干扰素眼膏的制作方法
专利名称：干扰素眼膏的制作方法
所属领域 本发明涉及一种干扰素眼膏及其制备方法，它是一种眼部抗病毒药物，是干扰素的外用剂型。
背景技术：
干扰素自1957年问世到现在，已开发了许多剂型，在国内就有冻干粉针剂、液体注射剂、软膏剂、凝胶剂、妇科栓剂、滴眼剂等等，但作为眼膏剂，迄今为止还没有见报道。干扰素作为广谱抗病毒、抗增殖和免疫调节药物已用于治疗二十余种疾病，如慢性乙肝、丙肝、丁肝、毛细胞白血病、慢性髓细胞性白血病、多发性骨髓瘤、淋巴瘤、黑色素瘤、卵巢癌、肝细胞癌、肾细胞癌、爱滋病相关综合症、流感及其它呼吸道病毒疾病、尖锐湿疣、病毒性肺炎、带状疱疹、水痘、流行性乙型脑炎、流行性出血热、病毒性角膜炎。局部用药也很广，尤其针对皮肤及黏膜用药，作为干扰素眼膏，它主要治疗眼睑单纯疱疹、单纯性结膜炎、单纯性虹膜炎、睫状体炎等眼疾。而液体的干扰素滴眼剂治疗病毒引起的眼部疾患的效果已被肯定，如腺病毒引起的严重流行性角膜炎，传染性强，对存在传染源的家庭成员每日点用3次，约5000单位，有90％的预防效果，(对照组75％感染)。发病早期使用，可缩短病程，减少角膜后遗症，防止视力减退。对单纯疱疹病毒引起的眼疱疹病、IDU顽固性疱疹角膜炎也有效。治疗单纯疱疹性角膜炎，治愈率可达84-92.4％。但滴眼剂是液体制剂，存在以下几点不足1.稳定性不好，有效期短，且在有效期内干扰素活性降低较快。
2.药物利用度低(1-10％)，这是由于人眼结膜囊暂时只可容纳30ul溶液，滴入部分药液可迅速从膜囊溢出或从泪液中流失。
3.用药局部可产生眼前组织(角膜、结膜、巩膜、房水、睫状体)药物比眼后部组织中(晶状体、玻璃体、视网膜)浓度高，很难达到治疗眼后部组织的作用。
几年来，临床医生及患者反映滴眼液虽白天使用方便，可需多次点滴，并且夜间不能持续用药。而使用眼用膏剂，不仅减少用药次数，而且可以夜间用药，从而延长了用药时间提高了治疗效果。发明人经过大量实验和临床研究，解决了上述问题。所以干扰素眼膏克服干扰素滴眼剂存在的这些不足，具有使用方便，作用直接、集中、全面、持久等特点。
发明内容
本发明的目的是提供一种干扰素眼膏，它不仅具有稳定性好、药物利用度高、药效持久、疗效好，且具有使用方便，作用直接、集中、全面、持久等特点。
本发明的另一个目的是提供一种干扰素眼膏的制备方法。它具有制备工艺稳定，制品均一性好，生物活性稳定，药效持久等优点。
本发明的技术方案是，一种干扰素眼膏，含有药用活性成分干扰素的干扰素溶液和眼膏基质；所述的干扰素溶液中含有干扰素、磷酸二氢钠、磷酸二氢钠、氯化钠、稳定剂，稳定剂选自人血白蛋白、甘露醇、甘油、甘氨酸中的一种或几种的组合；所述的眼膏基质中含有黄凡士林，液体石蜡，羊毛脂，乳化剂；乳化剂选自聚山梨酯-60、聚山梨酯-80、司盘-80中的一种或几种的组合。干扰素与眼膏基质以及乳化剂聚山梨酯-80等赋形剂共同形成油包水型稳定的眼膏剂。干扰素在赋形剂中表现出稳定的生物活性，眼部用药时，干扰素利用率高，药效持久，充分体现了干扰素广谱抗病毒的优越性。
如上所述的干扰素眼膏的组分中所述的干扰素溶液，其组份中干扰素按生物活性体积比为1.0×105IU/ml～3.0×108IU/ml，其它按体积比为磷酸氢二钠0.5％～1.2％，磷酸二氢钠0.2％～0.8％，氯化钠0.1％～0.8％，0.1％～2.0％稳定剂，稳定剂选自人血白蛋白、甘露醇、甘油、甘氨酸中的一种或几种的组合，人血白蛋白作为优选。所述的眼膏基质，按重量比，其组份黄凡士林60％～90％，液体石蜡5％～20％，羊毛脂5％～20％，0～2.0％的乳化剂，乳化剂选自聚山梨酯-60、聚山梨酯-80、司盘-80中的一种或几种的组合，其中以聚山梨酯-80作为优选。干扰素∶眼膏基质＝1.0×103IU～5.0×108IU∶1克。
如上所述的干扰素眼膏的制备方法，主要分为三个步骤其一是制备眼膏基质，即按眼膏基质组分比例称取各赋形剂，然后加热进行混合，150℃干热灭菌1小时，冷却后备用；其二是按眼膏组分比例取干扰素原液、稳定剂、缓冲溶液，在无菌条件下制备干扰素溶液液，经0.22um滤膜除菌后备用；其三是制备干扰素眼膏剂，即先将油相眼膏基质预热至40℃至56℃，再将按组分比例将水相干扰素溶液缓慢加入油相眼膏基质中，边加边搅拌，搅拌10分钟至30分钟后利用分装系统进行分装成成品。
如上所述的干扰素眼膏的干扰素是天然的，或是基因重组的人干扰素，可以是αβγ三种的任一型别。三种干扰素具有很大的同源性，只是三种干扰素在基因序列上稍有不同而已，其药物功效基本相近。
如上所述的干扰素眼膏的干扰素优选为α2b亚型。由于干扰素α2b具有比活性高，抗病毒作用强，中和抗体产生率低的优点。使用重组人扰素α2b眼膏可治疗由病毒感染引起的眼科疾病，如眼睑单纯疱疹、单纯性结膜炎、角膜炎、单纯性虹膜炎、睫状体炎等等。同时，本发明的干扰素眼膏具有易于均匀的涂敷于眼睑内，粘着性好，且无刺激性，更易被眼部黏膜吸收，且使用方便的优点。
本发明的干扰素眼膏产品，它具有制备工艺稳定，制品均一性好，生物活性稳定等优点。配方采用的是干扰素与眼膏赋型基质、稳定剂以及乳化剂等组成的油包水型眼膏剂。眼部用药时，药效持久，与干扰素滴眼液相比，明显的提高了治疗效果。基质中采用聚山梨酯80作为优选乳化剂，具有提高干扰素的稳定性，增强干扰素的生物疗效。
具体实施例方式
下面结合实施例对本发明作进一步说明实施例1 干扰素眼膏及其制备方法1.组分眼膏基质 黄凡士林 900.0g 液体石蜡 50.0g羊毛脂50.0g干扰素溶液IFNα2b 2.0×107IU人血白蛋白 5.0gNa2HPO44.2g NaH2PO4 2.3gNaCl 0.6g H2O 至500ml干扰素含量∶眼膏基质＝2.0×105IU∶1g2.制备方法A.称取眼膏基质的各组分，并进行加热混合，将混合后的基质进行150℃干烤灭菌1小时，冷却后备用；B.按眼膏组分比例取干扰素原液、稳定剂、缓冲溶液，在无菌条件下制备干扰素溶液液，经0.22um滤膜除菌后备用；C.将干扰素溶液加入到眼膏基质中，即先将油相眼膏基质预热至40℃至56℃，再将按组分比例将水相干扰素溶液缓慢加入油相基质中，边加边搅拌，搅拌10分钟至30分钟后利用分装系统进行分装。
实施例2干扰素眼膏及其制备方法1.组分眼膏基质 黄凡士林 800.0g液体石蜡 98.0g羊毛脂100.0g聚山梨酯-602.0g干扰素溶液IFNα2b 5.0×107IU 甘露醇 5.0gNa2HPO45.6g NaH2PO4 1.1gNaCl 0.5g H2O 至500ml干扰素含量∶眼膏基质＝1.0×105IU∶1g2.制备方法同具体实施例1。
实施例3干扰素眼膏及其制备方法1.组分眼膏基质 黄凡士林800.0g液体石蜡 97.5g
羊毛脂 100.0g聚山梨酯-80 2.5g干扰素溶液IFNα2b2.0×107IU 人血白蛋白 2.5gNa2HPO4 4.2g NaH2PO4 2.3gNaCl 0.6g H2O 至500ml干扰素含量∶眼膏基质＝2.0×105IU∶1g2.制备方法同具体实施例1。
实施例4 干扰素眼膏及其制备方法1.组分眼膏基质 黄凡士林 800.0g液体石蜡 97.5g羊毛脂100.0g司盘-802.5g干扰素溶液IFNα2b 2.0×107IU 人血白蛋白 2.5gNa2HPO44.2g NaH2PO4 2.3gNaCl 0.6g H2O 至500ml干扰素含量∶眼膏基质＝2.0×105IU∶1g2.制备方法同具体实施例1。
实施例5干扰素眼膏及其制备方法1.组分眼膏基质 黄凡士林 600.0g液体石蜡 195.0g羊毛脂 200.0g聚山梨酯-805.0g干扰素溶液IFNα2b2.0×107IU 甘油 2.5gNa2HPO44.2g NaH2PO4 2.3gNaCl 0.6g H2O 至500ml干扰素含量∶眼膏基质＝2.0×105IU∶1g2.制备方法同具体实施例1。
试验实施例1 药理学研究试验1.试验材料采用无环鸟苷组、滴宁(购自长春长生基因药业股份有限公司生产的重组人干扰素α1b滴眼液)为阳性对照药，眼膏的空白基质为阴性对照药，使用的干扰素眼膏是根据最优选的实施例三中制备的重组人干扰素α2b眼膏，并分为低、中、高三种剂量，利用体重为2～3Kg的大耳白兔(中国人民解放军农牧大学实验动物中心提供)为动物模型。
2.试验方法(1)模型制备将大白兔若干只分别固定，分别滴入眼内1滴丁卡因溶液，用扩眼器扩开眼睑，用6mm环钻在角膜上钻一环形印记，用手术刀片将角膜上皮刮去3×3mm2的创面，然后将50μl单疱病毒滴入损伤的角膜上，用手轻揉30秒钟，左右眼均做上述手术。
(2)分组及给药将上述兔均分6组模型组、阴性对照组、阳性对照组、干扰素眼膏组。阳性组中，无环鸟苷为2滴/次，滴宁为7500IU/次，重组人干扰素α2b眼膏，是按低、中、高剂量组3750IU/次、7500IU/次、15000IU/次，3次/日，连续7日，其中中剂量组为临床组，同时对大耳白兔已经感染单疱病毒的左右眼进行涂(或滴)眼药。
(3)及评分标准分别于造模型后24h、给药后3、5、7、天，用沾1％荧光素钠的滤纸染色，于裂隙灯下观察角膜病变程度、照相，于给药后第7天观察、照相后，麻醉取角膜，10％中性福尔马林固定，做病理学检查。
角膜病变程度评分印记环明显，弥漫点状、片状及树枝状着色为5分；印记环明显，散在点状、片状及树枝状着色为4分；印记环不明显，散在点状、片状着色为3分；印记环不明显，散在少数点状、片状及浅树枝着色为2分；印记环不明显，散在少数点状着色为1分；表面光滑，有极少数点状着色为0分。
3.试验结果将每个大耳白兔各角膜病变程度按上述评分标准打分后，按统计学进行统计，则P值均小于0.001。观察结果表明应用无环鸟苷及滴宁后，角膜的病损变浅、变小，应用重组人干扰素α2b眼膏，角膜的病损也变浅、变小，其中以中、高剂量组的疗效为佳，所以重组人干扰素α2b有明显地抑制单疱病毒角膜炎的作用。
试验实施例2 大耳白兔的急性毒性试验1.试验材料使用的干扰素眼膏是根据最优选的实施例3中制备的重组人干扰素α2b眼膏，利用体重为2～3Kg的大耳白兔(中国人民解放军农牧大学实验动物中心提供)为动物模型。
2.试验方法利用重组人干扰素α2b眼膏最大给药量4.8万IU/Kg作为实验药品，各兔双眼均涂敷干扰素α2b眼膏3cm×2，即120mg，相当于12万IU/2.5Kg(4.8IU/Kg)，涂敷眼膏后，每日观察，连续7日，观察结果。
3.试验结果观察发现给药后7日之内动物体重、毛发、食欲、四肢活动、精神状态均无异常，无一只死亡。而重组人干扰素α2b眼膏临床用量为40万IU/g的1.5cm，若人体重按60Kg计算，相当于0.04万IU/Kg；而重组人干扰素α2b眼膏兔急毒试验证明，其最大给药量4.8IU/Kg未出现毒性反应，该剂量相当于临床剂量的120倍，所以临床用药非常安全。
试验实施例3 大耳白兔的眼部刺激试验1.试验材料采用眼膏的空白基质为阴性对照药，使用的干扰素眼膏是根据最优选的实施例中制备的重组人干扰素α2b眼膏临床用药规格20万IU/g为试验膏剂，利用体重为2～3Kg的大耳白兔(中国人民解放军农牧大学实验动物中心提供)为动物模型。
2.试验方法取重组人干扰素α2b眼膏，将其100mg涂敷于大耳白兔右侧眼结膜囊内，另一侧涂敷等量的空白基质作对照，给药后使眼睛被动闭合5～10秒，每曰给药3次，连续给药7天。记录首次给药后6h、24h、48h、72h、5天、7天眼的局部反应情况(裂隙灯下观察、照相)。
3.试验结果依据《新药(西药)临床前研究指导原则汇编》进行评分标准，将每只动物的眼角膜、虹膜、结膜的刺激反应分值相加，即是1只动物眼刺激反应的总积分，再按《新药(西药)临床前研究指导原则汇编》眼刺激评价标准进行判定，见下表。
IFNα2b眼膏刺激性试验最后分值评分结果表 根据按《新药(西药)临床前研究指导原则汇编》眼刺激性评分标准，给药期间内三个批号的重组人干扰素α2b眼膏对眼均无刺激性反应。所以这种干扰素眼膏100mg/次，3次/日，连续7日给药，对兔眼均无刺激性反应。
权利要求
1.一种干扰素眼膏，含有药用活性成分干扰素的干扰素溶液和眼膏基质，所述的干扰素溶液中含有干扰素、人血白蛋白、磷酸二氢钠、磷酸二氢钠、氯化钠；所述的眼膏基质中含有黄凡士林，液体石蜡，羊毛脂，乳化剂。
2.如权利要求1所述的干扰素眼膏，其特征在于眼膏基质中采用聚山梨酯80作为乳化剂，占总重量比为0.02％～2.0％。
3.如权利要求1所述的干扰素眼膏，其特征在于所述的干扰素溶液，其组份中干扰素按生物活性体积比为1.0×105IU/ml～3.0×108IU/ml，其它按体积比为人血白蛋白0.1％～2.0％，磷酸氢二钠0.5％～1.2％，磷酸二氢钠0.2％～0.8％，氯化钠0.1％～0.8％。
4.如权利要求1所述的干扰素眼膏，其特征在于所述的眼膏基质，按重量比，其组份黄凡士林60％～90％，液体石蜡5％～20％，羊毛脂5％～20％。
5.如权利要求1至4所述的干扰素眼膏，其特征在于干扰素眼膏的组份含量为干扰素∶眼膏基质＝1.0×105IU～5.0×108IU∶100g。
6.如权利要求5所述的干扰素眼膏，其特征在于干扰素眼膏的组份含量为干扰素∶眼膏基质＝2.0×105IU∶1g。
7.如权利要求1所述的干扰素眼膏，其特征在于所述的干扰素眼膏中的干扰素可以是天然的或基因重组的人干扰素，可以是αβγ三种的任一型别。
8.如权利要求7所述的任一干扰素眼膏，其特征在于所述的干扰素眼膏的干扰素，是α、β、γ三种的任一型别基因重组的人干扰素。
9.如权利要求8所述的干扰素眼膏，其特征在于所述的干扰素眼膏中的干扰素为α2b亚型。
10.权利要求1的干扰素眼膏的制备方法，包括下列工艺步骤A.称取眼膏基质的各组分，并进行加热混合，将混合后的基质进行150℃干烤灭菌1小时，冷却后备用；B.按眼膏组分比例取干扰素原液、稳定剂、缓冲溶液，在无菌条件下制备干扰素溶液液，经0.22um滤膜除菌后备用；C.将干扰素溶液加入到眼膏基质中，即先将油相眼膏基质预热至40℃至56℃，再将按组分比例将水相干扰素溶液缓慢加入油相基质中，边加边搅拌，搅拌10分钟至30分钟后利用分装系统进行分装。
全文摘要
本发明提供一种干扰素眼膏及其制备方法，含有药用活性成分干扰素的干扰素溶液和眼膏基质共同形成油包水型稳定的眼膏剂，干扰素∶眼膏基质＝(1.0×10
文档编号A61K9/02GK1616088SQ20041005155
公开日2005年5月18日 申请日期2004年9月17日 优先权日2004年9月17日
发明者王妍, 柴向东, 田建明, 李云富 申请人:深圳市海王英特龙生物技术股份有限公司
所属领域 本发明涉及一种干扰素眼膏及其制备方法，它是一种眼部抗病毒药物，是干扰素的外用剂型。
背景技术：
干扰素自1957年问世到现在，已开发了许多剂型，在国内就有冻干粉针剂、液体注射剂、软膏剂、凝胶剂、妇科栓剂、滴眼剂等等，但作为眼膏剂，迄今为止还没有见报道。干扰素作为广谱抗病毒、抗增殖和免疫调节药物已用于治疗二十余种疾病，如慢性乙肝、丙肝、丁肝、毛细胞白血病、慢性髓细胞性白血病、多发性骨髓瘤、淋巴瘤、黑色素瘤、卵巢癌、肝细胞癌、肾细胞癌、爱滋病相关综合症、流感及其它呼吸道病毒疾病、尖锐湿疣、病毒性肺炎、带状疱疹、水痘、流行性乙型脑炎、流行性出血热、病毒性角膜炎。局部用药也很广，尤其针对皮肤及黏膜用药，作为干扰素眼膏，它主要治疗眼睑单纯疱疹、单纯性结膜炎、单纯性虹膜炎、睫状体炎等眼疾。而液体的干扰素滴眼剂治疗病毒引起的眼部疾患的效果已被肯定，如腺病毒引起的严重流行性角膜炎，传染性强，对存在传染源的家庭成员每日点用3次，约5000单位，有90％的预防效果，(对照组75％感染)。发病早期使用，可缩短病程，减少角膜后遗症，防止视力减退。对单纯疱疹病毒引起的眼疱疹病、IDU顽固性疱疹角膜炎也有效。治疗单纯疱疹性角膜炎，治愈率可达84-92.4％。但滴眼剂是液体制剂，存在以下几点不足1.稳定性不好，有效期短，且在有效期内干扰素活性降低较快。
2.药物利用度低(1-10％)，这是由于人眼结膜囊暂时只可容纳30ul溶液，滴入部分药液可迅速从膜囊溢出或从泪液中流失。
3.用药局部可产生眼前组织(角膜、结膜、巩膜、房水、睫状体)药物比眼后部组织中(晶状体、玻璃体、视网膜)浓度高，很难达到治疗眼后部组织的作用。
几年来，临床医生及患者反映滴眼液虽白天使用方便，可需多次点滴，并且夜间不能持续用药。而使用眼用膏剂，不仅减少用药次数，而且可以夜间用药，从而延长了用药时间提高了治疗效果。发明人经过大量实验和临床研究，解决了上述问题。所以干扰素眼膏克服干扰素滴眼剂存在的这些不足，具有使用方便，作用直接、集中、全面、持久等特点。
发明内容
本发明的目的是提供一种干扰素眼膏，它不仅具有稳定性好、药物利用度高、药效持久、疗效好，且具有使用方便，作用直接、集中、全面、持久等特点。
本发明的另一个目的是提供一种干扰素眼膏的制备方法。它具有制备工艺稳定，制品均一性好，生物活性稳定，药效持久等优点。
本发明的技术方案是，一种干扰素眼膏，含有药用活性成分干扰素的干扰素溶液和眼膏基质；所述的干扰素溶液中含有干扰素、磷酸二氢钠、磷酸二氢钠、氯化钠、稳定剂，稳定剂选自人血白蛋白、甘露醇、甘油、甘氨酸中的一种或几种的组合；所述的眼膏基质中含有黄凡士林，液体石蜡，羊毛脂，乳化剂；乳化剂选自聚山梨酯-60、聚山梨酯-80、司盘-80中的一种或几种的组合。干扰素与眼膏基质以及乳化剂聚山梨酯-80等赋形剂共同形成油包水型稳定的眼膏剂。干扰素在赋形剂中表现出稳定的生物活性，眼部用药时，干扰素利用率高，药效持久，充分体现了干扰素广谱抗病毒的优越性。
如上所述的干扰素眼膏的组分中所述的干扰素溶液，其组份中干扰素按生物活性体积比为1.0×105IU/ml～3.0×108IU/ml，其它按体积比为磷酸氢二钠0.5％～1.2％，磷酸二氢钠0.2％～0.8％，氯化钠0.1％～0.8％，0.1％～2.0％稳定剂，稳定剂选自人血白蛋白、甘露醇、甘油、甘氨酸中的一种或几种的组合，人血白蛋白作为优选。所述的眼膏基质，按重量比，其组份黄凡士林60％～90％，液体石蜡5％～20％，羊毛脂5％～20％，0～2.0％的乳化剂，乳化剂选自聚山梨酯-60、聚山梨酯-80、司盘-80中的一种或几种的组合，其中以聚山梨酯-80作为优选。干扰素∶眼膏基质＝1.0×103IU～5.0×108IU∶1克。
如上所述的干扰素眼膏的制备方法，主要分为三个步骤其一是制备眼膏基质，即按眼膏基质组分比例称取各赋形剂，然后加热进行混合，150℃干热灭菌1小时，冷却后备用；其二是按眼膏组分比例取干扰素原液、稳定剂、缓冲溶液，在无菌条件下制备干扰素溶液液，经0.22um滤膜除菌后备用；其三是制备干扰素眼膏剂，即先将油相眼膏基质预热至40℃至56℃，再将按组分比例将水相干扰素溶液缓慢加入油相眼膏基质中，边加边搅拌，搅拌10分钟至30分钟后利用分装系统进行分装成成品。
如上所述的干扰素眼膏的干扰素是天然的，或是基因重组的人干扰素，可以是αβγ三种的任一型别。三种干扰素具有很大的同源性，只是三种干扰素在基因序列上稍有不同而已，其药物功效基本相近。
如上所述的干扰素眼膏的干扰素优选为α2b亚型。由于干扰素α2b具有比活性高，抗病毒作用强，中和抗体产生率低的优点。使用重组人扰素α2b眼膏可治疗由病毒感染引起的眼科疾病，如眼睑单纯疱疹、单纯性结膜炎、角膜炎、单纯性虹膜炎、睫状体炎等等。同时，本发明的干扰素眼膏具有易于均匀的涂敷于眼睑内，粘着性好，且无刺激性，更易被眼部黏膜吸收，且使用方便的优点。
本发明的干扰素眼膏产品，它具有制备工艺稳定，制品均一性好，生物活性稳定等优点。配方采用的是干扰素与眼膏赋型基质、稳定剂以及乳化剂等组成的油包水型眼膏剂。眼部用药时，药效持久，与干扰素滴眼液相比，明显的提高了治疗效果。基质中采用聚山梨酯80作为优选乳化剂，具有提高干扰素的稳定性，增强干扰素的生物疗效。
具体实施例方式
下面结合实施例对本发明作进一步说明实施例1 干扰素眼膏及其制备方法1.组分眼膏基质 黄凡士林 900.0g 液体石蜡 50.0g羊毛脂50.0g干扰素溶液IFNα2b 2.0×107IU人血白蛋白 5.0gNa2HPO44.2g NaH2PO4 2.3gNaCl 0.6g H2O 至500ml干扰素含量∶眼膏基质＝2.0×105IU∶1g2.制备方法A.称取眼膏基质的各组分，并进行加热混合，将混合后的基质进行150℃干烤灭菌1小时，冷却后备用；B.按眼膏组分比例取干扰素原液、稳定剂、缓冲溶液，在无菌条件下制备干扰素溶液液，经0.22um滤膜除菌后备用；C.将干扰素溶液加入到眼膏基质中，即先将油相眼膏基质预热至40℃至56℃，再将按组分比例将水相干扰素溶液缓慢加入油相基质中，边加边搅拌，搅拌10分钟至30分钟后利用分装系统进行分装。
实施例2干扰素眼膏及其制备方法1.组分眼膏基质 黄凡士林 800.0g液体石蜡 98.0g羊毛脂100.0g聚山梨酯-602.0g干扰素溶液IFNα2b 5.0×107IU 甘露醇 5.0gNa2HPO45.6g NaH2PO4 1.1gNaCl 0.5g H2O 至500ml干扰素含量∶眼膏基质＝1.0×105IU∶1g2.制备方法同具体实施例1。
实施例3干扰素眼膏及其制备方法1.组分眼膏基质 黄凡士林800.0g液体石蜡 97.5g
羊毛脂 100.0g聚山梨酯-80 2.5g干扰素溶液IFNα2b2.0×107IU 人血白蛋白 2.5gNa2HPO4 4.2g NaH2PO4 2.3gNaCl 0.6g H2O 至500ml干扰素含量∶眼膏基质＝2.0×105IU∶1g2.制备方法同具体实施例1。
实施例4 干扰素眼膏及其制备方法1.组分眼膏基质 黄凡士林 800.0g液体石蜡 97.5g羊毛脂100.0g司盘-802.5g干扰素溶液IFNα2b 2.0×107IU 人血白蛋白 2.5gNa2HPO44.2g NaH2PO4 2.3gNaCl 0.6g H2O 至500ml干扰素含量∶眼膏基质＝2.0×105IU∶1g2.制备方法同具体实施例1。
实施例5干扰素眼膏及其制备方法1.组分眼膏基质 黄凡士林 600.0g液体石蜡 195.0g羊毛脂 200.0g聚山梨酯-805.0g干扰素溶液IFNα2b2.0×107IU 甘油 2.5gNa2HPO44.2g NaH2PO4 2.3gNaCl 0.6g H2O 至500ml干扰素含量∶眼膏基质＝2.0×105IU∶1g2.制备方法同具体实施例1。
试验实施例1 药理学研究试验1.试验材料采用无环鸟苷组、滴宁(购自长春长生基因药业股份有限公司生产的重组人干扰素α1b滴眼液)为阳性对照药，眼膏的空白基质为阴性对照药，使用的干扰素眼膏是根据最优选的实施例三中制备的重组人干扰素α2b眼膏，并分为低、中、高三种剂量，利用体重为2～3Kg的大耳白兔(中国人民解放军农牧大学实验动物中心提供)为动物模型。
2.试验方法(1)模型制备将大白兔若干只分别固定，分别滴入眼内1滴丁卡因溶液，用扩眼器扩开眼睑，用6mm环钻在角膜上钻一环形印记，用手术刀片将角膜上皮刮去3×3mm2的创面，然后将50μl单疱病毒滴入损伤的角膜上，用手轻揉30秒钟，左右眼均做上述手术。
(2)分组及给药将上述兔均分6组模型组、阴性对照组、阳性对照组、干扰素眼膏组。阳性组中，无环鸟苷为2滴/次，滴宁为7500IU/次，重组人干扰素α2b眼膏，是按低、中、高剂量组3750IU/次、7500IU/次、15000IU/次，3次/日，连续7日，其中中剂量组为临床组，同时对大耳白兔已经感染单疱病毒的左右眼进行涂(或滴)眼药。
(3)及评分标准分别于造模型后24h、给药后3、5、7、天，用沾1％荧光素钠的滤纸染色，于裂隙灯下观察角膜病变程度、照相，于给药后第7天观察、照相后，麻醉取角膜，10％中性福尔马林固定，做病理学检查。
角膜病变程度评分印记环明显，弥漫点状、片状及树枝状着色为5分；印记环明显，散在点状、片状及树枝状着色为4分；印记环不明显，散在点状、片状着色为3分；印记环不明显，散在少数点状、片状及浅树枝着色为2分；印记环不明显，散在少数点状着色为1分；表面光滑，有极少数点状着色为0分。
3.试验结果将每个大耳白兔各角膜病变程度按上述评分标准打分后，按统计学进行统计，则P值均小于0.001。观察结果表明应用无环鸟苷及滴宁后，角膜的病损变浅、变小，应用重组人干扰素α2b眼膏，角膜的病损也变浅、变小，其中以中、高剂量组的疗效为佳，所以重组人干扰素α2b有明显地抑制单疱病毒角膜炎的作用。
试验实施例2 大耳白兔的急性毒性试验1.试验材料使用的干扰素眼膏是根据最优选的实施例3中制备的重组人干扰素α2b眼膏，利用体重为2～3Kg的大耳白兔(中国人民解放军农牧大学实验动物中心提供)为动物模型。
2.试验方法利用重组人干扰素α2b眼膏最大给药量4.8万IU/Kg作为实验药品，各兔双眼均涂敷干扰素α2b眼膏3cm×2，即120mg，相当于12万IU/2.5Kg(4.8IU/Kg)，涂敷眼膏后，每日观察，连续7日，观察结果。
3.试验结果观察发现给药后7日之内动物体重、毛发、食欲、四肢活动、精神状态均无异常，无一只死亡。而重组人干扰素α2b眼膏临床用量为40万IU/g的1.5cm，若人体重按60Kg计算，相当于0.04万IU/Kg；而重组人干扰素α2b眼膏兔急毒试验证明，其最大给药量4.8IU/Kg未出现毒性反应，该剂量相当于临床剂量的120倍，所以临床用药非常安全。
试验实施例3 大耳白兔的眼部刺激试验1.试验材料采用眼膏的空白基质为阴性对照药，使用的干扰素眼膏是根据最优选的实施例中制备的重组人干扰素α2b眼膏临床用药规格20万IU/g为试验膏剂，利用体重为2～3Kg的大耳白兔(中国人民解放军农牧大学实验动物中心提供)为动物模型。
2.试验方法取重组人干扰素α2b眼膏，将其100mg涂敷于大耳白兔右侧眼结膜囊内，另一侧涂敷等量的空白基质作对照，给药后使眼睛被动闭合5～10秒，每曰给药3次，连续给药7天。记录首次给药后6h、24h、48h、72h、5天、7天眼的局部反应情况(裂隙灯下观察、照相)。
3.试验结果依据《新药(西药)临床前研究指导原则汇编》进行评分标准，将每只动物的眼角膜、虹膜、结膜的刺激反应分值相加，即是1只动物眼刺激反应的总积分，再按《新药(西药)临床前研究指导原则汇编》眼刺激评价标准进行判定，见下表。
IFNα2b眼膏刺激性试验最后分值评分结果表 根据按《新药(西药)临床前研究指导原则汇编》眼刺激性评分标准，给药期间内三个批号的重组人干扰素α2b眼膏对眼均无刺激性反应。所以这种干扰素眼膏100mg/次，3次/日，连续7日给药，对兔眼均无刺激性反应。
权利要求
1.一种干扰素眼膏，含有药用活性成分干扰素的干扰素溶液和眼膏基质，所述的干扰素溶液中含有干扰素、人血白蛋白、磷酸二氢钠、磷酸二氢钠、氯化钠；所述的眼膏基质中含有黄凡士林，液体石蜡，羊毛脂，乳化剂。
2.如权利要求1所述的干扰素眼膏，其特征在于眼膏基质中采用聚山梨酯80作为乳化剂，占总重量比为0.02％～2.0％。
3.如权利要求1所述的干扰素眼膏，其特征在于所述的干扰素溶液，其组份中干扰素按生物活性体积比为1.0×105IU/ml～3.0×108IU/ml，其它按体积比为人血白蛋白0.1％～2.0％，磷酸氢二钠0.5％～1.2％，磷酸二氢钠0.2％～0.8％，氯化钠0.1％～0.8％。
4.如权利要求1所述的干扰素眼膏，其特征在于所述的眼膏基质，按重量比，其组份黄凡士林60％～90％，液体石蜡5％～20％，羊毛脂5％～20％。
5.如权利要求1至4所述的干扰素眼膏，其特征在于干扰素眼膏的组份含量为干扰素∶眼膏基质＝1.0×105IU～5.0×108IU∶100g。
6.如权利要求5所述的干扰素眼膏，其特征在于干扰素眼膏的组份含量为干扰素∶眼膏基质＝2.0×105IU∶1g。
7.如权利要求1所述的干扰素眼膏，其特征在于所述的干扰素眼膏中的干扰素可以是天然的或基因重组的人干扰素，可以是αβγ三种的任一型别。
8.如权利要求7所述的任一干扰素眼膏，其特征在于所述的干扰素眼膏的干扰素，是α、β、γ三种的任一型别基因重组的人干扰素。
9.如权利要求8所述的干扰素眼膏，其特征在于所述的干扰素眼膏中的干扰素为α2b亚型。
10.权利要求1的干扰素眼膏的制备方法，包括下列工艺步骤A.称取眼膏基质的各组分，并进行加热混合，将混合后的基质进行150℃干烤灭菌1小时，冷却后备用；B.按眼膏组分比例取干扰素原液、稳定剂、缓冲溶液，在无菌条件下制备干扰素溶液液，经0.22um滤膜除菌后备用；C.将干扰素溶液加入到眼膏基质中，即先将油相眼膏基质预热至40℃至56℃，再将按组分比例将水相干扰素溶液缓慢加入油相基质中，边加边搅拌，搅拌10分钟至30分钟后利用分装系统进行分装。
全文摘要
本发明提供一种干扰素眼膏及其制备方法，含有药用活性成分干扰素的干扰素溶液和眼膏基质共同形成油包水型稳定的眼膏剂，干扰素∶眼膏基质＝(1.0×10
文档编号A61K9/02GK1616088SQ20041005155
公开日2005年5月18日 申请日期2004年9月17日 优先权日2004年9月17日
发明者王妍, 柴向东, 田建明, 李云富 申请人:深圳市海王英特龙生物技术股份有限公司
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