一种川红酚黄素有效部位及其制备方法
专利名称：一种川红酚黄素有效部位及其制备方法
技术领域：
本发明属于制药技术领域，具体涉及一种川红酚黄素有效部位及其制备方法。
背景技术：
红花的主要化学成分红花黄色素为黄酮类化合物的混合物，其中主要包括红花黄 色素A、红花黄色素B、羟基红花黄色素A、SafTlomin C, Safflomin A等。多种研究结果表 明红花黄色素具有扩张冠状动脉、耐缺氧、改善心肌血液供应；降低血压、扩张血管、改善器 官供血；抗凝血、抑制血栓形成；镇静、镇痛等心血管疾病的作用。川芎的主要活性成分为酚酸类成分，其中含阿魏酸，川芎酚，原儿茶酸，亚油酸等。 从川芎中提取的川芎总酚酸可以较明显地扩张冠脉，增加冠脉流量及心肌营养血流量，使 心肌供氧量增加。阿魏酸也能增加冠脉血流量，保护缺血心肌。阿魏酸钠是一种IXA2合成 酶抑制剂。由于该酶的活性受到抑制，由花生四烯酸转化为TXA2的量明显减少，从而抑制 血小板聚集。检索资料发现，有文献公开了红花或川芎分别提取分离纯化得各组分的有效部 位，也有文献公开了复方提取工艺研究，而复方提取直接得到川红酚黄素有效部位及其制 备工艺还未见报道，由于在治疗心血管疾病方面，红花中的黄色类成分和川芎中的酚酸类 成分的功能主治与药效响应相符合，故确定川芎、红花的有效部位为红花黄色素和川芎总 酚，其提取物命名为川红酚黄素，研究结果表明提取物中有效成分红花黄色素和川芎总酚 的总含量大于54%，符合中药有效部位的制备要求，研究结果表明，川红酚黄素有效部位制 备工艺稳定，符合规模化大生产的要求。
发明内容
本发明所述的川红酚黄素制备工艺以红花黄色素和川芎总酚的含量为考察指标 进行研究，研究结果显示经过提取、纯化后提取物中的红花黄色素和川芎总酚总含量大于 50%，且符合工业化生产的要求。本发明川红酚黄素有效部位的制备方法以红花黄色素和川芎总酚的转移率为指 标，考察提取加水量；以红花黄色素、川芎总酚的纯度和转移率为评价指标，确定大孔树脂 纯化方法；以红花黄色素和川芎总酚在浓缩过程中的损失率为考察指标，确定浓缩的方法 和温度，经过研究制备工艺如下取处方量的川芎和红花加10-15倍量水煎煮1-2小时，煎煮2-3次(也可以是川芎 加10-15倍量水煎煮1-2小时，滤过，滤液另存，药渣与红花加水煎煮二次，每次1-2小时， 合并三次煎液)，滤过，滤液减压浓缩(60°C )至0. 3-0. 6g生药材/ml，离心，上清液用大孔 吸附树脂纯化，先用水洗脱至洗脱液近无色，再用5-10 %乙醇洗脱至洗脱液近无色，最后用 40-60%乙醇洗脱有效成分，洗脱液减压浓缩喷雾干燥，收集喷干粉，即得。川红酚黄素中红花黄色素以羟基红花黄色素A(C17H30015)计含量不少于 50.0%，川芎总酚以阿魏酸(C17H30015)计含量不少于2.0%。
本发明川红酚黄素有效部位，可以作为药用提取物与其它药材提取物配伍制成复 方制剂，优选活血化瘀类药物，比如延胡索，乳香，郁金，葛根、益母草，当归，赤芍，桃仁，丹 参，牛膝，骨碎补，马钱子，水蛭，莪术，斑蝥，田七，茜草，蒲黄等本发明川红酚黄素有效部位，可以制备成药剂学上的各种不同的药物剂型。川红酚黄素含量测定方法1、红花黄色素的测定方法1. 1对照品溶液的制备精密称取羟基红花黄色素A对照品适量，加水制成每Iml中 含0.015mg的溶液，即得。1. 2样品测定方法吸取样品溶液一定量，置比色杯中，以水为空白，在401nm的波 长处测定吸收度，用外标法计算含量，即得。2、川芎总酚的测定方法2. 1对照品溶液的制备精密称取阿魏酸对照品适量，加甲醇制成每Iml中含 0. 006mg的溶液，即得。2. 2样品测定方法吸取样品溶液一定量，加于预先处理好的凝胶色谱分离柱 (Sephadex LH-20，内径1. 2cm，填充物高20cm，滴速8 12滴/分钟)上，用三氯甲烷-甲 醇(70 30)混合溶液洗脱，收集30ml洗脱液，置50°C水浴上蒸发至干，残渣加75%乙醇溶 解，转移至IOml棕色量瓶中，加75%乙醇稀释至刻度，摇勻，离心(1000转/分钟，5分钟)， 在320nm波长处测定吸光度，用外标法计算含量，即得。具体实施例一红花IOOg 川芎 200g取处方量的川芎和红花加12倍量水煎煮1-2小时，煎煮2-3次，滤过，滤液减压浓 缩(60°C )至0. 3-0. 6g生药材/ml，离心，上清液用大孔吸附树脂纯化，先用水洗脱至洗脱 液近无色，再用5%乙醇洗脱至洗脱液近无色，最后用50%乙醇洗脱有效成分，洗脱液减压 浓缩喷雾干燥，收集喷干粉，即得，含量测定结果川红酚黄素的总含量为56%，符合有效部 位的要求。具体实施例二 红花IOOg 川芎 200g取处方量的川芎加10倍量水煎煮2小时，滤过，滤液另存，药渣与红花加10倍量 水煎煮二次，每次1小时，合并三次煎液，滤过，滤液减压浓缩(60°c)至0. 5g生药材/ml， 离心，上清液用DlOl型大孔吸附树脂纯化，先用水洗脱至洗脱液近无色，再用5%乙醇洗脱 至洗脱液近无色，最后用60 %乙醇洗脱有效成分，洗脱液减压浓缩喷雾干燥，收集喷干粉， 即得，含量测定结果川红酚黄素的总含量为54%，符合有效部位的要求。具体实施例三红花200g 川芎 200g取处方量的川芎加12倍量水煎煮2小时，滤过，滤液另存，药渣与红花加12倍量 水煎煮二次，每次1小时，合并三次煎液，滤过，滤液减压浓缩(60°C)至0. 5g生药材/ml， 离心，上清液用AB-8型大孔吸附树脂纯化，先用水洗脱至洗脱液近无色，再用5%乙醇洗脱 至洗脱液近无色，最后用50 %乙醇洗脱有效成分，洗脱液减压浓缩喷雾干燥，收集喷干粉， 即得，含量测定结果川红酚黄素的总含量为61. 5%，符合有效部位的要求。
具体实施例四红花200g 川芎 IOOg取处方量的川芎加10倍量水煎煮2小时，滤过，滤液另存，药渣与红花加12倍量 水煎煮二次，每次1小时，合并三次煎液，滤过，滤液减压浓缩(60°C )至0.4g生药材/ml， 离心，上清液用AB-8型大孔吸附树脂纯化，先用水洗脱至洗脱液近无色，再用5%乙醇洗脱 至洗脱液近无色，最后用50 %乙醇洗脱有效成分，洗脱液减压浓缩喷雾干燥，收集喷干粉， 即得，含量测定结果川红酚黄素的总含量为52. 5%，符合有效部位的要求。药效学实验实验材料1.实验动物=Wistar种大鼠32只，雄性，体重240 270g。2.实验药物川红酚黄素(按照实施例二制备)，川芎总酚(按照实施例二中的方 法制备，去掉红花)红花黄色素(按照实施例二制备，去掉川芎)，0. 9%氯化钠注射液。实验方法动物随机分为4组模型组(生理盐水)，川红酚黄素、川芎总酚、红花黄色素各 0. 05g/kg，药物以生理盐水稀释至所需浓度，给药体积均为lml/kg，给药途径为口服每天一 次，连续14天进行试验。心肌梗塞动物模型按照常规造模方式得到。实验结果各有效部位对心肌梗塞程度的影响
权利要求
1.一种川红酚黄素有效部位及其制备方法，其特征在于川红酚黄素有效部位是通 过川芎和红花复方提取直接得到，其中川红酚黄素中川芎总酚与红花黄色素的重量比为 0. 2-1. 0 10。
2.根据权利要求1所述川红酚黄素有效部位，其特征在于川红酚黄素中红花黄色素以 羟基红花黄色素A(C17H30015)计含量不少于50. 0%，川弯总酚以阿魏酸(C17H30015)计含 量不少于2.0%。
3.根据权利要求1所述川红酚黄素有效部位，其特征在于制备方法如下取处方量的 川芎和红花加10-15倍量水煎煮1-2小时，煎煮2-3次(也可以是川芎加10-15倍量水煎 煮1-2小时，滤过，滤液另存，药渣与红花加水煎煮二次，每次1-2小时，合并三次煎液)，滤 过，滤液减压浓缩(60°C)至0. 3-0. 6g生药材/ml，离心，上清液用大孔吸附树脂纯化，先用 水洗脱至洗脱液近无色，再用5-10%乙醇洗脱至洗脱液近无色，最后用40-60%乙醇洗脱 有效成分，洗脱液减压浓缩喷雾干燥，收集喷干粉，即得。
4.根据权利要求3中的红花黄色素与川芎总酚，其特征在于川芎总酚含量测定方法 为照2005年版一部《中国药典》中紫外-可见分光光度法，在320nm波长处测定吸光度， 以阿魏酸(C10H1004)计；红花黄色素含量测定方法为照2005年版一部《中国药典》中紫 外-可见分光光度法，在401nm波长处测定吸光度，以羟基红花黄色素A (C27H3tlO15)计。
5.根据权利要求1所述川红酚黄素有效部位，可以作为药用提取物与其它药材提取物 配伍制成复方制剂。
6.根据权利要求1中的川红酚黄素有效部位，其特征在于可以制备成药剂学上的各种 不同的药物剂型。
7.根据权利要求7所述含川红酚黄素的有效部位制成的制剂，其特征在于用于瘀血阻 滞所致的胸痹，症见胸闷、心前区刺痛；冠心病心绞痛见上述证候者的治疗。
全文摘要
本发明川红酚黄素有效部位及其制备方法，其中川红酚黄素有效部位是通过川芎和红花复方提取直接得到，其中川红酚黄素中川芎总酚与红花黄色素的重量比为0.2-1.0∶10。
文档编号A61P9/10GK102091113SQ20091020037
公开日2011年6月15日 申请日期2009年12月11日 优先权日2009年12月11日
发明者冯育林, 张文芳, 杨世林, 王跃生, 范玫玫 申请人:苏州世林医药技术发展有限公司
技术领域：
本发明属于制药技术领域，具体涉及一种川红酚黄素有效部位及其制备方法。
背景技术：
红花的主要化学成分红花黄色素为黄酮类化合物的混合物，其中主要包括红花黄 色素A、红花黄色素B、羟基红花黄色素A、SafTlomin C, Safflomin A等。多种研究结果表 明红花黄色素具有扩张冠状动脉、耐缺氧、改善心肌血液供应；降低血压、扩张血管、改善器 官供血；抗凝血、抑制血栓形成；镇静、镇痛等心血管疾病的作用。川芎的主要活性成分为酚酸类成分，其中含阿魏酸，川芎酚，原儿茶酸，亚油酸等。 从川芎中提取的川芎总酚酸可以较明显地扩张冠脉，增加冠脉流量及心肌营养血流量，使 心肌供氧量增加。阿魏酸也能增加冠脉血流量，保护缺血心肌。阿魏酸钠是一种IXA2合成 酶抑制剂。由于该酶的活性受到抑制，由花生四烯酸转化为TXA2的量明显减少，从而抑制 血小板聚集。检索资料发现，有文献公开了红花或川芎分别提取分离纯化得各组分的有效部 位，也有文献公开了复方提取工艺研究，而复方提取直接得到川红酚黄素有效部位及其制 备工艺还未见报道，由于在治疗心血管疾病方面，红花中的黄色类成分和川芎中的酚酸类 成分的功能主治与药效响应相符合，故确定川芎、红花的有效部位为红花黄色素和川芎总 酚，其提取物命名为川红酚黄素，研究结果表明提取物中有效成分红花黄色素和川芎总酚 的总含量大于54%，符合中药有效部位的制备要求，研究结果表明，川红酚黄素有效部位制 备工艺稳定，符合规模化大生产的要求。
发明内容
本发明所述的川红酚黄素制备工艺以红花黄色素和川芎总酚的含量为考察指标 进行研究，研究结果显示经过提取、纯化后提取物中的红花黄色素和川芎总酚总含量大于 50%，且符合工业化生产的要求。本发明川红酚黄素有效部位的制备方法以红花黄色素和川芎总酚的转移率为指 标，考察提取加水量；以红花黄色素、川芎总酚的纯度和转移率为评价指标，确定大孔树脂 纯化方法；以红花黄色素和川芎总酚在浓缩过程中的损失率为考察指标，确定浓缩的方法 和温度，经过研究制备工艺如下取处方量的川芎和红花加10-15倍量水煎煮1-2小时，煎煮2-3次(也可以是川芎 加10-15倍量水煎煮1-2小时，滤过，滤液另存，药渣与红花加水煎煮二次，每次1-2小时， 合并三次煎液)，滤过，滤液减压浓缩(60°C )至0. 3-0. 6g生药材/ml，离心，上清液用大孔 吸附树脂纯化，先用水洗脱至洗脱液近无色，再用5-10 %乙醇洗脱至洗脱液近无色，最后用 40-60%乙醇洗脱有效成分，洗脱液减压浓缩喷雾干燥，收集喷干粉，即得。川红酚黄素中红花黄色素以羟基红花黄色素A(C17H30015)计含量不少于 50.0%，川芎总酚以阿魏酸(C17H30015)计含量不少于2.0%。
本发明川红酚黄素有效部位，可以作为药用提取物与其它药材提取物配伍制成复 方制剂，优选活血化瘀类药物，比如延胡索，乳香，郁金，葛根、益母草，当归，赤芍，桃仁，丹 参，牛膝，骨碎补，马钱子，水蛭，莪术，斑蝥，田七，茜草，蒲黄等本发明川红酚黄素有效部位，可以制备成药剂学上的各种不同的药物剂型。川红酚黄素含量测定方法1、红花黄色素的测定方法1. 1对照品溶液的制备精密称取羟基红花黄色素A对照品适量，加水制成每Iml中 含0.015mg的溶液，即得。1. 2样品测定方法吸取样品溶液一定量，置比色杯中，以水为空白，在401nm的波 长处测定吸收度，用外标法计算含量，即得。2、川芎总酚的测定方法2. 1对照品溶液的制备精密称取阿魏酸对照品适量，加甲醇制成每Iml中含 0. 006mg的溶液，即得。2. 2样品测定方法吸取样品溶液一定量，加于预先处理好的凝胶色谱分离柱 (Sephadex LH-20，内径1. 2cm，填充物高20cm，滴速8 12滴/分钟)上，用三氯甲烷-甲 醇(70 30)混合溶液洗脱，收集30ml洗脱液，置50°C水浴上蒸发至干，残渣加75%乙醇溶 解，转移至IOml棕色量瓶中，加75%乙醇稀释至刻度，摇勻，离心(1000转/分钟，5分钟)， 在320nm波长处测定吸光度，用外标法计算含量，即得。具体实施例一红花IOOg 川芎 200g取处方量的川芎和红花加12倍量水煎煮1-2小时，煎煮2-3次，滤过，滤液减压浓 缩(60°C )至0. 3-0. 6g生药材/ml，离心，上清液用大孔吸附树脂纯化，先用水洗脱至洗脱 液近无色，再用5%乙醇洗脱至洗脱液近无色，最后用50%乙醇洗脱有效成分，洗脱液减压 浓缩喷雾干燥，收集喷干粉，即得，含量测定结果川红酚黄素的总含量为56%，符合有效部 位的要求。具体实施例二 红花IOOg 川芎 200g取处方量的川芎加10倍量水煎煮2小时，滤过，滤液另存，药渣与红花加10倍量 水煎煮二次，每次1小时，合并三次煎液，滤过，滤液减压浓缩(60°c)至0. 5g生药材/ml， 离心，上清液用DlOl型大孔吸附树脂纯化，先用水洗脱至洗脱液近无色，再用5%乙醇洗脱 至洗脱液近无色，最后用60 %乙醇洗脱有效成分，洗脱液减压浓缩喷雾干燥，收集喷干粉， 即得，含量测定结果川红酚黄素的总含量为54%，符合有效部位的要求。具体实施例三红花200g 川芎 200g取处方量的川芎加12倍量水煎煮2小时，滤过，滤液另存，药渣与红花加12倍量 水煎煮二次，每次1小时，合并三次煎液，滤过，滤液减压浓缩(60°C)至0. 5g生药材/ml， 离心，上清液用AB-8型大孔吸附树脂纯化，先用水洗脱至洗脱液近无色，再用5%乙醇洗脱 至洗脱液近无色，最后用50 %乙醇洗脱有效成分，洗脱液减压浓缩喷雾干燥，收集喷干粉， 即得，含量测定结果川红酚黄素的总含量为61. 5%，符合有效部位的要求。
具体实施例四红花200g 川芎 IOOg取处方量的川芎加10倍量水煎煮2小时，滤过，滤液另存，药渣与红花加12倍量 水煎煮二次，每次1小时，合并三次煎液，滤过，滤液减压浓缩(60°C )至0.4g生药材/ml， 离心，上清液用AB-8型大孔吸附树脂纯化，先用水洗脱至洗脱液近无色，再用5%乙醇洗脱 至洗脱液近无色，最后用50 %乙醇洗脱有效成分，洗脱液减压浓缩喷雾干燥，收集喷干粉， 即得，含量测定结果川红酚黄素的总含量为52. 5%，符合有效部位的要求。药效学实验实验材料1.实验动物=Wistar种大鼠32只，雄性，体重240 270g。2.实验药物川红酚黄素(按照实施例二制备)，川芎总酚(按照实施例二中的方 法制备，去掉红花)红花黄色素(按照实施例二制备，去掉川芎)，0. 9%氯化钠注射液。实验方法动物随机分为4组模型组(生理盐水)，川红酚黄素、川芎总酚、红花黄色素各 0. 05g/kg，药物以生理盐水稀释至所需浓度，给药体积均为lml/kg，给药途径为口服每天一 次，连续14天进行试验。心肌梗塞动物模型按照常规造模方式得到。实验结果各有效部位对心肌梗塞程度的影响
权利要求
1.一种川红酚黄素有效部位及其制备方法，其特征在于川红酚黄素有效部位是通 过川芎和红花复方提取直接得到，其中川红酚黄素中川芎总酚与红花黄色素的重量比为 0. 2-1. 0 10。
2.根据权利要求1所述川红酚黄素有效部位，其特征在于川红酚黄素中红花黄色素以 羟基红花黄色素A(C17H30015)计含量不少于50. 0%，川弯总酚以阿魏酸(C17H30015)计含 量不少于2.0%。
3.根据权利要求1所述川红酚黄素有效部位，其特征在于制备方法如下取处方量的 川芎和红花加10-15倍量水煎煮1-2小时，煎煮2-3次(也可以是川芎加10-15倍量水煎 煮1-2小时，滤过，滤液另存，药渣与红花加水煎煮二次，每次1-2小时，合并三次煎液)，滤 过，滤液减压浓缩(60°C)至0. 3-0. 6g生药材/ml，离心，上清液用大孔吸附树脂纯化，先用 水洗脱至洗脱液近无色，再用5-10%乙醇洗脱至洗脱液近无色，最后用40-60%乙醇洗脱 有效成分，洗脱液减压浓缩喷雾干燥，收集喷干粉，即得。
4.根据权利要求3中的红花黄色素与川芎总酚，其特征在于川芎总酚含量测定方法 为照2005年版一部《中国药典》中紫外-可见分光光度法，在320nm波长处测定吸光度， 以阿魏酸(C10H1004)计；红花黄色素含量测定方法为照2005年版一部《中国药典》中紫 外-可见分光光度法，在401nm波长处测定吸光度，以羟基红花黄色素A (C27H3tlO15)计。
5.根据权利要求1所述川红酚黄素有效部位，可以作为药用提取物与其它药材提取物 配伍制成复方制剂。
6.根据权利要求1中的川红酚黄素有效部位，其特征在于可以制备成药剂学上的各种 不同的药物剂型。
7.根据权利要求7所述含川红酚黄素的有效部位制成的制剂，其特征在于用于瘀血阻 滞所致的胸痹，症见胸闷、心前区刺痛；冠心病心绞痛见上述证候者的治疗。
全文摘要
本发明川红酚黄素有效部位及其制备方法，其中川红酚黄素有效部位是通过川芎和红花复方提取直接得到，其中川红酚黄素中川芎总酚与红花黄色素的重量比为0.2-1.0∶10。
文档编号A61P9/10GK102091113SQ20091020037
公开日2011年6月15日 申请日期2009年12月11日 优先权日2009年12月11日
发明者冯育林, 张文芳, 杨世林, 王跃生, 范玫玫 申请人:苏州世林医药技术发展有限公司
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