取代哌嗪乙基磺酰胺类衍生物及制备和用途的制作方法
专利名称：取代哌嗪乙基磺酰胺类衍生物及制备和用途的制作方法
技术领域：
本发明属药物化学和药理学领域，涉及取代哌嗪乙基磺酰胺类衍生物及制备，以 及该类化合物在制备抗肿瘤药物中的用途。
背景技术：
细胞凋亡是重要的生命现象，细胞凋亡过程的异常是肿瘤发生和发展过程中的一 个重要环节。蛋白激酶PKB作为一种介导细胞存活信号的重要分子，在细胞凋亡过程中 的调节作用十分重要。PKB的活化过程是细胞存活信号转导途径的中心环节，利用各种方 式抑制PKB的活性将可以促进细胞凋亡过程。蛋白激酶PKB将是一新的、良好的抗肿瘤药 物靶位。在目前蛋白激酶抑制剂的研究中，Novartis公司的Gleevec和Astrazenca公司 的Iressa已作为治疗慢性白血病和治疗肺癌的药物进入临床应用。此外，还有十几个化 合物正在进行临床前试验。虽然对蛋白激酶抑制剂的研究近来取得一些进展，但还没有 进入临床试验的化合物(Levitzki, A. , Protein Kinase Inhibitors as a Therapeutic Modality. Acc. Chem. Res. 2003，36，462)。目前已报道的活性较好的抑制剂是异喹啉磺酰胺 类化合物H-89，以色列的科学家以Ser/Thr蛋白激酶抑制剂H-89作为先导化合物合成出了 大量的小分子抑制剂，并初步研究了 H-89的构效关系(Reuveni，H.，et al. Modification of a Selective PKA Inhibitor by Rational Design. Biochemistry,2002,41,1030)。但 由于这类化合物对多种靶标有作用，对PKB的选择性不高。因此，需要进一步发展及优化针 对PKB的高活性、特异性抑制剂，开发高效、低毒的抗肿瘤治疗药物。
发明内容
本发明的目的是提供一种取代哌嗪乙基磺酰胺类衍生物，以及它们的可药用盐， 具有以下结构通式其中取代的胺磺酰基可以在双环的1位或2位；A，B, D，E相同或不同，选用碳， 氮氓可选用1-5个碳的饱和或不饱和烃基、烷胺甲基、羟烷基，也可选用取代或未取代的 苄基；R2可选用1-15个碳的饱和或不饱和烃基、取代或未取代的苄基以及五元、六元杂环。 其优选的式(1)化合物是1-￡1:^{(11 )-2-[4-(4-氯苄基)哌嗪-1-基]-1-甲基乙基}异喹啉-5-磺酰胺I-b :N-[(lR)-2-(4-苄基哌嗪-1-基)-1_甲基乙基]异喹啉-5-磺酰胺I-c :N-((1R)-1-甲基-2-{4-[4_(三氟乙基)苄基]哌嗪_1_基}乙基)异喹 啉-5-磺酰胺1-(1:^{(110-2-[4-(3-溴苄基)哌嗪-1-基]-1-甲基乙基}异喹啉-5-磺酰胺I-e :N-{(lR)-2-[4-(2，4-二氟苄基)哌嗪基]甲基乙基}异喹啉_5_磺 酰胺
I-f:N-((1R)--2-{4-[(2-氯-1，3-噻唑-5-基)甲基]哌嗪-1-基}-1_甲基乙基)异喹啉_5-磺酰胺
I"g:N-((1R)--2-{4-[(6_氯吡啶-3-基)甲基]哌嗪-1-基}-1_甲基乙基)异喹啉-5-“磺酰胺
I-h:N-[(1R)--1-甲基-2- (4-甲基哌嗪-1-基)乙基]异喹啉-5-磺酰胺
I-i:N-[(1R)--1-甲基-2- (4-戊基哌嗪-1-基)乙基]异喹啉-5-磺酰胺
I-j:N-[(1R)--1-甲基-2- (4-辛基哌嗪-1-基)乙基]异喹啉-5-磺酰胺
I-k:N-[(1R)--2-(4-十二烷基哌嗪-1-基)-1_甲基乙基]异喹啉-5-磺酰胺
1-1:N-{(1R)--2-[4_ (4-氟苄基)哌嗪-1-基]-1-甲基乙基}异喹啉-5-磺酰胺
I-m:N-{(1R)--2-[4-(4-溴苄基)哌嗪-1-基]-1-甲基乙基}异喹啉-5-磺酰胺
I-n:N-[(1R)--1-苄基-2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基]异喹啉-5-磺酰胺
I-o:N-[(1R)--1-苄基-2- (4-苄基哌嗪-1-基)乙基]异喹啉-5-磺酰胺
I-P:N-((1R)--1-甲基-2-{4-[4-(三氟甲基)苄基]哌嗪-l-基}乙基)萘-2-磺酰胺
I-q:N-{(1R)--2-[4_ (3-氟苄基)哌嗪-1-基]-1-甲基乙基}萘-2-磺酰胺
I-r:N-{(1R)--2-[4-(3-氯苄基)哌嗪-1-基]-1-甲基乙基}萘-2-磺酰胺
I-s:N-{(1R)--2-[4-(3-溴苄基)哌嗪-1-基]-1-甲基乙基}萘-2-磺酰胺
I-t:N-((1R)--2-{4-[(2-氯-1，3-噻唑-5-基)甲基]哌嗪-1-基}-1_甲基乙基)萘--2-磺酰胺
I-u:N-((1R)--2-{4-[(6-氯吡啶-3-基甲基]哌嗪-1-基}-1_甲基乙基)萘-2-磺酰胺
I-v:N-[(1R)--1-甲基-2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基]萘-2-磺酰胺
I~w:N-[(1R)--1-甲基-2-(4-戊基哌嗪-1-基)乙基]萘-2-磺酰胺
I-X:N-{(1R)--1-甲基1-2-[4-(3-甲基丁基)哌嗪-1-基]乙基}萘-2-磺酰胺
i-y:N-[(1R)--1-甲基-2-(4-辛基哌嗪-1-基)乙基]萘-2-磺酰胺
I-Z:N-[(1R)--2-(4-十二烷基哌嗪-1-基)-1_甲基乙基]萘-2-磺酰胺
优选的式(1)化合物结构表
本发明的另一个目的是提供所述取代哌嗪乙基磺酰胺类衍生物的制备方法，通过 以下方案实现取代磺酸经二氯亚砜氯化得到其酰氯衍生物，取代L型氨基酸经氢化铝锂 还原得到L型胺基醇类化合物，与取代的磺酰氯衍生物发生偶联反应得到化合物IV，化合 物IV经甲磺酰氯保护得到其甲磺酸酯衍生物III，该衍生物III与由单叔丁氧羰基(B0C) 保护哌嗪经取代反应和三氟醋酸脱保护得到的单取代哌嗪II在有机胺催化下发生取代反 应得到取代哌嗪乙基磺酰胺类衍生物I，该有机胺可以是三甲胺、三乙胺、二异丙基乙胺等 其中A，B，D，E和基团礼，&的定义与式(1)中的相同。本发明的又一目的是提供取代哌嗪乙基磺酰胺类衍生物及其可药用盐在防治 肿瘤疾病药物中的应用。初步的药理实验表明本发明式(1)化合物体外对人肺癌细胞 (A549)，人肝癌细胞0fepG2)，人慢性髓原细胞白血病细胞(K562)，子宫颈癌细胞(Hela)， 人急性白血病细胞(HL60)的有较好的生长抑制作用，体外活性半数抑制浓度(IC5(I值)显 示，部分化合物其抗肿瘤活性高于先导物H89，甚至高于上市的一线抑制蛋白激酶类抗肿瘤 药物舒尼替尼、达沙替尼或与其相当，表明此类衍生物有可能发展成为新的防治肿瘤药物。本发明的有益之处是以已发现的蛋白激酶B抑制剂H89为先导化合物，通过合 理设计得到取代哌嗪乙基磺酰胺类衍生物。着重对该取代哌嗪乙基磺酰胺类衍生物进行探 索，提供了该类化合物的制备方法；提供的该取代哌嗪乙基磺酰胺类衍生物具有重要的生 物活性，体外对多株肿瘤细胞有抑制作用，有望成为新的防治肿瘤药物。
具体实施例方式下面通过具体的实施例进一步说明本发明。下述实施例给出了代表性化合物的合 成及相关结构鉴定数据。必须说明，下述实施例是用于说明本发明而不是对本发明的限制。 根据本发明的实质对本发明进行的简单改进都属于本发明要求保护的范围。实施例1 :N-[(1R)_2-羟基-1-甲基乙基]异喹啉-5-磺酰胺(IV)的制备 本例涉及到一类取代哌嗪乙基磺酰胺类衍生物中间体(IV)的一般合成方法。具 体涉及N-[(1R)_2-羟基-1-甲基乙基]异喹啉-5-磺酰胺的合成。该化合物由L-丙胺醇 与异喹啉-5-磺酰氯缩合而成。
6
冰浴下将L-丙氨酸(4. 85g，55. Ommol)慢慢加入到氢化铝锂(3. Og, 78. 9mmol)的 四氢呋喃反应液(150mL)中，反应20小时后加入水和15% NaOH溶液中止反应，过滤，滤液 减压蒸除溶剂得到淡黄色固体。粗品经硅胶柱层析后得无色油状物L-丙胺醇3. 41g，收率 82. 5%。iH-NMlUCDCl》8 3. 40(lH,dd, = 8. 0Hz, J2 = 2. 8Hz) ；3. 12(lH,dd, = 8. 4Hz, J2 = 6. 4Hz) ；2. 91-2. 87 (1H, m) ；0. 93 (3H, d，J = 5. 2Hz) ESI-MS :76 [M+l] +。将异喹啉-5-磺酸(4g，19. Ommol)与氯化亚砜(25mL)加热回流2小时后，减压蒸 除过量的氯化亚砜，残渣悬浮在二氯甲烷中，过滤并收集滤饼，真空干燥得到异喹啉-5-磺 酰氯盐酸盐5. 28g(收率95. 6% )。将得到的5. 28g异喹啉-5-磺酰氯盐酸盐(0. 02mol) 溶于水(53mL)中，冰浴下加入碳酸氢钠(1.68g，0.02mol)，氯仿提取，所得有机层经饱和氯 化钠洗涤，无水硫酸镁干燥备用。将L-丙胺醇(1.50g，0.02mol)和干燥的三乙胺(2. 02g， 0. 02mol)溶于干燥的二氯甲烷(60mL)中，在冰浴下滴加上一步制备的溶液，室温反应30 分钟后加入水(50mL)，有机层经饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂得白色固 体N-[(1R)_2-羟基-1-甲基乙基]异喹啉-5-磺酰胺3.86g，收率72.6%;力-匪1 (0)(13) 8 9. 34 (1H, s)，8. 67 (1H, d, J = 8. 0Hz)，8. 50 (1H, d, J = 9. 0Hz)，8. 47 (1H, d, J = 7. 5Hz)， 8. 22 (1H, d, J = 10. 0Hz)，7. 72 (1H, t, J = 9. 0Hz)，3. 44-3. 38 (2H, m)，3. 19-3. 14 (1H, m)， 0. 99 (3H, d, J = 6. 0Hz) ； ESI-MS :267[M+1] +。实施例2 = (2R) -2-「(异喹啉基磺酰基)胺基]丙基甲磺酸酯(III)的制备 本例涉及到一类取代哌嗪乙基磺酰胺类衍生物中间体(III)的一般合成方法。 具体涉及(2R)-2-[(异喹啉-5-基磺酰基)胺基]丙基甲磺酸酯的合成。N-[(1R)_2-羟 基-1-甲基乙基]异喹啉-5-磺酰胺(3g，13. Ommol)与三乙胺(2. 01g, 19. 9mmol)溶于干 燥的二氯甲烷(120mL)中，冰浴冷却后，将甲磺酰氯(1.67g，15. Ommol)慢慢滴入，半小时后 经饱和碳酸钠洗，无水硫酸钠干燥后，减压回收溶剂得粗品，粗品经硅胶柱层析得白色固体 (2R)-2-[(异喹啉-5-基磺酰基)胺基]丙基甲磺酸酯3. 39g，收率75.8%/H-NMR(⑶Cl3) 8 9. 41 (1H, s)，8. 69 (1H, d, J = 6. 5Hz)，8. 50 (1H, d, J = 7. 5Hz)，8. 45 (1H, d, J = 6. 0Hz)， 8. 26 (1H, d, J = 8. 0Hz)，7. 74 (1H, t, J = 8. 0Hz)，4. 09-4. 05 (2H, m)，3. 69-3. 62 (1H, m)， 2. 88 (3H, s)，1. 10 (3H, d, J = 7. 0Hz). ESI-MS :345[M+1] +。实施例3 :l-(4_氯苄基)哌嗪(II)的制备 本例涉及到一类取代哌嗪乙基磺酰胺类衍生物中间体(II)的一般合成方法。具 体涉及1-(4_氯苄基)哌嗪的合成。叔丁基哌嗪-1-碳酸酯(2. 34g，12. 6mmol)、4_氯苄 基氯(1.69g，10. 5mmol)、三乙胺(2. lg，20. 5mmol)在乙腈(40mL)溶液中于 60°C搅拌 12 小时后，减压蒸除溶剂，残留物用氯仿-水分配萃取，有机层经饱和食盐水洗涤，无水硫酸 钠干燥，减压蒸除溶剂得到粗品。将得到的粗品叔丁基-4_(4-氯苄基)哌嗪-1-碳酸酯 (2. lg,0.01mol)溶解在二氯甲烷(4mL)中，加入三氟乙酸(5. 80g,0. 08mol)后，继续反应 2小时后减压蒸除溶剂，残留物用饱和NaHC03*和，二氯甲烷萃取所得有机层，饱和食盐 水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂所得黄色粘稠液体，经硅胶柱层析纯化得到白色固 体 1-(4_ 氯节基)哌嗪(1. 89g，89. 8% )。M.p.93-97°C。力匪R(CDC13) 8 7. 15(m,4H), 3. 35(s，2H)，2. 95-2. 65(m，4H)，2. 45-2. 15 (m，5H) ESI-MS :211[M+1] +。
实施例4 :N_丨(lR)-2-「4_(4-氯苄基)哌嗪基]甲基乙基}异喹啉_5_磺 酰胺(I-a)的制备本例涉及到一类取代哌嗪乙基磺酰胺类衍生物(I)的一般合成方法。具体涉及 N-{(lR)-2-[4-(4-氯苄基)哌嗪-1-基]-1-甲基乙基}异喹啉-5-磺酰胺(I-a)的合 成。(2R)-2-[(异喹啉-5-基磺酰基)胺基]丙基甲磺酸酯(50mg，0. 142mmol)、1-(4-氯苄 基)哌嗪(36mg，0. 17mmol)、N, N- 二异丙基乙基胺(21. 8mg，0. 17mmol)在无水乙腈(2mL) 中，于60°C搅拌24小时后减压蒸除溶剂，残渣用氯仿_水分配萃取后所得有机层，经饱和 食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂后得到的残留物用硅胶柱层析纯化得白色固 体(I-a, 41. lmg, 63. 2% ) ；1HNMR(CDC13) 6 9. 35 (1H, s)，8. 74 (1H, d, J = 6. 0Hz)，8. 52 (1H, d, J = 6. 0Hz)，8. 45 (1H, d, J = 7. 5Hz)，8. 18 (1H, d, J = 8. 0Hz)，7. 69 (1H, t, J = 7. 5Hz)，
7.28 (2H, t, J = 8. 5Hz)，7. 18 (2H, d, J = 8. 0Hz)，3. 34 (1H, d, J = 13. 0Hz)，3. 26 (1H, d, J = 13. 0Hz)3. 08-3. 02(lH，m)，2. 22-1. 67(10H，m)，1. 12(3H，d，J = 6. 0Hz). ESI—MS :459[M+1]+。实施例5 :N-「(lR)-2-(4-苄基哌嗪-1-基)-l_甲基乙基1异喹啉_5_磺酰胺 (I-b)的制备根据实施例4的方法，用苄基哌嗪替代1-(4_氯苄基)哌嗪得白色固体(I-b， 75.1%)。'HNMR (CDC13) 6 9. 36 (1H, s)，8. 74 (1H, d, J = 5. 5Hz)，8. 52 (1H, d, J = 7. 5Hz)，
8.45 (1H, d, J = 7. 5Hz)，8. 18 (1H, dd, J = 7. 5Hz)，7. 69 (1H, t, J = 8. 0Hz)，7. 33-7. 30 (3H, m)，7. 26-7. 24 (2H, m)，3. 38 (1H, d, J = 13. 0Hz)，3. 32 (1H, d, J = 13. 0Hz) 3. 06-3. 03 (1H, m)，2. 21-1. 96(10H, m)，1. 12 (3H, d, J = 6. 0Hz). ESI-MS :425[M+1] +。 实施例6 :N-((1R)_1-甲基-2-{4-「4-(三氟乙基)苄基1哌嗪基}乙基)异 喹啉-5-磺酰胺(I-c)的制备根据实施例4的方法，用对三氟甲基苄基哌嗪替代1-(4_氯苄基)哌嗪得白色固 体(I-c，68. 9% ) ；1HNMR(CDC13) 6 9. 35 (1H, s) ,8. 73 (1H, d, J = 5. 5Hz) ,8. 53 (1H, d, J = 6. 0Hz)，8. 45 (1H, d, J = 7. 5Hz)，8. 18 (1H, d, J = 7. 5Hz)，7. 69 (1H, t, J = 8. 0Hz)，7. 50 (2H, t, J = 7. 5Hz)，7. 42 (2H, d, J = 7. 5Hz)，3. 33 (1H, d, J = 13. 0Hz)，3. 25 (1H, d, J = 13. 0Hz)，
83. 06-3. 01 (1H, m) ,2. 31-1. 79(10H, m)，1. 12 (3H, d, J = 6. 0Hz). ESI-MS :493[M+1] +。实施例7 :N_丨(lR)-2-「4_(3-溴苄基)哌嗪基]甲基乙基}异喹啉_5_磺 酰胺(I-d)的制备根据实施例4的方法，用间溴苄基哌嗪替代1-(4-氯苄基)哌嗪得白色固体(I-d， 68. 7% ) o 'HNMR(CDC13) 6 9. 36 (1H, s)，8. 74 (1H, d, J = 6. 0Hz)，8. 52 (1H, d, J = 6. 0Hz)， 8. 46 (1H, d, J = 7. 5Hz)，8. 19 (1H, d, J = 8. 0Hz)，7. 70 (1H, t, J = 8. 0Hz)，7. 26-7. 23 (1H, m)，7. 02-6. 97 (2H, m)，6. 94-6. 91 (1H, m)，3. 34 (1H, d, J = 13. 0Hz)，3. 26 (1H, d, J = 13. 0Hz) ,3. 09-3. 04(1H, m) ,2. 26-1. 51 (10H, m)，1. 11 (3H, d, J = 6. 0Hz). ESI-MS 503[M+1]+。实施例8 :N-{(lR)-2-[4-(2，4-二氟苄基)哌嗪基]甲基乙基}异喹 啉-5-磺酰胺(I-e)的制备根据实施例4的方法，用2，4- 二氟苄基哌嗪替代1-(4_氯苄基)哌嗪得白色固 体(I-e，67.4 % )。'HNMR^DC^) 6 9. 37 (1H, s) ,8. 73 (1H, d, J = 6. 0Hz)，8. 51 (1H，d, J = 6. 0Hz)，8. 46 (1H, d, J = 7. 5Hz)，8. 21 (1H, d, J = 8. 0Hz)，7. 71 (1H, t, J = 8. 0Hz)，
7.27-7. 21 (1H, m)，6. 86-6. 78 (2H, m)，3. 40 (1H, d, J = 13. 0Hz)，3. 34 (1H, d, J = 13. 0Hz)， 3. 06-3. 02 (1H, m)，2. 21-1. 62(10H, m)，1. 11 (3H, d, J = 6. 0Hz). ESI-MS :461[M+1] +。实施例9 :N_ ((1R) -2- {4-「(2-氯-1, 3~ 噻唑 _5_ 基)甲基]哌嗪 基} 甲 基乙基)异喹啉-5-磺酰胺(I-f)的制备根据实施例4的方法，用2-氯_5-(哌嗪-1-基甲基)噻唑替代1-(4_氯苄基) 哌嗪得白色固体(I-f，68. 5% ) o 'HNMR^DC^) 6 9. 37 (1H, s) ,8. 75 (1H, d, J = 6. 0Hz)，
8.52 (1H, d, J = 6. 0Hz)，8. 47 (1H, d, J = 7. 0Hz)，8. 21 (1H, d, J = 8. 0Hz)，7. 72 (1H, t, J = 8. 0Hz)，7. 35 (1H, s)，3. 48 (1H, d, J = 13. 5Hz)，3. 42 (1H, d, J = 13. 5Hz)，3. 08-3. 01 (1H, m)，2. 25-1. 62(10H, m)，1. 12 (3H, d, J = 6. 0Hz). ESI-MS :466[M+1] +。实施例10』-((1!0-2-{4-[(6-氯吡啶-3-基)甲基]哌嗪基}_1_甲基乙 基)异喹啉-5-磺酰胺(I-g)的制备根据实施例4的方法，用1-((6_氯吡啶-3-基)甲基)哌嗪替代1-(4_氯苄基) 哌嗪得白色固体(I-g, 71. 4% )。'HNMR^DC^) 6 9. 35 (1H, s) ,8. 75 (1H, d, J = 5. 5Hz)， 8. 52 (1H, d, J = 6. 0Hz)，8. 46 (1H, d, J = 7. 5Hz)，8. 29 (1H, d, J = 5. 0Hz)，8. 20 (1H, dd, J =
7.5Hz)，7. 71 (1H, t，J = 8. 0Hz，)，7. 26 (1H, s)，7. 12-7. 11 (1H,m)，3. 34 (1H, d, J = 14. 0Hz)， 3. 25 (1H, d, J = 14. 0Hz) 3. 09-3. 01 (1H, m)，2. 23-1. 63 (10H, m)，1. 12 (3H, d, J = 6. 0Hz) ESI-MS :460[M+l] + o实施例11 :N-[(1R)~1-甲基-2-(4-甲基哌嗪基)乙基]异喹啉_5_磺酰胺 (I-h)的制备根据实施例4的方法，用N-甲基哌嗪替代1-(4_氯苄基)哌嗪得白色固体(I-h， 78.9%)。iHNMlUCDCl》8 9. 37(lH,s) ,8. 74(lH,d, J = 5. 5Hz)，8. 51 (1H，d，J = 8. 0Hz，)，
8.47 (1H, d, J = 7. 5Hz)，8. 21 (1H, d, J = 7. 5Hz)，7. 71 (1H, t, J = 8. 0Hz)，3. 09-3. 05 (1H, m)，2. 22-2. 14 (2H, m)，2. 14 (3H, s)，2. 09-1. 65 (8H, m)，1. 12 (3H, d, J = 6. 0Hz) ESI-MS 349[M+l]+。实施例12 :N-r(lR)~l-甲基-2-(4-戊基哌嗪基)乙基]异喹啉_5_磺酰胺(I"i)的制备根据实施例4的方法，用正戊基哌嗪替代1-(4_氯苄基)哌嗪得白色固体(I-i， 79. 4% )。iHNMlUCDCl》8 9. 36 (1H, s) ,8. 73 (1H, d, J = 5. 6Hz)，8. 50 (1H，d，J = 5. 6Hz)， 8. 46 (1H, d, J = 7. 2Hz)，8. 21 (1H, d, J = 8. 4Hz)，7. 71 (1H, t, J = 8. 0Hz)，3. 05-3. 01 (1H, m) ,2. 22-1. 88(12H，m)，1. 41-1. 19(6H，m)，1. ll(3H，d，J = 6. 4Hz) ,0. 87(3H，t，J = 6. 8Hz) ESI-MS :405[M+l] + o实施例13 :N-[(1R)~1-甲基-2_(4-辛基哌嗪基)乙基]异喹啉_5_磺酰胺 (I-j)的制备根据实施例4的方法，用正辛基哌嗪替代1-(4_氯苄基)哌嗪得白色固体(I-j， 75.8%)。'HNMR (CDC13) 6 9. 37 (1H, s)，8. 72 (1H, d, J = 6. 0Hz)，8. 50 (1H, d, J = 6. 0Hz)， 8. 47 (1H, d, J = 7. 2Hz)，8. 22 (1H, d, J = 7. 6Hz)，7. 72 (1H, t, J = 7. 6Hz)，3. 11-3. 08 (1H, m)，2. 51-1. 97 (12H, m)，1. 52-1. 40 (2H, m)，1. 32-1. 19 (10H, m)，1. 07 (3H, d, J = 6. 4Hz)， 0. 87 (3H, t, J = 6. 0Hz). ESI-MS :447[M+1]+。实施例14 :^[(1幻-2-(4-十二烷基哌嗪-1-基)-1-甲基乙基]异喹啉-5-磺酰 胺(I_k)的制备根据实施例4的方法，用十二烷基哌嗪替代1-(4-氯苄基)哌嗪得白色固体(I-k， 73. 6% ) o 'HNMR(CDC13) 6 9. 37 (1H, s)，8. 74 (1H, d, J = 6. 0Hz)，8. 52 (1H, d, J = 6. 4Hz)， 8. 47 (1H, d, J = 7. 2Hz)，8. 22 (1H, d, J = 8. 0Hz)，7. 72 (1H, t, J = 8. 0Hz)，3. 08-2. 98 (1H, m)，2. 22-2. 08 (12H, m)，1. 36-1. 32 (2H, m)，1. 32-1. 19 (18H, m)，1. 12 (3H, d, J = 5. 6Hz)， 0. 89 (3H, t, J = 7. 2Hz). ESI-MS :503[M+1]+。实施例15力-丨(1钔-2-「4-(4-氟苄基)哌嗪基]甲基乙基}异喹啉_5_磺 酰胺(1-1)的制备根据实施例4的方法，用对氟苄基哌嗪替代1-(4-氯苄基)哌嗪得白色固体(1-1， 75.2%)。'HNMR (CDC13) 6 9. 35 (1H, s)，8. 73 (1H, d, J = 5. 5Hz)，8. 53 (1H, d, J = 6. 0Hz)， 8. 45 (1H, d, J = 7. 5Hz)，8. 18 (1H, d, J = 7. 5Hz)，7. 69 (1H, t, J = 8. 0Hz)，7. 21-7. 18 (2H, m)，7. 01-6. 98 (2H, m)，3. 33 (1H, d, J = 13. 0Hz)，3. 25 (1H, d, J = 13. 0Hz)，3. 06-3. 01 (1H, m) ,2. 21-1. 69(10H, m)，1. 12 (3H, d, J = 6. 0Hz). ESI-MS :443[M+1] +。实施例16力-丨(1钔-2-「4-(4-溴苄基)哌嗪基]甲基乙基}异喹啉_5_磺 酰胺(I-m)的制备根据实施例4的方法，用对溴苄基哌嗪替代1-(4-氯苄基)哌嗪得白色固体(I-m， 65.5%)。'HNMR (CDC13) 6 9. 36 (1H, s)，8. 74 (1H, d, J = 6. 0Hz)，8. 52 (1H, d, J = 6. 0Hz)， 8. 46 (1H, d, J = 7. 5Hz)，8. 19 (1H, d, J = 8. 0Hz)，7. 70 (1H, t, J = 8. 0Hz)，7. 44 (2H, d, J =8. 0Hz)，7. 16 (2H, d, J = 8. 0Hz)，3. 34 (1H, d, J = 13. 0Hz)，3. 26 (1H, d, J = 13. 0Hz)， 3. 09-3. 04 (1H, m)，2. 26-1. 51(10H, m)，1. 11 (3H, d, J = 6. 0Hz). ESI-MS :503[M+1] +。实施例17 :N-「(1R)_1-苄基-2-(4-甲基哌嗪基)乙基]异喹啉_5_磺酰胺 (I-n)的制备根据实施例1和4的方法，用L-苯丙氨酸替代L-丙氨酸，N-甲基哌嗪替代 1-(4-氯节基)哌嗪得白色固体(I_n，75. 2% )。iHNMlUCDCl》8 9. 34 (1H, s) ,8. 70 (1H, d, J = 6. 0Hz) ,8. 47-8. 45 (2H, m) ,8. 20 (1H, d, J = 8. 5Hz)，7. 70 (1H，t，J = 8.0Hz)，7. 17-7. 10 (3H, m)，7. 03-7. 01 (2H, m)，3. 31-3. 28 (1H, m)，3. 01 (1H, dd, = 14. 0Hz, J2 = 4. 5Hz) ,2. 75 (1H, dd, = 14. OHz, J2 = 7. 5Hz)，2. 23-1. 97(12H, m). ESI-MS :425[M+1]+。实施例18 :N-[(1R)_1-苄基-2-(4-苄基哌嗪基)乙基]异喹啉_5_磺酰胺 (I-o)的制备根据实施例1和4的方法，用L-苯丙氨酸替代L-丙氨酸，N-苄基哌嗪替代 1-(4_ 氯苄基)哌嗪得白色固体(1-0,73.6% )。'HNMR^DC^) 6 9. 34 (1H, s),8. 71 (1H, d, J = 6. 5Hz) ,8. 48-8. 46 (2H, m) ,8. 17 (1H, d, J = 8. 5Hz)，7. 68 (1H，t，J = 7. 5Hz)， 7. 31-7. 21 (5H，m)，7. 18-7. 11 (3H, m)，7. 06-7. 03 (2H, m)，3. 33-3. 24 (2H, m)，3. 03 (1H, dd,
= 14. OHz, J2 = 4. 5Hz)，2. 78 (1H, dd, = 13. 5Hz, J2 = 7. 5Hz)，2. 21-2. 17 (1H, m)， 2. 12-2. 09 (1H, m)，2. 05-1. 72 (8H, m). ESI-MS :501[M+1]+。实施例19 :N-((1R)~1-甲基-2-{4-「4_(三氟甲基)苄基1哌嗪基}乙基) 萘-2-磺酰胺(I-p)的制备根据实施例1和4的方法，用萘-2-磺酸替代异喹啉-5-磺酸，对三氟甲基苄基 哌嗪替代1-(4_氯苄基)哌嗪得白色固体(I-p,72. 3% )0 iHNMlUCDCl》=8 8. 44(1H, s)， 7. 97-7. 93 (2H, m)，7. 89-7. 84 (2H, m)，7. 65-7. 60 (2H, m)，7. 55 (2H, d, J = 8. OHz)，7. 36 (2H, d, J = 8. OHz)，3. 47 (1H, d, J = 13. OHz)，3. 43 (1H, d, J = 13. OHz) 3. 11-3. 07 (1H, m)， 2. 32-1. 92(10H, m)，1. 20 (3H, d, J = 6. OHz). ESI-MS :492[M+1] +。实施例20 :N-{(lR)-2-[4-(3-氟苄基)哌嗪基]甲基乙基}萘_2_磺酰 胺(I-q)的制备根据实施例1和4的方法，用萘-2-磺酸替代异喹啉-5-磺酸，用间氟苄基哌 嗪替代1-(4_氯苄基)哌嗪得白色固体(I-q, 73. 6% )。iHNMlUCDCl》=8 8. 45 (1H, s)， 7. 98-7. 93 (2H, m)，7. 90-7. 84 (2H, m)，7. 65-7. 61 (2H, m)，7. 27-7. 24 (1H, m)，7. 03-6. 99 (2H, m)，6. 95-6. 92 (1H, m)，3. 43 (1H, d, J = 13. OHz)，3. 39 (1H, d, J = 13. OHz)，3. 09-3. 04 (1H, m)，2. 34-1. 53 (10H, m)，1. 21 (3H, d, J = 6. OHz) ESI-MS 442 _] +。实施例21 :^丨(1钔-2-「4-(3-氯苄基)哌嗪基]甲基乙基}萘_2_磺酰 胺(I-r)的制备根据实施例1和4的方法，用萘-2-磺酸替代异喹啉-5-磺酸，用间氯苄基哌 嗪替代1-(4_氯苄基)哌嗪得白色固体(I-r, 72. 5% )。iHNMlUCDCl》=8 8. 45 (1H, s)， 7. 98-7. 94 (2H, m)，7. 91-7. 84 (2H, m)，7. 66-7. 61 (2H, m)，7. 24-7. 21 (3H, m)，7. 12-7. 10 (1H, m)，3. 41 (1H, d, J = 13. OHz)，3. 34 (1H, d, J = 13. OHz) 3. 09-3. 05 (1H, m)，2. 24-2. 01 (10H, m)，1. 21 (3H, d, J = 6. OHz). ESI-MS :458[M+1]+。实施例22 :^丨(1钔-2-「4-(3-溴苄基)哌嗪基]甲基乙基}萘_2_磺酰 胺(I-s)的制备根据实施例1和4的方法，用萘-2-磺酸替代异喹啉-5-磺酸，用间溴苄基哌 嗪替代1-(4_氯苄基)哌嗪得白色固体(I-s,69.7% )。iHNMlUCDCl》=8 8. 44(1H, s)， 7. 97-7. 94 (2H, m)，7. 91-7. 84 (2H, m)，7. 66-7. 61 (2H, m)，7. 24-7. 20 (3H, m)，7. 12-7. 10 (1H, m)，3. 41 (1H, d, J = 13. OHz)，3. 34 (1H, d, J = 13. OHz) 3. 09-3. 04 (1H, m)，2. 24-2. 01 (10H, m)，1. 21 (3H, d, J = 6. OHz). ESI-MS :502[M+1]+。实施例23 :N_ ((1R) -2- {4~「(2_ 氯 ，3_ 噻唑 ~5~ 基)甲基]哌嗪 基} 甲基乙基)萘-2-磺酰胺(I-t)的制备根据实施例1和4的方法，用萘-2-磺酸替代异喹啉-5-磺酸，用1_[ (2-氯_1， 3-噻唑-5-基)甲基]哌嗪替代1-(4_氯苄基)哌嗪得白色固体(I-t，76. 7 % ) 'HNMR (CDC13) 6 8. 44 (1H, s)，7. 97-7. 93 (2H, m)，7. 90-7. 84 (2H, m)，7. 65-7. 60 (2H, m)， 7. 35 (1H, s)，3. 56 (1H, d, J = 13. 0Hz)，3. 49 (1H, d, J = 13. 0Hz)，3. 13-3. 08 (1H, m,)，
2.29-1. 63 (10H, m)，1. 20 (3H, d, J = 6. 0Hz)，7. 35 (1H, s)，3. 48 (1H, d, J = 10. 8Hz)，
3.42 (1H, d, J = 10. 8Hz). ESI-MS 465 [M+l] +。实施例24 :N-((lR)-2-{4~[(6-氯吡啶基甲基]哌嗪基} 甲基乙基) 萘-2-磺酰胺(I-u)的制备根据实施例1和4的方法，用萘-2-磺酸替代异喹啉-5-磺酸，用1_[ (6-氯吡 啶-3-基)甲基]哌嗪替代1-(4-氯苄基)哌嗪得白色固体(I_u，77.9%)。iHNMR(⑶Cl3) 8 8. 44 (1H，s)，8. 29-8. 28 (1H, m)，7. 97-7. 93 (2H, m)，7. 90-7. 84 (2H, m)，7. 65-7. 60 (2H, m) ,7. 26-7. 24 (1H，m)，7. 12-7. 11 (1H, m)，3. 42 (1H, d, J = 13. 0Hz)，3. 34 (1H，d, J = 13. 0Hz)3. 13-3. 08(lH，m)，2. 29-1. 63(10H，m)，1. 20(3H，d，J = 6. 0Hz). ESI-MS :459[M+1]+。实施例25 :N-[(1R)~1-甲基-2_(4_甲基哌嗪基)乙基]萘_2_磺酰胺(I_v) 的制备根据实施例1和4的方法，用萘-2-磺酸替代异喹啉-5-磺酸，用N-甲基哌 嗪替代1-(4_氯苄基)哌嗪得白色固体(I_v，74. 3% )。iHNMlUCDCl》=8 8. 46 (1H, s)， 7. 99-7. 96 (2H, m)，7. 92-7. 90 (1H, m)，7. 87-7. 86 (1H, m)，7. 67-7. 61 (2H, m)，3. 09-3. 06 (1H, m)，2. 27-1. 79 (13H, m)，1. 21 (3H, d, J = 4. 8Hz) ESI-MS 348 _] +。实施例26 :N-[(1R)~1-甲基(4_戊基哌嗪基)乙基]萘_2_磺酰胺(I_w) 的制备根据实施例1和4的方法，用萘-2-磺酸替代异喹啉-5-磺酸，用正戊基哌 嗪替代1-(4-氯苄基)哌嗪得白色固体(I-w, 72. 4 % ) 0她_(13) 6 8. 48 (1H， s)，7. 99-7. 88 (2H, m)，7. 70-7. 64 (2H, m)，3. 39-3. 27 (1H, m)，2. 75-2. 27 (12H, m)， 1. 59-1. 57 (2H, m)，1. 32-1. 22 (4H, m)，1. 14 (3H, d, J = 6. 0Hz)，0. 89 (3H, d, J = 6. 0Hz) ESI-MS :404[M+l] + o实施例27 :^丨(1钔-1-甲基1-2-「4-(3-甲基丁基)哌嗪基1乙基}萘_2_磺 酰胺(I-x)的制备根据实施例1和4的方法，用萘-2-磺酸替代异喹啉-5-磺酸，用异戊基哌 嗪替代1-(4-氯苄基)哌嗪得白色固体(I-x，75. 6 % ) 0 iNMlUCDCU 6 8. 48 (1H， s)，7. 99-7. 88 (2H, m)，7. 70-7. 64 (2H, m)，3. 39-3. 27 (1H, m)，2. 75-2. 27 (12H, m)， 1. 56-1. 52 (1H, m)，1. 35-1. 31 (2H, m)，1. 09 (3H, d, J = 6. 4Hz)，0. 87 (3H, t, J = 6. 4Hz) ESI-MS :404[M+l] + o实施例28 :N- r (1R)-1-甲基-2- (4-辛基哌嗪-1-基)乙基]萘-2-磺酰胺(I_y) 的制备根据实施例1和4的方法，用萘-2-磺酸替代异喹啉-5-磺酸，用正辛基哌 嗪替代1-(4-氯苄基)哌嗪得白色固体(I-y，78. 6 % ) 0 iNMlUCDCU 6 8. 48 (1H， s)，7. 99-7. 88 (2H, m)，7. 70-7. 64 (2H, m)，3. 39-3. 27 (1H, m)，2. 75-2. 27 (12H, m)，1. 59-1. 57 (2H, m)，1. 32-1. 22 (10H, m)，1. 14 (3H, d, J = 6. 0Hz)，0. 89 (3H, d, J = 6. OHz) ESI-MS :446[M+l] + 0实施例29 :N-「(lR)-2_(4-十二烷基哌嗪-1-基)-l_甲基乙基1萘_2_磺酰胺 (I-z)的制备根据实施例1和4的方法，用萘-2-磺酸替代异喹啉-5-磺酸，用十二烷基 哌嗪替代1-(4_氯苄基)哌嗪得白色固体(I-z,69. 5% )。她_(13) =8 8. 48 (1H, s) , 7. 99-7. 88 (2H, m) , 7. 70-7. 64 (2H, m) , 3. 31-3. 25 (1H, m) ,2. 83-2. 12 (12H, m)， 1. 62-1. 53 (2H, m)，1. 29-1. 21 (18H, m)，1. 14 (3H, d, J = 6. 4Hz)，0. 88 (3H, d, J = 6. 4Hz) ESI-MS :502[M+l]+o为了更好地理解本发明的实质，下面通过药理实施例进一步说明本发明。药理实 施例给出了代表性化合物的部分活性数据。必须说明，下述药理实施例是用于说明本发明 而不是对本发明的限制，根据本发明的实质对本发明进行的简单改进都属于本发明要求保 护的范围。实施例30 化合物I_k对A549细胞的细胞毒活性A549(人肺癌)细胞用RPMI 1640培养基培养，培养基中含10 %的胎牛血清， 100U/毫升青霉素和100U/毫升的链霉素。细胞以每孔5X 103的浓度加入到96孔板中，在 37°C含5% C02潮湿空气的培养箱中培养24小时。细胞存活率的测定用改良MTT法。细胞经过24小时的孵育后，分别将新配的化 合物I_k的二甲亚砜溶液以浓度梯度加入到各孔中，使孔中化合物最终浓度分别为100微 克/毫升，33. 3微克/毫升，11. 1微克/毫升和3. 7微克/毫升。72小时后，加入10微升 MTT (5毫克/毫升)的磷酸盐缓冲液，再继续在37°C培养4小时后，离心5分钟除去未转化 的MTT，每孔中加入200微升二甲亚砜，以溶解还原的MTT晶体甲臜(formazan)，所形成的 formazan用酶标仪在570nm波长下比色，细胞存活率由样品相对于对照品的比值计算。其中化合物I-k对A549细胞半抑制浓度IC5Q由剂量效应曲线得到。化合物I_k 的 IC50 为 25. 2 ii Mo本试验以抗肿瘤一线用药舒尼替尼和已报道的PKB抑制剂H-89作为阳性对照，舒 尼替尼和H-89对人肺癌A549细胞的半抑制浓度IC5(1分别为23. 6 y M和58. 9 u M0本试验表明此类新取代哌嗪乙基磺酰胺类衍生物对人肺癌A549细胞具有较强的 细胞毒性，有可能发展成为新的具有抗肺癌作用的药物。实施例31 化合物I-k对人慢性髓原细胞白血病细胞(K562)的细胞毒活性人慢性髓原细胞白血病细胞(K562)用RPMI 1640培养基培养，培养基中含10%小 牛血清，100U/毫升青霉素和100U/毫升链霉素。细胞以每孔1 X 104个密度接种到96孔板 中，在37°C，5% C02潮湿空气的培养箱中培养24小时。细胞存活率的测定方法用改良MTT法。细胞经24小时的孵育后，分别将新配的化 合物I-k的二甲亚砜溶液以浓度梯度加入到各孔中，使孔中化合物的最终浓度分别为100 微克/毫升、50微克/毫升、25微克/毫升、5微克/毫升。72小时后，加入10微升MTT(5 毫克/毫升)的生理盐水溶液，再继续在37°C，5% C02潮湿空气的培养箱中培养3小时，每 孔中加入150毫升二甲亚砜，振荡溶解生成的MTT晶体甲臜(formazan)，所形成的甲臜用酶 标仪在570nm波长下比色，细胞存活率由样品0D值对于对照0D值的比值计算。其中化合物I-k对K562细胞的半数抑制浓度(IC5Q)由剂量效应曲线得到。细胞存活率的测定用改良MTT法，具体方法同实施例30。对人慢性髓原细胞白血病K562细胞半抑制浓度IC5Q由剂量效应曲线得到。化合 物 I-k 的 IC50 为34. 5iiM。本试验以抗肿瘤一线用药达沙替尼和已报道的PKB抑制剂H-89作为阳性对照，达 沙替尼和H-89对人慢性髓原细胞白血病细胞的半抑制浓度IC5(1分别为35. 2和49. 6 u M。本实验表明此类新取代哌嗪乙基磺酰胺类衍生物对人慢性髓原细胞白血病癌细 胞K562细胞具有细胞毒性，有可能发展成为新的具有抗慢性髓原细胞白血病作用的药物。实施例32 化合物I_y对人肝癌细胞0fepG2)的细胞毒活性根据实施例30的方法，本试验以抗肿瘤一线用药舒尼替尼和已报道的PKB抑制 剂H-89作为阳性对照，舒尼替尼和H-89对人肝癌H印G2细胞的半抑制浓度IC5(1分别为 20. lii]\^P40.4iiM。其中化合物I-y对人肝癌H印G2细胞半抑制浓度IC5(1由剂量效应曲线得到。化合 物 I-k 的 IC50 为 17. 6 u Mo本试验表明此类新取代哌嗪乙基磺酰胺类衍生物对人肝癌HepG2细胞具有较强 的细胞毒性，有可能发展成为新的具有抗肝癌作用的药物。实施例33 化合物I_j对人子宫颈癌细胞(Hela)的细胞毒活性根据实施例30的方法，本试验以抗肿瘤一线用药舒尼替尼和已报道的PKB抑制 剂H-89作为阳性对照，舒尼替尼和H-89对人子宫颈癌Hela细胞的半抑制浓度IC5(1分别为
19.4iiM 禾P 51. 8iiM。其中化合物I_j对Hela细胞半抑制浓度IC5(1由剂量效应曲线得到。化合物I_j 的 IC5Q 为 20. 6 ii M。本试验表明此类新取代哌嗪乙基磺酰胺类衍生物对人子宫颈癌Hela细胞具有较 强的细胞毒性，有可能发展成为新的具有抗子宫颈癌作用的药物。实施例34 化合物I-z对人白血病细胞(HL60)的细胞毒活性根据实施例31的方法，本试验以抗肿瘤一线用药达沙替尼和已报道的PKB抑制 剂H-89作为阳性对照，达沙替尼和H-89对人白血病细胞(HL60)的半抑制浓度IC5(1分别为
20.8iiM 禾P 51. 4iiM。其中化合物I-z对HL60细胞半抑制浓度IC5Q由剂量效应曲线得到。化合物I_z 的 IC5Q 为 18. 1 ii M。本试验表明此类取代哌嗪乙基磺酰胺类衍生物对对人白血病细胞(HL60)具有较 强的细胞毒性，有可能发展成为新的具有抗白血病作用的药物。
权利要求
一种取代哌嗪乙基磺酰胺类衍生物，以及它们的可药用盐，具有以下结构通式其中取代的胺磺酰基在双环的1位或2位；A，B，D，E相同或不同，选用碳，氮；R1选用1-5个碳的饱和或不饱和烃基、烷胺甲基、羟烷基，或选用取代或未取代的苄基；R2选用1-15个碳的饱和或不饱和烃基、取代或未取代的苄基以及五元或六元杂环。dest_path_FSB00000216589600011.tif
2.根据权利要求1所述的取代哌嗪乙基磺酰胺类衍生物的制备方法，其特征在于通过 以下步骤实现取代磺酸经二氯亚砜氯化得到其酰氯衍生物，取代L型氨基酸经氢化铝锂 还原得到L型胺基醇类化合物，与取代的磺酰氯衍生物发生偶联反应得到化合物IV，化合 物IV经甲磺酰氯保护得到其甲磺酸酯衍生物III，该衍生物III与由单叔丁氧羰基保护哌 嗪经取代反应和三氟醋酸脱保护得到的单取代哌嗪II在有机胺催化下发生取代反应得到 取代哌嗪乙基磺酰胺类衍生物I ；反应式为 其中:A, B, D，E和基团R1, R2的定义与权利要求1中的相同。
3.根据权利要求2所述的取代哌嗪乙基磺酰胺类衍生物的制备方法，其特征在于，由 化合物II与III制备I所用的有机胺选用是三甲胺、三乙胺或二异丙基乙胺中的任意一 种。
4.根据权利要求1所述的取代哌嗪乙基磺酰胺类衍生物及它们的可药用盐在制备防 治肿瘤药物中的应用。
全文摘要
本发明提供一种取代哌嗪乙基磺酰胺类衍生物，以及它们的可药用盐，通过取代磺酸经二氯亚砜氯化得到其酰氯衍生物，取代L型氨基酸经氢化铝锂还原得到L型胺基醇类化合物，与取代的磺酰氯衍生物发生偶联反应，再经甲磺酰氯保护得到其甲磺酸酯衍生物，与由单叔丁氧羰基保护哌嗪经取代反应和三氟醋酸脱保护得到的单取代哌嗪，并在有机胺催化下发生取代反应获得。本发明提供的化合物体外对五株肿瘤细胞毒活性试验表明，该类衍生物体外的细胞毒活性测试表明，部分化合物的活性高于或与阳性对照抗肿瘤药物相当，可在制备防治肿瘤疾病药物中进行应用；本发明化合物的结构通式
文档编号A61K31/495GK101851199SQ201010164140
公开日2010年10月6日 申请日期2010年5月5日 优先权日2010年5月5日
发明者俞永平, 祝华健, 章国林, 贾平, 邹宏斌 申请人:浙江大学
技术领域：
本发明属药物化学和药理学领域，涉及取代哌嗪乙基磺酰胺类衍生物及制备，以 及该类化合物在制备抗肿瘤药物中的用途。
背景技术：
细胞凋亡是重要的生命现象，细胞凋亡过程的异常是肿瘤发生和发展过程中的一 个重要环节。蛋白激酶PKB作为一种介导细胞存活信号的重要分子，在细胞凋亡过程中 的调节作用十分重要。PKB的活化过程是细胞存活信号转导途径的中心环节，利用各种方 式抑制PKB的活性将可以促进细胞凋亡过程。蛋白激酶PKB将是一新的、良好的抗肿瘤药 物靶位。在目前蛋白激酶抑制剂的研究中，Novartis公司的Gleevec和Astrazenca公司 的Iressa已作为治疗慢性白血病和治疗肺癌的药物进入临床应用。此外，还有十几个化 合物正在进行临床前试验。虽然对蛋白激酶抑制剂的研究近来取得一些进展，但还没有 进入临床试验的化合物(Levitzki, A. , Protein Kinase Inhibitors as a Therapeutic Modality. Acc. Chem. Res. 2003，36，462)。目前已报道的活性较好的抑制剂是异喹啉磺酰胺 类化合物H-89，以色列的科学家以Ser/Thr蛋白激酶抑制剂H-89作为先导化合物合成出了 大量的小分子抑制剂，并初步研究了 H-89的构效关系(Reuveni，H.，et al. Modification of a Selective PKA Inhibitor by Rational Design. Biochemistry,2002,41,1030)。但 由于这类化合物对多种靶标有作用，对PKB的选择性不高。因此，需要进一步发展及优化针 对PKB的高活性、特异性抑制剂，开发高效、低毒的抗肿瘤治疗药物。
发明内容
本发明的目的是提供一种取代哌嗪乙基磺酰胺类衍生物，以及它们的可药用盐， 具有以下结构通式其中取代的胺磺酰基可以在双环的1位或2位；A，B, D，E相同或不同，选用碳， 氮氓可选用1-5个碳的饱和或不饱和烃基、烷胺甲基、羟烷基，也可选用取代或未取代的 苄基；R2可选用1-15个碳的饱和或不饱和烃基、取代或未取代的苄基以及五元、六元杂环。 其优选的式(1)化合物是1-￡1:^{(11 )-2-[4-(4-氯苄基)哌嗪-1-基]-1-甲基乙基}异喹啉-5-磺酰胺I-b :N-[(lR)-2-(4-苄基哌嗪-1-基)-1_甲基乙基]异喹啉-5-磺酰胺I-c :N-((1R)-1-甲基-2-{4-[4_(三氟乙基)苄基]哌嗪_1_基}乙基)异喹 啉-5-磺酰胺1-(1:^{(110-2-[4-(3-溴苄基)哌嗪-1-基]-1-甲基乙基}异喹啉-5-磺酰胺I-e :N-{(lR)-2-[4-(2，4-二氟苄基)哌嗪基]甲基乙基}异喹啉_5_磺 酰胺
I-f:N-((1R)--2-{4-[(2-氯-1，3-噻唑-5-基)甲基]哌嗪-1-基}-1_甲基乙基)异喹啉_5-磺酰胺
I"g:N-((1R)--2-{4-[(6_氯吡啶-3-基)甲基]哌嗪-1-基}-1_甲基乙基)异喹啉-5-“磺酰胺
I-h:N-[(1R)--1-甲基-2- (4-甲基哌嗪-1-基)乙基]异喹啉-5-磺酰胺
I-i:N-[(1R)--1-甲基-2- (4-戊基哌嗪-1-基)乙基]异喹啉-5-磺酰胺
I-j:N-[(1R)--1-甲基-2- (4-辛基哌嗪-1-基)乙基]异喹啉-5-磺酰胺
I-k:N-[(1R)--2-(4-十二烷基哌嗪-1-基)-1_甲基乙基]异喹啉-5-磺酰胺
1-1:N-{(1R)--2-[4_ (4-氟苄基)哌嗪-1-基]-1-甲基乙基}异喹啉-5-磺酰胺
I-m:N-{(1R)--2-[4-(4-溴苄基)哌嗪-1-基]-1-甲基乙基}异喹啉-5-磺酰胺
I-n:N-[(1R)--1-苄基-2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基]异喹啉-5-磺酰胺
I-o:N-[(1R)--1-苄基-2- (4-苄基哌嗪-1-基)乙基]异喹啉-5-磺酰胺
I-P:N-((1R)--1-甲基-2-{4-[4-(三氟甲基)苄基]哌嗪-l-基}乙基)萘-2-磺酰胺
I-q:N-{(1R)--2-[4_ (3-氟苄基)哌嗪-1-基]-1-甲基乙基}萘-2-磺酰胺
I-r:N-{(1R)--2-[4-(3-氯苄基)哌嗪-1-基]-1-甲基乙基}萘-2-磺酰胺
I-s:N-{(1R)--2-[4-(3-溴苄基)哌嗪-1-基]-1-甲基乙基}萘-2-磺酰胺
I-t:N-((1R)--2-{4-[(2-氯-1，3-噻唑-5-基)甲基]哌嗪-1-基}-1_甲基乙基)萘--2-磺酰胺
I-u:N-((1R)--2-{4-[(6-氯吡啶-3-基甲基]哌嗪-1-基}-1_甲基乙基)萘-2-磺酰胺
I-v:N-[(1R)--1-甲基-2-(4-甲基哌嗪-1-基)乙基]萘-2-磺酰胺
I~w:N-[(1R)--1-甲基-2-(4-戊基哌嗪-1-基)乙基]萘-2-磺酰胺
I-X:N-{(1R)--1-甲基1-2-[4-(3-甲基丁基)哌嗪-1-基]乙基}萘-2-磺酰胺
i-y:N-[(1R)--1-甲基-2-(4-辛基哌嗪-1-基)乙基]萘-2-磺酰胺
I-Z:N-[(1R)--2-(4-十二烷基哌嗪-1-基)-1_甲基乙基]萘-2-磺酰胺
优选的式(1)化合物结构表
本发明的另一个目的是提供所述取代哌嗪乙基磺酰胺类衍生物的制备方法，通过 以下方案实现取代磺酸经二氯亚砜氯化得到其酰氯衍生物，取代L型氨基酸经氢化铝锂 还原得到L型胺基醇类化合物，与取代的磺酰氯衍生物发生偶联反应得到化合物IV，化合 物IV经甲磺酰氯保护得到其甲磺酸酯衍生物III，该衍生物III与由单叔丁氧羰基(B0C) 保护哌嗪经取代反应和三氟醋酸脱保护得到的单取代哌嗪II在有机胺催化下发生取代反 应得到取代哌嗪乙基磺酰胺类衍生物I，该有机胺可以是三甲胺、三乙胺、二异丙基乙胺等 其中A，B，D，E和基团礼，&的定义与式(1)中的相同。本发明的又一目的是提供取代哌嗪乙基磺酰胺类衍生物及其可药用盐在防治 肿瘤疾病药物中的应用。初步的药理实验表明本发明式(1)化合物体外对人肺癌细胞 (A549)，人肝癌细胞0fepG2)，人慢性髓原细胞白血病细胞(K562)，子宫颈癌细胞(Hela)， 人急性白血病细胞(HL60)的有较好的生长抑制作用，体外活性半数抑制浓度(IC5(I值)显 示，部分化合物其抗肿瘤活性高于先导物H89，甚至高于上市的一线抑制蛋白激酶类抗肿瘤 药物舒尼替尼、达沙替尼或与其相当，表明此类衍生物有可能发展成为新的防治肿瘤药物。本发明的有益之处是以已发现的蛋白激酶B抑制剂H89为先导化合物，通过合 理设计得到取代哌嗪乙基磺酰胺类衍生物。着重对该取代哌嗪乙基磺酰胺类衍生物进行探 索，提供了该类化合物的制备方法；提供的该取代哌嗪乙基磺酰胺类衍生物具有重要的生 物活性，体外对多株肿瘤细胞有抑制作用，有望成为新的防治肿瘤药物。
具体实施例方式下面通过具体的实施例进一步说明本发明。下述实施例给出了代表性化合物的合 成及相关结构鉴定数据。必须说明，下述实施例是用于说明本发明而不是对本发明的限制。 根据本发明的实质对本发明进行的简单改进都属于本发明要求保护的范围。实施例1 :N-[(1R)_2-羟基-1-甲基乙基]异喹啉-5-磺酰胺(IV)的制备 本例涉及到一类取代哌嗪乙基磺酰胺类衍生物中间体(IV)的一般合成方法。具 体涉及N-[(1R)_2-羟基-1-甲基乙基]异喹啉-5-磺酰胺的合成。该化合物由L-丙胺醇 与异喹啉-5-磺酰氯缩合而成。
6
冰浴下将L-丙氨酸(4. 85g，55. Ommol)慢慢加入到氢化铝锂(3. Og, 78. 9mmol)的 四氢呋喃反应液(150mL)中，反应20小时后加入水和15% NaOH溶液中止反应，过滤，滤液 减压蒸除溶剂得到淡黄色固体。粗品经硅胶柱层析后得无色油状物L-丙胺醇3. 41g，收率 82. 5%。iH-NMlUCDCl》8 3. 40(lH,dd, = 8. 0Hz, J2 = 2. 8Hz) ；3. 12(lH,dd, = 8. 4Hz, J2 = 6. 4Hz) ；2. 91-2. 87 (1H, m) ；0. 93 (3H, d，J = 5. 2Hz) ESI-MS :76 [M+l] +。将异喹啉-5-磺酸(4g，19. Ommol)与氯化亚砜(25mL)加热回流2小时后，减压蒸 除过量的氯化亚砜，残渣悬浮在二氯甲烷中，过滤并收集滤饼，真空干燥得到异喹啉-5-磺 酰氯盐酸盐5. 28g(收率95. 6% )。将得到的5. 28g异喹啉-5-磺酰氯盐酸盐(0. 02mol) 溶于水(53mL)中，冰浴下加入碳酸氢钠(1.68g，0.02mol)，氯仿提取，所得有机层经饱和氯 化钠洗涤，无水硫酸镁干燥备用。将L-丙胺醇(1.50g，0.02mol)和干燥的三乙胺(2. 02g， 0. 02mol)溶于干燥的二氯甲烷(60mL)中，在冰浴下滴加上一步制备的溶液，室温反应30 分钟后加入水(50mL)，有机层经饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂得白色固 体N-[(1R)_2-羟基-1-甲基乙基]异喹啉-5-磺酰胺3.86g，收率72.6%;力-匪1 (0)(13) 8 9. 34 (1H, s)，8. 67 (1H, d, J = 8. 0Hz)，8. 50 (1H, d, J = 9. 0Hz)，8. 47 (1H, d, J = 7. 5Hz)， 8. 22 (1H, d, J = 10. 0Hz)，7. 72 (1H, t, J = 9. 0Hz)，3. 44-3. 38 (2H, m)，3. 19-3. 14 (1H, m)， 0. 99 (3H, d, J = 6. 0Hz) ； ESI-MS :267[M+1] +。实施例2 = (2R) -2-「(异喹啉基磺酰基)胺基]丙基甲磺酸酯(III)的制备 本例涉及到一类取代哌嗪乙基磺酰胺类衍生物中间体(III)的一般合成方法。 具体涉及(2R)-2-[(异喹啉-5-基磺酰基)胺基]丙基甲磺酸酯的合成。N-[(1R)_2-羟 基-1-甲基乙基]异喹啉-5-磺酰胺(3g，13. Ommol)与三乙胺(2. 01g, 19. 9mmol)溶于干 燥的二氯甲烷(120mL)中，冰浴冷却后，将甲磺酰氯(1.67g，15. Ommol)慢慢滴入，半小时后 经饱和碳酸钠洗，无水硫酸钠干燥后，减压回收溶剂得粗品，粗品经硅胶柱层析得白色固体 (2R)-2-[(异喹啉-5-基磺酰基)胺基]丙基甲磺酸酯3. 39g，收率75.8%/H-NMR(⑶Cl3) 8 9. 41 (1H, s)，8. 69 (1H, d, J = 6. 5Hz)，8. 50 (1H, d, J = 7. 5Hz)，8. 45 (1H, d, J = 6. 0Hz)， 8. 26 (1H, d, J = 8. 0Hz)，7. 74 (1H, t, J = 8. 0Hz)，4. 09-4. 05 (2H, m)，3. 69-3. 62 (1H, m)， 2. 88 (3H, s)，1. 10 (3H, d, J = 7. 0Hz). ESI-MS :345[M+1] +。实施例3 :l-(4_氯苄基)哌嗪(II)的制备 本例涉及到一类取代哌嗪乙基磺酰胺类衍生物中间体(II)的一般合成方法。具 体涉及1-(4_氯苄基)哌嗪的合成。叔丁基哌嗪-1-碳酸酯(2. 34g，12. 6mmol)、4_氯苄 基氯(1.69g，10. 5mmol)、三乙胺(2. lg，20. 5mmol)在乙腈(40mL)溶液中于 60°C搅拌 12 小时后，减压蒸除溶剂，残留物用氯仿-水分配萃取，有机层经饱和食盐水洗涤，无水硫酸 钠干燥，减压蒸除溶剂得到粗品。将得到的粗品叔丁基-4_(4-氯苄基)哌嗪-1-碳酸酯 (2. lg,0.01mol)溶解在二氯甲烷(4mL)中，加入三氟乙酸(5. 80g,0. 08mol)后，继续反应 2小时后减压蒸除溶剂，残留物用饱和NaHC03*和，二氯甲烷萃取所得有机层，饱和食盐 水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂所得黄色粘稠液体，经硅胶柱层析纯化得到白色固 体 1-(4_ 氯节基)哌嗪(1. 89g，89. 8% )。M.p.93-97°C。力匪R(CDC13) 8 7. 15(m,4H), 3. 35(s，2H)，2. 95-2. 65(m，4H)，2. 45-2. 15 (m，5H) ESI-MS :211[M+1] +。
实施例4 :N_丨(lR)-2-「4_(4-氯苄基)哌嗪基]甲基乙基}异喹啉_5_磺 酰胺(I-a)的制备本例涉及到一类取代哌嗪乙基磺酰胺类衍生物(I)的一般合成方法。具体涉及 N-{(lR)-2-[4-(4-氯苄基)哌嗪-1-基]-1-甲基乙基}异喹啉-5-磺酰胺(I-a)的合 成。(2R)-2-[(异喹啉-5-基磺酰基)胺基]丙基甲磺酸酯(50mg，0. 142mmol)、1-(4-氯苄 基)哌嗪(36mg，0. 17mmol)、N, N- 二异丙基乙基胺(21. 8mg，0. 17mmol)在无水乙腈(2mL) 中，于60°C搅拌24小时后减压蒸除溶剂，残渣用氯仿_水分配萃取后所得有机层，经饱和 食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂后得到的残留物用硅胶柱层析纯化得白色固 体(I-a, 41. lmg, 63. 2% ) ；1HNMR(CDC13) 6 9. 35 (1H, s)，8. 74 (1H, d, J = 6. 0Hz)，8. 52 (1H, d, J = 6. 0Hz)，8. 45 (1H, d, J = 7. 5Hz)，8. 18 (1H, d, J = 8. 0Hz)，7. 69 (1H, t, J = 7. 5Hz)，
7.28 (2H, t, J = 8. 5Hz)，7. 18 (2H, d, J = 8. 0Hz)，3. 34 (1H, d, J = 13. 0Hz)，3. 26 (1H, d, J = 13. 0Hz)3. 08-3. 02(lH，m)，2. 22-1. 67(10H，m)，1. 12(3H，d，J = 6. 0Hz). ESI—MS :459[M+1]+。实施例5 :N-「(lR)-2-(4-苄基哌嗪-1-基)-l_甲基乙基1异喹啉_5_磺酰胺 (I-b)的制备根据实施例4的方法，用苄基哌嗪替代1-(4_氯苄基)哌嗪得白色固体(I-b， 75.1%)。'HNMR (CDC13) 6 9. 36 (1H, s)，8. 74 (1H, d, J = 5. 5Hz)，8. 52 (1H, d, J = 7. 5Hz)，
8.45 (1H, d, J = 7. 5Hz)，8. 18 (1H, dd, J = 7. 5Hz)，7. 69 (1H, t, J = 8. 0Hz)，7. 33-7. 30 (3H, m)，7. 26-7. 24 (2H, m)，3. 38 (1H, d, J = 13. 0Hz)，3. 32 (1H, d, J = 13. 0Hz) 3. 06-3. 03 (1H, m)，2. 21-1. 96(10H, m)，1. 12 (3H, d, J = 6. 0Hz). ESI-MS :425[M+1] +。 实施例6 :N-((1R)_1-甲基-2-{4-「4-(三氟乙基)苄基1哌嗪基}乙基)异 喹啉-5-磺酰胺(I-c)的制备根据实施例4的方法，用对三氟甲基苄基哌嗪替代1-(4_氯苄基)哌嗪得白色固 体(I-c，68. 9% ) ；1HNMR(CDC13) 6 9. 35 (1H, s) ,8. 73 (1H, d, J = 5. 5Hz) ,8. 53 (1H, d, J = 6. 0Hz)，8. 45 (1H, d, J = 7. 5Hz)，8. 18 (1H, d, J = 7. 5Hz)，7. 69 (1H, t, J = 8. 0Hz)，7. 50 (2H, t, J = 7. 5Hz)，7. 42 (2H, d, J = 7. 5Hz)，3. 33 (1H, d, J = 13. 0Hz)，3. 25 (1H, d, J = 13. 0Hz)，
83. 06-3. 01 (1H, m) ,2. 31-1. 79(10H, m)，1. 12 (3H, d, J = 6. 0Hz). ESI-MS :493[M+1] +。实施例7 :N_丨(lR)-2-「4_(3-溴苄基)哌嗪基]甲基乙基}异喹啉_5_磺 酰胺(I-d)的制备根据实施例4的方法，用间溴苄基哌嗪替代1-(4-氯苄基)哌嗪得白色固体(I-d， 68. 7% ) o 'HNMR(CDC13) 6 9. 36 (1H, s)，8. 74 (1H, d, J = 6. 0Hz)，8. 52 (1H, d, J = 6. 0Hz)， 8. 46 (1H, d, J = 7. 5Hz)，8. 19 (1H, d, J = 8. 0Hz)，7. 70 (1H, t, J = 8. 0Hz)，7. 26-7. 23 (1H, m)，7. 02-6. 97 (2H, m)，6. 94-6. 91 (1H, m)，3. 34 (1H, d, J = 13. 0Hz)，3. 26 (1H, d, J = 13. 0Hz) ,3. 09-3. 04(1H, m) ,2. 26-1. 51 (10H, m)，1. 11 (3H, d, J = 6. 0Hz). ESI-MS 503[M+1]+。实施例8 :N-{(lR)-2-[4-(2，4-二氟苄基)哌嗪基]甲基乙基}异喹 啉-5-磺酰胺(I-e)的制备根据实施例4的方法，用2，4- 二氟苄基哌嗪替代1-(4_氯苄基)哌嗪得白色固 体(I-e，67.4 % )。'HNMR^DC^) 6 9. 37 (1H, s) ,8. 73 (1H, d, J = 6. 0Hz)，8. 51 (1H，d, J = 6. 0Hz)，8. 46 (1H, d, J = 7. 5Hz)，8. 21 (1H, d, J = 8. 0Hz)，7. 71 (1H, t, J = 8. 0Hz)，
7.27-7. 21 (1H, m)，6. 86-6. 78 (2H, m)，3. 40 (1H, d, J = 13. 0Hz)，3. 34 (1H, d, J = 13. 0Hz)， 3. 06-3. 02 (1H, m)，2. 21-1. 62(10H, m)，1. 11 (3H, d, J = 6. 0Hz). ESI-MS :461[M+1] +。实施例9 :N_ ((1R) -2- {4-「(2-氯-1, 3~ 噻唑 _5_ 基)甲基]哌嗪 基} 甲 基乙基)异喹啉-5-磺酰胺(I-f)的制备根据实施例4的方法，用2-氯_5-(哌嗪-1-基甲基)噻唑替代1-(4_氯苄基) 哌嗪得白色固体(I-f，68. 5% ) o 'HNMR^DC^) 6 9. 37 (1H, s) ,8. 75 (1H, d, J = 6. 0Hz)，
8.52 (1H, d, J = 6. 0Hz)，8. 47 (1H, d, J = 7. 0Hz)，8. 21 (1H, d, J = 8. 0Hz)，7. 72 (1H, t, J = 8. 0Hz)，7. 35 (1H, s)，3. 48 (1H, d, J = 13. 5Hz)，3. 42 (1H, d, J = 13. 5Hz)，3. 08-3. 01 (1H, m)，2. 25-1. 62(10H, m)，1. 12 (3H, d, J = 6. 0Hz). ESI-MS :466[M+1] +。实施例10』-((1!0-2-{4-[(6-氯吡啶-3-基)甲基]哌嗪基}_1_甲基乙 基)异喹啉-5-磺酰胺(I-g)的制备根据实施例4的方法，用1-((6_氯吡啶-3-基)甲基)哌嗪替代1-(4_氯苄基) 哌嗪得白色固体(I-g, 71. 4% )。'HNMR^DC^) 6 9. 35 (1H, s) ,8. 75 (1H, d, J = 5. 5Hz)， 8. 52 (1H, d, J = 6. 0Hz)，8. 46 (1H, d, J = 7. 5Hz)，8. 29 (1H, d, J = 5. 0Hz)，8. 20 (1H, dd, J =
7.5Hz)，7. 71 (1H, t，J = 8. 0Hz，)，7. 26 (1H, s)，7. 12-7. 11 (1H,m)，3. 34 (1H, d, J = 14. 0Hz)， 3. 25 (1H, d, J = 14. 0Hz) 3. 09-3. 01 (1H, m)，2. 23-1. 63 (10H, m)，1. 12 (3H, d, J = 6. 0Hz) ESI-MS :460[M+l] + o实施例11 :N-[(1R)~1-甲基-2-(4-甲基哌嗪基)乙基]异喹啉_5_磺酰胺 (I-h)的制备根据实施例4的方法，用N-甲基哌嗪替代1-(4_氯苄基)哌嗪得白色固体(I-h， 78.9%)。iHNMlUCDCl》8 9. 37(lH,s) ,8. 74(lH,d, J = 5. 5Hz)，8. 51 (1H，d，J = 8. 0Hz，)，
8.47 (1H, d, J = 7. 5Hz)，8. 21 (1H, d, J = 7. 5Hz)，7. 71 (1H, t, J = 8. 0Hz)，3. 09-3. 05 (1H, m)，2. 22-2. 14 (2H, m)，2. 14 (3H, s)，2. 09-1. 65 (8H, m)，1. 12 (3H, d, J = 6. 0Hz) ESI-MS 349[M+l]+。实施例12 :N-r(lR)~l-甲基-2-(4-戊基哌嗪基)乙基]异喹啉_5_磺酰胺(I"i)的制备根据实施例4的方法，用正戊基哌嗪替代1-(4_氯苄基)哌嗪得白色固体(I-i， 79. 4% )。iHNMlUCDCl》8 9. 36 (1H, s) ,8. 73 (1H, d, J = 5. 6Hz)，8. 50 (1H，d，J = 5. 6Hz)， 8. 46 (1H, d, J = 7. 2Hz)，8. 21 (1H, d, J = 8. 4Hz)，7. 71 (1H, t, J = 8. 0Hz)，3. 05-3. 01 (1H, m) ,2. 22-1. 88(12H，m)，1. 41-1. 19(6H，m)，1. ll(3H，d，J = 6. 4Hz) ,0. 87(3H，t，J = 6. 8Hz) ESI-MS :405[M+l] + o实施例13 :N-[(1R)~1-甲基-2_(4-辛基哌嗪基)乙基]异喹啉_5_磺酰胺 (I-j)的制备根据实施例4的方法，用正辛基哌嗪替代1-(4_氯苄基)哌嗪得白色固体(I-j， 75.8%)。'HNMR (CDC13) 6 9. 37 (1H, s)，8. 72 (1H, d, J = 6. 0Hz)，8. 50 (1H, d, J = 6. 0Hz)， 8. 47 (1H, d, J = 7. 2Hz)，8. 22 (1H, d, J = 7. 6Hz)，7. 72 (1H, t, J = 7. 6Hz)，3. 11-3. 08 (1H, m)，2. 51-1. 97 (12H, m)，1. 52-1. 40 (2H, m)，1. 32-1. 19 (10H, m)，1. 07 (3H, d, J = 6. 4Hz)， 0. 87 (3H, t, J = 6. 0Hz). ESI-MS :447[M+1]+。实施例14 :^[(1幻-2-(4-十二烷基哌嗪-1-基)-1-甲基乙基]异喹啉-5-磺酰 胺(I_k)的制备根据实施例4的方法，用十二烷基哌嗪替代1-(4-氯苄基)哌嗪得白色固体(I-k， 73. 6% ) o 'HNMR(CDC13) 6 9. 37 (1H, s)，8. 74 (1H, d, J = 6. 0Hz)，8. 52 (1H, d, J = 6. 4Hz)， 8. 47 (1H, d, J = 7. 2Hz)，8. 22 (1H, d, J = 8. 0Hz)，7. 72 (1H, t, J = 8. 0Hz)，3. 08-2. 98 (1H, m)，2. 22-2. 08 (12H, m)，1. 36-1. 32 (2H, m)，1. 32-1. 19 (18H, m)，1. 12 (3H, d, J = 5. 6Hz)， 0. 89 (3H, t, J = 7. 2Hz). ESI-MS :503[M+1]+。实施例15力-丨(1钔-2-「4-(4-氟苄基)哌嗪基]甲基乙基}异喹啉_5_磺 酰胺(1-1)的制备根据实施例4的方法，用对氟苄基哌嗪替代1-(4-氯苄基)哌嗪得白色固体(1-1， 75.2%)。'HNMR (CDC13) 6 9. 35 (1H, s)，8. 73 (1H, d, J = 5. 5Hz)，8. 53 (1H, d, J = 6. 0Hz)， 8. 45 (1H, d, J = 7. 5Hz)，8. 18 (1H, d, J = 7. 5Hz)，7. 69 (1H, t, J = 8. 0Hz)，7. 21-7. 18 (2H, m)，7. 01-6. 98 (2H, m)，3. 33 (1H, d, J = 13. 0Hz)，3. 25 (1H, d, J = 13. 0Hz)，3. 06-3. 01 (1H, m) ,2. 21-1. 69(10H, m)，1. 12 (3H, d, J = 6. 0Hz). ESI-MS :443[M+1] +。实施例16力-丨(1钔-2-「4-(4-溴苄基)哌嗪基]甲基乙基}异喹啉_5_磺 酰胺(I-m)的制备根据实施例4的方法，用对溴苄基哌嗪替代1-(4-氯苄基)哌嗪得白色固体(I-m， 65.5%)。'HNMR (CDC13) 6 9. 36 (1H, s)，8. 74 (1H, d, J = 6. 0Hz)，8. 52 (1H, d, J = 6. 0Hz)， 8. 46 (1H, d, J = 7. 5Hz)，8. 19 (1H, d, J = 8. 0Hz)，7. 70 (1H, t, J = 8. 0Hz)，7. 44 (2H, d, J =8. 0Hz)，7. 16 (2H, d, J = 8. 0Hz)，3. 34 (1H, d, J = 13. 0Hz)，3. 26 (1H, d, J = 13. 0Hz)， 3. 09-3. 04 (1H, m)，2. 26-1. 51(10H, m)，1. 11 (3H, d, J = 6. 0Hz). ESI-MS :503[M+1] +。实施例17 :N-「(1R)_1-苄基-2-(4-甲基哌嗪基)乙基]异喹啉_5_磺酰胺 (I-n)的制备根据实施例1和4的方法，用L-苯丙氨酸替代L-丙氨酸，N-甲基哌嗪替代 1-(4-氯节基)哌嗪得白色固体(I_n，75. 2% )。iHNMlUCDCl》8 9. 34 (1H, s) ,8. 70 (1H, d, J = 6. 0Hz) ,8. 47-8. 45 (2H, m) ,8. 20 (1H, d, J = 8. 5Hz)，7. 70 (1H，t，J = 8.0Hz)，7. 17-7. 10 (3H, m)，7. 03-7. 01 (2H, m)，3. 31-3. 28 (1H, m)，3. 01 (1H, dd, = 14. 0Hz, J2 = 4. 5Hz) ,2. 75 (1H, dd, = 14. OHz, J2 = 7. 5Hz)，2. 23-1. 97(12H, m). ESI-MS :425[M+1]+。实施例18 :N-[(1R)_1-苄基-2-(4-苄基哌嗪基)乙基]异喹啉_5_磺酰胺 (I-o)的制备根据实施例1和4的方法，用L-苯丙氨酸替代L-丙氨酸，N-苄基哌嗪替代 1-(4_ 氯苄基)哌嗪得白色固体(1-0,73.6% )。'HNMR^DC^) 6 9. 34 (1H, s),8. 71 (1H, d, J = 6. 5Hz) ,8. 48-8. 46 (2H, m) ,8. 17 (1H, d, J = 8. 5Hz)，7. 68 (1H，t，J = 7. 5Hz)， 7. 31-7. 21 (5H，m)，7. 18-7. 11 (3H, m)，7. 06-7. 03 (2H, m)，3. 33-3. 24 (2H, m)，3. 03 (1H, dd,
= 14. OHz, J2 = 4. 5Hz)，2. 78 (1H, dd, = 13. 5Hz, J2 = 7. 5Hz)，2. 21-2. 17 (1H, m)， 2. 12-2. 09 (1H, m)，2. 05-1. 72 (8H, m). ESI-MS :501[M+1]+。实施例19 :N-((1R)~1-甲基-2-{4-「4_(三氟甲基)苄基1哌嗪基}乙基) 萘-2-磺酰胺(I-p)的制备根据实施例1和4的方法，用萘-2-磺酸替代异喹啉-5-磺酸，对三氟甲基苄基 哌嗪替代1-(4_氯苄基)哌嗪得白色固体(I-p,72. 3% )0 iHNMlUCDCl》=8 8. 44(1H, s)， 7. 97-7. 93 (2H, m)，7. 89-7. 84 (2H, m)，7. 65-7. 60 (2H, m)，7. 55 (2H, d, J = 8. OHz)，7. 36 (2H, d, J = 8. OHz)，3. 47 (1H, d, J = 13. OHz)，3. 43 (1H, d, J = 13. OHz) 3. 11-3. 07 (1H, m)， 2. 32-1. 92(10H, m)，1. 20 (3H, d, J = 6. OHz). ESI-MS :492[M+1] +。实施例20 :N-{(lR)-2-[4-(3-氟苄基)哌嗪基]甲基乙基}萘_2_磺酰 胺(I-q)的制备根据实施例1和4的方法，用萘-2-磺酸替代异喹啉-5-磺酸，用间氟苄基哌 嗪替代1-(4_氯苄基)哌嗪得白色固体(I-q, 73. 6% )。iHNMlUCDCl》=8 8. 45 (1H, s)， 7. 98-7. 93 (2H, m)，7. 90-7. 84 (2H, m)，7. 65-7. 61 (2H, m)，7. 27-7. 24 (1H, m)，7. 03-6. 99 (2H, m)，6. 95-6. 92 (1H, m)，3. 43 (1H, d, J = 13. OHz)，3. 39 (1H, d, J = 13. OHz)，3. 09-3. 04 (1H, m)，2. 34-1. 53 (10H, m)，1. 21 (3H, d, J = 6. OHz) ESI-MS 442 _] +。实施例21 :^丨(1钔-2-「4-(3-氯苄基)哌嗪基]甲基乙基}萘_2_磺酰 胺(I-r)的制备根据实施例1和4的方法，用萘-2-磺酸替代异喹啉-5-磺酸，用间氯苄基哌 嗪替代1-(4_氯苄基)哌嗪得白色固体(I-r, 72. 5% )。iHNMlUCDCl》=8 8. 45 (1H, s)， 7. 98-7. 94 (2H, m)，7. 91-7. 84 (2H, m)，7. 66-7. 61 (2H, m)，7. 24-7. 21 (3H, m)，7. 12-7. 10 (1H, m)，3. 41 (1H, d, J = 13. OHz)，3. 34 (1H, d, J = 13. OHz) 3. 09-3. 05 (1H, m)，2. 24-2. 01 (10H, m)，1. 21 (3H, d, J = 6. OHz). ESI-MS :458[M+1]+。实施例22 :^丨(1钔-2-「4-(3-溴苄基)哌嗪基]甲基乙基}萘_2_磺酰 胺(I-s)的制备根据实施例1和4的方法，用萘-2-磺酸替代异喹啉-5-磺酸，用间溴苄基哌 嗪替代1-(4_氯苄基)哌嗪得白色固体(I-s,69.7% )。iHNMlUCDCl》=8 8. 44(1H, s)， 7. 97-7. 94 (2H, m)，7. 91-7. 84 (2H, m)，7. 66-7. 61 (2H, m)，7. 24-7. 20 (3H, m)，7. 12-7. 10 (1H, m)，3. 41 (1H, d, J = 13. OHz)，3. 34 (1H, d, J = 13. OHz) 3. 09-3. 04 (1H, m)，2. 24-2. 01 (10H, m)，1. 21 (3H, d, J = 6. OHz). ESI-MS :502[M+1]+。实施例23 :N_ ((1R) -2- {4~「(2_ 氯 ，3_ 噻唑 ~5~ 基)甲基]哌嗪 基} 甲基乙基)萘-2-磺酰胺(I-t)的制备根据实施例1和4的方法，用萘-2-磺酸替代异喹啉-5-磺酸，用1_[ (2-氯_1， 3-噻唑-5-基)甲基]哌嗪替代1-(4_氯苄基)哌嗪得白色固体(I-t，76. 7 % ) 'HNMR (CDC13) 6 8. 44 (1H, s)，7. 97-7. 93 (2H, m)，7. 90-7. 84 (2H, m)，7. 65-7. 60 (2H, m)， 7. 35 (1H, s)，3. 56 (1H, d, J = 13. 0Hz)，3. 49 (1H, d, J = 13. 0Hz)，3. 13-3. 08 (1H, m,)，
2.29-1. 63 (10H, m)，1. 20 (3H, d, J = 6. 0Hz)，7. 35 (1H, s)，3. 48 (1H, d, J = 10. 8Hz)，
3.42 (1H, d, J = 10. 8Hz). ESI-MS 465 [M+l] +。实施例24 :N-((lR)-2-{4~[(6-氯吡啶基甲基]哌嗪基} 甲基乙基) 萘-2-磺酰胺(I-u)的制备根据实施例1和4的方法，用萘-2-磺酸替代异喹啉-5-磺酸，用1_[ (6-氯吡 啶-3-基)甲基]哌嗪替代1-(4-氯苄基)哌嗪得白色固体(I_u，77.9%)。iHNMR(⑶Cl3) 8 8. 44 (1H，s)，8. 29-8. 28 (1H, m)，7. 97-7. 93 (2H, m)，7. 90-7. 84 (2H, m)，7. 65-7. 60 (2H, m) ,7. 26-7. 24 (1H，m)，7. 12-7. 11 (1H, m)，3. 42 (1H, d, J = 13. 0Hz)，3. 34 (1H，d, J = 13. 0Hz)3. 13-3. 08(lH，m)，2. 29-1. 63(10H，m)，1. 20(3H，d，J = 6. 0Hz). ESI-MS :459[M+1]+。实施例25 :N-[(1R)~1-甲基-2_(4_甲基哌嗪基)乙基]萘_2_磺酰胺(I_v) 的制备根据实施例1和4的方法，用萘-2-磺酸替代异喹啉-5-磺酸，用N-甲基哌 嗪替代1-(4_氯苄基)哌嗪得白色固体(I_v，74. 3% )。iHNMlUCDCl》=8 8. 46 (1H, s)， 7. 99-7. 96 (2H, m)，7. 92-7. 90 (1H, m)，7. 87-7. 86 (1H, m)，7. 67-7. 61 (2H, m)，3. 09-3. 06 (1H, m)，2. 27-1. 79 (13H, m)，1. 21 (3H, d, J = 4. 8Hz) ESI-MS 348 _] +。实施例26 :N-[(1R)~1-甲基(4_戊基哌嗪基)乙基]萘_2_磺酰胺(I_w) 的制备根据实施例1和4的方法，用萘-2-磺酸替代异喹啉-5-磺酸，用正戊基哌 嗪替代1-(4-氯苄基)哌嗪得白色固体(I-w, 72. 4 % ) 0她_(13) 6 8. 48 (1H， s)，7. 99-7. 88 (2H, m)，7. 70-7. 64 (2H, m)，3. 39-3. 27 (1H, m)，2. 75-2. 27 (12H, m)， 1. 59-1. 57 (2H, m)，1. 32-1. 22 (4H, m)，1. 14 (3H, d, J = 6. 0Hz)，0. 89 (3H, d, J = 6. 0Hz) ESI-MS :404[M+l] + o实施例27 :^丨(1钔-1-甲基1-2-「4-(3-甲基丁基)哌嗪基1乙基}萘_2_磺 酰胺(I-x)的制备根据实施例1和4的方法，用萘-2-磺酸替代异喹啉-5-磺酸，用异戊基哌 嗪替代1-(4-氯苄基)哌嗪得白色固体(I-x，75. 6 % ) 0 iNMlUCDCU 6 8. 48 (1H， s)，7. 99-7. 88 (2H, m)，7. 70-7. 64 (2H, m)，3. 39-3. 27 (1H, m)，2. 75-2. 27 (12H, m)， 1. 56-1. 52 (1H, m)，1. 35-1. 31 (2H, m)，1. 09 (3H, d, J = 6. 4Hz)，0. 87 (3H, t, J = 6. 4Hz) ESI-MS :404[M+l] + o实施例28 :N- r (1R)-1-甲基-2- (4-辛基哌嗪-1-基)乙基]萘-2-磺酰胺(I_y) 的制备根据实施例1和4的方法，用萘-2-磺酸替代异喹啉-5-磺酸，用正辛基哌 嗪替代1-(4-氯苄基)哌嗪得白色固体(I-y，78. 6 % ) 0 iNMlUCDCU 6 8. 48 (1H， s)，7. 99-7. 88 (2H, m)，7. 70-7. 64 (2H, m)，3. 39-3. 27 (1H, m)，2. 75-2. 27 (12H, m)，1. 59-1. 57 (2H, m)，1. 32-1. 22 (10H, m)，1. 14 (3H, d, J = 6. 0Hz)，0. 89 (3H, d, J = 6. OHz) ESI-MS :446[M+l] + 0实施例29 :N-「(lR)-2_(4-十二烷基哌嗪-1-基)-l_甲基乙基1萘_2_磺酰胺 (I-z)的制备根据实施例1和4的方法，用萘-2-磺酸替代异喹啉-5-磺酸，用十二烷基 哌嗪替代1-(4_氯苄基)哌嗪得白色固体(I-z,69. 5% )。她_(13) =8 8. 48 (1H, s) , 7. 99-7. 88 (2H, m) , 7. 70-7. 64 (2H, m) , 3. 31-3. 25 (1H, m) ,2. 83-2. 12 (12H, m)， 1. 62-1. 53 (2H, m)，1. 29-1. 21 (18H, m)，1. 14 (3H, d, J = 6. 4Hz)，0. 88 (3H, d, J = 6. 4Hz) ESI-MS :502[M+l]+o为了更好地理解本发明的实质，下面通过药理实施例进一步说明本发明。药理实 施例给出了代表性化合物的部分活性数据。必须说明，下述药理实施例是用于说明本发明 而不是对本发明的限制，根据本发明的实质对本发明进行的简单改进都属于本发明要求保 护的范围。实施例30 化合物I_k对A549细胞的细胞毒活性A549(人肺癌)细胞用RPMI 1640培养基培养，培养基中含10 %的胎牛血清， 100U/毫升青霉素和100U/毫升的链霉素。细胞以每孔5X 103的浓度加入到96孔板中，在 37°C含5% C02潮湿空气的培养箱中培养24小时。细胞存活率的测定用改良MTT法。细胞经过24小时的孵育后，分别将新配的化 合物I_k的二甲亚砜溶液以浓度梯度加入到各孔中，使孔中化合物最终浓度分别为100微 克/毫升，33. 3微克/毫升，11. 1微克/毫升和3. 7微克/毫升。72小时后，加入10微升 MTT (5毫克/毫升)的磷酸盐缓冲液，再继续在37°C培养4小时后，离心5分钟除去未转化 的MTT，每孔中加入200微升二甲亚砜，以溶解还原的MTT晶体甲臜(formazan)，所形成的 formazan用酶标仪在570nm波长下比色，细胞存活率由样品相对于对照品的比值计算。其中化合物I-k对A549细胞半抑制浓度IC5Q由剂量效应曲线得到。化合物I_k 的 IC50 为 25. 2 ii Mo本试验以抗肿瘤一线用药舒尼替尼和已报道的PKB抑制剂H-89作为阳性对照，舒 尼替尼和H-89对人肺癌A549细胞的半抑制浓度IC5(1分别为23. 6 y M和58. 9 u M0本试验表明此类新取代哌嗪乙基磺酰胺类衍生物对人肺癌A549细胞具有较强的 细胞毒性，有可能发展成为新的具有抗肺癌作用的药物。实施例31 化合物I-k对人慢性髓原细胞白血病细胞(K562)的细胞毒活性人慢性髓原细胞白血病细胞(K562)用RPMI 1640培养基培养，培养基中含10%小 牛血清，100U/毫升青霉素和100U/毫升链霉素。细胞以每孔1 X 104个密度接种到96孔板 中，在37°C，5% C02潮湿空气的培养箱中培养24小时。细胞存活率的测定方法用改良MTT法。细胞经24小时的孵育后，分别将新配的化 合物I-k的二甲亚砜溶液以浓度梯度加入到各孔中，使孔中化合物的最终浓度分别为100 微克/毫升、50微克/毫升、25微克/毫升、5微克/毫升。72小时后，加入10微升MTT(5 毫克/毫升)的生理盐水溶液，再继续在37°C，5% C02潮湿空气的培养箱中培养3小时，每 孔中加入150毫升二甲亚砜，振荡溶解生成的MTT晶体甲臜(formazan)，所形成的甲臜用酶 标仪在570nm波长下比色，细胞存活率由样品0D值对于对照0D值的比值计算。其中化合物I-k对K562细胞的半数抑制浓度(IC5Q)由剂量效应曲线得到。细胞存活率的测定用改良MTT法，具体方法同实施例30。对人慢性髓原细胞白血病K562细胞半抑制浓度IC5Q由剂量效应曲线得到。化合 物 I-k 的 IC50 为34. 5iiM。本试验以抗肿瘤一线用药达沙替尼和已报道的PKB抑制剂H-89作为阳性对照，达 沙替尼和H-89对人慢性髓原细胞白血病细胞的半抑制浓度IC5(1分别为35. 2和49. 6 u M。本实验表明此类新取代哌嗪乙基磺酰胺类衍生物对人慢性髓原细胞白血病癌细 胞K562细胞具有细胞毒性，有可能发展成为新的具有抗慢性髓原细胞白血病作用的药物。实施例32 化合物I_y对人肝癌细胞0fepG2)的细胞毒活性根据实施例30的方法，本试验以抗肿瘤一线用药舒尼替尼和已报道的PKB抑制 剂H-89作为阳性对照，舒尼替尼和H-89对人肝癌H印G2细胞的半抑制浓度IC5(1分别为 20. lii]\^P40.4iiM。其中化合物I-y对人肝癌H印G2细胞半抑制浓度IC5(1由剂量效应曲线得到。化合 物 I-k 的 IC50 为 17. 6 u Mo本试验表明此类新取代哌嗪乙基磺酰胺类衍生物对人肝癌HepG2细胞具有较强 的细胞毒性，有可能发展成为新的具有抗肝癌作用的药物。实施例33 化合物I_j对人子宫颈癌细胞(Hela)的细胞毒活性根据实施例30的方法，本试验以抗肿瘤一线用药舒尼替尼和已报道的PKB抑制 剂H-89作为阳性对照，舒尼替尼和H-89对人子宫颈癌Hela细胞的半抑制浓度IC5(1分别为
19.4iiM 禾P 51. 8iiM。其中化合物I_j对Hela细胞半抑制浓度IC5(1由剂量效应曲线得到。化合物I_j 的 IC5Q 为 20. 6 ii M。本试验表明此类新取代哌嗪乙基磺酰胺类衍生物对人子宫颈癌Hela细胞具有较 强的细胞毒性，有可能发展成为新的具有抗子宫颈癌作用的药物。实施例34 化合物I-z对人白血病细胞(HL60)的细胞毒活性根据实施例31的方法，本试验以抗肿瘤一线用药达沙替尼和已报道的PKB抑制 剂H-89作为阳性对照，达沙替尼和H-89对人白血病细胞(HL60)的半抑制浓度IC5(1分别为
20.8iiM 禾P 51. 4iiM。其中化合物I-z对HL60细胞半抑制浓度IC5Q由剂量效应曲线得到。化合物I_z 的 IC5Q 为 18. 1 ii M。本试验表明此类取代哌嗪乙基磺酰胺类衍生物对对人白血病细胞(HL60)具有较 强的细胞毒性，有可能发展成为新的具有抗白血病作用的药物。
权利要求
一种取代哌嗪乙基磺酰胺类衍生物，以及它们的可药用盐，具有以下结构通式其中取代的胺磺酰基在双环的1位或2位；A，B，D，E相同或不同，选用碳，氮；R1选用1-5个碳的饱和或不饱和烃基、烷胺甲基、羟烷基，或选用取代或未取代的苄基；R2选用1-15个碳的饱和或不饱和烃基、取代或未取代的苄基以及五元或六元杂环。dest_path_FSB00000216589600011.tif
2.根据权利要求1所述的取代哌嗪乙基磺酰胺类衍生物的制备方法，其特征在于通过 以下步骤实现取代磺酸经二氯亚砜氯化得到其酰氯衍生物，取代L型氨基酸经氢化铝锂 还原得到L型胺基醇类化合物，与取代的磺酰氯衍生物发生偶联反应得到化合物IV，化合 物IV经甲磺酰氯保护得到其甲磺酸酯衍生物III，该衍生物III与由单叔丁氧羰基保护哌 嗪经取代反应和三氟醋酸脱保护得到的单取代哌嗪II在有机胺催化下发生取代反应得到 取代哌嗪乙基磺酰胺类衍生物I ；反应式为 其中:A, B, D，E和基团R1, R2的定义与权利要求1中的相同。
3.根据权利要求2所述的取代哌嗪乙基磺酰胺类衍生物的制备方法，其特征在于，由 化合物II与III制备I所用的有机胺选用是三甲胺、三乙胺或二异丙基乙胺中的任意一 种。
4.根据权利要求1所述的取代哌嗪乙基磺酰胺类衍生物及它们的可药用盐在制备防 治肿瘤药物中的应用。
全文摘要
本发明提供一种取代哌嗪乙基磺酰胺类衍生物，以及它们的可药用盐，通过取代磺酸经二氯亚砜氯化得到其酰氯衍生物，取代L型氨基酸经氢化铝锂还原得到L型胺基醇类化合物，与取代的磺酰氯衍生物发生偶联反应，再经甲磺酰氯保护得到其甲磺酸酯衍生物，与由单叔丁氧羰基保护哌嗪经取代反应和三氟醋酸脱保护得到的单取代哌嗪，并在有机胺催化下发生取代反应获得。本发明提供的化合物体外对五株肿瘤细胞毒活性试验表明，该类衍生物体外的细胞毒活性测试表明，部分化合物的活性高于或与阳性对照抗肿瘤药物相当，可在制备防治肿瘤疾病药物中进行应用；本发明化合物的结构通式
文档编号A61K31/495GK101851199SQ201010164140
公开日2010年10月6日 申请日期2010年5月5日 优先权日2010年5月5日
发明者俞永平, 祝华健, 章国林, 贾平, 邹宏斌 申请人:浙江大学
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