吡啶化合物在制备用于治疗皮肤损伤的药物中的应用的制作方法
专利名称：吡啶化合物在制备用于治疗皮肤损伤的药物中的应用的制作方法
技术领域：
本发明提供了吡啶化合物在制备用于治疗皮肤损伤例如伤口或皮肤溃疡的药物中的新应用。本发明还提供了吡啶化合物在制备用于促进表皮微血管内皮细胞增殖的药物中的新应用。本发明还提供了治疗皮肤损伤的方法，所述方法包括给需要这种治疗的哺乳动物施用吡啶化合物。
背景技术：
有多种因素会引起皮肤损伤例如伤口、褥疮性溃疡或热溃疡。引起显著患者痛苦的这样的皮肤损伤已经被认识到是医药经济严重问题，因为其经常需要长期治疗来修复皮肤损伤，尤其是对于慢性皮肤损伤例如褥疮性溃疡。
皮肤损伤一般是通过一系列事件完成的，这些事件包括(1)炎症阶段，(2)细胞增殖阶段和(3)表皮/真皮重建阶段。据认为，在愈合过程中，有多种不同因子例如血小板衍生生长因子(PDGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、血管内皮生长因子(VEGF)、角质形成细胞生长因子(KGF)、肝细胞生长因子(HGF)等以高度复杂的关系进行工作。从组织病理学方面来看，短暂的血管生成是皮肤损伤愈合过程中的必需事件。在这方面，在上述生长因子当中，VEGF是其中一个主要血管生成促进因子，并且促进皮肤损伤愈合(AmericanJournal of Pathology(2004)Vol.164(6)，pp1935-47，FASEB Journal(2004)Vol.18(11)，pp1264-66)。
作为治疗皮肤损伤的治疗剂，前列腺素E2制剂(alprostadilalphadex)、二丁酰基cAMP制剂(布拉地辛钠)、蔗糖/聚乙烯吡咯烷酮碘制剂、维生素E维A酸酯制剂等是已知的。然而，在慢性皮肤损伤例如慢性皮肤溃疡的治疗中，这些治疗剂并不总是有效的。
最近，开发了bFGF，一种上述生长因子，这是因为其基于成纤维细胞、血管内皮细胞和血管平滑肌细胞增殖促进活性的生理活性(血管生成促进活性)，并且进入了实际应用。
有一些其它药物会用作促进皮肤损伤愈合的活性剂。例如，某些文献报道，在动物模型中，前列腺素I1(PGI1)衍生物表现出促进伤口愈合的活性(Japanese Journal of Pharmacology(1995)Vol.67(Suppl.I)，p275(P3-116))，或者磷酸二酯酶5抑制剂例如西地那非已经在临床上用于治疗勃起功能障碍，预计其可以促进伤口愈合，这是因为通过细胞内cGMP水平增加而介导的血管扩张活性(WO2002/015893)。然而，这些药物尚未进入实际应用。
另一方面，有些文献报道，预计一些种类化合物例如含氧杂环化合物如苯并呋喃化合物(US专利6716987)或烟酸化合物(US专利出版2003/0195233)可表现出伤口愈合促进作用。然而，其在伤口愈合过程中的机制以及临床用途尚待证实。
同时，作为本发明活性组分的吡啶化合物(即吡啶基取代的萘化合物和吡啶基取代的异喹啉化合物)已知用作抗哮喘剂，其具有支气管收缩抑制活性和气道炎症抑制活性，这是通过其PDE4-抑制活性介导的(EP748805，EP848000)。但是其皮肤损伤愈合促进活性没有报道过。
发明公开本发明涉及下式[I]的吡啶化合物或其可药用盐在制备用于治疗皮肤损伤的药物或者在制备用于促进表皮微血管内皮细胞增殖的药物中的应用 其中R是具有下式的取代的吡啶基
R0是C1-6烷氧基-C1-6烷基，R1和R2是相同或不同的，并且是C1-6烷氧基，X是式＝N-的基团或下式所示基团 环A是任选具有取代基的饱和或不饱和10元含氮杂二环基，并且虚线是指存在或不存在双键。
本发明药物可用于促进皮肤损伤例如伤口(创伤性伤口、手术后伤口等)、褥疮性溃疡、慢性皮肤溃疡(热溃疡，血管阻塞性溃疡，包括腿溃疡、糖尿病性溃疡等)的愈合。
化合物[I]或其可药用盐在皮肤损伤愈合中的精确机制有待研究。在现在，其对于表皮微血管内皮细胞增殖的促进活性可导致一个可能的假设，也就是有一个反应链在皮肤损伤愈合中起重要作用，该反应链包括由这样的吡啶化合物诱导的血管内皮细胞特异性mytogen(VEGF)的表达增加以及VEGF诱导的细胞迁移和增殖，之后是促进目标组织中的血管生成，虽然其它生长因子例如由VEGF诱导的FGF也可以合作参与该过程。
实施本发明的最佳方式作为本发明活性组分的化合物[I]的实例包括其中R是下式所示基团的化合物 在环A中的10元含氮杂二环基是任选还含有选自氮原子、氧原子和硫原子的杂原子的10元含氮杂二环基(所述杂环基可以是部分或完全氢化的)。这样的杂环基包括喹啉基、异喹啉基、喹唑啉基、酞嗪基(phtharadinyl)、萘基、喹喔啉基和苯并噻嗪基(所述杂环基可以是部分或完全氢化的)。所述10元杂二环基可具有一个或多个取代基。这样的取代基包括选自下列的基团羟基、氧代基、饱和或不饱和6元含氮杂单环基取代的C1-6烷氧基、二(C1-6烷基)苯基和饱和或不饱和6元含氮杂单环基。当杂二环基上的取代基是或者包括饱和或不饱和6元含氮杂单环基时，这样的杂环基的实例包括吡啶基、二氢吡啶基、嘧啶基、吗啉代基团、哌啶基等。
在上述取代的环A当中，环A的优选实例包括被至少一个氧代基和/或羟基取代的10元含氮杂二环基。这样的杂环基的实例包括下列式的基团 同时，除了氧代基和/或羟基以外，所述杂二环基还可以具有如上所例举的其它取代基。
更具体地，作为本发明活性组分的化合物[I]的实例是下列式[I-A]或[I-B]的化合物或其可药用盐 其中R11是下式的基团
环A是(i)氧代基取代的二氢或四氢喹啉基，其任选被选自羟基和吡啶基的基团取代，(ii)羟基取代的二氢或四氢喹啉基，(iii)氧代基取代的六氢喹啉基，其任选被羟基取代，(iv)氧代基取代的二氢或四氢异喹啉基，其任选被选自下列的基团取代羟基、吗啉代-C1-6烷氧基、吡啶基-C1-6烷氧基、哌啶基-C1-6烷氧基和吗啉代基团，(v)氧代基取代的二氢或四氢-酞嗪基，其任选被选自下列的基团取代羟基、二(C1-6烷基)氨基苯基、吡啶基和嘧啶基，(vi)氧代基取代的二氢或四氢-喹唑啉基，其任选被羟基取代，(vii)氧代基取代的二氢或四氢-喹喔啉基，其任选被羟基取代，或(viii)氧代基取代的二氢或四氢-萘基，其任选被羟基取代，R1和R2是相同或不同的，并且是C1-6烷氧基。
作为本发明活性组分的化合物[I]的另一个具体实例包括这样的化合物[I]，其中R是下式所示的2-氧代-1-取代的吡啶-4-基 且X是下式的基团 在它们当中，更优选的实例包括其中R0是甲氧基甲基，且R1和R2是乙氧基的化合物。
在上述吡啶化合物[I]当中，在药理学上优选的化合物包括这样的化合物[I-A]或[I-B]，其中R11是下式所示的2-取代的吡啶-4-基 并且R1和R2是相同或不同的，并且是甲氧基或乙氧基。
在上述化合物当中，在药理学上更优选的化合物包括这样的化合物[I-A]或[I-B]，其中R11中的环A是(a)羟基-取代的二氢或四氢-喹啉基，(b)氧代基取代的二氢或四氢-异喹啉基，其被选自吡啶基-取代的C1-6烷氧基和吗啉代-C1-6烷氧基的基团取代，(c)氧代基取代的二氢或四氢-酞嗪基，其被选自吡啶基、嘧啶基和二(C1-6烷基)氨基苯基的基团取代，或(d)氧代基取代的二氢或四氢-喹唑啉基。
在上述吡啶化合物[I]当中，药理学上优选的另外化合物包括这样的化合物[I-A]或[I-B]，其中环A是下式的基团 在它们当中，在药理学上特别优选的化合物包括选自下列的化合物2-(4-羟基-1，2，3，4-四氢喹啉-1-基)-4-[2，3-二(羟基甲基)-6，7-二甲氧基萘-1-基]吡啶；4-[2，3-二(羟基甲基)-6，7-二甲氧基萘-1-基]-2-[1-氧代-1，2-二氢-5-(2-吗啉代乙氧基)-异喹啉-2-基]吡啶；4-[2，3-二(羟基甲基)-6，7-二甲氧基萘-1-基]-2-[1-氧代-1，2-二氢-5-(3-吡啶基甲氧基)-1-异喹啉-2-基]吡啶；4-(3-羟基甲基-6，7-二甲氧基异喹啉-1-基)-2-[4-(3-吡啶基)酞嗪-1(2H)-酮-2-基]吡啶；和4-[(3S)-3-羟基甲基-3，4-二氢-6，7-二甲氧基异喹啉-1-基]-2-[1-氧代-5-(3-吡啶基甲氧基)-1，2-二氢异喹啉-2-基]吡啶；或其可药用盐。
当本发明化合物[I]在其分子中具有不对称中心时(例如在二氢异喹啉部分或在环A中)，由于其所述不对称碳原子，其可以以其立体异构体形式存在(非对映体、旋光异构体)，并且本发明也包括任一种立体异构体及其混合物。
本发明药物可用于促进皮肤损伤例如皮肤损伤例如伤口(创伤性伤口、手术后伤口等)、褥疮性溃疡、慢性皮肤溃疡(热溃疡，血管阻塞性溃疡，包括腿溃疡、糖尿病性溃疡等)的愈合。
化合物[I]的可药用盐的实例包括无机酸盐例如盐酸盐、硫酸盐或氢溴酸盐，和有机酸盐例如乙酸盐、富马酸盐、草酸盐、甲磺酸盐或马来酸盐。
化合物[I]或其可药用盐可通过描述在例如EP748805B1、EP848000B1或US专利5342941中的已知方法制得。
化合物[I]或其可药用盐可以直接或间接局部给药到损伤部位上，并且其剂量可以根据需要治疗皮肤损伤的个体/患者的年龄、体重和身体状况或者皮肤损伤的种类和程度而改变。例如，剂量通常为约0.05-100mg/皮肤损伤，优选0.1-10mg/皮肤损伤。可按照需要适当地确定给药频率。例如，通常每天给药1-4次，优选每天给药1或2次。
本发明治疗皮肤损伤的药物具有促进表皮微血管细胞增殖的活性，并且因此可用于治疗(例如促进愈合)皮肤损伤例如伤口(创伤性伤口、手术后伤口等)、褥疮性溃疡或慢性皮肤溃疡(热溃疡，血管阻塞性溃疡，包括腿溃疡、糖尿病性溃疡等)。
此外，作为本发明活性组分的化合物[I]包括至少在治疗皮肤损伤的有效剂量范围内基本上不表现出一些不利副作用例如细胞毒性、光敏性等。从安全性方面来看，包含这样的化合物的本发明用于治疗皮肤损伤的药物可以作为治疗剂使用。
如果需要的话，除了用作活性组分的化合物[I]或其可药用盐以外，可以向本发明药物中引入一种或多种可药用添加剂例如渗透促进剂、pH-调节剂、防腐剂、矫味剂、分散剂、润湿剂、稳定剂、抗菌剂、悬浮剂或表面活性剂。
渗透促进剂的实例包括具有20个碳原子或少于20个碳原子的一元醇，例如乙醇、异丙醇和硬脂醇，吡咯烷酮化合物例如2-吡咯烷酮和1-甲基-2-吡咯烷酮，脲化合物例如脲和硫脲，环糊精化合物例如α-环糊精，薄荷醇，1-十二烷基氮杂环庚烷-2-酮，巯基乙酸钙，柠檬烯等。所述渗透促进剂的用量可以根据制剂形式或载体基质而改变。渗透促进剂的量通常为，从有效表现出渗透促进活性的角度来看，0.1w/w％或更大，优选0.3w/w％或更大，并且，从抑制不利药物反应的角度来看，为10w/w％或更小，或优选5w/w％或更小。
pH调节剂可以为无机酸例如盐酸、硫酸或磷酸，和有机酸例如乙酸、琥珀酸或苹果酸或其金属盐。所述pH调节剂的用量可以根据制剂的形式或载体基质而改变。其用量通常是这样的，使得目标组合物的pH为4-8。
防腐剂可以是对羟基苯甲酸酯、对羟基苯甲酸甲酯、氯丁醇、苯甲醇等。
矫味剂可以是薄荷醇、玫瑰油、桉树油、d-樟脑等。
分散剂可以是偏磷酸钠、聚磷酸钾、无水硅酸。
润湿剂可以是丙二醇、甘油、山梨醇、乳酸钠、透明质酸钠等。
稳定剂可以是亚硫酸钠、生育酚、乙二胺四乙酸(EDTA)、柠檬酸等。
悬浮剂可以是粉末黄蓍胶、粉末阿拉伯胶、膨润土、羧甲基纤维素等。
表面活性剂可以是聚氧乙烯氢化蓖麻油、脱水山梨醇脂肪酸酯例如脱水山梨醇倍半油酸酯、聚氧乙烯硬脂酸酯等。
本发明用于治疗皮肤损伤的药物可以用作局部用制剂，以膏剂、霜剂、洗剂、搽剂、泥敷剂、硬膏剂、贴剂、凝胶剂、溶液剂等的形式直接施加到损伤/伤口部位上。
对于上述膏剂或霜剂，可以使用油性基质或乳剂基质。油性基质可以是烃例如C12-32-烃，包括液体石蜡、白凡士林、角鲨烯、角鲨烷、增塑基质(plastibase)等，高级醇例如一元C12-30-脂族醇，包括月桂醇、鲸蜡醇、硬脂醇、油醇等，高级脂肪酸例如饱和或不饱和C6-32-脂肪酸，包括棕榈酸和硬脂酸，高级脂肪酸酯例如棕榈酸肉豆蔻酯、硬脂酸十八烷基酯，与一元C14-32-脂族醇形成的脂肪酸酯，包括lanorine和巴西棕榈蜡，饱和或不饱和C10-22-脂族酸与甘油的酯，包括甘油一月桂酸酯或其氢化衍生物，二醇化合物，包括乙二醇、丙二醇和聚乙二醇，植物油和动物油。
乳剂基质可以是水包油基质、油包水基质或悬浮基质。水包油基质的实例包括通过以下方法制得的基质在或不在表面活性剂存在下，将油性组分例如羊毛脂、丙二醇、硬脂醇、凡士林、硅油、液体石蜡、甘油单硬脂酸酯、聚乙二醇等用水乳化或分散。油包水基质的实例包括通过以下方法制得的基质在或不在表面活性剂存在下，将油性组分例如白凡士林、液体实例等与水混合，然后将混合物乳化或分散。悬浮基质可以是通过将悬浮剂例如淀粉、甘油、高粘度羧甲基纤维素、羧基乙烯基聚合物等混合而制得的凝胶形式的水基质。
本发明用于治疗皮肤损伤的药物可以通过常规方式制成局部用制剂，例如通过把基质材料混合、乳化或悬浮，将活性组分和其它添加剂与基质混合，然后将其在混合器例如螺杆混合器中混合。
本发明用于治疗皮肤损伤的药物可以以悬浮液、乳液或溶液型洗剂的形式使用。用于悬浮液型洗剂的基质的实例包括含有以下组分的混合物悬浮剂例如树胶，包括阿拉伯胶和黄蓍胶，纤维素化合物，包括甲基纤维素和羟乙基纤维素，粘土，包括膨润土和水。用于乳液型洗剂的基质的实例包括乳液，所述乳液含有水和油例如脂肪酸，包括硬脂酸和油酸，或高级脂族醇，包括鲸蜡醇。用于溶液型洗剂的基质的实例包括水和醇例如乙醇、甘油或丙二醇。这样的洗剂可以这样制得将基质与水混合，搅拌混合物，把活性组分与其合适的添加剂混合，并且如果需要的话，过滤这样的混合物。
用于搽剂的基质的实例包括植物油例如橄榄油，醇例如乙醇或异丙醇，以及这样的油与水的混合物。所述搽剂可以这样制得将活性组分溶解，并且如果需要的话，把合适的添加剂与混合物混合。
用于泥敷剂的实例包括水溶性聚合物例如聚丙烯酸、聚乙烯醇或聚乙烯吡咯烷酮。所述泥敷剂可以这样制得将活性组分、基质与合适的添加剂混合，加热，然后把混合物冷却。
用于硬膏剂或贴剂的基质的实例包括载体例如无纺织物，弹性体例如天然橡胶或异戊二烯橡胶，填充剂例如锌白或氧化钛，粘合剂例如萜烯树脂，剥落剂例如乙酸乙烯酯，软化剂例如液体石蜡或抗氧化剂例如二丁基羟基甲苯(BHT)的组合。所述硬膏剂和贴剂可以通过常规方式例如溶液方法等来制得。
用于溶液的溶剂的实例包括水、乙醇、异丙醇、苯甲醇、聚乙二醇例如PEG400、丙二醇、碳酸丙烯酯及其混合物。可以将所述溶液掺入到纱布或敷料内。
活性组分的用量可以根据制剂的形式来改变，并且可以为，对于膏剂，0.0025-5w/w％，优选0.005-0.5w/w％，对于溶液，0.1-200mg/ml，优选0.1-20mg/mL。
本发明用于治疗皮肤损伤的药物还可以与用于治疗伤口或皮肤溃疡的其它活性剂联合使用。此外，如果需要的话，可以将具有促进皮肤损伤/伤口愈合的生理活性物质(例如生长因子例如PDGF、TGF-α、TGF-β、bFGF、EGF等)掺入到本发明药物制剂内。
通过下列实施例/实验来更详细地举例说明本发明，但是不是对本发明的限制。如表1中所示的下列化合物(No.1-11)包括在作为本发明活性组分的化合物[I]的范围内。同时，在表1的化合物当中，除非描述了旋光异构体，否则具有不对称中心的每一种化合物是外消旋混合物形式的化合物。
表1(No.1)
*盐酸盐表1(No.2)
*盐酸盐表1(No.3)
表1(No.4) *盐酸盐表1(No.5) *盐酸盐表1(No.6)
*盐酸盐表1(No.7) 表1(No.8)
*盐酸盐表1(No.9) *盐酸盐表1(No.10) *盐酸盐表1(No.11) 通过下列实验来更详细地举例说明本发明，但是不应当理解为对本发明的限制。
实验1[本发明吡啶化合物对于人表皮微血管内皮细胞(HDMEC)增殖的体外促进活性]方法通过以下方法，在对于HDMEC增殖的促进活性方面评估受试化合物的伤口愈合促进活性。在本实验中使用正常成人表皮微血管内皮细胞(Hybridoma(1996)Vol.15(4)，pp279-288)作为HDMEC。
将上述HDMEC的悬浮液(2×104个细胞/mL，Cryo HMVEC-Ad；Cambrex Inc.的注册商标)接种到48-孔平板(250μL/孔)上。将细胞在增殖培养基(BletKit EGM-2-MV；Cambrex Inc.的注册商标)中培养1天。用分析培养基(450μL，不含bFGF、EGF和VEGF的BletKit EGM-2-MV；Cambrex Inc.的注册商标)替换增殖培养基后，向每个孔中加入受试化合物的二甲亚砜溶液(0.1v/v％，50μL)，将这些孔培养96小时。培养后，通过抽吸除去分析培养基，把残余细胞悬浮在含有0.05％胰蛋白酶和0.02％乙二胺四乙酸的Isoton II溶液(500μL；Beckmann-Coulter Ltd.)中。将悬浮液用Isoton II溶液(5mL)稀释(11-倍)，通过Coulter-Counter Z1(Beckmann-CoulterLtd.)计数细胞的数目。
作为阴性对照组，将HDMEC以与上述相同的方式培养，但是没有受试化合物存在。作为阳性对照，将HDMEC以相同方式培养，但是使用bFGF溶液(0.1μg/mL培养基)来代替受试化合物溶液。
结果每一种受试化合物对于HDMEC-增殖的促进活性描述在表2-5中。从这些结果中可以清楚地看到，每一种受试化合物(0.1-1μM)表现出等效的对于作为bFGF的HDMEC增殖的促进活性(0.1μg/mL培养基)。
表2
表3
*盐酸盐表4
*盐酸盐表5
*盐酸盐实验2[本发明吡啶化合物对于伤口愈合的促进活性]方法饲养自发性糖尿病雄性小鼠(C57BL/KsJ-db/db Jcl，龄9周，体重30-40g；Nippon-Clair；4只小鼠/组)直至其达到10-12周龄。在戊巴比妥麻醉下，剃去小鼠背部的毛发，并且用乙醇擦拭。在小鼠背部制作一个环形全层皮肤伤口(2cm2)。将受试化合物在生理盐水中的溶液(20μL；10μg/伤口)滴加到伤口部位上，并且将伤口部位用膜敷料(Bioclusive，Johnson & Johnson Inc.的注册商标)覆盖。施用受试化合物，替换膜敷料，清洁伤口部位并且测定伤口面积，每2-4天进行一次，直至伤口完全愈合。期间，给对照组小鼠施用生理盐水溶液(20μL)来代替受试化合物溶液。
结果结果如表6-8所示。从这些结果中可以清楚看出，在受试化合物治疗组中，伤口完全愈合所需要的时间显著短于对照组。
表6
表7
*盐酸盐表8
*盐酸盐工业实用性本发明用于治疗皮肤损伤的药物具有促进表皮微血管细胞增殖的活性，并且因此可用于治疗(例如促进愈合)皮肤损伤例如伤口(创伤性伤口、手术后伤口等)、褥疮性溃疡或慢性皮肤溃疡(热溃疡，血管阻塞性溃疡，包括腿溃疡、糖尿病性溃疡等)。
权利要求
1.式[I]的吡啶化合物或其可药用盐在制备用于治疗皮肤损伤的药物中的应用 其中R是具有下式的取代的吡啶基 R0是C1-6烷氧基-C1-6烷基，R1和R2是相同或不同的，并且是C1-6烷氧基，X是式＝N-的基团或下式所示基团 环A是任选具有取代基的饱和或不饱和10元含氮杂二环基，并且虚线是指存在或不存在双键。
2.权利要求1的应用，其中R是下式所示基团 其中在环A中的饱和或不饱和10元含氮杂二环基还可以含有选自氮原子、氧原子和硫原子的杂原子。
3.权利要求2的应用，其中所述环A中的10元含氮杂二环基是喹啉基、异喹啉基、喹唑啉基、酞嗪基、萘基、喹喔啉基或苯并噻嗪基，并且所述杂二环基可以是部分或完全氢化的。
4.权利要求3的应用，其中环A是10元含氮杂二环基，所述杂二环基任选被选自下列的基团取代羟基、氧代基、饱和或不饱和6元含氮杂单环基取代的C1-6烷氧基、二(C1-6烷基)氨基苯基和饱和或不饱和6元含氮杂单环基。
5.权利要求4的应用，其中所述饱和或不饱和6元含氮杂单环基是吡啶基、二氢吡啶基、嘧啶基、吗啉代基团或哌啶子基。
6.权利要求4的应用，其中环A是被至少氧代基和/或羟基取代的饱和或不饱和10元含氮杂二环基。
7.权利要求6的应用，其中所述吡啶化合物是下式[I-A]或[I-B]的化合物或其可药用盐 其中R11是下式的基团 环A是(i)氧代基取代的二氢或四氢喹啉基，其任选被选自羟基和吡啶基的基团取代，(ii)羟基取代的二氢或四氢喹啉基，(iii)氧代基取代的六氢喹啉基，其任选被羟基取代，(iv)氧代基取代的二氢或四氢异喹啉基，其任选被选自下列的基团取代羟基、吗啉代-C1-6烷氧基、吡啶基-C1-6烷氧基、哌啶基-C1-6烷氧基和吗啉代基团，(v)氧代基取代的二氢或四氢-酞嗪基，其任选被选自下列的基团取代羟基、二(C1-6烷基)氨基苯基、吡啶基和嘧啶基，(vi)氧代基取代的二氢或四氢-喹唑啉基，其任选被羟基取代，(vii)氧代基取代的二氢或四氢-喹喔啉基，其任选被羟基取代，或(viii)氧代基取代的二氢或四氢-萘基，其任选被羟基取代，R1和R2是相同或不同的，并且是C1-6烷氧基。
8.权利要求1的应用，其中R是下式所示取代的吡啶基 且X是下式的基团
9.权利要求8的应用，其中R0是甲氧基甲基，且R1和R2是乙氧基。
10.权利要求7的应用，其中R是下式所示取代的吡啶基 R1和R2是相同或不同的，并且选自甲氧基和乙氧基。
11.权利要求10的应用，其中环A是(a)羟基-取代的二氢或四氢-喹啉基，(b)氧代基取代的二氢或四氢-异喹啉基，其被选自吡啶基-取代的C1-6烷氧基和吗啉代-C1-6烷氧基的基团取代，(c)氧代基取代的二氢或四氢-酞嗪基，其被选自吡啶基、嘧啶基和二(C1-6烷基)氨基苯基的基团取代，或(d)氧代基取代的二氢或四氢-喹唑啉基。
12.权利要求11的应用，其中环A是下式的基团
13.选自下列的化合物或其可药用盐在制备用于治疗皮肤损伤的药物中的应用2-(4-羟基-1，2，3，4-四氢喹啉-1-基)-4-[2，3-二(羟基甲基)-6，7-二甲氧基萘-1-基]吡啶；4-[2，3-二(羟基甲基)-6，7-二甲氧基萘-1-基]-2-[1-氧代-1，2-二氢-5-(2-吗啉代乙氧基)-异喹啉-2-基]吡啶；4-[2，3-二(羟基甲基)-6，7-二甲氧基萘-1-基]-2-[1-氧代-1，2-二氢-5-(3-吡啶基甲氧基)-1-异喹啉-2-基]吡啶；4-(3-羟基甲基-6，7-二甲氧基异喹啉-1-基)-2-[4-(3-吡啶基)酞嗪-1(2H)-酮-2-基]吡啶；和4-[(3S)-3-羟基甲基-3，4-二氢-6，7-二甲氧基异喹啉-1-基]-2-[1-氧代-5-(3-吡啶基甲氧基)-1，2-二氢异喹啉-2-基]吡啶。
14.权利要求1-13任一项的应用，其中所述皮肤损伤是急性或慢性伤口。
15.权利要求1-13任一项的应用，其中所述皮肤损伤是褥疮性溃疡(压迫溃疡)。
16.权利要求1-13任一项的应用，其中所述皮肤损伤选自热溃疡，血管阻塞性溃疡，包括腿溃疡，糖尿病性溃疡，创伤性溃疡和手术后溃疡。
17.用于治疗皮肤损伤的药物，所述药物包含下式[I]的吡啶化合物或其可药用盐作为活性组分 其中R是具有下式的取代的吡啶基 R0是C1-6烷氧基-C1-6烷基，R1和R2是相同或不同的，并且是C1-6烷氧基，X是式＝N-的基团或下式所示基团 环A是任选具有取代基的饱和或不饱和10元含氮杂二环基，并且虚线是指存在或不存在双键。
18.式[I]的吡啶化合物或其可药用盐在制备用于促进表皮微血管内皮细胞增殖的药物中的应用 其中R是具有下式的取代的吡啶基 R0是C1-6烷氧基-C1-6烷基，R1和R2是相同或不同的，并且是C1-6烷氧基，X是式＝N-的基团或下式所示基团 环A是任选具有取代基的饱和或不饱和10元含氮杂二环基，并且虚线是指存在或不存在双键。
19.治疗哺乳动物中皮肤损伤的方法，所述方法包括给需要所述治疗的哺乳动物局部施用治疗有效量的下式[I]的吡啶化合物或其可药用盐 其中R是具有下式的取代的吡啶基 R0是C1-6烷氧基-C1-6烷基，R1和R2是相同或不同的，并且是C1-6烷氧基，X是式＝N-的基团或下式所示基团 环A是任选具有取代基的饱和或不饱和10元含氮杂二环基，并且虚线是指存在或不存在双键。
20.促进哺乳动物中表皮微血管内皮细胞增殖的方法，所述方法包括将所述细胞用药理学有效量的下式[I]的吡啶化合物或其可药用盐处理 其中R是具有下式的取代的吡啶基 R0是C1-6烷氧基-C1-6烷基，R1和R2是相同或不同的，并且是C1-6烷氧基，X是式＝N-的基团或下式所示基团 环A是任选具有取代基的饱和或不饱和10元含氮杂二环基，并且虚线是指存在或不存在双键。
全文摘要
本发明涉及式[I]的吡啶化合物或其可药用盐在制备用于治疗皮肤损伤的药物中的应用，其中R是具有下式的取代的吡啶基，R
文档编号A61K31/5415GK101052400SQ20058003761
公开日2007年10月10日 申请日期2005年10月28日 优先权日2004年10月29日
发明者高木保, 直塚敦子 申请人:田边制药株式会社
技术领域：
本发明提供了吡啶化合物在制备用于治疗皮肤损伤例如伤口或皮肤溃疡的药物中的新应用。本发明还提供了吡啶化合物在制备用于促进表皮微血管内皮细胞增殖的药物中的新应用。本发明还提供了治疗皮肤损伤的方法，所述方法包括给需要这种治疗的哺乳动物施用吡啶化合物。
背景技术：
有多种因素会引起皮肤损伤例如伤口、褥疮性溃疡或热溃疡。引起显著患者痛苦的这样的皮肤损伤已经被认识到是医药经济严重问题，因为其经常需要长期治疗来修复皮肤损伤，尤其是对于慢性皮肤损伤例如褥疮性溃疡。
皮肤损伤一般是通过一系列事件完成的，这些事件包括(1)炎症阶段，(2)细胞增殖阶段和(3)表皮/真皮重建阶段。据认为，在愈合过程中，有多种不同因子例如血小板衍生生长因子(PDGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、血管内皮生长因子(VEGF)、角质形成细胞生长因子(KGF)、肝细胞生长因子(HGF)等以高度复杂的关系进行工作。从组织病理学方面来看，短暂的血管生成是皮肤损伤愈合过程中的必需事件。在这方面，在上述生长因子当中，VEGF是其中一个主要血管生成促进因子，并且促进皮肤损伤愈合(AmericanJournal of Pathology(2004)Vol.164(6)，pp1935-47，FASEB Journal(2004)Vol.18(11)，pp1264-66)。
作为治疗皮肤损伤的治疗剂，前列腺素E2制剂(alprostadilalphadex)、二丁酰基cAMP制剂(布拉地辛钠)、蔗糖/聚乙烯吡咯烷酮碘制剂、维生素E维A酸酯制剂等是已知的。然而，在慢性皮肤损伤例如慢性皮肤溃疡的治疗中，这些治疗剂并不总是有效的。
最近，开发了bFGF，一种上述生长因子，这是因为其基于成纤维细胞、血管内皮细胞和血管平滑肌细胞增殖促进活性的生理活性(血管生成促进活性)，并且进入了实际应用。
有一些其它药物会用作促进皮肤损伤愈合的活性剂。例如，某些文献报道，在动物模型中，前列腺素I1(PGI1)衍生物表现出促进伤口愈合的活性(Japanese Journal of Pharmacology(1995)Vol.67(Suppl.I)，p275(P3-116))，或者磷酸二酯酶5抑制剂例如西地那非已经在临床上用于治疗勃起功能障碍，预计其可以促进伤口愈合，这是因为通过细胞内cGMP水平增加而介导的血管扩张活性(WO2002/015893)。然而，这些药物尚未进入实际应用。
另一方面，有些文献报道，预计一些种类化合物例如含氧杂环化合物如苯并呋喃化合物(US专利6716987)或烟酸化合物(US专利出版2003/0195233)可表现出伤口愈合促进作用。然而，其在伤口愈合过程中的机制以及临床用途尚待证实。
同时，作为本发明活性组分的吡啶化合物(即吡啶基取代的萘化合物和吡啶基取代的异喹啉化合物)已知用作抗哮喘剂，其具有支气管收缩抑制活性和气道炎症抑制活性，这是通过其PDE4-抑制活性介导的(EP748805，EP848000)。但是其皮肤损伤愈合促进活性没有报道过。
发明公开本发明涉及下式[I]的吡啶化合物或其可药用盐在制备用于治疗皮肤损伤的药物或者在制备用于促进表皮微血管内皮细胞增殖的药物中的应用 其中R是具有下式的取代的吡啶基
R0是C1-6烷氧基-C1-6烷基，R1和R2是相同或不同的，并且是C1-6烷氧基，X是式＝N-的基团或下式所示基团 环A是任选具有取代基的饱和或不饱和10元含氮杂二环基，并且虚线是指存在或不存在双键。
本发明药物可用于促进皮肤损伤例如伤口(创伤性伤口、手术后伤口等)、褥疮性溃疡、慢性皮肤溃疡(热溃疡，血管阻塞性溃疡，包括腿溃疡、糖尿病性溃疡等)的愈合。
化合物[I]或其可药用盐在皮肤损伤愈合中的精确机制有待研究。在现在，其对于表皮微血管内皮细胞增殖的促进活性可导致一个可能的假设，也就是有一个反应链在皮肤损伤愈合中起重要作用，该反应链包括由这样的吡啶化合物诱导的血管内皮细胞特异性mytogen(VEGF)的表达增加以及VEGF诱导的细胞迁移和增殖，之后是促进目标组织中的血管生成，虽然其它生长因子例如由VEGF诱导的FGF也可以合作参与该过程。
实施本发明的最佳方式作为本发明活性组分的化合物[I]的实例包括其中R是下式所示基团的化合物 在环A中的10元含氮杂二环基是任选还含有选自氮原子、氧原子和硫原子的杂原子的10元含氮杂二环基(所述杂环基可以是部分或完全氢化的)。这样的杂环基包括喹啉基、异喹啉基、喹唑啉基、酞嗪基(phtharadinyl)、萘基、喹喔啉基和苯并噻嗪基(所述杂环基可以是部分或完全氢化的)。所述10元杂二环基可具有一个或多个取代基。这样的取代基包括选自下列的基团羟基、氧代基、饱和或不饱和6元含氮杂单环基取代的C1-6烷氧基、二(C1-6烷基)苯基和饱和或不饱和6元含氮杂单环基。当杂二环基上的取代基是或者包括饱和或不饱和6元含氮杂单环基时，这样的杂环基的实例包括吡啶基、二氢吡啶基、嘧啶基、吗啉代基团、哌啶基等。
在上述取代的环A当中，环A的优选实例包括被至少一个氧代基和/或羟基取代的10元含氮杂二环基。这样的杂环基的实例包括下列式的基团 同时，除了氧代基和/或羟基以外，所述杂二环基还可以具有如上所例举的其它取代基。
更具体地，作为本发明活性组分的化合物[I]的实例是下列式[I-A]或[I-B]的化合物或其可药用盐 其中R11是下式的基团
环A是(i)氧代基取代的二氢或四氢喹啉基，其任选被选自羟基和吡啶基的基团取代，(ii)羟基取代的二氢或四氢喹啉基，(iii)氧代基取代的六氢喹啉基，其任选被羟基取代，(iv)氧代基取代的二氢或四氢异喹啉基，其任选被选自下列的基团取代羟基、吗啉代-C1-6烷氧基、吡啶基-C1-6烷氧基、哌啶基-C1-6烷氧基和吗啉代基团，(v)氧代基取代的二氢或四氢-酞嗪基，其任选被选自下列的基团取代羟基、二(C1-6烷基)氨基苯基、吡啶基和嘧啶基，(vi)氧代基取代的二氢或四氢-喹唑啉基，其任选被羟基取代，(vii)氧代基取代的二氢或四氢-喹喔啉基，其任选被羟基取代，或(viii)氧代基取代的二氢或四氢-萘基，其任选被羟基取代，R1和R2是相同或不同的，并且是C1-6烷氧基。
作为本发明活性组分的化合物[I]的另一个具体实例包括这样的化合物[I]，其中R是下式所示的2-氧代-1-取代的吡啶-4-基 且X是下式的基团 在它们当中，更优选的实例包括其中R0是甲氧基甲基，且R1和R2是乙氧基的化合物。
在上述吡啶化合物[I]当中，在药理学上优选的化合物包括这样的化合物[I-A]或[I-B]，其中R11是下式所示的2-取代的吡啶-4-基 并且R1和R2是相同或不同的，并且是甲氧基或乙氧基。
在上述化合物当中，在药理学上更优选的化合物包括这样的化合物[I-A]或[I-B]，其中R11中的环A是(a)羟基-取代的二氢或四氢-喹啉基，(b)氧代基取代的二氢或四氢-异喹啉基，其被选自吡啶基-取代的C1-6烷氧基和吗啉代-C1-6烷氧基的基团取代，(c)氧代基取代的二氢或四氢-酞嗪基，其被选自吡啶基、嘧啶基和二(C1-6烷基)氨基苯基的基团取代，或(d)氧代基取代的二氢或四氢-喹唑啉基。
在上述吡啶化合物[I]当中，药理学上优选的另外化合物包括这样的化合物[I-A]或[I-B]，其中环A是下式的基团 在它们当中，在药理学上特别优选的化合物包括选自下列的化合物2-(4-羟基-1，2，3，4-四氢喹啉-1-基)-4-[2，3-二(羟基甲基)-6，7-二甲氧基萘-1-基]吡啶；4-[2，3-二(羟基甲基)-6，7-二甲氧基萘-1-基]-2-[1-氧代-1，2-二氢-5-(2-吗啉代乙氧基)-异喹啉-2-基]吡啶；4-[2，3-二(羟基甲基)-6，7-二甲氧基萘-1-基]-2-[1-氧代-1，2-二氢-5-(3-吡啶基甲氧基)-1-异喹啉-2-基]吡啶；4-(3-羟基甲基-6，7-二甲氧基异喹啉-1-基)-2-[4-(3-吡啶基)酞嗪-1(2H)-酮-2-基]吡啶；和4-[(3S)-3-羟基甲基-3，4-二氢-6，7-二甲氧基异喹啉-1-基]-2-[1-氧代-5-(3-吡啶基甲氧基)-1，2-二氢异喹啉-2-基]吡啶；或其可药用盐。
当本发明化合物[I]在其分子中具有不对称中心时(例如在二氢异喹啉部分或在环A中)，由于其所述不对称碳原子，其可以以其立体异构体形式存在(非对映体、旋光异构体)，并且本发明也包括任一种立体异构体及其混合物。
本发明药物可用于促进皮肤损伤例如皮肤损伤例如伤口(创伤性伤口、手术后伤口等)、褥疮性溃疡、慢性皮肤溃疡(热溃疡，血管阻塞性溃疡，包括腿溃疡、糖尿病性溃疡等)的愈合。
化合物[I]的可药用盐的实例包括无机酸盐例如盐酸盐、硫酸盐或氢溴酸盐，和有机酸盐例如乙酸盐、富马酸盐、草酸盐、甲磺酸盐或马来酸盐。
化合物[I]或其可药用盐可通过描述在例如EP748805B1、EP848000B1或US专利5342941中的已知方法制得。
化合物[I]或其可药用盐可以直接或间接局部给药到损伤部位上，并且其剂量可以根据需要治疗皮肤损伤的个体/患者的年龄、体重和身体状况或者皮肤损伤的种类和程度而改变。例如，剂量通常为约0.05-100mg/皮肤损伤，优选0.1-10mg/皮肤损伤。可按照需要适当地确定给药频率。例如，通常每天给药1-4次，优选每天给药1或2次。
本发明治疗皮肤损伤的药物具有促进表皮微血管细胞增殖的活性，并且因此可用于治疗(例如促进愈合)皮肤损伤例如伤口(创伤性伤口、手术后伤口等)、褥疮性溃疡或慢性皮肤溃疡(热溃疡，血管阻塞性溃疡，包括腿溃疡、糖尿病性溃疡等)。
此外，作为本发明活性组分的化合物[I]包括至少在治疗皮肤损伤的有效剂量范围内基本上不表现出一些不利副作用例如细胞毒性、光敏性等。从安全性方面来看，包含这样的化合物的本发明用于治疗皮肤损伤的药物可以作为治疗剂使用。
如果需要的话，除了用作活性组分的化合物[I]或其可药用盐以外，可以向本发明药物中引入一种或多种可药用添加剂例如渗透促进剂、pH-调节剂、防腐剂、矫味剂、分散剂、润湿剂、稳定剂、抗菌剂、悬浮剂或表面活性剂。
渗透促进剂的实例包括具有20个碳原子或少于20个碳原子的一元醇，例如乙醇、异丙醇和硬脂醇，吡咯烷酮化合物例如2-吡咯烷酮和1-甲基-2-吡咯烷酮，脲化合物例如脲和硫脲，环糊精化合物例如α-环糊精，薄荷醇，1-十二烷基氮杂环庚烷-2-酮，巯基乙酸钙，柠檬烯等。所述渗透促进剂的用量可以根据制剂形式或载体基质而改变。渗透促进剂的量通常为，从有效表现出渗透促进活性的角度来看，0.1w/w％或更大，优选0.3w/w％或更大，并且，从抑制不利药物反应的角度来看，为10w/w％或更小，或优选5w/w％或更小。
pH调节剂可以为无机酸例如盐酸、硫酸或磷酸，和有机酸例如乙酸、琥珀酸或苹果酸或其金属盐。所述pH调节剂的用量可以根据制剂的形式或载体基质而改变。其用量通常是这样的，使得目标组合物的pH为4-8。
防腐剂可以是对羟基苯甲酸酯、对羟基苯甲酸甲酯、氯丁醇、苯甲醇等。
矫味剂可以是薄荷醇、玫瑰油、桉树油、d-樟脑等。
分散剂可以是偏磷酸钠、聚磷酸钾、无水硅酸。
润湿剂可以是丙二醇、甘油、山梨醇、乳酸钠、透明质酸钠等。
稳定剂可以是亚硫酸钠、生育酚、乙二胺四乙酸(EDTA)、柠檬酸等。
悬浮剂可以是粉末黄蓍胶、粉末阿拉伯胶、膨润土、羧甲基纤维素等。
表面活性剂可以是聚氧乙烯氢化蓖麻油、脱水山梨醇脂肪酸酯例如脱水山梨醇倍半油酸酯、聚氧乙烯硬脂酸酯等。
本发明用于治疗皮肤损伤的药物可以用作局部用制剂，以膏剂、霜剂、洗剂、搽剂、泥敷剂、硬膏剂、贴剂、凝胶剂、溶液剂等的形式直接施加到损伤/伤口部位上。
对于上述膏剂或霜剂，可以使用油性基质或乳剂基质。油性基质可以是烃例如C12-32-烃，包括液体石蜡、白凡士林、角鲨烯、角鲨烷、增塑基质(plastibase)等，高级醇例如一元C12-30-脂族醇，包括月桂醇、鲸蜡醇、硬脂醇、油醇等，高级脂肪酸例如饱和或不饱和C6-32-脂肪酸，包括棕榈酸和硬脂酸，高级脂肪酸酯例如棕榈酸肉豆蔻酯、硬脂酸十八烷基酯，与一元C14-32-脂族醇形成的脂肪酸酯，包括lanorine和巴西棕榈蜡，饱和或不饱和C10-22-脂族酸与甘油的酯，包括甘油一月桂酸酯或其氢化衍生物，二醇化合物，包括乙二醇、丙二醇和聚乙二醇，植物油和动物油。
乳剂基质可以是水包油基质、油包水基质或悬浮基质。水包油基质的实例包括通过以下方法制得的基质在或不在表面活性剂存在下，将油性组分例如羊毛脂、丙二醇、硬脂醇、凡士林、硅油、液体石蜡、甘油单硬脂酸酯、聚乙二醇等用水乳化或分散。油包水基质的实例包括通过以下方法制得的基质在或不在表面活性剂存在下，将油性组分例如白凡士林、液体实例等与水混合，然后将混合物乳化或分散。悬浮基质可以是通过将悬浮剂例如淀粉、甘油、高粘度羧甲基纤维素、羧基乙烯基聚合物等混合而制得的凝胶形式的水基质。
本发明用于治疗皮肤损伤的药物可以通过常规方式制成局部用制剂，例如通过把基质材料混合、乳化或悬浮，将活性组分和其它添加剂与基质混合，然后将其在混合器例如螺杆混合器中混合。
本发明用于治疗皮肤损伤的药物可以以悬浮液、乳液或溶液型洗剂的形式使用。用于悬浮液型洗剂的基质的实例包括含有以下组分的混合物悬浮剂例如树胶，包括阿拉伯胶和黄蓍胶，纤维素化合物，包括甲基纤维素和羟乙基纤维素，粘土，包括膨润土和水。用于乳液型洗剂的基质的实例包括乳液，所述乳液含有水和油例如脂肪酸，包括硬脂酸和油酸，或高级脂族醇，包括鲸蜡醇。用于溶液型洗剂的基质的实例包括水和醇例如乙醇、甘油或丙二醇。这样的洗剂可以这样制得将基质与水混合，搅拌混合物，把活性组分与其合适的添加剂混合，并且如果需要的话，过滤这样的混合物。
用于搽剂的基质的实例包括植物油例如橄榄油，醇例如乙醇或异丙醇，以及这样的油与水的混合物。所述搽剂可以这样制得将活性组分溶解，并且如果需要的话，把合适的添加剂与混合物混合。
用于泥敷剂的实例包括水溶性聚合物例如聚丙烯酸、聚乙烯醇或聚乙烯吡咯烷酮。所述泥敷剂可以这样制得将活性组分、基质与合适的添加剂混合，加热，然后把混合物冷却。
用于硬膏剂或贴剂的基质的实例包括载体例如无纺织物，弹性体例如天然橡胶或异戊二烯橡胶，填充剂例如锌白或氧化钛，粘合剂例如萜烯树脂，剥落剂例如乙酸乙烯酯，软化剂例如液体石蜡或抗氧化剂例如二丁基羟基甲苯(BHT)的组合。所述硬膏剂和贴剂可以通过常规方式例如溶液方法等来制得。
用于溶液的溶剂的实例包括水、乙醇、异丙醇、苯甲醇、聚乙二醇例如PEG400、丙二醇、碳酸丙烯酯及其混合物。可以将所述溶液掺入到纱布或敷料内。
活性组分的用量可以根据制剂的形式来改变，并且可以为，对于膏剂，0.0025-5w/w％，优选0.005-0.5w/w％，对于溶液，0.1-200mg/ml，优选0.1-20mg/mL。
本发明用于治疗皮肤损伤的药物还可以与用于治疗伤口或皮肤溃疡的其它活性剂联合使用。此外，如果需要的话，可以将具有促进皮肤损伤/伤口愈合的生理活性物质(例如生长因子例如PDGF、TGF-α、TGF-β、bFGF、EGF等)掺入到本发明药物制剂内。
通过下列实施例/实验来更详细地举例说明本发明，但是不是对本发明的限制。如表1中所示的下列化合物(No.1-11)包括在作为本发明活性组分的化合物[I]的范围内。同时，在表1的化合物当中，除非描述了旋光异构体，否则具有不对称中心的每一种化合物是外消旋混合物形式的化合物。
表1(No.1)
*盐酸盐表1(No.2)
*盐酸盐表1(No.3)
表1(No.4) *盐酸盐表1(No.5) *盐酸盐表1(No.6)
*盐酸盐表1(No.7) 表1(No.8)
*盐酸盐表1(No.9) *盐酸盐表1(No.10) *盐酸盐表1(No.11) 通过下列实验来更详细地举例说明本发明，但是不应当理解为对本发明的限制。
实验1[本发明吡啶化合物对于人表皮微血管内皮细胞(HDMEC)增殖的体外促进活性]方法通过以下方法，在对于HDMEC增殖的促进活性方面评估受试化合物的伤口愈合促进活性。在本实验中使用正常成人表皮微血管内皮细胞(Hybridoma(1996)Vol.15(4)，pp279-288)作为HDMEC。
将上述HDMEC的悬浮液(2×104个细胞/mL，Cryo HMVEC-Ad；Cambrex Inc.的注册商标)接种到48-孔平板(250μL/孔)上。将细胞在增殖培养基(BletKit EGM-2-MV；Cambrex Inc.的注册商标)中培养1天。用分析培养基(450μL，不含bFGF、EGF和VEGF的BletKit EGM-2-MV；Cambrex Inc.的注册商标)替换增殖培养基后，向每个孔中加入受试化合物的二甲亚砜溶液(0.1v/v％，50μL)，将这些孔培养96小时。培养后，通过抽吸除去分析培养基，把残余细胞悬浮在含有0.05％胰蛋白酶和0.02％乙二胺四乙酸的Isoton II溶液(500μL；Beckmann-Coulter Ltd.)中。将悬浮液用Isoton II溶液(5mL)稀释(11-倍)，通过Coulter-Counter Z1(Beckmann-CoulterLtd.)计数细胞的数目。
作为阴性对照组，将HDMEC以与上述相同的方式培养，但是没有受试化合物存在。作为阳性对照，将HDMEC以相同方式培养，但是使用bFGF溶液(0.1μg/mL培养基)来代替受试化合物溶液。
结果每一种受试化合物对于HDMEC-增殖的促进活性描述在表2-5中。从这些结果中可以清楚地看到，每一种受试化合物(0.1-1μM)表现出等效的对于作为bFGF的HDMEC增殖的促进活性(0.1μg/mL培养基)。
表2
表3
*盐酸盐表4
*盐酸盐表5
*盐酸盐实验2[本发明吡啶化合物对于伤口愈合的促进活性]方法饲养自发性糖尿病雄性小鼠(C57BL/KsJ-db/db Jcl，龄9周，体重30-40g；Nippon-Clair；4只小鼠/组)直至其达到10-12周龄。在戊巴比妥麻醉下，剃去小鼠背部的毛发，并且用乙醇擦拭。在小鼠背部制作一个环形全层皮肤伤口(2cm2)。将受试化合物在生理盐水中的溶液(20μL；10μg/伤口)滴加到伤口部位上，并且将伤口部位用膜敷料(Bioclusive，Johnson & Johnson Inc.的注册商标)覆盖。施用受试化合物，替换膜敷料，清洁伤口部位并且测定伤口面积，每2-4天进行一次，直至伤口完全愈合。期间，给对照组小鼠施用生理盐水溶液(20μL)来代替受试化合物溶液。
结果结果如表6-8所示。从这些结果中可以清楚看出，在受试化合物治疗组中，伤口完全愈合所需要的时间显著短于对照组。
表6
表7
*盐酸盐表8
*盐酸盐工业实用性本发明用于治疗皮肤损伤的药物具有促进表皮微血管细胞增殖的活性，并且因此可用于治疗(例如促进愈合)皮肤损伤例如伤口(创伤性伤口、手术后伤口等)、褥疮性溃疡或慢性皮肤溃疡(热溃疡，血管阻塞性溃疡，包括腿溃疡、糖尿病性溃疡等)。
权利要求
1.式[I]的吡啶化合物或其可药用盐在制备用于治疗皮肤损伤的药物中的应用 其中R是具有下式的取代的吡啶基 R0是C1-6烷氧基-C1-6烷基，R1和R2是相同或不同的，并且是C1-6烷氧基，X是式＝N-的基团或下式所示基团 环A是任选具有取代基的饱和或不饱和10元含氮杂二环基，并且虚线是指存在或不存在双键。
2.权利要求1的应用，其中R是下式所示基团 其中在环A中的饱和或不饱和10元含氮杂二环基还可以含有选自氮原子、氧原子和硫原子的杂原子。
3.权利要求2的应用，其中所述环A中的10元含氮杂二环基是喹啉基、异喹啉基、喹唑啉基、酞嗪基、萘基、喹喔啉基或苯并噻嗪基，并且所述杂二环基可以是部分或完全氢化的。
4.权利要求3的应用，其中环A是10元含氮杂二环基，所述杂二环基任选被选自下列的基团取代羟基、氧代基、饱和或不饱和6元含氮杂单环基取代的C1-6烷氧基、二(C1-6烷基)氨基苯基和饱和或不饱和6元含氮杂单环基。
5.权利要求4的应用，其中所述饱和或不饱和6元含氮杂单环基是吡啶基、二氢吡啶基、嘧啶基、吗啉代基团或哌啶子基。
6.权利要求4的应用，其中环A是被至少氧代基和/或羟基取代的饱和或不饱和10元含氮杂二环基。
7.权利要求6的应用，其中所述吡啶化合物是下式[I-A]或[I-B]的化合物或其可药用盐 其中R11是下式的基团 环A是(i)氧代基取代的二氢或四氢喹啉基，其任选被选自羟基和吡啶基的基团取代，(ii)羟基取代的二氢或四氢喹啉基，(iii)氧代基取代的六氢喹啉基，其任选被羟基取代，(iv)氧代基取代的二氢或四氢异喹啉基，其任选被选自下列的基团取代羟基、吗啉代-C1-6烷氧基、吡啶基-C1-6烷氧基、哌啶基-C1-6烷氧基和吗啉代基团，(v)氧代基取代的二氢或四氢-酞嗪基，其任选被选自下列的基团取代羟基、二(C1-6烷基)氨基苯基、吡啶基和嘧啶基，(vi)氧代基取代的二氢或四氢-喹唑啉基，其任选被羟基取代，(vii)氧代基取代的二氢或四氢-喹喔啉基，其任选被羟基取代，或(viii)氧代基取代的二氢或四氢-萘基，其任选被羟基取代，R1和R2是相同或不同的，并且是C1-6烷氧基。
8.权利要求1的应用，其中R是下式所示取代的吡啶基 且X是下式的基团
9.权利要求8的应用，其中R0是甲氧基甲基，且R1和R2是乙氧基。
10.权利要求7的应用，其中R是下式所示取代的吡啶基 R1和R2是相同或不同的，并且选自甲氧基和乙氧基。
11.权利要求10的应用，其中环A是(a)羟基-取代的二氢或四氢-喹啉基，(b)氧代基取代的二氢或四氢-异喹啉基，其被选自吡啶基-取代的C1-6烷氧基和吗啉代-C1-6烷氧基的基团取代，(c)氧代基取代的二氢或四氢-酞嗪基，其被选自吡啶基、嘧啶基和二(C1-6烷基)氨基苯基的基团取代，或(d)氧代基取代的二氢或四氢-喹唑啉基。
12.权利要求11的应用，其中环A是下式的基团
13.选自下列的化合物或其可药用盐在制备用于治疗皮肤损伤的药物中的应用2-(4-羟基-1，2，3，4-四氢喹啉-1-基)-4-[2，3-二(羟基甲基)-6，7-二甲氧基萘-1-基]吡啶；4-[2，3-二(羟基甲基)-6，7-二甲氧基萘-1-基]-2-[1-氧代-1，2-二氢-5-(2-吗啉代乙氧基)-异喹啉-2-基]吡啶；4-[2，3-二(羟基甲基)-6，7-二甲氧基萘-1-基]-2-[1-氧代-1，2-二氢-5-(3-吡啶基甲氧基)-1-异喹啉-2-基]吡啶；4-(3-羟基甲基-6，7-二甲氧基异喹啉-1-基)-2-[4-(3-吡啶基)酞嗪-1(2H)-酮-2-基]吡啶；和4-[(3S)-3-羟基甲基-3，4-二氢-6，7-二甲氧基异喹啉-1-基]-2-[1-氧代-5-(3-吡啶基甲氧基)-1，2-二氢异喹啉-2-基]吡啶。
14.权利要求1-13任一项的应用，其中所述皮肤损伤是急性或慢性伤口。
15.权利要求1-13任一项的应用，其中所述皮肤损伤是褥疮性溃疡(压迫溃疡)。
16.权利要求1-13任一项的应用，其中所述皮肤损伤选自热溃疡，血管阻塞性溃疡，包括腿溃疡，糖尿病性溃疡，创伤性溃疡和手术后溃疡。
17.用于治疗皮肤损伤的药物，所述药物包含下式[I]的吡啶化合物或其可药用盐作为活性组分 其中R是具有下式的取代的吡啶基 R0是C1-6烷氧基-C1-6烷基，R1和R2是相同或不同的，并且是C1-6烷氧基，X是式＝N-的基团或下式所示基团 环A是任选具有取代基的饱和或不饱和10元含氮杂二环基，并且虚线是指存在或不存在双键。
18.式[I]的吡啶化合物或其可药用盐在制备用于促进表皮微血管内皮细胞增殖的药物中的应用 其中R是具有下式的取代的吡啶基 R0是C1-6烷氧基-C1-6烷基，R1和R2是相同或不同的，并且是C1-6烷氧基，X是式＝N-的基团或下式所示基团 环A是任选具有取代基的饱和或不饱和10元含氮杂二环基，并且虚线是指存在或不存在双键。
19.治疗哺乳动物中皮肤损伤的方法，所述方法包括给需要所述治疗的哺乳动物局部施用治疗有效量的下式[I]的吡啶化合物或其可药用盐 其中R是具有下式的取代的吡啶基 R0是C1-6烷氧基-C1-6烷基，R1和R2是相同或不同的，并且是C1-6烷氧基，X是式＝N-的基团或下式所示基团 环A是任选具有取代基的饱和或不饱和10元含氮杂二环基，并且虚线是指存在或不存在双键。
20.促进哺乳动物中表皮微血管内皮细胞增殖的方法，所述方法包括将所述细胞用药理学有效量的下式[I]的吡啶化合物或其可药用盐处理 其中R是具有下式的取代的吡啶基 R0是C1-6烷氧基-C1-6烷基，R1和R2是相同或不同的，并且是C1-6烷氧基，X是式＝N-的基团或下式所示基团 环A是任选具有取代基的饱和或不饱和10元含氮杂二环基，并且虚线是指存在或不存在双键。
全文摘要
本发明涉及式[I]的吡啶化合物或其可药用盐在制备用于治疗皮肤损伤的药物中的应用，其中R是具有下式的取代的吡啶基，R
文档编号A61K31/5415GK101052400SQ20058003761
公开日2007年10月10日 申请日期2005年10月28日 优先权日2004年10月29日
发明者高木保, 直塚敦子 申请人:田边制药株式会社
最新回复(0)