一种从桑叶中制备黄酮、生物碱的方法
专利名称：一种从桑叶中制备黄酮、生物碱的方法
技术领域：
本发明涉及一种从桑叶中制备黄酮、生物碱的方法，特别涉及一种采用碱水提取 黄酮和乙醇提取生物碱的工艺。
背景技术：
我国是世界上种桑养蚕最早的国家，也是中华民族对人类文明的伟大贡献之一。 桑树的栽培已有七千多年的历史。栽培范围广泛，东北自哈尔滨以南；西北从内蒙古南部至 新疆、青海；南至两广，东至台湾；西至四川、云南；长江中下游各地栽培最多。桑叶为桑科(Moraceae)桑属植物桑(Morns dba L.)的叶，味苦、甘，性寒，归肺、 肝经，具有疏散风热、清肺润燥、平肝明目、凉血止血之功效。《本草纲目》记载桑叶乃手、足 阳明之药，治劳热咳嗽，明目长发，止消渴。桑叶含有含牛膝留酮、脱皮留酮、保留醇、芸香甙、桑甙、异槲皮甙、伞形花内 酯、东莨菪甙、葫芦巴碱(trigonelline、胆碱等。桑叶中黄酮类成分含量丰富，含量约占干 叶重的1. 0% 3. 0%，是植物茎叶中黄酮类化合物含量较高的一种。黄酮类化合物因其生 理活性多种多样，引起了国内外学者的广泛重视，研究进展很快。它具有良好的自由基、抗 氧化、抗衰老、降血脂、免疫调节、抗菌等生理活性，具有广阔的应用前景。桑叶生物碱具有 降血糖作用。现有提取桑叶黄酮和生物碱多是乙醇提取或水煎煮，再经大孔树脂吸附、萃取或 离子柱。如专利200810236144 “一种联产桑叶黄酮、多糖和生物碱”，公开的方法采用水加 热浸提、大孔树脂吸附。还有专利03101988“一种含有桑叶总碱浸膏的制剂其制备的方法” 公开的方法采用热水溶解、离子交换树脂纯化。乙醇和热水提取，同时溶出两种成分，分离
纯化较难。
发明内容
本发明的目的是为了克服以上述已有工艺缺陷和不足，发明人根据桑叶黄酮和生 物碱的性质差异，反复试验，特提供一种从桑叶中制备黄酮、生物碱的方法。本发明的目的是这样来实现的一种从桑叶中制备黄酮、生物碱的方法，其特征在于包括以下几个步骤1)将桑叶粉碎，用6-10倍量ph9_12碱水30_50°C动态提取1_3小时，提取2_3次， 合并水提取液，药渣再加入4-6倍量85-95%乙醇和活性炭回流提取2-3次，合并醇提液；2)将步骤1)水提取液调ph5_7加入大孔树脂柱吸附，水_醇洗脱，收集桑叶黄酮 流分，加入活性炭回流脱色后，减压浓缩phl-3静置结晶；3)滤出粗结晶物碱醇溶解调ph2-4结晶，滤出再用70-80%乙醇回流溶解结晶，滤 出结晶物干燥即得桑叶总黄酮；4)将步骤1)醇提液调至中性，回收乙醇至膏状，加丙酮溶解滤过，加入氧化铝短 粗柱，收集下柱液回收丙酮，加入氨水结晶，滤出结晶再用85-90%乙醇回流溶解结晶，干燥即得桑叶生物总碱。步骤1)中的碱可选氢氧化钠或氢氧化钙。优选氢氧化钙。步骤2)、3)、4)中的调ph的可选盐酸、硫酸或磷酸的一种。步骤2)中大孔树脂可选D101或SPD100，水-醇洗脱为水洗中性再5-6BV50-70% 乙醇洗脱桑叶黄酮。步骤1)、2)中活性炭为针剂类医药活性炭，加入量液体的1_3%，脱色时间为1-2 小时。步骤3)中的碱醇为Ph9-12的90-95 %乙醇氢氧化钠溶液。步骤4)中的氧化铝为120-200目中性氧化铝。综上所述，本发明存在以下优点碱水低温提取，黄酮易溶出而生物碱无溶出；碱 化后再提取生物碱，杂质少；酸碱处理黄酮含量高、操作简单；氧化铝短柱处理生物碱周期短。下面将结合具体实施方式
进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限 于下列实施方式。
具体实施例方式实施例1 取1kg干燥桑叶，粉碎，加入lOLphlO的氢氧化钙溶液，加热至50°C动态提取2 小时，提取两次，合并提取液滤过盐酸调ph至5加入500mlD101树脂柱吸附，水洗中性， 3L65%乙醇洗脱桑叶黄酮，收集流分加入25g针剂类医用活性炭回流脱色，盐酸调节ph至1 静置结晶，滤出再用PM的85%乙醇氢氧化钠溶液溶解滤过调ph至3结晶，滤出再用75% 乙醇回流溶解结晶，滤出干燥得桑叶黄酮21g，含量91 %。上述桑叶残渣加入6L90%乙醇和60g活性炭回流提取2小时，提取2次，合并滤液 盐酸调至中性回收乙醇，膏状物加入丙酮溶解，滤过加入中性氧化铝短粗柱，收集下柱液回 收丙酮，加入氨水结晶，滤出粗结晶再用90%乙醇回流溶解结晶，过滤结晶物干燥得桑叶生 物碱90%。实施例2 取1kg干燥桑叶，粉碎，加入6Lphl2的氢氧化钙溶液，加热至30°C动态提取3 小时，提取3次，合并提取液滤过盐酸调ph至7加入500mlD101树脂柱吸附，水洗中性， 2. 5L70%乙醇洗脱桑叶黄酮，收集流分加入50g针剂类医用活性炭回流脱色，盐酸调节ph 至3静置结晶，滤出再用phlO的90%乙醇氢氧化钠溶液溶解滤过调ph至2结晶，滤出再用 80%乙醇回流溶解结晶，滤出干燥得桑叶黄酮24g，含量90%。上述桑叶残渣加入4L85%乙醇和80g活性炭回流提取1小时，提取3次，合并滤液 盐酸调至中性回收乙醇，膏状物加入丙酮溶解，滤过加入中性氧化铝短粗柱，收集下柱液回 收丙酮，加入氨水结晶，滤出粗结晶再用85%乙醇回流溶解结晶，过滤结晶物干燥得桑叶生 物碱90%。实施例3 取1kg干燥桑叶，粉碎，加入lOLphlO的氢氧化钠溶液，加热至40°C动态提取2小 时，提取两次，合并提取液滤过盐酸调ph至6加入500mlSPD100树脂柱吸附，水洗中性，3L50 %乙醇洗脱桑叶黄酮，收集流分加入60g针剂类医用活性炭回流脱色，盐酸调节ph至2 静置结晶，滤出再用Phl2的95%乙醇氢氧化钠溶液溶解滤过调ph至3结晶，滤出再用75% 乙醇回流溶解结晶，滤出干燥得桑叶黄酮22g，含量90%。上述桑叶残渣加入5L95%乙醇和50g活性炭回流提取2小时，提取2次，合并滤液 硫酸调至中性回收乙醇，膏状物加入丙酮溶解，滤过加入中性氧化铝短粗柱，收集下柱液回 收丙酮，加入氨水结晶，滤出粗结晶再用90%乙醇回流溶解结晶，过滤结晶物干燥得桑叶生 物碱90%。实施例4 取5kg干燥桑叶，粉碎，加入50Lphl0的氢氧化钙溶液，加热至30°C动态提取2 小时，提取两次，合并提取液滤过硫酸调Ph至5加入2. 5LD101树脂柱吸附，水洗中性， 15L60%乙醇洗脱桑叶黄酮，收集流分加入300g针剂类医用活性炭回流脱色，硫酸调节ph 至1静置结晶，滤出再用phlO的90%乙醇氢氧化钠溶液溶解滤过调ph至2结晶，滤出再用 75%乙醇回流溶解结晶，滤出干燥得桑叶黄酮120g，含量90%。上述桑叶残渣加入25L90%乙醇和500g活性炭回流提取2小时，提取2次，合并滤 液盐酸调至中性回收乙醇，膏状物加入丙酮溶解，滤过加入中性氧化铝短粗柱，收集下柱液 回收丙酮，加入氨水结晶，滤出粗结晶再用90%乙醇回流溶解结晶，过滤结晶物干燥得桑叶 生物碱90%。实施例5 取10kg干燥桑叶，粉碎，加入lOOLphlO的氢氧化钙溶液，加热至40°C动态提取 2小时，提取2次，合并提取液滤过盐酸调ph至5加入5LSPD100树脂柱吸附，水洗中性， 25L65%乙醇洗脱桑叶黄酮，收集流分加入500g针剂类医用活性炭回流脱色，盐酸调节ph 至2静置结晶，滤出再用ph9的85%乙醇氢氧化钠溶液溶解滤过调ph至2结晶，滤出再用 75%乙醇回流溶解结晶，滤出干燥得桑叶黄酮215g，含量91 %。上述桑叶残渣加入50L90%乙醇和500g活性炭回流提取2小时，提取2次，合并滤 液盐酸调至中性回收乙醇，膏状物加入丙酮溶解，滤过加入中性氧化铝短粗柱，收集下柱液 回收丙酮，加入氨水结晶，滤出粗结晶再用85%乙醇回流溶解结晶，过滤结晶物干燥得桑叶 生物碱90%。
权利要求
一种从桑叶中制备黄酮、生物碱的方法，其特征在于包括以下几个步骤1)将桑叶粉碎，用6-10倍量ph9-12碱水30-50℃动态提取1-3小时，提取2-3次，合并水提取液，药渣再加入4-6倍量85-95％乙醇和活性炭回流提取2-3次，合并醇提液；2)将步骤1)水提取液调ph5-7加入大孔树脂柱吸附，水—醇洗脱，收集桑叶黄酮流分，加入活性炭回流脱色后，减压浓缩ph1-3静置结晶；3)滤出粗结晶物碱醇溶解调ph2-4结晶，滤出再用70-80％乙醇回流溶解结晶，滤出结晶物干燥即得桑叶总黄酮；4)将步骤1)醇提液调至中性，回收乙醇至膏状，加丙酮溶解滤过，加入氧化铝短粗柱，收集下柱液回收丙酮，加入氨水结晶，滤出结晶再用85-90％乙醇回流溶解结晶，干燥即得桑叶生物总碱。
2.根据权利要求1所述从桑叶中制备黄酮、生物碱的方法，其特征在于步骤1)中的碱 可选氢氧化钠或氢氧化钙。
3.根据权利要求1所述从桑叶中制备黄酮、生物碱的方法，其特征在于步骤2)、3)、4) 中的调Ph的可选盐酸、硫酸或磷酸的一种。
4.根据权利要求1所述从桑叶中制备黄酮、生物碱的方法，其特征在于步骤2)中大孔 树脂可选DlOl或SPD100，水一醇洗脱为水洗中性再5-6BV50-70%乙醇洗脱桑叶黄酮。
5.根据权利要求1所述从桑叶中制备黄酮、生物碱的方法，其特征在于步骤1)、2)中活 性炭为针剂类医药活性炭，加入量液体的1_3%，脱色时间为1-2小时。
6.根据权利要求1所述从桑叶中制备黄酮、生物碱的方法，其特征在于步骤3)中的碱 醇为ph9-12的90-95%乙醇氢氧化钠溶液。
7.根据权利要求1所述从桑叶中制备黄酮、生物碱的方法，其特征在于步骤4)中的氧 化铝为120-200目中性氧化铝。
全文摘要
本发明涉及一种从桑叶中制备黄酮、生物碱的方法。工艺步骤包括碱水加热提取黄酮，90-95％乙醇和活性炭再提取生物碱，黄酮提取液调酸过大孔树脂柱，酸化结晶和70-80％乙醇溶解重结晶，生物碱提取液浓缩，丙酮再溶解，过氧化铝短粗柱，氨化结晶和85-90％乙醇溶解重结晶。采用本发明生产桑叶黄酮、生物碱，工艺简单易工业化、原料利用率高，所得产品纯度高、符合食品医药要求。
文档编号A61P3/06GK101862371SQ20101013026
公开日2010年10月20日 申请日期2010年3月23日 优先权日2010年3月23日
发明者苏刘花 申请人:南京泽朗农业发展有限公司
技术领域：
本发明涉及一种从桑叶中制备黄酮、生物碱的方法，特别涉及一种采用碱水提取 黄酮和乙醇提取生物碱的工艺。
背景技术：
我国是世界上种桑养蚕最早的国家，也是中华民族对人类文明的伟大贡献之一。 桑树的栽培已有七千多年的历史。栽培范围广泛，东北自哈尔滨以南；西北从内蒙古南部至 新疆、青海；南至两广，东至台湾；西至四川、云南；长江中下游各地栽培最多。桑叶为桑科(Moraceae)桑属植物桑(Morns dba L.)的叶，味苦、甘，性寒，归肺、 肝经，具有疏散风热、清肺润燥、平肝明目、凉血止血之功效。《本草纲目》记载桑叶乃手、足 阳明之药，治劳热咳嗽，明目长发，止消渴。桑叶含有含牛膝留酮、脱皮留酮、保留醇、芸香甙、桑甙、异槲皮甙、伞形花内 酯、东莨菪甙、葫芦巴碱(trigonelline、胆碱等。桑叶中黄酮类成分含量丰富，含量约占干 叶重的1. 0% 3. 0%，是植物茎叶中黄酮类化合物含量较高的一种。黄酮类化合物因其生 理活性多种多样，引起了国内外学者的广泛重视，研究进展很快。它具有良好的自由基、抗 氧化、抗衰老、降血脂、免疫调节、抗菌等生理活性，具有广阔的应用前景。桑叶生物碱具有 降血糖作用。现有提取桑叶黄酮和生物碱多是乙醇提取或水煎煮，再经大孔树脂吸附、萃取或 离子柱。如专利200810236144 “一种联产桑叶黄酮、多糖和生物碱”，公开的方法采用水加 热浸提、大孔树脂吸附。还有专利03101988“一种含有桑叶总碱浸膏的制剂其制备的方法” 公开的方法采用热水溶解、离子交换树脂纯化。乙醇和热水提取，同时溶出两种成分，分离
纯化较难。
发明内容
本发明的目的是为了克服以上述已有工艺缺陷和不足，发明人根据桑叶黄酮和生 物碱的性质差异，反复试验，特提供一种从桑叶中制备黄酮、生物碱的方法。本发明的目的是这样来实现的一种从桑叶中制备黄酮、生物碱的方法，其特征在于包括以下几个步骤1)将桑叶粉碎，用6-10倍量ph9_12碱水30_50°C动态提取1_3小时，提取2_3次， 合并水提取液，药渣再加入4-6倍量85-95%乙醇和活性炭回流提取2-3次，合并醇提液；2)将步骤1)水提取液调ph5_7加入大孔树脂柱吸附，水_醇洗脱，收集桑叶黄酮 流分，加入活性炭回流脱色后，减压浓缩phl-3静置结晶；3)滤出粗结晶物碱醇溶解调ph2-4结晶，滤出再用70-80%乙醇回流溶解结晶，滤 出结晶物干燥即得桑叶总黄酮；4)将步骤1)醇提液调至中性，回收乙醇至膏状，加丙酮溶解滤过，加入氧化铝短 粗柱，收集下柱液回收丙酮，加入氨水结晶，滤出结晶再用85-90%乙醇回流溶解结晶，干燥即得桑叶生物总碱。步骤1)中的碱可选氢氧化钠或氢氧化钙。优选氢氧化钙。步骤2)、3)、4)中的调ph的可选盐酸、硫酸或磷酸的一种。步骤2)中大孔树脂可选D101或SPD100，水-醇洗脱为水洗中性再5-6BV50-70% 乙醇洗脱桑叶黄酮。步骤1)、2)中活性炭为针剂类医药活性炭，加入量液体的1_3%，脱色时间为1-2 小时。步骤3)中的碱醇为Ph9-12的90-95 %乙醇氢氧化钠溶液。步骤4)中的氧化铝为120-200目中性氧化铝。综上所述，本发明存在以下优点碱水低温提取，黄酮易溶出而生物碱无溶出；碱 化后再提取生物碱，杂质少；酸碱处理黄酮含量高、操作简单；氧化铝短柱处理生物碱周期短。下面将结合具体实施方式
进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限 于下列实施方式。
具体实施例方式实施例1 取1kg干燥桑叶，粉碎，加入lOLphlO的氢氧化钙溶液，加热至50°C动态提取2 小时，提取两次，合并提取液滤过盐酸调ph至5加入500mlD101树脂柱吸附，水洗中性， 3L65%乙醇洗脱桑叶黄酮，收集流分加入25g针剂类医用活性炭回流脱色，盐酸调节ph至1 静置结晶，滤出再用PM的85%乙醇氢氧化钠溶液溶解滤过调ph至3结晶，滤出再用75% 乙醇回流溶解结晶，滤出干燥得桑叶黄酮21g，含量91 %。上述桑叶残渣加入6L90%乙醇和60g活性炭回流提取2小时，提取2次，合并滤液 盐酸调至中性回收乙醇，膏状物加入丙酮溶解，滤过加入中性氧化铝短粗柱，收集下柱液回 收丙酮，加入氨水结晶，滤出粗结晶再用90%乙醇回流溶解结晶，过滤结晶物干燥得桑叶生 物碱90%。实施例2 取1kg干燥桑叶，粉碎，加入6Lphl2的氢氧化钙溶液，加热至30°C动态提取3 小时，提取3次，合并提取液滤过盐酸调ph至7加入500mlD101树脂柱吸附，水洗中性， 2. 5L70%乙醇洗脱桑叶黄酮，收集流分加入50g针剂类医用活性炭回流脱色，盐酸调节ph 至3静置结晶，滤出再用phlO的90%乙醇氢氧化钠溶液溶解滤过调ph至2结晶，滤出再用 80%乙醇回流溶解结晶，滤出干燥得桑叶黄酮24g，含量90%。上述桑叶残渣加入4L85%乙醇和80g活性炭回流提取1小时，提取3次，合并滤液 盐酸调至中性回收乙醇，膏状物加入丙酮溶解，滤过加入中性氧化铝短粗柱，收集下柱液回 收丙酮，加入氨水结晶，滤出粗结晶再用85%乙醇回流溶解结晶，过滤结晶物干燥得桑叶生 物碱90%。实施例3 取1kg干燥桑叶，粉碎，加入lOLphlO的氢氧化钠溶液，加热至40°C动态提取2小 时，提取两次，合并提取液滤过盐酸调ph至6加入500mlSPD100树脂柱吸附，水洗中性，3L50 %乙醇洗脱桑叶黄酮，收集流分加入60g针剂类医用活性炭回流脱色，盐酸调节ph至2 静置结晶，滤出再用Phl2的95%乙醇氢氧化钠溶液溶解滤过调ph至3结晶，滤出再用75% 乙醇回流溶解结晶，滤出干燥得桑叶黄酮22g，含量90%。上述桑叶残渣加入5L95%乙醇和50g活性炭回流提取2小时，提取2次，合并滤液 硫酸调至中性回收乙醇，膏状物加入丙酮溶解，滤过加入中性氧化铝短粗柱，收集下柱液回 收丙酮，加入氨水结晶，滤出粗结晶再用90%乙醇回流溶解结晶，过滤结晶物干燥得桑叶生 物碱90%。实施例4 取5kg干燥桑叶，粉碎，加入50Lphl0的氢氧化钙溶液，加热至30°C动态提取2 小时，提取两次，合并提取液滤过硫酸调Ph至5加入2. 5LD101树脂柱吸附，水洗中性， 15L60%乙醇洗脱桑叶黄酮，收集流分加入300g针剂类医用活性炭回流脱色，硫酸调节ph 至1静置结晶，滤出再用phlO的90%乙醇氢氧化钠溶液溶解滤过调ph至2结晶，滤出再用 75%乙醇回流溶解结晶，滤出干燥得桑叶黄酮120g，含量90%。上述桑叶残渣加入25L90%乙醇和500g活性炭回流提取2小时，提取2次，合并滤 液盐酸调至中性回收乙醇，膏状物加入丙酮溶解，滤过加入中性氧化铝短粗柱，收集下柱液 回收丙酮，加入氨水结晶，滤出粗结晶再用90%乙醇回流溶解结晶，过滤结晶物干燥得桑叶 生物碱90%。实施例5 取10kg干燥桑叶，粉碎，加入lOOLphlO的氢氧化钙溶液，加热至40°C动态提取 2小时，提取2次，合并提取液滤过盐酸调ph至5加入5LSPD100树脂柱吸附，水洗中性， 25L65%乙醇洗脱桑叶黄酮，收集流分加入500g针剂类医用活性炭回流脱色，盐酸调节ph 至2静置结晶，滤出再用ph9的85%乙醇氢氧化钠溶液溶解滤过调ph至2结晶，滤出再用 75%乙醇回流溶解结晶，滤出干燥得桑叶黄酮215g，含量91 %。上述桑叶残渣加入50L90%乙醇和500g活性炭回流提取2小时，提取2次，合并滤 液盐酸调至中性回收乙醇，膏状物加入丙酮溶解，滤过加入中性氧化铝短粗柱，收集下柱液 回收丙酮，加入氨水结晶，滤出粗结晶再用85%乙醇回流溶解结晶，过滤结晶物干燥得桑叶 生物碱90%。
权利要求
一种从桑叶中制备黄酮、生物碱的方法，其特征在于包括以下几个步骤1)将桑叶粉碎，用6-10倍量ph9-12碱水30-50℃动态提取1-3小时，提取2-3次，合并水提取液，药渣再加入4-6倍量85-95％乙醇和活性炭回流提取2-3次，合并醇提液；2)将步骤1)水提取液调ph5-7加入大孔树脂柱吸附，水—醇洗脱，收集桑叶黄酮流分，加入活性炭回流脱色后，减压浓缩ph1-3静置结晶；3)滤出粗结晶物碱醇溶解调ph2-4结晶，滤出再用70-80％乙醇回流溶解结晶，滤出结晶物干燥即得桑叶总黄酮；4)将步骤1)醇提液调至中性，回收乙醇至膏状，加丙酮溶解滤过，加入氧化铝短粗柱，收集下柱液回收丙酮，加入氨水结晶，滤出结晶再用85-90％乙醇回流溶解结晶，干燥即得桑叶生物总碱。
2.根据权利要求1所述从桑叶中制备黄酮、生物碱的方法，其特征在于步骤1)中的碱 可选氢氧化钠或氢氧化钙。
3.根据权利要求1所述从桑叶中制备黄酮、生物碱的方法，其特征在于步骤2)、3)、4) 中的调Ph的可选盐酸、硫酸或磷酸的一种。
4.根据权利要求1所述从桑叶中制备黄酮、生物碱的方法，其特征在于步骤2)中大孔 树脂可选DlOl或SPD100，水一醇洗脱为水洗中性再5-6BV50-70%乙醇洗脱桑叶黄酮。
5.根据权利要求1所述从桑叶中制备黄酮、生物碱的方法，其特征在于步骤1)、2)中活 性炭为针剂类医药活性炭，加入量液体的1_3%，脱色时间为1-2小时。
6.根据权利要求1所述从桑叶中制备黄酮、生物碱的方法，其特征在于步骤3)中的碱 醇为ph9-12的90-95%乙醇氢氧化钠溶液。
7.根据权利要求1所述从桑叶中制备黄酮、生物碱的方法，其特征在于步骤4)中的氧 化铝为120-200目中性氧化铝。
全文摘要
本发明涉及一种从桑叶中制备黄酮、生物碱的方法。工艺步骤包括碱水加热提取黄酮，90-95％乙醇和活性炭再提取生物碱，黄酮提取液调酸过大孔树脂柱，酸化结晶和70-80％乙醇溶解重结晶，生物碱提取液浓缩，丙酮再溶解，过氧化铝短粗柱，氨化结晶和85-90％乙醇溶解重结晶。采用本发明生产桑叶黄酮、生物碱，工艺简单易工业化、原料利用率高，所得产品纯度高、符合食品医药要求。
文档编号A61P3/06GK101862371SQ20101013026
公开日2010年10月20日 申请日期2010年3月23日 优先权日2010年3月23日
发明者苏刘花 申请人:南京泽朗农业发展有限公司
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