一种中药组合物及其制备方法和质量控制方法
专利名称：一种中药组合物及其制备方法和质量控制方法
技术领域：
本发明涉及一种中药组合物及其制备方法，属中药领域。
背景技术：
阴道炎是妇科常见病。由于阴道与外界相通，常因经期或性生活卫生不良，或因分娩及宫腔操作等因素引起阴道感染，甚至可使炎症侵袭内生殖器官，导致盆腔炎症。此外患有糖尿病、B族维生素缺乏、卵巢功能衰退，某些过敏或感染性疾病者更易感染，致病病原体常为霉菌、细菌、支原体、衣原体等。除老年性阴道炎外，几种阴道炎均属性传播疾病，近年来发病率有上升趋势。因此，探索一种治疗该类疾病的药物非常必要。
发明内容
本发明的目的是提供一种制备治疗妇女湿热带下，霉菌性、滴虫性及非特异性阴道炎药中应用的中药组合物及其制备方法；本发明的目的还在于提供一种中药组合物的质量控制方法。
本发明目的是通过如下技术方案实现的发明人研制了一种中药组合物，该组合物的原料药是按如下重量比组合的蛇床子50～75份金银花50～75份栀子50～75份土荆皮50～75份黄柏50～75份 黄芩100～150份苦参50～75份地肤子50～75份茵陈50～75份 薄荷100～150份艾叶50～75份独活50～75份苍术50～75份 石菖蒲100～150份确切地，这些的原料药的重量比为蛇床子62.5份金银花62.5份栀子62.5份土荆皮62.5份黄柏62.5份 黄芩125份 苦参62.5份地肤子62.5份茵陈62.5份 薄荷125份 艾叶62.5份独活62.5份苍术62.5份 石菖蒲125份用以上的处方，理论上可以制成各种临床适用剂型，发明人针对适应症的特点，优选为栓剂，同时研究了其制备工艺应为
将处方中蛇床子、栀子、黄柏、黄芩、苦参加乙醇回流提取，滤液浓缩成清膏，备用；取其余药材加水煎煮，同时收集挥发油，合并煎液，滤过，滤液浓缩成清膏，与上述浓缩浸膏合并，喷雾干燥；将喷干粉、挥发油，加入常规辅料制成栓剂。
优化参数后的具体工艺为将处方中蛇床子、栀子、黄柏、黄芩、苦参加70％乙醇回流提取二次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成相对密度约1.18(80℃)的清膏，备用；取其余药材加水煎煮二次，每次2小时，同时收集挥发油，合并煎液，滤过，滤液浓缩成相对密度约1.18(80℃)的清膏，与上述浓缩浸膏合并，喷雾干燥，喷干粉、挥发油，加入常规辅料制成栓剂。
该栓剂可以方便地应用于妇科疾病的治疗，发明人初步达到了发明目的。
为了有效控制本发明产品的质量，发明人还制定了质量控制方法，包括定性鉴别和含量测定，以下分别描叙。
定性鉴别，包含如下的五种中的一种或一种以上a.取本发明组合物制剂5～10g，置索氏提取器中，加石油醚200ml，回流3小时，石油醚液弃去，残渣取出，冷风吹干，加甲醇50ml，超声提取30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水15ml使溶解，以乙醚提取三次，每次20ml，合并乙醚液，挥干，加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取蛇床子素对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl、对照品溶液2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-醋酸乙酯(30∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
b.取鉴别(a)项下经乙醚提取后所余水液用盐酸调pH2～3，以醋酸乙酯提取三次，每次20ml，合并醋酸乙酯液，以5％碳酸氢钠溶液提取三次，每次20ml，合并碱液，用盐酸调pH2～3，以醋酸乙酯提取三次，每次20ml，合并醋酸乙酯液，水洗至中性，蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各0.5μl，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以醋酸丁酯-甲酸-水(4∶2∶2)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2％三氯化铁乙醇溶液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
c.取鉴别(b)项下经醋酸乙酯提取后余水液加氨水调pH9，以水饱和正丁醇提取三次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇2～3ml使溶解，加于中性氧化铝柱(120～160目，5g；内径1.5cm)，以50％甲醇洗脱，收集洗脱液50ml，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取苦参碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-丙酮-醋酸乙酯-浓氨试液(2∶3∶4∶0.2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
d.取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；另取川黄柏对照药材0.1g，加甲醇10ml、盐酸1滴，摇匀，超声处理15分钟，滤过，滤液作为对照药材液。照薄层色谱法试验，吸取鉴别(c)供试品溶液5μl、对照品及对照药材溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-醋酸乙酯-异丙醇-甲醇-水(6∶3∶1.5∶1.5∶0.3)为展开剂，置氨蒸气饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品、对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
e.另取栀子苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取鉴别(c)项下供试品溶液及上述对照品溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水(7∶1∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，105℃烘至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
含量测定，包含如下的三种中的任一种或一种以上a.蛇床子中蛇床子素的含量测定色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填料；甲醇-水(70∶30)为流动相，检测波长为322nm，理论板数按蛇床子素峰计算，应不低于2500。
对照品溶液的制备 精密称取蛇床子素对照品适量，加中性乙醇使溶解，并稀释，制成每1ml中含20μg的溶液，作为对照品溶液。
供试品溶液的制备 精密量取本品5ml，加氨水0.25ml，混匀，置热水浴上浓缩至近干，加少量乙醇溶解并定量转移入10ml量瓶中，超声处理10分钟，放至室温，加乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，取续滤液作为供试品溶液。
测定法分别精密量取对照品溶液与供试品溶液各10～20μl，注入液相色谱仪，测定峰面积，以外标法计算，即得。
本组合物制剂每单位量含蛇床子以蛇床子素(C15H16O3)计，不得少于0.3mg。
上述单位量是指含相当10.6g原药材的成品药剂量。
b.栀子中栀子苷的含量测定色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水(11∶89)为流动相，流速为1.0ml/min，柱温30℃。检测波长238nm。理论板数按栀子苷峰计算应不低于5000。
对照品溶液的制备 精密称取适量以五氧化二磷干燥至恒重的栀子苷对照品，用流动相制成每1ml含35μg的溶液，摇匀，即得。
供试品溶液的制备 取本品4枚，切碎，取3.0g，精密称定，置于索氏提取器中，加入石油醚(60℃～90℃)200ml回流3小时，残渣蒸干，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称重，超声(250W，50kHz)处理30分钟，放冷，称重，用甲醇补足损失的重量，摇匀，滤过，取续滤液以微孔滤膜(0.45μm)滤过，作为供试品溶液。
测定法分别精密吸取对照品与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本组合物制剂每单位量含栀子以栀子苷(C17H24O10)计，不得少于0.6mg。
上述单位量是指含相当1.06g原药材的成品药剂量。
c.黄芩中黄芩苷的含量测定色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基键合硅胶为填充剂；甲醇-0.3％磷酸溶液(47∶53)为流动相；柱温40℃；检测波长为280nm，理论塔板数按黄芩苷峰计应不低于2000。
对照品溶液的制备 取黄芩苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含50μg的溶液，即得。
供试品溶液的制备 取本品5枚，切碎，称取1g，精密称定，置索氏提取器中，加石油醚(60℃～90℃)200ml，回流3小时，取出滤纸筒，冷风吹干，精密加甲醇50ml，称定重量，超声提取30分钟(100W，50kHz)，冷却至室温，称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液以微孔滤膜(0.45μm)滤过，即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，测定，即得。
本组合物制剂每单位量含黄芩以黄芩苷(C21H18O11)计，不得少于6.75mg。
上述单位量是指含相当1.06g原药材的成品药剂量。
具体实施例方式
本发明药物制剂具有清热燥湿，杀虫止痒的功能。发明人根据其功能主治，从抗炎、抗阴道炎、阴道滴虫等方面对其药效学进行了研究。
1抗炎作用本品制剂皮下注射对小鼠耳肿胀的影响和本品制剂对二甲苯致小鼠毛细血管通透性的影响实验，结果表明本品制剂0.27～1.1g/kg×4d，对巴豆油所致小鼠耳肿胀有明显抑制作用；本品制剂0.13～0.54g/kg×4d皮下注射均对二甲苯致小鼠毛细血管通透性有明显抑制作用，百艾洗液1.0g/kg×4d也有明显抑制作用。
2对大鼠实验性阴道炎的疗效观察将雌性大鼠以10％乌拉坦腹腔注射1ml/100g麻醉后作大鼠卵巢切除术，术后3周隔天1次，灌服乙烯雌酚2mg/kg，当阴道涂片检查证实已经产生伪动情期时，进行白色念珠菌感染，菌量为8×105个/0.2ml/只，每天一次，连续3天，停止感染后4天，阴道涂片证实感染成功后，再将感染阳性的动物随机分为6组，每组10只，分别用本品制剂0.54、0.27、0.138g(生药)/kg和10％百艾洗液，妇炎平、生理盐水冲洗阴道，每日1次，每次10ml，连续7天、9天，分别以阴道涂片转阴为治疗指标。
结果显示本品制剂0.54g(生药)/kg给药7天、9天对阴道霉菌感染转阴率为60％、80％；10％百艾洗液10ml〔约为10g(生药)/kg〕转阴率分别为30％、60％；阳性对照药妇炎平l0ml转阴率分别为20％、30％。
3对阴道滴虫的抑制作用取10×15mm试管72支，本品制剂和洗液各设三个平行组，每组11支，编号1-11，其余6支为对照组。各管加入肝浸液培养液7ml，无菌小牛血清2ml。本品制剂以8mg/ml、百艾洗液20mg/ml为始浓度，分别以对倍稀释法配成11个药物浓度，各加药试验组按试管编号1-11分别从高-低药物浓度加入试管1ml，然后，每管加滴虫100微升，置孵箱中37℃培养48小时，测定本品制剂和百艾洗液的最低抑虫浓度。
结果显示本品制剂的最低抑虫浓度为0.5％(1∶40)即可使95％以上的滴虫死亡，比百艾洗液(MIC为0.625％)稍好。
以下通过实施例来进一步说明本发明的技术方案。
实施例一处方蛇床子50g 金银花50g 栀子50g 土荆皮50g黄柏50g 黄芩100g 苦参50g 地肤子50g茵陈50g 薄荷100g 艾叶50g 独活50g苍术50g 石菖蒲100g制法以上十四味，分别水煎煮二次，每次2小时，第一次加10倍量，第二次加8倍量，同时收集挥发油，合并煎液，滤过，滤液减压(65℃～70℃，-0.08Mpa)浓缩成相对密度约为1.32～1.35(60℃)的清膏，减压干燥(65℃～70℃，-0.08Mpa)，粉碎过140目筛，备用；将上述挥发油，加入司盘-80135g，搅匀，再加入上述浸膏粉充分研匀，将混合物加入到熔融的36型混合脂肪酸酯(60℃)中，调整总量至2700g，混匀，浇模，冷却后取出，制成1000枚栓，即得。
实施例二处方蛇床子62.5g 金银花62.5g 栀子62.5g 土荆皮62.5g黄柏62.5g 黄芩125g 苦参62.5g 地肤子62.5g茵陈62.5g 薄荷125g 艾叶62.5g 独活62.5g苍术62.5g 石菖蒲125g制法以上十四味，取蛇床子、栀子、黄柏、黄芩、苦参加70％乙醇回流提取二次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成相对密度约1.18(80℃)的清膏，备用；取其余药材加水煎煮二次，每次2小时，同时收集挥发油，合并煎液，滤过，滤液浓缩成相对密度约1.18(80℃)的清膏，与上述浓缩浸膏合并，喷雾干燥，喷干粉得喷干粉备用；将上述挥发油，加入司盘-80135g，搅匀，再加入上述浸膏粉充分研匀，将混合物加入到熔融的36型混合脂肪酸酯(60℃)中，调整总量至2700g，混匀，浇模，冷却后取出，制成1000枚栓，即得。
实施例三处方蛇床子75g 金银花75g 栀子75g 土荆皮75g黄柏75g 黄芩150g 苦参75g 地肤子75g茵陈75g 薄荷150g 艾叶75g 独活75g苍术75g 石菖蒲150g制法以上十四味，取蛇床子、栀子、黄柏、黄芩、苦参加70％乙醇回流提取二次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成相对密度约1.18(80℃)的清膏，备用；取其余药材加水煎煮二次，每次2小时，同时收集挥发油，合并煎液，滤过，滤液浓缩成相对密度约1.18(80℃)的清膏，与上述浓缩浸膏合并，喷雾干燥，喷干粉得喷干粉备用；将上述挥发油，加入司盘-80 135g，搅匀，再加入上述浸膏粉充分研匀，将混合物加入到熔融的36型混合脂肪酸酯(60℃)中，调整总量至2700g，混匀，浇模，冷却后取出，制成1000枚栓，即得。
鉴别a.取本品5枚，切碎，准确称取10g，置索氏提取器中，加石油醚200ml，回流3小时，石油醚液弃去，残渣取出，冷风吹干，加甲醇50ml，超声提取30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水15ml使溶解，以乙醚提取三次，每次20ml，合并乙醚液，挥干，加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取蛇床子素对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl、对照品溶液2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-醋酸乙酯(30∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
b.取鉴别(a)项下经乙醚提取后所余水液用盐酸调pH2～3，以醋酸乙酯提取三次，每次20ml，合并醋酸乙酯液，以5％碳酸氢钠溶液提取三次，每次20ml，合并碱液，用盐酸调pH2～3，以醋酸乙酯提取三次，每次20ml，合并醋酸乙酯液，水洗至中性，蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各0.5μl，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以醋酸丁酯-甲酸-水(4∶2∶2)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2％三氯化铁乙醇溶液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点c.取鉴别(b)项下经醋酸乙酯提取后余水液加氨水调pH9，以水饱和正丁醇提取三次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇2～3ml使溶解，加于中性氧化铝柱(120～160目，5g；内径1.5cm)，以50％甲醇洗脱，收集洗脱液50ml，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取苦参碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-丙酮-醋酸乙酯-浓氨试液(2∶3∶4∶0.2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
d.取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；另取川黄柏对照药材0.1g，加甲醇10ml、盐酸1滴，摇匀，超声处理15分钟，滤过，滤液作为对照药材液。照薄层色谱法试验，吸取鉴别(c)供试品溶液5μl、对照品及对照药材溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-醋酸乙酯-异丙醇-甲醇-水(6∶3∶1.5∶1.5∶0.3)为展开剂，置氨蒸气饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品、对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
e.另取栀子苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取鉴别(c)项下供试品溶液及上述对照品溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水(7∶1∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，105℃烘至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
含量测定1栀子中栀子苷的含量测定色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水(11∶89)为流动相，流速为1.0ml/min，柱温30℃。检测波长238nm。理论板数按栀子苷峰计算应不低于5000。
对照品溶液的制备 精密称取适量以五氧化二磷干燥至恒重的栀子苷对照品，用流动相制成每1ml含35靏的溶液，摇匀，即得。
供试品溶液的制备 取本品4枚，切碎，取3.0g，精密称定，置于索氏提取器中，加入石油醚(60℃～90℃)200ml回流3小时，残渣蒸干，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称重，超声(250W，50kHz)处理30分钟，放冷，称重，用甲醇补足损失的重量，摇匀，滤过，取续滤液以微孔滤膜(0.45μm)滤过，作为供试品溶液。
测定法 分别精密吸取对照品与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品每枚栓含栀子以栀子苷(C17H24O10)计，不得少于0.75mg。
每枚栓为2.75g，相当于原药材1.06g。
2黄芩中黄芩苷的含量测定色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基键合硅胶为填充剂；甲醇-0.3％磷酸溶液(47∶53)为流动相；柱温40℃；检测波长为280nm，理论塔板数按黄芩苷峰计应不低于2000。
对照品溶液的制备取黄芩苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含50μg的溶液，即得。
供试品溶液的制备 取本品5枚，切碎，称取1g，精密称定，置索氏提取器中，加石油醚(60℃～90℃)200ml，回流3小时，取出滤纸筒，冷风吹干，精密加甲醇50ml，称定重量，超声提取30分钟(100W，50kHz)，冷却至室温，称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液以微孔滤膜(0.45μm)滤过，即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，测定，即得。
本品每枚含黄芩以黄芩苷(C21H18O11)计，不得少于6.75mg。
每枚栓为2.75g，相当于原药材1.06g。
权利要求
1.一种中药组合物，其特征在于该中药组合物是由如下重量比的原料药制成的蛇床子50～75份金银花50～75份栀子50～75份土荆皮50～75份黄柏50～75份 黄芩100～150份苦参50～75份地肤子50～75份茵陈50～75份 薄荷100～150份艾叶50～75份独活50～75份苍术50～75份 石菖蒲100～150份
2.如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于各原料药的重量比为蛇床子62.5份金银花62.5份 栀子62.5份土荆皮62.5份黄柏62.5份 黄芩125份苦参62.5份地肤子62.5份茵陈62.5份 薄荷125份艾叶62.5份独活62.5份苍术62.5份 石菖蒲125份
3.如权利要求1或2所述的中药组合物，其特征在于该组合物可制备成栓剂。
4.权利要求3所述的中药组合物的制备方法，其特征在于该方法包括如下步骤将处方中蛇床子、栀子、黄柏、黄芩、苦参加乙醇回流提取，滤液浓缩成清膏，备用；取其余药材加水煎煮，同时收集挥发油，合并煎液，滤过，滤液浓缩成清膏，与上述浓缩浸膏合并，喷雾干燥；将喷干粉、挥发油，加入常规辅料制成栓剂。
5.如权利要求4所述的中药组合物的制备方法，其特征在于该方法包括如下步骤将处方中蛇床子、栀子、黄柏、黄芩、苦参加70％乙醇回流提取二次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成80℃时相对密度1.15～1.20的清膏，备用；取其余药材加水煎煮二次，每次2小时，同时收集挥发油，合并煎液，滤过，滤液浓缩成80℃时相对密度约1.15～1.20的清膏，与上述浓缩浸膏合并，喷雾干燥，将喷干粉、挥发油加入常规辅料制成栓剂。
6.权利要求3所述的中药组合物的质量控制方法，其特征在于该方法包含如下定性鉴别中的一种或几种a.取本发明组合物制剂5～10g，置索氏提取器中，加石油醚200ml，回流3小时，石油醚液弃去，残渣取出，冷风吹干，加甲醇50ml，超声提取30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水15ml使溶解，以乙醚提取三次，每次20ml，合并乙醚液，挥干，加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取蛇床子素对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl、对照品溶液2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以30∶1的苯-醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。b.取上述a项下经乙醚提取后所余水液用盐酸调pH2～3，以醋酸乙酯提取三次，每次20ml，合并醋酸乙酯液，以5％碳酸氢钠溶液提取三次，每次20ml，合并碱液，用盐酸调pH2～3，以醋酸乙酯提取三次，每次20ml，合并醋酸乙酯液，水洗至中性，蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各0.5μl，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以4∶2∶2的醋酸丁酯-甲酸-水的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2％三氯化铁乙醇溶液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。c.取上述a项下经醋酸乙酯提取后余水液加氨水调pH9，以水饱和正丁醇提取三次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇2～3ml使溶解，加于中性氧化铝柱，以50％甲醇洗脱，收集洗脱液50ml，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取苦参碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以2∶3∶4∶0.2的苯-丙酮-醋酸乙酯-浓氨试液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。d.取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；另取川黄柏对照药材0.1g，加甲醇10ml、盐酸1滴，摇匀，超声处理15分钟，滤过，滤液作为对照药材液；照薄层色谱法试验，吸取上述c项下供试品溶液5μl、对照品及对照药材溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以6∶3∶1.5∶1.5∶0.3的苯-醋酸乙酯-异丙醇-甲醇-水为展开剂，置氨蒸气饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品、对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。e.另取栀子苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述c项下供试品溶液及上述对照品溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以7∶1∶2的正丁醇-冰醋酸-水为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，105℃烘至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
7.如权利要求6所述的中药组合物的质量控制方法，其特征在于该方法的还包含如下定量方法a.蛇床子中蛇床子素的含量测定色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填料；70∶30的甲醇-水为流动相，检测波长为322nm，理论板数按蛇床子素峰计算，应不低于2500；对照品溶液的制备 精密称取蛇床子素对照品适量，加中性乙醇使溶解，并稀释，制成每1ml中含20μg的溶液，作为对照品溶液；供试品溶液的制备 精密量取本品5ml，加氨水0.25ml，混匀，置热水浴上浓缩至近干，加少量乙醇溶解并定量转移入10ml量瓶中，超声处理10分钟，放至室温，加乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，取续滤液作为供试品溶液；测定法 分别精密量取对照品溶液与供试品溶液各10～20μl，注入液相色谱仪，测定峰面积，以外标法计算，即得。b.栀子中栀子苷的含量测定色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；11∶89的乙腈-水为流动相，流速为1.0ml/min，柱温30℃，检测波长238nm，理论板数按栀子苷峰计算应不低于5000；对照品溶液的制备 精密称取适量以五氧化二磷干燥至恒重的栀子苷对照品，用流动相制成每1ml含35μg的溶液，摇匀，即得。供试品溶液的制备 取本品4枚，切碎，取3.0g，精密称定，置于索氏提取器中，加入石油醚200ml回流3小时，残渣蒸干，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称重，超声处理30分钟，放冷，称重，用甲醇补足损失的重量，摇匀，滤过，取续滤液以0.45μm微孔滤膜滤过，作为供试品溶液。测定法 分别精密吸取对照品与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。c.黄芩中黄芩苷的含量测定色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基键合硅胶为填充剂；47∶53的甲醇-0.3％磷酸溶液为流动相；柱温40℃；检测波长为280nm，理论塔板数按黄芩苷峰计应不低于2000；对照品溶液的制备 取黄芩苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含50μg的溶液，即得；供试品溶液的制备 取本品5枚，切碎，称取1g，精密称定，置索氏提取器中，加石油醚200ml，回流3小时，取出滤纸筒，冷风吹干，精密加甲醇50ml，称定重量，超声提取30分钟，冷却至室温，称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液以0.45μm微孔滤膜滤过，即得。测定法 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，测定，即得。
8.如权利要求1或2所述的中药组合物在制备治疗妇女湿热带下，霉菌性、滴虫性及非特异性阴道炎药物中的应用。
全文摘要
本发明公开了一种用于治疗妇科疾病的中药组合物，该组合物是由蛇床子、金银花、栀子、土荆皮、黄柏、黄芩、苦参、地肤子、茵陈、薄荷、艾叶、独活、苍术和石菖蒲组成，并按一定工艺加工制得，对于治疗妇女湿热带下，霉菌性、滴虫性及非特异性阴道炎有较好效果。本发明同时还公开该中药组合物的制备方法和质量控制方法。
文档编号A61P15/00GK1806836SQ20051020004
公开日2006年7月26日 申请日期2005年1月18日 优先权日2005年1月18日
发明者高淑英 申请人:北京凯瑞创新医药科技有限公司
技术领域：
本发明涉及一种中药组合物及其制备方法，属中药领域。
背景技术：
阴道炎是妇科常见病。由于阴道与外界相通，常因经期或性生活卫生不良，或因分娩及宫腔操作等因素引起阴道感染，甚至可使炎症侵袭内生殖器官，导致盆腔炎症。此外患有糖尿病、B族维生素缺乏、卵巢功能衰退，某些过敏或感染性疾病者更易感染，致病病原体常为霉菌、细菌、支原体、衣原体等。除老年性阴道炎外，几种阴道炎均属性传播疾病，近年来发病率有上升趋势。因此，探索一种治疗该类疾病的药物非常必要。
发明内容
本发明的目的是提供一种制备治疗妇女湿热带下，霉菌性、滴虫性及非特异性阴道炎药中应用的中药组合物及其制备方法；本发明的目的还在于提供一种中药组合物的质量控制方法。
本发明目的是通过如下技术方案实现的发明人研制了一种中药组合物，该组合物的原料药是按如下重量比组合的蛇床子50～75份金银花50～75份栀子50～75份土荆皮50～75份黄柏50～75份 黄芩100～150份苦参50～75份地肤子50～75份茵陈50～75份 薄荷100～150份艾叶50～75份独活50～75份苍术50～75份 石菖蒲100～150份确切地，这些的原料药的重量比为蛇床子62.5份金银花62.5份栀子62.5份土荆皮62.5份黄柏62.5份 黄芩125份 苦参62.5份地肤子62.5份茵陈62.5份 薄荷125份 艾叶62.5份独活62.5份苍术62.5份 石菖蒲125份用以上的处方，理论上可以制成各种临床适用剂型，发明人针对适应症的特点，优选为栓剂，同时研究了其制备工艺应为
将处方中蛇床子、栀子、黄柏、黄芩、苦参加乙醇回流提取，滤液浓缩成清膏，备用；取其余药材加水煎煮，同时收集挥发油，合并煎液，滤过，滤液浓缩成清膏，与上述浓缩浸膏合并，喷雾干燥；将喷干粉、挥发油，加入常规辅料制成栓剂。
优化参数后的具体工艺为将处方中蛇床子、栀子、黄柏、黄芩、苦参加70％乙醇回流提取二次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成相对密度约1.18(80℃)的清膏，备用；取其余药材加水煎煮二次，每次2小时，同时收集挥发油，合并煎液，滤过，滤液浓缩成相对密度约1.18(80℃)的清膏，与上述浓缩浸膏合并，喷雾干燥，喷干粉、挥发油，加入常规辅料制成栓剂。
该栓剂可以方便地应用于妇科疾病的治疗，发明人初步达到了发明目的。
为了有效控制本发明产品的质量，发明人还制定了质量控制方法，包括定性鉴别和含量测定，以下分别描叙。
定性鉴别，包含如下的五种中的一种或一种以上a.取本发明组合物制剂5～10g，置索氏提取器中，加石油醚200ml，回流3小时，石油醚液弃去，残渣取出，冷风吹干，加甲醇50ml，超声提取30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水15ml使溶解，以乙醚提取三次，每次20ml，合并乙醚液，挥干，加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取蛇床子素对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl、对照品溶液2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-醋酸乙酯(30∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
b.取鉴别(a)项下经乙醚提取后所余水液用盐酸调pH2～3，以醋酸乙酯提取三次，每次20ml，合并醋酸乙酯液，以5％碳酸氢钠溶液提取三次，每次20ml，合并碱液，用盐酸调pH2～3，以醋酸乙酯提取三次，每次20ml，合并醋酸乙酯液，水洗至中性，蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各0.5μl，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以醋酸丁酯-甲酸-水(4∶2∶2)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2％三氯化铁乙醇溶液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
c.取鉴别(b)项下经醋酸乙酯提取后余水液加氨水调pH9，以水饱和正丁醇提取三次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇2～3ml使溶解，加于中性氧化铝柱(120～160目，5g；内径1.5cm)，以50％甲醇洗脱，收集洗脱液50ml，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取苦参碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-丙酮-醋酸乙酯-浓氨试液(2∶3∶4∶0.2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
d.取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；另取川黄柏对照药材0.1g，加甲醇10ml、盐酸1滴，摇匀，超声处理15分钟，滤过，滤液作为对照药材液。照薄层色谱法试验，吸取鉴别(c)供试品溶液5μl、对照品及对照药材溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-醋酸乙酯-异丙醇-甲醇-水(6∶3∶1.5∶1.5∶0.3)为展开剂，置氨蒸气饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品、对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
e.另取栀子苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取鉴别(c)项下供试品溶液及上述对照品溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水(7∶1∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，105℃烘至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
含量测定，包含如下的三种中的任一种或一种以上a.蛇床子中蛇床子素的含量测定色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填料；甲醇-水(70∶30)为流动相，检测波长为322nm，理论板数按蛇床子素峰计算，应不低于2500。
对照品溶液的制备 精密称取蛇床子素对照品适量，加中性乙醇使溶解，并稀释，制成每1ml中含20μg的溶液，作为对照品溶液。
供试品溶液的制备 精密量取本品5ml，加氨水0.25ml，混匀，置热水浴上浓缩至近干，加少量乙醇溶解并定量转移入10ml量瓶中，超声处理10分钟，放至室温，加乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，取续滤液作为供试品溶液。
测定法分别精密量取对照品溶液与供试品溶液各10～20μl，注入液相色谱仪，测定峰面积，以外标法计算，即得。
本组合物制剂每单位量含蛇床子以蛇床子素(C15H16O3)计，不得少于0.3mg。
上述单位量是指含相当10.6g原药材的成品药剂量。
b.栀子中栀子苷的含量测定色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水(11∶89)为流动相，流速为1.0ml/min，柱温30℃。检测波长238nm。理论板数按栀子苷峰计算应不低于5000。
对照品溶液的制备 精密称取适量以五氧化二磷干燥至恒重的栀子苷对照品，用流动相制成每1ml含35μg的溶液，摇匀，即得。
供试品溶液的制备 取本品4枚，切碎，取3.0g，精密称定，置于索氏提取器中，加入石油醚(60℃～90℃)200ml回流3小时，残渣蒸干，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称重，超声(250W，50kHz)处理30分钟，放冷，称重，用甲醇补足损失的重量，摇匀，滤过，取续滤液以微孔滤膜(0.45μm)滤过，作为供试品溶液。
测定法分别精密吸取对照品与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本组合物制剂每单位量含栀子以栀子苷(C17H24O10)计，不得少于0.6mg。
上述单位量是指含相当1.06g原药材的成品药剂量。
c.黄芩中黄芩苷的含量测定色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基键合硅胶为填充剂；甲醇-0.3％磷酸溶液(47∶53)为流动相；柱温40℃；检测波长为280nm，理论塔板数按黄芩苷峰计应不低于2000。
对照品溶液的制备 取黄芩苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含50μg的溶液，即得。
供试品溶液的制备 取本品5枚，切碎，称取1g，精密称定，置索氏提取器中，加石油醚(60℃～90℃)200ml，回流3小时，取出滤纸筒，冷风吹干，精密加甲醇50ml，称定重量，超声提取30分钟(100W，50kHz)，冷却至室温，称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液以微孔滤膜(0.45μm)滤过，即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，测定，即得。
本组合物制剂每单位量含黄芩以黄芩苷(C21H18O11)计，不得少于6.75mg。
上述单位量是指含相当1.06g原药材的成品药剂量。
具体实施例方式
本发明药物制剂具有清热燥湿，杀虫止痒的功能。发明人根据其功能主治，从抗炎、抗阴道炎、阴道滴虫等方面对其药效学进行了研究。
1抗炎作用本品制剂皮下注射对小鼠耳肿胀的影响和本品制剂对二甲苯致小鼠毛细血管通透性的影响实验，结果表明本品制剂0.27～1.1g/kg×4d，对巴豆油所致小鼠耳肿胀有明显抑制作用；本品制剂0.13～0.54g/kg×4d皮下注射均对二甲苯致小鼠毛细血管通透性有明显抑制作用，百艾洗液1.0g/kg×4d也有明显抑制作用。
2对大鼠实验性阴道炎的疗效观察将雌性大鼠以10％乌拉坦腹腔注射1ml/100g麻醉后作大鼠卵巢切除术，术后3周隔天1次，灌服乙烯雌酚2mg/kg，当阴道涂片检查证实已经产生伪动情期时，进行白色念珠菌感染，菌量为8×105个/0.2ml/只，每天一次，连续3天，停止感染后4天，阴道涂片证实感染成功后，再将感染阳性的动物随机分为6组，每组10只，分别用本品制剂0.54、0.27、0.138g(生药)/kg和10％百艾洗液，妇炎平、生理盐水冲洗阴道，每日1次，每次10ml，连续7天、9天，分别以阴道涂片转阴为治疗指标。
结果显示本品制剂0.54g(生药)/kg给药7天、9天对阴道霉菌感染转阴率为60％、80％；10％百艾洗液10ml〔约为10g(生药)/kg〕转阴率分别为30％、60％；阳性对照药妇炎平l0ml转阴率分别为20％、30％。
3对阴道滴虫的抑制作用取10×15mm试管72支，本品制剂和洗液各设三个平行组，每组11支，编号1-11，其余6支为对照组。各管加入肝浸液培养液7ml，无菌小牛血清2ml。本品制剂以8mg/ml、百艾洗液20mg/ml为始浓度，分别以对倍稀释法配成11个药物浓度，各加药试验组按试管编号1-11分别从高-低药物浓度加入试管1ml，然后，每管加滴虫100微升，置孵箱中37℃培养48小时，测定本品制剂和百艾洗液的最低抑虫浓度。
结果显示本品制剂的最低抑虫浓度为0.5％(1∶40)即可使95％以上的滴虫死亡，比百艾洗液(MIC为0.625％)稍好。
以下通过实施例来进一步说明本发明的技术方案。
实施例一处方蛇床子50g 金银花50g 栀子50g 土荆皮50g黄柏50g 黄芩100g 苦参50g 地肤子50g茵陈50g 薄荷100g 艾叶50g 独活50g苍术50g 石菖蒲100g制法以上十四味，分别水煎煮二次，每次2小时，第一次加10倍量，第二次加8倍量，同时收集挥发油，合并煎液，滤过，滤液减压(65℃～70℃，-0.08Mpa)浓缩成相对密度约为1.32～1.35(60℃)的清膏，减压干燥(65℃～70℃，-0.08Mpa)，粉碎过140目筛，备用；将上述挥发油，加入司盘-80135g，搅匀，再加入上述浸膏粉充分研匀，将混合物加入到熔融的36型混合脂肪酸酯(60℃)中，调整总量至2700g，混匀，浇模，冷却后取出，制成1000枚栓，即得。
实施例二处方蛇床子62.5g 金银花62.5g 栀子62.5g 土荆皮62.5g黄柏62.5g 黄芩125g 苦参62.5g 地肤子62.5g茵陈62.5g 薄荷125g 艾叶62.5g 独活62.5g苍术62.5g 石菖蒲125g制法以上十四味，取蛇床子、栀子、黄柏、黄芩、苦参加70％乙醇回流提取二次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成相对密度约1.18(80℃)的清膏，备用；取其余药材加水煎煮二次，每次2小时，同时收集挥发油，合并煎液，滤过，滤液浓缩成相对密度约1.18(80℃)的清膏，与上述浓缩浸膏合并，喷雾干燥，喷干粉得喷干粉备用；将上述挥发油，加入司盘-80135g，搅匀，再加入上述浸膏粉充分研匀，将混合物加入到熔融的36型混合脂肪酸酯(60℃)中，调整总量至2700g，混匀，浇模，冷却后取出，制成1000枚栓，即得。
实施例三处方蛇床子75g 金银花75g 栀子75g 土荆皮75g黄柏75g 黄芩150g 苦参75g 地肤子75g茵陈75g 薄荷150g 艾叶75g 独活75g苍术75g 石菖蒲150g制法以上十四味，取蛇床子、栀子、黄柏、黄芩、苦参加70％乙醇回流提取二次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成相对密度约1.18(80℃)的清膏，备用；取其余药材加水煎煮二次，每次2小时，同时收集挥发油，合并煎液，滤过，滤液浓缩成相对密度约1.18(80℃)的清膏，与上述浓缩浸膏合并，喷雾干燥，喷干粉得喷干粉备用；将上述挥发油，加入司盘-80 135g，搅匀，再加入上述浸膏粉充分研匀，将混合物加入到熔融的36型混合脂肪酸酯(60℃)中，调整总量至2700g，混匀，浇模，冷却后取出，制成1000枚栓，即得。
鉴别a.取本品5枚，切碎，准确称取10g，置索氏提取器中，加石油醚200ml，回流3小时，石油醚液弃去，残渣取出，冷风吹干，加甲醇50ml，超声提取30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水15ml使溶解，以乙醚提取三次，每次20ml，合并乙醚液，挥干，加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取蛇床子素对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl、对照品溶液2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-醋酸乙酯(30∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
b.取鉴别(a)项下经乙醚提取后所余水液用盐酸调pH2～3，以醋酸乙酯提取三次，每次20ml，合并醋酸乙酯液，以5％碳酸氢钠溶液提取三次，每次20ml，合并碱液，用盐酸调pH2～3，以醋酸乙酯提取三次，每次20ml，合并醋酸乙酯液，水洗至中性，蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各0.5μl，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以醋酸丁酯-甲酸-水(4∶2∶2)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2％三氯化铁乙醇溶液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点c.取鉴别(b)项下经醋酸乙酯提取后余水液加氨水调pH9，以水饱和正丁醇提取三次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇2～3ml使溶解，加于中性氧化铝柱(120～160目，5g；内径1.5cm)，以50％甲醇洗脱，收集洗脱液50ml，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取苦参碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-丙酮-醋酸乙酯-浓氨试液(2∶3∶4∶0.2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
d.取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；另取川黄柏对照药材0.1g，加甲醇10ml、盐酸1滴，摇匀，超声处理15分钟，滤过，滤液作为对照药材液。照薄层色谱法试验，吸取鉴别(c)供试品溶液5μl、对照品及对照药材溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-醋酸乙酯-异丙醇-甲醇-水(6∶3∶1.5∶1.5∶0.3)为展开剂，置氨蒸气饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品、对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
e.另取栀子苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取鉴别(c)项下供试品溶液及上述对照品溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水(7∶1∶2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，105℃烘至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
含量测定1栀子中栀子苷的含量测定色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水(11∶89)为流动相，流速为1.0ml/min，柱温30℃。检测波长238nm。理论板数按栀子苷峰计算应不低于5000。
对照品溶液的制备 精密称取适量以五氧化二磷干燥至恒重的栀子苷对照品，用流动相制成每1ml含35靏的溶液，摇匀，即得。
供试品溶液的制备 取本品4枚，切碎，取3.0g，精密称定，置于索氏提取器中，加入石油醚(60℃～90℃)200ml回流3小时，残渣蒸干，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称重，超声(250W，50kHz)处理30分钟，放冷，称重，用甲醇补足损失的重量，摇匀，滤过，取续滤液以微孔滤膜(0.45μm)滤过，作为供试品溶液。
测定法 分别精密吸取对照品与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品每枚栓含栀子以栀子苷(C17H24O10)计，不得少于0.75mg。
每枚栓为2.75g，相当于原药材1.06g。
2黄芩中黄芩苷的含量测定色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基键合硅胶为填充剂；甲醇-0.3％磷酸溶液(47∶53)为流动相；柱温40℃；检测波长为280nm，理论塔板数按黄芩苷峰计应不低于2000。
对照品溶液的制备取黄芩苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含50μg的溶液，即得。
供试品溶液的制备 取本品5枚，切碎，称取1g，精密称定，置索氏提取器中，加石油醚(60℃～90℃)200ml，回流3小时，取出滤纸筒，冷风吹干，精密加甲醇50ml，称定重量，超声提取30分钟(100W，50kHz)，冷却至室温，称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液以微孔滤膜(0.45μm)滤过，即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，测定，即得。
本品每枚含黄芩以黄芩苷(C21H18O11)计，不得少于6.75mg。
每枚栓为2.75g，相当于原药材1.06g。
权利要求
1.一种中药组合物，其特征在于该中药组合物是由如下重量比的原料药制成的蛇床子50～75份金银花50～75份栀子50～75份土荆皮50～75份黄柏50～75份 黄芩100～150份苦参50～75份地肤子50～75份茵陈50～75份 薄荷100～150份艾叶50～75份独活50～75份苍术50～75份 石菖蒲100～150份
2.如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于各原料药的重量比为蛇床子62.5份金银花62.5份 栀子62.5份土荆皮62.5份黄柏62.5份 黄芩125份苦参62.5份地肤子62.5份茵陈62.5份 薄荷125份艾叶62.5份独活62.5份苍术62.5份 石菖蒲125份
3.如权利要求1或2所述的中药组合物，其特征在于该组合物可制备成栓剂。
4.权利要求3所述的中药组合物的制备方法，其特征在于该方法包括如下步骤将处方中蛇床子、栀子、黄柏、黄芩、苦参加乙醇回流提取，滤液浓缩成清膏，备用；取其余药材加水煎煮，同时收集挥发油，合并煎液，滤过，滤液浓缩成清膏，与上述浓缩浸膏合并，喷雾干燥；将喷干粉、挥发油，加入常规辅料制成栓剂。
5.如权利要求4所述的中药组合物的制备方法，其特征在于该方法包括如下步骤将处方中蛇床子、栀子、黄柏、黄芩、苦参加70％乙醇回流提取二次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成80℃时相对密度1.15～1.20的清膏，备用；取其余药材加水煎煮二次，每次2小时，同时收集挥发油，合并煎液，滤过，滤液浓缩成80℃时相对密度约1.15～1.20的清膏，与上述浓缩浸膏合并，喷雾干燥，将喷干粉、挥发油加入常规辅料制成栓剂。
6.权利要求3所述的中药组合物的质量控制方法，其特征在于该方法包含如下定性鉴别中的一种或几种a.取本发明组合物制剂5～10g，置索氏提取器中，加石油醚200ml，回流3小时，石油醚液弃去，残渣取出，冷风吹干，加甲醇50ml，超声提取30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水15ml使溶解，以乙醚提取三次，每次20ml，合并乙醚液，挥干，加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取蛇床子素对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl、对照品溶液2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以30∶1的苯-醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。b.取上述a项下经乙醚提取后所余水液用盐酸调pH2～3，以醋酸乙酯提取三次，每次20ml，合并醋酸乙酯液，以5％碳酸氢钠溶液提取三次，每次20ml，合并碱液，用盐酸调pH2～3，以醋酸乙酯提取三次，每次20ml，合并醋酸乙酯液，水洗至中性，蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各0.5μl，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以4∶2∶2的醋酸丁酯-甲酸-水的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2％三氯化铁乙醇溶液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。c.取上述a项下经醋酸乙酯提取后余水液加氨水调pH9，以水饱和正丁醇提取三次，每次20ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇2～3ml使溶解，加于中性氧化铝柱，以50％甲醇洗脱，收集洗脱液50ml，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取苦参碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以2∶3∶4∶0.2的苯-丙酮-醋酸乙酯-浓氨试液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。d.取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；另取川黄柏对照药材0.1g，加甲醇10ml、盐酸1滴，摇匀，超声处理15分钟，滤过，滤液作为对照药材液；照薄层色谱法试验，吸取上述c项下供试品溶液5μl、对照品及对照药材溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以6∶3∶1.5∶1.5∶0.3的苯-醋酸乙酯-异丙醇-甲醇-水为展开剂，置氨蒸气饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品、对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。e.另取栀子苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述c项下供试品溶液及上述对照品溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以7∶1∶2的正丁醇-冰醋酸-水为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，105℃烘至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
7.如权利要求6所述的中药组合物的质量控制方法，其特征在于该方法的还包含如下定量方法a.蛇床子中蛇床子素的含量测定色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填料；70∶30的甲醇-水为流动相，检测波长为322nm，理论板数按蛇床子素峰计算，应不低于2500；对照品溶液的制备 精密称取蛇床子素对照品适量，加中性乙醇使溶解，并稀释，制成每1ml中含20μg的溶液，作为对照品溶液；供试品溶液的制备 精密量取本品5ml，加氨水0.25ml，混匀，置热水浴上浓缩至近干，加少量乙醇溶解并定量转移入10ml量瓶中，超声处理10分钟，放至室温，加乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，取续滤液作为供试品溶液；测定法 分别精密量取对照品溶液与供试品溶液各10～20μl，注入液相色谱仪，测定峰面积，以外标法计算，即得。b.栀子中栀子苷的含量测定色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；11∶89的乙腈-水为流动相，流速为1.0ml/min，柱温30℃，检测波长238nm，理论板数按栀子苷峰计算应不低于5000；对照品溶液的制备 精密称取适量以五氧化二磷干燥至恒重的栀子苷对照品，用流动相制成每1ml含35μg的溶液，摇匀，即得。供试品溶液的制备 取本品4枚，切碎，取3.0g，精密称定，置于索氏提取器中，加入石油醚200ml回流3小时，残渣蒸干，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称重，超声处理30分钟，放冷，称重，用甲醇补足损失的重量，摇匀，滤过，取续滤液以0.45μm微孔滤膜滤过，作为供试品溶液。测定法 分别精密吸取对照品与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。c.黄芩中黄芩苷的含量测定色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基键合硅胶为填充剂；47∶53的甲醇-0.3％磷酸溶液为流动相；柱温40℃；检测波长为280nm，理论塔板数按黄芩苷峰计应不低于2000；对照品溶液的制备 取黄芩苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含50μg的溶液，即得；供试品溶液的制备 取本品5枚，切碎，称取1g，精密称定，置索氏提取器中，加石油醚200ml，回流3小时，取出滤纸筒，冷风吹干，精密加甲醇50ml，称定重量，超声提取30分钟，冷却至室温，称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液以0.45μm微孔滤膜滤过，即得。测定法 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，测定，即得。
8.如权利要求1或2所述的中药组合物在制备治疗妇女湿热带下，霉菌性、滴虫性及非特异性阴道炎药物中的应用。
全文摘要
本发明公开了一种用于治疗妇科疾病的中药组合物，该组合物是由蛇床子、金银花、栀子、土荆皮、黄柏、黄芩、苦参、地肤子、茵陈、薄荷、艾叶、独活、苍术和石菖蒲组成，并按一定工艺加工制得，对于治疗妇女湿热带下，霉菌性、滴虫性及非特异性阴道炎有较好效果。本发明同时还公开该中药组合物的制备方法和质量控制方法。
文档编号A61P15/00GK1806836SQ20051020004
公开日2006年7月26日 申请日期2005年1月18日 优先权日2005年1月18日
发明者高淑英 申请人:北京凯瑞创新医药科技有限公司
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