黑乳海参中具有抗肿瘤作用的总皂苷的制作方法
专利名称：黑乳海参中具有抗肿瘤作用的总皂苷的制作方法
技术领域：
本发明涉及医药技术领域，是一种以黑乳海参为原料提取的总皂苷类化合物， 含有该提取物的制备方法和用途。
背景技术：
黑乳海参(7%efe"oto J)，又名"凤梨参"，为海洋棘皮动物门海参纲
刺参科动物，其体形很大，，一般为700mm，宽约100mm，高约80mm，广泛分 布于我国西沙群岛和台湾南端，具有补肝肾，益精，养血的功效。
皂苷是黑乳海参的主要次生代谢产物之一，是其化学防御的主要物质基础，
具有抗真菌，抗凝血、免疫调节，细胞毒和抗病毒等各种生物活性。在体外细胞 毒活性筛选中，发现黑乳海参的乙醇提取物具有强烈诱导稻瘟霉(i^"/c"/^^ 0^加e)菌丝体变形，最小变形浓度MMDC-8ng/ml。
目前，关于黑乳海参的报道有巫军、易杨华等，NobilisideA C, Three New Triterpene Glycosides from Sea Cucumber //"o/o^wr/" "ofo7is Selenka，研究了黑乳 海参体内的皂苷类化合物，通过从黑乳海参体内提取得到总皂苷，应用多种色谱 扭术对其进行分离纯化，根据化合物的理化性质和波谱数据鉴定其结构，结果分 离得到了 3个三萜皂苷类化合物，并将该化合物命名为Nobiliside A， B和C。 该文献仅仅阐述了从黑乳海参体内的皂苷类化合物中分离纯化得到3个新的化 合物，并对该化合物进行结构的鉴定，没有详细的提取物制备工艺；王远红，吕 志华等，梅花参中多糖提取工艺及含量测定的研究，中国海洋大学学报，2005
3年第6期，公开了 "采用正交设计L9(34),研究梅花参(Thelenota ananas)中多糖 的提取工艺，探讨并建立了测定海参多糖含量的方法"。结果表明最佳提取条 件为lg样品加40mL3XKOH溶液，40 45。C超声2h;且提取温度为首要的影 响因素；产物经二次乙醇纯化的结果较好，粗多糖得率20.25%。多糖经单糖组 成分析，岩藻糖含量达到70%以上。测得梅花参中总糖含量8.79%;糖醛酸含 量0.95%。
现有的文献主要是海参中多糖的提取工艺及含量测定的研究，关于总皂苷制 备方法的研究很少。
发明内容
本发明的技术方案是提供一种黑乳海参总皂苷，本发明的另一技术方案是提 供了该提取物的制备方法和用途。
黑乳海参总皂苷是由下述方法提取原料黑乳海参，洗净，切碎，乙醇提取， 提取液浓缩，通过大孔吸附树脂，依次用水和乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，回收溶 剂至干，即得。
本发明还提供了该黑乳海参总皂苷的制备方法，它包括如下步骤
a、 干燥黑乳海参，加入85%~95%乙醇提取，提取液浓縮，提取液浓縮，得 流浸膏；
b、 将流浸膏溶于水中，通过大孔吸附树脂，依次用水和50%乙醇洗脱，收 集乙醇洗脱液，回收溶剂至干，即得。
本发明还提供了一种药物组合物，它是含有有效量的黑乳海参总皂苷为原 料，加入药学上可接受的辅料或辅料性成分制备而成的制剂。
其中，所述的制剂是口服制剂、注射剂。黑乳海参总皂苷或黑乳海参总皂苷加上药用辅料组成的医学上可接受的各类制剂。如片剂、胶囊、颗粒、注射剂等。 本发明所用的辅料为制药工程中常用的辅料如固体制剂所用的辅料:糊精、淀粉、 淀粉衍生物、羧甲基纤维素、蔗糖、硫酸钙、硬脂酸镁、乳糖、微精纤维素、葡 萄糖、山梨醇、甘露醇等。液体制剂所用的辅料如水、乙醇、甘油、丙二醇、 聚乙二醇等。
本发明提供了该药物组合物在制备抗肿瘤药物中的用途
本发明黑乳海参总皂苷的生产工艺中，无需对产品进行脱脂，采用树脂吸附 除杂，在生产工程中的处理量大，且能够经过活化重复使用，节约了成本，所涉 及的有机溶剂只有乙醇，减少了有机溶剂对操作人员和生产管道的损害。本发明 黑乳海参总皂苷与其它方式制备所得的提取物相比，成本低、药效显著，可控性 强，质量稳定。
具体实施方式
实施例1
将黑乳海参10公斤克洗净，切碎，分别用5倍量(重量)的95%、 85%、 85%乙醇依次浸泡，每次浸泡7天，合并乙醇浸出液，减压回收乙醇，得流浸膏。 将流浸膏溶于3倍量水中，过滤，滤液通过DA201-B大孔树脂柱，依次用水和 50%乙醇洗脱，收集50%乙醇洗脱液，减压回收乙醇至干，得总皂苷55克。 *施例2
取黑乳海参总皂苷20g，用适量注射用水分散，加入辅料适量，混匀，制成 颗粒，干燥。
按实施例所得的颗粒剂，按所需剂量分装于空胶壳中，即得胶囊剂。 按实施例所得的颗粒剂，直接压片，薄膜包衣，即得片剂。用于治疗肿瘤疾病。 实施例3
将黑乳海参总皂苷适量加注射用水分散，喷雾干燥或真空干燥，得黑乳海参 总苷干粉。取聚乙二醇400，加黑乳海参总皂苷干粉，边加边搅拌至匀，采用压 制法，制成软胶囊。用于治疗肿瘤疾病。 实施例4
取黑乳海参总皂苷400mg，加注射用水适量溶解。加甘露醇400mg，按照常 规冻干工艺冻干，即得黑乳海参总皂苷冻干粉。用于治疗肿瘤疾病。
权利要求
1、一种从黑乳海参中提取的皂苷类化合物。
2、 根据权利要求书1所述的黑乳海参总皂苷，其特征在于黑乳海参来源于刺 参科动物黑乳海参去内脏的全体。
3、 根据权利要求1或2所述的黑乳海参总皂苷，.其特征在于它是由下述方法 提取取干燥黑乳海参去内脏的全体，用85%~95%乙醇提取，提取液浓 縮，得流浸膏，将流浸膏溶于水中，通过大孔吸附树脂，依次用水和50%乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，回收溶剂至干，即得。
4、 一种制备权利要求1所述的黑乳海参提取物的方法，它包括如下步骤a、 称取黑乳海参去内脏的全体，加入85%~95%乙醇提取，提取液浓缩， 得浓縮液；b、 通过大孔吸附树脂，依次用水和50%乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，回收 溶剂至干，即得。
5、 根据权利要求4所述的制备黑乳海参提取物的方法，其特征在于步骤b所述的乙醇洗脱是用50%的乙醇洗脱。
6、 一种药物组合物，它是含有有效量的权利要求1 4任一项所述的黑乳海参总 皂苷为'原料，加入药学上可以接受的辅料或辅料性成分制备而成的制剂。
7、 根据权利要求7所述的药物组合物，其特征在于所述的制剂是口服制剂、 注射剂。
8、 权利要求7所述的药物组合物在制备抗肿瘤药物中的用途。
全文摘要
本发明涉及医药技术领域，具体为一种从黑乳海参中提取的黑乳海参总皂苷类化合物。本发明还提供了黑乳海参总皂苷的制备方法和用途。本发明具有黑乳海参提取物成本低、可控性强，质量稳定。
文档编号A61K35/56GK101653459SQ20091015271
公开日2010年2月24日 申请日期2009年9月15日 优先权日2009年9月15日
发明者丁萍月, 军 傅, 军 巫, 张佳佳, 朱可奇, 王忠华 申请人:军 傅
技术领域：
本发明涉及医药技术领域，是一种以黑乳海参为原料提取的总皂苷类化合物， 含有该提取物的制备方法和用途。
背景技术：
黑乳海参(7%efe"oto J)，又名"凤梨参"，为海洋棘皮动物门海参纲
刺参科动物，其体形很大，，一般为700mm，宽约100mm，高约80mm，广泛分 布于我国西沙群岛和台湾南端，具有补肝肾，益精，养血的功效。
皂苷是黑乳海参的主要次生代谢产物之一，是其化学防御的主要物质基础，
具有抗真菌，抗凝血、免疫调节，细胞毒和抗病毒等各种生物活性。在体外细胞 毒活性筛选中，发现黑乳海参的乙醇提取物具有强烈诱导稻瘟霉(i^"/c"/^^ 0^加e)菌丝体变形，最小变形浓度MMDC-8ng/ml。
目前，关于黑乳海参的报道有巫军、易杨华等，NobilisideA C, Three New Triterpene Glycosides from Sea Cucumber //"o/o^wr/" "ofo7is Selenka，研究了黑乳 海参体内的皂苷类化合物，通过从黑乳海参体内提取得到总皂苷，应用多种色谱 扭术对其进行分离纯化，根据化合物的理化性质和波谱数据鉴定其结构，结果分 离得到了 3个三萜皂苷类化合物，并将该化合物命名为Nobiliside A， B和C。 该文献仅仅阐述了从黑乳海参体内的皂苷类化合物中分离纯化得到3个新的化 合物，并对该化合物进行结构的鉴定，没有详细的提取物制备工艺；王远红，吕 志华等，梅花参中多糖提取工艺及含量测定的研究，中国海洋大学学报，2005
3年第6期，公开了 "采用正交设计L9(34),研究梅花参(Thelenota ananas)中多糖 的提取工艺，探讨并建立了测定海参多糖含量的方法"。结果表明最佳提取条 件为lg样品加40mL3XKOH溶液，40 45。C超声2h;且提取温度为首要的影 响因素；产物经二次乙醇纯化的结果较好，粗多糖得率20.25%。多糖经单糖组 成分析，岩藻糖含量达到70%以上。测得梅花参中总糖含量8.79%;糖醛酸含 量0.95%。
现有的文献主要是海参中多糖的提取工艺及含量测定的研究，关于总皂苷制 备方法的研究很少。
发明内容
本发明的技术方案是提供一种黑乳海参总皂苷，本发明的另一技术方案是提 供了该提取物的制备方法和用途。
黑乳海参总皂苷是由下述方法提取原料黑乳海参，洗净，切碎，乙醇提取， 提取液浓缩，通过大孔吸附树脂，依次用水和乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，回收溶 剂至干，即得。
本发明还提供了该黑乳海参总皂苷的制备方法，它包括如下步骤
a、 干燥黑乳海参，加入85%~95%乙醇提取，提取液浓縮，提取液浓縮，得 流浸膏；
b、 将流浸膏溶于水中，通过大孔吸附树脂，依次用水和50%乙醇洗脱，收 集乙醇洗脱液，回收溶剂至干，即得。
本发明还提供了一种药物组合物，它是含有有效量的黑乳海参总皂苷为原 料，加入药学上可接受的辅料或辅料性成分制备而成的制剂。
其中，所述的制剂是口服制剂、注射剂。黑乳海参总皂苷或黑乳海参总皂苷加上药用辅料组成的医学上可接受的各类制剂。如片剂、胶囊、颗粒、注射剂等。 本发明所用的辅料为制药工程中常用的辅料如固体制剂所用的辅料:糊精、淀粉、 淀粉衍生物、羧甲基纤维素、蔗糖、硫酸钙、硬脂酸镁、乳糖、微精纤维素、葡 萄糖、山梨醇、甘露醇等。液体制剂所用的辅料如水、乙醇、甘油、丙二醇、 聚乙二醇等。
本发明提供了该药物组合物在制备抗肿瘤药物中的用途
本发明黑乳海参总皂苷的生产工艺中，无需对产品进行脱脂，采用树脂吸附 除杂，在生产工程中的处理量大，且能够经过活化重复使用，节约了成本，所涉 及的有机溶剂只有乙醇，减少了有机溶剂对操作人员和生产管道的损害。本发明 黑乳海参总皂苷与其它方式制备所得的提取物相比，成本低、药效显著，可控性 强，质量稳定。
具体实施方式
实施例1
将黑乳海参10公斤克洗净，切碎，分别用5倍量(重量)的95%、 85%、 85%乙醇依次浸泡，每次浸泡7天，合并乙醇浸出液，减压回收乙醇，得流浸膏。 将流浸膏溶于3倍量水中，过滤，滤液通过DA201-B大孔树脂柱，依次用水和 50%乙醇洗脱，收集50%乙醇洗脱液，减压回收乙醇至干，得总皂苷55克。 *施例2
取黑乳海参总皂苷20g，用适量注射用水分散，加入辅料适量，混匀，制成 颗粒，干燥。
按实施例所得的颗粒剂，按所需剂量分装于空胶壳中，即得胶囊剂。 按实施例所得的颗粒剂，直接压片，薄膜包衣，即得片剂。用于治疗肿瘤疾病。 实施例3
将黑乳海参总皂苷适量加注射用水分散，喷雾干燥或真空干燥，得黑乳海参 总苷干粉。取聚乙二醇400，加黑乳海参总皂苷干粉，边加边搅拌至匀，采用压 制法，制成软胶囊。用于治疗肿瘤疾病。 实施例4
取黑乳海参总皂苷400mg，加注射用水适量溶解。加甘露醇400mg，按照常 规冻干工艺冻干，即得黑乳海参总皂苷冻干粉。用于治疗肿瘤疾病。
权利要求
1、一种从黑乳海参中提取的皂苷类化合物。
2、 根据权利要求书1所述的黑乳海参总皂苷，其特征在于黑乳海参来源于刺 参科动物黑乳海参去内脏的全体。
3、 根据权利要求1或2所述的黑乳海参总皂苷，.其特征在于它是由下述方法 提取取干燥黑乳海参去内脏的全体，用85%~95%乙醇提取，提取液浓 縮，得流浸膏，将流浸膏溶于水中，通过大孔吸附树脂，依次用水和50%乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，回收溶剂至干，即得。
4、 一种制备权利要求1所述的黑乳海参提取物的方法，它包括如下步骤a、 称取黑乳海参去内脏的全体，加入85%~95%乙醇提取，提取液浓缩， 得浓縮液；b、 通过大孔吸附树脂，依次用水和50%乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，回收 溶剂至干，即得。
5、 根据权利要求4所述的制备黑乳海参提取物的方法，其特征在于步骤b所述的乙醇洗脱是用50%的乙醇洗脱。
6、 一种药物组合物，它是含有有效量的权利要求1 4任一项所述的黑乳海参总 皂苷为'原料，加入药学上可以接受的辅料或辅料性成分制备而成的制剂。
7、 根据权利要求7所述的药物组合物，其特征在于所述的制剂是口服制剂、 注射剂。
8、 权利要求7所述的药物组合物在制备抗肿瘤药物中的用途。
全文摘要
本发明涉及医药技术领域，具体为一种从黑乳海参中提取的黑乳海参总皂苷类化合物。本发明还提供了黑乳海参总皂苷的制备方法和用途。本发明具有黑乳海参提取物成本低、可控性强，质量稳定。
文档编号A61K35/56GK101653459SQ20091015271
公开日2010年2月24日 申请日期2009年9月15日 优先权日2009年9月15日
发明者丁萍月, 军 傅, 军 巫, 张佳佳, 朱可奇, 王忠华 申请人:军 傅
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