一种中药脂质体的制备方法
专利名称：一种中药脂质体的制备方法
技术领域：
本发明涉及一种中药脂质体的制备方法。
背景技术：
脂质体于1956年由英国学者Bangham和Standish用电镜观察悬浮于水中的磷脂 时发现。1971年Gregoriadis和Ryman开始将脂质体用于药物载体研究。脂质体是脂类分 子(类脂)的自组装体，是一 种由一个或多个脂质双层中间包覆微水相的结构。在脂质体 的形成过程中，亲水的头部形成膜的内外表面层，而亲油性的尾部处于膜的中间，膜壁厚度 约为5-7nm，而囊的直径一般在25-500nm之间。脂质体的这种结构使其能够携带各种亲水 的、疏水的或两亲性的物质，这些物质被包入脂质体内部水相，或插入类脂双分子层，或吸 附连结在脂质体的表面。纳米中药不是一种新的药种，而是中药纳米化后的一种笼统的叫法。它是指运用 纳米技术制造的、粒径小于IOOnm的有效成分、有效部位、原药及其复方制剂。同传统的中 药相比，纳米中药具有如下的特点①提高了药物的利用度，减少用药量。②增强药物的靶 向性。③具有缓释功能，将中药纳米粒进行一定的表面修饰后，可能使中药具有缓释作用。 ④呈现新的药效，拓宽原药适用证，中药加工至纳米尺寸时，由于其量子尺寸等效应导致其 物理、化学特性的改变，从而可使中药呈现出新功能。⑤丰富中药的剂型选择，提升传统给 药途径。纳米中药所具有的新功能可在临床中解决许多疑难问题，在临床各科的应用前景 将十分广阔。在制备含药脂质体时，根据药物装载的机制不同，可分为被动载药法和主动载 药法两大类。对于脂溶性的、与磷脂亲和力高的药物，被动载药法较为适用；而对于两亲性 药物，其油水分配系数受介质的PH值和离子强度的影响较大，包封条件的较小变化，就有 可能使包封率有较大的变化，不适合放大生产。所谓主动载药，即通过内外水相的不同离子 或化合物梯度进行载药，主要有K+-Na+梯度和H+梯度(即pH梯度等)。由于采用主动载 药法制备的脂质体包封率高、渗漏率小，非常适合工业化大生产。在脂质体的制备过程中，脂质体的包封率、稳定性和粒径是最重要的3个部分。首 先，脂质体如混悬在水相中，在储存过程中，药物会慢慢渗漏，导致药物包封率的改变。因 此，使得脂质体能有一个稳定的剂型保证脂质体的包封率不发生大的变化，并且不影响制 剂的疗效。其次，脂质体的粒径也是一个很重要的指标。获得小粒径脂质体一直是研发的 目标，这是由于i大粒径的脂质体很容易被体内的单核巨噬细胞系统所吞噬，从而被迅速 清除；ii小粒径的脂质体可以被动靶向。综上所述，由于脂质体的特点和良好性能，若能很好的解决上述的问题，利用稳定 可行的脂质体制备方法来获得有效的脂质体制剂。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术中存在的问题，提供新的中药脂质体的制备方法。
为达到上述目的，本发明采用如下技术方案一种中药脂质体的制备方法，其特征在于该方法的具体步骤为a.将卵磷脂与胆固醇按质量比为(1 5) 1的比例溶解在无水乙醇中得到溶液A，将该溶液A除去溶剂得到磷脂膜；b.将步骤a所得磷脂膜溶于pH值为3 5的枸橼酸缓冲溶液中，经水化后得到空 白脂质体B，将该空白脂质体B用微孔滤膜过滤，得到澄清的空白脂质体溶液；c.将待包封的物质和载体物质溶于水中得到溶液C，所述的载体物质为蔗糖、 海藻糖、乳糖或甘露醇；所述的待包封的物质与步骤b所得空白脂质体溶液之间的比例为 0. 6mg/ml 1. 2mg/ml，载体物质与待包封的物质之间的质量比例为1 1 10 1。d.将步骤c所得溶液C加入到步骤b所得空白脂质体溶液中得到混合液，调节该 混合液的pH为6 8，在30 80°C温度下进行孵化，再经高压均质法得到脂质体溶液；e.将步骤d得到的脂质体溶液冷冻干燥除去溶剂，得到冻干的中药脂质体。上述的待包封的物质为两亲性药物。上述的两亲性药物有盐酸小檗碱或阿胶。上述的的微孔滤膜大小为0. 22 μ m 0. 8 μ m。上述的卵磷脂为氢化大豆卵磷脂、大豆卵磷脂或蛋黄卵磷脂。上述的胆固醇为蛋白胆固醇、血清胆固醇、蛋黄胆固醇或胆囊胆固醇；上述的步骤a所得溶液A中还加入抗氧化剂。上述的抗氧化剂为维生素E。上述的高压均质法的具体工艺为将溶液加入均质机中采用逐级循环升压，压力 范围为20 IOOMpa0本发明添加了蔗糖、海藻糖、乳糖或甘露醇等载体物质以保护脂质体颗粒的完整 性。这些物质的加入可以作为冻干保护剂，使得到得冻干产物具有良好的形态。同时使得 到得冻干产物不易吸潮，可以长期贮存，待到需要使用时，在进行水化即可。本发明中提到得待包封的中药，是中药提纯物生物碱类药物，该类药物在有机相 中的溶解度很小，而在水相中的溶解度相对较大，此时采用了主动载药的方法，利用PH梯 度法包封生物碱类药物。将用薄膜蒸发法得到的脂类物质溶解于柠檬酸中，通过微孔滤膜 过膜，之后加入溶解了的生物碱类中药成分。然后再用碳酸氢钠调节外水相PH值，造成脂 质体内外的PH值梯度，通过孵育使得药物进入到脂质体中得到含药脂质体，从而实现主动 载药过程。本发明方法工艺非常简单，只需要一台旋转蒸发仪和一台冷冻干燥机就好了，其 他几乎不需要大型设备，且非常容易放大的，有利于工业化生产。本发明方法找到了一种有 效的控制脂质体粒径的方法。本发明方法通过调整脂类组成成分之间的比例，然后通过高 压均质机调整其均质压力，可以有效的控制脂质体的粒径。由于可以做到粒度均一，稳定性 好的小颗粒脂质体，大大增加了本发明的应用价值。本发明中所涉及到的溶媒为无水乙醇，无水乙醇本身就是毒性很低的溶媒，并且 在旋转蒸发仪上能过较为彻底的去除，所以最终得到的产物几乎不会有残留。本发明方法还可以得到较高的药物的包封效率。
具体实施例方式实施例一磷脂与胆固醇比例对脂质体粒径的影响氢化大豆卵磷脂与血清胆固醇的质量比分别为2 1,3 1,4 1,5 1,6 1。再分别加入5mg维生素E溶于适量 乙醇中，超声溶解，使之成为白色透亮溶液；减压回收溶剂，在瓶壁形成一层薄膜；注入枸 橼酸溶液60ml，使得脂材溶解，并且使脂材膜在枸橼酸中水化Ih ；将前面溶液过0. 45um微 孔滤膜，得到空白脂质体；在得到的空白脂质体溶液中加入80mg的盐酸小檗碱溶液，超声 使之完全溶解；用碳酸氢钠溶解调整其PH值为6. 8，使得游离的盐酸小檗碱进入到空白脂 质体中；在60°C下孵化20分钟，得到黄色的类脂混悬液；将类脂混悬液在高压均质机中均 质2h，得到的脂质体为澄明均一的溶液，，将0. 5g蔗糖加入到脂质体溶液中，超声使之完 全溶解。将脂质体溶液在低温冰箱中快速冰冻，放置于冷冻干燥机中冻干24H。将冻干粉 末加双蒸水超声溶解，并用ZETASSIZEROiiarlvern公司)测定粒径。脂质体的粒径分别为 118. 7nm，90. 8nm，95. 29nm，85. 4nm，83. 3nm(intensity mean)。用透射电子显微镜观察所得 脂质体。采用负染法进行观察。即将脂质体用1%，PH =7的磷钨酸进行染色。在电子显 微镜下观察到脂质体为圆球，大小与用粒度仪测定的结果相吻合。实施例二 盐酸小檗碱脂质体的制备称取80mg大豆卵磷脂，20mg蛋黄胆固醇，以 及5mg维生素E溶于适量乙醇中，超声溶解，使之成为白色透亮溶液；减压回收溶剂，在瓶 壁形成一层薄膜；注入枸橼酸溶液50ml，使得脂材溶解，并且使脂材膜在枸橼酸中水化Ih ； 将前面溶液过0. Sum微孔滤膜，得到空白脂质体；在得到的空白脂质体溶液中加入80mg的 盐酸小檗碱溶液，超声使之完全溶解；用碳酸氢钠溶解调整其PH值为6. 8，使得游离的盐酸 小檗碱进入到空白脂质体中；在50°C下孵化20分钟，得到黄色的类脂混悬液；将类脂混悬 液在高压均质机中在压力400-1000Mpa下逐级增压均质2h，得到的脂质体为澄明均一的溶 液，将0. 5g海藻糖加入到脂质体溶液中，超声使之完全溶解。将脂质体溶液在低温冰箱中 快速冰冻，放置于冷冻干燥机中冻干24H。将冻干粉末加双蒸水超声溶解，并通过激光粒度 仪测得粒径在90nm左右。用柱分离的方法分离脂质体和游离药物，测得包封率为81%。实施例三称取SOmg蛋黄卵磷脂，20mg血清胆固醇，以及5mg维生素E溶于适量 氯仿中，超声溶解，使之成为白色透亮溶液；减压回收溶剂，在瓶壁形成一层薄膜；注入枸 橼酸溶液60ml，使得脂材溶解，并且使脂材膜在枸橼酸中水化0. 5h ；将前面溶液过0. 45um 微孔滤膜，得到空白脂质体；在得到的空白脂质体溶液中加入40mg的盐酸小檗碱溶液，超 声使之完全溶解；用碳酸氢钠溶解调整其PH值为6.0，使得游离的盐酸小檗碱进入到空白 脂质体中；在40°C下孵化10分钟，得到黄色的类脂混悬液；将类脂混悬液在高压均质机中 在压力200-600Mpa下逐级增压均质lh，得到的脂质体为澄明均一的溶液，将0. 3g甘露醇加 入到脂质体溶液中，超声使之完全溶解。将脂质体溶液在低温冰箱中快速冰冻，放置于冷冻 干燥机中冻干24H。将冻干粉末加双蒸水超声溶解，并通过激光粒度仪测得粒径在95nm左 右。用柱分离的方法分离脂质体和游离药物，测得包封率为78%。实施例四阿胶脂质体的制备称取IOOmg蛋黄卵磷脂，40mg胆固醇，以及5mg维 生素E溶于适量乙醇中，超声溶解，使之成为白色透亮溶液；减压回收溶剂，在瓶壁形成一 层薄膜；注入枸橼酸溶液80ml，使得脂材溶解，并且使脂材膜在枸橼酸中水化2h ；将前面溶 液过0. 45um微孔滤膜，得到空白脂质体；在得到的空白脂质体溶液中加入IOOmg的阿胶溶 液，超声使之完全溶解；用碳酸氢钠溶解调整其PH值为6. 8，使得游离的阿胶制剂进入到空白脂质体中；在60°C下孵化30分钟，得到褐色的类脂混悬液；将类脂混悬液在高压均质机中在压力200-800Mpa下逐级增压均质1. 5h，得到的脂质体为澄明均一的溶液，将0. 8g乳糖 加入到脂质体溶液中，超声使之完全溶解。将脂质体溶液在低温冰箱中快速冰冻，放置于冷 冻干燥机中冻干24H。将冻干粉末加双蒸水超声溶解，并通过激光粒度仪测得粒径在93nm 左右。用柱分离的方法分离脂质体和游离药物，测得包封率为75%。
权利要求
一种中药脂质体的制备方法，其特征在于该方法的具体步骤为a.将卵磷脂与胆固醇按质量比为(1～5)∶1的比例溶解在无水乙醇中得到溶液A，将该溶液A除去溶剂得到磷脂膜；b.将步骤a所得磷脂膜溶于pH值为3～5的枸橼酸缓冲溶液中，经水化后得到空白脂质体B，将该空白脂质体B用微孔滤膜过滤，得到澄清的空白脂质体溶液；c.将待包封的物质和载体物质溶于水中得到溶液C，所述的载体物质为蔗糖、海藻糖、乳糖或甘露醇；所述的待包封的物质与步骤b所得空白脂质体溶液之间的比例为0.6mg/ml～1.2mg/ml，载体物质与待包封的物质之间的质量比例为1∶1～10∶1。d.将步骤c所得溶液C加入到步骤b所得空白脂质体溶液中得到混合液，调节该混合液的pH为6～8，在30～80℃温度下进行孵化，再经高压均质法得到脂质体溶液；e.将步骤d得到的脂质体溶液冷冻干燥除去溶剂，得到冻干的中药脂质体。
2.根据权利要求1所述的中药脂质体的制备方法，其特征在于所述的待包封的物质为 两亲性药物。
3.根据权利要求3所述的中药脂质体的制备方法，其特征在于所述的两亲性药物有 盐酸小檗碱或阿胶。
4.根据权利要求1所述的中药脂质体的制备方法，其特征在于所述的的微孔滤膜大小 为 0·22μπι 0·8μ 。
5.根据权利要求1所述的纳米盐酸小檗碱脂质体的制备方法，其特征在于所述的卵磷 脂为氢化大豆卵磷脂、大豆卵磷脂或蛋黄卵磷脂。
6.根据权利要求1所述的纳米盐酸小檗碱脂质体的制备方法，其特征在于所述的胆固 醇为蛋白胆固醇、血清胆固醇、蛋黄胆固醇或胆囊胆固醇；
7.根据权利要求1所述的中药脂质体的制备方法，其特征在于步骤a所得溶液A中还 加入抗氧化剂。
8.根据权利要求6所述的中药脂质体的制备方法，其特征在于所述的抗氧化剂为维生素E。
9.根据权利要求1所述的中药脂质体的制备方法，其特征在于所述的高压均质法的具 体工艺为将溶液加入均质机中采用逐级循环升压，压力范围为20 lOOMpa。
全文摘要
本发明涉及一种中药脂质体的制备方法。该方法的具体步骤为将卵磷脂与胆固醇溶解在无水乙醇中得到溶液A，将该溶液A除去溶剂得到磷脂膜；再将磷脂膜中加入pH值为3～5的枸橼酸缓冲溶液，经水化后得到空白脂质体B，将该空白脂质体B用微孔滤膜过滤，得到澄清的空白脂质体溶液；将待包封的物质和载体物质溶于水中得到溶液C，将步骤c所得溶液C加入到步骤b所得空白脂质体B中调整其pH值为6～8，在一定温度范围内(30～80℃)孵化，得到脂质体溶液；将步骤d得到的脂质体溶液冷冻干燥除去溶剂，得到冻干的中药脂质体。本发明方法工艺非常简单，有利于工业化生产。本发明方法通过调整脂类组成成分之间的比例，然后通过高压均质机调整其均质压力，可以有效的控制脂质体的粒径。由于可以做到粒度均一，稳定性好的小颗粒脂质体，大大增加了本发明的应用价值。
文档编号A61K35/36GK101804028SQ20101015252
公开日2010年8月18日 申请日期2010年4月20日 优先权日2010年4月20日
发明者何丹农, 王俊玲, 金彩虹 申请人:上海纳米技术及应用国家工程研究中心有限公司
技术领域：
本发明涉及一种中药脂质体的制备方法。
背景技术：
脂质体于1956年由英国学者Bangham和Standish用电镜观察悬浮于水中的磷脂 时发现。1971年Gregoriadis和Ryman开始将脂质体用于药物载体研究。脂质体是脂类分 子(类脂)的自组装体，是一 种由一个或多个脂质双层中间包覆微水相的结构。在脂质体 的形成过程中，亲水的头部形成膜的内外表面层，而亲油性的尾部处于膜的中间，膜壁厚度 约为5-7nm，而囊的直径一般在25-500nm之间。脂质体的这种结构使其能够携带各种亲水 的、疏水的或两亲性的物质，这些物质被包入脂质体内部水相，或插入类脂双分子层，或吸 附连结在脂质体的表面。纳米中药不是一种新的药种，而是中药纳米化后的一种笼统的叫法。它是指运用 纳米技术制造的、粒径小于IOOnm的有效成分、有效部位、原药及其复方制剂。同传统的中 药相比，纳米中药具有如下的特点①提高了药物的利用度，减少用药量。②增强药物的靶 向性。③具有缓释功能，将中药纳米粒进行一定的表面修饰后，可能使中药具有缓释作用。 ④呈现新的药效，拓宽原药适用证，中药加工至纳米尺寸时，由于其量子尺寸等效应导致其 物理、化学特性的改变，从而可使中药呈现出新功能。⑤丰富中药的剂型选择，提升传统给 药途径。纳米中药所具有的新功能可在临床中解决许多疑难问题，在临床各科的应用前景 将十分广阔。在制备含药脂质体时，根据药物装载的机制不同，可分为被动载药法和主动载 药法两大类。对于脂溶性的、与磷脂亲和力高的药物，被动载药法较为适用；而对于两亲性 药物，其油水分配系数受介质的PH值和离子强度的影响较大，包封条件的较小变化，就有 可能使包封率有较大的变化，不适合放大生产。所谓主动载药，即通过内外水相的不同离子 或化合物梯度进行载药，主要有K+-Na+梯度和H+梯度(即pH梯度等)。由于采用主动载 药法制备的脂质体包封率高、渗漏率小，非常适合工业化大生产。在脂质体的制备过程中，脂质体的包封率、稳定性和粒径是最重要的3个部分。首 先，脂质体如混悬在水相中，在储存过程中，药物会慢慢渗漏，导致药物包封率的改变。因 此，使得脂质体能有一个稳定的剂型保证脂质体的包封率不发生大的变化，并且不影响制 剂的疗效。其次，脂质体的粒径也是一个很重要的指标。获得小粒径脂质体一直是研发的 目标，这是由于i大粒径的脂质体很容易被体内的单核巨噬细胞系统所吞噬，从而被迅速 清除；ii小粒径的脂质体可以被动靶向。综上所述，由于脂质体的特点和良好性能，若能很好的解决上述的问题，利用稳定 可行的脂质体制备方法来获得有效的脂质体制剂。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术中存在的问题，提供新的中药脂质体的制备方法。
为达到上述目的，本发明采用如下技术方案一种中药脂质体的制备方法，其特征在于该方法的具体步骤为a.将卵磷脂与胆固醇按质量比为(1 5) 1的比例溶解在无水乙醇中得到溶液A，将该溶液A除去溶剂得到磷脂膜；b.将步骤a所得磷脂膜溶于pH值为3 5的枸橼酸缓冲溶液中，经水化后得到空 白脂质体B，将该空白脂质体B用微孔滤膜过滤，得到澄清的空白脂质体溶液；c.将待包封的物质和载体物质溶于水中得到溶液C，所述的载体物质为蔗糖、 海藻糖、乳糖或甘露醇；所述的待包封的物质与步骤b所得空白脂质体溶液之间的比例为 0. 6mg/ml 1. 2mg/ml，载体物质与待包封的物质之间的质量比例为1 1 10 1。d.将步骤c所得溶液C加入到步骤b所得空白脂质体溶液中得到混合液，调节该 混合液的pH为6 8，在30 80°C温度下进行孵化，再经高压均质法得到脂质体溶液；e.将步骤d得到的脂质体溶液冷冻干燥除去溶剂，得到冻干的中药脂质体。上述的待包封的物质为两亲性药物。上述的两亲性药物有盐酸小檗碱或阿胶。上述的的微孔滤膜大小为0. 22 μ m 0. 8 μ m。上述的卵磷脂为氢化大豆卵磷脂、大豆卵磷脂或蛋黄卵磷脂。上述的胆固醇为蛋白胆固醇、血清胆固醇、蛋黄胆固醇或胆囊胆固醇；上述的步骤a所得溶液A中还加入抗氧化剂。上述的抗氧化剂为维生素E。上述的高压均质法的具体工艺为将溶液加入均质机中采用逐级循环升压，压力 范围为20 IOOMpa0本发明添加了蔗糖、海藻糖、乳糖或甘露醇等载体物质以保护脂质体颗粒的完整 性。这些物质的加入可以作为冻干保护剂，使得到得冻干产物具有良好的形态。同时使得 到得冻干产物不易吸潮，可以长期贮存，待到需要使用时，在进行水化即可。本发明中提到得待包封的中药，是中药提纯物生物碱类药物，该类药物在有机相 中的溶解度很小，而在水相中的溶解度相对较大，此时采用了主动载药的方法，利用PH梯 度法包封生物碱类药物。将用薄膜蒸发法得到的脂类物质溶解于柠檬酸中，通过微孔滤膜 过膜，之后加入溶解了的生物碱类中药成分。然后再用碳酸氢钠调节外水相PH值，造成脂 质体内外的PH值梯度，通过孵育使得药物进入到脂质体中得到含药脂质体，从而实现主动 载药过程。本发明方法工艺非常简单，只需要一台旋转蒸发仪和一台冷冻干燥机就好了，其 他几乎不需要大型设备，且非常容易放大的，有利于工业化生产。本发明方法找到了一种有 效的控制脂质体粒径的方法。本发明方法通过调整脂类组成成分之间的比例，然后通过高 压均质机调整其均质压力，可以有效的控制脂质体的粒径。由于可以做到粒度均一，稳定性 好的小颗粒脂质体，大大增加了本发明的应用价值。本发明中所涉及到的溶媒为无水乙醇，无水乙醇本身就是毒性很低的溶媒，并且 在旋转蒸发仪上能过较为彻底的去除，所以最终得到的产物几乎不会有残留。本发明方法还可以得到较高的药物的包封效率。
具体实施例方式实施例一磷脂与胆固醇比例对脂质体粒径的影响氢化大豆卵磷脂与血清胆固醇的质量比分别为2 1,3 1,4 1,5 1,6 1。再分别加入5mg维生素E溶于适量 乙醇中，超声溶解，使之成为白色透亮溶液；减压回收溶剂，在瓶壁形成一层薄膜；注入枸 橼酸溶液60ml，使得脂材溶解，并且使脂材膜在枸橼酸中水化Ih ；将前面溶液过0. 45um微 孔滤膜，得到空白脂质体；在得到的空白脂质体溶液中加入80mg的盐酸小檗碱溶液，超声 使之完全溶解；用碳酸氢钠溶解调整其PH值为6. 8，使得游离的盐酸小檗碱进入到空白脂 质体中；在60°C下孵化20分钟，得到黄色的类脂混悬液；将类脂混悬液在高压均质机中均 质2h，得到的脂质体为澄明均一的溶液，，将0. 5g蔗糖加入到脂质体溶液中，超声使之完 全溶解。将脂质体溶液在低温冰箱中快速冰冻，放置于冷冻干燥机中冻干24H。将冻干粉 末加双蒸水超声溶解，并用ZETASSIZEROiiarlvern公司)测定粒径。脂质体的粒径分别为 118. 7nm，90. 8nm，95. 29nm，85. 4nm，83. 3nm(intensity mean)。用透射电子显微镜观察所得 脂质体。采用负染法进行观察。即将脂质体用1%，PH =7的磷钨酸进行染色。在电子显 微镜下观察到脂质体为圆球，大小与用粒度仪测定的结果相吻合。实施例二 盐酸小檗碱脂质体的制备称取80mg大豆卵磷脂，20mg蛋黄胆固醇，以 及5mg维生素E溶于适量乙醇中，超声溶解，使之成为白色透亮溶液；减压回收溶剂，在瓶 壁形成一层薄膜；注入枸橼酸溶液50ml，使得脂材溶解，并且使脂材膜在枸橼酸中水化Ih ； 将前面溶液过0. Sum微孔滤膜，得到空白脂质体；在得到的空白脂质体溶液中加入80mg的 盐酸小檗碱溶液，超声使之完全溶解；用碳酸氢钠溶解调整其PH值为6. 8，使得游离的盐酸 小檗碱进入到空白脂质体中；在50°C下孵化20分钟，得到黄色的类脂混悬液；将类脂混悬 液在高压均质机中在压力400-1000Mpa下逐级增压均质2h，得到的脂质体为澄明均一的溶 液，将0. 5g海藻糖加入到脂质体溶液中，超声使之完全溶解。将脂质体溶液在低温冰箱中 快速冰冻，放置于冷冻干燥机中冻干24H。将冻干粉末加双蒸水超声溶解，并通过激光粒度 仪测得粒径在90nm左右。用柱分离的方法分离脂质体和游离药物，测得包封率为81%。实施例三称取SOmg蛋黄卵磷脂，20mg血清胆固醇，以及5mg维生素E溶于适量 氯仿中，超声溶解，使之成为白色透亮溶液；减压回收溶剂，在瓶壁形成一层薄膜；注入枸 橼酸溶液60ml，使得脂材溶解，并且使脂材膜在枸橼酸中水化0. 5h ；将前面溶液过0. 45um 微孔滤膜，得到空白脂质体；在得到的空白脂质体溶液中加入40mg的盐酸小檗碱溶液，超 声使之完全溶解；用碳酸氢钠溶解调整其PH值为6.0，使得游离的盐酸小檗碱进入到空白 脂质体中；在40°C下孵化10分钟，得到黄色的类脂混悬液；将类脂混悬液在高压均质机中 在压力200-600Mpa下逐级增压均质lh，得到的脂质体为澄明均一的溶液，将0. 3g甘露醇加 入到脂质体溶液中，超声使之完全溶解。将脂质体溶液在低温冰箱中快速冰冻，放置于冷冻 干燥机中冻干24H。将冻干粉末加双蒸水超声溶解，并通过激光粒度仪测得粒径在95nm左 右。用柱分离的方法分离脂质体和游离药物，测得包封率为78%。实施例四阿胶脂质体的制备称取IOOmg蛋黄卵磷脂，40mg胆固醇，以及5mg维 生素E溶于适量乙醇中，超声溶解，使之成为白色透亮溶液；减压回收溶剂，在瓶壁形成一 层薄膜；注入枸橼酸溶液80ml，使得脂材溶解，并且使脂材膜在枸橼酸中水化2h ；将前面溶 液过0. 45um微孔滤膜，得到空白脂质体；在得到的空白脂质体溶液中加入IOOmg的阿胶溶 液，超声使之完全溶解；用碳酸氢钠溶解调整其PH值为6. 8，使得游离的阿胶制剂进入到空白脂质体中；在60°C下孵化30分钟，得到褐色的类脂混悬液；将类脂混悬液在高压均质机中在压力200-800Mpa下逐级增压均质1. 5h，得到的脂质体为澄明均一的溶液，将0. 8g乳糖 加入到脂质体溶液中，超声使之完全溶解。将脂质体溶液在低温冰箱中快速冰冻，放置于冷 冻干燥机中冻干24H。将冻干粉末加双蒸水超声溶解，并通过激光粒度仪测得粒径在93nm 左右。用柱分离的方法分离脂质体和游离药物，测得包封率为75%。
权利要求
一种中药脂质体的制备方法，其特征在于该方法的具体步骤为a.将卵磷脂与胆固醇按质量比为(1～5)∶1的比例溶解在无水乙醇中得到溶液A，将该溶液A除去溶剂得到磷脂膜；b.将步骤a所得磷脂膜溶于pH值为3～5的枸橼酸缓冲溶液中，经水化后得到空白脂质体B，将该空白脂质体B用微孔滤膜过滤，得到澄清的空白脂质体溶液；c.将待包封的物质和载体物质溶于水中得到溶液C，所述的载体物质为蔗糖、海藻糖、乳糖或甘露醇；所述的待包封的物质与步骤b所得空白脂质体溶液之间的比例为0.6mg/ml～1.2mg/ml，载体物质与待包封的物质之间的质量比例为1∶1～10∶1。d.将步骤c所得溶液C加入到步骤b所得空白脂质体溶液中得到混合液，调节该混合液的pH为6～8，在30～80℃温度下进行孵化，再经高压均质法得到脂质体溶液；e.将步骤d得到的脂质体溶液冷冻干燥除去溶剂，得到冻干的中药脂质体。
2.根据权利要求1所述的中药脂质体的制备方法，其特征在于所述的待包封的物质为 两亲性药物。
3.根据权利要求3所述的中药脂质体的制备方法，其特征在于所述的两亲性药物有 盐酸小檗碱或阿胶。
4.根据权利要求1所述的中药脂质体的制备方法，其特征在于所述的的微孔滤膜大小 为 0·22μπι 0·8μ 。
5.根据权利要求1所述的纳米盐酸小檗碱脂质体的制备方法，其特征在于所述的卵磷 脂为氢化大豆卵磷脂、大豆卵磷脂或蛋黄卵磷脂。
6.根据权利要求1所述的纳米盐酸小檗碱脂质体的制备方法，其特征在于所述的胆固 醇为蛋白胆固醇、血清胆固醇、蛋黄胆固醇或胆囊胆固醇；
7.根据权利要求1所述的中药脂质体的制备方法，其特征在于步骤a所得溶液A中还 加入抗氧化剂。
8.根据权利要求6所述的中药脂质体的制备方法，其特征在于所述的抗氧化剂为维生素E。
9.根据权利要求1所述的中药脂质体的制备方法，其特征在于所述的高压均质法的具 体工艺为将溶液加入均质机中采用逐级循环升压，压力范围为20 lOOMpa。
全文摘要
本发明涉及一种中药脂质体的制备方法。该方法的具体步骤为将卵磷脂与胆固醇溶解在无水乙醇中得到溶液A，将该溶液A除去溶剂得到磷脂膜；再将磷脂膜中加入pH值为3～5的枸橼酸缓冲溶液，经水化后得到空白脂质体B，将该空白脂质体B用微孔滤膜过滤，得到澄清的空白脂质体溶液；将待包封的物质和载体物质溶于水中得到溶液C，将步骤c所得溶液C加入到步骤b所得空白脂质体B中调整其pH值为6～8，在一定温度范围内(30～80℃)孵化，得到脂质体溶液；将步骤d得到的脂质体溶液冷冻干燥除去溶剂，得到冻干的中药脂质体。本发明方法工艺非常简单，有利于工业化生产。本发明方法通过调整脂类组成成分之间的比例，然后通过高压均质机调整其均质压力，可以有效的控制脂质体的粒径。由于可以做到粒度均一，稳定性好的小颗粒脂质体，大大增加了本发明的应用价值。
文档编号A61K35/36GK101804028SQ20101015252
公开日2010年8月18日 申请日期2010年4月20日 优先权日2010年4月20日
发明者何丹农, 王俊玲, 金彩虹 申请人:上海纳米技术及应用国家工程研究中心有限公司
最新回复(0)