一种5-α还原酶抑制剂-荨麻裂环木脂素苷C及其制备方法与用途的制作方法
专利名称：一种5-α还原酶抑制剂-荨麻裂环木脂素苷C及其制备方法与用途的制作方法
技术领域：
本发明属于中药生物活性成分的提取制备方法，具体涉及从植物裂叶荨麻中用溶
解、提取、萃取、离心和吸附、洗脱的分离方法制备有效植物成分，以及对前列腺等疾病有潜 在的治疗作用。
背景技术：
Kraus与Wu等[1—2]从大荨麻中鉴定出了 13个木脂素类化合物(+)-新橄榄
树脂素、(-)-开环异落叶松脂素、异落叶松脂素、松醋醇、3，4-二香草基四氢吠喃、新
橄榄树脂素-4-0-13 -D-葡萄糖苷、9_乙酰基-新橄榄树脂素、9_乙酰基-新橄榄树脂
素-4-0-P-D-葡萄糖苷、9，9' -二乙酰基_新橄榄树脂素、9，9' -二乙酰基-新橄揽树
脂素-4-0-13 -D-葡萄糖苷、(_)-开环异落叶松脂素-9-0-13 -D-葡萄糖苷、(_)-开环异落
叶松脂素-4-0-P -D-葡萄糖苷、新橄榄树脂素-9-0-P -D-葡萄糖苷。其结构类型主要有
开环落叶松脂素、落叶松脂素及其苷类和新橄榄树脂素及其苷类。其中新橄榄树脂素及其
苷类结构如下
新橄榄树脂素-9-0-13 -D-葡萄糖苷 9-乙酰基-新橄榄树脂素
3
(-)-开环异落叶松脂素 (-)_开环异落叶松脂素-9-0-13 -D-葡萄糖苷
HO'( — )-开环异落叶松脂素-4-0-l3-D-葡萄糖苷 5-甲氧基开环异落叶松脂素
4OH 异落叶松脂素 有研究[3]表明从大荨麻根中分离到(+)-新橄榄树脂素、(-)-开环异落叶松脂素、 脱氢二松柏醇、异落叶松脂素、松脂醇和3， 4- 二香草基四氢呋喃，并检验了以上几种物质 体外与性激素结合球蛋白(SBHG)的亲和作用，结果除松脂醇外，其余化合物都有亲合力， 其中3，4-二香草基四氢呋喃的亲合作用最强，浓度为250i! g/ml时抑制率为95%。提示大 荨麻根中木脂素类是治疗BPH(良性前列腺增生的简称，下同)的活性成分之一。
本发明的课题组曾对国产的8种荨麻属植物根的不同提取物进行了抗前列腺增 生的生物活性筛选，结果表明滇藏荨麻根的20%和95%乙醇提取物能显著地抑制前列腺
增生大鼠的病变组织。虽然国外报道了荨麻中木脂素类具有一定抗Bra活性，但作用较弱，
而裂环荨麻木脂素类结构特殊，作用与阳性药非那雄胺相当。
参考文献 [l]Kraus R， Spiteller G. Phenolic compounds from root of Urtica dioica. Phytochem，1990,29(5) :1653-659. [2]Jian-lin Wu，Na Li，Toshiaki Hasegawa，et al. Bioactive Secolignansfrom P印eromia dindygulensis. J. Nat. Prod. 2006， 69， 790-794. [3]Schottner M， Ganber D， Spiteller G. Ligans from the roots of Urticadioica and their metabolites bind to human sex hormone bindingglobulia(SHBG). Planta Medica. 1997,63(6) :529-532.
发明内容
本发明的目的是在前期研究的基础上，为了进一步研究提取物抗前列腺增生的活 性部位和作用机理，选取前列腺组织中一个关键酶_5 a -还原酶为作用靶点，采用酶联免 疫(Enzyme-linked i匪nospecific assay ELISA)的方法，建立抑制5 a -还原酶体夕卜模 型，从大鼠前列腺组织中提取a -还原酶，与底物睾酮以及供氢体NADra共同组成了一种微 量反应体系，利用酶标仪检测双氢睾酮(DHT)的含量，以DHT的含量来判断荨麻提取物是否 有抑制5a-还原酶的活性。 本发明从裂叶荨麻中分离得到了荨麻裂环木脂素苷C，该成分的结构不同于上述 木脂素类成分，为一种新的裂环木脂素类成分，对其抑制5 a -还原酶作用研
究发现具有较强活性，是一种潜在的抗前列腺增生药物成分。
5
本发明的技术方案是一种5-a还原酶抑制剂-荨麻裂环木脂素苷c，其分子结
构式如下
上述的5- a还原酶抑制剂-荨麻裂环木脂素苷C的制备方法是以裂叶荨麻为原 料，制备步骤如下 (1)将裂叶荨麻干燥地下部分粉碎处理后，用6-8倍量质量浓度为95%的工业乙 醇回流提取，过滤后减压浓縮； (2)将醇提取物用8-10倍量热水混悬，依次用等体积的石油醚、乙酸乙酯、水饱和 正丁醇萃取，各萃取三次； (3)萃余水层采用d101大孔吸附树脂分离纯化，以乙醇_水梯度(水一30%乙醇 —50%乙醇一95%乙醇)洗脱，收集洗脱液； (4)乙醇洗脱液用硅胶柱色谱分离纯化，采用体积比为氯仿甲醇=30 : 1、
io : 1、5 : 1、2 : i的梯度洗脱，收集洗脱液，采用薄层色谱法(tlc)检测将组成相同的组 分进行合并； (5)步骤(4)的洗脱液经反相硅胶柱色谱分离纯化，采用体积比为甲醇水= 3 : 7的溶液洗脱，每0.5个保留体积收集成1份，其中第15-20份洗脱液采用tlc法检测 为单一成分，合并浓縮后得到荨麻裂环木脂素苷c。 采用核磁共振(nmr)等波谱技术测定其结构，荨麻裂环木脂素苷c的波谱数据见 表l: 表1荨麻裂环木脂素苷c的^和13c nmr数据
6
NO.C(CD3OD)
3c
2180.5
348.02.56， 1H,成",4，3.3
441.53.68， 1H，兩，^11.7,5.4
4,35, 1H，必，>8.8,8.3
572.83.88, 1H,cM,^9.1,7.1
656.43.84, 1H乂fl 1.5
3.74, 1H，必,^10.3,2.7
768.43.31, 1H，必,^10.4，4,2
r137.0
2,113.26.97, 1H, d，月.O
3,150.6
4,149.5
5,113.46.88， 1H, A ^8.5
6,121.06.95, w
r'137,2
2"113.46.95, 1H,c/,1.9
3"150.7
4"149.5
5"113.46.90， 1H，《J:2.0
6"12.66.99, 1H,必,J=8.1, 1.9
r"104.74.12, 1H,《^7.9
2〃'75.13.16, 1H,附
3〃'78.03.21, 1H，w
4〃,71.53.31, 1H,w
v〃78.03.31， 1H，m
3.86, 1H 11.6,2.5
6"'62.73.71, 1H,必,月11.8，5.4
3','■56.5,56.63.79， 3.79, both 3H,s
3"-OCH356.7, 56.83.82,3,82, both3H,s
4',
4"-OCH3 荨麻裂环木脂素苷C可以用于制备抗前列腺增生药物，将有效计量的荨麻裂环木 脂素苷C与药用载体混合并制成适当剂型的药物。
本发明的有益效果是目前前列腺增生药物中植物药作用弱，治疗效果差，而合成 药一般副作用较强。裂环木脂素类原料为纯天然植物根，安全易得，方法简单易操作，不引 入有毒物质，成本低廉，虽来源于植物但作用较强，对前列腺疾病有潜在的医疗用途。
以下用实施例对本发明作进一步的说明。
具体实施方式
实施例1 裂叶荨麻药材采集自四川省阿巴州。从裂叶荨麻中制备荨麻裂环木脂苷C方法步 骤如下 (D将裂叶荨麻干燥地下部分粉碎处理后，用质量浓度为95%的工业乙醇回流提 取，料液比(kg/1) =1 : 8，提取温度9(TC，提取时间3h，提取次数3次，合并提取液，过滤 后减压浓縮至无醇味； (2)将醇提物200g用2L热水混悬，依次用2L的石油醚、乙酸乙酯、水饱和正丁醇 萃取，各萃取3次； (3)萃余水层萃取物30g经D101大孔树脂(lkg)分离，以乙醇-水梯度(水一30% 乙醇一50%乙醇一95%乙醇)洗脱，收集洗脱液10L ; (4)乙醇洗脱液浓縮至干得5g，以甲醇溶解后加入10g硅胶拌样后用硅胶柱色谱
(硅胶i50g)分离纯化，采用体积比为氯仿甲醇=30 : i、io : 1、5 : 1、2 : i梯度洗
脱，收集每个比例洗脱液1L; (5)步骤(4)的洗脱液浓縮至干得lg，以甲醇溶解然后经反相硅胶柱色谱(反相 硅胶30g)分离纯化，采用甲醇水=3 : 7梯度洗脱，每25ml收集成1份，合并15-20份 洗脱液，浓縮后得到荨麻裂环木脂素苷C120mg。
实施例2 测试了实施例1制得的荨麻裂环木脂素苷C的5-a还原酶抑制作用。
5-a还原酶抑制作用实验步骤如下
(D5-ci还原酶的制备 雄性SD大鼠3只，体重200士 10g，大连医科大学实验动物中心提供，禁食不禁水过
夜处死，迅速取出腹侧的前列腺组织在冰台上剪碎，用预冷的匀浆液(蔗糖0. 73mol ，L一1，
氯化钙1. 91mmol *L—0在玻璃匀浆器中匀浆，在4"下以10000rpm低温高速离心20min，取
上清液再以16000rpm低温高速离心30min，即得5 a -还原酶提取物。采用lowry法测定蛋
白含量，以酶提物中的总蛋白含量表示5a -还原酶提取物的含量，将提取物放入小离心管
在-7(TC下保存，备用。
(2) 5 a -还原酶抑制活性测定 操作分两部分完成，即①将反应成分37t:恒温缓冲液、睾酮、实施例1制备的荨麻 裂环木脂苷C样品、阳性对照药、NADra及酶组织液依次加入96孔板内，使之微量化，设置不 同反应孔和对照孔板。反应温度为37°C (相对饱和湿度)，反应时间为60min。②采用EL ISA法定量测定产物DHT，以产物的生成量大小反映酶活性的强弱。受试样品管中DHT的含 量低于酶反应管中DHT含量时，则视为具有抑制5 a -还原酶的活性。检测方法及计算参照 睾酮试剂盒(购于AdlitteramDiagnostic Laboratories公司)使用说明进行。所有实验 孔均为双复孔操作。在已经确定的反应体系基础上，辅酶NADPH浓度为lmmol L—、睾酮浓 度为0. 5 ii mol *L—、结合睾酮试剂盒微量测定的特点，将整个反应体系的总量定为200 iU。 酶反应体系中各组分的原始浓度分别为缓冲溶液(PBS 20mmo1 L-l，蔗糖0. 2mo1 L一1， EDTA Na2 lmmol L—、 p朋.8) ;NADPH浓度(20,1 L—0 ;粗酶浓度(4. 3mg ml—1);睾酮浓
8度(20 ii mol L-0 ;非那雄胺(1. 3,1 L-0 。测定结果见表2 :
表2荨麻裂环木脂素苷C抑制5 a -还原酶作用
空白对照组非那雄胺组样品组
DHT含量(ng/ml) 7.43.54.1 从上表可以看出荨麻裂环木脂素C能显著抑制DHT的生成，与阳性药非那雄胺相 当。
9
权利要求
一种5-α还原酶抑制剂-荨麻裂环木脂素苷C，是以三角叶荨麻地下部分为原料，经过醇提，醇提物热水混悬，石油醚、乙酸乙酯和水饱和正丁醇萃取，萃余水层萃取物经大孔树脂分离和洗脱，以及硅胶柱色谱分离纯化而得；其分子的结构式为F2009102199574C0000011.tif
2. 如权利要求l所述5-a还原酶抑制剂-荨麻裂环木脂素苷C的制备方法，其特征在 于，该方法是以三角叶荨麻为原料，其工艺步骤如下(1) 将裂叶荨麻干燥地下部分粉碎处理后，用6-8倍量质量浓度为95%的工业乙醇回 流提取，过滤后减压浓縮；(2) 将醇提取物用8-10倍量热水混悬，依次用等体积的石油醚、乙酸乙酯、水饱和正丁 醇萃取，各萃取三次；(3) 萃余水层采用D101大孔吸附树脂分离纯化，以乙醇-水梯度洗脱，收集洗脱液； 所述以乙醇_水梯度为水一30%乙醇一50%乙醇一95%乙醇；(4) 乙醇洗脱液用硅胶柱色谱分离纯化，采用体积比为氯仿甲醇=30 : i、io : i、 5 : 1、2 : i的梯度洗脱，收集洗脱液，采用薄层色谱法检测将组成相同的组分进行合并；(5) 步骤(4)的洗脱液经反相硅胶柱色谱分离纯化，采用体积比为甲醇水=3 : 7的溶液洗脱，每0. 5个保留体积收集成1份，其中第15-20份洗脱液采用TLC法检测为单一成 分，合并浓縮后得到荨麻裂环木脂素苷C。
3. 如权利要求l所述5-a还原酶抑制剂-荨麻裂环木脂素苷C的用途，其特征在于能 显著抑制5 a -还原酶作用；抑制DHT的生成，与阳性药非那雄胺相当，对前列腺疾病有潜在 的医疗用途。
全文摘要
一种5-α还原酶抑制剂-荨麻裂环木脂素苷C及其制备方法与用途。是以三角叶荨麻地下部分为原料，经过醇提，醇提物热水混悬，石油醚、乙酸乙酯和水饱和正丁醇萃取，萃余水层萃取物经大孔树脂分离和洗脱，以及硅胶柱色谱分离纯化而得。荨麻裂环木脂素C能显著抑制DHT的生成，与阳性药非那雄胺相当，对前列腺疾病有潜在的预防和治疗用途。对裂环木脂素类原料为纯天然植物根，安全易得，方法简单易操作，不引入有毒物质，成本低廉，虽来源于植物但作用较强，在抗前列腺增生药物研究开发上具有非常重要的意义。
文档编号A61K31/7048GK101704856SQ20091021995
公开日2010年5月12日 申请日期2009年11月16日 优先权日2009年11月16日
发明者冯宝民, 姜妮 申请人:大连大学
技术领域：
本发明属于中药生物活性成分的提取制备方法，具体涉及从植物裂叶荨麻中用溶
解、提取、萃取、离心和吸附、洗脱的分离方法制备有效植物成分，以及对前列腺等疾病有潜 在的治疗作用。
背景技术：
Kraus与Wu等[1—2]从大荨麻中鉴定出了 13个木脂素类化合物(+)-新橄榄
树脂素、(-)-开环异落叶松脂素、异落叶松脂素、松醋醇、3，4-二香草基四氢吠喃、新
橄榄树脂素-4-0-13 -D-葡萄糖苷、9_乙酰基-新橄榄树脂素、9_乙酰基-新橄榄树脂
素-4-0-P-D-葡萄糖苷、9，9' -二乙酰基_新橄榄树脂素、9，9' -二乙酰基-新橄揽树
脂素-4-0-13 -D-葡萄糖苷、(_)-开环异落叶松脂素-9-0-13 -D-葡萄糖苷、(_)-开环异落
叶松脂素-4-0-P -D-葡萄糖苷、新橄榄树脂素-9-0-P -D-葡萄糖苷。其结构类型主要有
开环落叶松脂素、落叶松脂素及其苷类和新橄榄树脂素及其苷类。其中新橄榄树脂素及其
苷类结构如下
新橄榄树脂素-9-0-13 -D-葡萄糖苷 9-乙酰基-新橄榄树脂素
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(-)-开环异落叶松脂素 (-)_开环异落叶松脂素-9-0-13 -D-葡萄糖苷
HO'( — )-开环异落叶松脂素-4-0-l3-D-葡萄糖苷 5-甲氧基开环异落叶松脂素
4OH 异落叶松脂素 有研究[3]表明从大荨麻根中分离到(+)-新橄榄树脂素、(-)-开环异落叶松脂素、 脱氢二松柏醇、异落叶松脂素、松脂醇和3， 4- 二香草基四氢呋喃，并检验了以上几种物质 体外与性激素结合球蛋白(SBHG)的亲和作用，结果除松脂醇外，其余化合物都有亲合力， 其中3，4-二香草基四氢呋喃的亲合作用最强，浓度为250i! g/ml时抑制率为95%。提示大 荨麻根中木脂素类是治疗BPH(良性前列腺增生的简称，下同)的活性成分之一。
本发明的课题组曾对国产的8种荨麻属植物根的不同提取物进行了抗前列腺增 生的生物活性筛选，结果表明滇藏荨麻根的20%和95%乙醇提取物能显著地抑制前列腺
增生大鼠的病变组织。虽然国外报道了荨麻中木脂素类具有一定抗Bra活性，但作用较弱，
而裂环荨麻木脂素类结构特殊，作用与阳性药非那雄胺相当。
参考文献 [l]Kraus R， Spiteller G. Phenolic compounds from root of Urtica dioica. Phytochem，1990,29(5) :1653-659. [2]Jian-lin Wu，Na Li，Toshiaki Hasegawa，et al. Bioactive Secolignansfrom P印eromia dindygulensis. J. Nat. Prod. 2006， 69， 790-794. [3]Schottner M， Ganber D， Spiteller G. Ligans from the roots of Urticadioica and their metabolites bind to human sex hormone bindingglobulia(SHBG). Planta Medica. 1997,63(6) :529-532.
发明内容
本发明的目的是在前期研究的基础上，为了进一步研究提取物抗前列腺增生的活 性部位和作用机理，选取前列腺组织中一个关键酶_5 a -还原酶为作用靶点，采用酶联免 疫(Enzyme-linked i匪nospecific assay ELISA)的方法，建立抑制5 a -还原酶体夕卜模 型，从大鼠前列腺组织中提取a -还原酶，与底物睾酮以及供氢体NADra共同组成了一种微 量反应体系，利用酶标仪检测双氢睾酮(DHT)的含量，以DHT的含量来判断荨麻提取物是否 有抑制5a-还原酶的活性。 本发明从裂叶荨麻中分离得到了荨麻裂环木脂素苷C，该成分的结构不同于上述 木脂素类成分，为一种新的裂环木脂素类成分，对其抑制5 a -还原酶作用研
究发现具有较强活性，是一种潜在的抗前列腺增生药物成分。
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本发明的技术方案是一种5-a还原酶抑制剂-荨麻裂环木脂素苷c，其分子结
构式如下
上述的5- a还原酶抑制剂-荨麻裂环木脂素苷C的制备方法是以裂叶荨麻为原 料，制备步骤如下 (1)将裂叶荨麻干燥地下部分粉碎处理后，用6-8倍量质量浓度为95%的工业乙 醇回流提取，过滤后减压浓縮； (2)将醇提取物用8-10倍量热水混悬，依次用等体积的石油醚、乙酸乙酯、水饱和 正丁醇萃取，各萃取三次； (3)萃余水层采用d101大孔吸附树脂分离纯化，以乙醇_水梯度(水一30%乙醇 —50%乙醇一95%乙醇)洗脱，收集洗脱液； (4)乙醇洗脱液用硅胶柱色谱分离纯化，采用体积比为氯仿甲醇=30 : 1、
io : 1、5 : 1、2 : i的梯度洗脱，收集洗脱液，采用薄层色谱法(tlc)检测将组成相同的组 分进行合并； (5)步骤(4)的洗脱液经反相硅胶柱色谱分离纯化，采用体积比为甲醇水= 3 : 7的溶液洗脱，每0.5个保留体积收集成1份，其中第15-20份洗脱液采用tlc法检测 为单一成分，合并浓縮后得到荨麻裂环木脂素苷c。 采用核磁共振(nmr)等波谱技术测定其结构，荨麻裂环木脂素苷c的波谱数据见 表l: 表1荨麻裂环木脂素苷c的^和13c nmr数据
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NO.C(CD3OD)
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348.02.56， 1H,成",4，3.3
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572.83.88, 1H,cM,^9.1,7.1
656.43.84, 1H乂fl 1.5
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4"-OCH3 荨麻裂环木脂素苷C可以用于制备抗前列腺增生药物，将有效计量的荨麻裂环木 脂素苷C与药用载体混合并制成适当剂型的药物。
本发明的有益效果是目前前列腺增生药物中植物药作用弱，治疗效果差，而合成 药一般副作用较强。裂环木脂素类原料为纯天然植物根，安全易得，方法简单易操作，不引 入有毒物质，成本低廉，虽来源于植物但作用较强，对前列腺疾病有潜在的医疗用途。
以下用实施例对本发明作进一步的说明。
具体实施方式
实施例1 裂叶荨麻药材采集自四川省阿巴州。从裂叶荨麻中制备荨麻裂环木脂苷C方法步 骤如下 (D将裂叶荨麻干燥地下部分粉碎处理后，用质量浓度为95%的工业乙醇回流提 取，料液比(kg/1) =1 : 8，提取温度9(TC，提取时间3h，提取次数3次，合并提取液，过滤 后减压浓縮至无醇味； (2)将醇提物200g用2L热水混悬，依次用2L的石油醚、乙酸乙酯、水饱和正丁醇 萃取，各萃取3次； (3)萃余水层萃取物30g经D101大孔树脂(lkg)分离，以乙醇-水梯度(水一30% 乙醇一50%乙醇一95%乙醇)洗脱，收集洗脱液10L ; (4)乙醇洗脱液浓縮至干得5g，以甲醇溶解后加入10g硅胶拌样后用硅胶柱色谱
(硅胶i50g)分离纯化，采用体积比为氯仿甲醇=30 : i、io : 1、5 : 1、2 : i梯度洗
脱，收集每个比例洗脱液1L; (5)步骤(4)的洗脱液浓縮至干得lg，以甲醇溶解然后经反相硅胶柱色谱(反相 硅胶30g)分离纯化，采用甲醇水=3 : 7梯度洗脱，每25ml收集成1份，合并15-20份 洗脱液，浓縮后得到荨麻裂环木脂素苷C120mg。
实施例2 测试了实施例1制得的荨麻裂环木脂素苷C的5-a还原酶抑制作用。
5-a还原酶抑制作用实验步骤如下
(D5-ci还原酶的制备 雄性SD大鼠3只，体重200士 10g，大连医科大学实验动物中心提供，禁食不禁水过
夜处死，迅速取出腹侧的前列腺组织在冰台上剪碎，用预冷的匀浆液(蔗糖0. 73mol ，L一1，
氯化钙1. 91mmol *L—0在玻璃匀浆器中匀浆，在4"下以10000rpm低温高速离心20min，取
上清液再以16000rpm低温高速离心30min，即得5 a -还原酶提取物。采用lowry法测定蛋
白含量，以酶提物中的总蛋白含量表示5a -还原酶提取物的含量，将提取物放入小离心管
在-7(TC下保存，备用。
(2) 5 a -还原酶抑制活性测定 操作分两部分完成，即①将反应成分37t:恒温缓冲液、睾酮、实施例1制备的荨麻 裂环木脂苷C样品、阳性对照药、NADra及酶组织液依次加入96孔板内，使之微量化，设置不 同反应孔和对照孔板。反应温度为37°C (相对饱和湿度)，反应时间为60min。②采用EL ISA法定量测定产物DHT，以产物的生成量大小反映酶活性的强弱。受试样品管中DHT的含 量低于酶反应管中DHT含量时，则视为具有抑制5 a -还原酶的活性。检测方法及计算参照 睾酮试剂盒(购于AdlitteramDiagnostic Laboratories公司)使用说明进行。所有实验 孔均为双复孔操作。在已经确定的反应体系基础上，辅酶NADPH浓度为lmmol L—、睾酮浓 度为0. 5 ii mol *L—、结合睾酮试剂盒微量测定的特点，将整个反应体系的总量定为200 iU。 酶反应体系中各组分的原始浓度分别为缓冲溶液(PBS 20mmo1 L-l，蔗糖0. 2mo1 L一1， EDTA Na2 lmmol L—、 p朋.8) ;NADPH浓度(20,1 L—0 ;粗酶浓度(4. 3mg ml—1);睾酮浓
8度(20 ii mol L-0 ;非那雄胺(1. 3,1 L-0 。测定结果见表2 :
表2荨麻裂环木脂素苷C抑制5 a -还原酶作用
空白对照组非那雄胺组样品组
DHT含量(ng/ml) 7.43.54.1 从上表可以看出荨麻裂环木脂素C能显著抑制DHT的生成，与阳性药非那雄胺相 当。
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权利要求
一种5-α还原酶抑制剂-荨麻裂环木脂素苷C，是以三角叶荨麻地下部分为原料，经过醇提，醇提物热水混悬，石油醚、乙酸乙酯和水饱和正丁醇萃取，萃余水层萃取物经大孔树脂分离和洗脱，以及硅胶柱色谱分离纯化而得；其分子的结构式为F2009102199574C0000011.tif
2. 如权利要求l所述5-a还原酶抑制剂-荨麻裂环木脂素苷C的制备方法，其特征在 于，该方法是以三角叶荨麻为原料，其工艺步骤如下(1) 将裂叶荨麻干燥地下部分粉碎处理后，用6-8倍量质量浓度为95%的工业乙醇回 流提取，过滤后减压浓縮；(2) 将醇提取物用8-10倍量热水混悬，依次用等体积的石油醚、乙酸乙酯、水饱和正丁 醇萃取，各萃取三次；(3) 萃余水层采用D101大孔吸附树脂分离纯化，以乙醇-水梯度洗脱，收集洗脱液； 所述以乙醇_水梯度为水一30%乙醇一50%乙醇一95%乙醇；(4) 乙醇洗脱液用硅胶柱色谱分离纯化，采用体积比为氯仿甲醇=30 : i、io : i、 5 : 1、2 : i的梯度洗脱，收集洗脱液，采用薄层色谱法检测将组成相同的组分进行合并；(5) 步骤(4)的洗脱液经反相硅胶柱色谱分离纯化，采用体积比为甲醇水=3 : 7的溶液洗脱，每0. 5个保留体积收集成1份，其中第15-20份洗脱液采用TLC法检测为单一成 分，合并浓縮后得到荨麻裂环木脂素苷C。
3. 如权利要求l所述5-a还原酶抑制剂-荨麻裂环木脂素苷C的用途，其特征在于能 显著抑制5 a -还原酶作用；抑制DHT的生成，与阳性药非那雄胺相当，对前列腺疾病有潜在 的医疗用途。
全文摘要
一种5-α还原酶抑制剂-荨麻裂环木脂素苷C及其制备方法与用途。是以三角叶荨麻地下部分为原料，经过醇提，醇提物热水混悬，石油醚、乙酸乙酯和水饱和正丁醇萃取，萃余水层萃取物经大孔树脂分离和洗脱，以及硅胶柱色谱分离纯化而得。荨麻裂环木脂素C能显著抑制DHT的生成，与阳性药非那雄胺相当，对前列腺疾病有潜在的预防和治疗用途。对裂环木脂素类原料为纯天然植物根，安全易得，方法简单易操作，不引入有毒物质，成本低廉，虽来源于植物但作用较强，在抗前列腺增生药物研究开发上具有非常重要的意义。
文档编号A61K31/7048GK101704856SQ20091021995
公开日2010年5月12日 申请日期2009年11月16日 优先权日2009年11月16日
发明者冯宝民, 姜妮 申请人:大连大学
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