兽用长效复方多西环素注射液及其制备方法

专利名称：：兽用长效复方多西环素注射液及其制备方法
技术领域：
：本发明为兽用注射药品领域，特别是一种兽用长效复方多西环素注射液及其制备方法。
背景技术：
：多西环素(Doxycycline)，又名脱氧土霉素，分子式为C22H24N2O8，分子量为444.40，为半合成广谱抗生素，抗菌谱与四环素相同，但其体内和体外活性均较土霉素等其他四环素强，其注射液在多种畜禽疾病的防治上有广泛的应用，将其与金属离子络合，可以延长药物作用时间，达到长效的目的，同时也可以提高PH值及稳定性，从而提高了疗效，有广阔的开发应用前景。目前市场上的长效多西环素注射液多为单方制剂，采用与金属离子络合，对吸收速度有一定影响，因而降低了药物的速效性，有些与其他抗生素组成的复方制剂，主药往往达不到较高的含量(20%)，因而也难以达到速效和长效的目的。公开号为CN101301268A公开了一种兽用盐酸多西环素注射液的组成及其制备工艺。由主药、溶剂、盐酸多西环素络合剂、抗氧化剂组成。采用较高含量的金属离子(MG2+)作为盐酸多西环素络合剂，使盐酸多西环素溶解度和PH值显着提高，同时能使其注射剂的稳定性增强；最重要的是药物经过络合以后，毒性及组织刺激性降低。选用2-吡咯烷酮和丙二醇或二甲基乙酰胺混合溶媒作为溶剂，增加了注射剂的稳定性，在低温(4°C)条件下不析出和结冻，并且采用了浓盐酸、乙醇胺为PH调节剂，该发明用镁离子和盐酸多西环素络合，包括主药、附加剂和溶媒。主药为盐酸多西环素；附加剂为抗氧剂、金属络合剂和注射用溶媒，该技术方案解决了多西环素长效的问题，但难以实现速效的目的；公开号为CN1861084A的复方氟苯尼考注射液，氟苯尼考和多西环素的含量都很低，不能达到高效的结果；公开号为CN101181276A采用盐酸脱氧土霉素和盐酸土霉素复合，与公开号为CN101301268A的发明相比类似，只能降低一些成本；公开号为CN10102014A用克林霉素或林克霉素与多西环素复合，未采用金属离子络合物的方式实现长效性。
发明内容本发明目的是针对现有技术的不足，提出一种将金属络合多西环素与抗菌增效剂甲氧苄啶、具有抗病毒和免疫增强作用的黄芪多糖或二者的结合复合，在保持多西环素金属络合物长效性的同时，实现高效速效的目的，提高药物的抗菌效果，扩大了产品的使用范围，降低了使用成本。实现本发明的技术方案如下兽用长效复方多西环素注射液，所述兽用长效复方多西环素注射液，其特征是由主药多西环素或盐酸多西环素、增效剂、溶剂、络合剂、抗氧化剂、PH调节剂组成，其中主药为多西环素或盐酸多西环素，含量按多西环素计为10.020.0克；增效剂为甲氧苄啶0.25克或黄芪多糖0.25克或二者的组合，二者的用量相同或相异均在上述范围内；络合剂为能与多西环素上多羟基络合的Ca2+、Mg2+、Zn2+或Al3+金属离子化合物，采用氧化钙、氧化镁、氧化锌、氧化铝、氯化钙、氯化镁、硫酸镁，氯化铝等，其用量与多西环素用量的摩尔比为1.OO1.101.00；所用抗氧化剂为甲醛合次硫酸氢钠、硫代硫酸钠、偏重亚硫酸钠中的一种，或其组合，其用量为0.101.00；所用的PH调节剂为盐酸、乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺或其组合，PH值调节的范围为4.07.5，所用的注射用溶剂添加至100ml，注射用溶剂为注射用水、丙二醇、α-吡咯烷酮、N甲基α-吡咯烷酮、二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、PEG200、T80及其组合。所述兽用长效复方多西环素注射液制备方法为(1)将计量好的络合剂和抗氧化剂加入部分注射用溶剂中搅拌混合均勻；(2)在溶液(1)中加入多西环素或盐酸多西环素，边搅拌边升温反应至溶液澄清透明，控制反应温度为4080°C，保温反应时间为10-100分钟，在络合反应的同时调节PH值，促进反应进行；(3)将计量好的增效剂加入适量溶剂中，搅拌至完全溶解；(4)将溶液(3)加入溶液(2)中，搅拌均勻并调PH值4.06.5，补注射用水至配方量；(5)用钛棒或滤膜过滤，分装与安瓿瓶或西林瓶中，灭菌后即得成品。本发明的有益效果是提出一种将金属络合多西环素与抗菌增效剂甲氧苄啶、尤其是具有抗病毒和免疫增强作用的黄芪多糖以及尤其是二者的结合复合，在保持多西环素金属络合物长效性的同时，实现高效速效的目的，提高药物的抗菌效果，扩大了产品的使用范围，并降低了使用成本。本发明的产品对光、热稳定性高，可有效延长药物的作用时间，。本发明将金属与多西环素在溶媒中络合，在络合反应时用碱性PH调节剂促进络合快速进行，使络合反应快速完成，减少多西环素分解，成品颜色浅稳定性好，在保证产品长效性的同时，通过药效增强剂甲氧苄啶使注射剂疗效提高，而黄芪多糖不仅抗病毒，还可增强免疫作用，从而进一步提高疗效，降低用药成本。具体实施例方式实施例1(1)取丙二醇35ml、注射用水10ml，加入氧化镁0.9克、硫代硫酸钠0.2克，搅拌均勻；(2)在溶液(1)中加入盐酸多西环素11.7克，边搅拌边升温至6070°C反应，在络合反应的同时用乙醇胺缓慢调节PH值6.06.5，保温反应30分钟至溶液澄清透明得多西环素溶液。(3)取二甲基乙酰胺20ml，加入甲氧苄啶0.6或2.0克，甲氧苄啶亦可以采用4或5克，搅拌至完全溶解得甲氧苄啶溶液；(4)将甲氧苄啶溶液加入到多西环素溶液中，搅拌均勻后，调PH值6.0，补注射用水至IOOml；(5)用钛棒或滤膜过滤，分装与安瓿瓶或西林瓶中，灭菌后即得成品。实施例2(1)取丙二醇35ml、注射用水12ml，加入氯化镁8.8克或氧化锌1.80克、甲醛合次硫酸氢钠0.4克，搅拌均勻；(2)在溶液(1)中加入盐酸多西环素23.5克，边搅拌边升温至5060°C反应，在络合反应的同时用三乙醇胺缓慢调节PH值5.56.0，保温反应25分钟至溶液澄清透明得多西环素溶液。(3)取二甲基乙酰胺25ml，加入甲氧苄啶4.0或5.0克，搅拌至完全溶解得甲氧苄啶溶液；(4)将甲氧苄啶溶液加入到多西环素溶液中，搅拌均勻后，调PH值6.5，补注射用水至IOOml；(5)用钛棒或滤膜过滤，分装与安瓿瓶或西林瓶中，灭菌后即得成品。实施例3(1)取丙二醇40ml、注射用水6ml，加入氧化镁1.75克、氧化钙2.52克或氧化锌3.60克、硫代硫酸钠0.2克，搅拌均勻；(2)在溶液(1)中加入盐酸多西环素23.6克，边搅拌边升温至6575°C反应，在络合反应的同时用乙醇胺缓慢调节PH值6.06.5，保温反应60分钟至溶液澄清透明得多西环素溶液。(3)取二甲基乙酰胺30ml，加入甲氧苄啶4.0克或5.0克，搅拌至完全溶解得甲氧苄啶溶液；(4)将甲氧苄啶溶液加入到多西环素溶液中，搅拌均勻后，调PH值6.0，补注射用水至IOOml；(5)用钛棒或滤膜过滤，分装与安瓿瓶或西林瓶中，灭菌后即得成品。实施例4(1)取丙二醇35ml、注射用水6ml，亚硫酸氢钠0.5克，加入氧化镁0.9克、氧化钙1.26克或氧化锌1.80克，搅拌均勻；(2)在溶液(1)中加入盐酸多西环素11.8克，边搅拌边升温至7080°C反应，在络合反应的同时用乙醇胺缓慢调节PH值6.06.5，保温反应30分钟至溶液澄清透明得多西环素溶液。(3)取二甲基甲酰胺20ml、T801.5克加入黄芪多糖1、4或5克、搅拌至完全溶解得黄芪多糖溶液；(4)将黄芪多糖溶液加入到多西环素溶液中，搅拌均勻后，调PH值4.5，补注射用水至IOOml；(5)用钛棒或滤膜过滤，分装与安瓿瓶或西林瓶中，灭菌后即得成品。实验例5(1)取α-吡咯烷酮35ml、注射用水6ml，亚硫酸氢钠0.5克，加入氧化镁0.9克、氧化钙1.26克或氧化锌1.80克，搅拌均勻；(2)在溶液(1)中加入盐酸多西环素11.8克，边搅拌边升温至7080°C反应，在络合反应的同时用乙醇胺缓慢调节PH值6.06.5，保温反应30分钟至溶液澄清透明得多西环素溶液。(3)在黄芪多糖溶液制备过程中添加甲氧苄啶0.2或2克，搅拌至完全溶解得黄芪多糖与甲氧苄啶溶液；(4)将黄芪多糖甲氧苄啶溶液加入到多西环素溶液中，搅拌均勻后，调PH值4.5，补注射用水至IOOml；(5)用钛棒或滤膜过滤，分装与安瓿瓶或西林瓶中，灭菌后即得成品。也可以使用N甲基α_吡咯烷酮或α-吡咯烷酮与丙二醇混合使用。实施例6(1)取丙二醇45ml、注射用水6ml，加入氧化镁0.3克、氯化镁3.0克、硫代硫酸钠0.2克，搅拌均勻；(2)在溶液(1)中加入盐酸多西环素11.7克，边搅拌边升温至4050°C反应，在络合反应的同时用二乙醇胺缓慢调节PH值6.06.5，保温反应30分钟至溶液澄清透明得多西环素溶液。(3)取二甲基乙酰胺25ml，加入甲氧苄啶2.0克，搅拌至完全溶解得甲氧苄啶溶液；(4)将甲氧苄啶溶液加入到多西环素溶液中，搅拌均勻后，调PH值5.5，补注射用水至IOOml；(5)用钛棒或滤膜过滤，分装与安瓿瓶或西林瓶中，灭菌后即得成品。实施例7(1)取α-吡咯烷酮40ml、注射用水6ml，加入氯化镁4.5克、硫代硫酸钠1.0克，搅拌均勻；(2)在溶液(1)中加入多西环素10.1克，边搅拌边升温至6070°C反应，，在络合反应的同时用乙醇胺缓慢调节PH值7.07.5，保温反应30分钟至溶液澄清透明得多西环素溶液。(3)取二甲基乙酰胺25ml，加入甲氧苄啶1.0克，搅拌至完全溶解得甲氧苄啶溶液；(4)将甲氧苄啶溶液加入到多西环素溶液中，搅拌均勻后，调PH值6.5，补注射用水至IOOml；(5)用钛棒或滤膜过滤，分装与安瓿瓶或西林瓶中，灭菌后即得成品。实施例8(1)取α-吡咯烷酮30ml、注射用水6ml，加入氯化镁6.75克、硫代硫酸钠0.4克，搅拌均勻；(2)在溶液(1)中加入多西环素15.0克，边搅拌边升温至6070°C反应，，在络合反应的同时用乙醇胺缓慢调节PH值7.07.5，保温反应30分钟至溶液澄清透明得多西环素溶液。(3)取二甲基乙酰胺30ml，加入甲氧苄啶3.0克，搅拌至完全溶解得甲氧苄啶溶液；(4)将甲氧苄啶溶液加入到多西环素溶液中，搅拌均勻后，调PH值6，补注射用水至IOOml；(5)用钛棒或滤膜过滤，分装与安瓿瓶或西林瓶中，灭菌后即得成品。实施例9(1)取α-吡咯烷酮30ml、注射用水6ml，加入氯化镁8.8克、硫代硫酸钠0.4克，搅拌均勻；(2)在溶液(1)中加入多西环素20.0克，边搅拌边升温至6070°C反应，，在络合反应的同时用乙醇胺缓慢调节PH值7.O7.5，保温反应30分钟至溶液澄清透明得多西环素溶液。(3)取二甲基乙酰胺30ml，加入甲氧苄啶4.0克、黄芪多糖1.0克，搅拌至完全溶解得甲氧苄啶溶液；(4)将甲氧苄啶、黄芪多糖溶液加入到多西环素溶液中，搅拌均勻后，调PH值6，补注射用水至IOOml；(5)用钛棒或滤膜过滤，分装与安瓿瓶或西林瓶中，灭菌后即得成品。本发明的治疗预防效果按实施例3制备兽用长效复方多西环素注射液(20%多西环素、4%甲氧苄啶、络合剂选用氧化镁)、实施例9制备兽用长效复方多西环素注射液(20%多西环素、4%甲氧苄啶、黄芪多糖)和单方长效多西环素注射液(20%多西环素)在养猪场进行实际疗效试验，试验分为仔猪保健和母猪产后保健，实验方案及结果如下一仔猪保健试验(一)单方长效多西环素注射液仔猪三针保健(100ml打100头)仔猪出生第3天第1针0.3ml/头仔猪出生第7天第2针0.3ml/头仔猪出生第21天第3针0.4ml/头总计1.0ml/头(二)实施例3制备兽用长效复方多西环素注射液仔猪三针保健(100ml打125头)仔猪出生第3天第1针0.25ml/头仔猪出生第7天第2针0.25ml/头仔猪出生第21天第3针0.3ml/头总计0.8ml/头(三)实施例9制备兽用长效复方多西环素注射液仔猪三针保健(100ml打143头)仔猪出生第3天第1针0.2ml/头仔猪出生第7天第2针0.2ml/头仔猪出生第21天第3针0.3ml/头总计0.7ml/头仔猪保健试验结果表明三种保健方案达到了如下的效果帮助仔猪在断奶前抵抗各种细菌病，促进增重，提高离乳整齐度；预防猪附红体病、气喘病、传染性胸膜肺炎、萎缩性鼻炎和下痢的发生；减少蓝耳病引起的混合感染。三种保健方案的总体效果相当，成本效益情况如下表表1仔猪保健成本比较表经<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>〔0083〕二、母猪产后保健〔0084〕母猪产后8小时内每头母猪肌注多西环素注射液预防产后感染乳房炎。子宫炎和无乳症，保护母猪繁衍性能，三种保健方案如下〔0085〕(一)母猪产后8小时内每头母猪肌注单方长效多西环素注射液4.0ML(100ml打25头)，有效率83%；(二)母猪产后8小时内每头母猪肌注实施例3制备兽用长效复方多西环素注射液3.Oml(100ml打33头)，有效率89%；(三)母猪产后8小时内每头母猪肌注实施例9制备兽用长效复方多西环素注射液2.5ml(100ml打40头)，有效率93%；结果表明方案(三)的疗效最高，方案(二)的疗效次之，方案(一)的疗效最低，经济效益见表1。通过上述仔猪保健和母猪产后保健试验说明按实施例3制备兽用长效复方多西环素注射液(20%多西环素、4%甲氧苄啶、络合剂选用氧化镁)和按施例9制备兽用长效复方多西环素注射液(20%多西环素、4%甲氧苄啶、黄芪多糖)在疗效和经济性方面相近，都优于对照的单方多西环素注射液，既提高了疗效，又降低了使用成本，有一定的经济价值，但这还只是一种初步性的尝试，要实现大规模产业化，尚须在制备工艺和扩大临床试验范围及试验规模方面做更多的工作，同时也希望相关领域的专家积极的指导和交流。由上可见，采用抗病毒、免增效剂为甲氧苄啶或黄芪多糖或二者的组合，具有较明显的免疫增强作用。尤其是二者的结合。权利要求兽用长效复方多西环素注射液，其特征是由主药多西环素或盐酸多西环素、增效剂、溶剂、络合剂、抗氧化剂、PH调节剂组成，其中主药为多西环素或盐酸多西环素，含量按多西环素计为重量份，10.0～20.0克；增效剂为甲氧苄啶、黄芪多糖，重量份均为0.2～5克，或甲氧苄啶或黄芪多糖二者的组合；络合剂为能与多西环素上多羟基络合的Ca2+、Mg2+、Zn2+或Al3+金属离子化合物，即氧化钙、氧化镁、氧化锌、氧化铝、氯化钙、氯化镁、硫酸镁，氯化铝，其用量与多西环素用量的摩尔比为1.00～1.10∶1.00；所用抗氧化剂为甲醛合次硫酸氢钠、硫代硫酸钠、偏重亚硫酸钠中的一种或其组合，其用量为0.10～1.00克；所用的pH调节剂为盐酸、乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺或其组合，pH值调节的范围为4.0～7.5，所用的注射用溶剂添加至100ml，注射用溶剂为注射用水、丙二醇、α-吡咯烷酮、N甲基α-吡咯烷酮、二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、PEG200、T80及其组合。2.根据权利要求1所述的兽用长效复方多西环素注射液，其特征是(1)取丙二醇40ml、注射用水6ml，加入氧化镁1.75克、氧化钙2.53克或氧化锌3.60克、硫代硫酸钠0.2克，搅拌均勻；(2)在溶液(1)中加入盐酸多西环素23.6克，边搅拌边升温至6575°C反应，在络合反应的同时用乙醇胺缓慢调节PH值6.06.5，保温反应60分钟至溶液澄清透明得多西环素溶液。(3)取二甲基乙酰胺30ml，加入甲氧苄啶4.0克或5.0克，搅拌至完全溶解得甲氧苄啶溶液；(4)将甲氧苄啶溶液加入到多西环素溶液中，搅拌均勻后，调PH值6.0，补注射用水至IOOml；(5)用钛棒或滤膜过滤，分装与安瓿瓶或西林瓶中，灭菌后即得成品。3.根据权利要求2所述的兽用长效复方多西环素注射液，其特征是(1)取丙二醇35ml、注射用水6ml，络合剂为亚硫酸氢钠0.5克，加入氧化镁0.9克、氧化钙1.26克或氧化锌1.80克，搅拌均勻；(2)在溶液(1)中加入盐酸多西环素11.8克，边搅拌边升温至7080°C反应，在络合反应的同时用乙醇胺缓慢调节PH值6.06.5，保温反应30分钟至溶液澄清透明得多西环素溶液。(3)取二甲基甲酰胺20ml、T801.5克加入黄芪多糖1、4或5克、搅拌至完全溶解得黄芪多糖溶液；(4)将黄芪多糖溶液加入到多西环素溶液中，搅拌均勻后，调PH值4.5，补注射用水至IOOml；(5)用钛棒或滤膜过滤，分装与安瓿瓶或西林瓶中，灭菌后即得成品。4.根据权利要求3所述的兽用长效复方多西环素注射液，其特征是(1)取丙二醇35ml、注射用水6ml，但络合剂亚硫酸氢钠0.5克，加入氧化镁、氧化钙或氧化锌0.9克，搅拌均勻；(2)在溶液(1)中加入盐酸多西环素11.8克，边搅拌边升温至7080°C反应，在络合反应的同时用乙醇胺缓慢调节PH值6.06.5，保温反应30分钟至溶液澄清透明得多西环素溶液；(3)在黄芪多糖溶液制备过程中添加甲氧苄啶0.2或1克，搅拌至完全溶解得黄芪多糖与甲氧苄啶溶液；(4)将黄芪多糖甲氧苄啶溶液加入到多西环素溶液中，搅拌均勻后，调PH值4.5，补注射用水至IOOml；(5)用钛棒或滤膜过滤，分装与安瓿瓶或西林瓶中，灭菌后即得成品。5.兽用长效复方多西环素注射液制备方法，其特征是所述注射液的配比是多西环素或盐酸多西环素含量按多西环素计为重量份，10.020.0克；增效剂为甲氧苄啶、黄芪多糖，重量份均为0.25克，或甲氧苄啶或黄芪多糖二者的组合；络合剂为能与多西环素上多羟基络合的Ca2+、Mg2+、Zn2+或Al3+金属离子化合物，即氧化钙、氧化镁、氧化锌、氧化铝、氯化钙、氯化镁、硫酸镁，氯化铝，其用量与多西环素用量的摩尔比为1.001.101.00；所用抗氧化剂为甲醛合次硫酸氢钠、硫代硫酸钠、偏重亚硫酸钠中的一种，或其组合，其用量为0.101.00；所用的PH调节剂为盐酸、乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺或其组合，PH值调节的范围为4.07.5，所用的注射用溶剂添加至100ml，注射用溶剂为注射用水、丙二醇、α-吡咯烷酮、N甲基α-吡咯烷酮、二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、PEG200、T80及其组合；并以下述步骤进行制备(1)将计量好的络合剂和抗氧化剂加入部分注射用溶剂中搅拌混合均勻；(2)在溶液(1)中加入多西环素或盐酸多西环素，边搅拌边升温反应至溶液澄清透明，控制反应温度为4080°C，保温反应时间为10-100分钟，在络合反应的同时调节PH值，促进反应进行；(3)将计量好的增效剂加入适量溶剂中，搅拌至完全溶解；(4)将溶液(3)加入溶液(2)中，搅拌均勻并调PH值4.06.5，补注射用水至配方量；(5)用钛棒或滤膜过滤，分装与安瓿瓶或西林瓶中，灭菌后即得成品。全文摘要兽用长效复方多西环素注射液，由主药多西环素或盐酸多西环素、增效剂、溶剂、络合剂、抗氧化剂、pH调节剂组成，其中主药为多西环素或盐酸多西环素，含量按多西环素计为重量份，10.0～20.0克；增效剂为甲氧苄啶、黄芪多糖，重量份均为0.2～5克，或甲氧苄啶或黄芪多糖二者的组合；络合剂用量与多西环素用量的摩尔比为1.00～1.10∶1.00；所用抗氧化剂用量为0.10～1.00；所用的注射用溶剂添加至100ml，注射用溶剂为注射用水、丙二醇、α-吡咯烷酮、N甲基α-吡咯烷酮、二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺及其组合。本发明通过药效增强剂甲氧苄啶使注射剂疗效提高，黄芪多糖不仅抗病毒，还可增强免疫作用。文档编号A61K31/65GK101804062SQ20101015447公开日2010年8月18日申请日期2010年4月23日优先权日2010年4月23日发明者孔令娣,张建新,戴荣贵,杨庆,黄文江申请人:镇江威特药业有限责任公司