一种阴道用酸性缓冲凝胶制剂及其制备方法和应用的制作方法

专利名称：：一种阴道用酸性缓冲凝胶制剂及其制备方法和应用的制作方法
技术领域：
：本发明涉及阴道用凝胶制剂，具体涉及一种阴道用酸性缓冲凝胶制剂及其制备方法和应用。
背景技术：
：育龄期女性，阴道粘膜在雌激素作用下，周期性脱落糖原，正常菌群分解代谢这些糖原，生成乳酸等酸性成分，使得阴道腔道内环境呈酸性状态(pH3.54.5)。阴道这种酸性环境有利于乳杆菌等保持优势菌群的地位，同时能够抑制多种病原微生物的生长。而当阴道微生态菌群处于失调状态时，某些内源性菌群或条件致病性微生物以及其它厌氧性菌群的显著增加，当某一类菌群(或滴虫、支原体)增加到占优势地位时，就出现了阴道炎的临床症状。因此生理性酸性被认为是阴道的一个自我保护机制吴燕菁，王丽丽，阴道pH值监测的临床应用，国外医学计划生育分册，2003年22巻第3期148页。为此，维持正常生理性酸性对预防和治疗阴道细菌性阴道炎是非常有益的一种措施，可以大大减少抗生素的使用几率，减少耐药性的产生。直接使用乳酸进行阴道pH调节存在诸多缺陷。主要存在以下问题1)乳酸是小分子有机酸，完全水溶性，没有缓冲能力，pH过低，可能有剌激性。2)由于正常阴道内腺体分泌的体液很快稀释凝胶，流出体外，一天需要1到2次以上用药方才有效。但是使用其他酸剂同样存在类似的障碍。具有多羧酸基团的交联聚丙烯酸树脂具有生物粘膜粘附性能，同时还具有一定的pH缓冲容量，已经是制药领域常用的药用辅料，非常安全。目前临床上实际使用的是其钠盐，比如最常用的凝胶材料卡波姆，在其成钠盐时才具有良好的黏度；溶胀而不溶解的聚卡波非(polycarbophil)是用其钙盐为通便剂。用其酸型作为阴道凝胶则具有酸性的pH缓冲容量，可以用作中和碱性物质，维持腔道环境酸性的作用。正如欧洲专利EP1764100A公开的以无水固体状态的交联聚丙烯酸与小分子固体有机酸制备成栓剂，用作阴道pH酸性调节制剂，具有较长的持续作用时间。可是栓剂的使用还是非常不便，通常需要用手指推送；同时固体制剂与敏感的粘膜接触，总是有不适感。美国专利申请号09748753公开的聚卡波非为单一功能成分制备的凝胶，具有持久的阴道pH酸性维持作用。中国专利申请00805909.8采用交联聚丙烯酸配合角叉菜聚糖和琼脂糖制备成阴道凝胶药物载体，可以改变小分子药物从凝胶中释放行为，达到快速释放与缓释相结合的目的。这至少利用该类型材料的生物粘附功能，未发挥其酸性缓冲能力。满足具备长效阴道pH酸性维持作用的凝胶制剂，最终使用的成品，不可能靠单一的组份获得。最适合阴道环境使用水性凝胶组合物，具有使用方便，易清洗等特点。但每一个处方的配制各不相同。比如，阴道凝胶如果不是最终灭菌的无菌制剂，则必须在配方中包括防腐剂。但防腐剂对阴道粘膜的剌激性以及对正常有益菌比如乳杆菌的影响与安全性和有效性密切相关。另外，凝胶具有一定粘稠度，对于需要控制pH值凝胶产品，通常需要在生产线上对配料罐内的混合物料进行pH值调节，使用氢氧化钠溶液调高，盐酸溶液调低，少量酸碱调节剂难以混合均匀，又要现场测试PH值，往往需要用氢氧化钠溶液和盐酸溶液反复来回多次调节才能获得设定的pH值，结果带入过量不需要的盐分和溶剂，使得不同批次的产品差异很大。
发明内容本发明所要解决的技术问题是提供一种用于调节女性阴道pH值的酸性缓冲凝胶制剂，由交联聚丙烯酸类高分子有机酸与尼泊金酯类的钠盐制备而成，具有生物粘附能力和酸碱缓冲容量。该制剂施用于阴道后，具有维持阴道内生理性酸性，l次使用可以维持不少于3天的效果；并且该制剂对有益菌乳杆菌(Lactobacillusacidophilus)没有杀灭作用，稀释1倍后也不影响乳酸杆菌的繁殖。通过维持阴道pH值在3-4.5的生理性状态，有利于正常的益生菌生产，保持阴道微生态的平衡，使得不耐酸性PH值的致病菌阴道加德纳菌(Gardnerellavaginalis)就不能生长了，从而达到治疗和预防细菌性阴道炎的功效。本发明还提供上述阴道用酸性缓冲凝胶制剂的制备方法，巧妙应用尼泊金酯类中的三种化合物，即羟苯甲酯、羟苯乙酯和羟苯丙酯三者固定比例的混合钠盐作为碱剂，革除了常规凝胶剂制备过程需要使用氢氧化钠等酸碱试剂进行pH调节的步骤，使得工业化生产的质量均一性得到保证；羟苯甲酯、羟苯乙酯和羟苯丙酯钠盐的比例不但实现了储存期的防腐效果，同时兼顾施用于阴道后对乳杆菌为代表的健康菌群不产生杀灭或强的抑制作用，帮助恢复健康菌群抵制条件致病菌能力。为了达到上述目的，本发明采用以下技术方案来实现—种阴道用酸性缓冲凝胶制剂，包括以聚卡波非和卡波姆为组份的酸剂，以羟苯甲酯、羟苯乙酯和羟苯丙酯三者的钠盐为组分的碱剂，以及以由水和甘油为组分的溶剂。以重量份计，所述酸齐U、碱齐U、水和甘油的比例如下碱剂23份酸齐[J3033份甘油120130份水840850份。以重量份计，所述酸剂各组分的比例如下聚卡波非polycarbophil2份卡波姆Carbomer934P1份。以重量份计，所述碱剂各组分的比例如下羟苯甲酯钠15份羟苯乙酯钠3份羟苯丙酯钠2份。所述制剂的pH值为3.3士0.2，且具备合适的缓冲当量，5g凝胶中加入10ml0.lmol/L的氢氧化钠溶液，稀释后的凝胶pH值仍不大于6.0。这是通过对酸碱组份的精确配伍获得的最优技术方案，使得产品天然具有精确设计的PH值。所述制剂施用于人体阴道穹窿部位，具有维持腔道内pH值小于4.5超过76小时4的性能。所述制剂对乳酸杆菌(Lactobacillusacidophilus)影响小，用生理盐水稀释l倍后即完全没有抑制作用。这是通过对三种构成碱剂的羟苯甲酯、乙酯和丙酯的钠盐比例进行优选获得的，在该优选组成比例和使用比例范围内，产品凝胶具有足够的防腐性能，但施用部位后对乳杆菌的影响小，在体液的稀释一倍左右即不影响乳杆菌的生长。这对帮助恢复阴道健康菌群的自我维持作用是重要的有益性质。所述阴道用酸性缓冲凝胶制剂在维持腔道内pH时的应用。所述阴道用酸性缓冲凝胶制剂的制备方法，首先将甘油与水混合成为溶剂，加入酸剂，静置6-12小时，搅拌使溶胀后的酸剂溶解，最后加入碱剂，搅拌使溶解，脱气，即得该酸性缓冲凝胶制剂。其中，所述酸剂的配制如下聚卡波非为符合美国药典USP31-NF26Page3021关于polycarbophil的质量指标的市售产品，卡波姆为符合欧洲药典EP6.0pagel416关于carbomers的质量规定，典型的商品是南京威尔化工有限公司的产品卡波姆，型号为934p。分别称取上述两种市售产品，按重量比，2份聚卡波非与1份卡波姆934p混合均匀，作为酸剂备用。其中，所述碱剂的配制如下羟苯甲酯钠为符合美国药典USP31-NF26Pagel176关于MethylparabenSodium质量指标的市售商品，羟苯乙酯钠为符合欧洲药典EP6.0pagel840关于Ethylparahydroxybenzoatesodium质量指标的市售商品，羟苯丙酯钠为符合美国药典USP31-NF26Page1217关于PropylparabenSodium质量指标的市售商品。分别称取三种上述商品，羟苯甲酯钠、羟苯乙酯钠、羟苯丙酯钠，按重量比15:3:2混合均匀，作为碱剂备用。上述所制得的阴道用酸性缓冲凝胶制剂采用单剂量一次性的铝管、塑料管、塑料瓶以及阴道推注器进行包装。其中，本发明所选用的甘油是符合中国药典2005年版二部68页关于甘油的质量标准的市售商品，水是符合药用水质量的自制纯净水。本发明的阴道用酸性缓冲凝胶制剂的各药理实验分别如下—、对乳酸杆菌的影响试验乳酸杆菌是阴道内正常菌丛中的优势菌，对维持阴道正常生理环境起重要作用，考察本品对嗜酸性乳酸杆菌(Lactobacillusacidophilus)影响。采用滤纸片琼脂扩散法考察本发明的酸性缓冲凝胶剂对培养的乳酸杆菌的生长影响。将MRS培养基与3X琼脂液按1:l(质量比)混合后，12rC，20分钟灭菌。在超净工作台中完成下列操作，每培养皿中加入20mL混合液为底层培养基，凝固后，精取0.3ml新鲜增殖的乳酸杆菌液，注满已铺好底层的培养皿中。取无菌并干燥的圆形滤纸片(直径为6mm)，每片滴加本发明不同浓度的酸性缓冲凝胶剂样品溶液(用生理盐水为稀释剂)10yl，然后用镊子将滤纸片轻轻放入培养皿中，对照品的操作类同于样品，每个培养皿放3个样品滤纸片，1个阳性对照片和l个阴性对照片，共5片。贴放好后，用无菌镊子轻压样片，使其紧贴于平皿表面，盖好平皿。然后将培养皿放入产生厌养混合气体的厌养罐中，置于37t:培养箱中厌养培养48小时后取出观察结果。用卡尺测量抑菌圈的直径，试验重复53次。试验结果表明，酸性缓冲凝胶剂在浓度100、200和400mg/ml时对培养的乳酸杆菌不产生抑菌圈，不稀释时可产生直径为(6.8±0.l)mm的抑菌圈，这是制剂中羟苯酯类的作用。凝胶用于阴道腔道部位后，在该部位的体液具有稀释作用，使得凝胶对正常菌群没有抑制作用。二、安全性试验本发明的阴道用酸性缓冲凝胶制剂，产品商品名称为"阴道pH缓冲凝胶"，注册商标为"芭菲"，经上海生物材料研究测试中心按GB/T16886.10-2005和GB/T16886.5-2003标准实施阴道剌激试验、致敏试验和细胞毒性试验三项安全评价试验，检测结果如下表1所示。结果表明产品无细胞毒性、无剌激性和无过敏性，非常安全。表1安全性试验检测结果汇总(09)沪生研发字第939号<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>三、临床试验5名诊断为细菌性阴道炎，年龄2540岁女性，妇科检查中其阴道pH值^4.7;月经干净后第3天的患者，用妇科棉签取阴道穹窿分泌物，测量pH值，测试用pH试纸为德国Macherey-Nagel公司生产的Pehanon品牌的精密pH试纸，作为基础pH值；用5g规格的一次性使用的长尖嘴软膏管包装的本发明的酸性缓冲凝胶制剂，将约3.2g(有效挤出量)施用于阴道穹窿部位，同样方法测定用药后24、48、76小时的阴道pH值，结果如下表2所示。表2用药前阴道基础pH值5.2±0.3用药后24h阴道pH值3.8±0.2用药后48h阴道pH值3.8±0.2用药后76h阴道pH值4.2±0.2从以上各试验结果可以看出本发明的成品凝胶制剂对有益菌乳杆菌没有杀灭作用，稀释后也不影响乳杆菌的繁殖。由于本发明将速效和长效组合在一个配方中，迅速起效的同时又能维持持续作用，起始24小时后pH值接近正常值下限3.5，76小时后保持pH值小于4.5。并且由于本发明揭示的制备方法，其生产过程不需要用强酸或强碱调节pH值，无需频繁检测中间体的pH，因而制得的凝胶制剂的pH值准确地处于3.3±0.2，非常接近生理性阴道pH值下限。采用酸剂和碱剂的特定配比参数，不需要酸碱调节步骤，成品黏度适中，易于施用。具体实施例方式以下结合具体实施例进一步详细描述本发明的技术方案。实施例1配方1)碱剂(以重量份计)羟苯甲酯钠15份羟苯乙酯钠3份羟苯丙酯钠2份2)酸剂(以重量份计)聚卡波非(polycarbophil)2份卡波姆(Carbomer934P)1份3)酸性凝胶制剂碱齐[J2g酸剂30g甘油120g水840g制备方法先将甘油与水混合均匀，加入酸剂，静置12h，搅拌溶解，再加入碱剂，搅拌溶解，真空脱气，即得本发明的酸性凝胶，分装于5g规格的铝塑复核软膏管中。实施例2配方碱剂3g酸剂33g甘油130g水850g7其中酸剂、碱剂配方同实施例1。制备方法制备方法先将甘油与水混合均匀，加入酸剂，静置6h，搅拌溶解，再加入碱剂，搅拌溶解，真空脱气，即得本发明的酸性凝胶，分装于5g规格的铝塑复核软膏管中。。实施例3配方碱剂2g酸剂31g甘油125g水845g其中酸剂、碱剂配方同实施例1。制备方法同实施例l。实施例4配方碱剂3份酸剂32份甘油125份水845份其中酸剂、碱剂配方同实施例1。制备方法同实施例l。实施例5性能测定一是直接用pH计(型号)测定凝胶的pH值为酸度，二是量取5g凝胶，加入10ml0.lml/L氢氧化钠溶液，稀释均匀后用相同pH计测定pH值为缓冲能力。实施例14制备的酸性缓冲凝胶制剂的结果如下表3所示。表3样品酸度缓冲能力实施例13.315.81实施例23.225.57实施例33.355.83实施例43.305.62最后应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的精神和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围中。权利要求一种阴道用酸性缓冲凝胶制剂，其特征在于，包括以聚卡波非和卡波姆为组份的酸剂，以羟苯甲酯、羟苯乙酯和羟苯丙酯三者的钠盐为组分的碱剂，以及以水和甘油为组分的溶剂；以重量份计，所述酸剂、碱剂、水和甘油的比例如下碱剂2～3份酸剂30～33份甘油120～130份水840～850份。2.根据权利要求1所述的阴道用酸性缓冲凝胶制剂，其特征在于，以重量份计，所述酸剂各组分的比例如下聚卡波非polycarbophil2份卡波姆Carbomer934P1份。3.根据权利要求1所述的阴道用酸性缓冲凝胶制剂，其特征在于，以重量份计，所述碱剂各组分的比例如下羟苯甲酯钠15份羟苯乙酯钠3份羟苯丙酯钠2份。4.根据权利要求1所述的阴道用酸性缓冲凝胶制剂，其特征在于，所述制剂的pH值为3.3±0.2。5.根据权利要求1所述的阴道用酸性缓冲凝胶制剂，其特征在于，所述制剂施用于人体阴道穹窿部位。6.—种制备权利要求1所述的阴道用酸性缓冲凝胶制剂的方法，其特征在于，首先将甘油与水混合成为溶剂，加入酸剂，静置6-12小时，搅拌使溶胀后的酸剂溶解，最后加入碱剂，搅拌使溶解，脱气，即得该酸性缓冲凝胶制剂，其中该制备过程不需要调节中间体和产品的pH值。7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述酸剂是由重量比为2:l的聚卡波非与波姆934p混合均匀制备而成的。8.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述碱剂由重量比为15:3:2的羟苯甲酯钠、羟苯乙酯钠、羟苯丙酯钠混合均匀制备而成的。9.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所制得的阴道用酸性缓冲凝胶制剂采用单剂量一次性的铝管、塑料管、塑料瓶以及阴道推注器进行包装。10.根据权利要求1所述的阴道用酸性缓冲凝胶制剂在维持腔道内pH时的应用。全文摘要本发明公开了一种阴道用酸性缓冲凝胶制剂，以聚卡波非和卡波姆为酸剂，以羟苯甲酯、羟苯乙酯和羟苯丙酯三者的钠盐为碱剂，以水和甘油为溶剂，组成具有缓冲容量的pH缓冲体系。本发明还公开了该制剂的制备方法，制备过程中不需要用强酸或强碱调节pH值，即无需频繁检测中间体的pH，使制得的酸性凝胶制剂的pH值准确地处于3.3±0.2，非常接近生理性阴道pH值下限，1次使用可以维持不少于3天的效果。文档编号A61K31/78GK101773516SQ20091019939公开日2010年7月14日申请日期2009年11月26日优先权日2009年11月26日发明者傅丽君,单园园,方通,李若海,沈颖,潘俊芳,王安枝,王晖申请人:上海华拓医药科技发展股份有限公司