泰山虫草药基发酵镇咳剂的制备方法
专利名称：泰山虫草药基发酵镇咳剂的制备方法
技术领域：
本发明涉及中药学和生物技术领域一一种镇咳口服液的制备方法。
背景技术：
咳嗽是人体重要的保护性反射，能够帮助清除呼吸道分泌物或者异物。另一方面， 如果患有感冒、支气管炎或者其他呼吸道疾病，咳嗽就会对人体造成一系列的危害。且具有周期长，难治愈，容易引发多种并发症等特征，例如力竭、声音嘶 、尿失禁等，严重影响患者的休息、工作和学习。情况严重的还可能冲破肺脏，造成气胸，后果不堪设想。咳嗽让人痛苦不堪，给人们的生活带来了诸多不便，因此镇咳药物成为家庭必备。市面上镇咳的药物种类繁多，但都或多或少带有毒副作用，长期服用对人体造成一定危害。药基发酵是在真菌的培养基中添加一定量的中药材，通过真菌复杂的酶系，增强原有疗效或降低毒副作用，或产生新的功能。现代研究表明，由于中药材经其发酵后，其成分会发生改变，同时，药材中某些成分也会促进真菌的生长或其活性成分的增加。
发明内容
本发明针对以上不足之处，提供一种泰山虫草药基发酵镇咳剂的制备方法，采用本方法制取的镇咳药物具有明显的清肺、祛痰、镇咳的作用。为达到上述目的，本发明采用的技术方案是一种泰山虫草药基发酵镇咳剂的制备方法，包括以下制备方法a、向液体发酵的基本培养基中加入2% -15%的杏叶参提取液，向发酵罐中接入泰山虫草菌株，发酵培养73-120h ；b、将发酵物分离提取；C、将提取物灭菌。上述的制备方法中，培养基用以下质量份的原料制取蒸馏水1000份、土豆200 份、葡萄糖20份、蛋白胨5份、磷酸二氢钾2份、硫酸镁2份。上述的制备方法中，所述的发酵培养过程是在转速140r/min、室温20°C条件下振
荡培养。上述的制备方法中，所述的分离提取可采用以下步骤将发酵产物在50°C -IOO0C 的水浴加热条件下处理50-120min后，离心提取上清液，并将上清液浓缩至原体积的 1/6-1/4。上述的制备方法，所述的分离提取也可采用以下步骤将发酵产物在60°C -90 60-100Hz超声波条件下处理30-60min后，离心提取上清液，并将上清液浓缩至原体积的 1/6-1/4。上述的制备方法，所述的分离提取也可采用以下步骤将发酵产物在50°C -IOO0C 的水浴加热条件下处理50-120min后，再在60°C -90 °C、60-IOOHz超声波条件下处理 30-60min后，离心提取上清液，并将上清液浓缩至原体积的1/6-1/4。
上述的制备方法，在上述浓缩后的上清液中添加-10%的蜂蜜。。泰山虫草和杏叶参药理如下泰山虫草，是拟青霉菌寄生于鳞翅目昆虫体内，生长发育后形成的一种子座、菌核复合体，具有提高免疫力、延缓衰老、扶正固本、保护心脏、肝脏、抗痉挛、抗癌、防毒、减毒等作用。药用价值高，安全性好。其活性成分虫草多糖和虫草酸等，是能提高人体免疫机能的生物活性物质。虫草素又称虫草菌素，即3’ -脱氧腺苷，是一种核苷类抗生素，具有多种生理活性，如抑菌、抗肿瘤、抑制病毒，以及增强免疫功能、防治心脑血管疾病等。虫草多糖是一类高分子复合物，它作为虫草的主要活性成分之一，是虫草中含量最高的药理活性物质，具有明显的抗肿瘤作用。杏叶参的根质鲜嫩，富含多种维生素、微量元素、皂苷、多糖等成分，为泰山地区名贵中草药，药用价值很高，安全性好。且以其作为泰山虫草液体发酵的主要组分之一，能够促进泰山虫草的生长。泰山虫草、杏叶参都是国家规定的药食两用的药材，两者通过药基发酵结合，对人体安全无害，有广阔的临床应用前景和开发价值。目前尚无相关研究报道。本发明以杏叶参为药基培养的组成成分，以泰山虫草为发酵菌株，采用发酵方法， 从发酵物汇总提取镇咳药物，配置成镇咳药物，具有明显的清肺、祛痰、镇咳的作用，下面结合具体实施方式
加以描述。
具体实施例方式一种泰山虫草药基发酵镇咳剂的制备方法，首先制备培养基采用以下质量份的原料制取蒸馏水1000份、土豆200份、葡萄糖20份、蛋白胨5份、磷酸二氢钾2份、硫酸镁 2份。杏叶参的提取杏叶参粉100g，蒸馏水1000ml，煎煮至沸腾后保持微沸30min，取上清液减压浓缩至100ml，即得杏叶参提取液。实施例1(1)药基发酵在上述基本培养基中加入2%的杏叶参提取液，于发酵罐中接入泰山虫草菌种，在140r/min、室温20°C条件下振荡发酵培养72h ；(2)分离提取将上述药基发酵产物用50°C的水浴加热处理50min后破壁后取上清液，浓缩至原体积的1/6 ；(3) 口服液制备，将上清液添加的蜂蜜等辅料，灭菌后制得口服液。实施例2(1)药基发酵在上述基本培养基中加入15%的杏叶参提取液，于发酵罐中接入泰山虫草菌种，在140r/min、室温20°C条件下振荡发酵培养120h ；(2)分离提取将上述药基发酵产物用100°C的水浴加热处理120min后破壁后取上清液，浓缩至原体积的1/4 ；(3) 口服液制备，将上清液添加10%的蜂蜜等辅料，灭菌后制得口服液。实施例3(1)药基发酵在上述基本培养基中加入6%的杏叶参提取液，于发酵罐中接入泰山虫草菌种，在140r/min、室温20°C条件下振荡发酵培养80h ；
(2)分离提取将上述药基发酵产物用80°C的水浴加热处理SOmin后破壁后取上清液，浓缩至原体积的1/5 ；(3) 口服液制备，将上清液添加6%的蜂蜜等辅料，灭菌后制得口服液。实施例4(1)药基发酵在上述基本培养基中加入6%的杏叶参提取液，于发酵罐中接入泰山虫草菌种，在140r/min、室温20°C条件下振荡发酵培养90h ；(2)分离提取将上述药基发酵产物用90°C的水浴加热处理IOOmin后破壁后取上清液，浓缩至原体积的1/5 ；(3) 口服液制备，将上清液添加8%的蜂蜜等辅料，灭菌后制得口服液实施例5(1)药基发酵在上述基本培养基中加入8%的杏叶参提取液，于发酵罐中接入泰山虫草菌种，在140r/min、室温20°C条件下振荡发酵培养85h ；(2)分离提取将上述药基发酵产物用60°C、60Hz条件下超声波处理20min后破壁后取上清液，浓缩至原体积的1/4 ；(3) 口服液制备，将上清液添加2%的蜂蜜等辅料，灭菌后制得口服液。实施例6(1)药基发酵在上述基本培养基中加入3%的杏叶参提取液，于发酵罐中接入泰山虫草菌种，在140r/min、室温20°C条件下振荡发酵培养90h ；(2)分离提取将上述药基发酵产物用90°C、IOOHz条件下超声波处理40min后破壁后取上清液，浓缩至原体积的1/4 ；(3) 口服液制备，将上清液添加3%的蜂蜜等辅料，灭菌后制得口服液。实施例7(1)药基发酵在上述基本培养基中加入9%的杏叶参提取液，于发酵罐中接入泰山虫草菌种，在140r/min、室温20°C条件下振荡发酵培养IOOh ；(2)分离提取将上述药基发酵产物用80°C、90Hz条件下超声波处理30min后破壁后取上清液，浓缩至原体积的1/5 ；(3) 口服液制备，将上清液添加5%的蜂蜜等辅料，灭菌后制得口服液。实施例8(1)药基发酵在上述基本培养基中加入6%的杏叶参提取液，于发酵罐中接入泰山虫草菌种，在140r/min、室温20°C条件下振荡发酵培养IOOh ；(2)分离提取将上述药基发酵产物用50°C的水浴加热处理50min后，再在60°C、 60Hz的条件下超声波处理20min，后破壁后取上清液，浓缩至原体积的1/4 ；(3) 口服液制备，将上清液添加6%的蜂蜜等辅料，灭菌后制得口服液。实施例9(1)药基发酵在上述基本培养基中加入7%的杏叶参提取液，于发酵罐中接入泰山虫草菌种，在140r/min、室温20°C条件下振荡发酵培养IlOh ；(2)分离提取将上述药基发酵产物用100°C的水浴加热处理120min后，再在 900C UOOHz的条件下超声波处理40min，后破壁后取上清液，浓缩至原体积的1/6 ；(3) 口服液制备，将上清液添加7%的蜂蜜等辅料，灭菌后制得口服液。
实施例10(1)药基发酵在上述基本培养基中加入14%的杏叶参提取液，于发酵罐中接入泰山虫草菌种，在140r/min、室温20°C条件下振荡发酵培养10 ；(2)分离提取将上述药基发酵产物用90°C的水浴加热处理IOOmin后，再在 8090Hz的条件下超声波处理30min，后破壁后取上清液，浓缩至原体积的1/5 ；(3) 口服液制备，将上清液添加9%的蜂蜜等辅料，灭菌后制得口服液。实施例11(1)药基发酵在上述基本培养基中加入15%的杏叶参提取液，于发酵罐中接入泰山虫草菌种，在140r/min、室温20°C条件下振荡发酵培养IlOh ；(2)分离提取将上述药基发酵产物用95°C的水浴加热处理IlOmin后，再在 8595Hz的条件下超声波处理35min，后破壁后取上清液，浓缩至原体积的1/4 ；(3) 口服液制备，将上清液添加10%的蜂蜜等辅料，灭菌后制得口服液。对比实验杏叶参加入量对发酵生物量的影响在相同条件下，按照下表的加入量向培养基中加入杏叶参提取液，然后经相同的发酵时间和提取条件下获得发酵产物，然后将发酵产物在5000r/s条件下，离心20min后分离得菌丝体，60°C烘干，测生物量。下表为杏叶参加入量对发酵生物量的影响
权利要求
1.一种泰山虫草药基发酵镇咳剂的制备方法，其特征在于，包括以下制备方法a、向液体发酵的基本培养基中加入2%-15%的杏叶参提取液，向发酵罐中接入泰山虫草菌株，发酵培养72-120h;b、将发酵物分离提取；c、将提取物灭菌。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，培养基用以下质量份的原料制取蒸馏水1000份、土豆200份、葡萄糖20份、蛋白胨5份、磷酸二氢钾2份、硫酸镁2份。
3.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，所述的发酵培养过程是在转速 140r/min、室温20°C条件下振荡培养。
4.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，所述的分离提取采用以下步骤 将发酵产物在50°C -10(TC的水浴加热条件下处理50-120min后，离心提取上清液，并将上清液浓缩至原体积的1/6-1/4。
5.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，所述的分离提取采用以下步骤 将发酵产物在60°C -90°C,60-100Hz超声波条件下处理30-60min后，离心提取上清液，并将上清液浓缩至原体积的1/6-1/4。
6.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，所述的分离提取采用以下步骤将发酵产物在50°C -100°C的水浴加热条件下处理50-120min后，再在60°C _90°C、 60-100Hz超声波条件下处理30-60min后，离心提取上清液，并将上清液浓缩至原体积的 1/6-1/4。
7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在上述浓缩后的上清液中添加 1% -10%的蜂蜜。
全文摘要
本发明公开了一种泰山虫草药基发酵镇咳剂的制备方法。其以泰山虫草为发酵菌株，以杏叶参为药基培养基的组成成分，采用液态发酵的方法，通过对发酵产物进行处理，配制成镇咳口服液。该镇咳剂具有明显的镇咳、清肺、祛痰的作用，经实验证明，该镇咳剂的总有效率达90％以上，有很高的开发应用价值。
文档编号A61P11/14GK102232979SQ201010154498
公开日2011年11月9日 申请日期2010年4月26日 优先权日2010年4月26日
发明者聂心语, 苏延友, 蒋嘉琪 申请人:聂心语, 蒋嘉琪
技术领域：
本发明涉及中药学和生物技术领域一一种镇咳口服液的制备方法。
背景技术：
咳嗽是人体重要的保护性反射，能够帮助清除呼吸道分泌物或者异物。另一方面， 如果患有感冒、支气管炎或者其他呼吸道疾病，咳嗽就会对人体造成一系列的危害。且具有周期长，难治愈，容易引发多种并发症等特征，例如力竭、声音嘶 、尿失禁等，严重影响患者的休息、工作和学习。情况严重的还可能冲破肺脏，造成气胸，后果不堪设想。咳嗽让人痛苦不堪，给人们的生活带来了诸多不便，因此镇咳药物成为家庭必备。市面上镇咳的药物种类繁多，但都或多或少带有毒副作用，长期服用对人体造成一定危害。药基发酵是在真菌的培养基中添加一定量的中药材，通过真菌复杂的酶系，增强原有疗效或降低毒副作用，或产生新的功能。现代研究表明，由于中药材经其发酵后，其成分会发生改变，同时，药材中某些成分也会促进真菌的生长或其活性成分的增加。
发明内容
本发明针对以上不足之处，提供一种泰山虫草药基发酵镇咳剂的制备方法，采用本方法制取的镇咳药物具有明显的清肺、祛痰、镇咳的作用。为达到上述目的，本发明采用的技术方案是一种泰山虫草药基发酵镇咳剂的制备方法，包括以下制备方法a、向液体发酵的基本培养基中加入2% -15%的杏叶参提取液，向发酵罐中接入泰山虫草菌株，发酵培养73-120h ；b、将发酵物分离提取；C、将提取物灭菌。上述的制备方法中，培养基用以下质量份的原料制取蒸馏水1000份、土豆200 份、葡萄糖20份、蛋白胨5份、磷酸二氢钾2份、硫酸镁2份。上述的制备方法中，所述的发酵培养过程是在转速140r/min、室温20°C条件下振
荡培养。上述的制备方法中，所述的分离提取可采用以下步骤将发酵产物在50°C -IOO0C 的水浴加热条件下处理50-120min后，离心提取上清液，并将上清液浓缩至原体积的 1/6-1/4。上述的制备方法，所述的分离提取也可采用以下步骤将发酵产物在60°C -90 60-100Hz超声波条件下处理30-60min后，离心提取上清液，并将上清液浓缩至原体积的 1/6-1/4。上述的制备方法，所述的分离提取也可采用以下步骤将发酵产物在50°C -IOO0C 的水浴加热条件下处理50-120min后，再在60°C -90 °C、60-IOOHz超声波条件下处理 30-60min后，离心提取上清液，并将上清液浓缩至原体积的1/6-1/4。
上述的制备方法，在上述浓缩后的上清液中添加-10%的蜂蜜。。泰山虫草和杏叶参药理如下泰山虫草，是拟青霉菌寄生于鳞翅目昆虫体内，生长发育后形成的一种子座、菌核复合体，具有提高免疫力、延缓衰老、扶正固本、保护心脏、肝脏、抗痉挛、抗癌、防毒、减毒等作用。药用价值高，安全性好。其活性成分虫草多糖和虫草酸等，是能提高人体免疫机能的生物活性物质。虫草素又称虫草菌素，即3’ -脱氧腺苷，是一种核苷类抗生素，具有多种生理活性，如抑菌、抗肿瘤、抑制病毒，以及增强免疫功能、防治心脑血管疾病等。虫草多糖是一类高分子复合物，它作为虫草的主要活性成分之一，是虫草中含量最高的药理活性物质，具有明显的抗肿瘤作用。杏叶参的根质鲜嫩，富含多种维生素、微量元素、皂苷、多糖等成分，为泰山地区名贵中草药，药用价值很高，安全性好。且以其作为泰山虫草液体发酵的主要组分之一，能够促进泰山虫草的生长。泰山虫草、杏叶参都是国家规定的药食两用的药材，两者通过药基发酵结合，对人体安全无害，有广阔的临床应用前景和开发价值。目前尚无相关研究报道。本发明以杏叶参为药基培养的组成成分，以泰山虫草为发酵菌株，采用发酵方法， 从发酵物汇总提取镇咳药物，配置成镇咳药物，具有明显的清肺、祛痰、镇咳的作用，下面结合具体实施方式
加以描述。
具体实施例方式一种泰山虫草药基发酵镇咳剂的制备方法，首先制备培养基采用以下质量份的原料制取蒸馏水1000份、土豆200份、葡萄糖20份、蛋白胨5份、磷酸二氢钾2份、硫酸镁 2份。杏叶参的提取杏叶参粉100g，蒸馏水1000ml，煎煮至沸腾后保持微沸30min，取上清液减压浓缩至100ml，即得杏叶参提取液。实施例1(1)药基发酵在上述基本培养基中加入2%的杏叶参提取液，于发酵罐中接入泰山虫草菌种，在140r/min、室温20°C条件下振荡发酵培养72h ；(2)分离提取将上述药基发酵产物用50°C的水浴加热处理50min后破壁后取上清液，浓缩至原体积的1/6 ；(3) 口服液制备，将上清液添加的蜂蜜等辅料，灭菌后制得口服液。实施例2(1)药基发酵在上述基本培养基中加入15%的杏叶参提取液，于发酵罐中接入泰山虫草菌种，在140r/min、室温20°C条件下振荡发酵培养120h ；(2)分离提取将上述药基发酵产物用100°C的水浴加热处理120min后破壁后取上清液，浓缩至原体积的1/4 ；(3) 口服液制备，将上清液添加10%的蜂蜜等辅料，灭菌后制得口服液。实施例3(1)药基发酵在上述基本培养基中加入6%的杏叶参提取液，于发酵罐中接入泰山虫草菌种，在140r/min、室温20°C条件下振荡发酵培养80h ；
(2)分离提取将上述药基发酵产物用80°C的水浴加热处理SOmin后破壁后取上清液，浓缩至原体积的1/5 ；(3) 口服液制备，将上清液添加6%的蜂蜜等辅料，灭菌后制得口服液。实施例4(1)药基发酵在上述基本培养基中加入6%的杏叶参提取液，于发酵罐中接入泰山虫草菌种，在140r/min、室温20°C条件下振荡发酵培养90h ；(2)分离提取将上述药基发酵产物用90°C的水浴加热处理IOOmin后破壁后取上清液，浓缩至原体积的1/5 ；(3) 口服液制备，将上清液添加8%的蜂蜜等辅料，灭菌后制得口服液实施例5(1)药基发酵在上述基本培养基中加入8%的杏叶参提取液，于发酵罐中接入泰山虫草菌种，在140r/min、室温20°C条件下振荡发酵培养85h ；(2)分离提取将上述药基发酵产物用60°C、60Hz条件下超声波处理20min后破壁后取上清液，浓缩至原体积的1/4 ；(3) 口服液制备，将上清液添加2%的蜂蜜等辅料，灭菌后制得口服液。实施例6(1)药基发酵在上述基本培养基中加入3%的杏叶参提取液，于发酵罐中接入泰山虫草菌种，在140r/min、室温20°C条件下振荡发酵培养90h ；(2)分离提取将上述药基发酵产物用90°C、IOOHz条件下超声波处理40min后破壁后取上清液，浓缩至原体积的1/4 ；(3) 口服液制备，将上清液添加3%的蜂蜜等辅料，灭菌后制得口服液。实施例7(1)药基发酵在上述基本培养基中加入9%的杏叶参提取液，于发酵罐中接入泰山虫草菌种，在140r/min、室温20°C条件下振荡发酵培养IOOh ；(2)分离提取将上述药基发酵产物用80°C、90Hz条件下超声波处理30min后破壁后取上清液，浓缩至原体积的1/5 ；(3) 口服液制备，将上清液添加5%的蜂蜜等辅料，灭菌后制得口服液。实施例8(1)药基发酵在上述基本培养基中加入6%的杏叶参提取液，于发酵罐中接入泰山虫草菌种，在140r/min、室温20°C条件下振荡发酵培养IOOh ；(2)分离提取将上述药基发酵产物用50°C的水浴加热处理50min后，再在60°C、 60Hz的条件下超声波处理20min，后破壁后取上清液，浓缩至原体积的1/4 ；(3) 口服液制备，将上清液添加6%的蜂蜜等辅料，灭菌后制得口服液。实施例9(1)药基发酵在上述基本培养基中加入7%的杏叶参提取液，于发酵罐中接入泰山虫草菌种，在140r/min、室温20°C条件下振荡发酵培养IlOh ；(2)分离提取将上述药基发酵产物用100°C的水浴加热处理120min后，再在 900C UOOHz的条件下超声波处理40min，后破壁后取上清液，浓缩至原体积的1/6 ；(3) 口服液制备，将上清液添加7%的蜂蜜等辅料，灭菌后制得口服液。
实施例10(1)药基发酵在上述基本培养基中加入14%的杏叶参提取液，于发酵罐中接入泰山虫草菌种，在140r/min、室温20°C条件下振荡发酵培养10 ；(2)分离提取将上述药基发酵产物用90°C的水浴加热处理IOOmin后，再在 8090Hz的条件下超声波处理30min，后破壁后取上清液，浓缩至原体积的1/5 ；(3) 口服液制备，将上清液添加9%的蜂蜜等辅料，灭菌后制得口服液。实施例11(1)药基发酵在上述基本培养基中加入15%的杏叶参提取液，于发酵罐中接入泰山虫草菌种，在140r/min、室温20°C条件下振荡发酵培养IlOh ；(2)分离提取将上述药基发酵产物用95°C的水浴加热处理IlOmin后，再在 8595Hz的条件下超声波处理35min，后破壁后取上清液，浓缩至原体积的1/4 ；(3) 口服液制备，将上清液添加10%的蜂蜜等辅料，灭菌后制得口服液。对比实验杏叶参加入量对发酵生物量的影响在相同条件下，按照下表的加入量向培养基中加入杏叶参提取液，然后经相同的发酵时间和提取条件下获得发酵产物，然后将发酵产物在5000r/s条件下，离心20min后分离得菌丝体，60°C烘干，测生物量。下表为杏叶参加入量对发酵生物量的影响
权利要求
1.一种泰山虫草药基发酵镇咳剂的制备方法，其特征在于，包括以下制备方法a、向液体发酵的基本培养基中加入2%-15%的杏叶参提取液，向发酵罐中接入泰山虫草菌株，发酵培养72-120h;b、将发酵物分离提取；c、将提取物灭菌。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，培养基用以下质量份的原料制取蒸馏水1000份、土豆200份、葡萄糖20份、蛋白胨5份、磷酸二氢钾2份、硫酸镁2份。
3.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，所述的发酵培养过程是在转速 140r/min、室温20°C条件下振荡培养。
4.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，所述的分离提取采用以下步骤 将发酵产物在50°C -10(TC的水浴加热条件下处理50-120min后，离心提取上清液，并将上清液浓缩至原体积的1/6-1/4。
5.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，所述的分离提取采用以下步骤 将发酵产物在60°C -90°C,60-100Hz超声波条件下处理30-60min后，离心提取上清液，并将上清液浓缩至原体积的1/6-1/4。
6.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，所述的分离提取采用以下步骤将发酵产物在50°C -100°C的水浴加热条件下处理50-120min后，再在60°C _90°C、 60-100Hz超声波条件下处理30-60min后，离心提取上清液，并将上清液浓缩至原体积的 1/6-1/4。
7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在上述浓缩后的上清液中添加 1% -10%的蜂蜜。
全文摘要
本发明公开了一种泰山虫草药基发酵镇咳剂的制备方法。其以泰山虫草为发酵菌株，以杏叶参为药基培养基的组成成分，采用液态发酵的方法，通过对发酵产物进行处理，配制成镇咳口服液。该镇咳剂具有明显的镇咳、清肺、祛痰的作用，经实验证明，该镇咳剂的总有效率达90％以上，有很高的开发应用价值。
文档编号A61P11/14GK102232979SQ201010154498
公开日2011年11月9日 申请日期2010年4月26日 优先权日2010年4月26日
发明者聂心语, 苏延友, 蒋嘉琪 申请人:聂心语, 蒋嘉琪
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