半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒的制备方法
专利名称：半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒的制备方法
技术领域：
本发明涉及一种对肝癌基因治疗药品纳米颗粒的制备方法。
背景技术：
原发性肝癌是世界最流行的恶性肿瘤之一，目前临床常规治疗，手术切除率低，化疗靶向性差，毒副作用明显。近年来，尽管基因治疗在基础研究方面取得很多成绩，然而临床试验的结果尚不令人满意。由于早期诊断水平的提高，使肝癌的手术切除率较过去有明显的提高，但术后易复发。复发的主要原因之一，是术后肝脏残留有许多微小的癌灶。针对这些微小癌灶进行化疗，不但难以获得满意的疗效，且不能消除化疗药物对正常细胞的毒性。
发明内容
本发明的目的，是要提供一种化疗靶向性好，毒副作用小的肝癌基因治疗药品——半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒的制备方法。
本发明的技术方案是预制备好半乳糖化白蛋白，将阿霉素、半乳糖化白蛋白、磁粉按一定比例混合，通过在精制棉籽油中超声乳化、加热变性固化、乙醚洗涤等工艺制出载药纳米粒。
本发明将半乳糖残基偶联到载药纳米粒的表面，形成半乳糖化纳米粒，具有主动与被动双重靶向性，实现更高程度的药物肝靶向。将磁性白蛋白阿霉素纳米粒加上半乳糖基修饰，更增强磁性白蛋白阿霉素纳米粒的靶向性。
具体实施例方式
下面结合实施例具体介绍本发明。
设制备一份本发明的半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒，先准备好棉籽油和纳米磁粉。
棉籽油的精制将市售棉籽油加热至少30～50℃，边搅拌边加入NaOH，使游离脂肪充分皂化，加热至60～70℃，维持30min，使皂化完全，过滤除去生成的皂脂，留存油液。油液在搅拌下加热至50℃，加入适量活性炭，加热至80℃，维持0.5小时，趁热过滤除去脱色剂，留存油液加入适量无水CaCl2，静置过夜，过滤除去颗粒，得所需棉籽油。
纳米磁粉的制备称取0.85g FeCl3·6H2O(3.1mol)、0.3g FeCl2·4H2O(1.5mol)，在氮气保护下，溶于200ml 0。1％吐温80溶液中。在强力搅拌下，将1.5ml/L NH4OH缓慢加入铁盐混合溶液中，至PH＝8，使水解趋于完全，用磁铁从溶液中分离出黑色Fe3O4晶体。用蒸馏水洗涤3次，然后分散于20ml蒸馏水中。
半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒的制备将预制备的磁粉超声处理2分钟，称取磁粉900mg，取半乳糖化白蛋白200mg用0.5ml双蒸水溶解，取阿霉素10mg用0.5ml双蒸水溶解，混合均匀，加入到15ml精制棉籽油中，4℃下超声乳化10分钟。分散均匀后，在电动机转速2000r/m搅拌下，以每分钟100滴的速度加入预热至120℃的50ml精制棉籽油中，维持恒温及转速继续反应20分钟，迅速冷却至室温，加入30ml乙醚，置于离心机中，以3000r/m的速度离心15分钟，弃去上清液，反复洗涤4次，4℃下凉干，即得本发明半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒。
权利要求
1.一种半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒的制备方法，设制备一份本发明的半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒，先准备好棉籽油和纳米磁粉，其步骤是a、将市售棉籽油加热至少30～50℃，边搅拌边加入NaOH，使游离脂肪充分皂化，加热至60～70℃，维持30min，使皂化完全，过滤除去生成的皂脂，留存油液；油液在搅拌下加热至50℃，加入适量活性炭，加热至80℃，维持0.5小时，趁热过滤除去脱色剂，留存油液加入适量无水CaCl2，静置过夜，过滤除去颗粒，得所需棉籽油；b、称取0.85g FeCl3·6H2O(3.1mol)、0.3g FeCl2·4H2O，在氮气保护下，溶于200ml 0.1％吐温80溶液中；在强力搅拌下，将1.5ml/L NH4OH缓慢加入铁盐混合溶液中，至PH＝8，使水解趋于完全，用磁铁从溶液中分离出黑色Fe3O4晶体，用蒸馏水洗涤3次，然后分散于20ml蒸馏水中；c、半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒的制备将预制备的磁粉超声处理2分钟，称取磁粉900mg，取半乳糖化白蛋白200mg用0.5ml双蒸水溶解，取阿霉素10mg用0.5ml双蒸水溶解，混合均匀，加入到15ml精制棉籽油中，4℃下超声乳化10分钟，分散均匀后，以电动机转速2000r/m搅拌下，以每分钟100滴的速度加入预热至120℃的50ml精制棉籽油中，维持恒温及转速继续反应20分钟，迅速冷却至室温，加入30ml乙醚，置于离心机中，以3000r/m的速度离心15分钟，弃去上清液，反复洗涤4次，4℃下凉干，即得本发明半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒。
全文摘要
一种半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒的制备方法，设制备一份本发明的半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒，先准备好棉籽油、纳米磁粉和半乳糖化白蛋白。将阿霉素、半乳糖化白蛋白、磁粉按一定比例混合，通过在精制棉籽油中超声乳化、加热变性固化、乙醚洗涤等工艺制出载药纳米粒。本发明将半乳糖残基偶联到载药纳米粒的表面，形成半乳糖化纳米粒，具有主动与被动双重靶向性，实现更高程度的药物肝靶向。将磁性白蛋白阿霉素纳米粒加上半乳糖基修饰，更增强磁性白蛋白阿霉素纳米粒的靶向性。
文档编号A61P35/00GK1733314SQ200410046650
公开日2006年2月15日 申请日期2004年8月11日 优先权日2004年8月11日
发明者张阳德 申请人:张阳德
技术领域：
本发明涉及一种对肝癌基因治疗药品纳米颗粒的制备方法。
背景技术：
原发性肝癌是世界最流行的恶性肿瘤之一，目前临床常规治疗，手术切除率低，化疗靶向性差，毒副作用明显。近年来，尽管基因治疗在基础研究方面取得很多成绩，然而临床试验的结果尚不令人满意。由于早期诊断水平的提高，使肝癌的手术切除率较过去有明显的提高，但术后易复发。复发的主要原因之一，是术后肝脏残留有许多微小的癌灶。针对这些微小癌灶进行化疗，不但难以获得满意的疗效，且不能消除化疗药物对正常细胞的毒性。
发明内容
本发明的目的，是要提供一种化疗靶向性好，毒副作用小的肝癌基因治疗药品——半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒的制备方法。
本发明的技术方案是预制备好半乳糖化白蛋白，将阿霉素、半乳糖化白蛋白、磁粉按一定比例混合，通过在精制棉籽油中超声乳化、加热变性固化、乙醚洗涤等工艺制出载药纳米粒。
本发明将半乳糖残基偶联到载药纳米粒的表面，形成半乳糖化纳米粒，具有主动与被动双重靶向性，实现更高程度的药物肝靶向。将磁性白蛋白阿霉素纳米粒加上半乳糖基修饰，更增强磁性白蛋白阿霉素纳米粒的靶向性。
具体实施例方式
下面结合实施例具体介绍本发明。
设制备一份本发明的半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒，先准备好棉籽油和纳米磁粉。
棉籽油的精制将市售棉籽油加热至少30～50℃，边搅拌边加入NaOH，使游离脂肪充分皂化，加热至60～70℃，维持30min，使皂化完全，过滤除去生成的皂脂，留存油液。油液在搅拌下加热至50℃，加入适量活性炭，加热至80℃，维持0.5小时，趁热过滤除去脱色剂，留存油液加入适量无水CaCl2，静置过夜，过滤除去颗粒，得所需棉籽油。
纳米磁粉的制备称取0.85g FeCl3·6H2O(3.1mol)、0.3g FeCl2·4H2O(1.5mol)，在氮气保护下，溶于200ml 0。1％吐温80溶液中。在强力搅拌下，将1.5ml/L NH4OH缓慢加入铁盐混合溶液中，至PH＝8，使水解趋于完全，用磁铁从溶液中分离出黑色Fe3O4晶体。用蒸馏水洗涤3次，然后分散于20ml蒸馏水中。
半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒的制备将预制备的磁粉超声处理2分钟，称取磁粉900mg，取半乳糖化白蛋白200mg用0.5ml双蒸水溶解，取阿霉素10mg用0.5ml双蒸水溶解，混合均匀，加入到15ml精制棉籽油中，4℃下超声乳化10分钟。分散均匀后，在电动机转速2000r/m搅拌下，以每分钟100滴的速度加入预热至120℃的50ml精制棉籽油中，维持恒温及转速继续反应20分钟，迅速冷却至室温，加入30ml乙醚，置于离心机中，以3000r/m的速度离心15分钟，弃去上清液，反复洗涤4次，4℃下凉干，即得本发明半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒。
权利要求
1.一种半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒的制备方法，设制备一份本发明的半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒，先准备好棉籽油和纳米磁粉，其步骤是a、将市售棉籽油加热至少30～50℃，边搅拌边加入NaOH，使游离脂肪充分皂化，加热至60～70℃，维持30min，使皂化完全，过滤除去生成的皂脂，留存油液；油液在搅拌下加热至50℃，加入适量活性炭，加热至80℃，维持0.5小时，趁热过滤除去脱色剂，留存油液加入适量无水CaCl2，静置过夜，过滤除去颗粒，得所需棉籽油；b、称取0.85g FeCl3·6H2O(3.1mol)、0.3g FeCl2·4H2O，在氮气保护下，溶于200ml 0.1％吐温80溶液中；在强力搅拌下，将1.5ml/L NH4OH缓慢加入铁盐混合溶液中，至PH＝8，使水解趋于完全，用磁铁从溶液中分离出黑色Fe3O4晶体，用蒸馏水洗涤3次，然后分散于20ml蒸馏水中；c、半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒的制备将预制备的磁粉超声处理2分钟，称取磁粉900mg，取半乳糖化白蛋白200mg用0.5ml双蒸水溶解，取阿霉素10mg用0.5ml双蒸水溶解，混合均匀，加入到15ml精制棉籽油中，4℃下超声乳化10分钟，分散均匀后，以电动机转速2000r/m搅拌下，以每分钟100滴的速度加入预热至120℃的50ml精制棉籽油中，维持恒温及转速继续反应20分钟，迅速冷却至室温，加入30ml乙醚，置于离心机中，以3000r/m的速度离心15分钟，弃去上清液，反复洗涤4次，4℃下凉干，即得本发明半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒。
全文摘要
一种半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒的制备方法，设制备一份本发明的半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒，先准备好棉籽油、纳米磁粉和半乳糖化白蛋白。将阿霉素、半乳糖化白蛋白、磁粉按一定比例混合，通过在精制棉籽油中超声乳化、加热变性固化、乙醚洗涤等工艺制出载药纳米粒。本发明将半乳糖残基偶联到载药纳米粒的表面，形成半乳糖化纳米粒，具有主动与被动双重靶向性，实现更高程度的药物肝靶向。将磁性白蛋白阿霉素纳米粒加上半乳糖基修饰，更增强磁性白蛋白阿霉素纳米粒的靶向性。
文档编号A61P35/00GK1733314SQ200410046650
公开日2006年2月15日 申请日期2004年8月11日 优先权日2004年8月11日
发明者张阳德 申请人:张阳德
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