莫索尼定在心肌梗塞后治疗中的应用的制作方法
专利名称：莫索尼定在心肌梗塞后治疗中的应用的制作方法
发明描述本发明涉及4-氯-5-[(4，5-二氢-1H-咪唑-2基)-氨基]-6-甲氧基-2-甲基嘧啶(＝莫索尼定)和其生理相容的酸加合盐用于治疗心肌梗塞造成的心肌损伤和制备用于这种治疗的合适的药物中的应用。
本发明的目的是提供新的药物制剂，这些药物对心肌梗塞病人的心肌状态产生有益的、促进康复和/或恢复的影响并因此适合于在心肌梗塞和/或心肌梗塞后的治疗范围内治疗心肌梗塞造成的心肌损伤。
按发明为制备治疗心肌梗塞造成的心肌损伤的药物制剂，应用式I的4-氯-5-[(4，5-二氢-1H-咪唑-2基)-氨基]-6-甲氧基-2-甲基嘧啶 及其生理相容的酸加合盐。
作为莫索尼定的生理相容的酸加合盐合适的是与无机酸，例如氢卤酸，或者与有机酸，例如低级脂肪族单-或二羧酸如乙酸、富马酸或酒石酸或芳族羧酸如水杨酸形成的盐。
按发明所用的化合物落入在德国专利申请Nr.28 49 537中描述的具有降血压性能的5-[(2-咪唑啉-2-基)-氨基]-嘧啶衍生物的范围内并是在该专利申请中已知的。商品名为Physiotens的包含莫索尼定的药物制品作为抗高血压药是可商购的并在医疗上用作抗高血压药。这些化合物可按上述专利申请中描述的已知的方法或者类似于这些方法制备。
令人吃惊地发现莫索尼定及其生理相容的酸加成盐对遭受心肌梗塞之后的心肌状态产生有益的、促进康复和/或恢复的影响并因此适合于在人类和较大的哺乳动物中治疗心肌梗塞造成的心肌损伤。
心肌梗塞一般应理解为由于区域性血液供应的持续性完全中断或关键性的减低造成的局部心肌区域坏死。除一般的治疗方法(镇痛和镇静、供氧、卧床及特种饮食)外，在急性心肌梗塞中尤其还采用血栓溶解及纤维蛋白溶解的治疗，目的在于，通过局部缺血区域尽可能多(首要的)的再灌注使局部缺血的心肌免于最后的细胞死亡(即最后的坏死)并因此将梗塞面积限制在尽可能小的区域。在急性心肌梗塞阶段和在心肌梗塞后应用其它(辅助的)方法可能有助于改善心肌状态，尤其是在梗塞的区域内。
本发明的为治疗心肌梗塞造成的心肌损伤而使用的化合物在这种情况下一般适合于在心肌梗塞治疗范围内应用。因此这些化合物可以在治疗急性心肌梗塞并且特别在心肌梗塞后的治疗范围内，既可以在已经进行了纤维蛋白溶解治疗的病人中又可以在没有进行这种溶解治疗的病人中使用。在进行了溶解治疗的梗塞后病人中本发明化合物对治疗特别也对预防形成心肌造成的心机能不全(心肌机能不全)有效。这也适用于那些已经用β-肾上腺素能受体阻断剂进行过治疗的病人。
没有进行溶解的梗塞后的病人转入心肌梗塞的慢性阶段。对于处于慢性阶段的梗塞后病人特别有意义的是交感神经系统(SNS)在心血管的调节中起重要的作用。交感神经的刺激是提高心脏喷射特别重要的机制，因为这一刺激既提高心肌收缩力又提高心率。此外，急性心肌梗塞导致SNS的激活以维持灌注压力及组织灌注。这种急性状态可发展成更慢性阶段，在这一阶段中交感神经的激活会导致未受伤害的心肌的肥大和重建(Remodeling)。但这一过程可能超过所希望的程度并且由于各种原因持续的SNS激活可能是有害的1)考虑到心脏机能不全的发展可认为中枢交感神经系统的慢性激活是不利的。在持续性肾上腺素能的刺激中会导致心脏上补偿性的肾上腺素能受体的减少。但这种免于长久提高儿茶酚胺水平的心脏保护机制的后果是心率和心力通过自主神经系统调节的严重损害。
2)SNS-刺激提高血管紧张并因此提高心脏的后持续(Nachlast)。
3)升高的、循环的儿茶酚胺水平引起心脏中病灶坏死并促进心的肥大的产生。
4)升高的血浆-儿茶酚胺水平促进心率的不利的提高和有生命危险的心率不齐的时而出现。
因此，阻止或禁止过强的交感神经激活可能是治疗心肌梗塞病人，特别也是预防性治疗心肌梗塞后心脏衰弱的发展有价值的策略。
现已令人惊奇地发现，本发明用于治疗心肌梗塞和/或心肌梗塞后所用的莫索尼定由于其对心肌梗塞病人，尤其是心肌梗塞后的病人在慢性阶段的心肌功能状态产生令人惊奇的、促进康复和/或恢复的、有益的影响而出众。在心肌梗塞后给以莫索尼定使心脏重量减少并降低交感神经的激活，通过血浆-去甲肾上腺素-水平测得。因此莫索尼定适合于减少心脏的过度肥大，特别是在心肌梗塞后病人的后期治疗阶段。此外，莫索尼定降低血浆-去甲肾上腺素-水平，由此极为有效的使心肌梗塞后交感神经刺激正常化。
为按发明治疗心肌梗塞引起的心肌损伤可口服、静注或也可经皮给以莫索尼定和其生理相容的酸加成盐的常规药物制剂。
因此，莫索尼定和其生理相容的酸加合盐可以促进心肌状态康复和/或恢复有效量与常用药物助剂和/或载体包含于固体或液体的药物制剂中。作为可制成直接或者缓慢释放活性物质的固体制剂的实例是可口服给药的制剂如片剂、糖衣药丸、胶囊剂、粉剂或颗粒剂，或者栓剂和膏药(经皮的治疗体系)。这些固体制剂除药物常用的助剂如润滑剂或片剂崩解剂外还可包含药物常用的无机和/或有机载体，如乳糖、滑石或淀粉。若为膏药，将活性物质置于活性物质储存介质，尤其是例如活性物质基质(如聚合物基质)中。流体制剂如活性物质的溶液、悬浮液或乳液可包含常用的稀释剂如水、油和/或悬浮剂如聚乙二醇等等。此外，还可向这些制剂中加入其它助剂，如防腐剂、调味剂等。
活性物质可与药物助剂和/或载体按本来已知的方式混合和配制。为制备固体药物，可将活性物质例如与药物助剂和/或载体按本来已知的方式混合并湿或干制粒。粒剂或粉剂可被直接装入胶囊中或按本来已知的方式压成片核。片核在需要的情况下可按已知的方式进行包衣。膏药及经皮的治疗体系可按常用方式如用覆盖膜、活性物质介质(自粘的或带有附加的粘附层)和抽去膜或者建立基质调节的或者建立膜调节(即涂以附加的控释膜)的体系。
试验描述和结果莫索尼定在心肌梗塞尤其是心肌梗塞后的治疗中的有益作用可在标准试验中通过测定测试物质对那些影响经历心肌梗塞后心肌的功能状态的因素的作用的药理学表征来证明。对证明特别是在心肌梗塞的慢性阶段影响心肌的功能状态的因素的作用合适的动物模型是例如有慢性心肌梗塞(MI)的Wister-大鼠。
用这一动物模型(MI-大鼠)发现血浆去甲肾上腺素水平在心肌梗塞后急剧上升。在心脏机能不全的病情加重阶段血浆去甲肾上腺素水平会继续上升。细心的MI-大鼠试验能看出甚至梗塞三周后，即在所谓的恢复阶段后仍显示出心率提高(体内非限制的状态测定，醒着的大鼠)，同时剩余的血浆去甲肾上腺素水平还比假大鼠高出约50％(见下文假动过手术的大鼠，没有结扎冠状动脉)。此外在这种动物的中枢神经系统中在脑室旁的下丘脑和蓝斑中观察到升高的代谢，在其中的交感神经对周围系统作用被调节。行为研究表明在梗塞大鼠中恐惧感升高。因此这些观察结果表明在这种梗塞大鼠模型中存在缓慢升高的交感神经活化。
试验动物和剂量下列试验是在雄性Wister大鼠(270-320克，Harlan Zeist，荷兰)上进行的。这些大鼠用12小时照明/黑暗循环并用标准大鼠饲料和水(都可随意获取)饲养。这些动物将经受冠状动脉结扎(MI-大鼠)或者未结扎的假手术(假-大鼠)。24小时后将MI-大鼠随机分开，然后移植渗透微泵(Alzet，型号2001)，以按每千克每天3或6毫克的剂量皮下给以莫索尼定或只给以赋型剂。莫索尼定治疗将连续进行直到手术后第三个周末。
冠状动脉结扎在戊巴比妥麻醉(60m/kg，i.p.)下进行左前下行冠状动脉结扎。简而言之在气管插管后在第四肋间区做一皮肤切口。将平滑肌分开并固定到一边。然后对动物进行正压换气(频率65-70/分钟，活塞排气量3ml)并且其胸腔通过分开肋间肌肉而打开。打开心包，心脏就地保持并用6-0丝线在左冠状动脉下侧在肺动脉开始的附近缝合。将缝拉紧。假大鼠也进行相同的过程，但不进行真正的结扎。将肋骨用3-0丝线集中到一起，然后将肌肉恢复原位并缝合皮肤。
血液样品的准备和采集在使冠状动脉结扎的外科手术后19天重新用戊巴比妥将大鼠麻醉，并将一根导管(PE-10，用PE-50热焊接)经股动脉插到腹部主动脉。将该导管从皮下引导至动物脖颈，让它从那里向外穿出并将其固定并封闭。让大鼠休息两天。在取样品那天用一根肝素处理的、充满盐水的软管将导管加长并在至少60分钟后取2个1毫升的血样。将血液收集在预冷却的样品小瓶(注射器)中，里面含有10μl EDTA(0.1M)。离心后将血浆收集到预冷的、装有或者1.2毫克Gluthation或者10μl抑肽酶(100KIU；KIU＝千国际单位)的小管中，以测定儿茶酚胺或前房的促尿钠排泄因子(ANF)。将小管在-80℃保存。去甲肾上腺素的血浆浓度、肾上腺素和多巴胺将通过HPLC测定，同时在另一方面用RIA-试验分析ANF的浓度。
心的胶原蛋白的测定随机从每个实验组中选取6到7个心脏测定间质胶原蛋白的量。为此通过灌注3.6％重量的磷酸盐缓冲的甲醛固定心脏。在除去心房和大血管后，将心室从心尖开始到心底切成4片并至少在甲醛中保存切片24小时。固定后将切片脱水并包入石蜡中。将去掉石蜡的5μm薄片用0.2％重量/体积的磷钼酸水溶液温育5分钟，然后用0.1％重量的天狼星红F3BA(Polysciencies Inc.公司，Northampton，英国)的饱和三硝基苯酚溶液温育45分钟，然后用0.01M的盐酸洗涤2分钟，去水，并为了显微镜检测包入Entellan(Merk公司，Darmstadt，德国)中。除去梗塞区域，在心室间的隔膜作为天狼星红阳性区域在40倍的放大倍数下测定每个心脏的间质胶原蛋白。
数据处理若无另外说明，所得数据用组平均值±S.E.M.(标准平均偏差)表示。只处理带包含左心室自由心壁的主要部分的梗塞区域的梗塞心脏的数据，因为较小的梗塞区域通常在血液动力学上被全部代偿。通过“变量的单向分析(Einweganalyse)(ANOVA)”，随后按照Bonferroni的post-hoc-Analyse分析这些数据。在莫索尼定治疗过的和未治疗过的梗塞心脏中血管的结构参数的差别用学生t试验(Student’st-Test)对两组分别确定。
结果对4组大鼠进行了研究两组为莫索尼定治疗过的梗塞大鼠(每千克每天的剂量为3和6毫克)，一组未治疗过的梗塞大鼠和一组假手术对照大鼠(假大鼠)。冠状动脉结扎产生左心室自由心壁主梗塞。试验动物的总死亡率为29％并且在两组梗塞大鼠之间没有区别。在每千克每日的剂量为6毫克的组中5只大鼠的数据必须除外，因为它们显示的梗塞区域太小。将每千克每日的剂量为6毫克和每千克每日的剂量为3毫克的试验的结果概括于表1中并将在随后说明。在表1中给出的结果包含每组大鼠为7-14只的组数据，胶原蛋白测定除外，其数据是基于每组大鼠为6-7只的数据。
尽管实验动物在试验开始时体重近似，但莫索尼定治疗的梗塞大鼠与未治疗的梗塞大鼠相比显示出微小的体重降低，但与假-大鼠相比体重明显下降。莫索尼定治疗的梗塞大鼠的心脏重量明显低于未治疗的梗塞大鼠。在约每千克每日3到6毫克的剂量范围内这一作用是剂量依赖性的(见表1)。从这些数据得出的结论是给以莫索尼定阻止过度的心肌肥大。
根据血浆-去甲肾上腺素水平和ANF水平测得的神经递质的活性在未治疗的梗塞大鼠中明显升高。用莫索尼定治疗的大鼠的ANF-血浆水平与未治疗的梗塞大鼠相比没有变化。通过莫索尼定治疗使血浆去甲肾上腺素水平降低到约为对假大鼠测得的血浆去甲肾上腺素水平的一半。
在未治疗的梗塞大鼠中测得的血浆去甲肾上腺素水平明显升高而且高达假大鼠测定值的三倍。通过在每千克每日6毫克的组中用莫索尼定治疗，血浆去甲肾上腺素水平降低到几乎是假大鼠值的一半。在每千克每日3毫克的组中血浆去甲肾上腺素水平明显下降。这表明每千克每日3或6毫克的莫索尼定能在大鼠心肌梗塞后有效降低交感神经的活化。
对于每千克每日3和6毫克的组，从表1中同样可获得心的胶原蛋白的测定结果。
在醒着的动物中测得的心率为梗塞大鼠比假大鼠明显升高。给以莫索尼定不仅降低心动过速，而且经过治疗的梗塞大鼠与假大鼠相比显示出心脏活动变慢(心动徐缓)。
表1假手术对照动物(SHAM)、未治疗梗塞大鼠(INFARKT)和莫索尼定治疗的梗塞大鼠(INF＋MOX)的试验结果；剂量为每千克每日3毫克和每千克每日6毫克。
缩写MPA＝平均动脉血压；NA＝去甲肾上腺素ANF＝动脉促尿钠排泄因子*＝与假-大鼠明显不同#＝与未治疗的梗塞大鼠明显不同这些试验结果清楚地表明，在心肌梗塞治疗范围内尤其是在心肌梗塞后的治疗范围内通过给以莫索尼定对心肌的功能状态产生了有益的影响。从测得的血浆儿茶酚胺水平可以看出莫索尼定能有效地使心肌梗塞大鼠的交感神经活化正常。这些结果可通过心率数据(体内，在醒着的大鼠上测得)证明，因为在莫索尼定治疗的大鼠中心率甚至低于假-大鼠的心率值。这可能更是归因于莫索尼定的慢性作用而不是急性作用，因为在急性治疗中心率的降低伴随着动脉血压平均值的上升，这种情况在缓慢治疗中没有观察到。考虑到莫索尼定复杂的作用，虽然测得的心脏重/体重比(肥大)的积极效果看起来不显著并且间质的胶原蛋白的测定最多能推断出小的重建(Remodeling)效应，但这些结果表明莫索尼定对心的肥大和不希望的重建有明显的预防作用趋势。
因此上述的试验结果表明，莫索尼定及其酸加成盐对经受心肌梗塞后的心肌状态产生有益的、促进康复和/或恢复的影响并因此适合于在人类和大的哺乳动物中、在治疗急性心肌梗塞的范围内并且特别是也在心肌梗塞后的治疗范围内治疗心肌梗塞造成的心肌损伤。此外，考虑到心肌梗塞后心脏衰弱的进行，莫索尼定特别能在心肌梗塞后的治疗范围内也起到预防作用。莫索尼定及其酸加成盐的应用剂量可依个别情况而异并自然随要治疗的状态的类型和给药形式而变。一般对人类心肌梗塞治疗或心肌梗塞后的治疗口服的日剂量为0.05到5毫克，优选0.25到3毫克。在这种情况下在药物制剂中的莫索尼定及其酸加成盐既可用于活性物质的快速给药也可用于缓释和/或控释给药。对此专业人员能够领会到活性成分的缓释和/或控释制剂比用于活性成分快速释放的制剂可含有较高的活性物质含量。
下列实施例用于进一步说明用于心肌梗塞和/或心肌梗塞后的治疗的合适的、包含莫索尼定的药物制剂的制备，但这些实施例不限制本申请的范围。
实施例1含莫索尼定的薄膜包衣片组成片核莫索尼定 0.025份乳糖 9.575份聚乙烯吡咯烷酮USP0.070份聚乙烯聚吡咯烷酮USP 0.300份硬脂酸镁 0.030份(水 0.750份)固体物质总量 10.000份薄膜包衣羟丙基甲基纤维素 0.156份30％的乙基纤维素水悬浮液0.480份(＝固体物质)(0.144)份聚乙二醇60000.030份二氧化钛0.150份滑石0.1197份红色氧化铁 0.0003份(水 3.864份固体物质总量0.600份薄膜包衣悬浮液总量 4.800份为包衣10,000片核(每片100mg)，加入4.8千克上述薄膜包衣悬浮液。
片核的制备将莫索尼定与乳糖混合，用粘合剂聚乙烯吡咯烷酮的水溶液将该混合物湿透并充分捏合，将所得产品摊到架子上并在约50℃下干燥至水分含量最高为0.5％。将干燥后的产品过0.75mm筛(Frewitt-Maschine)。将所得粒状物与聚乙烯聚吡咯烷酮和硬脂酸镁混合并压成100毫克的片核，因此每个片核含有0.25毫克活性物质。
薄膜包衣悬浮液的制备将羟丙基甲基纤维素和聚乙二醇6000溶于部分水中，在搅拌下向该溶液中加入滑石、二氧化钛及氧化铁在其余水中的悬浮液。在轻轻搅拌下用30％的乙基纤维素水悬浮液稀释所得悬浮液。
片核的薄膜包衣向于涂膜设备中的片核上喷射薄膜包衣悬浮液，同时用约70℃的热空气将片核加热到约45℃。然后在约45℃下干燥薄膜包衣片16小时。
权利要求
1.式I的4-氯-5-[(4，5-二氢-1H-咪唑-2-基)-氨基]-6-甲氧基-2-甲基嘧啶和其生理相容的酸加合盐在制备治疗心肌梗塞造成的心肌损伤的药物中的应用
2.按照权利要求1的应用，其特征在于将按照权利要求1的式I化合物或其生理相容的酸加合盐用于制备在急性心肌梗塞和/或心肌梗塞后的治疗中治疗心肌梗塞造成的心肌损伤的药物。
3.按照权利要求2的应用，其特征在于将按照权利要求1的式I化合物或其生理相容的酸加合盐用于制备在慢性的心肌梗塞后的治疗中治疗心肌梗塞造成的心肌损伤的药物。
4.制备治疗心肌梗塞造成的心肌损伤的药物的方法，其特征在于将促进心肌状态康复和/或恢复有效量的按照权利要求1的式I化合物或其生理相容的酸加合盐与常用药物助剂一起制成合适的药物剂型。
全文摘要
本发明涉及莫索尼定及其生理相容的酸加成盐在制备治疗心肌梗塞造成心肌损伤的药物制剂中的应用。含有莫索尼定和莫索尼定的生理相容的酸加成盐的药物制剂适合用于急性心肌梗塞和/或心肌梗塞后的治疗。
文档编号A61K31/506GK1338938SQ00803244
公开日2002年3月6日 申请日期2000年1月28日 优先权日1999年2月1日
发明者R·G·舒伊马克 申请人:索尔瓦药物有限公司
发明描述本发明涉及4-氯-5-[(4，5-二氢-1H-咪唑-2基)-氨基]-6-甲氧基-2-甲基嘧啶(＝莫索尼定)和其生理相容的酸加合盐用于治疗心肌梗塞造成的心肌损伤和制备用于这种治疗的合适的药物中的应用。
本发明的目的是提供新的药物制剂，这些药物对心肌梗塞病人的心肌状态产生有益的、促进康复和/或恢复的影响并因此适合于在心肌梗塞和/或心肌梗塞后的治疗范围内治疗心肌梗塞造成的心肌损伤。
按发明为制备治疗心肌梗塞造成的心肌损伤的药物制剂，应用式I的4-氯-5-[(4，5-二氢-1H-咪唑-2基)-氨基]-6-甲氧基-2-甲基嘧啶 及其生理相容的酸加合盐。
作为莫索尼定的生理相容的酸加合盐合适的是与无机酸，例如氢卤酸，或者与有机酸，例如低级脂肪族单-或二羧酸如乙酸、富马酸或酒石酸或芳族羧酸如水杨酸形成的盐。
按发明所用的化合物落入在德国专利申请Nr.28 49 537中描述的具有降血压性能的5-[(2-咪唑啉-2-基)-氨基]-嘧啶衍生物的范围内并是在该专利申请中已知的。商品名为Physiotens的包含莫索尼定的药物制品作为抗高血压药是可商购的并在医疗上用作抗高血压药。这些化合物可按上述专利申请中描述的已知的方法或者类似于这些方法制备。
令人吃惊地发现莫索尼定及其生理相容的酸加成盐对遭受心肌梗塞之后的心肌状态产生有益的、促进康复和/或恢复的影响并因此适合于在人类和较大的哺乳动物中治疗心肌梗塞造成的心肌损伤。
心肌梗塞一般应理解为由于区域性血液供应的持续性完全中断或关键性的减低造成的局部心肌区域坏死。除一般的治疗方法(镇痛和镇静、供氧、卧床及特种饮食)外，在急性心肌梗塞中尤其还采用血栓溶解及纤维蛋白溶解的治疗，目的在于，通过局部缺血区域尽可能多(首要的)的再灌注使局部缺血的心肌免于最后的细胞死亡(即最后的坏死)并因此将梗塞面积限制在尽可能小的区域。在急性心肌梗塞阶段和在心肌梗塞后应用其它(辅助的)方法可能有助于改善心肌状态，尤其是在梗塞的区域内。
本发明的为治疗心肌梗塞造成的心肌损伤而使用的化合物在这种情况下一般适合于在心肌梗塞治疗范围内应用。因此这些化合物可以在治疗急性心肌梗塞并且特别在心肌梗塞后的治疗范围内，既可以在已经进行了纤维蛋白溶解治疗的病人中又可以在没有进行这种溶解治疗的病人中使用。在进行了溶解治疗的梗塞后病人中本发明化合物对治疗特别也对预防形成心肌造成的心机能不全(心肌机能不全)有效。这也适用于那些已经用β-肾上腺素能受体阻断剂进行过治疗的病人。
没有进行溶解的梗塞后的病人转入心肌梗塞的慢性阶段。对于处于慢性阶段的梗塞后病人特别有意义的是交感神经系统(SNS)在心血管的调节中起重要的作用。交感神经的刺激是提高心脏喷射特别重要的机制，因为这一刺激既提高心肌收缩力又提高心率。此外，急性心肌梗塞导致SNS的激活以维持灌注压力及组织灌注。这种急性状态可发展成更慢性阶段，在这一阶段中交感神经的激活会导致未受伤害的心肌的肥大和重建(Remodeling)。但这一过程可能超过所希望的程度并且由于各种原因持续的SNS激活可能是有害的1)考虑到心脏机能不全的发展可认为中枢交感神经系统的慢性激活是不利的。在持续性肾上腺素能的刺激中会导致心脏上补偿性的肾上腺素能受体的减少。但这种免于长久提高儿茶酚胺水平的心脏保护机制的后果是心率和心力通过自主神经系统调节的严重损害。
2)SNS-刺激提高血管紧张并因此提高心脏的后持续(Nachlast)。
3)升高的、循环的儿茶酚胺水平引起心脏中病灶坏死并促进心的肥大的产生。
4)升高的血浆-儿茶酚胺水平促进心率的不利的提高和有生命危险的心率不齐的时而出现。
因此，阻止或禁止过强的交感神经激活可能是治疗心肌梗塞病人，特别也是预防性治疗心肌梗塞后心脏衰弱的发展有价值的策略。
现已令人惊奇地发现，本发明用于治疗心肌梗塞和/或心肌梗塞后所用的莫索尼定由于其对心肌梗塞病人，尤其是心肌梗塞后的病人在慢性阶段的心肌功能状态产生令人惊奇的、促进康复和/或恢复的、有益的影响而出众。在心肌梗塞后给以莫索尼定使心脏重量减少并降低交感神经的激活，通过血浆-去甲肾上腺素-水平测得。因此莫索尼定适合于减少心脏的过度肥大，特别是在心肌梗塞后病人的后期治疗阶段。此外，莫索尼定降低血浆-去甲肾上腺素-水平，由此极为有效的使心肌梗塞后交感神经刺激正常化。
为按发明治疗心肌梗塞引起的心肌损伤可口服、静注或也可经皮给以莫索尼定和其生理相容的酸加成盐的常规药物制剂。
因此，莫索尼定和其生理相容的酸加合盐可以促进心肌状态康复和/或恢复有效量与常用药物助剂和/或载体包含于固体或液体的药物制剂中。作为可制成直接或者缓慢释放活性物质的固体制剂的实例是可口服给药的制剂如片剂、糖衣药丸、胶囊剂、粉剂或颗粒剂，或者栓剂和膏药(经皮的治疗体系)。这些固体制剂除药物常用的助剂如润滑剂或片剂崩解剂外还可包含药物常用的无机和/或有机载体，如乳糖、滑石或淀粉。若为膏药，将活性物质置于活性物质储存介质，尤其是例如活性物质基质(如聚合物基质)中。流体制剂如活性物质的溶液、悬浮液或乳液可包含常用的稀释剂如水、油和/或悬浮剂如聚乙二醇等等。此外，还可向这些制剂中加入其它助剂，如防腐剂、调味剂等。
活性物质可与药物助剂和/或载体按本来已知的方式混合和配制。为制备固体药物，可将活性物质例如与药物助剂和/或载体按本来已知的方式混合并湿或干制粒。粒剂或粉剂可被直接装入胶囊中或按本来已知的方式压成片核。片核在需要的情况下可按已知的方式进行包衣。膏药及经皮的治疗体系可按常用方式如用覆盖膜、活性物质介质(自粘的或带有附加的粘附层)和抽去膜或者建立基质调节的或者建立膜调节(即涂以附加的控释膜)的体系。
试验描述和结果莫索尼定在心肌梗塞尤其是心肌梗塞后的治疗中的有益作用可在标准试验中通过测定测试物质对那些影响经历心肌梗塞后心肌的功能状态的因素的作用的药理学表征来证明。对证明特别是在心肌梗塞的慢性阶段影响心肌的功能状态的因素的作用合适的动物模型是例如有慢性心肌梗塞(MI)的Wister-大鼠。
用这一动物模型(MI-大鼠)发现血浆去甲肾上腺素水平在心肌梗塞后急剧上升。在心脏机能不全的病情加重阶段血浆去甲肾上腺素水平会继续上升。细心的MI-大鼠试验能看出甚至梗塞三周后，即在所谓的恢复阶段后仍显示出心率提高(体内非限制的状态测定，醒着的大鼠)，同时剩余的血浆去甲肾上腺素水平还比假大鼠高出约50％(见下文假动过手术的大鼠，没有结扎冠状动脉)。此外在这种动物的中枢神经系统中在脑室旁的下丘脑和蓝斑中观察到升高的代谢，在其中的交感神经对周围系统作用被调节。行为研究表明在梗塞大鼠中恐惧感升高。因此这些观察结果表明在这种梗塞大鼠模型中存在缓慢升高的交感神经活化。
试验动物和剂量下列试验是在雄性Wister大鼠(270-320克，Harlan Zeist，荷兰)上进行的。这些大鼠用12小时照明/黑暗循环并用标准大鼠饲料和水(都可随意获取)饲养。这些动物将经受冠状动脉结扎(MI-大鼠)或者未结扎的假手术(假-大鼠)。24小时后将MI-大鼠随机分开，然后移植渗透微泵(Alzet，型号2001)，以按每千克每天3或6毫克的剂量皮下给以莫索尼定或只给以赋型剂。莫索尼定治疗将连续进行直到手术后第三个周末。
冠状动脉结扎在戊巴比妥麻醉(60m/kg，i.p.)下进行左前下行冠状动脉结扎。简而言之在气管插管后在第四肋间区做一皮肤切口。将平滑肌分开并固定到一边。然后对动物进行正压换气(频率65-70/分钟，活塞排气量3ml)并且其胸腔通过分开肋间肌肉而打开。打开心包，心脏就地保持并用6-0丝线在左冠状动脉下侧在肺动脉开始的附近缝合。将缝拉紧。假大鼠也进行相同的过程，但不进行真正的结扎。将肋骨用3-0丝线集中到一起，然后将肌肉恢复原位并缝合皮肤。
血液样品的准备和采集在使冠状动脉结扎的外科手术后19天重新用戊巴比妥将大鼠麻醉，并将一根导管(PE-10，用PE-50热焊接)经股动脉插到腹部主动脉。将该导管从皮下引导至动物脖颈，让它从那里向外穿出并将其固定并封闭。让大鼠休息两天。在取样品那天用一根肝素处理的、充满盐水的软管将导管加长并在至少60分钟后取2个1毫升的血样。将血液收集在预冷却的样品小瓶(注射器)中，里面含有10μl EDTA(0.1M)。离心后将血浆收集到预冷的、装有或者1.2毫克Gluthation或者10μl抑肽酶(100KIU；KIU＝千国际单位)的小管中，以测定儿茶酚胺或前房的促尿钠排泄因子(ANF)。将小管在-80℃保存。去甲肾上腺素的血浆浓度、肾上腺素和多巴胺将通过HPLC测定，同时在另一方面用RIA-试验分析ANF的浓度。
心的胶原蛋白的测定随机从每个实验组中选取6到7个心脏测定间质胶原蛋白的量。为此通过灌注3.6％重量的磷酸盐缓冲的甲醛固定心脏。在除去心房和大血管后，将心室从心尖开始到心底切成4片并至少在甲醛中保存切片24小时。固定后将切片脱水并包入石蜡中。将去掉石蜡的5μm薄片用0.2％重量/体积的磷钼酸水溶液温育5分钟，然后用0.1％重量的天狼星红F3BA(Polysciencies Inc.公司，Northampton，英国)的饱和三硝基苯酚溶液温育45分钟，然后用0.01M的盐酸洗涤2分钟，去水，并为了显微镜检测包入Entellan(Merk公司，Darmstadt，德国)中。除去梗塞区域，在心室间的隔膜作为天狼星红阳性区域在40倍的放大倍数下测定每个心脏的间质胶原蛋白。
数据处理若无另外说明，所得数据用组平均值±S.E.M.(标准平均偏差)表示。只处理带包含左心室自由心壁的主要部分的梗塞区域的梗塞心脏的数据，因为较小的梗塞区域通常在血液动力学上被全部代偿。通过“变量的单向分析(Einweganalyse)(ANOVA)”，随后按照Bonferroni的post-hoc-Analyse分析这些数据。在莫索尼定治疗过的和未治疗过的梗塞心脏中血管的结构参数的差别用学生t试验(Student’st-Test)对两组分别确定。
结果对4组大鼠进行了研究两组为莫索尼定治疗过的梗塞大鼠(每千克每天的剂量为3和6毫克)，一组未治疗过的梗塞大鼠和一组假手术对照大鼠(假大鼠)。冠状动脉结扎产生左心室自由心壁主梗塞。试验动物的总死亡率为29％并且在两组梗塞大鼠之间没有区别。在每千克每日的剂量为6毫克的组中5只大鼠的数据必须除外，因为它们显示的梗塞区域太小。将每千克每日的剂量为6毫克和每千克每日的剂量为3毫克的试验的结果概括于表1中并将在随后说明。在表1中给出的结果包含每组大鼠为7-14只的组数据，胶原蛋白测定除外，其数据是基于每组大鼠为6-7只的数据。
尽管实验动物在试验开始时体重近似，但莫索尼定治疗的梗塞大鼠与未治疗的梗塞大鼠相比显示出微小的体重降低，但与假-大鼠相比体重明显下降。莫索尼定治疗的梗塞大鼠的心脏重量明显低于未治疗的梗塞大鼠。在约每千克每日3到6毫克的剂量范围内这一作用是剂量依赖性的(见表1)。从这些数据得出的结论是给以莫索尼定阻止过度的心肌肥大。
根据血浆-去甲肾上腺素水平和ANF水平测得的神经递质的活性在未治疗的梗塞大鼠中明显升高。用莫索尼定治疗的大鼠的ANF-血浆水平与未治疗的梗塞大鼠相比没有变化。通过莫索尼定治疗使血浆去甲肾上腺素水平降低到约为对假大鼠测得的血浆去甲肾上腺素水平的一半。
在未治疗的梗塞大鼠中测得的血浆去甲肾上腺素水平明显升高而且高达假大鼠测定值的三倍。通过在每千克每日6毫克的组中用莫索尼定治疗，血浆去甲肾上腺素水平降低到几乎是假大鼠值的一半。在每千克每日3毫克的组中血浆去甲肾上腺素水平明显下降。这表明每千克每日3或6毫克的莫索尼定能在大鼠心肌梗塞后有效降低交感神经的活化。
对于每千克每日3和6毫克的组，从表1中同样可获得心的胶原蛋白的测定结果。
在醒着的动物中测得的心率为梗塞大鼠比假大鼠明显升高。给以莫索尼定不仅降低心动过速，而且经过治疗的梗塞大鼠与假大鼠相比显示出心脏活动变慢(心动徐缓)。
表1假手术对照动物(SHAM)、未治疗梗塞大鼠(INFARKT)和莫索尼定治疗的梗塞大鼠(INF＋MOX)的试验结果；剂量为每千克每日3毫克和每千克每日6毫克。
缩写MPA＝平均动脉血压；NA＝去甲肾上腺素ANF＝动脉促尿钠排泄因子*＝与假-大鼠明显不同#＝与未治疗的梗塞大鼠明显不同这些试验结果清楚地表明，在心肌梗塞治疗范围内尤其是在心肌梗塞后的治疗范围内通过给以莫索尼定对心肌的功能状态产生了有益的影响。从测得的血浆儿茶酚胺水平可以看出莫索尼定能有效地使心肌梗塞大鼠的交感神经活化正常。这些结果可通过心率数据(体内，在醒着的大鼠上测得)证明，因为在莫索尼定治疗的大鼠中心率甚至低于假-大鼠的心率值。这可能更是归因于莫索尼定的慢性作用而不是急性作用，因为在急性治疗中心率的降低伴随着动脉血压平均值的上升，这种情况在缓慢治疗中没有观察到。考虑到莫索尼定复杂的作用，虽然测得的心脏重/体重比(肥大)的积极效果看起来不显著并且间质的胶原蛋白的测定最多能推断出小的重建(Remodeling)效应，但这些结果表明莫索尼定对心的肥大和不希望的重建有明显的预防作用趋势。
因此上述的试验结果表明，莫索尼定及其酸加成盐对经受心肌梗塞后的心肌状态产生有益的、促进康复和/或恢复的影响并因此适合于在人类和大的哺乳动物中、在治疗急性心肌梗塞的范围内并且特别是也在心肌梗塞后的治疗范围内治疗心肌梗塞造成的心肌损伤。此外，考虑到心肌梗塞后心脏衰弱的进行，莫索尼定特别能在心肌梗塞后的治疗范围内也起到预防作用。莫索尼定及其酸加成盐的应用剂量可依个别情况而异并自然随要治疗的状态的类型和给药形式而变。一般对人类心肌梗塞治疗或心肌梗塞后的治疗口服的日剂量为0.05到5毫克，优选0.25到3毫克。在这种情况下在药物制剂中的莫索尼定及其酸加成盐既可用于活性物质的快速给药也可用于缓释和/或控释给药。对此专业人员能够领会到活性成分的缓释和/或控释制剂比用于活性成分快速释放的制剂可含有较高的活性物质含量。
下列实施例用于进一步说明用于心肌梗塞和/或心肌梗塞后的治疗的合适的、包含莫索尼定的药物制剂的制备，但这些实施例不限制本申请的范围。
实施例1含莫索尼定的薄膜包衣片组成片核莫索尼定 0.025份乳糖 9.575份聚乙烯吡咯烷酮USP0.070份聚乙烯聚吡咯烷酮USP 0.300份硬脂酸镁 0.030份(水 0.750份)固体物质总量 10.000份薄膜包衣羟丙基甲基纤维素 0.156份30％的乙基纤维素水悬浮液0.480份(＝固体物质)(0.144)份聚乙二醇60000.030份二氧化钛0.150份滑石0.1197份红色氧化铁 0.0003份(水 3.864份固体物质总量0.600份薄膜包衣悬浮液总量 4.800份为包衣10,000片核(每片100mg)，加入4.8千克上述薄膜包衣悬浮液。
片核的制备将莫索尼定与乳糖混合，用粘合剂聚乙烯吡咯烷酮的水溶液将该混合物湿透并充分捏合，将所得产品摊到架子上并在约50℃下干燥至水分含量最高为0.5％。将干燥后的产品过0.75mm筛(Frewitt-Maschine)。将所得粒状物与聚乙烯聚吡咯烷酮和硬脂酸镁混合并压成100毫克的片核，因此每个片核含有0.25毫克活性物质。
薄膜包衣悬浮液的制备将羟丙基甲基纤维素和聚乙二醇6000溶于部分水中，在搅拌下向该溶液中加入滑石、二氧化钛及氧化铁在其余水中的悬浮液。在轻轻搅拌下用30％的乙基纤维素水悬浮液稀释所得悬浮液。
片核的薄膜包衣向于涂膜设备中的片核上喷射薄膜包衣悬浮液，同时用约70℃的热空气将片核加热到约45℃。然后在约45℃下干燥薄膜包衣片16小时。
权利要求
1.式I的4-氯-5-[(4，5-二氢-1H-咪唑-2-基)-氨基]-6-甲氧基-2-甲基嘧啶和其生理相容的酸加合盐在制备治疗心肌梗塞造成的心肌损伤的药物中的应用
2.按照权利要求1的应用，其特征在于将按照权利要求1的式I化合物或其生理相容的酸加合盐用于制备在急性心肌梗塞和/或心肌梗塞后的治疗中治疗心肌梗塞造成的心肌损伤的药物。
3.按照权利要求2的应用，其特征在于将按照权利要求1的式I化合物或其生理相容的酸加合盐用于制备在慢性的心肌梗塞后的治疗中治疗心肌梗塞造成的心肌损伤的药物。
4.制备治疗心肌梗塞造成的心肌损伤的药物的方法，其特征在于将促进心肌状态康复和/或恢复有效量的按照权利要求1的式I化合物或其生理相容的酸加合盐与常用药物助剂一起制成合适的药物剂型。
全文摘要
本发明涉及莫索尼定及其生理相容的酸加成盐在制备治疗心肌梗塞造成心肌损伤的药物制剂中的应用。含有莫索尼定和莫索尼定的生理相容的酸加成盐的药物制剂适合用于急性心肌梗塞和/或心肌梗塞后的治疗。
文档编号A61K31/506GK1338938SQ00803244
公开日2002年3月6日 申请日期2000年1月28日 优先权日1999年2月1日
发明者R·G·舒伊马克 申请人:索尔瓦药物有限公司
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