一种由冰片和银杏叶提取物组成的复方注射制剂及其制备方法
专利名称：一种由冰片和银杏叶提取物组成的复方注射制剂及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种由冰片和银杏叶提取物按一定比例组成的复方注射剂及其制备方法。属医药技术领域。
背景技术：
心脑血管疾病是危害人类生命和健康的第一杀手，据最新统计资料，2000年全世界有1700万人死于心血管疾病，占全球各种原因总死亡人数的1/3，预计到2020年这个数字将增至2500万，而其中80％都在发展中国家。
根据1997年我国人口死因分析，城市人口死亡原因中肿瘤占第一位，脑血管病占第二位，两者的数值近于相等；农村人口死亡原因中呼吸系统疾病占第一位，脑血管病占第二位。缺血性脑血管病在全部脑血管病中约占70％。心脑血管疾病有着相当高的发病率及致残率，不容忽视。
银杏为仅存一科一属一种品种，素有裸子植物“活化石”之称。主要有促进血液循环，预防心脑血管疾病、提升记忆力，预防老年痴呆症、抗氧化作用、预防血凝块形成等功能。目前，已从银杏叶中分离出30个活性化学成份，但临床药用的主要化学活性成份仍为总黄酮及总内酯。银杏叶制剂在临床上主要用于治疗心脑血管疾病、神经精神疾患、五官科疾病、呼吸系统疾病、泌尿系疾病以其它癌症、对器官移植排斥反应的保护作用等，银杏在哺乳动物的毒性非常低。
冰片有开窍醒神，清热止痛之功效。现代研究表明，冰片不但自身极易透过血脑屏障，发挥醒脑开窍作用，还能增加其它药物的血脑屏障通透性，增加药物对脑部疾病的疗效。
冰片静脉给药其分布半衰期为2.8分钟，很快分布到组织器官发挥疗效，而口服消除半衰期为5.3小时，说明冰片吸收缓慢且生物利用度低。冰片在少数注射液如醒脑静注射液、清开灵注射液中含有量也非常低，难以达到药物有效浓度而影响疗效。
单独用银杏叶提取物与冰片配伍的复方制剂尚未发现，其相关研究文献也未见有报道，两者对心脑血管急性疾病都有很好的治疗作用，复方后能发挥协同作用，特别是心脑血管急性发作期，能迅速起效而达到预期的治疗效果。
发明内容
本发明的目的在于提供一种由中药冰片和银杏叶提取物按一定比例组成的复方注射剂，可用于心脑血管疾病，它能克服口服制剂吸收差且慢的缺点。药效学实验证明，以银杏叶提取物的有效部位银杏叶提取物和冰片组成的中药用于气滞血瘀心脑血管病，疗效显著。该复方注射剂药物经毒理实验表明，毒性极小，经拆方研究，本处方二药合在一起配用，比单用其中任何一种不仅药效明显增强，并且具有减毒作用。本发明还提供上述复方注射剂的制备方法。
本发明提出的中药有效部位复方注射剂，是由中药冰片和银杏叶提取物按一定比例组成的复方注射剂。
本中药有效部位复方注射剂，其比较合适的配比为冰片1份，银杏叶提取物2-20份。
本复方注射剂可以是水针，粉针和输液等剂型。
本复方注射剂用以治疗缺血性脑损伤、心绞痛、心肌缺血等各种心脑血管疾病。
本复方注射剂的配伍使用，主要优点为冰片能增加银杏的有效成分在体内的生物利用度，提高其疗效，加强中枢作用，银杏能提高冰片在水中的溶解度，银杏叶提取物与冰片配伍增效作用，本制剂起效快，疗效高。
银杏叶提取物的制备可按如下工艺进行，取一定质量的银杏叶以一定浓度乙醇回流提取，减压浓缩，澄清剂沉降后，再减压浓缩用50％左右乙醇沸提银杏叶干粗粉，滤液上吸附树脂柱，最后得淡黄色粉末状提取物，含黄酮苷和银杏总内酯分别不低于24％，6％。
冰片为市售符合中国药典标准的中药饮片。
本发明还提出了上述组合物，其水针、输液、粉针制剂按如下步骤制备取冰片1重量份，碾细，加30-70重量份甘油加热搅拌使完全溶解，备用。取银杏叶提取物2-20重量份，加适量注射用水溶解，将上述冰片的甘油溶液缓慢加入银杏叶提取物的水溶液中，搅拌，制成输液时需加至等渗量的渗透压调节剂使溶解，该渗透压调节剂为甘露醇、氯化钠或葡萄糖中的至少一种，用适量的注射用水稀释至一定体积，混匀。药液经通量为10000～30000分子量的超滤膜超滤，灌封成注射液或输液，消毒，即得注射液、小输液制剂。
取冰片1重量份，碾细，加入适量无水乙醇溶解后，慢慢加入以8-15重量份羟丙基-β-环糊精配成饱和的水溶液中，保温40-60。，搅拌或超声使溶液澄清。另取银杏叶提取物2-20重量份，加适量注射用水溶解。将冰片的羟丙基-β-环糊精包合溶液缓慢加入银杏叶提取物的水溶液中，搅拌，制成输液时需加至等渗量的渗透压调节剂使溶解，该渗透压调节剂为甘露醇、氯化钠或葡萄糖中的至少一种，用适量的注射用水稀释至一定体积，混匀。药液经孔径30000～100000分子量的超滤膜超滤，灌封成注射液或小输液，消毒，即得注射液、小输液制剂。
取冰片1重量份，碾细，加入适量无水乙醇溶解后，慢慢加入以8-15重量份羟丙基-β-环糊精配成饱和的水溶液中，保温40-60℃，搅拌或超声使溶液澄清，另取银杏叶提取物2-20重量份，加适量注射用水溶解，将冰片的羟丙基-β-环糊精包合溶液缓慢加入银杏叶提取物的水溶液中，搅拌均匀，再加入适量成型剂使溶解，该成型剂为甘露醇、羟丙基-β-环糊精或葡萄糖中的至少一种，用适量的注射用水稀释至一定体积，搅拌均匀，药液经孔径30000～100000分子量的超滤膜超滤，超滤液分装，冻干，压盖，即得粉针。
本发明药效学实验一、对小鼠缺血再灌注学习记忆障碍模型的作用取雄性SD小鼠6组随机分为假手术组、模型组、丹参酮阳性药对照组和复方银冰注射剂组、银杏叶提取物组、冰片组、每组10只动物，每日灌胃1次，空白对照组及模型组给等容量生理盐水，连续15日，末次给药后1h，按照方法造成小鼠的不完全性双侧血流阻断，引起大脑缺血，5min后，解除血管结扎，使颈总动脉回复血流再灌注。次日使用JZZ94多功能回避条件仪，以跳台法进行被动学习记忆训练，记录小鼠自跳台跳下电栅的错误次数(N)，刺激时间(Ts)及平台停留期(T)。24小时后再测试。结果见表1。
表1对小鼠脑缺血再灌注小鼠学习记忆的影响(X±S n＝10)
注与空白对照组比较，##P＜0.01；与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01。
试验结果显示，模型组与假手术组比较有显著性差异(P＜0.01)，表明小鼠造模成功。复方银冰注射剂与模型组比较有显著性差异(P＜0.01)，表明此注射剂对小鼠的记忆能力有显著的提高。与银杏叶提取物组相比较(P＜0.05)，复方注射剂组对小鼠的记忆有更好的效果，复方中的冰片在其透过血脑屏障，促进药物吸收，促进药物体内浓度增高方面有较好的作用，也表明了此复方的合理性。
二、对小鼠断头后喘息持续时间的影响试验取Bal/BC小鼠50只，随机分为空白对照组、尼莫地平阳性药对照组和银冰注射用复方组、冰片组、银杏叶提取物组，每组10只动物。其中，银冰给药剂量依据文献折算动物给药剂量，尼莫地平组依据人体用量折算小鼠给药剂量。空白对照组生理盐水灌胃，其余各组相应药物灌胃，1次/d，连续7d。末次给药后15min，自小鼠耳根下快速断头，记录从断头开始至其最后一次喘息停止的时间作为断头喘息持续时间。结果见表2。
表2对小鼠断头后喘息持续时间的影响(X±S)n＝10
注与空白对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01。
实验结果表明，ig复方银冰、单味冰片均能明显延长小鼠断头后喘息持续时间，与空白组比较，呈显著性差异(*P＜0.05，**P＜0.01)，ig单味银杏叶提取物延长小鼠断头后喘息持续时间不明显，与空白组比较，无显著性差异。但复方银冰注射剂组比冰片组和银杏叶提取物组延长小鼠断头后喘息持续时间的作用更为显著，提示复方注射剂能显著提高脑缺血疾病的治疗效果，比单味药物的治疗效果更为优越。
三、对大鼠大脑中动脉引起脑局部缺血的作用取雄性SD大鼠6组随机分为假手术组、脑缺血模型组、尼莫地平阳性药对照组和复方银冰注射剂组、银杏叶提取物组、冰片组，每组10只动物。按照阻断大鼠中动脉(MCAO)法造成大鼠的大脑半球皮层和基底核缺血性损伤模型。各组静脉注射一次，给药30分钟后，各鼠以10％水合氯醛麻醉(300mg/kg，iβ)，按文献方法进行手术，术后24小时断头取脑，经染色后，分别取出呈玫瑰红色的正常脑组织及呈灰白色的梗塞组织，称重，然后根据重量求面积法，求出梗塞区面积占半球总面积的百分比，即梗塞率，并采用组间t检验法与模型组进行显著性测定比较。结果见表3。
表3 对大鼠脑梗死范围的影响(X±S)n＝10
注与假手术组比较，##P＜0.01；与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01。
试验结果经统计学表明，模型组与假手术组相比有显著性差异，表明大鼠MCAO造模成功。与模型组比较，复方银冰注射液组、银杏叶提取物组均能降低动物脑脑梗塞率，但复方银冰注射液组与其相比有显著性差异(P＜0.01)，其对大脑中动脉阻断(MCAO)大鼠的保护作用好于银杏组及尼莫地平组(P＜0.05)，由此表明银冰复方的优越性。
四、对大鼠急性肝损伤模型的作用取雄性Wistar大鼠，随机分为对照组、模型组、银冰制剂低、中、高三个剂量组，银杏叶提取物组，冰片组及齐敦果酸阳性药对照组，每组10只。D-氨基半乳糖胺(D-GalN)致大鼠急性肝损伤模型.给予治疗性药物银冰注射剂、银杏及阳性药对照剂(齐敦果酸)，1次/d，共8d，于第7天上午，给予D-GalN造模，第8天，末次给药1h后断头取血，测定大鼠血清血小板活化因子(PAF)、丙氨酸转氨酶(ALT)、丙二醛(MDA)，并光镜下观察肝脏病理变化.结果见表4。表5。
表4 各组大鼠血清PAF、ALT、MDA的变化情况
注与假手术组比较，##P＜0.01；与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01。
试验结果表明，银冰注射剂及银杏提取物组均有良好的对急性肝损伤的保护作用，但与银杏相比较，银冰中的冰片对银杏提取物具有显著的促进吸收，提高体内浓度，增加疗效的优越性。
对病理学改变的影响D-GalN诱发大鼠肝损伤模型，因其病理变化与人类病毒性肝炎相似而被广泛应用。本试验病理学观察显示肝细胞大块或亚大块坏死，肝小叶及肝细胞消失，肝脏病理学分级与正常组有显著差异(P＜0.01)。银杏各剂量组血清PAF、ALT、MDA及阳性对照组ALT、MDA则均明显低于模型组，肝细胞坏死明显减轻，范围缩小，并可见肝小叶结构，其中尤以银冰剂量组疗效较佳，其他各治疗组效果无明显差异。结论银冰注射剂对D-GalN所致大鼠急性肝损伤具有保护作用，其机制可能是通过清除氧自由基、拮抗PAF，改善肝脏微循环实现的，冰片能显著增加银杏有效成分在体内浓度，提高其生物利用度，有望成为临床治疗急性重型病毒性肝炎的有效药物之一。
具体实施例实施例1银杏叶提取物的制备取一定质量的银杏叶以65％乙醇回流提取，减压浓缩，ZTC澄清剂沉降后，再减压浓缩用50％乙醇沸提银杏叶干粗粉，滤液上724吸附树脂柱，最后得淡黄色粉末状提取物，含黄酮苷和银杏总内酯分别为26％，10.6％。
实施例2银冰注射液的制备[一]取冰片(人工或天然)20g，碾细，加1000ml甘油加热搅拌使完全溶解。取银杏叶提取物2g加2-4L注射用水溶解。将冰片的甘油溶液缓慢加入银杏叶提取物的水溶液中，边加边搅拌至澄清，并用注射用水稀释至10L。药液经孔径为10000分子量的超滤膜超滤，灌封，10ml/支，消毒，即得注射液。
实施例3银冰注射液的制备[二]取冰片(人工或天然)20g，碾细，加入适量无水乙醇溶解后，慢慢加入以600g羟丙基-β-环糊精配成饱和的水溶液中，保温40-60℃，搅拌或超声使溶液澄清。另取银杏叶提取物4g，加适量注射用水溶解。将冰片的羟丙基-β-环糊精包合溶液缓慢加入银杏叶提取物的水溶液中，搅拌，制成输液时需加至等渗量的渗透压调节剂使溶解，该渗透压调节剂为甘露醇、氯化钠或葡萄糖中的至少一种，用注射用水稀释至20L，混匀。药液经孔径30000～100000分子量的超滤膜超滤，灌封，10ml/支，消毒，即得注射液。
实施例4银冰输液的制备[一]取冰片(人工或天然)20g，碾细，加2400ml甘油加热搅拌使完全溶解。取银杏叶提取物2g加2-4L注射用水溶解。将冰片的甘油溶液缓慢加入银杏叶提取物的水溶液中，边加边搅拌，加至等渗量的渗透压调节剂，该等渗剂为甘露醇、氯化钠或葡萄糖中的至少一种，并用注射用水稀释至100L或250L，搅拌均匀。药液经孔径为30000分子量的超滤膜超滤，补充注射用水适量，分装成100ml或250ml/瓶，灌盖，消毒，即得输液。
实施例5银冰输液的制备[二]取冰片(人工或天然)20g，碾细，加入适量无水乙醇溶解后，慢慢加入以200g羟丙基-β-环糊精配成饱和的水溶液中，保温40-60℃，搅拌或超声使溶液澄清。另取银杏叶提取物4g，加适量注射用水溶解。将冰片的羟丙基-β-环糊精包合溶液缓慢加入银杏叶提取物的水溶液中，搅拌，制成输液时需加至等渗量的渗透压调节剂使溶解，该渗透压调节剂为甘露醇、氯化钠或葡萄糖中的至少一种，并用注射用水稀释至100L或250L，搅拌均匀。药液经孔径为30000分子量的超滤膜超滤，补充注射用水适量，分装成100ml或250ml/瓶，灌盖，消毒，即得输液。
实施例6银冰冻干粉针剂的制备取冰片(人工或天然)20g，碾细，加40ml无水乙醇溶解，备用。另取羟丙基-β-环糊精240g，配成饮和溶液，边搅拌边加入冰片乙醇液，搅拌或超声包合得澄清溶液。取银杏叶提取物4g，加适量注射用水溶解。将冰片的羟丙基β-环糊精包合溶液缓慢加入银杏叶提取物的水溶液中，边加边搅拌至澄清，并用注射用水稀释至50L，溶解。药液经通量为10000分子量的超滤膜超滤，分装，每瓶5ml，冻干，压盖，标签，即得粉针，共10000瓶。
权利要求
1.一种用于治疗心脑血管类疾病的中药有效部位复方注射制剂，其特征是由冰片和银杏叶提取物按一定配比组合制成。
2.根据权利要求1的所述的中药有效部位复方注射制剂的制备方法，其特征为一、取冰片1重量份，碾细，加30-70重量份甘油加热搅拌使完全溶解，备用，取银杏叶提取物2-20重量份，加适量注射用水溶解，将上述冰片的甘油溶液缓慢加入银杏叶提取物的水溶液中，搅拌，制成输液时需加至等渗量的渗透压调节剂使溶解，该渗透压调节剂为甘露醇、氯化钠或葡萄糖中的至少一种，用适量的注射用水稀释至一定体积，混匀，药液经通量为10000～30000分子量的超滤膜超滤，灌封成注射液或输液，消毒，即得水针、输液制剂。二、取冰片1重量份，碾细，加入适量无水乙醇溶解后，慢慢加入以8-15重量份羟丙基-β-环糊精配成饱和的水溶液中，保温40-60℃，搅拌或超声使溶液澄清，另取银杏叶提取物2-20重量份，加适量注射用水溶解，将冰片的羟丙基-β-环糊精包合溶液缓慢加入银杏叶提取物的水溶液中，搅拌，制成输液时需加至等渗量的渗透压调节剂使溶解，该渗透压调节剂为甘露醇、氯化钠或葡萄糖中的至少一种，用适量的注射用水稀释至一定体积，混匀，药液经孔径30000～100000分子量的超滤膜超滤，灌封成注射液或小输液，消毒，即得注射液、小输液制剂。三、取冰片1重量份，碾细，加入适量无水乙醇溶解后，慢慢加入以8-15重量份羟丙基-β-环糊精配成饱和的水溶液中，保温40-60℃，搅拌或超声使溶液澄清，另取银杏叶提取物2-20重量份，加适量注射用水溶解，将冰片的羟丙基-β-环糊精包合溶液缓慢加入银杏叶提取物的水溶液中，搅拌均匀，再加入适量成型剂使溶解，该成型剂为甘露醇、羟丙基-β-环糊精或葡萄糖中的至少一种，用适量的注射用水稀释至一定体积，搅拌均匀，药液经孔径30000～100000分子量的超滤膜超滤，超滤液分装，冻干，压盖，即得粉针。
3.根据权利要求2的水针及输液的制备方法，其特征是将药液以10000～30000分子量的超滤膜超滤。
4.根据权利要求2的注射用粉针剂的制备方法，其特征是将滤液以30000～100000分子量的超滤膜超滤。
5.根据权利要求2的注射剂的制备方法，其特征是辅料可以为甘露醇、氯化钠或葡萄糖中的至少一种。
全文摘要
本发明为一种用于治疗心脑血管疾病的中药有效部位复方注射制剂及其制备方法。该复方制剂由中药由冰片1重量份和银杏叶提取物按2－20重量份配比组合制成，并制成了其复方的注射剂，本发明的复方注射制剂提高了传统口服的药理作用和起效时间，且比单用其中任何一种不仅药效明显增强，并且具有减毒作用。用于治疗脑梗塞、脑缺血、冠心病、心绞痛、心肌梗死等，具有显效快，效果明显、高安全性和稳定性的特点。
文档编号A61P9/00GK1778318SQ20041006533
公开日2006年5月31日 申请日期2004年11月26日 优先权日2004年11月26日
发明者秦引林, 何龙其 申请人:秦引林
技术领域：
本发明涉及一种由冰片和银杏叶提取物按一定比例组成的复方注射剂及其制备方法。属医药技术领域。
背景技术：
心脑血管疾病是危害人类生命和健康的第一杀手，据最新统计资料，2000年全世界有1700万人死于心血管疾病，占全球各种原因总死亡人数的1/3，预计到2020年这个数字将增至2500万，而其中80％都在发展中国家。
根据1997年我国人口死因分析，城市人口死亡原因中肿瘤占第一位，脑血管病占第二位，两者的数值近于相等；农村人口死亡原因中呼吸系统疾病占第一位，脑血管病占第二位。缺血性脑血管病在全部脑血管病中约占70％。心脑血管疾病有着相当高的发病率及致残率，不容忽视。
银杏为仅存一科一属一种品种，素有裸子植物“活化石”之称。主要有促进血液循环，预防心脑血管疾病、提升记忆力，预防老年痴呆症、抗氧化作用、预防血凝块形成等功能。目前，已从银杏叶中分离出30个活性化学成份，但临床药用的主要化学活性成份仍为总黄酮及总内酯。银杏叶制剂在临床上主要用于治疗心脑血管疾病、神经精神疾患、五官科疾病、呼吸系统疾病、泌尿系疾病以其它癌症、对器官移植排斥反应的保护作用等，银杏在哺乳动物的毒性非常低。
冰片有开窍醒神，清热止痛之功效。现代研究表明，冰片不但自身极易透过血脑屏障，发挥醒脑开窍作用，还能增加其它药物的血脑屏障通透性，增加药物对脑部疾病的疗效。
冰片静脉给药其分布半衰期为2.8分钟，很快分布到组织器官发挥疗效，而口服消除半衰期为5.3小时，说明冰片吸收缓慢且生物利用度低。冰片在少数注射液如醒脑静注射液、清开灵注射液中含有量也非常低，难以达到药物有效浓度而影响疗效。
单独用银杏叶提取物与冰片配伍的复方制剂尚未发现，其相关研究文献也未见有报道，两者对心脑血管急性疾病都有很好的治疗作用，复方后能发挥协同作用，特别是心脑血管急性发作期，能迅速起效而达到预期的治疗效果。
发明内容
本发明的目的在于提供一种由中药冰片和银杏叶提取物按一定比例组成的复方注射剂，可用于心脑血管疾病，它能克服口服制剂吸收差且慢的缺点。药效学实验证明，以银杏叶提取物的有效部位银杏叶提取物和冰片组成的中药用于气滞血瘀心脑血管病，疗效显著。该复方注射剂药物经毒理实验表明，毒性极小，经拆方研究，本处方二药合在一起配用，比单用其中任何一种不仅药效明显增强，并且具有减毒作用。本发明还提供上述复方注射剂的制备方法。
本发明提出的中药有效部位复方注射剂，是由中药冰片和银杏叶提取物按一定比例组成的复方注射剂。
本中药有效部位复方注射剂，其比较合适的配比为冰片1份，银杏叶提取物2-20份。
本复方注射剂可以是水针，粉针和输液等剂型。
本复方注射剂用以治疗缺血性脑损伤、心绞痛、心肌缺血等各种心脑血管疾病。
本复方注射剂的配伍使用，主要优点为冰片能增加银杏的有效成分在体内的生物利用度，提高其疗效，加强中枢作用，银杏能提高冰片在水中的溶解度，银杏叶提取物与冰片配伍增效作用，本制剂起效快，疗效高。
银杏叶提取物的制备可按如下工艺进行，取一定质量的银杏叶以一定浓度乙醇回流提取，减压浓缩，澄清剂沉降后，再减压浓缩用50％左右乙醇沸提银杏叶干粗粉，滤液上吸附树脂柱，最后得淡黄色粉末状提取物，含黄酮苷和银杏总内酯分别不低于24％，6％。
冰片为市售符合中国药典标准的中药饮片。
本发明还提出了上述组合物，其水针、输液、粉针制剂按如下步骤制备取冰片1重量份，碾细，加30-70重量份甘油加热搅拌使完全溶解，备用。取银杏叶提取物2-20重量份，加适量注射用水溶解，将上述冰片的甘油溶液缓慢加入银杏叶提取物的水溶液中，搅拌，制成输液时需加至等渗量的渗透压调节剂使溶解，该渗透压调节剂为甘露醇、氯化钠或葡萄糖中的至少一种，用适量的注射用水稀释至一定体积，混匀。药液经通量为10000～30000分子量的超滤膜超滤，灌封成注射液或输液，消毒，即得注射液、小输液制剂。
取冰片1重量份，碾细，加入适量无水乙醇溶解后，慢慢加入以8-15重量份羟丙基-β-环糊精配成饱和的水溶液中，保温40-60。，搅拌或超声使溶液澄清。另取银杏叶提取物2-20重量份，加适量注射用水溶解。将冰片的羟丙基-β-环糊精包合溶液缓慢加入银杏叶提取物的水溶液中，搅拌，制成输液时需加至等渗量的渗透压调节剂使溶解，该渗透压调节剂为甘露醇、氯化钠或葡萄糖中的至少一种，用适量的注射用水稀释至一定体积，混匀。药液经孔径30000～100000分子量的超滤膜超滤，灌封成注射液或小输液，消毒，即得注射液、小输液制剂。
取冰片1重量份，碾细，加入适量无水乙醇溶解后，慢慢加入以8-15重量份羟丙基-β-环糊精配成饱和的水溶液中，保温40-60℃，搅拌或超声使溶液澄清，另取银杏叶提取物2-20重量份，加适量注射用水溶解，将冰片的羟丙基-β-环糊精包合溶液缓慢加入银杏叶提取物的水溶液中，搅拌均匀，再加入适量成型剂使溶解，该成型剂为甘露醇、羟丙基-β-环糊精或葡萄糖中的至少一种，用适量的注射用水稀释至一定体积，搅拌均匀，药液经孔径30000～100000分子量的超滤膜超滤，超滤液分装，冻干，压盖，即得粉针。
本发明药效学实验一、对小鼠缺血再灌注学习记忆障碍模型的作用取雄性SD小鼠6组随机分为假手术组、模型组、丹参酮阳性药对照组和复方银冰注射剂组、银杏叶提取物组、冰片组、每组10只动物，每日灌胃1次，空白对照组及模型组给等容量生理盐水，连续15日，末次给药后1h，按照方法造成小鼠的不完全性双侧血流阻断，引起大脑缺血，5min后，解除血管结扎，使颈总动脉回复血流再灌注。次日使用JZZ94多功能回避条件仪，以跳台法进行被动学习记忆训练，记录小鼠自跳台跳下电栅的错误次数(N)，刺激时间(Ts)及平台停留期(T)。24小时后再测试。结果见表1。
表1对小鼠脑缺血再灌注小鼠学习记忆的影响(X±S n＝10)
注与空白对照组比较，##P＜0.01；与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01。
试验结果显示，模型组与假手术组比较有显著性差异(P＜0.01)，表明小鼠造模成功。复方银冰注射剂与模型组比较有显著性差异(P＜0.01)，表明此注射剂对小鼠的记忆能力有显著的提高。与银杏叶提取物组相比较(P＜0.05)，复方注射剂组对小鼠的记忆有更好的效果，复方中的冰片在其透过血脑屏障，促进药物吸收，促进药物体内浓度增高方面有较好的作用，也表明了此复方的合理性。
二、对小鼠断头后喘息持续时间的影响试验取Bal/BC小鼠50只，随机分为空白对照组、尼莫地平阳性药对照组和银冰注射用复方组、冰片组、银杏叶提取物组，每组10只动物。其中，银冰给药剂量依据文献折算动物给药剂量，尼莫地平组依据人体用量折算小鼠给药剂量。空白对照组生理盐水灌胃，其余各组相应药物灌胃，1次/d，连续7d。末次给药后15min，自小鼠耳根下快速断头，记录从断头开始至其最后一次喘息停止的时间作为断头喘息持续时间。结果见表2。
表2对小鼠断头后喘息持续时间的影响(X±S)n＝10
注与空白对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01。
实验结果表明，ig复方银冰、单味冰片均能明显延长小鼠断头后喘息持续时间，与空白组比较，呈显著性差异(*P＜0.05，**P＜0.01)，ig单味银杏叶提取物延长小鼠断头后喘息持续时间不明显，与空白组比较，无显著性差异。但复方银冰注射剂组比冰片组和银杏叶提取物组延长小鼠断头后喘息持续时间的作用更为显著，提示复方注射剂能显著提高脑缺血疾病的治疗效果，比单味药物的治疗效果更为优越。
三、对大鼠大脑中动脉引起脑局部缺血的作用取雄性SD大鼠6组随机分为假手术组、脑缺血模型组、尼莫地平阳性药对照组和复方银冰注射剂组、银杏叶提取物组、冰片组，每组10只动物。按照阻断大鼠中动脉(MCAO)法造成大鼠的大脑半球皮层和基底核缺血性损伤模型。各组静脉注射一次，给药30分钟后，各鼠以10％水合氯醛麻醉(300mg/kg，iβ)，按文献方法进行手术，术后24小时断头取脑，经染色后，分别取出呈玫瑰红色的正常脑组织及呈灰白色的梗塞组织，称重，然后根据重量求面积法，求出梗塞区面积占半球总面积的百分比，即梗塞率，并采用组间t检验法与模型组进行显著性测定比较。结果见表3。
表3 对大鼠脑梗死范围的影响(X±S)n＝10
注与假手术组比较，##P＜0.01；与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01。
试验结果经统计学表明，模型组与假手术组相比有显著性差异，表明大鼠MCAO造模成功。与模型组比较，复方银冰注射液组、银杏叶提取物组均能降低动物脑脑梗塞率，但复方银冰注射液组与其相比有显著性差异(P＜0.01)，其对大脑中动脉阻断(MCAO)大鼠的保护作用好于银杏组及尼莫地平组(P＜0.05)，由此表明银冰复方的优越性。
四、对大鼠急性肝损伤模型的作用取雄性Wistar大鼠，随机分为对照组、模型组、银冰制剂低、中、高三个剂量组，银杏叶提取物组，冰片组及齐敦果酸阳性药对照组，每组10只。D-氨基半乳糖胺(D-GalN)致大鼠急性肝损伤模型.给予治疗性药物银冰注射剂、银杏及阳性药对照剂(齐敦果酸)，1次/d，共8d，于第7天上午，给予D-GalN造模，第8天，末次给药1h后断头取血，测定大鼠血清血小板活化因子(PAF)、丙氨酸转氨酶(ALT)、丙二醛(MDA)，并光镜下观察肝脏病理变化.结果见表4。表5。
表4 各组大鼠血清PAF、ALT、MDA的变化情况
注与假手术组比较，##P＜0.01；与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01。
试验结果表明，银冰注射剂及银杏提取物组均有良好的对急性肝损伤的保护作用，但与银杏相比较，银冰中的冰片对银杏提取物具有显著的促进吸收，提高体内浓度，增加疗效的优越性。
对病理学改变的影响D-GalN诱发大鼠肝损伤模型，因其病理变化与人类病毒性肝炎相似而被广泛应用。本试验病理学观察显示肝细胞大块或亚大块坏死，肝小叶及肝细胞消失，肝脏病理学分级与正常组有显著差异(P＜0.01)。银杏各剂量组血清PAF、ALT、MDA及阳性对照组ALT、MDA则均明显低于模型组，肝细胞坏死明显减轻，范围缩小，并可见肝小叶结构，其中尤以银冰剂量组疗效较佳，其他各治疗组效果无明显差异。结论银冰注射剂对D-GalN所致大鼠急性肝损伤具有保护作用，其机制可能是通过清除氧自由基、拮抗PAF，改善肝脏微循环实现的，冰片能显著增加银杏有效成分在体内浓度，提高其生物利用度，有望成为临床治疗急性重型病毒性肝炎的有效药物之一。
具体实施例实施例1银杏叶提取物的制备取一定质量的银杏叶以65％乙醇回流提取，减压浓缩，ZTC澄清剂沉降后，再减压浓缩用50％乙醇沸提银杏叶干粗粉，滤液上724吸附树脂柱，最后得淡黄色粉末状提取物，含黄酮苷和银杏总内酯分别为26％，10.6％。
实施例2银冰注射液的制备[一]取冰片(人工或天然)20g，碾细，加1000ml甘油加热搅拌使完全溶解。取银杏叶提取物2g加2-4L注射用水溶解。将冰片的甘油溶液缓慢加入银杏叶提取物的水溶液中，边加边搅拌至澄清，并用注射用水稀释至10L。药液经孔径为10000分子量的超滤膜超滤，灌封，10ml/支，消毒，即得注射液。
实施例3银冰注射液的制备[二]取冰片(人工或天然)20g，碾细，加入适量无水乙醇溶解后，慢慢加入以600g羟丙基-β-环糊精配成饱和的水溶液中，保温40-60℃，搅拌或超声使溶液澄清。另取银杏叶提取物4g，加适量注射用水溶解。将冰片的羟丙基-β-环糊精包合溶液缓慢加入银杏叶提取物的水溶液中，搅拌，制成输液时需加至等渗量的渗透压调节剂使溶解，该渗透压调节剂为甘露醇、氯化钠或葡萄糖中的至少一种，用注射用水稀释至20L，混匀。药液经孔径30000～100000分子量的超滤膜超滤，灌封，10ml/支，消毒，即得注射液。
实施例4银冰输液的制备[一]取冰片(人工或天然)20g，碾细，加2400ml甘油加热搅拌使完全溶解。取银杏叶提取物2g加2-4L注射用水溶解。将冰片的甘油溶液缓慢加入银杏叶提取物的水溶液中，边加边搅拌，加至等渗量的渗透压调节剂，该等渗剂为甘露醇、氯化钠或葡萄糖中的至少一种，并用注射用水稀释至100L或250L，搅拌均匀。药液经孔径为30000分子量的超滤膜超滤，补充注射用水适量，分装成100ml或250ml/瓶，灌盖，消毒，即得输液。
实施例5银冰输液的制备[二]取冰片(人工或天然)20g，碾细，加入适量无水乙醇溶解后，慢慢加入以200g羟丙基-β-环糊精配成饱和的水溶液中，保温40-60℃，搅拌或超声使溶液澄清。另取银杏叶提取物4g，加适量注射用水溶解。将冰片的羟丙基-β-环糊精包合溶液缓慢加入银杏叶提取物的水溶液中，搅拌，制成输液时需加至等渗量的渗透压调节剂使溶解，该渗透压调节剂为甘露醇、氯化钠或葡萄糖中的至少一种，并用注射用水稀释至100L或250L，搅拌均匀。药液经孔径为30000分子量的超滤膜超滤，补充注射用水适量，分装成100ml或250ml/瓶，灌盖，消毒，即得输液。
实施例6银冰冻干粉针剂的制备取冰片(人工或天然)20g，碾细，加40ml无水乙醇溶解，备用。另取羟丙基-β-环糊精240g，配成饮和溶液，边搅拌边加入冰片乙醇液，搅拌或超声包合得澄清溶液。取银杏叶提取物4g，加适量注射用水溶解。将冰片的羟丙基β-环糊精包合溶液缓慢加入银杏叶提取物的水溶液中，边加边搅拌至澄清，并用注射用水稀释至50L，溶解。药液经通量为10000分子量的超滤膜超滤，分装，每瓶5ml，冻干，压盖，标签，即得粉针，共10000瓶。
权利要求
1.一种用于治疗心脑血管类疾病的中药有效部位复方注射制剂，其特征是由冰片和银杏叶提取物按一定配比组合制成。
2.根据权利要求1的所述的中药有效部位复方注射制剂的制备方法，其特征为一、取冰片1重量份，碾细，加30-70重量份甘油加热搅拌使完全溶解，备用，取银杏叶提取物2-20重量份，加适量注射用水溶解，将上述冰片的甘油溶液缓慢加入银杏叶提取物的水溶液中，搅拌，制成输液时需加至等渗量的渗透压调节剂使溶解，该渗透压调节剂为甘露醇、氯化钠或葡萄糖中的至少一种，用适量的注射用水稀释至一定体积，混匀，药液经通量为10000～30000分子量的超滤膜超滤，灌封成注射液或输液，消毒，即得水针、输液制剂。二、取冰片1重量份，碾细，加入适量无水乙醇溶解后，慢慢加入以8-15重量份羟丙基-β-环糊精配成饱和的水溶液中，保温40-60℃，搅拌或超声使溶液澄清，另取银杏叶提取物2-20重量份，加适量注射用水溶解，将冰片的羟丙基-β-环糊精包合溶液缓慢加入银杏叶提取物的水溶液中，搅拌，制成输液时需加至等渗量的渗透压调节剂使溶解，该渗透压调节剂为甘露醇、氯化钠或葡萄糖中的至少一种，用适量的注射用水稀释至一定体积，混匀，药液经孔径30000～100000分子量的超滤膜超滤，灌封成注射液或小输液，消毒，即得注射液、小输液制剂。三、取冰片1重量份，碾细，加入适量无水乙醇溶解后，慢慢加入以8-15重量份羟丙基-β-环糊精配成饱和的水溶液中，保温40-60℃，搅拌或超声使溶液澄清，另取银杏叶提取物2-20重量份，加适量注射用水溶解，将冰片的羟丙基-β-环糊精包合溶液缓慢加入银杏叶提取物的水溶液中，搅拌均匀，再加入适量成型剂使溶解，该成型剂为甘露醇、羟丙基-β-环糊精或葡萄糖中的至少一种，用适量的注射用水稀释至一定体积，搅拌均匀，药液经孔径30000～100000分子量的超滤膜超滤，超滤液分装，冻干，压盖，即得粉针。
3.根据权利要求2的水针及输液的制备方法，其特征是将药液以10000～30000分子量的超滤膜超滤。
4.根据权利要求2的注射用粉针剂的制备方法，其特征是将滤液以30000～100000分子量的超滤膜超滤。
5.根据权利要求2的注射剂的制备方法，其特征是辅料可以为甘露醇、氯化钠或葡萄糖中的至少一种。
全文摘要
本发明为一种用于治疗心脑血管疾病的中药有效部位复方注射制剂及其制备方法。该复方制剂由中药由冰片1重量份和银杏叶提取物按2－20重量份配比组合制成，并制成了其复方的注射剂，本发明的复方注射制剂提高了传统口服的药理作用和起效时间，且比单用其中任何一种不仅药效明显增强，并且具有减毒作用。用于治疗脑梗塞、脑缺血、冠心病、心绞痛、心肌梗死等，具有显效快，效果明显、高安全性和稳定性的特点。
文档编号A61P9/00GK1778318SQ20041006533
公开日2006年5月31日 申请日期2004年11月26日 优先权日2004年11月26日
发明者秦引林, 何龙其 申请人:秦引林
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