皮肤及毛发颜色控制因子的制作方法

xiaoxiao2020-6-24  6

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专利名称:皮肤及毛发颜色控制因子的制作方法
技术领域
本发明涉及角质形成细胞(keratinocyte)中黑色素量的调节,以及皮肤或者毛发的颜色的控制。
背景技术
作为决定皮肤或者毛发的颜色的因子,虽然报告有种种,但是认为其中存在于表皮的黑色素的量或质对皮肤或者毛发的颜色产生大的影响。即,皮肤或者毛发的颜色的形成受到由在黑色素细胞(melanocyte)中的被称为黑素体(melanosome)的细胞小器官中制造的黑色素(melanin)向表皮或者毛囊的角质形成细胞中传送从而遍及表皮或者毛发整体的过程的很大影响。从很久以前就已知由该黑色素细胞产生的黑色素的产生量是与个体的皮肤或者毛发的颜色相关联的因子。现有的皮肤美白剂主要是以在黑色素细胞中的黑色素产生为目的而开发的。例如,在非专利文献I中,作为具有通过阻碍酪氨酸酶的酶活性而抑制黑色素产生的作用的皮肤美白剂,报告有抗坏血酸、熊果苷、曲酸等,其中,酪氨酸酶是有关从黑色素前体的酪氨酸转化为黑色素的酶。另一方面,还报告有由皮肤颜色的不同而发现在黑色素细胞中黑色素的存在模式或者成熟状态中的差异(非专利文献2)。即,认为在黑色素细胞中的黑色素动态可能会在决定皮肤颜色中具有某些作用。在至今的报告中,启示了感受器分子PAR-2参与黑色素细胞中黑色素的获取(贪食),以及通过调节其活性来控制皮肤颜色的可能性(非专利文献3)。另外,还启示了蛋白质分子动力蛋白(Dynein)或者动力激活蛋白(Dynactin)参与黑色素传送到黑色素细胞之后局部存在于该黑色素细胞内(非专利文献4和5)。进一步,最近启示了与称作丝状伪足(Filopodia)的细胞结构的形成相关的蛋白质分子MyoX参与从黑色素细胞传送至角质形成细胞、以及从角质形成细胞传送至角质形成细胞的两种黑色素传送(非专利文献6)。然而,关于在黑色素细胞中产生的黑色素(黑素体)通过角质形成细胞来获取、输送、以及代谢的机理,尚未充分明确,也没有验证其对于皮肤颜色的作用。另外,最近,还启示了通过使用来自不同民族的角质形成细胞进行探讨,在获取的黑色素的代谢能中存在民族差异(非专利文献7)。本论文报告了在表皮细胞获取了用荧光物质标识的黑色素之后,根据表皮细胞内的荧光消退的结果发现,黑色素在白人的表皮细胞中容易分解。然而,关于参与分解的机理或者特定的因子没有任何提及。已知CLIP-170、RAB7B、Rubicon、RABllA和ATG7作为参与囊泡的输送或者局部存在、或者囊泡的分解或者自噬的分子(非专利文献8 16)。但是,角质形成细胞内的黑色素动态,例如这些分子参与黑色素的获取、输送、局部存在或者存积、排出或者分解等迄今为止尚未明确。现有技术文献非专利文献

非专利文献1:美白战略(南江堂)IV.,美白剂的药理和临床,P95-116
非专利文献2:Thong et al, (2003)Br J Dermatol 149:498-505非专利文献3:Lin et al, (2008)Pigment Cell Melanoma Res21:172-183非专利文献4:Byers et al, (2003) J Invest Dermatol 121:813-820非专利文献5:Byers et al, (2007) J Invest Dermatol 127:1736-1744非专利文献6:Singh et al, (2010)FASEB J24:3756-3769非专利文献7:Ebanks et al, (2011) J Invest Dermatol 131:1226-1233非专利文献8:Vaughan et al, (1999) J Cell Scill2:1437-1447非专利文献9:Yang et al, (2004)Biochem Biophys Res Commun318:792-799非专利文献10:Wang et al, (2007)Bloodll0:962_971非专利文献11:Yao et al, (2009)J Immunoll83:1751-1758非专利文献12:Progida et al, (2010) J Cell Scil23:1480-1491非专利文献13:Matsunaga et al, (2009)Nat Cell Biolll: 385-396非专利文献14:Bryant et al, (2010)Nat Cell Bioll2:1035-1045非专利文献15: Ishida-Yamamoto et al, (2007) J InvestDermatol127:2166-2170
非专利文献16:Komatsu et al, (2005) J Cell Bioll69:425_43
发明内容
在一个实施方式中,本发明提供以下的一种角质形成细胞中黑色素量调节剂的评价和/或选择方法,其中,包括下述工序:向细胞给予被检测物质的工序;测定该细胞中选自ATG7、RAB11A、CLIP-170, Rubicon和RAB7B的基因中至少I种基因的表达的变化、或者由该基因编码的分子中至少I种分子的表达或活性的变化的工序;基于该测定的结果,评价该被检测物质的黑色素量调节作用的工序;以及基于该评价的结果,选择该被检测物质作为角质形成细胞中黑色素量调节剂的工序。在其它实施方式中,本发明提供以下的一种皮肤或者毛发颜色控制剂的评价和/或选择方法,其中,包括下述工序:向细胞给予被检测物质的工序;测定该细胞中选自ATG7、RAB11A、CLIP-170, Rubicon和RAB7B的基因中至少I种基因的表达的变化、或者由该基因编码的分子中至少I种分子的表达或活性的变化的工序;基于该测定的结果,评价该被检测物质的皮肤或者毛发颜色控制作用的工序;以及基于该评价的结果,选择该被检测物质作为皮肤或者毛发颜色控制剂的工序。进一步在其它的实施方式中,本发明提供一种调节角质形成细胞中黑色素量的方法,其中,包括对希望黑色素量调节的角质形成细胞中选自ATG7、RAB11A、CLIP-170,Rubicon和RAB7B的基因中至少1种基因的表达或者由该基因编码的分子中至少I种分子的表达或活性进行调节的工序。进一步在其它实施方式中,本发明提供一种控制被检测体中皮肤或毛发颜色的方法,其中,包括对希望皮肤或毛发颜色控制的被检测体的角质形成细胞中选自ATG7、RAB11A.CLIP-170,Rubicon和RAB7B的基因中至少I种基因的表达或者由该基因编码的分子中至少I种分子的表达或活性进行调节的工序。另外在其它的实施方式中,本发明提供一种选自ATG7、RABllA、CLIP_170、Rubicon和RAB7B的基因或者由该基因编码的分子在用于调节角质形成细胞中黑色素量中的用途。另外在其它实施方式中,本发明提供一种选自ATG7、RAB11A、CLIP-170, Rubicon和RAB7B的基因或者由该基因编码的分子在用于控制皮肤或者毛发颜色中的用途。 进一步在一个实施方式中,本发明提供一种皮肤或毛发颜色控制基因,其特征为,所述皮肤或毛发颜色控制基因选自ATG7基因、RABllA基因、CLIP-170基因、Rubicon基因和RAB7B基因,并且与角质形成细胞中黑色素量调节相关。


图1为显示在CLIP-170、RAB7B或者Rubicon基因的表达抑制后的角质形成细胞中黑色素分布的显微镜图像。A.左上:对照、右上:CLIP-170抑制、左下:RAB7B抑制、右下:Rubicon抑制。B.A中四方形所围部分的放大图像。图2为CLIP-170、RAB7B或者Rubicon基因的表达抑制后的角质形成细胞中黑色
素量变化。图3为CLIP-170、RAB7B或者Rubicon基因的表达抑制后的角质形成细胞中黑色素(黑素体)量变化:蛋白质印迹(Western blotting)像。图4为黑色素添加后RAB7B的表达变化。图5为RABl IA或ATG7基因的表达抑制后的角质形成细胞中黑色素(黑素体)量变化:蛋白质印迹像。A:RAB11A表达抑制。B:ATG7表达抑制。图6为皮肤中RABllA基因表达和皮肤颜色的相关性。A =RABllA基因表达量在民族间的比较。B =RABllA基因表达量和皮肤颜色(L*值)的相关性。
具体实施例方式本发明涉及参与角质形成细胞中黑色素的局部存在、存积、排出或者分解,并且与角质形成细胞中黑色素量调节、以及皮肤或者毛发颜色控制相关的因子。另外,本发明涉及使用该因子调节角质形成细胞中黑色素量的方法;控制皮肤或者毛发颜色的方法;以及使用该因子评价和/或选择角质形成细胞中黑色素量调节剂、或者皮肤或者毛发颜色控制剂的方法。本发明者们为了明确皮肤或者毛发颜色与角质形成细胞内基因表达的关联性,探索角质形成细胞中黑色素量调节相关的基因,另外针对该基因表达对角质形成细胞中黑色素动态的影响进行调查,结果发现角质形成细胞中黑色素局部存在、存积、排出或者分解相关的几个基因,并且这些的基因的表达量和皮肤颜色之间具有高的相关性。从这些结果,本发明者们发现如果利用该基因或者其表达产物,可以控制角质形成细胞中黑色素量、或者皮肤或者毛发颜色。根据本发明,可以提供皮肤或者毛发颜色控制基因,其通过对角质形成细胞中黑色素的局部存在、存积、排出分解产生影响而能够控制皮肤或者毛发颜色。通过调节该基因或者其表达产物的表达或活性,可以调节角质形成细胞中黑色素的量或者分布,控制皮肤或者毛发的颜色。另外该基因或者其表达产物,将其表达或活性作为指标,可以评价和/或选择能够控制皮肤或者毛发颜色的素材,因此对于皮肤或者毛发颜色控制剂,例如美白剂、晒黑剂(tanning agent)、毛发染色剂或者漂白剂、黑发剂等的开发有用。本发明提供选自ATG7基因、RABllA基因、CLIP-170基因、Rubicon基因以及RAB7B基因中的皮肤或者毛发颜色控制基因。上述所列举的基因虽然按照下述表I在公知的数据库中进行登记,但是其参与角质形成细胞内的黑色素的动态,例如黑色素的获取、输送、局部存在、存积、排出或者分解等是在现有技术中未知的。[表 I]
权利要求
1.一种角质形成细胞中黑色素量调节剂的评价和/或选择方法,其中, 包括下述工序: 向细胞给予被检测物质的工序; 测定该细胞中选自ATG7、RABl 1A、CLIP-170、Rubicon和RAB7B的基因中至少I种基因的表达的变化、或者由该基因编码的分子中至少I种分子的表达或活性的变化的工序; 基于该测定的结果,评价该被检测物质的黑色素量调节作用的工序;以及 基于该评价的结果,选择该被检测物质作为角质形成细胞中黑色素量调节剂的工序。
2.如权利要求1所述的方法,其中, 在所述基因的表达或者所述分子的表达或活性被抑制的情况下,选择所述被检测物质作为角质形成细胞中黑色素量增加剂。
3.如权利要求1所述的方法,其中, 在所述基因的表达或者所述分子的表达或活性被增强的情况下,选择所述被检测物质作为角质形成细胞中黑色素量降低剂。
4.一种皮肤或者毛发颜色控制剂的评价和/或选择方法,其中, 包括下述工序: 向细胞给予被检测物质的工序; 测定该细胞中选自ATG7、RABl 1A、CLIP-170、Rubicon和RAB7B的基因中至少I种基因的表达的变化、或者由该基因编码的分子中至少I种分子的表达或活性的变化的工序; 基于该测定的结果,评价该被检测物质的皮肤或者毛发颜色控制作用的工序;以及 基于该评价的结果,选择该被检测物质作为皮肤或者毛发颜色控制剂的工序。
5.如权利要求4所述的方法,其中, 在所述基因的表达或者所述分子的表达或活性被抑制的情况下,评价所述被检测物质具有使皮肤或毛发颜色暗色化的作用,选择其作为皮肤或毛发的暗色化剂。
6.如权利要求4所述的方法,其中, 在所述基因的表达或者所述分子的表达或活性被增强的情况下,评价所述被检测物质具有使皮肤或者毛发颜色亮色化的作用,选择其作为皮肤或毛发的亮色化剂。
7.一种调节角质形成细胞中黑色素量的方法,其中, 包括对希望黑色素量调节的角质形成细胞中选自ATG7、RAB11A、CLIP-170, Rubicon和RAB7B的基因中至少I种基因的表达或者由该基因编码的分子中至少I种分子的表达或活性进行调节的工序。
8.如权利要求7所述的方法,其中, 所述基因的表达或者所述分子的表达或活性被抑制,角质形成细胞中黑色素量增加。
9.如权利要求7所述的方法,其中, 所述基因的表达或者所述分子的表达或活性被增强,角质形成细胞中黑色素量减少。
10.一种控制被检测体中皮肤或毛发颜色的方法,其中, 包括对希望皮肤或毛发颜色控制的被检测体的角质形成细胞中选自ATG7、RAB11A、CLIP-170, Rubicon和RAB7B的基因中至少I种基因的表达或者由该基因编码的分子中至少I种分子的表达或活性进行调节的工序。
11.如权利要求10所述的方法,其中,皮肤角质形成细胞中所述基因的表达或者所述分子的表达或活性被抑制,皮肤颜色被暗色化。
12.如权利要求10所述的方法,其中, 在皮肤角质形成细胞中所述基因的表达或者所述分子的表达或活性被增强,皮肤颜色被亮色化。
13.如权利要求10所述的方法,其中, 毛囊角质形成细胞中所述基因的表达或者所述分子的表达或活性被抑制,毛发颜色被暗色化。
14.如权利要求10所述的方法,其中, 毛囊角质形成细胞中所述基因的表达或者所述分子的表达或活性被增强,毛发颜色被亮色化。
15.如权利要求7 14中任一项所述的方法,其中, 所述方法是非治疗性方法。
16.一种选自ATG7、RABl 1A、CLIP-170, Rubicon和RAB7B的基因或者由该基因编码的分子在用于调节角质形成细胞中黑色素量中的用途。
17.如权利要求16所述的用途,其中, 所述用途是用于使黑色素量增加或者减少的用途。
18.一种选自ATG7 、RABl 1A、CLIP-170、Rubicon和RAB7B的基因或者由该基因编码的分子在用于控制皮肤或毛发颜色中的用途。
19.如权利要求22所述的用途,其中, 所述用途是用于使皮肤或毛发颜色暗色化或亮色化的用途。
20.如权利要求24所述的用途,其中, 所述用途是用于使皮肤或毛发颜色暗色化或亮色化的用途。
21.如权利要求16 20中任一项所述的用途,其中, 所述用途是非治疗性用途。
22.一种皮肤或毛发颜色控制基因,其特征为, 所述皮肤或毛发颜色控制基因选自ATG7基因、RABllA基因、CLIP-170基因、Rubicon基因和RAB7B基因,并且与角质形成细胞中黑色素量调节相关。
全文摘要
一种选自ATG7基因、RAB11A基因、CLIP-170基因、Rubicon基因和RAB7B基因的、与角质形成细胞中黑色素量调节以及皮肤或毛发颜色控制相关的基因,以及由该基因编码的分子。
文档编号C12Q1/68GK103180441SQ20118005126
公开日2013年6月26日 申请日期2011年10月31日 优先权日2010年11月1日
发明者村瀬大树, 八谷辉 申请人:花王株式会社

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