1-氮杂呫吨酮-3-甲酰胺类化合物及制备方法和抗肿瘤用途的制作方法
专利名称：1-氮杂呫吨酮-3-甲酰胺类化合物及制备方法和抗肿瘤用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及医药技术领域，更具体而言，本发明涉及一类1-氮杂咕吨酮-3-甲酰 胺类化合物，本发明还涉及该类化合物的制备方法及其在制备抗肿瘤药中的应用。
背景技术：
恶性肿瘤是严重威胁人类生命和生活质量的主要疾病之一。据2007年底卫生部 公布的数据，恶性肿瘤已经成为我国城乡居民的第一死因。近年来，肿瘤化疗取得了相当 大的进步，肿瘤患者生存时间明显延长，特别是对白血病、恶性淋巴瘤等的治疗有了较大突 破，但对危害人类生命健康最严重的、占恶性肿瘤90%以上的实体瘤(包括肺癌、肝癌、膀 胱癌及结肠癌等)的治疗依然未能达到满意效果。随着生命科学研究的飞速进展，肿瘤机制被逐步阐明，相继出现了抑制肿瘤生长 因子、干预肿瘤信号传导、抑制肿瘤血管生成以及诱导肿瘤细胞凋亡等新方向；但是，由于 恶性肿瘤的发病机制非常复杂，近年的临床实践表明它们只有和细胞毒药物联合应用才能 取得较好的临床疗效。因此，以肿瘤细胞中与分化增殖相关的关键酶作为药物筛选靶标，发 现选择性作用于特定靶点的高效、低毒、特异性强的新型抗癌药物具有重要意义。近年来拓扑异构酶I (Topl)已成为设计新型抗癌药物的关键靶酶之一。它是细 胞生存的必需酶，参与DNA复制、转录、重组、修复的全过程；而且多种肿瘤细胞中尤其是肺 癌、胃癌、结肠癌、卵巢癌等Topl的含量明显高于正常细胞。这些都使得Topl抑制剂类药 物不仅疗效高、抗瘤谱广，而且对肿瘤细胞还具有很好的选择性，现已被美国国家癌症研究 所列为重点研究的六大类抗肿瘤药物之一。在各类Topl抑制剂中，喜树碱(CPT)类衍生物研究最为深入，也是最经典的Topl 特异性的抑制剂。该类化合物中，伊诺替康(CPT-Il)和拓扑替康已成功上市，被用于转移 性的结直肠癌和顽固性的卵巢癌等的治疗，取得了良好的疗效。然而，该类化合物还存在 如下突出问题1)体内代谢不稳定，活性必需的E环内酯结构在人体内过快地水解成羧酸 盐形式，羧酸盐形式不仅对Topl无效，而且更易与人血清白蛋白结合；2) Topl切割复合物 (Toplcc)需要维持一定长的时间才能转化为DNA损伤，然而喜树碱易于从Toplcc解离，因 此临床上使用喜树碱类药物时必须延长静滴时间；3)水溶性差，喜树碱独特的五环共轭 平面结构具有较强的疏水性，导致其水溶性较差；4)喜树碱类药物存在一定的毒副作用， 比如自细胞减少、恶心、呕吐等，限制了安全剂量并进而限制了药物疗效；5)耐药性，现在 已有数个Topl的喜树碱耐受突变株报道，最常见的有ASn722，Arg364等的突变均可导致喜 树碱耐药性的产生。非喜树碱类Topl抑制剂已经成为近年来抗癌药研究热点。Indolocarbazole类 化合物是目前研究较为深入的一类，该类化合物中的J-107088 (Edotecarin)已进入临床 研究，然而有研究表明该类化合物并不是Topl特异性的抑制剂，还有抑制蛋白激酶C或检 查点激酶Chk-I的活性。此外，LuotonineAlamellarinD也是近年来从自然界分离得到的
Topl抑制剂，但它们大都存在结构复杂、特异性差、毒副作用较大等问题，目前临床广为使 用的仍然只有喜树碱类抗肿瘤药物。为了发现全新结构类型的Topl抑制剂，我们前期开展了 Topl抑制剂的虚拟高通 量筛选研究，成功地发现了数个类药性好、无潜在致癌性的先导化合物。基于活性、新颖性 并结合分子图形学考察，我们最终选定购买得到部分化合物进行抑酶和细胞毒活性测试， 结果表明我们首次发现1-氮杂咕吨酮-3-甲酰胺类化合物具有很强的抑制Topl的活性， 显著优于上市药物拓扑替康，细胞毒活性测试结果表明对数种肿瘤细胞显示了一定的抗肿 瘤活性。分子对接研究表明该类先导化合物可以与我们前期识别发现的Topo I靶酶的关 键活性位点残基Arg364形成两个氢键作用，侧链上的酰胺基团可以与靶酶上DNA切割位点 下游+1位的胞嘧啶形成选择性的作用，这使得该类化合物与已有的Topl抑制剂相比具有 更大优势，可望很好地克服现有抗肿瘤药物的耐药性问题。需要说明的，虽然个别该类化合物化合物已经可以购买得到，但是文献里面没有 公布该类化合物的理化性质、制备方法，更没有该类化合物可以用于抗肿瘤的报道。因此， 我们首次发现的1-氮杂咕吨酮-3-甲酰胺类化合物代表了一类全新结构的抗肿瘤活性化 合物。
发明内容
本发明目的是为了提供一类1-氮杂咕吨酮-3-甲酰胺类化合物，或其药学上可接 受的盐。本发明同时公开了该类化合物的制备方法、医疗用途和组合物。本发明根据我们前期虚拟高通量筛选得到的先导物结构，进一步设计、合成了该 类化合物的衍生物，对多种肿瘤细胞的活性测试表明，该类化合物具有一定的抗肿瘤活性， 特别值得指出的是，该类化合物对转移性的乳腺癌细胞显示了良好的选择性毒性，为开发 为高效、低毒、特异性强的抗肿瘤药物奠定了基础。本发明的1-氮杂咕吨酮-3-甲酰胺类化合物结构如通式(I )所示或其药学上可接受的盐，其中，R1的取代位置可位于6至9位，可以是单、双或多取 代，R1为下列基团中的任一类a)氢；b)Cl-8的直链或支链烷氧基；c)Cl-8的直链或支链 烷基；d)卤素；m)亚甲二氧基；R2, R3独立地表示下列基团氢、C1-8的直链或支链的烷基、取代或未取代的芳基 亚甲基，所述的取代为氢、卤素、C1-8的直链或支链的烷基、C1-8的直链或支链的烷氧基、 硝基、氨基、羟基；或R2、R3 一起形成由3到7个CH2单元连接组成的链；R4为氢、C1-8的直链或支链烷基。本发明的进一步较佳实施例中，上述的1-氮杂咕吨酮-3-甲酰胺类化合物，当R1 为单取代且7位为氟、氯时，R2和R3的组合不能为二乙基、叔丁基、苄基、对氯苄基；当R1为单取代且7位为氢时，R2和R3的组合不能为苄基、对氯苄基；当R1为单取代且7位为甲基 时，R2和R3的组合不能为叔丁基、苄基、对氯苄基。更进一步地，上述的1-氮杂咕吨酮-3-甲酰胺类化合物，R1取代为单取代，优选为 7位单取代。本发明的一较佳实施例中，上述的1-氮杂咕吨酮-3-甲酰胺类化合物，&和民 的组合为取代或未取代的芳基亚甲基，所述的取代为氢、卤素、C1-8的直链或支链的烷基、 C1-8的直链或支链的烷氧基、硝基、氨基、羟基；或R2、R3 —起形成由3到7个CH2单元连接 组成的链。所述的芳基亚甲基，优选为苄基，更进一步芳基亚甲基上的取代优选为氢或卤 本发明的一较佳实施例中，所述的1-氮杂咕吨酮-3-甲酰胺类化合物，R4优选为甲基。本发明所述的芳基是芳香烃分子中去掉一个氢原子后所剩下的原子团称为芳基。 芳香烃是一类具有芳香性的化合物，其化学性质稳定，不易加成，不易氧化，容易取代和碳 环异常稳定的特性，不同于一般的饱和化合物的性质，包括1)单环芳烃，分子中只含有一 个苯环，如苯、甲苯、乙苯、苯乙烯等；2)多环芳烃，分子中含有2个或2个以上的苯环，如 联苯、萘、蒽、菲等；3)非苯芳烃，分子中不含苯环，但含有结构及性质与苯环相似的芳烃， 并具有芳香族化合物的特性，如环戊二烯负离子等。所述的取代芳基是指芳基上的氢原子被其它取代基所取代得到的基团。在本发明的实施例中，所述的1-氮杂咕吨酮-3-甲酰胺类化合物，各取代基团组 合包含并不限于下表 本发明的另一目的是提供了上述1-氮杂咕吨酮-3-甲酰胺类的制备方法，包括下
列步骤
IVν(1)制备3-氰基-4-苯并吡喃酮(II )先将DMF和三氯氧磷在0°C反应半小时，再加入取代的羟基苯乙酮(I )，室温搅 拌反应4h后再加入盐酸羟胺继续反应6h，生成3-氰基-4-苯并吡喃酮(II )；(2)制备5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_3_羧酸乙酯(III)将3-氰基-4-苯并吡喃酮(II )、乙酰乙酸乙酯和哌啶在乙醇中回流，生成 5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2,3-b]吡啶-3-羧酸乙酯(III)；(3)制备5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_3_羧酸(IV )将5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3-b]吡啶 _3_ 羧酸乙酯(III)在 50% H2S04_Ac0H 混合酸中回流，生成2-甲基-5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3-b]吡啶-3-羧酸(IV )；(4)制备5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3-b]吡啶_3_甲酰胺(V )将5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_3_羧酸(IV)溶于DMF中，在0°C下 分别加入DCC和HOBt的二氯甲烷溶液，搅拌数分钟后加入胺，室温搅拌反应24h，生成 5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3-b]吡啶-3-甲酰胺(V )。本发明的某些1-氮杂咕吨酮-3-甲酰胺类化合物可按照常规方法制备为其药学 接受的盐的形式。包括其无机酸盐和有机酸盐无机酸包括(但不限于)盐酸、硫酸、磷酸、 二磷酸、氢溴酸、硝酸等；有机酸包括(但不限于)乙酸、马来酸、富马酸、酒石酸、琥珀酸、乳 酸、对甲苯磺酸、水杨酸、草酸等。本发明的化合物具有良好的抗肿瘤活性，它们可以用于治疗肿瘤，包括食道、胃、 肠、直肠、口腔、咽、喉、肺、结肠、乳腺、子宫、子宫内膜、卵巢、前列腺、睾丸、膀胱、肾、肝、胰 腺、骨、结缔组织、皮肤、眼、脑和中枢神经系统等部位发生的癌症，以及甲状腺癌、白血病、 霍杰金式病、淋巴瘤和骨髓瘤等。优选地，所治疗的肿瘤为乳腺癌，更优选地，为转移性的乳 腺癌。本发明的1-氮杂咕吨酮-3-甲酰胺类化合物的药理活性使其可以用于制备抗肿 瘤、抗真菌及抗病毒药物，因此本发明还包括以这些化合物或其药学可接受的盐作为活性 成分的药物组合物，该药物组合物中还含有药学上接受的载体，可以是固体形式或是液体 形式，所述的药物剂型可以是片剂、胶囊、粉末剂、颗粒剂、混悬剂、或注射剂。
具体实施例方式下面结合实施例对本发明做具体描述，但下列实施例不应看作是对本发明范围的 限制。实施例1 :3_氰基-4-苯并吡喃酮(II )的制备
在园底烧瓶中加入DMF(20mL)和POCl3 (12mL，0125mol)，在0°C下搅拌反应0. 5h。 于0°C下加入邻羟基苯乙酮(4. 25g，0.031mol)，室温反应4h。反应结束后加CH2Cl245mL稀 释，冷至0°C，再加入盐酸羟胺的DMF溶液(6. 5g H2NOH · HCl溶于20mL DMF中)，室温搅拌 反应24h。反应结束后加水35mL稀释，用二氯甲烷提取(3X25mL)，有机层再依次用10% NaHCO3溶液和饱和氯化钠溶液洗涤。无水Na2SO4干燥，过滤，滤液蒸干，得黄色固体。甲醇 重结晶，得无色针状晶3. 2g，收率60. 4。1H-WrGOOMHz, CDCl3) δ 7. 53 (1Η, t，6-Η)，7. 55 (1Η，d，8-H)，7. 78 (1H，t，7_H)， 8. 25 (1H, d,5-H) ,8. 40 (1H, s，2_H) ；ESI-MS (m/z) 210 (M++H+Na) ；IR(KBr) cm-1 -.2241,1662 ； m. p. 176-178°C (lit. 177_178°C )。实施例2 2-甲基-5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_3_羧酸乙酯(III)的 制备取3-氰基-4-苯并吡喃酮(II ) (3. 42g，0. 02mol)、乙酰乙酸乙酯(2. 60g， 0. 02mol)和哌啶4mL，在80mL乙醇中回流。反应结束后停止回流，冷却，加水250mL稀释， 过滤析出的固体，水洗至中性，抽干，得红色粗品。在硅胶色谱柱上纯化(洗脱剂石油醚 乙酸乙酯=20 1)，得白色晶体2. 65g，收率46.8%。1H-NMR(300MHz, CDCl3) δ 1. 45 (3Η, t，2，-CH3)，2· 91 (3H，s，2_CH3)，4· 42 (2Η，q, 1，-CH2-)，7. 52 (1H, t, 7-H)，7. 65 (1H, d, 9-H)，7. 85 (1H, t，8-H)，8. 28 (1H, d, 6-H)，9. 16 (1H, s，4-H)。ESI-MS(m/z) :282 (M++Na_K) ；IR(KBr) cnT1 :1715，1655 ;m. p. 151_152°C实施例3 2-甲基-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_3_羧酸(IV )的制备将2-甲基-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_3_羧酸乙酯(III ) (1. 5g, 0. 0053mol)加入 50 % H2SO4-AcOHd 2)混合酸 27mL，130 °C 回流搅拌 3h。将反应 液倒入200mL水中，析出固体，过滤，水洗，抽干得到灰白色固体，用DMF-H2O重结晶 得白色固体 1. 21g,收率 91.3 V0o 1H-NMR (300MHz, d6_DMS0) δ 2. 85 (3Η, s，2_CH3)，
7.51(1H, t, 7-H)，7. 71 (1H, d, 9-H)，7. 90 (1H, t，8_H)，8. 15 (1H, d, 6-H)，8. 90 (1H, s，4_H)， 13. 56 (1H, br, -C00H)。ESI-MS (m/z) :256(M+H+) ； IR (KBr) cnT1 :3103，3066，1732，1644 ; m. p. 290-295 °C。实施例4 2-甲基-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_3_苄酰胺(V )的制 备将2-甲基-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶 _3_ 羧酸(IV) (lg，0.004mOl)溶 于20mL DMF中，冰水冷却至0°C。另称取DCC(0. 87g，0. 0042mol)和H0Bt(0. 57g，0. 0042mol) 分别溶于50mLCH2Cl2中，在0°C下依次加入反应液中，搅拌。于0°C下加入苄胺(0. 5mL， 0. 004mol)，室温搅拌过夜。反应液依次用5%柠檬酸、饱和NaHCO3和水洗涤，有机层用无水 Na2SO4干燥，过滤，浓缩至干。用乙醇重结晶，得白色晶体0. 72g，收率53. 1 %。1H-NMR (300MHz, CDCl3) δ 2. 85 (3Η, s，2_CH3)，4. 70 (2Η，d，2，-CH2-) ,6. 50 (1H, br, -NH-)，7· 34 7· 46 (6Η, m，3， 一O 禾口 7_H), 7· 64 (1Η, d，9_H)，7· 80 (1Η, t，8_H)，
8.24 (1Η, d，6-H)，8· 65(1Η，s，4_H)。ESI-MS (m/z) :345 (M+H+)，711 (2M+Na+) ；IR(KBr) cm-1 3270，1673，1638 ；m. p.215_216°C其余的目标化合物分别以不同基团取代的邻羟基苯乙酮和不同的胺为原料，重复 实施例1、2、3、4中的步骤，得到不同的2-甲基-5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_3_酰胺类化合物。实施例中所用试剂均为市售分析纯。本发明部分已合成的化合物的化学结构和表征数据如下。
2-甲基-5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶-N-甲基_3_酰胺2-methyl-5-oxo-5H-[1]benzopyrano[2,3~b]pyridine-N-methyl-3-amide 1H NMR(300MHz, CDCl3) δ 2. 83 (3Η, s,2-CH3) ,3. 09 (3Η, d,2' -CH3) ,6. 21 (1H, br, -NH-)，7. 45 (1H, t, 7_H)，7. 60 (1H, d, 9_H)，7. 80 (1H, t，8_H)，8. 25 (1H, d, 6_H)，8. 62 (1H, s，4-H) ；ESI-MS (m/z) :269(M+H+) ；IR(KBr) cnT1 :3275，1673，1642 ；m. p. 277_278°C2-甲基-5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_乙基_3_酰胺2-methyl-5-oxo-5H-[1]benzopyrano[2,3~b]pyridine-N-ethyl-3-amide IH NMR(300MHz, CDC13) δ :1. 32 (3H, t，3，-CH3)，2. 84 (3H，s，2_CH3)，3. 55 (2H， m，2，-CH2)，6. 05 (1H, br, -NH-)，7. 46 (1H, t，7_H)，7. 63 (1H, d，9_H)，7. 82 (1H, t，8_H)， 8. 30 (1H, d，6-H)，8· 65(1H，s，4_H). ESI—MS (m/z) :283(M+H+) ； IR (KBr) cnf1 :3274，1670， 1637 ；m. p. 252-254V2-甲基-5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_正丙基_3_酰胺2-methyl-5-oxo-5H-[1]benzopyrano[2,3~b]pyridine-N-n-propyl-3-amide IH NMR (300MHz, CDC13) δ 1. 04 (3H, t，4，-CH3)，1. 68 (2H，m，3，-CH2)，2. 80 (3H， s，2-CH3)，3. 48 (2H, m，2，-CH2)，6. 22 (1H, br, -NH-)，7. 48 (1H, t，7_H)，7. 61 (1H, d，9_H)， 7. 81(1H, t，8-H)，8. 25 (1H, d，6_H)，8. 61(1H，s，4_H) · ESI-MS(m/z) 295(M-H+) ； IR(KBr) cm-1 :3281,1671，1634 ；m.p.211_212°C2-甲基-5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_异丙基_3_酰胺2-methyl-5-oxo-5H-[1]benzopyrano[2，3-b]pyridine-N-isopropyl-3-amide 1H 匪R(300MHz，CDCl3) δ 1· 29 (6Η，dd，3，-CH3X 2)，2· 84 (3Η，s，2_CH3)，4· 33 (1Η， m，2，-CH), 5. 85 (1H, br, -NH-)，7· 47 (1Η，t，7_H)，7· 64 (1H，d，9_H)，7· 82 (1H, t，8_H)， 8. 32 (1H, d，6-H)，8· 63(1H，s，4_H) ；ESI-MS (m/z) :297(M+H+) ；IR(KBr) cm-1 :3274,1671, 1636 ；m. p. 240-2410C2-甲基-5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_正丁基_3_酰胺2-methyl-5-oxo-5H-[1]benzopyrano[2,3~b]pyridine-N-n-butyl-3-amide 1H NMR(300MHz, CDCl3) δ 1. 01 (3H, t，5，-CH3)，1. 48 (2H，m，4，-CH2-)，1. 66 (2H， m，3，-CH2-)，2. 83 (3H, s，2_CH3)，3. 52 (2H, q，2，-CH2-) ,6. 10 (1H，br, -NH-), 7. 46 (1H, t, 7-H)，7. 63 (1H, d, 9_H)，7. 81 (1H, t，8_H)，8. 28 (1H, d, 6_H)，8. 63 (1H, s，4_H) ； ESI-MS (m/z) 311(M+H+) ； IR (KBr)cnT1 :3285，1671，1634 ；m. p. 193-195°C2-甲基-5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_苄基_3_酰胺2-methyl-5-oxo-5H-[1]benzopyrano[2，3~b]pyridine-N-benzyl-3-amide 1H NMR (300MHz, CDCl3) δ 2. 85 (3H, s，2_CH3)，4. 70 (2H，d，2，-CH2-) ,6. 50 (1H, br, -NH-)，7. 34 7. 46 (6H, m, Ar-H)，7. 64 (1H, d, 9_H)，7. 80 (1H, t，8_H)，8. 24 (1H, d, 6_H)， 8. 65 (1H, s，4-H) ；ESI-MS (m/z) :345 (M+H)+，711 (2M+Na)+; IR (KBr) cnf1 :3270，1673，1638. m. p. 215-216°C2-甲基-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_ (4_氯苄基)_3_酰胺2-methyl-5-oxo-5H-[1]benzopyrano[2，3_b]pyridine-N-(4-chlorobenzyl)_3_ amide 1H-NMR (300MHz, CDCl3) δ 2. 84 (3H, s，2_CH3)，4. 65 (2H，d，2，-CH2-) ,6. 49 (1H, br, -NH-) , 7. 34 (4H, m, Ar-H) ,7. 45 (1H, t，7_H)，7. 61 (1H, d，9_H)，7. 80 (1H, t，8_H)， 8. 24(1H, d,6-H) ,8. 64(1H, s，4_H) ；ESI-MS (m/z) :379 (M+H)+，779 (2M+Na)+;IR(KBr) cnT1 : 3308，1672，1637 ；m. p.240-241°C2-甲基-5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_3_哌啶基酰胺2-methyl-5-oxo-5H-[1]benzopyrano[2,3~b]pyridine-3-piperidyl amide 1H NMR(300MHz, CDCl3) δ 1. 55 (2Η, m，4，-CH2-)，1. 73 (4H, m，3，，5，-CH2-X 2)， 2. 71 (3H, s, 2-CH3)，3. 26 (2H, t，6，-CH2-)，3. 81 (2H, t，2，-CH2-)，7. 46 (1H, t, 7_H) 7. 62 (1H, d，9-H)，7· 81 (1H，t，8_H)，8· 32 (1H，d，6_H)，8. 50 (1H，s，4_H) ； ESI-MS (m/z) :323(M+H)+; IR(KBr)CnT1 :1651，1635 ；m. p. 194_195°C2-甲基-5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_3_吡咯基酰胺2-methyl-5-oxo-5H-[1]benzopyrano[2,3-b]pyridine-3-pyrrolidinyl amide 1H NMR(300MHz, CDCl3) δ 1. 99 (4H, m，3，，4，-CH2-X 2) , 2. 72 (3H, s，2_CH3)， 3. 28 (2H, t，2，-CH2-) , 3. 72 (2H, t，5，-CH2-) , 7. 48 (1H, t，7_H) , 7. 62 (1H, d，9_H)， 7. 80 (1H, t，8-H)，8. 30 (1H, d，6_H)，8. 56 (1H, s，4_H) ；ESI-MS (m/z) :309 (M+H+)，348 (M+K)+， 639 (2M+Na+) ；IR(KBr) cm-1 :1664,1629 ；m. p. 159_160°C2-甲基-7-甲基-5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶-N-甲基_3_酰胺2-methyl-7-methyl-5-oxo-5H - [ 1] benzopyrano [2, 3 - b ] pyridine-N-methyl-3-amide 1H NMR (300MHz, CDCl3) δ 2. 50 (3Η, s，7_CH3)，2· 84 (3Η，s,2-CH3) ,3. 08 (3Η, d，2，-CH3) ,6. 11 (1H, br, -NH-) , 7. 52 (1H, d，9_H) , 7. 60 (1H, d，8_H) ,8. 07 (1H, s, 6-H) ,8. 65 (1H, s，4-H) ；ESI-MS (m/z) 283 (M+H)+ ；IR(KBr)CnT1 :3277，1664，1643 ； m. p. 279-2810C .2-甲基-7-甲基-5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶-N-乙基_3_酰胺2-methyl-7-methyl-5-oxo-5H - [ 1] benzopyrano [2, 3 - b ] pyridine-N-ethyl-3-amide 1H-MR (300MHz, CDCl3) δ 1. 32 (3Η, t, CH3)，2· 50 (3Η，s, CH3)，2· 83 (3H，s, CH3), 3. 55 (2Η, q, CH2), 6. 04 (1Η, br, NH) ,7. 52 (1Η, d, Ar-H) ,7. 61 (1Η, d, Ar-H) ,8. 08 (1Η, s, Ar-H) ,8. 64 (1Η, s，4_H) ；ESI-MS (m/z) 297. 46 (M+H)+ ；IR (KBr) cm_13274, 1672, 1637 ； m. ρ· 258-260 °C2-甲基-7-甲基-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_正丙基_3_酰胺2-methyl-7-methyl-5-oxo-5H - [ 1] benzopyrano [2, 3 - b ]
1H NMR (300MHz, CDCl3) δ 1. 05 (3Η, t，4，-CH3)，1· 71 (2H，m，3，-CH2)，2· 50 (3H， s，7-CH3)，2· 82(3Η，s,2-CH3) ,3. 49 (2Η, m，2，-CH2), 6. 11 (1Η, br, -ΝΗ-)，7· 51 (1Η，d，9_H)， 7. 61 (1H, d，8-H)，8· 07(1H，s，6_H)，8. 63 (1H，s，4_H) ；EI-MS (m/z) :351 (M+K+)，311 (M+H+)； IR(KBr)CnT1 :3284，1669，1635 ；m. p. 221-222V2-甲基-7-甲基-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_异丙基_3_酰胺2-methyl-7-methyl-5-oxo-5H - [ 1] benzopyrano [2, 3 - b ] pyridine-N-isopropyl-3-amide1H NMR (300MHz, CDCl3) δ 1. 33 (6Η, d，3，-CH3 X 2) ,2. 51 (3Η, s，7_CH3)，2· 83 (3Η， s，2-CH3)，4· 32(1H，m，2，-CH) ,5. 85 (1H, br, -NH-), 7. 52 (1H, d，9_H)，7. 61 (1H，d，8_H)， 8. 09 (1H, s，6-H)，8. 61 (1H，s, 4-H). ESI-MS (m/z) :311 (M+H+). IR (KBr) cnf1 :3298，1674， 1633. m. p. 254-256 °C .2-甲基-7-甲基-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_正丁基_3_酰胺2-methyl-7-methyl-5-oxo-5H - [ 1] benzopyrano [2, 3 - b ] pyridine-N-n-butyl-3-amide 1H NMR(300MHz, CDCl3) δ 1. 01 (3Η, t，5，-CH3)，1· 48 (2Η，m，4，-CH2-)，1· 69 (2H，m， 3'-CH2-) ,2. 49(3H，s，7-CH3)，2· 77 (3H，s，2_CH3)，3· 51 (2H，q，2，-CH2-)，6· 32 (1Η, br,-ΝΗ-)， 7. 48 (1Η, d，9-H)，7· 60(1Η，d，8_Η)，8. 01 (1Η，s，6_H)，8· 57 (1H，s, 4-H). ESI-MS (m/z) 365 (Μ+Ζ +Κ+) · IR(KBr)CnT1 :3298，1674，1633. m. p. 220-221 °C .2-甲基-7-甲基-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_苄基_3_酰胺2-methyl-7-methyl-5-oxo-5H - [ 1] benzopyrano [2, 3 - b ] pyridine-N-benzyl-3-amide 1H NMR (300MHz，CDCl3) δ 2. 47 (3Η, s，7_CH3)，2. 83 (3H, s，2_CH3)，4. 69 (2H, d, 2，-CH2)，6. 51 (1H, br, -NH-)，7. 32 7. 41 (5H, m, Ar-H)，7. 51 (1H, d, 9-H)，7. 61 (1H, d, 8-H)， 8. 01 (1H, s,6-H) ,8. 64 (1H, s, 4-H). ESI-MS (m/z) :739 (2M+Na+)，399 (M+K+)，359 (M+H+) ·IR(KBr)CnT1 :3270，1673，1633. m. ρ· 248-249°C .2-甲基-7-甲基-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_ (4_氯苄基)_3_酰胺2-methyl-7-methyl-5-oxo-5H-[1]benzopyrano[2，3_b]pyridine-N-(4-chlorob enzyl)-3-amide 1H NMR (300MHz，CDCl3) δ 2. 49 (3H, s，7_CH3)，2. 84 (3H, s，2_CH3)，4. 65 (2H, d, 2，-CH2)，6. 53 (1H, br, NH)，7. 35 (4H, d, Ar-H)，7. 51 (1H, d, 9-H)，7. 61 (1H, d, 8-H)，8. 01 (1H, s,6-H) ,8. 65 (1H, s,4-H). ESI-MS (m/z) :393 (M+H+). IR(KBr)CnT1 -.3277, 1671, 1635. m. p. 245-246 °C2-甲基-7-氯-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_正丙基_3_酰胺2-methyl-7-chloro-5-oxo-5H - [ 1] benzopyrano [2, 3 - b ] pyridine-N-n-propyl-3-amide 1H-NMR(300MHz, DMS0_d6) δ 0. 93(t,3H, CH3)，1. 56 (sext，2H，CH2)，2. 66 (s，3H， CH3)，3. 24 (m, 2H, CH2)，7. 77 (d, 1H, J = 9. OHz，Ar-H)，7. 94 (dd, IHjJ1 = 8. 7Hz，J2 = 2. 4Hz， Ar-H) ,8. 07 (s, 1Η, Ar-H) ,8. 46 (s, 1Η, Ar-H), 8. 71(br,lH, J = 5. 4Hz, NH). ESI-MS (m/z) 329. 63(M-H_). IR(KBr) cm-1 :3283，1635，1671 ；m. p. 256-258 °C2-甲基-7-氯-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_异丙基_3_酰胺2-methyl-7-chloro-5-oxo-5H - [ 1] benzopyrano [2, 3 - b ] pyridine-N-isopropyl-3-amide 1H NMR (300MHz, CDCl3) δ 1. 33 (6Η, d，2CH3)，2· 85 (3Η, s，2_CH3)，4· 32 (1Η, m, CH)， 5. 80(1Η, br, NH)，7. 60 (1H, d,9-H)，7. 76 (1H, d, 8-H)，8. 28 (1H, s，6-H)，8. 62 (1H, s，4_H). ESI-MS (m/z) :331(M+H+). IR(KBr) cm-1 :3282，1672，1637. m. p. 280-281 °C ·2-甲基-7-氯-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_正丁基_3_酰胺2-methyl-7-chloro-5-oxo-5H - [ 1] benzopyrano [2, 3 - b ] pyridine-N-n-butyl-3-amide 1H 匪R(300MHz，DMS0_d6) δ 0. 92 (t,3H, CH3)，1. 36 (m, 2H, CH2)，1. 51 (m, 2H, CH2)，2. 67(s，3H，CH3)，3. 27 (m, 2H, CH2)，7. 81 (d, 1H, J = 9. OHz, Ar-H), 8. 11 (d, 1H, J = 2. 4Hz, Ar-H), 8. 48 (s，1H, Ar-H) ,8. 70 (br, 1H, J = 5. 4Hz, NH). IR(KBr) cm-1 :3279，1698，1673. m. p. 242-244°C .2-甲基-7-氯-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_羟乙基_3_酰胺2-methyl-7-chloro-5-oxo-5H-[1]benzopyrano[2,3_b]pyridine-N-hydroxylet hyl-3-amide 1H NMR(300MHz, DMS0_d6) δ 1. 24(m,2H, CH2) ,2. 67(s,3H, CH3) ,3. 54(m,2H, J =5. 7Hz, CH2) ,4. 84 (t, 1H, J = 5. 7Hz，OH)，7. 81 (d，1H，J = 9. OHz, Ar-H), 7. 99 (dd, 1H, J1 = 9. OHz, J2 = 2. 7Hz，Ar-H)，8. ll(d，lH，J = 2. 7Hz, Ar-H) ,8. 56 (s, 1H, Ar-H), 8. 72 (br, 1H, J = 5. 4Hz, NH). ESI-MS (m/z) :333. 27 (M+H+) · IR(KBr) cnT1 :3274，1681，1636. m. p. 249-2510C .2-甲基-7-氯-5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶-N-苄基_3_酰胺2-methyl-7-chloro-5-oxo-5H - [ 1] benzopyrano [2, 3 - b ] pyridine-N-benzyl-3-amide 1H NMR(300MHz, DMS0_d6) δ 2. 68(s,3H, CH3) ,4. 45(d,2H, J = 5. 7Hz, CH2),
7.28 (dd, 1H, Jl = 8. 4Hz，J2 = 4. 2Hz，Ar-H)，7. 37 (d, 4H, J = 5. 2Hz，Ar-H)，7. 78 (d, 1H, J = 9. OHz，Ar-H)，7. 94 (dd, 1H, J1 = 9. OHz，J2 = 2. 7Hz，Ar-H)，8. 07 (d, 1H, J = 2. 7Hz，Ar-H)，
8.54 (s，1H, Ar-H), 9. 27 (t, 1H, J = 5. 7Hz, NH). ESI-MS (m/z) :377· 35 (M-H)IR(KBr) cm-1 3269，1675，1634. m. p. 268-270 °C .2-甲基-7-氯-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_ (4_氟苄基)_3_酰胺2-methyl-7-chloro-5-oxo-5H-[1]benzopyrano[2，3_b]pyridine-N-(4-flurobe nzyl)-3-amide 1H NMR(300MHz, DMS0_d6) δ 2. 68(s,3H, CH3) ,4. 48(d,2H, J2 = 6. OHz, CH2), 7. 16-7. 22 (m, 2H, Ar-H)，7. 39-7. 44 (m, 2H, Ar-H)，7. 80 (d, 1H, J = 9. OHz，Ar-H)，7. 96 (dd, 1H, J1 = 9. OHz，J2 = 2. 7Hz, Ar-H), 8. 10 (d, 1H, J = 2. 4Hz, Ar-H), 8. 56 (s, 1H, Ar-H)， 9. 25 (t, 1H, J = 6. OHz，NH). ESI-MS (m/z) :395. 62 (Μ-ΗΓ. IR(KBr) cnT1 :3270，1677，1635. m. p. 269°C (dec).2-甲基-7-氯-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_ (4_氯苄基)_3_酰胺
2-methyl-7-chloro-5-oxo-5H-[1]benzopyrano[2，3_b]pyridine-N-(4-chlorob enzyl)-3-amide 1H NMR(300MHz, CDCl3) δ 2. 86(s,3H, CH3) ,4. 64(d,2H, J = 5. 7Hz, CH2) ,6. 28 (br, 1H, NH)，7. 32-7. 39 (m, 4H, Ar-H)，7. 59 (d, 1H, J = 8. 7Hz，Ar-H)，7. 75 (dd, 1H, J1 = 9. OHz， J2 = 2. 4Hz, Ar-H) ,8. 25 (d, 1H, J = 2. 7Hz, Ar-H), 8. 65 (s, 1H, Ar-H). ESI-MS (m/z) 411. 64(M-H)IR(KBr)CnT1 3273,1674,1634. m. p. 248°C (dec).2-甲基-7-氯-5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶-N_(4_甲基苄基)_3_酰胺2-methyl-7-chloro-5-oxo-5H-[1]benzopyrano[2，3_b]pyridine-N-(4-methylb enzyl)-3-amide 1H NMR (300MHz, DMS0_d6) δ 2. 29(s,3H, CH3)，2. 68 (s，3H，CH3)，4. 44 (d，2H，J = 5. 7Hz, CH2)，7. 17 (d, 2H, J = 8. IHz, Ar-H)，7. 26 (d, 2H, J = 8. IHz, Ar-H)，7. 81 (d, 1H, J = 9. OHz，Ar-H)，7. 97 (dd, 1H, J1 = 9. OHz，J2 = 2. 7Hz，Ar-H)，8. 11 (d，1H，J = 2. 7Hz，Ar-H)， 8. 54 (s，1H, Ar-H), 9. 23 (br, 1H，NH). ESI-MS (m/z) 391. 74 (M-H) IR(KBr) cm-1 :3277，1675， 1635. m. p. 2610C (dec). 2-甲基-7-甲氧基-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_ (4_正丁基)_3_酰 胺 2-methyl-7-methoxy-5-oxo-5H - [1] benzopyrano [2, 3 - b ] pyridine-N-(4-n-butyl)-3-amide1H NMR(300MHz, CDCl3) δ 0. 92(t,3H, CH3)，1. 40 (m，2H，CH2)，1. 52 (m，2H，CH2), 2. 67 (s，3H, CH3)，3. 26 (m, 2H, CH2)，3. 95 (s, 3H, OCH3)，7. 10 (dd, 1H, J1 = 8. 7Hz, J2 = 2. 4Hz, Ar-H), 7. 26 (d, 1H, J = 2. 4Hz, Ar-H), 8. 09 (d, 1H, J = 9. OHz，Ar-H), 8. 45 (s, 1H, Ar-H)， 8. 68 (br, 1H, J = 5. 4Hz, NH). ESI-MS (m/z) :341. 66 (M+H)+· IR(KBr) cnT1 :3280，1694，1634. m. p. 248-250 °C ·2-甲基-7-甲氧基-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_苄基_3_酰胺2-methyl-7-methoxy-5-oxo-5H-[l]benzopyrano [2, 3 - b ] pyridine-N-(4-benzyl)-3-amide 1H NMR(300MHz, DMS0_d6) δ 2. 68(s,3H, CH3)，3· 94 (s，3H，OCH3) ,4. 50(d,2H, J = 5. 7Hz, CH2)，7. 09 (dd, 1H, J1 = 9. OHz，J2 = 2. 4Hz, Ar-H), 7. 24 (d, 1H, J = 2. 4Hz, Ar-H)，
7.28 (d, 1H, J = 4. 5Hz，Ar-H)，7. 37 (d, 4H, J = 4. 5Hz，Ar-H)，8. 08 (d, 1H, J = 9. OHz，Ar-H)，
8.53 (s，1H, Ar-H), 9. 23 (br, 1H，NH). ESI-MS (m/z) :373· 72 (M-H) IR(KBr) cm-1 :3270，1663， 1634. m. p. 268-270 °C . 2-甲基-7-甲氧基-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_ (4_氟苄基)_3_酰 胺 2-methyl-7-methoxy-5-oxo-5H-[l]benzopyrano[2，3_b]pyridine-N-(4-flurob enzyl)-3—amide 1H NMR(300MHz, DMS0_d6) δ 2. 67(s,3H, CH3)，3. 95 (s，3H，OCH3)，4. 47 (d，2H，J = 6. OHz, CH2)，7. 08-7. 26 (m, 4H, Ar-H)，7. 39-7. 43 (m, 2H, Ar-H)，8. 09 (d, 1H, J = 9. OHz, Ar-H), 8. 53 (s，lH，Ar_H)，9. 23 (br, 1Η，J = 6. 0Hz，NH). EI-MS (m/z) :393. 72(Μ+Η)+. IR(KBr) cnT1 :3292,1716，1662. m. ρ. 295-297°C · 2-甲基-7-甲氧基-5-氧-5Η_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_ (4_氯苄基)_3_酰 胺 2-methyl-7-methoxy-5-oxo-5H-[1]benzopyrano[2，3_b]pyridine-N-(4-chloro benzyl)-3—amide1H NMR(300MHz, DMS0_d6) δ 2. 67(s,3H, CH3)，3. 95 (s，3H，OCH3)，4. 48 (d，2H，J =
6.OHz，CH2)，7. 10 (dd, 1H, J1 = 9. OHz，J2 = 2. 4Hz, Ar-H)，7. 25 (d, 1H, J = 2. 4Hz, Ar-H)，
7.38-7. 45(m，4H，Ar-H)，8· 09 (d, 1H, J = 8. 7Hz，Ar_H)，8· 54 (s，lH，Ar_H)，9. 24 (br, 1H, J = 6. OHz, NH). ESI-MS (m/z) :407· 56Μ-ΗΓ. IR(KBr) cm-1 :3294，1716，1662. m. p. 270°C (dec).2-甲基-7-甲氧基-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶-N_(4_甲基苄基)_3_酰 胺2-methyl-7-methoxy-5-oxo-5H-[1]benzopyrano[2，3_b]pyridine-N-(4-methyl benzyl)-3—amide 1H NMR (300MHz，DMS0-d6) δ 2. 29 (s，3H，CH3)，2. 67 (s，3H，CH3)，3. 95 (s，3H，OCH3)， 4. 44(d，2H，J = 5. 7Hz, CH2), 7. 10 (dd, 1H, J1 = 9. OHz，J2 = 2. 4Hz, Ar-H), 7. 17(d，2H，J = 7. 8Ηζ，Ar-H)，7. 25 (d, 2H, J = 3. 9Hz，Ar-H)，7. 26 (d, 1H, J = 3. 9Hz，Ar-H)，8. 09 (d, 1H, J =9.0Hz，Ar-H) ,8. 50 (s, 1H, Ar-H), 9. 19 (br, 1H, NH). EI-MS (m/z) :389. 61 (M+H)+. IR(KBr) cnT1 3257,1662，1637. m. p. 275_277°C ·实施例5 本发明的化合物的细胞毒作用(一)实验材料和方法1.实验材料(一)实验菌株本实验采用了 3种人癌细胞株作为筛选对象，此癌细胞株均由上海医药工业研究 院药理研究室提供。1)人肺癌细胞A5492)人结肠癌细胞Colo2053)人乳腺癌细胞MDA-MB-435(二)培养液为RPMI1640+15 % NBS+双抗。所用全自动酶标仪型号为 WellscanMK-2，生产厂商Labsystems。进口 96孔培养板等。2.实验方法体外抗肿瘤瘤活性采用MTT法。样品配制用DMSO(Merck)溶解后，加入PBS(-)配成1000 μ g/ml的溶液或均勻的 混悬液，然后用含DMSO的PBS (-)稀释。培养液RPMI640+15%NBS+ 双抗阳性对照药物羟基喜树碱实验步骤如下在96孔培养板中每孔加入浓度为4 5 X IO4个/ml的细胞悬液1000 μ 1，置37°C， 5% CO2培养箱内。24h后，加入样品液，10μ 1/孔，设双复孔，37°C，5% CO2作用72h。每孔 加入5m g/ml的MTT溶液20 μ 1，作用4h后加入溶解液，100 μ 1/孔，置培养箱内，溶解后用 ΜΚ-2全自动酶标仪测570nm0D值。(二)实验结果表2. 29个化合物对人体肿瘤细胞的体外增殖抑制作用
21 实例6 拓扑异构酶I抑制活性试验运用文献方法(KingsburyWD, Boehm JC, Jakas DR, et al. J Med Chem，1991，34， 98-107)，对部分化合物进行了拓扑异构酶I抑制活性试验，发现它们在0. Ol-IOOuM范围内具有良好的抑制Topl的活性。 综上，本发明化合物具有一定的抗肿瘤作用，特别值得指出的是，该类化合物对转 移性的乳腺癌细胞显示了良好的选择性毒性，为开发为高效、低毒、特异性强的抗肿瘤药物 奠定了基础，具有很好的开发价值。本发明的1-氮杂咕吨酮-3-甲酰胺类化合物代表着 一类全新结构的具有抗肿瘤活性的化合物，这为深入研究和开发新的抗肿瘤药物开辟了新 的途径和方向。
权利要求
一类如通式(I)所示的1 氮杂呫吨酮 3 甲酰胺类化合物或其药学上可接受的盐，其中，R1的取代位置可位于6至9位，可以是单、双或多取代，R1为下列基团中的任一类a)氢；b)C1 8的直链或支链烷氧基；c)C1 8的直链或支链烷基；d)卤素；m)亚甲二氧基；R2、R3独立地表示下列基团氢、C1 8的直链或支链的烷基、取代或未取代的芳基亚甲基，所述的取代为氢、卤素、C1 8的直链或支链的烷基、C1 8的直链或支链的烷氧基、硝基、氨基、羟基；或R2、R3一起形成由3到7个CH2单元连接组成的链；R4为氢、C1 8的直链或支链烷基。FSA00000119853000011.tif
2.按权利要求1所述的1-氮杂咕吨酮-3-甲酰胺类化合物，其特征在于，当R1为单取代且7位为氟、氯时，R2和R3的组合不能为二乙基、叔丁基、苄基、对氯苄基；当R1为单取代且7位为氢时，R2和R3的组合不能为苄基、对氯苄基； 当R1为单取代且7位为甲基时，R2和R3的组合不能为叔丁基、苄基、对氯苄基。
3.按权利要求1至2所述的1-氮杂咕吨酮-3-甲酰胺类化合物，其特征在于，R1取代 为单取代。
4.按权利要求1至3所述的1-氮杂咕吨酮-3-甲酰胺类化合物，其特征在于，R1取代 位于7位。
5.按权利要求1至4所述的1-氮杂咕吨酮-3-甲酰胺类化合物，其特征在于，所述的芳基亚甲基为苄基。
6.按权利要求1至5所述的1-氮杂咕吨酮-3-甲酰胺类化合物，其特征在于，所述的 R2、R3为取代或未取代的芳基亚甲基时，所述的取代为氢或卤素。
7.按权利要求1至6所述的1-氮杂咕吨酮-3-甲酰胺类化合物，其特征在于R4为甲基。
8.按权利要求1所述的1-氮杂咕吨酮-3-甲酰胺类化合物，包含
9.权利要求1至8中所述的1-氮杂咕吨酮-3-甲酰胺类化合物的制备方法，包括以下 步骤 (1)制备3-氰基-4-苯并吡喃酮(II)先将DMF和三氯氧磷在0°C反应半小时，再加入取代的羟基苯乙酮(I)，室温搅拌反应 4h后再加入盐酸羟胺继续反应6h，生成3-氰基-4-苯并吡喃酮(II)；(2)制备5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3-b]吡啶-3-羧酸乙酯(III)将3-氰基-4-苯并吡喃酮(II)、乙酰乙酸乙酯和哌啶在乙醇中回流，生成 5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2,3-b]吡啶-3-羧酸乙酯(III)；(3)制备5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3-b]吡啶-3-羧酸(IV)将5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2,3-b]吡啶-3-羧酸乙酯(III)在50% H2SCM-AcOH混合 酸中回流，生成2-甲基-5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3-b]吡啶-3-羧酸(IV)；(4)制备5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3-b]吡啶-3-甲酰胺(V)将5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3-b]吡啶-3-羧酸(IV)溶于DMF中，在0°C下分别加入 DCC和HOBt的二氯甲烷溶液，搅拌数分钟后加入胺，室温搅拌反应24h，生成5-氧_5H_[1] 苯并吡喃[2，3-b]吡啶-3-甲酰胺(V)。
10.按照权利要求1至8所述的1-氮杂咕吨酮-3-甲酰胺类化合物在制备抗肿瘤药物 中的应用。
11.按照权利要求1至8所述的该类化合物在制备抗肿瘤药物的应用，其特征在于肿瘤 为乳腺癌。
12.按照权利要求1至8所述的该类化合物在制备抗肿瘤药物的应用，其特征在于肿瘤 为转移性乳腺癌。
13.—种组合物，含有权利要求1-8所述的任一 1-氮杂咕吨酮-3-甲酰胺类化合物或 其药学上可接受的盐及药学上接受的载体。
全文摘要
本发明涉及医药领域，公开了一类如通式(I)所示的1-氮杂呫吨酮-3-甲酰胺类化合物及其制备方法和用途。该类化合物具有一定的抗肿瘤作用，特别值得指出的是，该类化合物对转移性的乳腺癌细胞显示了良好的选择性毒性，为开发为高效、低毒、特异性强的抗肿瘤药物奠定了基础。
文档编号A61P35/04GK101899051SQ201010176290
公开日2010年12月1日 申请日期2010年5月17日 优先权日2010年5月17日
发明者亓云鹏, 付小旦, 吕加国, 周有骏, 宋云龙, 张万年, 朱驹, 章玲 申请人:中国人民解放军第二军医大学
技术领域：
本发明涉及医药技术领域，更具体而言，本发明涉及一类1-氮杂咕吨酮-3-甲酰 胺类化合物，本发明还涉及该类化合物的制备方法及其在制备抗肿瘤药中的应用。
背景技术：
恶性肿瘤是严重威胁人类生命和生活质量的主要疾病之一。据2007年底卫生部 公布的数据，恶性肿瘤已经成为我国城乡居民的第一死因。近年来，肿瘤化疗取得了相当 大的进步，肿瘤患者生存时间明显延长，特别是对白血病、恶性淋巴瘤等的治疗有了较大突 破，但对危害人类生命健康最严重的、占恶性肿瘤90%以上的实体瘤(包括肺癌、肝癌、膀 胱癌及结肠癌等)的治疗依然未能达到满意效果。随着生命科学研究的飞速进展，肿瘤机制被逐步阐明，相继出现了抑制肿瘤生长 因子、干预肿瘤信号传导、抑制肿瘤血管生成以及诱导肿瘤细胞凋亡等新方向；但是，由于 恶性肿瘤的发病机制非常复杂，近年的临床实践表明它们只有和细胞毒药物联合应用才能 取得较好的临床疗效。因此，以肿瘤细胞中与分化增殖相关的关键酶作为药物筛选靶标，发 现选择性作用于特定靶点的高效、低毒、特异性强的新型抗癌药物具有重要意义。近年来拓扑异构酶I (Topl)已成为设计新型抗癌药物的关键靶酶之一。它是细 胞生存的必需酶，参与DNA复制、转录、重组、修复的全过程；而且多种肿瘤细胞中尤其是肺 癌、胃癌、结肠癌、卵巢癌等Topl的含量明显高于正常细胞。这些都使得Topl抑制剂类药 物不仅疗效高、抗瘤谱广，而且对肿瘤细胞还具有很好的选择性，现已被美国国家癌症研究 所列为重点研究的六大类抗肿瘤药物之一。在各类Topl抑制剂中，喜树碱(CPT)类衍生物研究最为深入，也是最经典的Topl 特异性的抑制剂。该类化合物中，伊诺替康(CPT-Il)和拓扑替康已成功上市，被用于转移 性的结直肠癌和顽固性的卵巢癌等的治疗，取得了良好的疗效。然而，该类化合物还存在 如下突出问题1)体内代谢不稳定，活性必需的E环内酯结构在人体内过快地水解成羧酸 盐形式，羧酸盐形式不仅对Topl无效，而且更易与人血清白蛋白结合；2) Topl切割复合物 (Toplcc)需要维持一定长的时间才能转化为DNA损伤，然而喜树碱易于从Toplcc解离，因 此临床上使用喜树碱类药物时必须延长静滴时间；3)水溶性差，喜树碱独特的五环共轭 平面结构具有较强的疏水性，导致其水溶性较差；4)喜树碱类药物存在一定的毒副作用， 比如自细胞减少、恶心、呕吐等，限制了安全剂量并进而限制了药物疗效；5)耐药性，现在 已有数个Topl的喜树碱耐受突变株报道，最常见的有ASn722，Arg364等的突变均可导致喜 树碱耐药性的产生。非喜树碱类Topl抑制剂已经成为近年来抗癌药研究热点。Indolocarbazole类 化合物是目前研究较为深入的一类，该类化合物中的J-107088 (Edotecarin)已进入临床 研究，然而有研究表明该类化合物并不是Topl特异性的抑制剂，还有抑制蛋白激酶C或检 查点激酶Chk-I的活性。此外，LuotonineAlamellarinD也是近年来从自然界分离得到的
Topl抑制剂，但它们大都存在结构复杂、特异性差、毒副作用较大等问题，目前临床广为使 用的仍然只有喜树碱类抗肿瘤药物。为了发现全新结构类型的Topl抑制剂，我们前期开展了 Topl抑制剂的虚拟高通 量筛选研究，成功地发现了数个类药性好、无潜在致癌性的先导化合物。基于活性、新颖性 并结合分子图形学考察，我们最终选定购买得到部分化合物进行抑酶和细胞毒活性测试， 结果表明我们首次发现1-氮杂咕吨酮-3-甲酰胺类化合物具有很强的抑制Topl的活性， 显著优于上市药物拓扑替康，细胞毒活性测试结果表明对数种肿瘤细胞显示了一定的抗肿 瘤活性。分子对接研究表明该类先导化合物可以与我们前期识别发现的Topo I靶酶的关 键活性位点残基Arg364形成两个氢键作用，侧链上的酰胺基团可以与靶酶上DNA切割位点 下游+1位的胞嘧啶形成选择性的作用，这使得该类化合物与已有的Topl抑制剂相比具有 更大优势，可望很好地克服现有抗肿瘤药物的耐药性问题。需要说明的，虽然个别该类化合物化合物已经可以购买得到，但是文献里面没有 公布该类化合物的理化性质、制备方法，更没有该类化合物可以用于抗肿瘤的报道。因此， 我们首次发现的1-氮杂咕吨酮-3-甲酰胺类化合物代表了一类全新结构的抗肿瘤活性化 合物。
发明内容
本发明目的是为了提供一类1-氮杂咕吨酮-3-甲酰胺类化合物，或其药学上可接 受的盐。本发明同时公开了该类化合物的制备方法、医疗用途和组合物。本发明根据我们前期虚拟高通量筛选得到的先导物结构，进一步设计、合成了该 类化合物的衍生物，对多种肿瘤细胞的活性测试表明，该类化合物具有一定的抗肿瘤活性， 特别值得指出的是，该类化合物对转移性的乳腺癌细胞显示了良好的选择性毒性，为开发 为高效、低毒、特异性强的抗肿瘤药物奠定了基础。本发明的1-氮杂咕吨酮-3-甲酰胺类化合物结构如通式(I )所示或其药学上可接受的盐，其中，R1的取代位置可位于6至9位，可以是单、双或多取 代，R1为下列基团中的任一类a)氢；b)Cl-8的直链或支链烷氧基；c)Cl-8的直链或支链 烷基；d)卤素；m)亚甲二氧基；R2, R3独立地表示下列基团氢、C1-8的直链或支链的烷基、取代或未取代的芳基 亚甲基，所述的取代为氢、卤素、C1-8的直链或支链的烷基、C1-8的直链或支链的烷氧基、 硝基、氨基、羟基；或R2、R3 一起形成由3到7个CH2单元连接组成的链；R4为氢、C1-8的直链或支链烷基。本发明的进一步较佳实施例中，上述的1-氮杂咕吨酮-3-甲酰胺类化合物，当R1 为单取代且7位为氟、氯时，R2和R3的组合不能为二乙基、叔丁基、苄基、对氯苄基；当R1为单取代且7位为氢时，R2和R3的组合不能为苄基、对氯苄基；当R1为单取代且7位为甲基 时，R2和R3的组合不能为叔丁基、苄基、对氯苄基。更进一步地，上述的1-氮杂咕吨酮-3-甲酰胺类化合物，R1取代为单取代，优选为 7位单取代。本发明的一较佳实施例中，上述的1-氮杂咕吨酮-3-甲酰胺类化合物，&和民 的组合为取代或未取代的芳基亚甲基，所述的取代为氢、卤素、C1-8的直链或支链的烷基、 C1-8的直链或支链的烷氧基、硝基、氨基、羟基；或R2、R3 —起形成由3到7个CH2单元连接 组成的链。所述的芳基亚甲基，优选为苄基，更进一步芳基亚甲基上的取代优选为氢或卤 本发明的一较佳实施例中，所述的1-氮杂咕吨酮-3-甲酰胺类化合物，R4优选为甲基。本发明所述的芳基是芳香烃分子中去掉一个氢原子后所剩下的原子团称为芳基。 芳香烃是一类具有芳香性的化合物，其化学性质稳定，不易加成，不易氧化，容易取代和碳 环异常稳定的特性，不同于一般的饱和化合物的性质，包括1)单环芳烃，分子中只含有一 个苯环，如苯、甲苯、乙苯、苯乙烯等；2)多环芳烃，分子中含有2个或2个以上的苯环，如 联苯、萘、蒽、菲等；3)非苯芳烃，分子中不含苯环，但含有结构及性质与苯环相似的芳烃， 并具有芳香族化合物的特性，如环戊二烯负离子等。所述的取代芳基是指芳基上的氢原子被其它取代基所取代得到的基团。在本发明的实施例中，所述的1-氮杂咕吨酮-3-甲酰胺类化合物，各取代基团组 合包含并不限于下表 本发明的另一目的是提供了上述1-氮杂咕吨酮-3-甲酰胺类的制备方法，包括下
列步骤
IVν(1)制备3-氰基-4-苯并吡喃酮(II )先将DMF和三氯氧磷在0°C反应半小时，再加入取代的羟基苯乙酮(I )，室温搅 拌反应4h后再加入盐酸羟胺继续反应6h，生成3-氰基-4-苯并吡喃酮(II )；(2)制备5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_3_羧酸乙酯(III)将3-氰基-4-苯并吡喃酮(II )、乙酰乙酸乙酯和哌啶在乙醇中回流，生成 5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2,3-b]吡啶-3-羧酸乙酯(III)；(3)制备5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_3_羧酸(IV )将5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3-b]吡啶 _3_ 羧酸乙酯(III)在 50% H2S04_Ac0H 混合酸中回流，生成2-甲基-5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3-b]吡啶-3-羧酸(IV )；(4)制备5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3-b]吡啶_3_甲酰胺(V )将5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_3_羧酸(IV)溶于DMF中，在0°C下 分别加入DCC和HOBt的二氯甲烷溶液，搅拌数分钟后加入胺，室温搅拌反应24h，生成 5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3-b]吡啶-3-甲酰胺(V )。本发明的某些1-氮杂咕吨酮-3-甲酰胺类化合物可按照常规方法制备为其药学 接受的盐的形式。包括其无机酸盐和有机酸盐无机酸包括(但不限于)盐酸、硫酸、磷酸、 二磷酸、氢溴酸、硝酸等；有机酸包括(但不限于)乙酸、马来酸、富马酸、酒石酸、琥珀酸、乳 酸、对甲苯磺酸、水杨酸、草酸等。本发明的化合物具有良好的抗肿瘤活性，它们可以用于治疗肿瘤，包括食道、胃、 肠、直肠、口腔、咽、喉、肺、结肠、乳腺、子宫、子宫内膜、卵巢、前列腺、睾丸、膀胱、肾、肝、胰 腺、骨、结缔组织、皮肤、眼、脑和中枢神经系统等部位发生的癌症，以及甲状腺癌、白血病、 霍杰金式病、淋巴瘤和骨髓瘤等。优选地，所治疗的肿瘤为乳腺癌，更优选地，为转移性的乳 腺癌。本发明的1-氮杂咕吨酮-3-甲酰胺类化合物的药理活性使其可以用于制备抗肿 瘤、抗真菌及抗病毒药物，因此本发明还包括以这些化合物或其药学可接受的盐作为活性 成分的药物组合物，该药物组合物中还含有药学上接受的载体，可以是固体形式或是液体 形式，所述的药物剂型可以是片剂、胶囊、粉末剂、颗粒剂、混悬剂、或注射剂。
具体实施例方式下面结合实施例对本发明做具体描述，但下列实施例不应看作是对本发明范围的 限制。实施例1 :3_氰基-4-苯并吡喃酮(II )的制备
在园底烧瓶中加入DMF(20mL)和POCl3 (12mL，0125mol)，在0°C下搅拌反应0. 5h。 于0°C下加入邻羟基苯乙酮(4. 25g，0.031mol)，室温反应4h。反应结束后加CH2Cl245mL稀 释，冷至0°C，再加入盐酸羟胺的DMF溶液(6. 5g H2NOH · HCl溶于20mL DMF中)，室温搅拌 反应24h。反应结束后加水35mL稀释，用二氯甲烷提取(3X25mL)，有机层再依次用10% NaHCO3溶液和饱和氯化钠溶液洗涤。无水Na2SO4干燥，过滤，滤液蒸干，得黄色固体。甲醇 重结晶，得无色针状晶3. 2g，收率60. 4。1H-WrGOOMHz, CDCl3) δ 7. 53 (1Η, t，6-Η)，7. 55 (1Η，d，8-H)，7. 78 (1H，t，7_H)， 8. 25 (1H, d,5-H) ,8. 40 (1H, s，2_H) ；ESI-MS (m/z) 210 (M++H+Na) ；IR(KBr) cm-1 -.2241,1662 ； m. p. 176-178°C (lit. 177_178°C )。实施例2 2-甲基-5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_3_羧酸乙酯(III)的 制备取3-氰基-4-苯并吡喃酮(II ) (3. 42g，0. 02mol)、乙酰乙酸乙酯(2. 60g， 0. 02mol)和哌啶4mL，在80mL乙醇中回流。反应结束后停止回流，冷却，加水250mL稀释， 过滤析出的固体，水洗至中性，抽干，得红色粗品。在硅胶色谱柱上纯化(洗脱剂石油醚 乙酸乙酯=20 1)，得白色晶体2. 65g，收率46.8%。1H-NMR(300MHz, CDCl3) δ 1. 45 (3Η, t，2，-CH3)，2· 91 (3H，s，2_CH3)，4· 42 (2Η，q, 1，-CH2-)，7. 52 (1H, t, 7-H)，7. 65 (1H, d, 9-H)，7. 85 (1H, t，8-H)，8. 28 (1H, d, 6-H)，9. 16 (1H, s，4-H)。ESI-MS(m/z) :282 (M++Na_K) ；IR(KBr) cnT1 :1715，1655 ;m. p. 151_152°C实施例3 2-甲基-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_3_羧酸(IV )的制备将2-甲基-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_3_羧酸乙酯(III ) (1. 5g, 0. 0053mol)加入 50 % H2SO4-AcOHd 2)混合酸 27mL，130 °C 回流搅拌 3h。将反应 液倒入200mL水中，析出固体，过滤，水洗，抽干得到灰白色固体，用DMF-H2O重结晶 得白色固体 1. 21g,收率 91.3 V0o 1H-NMR (300MHz, d6_DMS0) δ 2. 85 (3Η, s，2_CH3)，
7.51(1H, t, 7-H)，7. 71 (1H, d, 9-H)，7. 90 (1H, t，8_H)，8. 15 (1H, d, 6-H)，8. 90 (1H, s，4_H)， 13. 56 (1H, br, -C00H)。ESI-MS (m/z) :256(M+H+) ； IR (KBr) cnT1 :3103，3066，1732，1644 ; m. p. 290-295 °C。实施例4 2-甲基-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_3_苄酰胺(V )的制 备将2-甲基-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶 _3_ 羧酸(IV) (lg，0.004mOl)溶 于20mL DMF中，冰水冷却至0°C。另称取DCC(0. 87g，0. 0042mol)和H0Bt(0. 57g，0. 0042mol) 分别溶于50mLCH2Cl2中，在0°C下依次加入反应液中，搅拌。于0°C下加入苄胺(0. 5mL， 0. 004mol)，室温搅拌过夜。反应液依次用5%柠檬酸、饱和NaHCO3和水洗涤，有机层用无水 Na2SO4干燥，过滤，浓缩至干。用乙醇重结晶，得白色晶体0. 72g，收率53. 1 %。1H-NMR (300MHz, CDCl3) δ 2. 85 (3Η, s，2_CH3)，4. 70 (2Η，d，2，-CH2-) ,6. 50 (1H, br, -NH-)，7· 34 7· 46 (6Η, m，3， 一O 禾口 7_H), 7· 64 (1Η, d，9_H)，7· 80 (1Η, t，8_H)，
8.24 (1Η, d，6-H)，8· 65(1Η，s，4_H)。ESI-MS (m/z) :345 (M+H+)，711 (2M+Na+) ；IR(KBr) cm-1 3270，1673，1638 ；m. p.215_216°C其余的目标化合物分别以不同基团取代的邻羟基苯乙酮和不同的胺为原料，重复 实施例1、2、3、4中的步骤，得到不同的2-甲基-5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_3_酰胺类化合物。实施例中所用试剂均为市售分析纯。本发明部分已合成的化合物的化学结构和表征数据如下。
2-甲基-5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶-N-甲基_3_酰胺2-methyl-5-oxo-5H-[1]benzopyrano[2,3~b]pyridine-N-methyl-3-amide 1H NMR(300MHz, CDCl3) δ 2. 83 (3Η, s,2-CH3) ,3. 09 (3Η, d,2' -CH3) ,6. 21 (1H, br, -NH-)，7. 45 (1H, t, 7_H)，7. 60 (1H, d, 9_H)，7. 80 (1H, t，8_H)，8. 25 (1H, d, 6_H)，8. 62 (1H, s，4-H) ；ESI-MS (m/z) :269(M+H+) ；IR(KBr) cnT1 :3275，1673，1642 ；m. p. 277_278°C2-甲基-5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_乙基_3_酰胺2-methyl-5-oxo-5H-[1]benzopyrano[2,3~b]pyridine-N-ethyl-3-amide IH NMR(300MHz, CDC13) δ :1. 32 (3H, t，3，-CH3)，2. 84 (3H，s，2_CH3)，3. 55 (2H， m，2，-CH2)，6. 05 (1H, br, -NH-)，7. 46 (1H, t，7_H)，7. 63 (1H, d，9_H)，7. 82 (1H, t，8_H)， 8. 30 (1H, d，6-H)，8· 65(1H，s，4_H). ESI—MS (m/z) :283(M+H+) ； IR (KBr) cnf1 :3274，1670， 1637 ；m. p. 252-254V2-甲基-5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_正丙基_3_酰胺2-methyl-5-oxo-5H-[1]benzopyrano[2,3~b]pyridine-N-n-propyl-3-amide IH NMR (300MHz, CDC13) δ 1. 04 (3H, t，4，-CH3)，1. 68 (2H，m，3，-CH2)，2. 80 (3H， s，2-CH3)，3. 48 (2H, m，2，-CH2)，6. 22 (1H, br, -NH-)，7. 48 (1H, t，7_H)，7. 61 (1H, d，9_H)， 7. 81(1H, t，8-H)，8. 25 (1H, d，6_H)，8. 61(1H，s，4_H) · ESI-MS(m/z) 295(M-H+) ； IR(KBr) cm-1 :3281,1671，1634 ；m.p.211_212°C2-甲基-5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_异丙基_3_酰胺2-methyl-5-oxo-5H-[1]benzopyrano[2，3-b]pyridine-N-isopropyl-3-amide 1H 匪R(300MHz，CDCl3) δ 1· 29 (6Η，dd，3，-CH3X 2)，2· 84 (3Η，s，2_CH3)，4· 33 (1Η， m，2，-CH), 5. 85 (1H, br, -NH-)，7· 47 (1Η，t，7_H)，7· 64 (1H，d，9_H)，7· 82 (1H, t，8_H)， 8. 32 (1H, d，6-H)，8· 63(1H，s，4_H) ；ESI-MS (m/z) :297(M+H+) ；IR(KBr) cm-1 :3274,1671, 1636 ；m. p. 240-2410C2-甲基-5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_正丁基_3_酰胺2-methyl-5-oxo-5H-[1]benzopyrano[2,3~b]pyridine-N-n-butyl-3-amide 1H NMR(300MHz, CDCl3) δ 1. 01 (3H, t，5，-CH3)，1. 48 (2H，m，4，-CH2-)，1. 66 (2H， m，3，-CH2-)，2. 83 (3H, s，2_CH3)，3. 52 (2H, q，2，-CH2-) ,6. 10 (1H，br, -NH-), 7. 46 (1H, t, 7-H)，7. 63 (1H, d, 9_H)，7. 81 (1H, t，8_H)，8. 28 (1H, d, 6_H)，8. 63 (1H, s，4_H) ； ESI-MS (m/z) 311(M+H+) ； IR (KBr)cnT1 :3285，1671，1634 ；m. p. 193-195°C2-甲基-5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_苄基_3_酰胺2-methyl-5-oxo-5H-[1]benzopyrano[2，3~b]pyridine-N-benzyl-3-amide 1H NMR (300MHz, CDCl3) δ 2. 85 (3H, s，2_CH3)，4. 70 (2H，d，2，-CH2-) ,6. 50 (1H, br, -NH-)，7. 34 7. 46 (6H, m, Ar-H)，7. 64 (1H, d, 9_H)，7. 80 (1H, t，8_H)，8. 24 (1H, d, 6_H)， 8. 65 (1H, s，4-H) ；ESI-MS (m/z) :345 (M+H)+，711 (2M+Na)+; IR (KBr) cnf1 :3270，1673，1638. m. p. 215-216°C2-甲基-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_ (4_氯苄基)_3_酰胺2-methyl-5-oxo-5H-[1]benzopyrano[2，3_b]pyridine-N-(4-chlorobenzyl)_3_ amide 1H-NMR (300MHz, CDCl3) δ 2. 84 (3H, s，2_CH3)，4. 65 (2H，d，2，-CH2-) ,6. 49 (1H, br, -NH-) , 7. 34 (4H, m, Ar-H) ,7. 45 (1H, t，7_H)，7. 61 (1H, d，9_H)，7. 80 (1H, t，8_H)， 8. 24(1H, d,6-H) ,8. 64(1H, s，4_H) ；ESI-MS (m/z) :379 (M+H)+，779 (2M+Na)+;IR(KBr) cnT1 : 3308，1672，1637 ；m. p.240-241°C2-甲基-5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_3_哌啶基酰胺2-methyl-5-oxo-5H-[1]benzopyrano[2,3~b]pyridine-3-piperidyl amide 1H NMR(300MHz, CDCl3) δ 1. 55 (2Η, m，4，-CH2-)，1. 73 (4H, m，3，，5，-CH2-X 2)， 2. 71 (3H, s, 2-CH3)，3. 26 (2H, t，6，-CH2-)，3. 81 (2H, t，2，-CH2-)，7. 46 (1H, t, 7_H) 7. 62 (1H, d，9-H)，7· 81 (1H，t，8_H)，8· 32 (1H，d，6_H)，8. 50 (1H，s，4_H) ； ESI-MS (m/z) :323(M+H)+; IR(KBr)CnT1 :1651，1635 ；m. p. 194_195°C2-甲基-5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_3_吡咯基酰胺2-methyl-5-oxo-5H-[1]benzopyrano[2,3-b]pyridine-3-pyrrolidinyl amide 1H NMR(300MHz, CDCl3) δ 1. 99 (4H, m，3，，4，-CH2-X 2) , 2. 72 (3H, s，2_CH3)， 3. 28 (2H, t，2，-CH2-) , 3. 72 (2H, t，5，-CH2-) , 7. 48 (1H, t，7_H) , 7. 62 (1H, d，9_H)， 7. 80 (1H, t，8-H)，8. 30 (1H, d，6_H)，8. 56 (1H, s，4_H) ；ESI-MS (m/z) :309 (M+H+)，348 (M+K)+， 639 (2M+Na+) ；IR(KBr) cm-1 :1664,1629 ；m. p. 159_160°C2-甲基-7-甲基-5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶-N-甲基_3_酰胺2-methyl-7-methyl-5-oxo-5H - [ 1] benzopyrano [2, 3 - b ] pyridine-N-methyl-3-amide 1H NMR (300MHz, CDCl3) δ 2. 50 (3Η, s，7_CH3)，2· 84 (3Η，s,2-CH3) ,3. 08 (3Η, d，2，-CH3) ,6. 11 (1H, br, -NH-) , 7. 52 (1H, d，9_H) , 7. 60 (1H, d，8_H) ,8. 07 (1H, s, 6-H) ,8. 65 (1H, s，4-H) ；ESI-MS (m/z) 283 (M+H)+ ；IR(KBr)CnT1 :3277，1664，1643 ； m. p. 279-2810C .2-甲基-7-甲基-5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶-N-乙基_3_酰胺2-methyl-7-methyl-5-oxo-5H - [ 1] benzopyrano [2, 3 - b ] pyridine-N-ethyl-3-amide 1H-MR (300MHz, CDCl3) δ 1. 32 (3Η, t, CH3)，2· 50 (3Η，s, CH3)，2· 83 (3H，s, CH3), 3. 55 (2Η, q, CH2), 6. 04 (1Η, br, NH) ,7. 52 (1Η, d, Ar-H) ,7. 61 (1Η, d, Ar-H) ,8. 08 (1Η, s, Ar-H) ,8. 64 (1Η, s，4_H) ；ESI-MS (m/z) 297. 46 (M+H)+ ；IR (KBr) cm_13274, 1672, 1637 ； m. ρ· 258-260 °C2-甲基-7-甲基-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_正丙基_3_酰胺2-methyl-7-methyl-5-oxo-5H - [ 1] benzopyrano [2, 3 - b ]
1H NMR (300MHz, CDCl3) δ 1. 05 (3Η, t，4，-CH3)，1· 71 (2H，m，3，-CH2)，2· 50 (3H， s，7-CH3)，2· 82(3Η，s,2-CH3) ,3. 49 (2Η, m，2，-CH2), 6. 11 (1Η, br, -ΝΗ-)，7· 51 (1Η，d，9_H)， 7. 61 (1H, d，8-H)，8· 07(1H，s，6_H)，8. 63 (1H，s，4_H) ；EI-MS (m/z) :351 (M+K+)，311 (M+H+)； IR(KBr)CnT1 :3284，1669，1635 ；m. p. 221-222V2-甲基-7-甲基-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_异丙基_3_酰胺2-methyl-7-methyl-5-oxo-5H - [ 1] benzopyrano [2, 3 - b ] pyridine-N-isopropyl-3-amide1H NMR (300MHz, CDCl3) δ 1. 33 (6Η, d，3，-CH3 X 2) ,2. 51 (3Η, s，7_CH3)，2· 83 (3Η， s，2-CH3)，4· 32(1H，m，2，-CH) ,5. 85 (1H, br, -NH-), 7. 52 (1H, d，9_H)，7. 61 (1H，d，8_H)， 8. 09 (1H, s，6-H)，8. 61 (1H，s, 4-H). ESI-MS (m/z) :311 (M+H+). IR (KBr) cnf1 :3298，1674， 1633. m. p. 254-256 °C .2-甲基-7-甲基-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_正丁基_3_酰胺2-methyl-7-methyl-5-oxo-5H - [ 1] benzopyrano [2, 3 - b ] pyridine-N-n-butyl-3-amide 1H NMR(300MHz, CDCl3) δ 1. 01 (3Η, t，5，-CH3)，1· 48 (2Η，m，4，-CH2-)，1· 69 (2H，m， 3'-CH2-) ,2. 49(3H，s，7-CH3)，2· 77 (3H，s，2_CH3)，3· 51 (2H，q，2，-CH2-)，6· 32 (1Η, br,-ΝΗ-)， 7. 48 (1Η, d，9-H)，7· 60(1Η，d，8_Η)，8. 01 (1Η，s，6_H)，8· 57 (1H，s, 4-H). ESI-MS (m/z) 365 (Μ+Ζ +Κ+) · IR(KBr)CnT1 :3298，1674，1633. m. p. 220-221 °C .2-甲基-7-甲基-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_苄基_3_酰胺2-methyl-7-methyl-5-oxo-5H - [ 1] benzopyrano [2, 3 - b ] pyridine-N-benzyl-3-amide 1H NMR (300MHz，CDCl3) δ 2. 47 (3Η, s，7_CH3)，2. 83 (3H, s，2_CH3)，4. 69 (2H, d, 2，-CH2)，6. 51 (1H, br, -NH-)，7. 32 7. 41 (5H, m, Ar-H)，7. 51 (1H, d, 9-H)，7. 61 (1H, d, 8-H)， 8. 01 (1H, s,6-H) ,8. 64 (1H, s, 4-H). ESI-MS (m/z) :739 (2M+Na+)，399 (M+K+)，359 (M+H+) ·IR(KBr)CnT1 :3270，1673，1633. m. ρ· 248-249°C .2-甲基-7-甲基-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_ (4_氯苄基)_3_酰胺2-methyl-7-methyl-5-oxo-5H-[1]benzopyrano[2，3_b]pyridine-N-(4-chlorob enzyl)-3-amide 1H NMR (300MHz，CDCl3) δ 2. 49 (3H, s，7_CH3)，2. 84 (3H, s，2_CH3)，4. 65 (2H, d, 2，-CH2)，6. 53 (1H, br, NH)，7. 35 (4H, d, Ar-H)，7. 51 (1H, d, 9-H)，7. 61 (1H, d, 8-H)，8. 01 (1H, s,6-H) ,8. 65 (1H, s,4-H). ESI-MS (m/z) :393 (M+H+). IR(KBr)CnT1 -.3277, 1671, 1635. m. p. 245-246 °C2-甲基-7-氯-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_正丙基_3_酰胺2-methyl-7-chloro-5-oxo-5H - [ 1] benzopyrano [2, 3 - b ] pyridine-N-n-propyl-3-amide 1H-NMR(300MHz, DMS0_d6) δ 0. 93(t,3H, CH3)，1. 56 (sext，2H，CH2)，2. 66 (s，3H， CH3)，3. 24 (m, 2H, CH2)，7. 77 (d, 1H, J = 9. OHz，Ar-H)，7. 94 (dd, IHjJ1 = 8. 7Hz，J2 = 2. 4Hz， Ar-H) ,8. 07 (s, 1Η, Ar-H) ,8. 46 (s, 1Η, Ar-H), 8. 71(br,lH, J = 5. 4Hz, NH). ESI-MS (m/z) 329. 63(M-H_). IR(KBr) cm-1 :3283，1635，1671 ；m. p. 256-258 °C2-甲基-7-氯-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_异丙基_3_酰胺2-methyl-7-chloro-5-oxo-5H - [ 1] benzopyrano [2, 3 - b ] pyridine-N-isopropyl-3-amide 1H NMR (300MHz, CDCl3) δ 1. 33 (6Η, d，2CH3)，2· 85 (3Η, s，2_CH3)，4· 32 (1Η, m, CH)， 5. 80(1Η, br, NH)，7. 60 (1H, d,9-H)，7. 76 (1H, d, 8-H)，8. 28 (1H, s，6-H)，8. 62 (1H, s，4_H). ESI-MS (m/z) :331(M+H+). IR(KBr) cm-1 :3282，1672，1637. m. p. 280-281 °C ·2-甲基-7-氯-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_正丁基_3_酰胺2-methyl-7-chloro-5-oxo-5H - [ 1] benzopyrano [2, 3 - b ] pyridine-N-n-butyl-3-amide 1H 匪R(300MHz，DMS0_d6) δ 0. 92 (t,3H, CH3)，1. 36 (m, 2H, CH2)，1. 51 (m, 2H, CH2)，2. 67(s，3H，CH3)，3. 27 (m, 2H, CH2)，7. 81 (d, 1H, J = 9. OHz, Ar-H), 8. 11 (d, 1H, J = 2. 4Hz, Ar-H), 8. 48 (s，1H, Ar-H) ,8. 70 (br, 1H, J = 5. 4Hz, NH). IR(KBr) cm-1 :3279，1698，1673. m. p. 242-244°C .2-甲基-7-氯-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_羟乙基_3_酰胺2-methyl-7-chloro-5-oxo-5H-[1]benzopyrano[2,3_b]pyridine-N-hydroxylet hyl-3-amide 1H NMR(300MHz, DMS0_d6) δ 1. 24(m,2H, CH2) ,2. 67(s,3H, CH3) ,3. 54(m,2H, J =5. 7Hz, CH2) ,4. 84 (t, 1H, J = 5. 7Hz，OH)，7. 81 (d，1H，J = 9. OHz, Ar-H), 7. 99 (dd, 1H, J1 = 9. OHz, J2 = 2. 7Hz，Ar-H)，8. ll(d，lH，J = 2. 7Hz, Ar-H) ,8. 56 (s, 1H, Ar-H), 8. 72 (br, 1H, J = 5. 4Hz, NH). ESI-MS (m/z) :333. 27 (M+H+) · IR(KBr) cnT1 :3274，1681，1636. m. p. 249-2510C .2-甲基-7-氯-5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶-N-苄基_3_酰胺2-methyl-7-chloro-5-oxo-5H - [ 1] benzopyrano [2, 3 - b ] pyridine-N-benzyl-3-amide 1H NMR(300MHz, DMS0_d6) δ 2. 68(s,3H, CH3) ,4. 45(d,2H, J = 5. 7Hz, CH2),
7.28 (dd, 1H, Jl = 8. 4Hz，J2 = 4. 2Hz，Ar-H)，7. 37 (d, 4H, J = 5. 2Hz，Ar-H)，7. 78 (d, 1H, J = 9. OHz，Ar-H)，7. 94 (dd, 1H, J1 = 9. OHz，J2 = 2. 7Hz，Ar-H)，8. 07 (d, 1H, J = 2. 7Hz，Ar-H)，
8.54 (s，1H, Ar-H), 9. 27 (t, 1H, J = 5. 7Hz, NH). ESI-MS (m/z) :377· 35 (M-H)IR(KBr) cm-1 3269，1675，1634. m. p. 268-270 °C .2-甲基-7-氯-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_ (4_氟苄基)_3_酰胺2-methyl-7-chloro-5-oxo-5H-[1]benzopyrano[2，3_b]pyridine-N-(4-flurobe nzyl)-3-amide 1H NMR(300MHz, DMS0_d6) δ 2. 68(s,3H, CH3) ,4. 48(d,2H, J2 = 6. OHz, CH2), 7. 16-7. 22 (m, 2H, Ar-H)，7. 39-7. 44 (m, 2H, Ar-H)，7. 80 (d, 1H, J = 9. OHz，Ar-H)，7. 96 (dd, 1H, J1 = 9. OHz，J2 = 2. 7Hz, Ar-H), 8. 10 (d, 1H, J = 2. 4Hz, Ar-H), 8. 56 (s, 1H, Ar-H)， 9. 25 (t, 1H, J = 6. OHz，NH). ESI-MS (m/z) :395. 62 (Μ-ΗΓ. IR(KBr) cnT1 :3270，1677，1635. m. p. 269°C (dec).2-甲基-7-氯-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_ (4_氯苄基)_3_酰胺
2-methyl-7-chloro-5-oxo-5H-[1]benzopyrano[2，3_b]pyridine-N-(4-chlorob enzyl)-3-amide 1H NMR(300MHz, CDCl3) δ 2. 86(s,3H, CH3) ,4. 64(d,2H, J = 5. 7Hz, CH2) ,6. 28 (br, 1H, NH)，7. 32-7. 39 (m, 4H, Ar-H)，7. 59 (d, 1H, J = 8. 7Hz，Ar-H)，7. 75 (dd, 1H, J1 = 9. OHz， J2 = 2. 4Hz, Ar-H) ,8. 25 (d, 1H, J = 2. 7Hz, Ar-H), 8. 65 (s, 1H, Ar-H). ESI-MS (m/z) 411. 64(M-H)IR(KBr)CnT1 3273,1674,1634. m. p. 248°C (dec).2-甲基-7-氯-5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶-N_(4_甲基苄基)_3_酰胺2-methyl-7-chloro-5-oxo-5H-[1]benzopyrano[2，3_b]pyridine-N-(4-methylb enzyl)-3-amide 1H NMR (300MHz, DMS0_d6) δ 2. 29(s,3H, CH3)，2. 68 (s，3H，CH3)，4. 44 (d，2H，J = 5. 7Hz, CH2)，7. 17 (d, 2H, J = 8. IHz, Ar-H)，7. 26 (d, 2H, J = 8. IHz, Ar-H)，7. 81 (d, 1H, J = 9. OHz，Ar-H)，7. 97 (dd, 1H, J1 = 9. OHz，J2 = 2. 7Hz，Ar-H)，8. 11 (d，1H，J = 2. 7Hz，Ar-H)， 8. 54 (s，1H, Ar-H), 9. 23 (br, 1H，NH). ESI-MS (m/z) 391. 74 (M-H) IR(KBr) cm-1 :3277，1675， 1635. m. p. 2610C (dec). 2-甲基-7-甲氧基-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_ (4_正丁基)_3_酰 胺 2-methyl-7-methoxy-5-oxo-5H - [1] benzopyrano [2, 3 - b ] pyridine-N-(4-n-butyl)-3-amide1H NMR(300MHz, CDCl3) δ 0. 92(t,3H, CH3)，1. 40 (m，2H，CH2)，1. 52 (m，2H，CH2), 2. 67 (s，3H, CH3)，3. 26 (m, 2H, CH2)，3. 95 (s, 3H, OCH3)，7. 10 (dd, 1H, J1 = 8. 7Hz, J2 = 2. 4Hz, Ar-H), 7. 26 (d, 1H, J = 2. 4Hz, Ar-H), 8. 09 (d, 1H, J = 9. OHz，Ar-H), 8. 45 (s, 1H, Ar-H)， 8. 68 (br, 1H, J = 5. 4Hz, NH). ESI-MS (m/z) :341. 66 (M+H)+· IR(KBr) cnT1 :3280，1694，1634. m. p. 248-250 °C ·2-甲基-7-甲氧基-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_苄基_3_酰胺2-methyl-7-methoxy-5-oxo-5H-[l]benzopyrano [2, 3 - b ] pyridine-N-(4-benzyl)-3-amide 1H NMR(300MHz, DMS0_d6) δ 2. 68(s,3H, CH3)，3· 94 (s，3H，OCH3) ,4. 50(d,2H, J = 5. 7Hz, CH2)，7. 09 (dd, 1H, J1 = 9. OHz，J2 = 2. 4Hz, Ar-H), 7. 24 (d, 1H, J = 2. 4Hz, Ar-H)，
7.28 (d, 1H, J = 4. 5Hz，Ar-H)，7. 37 (d, 4H, J = 4. 5Hz，Ar-H)，8. 08 (d, 1H, J = 9. OHz，Ar-H)，
8.53 (s，1H, Ar-H), 9. 23 (br, 1H，NH). ESI-MS (m/z) :373· 72 (M-H) IR(KBr) cm-1 :3270，1663， 1634. m. p. 268-270 °C . 2-甲基-7-甲氧基-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_ (4_氟苄基)_3_酰 胺 2-methyl-7-methoxy-5-oxo-5H-[l]benzopyrano[2，3_b]pyridine-N-(4-flurob enzyl)-3—amide 1H NMR(300MHz, DMS0_d6) δ 2. 67(s,3H, CH3)，3. 95 (s，3H，OCH3)，4. 47 (d，2H，J = 6. OHz, CH2)，7. 08-7. 26 (m, 4H, Ar-H)，7. 39-7. 43 (m, 2H, Ar-H)，8. 09 (d, 1H, J = 9. OHz, Ar-H), 8. 53 (s，lH，Ar_H)，9. 23 (br, 1Η，J = 6. 0Hz，NH). EI-MS (m/z) :393. 72(Μ+Η)+. IR(KBr) cnT1 :3292,1716，1662. m. ρ. 295-297°C · 2-甲基-7-甲氧基-5-氧-5Η_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶_N_ (4_氯苄基)_3_酰 胺 2-methyl-7-methoxy-5-oxo-5H-[1]benzopyrano[2，3_b]pyridine-N-(4-chloro benzyl)-3—amide1H NMR(300MHz, DMS0_d6) δ 2. 67(s,3H, CH3)，3. 95 (s，3H，OCH3)，4. 48 (d，2H，J =
6.OHz，CH2)，7. 10 (dd, 1H, J1 = 9. OHz，J2 = 2. 4Hz, Ar-H)，7. 25 (d, 1H, J = 2. 4Hz, Ar-H)，
7.38-7. 45(m，4H，Ar-H)，8· 09 (d, 1H, J = 8. 7Hz，Ar_H)，8· 54 (s，lH，Ar_H)，9. 24 (br, 1H, J = 6. OHz, NH). ESI-MS (m/z) :407· 56Μ-ΗΓ. IR(KBr) cm-1 :3294，1716，1662. m. p. 270°C (dec).2-甲基-7-甲氧基-5-氧-5H_[1]苯并吡喃[2，3_b]吡啶-N_(4_甲基苄基)_3_酰 胺2-methyl-7-methoxy-5-oxo-5H-[1]benzopyrano[2，3_b]pyridine-N-(4-methyl benzyl)-3—amide 1H NMR (300MHz，DMS0-d6) δ 2. 29 (s，3H，CH3)，2. 67 (s，3H，CH3)，3. 95 (s，3H，OCH3)， 4. 44(d，2H，J = 5. 7Hz, CH2), 7. 10 (dd, 1H, J1 = 9. OHz，J2 = 2. 4Hz, Ar-H), 7. 17(d，2H，J = 7. 8Ηζ，Ar-H)，7. 25 (d, 2H, J = 3. 9Hz，Ar-H)，7. 26 (d, 1H, J = 3. 9Hz，Ar-H)，8. 09 (d, 1H, J =9.0Hz，Ar-H) ,8. 50 (s, 1H, Ar-H), 9. 19 (br, 1H, NH). EI-MS (m/z) :389. 61 (M+H)+. IR(KBr) cnT1 3257,1662，1637. m. p. 275_277°C ·实施例5 本发明的化合物的细胞毒作用(一)实验材料和方法1.实验材料(一)实验菌株本实验采用了 3种人癌细胞株作为筛选对象，此癌细胞株均由上海医药工业研究 院药理研究室提供。1)人肺癌细胞A5492)人结肠癌细胞Colo2053)人乳腺癌细胞MDA-MB-435(二)培养液为RPMI1640+15 % NBS+双抗。所用全自动酶标仪型号为 WellscanMK-2，生产厂商Labsystems。进口 96孔培养板等。2.实验方法体外抗肿瘤瘤活性采用MTT法。样品配制用DMSO(Merck)溶解后，加入PBS(-)配成1000 μ g/ml的溶液或均勻的 混悬液，然后用含DMSO的PBS (-)稀释。培养液RPMI640+15%NBS+ 双抗阳性对照药物羟基喜树碱实验步骤如下在96孔培养板中每孔加入浓度为4 5 X IO4个/ml的细胞悬液1000 μ 1，置37°C， 5% CO2培养箱内。24h后，加入样品液，10μ 1/孔，设双复孔，37°C，5% CO2作用72h。每孔 加入5m g/ml的MTT溶液20 μ 1，作用4h后加入溶解液，100 μ 1/孔，置培养箱内，溶解后用 ΜΚ-2全自动酶标仪测570nm0D值。(二)实验结果表2. 29个化合物对人体肿瘤细胞的体外增殖抑制作用
21 实例6 拓扑异构酶I抑制活性试验运用文献方法(KingsburyWD, Boehm JC, Jakas DR, et al. J Med Chem，1991，34， 98-107)，对部分化合物进行了拓扑异构酶I抑制活性试验，发现它们在0. Ol-IOOuM范围内具有良好的抑制Topl的活性。 综上，本发明化合物具有一定的抗肿瘤作用，特别值得指出的是，该类化合物对转 移性的乳腺癌细胞显示了良好的选择性毒性，为开发为高效、低毒、特异性强的抗肿瘤药物 奠定了基础，具有很好的开发价值。本发明的1-氮杂咕吨酮-3-甲酰胺类化合物代表着 一类全新结构的具有抗肿瘤活性的化合物，这为深入研究和开发新的抗肿瘤药物开辟了新 的途径和方向。
权利要求
一类如通式(I)所示的1 氮杂呫吨酮 3 甲酰胺类化合物或其药学上可接受的盐，其中，R1的取代位置可位于6至9位，可以是单、双或多取代，R1为下列基团中的任一类a)氢；b)C1 8的直链或支链烷氧基；c)C1 8的直链或支链烷基；d)卤素；m)亚甲二氧基；R2、R3独立地表示下列基团氢、C1 8的直链或支链的烷基、取代或未取代的芳基亚甲基，所述的取代为氢、卤素、C1 8的直链或支链的烷基、C1 8的直链或支链的烷氧基、硝基、氨基、羟基；或R2、R3一起形成由3到7个CH2单元连接组成的链；R4为氢、C1 8的直链或支链烷基。FSA00000119853000011.tif
2.按权利要求1所述的1-氮杂咕吨酮-3-甲酰胺类化合物，其特征在于，当R1为单取代且7位为氟、氯时，R2和R3的组合不能为二乙基、叔丁基、苄基、对氯苄基；当R1为单取代且7位为氢时，R2和R3的组合不能为苄基、对氯苄基； 当R1为单取代且7位为甲基时，R2和R3的组合不能为叔丁基、苄基、对氯苄基。
3.按权利要求1至2所述的1-氮杂咕吨酮-3-甲酰胺类化合物，其特征在于，R1取代 为单取代。
4.按权利要求1至3所述的1-氮杂咕吨酮-3-甲酰胺类化合物，其特征在于，R1取代 位于7位。
5.按权利要求1至4所述的1-氮杂咕吨酮-3-甲酰胺类化合物，其特征在于，所述的芳基亚甲基为苄基。
6.按权利要求1至5所述的1-氮杂咕吨酮-3-甲酰胺类化合物，其特征在于，所述的 R2、R3为取代或未取代的芳基亚甲基时，所述的取代为氢或卤素。
7.按权利要求1至6所述的1-氮杂咕吨酮-3-甲酰胺类化合物，其特征在于R4为甲基。
8.按权利要求1所述的1-氮杂咕吨酮-3-甲酰胺类化合物，包含
9.权利要求1至8中所述的1-氮杂咕吨酮-3-甲酰胺类化合物的制备方法，包括以下 步骤 (1)制备3-氰基-4-苯并吡喃酮(II)先将DMF和三氯氧磷在0°C反应半小时，再加入取代的羟基苯乙酮(I)，室温搅拌反应 4h后再加入盐酸羟胺继续反应6h，生成3-氰基-4-苯并吡喃酮(II)；(2)制备5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3-b]吡啶-3-羧酸乙酯(III)将3-氰基-4-苯并吡喃酮(II)、乙酰乙酸乙酯和哌啶在乙醇中回流，生成 5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2,3-b]吡啶-3-羧酸乙酯(III)；(3)制备5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3-b]吡啶-3-羧酸(IV)将5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2,3-b]吡啶-3-羧酸乙酯(III)在50% H2SCM-AcOH混合 酸中回流，生成2-甲基-5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3-b]吡啶-3-羧酸(IV)；(4)制备5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3-b]吡啶-3-甲酰胺(V)将5-氧-5H-[1]苯并吡喃[2，3-b]吡啶-3-羧酸(IV)溶于DMF中，在0°C下分别加入 DCC和HOBt的二氯甲烷溶液，搅拌数分钟后加入胺，室温搅拌反应24h，生成5-氧_5H_[1] 苯并吡喃[2，3-b]吡啶-3-甲酰胺(V)。
10.按照权利要求1至8所述的1-氮杂咕吨酮-3-甲酰胺类化合物在制备抗肿瘤药物 中的应用。
11.按照权利要求1至8所述的该类化合物在制备抗肿瘤药物的应用，其特征在于肿瘤 为乳腺癌。
12.按照权利要求1至8所述的该类化合物在制备抗肿瘤药物的应用，其特征在于肿瘤 为转移性乳腺癌。
13.—种组合物，含有权利要求1-8所述的任一 1-氮杂咕吨酮-3-甲酰胺类化合物或 其药学上可接受的盐及药学上接受的载体。
全文摘要
本发明涉及医药领域，公开了一类如通式(I)所示的1-氮杂呫吨酮-3-甲酰胺类化合物及其制备方法和用途。该类化合物具有一定的抗肿瘤作用，特别值得指出的是，该类化合物对转移性的乳腺癌细胞显示了良好的选择性毒性，为开发为高效、低毒、特异性强的抗肿瘤药物奠定了基础。
文档编号A61P35/04GK101899051SQ201010176290
公开日2010年12月1日 申请日期2010年5月17日 优先权日2010年5月17日
发明者亓云鹏, 付小旦, 吕加国, 周有骏, 宋云龙, 张万年, 朱驹, 章玲 申请人:中国人民解放军第二军医大学
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