一种用于预防和治疗糖尿病的复方组合物及其制备方法
专利名称：一种用于预防和治疗糖尿病的复方组合物及其制备方法
技术领域：
本发明涉及用于一种用于预防和治疗糖尿病的保健品。本发明提供了一种用于预防和治疗糖尿病的复方组合物，该复方组合物可以被作为用于预防和治疗糖尿病的保健品。另一方面本发明还提供了一种制备该用于预防和治疗糖尿病的复方组合物的方法。
背景技术：
糖尿病(DM)是以血糖升高为临床特点的代谢内分泌疾病，由于胰岛素分泌的绝对或相对不足导致糖代谢受阻，糖代谢的紊乱继而引起蛋白质、脂肪的代谢紊乱是DM发生和发展的起源。
当今在治疗DM的药物中，均是以刺激胰岛β细胞分泌胰岛素，增加胰岛素敏感性或改善周围组织对葡萄糖利用等方面为作用机理的。我们知道，由于DM病人体内β细胞分泌胰岛素的功能已被破坏，如果单纯的刺激β细胞，势必会导致β细胞的进一步被损害，如此治疗方法，后果是胰岛β细胞分泌胰岛素的能力愈来愈差，直接影响DM病人的整体治疗方案，使DM患者的中远期疗效值得担忧。
经过研究发现，葡萄糖必须在胰岛素的参与下才能进入细胞内，在线粒体上参与代谢产生能量被人体所利用，导致DM发生和发展的根本原因就是胰岛素和糖代谢之间的失配，如何能够寻找一种不依赖胰岛素的参与直接可进入人体细胞产生能量的物质代替葡萄糖，并修复胰岛和葡萄糖二者之间的关系是根本防治DM的关键因素。
研究表明，胰岛素的合成是由人体的遗传基因DNA所决定的，无法改变。但对以葡萄糖代谢供能为主的代谢结构我们是可以改变的，如果能够发明一种糖物质不依赖胰岛素的参与又能像葡萄糖一样发挥正常的供能作用，这对缺乏胰岛素的DM病人来讲是非常重要的。
研究表明戊糖(Pentose)对于DM患者是一种非常合适的替代葡萄糖的最佳能量补剂。
通过对能量代谢三羧酸循环的研究发现，戊糖通过代谢旁路能有效提供人体能量，戊糖在人体内含量极低，只有当葡萄糖代谢受阻时，戊糖代谢通道才启动。而且戊糖不需要胰岛素的参与可直接进入肌肉和脂肪细胞膜，提供人体有效的能量，可有效抑制葡萄糖，蛋白质和脂肪的代谢紊乱，降低DM病人血糖值，减少和改善DM病人并发症的发生和发展。
南瓜，其肉，籽，露蒂，藤，根，瓤均可入药。中医认为，南瓜性味甘温无毒，功能补脾益气，化痰解毒，杀虫利水。长期食用可补益中气，“消渴”病人宜食(糖尿病在中国古代医籍中称之为“消渴”)。有关南瓜作为DM病人的食疗验方从唐朝至今已广泛应用，早在唐朝王焘《外台秘要》中提及之“金瓜粉”，提倡将南瓜制成粉入口，可治“消渴”病人脾胃虚弱、气短倦怠，民间已广泛应用吃南瓜治疗DM。
自70年代日本学者名和能治首次报道应用南瓜治疗DM获效后，关于南瓜及其制品的的药理、生化等方面的研究报告络绎不绝，其中比较著名的有Nuttall FQ，effects of pumkin on Blood sugar，Diabetes；199342(4)503和蔡方《“南瓜药理研究”药理研究文摘，199310(1)37》。通过现代科学研究表明南瓜果肉含有多种氨基酸、维生素、淀粉、矿物质、纤维素、果胶、戊糖，其中果胶含量达7-17％，戊糖含量达0.3～0.6％。
戊糖(Pentose)对糖代谢的作用戊糖不依赖胰岛素可直接通过细胞膜进入细胞内，在线粒体上代谢能量，供人体细胞利用。人体对戊糖的有效利用在神经系统和内分泌系统地参与下可对糖代谢产生积极地调控，减少对葡萄糖的利用、抑制糖原分解、促进肝糖原合成、抑制糖异生作用。
戊糖(Pentose)对脂肪代谢的作用促进脂肪合成、脂肪分解代谢减弱、减少DM病人高脂蛋白血症。戊糖通过有效提供DM病人能量，抑制糖异生作用，可明显降低DM病人高血脂症的发病率。
由于人体内戊糖含量极少，只有通过体外补充才能够得到足够的戊糖能量源。但是天然植物中的戊糖含量极低，通过传统的提取工艺提取戊糖不仅产量极低，而且成本极高(成本是黄金价格11倍)，根本无法保证临床患者使用。
研究发现，戊糖在其它动、植物体内的含量均极少，但是在南瓜中有较高的含量，尤其在P34小金瓜品种中含量最高，但P34小金瓜中同样含葡萄糖和果糖。根据《糖尿病及并发症中西诊治学》(人民卫生出版社，主编吕仁和)等许多材料均报道枸杞子和茯苓均有明显的降低血脂、调节血糖的作用。所以利用南瓜提取其中的戊糖，辅以枸杞子和茯苓的提取液后，调节血糖的功效会更好。
1994年美国希尔公司的科技人员最先发明的“1，4羧基内切酶”和“分子筛滤过”技术，使南瓜戊糖的提取率由原来的0.012％提高为1.7％，从而使南瓜戊糖的临床应用变为现实。
戊糖由于能抑制糖异生作用，有效调节蛋白质的代谢紊乱。
发明内容
本发明的目的是提供一种用于预防和治疗糖尿病的复方组合物。
本发明的再一目的是提供一种制备上述复方组合物的方法。
一方面，本发明的用于预防和治疗糖尿病的复方组合物，由活性组分和/或药学上可接受的载体组成，其中每1000g所述的复方组合物含有作为活性组分的150～200g南瓜戊糖、35g～50g常规方法制备的枸杞提取物和17.5g～25g常规方法制备的茯苓提取物。其中南瓜戊糖可以为市售的戊糖或从南瓜中提取的天然戊糖，优选为从南瓜中提取的戊糖。
另一方面，本发明提供了制备所述复方组合物的方法，该方法包括以下步骤i)制备含有南瓜戊糖的南瓜提取液，1)选料，选取瓜重≥1.5公斤的南瓜；2)南瓜水浸液的制备，将选取的南瓜去蒂、瓤、籽，切块后粉碎，放入化料锅中，按1∶5的比例加入蒸馏水，搅拌均匀，保温50℃，搅拌2小时后，静置10小时，得到南瓜水浸液；3)南瓜浓缩液的制备，步骤2)中制备的南瓜水浸液进行第一次过滤得到南瓜滤液，所得滤液进入蒸馏罐，按3∶1的比例加热浓缩，100℃保温，时间3小时，得到南瓜浓缩液；
4)南瓜提取液的制备，通过步骤3)制备的南瓜浓缩液，冷却至常温，进入醇沉罐中，按1∶3的比例加入食用酒精，15～20℃，时间10小时，进行第二次过滤；滤液进入酒精回收塔回收酒精，不溶物进入化料锅按1∶3的比例加入蒸馏水，加热80℃搅拌至完全溶解，然后冷却至50℃，然后进行分子筛处理，得到的筛液进入蒸馏罐，按1∶1的比例浓缩，得到南瓜提取液；ii)制备枸杞提取物；iii)制备茯苓提取物；iv)混合，按60∶2∶1的重量比混合i)的南瓜提取液、ii)的枸杞提取物和iii)的茯苓提取物。
在通过以上方法制备南瓜提取液时，选取的南瓜的储存期低于3个月，因为根据本发明人的研究，如果南瓜的储存期超过3个月，则南瓜戊糖的含量将会大大降低。
通过本发明的方法制备的南瓜提取液中南瓜戊糖的含量大于20％，不仅成功地提高了戊糖的提取率，还保留了对糖尿病病人有益的果胶成份，使蔗糖的含量降至最低，保证了临床使用的有效性，从而能够提供一种新的有效的用于预防和治疗糖尿病的保健品。本发明的复方组合物还可以辅以枸杞子和茯苓的提取液，调节血糖的功效会更好。此外，在通过本发明的方法制备南瓜提取液的过程中，第一次过滤步骤中得到的滤渣被用作动物饲料，充分利用了生产过程中的废物并且带来了更高的经济利润。
具体实施例方式
制备实施例1南瓜提取液的制备1、南瓜提取液的制备1)选料，选取2.0公斤、储存期为1.5个月的南瓜；2)南瓜水浸液的制备，将选取的南瓜去蒂、瓤、籽，切块后粉碎，放入化料锅中，按1∶5的比例加入蒸馏水，搅拌均匀，保温50℃，搅拌2小时后，静置10小时，得到南瓜水浸液；3)南瓜浓缩液的制备，进行第一次过滤2)中制备的南瓜水浸液得到南瓜滤液，所得滤液进入蒸馏罐，按3∶1的比例加热浓缩，加热100℃，时间3小时，得到南瓜浓缩液；4)南瓜提取液的制备，通过3)制备的南瓜浓缩液，冷却至常温，进入酒沉罐中，按1∶3的比例加入食用酒精，15～20℃，时间10小时，进行第二次过滤；滤液进入酒精回收塔回收酒精，不溶物进入化料锅按1∶3的比例加入蒸馏水，加热80℃搅拌至完全溶解，然后冷却至50℃，然后进行分子筛处理，得到的筛液进入蒸馏罐，按1∶1的比例浓缩，得到南瓜提取液。
制备实施例2枸杞提取液的制备取枸杞子(符合中华人民共和国药典)，进入化料锅中加热煮沸2小时，冷却后粗滤，静置过夜(12小时)，取上清液，进入蒸馏罐，按2∶1的比例浓缩，进入酒沉罐，按1∶3的比例加入食用酒精，静置24小时，过滤，去掉不溶物，滤液进入酒精回收塔，所得药液进入蒸馏罐按1∶1的比例浓缩，得到枸杞提取液。
制备实施例3茯苓提取液的制备以与制备实施例2相同的方法制备茯苓提取液。
实施例1本发明的复方组合物的制备1、按100单位计算，取95重量份制备实施例1制备的南瓜提取液、3重量份的制备实施例2制备的枸杞提取液和1.5重量份的制备实施例3制备的茯苓提取液，进入化料锅中混合搅拌均匀，加热至60℃，进入膏液灌装机中进行装瓶，进入消毒柜中消毒，保温120℃，时间10分钟，消毒后包装入库。
2、产品功效成分的含量及功效成分检验方法检验方法本标准参照GB13509-92食品添加剂、木糖醇第5试验方法。
样品制取方法取以上制备的复方组合物100ml加入100ml蒸馏水中搅匀，静置备24H，取上清液过滤，滤液离心，取上清液过滤，滤液真空干燥、结晶即得。
鉴别方法溶解5g样品到10ml的盐酸和甲醛溶液中，在50℃下反应2H，加入25ml乙醇，收集产生的结晶，加热使结晶溶解于10ml水中，加入50ml乙醇，用过滤法收集分离出结晶，用乙醇重结晶两次，在105℃下干燥2H，结晶熔点在195--201℃之间。
含量测定1)仪器SP-2308气相色谱仪带氢离子检测器；25ml容量瓶；微量注射器。
2)试剂十八烷(内标)色谱纯；庚烷；吡啶(GB689)；六甲基二硅胺烷；标准木糖醇。
3)色谱条件柱为Φ50-2000mm玻璃柱或不锈钢柱；载气氮气，载气流速归50-60ml/min或调节到进样后约定13min得到木糖醇的TMS峰；空气流速600ml/min；柱温190℃；检测室温度250℃；气化室温度250℃；记录仪量程5mv；纸速4mm/min；载体为酸碱处理过的硅烷化色谱硅藻土，即Chro-mosorbWAW-DMCS(60-80目)，涂渍20％的甲基硅氧烷；
进样量10ml。
4)测定方法内标溶液准确称取500mg(精确0.001g)十八烷，用庚烷溶解，移入25ml容量瓶中，稀释到刻度、混匀；标准制备液准确称取50g(精确0.001g)标准木糖醇于25ml容量瓶中，加入1ml吡啶，在蒸气浴上加热溶解木糖醇，冷却到室温，加入0.2ml六甲基二硅胺烷(HMDS)和0.1ml三甲基氯硅烷(TMCS)，室温下放置30min，加入5.0ml内标溶液，用庚烷稀释到刻度、混匀；样品制备液准确称取50mg(精确0.001g)样品，(样品预先在60℃下放在五氧化二磷上真空干燥4H)于25ml容量瓶中，加入1ml吡啶，在蒸气浴上加热溶解，冷却到室温，加入0.2ml HMDS和0.1ml TMCS，在室温下放置30min，加入5.0ml内标溶液(4.4.2)，用庚烷稀释到刻度、混匀；于色谱柱中加入10ml标准制备液，分别记录戊糖TMS峰的面积Ax和十八烷峰的面积Ao。
5)计算RR＝(Ax×Co)/(Ao×Cx)式中RR--木糖醇的响应比；Co和Cx-分别为标准制备液中十八烷和标准戊糖的浓度，mg/ml；
同样地，注入10ml样品制备液，分别记录戊糖TMS峰和十八烷峰的面积a和ao。
X＝(ao×Co×25)/(ao×RR)式中X----戊糖的毫克数。
经以上方法检测，确定复方组合物中产品功效含量每100克题述复方组合物中南瓜戊糖的含量约为20克。
实施例3辅助调节血糖作用的实验报告1、材料和方法1.1受试试样本发明的复方组合物，棕色粘稠液体。人体推荐量为15ml/次、3次/日、饭后半小时。
1.2受试人群按自愿原则选择符合下列标准者1.2.1受试者的选择标准同时符合以下条件的病例可以入选为观察对象(1)确认为II型糖尿病或糖耐量低减，对试食观察的目的意义有充分了解，并愿意给予合作的志愿者。(2)病例无心肝肾等主要器官的严重并发症，心肝肾功能正常。(3)19-64岁。
附诊断标准参照1985年WHO标准(mg/dL＝mmol/L×18)
1.2.2排除标准以下任何一项(1)18岁以下或65岁以上。(2)妊娠和哺乳期妇女。(3)有严重心肝肾等脏器并发症或合并其他严重并发症及精神病者。(4)不愿合作，无法判断效果或资料不全者。
1.3实验设计及分组采用区组随机化分配，双盲，安慰剂对照形式，随机分为两个组，原服用的治疗药物不变，其中试食组加食本发明的复方组合物，对照组加食安慰剂。
1.4服用计量及时间本发明的复方组合物和安慰剂，均为15ml/次，3次/日，饭前半小时服用。两组原服用药物不变。自观察之日始，按不同劳动强度、体型规定主食，要求患者长期坚持饮食计划观察时间为30天。
1.5主要仪器与试剂、测试环境要求血糖RA-1000测试仪，试剂血清葡萄糖试剂。葡萄糖氧化酶法血脂TA-1000测试仪，试剂血清甘油三酯、胆固醇、高密度脂蛋白试剂胰岛素胰岛素试剂盒1.6观察指标1.6.1一般情况精神、饮食、睡眠以及主要临床症状。
1.6.2功效性观察1.6.2.1降糖实验试餐物统一为100g精粉制成的馒头，测空腹和餐后2小时的血糖。
1.6.2.2血清胰岛素测定试食物统一为100g精粉制馒头，测空腹和餐后2小时血清胰岛素。
1.6.2.3尿糖晨尿定性，换算为g/L1.6.2.4血脂总胆固醇TC、甘油三酯TG1.6.3安全性观察血液常规检查红细胞计数、白细胞计数、血小板白测试。血生化指标测定心、肝、肾功能(谷草转氨酶AST、谷丙转氨酶ALT、血清白蛋白ALB、总蛋白TB、尿素氮BUN、肌酐Cre)，X线胸部透视、腹部B超(肝、胆、胰、脾、肾)、心电图。
1.7实验数据统计计数资料用x2检验，率用u检验，计量资料用t(或t2检验)
1.8功效判定标准显效基本症状消失，空腹血糖≤7.2mmol/L(130mg/dL)；或血糖较治疗前下降≥30％。
有效基本症状明显改善，空腹血糖≤8.3mmol/L(150mg/dL)；或血糖较治疗前下降10％。
无效基本症状无明显改善，血糖下降未达到上述标准。
2、结果2.1一般情况表1 试食前一般资料比较
影响预后的主要因素(混杂因子)，两组基本均衡，具有可比性。
2.2功效观察2.2.1临床观察表2 试食前后临床症状的变化
观察组的改善率(比例)高于对照组表3 临床症状积分统计
#自身前后比较，每组都有显著差别，组间比较t＝4.70，p＜0.01。两组临床症状积分前后差值比较，有极显著差别，提示受试食品可以改善临床症状。
2.2.2空腹血糖表4 降空腹血糖功效比较
*组间比较，u＝2.08，p＜0.05，两组的总有效率之间有显著差别，提示受试食品可以降低空腹血糖。
表5 试食前后空腹血糖变化(mmo/L，x±SD)
#自身前后比较，*组间比较，t＝2.47，p＜0.05。降低绝对值的比较，两组之间有显著差别，提示受试食品可以降空腹血糖。
2.2.3餐后血糖表6 试食前后餐后2h血糖变化(mmol/L，x±SD)
#自身前后餐后2h血糖比较对照组t＝1.33，p＞0.05；观察组t＝3.55，p＜0.01。*试食后的餐后2h血糖组间比较t＝2.08，p＜0.05。提示受试样品可以降餐后2h血糖。
2.2.4尿糖表7 试食前后尿糖变化(g/L，x±SD)
#自身前后比较，*组间比较，t＝2.08，p＜0.05，试食前后尿糖差值的比较，两组之间有显著差别，提示受试食品可以降尿糖。
2.2.5血清胰岛素水平表8 试食前后血清胰岛素(INS)变化(mU/L，x±SD)
#自身前后比较空腹t＝1.39，p＞0.05；餐后t＝1.96，p＞0.05。*组间比较餐后t＝1.84，p＞0.05，试食前后自身血清胰岛素差值的比较，两组之间餐后的比较均无明显差别，提示受试食品对胰岛素的变化无影响。
2.2.6血脂表9 试食前后血胆固醇(TC)及甘油三酯(TG)的变化(mmol/L，x±SD)
#胆固醇自身前后比较对照组t＝0.70，P＞0.05；观察组t＝0.38，P＞0.05。*组间比较t＝1.21，p＞0.05。
#甘油三酯自身前后比较对照组t＝0.53，P＞0.05；观察组t＝0.24，P＞0.05。*组间比较t＝0.24，P＞0.05。提示受试食品对胆固醇及甘油三酯的变化无显著影响。
2.3安全观察指标
表10 试食前后血象变化(x±SD)
试食前后的红细胞、白细胞、血红蛋白都在正常范围，未观察到受试食品对上述血象有显著影响。
表11 试食前后肝、肾功能变化(x±SD)
试食前后肝、肾功能指标均在正常范围，未观察到受试样品对人体的不良影响。
3、小结受试食品样品“本发明的复方组合物”对64例受试者的观察结果提示，可以降空腹血糖、餐后2小时血糖和尿糖，可以改善相关的主要临床症状，未观察到对人体的不良影响。
权利要求
1.一种用于预防和治疗糖尿病的复方组合物，它是由活性组分和/或药学上可接受的载体组成，其特征在于所述每1000g复方组合物包括作为活性组分的150g～200g南瓜戊糖、35g～50g常规方法制备的枸杞提取物和17.5g～25g常规方法制备的茯苓提取物。
2.一种制备权利要求1的用于预防和治疗糖尿病的复方组合物的方法，其特征在于该方法包括以下步骤i)制备含有南瓜戊糖的南瓜提取液，1)选料，选取瓜重≥1.5公斤的南瓜；2)南瓜水浸液的制备，将选取的南瓜去蒂、瓤、籽，切块后粉碎，放入化料锅中，按1∶5的比例加入蒸馏水，搅拌均匀，保温50℃，搅拌2小时后，静置10小时，得到南瓜水浸液；3)南瓜浓缩液的制备，步骤2)中制备的南瓜水浸液进行第一次过滤得到南瓜滤液，所得滤液进入蒸馏罐，按3∶1的比例加热浓缩，100℃保温，时间3小时，得到南瓜浓缩液；4)南瓜提取液的制备，通过步骤3)制备的南瓜浓缩液，冷却至常温，进入醇沉罐中，按1∶3的比例加入食用酒精，15～20℃，时间10小时，进行第二次过滤；滤液进入酒精回收塔回收酒精，不溶物进入化料锅按1∶3的比例加入蒸馏水，加热80℃搅拌至完全溶解，然后冷却至50℃，然后进行分子筛处理，得到的筛液进入蒸馏罐，按1∶1的比例浓缩，得到南瓜提取液；ii)制备枸杞提取物；iii)制备茯苓提取物；iv)混合，按60∶2∶1的重量比混合i)的南瓜提取液、ii)的枸杞提取物和iii)的茯苓提取物。
3.如权利要求2所述的方法，其特征在于在所述i)的选料步骤中，选取的南瓜的储存期在3个月以下。
全文摘要
本发明涉及预防和治疗糖尿病的保健品领域。本发明提供了一种用于预防和治疗糖尿病的复方组合物，它是由活性组分和/或药学上可接受的载体组成，其中所述每1000g复方组合物含有作为活性组分的150g～250g南瓜戊糖、35g～50g常规方法制备的枸杞提取物和17.5g～25g常规方法制备的茯苓提取物。本发明还提供了一种用于制备所述用于预防和治疗糖尿病的复方组合物的方法，该方法i)制备含有南瓜戊糖的南瓜提取液；ii)制备枸杞提取物；iii)制备茯苓提取物；iv)混合。通过本发明的方法制备的南瓜提取液中南瓜戊糖的含量达到了20％或更高，克服了通过现有技术的方法制备的南瓜提取液中南瓜戊糖含量低的问题。
文档编号A61P3/00GK1751717SQ20041007807
公开日2006年3月29日 申请日期2004年9月20日 优先权日2004年9月20日
发明者张振涛 申请人:澳琪生物工程(中山)发展有限公司
技术领域：
本发明涉及用于一种用于预防和治疗糖尿病的保健品。本发明提供了一种用于预防和治疗糖尿病的复方组合物，该复方组合物可以被作为用于预防和治疗糖尿病的保健品。另一方面本发明还提供了一种制备该用于预防和治疗糖尿病的复方组合物的方法。
背景技术：
糖尿病(DM)是以血糖升高为临床特点的代谢内分泌疾病，由于胰岛素分泌的绝对或相对不足导致糖代谢受阻，糖代谢的紊乱继而引起蛋白质、脂肪的代谢紊乱是DM发生和发展的起源。
当今在治疗DM的药物中，均是以刺激胰岛β细胞分泌胰岛素，增加胰岛素敏感性或改善周围组织对葡萄糖利用等方面为作用机理的。我们知道，由于DM病人体内β细胞分泌胰岛素的功能已被破坏，如果单纯的刺激β细胞，势必会导致β细胞的进一步被损害，如此治疗方法，后果是胰岛β细胞分泌胰岛素的能力愈来愈差，直接影响DM病人的整体治疗方案，使DM患者的中远期疗效值得担忧。
经过研究发现，葡萄糖必须在胰岛素的参与下才能进入细胞内，在线粒体上参与代谢产生能量被人体所利用，导致DM发生和发展的根本原因就是胰岛素和糖代谢之间的失配，如何能够寻找一种不依赖胰岛素的参与直接可进入人体细胞产生能量的物质代替葡萄糖，并修复胰岛和葡萄糖二者之间的关系是根本防治DM的关键因素。
研究表明，胰岛素的合成是由人体的遗传基因DNA所决定的，无法改变。但对以葡萄糖代谢供能为主的代谢结构我们是可以改变的，如果能够发明一种糖物质不依赖胰岛素的参与又能像葡萄糖一样发挥正常的供能作用，这对缺乏胰岛素的DM病人来讲是非常重要的。
研究表明戊糖(Pentose)对于DM患者是一种非常合适的替代葡萄糖的最佳能量补剂。
通过对能量代谢三羧酸循环的研究发现，戊糖通过代谢旁路能有效提供人体能量，戊糖在人体内含量极低，只有当葡萄糖代谢受阻时，戊糖代谢通道才启动。而且戊糖不需要胰岛素的参与可直接进入肌肉和脂肪细胞膜，提供人体有效的能量，可有效抑制葡萄糖，蛋白质和脂肪的代谢紊乱，降低DM病人血糖值，减少和改善DM病人并发症的发生和发展。
南瓜，其肉，籽，露蒂，藤，根，瓤均可入药。中医认为，南瓜性味甘温无毒，功能补脾益气，化痰解毒，杀虫利水。长期食用可补益中气，“消渴”病人宜食(糖尿病在中国古代医籍中称之为“消渴”)。有关南瓜作为DM病人的食疗验方从唐朝至今已广泛应用，早在唐朝王焘《外台秘要》中提及之“金瓜粉”，提倡将南瓜制成粉入口，可治“消渴”病人脾胃虚弱、气短倦怠，民间已广泛应用吃南瓜治疗DM。
自70年代日本学者名和能治首次报道应用南瓜治疗DM获效后，关于南瓜及其制品的的药理、生化等方面的研究报告络绎不绝，其中比较著名的有Nuttall FQ，effects of pumkin on Blood sugar，Diabetes；199342(4)503和蔡方《“南瓜药理研究”药理研究文摘，199310(1)37》。通过现代科学研究表明南瓜果肉含有多种氨基酸、维生素、淀粉、矿物质、纤维素、果胶、戊糖，其中果胶含量达7-17％，戊糖含量达0.3～0.6％。
戊糖(Pentose)对糖代谢的作用戊糖不依赖胰岛素可直接通过细胞膜进入细胞内，在线粒体上代谢能量，供人体细胞利用。人体对戊糖的有效利用在神经系统和内分泌系统地参与下可对糖代谢产生积极地调控，减少对葡萄糖的利用、抑制糖原分解、促进肝糖原合成、抑制糖异生作用。
戊糖(Pentose)对脂肪代谢的作用促进脂肪合成、脂肪分解代谢减弱、减少DM病人高脂蛋白血症。戊糖通过有效提供DM病人能量，抑制糖异生作用，可明显降低DM病人高血脂症的发病率。
由于人体内戊糖含量极少，只有通过体外补充才能够得到足够的戊糖能量源。但是天然植物中的戊糖含量极低，通过传统的提取工艺提取戊糖不仅产量极低，而且成本极高(成本是黄金价格11倍)，根本无法保证临床患者使用。
研究发现，戊糖在其它动、植物体内的含量均极少，但是在南瓜中有较高的含量，尤其在P34小金瓜品种中含量最高，但P34小金瓜中同样含葡萄糖和果糖。根据《糖尿病及并发症中西诊治学》(人民卫生出版社，主编吕仁和)等许多材料均报道枸杞子和茯苓均有明显的降低血脂、调节血糖的作用。所以利用南瓜提取其中的戊糖，辅以枸杞子和茯苓的提取液后，调节血糖的功效会更好。
1994年美国希尔公司的科技人员最先发明的“1，4羧基内切酶”和“分子筛滤过”技术，使南瓜戊糖的提取率由原来的0.012％提高为1.7％，从而使南瓜戊糖的临床应用变为现实。
戊糖由于能抑制糖异生作用，有效调节蛋白质的代谢紊乱。
发明内容
本发明的目的是提供一种用于预防和治疗糖尿病的复方组合物。
本发明的再一目的是提供一种制备上述复方组合物的方法。
一方面，本发明的用于预防和治疗糖尿病的复方组合物，由活性组分和/或药学上可接受的载体组成，其中每1000g所述的复方组合物含有作为活性组分的150～200g南瓜戊糖、35g～50g常规方法制备的枸杞提取物和17.5g～25g常规方法制备的茯苓提取物。其中南瓜戊糖可以为市售的戊糖或从南瓜中提取的天然戊糖，优选为从南瓜中提取的戊糖。
另一方面，本发明提供了制备所述复方组合物的方法，该方法包括以下步骤i)制备含有南瓜戊糖的南瓜提取液，1)选料，选取瓜重≥1.5公斤的南瓜；2)南瓜水浸液的制备，将选取的南瓜去蒂、瓤、籽，切块后粉碎，放入化料锅中，按1∶5的比例加入蒸馏水，搅拌均匀，保温50℃，搅拌2小时后，静置10小时，得到南瓜水浸液；3)南瓜浓缩液的制备，步骤2)中制备的南瓜水浸液进行第一次过滤得到南瓜滤液，所得滤液进入蒸馏罐，按3∶1的比例加热浓缩，100℃保温，时间3小时，得到南瓜浓缩液；
4)南瓜提取液的制备，通过步骤3)制备的南瓜浓缩液，冷却至常温，进入醇沉罐中，按1∶3的比例加入食用酒精，15～20℃，时间10小时，进行第二次过滤；滤液进入酒精回收塔回收酒精，不溶物进入化料锅按1∶3的比例加入蒸馏水，加热80℃搅拌至完全溶解，然后冷却至50℃，然后进行分子筛处理，得到的筛液进入蒸馏罐，按1∶1的比例浓缩，得到南瓜提取液；ii)制备枸杞提取物；iii)制备茯苓提取物；iv)混合，按60∶2∶1的重量比混合i)的南瓜提取液、ii)的枸杞提取物和iii)的茯苓提取物。
在通过以上方法制备南瓜提取液时，选取的南瓜的储存期低于3个月，因为根据本发明人的研究，如果南瓜的储存期超过3个月，则南瓜戊糖的含量将会大大降低。
通过本发明的方法制备的南瓜提取液中南瓜戊糖的含量大于20％，不仅成功地提高了戊糖的提取率，还保留了对糖尿病病人有益的果胶成份，使蔗糖的含量降至最低，保证了临床使用的有效性，从而能够提供一种新的有效的用于预防和治疗糖尿病的保健品。本发明的复方组合物还可以辅以枸杞子和茯苓的提取液，调节血糖的功效会更好。此外，在通过本发明的方法制备南瓜提取液的过程中，第一次过滤步骤中得到的滤渣被用作动物饲料，充分利用了生产过程中的废物并且带来了更高的经济利润。
具体实施例方式
制备实施例1南瓜提取液的制备1、南瓜提取液的制备1)选料，选取2.0公斤、储存期为1.5个月的南瓜；2)南瓜水浸液的制备，将选取的南瓜去蒂、瓤、籽，切块后粉碎，放入化料锅中，按1∶5的比例加入蒸馏水，搅拌均匀，保温50℃，搅拌2小时后，静置10小时，得到南瓜水浸液；3)南瓜浓缩液的制备，进行第一次过滤2)中制备的南瓜水浸液得到南瓜滤液，所得滤液进入蒸馏罐，按3∶1的比例加热浓缩，加热100℃，时间3小时，得到南瓜浓缩液；4)南瓜提取液的制备，通过3)制备的南瓜浓缩液，冷却至常温，进入酒沉罐中，按1∶3的比例加入食用酒精，15～20℃，时间10小时，进行第二次过滤；滤液进入酒精回收塔回收酒精，不溶物进入化料锅按1∶3的比例加入蒸馏水，加热80℃搅拌至完全溶解，然后冷却至50℃，然后进行分子筛处理，得到的筛液进入蒸馏罐，按1∶1的比例浓缩，得到南瓜提取液。
制备实施例2枸杞提取液的制备取枸杞子(符合中华人民共和国药典)，进入化料锅中加热煮沸2小时，冷却后粗滤，静置过夜(12小时)，取上清液，进入蒸馏罐，按2∶1的比例浓缩，进入酒沉罐，按1∶3的比例加入食用酒精，静置24小时，过滤，去掉不溶物，滤液进入酒精回收塔，所得药液进入蒸馏罐按1∶1的比例浓缩，得到枸杞提取液。
制备实施例3茯苓提取液的制备以与制备实施例2相同的方法制备茯苓提取液。
实施例1本发明的复方组合物的制备1、按100单位计算，取95重量份制备实施例1制备的南瓜提取液、3重量份的制备实施例2制备的枸杞提取液和1.5重量份的制备实施例3制备的茯苓提取液，进入化料锅中混合搅拌均匀，加热至60℃，进入膏液灌装机中进行装瓶，进入消毒柜中消毒，保温120℃，时间10分钟，消毒后包装入库。
2、产品功效成分的含量及功效成分检验方法检验方法本标准参照GB13509-92食品添加剂、木糖醇第5试验方法。
样品制取方法取以上制备的复方组合物100ml加入100ml蒸馏水中搅匀，静置备24H，取上清液过滤，滤液离心，取上清液过滤，滤液真空干燥、结晶即得。
鉴别方法溶解5g样品到10ml的盐酸和甲醛溶液中，在50℃下反应2H，加入25ml乙醇，收集产生的结晶，加热使结晶溶解于10ml水中，加入50ml乙醇，用过滤法收集分离出结晶，用乙醇重结晶两次，在105℃下干燥2H，结晶熔点在195--201℃之间。
含量测定1)仪器SP-2308气相色谱仪带氢离子检测器；25ml容量瓶；微量注射器。
2)试剂十八烷(内标)色谱纯；庚烷；吡啶(GB689)；六甲基二硅胺烷；标准木糖醇。
3)色谱条件柱为Φ50-2000mm玻璃柱或不锈钢柱；载气氮气，载气流速归50-60ml/min或调节到进样后约定13min得到木糖醇的TMS峰；空气流速600ml/min；柱温190℃；检测室温度250℃；气化室温度250℃；记录仪量程5mv；纸速4mm/min；载体为酸碱处理过的硅烷化色谱硅藻土，即Chro-mosorbWAW-DMCS(60-80目)，涂渍20％的甲基硅氧烷；
进样量10ml。
4)测定方法内标溶液准确称取500mg(精确0.001g)十八烷，用庚烷溶解，移入25ml容量瓶中，稀释到刻度、混匀；标准制备液准确称取50g(精确0.001g)标准木糖醇于25ml容量瓶中，加入1ml吡啶，在蒸气浴上加热溶解木糖醇，冷却到室温，加入0.2ml六甲基二硅胺烷(HMDS)和0.1ml三甲基氯硅烷(TMCS)，室温下放置30min，加入5.0ml内标溶液，用庚烷稀释到刻度、混匀；样品制备液准确称取50mg(精确0.001g)样品，(样品预先在60℃下放在五氧化二磷上真空干燥4H)于25ml容量瓶中，加入1ml吡啶，在蒸气浴上加热溶解，冷却到室温，加入0.2ml HMDS和0.1ml TMCS，在室温下放置30min，加入5.0ml内标溶液(4.4.2)，用庚烷稀释到刻度、混匀；于色谱柱中加入10ml标准制备液，分别记录戊糖TMS峰的面积Ax和十八烷峰的面积Ao。
5)计算RR＝(Ax×Co)/(Ao×Cx)式中RR--木糖醇的响应比；Co和Cx-分别为标准制备液中十八烷和标准戊糖的浓度，mg/ml；
同样地，注入10ml样品制备液，分别记录戊糖TMS峰和十八烷峰的面积a和ao。
X＝(ao×Co×25)/(ao×RR)式中X----戊糖的毫克数。
经以上方法检测，确定复方组合物中产品功效含量每100克题述复方组合物中南瓜戊糖的含量约为20克。
实施例3辅助调节血糖作用的实验报告1、材料和方法1.1受试试样本发明的复方组合物，棕色粘稠液体。人体推荐量为15ml/次、3次/日、饭后半小时。
1.2受试人群按自愿原则选择符合下列标准者1.2.1受试者的选择标准同时符合以下条件的病例可以入选为观察对象(1)确认为II型糖尿病或糖耐量低减，对试食观察的目的意义有充分了解，并愿意给予合作的志愿者。(2)病例无心肝肾等主要器官的严重并发症，心肝肾功能正常。(3)19-64岁。
附诊断标准参照1985年WHO标准(mg/dL＝mmol/L×18)
1.2.2排除标准以下任何一项(1)18岁以下或65岁以上。(2)妊娠和哺乳期妇女。(3)有严重心肝肾等脏器并发症或合并其他严重并发症及精神病者。(4)不愿合作，无法判断效果或资料不全者。
1.3实验设计及分组采用区组随机化分配，双盲，安慰剂对照形式，随机分为两个组，原服用的治疗药物不变，其中试食组加食本发明的复方组合物，对照组加食安慰剂。
1.4服用计量及时间本发明的复方组合物和安慰剂，均为15ml/次，3次/日，饭前半小时服用。两组原服用药物不变。自观察之日始，按不同劳动强度、体型规定主食，要求患者长期坚持饮食计划观察时间为30天。
1.5主要仪器与试剂、测试环境要求血糖RA-1000测试仪，试剂血清葡萄糖试剂。葡萄糖氧化酶法血脂TA-1000测试仪，试剂血清甘油三酯、胆固醇、高密度脂蛋白试剂胰岛素胰岛素试剂盒1.6观察指标1.6.1一般情况精神、饮食、睡眠以及主要临床症状。
1.6.2功效性观察1.6.2.1降糖实验试餐物统一为100g精粉制成的馒头，测空腹和餐后2小时的血糖。
1.6.2.2血清胰岛素测定试食物统一为100g精粉制馒头，测空腹和餐后2小时血清胰岛素。
1.6.2.3尿糖晨尿定性，换算为g/L1.6.2.4血脂总胆固醇TC、甘油三酯TG1.6.3安全性观察血液常规检查红细胞计数、白细胞计数、血小板白测试。血生化指标测定心、肝、肾功能(谷草转氨酶AST、谷丙转氨酶ALT、血清白蛋白ALB、总蛋白TB、尿素氮BUN、肌酐Cre)，X线胸部透视、腹部B超(肝、胆、胰、脾、肾)、心电图。
1.7实验数据统计计数资料用x2检验，率用u检验，计量资料用t(或t2检验)
1.8功效判定标准显效基本症状消失，空腹血糖≤7.2mmol/L(130mg/dL)；或血糖较治疗前下降≥30％。
有效基本症状明显改善，空腹血糖≤8.3mmol/L(150mg/dL)；或血糖较治疗前下降10％。
无效基本症状无明显改善，血糖下降未达到上述标准。
2、结果2.1一般情况表1 试食前一般资料比较
影响预后的主要因素(混杂因子)，两组基本均衡，具有可比性。
2.2功效观察2.2.1临床观察表2 试食前后临床症状的变化
观察组的改善率(比例)高于对照组表3 临床症状积分统计
#自身前后比较，每组都有显著差别，组间比较t＝4.70，p＜0.01。两组临床症状积分前后差值比较，有极显著差别，提示受试食品可以改善临床症状。
2.2.2空腹血糖表4 降空腹血糖功效比较
*组间比较，u＝2.08，p＜0.05，两组的总有效率之间有显著差别，提示受试食品可以降低空腹血糖。
表5 试食前后空腹血糖变化(mmo/L，x±SD)
#自身前后比较，*组间比较，t＝2.47，p＜0.05。降低绝对值的比较，两组之间有显著差别，提示受试食品可以降空腹血糖。
2.2.3餐后血糖表6 试食前后餐后2h血糖变化(mmol/L，x±SD)
#自身前后餐后2h血糖比较对照组t＝1.33，p＞0.05；观察组t＝3.55，p＜0.01。*试食后的餐后2h血糖组间比较t＝2.08，p＜0.05。提示受试样品可以降餐后2h血糖。
2.2.4尿糖表7 试食前后尿糖变化(g/L，x±SD)
#自身前后比较，*组间比较，t＝2.08，p＜0.05，试食前后尿糖差值的比较，两组之间有显著差别，提示受试食品可以降尿糖。
2.2.5血清胰岛素水平表8 试食前后血清胰岛素(INS)变化(mU/L，x±SD)
#自身前后比较空腹t＝1.39，p＞0.05；餐后t＝1.96，p＞0.05。*组间比较餐后t＝1.84，p＞0.05，试食前后自身血清胰岛素差值的比较，两组之间餐后的比较均无明显差别，提示受试食品对胰岛素的变化无影响。
2.2.6血脂表9 试食前后血胆固醇(TC)及甘油三酯(TG)的变化(mmol/L，x±SD)
#胆固醇自身前后比较对照组t＝0.70，P＞0.05；观察组t＝0.38，P＞0.05。*组间比较t＝1.21，p＞0.05。
#甘油三酯自身前后比较对照组t＝0.53，P＞0.05；观察组t＝0.24，P＞0.05。*组间比较t＝0.24，P＞0.05。提示受试食品对胆固醇及甘油三酯的变化无显著影响。
2.3安全观察指标
表10 试食前后血象变化(x±SD)
试食前后的红细胞、白细胞、血红蛋白都在正常范围，未观察到受试食品对上述血象有显著影响。
表11 试食前后肝、肾功能变化(x±SD)
试食前后肝、肾功能指标均在正常范围，未观察到受试样品对人体的不良影响。
3、小结受试食品样品“本发明的复方组合物”对64例受试者的观察结果提示，可以降空腹血糖、餐后2小时血糖和尿糖，可以改善相关的主要临床症状，未观察到对人体的不良影响。
权利要求
1.一种用于预防和治疗糖尿病的复方组合物，它是由活性组分和/或药学上可接受的载体组成，其特征在于所述每1000g复方组合物包括作为活性组分的150g～200g南瓜戊糖、35g～50g常规方法制备的枸杞提取物和17.5g～25g常规方法制备的茯苓提取物。
2.一种制备权利要求1的用于预防和治疗糖尿病的复方组合物的方法，其特征在于该方法包括以下步骤i)制备含有南瓜戊糖的南瓜提取液，1)选料，选取瓜重≥1.5公斤的南瓜；2)南瓜水浸液的制备，将选取的南瓜去蒂、瓤、籽，切块后粉碎，放入化料锅中，按1∶5的比例加入蒸馏水，搅拌均匀，保温50℃，搅拌2小时后，静置10小时，得到南瓜水浸液；3)南瓜浓缩液的制备，步骤2)中制备的南瓜水浸液进行第一次过滤得到南瓜滤液，所得滤液进入蒸馏罐，按3∶1的比例加热浓缩，100℃保温，时间3小时，得到南瓜浓缩液；4)南瓜提取液的制备，通过步骤3)制备的南瓜浓缩液，冷却至常温，进入醇沉罐中，按1∶3的比例加入食用酒精，15～20℃，时间10小时，进行第二次过滤；滤液进入酒精回收塔回收酒精，不溶物进入化料锅按1∶3的比例加入蒸馏水，加热80℃搅拌至完全溶解，然后冷却至50℃，然后进行分子筛处理，得到的筛液进入蒸馏罐，按1∶1的比例浓缩，得到南瓜提取液；ii)制备枸杞提取物；iii)制备茯苓提取物；iv)混合，按60∶2∶1的重量比混合i)的南瓜提取液、ii)的枸杞提取物和iii)的茯苓提取物。
3.如权利要求2所述的方法，其特征在于在所述i)的选料步骤中，选取的南瓜的储存期在3个月以下。
全文摘要
本发明涉及预防和治疗糖尿病的保健品领域。本发明提供了一种用于预防和治疗糖尿病的复方组合物，它是由活性组分和/或药学上可接受的载体组成，其中所述每1000g复方组合物含有作为活性组分的150g～250g南瓜戊糖、35g～50g常规方法制备的枸杞提取物和17.5g～25g常规方法制备的茯苓提取物。本发明还提供了一种用于制备所述用于预防和治疗糖尿病的复方组合物的方法，该方法i)制备含有南瓜戊糖的南瓜提取液；ii)制备枸杞提取物；iii)制备茯苓提取物；iv)混合。通过本发明的方法制备的南瓜提取液中南瓜戊糖的含量达到了20％或更高，克服了通过现有技术的方法制备的南瓜提取液中南瓜戊糖含量低的问题。
文档编号A61P3/00GK1751717SQ20041007807
公开日2006年3月29日 申请日期2004年9月20日 优先权日2004年9月20日
发明者张振涛 申请人:澳琪生物工程(中山)发展有限公司
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