一种呋喃并吲哚类化合物及其制备方法和应用的制作方法
专利名称：一种呋喃并吲哚类化合物及其制备方法和应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种呋喃并吲哚类化合物，该化合物是溶解微血栓的海洋微生物的代 谢产物，还涉及呋喃并吲哚类化合物的制备方法，和该化合物对治疗和/或预防各种缺血 性疾病的用途，该化合物作为溶血栓治疗药物。
背景技术：
血栓病是人类的常见多发病，心脑血管疾病中有很大比例是血栓病，溶栓疗法是 治疗血栓性疾病的重要方法之一。一直以来，溶血栓药物都被作为心肌梗塞、脑栓塞、肺血 栓等重笃血栓症急性期的治疗药物，其治疗目的主要是溶解血管内血栓和改善血液循环， 溶血栓药是治疗血栓性疾病的关键药物。早期的溶血栓药为链激酶(Strepto kinase, SK)、尿激酶⑴rokinase，UK)、蚓激酶(Lumbrukinase)、尿激酶原(Pro-urokinase)、葡激酶 (Staphylokinase)、甲氧苯甲酰纤溶酶原-链激酶激活剂复合物(Anisoylatedplasminoge n-streptokinase activator complex, APSAC))、蛇毒抗栓酶(Fibrinoenase from snake venom)，最近使用的溶血栓药为阿替普酶(Alteplase)、瑞替普酶(Ret印Iase)等。围绕着血栓疾病的治疗既纤溶作用，在临床上使用的溶血栓药物会带来出血的重 大危险性，由于上述药物的安全问题，自20世纪90年代开始，一些研究者开始探索用组织 型纤溶酶原激活剂变异体(如TNKase、Monteplase, La noteplase)、脂质化合物用于血栓 疾病的治疗。研究发现，相比组织型纤溶酶原激活剂分子量小的活性化血液蛋白质C具有 抗凝血作用和促进纤溶作用；血小板膜特异性糖蛋白的抑制药物阿昔单抗作为小分子量的 短肽抗凝血药物已经用于临床；血液凝固因子叙的低分子抑制化合物作为药物正处于开 发阶段。但已经用于临床或正在试验阶段的抗凝血药物除了都有程度不同的出血危险性以 外，阿昔单抗的使用已经带来了像阿司匹林投与后的血小板减少的副作用。因此，在这一 治疗领域正急待着出血危险性小、不损伤血液因子、活性能够简单调控的低分子化合物作 为血栓疾病治疗药物的出现。
发明内容
本发明要解决的问题是为采用纤溶疗法进行血栓疾病的治疗和/或预防提供效 果明显、不存在出血危险性的临床药物。为了在血栓疾病治疗领域发现出血危险性小、不损伤血液因子、活性能够简单调 控的低分子化合物的药物，发明人从海洋和陆地的微生物、动植物的代谢产物进行了筛 选和广泛而深入的研究，结果发现用化合物(1)呋喃并吲哚类化合物(furan-p-indole compounds, FPIC)，该化合物是溶解微血栓的海洋微生物的代谢产物，该化合物作为溶血栓 药即能为微血栓疾病的治疗和/或预防提供效果明显、不存在出血危险性的临床药物，从 而完成本发明。本发明所需要解决的技术问题，可以通过以下技术方案来实现作为本发明的第一方面，一种呋喃并吲哚类化合物，其特征在于，所述化合物具有
权利要求
1.一种呋喃并吲哚类化合物，其特征在于，所述化合物具有结构式(1)，
2.根据权利要求1所述的呋喃并吲哚类化合物，其特征在于，所述氨基酸残基包括色 氨酸残基、蛋氨酸残基、苏氨酸残基、缬氨酸残基、赖氨酸残基、组氨酸残基、亮氨酸残基、异 亮氨酸残基、丙氨酸残基、苯丙氨酸残基、胱氨酸残基、半胱氨酸残基、精氨酸残基、甘氨酸 残基、丝氨酸残基、酪氨酸残基、谷氨酸残基、天门冬氨酸残基。
3.根据权利要求1所述的呋喃并吲哚类化合物，其特征在于，所述苯甲酸类似物包含 对苯甲酸残基、间苯甲酸残基、间羟基苯甲酸残基、邻羟基苯甲酸残基、对羟基苯甲酸残基， 具有结构式(2)，
4.根据权利要求1所述的呋喃并吲哚类化合物，其特征在于，所述苯基甘氨酸类似物 包含苯基甘氨酸残基、对羟基苯甘氨酸残基和间羟基苯甘氨酸残基，每个残基又分S构型 和R构型，具有结构式(3)，
5.根据权利要求1所述的呋喃并吲哚类化合物，其特征在于，所述二聚体类似物的R结 构具有结构式(4)，
6.一种如权利要求1所述的呋喃并吲哚类化合物的制备方法，其特征在于，分离 的海洋微生物斜面菌株TO216，所述菌株TO216分离自舟山群岛海域，属于小单胞菌属 (Micromonospora sp.)，经种子培养、发酵培养、甲醇提取、HPLC分离(即高效液相色谱分 离)、冷冻干燥步骤而得到具有溶血栓促进作用的化合物。
7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述种子培养步骤接种斜面菌株 FG216的种子培养基是改良的查氏培养基，该培养基每IOOOml人工海水中含有蔗糖50g、 硝酸钠3g、磷酸氢二钾0. lg、硫酸镁0. 5g、氯化钾0. 5g、酵母提取物lg、氯化钴0. 0025g、 硫酸亚铁0. 015g、氯化钙0. 0065g，pH 5. 8经灭菌后使用。每IOOOml人工海水含有氯化钠 24. 72g、氯化钾0. 67g、氯化钙1. 36g、氯化镁4. 66g、硫酸镁6. 29g、碳酸氢钠0. 18 g。
8.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述发酵培养步骤上述TO216种 子培养液按照1-5%的接种量分别接种于含有改良的查氏培养基的三角瓶，在25-30°C、 180-240r · miiT1的恒温摇床上培养4天后，添加培养基体积1 %重量的赖氨酸或苯丙氨酸 或鸟氨酸，培养M小时后，完成发酵培养。
9.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述甲醇提取步骤培养结束后，三 角瓶中加入等体积的甲醇，超声5-15min，在转速IOOOOrpm条件下离心10-15min，弃除沉 淀，上清液40-60°C条件下减压蒸馏蒸干，浓缩物真空干燥8-12h，干固物溶于少量甲醇，过 滤弃除沉淀，收集上清液，再减压浓缩真空干燥，所得干固物既为含有溶血栓作用呋喃并吲 哚类化合物的微生物代谢产物提取物。
10.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述HPLC分离步骤上述的微生物 代谢产物提取物溶于甲醇，溶解后的溶液在流动相甲醇和0.05M乙酸铵(70-85 30-15)、 流速8-10ml/min、检测波长洸5歷的条件下被色谱柱kpax HP-C18柱Ql. 2mmX 250mm, 10 μ m)，分离出呋喃并吲哚类化合物。
11.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述冷冻干燥步骤分离化合物的 洗脱峰部分在50-60°C被旋转蒸发仪减压浓缩，经冷冻干燥后得到纯化的促进微血栓溶解 的呋喃并吲哚类化合物。
12.—种如权利要求1所述的呋喃并吲哚类化合物的应用，其特征在于，所述呋喃并吲 哚类化合物在制备治疗和/或预防缺血性疾病的药物中的应用。
13.根据权利要求12所述的应用，其特征在于，所述呋喃并吲哚类化合物制备临床治 疗微血栓、急性血栓症状的肺血栓、脑血栓和心肌梗塞等血栓性疾病的溶血栓制剂。
14.根据权利要求12所述的应用，其特征在于，所述呋喃并吲哚类化合物制作成溶液型。
15.根据权利要求12所述的应用，其特征在于，所述呋喃并吲哚类化合物制作成固体 分散型。
全文摘要
一种呋喃并吲哚类化合物及其制备方法和其作为溶血栓治疗药物的用途。该化合物通过分离的海洋微生物斜面菌株FG216经种子培养、发酵培养、甲醇提取、HPLC分离、冷冻干燥而得到。该化合物的溶解微血栓作用在分子水平反应体系、in vitro反应体系体现出来。该化合物是通过纤溶疗法用于治疗和/或预防微血栓性疾病，没有急性毒性作用，可以做成固体片剂和液体制剂。作为溶血栓制剂能临床治疗慢性血栓、急性血栓症状的肺血栓、脑血栓和心肌梗塞等血栓性疾病，以及作为链激酶、尿激酶、瑞替普酶的协同或辅助治疗药物。
文档编号A61P9/10GK102115478SQ20101017422
公开日2011年7月6日 申请日期2010年5月14日 优先权日2010年5月14日
发明者包斌, 吴文惠, 张文俊, 汪珈慧, 王幸, 瞿佳华, 郝斐, 陈志华 申请人:上海海洋大学
技术领域：
本发明涉及一种呋喃并吲哚类化合物，该化合物是溶解微血栓的海洋微生物的代 谢产物，还涉及呋喃并吲哚类化合物的制备方法，和该化合物对治疗和/或预防各种缺血 性疾病的用途，该化合物作为溶血栓治疗药物。
背景技术：
血栓病是人类的常见多发病，心脑血管疾病中有很大比例是血栓病，溶栓疗法是 治疗血栓性疾病的重要方法之一。一直以来，溶血栓药物都被作为心肌梗塞、脑栓塞、肺血 栓等重笃血栓症急性期的治疗药物，其治疗目的主要是溶解血管内血栓和改善血液循环， 溶血栓药是治疗血栓性疾病的关键药物。早期的溶血栓药为链激酶(Strepto kinase, SK)、尿激酶⑴rokinase，UK)、蚓激酶(Lumbrukinase)、尿激酶原(Pro-urokinase)、葡激酶 (Staphylokinase)、甲氧苯甲酰纤溶酶原-链激酶激活剂复合物(Anisoylatedplasminoge n-streptokinase activator complex, APSAC))、蛇毒抗栓酶(Fibrinoenase from snake venom)，最近使用的溶血栓药为阿替普酶(Alteplase)、瑞替普酶(Ret印Iase)等。围绕着血栓疾病的治疗既纤溶作用，在临床上使用的溶血栓药物会带来出血的重 大危险性，由于上述药物的安全问题，自20世纪90年代开始，一些研究者开始探索用组织 型纤溶酶原激活剂变异体(如TNKase、Monteplase, La noteplase)、脂质化合物用于血栓 疾病的治疗。研究发现，相比组织型纤溶酶原激活剂分子量小的活性化血液蛋白质C具有 抗凝血作用和促进纤溶作用；血小板膜特异性糖蛋白的抑制药物阿昔单抗作为小分子量的 短肽抗凝血药物已经用于临床；血液凝固因子叙的低分子抑制化合物作为药物正处于开 发阶段。但已经用于临床或正在试验阶段的抗凝血药物除了都有程度不同的出血危险性以 外，阿昔单抗的使用已经带来了像阿司匹林投与后的血小板减少的副作用。因此，在这一 治疗领域正急待着出血危险性小、不损伤血液因子、活性能够简单调控的低分子化合物作 为血栓疾病治疗药物的出现。
发明内容
本发明要解决的问题是为采用纤溶疗法进行血栓疾病的治疗和/或预防提供效 果明显、不存在出血危险性的临床药物。为了在血栓疾病治疗领域发现出血危险性小、不损伤血液因子、活性能够简单调 控的低分子化合物的药物，发明人从海洋和陆地的微生物、动植物的代谢产物进行了筛 选和广泛而深入的研究，结果发现用化合物(1)呋喃并吲哚类化合物(furan-p-indole compounds, FPIC)，该化合物是溶解微血栓的海洋微生物的代谢产物，该化合物作为溶血栓 药即能为微血栓疾病的治疗和/或预防提供效果明显、不存在出血危险性的临床药物，从 而完成本发明。本发明所需要解决的技术问题，可以通过以下技术方案来实现作为本发明的第一方面，一种呋喃并吲哚类化合物，其特征在于，所述化合物具有
权利要求
1.一种呋喃并吲哚类化合物，其特征在于，所述化合物具有结构式(1)，
2.根据权利要求1所述的呋喃并吲哚类化合物，其特征在于，所述氨基酸残基包括色 氨酸残基、蛋氨酸残基、苏氨酸残基、缬氨酸残基、赖氨酸残基、组氨酸残基、亮氨酸残基、异 亮氨酸残基、丙氨酸残基、苯丙氨酸残基、胱氨酸残基、半胱氨酸残基、精氨酸残基、甘氨酸 残基、丝氨酸残基、酪氨酸残基、谷氨酸残基、天门冬氨酸残基。
3.根据权利要求1所述的呋喃并吲哚类化合物，其特征在于，所述苯甲酸类似物包含 对苯甲酸残基、间苯甲酸残基、间羟基苯甲酸残基、邻羟基苯甲酸残基、对羟基苯甲酸残基， 具有结构式(2)，
4.根据权利要求1所述的呋喃并吲哚类化合物，其特征在于，所述苯基甘氨酸类似物 包含苯基甘氨酸残基、对羟基苯甘氨酸残基和间羟基苯甘氨酸残基，每个残基又分S构型 和R构型，具有结构式(3)，
5.根据权利要求1所述的呋喃并吲哚类化合物，其特征在于，所述二聚体类似物的R结 构具有结构式(4)，
6.一种如权利要求1所述的呋喃并吲哚类化合物的制备方法，其特征在于，分离 的海洋微生物斜面菌株TO216，所述菌株TO216分离自舟山群岛海域，属于小单胞菌属 (Micromonospora sp.)，经种子培养、发酵培养、甲醇提取、HPLC分离(即高效液相色谱分 离)、冷冻干燥步骤而得到具有溶血栓促进作用的化合物。
7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述种子培养步骤接种斜面菌株 FG216的种子培养基是改良的查氏培养基，该培养基每IOOOml人工海水中含有蔗糖50g、 硝酸钠3g、磷酸氢二钾0. lg、硫酸镁0. 5g、氯化钾0. 5g、酵母提取物lg、氯化钴0. 0025g、 硫酸亚铁0. 015g、氯化钙0. 0065g，pH 5. 8经灭菌后使用。每IOOOml人工海水含有氯化钠 24. 72g、氯化钾0. 67g、氯化钙1. 36g、氯化镁4. 66g、硫酸镁6. 29g、碳酸氢钠0. 18 g。
8.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述发酵培养步骤上述TO216种 子培养液按照1-5%的接种量分别接种于含有改良的查氏培养基的三角瓶，在25-30°C、 180-240r · miiT1的恒温摇床上培养4天后，添加培养基体积1 %重量的赖氨酸或苯丙氨酸 或鸟氨酸，培养M小时后，完成发酵培养。
9.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述甲醇提取步骤培养结束后，三 角瓶中加入等体积的甲醇，超声5-15min，在转速IOOOOrpm条件下离心10-15min，弃除沉 淀，上清液40-60°C条件下减压蒸馏蒸干，浓缩物真空干燥8-12h，干固物溶于少量甲醇，过 滤弃除沉淀，收集上清液，再减压浓缩真空干燥，所得干固物既为含有溶血栓作用呋喃并吲 哚类化合物的微生物代谢产物提取物。
10.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述HPLC分离步骤上述的微生物 代谢产物提取物溶于甲醇，溶解后的溶液在流动相甲醇和0.05M乙酸铵(70-85 30-15)、 流速8-10ml/min、检测波长洸5歷的条件下被色谱柱kpax HP-C18柱Ql. 2mmX 250mm, 10 μ m)，分离出呋喃并吲哚类化合物。
11.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述冷冻干燥步骤分离化合物的 洗脱峰部分在50-60°C被旋转蒸发仪减压浓缩，经冷冻干燥后得到纯化的促进微血栓溶解 的呋喃并吲哚类化合物。
12.—种如权利要求1所述的呋喃并吲哚类化合物的应用，其特征在于，所述呋喃并吲 哚类化合物在制备治疗和/或预防缺血性疾病的药物中的应用。
13.根据权利要求12所述的应用，其特征在于，所述呋喃并吲哚类化合物制备临床治 疗微血栓、急性血栓症状的肺血栓、脑血栓和心肌梗塞等血栓性疾病的溶血栓制剂。
14.根据权利要求12所述的应用，其特征在于，所述呋喃并吲哚类化合物制作成溶液型。
15.根据权利要求12所述的应用，其特征在于，所述呋喃并吲哚类化合物制作成固体 分散型。
全文摘要
一种呋喃并吲哚类化合物及其制备方法和其作为溶血栓治疗药物的用途。该化合物通过分离的海洋微生物斜面菌株FG216经种子培养、发酵培养、甲醇提取、HPLC分离、冷冻干燥而得到。该化合物的溶解微血栓作用在分子水平反应体系、in vitro反应体系体现出来。该化合物是通过纤溶疗法用于治疗和/或预防微血栓性疾病，没有急性毒性作用，可以做成固体片剂和液体制剂。作为溶血栓制剂能临床治疗慢性血栓、急性血栓症状的肺血栓、脑血栓和心肌梗塞等血栓性疾病，以及作为链激酶、尿激酶、瑞替普酶的协同或辅助治疗药物。
文档编号A61P9/10GK102115478SQ20101017422
公开日2011年7月6日 申请日期2010年5月14日 优先权日2010年5月14日
发明者包斌, 吴文惠, 张文俊, 汪珈慧, 王幸, 瞿佳华, 郝斐, 陈志华 申请人:上海海洋大学
最新回复(0)