一种治疗烧烫伤的水溶性凝胶剂的制作方法

专利名称：：一种治疗烧烫伤的水溶性凝胶剂的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一种治疗烧烫伤的水溶性凝胶剂。
背景技术：
：蚯蚓，又称地龙、曲蟮，环节动物门寡毛纲陆生动物。我国对蚯蚓的药用历史悠久，是一种传统的中药。全世界已知的蚯蚓种类有3000多种，分为水栖种类、陆栖种类以及少数寄生，可供养殖的陆栖蚯蚓种类只有十几种。随着现代生物技术的发展关于蚯蚓的药理活性的研究也越来越多，但是主要还是集中在其纤溶活性方面，关于其他的药理活性的研究还很少，而将提纯后的蚯蚓蛋白制成外用凝胶剂用于烫伤治疗的研究就更少。
发明内容针对上述现有技术，本发明对蚯蚓蛋白进行乐分离纯化，得到一种对烧烫伤具有良好的促进愈合效果的蛋白，将其研制成水溶性凝胶制剂，并对其可能的促进烧烫伤愈合作用的机理进行了研究。本发明是通过以下技术方案实现的—种治疗烧烫伤的水溶性凝胶剂，包括以下组分蒸馏水，凝胶基质，保湿剂，蚯蚓蛋白，其中，凝胶基质的浓度为525g/L，优选15g/L，保湿剂的浓度为50300g/L，优选180g/L，蚯蚓蛋白的质量浓度为0.23%，优选1%。所述水溶性凝胶剂还包括防腐剂。所述防腐剂为尼泊金乙酯。所述凝胶基质为卡波姆-940、海藻酸盐、西黄蓍胶或明胶，优选卡波姆-940。所述保湿剂为丙二醇或/和甘油(两者之间，任意比例混合都可以)。所述蚯蚓蛋白为干蚯蚓经分离提取所得蛋白，亦可采用酶解技术获得，比如采用中国专利申请号为200910016682.4的发明专利中记载的方法制取。—种治疗烧烫伤的水溶性凝胶剂的制备方法，步骤如下1)将凝胶基质撒入蒸馏水中密闭放置过夜，使其充分溶胀；2)在溶胀好的凝胶基质溶液中加入保湿剂，混合均匀；3)在溶胀好的基质溶液中加入防腐剂；4)搅拌均匀，加入pH调节剂，调节pH到68;5)加蒸馏水定容，搅拌均匀；6)加入蚯蚓蛋白，搅拌均匀，即得水溶性凝胶剂。所述步骤4)中，pH调节剂为三乙醇胺、乙二胺、月桂胺、碳酸氢钠或氢氧化钠。本发明的水溶性凝胶剂具有较高药用价值，凝胶剂具有使创口与外界隔绝，防止细菌侵入伤口；吸收创面的多余渗出液，保持创面湿润兼具水化吸收双重功效，自主地湿化创面促进肉芽生长和上皮再生；可以与创面充分接触，特别适用于烫伤等不规则创口；此外，凝胶剂还具有缓释作用、润滑性、无剌激损伤，无局部毒副作用，冷却止痛且价廉，可以避免换药敷料粘连创面造成新的创面，增加患者顺应性。所以具有以上特点的凝胶剂是非常理想的应用于烧烫伤的治疗，也可以应用于创伤愈合或开放伤口的炎症治疗，或应用于其他各种疾病反应的治疗或辅助治疗。具体实施例方式下面结合实施例对本发明作进一步的说明实施例1:以蚯蚓蛋白为有效成分治疗烧烫伤的水溶性凝胶制备步骤如下1)将1.5g卡波姆-940撒入70ml蒸馏水中密闭放置过夜使其充分溶胀；2)在溶胀好的卡波姆溶液中加入丙二醇15g;3)在溶胀好的卡波姆溶液中加入甘油3g;4)在溶胀好的卡波姆溶液中加入尼泊金乙酯0.05g;5)搅拌均匀，加入三乙醇胺5g;6)加蒸馏水至100ml，搅拌均匀即得凝胶剂；7)加蚯蚓蛋白lg搅拌均匀即成水溶性凝胶蛋白。实施例2:蚯蚓蛋白为有效成分治疗烧烫伤的水溶性凝胶制备与实施例1相比，其不同点在于步骤1)中采用壳聚糖为凝胶剂基质；步骤2)至步骤7)同实施例1。实施例3:蚯蚓蛋白为有效成分治疗烧烫伤的水溶性凝胶制备与实施例1相比，其不同点在于步骤2)选择PEG-400等多元醇为保湿剂；步骤1)、3)至步骤7)同实施例1。实施例4:蚯蚓蛋白为有效成分治疗烧烫伤的水溶性凝胶制备与实施例1相比，其不同点在于步骤1)至步骤2)同实施例1，步骤3)采用PEG-400等多元醇为保湿剂；步骤4)至步骤7)同实施例1。实施例5:蚯蚓蛋白为有效成分治疗烧烫伤的水溶性凝胶制备与实施例l相比，其不同点在于步骤l)至步骤3)同实施例1，步骤4)采用苯甲酸、山梨酸、为防腐剂；步骤5)至步骤7)同实施例l。实施例6:以蚯蚓蛋白为有效成分治疗烧烫伤的水溶性凝胶制备与实施例1相比，其不同点在于步骤1)至步骤4)同实施例1，步骤4)采用乙二胺、月桂胺、碳酸氢钠、氢氧化钠等进行pH调节；步骤6)至步骤7)同实施例1。实施例7:以蚯蚓蛋白为有效成分治疗烧烫伤的水溶性凝胶制备步骤如下1)将2.5g明胶撒入70ml蒸馏水中密闭放置过夜使其充分溶胀；2)在溶胀好的明胶溶液中加入丙二醇20g;3)在溶胀好的明胶溶液中加入甘油10g;4)在溶胀好的明胶溶液中加入尼泊金乙酯0.05g;5)搅拌均匀，加入乙二胺，调节pH到68;6)加蒸馏水至100ml，搅拌均匀即得凝胶剂；7)加蚯蚓蛋白2.lg，搅拌均匀即成水溶性凝胶蛋白。4实施例8:以蚯蚓蛋白为有效成分治疗烧烫伤的水溶性凝胶制备步骤如下1)将0.5g西黄蓍胶撒入70ml蒸馏水中密闭放置过夜使其充分溶胀；2)在溶胀好的西黄蓍胶溶液中加入丙二醇lg;3)在溶胀好的西黄蓍胶溶液中加入甘油4g;4)在溶胀好的西黄蓍胶液中加入尼泊金乙酯0.05g;5)搅拌均匀，加入月桂胺，调节pH到68;6)加蒸馏水至100ml，搅拌均匀即得凝胶剂；7)加蚯蚓蛋白0.5g，搅拌均匀即成水溶性凝胶蛋白。实施例9:以蚯蚓蛋白为有效成分治疗烧烫伤的水溶性凝胶制备步骤如下1)将2.0g海藻酸盐撒入70ml蒸馏水中密闭放置过夜使其充分溶胀；2)在溶胀好的海藻酸盐溶液中加入丙二醇10g;3)在溶胀好的海藻酸盐溶液中加入甘油5g;4)在溶胀好的海藻酸盐溶液中加入尼泊金乙酯0.05g;5)搅拌均匀，加入碳酸氢钠，调节pH到68;6)加蒸馏水至100ml，搅拌均匀即得凝胶剂；7)加蚯蚓蛋白2.5g，搅拌均匀即成水溶性凝胶蛋白。实施例10:以蚯蚓蛋白为有效成分治疗烧烫伤的水溶性凝胶制备步骤如下1)将1.Og卡波姆-940撒入70ml蒸馏水中密闭放置过夜使其充分溶胀；2)在溶胀好的卡波姆溶液中加入丙二醇15g;3)在溶胀好的卡波姆溶液中加入甘油5g;4)在溶胀好的卡波姆溶液中加入尼泊金乙酯0.05g;5)搅拌均匀，加入三乙醇胺，调节pH到68;6)加蒸馏水至100ml，搅拌均匀即得凝胶剂；7)加蚯蚓蛋白3g，搅拌均匀即成水溶性凝胶蛋白。实施例11:以蚯蚓蛋白为有效成分治疗烧烫伤的水溶性凝胶制备步骤如下1)将1.5g明胶撒入70ml蒸馏水中密闭放置过夜使其充分溶胀；2)在溶胀好的明胶溶液中加入丙二醇5g;3)在溶胀好的明胶溶液中加入甘油15g;4)在溶胀好的明胶溶液中加入尼泊金乙酯0.05g;5)搅拌均匀，加入三乙醇胺，调节pH到68;6)加蒸馏水至100ml，搅拌均匀即得凝胶剂；7)加蚯蚓蛋白1.3g，搅拌均匀即成水溶性凝胶蛋白。实验例1:含有蚯蚓蛋白的水溶性凝胶剂对大鼠二度烫伤的治疗作用实验1.1试验材料1.1.1试剂与耗材[OOSS]大鼠白介素-6ELISA试剂盒(上海西唐生物科技有限公司)。大鼠肿瘤坏死因子ELISA试剂盒(上海西唐生物科技有限公司)。受试品依据实施例1方案制备的含有蚯蚓蛋白的水溶性凝胶制剂。对照品美宝湿润烧伤膏(汕头市美宝制药有限公司)。[OO92]戊巴比妥钠(上海西唐生物科技公司)。直径3cm铜棒(lkg)。1.1.2动物雄性Wistar大鼠(68周，210280g)40只，由山东大学实验动物中心提供，合格证编号SCXK(鲁)-20030004。1.2实验方法将大鼠随机分为模型组、阳性药物组、高剂量组、中剂量组和低剂量组，每组8只大鼠。用2.5%戊巴比妥钠对大鼠进行腹腔内注射麻醉，然后将大鼠背部两侧脱毛。用2.5%戊巴比妥钠对大鼠进行麻醉，将铜棒放于沸水中煮5min，然后把铜棒放于拔完毛后的大鼠背部两侧分别烫伤4秒。含有蚯蚓蛋白的水溶性凝胶制剂每天3次对烫伤创面给药。模型组以生理盐水给药，对照组以对照药物给药。取实验中各大鼠的烫伤皮肤，匀浆后分别用大鼠白介素-6ELISA试剂盒及大鼠肿瘤坏死因子ELISA试剂盒测定其TNF-a和IL-6含量，结果见表1和表2。1.3结果与讨论表1:伤后3-7d大鼠皮肤IL-6水平(ng/g，(;±s)，n=10)<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>注同一时相点与模型组比较^P<0.05)，**(P<0.01)表2:伤后3-7d大鼠皮肤TNF-a水平(ng/g，(；土s),n=<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>注同一时相点与模型组比较*(P<0.05)，**(P<0.01)炎症因子含量测定结果显示，含有蚯蚓蛋白的水溶性凝胶剂对炎症因子具有良好的抑制作用，因此，该蛋白对于炎症的治疗应具显著效果。由上可见，本发明所制备的含有蚯蚓蛋白的水溶性凝胶剂具有显著抗烧烫伤药理学活性，可以用于治疗烧烫伤，完全可以开发成为新型药物。权利要求一种治疗烧烫伤的水溶性凝胶剂，其特征在于，包括以下组分蒸馏水，凝胶基质，保湿剂，蚯蚓蛋白，其中，凝胶基质的浓度为5～25g/L，保湿剂的浓度为50～300g/L，蚯蚓蛋白的质量浓度为0.2～3％。2.根据权利要求1所述的一种治疗烧烫伤的水溶性凝胶剂，其特征在于还包括防腐剂。3.根据权利要求2所述的一种治疗烧烫伤的水溶性凝胶剂，其特征在于所述防腐剂为尼泊金乙酯。4.根据权利要求1所述的一种治疗烧烫伤的水溶性凝胶剂，其特征在于所述凝胶基质为卡波姆-940、海藻酸盐、西黄蓍胶或明胶。5.根据权利要求1所述的一种治疗烧烫伤的水溶性凝胶剂，其特征在于所述保湿剂为丙二醇或/和甘油。6.权利要求1所述的一种治疗烧烫伤的水溶性凝胶剂的制备方法，其特征在于步骤如下1)将凝胶基质撒入蒸馏水中密闭放置过夜，使其充分溶胀；2)在溶胀好的凝胶基质溶液中加入保湿剂，混合均匀；3)在溶胀好的基质溶液中加入防腐剂；4)搅拌均匀，加入pH调节剂，调节pH到68;5)加蒸馏水，搅拌均匀；6)加入蚯蚓蛋白，搅拌均匀，即得水溶性凝胶剂。7.根据权利要求6所述的一种治疗烧烫伤的水溶性凝胶剂的制备方法，其特征在于所述步骤4)中，pH调节剂为三乙醇胺、乙二胺、月桂胺、碳酸氢钠或氢氧化钠。8.权利要求1所述的一种治疗烧烫伤的水溶性凝胶剂在制备治疗烧烫伤药物中的应用。9.权利要求1所述的一种治疗烧烫伤的水溶性凝胶剂在制备抗炎药物中的应用。全文摘要本发明公开了一种治疗烧烫伤的水溶性凝胶剂，包括以下组分蒸馏水，凝胶基质，保湿剂，蚯蚓蛋白，其中，凝胶基质的浓度为5～25g/L，优选15g/L，保湿剂的浓度为50～300g/L，优选180g/L，蚯蚓蛋白的质量浓度为0.2～3％，优选1％。本发明的凝胶剂是非常理想的应用于烧烫伤的治疗，也可以应用于创伤愈合或开放伤口的炎症治疗，或应用于其他各种疾病反应的治疗或辅助治疗。文档编号A61P17/02GK101773662SQ20101011810公开日2010年7月14日申请日期2010年3月5日优先权日2010年3月5日发明者吉爱国,李振,王允山申请人:山东大学威海分校;济宁华能制药厂