一种含三七的中药制剂及其制备方法

专利名称：：一种含三七的中药制剂及其制备方法
技术领域：
：本发明涉及一种含三七的中药制剂及其制备方法，更特别的涉及一种含三七药渣的中药制剂及其制备方法。
背景技术：
：三七为五加科植物三七Panaxnotoginseng(Burk.)F.H.Chen的根。《本草纲目》云"味微甘而苦，颇似人参之味"、"能治一切血病"；《本草新编》云"三七根，止血之神药也"；《本草纲目拾遗》云"三七补血第一"、"为中药之最珍贵者"；《玉楸药解》云"和营止血，通脉行瘀"、"凡产后、经期、跌打、痈肿，一切淤血皆破；凡吐衄、崩漏、刀伤、箭射，一切新血皆止"。三七具有散瘀止血，消肿定痛之功效。主治咯血，吐血，衄血，便血，崩漏，外伤出血，胸腹剌痛，跌仆肿痛。三七主要药理作用有①止血，三七有"止血神药"之称，散瘀血，止血而不留瘀，对出血兼有瘀滞者更为适宜。三七具有较强的止血作用，对不同动物，不同给药途径，不同制剂，均显示明显止血作用。②抗血栓，三七中含具有活血散瘀功效的活性成分三七皂苷，能抗血小板聚集，抗凝血酶和促进纤维蛋白溶解，从而抵抗血栓的形成。③促进造血，三七"祛瘀生新"，现代研究证实三七具有补血作用。经60C0-Y射线照射小鼠，PNS腹腔连续注射6天，对多能造血干细胞的增殖具有明显的促进作用，脾结节中，粒、红二系细胞有丝分裂活跃，脾脏重量增加。对环磷酰胺引起的小鼠白细胞减少，PNS也有促进恢复作用。在大鼠急性失血性贫血，三七注射液可显著促进红细胞、网织红细胞、血红蛋白的恢复。④对心血管系统的作用，三七中的三七总皂苷(PNS)具有降低心肌收縮力，减慢心率，扩张外周血管，降低外周阻力的作用。PNS能扩张冠脉，抑制心肌收縮力，抗脂质过氧化和提高耐缺氧能力来抗心肌缺血。PNS还具抗动脉粥样硬化作用。三七、三七总黄酮及三七绒根提取物能对抗脑垂体后叶素引起的家兔急性心肌缺血所致的T波升高。此外，三七抗脑缺血作用，除与扩张脑血管，增加局部血流量有关外，尚与延缓缺血组织ATP的分解，改善能量代谢，以及抑制脂质过氧化，提高脑组织中SOD活性，清除氧自由基等作用有关。而三七抗心律失常的作用与其含有活性成分PNS、三七二醇苷(PDS)和三七三醇苷(PTS)有关。⑤其他作用，包括抗炎、抗肿瘤、镇痛、镇静、延缓衰老、对免疫功能及代谢的影响等。活血化瘀系三七最为重要的药理作用之一，现代药理学研究表明三七不但具有良好的止血、活血化瘀双向药理作用，还具有明显的补血作用，能促进血液中红细胞、白细胞、血小板等各类血液细胞分裂生长，增加数目，并保持正常水平。人参皂苷能防止血液凝固、促进纤维蛋白溶解，降低红细胞的聚集性，增加血液的流动性，改善组织灌注。据研究，三七温浸液及水溶性成分三七素可表现促凝血作用。此外，三七中的钙离子和槲皮苷等亦是止血活性物质。中医认为三七是具有化淤作用的止血药，能止血而不留瘀，因此对出血症兼有瘀滞者尤为适宜。三七注射液能促使家兔和人的眼前房、眼结膜和玻璃体内瘀血的吸收。三七总皂苷(PNS)能抑制血小板聚集，降低血液黏度，其主要有效成分为三七中人参皂苷Rgl及其他原人参三醇型皂苷(PTS)，它们可能通过提高血小板cAMP含量、减少血栓素4的生成而抑制其聚集功能。三七总皂苷(PNS)对家兔、大白鼠实验性血栓形成均有明显抑制作用；静脉注射可以明显抑制凝血所致弥漫性血管内凝血、动物血小板数目的下降和纤维蛋白降解产物的增加。PNS还可以升高血浆蛋白C活性，而蛋白C是一种由肝脏合成的纤维素依赖性蛋白质，在人体内被激活后，具有抗凝活性和促纤溶活性，可明显降低冠心病患者的血小板黏附和聚集，亦可改善微循环，抗血栓形成。PTS可抑制ADP、花生四烯酸、血小板活化因子、凝血酶、胶原等诱导的血小板聚集，且呈量效关系，血小板CA"浓度也随三七皂苷剂量增加而显著减少。Ri和Rd能显著促进或改善去甲肾上腺素(NA)所致耳廓微循环障碍小鼠耳廓的微循环，也可延长血浆复钙时间。三七中人参皂苷R^可通过纤溶系统，促进血管内皮细胞释放NO而发生抗栓作用。另外，三七中的黄酮类也有活血功效。可见三七止血(促凝)和活血化瘀(抗凝)双向调节功效是其所含多种活性成分综合作用的结果。三七能促进各类血细胞分裂生长和增殖，因而具有显著的造血功能。三七总皂苷(PNS)能够促进人骨髓粒系、红系造血祖细胞的增殖，说明三七R^和Rt^是促进造血的有效单体。有报道三七的水提物能抑制大鼠红血球溶血的作用。以原人参三醇为苷元的皂苷具有溶血作用，而以原人参二醇为苷元的皂苷却对抗其他皂苷引起的溶血效应，故PNS对红细胞无溶血现象，也无血细胞粘集现象，具良好的安全性。由此可见，三七发挥药理药效在于其各种活性成分共同协同作用的充分发挥。复方血栓通制剂是由三七、丹参、玄参和黄芪四味中药制备而成的纯中药制剂，三七为方中君药。具有活血化瘀，扩张血管，增加血流量，改善血液循环和微循环，益气养阴的作用。复方血栓通制剂药效学研究表明①对实验性急性心肌缺血有明显的保护作用，特别是缺血的第8-10分钟尤为显著。②能縮小心肌梗塞的范围，减轻心肌缺血的程度。③降低急性心肌梗塞后犬血浆的乳酸含量及LDH、MDA含量，升高SOD含量，具有抗氧化作用。能增强实验性心肌缺血犬心脏收縮能力。⑤降低小鼠心肌耗氧量，改善心肌代谢，提高对缺氧的耐受，延长小鼠寿命。⑥降低实验动物的血黏度。另外，复方血栓通制剂可增加青蛙外周血管灌流量，改善大鼠肠系膜微循环；可抑制热板法和醋酸扭体法所致的小鼠疼痛反应，减轻蛋清所致大鼠足拓肿，使小鼠的耐缺氧能力增强。复方血栓通制剂发挥其活血化瘀，益气养阴的关键在于处方中含有三七，而三七发挥药理作用在于其含有三七皂苷、三七素、三七多糖、黄酮类、氨基酸等活性成分。有报道，含三七的中药制剂能扩张冠脉，增加冠脉血流量，三七总皂苷能增加心肌营养血流量，改善心肌微循环，明显降低心肌耗氧量；三七总皂苷还被证明是三七治疗缺血性心脏病的基础。推测三七中起主要作用的成分可能是G-Re和G-Rlv三七有扩张血管、降低血压作用。目前普遍认为三七总皂苷是钙通道阻滞剂。同时，三七中人参二醇组皂苷能扩张脑血管，降低脑血管阻力，增加脑血流量，改善脑血循环。复方血栓通制剂目前包括复方血栓通胶囊、复方血栓通软胶囊、复方血栓通颗粒、复方血栓通片、复方血栓通滴丸、复方血栓通合剂等。在公布授权的专利02121219.8和专利02103920.8中提到的药材提取工艺均为三七粉碎后，以乙醇浸渍，提取液浓縮成稠膏，稠膏烘干粉碎成细粉过筛；黄芪、丹参、玄参以乙醇回流提取，提取液浓縮成稠膏，稠膏喷雾干燥成细粉过筛；两种浸膏细粉按一定的投料量比例混合，加入聚乙二醇4000或6000制成滴丸，加入精制大豆油制成软胶囊。采用此方法提取三七后产生大量三七药渣，这些药渣均被废弃，得不到合理的使用，本发明试验证明，三七药渣中仍含大量的活性成分，如三七皂苷、三七素、三七多糖、黄酮类、氨基酸等。这些成分具有与复方血栓通制剂的功能主治一致的药理活性，因而制剂中使用三七药渣将对复方血栓通制剂的临床疗效产生协同作用。通过对《中国药典》及国家中成药制剂标准、卫生部部颁标准中使用含三七的中药制剂进行查询，未发现现有中药品种三七采用醇提取(或水提取)成三七浸膏、三七药渣干燥粉碎成细粉同时入药的工艺；通过专利及文献检索，未见有将三七醇提取(或水提取)后的三七药渣烘干，粉碎成细粉过筛后与浸膏一同入药的相关专利及文献报道。2005年版《中国药典》三七大部分制剂均采用三七生粉直接入药(如三七片、人参再造丸、冠心丹参胶囊等)，还有一些品种采用三七水煎煮后入药(如复方丹参滴丸、脂脉康胶囊)、三七醇提取后入药(如少林风湿跌打膏、红药贴膏、麝香祛痛气雾剂等)，血栓通注射液采用提纯的三七总皂苷入药。口服三七生粉，临床研究证实生三七粉能较好改善血液流变指标，使血浆纤维蛋白原降低，从而降低血浆粘滞度，红细胞聚集指数及血小板凝集，有利于预防心、脑血管疾病的发生。但由于口服生三七粉时，消化液破坏作用及胃肠道吸收不完全等多种因素，影响了药物的吸收利用，限制了三七药性的发挥，降低了临床疗效，从而影响制剂的治疗效果；三七水煎煮后入药或三七醇提取后入药，大大提高了三七的生物利用度，具有可迅速被人体吸收、吸收率高的特点，使三七各种活性成分协同作用充分发挥，从而提高三七的临床疗效。以三七生粉入药，活性成分需要先通过细胞壁进行透壁释放，而三七质地坚实，有"铜皮铁骨"之称，导致活性成分溶出有限。而三七提取23次，三七皂苷不能提取完全，提取后的三七药渣被废弃，其中含大量的活性成分，未能得到合理利用，造成了较大的资源浪费。
发明内容本发明的目的之一是提供一种含三七药渣的中药制剂及其制备方法。本发明的这个以及其他目的将通过下列详细描述和说明来进一步体现和阐述。本发明的含三七的中药制剂，由下列原料制得的活性成分和/或药学上可接受的附加剂组成三七200-500克黄芪50-160克丹参40-100克玄参60-160克三七药渣粉100-400克。进一步的，本发明的含三七的中药制剂，由下列原料制得的活性成分和/或药学上可接受的附加剂组成三七250克黄芪80克丹参50克玄参80克三七药渣粉150-200克剂型为胶囊，制成1000粒；用量为每次3粒，每天3次。可以选择的是，本发明的含三七的中药制剂，由下列原料制得的活性成分和/或药学上可接受的附加剂组成三七375克黄芪120克丹参75克玄参120克三七药渣粉225-300克剂型为片，制成1000片；用量为海次2片，每天3次。在本发明的含三七的中药制剂中，所述的药学上可接受的附加剂为淀粉、滑石粉或羧甲淀粉钠、硬脂酸镁。本发明的含三七的中药制剂的制备方法，是将三七粉碎，加50-90V/VX乙醇浸渍(或超声提取或加热回流或渗漉)二次，第一次3-6天，第二次1-3天，滤过，合并滤液，回收乙醇并浓縮至相对密度为1.051.30，药渣烘干，粉碎成细粉，过筛；其余黄芪等三味，加50-90V/VX乙醇加热回流二次，第一次2-5小时，第二次1-3小时，滤过，合并滤液，回收乙醇并浓縮至相对密度为1.051.30，与上述浓縮液、细粉及辅料适量混匀，干燥，制成胶囊剂或片剂。可以选择的是，本发明的含三七的中药制剂的制备方法，是将三七粉碎，加50V/V%乙醇浸渍二次，第一次5天，第二次2天，滤过，合并滤液，回收乙醇并浓縮至相对密度为1.151.20(30°C)，药渣烘干，粉碎成细粉，过筛；其余黄芪等三味，加50V/VX乙醇加热回流二次，第一次3小时，第二次2小时，滤过，合并滤液，回收乙醇并浓縮至相对密度为1.151.20(30°C)，与上述浓縮液、细粉及辅料适量混匀，干燥，制成胶囊剂或片剂。本发明三七粉碎醇提浸膏入药，保证了三七各活性成分的迅速吸收利用，而三七药渣干燥粉碎成细粉入药，在一定程度上增加了含三七的中药制剂中的活性成分，相关成分产生协同作用，提高了三七的生物利用度，同时也避免了资源的浪费，在当今倡导节约型社会经济中具有很大的社会意义和经济意义。本发明通过将三七提取，药渣干燥粉碎成细粉，过筛后与浸膏一同入药制备含三七药渣的复方血栓通制剂，通过三七药渣的有效成分检测、与复方血栓通胶囊功能主治有关的主要药效学试验、复方血栓通胶囊动物长期毒性试验及临床试验证实，制剂中加入三七药渣粉是安全有效的，提高了三七的有效利用，为提高三七的生物利用度提供了一种新的方法，也为三七药渣的再利用带来新的解决办法，该发明具有很好的临床疗效，解决患者的疾病，同时为企业更好的发展提供有力保障，为环境保护做出一定的贡献。本发明的产品具有活血化瘀，扩张血管，增加血流量，改善血液循环和微循环，益气养阴的作用。主要用于治疗血瘀兼气阴两虚证的视网膜静脉阻塞，症见视力下降或视觉异常，眼底瘀血征象，神疲乏力，咽干，口干等；以及用于血瘀兼气阴两虚的稳定性劳累型心绞痛，症见胸闷痛、心悸、心慌、气短乏力、心烦口干者。本发明的产品通过药理实验，加入三七药渣的复方血栓通胶囊，具有比不加三七药渣的复方血栓通胶囊縮短小白鼠凝血时间促进止血作用。具有比不加三七药渣的复方血栓通胶囊对家兔血块溶解强的作用。具有比不加三七药渣的复方血栓通胶囊降低血栓重量抗大白鼠血栓形成的作用。具有比不加三七药渣的复方血栓通胶囊增加大白鼠颈总动脉血流量的作用。加入三七药渣的复方血栓通胶囊，通过縮短凝血时间促进止血作用、增强血块的溶解、降低血栓形成及增加动脉血流量的共同作用，达到比不加三七药渣的复方血栓通胶囊更好活血化瘀作用。通过长期毒性试验表明，复方血栓通胶囊加入三七药渣后，大鼠连续给药90天试验后，各项指标正常，说明三七药渣的加入是安全的。通过临床试验证明，复方血栓通胶囊加入三七药渣后，临床效果好。以下通过具体实施例来进一步说明本发明，但实施例仅用于说明，并不能限制本发明范围。在本发明中，若非特指，所有的份、量、百分比均为重量单位，所有的原料均可以从6市场购得。具体实施方式实施例1—、三七药渣各成分含量测定研究本发明通过对三七药渣各成分含量进行测定研究，证实了三七药渣仍含大量活性成分，与三七发挥其药理药效的各化学成分相对应，说明了三七药渣入药的可行性。下面列举本发明试验数据予以支持1.三七药渣中的三七总皂苷采用香草醛-高氯酸比色法测定三七中总皂苷含量，结果见表l，试验表明三七药材中三七总皂苷的含量为9.81%—11.64%、三七药渣中为1.25%—3.68%，说明三七药渣中仍含有较多的皂苷类成分，三七总皂苷是中药三七的主要成分，具有扩张血管、降低心肌耗氧量、抑制血小板凝集、延长凝血时间、降血脂、清除自由基、抗炎、抗氧化等药理作用。这类成分在复方血栓通制剂中起到了相当关键的作用。表1三七样品总皂苷含量测定结果<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>说明*为三七药材，**为三七醇提干浸膏。2.三七药渣中的氨基酸成分《本草新编》上说"三七根止血神药也"。止血有效成分是三七素(三七氨酸)，是从三七根中分离的一种特殊氨基酸。能縮短小鼠的凝血时间，并使血小板数量明显增加；电镜观察发现参三七注射液能使血小板发生伪足伸展、聚集、变型、脱颗粒反应，这些超微结构的改变近似于凝血酶对血小板超微结构的改变，故推测三七能使血小板释放ADP、血小板因子III和CA2+等止血活性物质，最终表现为促凝血作用。三七中含有多种氨基酸类成分，目前，从文山三七中分离出19种以上的氨基酸，有7种是体内必需的，其中一种特殊氨基酸称为三七素(dencichine)，具有非常好的止血作用。本发明试验采用HPLC法测定三七样品中三七素含量，结果三七素在三七药材中含量为0.37%，三七药渣中为0.13%，而三七浸膏中在相可知三七素在三七浸膏粉末中含量极低。结果见表2。法测定三七中十八种游离氨基酸的含量，结果见表3。表2三七样品中三七素含量应保留时间处均无色谱峰出现，因此采用异硫氰酸苯酯(PITC)柱前衍生<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>表3三七中氨基酸含量测定结果<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>说明*为三七药材，**为三七醇提干浸膏。3.三七药渣中的糖类成分三七含有单糖、鼠李糖、木糖、葡萄糖以及低聚糖和多糖。多糖往往具有生理活性，部分多糖具有提高机体免疫功能和抗肿瘤活性，如人参多糖、茯苳多糖、灵芝多糖。研究表明，从三七中分离的三七多糖A和三七茎叶多糖，可以增强有机体免疫能力，促进巨噬细胞和抗体分泌细胞活性，对自然杀伤细胞和抗原结合细胞无明显影响。采用DNS(3，5-二硝基水杨酸)显色测定三七中总多糖含量，结果在三七浸膏粉末中三七总多糖含量为10.5%，三七药材与三七药渣中总多糖含量相当。试验结果见表4。表4三七样品多糖含量测定结果1-1500310.50450.8150.1478.251-2500630.57250.8150.1588.908.52*1-3500450.52150.8150.1508.412-1500520.56852150.1583.542-2500530.53352150.1523.413.472-3500160.54252150.1533.453-1501860.82850.5150.20218.123-2500920.81450.5150.20017.9417.963-3500670.80650.5150.19817.824-1500790.3485630.3092.314-2500260.3545630.3122.342.33*4-3501030.3615630.3152.355-1500810.624201150.1671.885-2500740.619201150.1661.871.86*5-3500510.598201150.1631.836-1500690.818201150.2002.256-2500640.791201150.1962.202.236-3500480.809201150.1992.237-1500980.992201150.2302.587-2500650.956201150.2242.522.537-3500540.948201150.2232.508-1500410.657201150.m1.941.948-25.00250.6492011.5'o.m1.938-35.00140.6652011.50.1741.969-15.01650.448200.31.50.1375.139-25.01830.416200.31.50.1324.924.979-35.00310.403200.31.50.1304.8510-15.0090.475200.31.50.1425.3110-25.00420.463200.31.50.1405.245.2310-35.01490.451200.31.50.1385.1511-15.00770.8392011.50.2042.2911-25.00440.8132011.50.2002.242.3111-35.00930.8962011.50.2142.4012-15.01331.287200.31.50.28010.4912-25.00341.304200.31.50.28310.6210.4912-35.00621.265200.31.50.27710.3613-15.0111.333200.31.50.28810.7913-25.01341.312200.31.50.28510.6510.6013-35.00911.269200.31.50.27710.38说明*为三七药材，**为三七醇提干浸膏。11样品取样量编号g7，液显^色里ml，ml多糖平均含含量％量％糖解样w多水取量萄质g葡糖量4.三七药渣中的黄酮类成分黄酮类化合物是三七有效活性成分。三七黄酮可以分离出槲皮素，大量药理研究表明槲皮素具有祛痰、镇咳、平喘、降压、强心、增加冠脉流量、降血脂、增强肾上腺素、增加毛细血管抵抗力和降低毛细血管渗透性的作用。三七黄酮与皂苷合用，生理活性最强，分开使用则证明黄酮能显著增加心肌冠脉流量。三七茎叶总黄酮对人肝癌细胞S匪C-7721增殖有抑制作用，呈时间和剂量的依赖性；改变SMMC-7721细胞的周期分布，即G1期细胞百分率有所下降，S期百分率增加，这种作用呈剂量依赖性。三七总黄酮还能明显抑制体外培养心肌细胞病变，对柯萨奇B3病毒所致小鼠病毒性心肌炎具有一定治疗作用。此外，三七黄酮还具有活血的功效。试验选用芦丁为对照品，紫外分光光度法测定三七中总黄酮含量，结果在三七药材中含有黄酮类成分为0.047%—0.057%、三七药渣为0.02%。试验结果见表5。表5三七总黄酮测定结果12样品编号取样量g吸光度总黄酮含量y。平均含量％1_14.9900.1700.0495.0320.1480.0420.047*l-35.0130.1760.0512-24.9930.0900.0262-25.0000.0780.0220.0232-35.0720.0720.0203-14.9870.0780.0223-25.0010.0580.0160.0183-35.0020.0550.0154-15.0020.1980.0574-25.0070.2030.0590.057*4-34.9940.1900.0555-15.0030.2010.0585-25.0040.1700.0490.053*5_35.0010.1760.0516-110.0120.1550.0226-210.0080.1270.0180.0206-310.0250.1250.0187-14.9980.0500.0147-25.0060.0490.0140.0127-34.9910.0350.0108-110.0190.1430.0218-210.0050.1450.0210.0218-310.0460.1440.0219-15.0010.0730.0219-25.0030.0780.0220.0229-35.画0.0830.02410-15.0030.0740.02110-24.9970.0630.0180.01910-34.9960.0680.019ll-l5.0020.0490.01411-24.9960.0440.0120.01311-34.9950.0490.01412-11.0090.2380.34212-21.0060.2420.3490.348**12-30.9980.2440.35413-10.9960.2420.35213-20.9970.2390.3470.351**13-30.9950.2430.354说明*为三七药材，**为三七醇提干浸膏。通过对三七药材、三七药渣及三七醇提干浸膏的各成分含量测定研究，结果表明，三七醇提取后，三七药渣中仍含有大量的活性成分，如三七皂苷、三七素、三七多糖、黄酮类、氨基酸等，这些成分与复方血栓通制剂的功能主治相一致，将三七药渣烘干，粉碎过筛13后与浸膏一同入药是可行的。二、与复方血栓通胶囊功能主治有关的主要药效学试验复方血栓通胶囊具有活血化瘀，扩张血管，增加血流量，改善血液循环和微循环的作用，制剂中不加三七药渣与制剂中加入三七药渣，通过与复方血栓通胶囊功能主治有关的主要药效学试验研究，观察了复方血栓通胶囊对小白鼠凝血时间、家兔血块溶解、大白鼠血栓形成、大鼠颈总动脉血流量，并与单方三七的作用比较，结果如下。(说明复方血栓通胶囊1:为制剂中不加三七药渣；复方血栓通胶囊2:为制剂中加入三七药渣)1、复方血栓通胶囊对小白鼠凝血时间的影响凝血时间测定采用玻片法。共用18—22克NIH种小白鼠52只，雌雄兼有，随机分成4组。各组动物数和灌胃给药剂量见表一，生理盐水组给等容量生理盐水0.5mg/只。灌胃给药一小时后摘眼球取血，以载玻片接取流出的血液一大滴，立即开始计时，用干燥针头挑动载玻片上的血液，至见到纤维蛋白丝为止。自血液流出至出现纤维蛋白丝的时间即为凝血时间，结果见表6。表6复方血栓通胶囊对小白鼠凝血时间的影响<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>A与三七组比较P>0.005;*与复方血栓通胶囊1组比较P<0.001。结果表明复方血栓通胶囊具有縮短小白鼠凝血时间(P<0.001)促进止血作用，其作用强度与单方三七一样；复方血栓通胶囊2组凝血时间较复方血栓通胶囊1组快(P<0.001)。2、复方血栓通胶囊对家兔血块的溶解作用取新西兰种家兔耳缘静脉血，按文献报道方法，把血液分别放入备好的40个试管中，每管血量为O.l毫升，待凝成血块后(血块湿重80毫克)，分成4组每组10管。各组试管所加药物及剂量见表二，生理盐水组试管加入等容量生理盐水2ml/管。置室温24小时后，取出每管的血称重(湿重)，结果见表7。表7复方血栓通胶囊对家兔血块的溶解作用组别试管药量血块湿重(个)ml(mg)力口药前(mg)加药后(亍±SDmg)生理盐水复方血栓通胶嚢1复方血栓通胶嚢210280102(22)80102(22)8051.0±6.229.5±2.5<0.001A'24.1±4.8<0.001三七102(26.4)8032.6±2.4<0.001A与三七组比较P<0.001;*与复方血栓通胶囊1组比较P<0.001。结果表明复方血栓通胶囊组试管中血块重量明显比生理盐水组轻(P<0.001)，表明复方血栓通胶囊具有促进家兔血块溶解的作用，其作用明显比单方三七强；复方血栓通胶囊2组对家兔血块溶解较复方血栓通胶囊1组强(P<0.001)。3、复方血栓通胶囊对大白鼠血栓形成的影响取350-400克SD种大白鼠32只，雌雄兼有，随机分成4组，每组8只。以lg/kg乌拉坦腹腔注射麻醉，分离右颈总动脉和左颈外静脉，按大白鼠血栓形成法进行实验。十二指肠给药，给药剂量见表8，对照组给等容量生理盐水lml/100g。以血栓湿重为指标，结果见表8。表8复方血栓通胶囊对大白鼠血栓形成的影响组别动物剂量血才全湿重P(只)(mg/kg)(J±SDmg)生理盐水8lml/100g7.8±0.6复方血栓通胶嚢182207.1±0.5<0.05复方血栓通胶嚢28220A'6.3±0.3<0.001三七82647.3±0.3<0.05A与三七组比较P<0.001，*与复方血栓通胶囊1组比较P<0.05。结果表明复方血栓通胶囊具有降低血栓重量抗大白鼠血栓形成的作用(P<0.001)，其作用明显比单方三七强(P<0.001)，复方血栓通胶囊2组抗大白鼠血栓形成的作用较复方血栓通胶囊1组强(P<0.05)。4、复方血栓通胶囊对大白鼠颈总动脉血流量的影响共用200克左右SD种大白鼠40只，雌雄各半，随机分成4组，每组10只，乌拉坦lg/kg腹腔注射麻醉，解剖分离出颈总动脉，按电磁流量计测量法，用日本光电MFV-2100型电磁血液流量计测量给药前及十二指肠给药后30分钟颈总动脉的血流量，结果见表9。表9复方血栓通胶囊对大白鼠颈总动脉血流量的影响组别动物剂量灌流液流量(X±SDml/2分)(mg/kg)加药前给药后30增加值(mi/分钟分钟)生理盐水10复方血栓通胶嚢l10复方血栓通胶囊210lml/100g3.26±0.483.29±0.480.032203.21±0.533.48±0.490.272203.583.27±0.450.31'0.61>0.05<0.01<0.01三七102643.20±0.473.34±0.450.14<0.05*与给药前比较,与三七组比较P<0.05,A与复方血栓通胶囊1组比较P>O.05。结果表明复方血栓通胶囊具有增加大白鼠颈总动脉血流量的作用(P<0.01)，其作用比单方三七强(P<0.05);复方血栓通胶囊2组对大白鼠颈总动脉血流量的增加值较复方血栓通胶囊1组多(P>0.05)。三、制剂中加入三七药渣后的动物长期毒性试验研究复方血栓通胶囊动物长期毒性试验复方血栓通胶囊中加入三七药渣，进行动物长期毒性试验90天，试验结果如下选用SD大鼠80只，随机分为4组，每组20只，给予不同浓度(0.6、1.2、2.4g/kg)的复方血栓通胶囊，每天灌胃一次，连续90天，末次给药后24小时各组活杀10只动物(雌雄各半)，其余10只动物继续观察2周后活杀。试验期间观察动物的外观、一般行为、体重变化，给药后90天和停药2周进行血液学(WBC;HGB;PLT;NEU;NEU%;L预；LYM%;HCT;MPV;MONO;MONO%;MCV;PCT;EOS;EOS%;MCH;PDW;BASO;BASO%;MCHC;RBC;RDW;Ret;PT)和血清生化(Glu、AST、ALT、ALP、Crea、ALB、GP、A/G、BUN、TB、TCH、TG、TP、CK、Na+、K+、CI—)、脏器系数、病理组织学等指标检查。试验结果表明各组动物一般状态良好，外观体征、行为活动、体重增长均无异常变化；三个剂量组及对照组血液学检查、血液生化学检查均在正常范围，组间无显著差异；各组主要脏器组织未见与药物相关的病理学变化。上述指标停药2周后也未见改变。本试验用药剂量分别为临床用药剂量的8、16、32倍，根据试验结果表明复方血栓通胶囊低、中、高三个剂量(0.75/1.5/3.0g/kg)连续90天给药对大鼠无明显影响，无明确的毒性靶器官和敏感指标，恢复期观察也未见延迟性毒性反应，提示本品临床应用的剂量安全性较高。复方血栓通胶囊中加入三七药渣，大鼠连续给药90天试验后，各项指标正常，说明三七药渣的加入是安全的。四、制剂中加入三七药渣后的临床试验研究复方血栓通胶囊中加入三七药渣制成的制剂，通过临床试验研究，考察了治疗稳定性劳累型心绞痛(血瘀兼气阴两虚证)与治疗视网膜静脉阻塞(血瘀兼气阴两虚证)有效性、安全性的随机、单盲双模拟、平行对照、多中心临床研究。以复方丹参片为阳性对照评价复方血栓通胶囊治疗稳定性劳累型心绞痛(血瘀兼气阴两虚证)有效性、安全性的随机、单盲双模拟、平行对照、多中心临床研究。本试验共16有336例患者(复方血栓通胶囊试验组252例，复方丹参片对照组84例)入组，其中FAS:335例，PPS:323例，SS:336例。两组基线情况经统计学分析，均衡性、可比性良好。在心绞痛症状积分两组治疗前后自身组内比较，差异具有显著性，无论是治疗第15天，还是30天，试验组与对照组经治疗后与治疗前相比，P值均〈0.0001，提示两组症状均在好转。同时还表现在硝酸甘油的用量上，治疗15天、30天分别与治疗前相比，两组组内均有明显下降，组内治疗前后比较P值均<0.0001，说明两药均能有效地缓解心绞痛症状，并减少硝酸甘油的使用。心绞痛疗效评价，第30天时试验组心绞痛疗效显效率为31.97%，有效率60.25%，无效率7.79%，而对照组分别为22.50%、61.25%、16.25%，两组差异具有统计学意义，P值=0.0199，PPS集与FAS集结论一致，说明试验组在控制心绞痛临床症状的疗效要优于对照组。中医证候评价，第30天时试验组显效率为35.39%，有效率为54.32%，无效率为10.29%，对照组分别为26.25%、56.25%、17.50%，组间比较差异有统计学意义，P值=0.0473，PPS集与FAS集结论一致，说明试验组在改善中医证候方面要优于对照组。就单项症状疗效评价，主症之一的胸痛及次症心悸，两组比较均有统计学差异，试验组痊愈率高于对照组，P值均〈0.05，另外在舌象和脉象上，两组差异亦表现出有统计学意义的趋势。本试验安全性评价主要从不良事件及对血尿常规、肝肾功能等方面进行考察。两组共发生不良事件19例(试验组16/252、6.35%，对照组3/84、3.57%)，不良事件组间比较差异无统计学意义。对血尿便三大常规、肝肾功能及心电图等安全性指标，两组试验前后无明显变化。以益脉康片为阳性对照再评价复方血栓通胶囊治疗视网膜静脉阻塞(血瘀兼气阴两虚证)有效性、安全性的随机、双盲双模拟、平行对照、多中心临床试验。本试验共有143例患者(复方血栓通胶囊试验组107例，益脉康片对照组36例)入组，其中FAS:142例，PPS:141例，SS:143例。两组基线情况经统计学分析，均衡性、可比性良好。中医证候评分上，两组治疗第15天、第30天分别与治疗前相比，症状均有明显好转，各组组内自身前后比较，P值均<0.OOOl，提示两药均有效。组间差值比较，试验组证候评分治疗30天后下降12.81±4.47分，对照组下降10.56±5.41分，差异有统计学意义，P值二0.0053，说明试验组在改善中医证候方面要优于对照组。在主症视力下降的单项症状疗效评价上，试验组30天后显效率6.60%，有效率71.70%，无效率21.70%;而对照组分别为5.56%、47.22%、47.22X，两组差异有统计学意义，P值二0.0118，提示试验组优于对照组。在主症眼底瘀血的单项症状疗效评价上，试验组亦优于对照组，试验组显效率、有效率、无效率分别为4.72%、62.26%、33.02%;而对照组分别为0%、50%、50%，组间比较差异有统计学意义，P值二0.0388。在视力、眼底情况及中医证候疗效评价中，两组组间比较差异均无统计学意义，P值均〉0.05。本试验安全性评价主要从不良事件及对血尿常规、肝肾功能等方面进行考察。两组共发生1例不良事件，为对照组，表现为尿道炎，与药物无关，不良事件组间比较差异无统计学意义。对血尿便三大常规、肝肾功能及心电图等安全性指标，两组试验前后无明显变化。实施例2复方血栓通胶囊按照下述配比称取原料(克)三七250g黄芪80g丹参50g玄参80g三七药渣粉150-200g17将上述药物制成本发明药物的制备方法是(1)三七粗碎，加50%乙醇浸渍二次，第一次5天，第二次2天，滤过，合并滤液，回收乙醇并浓縮至相对密度为1.151.20(30°C)，药渣烘干，粉碎成细粉，过筛；(2)黄芪、丹参和玄参三味药材，加50%乙醇加热回流二次，第一次3小时，第二次2小时，滤过，合并滤液，回收乙醇并浓縮至相对密度为1.151.20(30°C);(3)两种浓縮液浸膏、三七药渣细粉及淀粉、滑石粉各适量混匀，制粒干燥，粉碎成细粉，装入胶囊，制成1000粒，即得。实施例3复方血栓通片按照下述配比称取原料(克)三七375g黄芪120g丹参75g玄参120g三七药渣粉225_300g将上述药物制成本发明药物的制备方法是(1)三七粗碎，加50%乙醇浸渍二次，第一次5天，第二次2天，滤过，合并滤液，回收乙醇并浓縮至相对密度为1.151.20(30°C)，药渣烘干，粉碎成细粉，过筛；(2)黄芪、丹参和玄参三味药材，加50%乙醇加热回流二次，第一次3小时，第二次2小时，滤过，合并滤液，回收乙醇并浓縮至相对密度为1.151.20(30°C);(3)两种浓縮液浸膏、三七药渣细粉及淀粉适量混匀，制粒干燥，整粒，加入羧甲淀粉钠、硬脂酸镁适量，混匀，制成1000片，包薄膜衣，即得。权利要求一种含三七的中药制剂，其特征在于由下列原料制得的活性成分和/或药学上可接受的附加剂组成三七200-500克黄芪50-160克丹参40-100克玄参60-160克三七药渣粉100-400克。2.根据权利要求1所述的含三七的中药制剂，其特征在于由下列原料制得的活性成分和/或药学上可接受的附加剂组成三七250克黄芪80克丹参50克玄参80克三七药渣粉150-200克剂型为胶囊，制成1000粒。3.根据权利要求1所述的含三七的中药制剂，其特征在于由下列原料制得的活性成分和/或药学上可接受的附加剂组成三七375克黄芪120克丹参75克玄参120克三七药渣粉225-300克剂型为片，制成1000片。4.根据权利要求l-3之一所述的含三七的中药制剂，其特征在于所述的药学上可接受的附加剂为淀粉、滑石粉或羧甲淀粉钠、硬脂酸镁。5.根据权利要求l-3之一所述的含三七的中药制剂的制备方法，其特征在于将三七粉碎，加50-90V/VX乙醇浸渍(或超声提取或加热回流或渗漉)二次，第一次3-6天，第二次1-3天，滤过，合并滤液，回收乙醇并浓縮至相对密度为1.051.30(20-50°C)，药渣烘干，粉碎成细粉，过筛；其余黄芪等三味，加50-90V/VX乙醇加热回流二次，第一次2-5小时，第二次1-3小时，滤过，合并滤液，回收乙醇并浓縮至相对密度为1.051.30(20-50°C)，与上述浓縮液、细粉及辅料适量混匀，干燥，制成胶囊剂或片剂。6.根据权利要求5所述的含三七的中药制剂的制备方法，其特征在于将三七粉碎，加50V/V%乙醇浸渍二次，第一次5天，第二次2天，滤过，合并滤液，回收乙醇并浓縮至相对密度为1.151.20(30°C)，药渣烘干，粉碎成细粉，过筛；其余黄芪等三味，加50V/V%乙醇加热回流二次，第一次3小时，第二次2小时，滤过，合并滤液，回收乙醇并浓縮至相对密度为1.151.2Q(3(TC)，与上述浓縮液、细粉及辅料适量混匀，干燥，制成胶囊剂或片剂。全文摘要本发明公开了一种含三七的中药制剂及其制备方法，由下列原料制得的活性成分和/或药学上可接受的附加剂组成三七200-500克，黄芪50-160克，丹参40-100克，玄参60-160克，三七药渣粉100-400克。本发明三七粉碎醇提浸膏入药，保证了三七各活性成分的迅速吸收利用，而三七药渣干燥粉碎成细粉入药，在一定程度上增加了含三七的中药制剂中的活性成分，相关成分产生协同作用，提高了三七的生物利用度，同时也避免了资源的浪费，在当今倡导节约型社会经济中具有很大的社会意义和经济意义。文档编号A61K9/20GK101716253SQ20091021581公开日2010年6月2日申请日期2009年12月30日优先权日2009年12月30日发明者谢称石,龙超峰申请人:广东众生药业股份有限公司