丹参酮IIA、隐丹参酮含量；色谱条件参照2005版中国药典一部52页丹参中丹参酮含测项。
丹参酚酸类含量测定方法高效液相色谱法测定丹参酚酸中丹参素、原儿茶醛、原儿茶酸、咖啡酸、丹参酚酸A、丹参酚酸B；色谱条件为流动相A(乙腈)，B(2％甲酸水)0～10min 0.7ml/min A15％，B85％10～20min 0.7～1ml/min A15～20％，B85～80％20～30min 1ml/min A20％，B80％30～40min 1ml/min A20～30％，B80～70％ 色谱柱Kromasil C185μ 结果见表1。
实施例2 同实施例1，所不同的是药材加入药材5倍体积量的水，于10℃搅拌提取30min。结果见表1。
实施例3 同实施例1，所不同的是药材加入药材8倍体积量的水，于20℃搅拌提取40min。结果见表1。
实施例4 同实施例2，所不同的是加入药材8倍体积量的水，控制提取液pH值为磷酸，pH值控制为4.5～5.0，药渣加入药材20倍体积量的70％乙醇。结果见表1。
实施例5 同实施例2，所不同的是加入6倍体积量的水后于20℃搅拌提取40min，控制提取液pH值为硫酸。结果见表1。
实施例6 同实施例4，所不同的是控制提取液pH值为草酸，药渣加入15倍体积量的70％甲醇于90℃提取90min。结果见表1。
实施例7 同实施例2，所不同的是提取过程用盐酸控制提取液pH在2.5～3.0，药渣加入50％的乙醇于40℃提取80min。结果见表1。
实施例8 同实施例7，所不同的是药材加入药材7倍体积量的水，于15℃搅拌提取40min，药渣加入95％的乙醇提取60min。结果见表1。
实施例9 同实施例4，所不同的是pH值控制为2.2～2.7，药渣加入80％的甲醇在60℃下提取90min。结果见表1。
实施例10 同实施例2，所不同的是提取过程控制提取液pH在3.0～3.5，药渣加入20倍体积量的70％乙醇在85℃下提取90min。结果见表1。
实施例11 同实施例4，所不同的是提取过程控制提取液pH在3.5～4.0，药渣加入18倍体积量的75％乙醇在85℃下提取90min。结果见表1。
实施例12 同实施例2，所不同的是药材量为300kg。结果见表1。
实施例13 同实施例9，所不同的是药材量为150kg。结果见表1。
表1实施例含量测定结果(单位％)
权利要求
1.一种能同时富集丹参脂溶性与水溶性有效部位的提取方法，其特征在于包括以下步骤
(1)将丹参药材粉碎成细粉；
(2)药材细粉加入水，在低于25℃下搅拌提取，提取过程控制提取液pH值，过滤，弃去滤液；
(3)残渣加入C1～C4低级醇或C1～C4低级醇水溶液，搅拌提取，过滤，滤液浓缩；
(4)浓缩液干燥，粉碎，即得提取物。
2.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于所述步骤(1)中细粉是采用生化的方法或机械破碎而成。
3.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于所述步骤(2)中，加入的水量是药材的1～30倍体积，在低于25℃下搅拌提取10～300min，提取过程控制提取液pH＝1～7。
4.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于所述步骤(2)中，加入的水量是药材的2～8倍体积，在5～20℃下搅拌提取10～40min，提取1次，提取过程控制提取液pH＝2～5。
5.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于所述步骤(2)中的控制提取液pH值的酸为盐酸、磷酸、硫酸、草酸中的一种或两种以上的混合酸。
6.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于所述C1～C4低级醇水溶液为体积百分比50％～95％甲醇水溶液或体积百分比50％～95％乙醇水溶液。
7.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于所述步骤(3)中提取条件为加入残渣5～40倍体积量的C1～C4低级醇或C1～C4低级醇水溶液搅拌提取10～300min。
8.根据权利要求7所述的提取方法，其特征在于所述步骤(3)中提取条件为加入残渣10～20倍体积量的C1～C4低级醇或C1～C4低级醇水溶液在40～90℃下搅拌提取30～90min，提取1次。
9.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于所述步骤(4)的提取物加入辅料或不加辅料直接制成制剂。
全文摘要
本发明公开了一种能同时富集丹参脂溶性与水溶性有效部位的提取方法，包括(1)将丹参药材粉碎成细粉；(2)药材细粉加入水，在低于25℃下搅拌提取，控制pH值，过滤，弃去滤液；(3)残渣加入C1～C4的低级醇，搅拌提取，过滤，浓缩；(4)浓缩液干燥，粉碎，即得提取物。本发明采用破碎技术粉碎原药材，增加了药材与溶剂的接触面积，提高了有效成分的溶出率和药物提取效率。本发明在丹参有效成分提取前采用低温除杂法，纯化简单，时间短，纯化过程中不会破坏有效成分。本发明采用低级醇为溶剂进行提取，能高倍富集丹参药材中的有效成分，所得提取物中丹参酮与丹参酚酸的百分含量是原药材的4～10倍。最大限度的保护了丹参酚酸与丹参酮的稳定性。
文档编号A61K36/185GK101757105SQ201010117050
公开日2010年6月30日 申请日期2010年2月23日 优先权日2010年2月23日
发明者黄裕, 周珊, 李金华, 周锦珂, 葛发欢, 黄展平, 汪涛, 全一思 申请人:广州汉方现代中药研究开发有限公司
技术领域：
本发明涉及一种丹参的提取方法。
背景技术：
丹参(Salvia miltionrrhiza Bge)为双子叶唇形科植物，以根入药，主要有祛瘀止痛、活血调经、养血安神之功效，被广泛应用于心血管疾病的治疗。
丹参的主要活性成分包括脂溶性的丹参酮类和水溶性的丹参酚酸类，其中丹参酮类以丹参酮IIA为代表，具有良好的抗菌消炎、抗氧化、抗肿瘤等作用；丹参酚酸类主要以丹参酚酸B为代表，具有抗血小板聚集、抗血栓形成的作用，对脂质过氧化引起的细胞膜损伤有明显保护作用。这两种主要活性成分在治疗心血管疾病时起协同作用，一般被制成片剂、滴丸等。
目前生产上丹参制剂的提取工艺部分是基于2005年版中国药典规定的复方丹参片的制法上加以改进。如艾相平等人在每次提取前都用溶剂浸泡1小时(中国药事，2009，23(7)694-695)；如黄琳等人则改用70％乙醇先浸泡6小时，再分别提取2次，每次2小时(中成药，2006，28(9)1385-1387)。这些制备工艺都经过多次提取，工艺繁琐、耗时长。也有是用同时含有丹参酮与丹参酚酸的提取物按要求进行制剂。现有文献与专利报道的丹参提取物是分别得到丹参酮与丹参酚酸固体物后再进行混合勾兑配制；而且纯化工艺主要采用醇沉法、絮凝法、大孔树脂法、溶剂萃取法、超临界二氧化碳萃取法等一种或多种方法联合应用分别对酚酸类与丹参酮类进行纯化，这些方法成本较高、设备投入大、工艺繁琐、生产周期长，常引起溶剂残留问题，容易在纯化过程中造成有效成分的破坏或损失，特别是丹参酚酸类由于性质不稳定、易于氧化，常在纯化过程中分解。如夏炎等人先用超临界二氧化碳萃取工艺提取丹参酮IIA后，残渣再用水和有机溶剂的混合液提取两次得到丹参酚酸B(公开号为CN1951953A)；如石任兵等人则先用体积分数50％～90％乙醇先提取总丹参酮，残渣再用体积分数0～50％乙醇提取总丹酚酸，分别经过大孔树脂法纯化后再合并(公开号为CN101073599A)。
因此，目前报道纯化丹参提取物的方法均不同程度存在成本高、设备投入大、工艺繁琐、生产周期长、溶剂残留、有效成分损失等问题，均难实现大规模的产业化生产。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术存在的不足，提供一种提取效率高，能耗低，工艺简单，能同时富集丹参脂溶性与水溶性有效部位的提取方法。
本发明的提取方法包括以下步骤 (1)将丹参药材粉碎成细粉； (2)药材细粉加入水，在低于25℃下搅拌提取，提取过程控制提取液pH值，过滤，弃去滤液；丹参药材中存在三大类成分丹参多糖类，丹参酚酸类，丹参酮类。据现有报道，丹参药材祛瘀止痛、活血调经、养血安神的成分为酚酸类与丹参酮类，所以在丹参治疗心脑血管疾病制剂中，丹参多糖一般视为杂质成分需除去。由于丹参多糖类，丹参酚酸类均为水溶性成分，酚酸类成分在低温酸性水溶液中受pKa值影响以酸结合态形式存在，溶解度变小，在一定时间内丹参多糖优先溶出，本发明利用此原理成功纯化丹参活性成分； (3)残渣加入C1～C4低级醇或C1～C4低级醇水溶液，搅拌提取，过滤，滤液浓缩； (4)浓缩液干燥，粉碎，即得提取物。
在上述提取方法中，所述步骤(1)中细粉是采用生化的方法或机械破碎而成。
在上述提取方法中，所述步骤(2)中加入的水量是药材的1～30倍体积，在低于25℃下搅拌提取10～300min，提取过程控制提取液pH＝1～7。最佳的条件是加入的水量是药材的2～8倍体积，在5～20℃下搅拌提取10～40min，提取1次，提取过程控制提取液pH＝2～5。
在上述提取方法中，所述步骤(2)中的控制提取液pH值的酸溶液优选为盐酸、磷酸、硫酸、草酸中的一种或两种以上的混合酸。
在上述提取方法中，所述C1～C4低级醇水溶液为体积百分比50％～95％甲醇水溶液或体积百分比50％～95％乙醇水溶液。
在上述提取方法中，所述步骤(3)中提取条件为加入残渣5～40倍体积量的溶剂搅拌提取10～300min。
在上述提取方法中，所述步骤(3)中提取条件为加入残渣10～20倍体积量的溶剂在40～90℃下搅拌提取30～90min，提取1次。
在上述提取方法中，所述步骤(4)的提取物加入辅料或不加辅料直接制成制剂。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果 1.中药有效成分的溶出速度与药物粉碎程度有关，用破碎技术粉碎而成的细粉对有效成分破坏或损失少，同时又能最大限度的快速溶出有效成份。本发明采用破碎技术粉碎原药材，增加了药材与溶剂的接触面积，提高了有效成分的溶出率，提高了药物的提取效率。
2.本发明在丹参有效成分提取前采用低温除杂法，采用水在低温下一步到位除杂，纯化方式简单，操作时间短，不会造成纯化过程中破坏或改变有效成分问题。
3.本发明采用低级醇为溶剂进行提取，能高倍富集丹参药材中的有效成分，所得提取物中丹参酮与丹参酚酸的百分含量是原药材的4～10倍。最大限度的保护了丹参酚酸与丹参酮的稳定性。本发明无需其它有机溶剂，真正做到无污染、安全、绿色生产。
4.本发明除用到传统的提取、浓缩、干燥设备外，无需其它设备，简单可行。
具体实施例方式 以下实施例中所用的丹参药材中丹参酚酸类、丹参酮类含量见表1。
下述醇的浓度为体积百分比浓度。
实施例1 取破碎的丹参药材细粉1000克加入2倍体积量的水，于5℃搅拌提取10min，提取过程用盐酸控制提取液pH在2.0～2.5，过滤，药渣加入药材10倍体积量的80％乙醇于60℃提取30min，过滤，滤液减压浓缩、干燥、粉碎即得丹参提取物。
丹参酮类含量测定方法高效液相色谱法测定丹参酮中丹参酮I、丹参酮IIA、隐丹参酮含量；色谱条件参照2005版中国药典一部52页丹参中丹参酮含测项。
丹参酚酸类含量测定方法高效液相色谱法测定丹参酚酸中丹参素、原儿茶醛、原儿茶酸、咖啡酸、丹参酚酸A、丹参酚酸B；色谱条件为流动相A(乙腈)，B(2％甲酸水)0～10min 0.7ml/min A15％，B85％10～20min 0.7～1ml/min A15～20％，B85～80％20～30min 1ml/min A20％，B80％30～40min 1ml/min A20～30％，B80～70％ 色谱柱Kromasil C185μ 结果见表1。
实施例2 同实施例1，所不同的是药材加入药材5倍体积量的水，于10℃搅拌提取30min。结果见表1。
实施例3 同实施例1，所不同的是药材加入药材8倍体积量的水，于20℃搅拌提取40min。结果见表1。
实施例4 同实施例2，所不同的是加入药材8倍体积量的水，控制提取液pH值为磷酸，pH值控制为4.5～5.0，药渣加入药材20倍体积量的70％乙醇。结果见表1。
实施例5 同实施例2，所不同的是加入6倍体积量的水后于20℃搅拌提取40min，控制提取液pH值为硫酸。结果见表1。
实施例6 同实施例4，所不同的是控制提取液pH值为草酸，药渣加入15倍体积量的70％甲醇于90℃提取90min。结果见表1。
实施例7 同实施例2，所不同的是提取过程用盐酸控制提取液pH在2.5～3.0，药渣加入50％的乙醇于40℃提取80min。结果见表1。
实施例8 同实施例7，所不同的是药材加入药材7倍体积量的水，于15℃搅拌提取40min，药渣加入95％的乙醇提取60min。结果见表1。
实施例9 同实施例4，所不同的是pH值控制为2.2～2.7，药渣加入80％的甲醇在60℃下提取90min。结果见表1。
实施例10 同实施例2，所不同的是提取过程控制提取液pH在3.0～3.5，药渣加入20倍体积量的70％乙醇在85℃下提取90min。结果见表1。
实施例11 同实施例4，所不同的是提取过程控制提取液pH在3.5～4.0，药渣加入18倍体积量的75％乙醇在85℃下提取90min。结果见表1。
实施例12 同实施例2，所不同的是药材量为300kg。结果见表1。
实施例13 同实施例9，所不同的是药材量为150kg。结果见表1。
表1实施例含量测定结果(单位％)
权利要求
1.一种能同时富集丹参脂溶性与水溶性有效部位的提取方法，其特征在于包括以下步骤
(1)将丹参药材粉碎成细粉；
(2)药材细粉加入水，在低于25℃下搅拌提取，提取过程控制提取液pH值，过滤，弃去滤液；
(3)残渣加入C1～C4低级醇或C1～C4低级醇水溶液，搅拌提取，过滤，滤液浓缩；
(4)浓缩液干燥，粉碎，即得提取物。
2.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于所述步骤(1)中细粉是采用生化的方法或机械破碎而成。
3.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于所述步骤(2)中，加入的水量是药材的1～30倍体积，在低于25℃下搅拌提取10～300min，提取过程控制提取液pH＝1～7。
4.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于所述步骤(2)中，加入的水量是药材的2～8倍体积，在5～20℃下搅拌提取10～40min，提取1次，提取过程控制提取液pH＝2～5。
5.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于所述步骤(2)中的控制提取液pH值的酸为盐酸、磷酸、硫酸、草酸中的一种或两种以上的混合酸。
6.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于所述C1～C4低级醇水溶液为体积百分比50％～95％甲醇水溶液或体积百分比50％～95％乙醇水溶液。
7.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于所述步骤(3)中提取条件为加入残渣5～40倍体积量的C1～C4低级醇或C1～C4低级醇水溶液搅拌提取10～300min。
8.根据权利要求7所述的提取方法，其特征在于所述步骤(3)中提取条件为加入残渣10～20倍体积量的C1～C4低级醇或C1～C4低级醇水溶液在40～90℃下搅拌提取30～90min，提取1次。
9.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于所述步骤(4)的提取物加入辅料或不加辅料直接制成制剂。
全文摘要
本发明公开了一种能同时富集丹参脂溶性与水溶性有效部位的提取方法，包括(1)将丹参药材粉碎成细粉；(2)药材细粉加入水，在低于25℃下搅拌提取，控制pH值，过滤，弃去滤液；(3)残渣加入C1～C4的低级醇，搅拌提取，过滤，浓缩；(4)浓缩液干燥，粉碎，即得提取物。本发明采用破碎技术粉碎原药材，增加了药材与溶剂的接触面积，提高了有效成分的溶出率和药物提取效率。本发明在丹参有效成分提取前采用低温除杂法，纯化简单，时间短，纯化过程中不会破坏有效成分。本发明采用低级醇为溶剂进行提取，能高倍富集丹参药材中的有效成分，所得提取物中丹参酮与丹参酚酸的百分含量是原药材的4～10倍。最大限度的保护了丹参酚酸与丹参酮的稳定性。
文档编号A61K36/185GK101757105SQ201010117050
公开日2010年6月30日 申请日期2010年2月23日 优先权日2010年2月23日
发明者黄裕, 周珊, 李金华, 周锦珂, 葛发欢, 黄展平, 汪涛, 全一思 申请人:广州汉方现代中药研究开发有限公司
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