苯丙氨醇衍生物的制作方法
专利名称：苯丙氨醇衍生物的制作方法
血管细胞粘着分子-1(VCAM-1)，免疫球蛋白(Ig)超基因家族中的一员，表达在激活的而不是静止的内皮上。表达在包括循环的淋巴细胞、嗜曙红细胞、嗜碱细胞和单核细胞而不是嗜中性白细胞的许多细胞类型上的整合素VLA-4(α4β1)是VCAM-1的主要的受体。VCAM-1或VLA-4的抗体能够阻断这些单核白细胞以及黑素瘤细胞对体外激活的内皮的粘附。(两者之中)任一蛋白的抗体在几个发炎的动物模型中已经有效地抑制白细胞浸润和防止组织损伤。抗VLA-4单克隆抗体已经显示能够阻断T-细胞在辅剂诱导的关节炎中渗出，防止嗜曙红细胞在气喘模型中积聚和支气管收缩，并且减少麻痹和抑制单核细胞和淋巴细胞在实验性自身免疫性脑炎(EAE)中的浸润。抗VCAM-1单克隆抗体已经显示能够延长心脏同种异体移植物的存活时间。近来的研究证明抗VLA-4mAbs能够防止非肥胖的糖尿病小鼠中的胰岛炎和糖尿病，并且显著地使结肠炎羊胡子草罗望子模型中的炎症减弱。
因此，抑制含有α4的整合素例如VLA-4和VCAM-1之间相互作用的化合物可用作治疗由慢性炎症性疾病例如类风湿性关节炎(RA)、多发性硬化(MS)、肺部炎症(例如气喘)和炎症性肠病(IBD)所引起的炎症的治疗剂。
一方面本发明包括下式醇 其中X是式X-1所示的基团 其中R15是卤素、硝基、低级烷磺酰基、氰基、低级烷基、低级烷氧基、低级烷氧羰基、羧基、低级烷基氨基磺酰基、全氟低级烷基、低级烷硫基、羟基低级烷基、烷氧基低级烷基、烷硫基低级烷基、烷亚磺酰基低级烷基、烷磺酰基低级烷基、低级烷亚磺酰基、低级烷酰基、芳酰基、芳基、芳氧基；R16是氢、卤素、硝基、氰基、低级烷基、OH、全氟低级烷基或低级烷硫基；或X是式X-2所示的基团 其中Het是含有1，2或3个选自N、O和S杂原子的5-或6-元杂芳环，或Het是含有1，2，3或4个选自O、S和N杂原子的9-或10-元二环杂芳环；R15和R16如上面X-1中所定义，以及R30是氢或低级烷基，p是0-1的整数；或X是式X-3所示的基团 其中R18是芳基、杂芳基，R19是取代的或未被取代的低级烷基、芳基、杂芳基、芳烷基、杂芳烷基，以及R20是取代的或未被取代的低级烷酰基或芳酰基；Y是式Y-1所示的基团 其中R22和R23独立地是氢、低级烷基、低级烷氧基、低级环烷基、芳基、芳烷基、硝基、氰基、低级烷硫基、低级烷亚磺酰基、低级烷磺酰基、低级烷酰基、卤素或全氟低级烷基，R22和R23中至少一个不是氢，以及R24是氢、低级烷基、低级烷氧基、芳基、硝基、氰基、低级烷磺酰基或卤素；或者Y是经碳原子连接酰胺羰基的五或六元杂芳环的基团Y-2，其中所述的环含有一个、两或三个选自N、O和S的杂原子，所述环中一个或两个原子独立地被低级烷基、环烷基、卤素、氰基、全氟烷基或芳基取代，至少一个所述的取代的原子与连接酰胺羰基的碳原子相邻；或者Y是下式所示3-7元环的基团Y-3 其中R25是低级烷基、未被取代的或者氟取代的低级链烯基，或者基团R26-(CH2)e-，R26是芳基、杂芳基、叠氮基、氰基、羟基、低级烷氧基、低级烷氧羰基、低级烷酰基、低级烷硫基、低级烷磺酰基、低级烷亚磺酰基、全氟代低级烷酰基、硝基或者R26是基团-NR28R29；R28是氢或者低级烷基；R29是氢、低级烷基、低级烷氧羰基、低级烷酰基、芳酰基、全氟代低级烷酰基氨基、低级烷磺酰基、低级烷氨基羰基、芳氨基羰基，或者R28和R29一起形成选择性地含有选自O、S和N的一个杂原子的4，5或6-元饱和碳环；环上的碳原子未被取代或被低级烷基或卤素取代；
Q是-(CH2)fO-、-(CH2)fS-、-(CH2)fN(R27)-、-(CH2)f-或键；R27是H、低级烷基、芳基、低级烷酰基、芳酰基或低级烷氧羰基；e是0-4的整数；f是1-3的整数；以及虚线的键可以被选择性地氢化。
这些化合物可以用作治疗炎症性疾病的抗炎剂。与衍生它们的相应的酸和酯相比，式1所示的这些醇是更有效的体内VCAM-VLA-4相互作用的抑制剂和消炎剂。与衍生它们的相应的酸和酯相比，它们更加生物可利用性。现已发现本发明的化合物比衍生它们的酸或酯更容易口服吸收。
式I所示的醇化合物衍生自下式相应的酸和酯 其中X和Y定义如上，Z是低级烷基或氢。
WO99/10313和WO99/10312中描述了式2化合物的制备。WO99/10312中公开了其中Y是Y-1和Y-2的式2化合物以及它们的制备方法。WO99/10313中公开了式2中Y是Y-3的化合物以及它们的制备方法。式1所示的这些醇以及式2所示的酯可用于治疗包括由VLA-4与VCAM-1结合所引起的炎症的炎症疾病例如类风湿性关节炎、多发性硬化、与肺有关的关节炎、气喘以及炎症性肠病。式1所示的醇比相应的羧酸更容易吸收以及更加生物可利用性。
单独或结合用于本说明书的术语“低级烷基”是指含有最多六个碳原子的直链或支链烷基，例如甲基、乙基、正-丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、正戊基、正己基等。低级烷基可以被一个或多个独立地选自环烷基、硝基、芳氧基、芳基、羟基、卤素、氰基、低级烷氧基、低级烷酰基、低级烷硫基、低级烷亚磺酰基、低级烷磺酰基和取代的氨基取代。取代的低级烷基的例子包括2-羟乙基、3-氧代丁基、氰基甲基和2-硝基丙基。
术语“环烷基”是指未被取代的或取代的3-7元碳环。用于本发明的取代基是羟基、卤素、氰基、低级烷氧基、低级烷酰基、低级烷基、芳酰基、低级烷硫基、低级烷亚磺酰基、低级烷磺酰基、芳基、杂芳基和取代的氨基。
术语“低级烷氧基”是指含有最多六个碳原子的直链或支链的烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、叔丁氧基等。
术语“低级烷硫基”是指通过二价硫原子连接的低级烷基，例如甲硫基或异丙硫基。
术语“芳基”是指单或二环芳基，例如苯基或萘基，其未被取代或被常用的取代基团取代。优选的取代基是低级烷基、低级烷氧基、羟基低级烷基、羟基、羟基烷氧基、卤素、低级烷硫基、低级烷亚磺酰基、低级烷磺酰基、氰基、硝基、全氟烷基、烷酰基、芳酰基、芳炔基、低级炔基和低级烷酰基氨基。可用于本发明的芳基的例子是对-甲苯基、对-甲氧基苯基、对-氯苯基、间-甲硫基苯基、2-甲基-5-硝基苯基、2，6-二氯苯基、1-萘基等。
术语“芳烷基”是指如在上文中定义的低级烷基，其中一个或多个氢原子被这里定义的芳基或杂芳基取代。任何常用的芳烷基可用于本发明，例如苄基等。
术语“杂芳基”是指含有1，2，3或4个独立为N、S或O杂原子的未被取代的或取代的5-或6元单环杂芳环或9-或10-元二环杂芳环。杂芳环的例子是吡啶、苯并咪唑、吲哚、咪唑、噻吩、异喹啉、喹啉(quinzoline)等。上面用于“芳基”中定义的取代基包括在杂芳基的定义中。
术语“低级烷氧羰基”是指经羰基连接的低级烷氧基。烷氧羰基的例子是乙氧羰基等。
术语“低级烷基羰氧基”是指经氧原子连接的烷基羰氧基，例如乙酰氧基。
术语“低级烷酰基”是指经羰基连接的低级烷基并且包含上文定义的基团例如乙酰基、丙酰基等。
术语“低级烷羰基氨基”是指经氮原子连接的低级烷羰基，例如乙酰氨基。
术语“芳酰基”是指经羰基连接的单或二环的芳基或杂芳基。芳酰基的例子是苯甲酰基、3-氰基苯甲酰基、2-萘基等。
在具体的式1化合物的实施方案中，Y-1中的取代基优选是其中R22和R23是低级烷基、三氟甲基或卤素，R24是氢、低级烷基、低级烷氧基或卤素，尤其其中R22和R23优选是低级烷基或卤素，R24优选是氢。
在Y-1基团中，当R23是低级烷基或卤素时，Y-1优选是 或 当Y是基团Y-2时，“Het”优选是含有1，2或3个杂原子的6元单环杂芳环，特别其中杂原子是N；更特别Y-2是 当Y是基团Y-3时，Q优选是-(CH2)fO-、-(CH2)fS-、-(CH2)fN(R27)-或-(CH2)f-，更优选-(CH2)f-；更特别Y-3是四-六元环，优选环烷基环，R25是R26-(CH2)e-；e是0-4，优选2-4，R26是叠氮基、氰基、羟基、低级烷氧基、低级烷氧羰基、低级烷酰基、低级烷磺酰基、低级烷亚磺酰基、全氟代低级烷酰基、硝基、低级烷硫基、苯基或被烷氧基或卤素取代的苯基，优选叠氮基、氰基、羟基、低级烷氧基、低级烷氧羰基、低级烷酰基、低级烷磺酰基、低级烷亚磺酰基、全氟代低级烷酰基、硝基、低级烷硫基或R26是NHR29，其中R29是低级烷酰基、优选乙酰基，或低级烷氨基羰基；Q是(CH2)f，f是1-3的整数；以及虚线的键是氢化了的；更特别Y-3是下式所示的五或六元环烷基环 其中Q是-(CH2)f，f是2和3；R25是R26-(CH2)e-；e是0-4的整数，优选2-4，R26是低级烷基、羟基、低级烷氧基、低级烷硫基或低级烷磺酰基，虚线的键是氢化了的；最特别Y-3是
当X是X-1时，R15优选是卤素、硝基、低级烷磺酰基、氰基、低级烷基、低级烷氧基、全氟低级烷基、低级烷硫基、烷亚磺酰基低级烷基、烷磺酰基低级烷基、低级烷亚磺酰基、低级烷酰基或芳酰基，R16是氢、卤素、硝基、氰基、低级烷基、全氟低级烷基或低级烷硫基。
在X-1中基团R15优选是低级烷基、硝基、卤素(尤其是氯或氟)、全氟甲基或氰基，R16是氢、低级烷基、硝基、卤素(尤其是氯或氟)、全氟甲基或氰基。
特别的是，R15和R16独立地是氯或氟。
特别优选的基团X-1如下式所示 在X-2中Het优选是5-或6-元含有1，2或3个氮或氮和硫或氮和氧的单环杂芳环。当Het是二环杂芳环时，优选含有1-3个氮作为杂原子。其中X是X-2，R15优选是硝基、低级烷磺酰基、氰基、低级烷基、低级烷氧基、全氟低级烷基、低级烷硫基、低级烷酰基或芳基(尤其是未被取代的苯基)；R16优选是氢、卤素、硝基、氰基、低级烷基、全氟低级烷基；R30存在时，优选是氢或低级烷基。
尤其优选的基团X-2如下式所示 在基团X-3中R18优选是苯基。R19优选是低级烷基，其是未被取代的或被吡啶基或苯基取代。R20优选是低级烷酰基。
在另一个X-3的实施方案中，R18是未被取代的或被卤素或低级烷氧基取代的苯基；R19是未被取代的或被低级烷氧基、吡啶基低级烷基或低级烷基取代的苯基低级烷基；R20是取代的或未被取代的低级烷酰基。
尤其优选的基团X-3如下式所示
Y优选是基团Y-1，因此本发明包括下式化合物 其中X、R22、R23和R24定义如上。
在Y-1基团中，R22和R23优选是低级烷基或卤素，R24优选是氢。
更优选的基团X是X-1。
当X是X-1时，R15是卤素、硝基、低级烷磺酰基、氰基、低级烷基、低级烷氧基、全氟低级烷基、低级烷硫基、烷亚磺酰基低级烷基、烷磺酰基低级烷基、低级烷亚磺酰基、低级烷酰基或芳酰基，R16是氢、卤素、硝基、氰基、低级烷基、全氟低级烷基或低级烷硫基。
最优选的是下式所示的结构的化合物 本发明的化合物可以以立体异构体和非对映体形式存在，所有这些均包括在本发明范围之内。
下列实施方案描述式1化合物和本发明的具体的实施方案。
1.1.在一个实施方案中X是下式所示的基团
R15和R16定义如上，特别是其中R15是低级烷基、硝基、卤素、全氟甲基或氰基，R16是氢、低级烷基、硝基、卤素、全氟甲基或氰基；更特别的是其中R15和R16独立地是氯或氟。
尤其X-1选自如下基团 1.2.在另一个式1化合物的实施方案中，X是式X-2基团 p和R15、R16以及R30定义如上，尤其是其中Het是含有1，2或3个氮或氮和硫或氮和氧的5-或6元单环杂芳环，或者Het是含有1-3个氮的二环杂芳环，更特别地是Her是含有1或2个氮的6元单环杂芳环或者Het是含有一个氮的10元二环杂芳环，R15是低级烷基或全氟烷基，R16是氢、低级烷基或全氟烷基，R30不存在。
在X-2中，R15优选是硝基、低级烷磺酰基、氰基、低级烷基、低级烷氧基、全氟低级烷基、低级烷硫基、低级烷酰基或芳基(优选是未被取代的苯基)，尤其R15是未被取代的苯基。在X-2中R16优选是氢、卤素、硝基、氰基、低级烷基、全氟低级烷基；R30是氢或者低级烷基。
尤其X-2选自如下基团 1.3.在式1化合物另一个实施方案中，X是 其中R18、R19以及R20定义如上，特别是其中R18是苯基，以及特别是其中R19是未被取代的或者被吡啶基或苯基取代的低级烷基，以及特别是其中R20是取代的或者未被取代的低级烷酰基。
具体的X-3基团优选是其中R18是苯基、R19是未被取代的或被吡啶基或苯基取代的低级烷基，R20是低级烷酰基；或者其中R18是未被取代的或被卤素或低级烷氧基取代的苯基，R19是未被取代的或被低级烷氧基、吡啶基低级烷基或低级烷基取代的苯基低级烷基，R20是取代的或未被取代的低级烷酰基；尤其是其中X选自如下基团
1.4.在式1化合物的另一个实施方案中 其中R22、R23以及R24定义如上，尤其是其中R22和R23是低级烷基、三氟甲基或者卤素，R24是氢、低级烷基、低级烷氧基或者卤素，特别是其中Y-1选自如下基团 1.5.在式1化合物的另一个实施方案中Y是 其中p和Het、R30和R31定义如上，尤其是其中Het是6元杂芳环，特别是其中杂原子是氮，更特别是其中Y-2选自如下基团
1.6.在式1化合物的又一个实施方案中Y是Y-3基团 其中R25和Q定义如上；e是0-4的整数；f是1-3的整数；虚线键可以被选择性地氢化，尤其是其中Y选自下式基团 此外，应当理解的是在如开始定义的式1化合物中基团X和基团Y可以是基团X-1以及Y是基团Y-1、Y-2或Y-3；或者X是X-2以及Y是基团Y-1、Y-2或Y-3；或者X是X-3以及Y是Y-1、Y-2或者Y-3，其中X-1、X-2、X-3、Y-1、Y-2和Y-3如上述任何独立的实施方案中所定义。
更特别的是，优选下列X和Y的结合。
在一个实施方案中X是X-1，Y是Y-3，更特别是其中R15和R16之一是卤素、全氟代低级烷基、硝基、低级烷基，另一个是卤素、氢、全氟代低级烷基、硝基、低级烷基，Y是下式所示的五或六元环烷基环 其中Q是-(CH2)f，f是2和3；R25是R26-(CH2)e-；e是0-4的整数，R26是低级烷基、羟基、低级烷氧基、低级烷硫基或低级磺酰基，虚线键是氢化了的；其中特别优选的化合物是4-[[(2-甲基-5-硝基苯基)羰基]氨基]-N-[[1-((4-甲磺酰基)丁基)环戊基]羰基]-L-苯丙氨醇，4-[[(2，6-二甲基苯基)羰基]氨基]-N-[[1-((4-甲磺酰基)丁基)环戊基]羰基]-L-苯丙氨醇，4-[[(2-三氟甲基苯基)羰基]氨基]-N-[[1-((4-甲磺酰基)丁基)环戊基]羰基]-L-苯丙氨醇，4-[[(2-甲基-5-硝基苯基)羰基]氨基]-N-[[1-((4-甲硫基)丁基)环戊基]羰基]-L-苯丙氨醇，4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-((3-甲磺酰基)丙基)环戊基]羰基]-L-苯丙氨醇，4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-(2-甲氧基乙基)环戊基]羰基]-L-苯丙氨醇，或4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-[(4-甲磺酰基)丁基]环戊基]-L-苯丙氨醇。
在另一个优选的结合中X是 R16是氢、低级烷基、硝基、氰基、卤素、低级烷硫基、全氟低级烷基，R15是低级烷基、硝基、氰基、卤素、低级烷磺酰基、全氟低级烷基，以及Y是式Y-1所示的基团 其中R22是氢、卤素、三氟烷基或低级烷基，R23是卤素、三氟烷基或低级烷基，R24是氢或Y是式Y-3所示的基团 其是四-六元环烷基环，R25是R26-(CH2)e-；e是2-4以及R26是叠氮基、氰基、羟基、低级烷氧基、低级烷氧羰基、低级烷酰基、低级烷磺酰基、低级烷亚磺酰基、全氟代低级烷酰基、硝基或低级烷硫基或者R25是NHR29其中R29是低级烷酰基或低级烷氨基羰基；Q是(CH2)f，f是1-3的整数；以及虚线键是氢化了的；特别是X是式X-1所示的基团 R16是氢、低级烷基、硝基、氰基、卤素、低级烷硫基、全氟低级烷基，R15是低级烷基、硝基、氰基、卤素、低级烷磺酰基、全氟低级烷基；以及Y是 其中R22是氢、卤素或者低级烷基，R23是卤素或者低级烷基，R24是氢，特别是其中在X-1中R15是卤素以及R16是氢或者卤素；R22是氢、卤素、乙基或者甲基，R23是卤素、乙基或者甲基。
本发明的化合物以及它们的代谢物抑制在循环的淋巴细胞、嗜曙红细胞、嗜碱细胞和单核细胞(“VLA-4表达的细胞”)上VCAM-1和纤维结合蛋白与VLA-4的结合。人们知道VCAM-1和纤维结合蛋白在这种细胞上与VLA-4结合涉及一定的疾病状态，例如类风湿性关节炎、、多发性硬化、炎症性肠病，特别是嗜曙红细胞与肺内皮的结合，其是发生气喘的肺炎的原因。因此，在另一个方面本发明的化合物用于治疗类风湿性关节炎、多发性硬化、炎症性肠病，特别是气喘。
基于它们能够抑制在循环的淋巴细胞、嗜曙红细胞、嗜碱细胞和单核细胞上VCAM-1和纤维结合蛋白与VLA-4的结合，本发明的化合物以及它们的代谢物能被用作治疗熟知与这种结合有关的疾病的药物。这种疾病的例子是类风湿性关节炎、多发性硬化、气喘以及炎症性肠病。本发明的化合物优选用于治疗包括与肺炎例如气喘的疾病。气喘中出现的肺炎与嗜曙红细胞渗入肺有关，其中嗜曙红细胞与已经被一些气喘-触发事件或物质激活的内皮结合。
此外，代谢地衍生自本发明化合物的酰基苯丙氨酸衍生物也能够抑制VCAM-1和MadCAM与细胞的受体α4-β7亦称LPAM结合，其表达在淋巴细胞、嗜曙红细胞以及T细胞上。α4-β7与不同的配位体在炎症性的状况例如气喘下相互作用的精确的作用没有完全了解，抑制α4-β1和α4-β7受体结合的本发明的化合物在气喘的动物模型中特别有效。此外单克隆抗体对α4-β7的作用显示抑制α4-β7与MadCAM或VCAM结合的化合物可用于治疗炎症性肠病。它们也可用于治疗其他的疾病，其中这种结合涉及病害或症状的原因。
本发明的化合物可以经口、直肠或肠胃外，例如静脉内、肌内、皮下、鞘内或经皮肤给药；或舌下给药，或作为眼制剂，或作为肺炎的气溶胶。用于口服的胶囊、片剂、悬浮液或溶液，栓剂，注射溶液，滴眼剂，药膏或喷雾溶液是给药形式的例子。
静脉内、肌内、口服或吸入给药是优选的使用形式。本发明化合物给药的有效剂量取决于特定有效成份的性质、病人的年龄和需要以及给药的方式。剂量可以通过任何传统方法、例如通过剂量-限定的临床试验来确定。因此，本发明进一步包括治疗患有其中与VLA-4-表达的细胞结合的纤维结合蛋白VCAM-1是病症或病害的病因因素的疾病的宿主的方法，通过给药足够抑制VCAM-1或与VLA-4-表达的细胞结合的纤维结合蛋白量的本发明化合物以致减少所述的症状或所述的损害。通常，优选每天大约0.1-100毫克/仟克体重的剂量，其中特别优选每天1-25毫克/仟克的剂量，尤其优选每天1-10毫克/仟克体重的剂量。
在另一个方面，本发明进一步包括含有药学上有效量的本发明化合物和药学上可接受的载体的药物组合物。这种组合物可以通过任何传统的方法配制。在这一点上本发明涉及药物制剂，尤其是用于治疗或预防类风湿性关节炎、多发性硬化、炎症性肠病和气喘的药物制剂，其含有本发明的任何一种化合物或其药学上可接受的盐或酯和相容的药物载体材料。片剂或颗粒可以含有一系列的粘合剂、填料、载体或稀释剂。液体组合物可以是例如无菌的与水可混溶的溶液形式。除有效成份之外胶囊可以含有填料或增稠剂。此外，还可以含有增加香味的添加剂以及通常用作防腐剂、稳定剂、保湿剂和乳化剂的物质以及用于改变渗透压力的盐、缓冲剂及其他添加剂。
前面提到的载体材料和稀释剂可以包括任何常用的药学上可接受的有机或无机物质，例如水、明胶、乳糖、淀粉、硬脂酸镁、滑石、阿拉伯胶、聚乙二醇等。
口服的单位剂型例如片剂和胶囊，优选含有25毫克-1000毫克本发明化合物。
在另一个方面，本发明涉及制备式1化合物的方法。本发明的化合物可以通过任何传统的方法制备。在反应路线1中，用能够有选择地还原羧酸酯的还原剂处理式2化合物，其中Z是低级烷基，该化合物是按照如WO99/10313和WO99/10312中所述的方法制备的已知化合物。例如在大约室温下在醇溶液中用碱金属氢硼化物例如硼氢化钠处理式2化合物能够顺利地进行还原得到式1化合物。路线1 其中X和Y定义如上。
一般的方法熔点在Thomas-Hoover仪器上测定并且未校正。旋光度用Perkin-Elmer241型旋光计测定。1H-NMR波谱是使用四甲基硅烷(TMS)作为内标物、用Varian XL-200和Unityplus 400 MHz波谱仪记录。电子轰击(EI，70 ev)和快速原子轰击(FAB)质谱是在VG Autospec或VG 70E-HF质谱仪上测定。用于柱色谱法的硅胶是用于快速色谱法的Mallinkrodt SiliCar 230-400目硅胶；该柱在顶端0-5 psi氮气下运行以促进流动。薄层色谱是在涂有由E.Merck(E.Merck#1.05719)提供的硅胶的玻璃薄层板上进行，通过在12蒸汽中曝露在254 nm紫外线灯下在观察盒中观察或者通过用乙醇水溶液中的磷钼酸(PMA)或在C12中曝露之后用根据E.Von Arx，M.Faupel和M Brugger，J.Chromatography，1976，120，224-228制备的4，4’-四甲基二氨基二苯基甲烷试剂喷雾来目测。
反相高压液相色谱法(RP-HPLC)使用采用3×30厘米、WatersDeltaPak 15μM C-18柱的Waters Delta Prep 4000在40毫升/分钟的流量下采用一般含有5-95％乙腈的乙腈水(每个含有0.75％TFA)梯度在35-40分钟内或者使用采用41.4毫米×30厘米、8μM DynamaxTMC-18柱的Rainin HPLC在49毫升/分钟的流量下和如上所述相似的乙腈水梯度进行。
二氯甲烷(CH2C12)、2-丙醇、DMF、THF、甲苯、己烷、乙醚和甲醇是Fisher试剂级并且无需另外的纯化即可使用，除非另有说明，乙腈是Fisherhplc级并且直接使用。
定义THF是四氢呋喃，DMF是N，N-二甲基甲酰胺，
HOBT是1-羟基苯并三唑，BOP是六氟磷酸[(苯并三唑-1-基)氧]三-(二甲基氨基)鏻，HATU是六氟磷酸O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲鎓(uronium)，HBTU是六氟磷酸O-苯并三唑-N，N，N’，N’-四甲基脲鎓(uronium)，DIPEA是二异丙基乙胺，DMAP是4-(N，N-二甲基氨基)吡啶，DPPA是二苯基磷酰基叠氮化物，DBU是1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯，NaH是氢化钠，盐水是饱和的氯化钠水溶液TLC是薄层色谱法LDA是二异丙基氨基锂BOP-Cl是二(2-氧代-3-噁唑烷基)次磷酰氯(phosphinic chloride)NMP是N-甲基吡咯烷酮(pyrrolidinone)实施例实施例1.4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[(2-氯-6-甲基苯基)羰基]-L-苯丙氨醇的合成 在室温下在8小时期间内向含有4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[(2-氯-6-甲基苯基)羰基]-L-苯丙氨酸甲酯(9.9毫摩尔，5.14克)的甲醇(55毫升)溶液中分六部分加入过量的硼氢化钠(198毫摩尔，7.49克)。为了控制放热反应和形成泡沫时气体的放出，缓慢的加入硼氢化钠是至关紧要的。加入之后，形成的溶液在室温下搅拌2天，在此期间TLC分析混合物显示没有原料。过量的氢化物通过缓慢加入水(20毫升)破坏。在真空下除去甲醇，将得到的固体溶于水(30毫升)、饱和氯化铵(80毫升)和乙酸乙酯(150毫升)的混合物中。分离两层，水层用乙酸乙酯(70毫升)萃取。合并的萃取液用盐水溶液(100毫升)洗涤，无水硫酸镁干燥。过滤出干燥剂后，在真空下浓缩滤液得到5.3克粗化合物，其通过硅胶柱色谱法，用乙酸乙酯和己烷(3∶1)洗脱纯化，获得4.5克(92％)4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[(2-氯-6-甲基苯基)-羰基]-L-苯丙氨醇，为白色固体熔点198-200℃，HRMS观察到的质量491.0699；计算的质量491.0696(M+H)。
实施例2.4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-((4-甲磺酰基)丁基)环戊基]羰基]-L-苯丙氨醇的合成 在30-35℃下在6小时期间内向含有4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-((4-甲磺酰基)丁基)环戊基]羰基]-L-苯丙氨酸甲酯(3.34毫摩尔，2.0克)的甲醇(40毫升)溶液中分四部分加入过量的硼氢化钠(10毫摩尔，378毫克)。透明溶液在室温下搅拌15小时，在这时TLC分析混合物显示含有原料。然后，在6小时期间内分四部分再加入一些硼氢化钠(16.9毫摩尔，640毫克)，该溶液再搅拌3天。过量的氢化物通过缓慢加入水(10毫升)破坏。在真空下除去甲醇，在热的条件下将得到的固体溶于水(30毫升)、饱和氯化铵(80毫升)、乙酸乙酯(100毫升)和四氢呋喃(50毫升)的混合物中。分离两层，水层用乙酸乙酯(50毫升)和四氢呋喃(50毫升)萃取。合并的萃取液用盐水溶液(100毫升)洗涤，无水硫酸镁干燥。过滤出干燥剂后，在真空下浓缩滤液，将粗的残余物通过硅胶柱色谱法，用乙酸乙酯洗脱纯化，获得0.89克(47％)4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-((4-甲磺酰基)丁基)环戊基]羰基]-L-苯丙氨醇，为无定形的白色固体。HRMS观察到的质量569.1645；计算的质量569.1643(M+H)。
实施例3.使用实施例1中描述的一般方法，可以制备下列化合物4-[[(2-甲基-5-硝基苯基)羰基]氨基]-N-[[1-((4-甲磺酰基)丁基)环戊基]羰基]-L-苯丙氨醇4-[[(2，6-二甲基苯基)羰基]氨基]-N-[[1-((4-甲磺酰基)丁基)环戊基]羰基]-L-苯丙氨醇4-[[(2-三氟甲基苯基)羰基]氨基]-N-[[1-((4-甲磺酰基)丁基)环戊基]羰基]-L-苯丙氨醇4-[[(2-甲基-5-硝基苯基)羰基]氨基]-N-[[1-((4-甲硫基)丁基)环戊基]羰基]-L-苯丙氨醇4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-((3-甲磺酰基)丙基)-环戊基]羰基]-L-苯丙氨醇4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-((2-甲氧基乙基)环戊基]羰基]-L-苯丙氨醇4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[2-甲基-6-乙基苯基]羰基]-L-苯丙氨醇4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[(2-三氟甲基苯基)羰基]-L-苯丙氨醇4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[(2-溴苯基)羰基]-L-苯丙氨醇4-[[(2，6-二甲基苯基)羰基]氨基]-N-[(2-溴苯基)羰基]-L-苯丙氨醇实施例4.特应性灵长目动物的急性导气管炎症。
使用Turner等人描述的改进的实验设计测定猴子的导气管炎症(Tumer等人，1994)。重量在3.6-5.8仟克之间的成熟的雄性cynomolgus猴(Macacafascicularis，Hazelton Labs，Denver，PA)用于这些研究中。当经受蛔虫属萃取液的气溶胶时，所有的动物显示对蛔虫属sutim抗原的积极的皮肤和导气管反应，对于乙酰甲胆碱(MCh)的敏感性至少增加3倍。
在每个实验的当天，插进装上胶管管头的气管内导管(3毫米，Mallinckrodt Medical，St.Louis，MO)用12毫克/仟克氯胺酮盐酸盐和0.5毫克/仟克甲苯噻嗪使动物麻醉，然后直立放在专门设计的有机玻璃架子上。该气管内导管与热的Fleisch呼吸气流流速计连接。经连接于呼吸气流流速计的Validyn压差传感器(DP 45-24)测量空气流量。经连接在气管套管的侧臂和插入位于左侧乳头下面肋间隙的18-号胸膜内的针之间的第二Validyne传感器(DP 45-24)量经肺压力，使用如上所述的模块仪器数据记录压力和流量以及计算RL。在每个实验的当天测量所有动物的基线RL，平均值大约为0.04厘米H2O/毫升/秒。
实验设计通过将动物暴露在A.Suum萃取液的气溶胶中60秒诱发导气管炎症。该气溶胶经连接于气管内导管的喷雾器(De Vilbiss 5000型，Healt Care Inc.，Somerset，PA)传送。预先决定每个动物的萃取液浓度(500-50,000 PNU)并且引起导气管阻力至少加倍。在攻击抗原24小时之后，按照前面描述的使动物麻醉并且放置在不锈钢桌子上。通过将小儿科的支气管镜插入至导气管腔中直到大约第4或第5代支气管并且温和地用无菌的Hanks平衡的盐溶液的3X2毫升等分试样灌洗来评价导气管炎症。然后使用标准血液学技术分析回收的灌洗液中总的细胞和有不同的细胞数。
药物治疗动物在攻击抗原之前2小时口服药物或赋形剂。相对于用赋形剂治疗的对照动物，实施例1的化合物使存在于灌洗液中炎症细胞数和百分比的显著地减少。
权利要求
1.下式化合物 其中X是式X-1所示的基团 其中R15是卤素、硝基、低级烷磺酰基、氰基、低级烷基、低级烷氧基、低级烷氧羰基、羧基、低级烷基氨基磺酰基、全氟低级烷基、低级烷硫基、羟基低级烷基、烷氧基低级烷基、烷硫基低级烷基、烷亚磺酰基低级烷基、烷磺酰基低级烷基、低级烷亚磺酰基、低级烷酰基、芳酰基、芳基、芳氧基；R16是氢、卤素、硝基、氰基、低级烷基、OH、全氟低级烷基或低级烷硫基；或X是式X-2所示的基团 其中Het是含有1，2或3个选自N、O和S杂原子的5-或6-元杂芳环，或Het是含有1，2，3或4个选自O、S和N杂原子的9-或10-元二环杂芳环；R15和R16如上面X-1中所定义，以及R30是氢或低级烷基，p是0-1的整数；或X是式X-3所示的基团 其中R18是芳基、杂芳基，R19是取代的或未被取代的低级烷基、芳基、杂芳基、芳烷基、杂芳烷基，以及R20是取代的或未被取代的低级烷酰基或芳酰基；Y是式Y-1所示的基团 其中R22和R23独立地是氢、低级烷基、低级烷氧基、低级环烷基、芳基、芳烷基、硝基、氰基、低级烷硫基、低级烷亚磺酰基、低级烷磺酰基、低级烷酰基、卤素或全氟低级烷基，R22和R23中至少一个不是氢，以及R24是氢、低级烷基、低级烷氧基、芳基、硝基、氰基、低级烷磺酰基或卤素或者Y是经碳原子连接酰胺羰基的五或六元杂芳环的基团Y-2，其中所述的环含有一个、两或三个选自N、O和S的杂原子，所述环中一个或两个原子独立地被低级烷基、环烷基、卤素、氰基、全氟烷基或芳基取代，至少一个所述的取代的原子与连接酰胺羰基的碳原子相邻；或者Y是下式所示3-7元环的基团Y-3 其中R25是低级烷基、未被取代的或者氟取代的低级链烯基，或者基团R26-(CH2)e-，R26是芳基、杂芳基、叠氮基、氰基、羟基、低级烷氧基、低级烷氧羰基、低级烷酰基、低级烷硫基、低级烷磺酰基、低级烷亚磺酰基、全氟代低级烷酰基、硝基或者R26是基团-NR28R29；R28是H或者低级烷基；R29是氢、低级烷基、低级烷氧羰基、低级烷酰基、芳酰基、全氟代低级烷酰基氨基、低级烷磺酰基、低级烷氨基羰基、芳氨基羰基，或者R28和R29一起形成选择性地含有选自O、S和N的一个杂原子的4，5或6-元饱和碳环；环上的碳原子未被取代或被低级烷基或卤素取代；Q是-(CH2)fO-、-(CH2)fS-、-(CH2)fN(R27)-、-(CH2)f-或键；R27是H、低级烷基、芳基、低级烷酰基、芳酰基或低级烷氧羰基；e是0-4的整数；f是1-3的整数；以及虚线的键可以被选择性地氢化。
2.权利要求1的化合物，其中X是下式所示的基团 R15和R16如权利要求1中所定义。
3.权利要求2的化合物，其中R15是卤素、硝基、低级烷磺酰基、氰基、低级烷基、低级烷氧基、全氟低级烷基、低级烷硫基、烷亚磺酰基低级烷基、烷磺酰基低级烷基、低级烷亚磺酰基、低级烷酰基或芳酰基，R16是氢、卤素、硝基、氰基、低级烷基、全氟低级烷基或低级烷硫基。
4.权利要求3的化合物，其中R15和R16独立地是氯或氟。
5.权利要求3的化合物，其中X选自如下基团
6.权利要求1的化合物，其中X是基团X-2 其中p、R15、R16和R30如权利要求1中所定义。
7.权利要求6的化合物，其中Het是含有1，2或3个氮或氮和硫或氮和氧的5-或6-元单环杂芳环。
8.权利要求6的化合物，其中Het是含有1-3个氮的二环杂芳环。
9.权利要求6的化合物，其中R15是硝基、低级烷磺酰基、氰基、低级烷基、低级烷氧基、全氟低级烷基、低级烷硫基、低级烷酰基或芳基。
10.权利要求9的化合物，其中R15是未被取代的苯基。
11.权利要求6的化合物，其中R16是氢、卤素、硝基、氰基、低级烷基、全氟低级烷基；R30是氢或者低级烷基。
12.权利要求6的化合物，其中Het是含有1或2个氮的6元单环杂芳环或含有一个氮的10元二环杂芳环，R15和R16独立地是氢、低级烷基或全氟烷基，R30不存在。
13.权利要求6的化合物，其中X-2选自如下基团
14.权利要求1的化合物，其中X是 R18、R19和R20如权利要求1中所定义。
15.权利要求14的化合物，其中R18是苯基。
16.权利要求14的化合物，其中R19是未被取代的或被吡啶基或苯基取代的低级烷基。
17.权利要求14的化合物，其中R20是取代的或未被取代的低级烷酰基。
18.权利要求14的化合物，其中R18是苯基，R19是未被取代的或被吡啶基或苯基取代的低级烷基，R20是低级烷酰基。
19.权利要求14的化合物，其中R18是未被取代的或被卤素或低级烷氧基取代的苯基；R19是未被取代的或被低级烷氧基、吡啶基低级烷基或低级烷基取代的苯基低级烷基；R20是取代的或未被取代的低级烷酰基。
20.权利要求14的化合物，其中X选自如下基团
21.权利要求1的化合物，其中Y是 R22、R23和R24如权利要求1中所定义。
22.权利要求21的化合物，其中R22和R23是低级烷基、三氟甲基或卤素，R24是氢、低级烷基、低级烷氧基或卤素。
23.权利要求22的化合物，其中Y-1选自如下基团
24.权利要求1的化合物，其中Y是 p和Het、R30和R31如权利要求1中所定义。
25.权利要求24的化合物，其中Het是6元单环杂芳环。
26.权利要求25的化合物，其中杂原子是N。
27.权利要求26的化合物，其中Y-2选自如下基团
28.权利要求1的化合物，其中Y是式Y-3所示的基团 R25和Q如权利要求1中所定义；e是0-4的整数；f是1-3的整数；虚线的键可以被选择性地氢化。
29.权利要求28的化合物，其中Y-3是四-六元环，R25是R26-(CH2)e-；e是0-4以及R26是叠氮基、氰基、羟基、低级烷氧基、低级烷氧羰基、低级烷酰基、低级烷磺酰基、低级烷亚磺酰基、全氟代低级烷酰基、硝基、低级烷硫基、苯基或被烷氧基或卤素取代的苯基，或者R26是NHR29其中R29是低级烷酰基或低级烷氨基羰基；Q是(CH2)f，f是1-3的整数；以及虚线的键是氢化了的。
30.权利要求28的化合物，其中Y选自下式基团
31.根据权利要求1的化合物，选自4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[2-氯-6-甲基苯基]羰基]-L-苯丙氨醇，4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[(2-溴苯基)羰基]-L-苯丙氨醇，4-[[(2-甲基-5-硝基苯基)羰基]氨基]-N-[[1-((4-甲磺酰基)丁基)环戊基]羰基]-L-苯丙氨醇，4-[[(2，6-二甲基苯基)羰基]氨基]-N-[[1-[(4-甲磺酰基)丁基]环戊基]羰基]-L-苯丙氨醇，4-[[(2-三氟甲基苯基)碳基]氨基]-N-[[1-((4-甲磺酰基)丁基)环戊基]羰基]-L-苯丙氨醇，4-[[(2-甲基-5-硝基苯基)羰基]氨基]-N-[[1-((4-甲硫基)丁基)环戊基]羰基]-L-苯丙氨醇，4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-((3-甲磺酰基)丙基)环戊基]羰基]-L-苯丙氨醇，4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-(2-甲氧基乙基)环戊基]羰基]-L-苯丙氨醇，4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-((4-甲磺酰基)丁基)环戊基]-L-苯丙氨醇，4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[(2-溴苯基)羰基]-L-苯丙氨醇，或4-[[(2，6-二甲基苯基)羰基]氨基]-N-[(2-溴苯基)羰基]-L-苯丙氨醇。
32.制备式1化合物的方法 其中X和Y如权利要求1中所定义，其特征在于用能够有选择地还原羧酸酯的还原剂处理式2化合物， 其中X和Y定义如上，Z是低级烷基。
33.根据权利要求1-31中任何一项的化合物，用作药物尤其是用于治疗或预防类风湿性关节炎、多发性硬化、炎症性肠病和气喘的药物。
34.药物制剂，尤其是用于治疗或预防类风湿性关节炎、多发性硬化、炎症性肠病和气喘的药物制剂，其含有权利要求1-31中任何一项的化合物或其药学上可接受的盐或酯和相容的药物载体材料。
35.生产药物制剂、尤其是用于治疗或预防类风湿性关节炎、多发性硬化、炎症性肠病和气喘的药物制剂的方法，该方法包括将一个或多个根据权利要求1-31中任何一项的化合物或其药学上可接受的盐或酯以及如果需要一个或多个其他治疗有价值的物质和相容的药物载体制成盖仑制剂给药形式。
36.根据权利要求1-31中任何一项的化合物或其药学上可接受的盐或酯用于治疗或预防疾病，尤其是治疗或预防类风湿性关节炎、多发性硬化、炎症性肠病和气喘的用途。
37.根据权利要求1-31中任何一项化合物或其药学上可接受的盐或酯用于制备治疗或预防疾病，尤其是治疗或预防类风湿性关节炎、多发性硬化、炎症性肠病和气喘的含有上述化合物作为活性物质的药物的用途。
38.基本上如在上文中描述的新的化合物、药物、方法和用途。
全文摘要
式(1)化合物以及其药学上可接受的盐和酯,其中X和Y如说明书中所定义,是VCAM－1与VLA－4在体内结合的有效抑制剂并且用于治疗炎症性疾病中的炎症,其中这种结合作用引起该炎症。
文档编号A61KGK1340043SQ00803869
公开日2002年3月13日 申请日期2000年2月12日 优先权日1999年2月18日
发明者阿奇萨拉奥·赛杜里, 杰斐逊·W·蒂利 申请人:霍夫曼-拉罗奇有限公司
血管细胞粘着分子-1(VCAM-1)，免疫球蛋白(Ig)超基因家族中的一员，表达在激活的而不是静止的内皮上。表达在包括循环的淋巴细胞、嗜曙红细胞、嗜碱细胞和单核细胞而不是嗜中性白细胞的许多细胞类型上的整合素VLA-4(α4β1)是VCAM-1的主要的受体。VCAM-1或VLA-4的抗体能够阻断这些单核白细胞以及黑素瘤细胞对体外激活的内皮的粘附。(两者之中)任一蛋白的抗体在几个发炎的动物模型中已经有效地抑制白细胞浸润和防止组织损伤。抗VLA-4单克隆抗体已经显示能够阻断T-细胞在辅剂诱导的关节炎中渗出，防止嗜曙红细胞在气喘模型中积聚和支气管收缩，并且减少麻痹和抑制单核细胞和淋巴细胞在实验性自身免疫性脑炎(EAE)中的浸润。抗VCAM-1单克隆抗体已经显示能够延长心脏同种异体移植物的存活时间。近来的研究证明抗VLA-4mAbs能够防止非肥胖的糖尿病小鼠中的胰岛炎和糖尿病，并且显著地使结肠炎羊胡子草罗望子模型中的炎症减弱。
因此，抑制含有α4的整合素例如VLA-4和VCAM-1之间相互作用的化合物可用作治疗由慢性炎症性疾病例如类风湿性关节炎(RA)、多发性硬化(MS)、肺部炎症(例如气喘)和炎症性肠病(IBD)所引起的炎症的治疗剂。
一方面本发明包括下式醇 其中X是式X-1所示的基团 其中R15是卤素、硝基、低级烷磺酰基、氰基、低级烷基、低级烷氧基、低级烷氧羰基、羧基、低级烷基氨基磺酰基、全氟低级烷基、低级烷硫基、羟基低级烷基、烷氧基低级烷基、烷硫基低级烷基、烷亚磺酰基低级烷基、烷磺酰基低级烷基、低级烷亚磺酰基、低级烷酰基、芳酰基、芳基、芳氧基；R16是氢、卤素、硝基、氰基、低级烷基、OH、全氟低级烷基或低级烷硫基；或X是式X-2所示的基团 其中Het是含有1，2或3个选自N、O和S杂原子的5-或6-元杂芳环，或Het是含有1，2，3或4个选自O、S和N杂原子的9-或10-元二环杂芳环；R15和R16如上面X-1中所定义，以及R30是氢或低级烷基，p是0-1的整数；或X是式X-3所示的基团 其中R18是芳基、杂芳基，R19是取代的或未被取代的低级烷基、芳基、杂芳基、芳烷基、杂芳烷基，以及R20是取代的或未被取代的低级烷酰基或芳酰基；Y是式Y-1所示的基团 其中R22和R23独立地是氢、低级烷基、低级烷氧基、低级环烷基、芳基、芳烷基、硝基、氰基、低级烷硫基、低级烷亚磺酰基、低级烷磺酰基、低级烷酰基、卤素或全氟低级烷基，R22和R23中至少一个不是氢，以及R24是氢、低级烷基、低级烷氧基、芳基、硝基、氰基、低级烷磺酰基或卤素；或者Y是经碳原子连接酰胺羰基的五或六元杂芳环的基团Y-2，其中所述的环含有一个、两或三个选自N、O和S的杂原子，所述环中一个或两个原子独立地被低级烷基、环烷基、卤素、氰基、全氟烷基或芳基取代，至少一个所述的取代的原子与连接酰胺羰基的碳原子相邻；或者Y是下式所示3-7元环的基团Y-3 其中R25是低级烷基、未被取代的或者氟取代的低级链烯基，或者基团R26-(CH2)e-，R26是芳基、杂芳基、叠氮基、氰基、羟基、低级烷氧基、低级烷氧羰基、低级烷酰基、低级烷硫基、低级烷磺酰基、低级烷亚磺酰基、全氟代低级烷酰基、硝基或者R26是基团-NR28R29；R28是氢或者低级烷基；R29是氢、低级烷基、低级烷氧羰基、低级烷酰基、芳酰基、全氟代低级烷酰基氨基、低级烷磺酰基、低级烷氨基羰基、芳氨基羰基，或者R28和R29一起形成选择性地含有选自O、S和N的一个杂原子的4，5或6-元饱和碳环；环上的碳原子未被取代或被低级烷基或卤素取代；
Q是-(CH2)fO-、-(CH2)fS-、-(CH2)fN(R27)-、-(CH2)f-或键；R27是H、低级烷基、芳基、低级烷酰基、芳酰基或低级烷氧羰基；e是0-4的整数；f是1-3的整数；以及虚线的键可以被选择性地氢化。
这些化合物可以用作治疗炎症性疾病的抗炎剂。与衍生它们的相应的酸和酯相比，式1所示的这些醇是更有效的体内VCAM-VLA-4相互作用的抑制剂和消炎剂。与衍生它们的相应的酸和酯相比，它们更加生物可利用性。现已发现本发明的化合物比衍生它们的酸或酯更容易口服吸收。
式I所示的醇化合物衍生自下式相应的酸和酯 其中X和Y定义如上，Z是低级烷基或氢。
WO99/10313和WO99/10312中描述了式2化合物的制备。WO99/10312中公开了其中Y是Y-1和Y-2的式2化合物以及它们的制备方法。WO99/10313中公开了式2中Y是Y-3的化合物以及它们的制备方法。式1所示的这些醇以及式2所示的酯可用于治疗包括由VLA-4与VCAM-1结合所引起的炎症的炎症疾病例如类风湿性关节炎、多发性硬化、与肺有关的关节炎、气喘以及炎症性肠病。式1所示的醇比相应的羧酸更容易吸收以及更加生物可利用性。
单独或结合用于本说明书的术语“低级烷基”是指含有最多六个碳原子的直链或支链烷基，例如甲基、乙基、正-丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、正戊基、正己基等。低级烷基可以被一个或多个独立地选自环烷基、硝基、芳氧基、芳基、羟基、卤素、氰基、低级烷氧基、低级烷酰基、低级烷硫基、低级烷亚磺酰基、低级烷磺酰基和取代的氨基取代。取代的低级烷基的例子包括2-羟乙基、3-氧代丁基、氰基甲基和2-硝基丙基。
术语“环烷基”是指未被取代的或取代的3-7元碳环。用于本发明的取代基是羟基、卤素、氰基、低级烷氧基、低级烷酰基、低级烷基、芳酰基、低级烷硫基、低级烷亚磺酰基、低级烷磺酰基、芳基、杂芳基和取代的氨基。
术语“低级烷氧基”是指含有最多六个碳原子的直链或支链的烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、叔丁氧基等。
术语“低级烷硫基”是指通过二价硫原子连接的低级烷基，例如甲硫基或异丙硫基。
术语“芳基”是指单或二环芳基，例如苯基或萘基，其未被取代或被常用的取代基团取代。优选的取代基是低级烷基、低级烷氧基、羟基低级烷基、羟基、羟基烷氧基、卤素、低级烷硫基、低级烷亚磺酰基、低级烷磺酰基、氰基、硝基、全氟烷基、烷酰基、芳酰基、芳炔基、低级炔基和低级烷酰基氨基。可用于本发明的芳基的例子是对-甲苯基、对-甲氧基苯基、对-氯苯基、间-甲硫基苯基、2-甲基-5-硝基苯基、2，6-二氯苯基、1-萘基等。
术语“芳烷基”是指如在上文中定义的低级烷基，其中一个或多个氢原子被这里定义的芳基或杂芳基取代。任何常用的芳烷基可用于本发明，例如苄基等。
术语“杂芳基”是指含有1，2，3或4个独立为N、S或O杂原子的未被取代的或取代的5-或6元单环杂芳环或9-或10-元二环杂芳环。杂芳环的例子是吡啶、苯并咪唑、吲哚、咪唑、噻吩、异喹啉、喹啉(quinzoline)等。上面用于“芳基”中定义的取代基包括在杂芳基的定义中。
术语“低级烷氧羰基”是指经羰基连接的低级烷氧基。烷氧羰基的例子是乙氧羰基等。
术语“低级烷基羰氧基”是指经氧原子连接的烷基羰氧基，例如乙酰氧基。
术语“低级烷酰基”是指经羰基连接的低级烷基并且包含上文定义的基团例如乙酰基、丙酰基等。
术语“低级烷羰基氨基”是指经氮原子连接的低级烷羰基，例如乙酰氨基。
术语“芳酰基”是指经羰基连接的单或二环的芳基或杂芳基。芳酰基的例子是苯甲酰基、3-氰基苯甲酰基、2-萘基等。
在具体的式1化合物的实施方案中，Y-1中的取代基优选是其中R22和R23是低级烷基、三氟甲基或卤素，R24是氢、低级烷基、低级烷氧基或卤素，尤其其中R22和R23优选是低级烷基或卤素，R24优选是氢。
在Y-1基团中，当R23是低级烷基或卤素时，Y-1优选是 或 当Y是基团Y-2时，“Het”优选是含有1，2或3个杂原子的6元单环杂芳环，特别其中杂原子是N；更特别Y-2是 当Y是基团Y-3时，Q优选是-(CH2)fO-、-(CH2)fS-、-(CH2)fN(R27)-或-(CH2)f-，更优选-(CH2)f-；更特别Y-3是四-六元环，优选环烷基环，R25是R26-(CH2)e-；e是0-4，优选2-4，R26是叠氮基、氰基、羟基、低级烷氧基、低级烷氧羰基、低级烷酰基、低级烷磺酰基、低级烷亚磺酰基、全氟代低级烷酰基、硝基、低级烷硫基、苯基或被烷氧基或卤素取代的苯基，优选叠氮基、氰基、羟基、低级烷氧基、低级烷氧羰基、低级烷酰基、低级烷磺酰基、低级烷亚磺酰基、全氟代低级烷酰基、硝基、低级烷硫基或R26是NHR29，其中R29是低级烷酰基、优选乙酰基，或低级烷氨基羰基；Q是(CH2)f，f是1-3的整数；以及虚线的键是氢化了的；更特别Y-3是下式所示的五或六元环烷基环 其中Q是-(CH2)f，f是2和3；R25是R26-(CH2)e-；e是0-4的整数，优选2-4，R26是低级烷基、羟基、低级烷氧基、低级烷硫基或低级烷磺酰基，虚线的键是氢化了的；最特别Y-3是
当X是X-1时，R15优选是卤素、硝基、低级烷磺酰基、氰基、低级烷基、低级烷氧基、全氟低级烷基、低级烷硫基、烷亚磺酰基低级烷基、烷磺酰基低级烷基、低级烷亚磺酰基、低级烷酰基或芳酰基，R16是氢、卤素、硝基、氰基、低级烷基、全氟低级烷基或低级烷硫基。
在X-1中基团R15优选是低级烷基、硝基、卤素(尤其是氯或氟)、全氟甲基或氰基，R16是氢、低级烷基、硝基、卤素(尤其是氯或氟)、全氟甲基或氰基。
特别的是，R15和R16独立地是氯或氟。
特别优选的基团X-1如下式所示 在X-2中Het优选是5-或6-元含有1，2或3个氮或氮和硫或氮和氧的单环杂芳环。当Het是二环杂芳环时，优选含有1-3个氮作为杂原子。其中X是X-2，R15优选是硝基、低级烷磺酰基、氰基、低级烷基、低级烷氧基、全氟低级烷基、低级烷硫基、低级烷酰基或芳基(尤其是未被取代的苯基)；R16优选是氢、卤素、硝基、氰基、低级烷基、全氟低级烷基；R30存在时，优选是氢或低级烷基。
尤其优选的基团X-2如下式所示 在基团X-3中R18优选是苯基。R19优选是低级烷基，其是未被取代的或被吡啶基或苯基取代。R20优选是低级烷酰基。
在另一个X-3的实施方案中，R18是未被取代的或被卤素或低级烷氧基取代的苯基；R19是未被取代的或被低级烷氧基、吡啶基低级烷基或低级烷基取代的苯基低级烷基；R20是取代的或未被取代的低级烷酰基。
尤其优选的基团X-3如下式所示
Y优选是基团Y-1，因此本发明包括下式化合物 其中X、R22、R23和R24定义如上。
在Y-1基团中，R22和R23优选是低级烷基或卤素，R24优选是氢。
更优选的基团X是X-1。
当X是X-1时，R15是卤素、硝基、低级烷磺酰基、氰基、低级烷基、低级烷氧基、全氟低级烷基、低级烷硫基、烷亚磺酰基低级烷基、烷磺酰基低级烷基、低级烷亚磺酰基、低级烷酰基或芳酰基，R16是氢、卤素、硝基、氰基、低级烷基、全氟低级烷基或低级烷硫基。
最优选的是下式所示的结构的化合物 本发明的化合物可以以立体异构体和非对映体形式存在，所有这些均包括在本发明范围之内。
下列实施方案描述式1化合物和本发明的具体的实施方案。
1.1.在一个实施方案中X是下式所示的基团
R15和R16定义如上，特别是其中R15是低级烷基、硝基、卤素、全氟甲基或氰基，R16是氢、低级烷基、硝基、卤素、全氟甲基或氰基；更特别的是其中R15和R16独立地是氯或氟。
尤其X-1选自如下基团 1.2.在另一个式1化合物的实施方案中，X是式X-2基团 p和R15、R16以及R30定义如上，尤其是其中Het是含有1，2或3个氮或氮和硫或氮和氧的5-或6元单环杂芳环，或者Het是含有1-3个氮的二环杂芳环，更特别地是Her是含有1或2个氮的6元单环杂芳环或者Het是含有一个氮的10元二环杂芳环，R15是低级烷基或全氟烷基，R16是氢、低级烷基或全氟烷基，R30不存在。
在X-2中，R15优选是硝基、低级烷磺酰基、氰基、低级烷基、低级烷氧基、全氟低级烷基、低级烷硫基、低级烷酰基或芳基(优选是未被取代的苯基)，尤其R15是未被取代的苯基。在X-2中R16优选是氢、卤素、硝基、氰基、低级烷基、全氟低级烷基；R30是氢或者低级烷基。
尤其X-2选自如下基团 1.3.在式1化合物另一个实施方案中，X是 其中R18、R19以及R20定义如上，特别是其中R18是苯基，以及特别是其中R19是未被取代的或者被吡啶基或苯基取代的低级烷基，以及特别是其中R20是取代的或者未被取代的低级烷酰基。
具体的X-3基团优选是其中R18是苯基、R19是未被取代的或被吡啶基或苯基取代的低级烷基，R20是低级烷酰基；或者其中R18是未被取代的或被卤素或低级烷氧基取代的苯基，R19是未被取代的或被低级烷氧基、吡啶基低级烷基或低级烷基取代的苯基低级烷基，R20是取代的或未被取代的低级烷酰基；尤其是其中X选自如下基团
1.4.在式1化合物的另一个实施方案中 其中R22、R23以及R24定义如上，尤其是其中R22和R23是低级烷基、三氟甲基或者卤素，R24是氢、低级烷基、低级烷氧基或者卤素，特别是其中Y-1选自如下基团 1.5.在式1化合物的另一个实施方案中Y是 其中p和Het、R30和R31定义如上，尤其是其中Het是6元杂芳环，特别是其中杂原子是氮，更特别是其中Y-2选自如下基团
1.6.在式1化合物的又一个实施方案中Y是Y-3基团 其中R25和Q定义如上；e是0-4的整数；f是1-3的整数；虚线键可以被选择性地氢化，尤其是其中Y选自下式基团 此外，应当理解的是在如开始定义的式1化合物中基团X和基团Y可以是基团X-1以及Y是基团Y-1、Y-2或Y-3；或者X是X-2以及Y是基团Y-1、Y-2或Y-3；或者X是X-3以及Y是Y-1、Y-2或者Y-3，其中X-1、X-2、X-3、Y-1、Y-2和Y-3如上述任何独立的实施方案中所定义。
更特别的是，优选下列X和Y的结合。
在一个实施方案中X是X-1，Y是Y-3，更特别是其中R15和R16之一是卤素、全氟代低级烷基、硝基、低级烷基，另一个是卤素、氢、全氟代低级烷基、硝基、低级烷基，Y是下式所示的五或六元环烷基环 其中Q是-(CH2)f，f是2和3；R25是R26-(CH2)e-；e是0-4的整数，R26是低级烷基、羟基、低级烷氧基、低级烷硫基或低级磺酰基，虚线键是氢化了的；其中特别优选的化合物是4-[[(2-甲基-5-硝基苯基)羰基]氨基]-N-[[1-((4-甲磺酰基)丁基)环戊基]羰基]-L-苯丙氨醇，4-[[(2，6-二甲基苯基)羰基]氨基]-N-[[1-((4-甲磺酰基)丁基)环戊基]羰基]-L-苯丙氨醇，4-[[(2-三氟甲基苯基)羰基]氨基]-N-[[1-((4-甲磺酰基)丁基)环戊基]羰基]-L-苯丙氨醇，4-[[(2-甲基-5-硝基苯基)羰基]氨基]-N-[[1-((4-甲硫基)丁基)环戊基]羰基]-L-苯丙氨醇，4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-((3-甲磺酰基)丙基)环戊基]羰基]-L-苯丙氨醇，4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-(2-甲氧基乙基)环戊基]羰基]-L-苯丙氨醇，或4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-[(4-甲磺酰基)丁基]环戊基]-L-苯丙氨醇。
在另一个优选的结合中X是 R16是氢、低级烷基、硝基、氰基、卤素、低级烷硫基、全氟低级烷基，R15是低级烷基、硝基、氰基、卤素、低级烷磺酰基、全氟低级烷基，以及Y是式Y-1所示的基团 其中R22是氢、卤素、三氟烷基或低级烷基，R23是卤素、三氟烷基或低级烷基，R24是氢或Y是式Y-3所示的基团 其是四-六元环烷基环，R25是R26-(CH2)e-；e是2-4以及R26是叠氮基、氰基、羟基、低级烷氧基、低级烷氧羰基、低级烷酰基、低级烷磺酰基、低级烷亚磺酰基、全氟代低级烷酰基、硝基或低级烷硫基或者R25是NHR29其中R29是低级烷酰基或低级烷氨基羰基；Q是(CH2)f，f是1-3的整数；以及虚线键是氢化了的；特别是X是式X-1所示的基团 R16是氢、低级烷基、硝基、氰基、卤素、低级烷硫基、全氟低级烷基，R15是低级烷基、硝基、氰基、卤素、低级烷磺酰基、全氟低级烷基；以及Y是 其中R22是氢、卤素或者低级烷基，R23是卤素或者低级烷基，R24是氢，特别是其中在X-1中R15是卤素以及R16是氢或者卤素；R22是氢、卤素、乙基或者甲基，R23是卤素、乙基或者甲基。
本发明的化合物以及它们的代谢物抑制在循环的淋巴细胞、嗜曙红细胞、嗜碱细胞和单核细胞(“VLA-4表达的细胞”)上VCAM-1和纤维结合蛋白与VLA-4的结合。人们知道VCAM-1和纤维结合蛋白在这种细胞上与VLA-4结合涉及一定的疾病状态，例如类风湿性关节炎、、多发性硬化、炎症性肠病，特别是嗜曙红细胞与肺内皮的结合，其是发生气喘的肺炎的原因。因此，在另一个方面本发明的化合物用于治疗类风湿性关节炎、多发性硬化、炎症性肠病，特别是气喘。
基于它们能够抑制在循环的淋巴细胞、嗜曙红细胞、嗜碱细胞和单核细胞上VCAM-1和纤维结合蛋白与VLA-4的结合，本发明的化合物以及它们的代谢物能被用作治疗熟知与这种结合有关的疾病的药物。这种疾病的例子是类风湿性关节炎、多发性硬化、气喘以及炎症性肠病。本发明的化合物优选用于治疗包括与肺炎例如气喘的疾病。气喘中出现的肺炎与嗜曙红细胞渗入肺有关，其中嗜曙红细胞与已经被一些气喘-触发事件或物质激活的内皮结合。
此外，代谢地衍生自本发明化合物的酰基苯丙氨酸衍生物也能够抑制VCAM-1和MadCAM与细胞的受体α4-β7亦称LPAM结合，其表达在淋巴细胞、嗜曙红细胞以及T细胞上。α4-β7与不同的配位体在炎症性的状况例如气喘下相互作用的精确的作用没有完全了解，抑制α4-β1和α4-β7受体结合的本发明的化合物在气喘的动物模型中特别有效。此外单克隆抗体对α4-β7的作用显示抑制α4-β7与MadCAM或VCAM结合的化合物可用于治疗炎症性肠病。它们也可用于治疗其他的疾病，其中这种结合涉及病害或症状的原因。
本发明的化合物可以经口、直肠或肠胃外，例如静脉内、肌内、皮下、鞘内或经皮肤给药；或舌下给药，或作为眼制剂，或作为肺炎的气溶胶。用于口服的胶囊、片剂、悬浮液或溶液，栓剂，注射溶液，滴眼剂，药膏或喷雾溶液是给药形式的例子。
静脉内、肌内、口服或吸入给药是优选的使用形式。本发明化合物给药的有效剂量取决于特定有效成份的性质、病人的年龄和需要以及给药的方式。剂量可以通过任何传统方法、例如通过剂量-限定的临床试验来确定。因此，本发明进一步包括治疗患有其中与VLA-4-表达的细胞结合的纤维结合蛋白VCAM-1是病症或病害的病因因素的疾病的宿主的方法，通过给药足够抑制VCAM-1或与VLA-4-表达的细胞结合的纤维结合蛋白量的本发明化合物以致减少所述的症状或所述的损害。通常，优选每天大约0.1-100毫克/仟克体重的剂量，其中特别优选每天1-25毫克/仟克的剂量，尤其优选每天1-10毫克/仟克体重的剂量。
在另一个方面，本发明进一步包括含有药学上有效量的本发明化合物和药学上可接受的载体的药物组合物。这种组合物可以通过任何传统的方法配制。在这一点上本发明涉及药物制剂，尤其是用于治疗或预防类风湿性关节炎、多发性硬化、炎症性肠病和气喘的药物制剂，其含有本发明的任何一种化合物或其药学上可接受的盐或酯和相容的药物载体材料。片剂或颗粒可以含有一系列的粘合剂、填料、载体或稀释剂。液体组合物可以是例如无菌的与水可混溶的溶液形式。除有效成份之外胶囊可以含有填料或增稠剂。此外，还可以含有增加香味的添加剂以及通常用作防腐剂、稳定剂、保湿剂和乳化剂的物质以及用于改变渗透压力的盐、缓冲剂及其他添加剂。
前面提到的载体材料和稀释剂可以包括任何常用的药学上可接受的有机或无机物质，例如水、明胶、乳糖、淀粉、硬脂酸镁、滑石、阿拉伯胶、聚乙二醇等。
口服的单位剂型例如片剂和胶囊，优选含有25毫克-1000毫克本发明化合物。
在另一个方面，本发明涉及制备式1化合物的方法。本发明的化合物可以通过任何传统的方法制备。在反应路线1中，用能够有选择地还原羧酸酯的还原剂处理式2化合物，其中Z是低级烷基，该化合物是按照如WO99/10313和WO99/10312中所述的方法制备的已知化合物。例如在大约室温下在醇溶液中用碱金属氢硼化物例如硼氢化钠处理式2化合物能够顺利地进行还原得到式1化合物。路线1 其中X和Y定义如上。
一般的方法熔点在Thomas-Hoover仪器上测定并且未校正。旋光度用Perkin-Elmer241型旋光计测定。1H-NMR波谱是使用四甲基硅烷(TMS)作为内标物、用Varian XL-200和Unityplus 400 MHz波谱仪记录。电子轰击(EI，70 ev)和快速原子轰击(FAB)质谱是在VG Autospec或VG 70E-HF质谱仪上测定。用于柱色谱法的硅胶是用于快速色谱法的Mallinkrodt SiliCar 230-400目硅胶；该柱在顶端0-5 psi氮气下运行以促进流动。薄层色谱是在涂有由E.Merck(E.Merck#1.05719)提供的硅胶的玻璃薄层板上进行，通过在12蒸汽中曝露在254 nm紫外线灯下在观察盒中观察或者通过用乙醇水溶液中的磷钼酸(PMA)或在C12中曝露之后用根据E.Von Arx，M.Faupel和M Brugger，J.Chromatography，1976，120，224-228制备的4，4’-四甲基二氨基二苯基甲烷试剂喷雾来目测。
反相高压液相色谱法(RP-HPLC)使用采用3×30厘米、WatersDeltaPak 15μM C-18柱的Waters Delta Prep 4000在40毫升/分钟的流量下采用一般含有5-95％乙腈的乙腈水(每个含有0.75％TFA)梯度在35-40分钟内或者使用采用41.4毫米×30厘米、8μM DynamaxTMC-18柱的Rainin HPLC在49毫升/分钟的流量下和如上所述相似的乙腈水梯度进行。
二氯甲烷(CH2C12)、2-丙醇、DMF、THF、甲苯、己烷、乙醚和甲醇是Fisher试剂级并且无需另外的纯化即可使用，除非另有说明，乙腈是Fisherhplc级并且直接使用。
定义THF是四氢呋喃，DMF是N，N-二甲基甲酰胺，
HOBT是1-羟基苯并三唑，BOP是六氟磷酸[(苯并三唑-1-基)氧]三-(二甲基氨基)鏻，HATU是六氟磷酸O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲鎓(uronium)，HBTU是六氟磷酸O-苯并三唑-N，N，N’，N’-四甲基脲鎓(uronium)，DIPEA是二异丙基乙胺，DMAP是4-(N，N-二甲基氨基)吡啶，DPPA是二苯基磷酰基叠氮化物，DBU是1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯，NaH是氢化钠，盐水是饱和的氯化钠水溶液TLC是薄层色谱法LDA是二异丙基氨基锂BOP-Cl是二(2-氧代-3-噁唑烷基)次磷酰氯(phosphinic chloride)NMP是N-甲基吡咯烷酮(pyrrolidinone)实施例实施例1.4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[(2-氯-6-甲基苯基)羰基]-L-苯丙氨醇的合成 在室温下在8小时期间内向含有4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[(2-氯-6-甲基苯基)羰基]-L-苯丙氨酸甲酯(9.9毫摩尔，5.14克)的甲醇(55毫升)溶液中分六部分加入过量的硼氢化钠(198毫摩尔，7.49克)。为了控制放热反应和形成泡沫时气体的放出，缓慢的加入硼氢化钠是至关紧要的。加入之后，形成的溶液在室温下搅拌2天，在此期间TLC分析混合物显示没有原料。过量的氢化物通过缓慢加入水(20毫升)破坏。在真空下除去甲醇，将得到的固体溶于水(30毫升)、饱和氯化铵(80毫升)和乙酸乙酯(150毫升)的混合物中。分离两层，水层用乙酸乙酯(70毫升)萃取。合并的萃取液用盐水溶液(100毫升)洗涤，无水硫酸镁干燥。过滤出干燥剂后，在真空下浓缩滤液得到5.3克粗化合物，其通过硅胶柱色谱法，用乙酸乙酯和己烷(3∶1)洗脱纯化，获得4.5克(92％)4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[(2-氯-6-甲基苯基)-羰基]-L-苯丙氨醇，为白色固体熔点198-200℃，HRMS观察到的质量491.0699；计算的质量491.0696(M+H)。
实施例2.4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-((4-甲磺酰基)丁基)环戊基]羰基]-L-苯丙氨醇的合成 在30-35℃下在6小时期间内向含有4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-((4-甲磺酰基)丁基)环戊基]羰基]-L-苯丙氨酸甲酯(3.34毫摩尔，2.0克)的甲醇(40毫升)溶液中分四部分加入过量的硼氢化钠(10毫摩尔，378毫克)。透明溶液在室温下搅拌15小时，在这时TLC分析混合物显示含有原料。然后，在6小时期间内分四部分再加入一些硼氢化钠(16.9毫摩尔，640毫克)，该溶液再搅拌3天。过量的氢化物通过缓慢加入水(10毫升)破坏。在真空下除去甲醇，在热的条件下将得到的固体溶于水(30毫升)、饱和氯化铵(80毫升)、乙酸乙酯(100毫升)和四氢呋喃(50毫升)的混合物中。分离两层，水层用乙酸乙酯(50毫升)和四氢呋喃(50毫升)萃取。合并的萃取液用盐水溶液(100毫升)洗涤，无水硫酸镁干燥。过滤出干燥剂后，在真空下浓缩滤液，将粗的残余物通过硅胶柱色谱法，用乙酸乙酯洗脱纯化，获得0.89克(47％)4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-((4-甲磺酰基)丁基)环戊基]羰基]-L-苯丙氨醇，为无定形的白色固体。HRMS观察到的质量569.1645；计算的质量569.1643(M+H)。
实施例3.使用实施例1中描述的一般方法，可以制备下列化合物4-[[(2-甲基-5-硝基苯基)羰基]氨基]-N-[[1-((4-甲磺酰基)丁基)环戊基]羰基]-L-苯丙氨醇4-[[(2，6-二甲基苯基)羰基]氨基]-N-[[1-((4-甲磺酰基)丁基)环戊基]羰基]-L-苯丙氨醇4-[[(2-三氟甲基苯基)羰基]氨基]-N-[[1-((4-甲磺酰基)丁基)环戊基]羰基]-L-苯丙氨醇4-[[(2-甲基-5-硝基苯基)羰基]氨基]-N-[[1-((4-甲硫基)丁基)环戊基]羰基]-L-苯丙氨醇4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-((3-甲磺酰基)丙基)-环戊基]羰基]-L-苯丙氨醇4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-((2-甲氧基乙基)环戊基]羰基]-L-苯丙氨醇4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[2-甲基-6-乙基苯基]羰基]-L-苯丙氨醇4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[(2-三氟甲基苯基)羰基]-L-苯丙氨醇4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[(2-溴苯基)羰基]-L-苯丙氨醇4-[[(2，6-二甲基苯基)羰基]氨基]-N-[(2-溴苯基)羰基]-L-苯丙氨醇实施例4.特应性灵长目动物的急性导气管炎症。
使用Turner等人描述的改进的实验设计测定猴子的导气管炎症(Tumer等人，1994)。重量在3.6-5.8仟克之间的成熟的雄性cynomolgus猴(Macacafascicularis，Hazelton Labs，Denver，PA)用于这些研究中。当经受蛔虫属萃取液的气溶胶时，所有的动物显示对蛔虫属sutim抗原的积极的皮肤和导气管反应，对于乙酰甲胆碱(MCh)的敏感性至少增加3倍。
在每个实验的当天，插进装上胶管管头的气管内导管(3毫米，Mallinckrodt Medical，St.Louis，MO)用12毫克/仟克氯胺酮盐酸盐和0.5毫克/仟克甲苯噻嗪使动物麻醉，然后直立放在专门设计的有机玻璃架子上。该气管内导管与热的Fleisch呼吸气流流速计连接。经连接于呼吸气流流速计的Validyn压差传感器(DP 45-24)测量空气流量。经连接在气管套管的侧臂和插入位于左侧乳头下面肋间隙的18-号胸膜内的针之间的第二Validyne传感器(DP 45-24)量经肺压力，使用如上所述的模块仪器数据记录压力和流量以及计算RL。在每个实验的当天测量所有动物的基线RL，平均值大约为0.04厘米H2O/毫升/秒。
实验设计通过将动物暴露在A.Suum萃取液的气溶胶中60秒诱发导气管炎症。该气溶胶经连接于气管内导管的喷雾器(De Vilbiss 5000型，Healt Care Inc.，Somerset，PA)传送。预先决定每个动物的萃取液浓度(500-50,000 PNU)并且引起导气管阻力至少加倍。在攻击抗原24小时之后，按照前面描述的使动物麻醉并且放置在不锈钢桌子上。通过将小儿科的支气管镜插入至导气管腔中直到大约第4或第5代支气管并且温和地用无菌的Hanks平衡的盐溶液的3X2毫升等分试样灌洗来评价导气管炎症。然后使用标准血液学技术分析回收的灌洗液中总的细胞和有不同的细胞数。
药物治疗动物在攻击抗原之前2小时口服药物或赋形剂。相对于用赋形剂治疗的对照动物，实施例1的化合物使存在于灌洗液中炎症细胞数和百分比的显著地减少。
权利要求
1.下式化合物 其中X是式X-1所示的基团 其中R15是卤素、硝基、低级烷磺酰基、氰基、低级烷基、低级烷氧基、低级烷氧羰基、羧基、低级烷基氨基磺酰基、全氟低级烷基、低级烷硫基、羟基低级烷基、烷氧基低级烷基、烷硫基低级烷基、烷亚磺酰基低级烷基、烷磺酰基低级烷基、低级烷亚磺酰基、低级烷酰基、芳酰基、芳基、芳氧基；R16是氢、卤素、硝基、氰基、低级烷基、OH、全氟低级烷基或低级烷硫基；或X是式X-2所示的基团 其中Het是含有1，2或3个选自N、O和S杂原子的5-或6-元杂芳环，或Het是含有1，2，3或4个选自O、S和N杂原子的9-或10-元二环杂芳环；R15和R16如上面X-1中所定义，以及R30是氢或低级烷基，p是0-1的整数；或X是式X-3所示的基团 其中R18是芳基、杂芳基，R19是取代的或未被取代的低级烷基、芳基、杂芳基、芳烷基、杂芳烷基，以及R20是取代的或未被取代的低级烷酰基或芳酰基；Y是式Y-1所示的基团 其中R22和R23独立地是氢、低级烷基、低级烷氧基、低级环烷基、芳基、芳烷基、硝基、氰基、低级烷硫基、低级烷亚磺酰基、低级烷磺酰基、低级烷酰基、卤素或全氟低级烷基，R22和R23中至少一个不是氢，以及R24是氢、低级烷基、低级烷氧基、芳基、硝基、氰基、低级烷磺酰基或卤素或者Y是经碳原子连接酰胺羰基的五或六元杂芳环的基团Y-2，其中所述的环含有一个、两或三个选自N、O和S的杂原子，所述环中一个或两个原子独立地被低级烷基、环烷基、卤素、氰基、全氟烷基或芳基取代，至少一个所述的取代的原子与连接酰胺羰基的碳原子相邻；或者Y是下式所示3-7元环的基团Y-3 其中R25是低级烷基、未被取代的或者氟取代的低级链烯基，或者基团R26-(CH2)e-，R26是芳基、杂芳基、叠氮基、氰基、羟基、低级烷氧基、低级烷氧羰基、低级烷酰基、低级烷硫基、低级烷磺酰基、低级烷亚磺酰基、全氟代低级烷酰基、硝基或者R26是基团-NR28R29；R28是H或者低级烷基；R29是氢、低级烷基、低级烷氧羰基、低级烷酰基、芳酰基、全氟代低级烷酰基氨基、低级烷磺酰基、低级烷氨基羰基、芳氨基羰基，或者R28和R29一起形成选择性地含有选自O、S和N的一个杂原子的4，5或6-元饱和碳环；环上的碳原子未被取代或被低级烷基或卤素取代；Q是-(CH2)fO-、-(CH2)fS-、-(CH2)fN(R27)-、-(CH2)f-或键；R27是H、低级烷基、芳基、低级烷酰基、芳酰基或低级烷氧羰基；e是0-4的整数；f是1-3的整数；以及虚线的键可以被选择性地氢化。
2.权利要求1的化合物，其中X是下式所示的基团 R15和R16如权利要求1中所定义。
3.权利要求2的化合物，其中R15是卤素、硝基、低级烷磺酰基、氰基、低级烷基、低级烷氧基、全氟低级烷基、低级烷硫基、烷亚磺酰基低级烷基、烷磺酰基低级烷基、低级烷亚磺酰基、低级烷酰基或芳酰基，R16是氢、卤素、硝基、氰基、低级烷基、全氟低级烷基或低级烷硫基。
4.权利要求3的化合物，其中R15和R16独立地是氯或氟。
5.权利要求3的化合物，其中X选自如下基团
6.权利要求1的化合物，其中X是基团X-2 其中p、R15、R16和R30如权利要求1中所定义。
7.权利要求6的化合物，其中Het是含有1，2或3个氮或氮和硫或氮和氧的5-或6-元单环杂芳环。
8.权利要求6的化合物，其中Het是含有1-3个氮的二环杂芳环。
9.权利要求6的化合物，其中R15是硝基、低级烷磺酰基、氰基、低级烷基、低级烷氧基、全氟低级烷基、低级烷硫基、低级烷酰基或芳基。
10.权利要求9的化合物，其中R15是未被取代的苯基。
11.权利要求6的化合物，其中R16是氢、卤素、硝基、氰基、低级烷基、全氟低级烷基；R30是氢或者低级烷基。
12.权利要求6的化合物，其中Het是含有1或2个氮的6元单环杂芳环或含有一个氮的10元二环杂芳环，R15和R16独立地是氢、低级烷基或全氟烷基，R30不存在。
13.权利要求6的化合物，其中X-2选自如下基团
14.权利要求1的化合物，其中X是 R18、R19和R20如权利要求1中所定义。
15.权利要求14的化合物，其中R18是苯基。
16.权利要求14的化合物，其中R19是未被取代的或被吡啶基或苯基取代的低级烷基。
17.权利要求14的化合物，其中R20是取代的或未被取代的低级烷酰基。
18.权利要求14的化合物，其中R18是苯基，R19是未被取代的或被吡啶基或苯基取代的低级烷基，R20是低级烷酰基。
19.权利要求14的化合物，其中R18是未被取代的或被卤素或低级烷氧基取代的苯基；R19是未被取代的或被低级烷氧基、吡啶基低级烷基或低级烷基取代的苯基低级烷基；R20是取代的或未被取代的低级烷酰基。
20.权利要求14的化合物，其中X选自如下基团
21.权利要求1的化合物，其中Y是 R22、R23和R24如权利要求1中所定义。
22.权利要求21的化合物，其中R22和R23是低级烷基、三氟甲基或卤素，R24是氢、低级烷基、低级烷氧基或卤素。
23.权利要求22的化合物，其中Y-1选自如下基团
24.权利要求1的化合物，其中Y是 p和Het、R30和R31如权利要求1中所定义。
25.权利要求24的化合物，其中Het是6元单环杂芳环。
26.权利要求25的化合物，其中杂原子是N。
27.权利要求26的化合物，其中Y-2选自如下基团
28.权利要求1的化合物，其中Y是式Y-3所示的基团 R25和Q如权利要求1中所定义；e是0-4的整数；f是1-3的整数；虚线的键可以被选择性地氢化。
29.权利要求28的化合物，其中Y-3是四-六元环，R25是R26-(CH2)e-；e是0-4以及R26是叠氮基、氰基、羟基、低级烷氧基、低级烷氧羰基、低级烷酰基、低级烷磺酰基、低级烷亚磺酰基、全氟代低级烷酰基、硝基、低级烷硫基、苯基或被烷氧基或卤素取代的苯基，或者R26是NHR29其中R29是低级烷酰基或低级烷氨基羰基；Q是(CH2)f，f是1-3的整数；以及虚线的键是氢化了的。
30.权利要求28的化合物，其中Y选自下式基团
31.根据权利要求1的化合物，选自4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[2-氯-6-甲基苯基]羰基]-L-苯丙氨醇，4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[(2-溴苯基)羰基]-L-苯丙氨醇，4-[[(2-甲基-5-硝基苯基)羰基]氨基]-N-[[1-((4-甲磺酰基)丁基)环戊基]羰基]-L-苯丙氨醇，4-[[(2，6-二甲基苯基)羰基]氨基]-N-[[1-[(4-甲磺酰基)丁基]环戊基]羰基]-L-苯丙氨醇，4-[[(2-三氟甲基苯基)碳基]氨基]-N-[[1-((4-甲磺酰基)丁基)环戊基]羰基]-L-苯丙氨醇，4-[[(2-甲基-5-硝基苯基)羰基]氨基]-N-[[1-((4-甲硫基)丁基)环戊基]羰基]-L-苯丙氨醇，4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-((3-甲磺酰基)丙基)环戊基]羰基]-L-苯丙氨醇，4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-(2-甲氧基乙基)环戊基]羰基]-L-苯丙氨醇，4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[[1-((4-甲磺酰基)丁基)环戊基]-L-苯丙氨醇，4-[[(2，6-二氯苯基)羰基]氨基]-N-[(2-溴苯基)羰基]-L-苯丙氨醇，或4-[[(2，6-二甲基苯基)羰基]氨基]-N-[(2-溴苯基)羰基]-L-苯丙氨醇。
32.制备式1化合物的方法 其中X和Y如权利要求1中所定义，其特征在于用能够有选择地还原羧酸酯的还原剂处理式2化合物， 其中X和Y定义如上，Z是低级烷基。
33.根据权利要求1-31中任何一项的化合物，用作药物尤其是用于治疗或预防类风湿性关节炎、多发性硬化、炎症性肠病和气喘的药物。
34.药物制剂，尤其是用于治疗或预防类风湿性关节炎、多发性硬化、炎症性肠病和气喘的药物制剂，其含有权利要求1-31中任何一项的化合物或其药学上可接受的盐或酯和相容的药物载体材料。
35.生产药物制剂、尤其是用于治疗或预防类风湿性关节炎、多发性硬化、炎症性肠病和气喘的药物制剂的方法，该方法包括将一个或多个根据权利要求1-31中任何一项的化合物或其药学上可接受的盐或酯以及如果需要一个或多个其他治疗有价值的物质和相容的药物载体制成盖仑制剂给药形式。
36.根据权利要求1-31中任何一项的化合物或其药学上可接受的盐或酯用于治疗或预防疾病，尤其是治疗或预防类风湿性关节炎、多发性硬化、炎症性肠病和气喘的用途。
37.根据权利要求1-31中任何一项化合物或其药学上可接受的盐或酯用于制备治疗或预防疾病，尤其是治疗或预防类风湿性关节炎、多发性硬化、炎症性肠病和气喘的含有上述化合物作为活性物质的药物的用途。
38.基本上如在上文中描述的新的化合物、药物、方法和用途。
全文摘要
式(1)化合物以及其药学上可接受的盐和酯,其中X和Y如说明书中所定义,是VCAM－1与VLA－4在体内结合的有效抑制剂并且用于治疗炎症性疾病中的炎症,其中这种结合作用引起该炎症。
文档编号A61KGK1340043SQ00803869
公开日2002年3月13日 申请日期2000年2月12日 优先权日1999年2月18日
发明者阿奇萨拉奥·赛杜里, 杰斐逊·W·蒂利 申请人:霍夫曼-拉罗奇有限公司
最新回复(0)