一种用于结核杆菌目视检测引物组及其试剂盒的制作方法

专利名称：一种用于结核杆菌目视检测引物组及其试剂盒的制作方法
技术领域：
本发明涉及ー种生物检测试剂的研发，更具体涉及ー种用于结核杆菌目视检测引物组及其试剂盒，属于分子生物学技术领域。。
背景技术：
结核病(Tuberculosis,TB)是由结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)引起的ー种慢性人畜共患病，能够感染人和多种哺乳动物以及禽类。其中导致人类感染的結核菌大多数是人结核分枝杆菌，也有10%以上是由牛分枝杆菌引起的。各个器官都可被侵犯，但以肺器官被侵染为多见。其病理特征是在多种组织器官中形成肉芽肿和干酪样、钙化结节病变。
据世界卫生组织(WHO)报告，目前全球已有20亿人感染結核菌，现有活动性肺结核患者约2000万，毎年新发病800-1000万，每年约有300万人死于结核病，毎年死于结核病的成年人多于艾滋病，疟疾和热带病死亡人数的总和。据WHO估算，到2005年全球结核病新病例将达1020万例。全球90%的结核病在发展中国家，中国结核病患者数居世界第ニ，仅次于印度。结核杆菌不仅感染人，也感染许多动物(见表I)尤其是奶牛。这对以奶牛业为主的发达国家造成严重经济损失。尽管ー些国家已有效地控制或消灭了此病，但在有些国家和地区仍呈地区性散发和流行。我国结核病疫情严重，且分布较广。表I各种不同结核杆菌对人和动物的致病性
权利要求
1.用于结核杆菌目视检测引物组，引物针对结核分支杆菌的FadB4基因设计，共包括4条，引物序列如下 引物名称引物序列(5’-3 )F3TTCCCGGACGCACTGCB3GCTCGGGCGACAATACCGFIPTCGAACCACTCCGGCGATCTC-TAACCCGTGGCCGTTACCBIPCCGGATAACAGCCAAGTGCGT-CGACTTCGGCCATGCC
2.包含权利要求I所述的用于结核杆菌目视检测引物组的试剂盒，所述试剂盒中任选包括，dNTPs, Bst DNA 聚合酶，SYBR Green I 染料。
3.权利要求2所述的试剂盒在PCR扩增中的应用。
4.权利要求2所述的试剂盒在检测人结核分枝杆菌标准株H37Rv、弱毒株H37Ra、卡介苗BCG、牛分枝杆菌、龟分枝杆菌、禽分枝杆菌基因组以及大肠杆菌、蜡样芽孢杆菌、绿脓杆菌、变形杆菌、金黄色葡萄球菌、棒状杆菌、李氏杆菌和/或布鲁氏菌S19中的应用。
5.权利要求2所述的试剂盒在食品检测中的应用。
全文摘要
本发明公开了一种用于结核杆菌目视检测引物组及其试剂盒，本发明的结核杆菌引物组及其试剂盒可直接目视检测结核杆菌基因组结果，可以用于从痰样中鉴别诊断结核分支杆菌。适应于临床结核样本的检测，为临床结核病患者的诊断提供辅助。
文档编号C12R1/32GK102776275SQ20121013311
公开日2012年11月14日 申请日期2012年5月3日 优先权日2012年5月3日
发明者乔军, 孙志华, 张豫, 张辉, 曹旭东, 王勇, 陈创夫 申请人:石河子大学