作为有丝分裂驱动蛋白抑制剂的取代的喹啉衍生物的制作方法
专利名称：作为有丝分裂驱动蛋白抑制剂的取代的喹啉衍生物的制作方法
根据35 U.S.C.§119(e)的规定，本申请要求2004年5月21日提交的美国临时申请序列号No.60/573,120的优先权，该申请全文纳入本文作为参考。
背景技术：
发明领域本发明涉及取代的喹啉化合物及其药学上可接受的盐、酯或前药，涉及这些化合物与药学上可接受的运载体的组合物，并涉及这些化合物的用途。
技术现状驱动蛋白是利用腺苷三磷酸结合微管和产生机械力的驱动蛋白。驱动蛋白以具有约350个氨基酸残基的驱动结构域(motor domain)为特征。已知一些驱动蛋白驱动结构域的晶体结构。
目前已经鉴定了约100种驱动蛋白相关蛋白(KRP)。驱动蛋白参与多种细胞生物过程，其中包括运输细胞器和小泡和维持内质网。一些KRP与有丝分裂纺锤体的微管或直接与染色体相互作用，并似乎在细胞周期的有丝分裂阶段发挥关键作用。这些有丝分裂KRP在癌症治疗的进展中倍受关注。
驱动蛋白纺锤体蛋白(KSP)(也称为Eg5、HsEg5、KNSL1或KIFII)是几种定位于有丝分裂纺锤体并已知是两极有丝分裂纺锤体形成和/或发挥作用所需的驱动蛋白样驱动蛋白中的一种。
在1995年，用抗KSP C末端的抗体除去KSP显示能阻止有单星状微管排列的有丝分裂中的Hela细胞(Blangy等，Cell 831159-1169，1995)。被认为是KSP同系物的bimC和cut7基因的突变造成构巢曲霉(Aspergillus nidulans)(Enos，A.P.和N.R.Morris，Cell 601019-1027，1990)和粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)(Hagan，I.和M.Yanagida，Nature 347563-566，1990)中心体分离失败。用能在蛋白质水平降低KSP表达的ATRA(全反式视黄酸)或用反义寡核苷酸除去KSP显示能显著抑制DAN-G胰腺癌细胞生长，这说明KSP可能参与全反式视黄酸的抗增殖作用(Kaiser，A.等，J.Biol.Chem.274，18925-18931，1999)。有趣的是，非洲爪蟾(Xenopuslaevis)Aurora相关蛋白激酶pEg2显示关联并磷酸化XlEg5(Giet，R.等，J.Biol.Chem.27415005-15013，1999)。在癌症药物开发中尤其感兴趣的是Aurora相关激酶的潜在底物。例如，在结肠癌患者中Aurora 1和2激酶在蛋白质和RNA水平过表达且其基因被扩增。
第一种细胞可渗透的KSP小分子抑制剂“单星素”显示可阻止具有单极纺锤体的细胞，但不会像常规化疗剂如紫杉烷和长春花生物碱那样影响微管聚合(Mayer，T.U.等，Science 286971-974，1999)。在基于表型的筛选中单星素被鉴定为抑制剂，这说明这种化合物可引导抗癌药的发展。这种抑制作用被认为不会竞争三磷酸腺苷且能迅速逆转(DeBonis，S.等，Biochemistry 42338-349，2003；Kapoor，T.M.等，J.Cell Biol.150975-988，2000)。
就改进化学疗法的重要性而言，需要有在体内有效抑制KSP和KSP相关蛋白的KSP抑制剂。
发明概述本发明的化合物本发明涉及用式I表示的取代的喹啉化合物 其中m是0-3的整数；R1选自酰氨基、羧基酯和任选被羟基或卤素取代的C1-C5烷基；R2是氢或C1-C5烷基；R3是-C(＝X)-A，其中A选自芳基、杂芳基、杂环基和环烷基，所有这些基团都可任选被1-4个选自以下的取代基取代C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、卤素、羟基和硝基，且X是氧或硫；R4是-亚烷基-杂环基或-亚烷基-NR7R8，其中的亚烷基是C1-C4直链亚烷基；R7和R8独立选自氢、C1-C4烷基、芳基烷基、杂芳基烷基、环烷基和环烷基烷基；
R5选自L-A1，其中的A选自芳基、杂芳基、杂环基和环烷基，所有这些基团都可任选被1-4个选自以下的取代基取代C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、卤素、羟基和硝基，且其中的L选自氧，-NR9，其中R9是氢或烷基，-S(O)q-，其中q是0、1或2，和任选被羟基、卤素或酰氨基取代的C1-C5亚烷基；和R6选自C1-C5烷基、C2-C5烯基、C2-C5炔基、-CF3、C1-C5烷氧基、卤素和羟基；或其药学上可接受的盐、酯或前药。
在另一优选实施方案中，本发明的化合物用式II表示 其中A2和A3独立选自芳基、杂芳基、杂环基和环烷基，所有这些基团都可任选被1-4个选自以下的取代基取代C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、卤素、羟基和硝基；各R6独立选自C1-C5烷基、C2-C5烯基、C2-C5炔基、-CF3、C1-C5烷氧基、卤素和羟基；R11是C2-C3烷基；R12和R13独立选自氢、C1-C4烷基、芳基烷基、杂芳基烷基、环烷基和环烷基烷基；m是0-3的整数；n是1-3的整数；和p是1-4的整数；或其药学上可接受的盐、酯和前药。
再在一优选实施方案中，本发明的化合物用式III表示
其中A2和A3独立选自芳基、杂芳基、杂环基和环烷基，所有这些基团都可任选被1-4个选自以下的取代基取代C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、卤素、羟基和硝基；R12和R13独立选自氢、C1-C4烷基、芳基烷基、杂芳基烷基、环烷基和环烷基烷基；p是1-4的整数；或其药学上可接受的盐、酯和前药。
优选实施方案在式I的化合物中，优选地，R1是C1-C5烷基，且更优选R1是异丙基或叔丁基。
在式I的化合物中，优选R2是氢或甲基。
在式I的化合物中，优选X是氧。在式I、II和III的化合物中，优选A是芳基，且更优选A是苯基或萘基。在其它式I、II和III的化合物中，优选A是杂芳基，且更优选A选自吡啶基、咪唑基、呋喃基、吡唑基和噻唑基。再在其它式I、II和III的化合物中，优选A是环烷基，且更优选A是环己基。
优选地，A被1-4个选自以下的取代基取代氯、甲基、溴、氟、硝基、-CF3、甲氧基和叔丁基。
再优选地，-C(O)-A选自(2-氯-6-甲基吡啶-4-基)羰基；(5-甲基咪唑-4-基)羰基；(萘-2-基)羰基；(吡啶-3-基)羰基；(吡啶-4-基)羰基；3，4-二氟苯甲酰基；3，4-二甲基苯甲酰基；3，5-二甲基吡唑-3-基羰基；2-(3-氨基丙酰胺(propanamido))-4-甲基苯甲酰基；2，4-二氟苯甲酰基；2，6-二氟苯甲酰基；2-氯苯甲酰基；2-氯吡啶-3-基羰基；
2-氯吡啶-5-基羰基；2-氟苯甲酰基；2-甲氧基苯甲酰基；3，4-二氯苯甲酰基；3-氯苯甲酰基；3-氟-4-甲基苯甲酰基；4-溴苯甲酰基；4-氯苯甲酰基；4-羟基苯甲酰基；4-甲氧基苯甲酰基；4-甲基-3-氟苯甲酰基；4-甲基苯甲酰基；4-硝基苯甲酰基；4-叔丁基苯甲酰基；4-三氟甲基苯甲酰基；苯甲酰基；环己基羰基；呋喃-3-基羰基；吡啶-2-基羰基；和噻唑-4-基羰基。
最优选地，-C(O)-A选自4-甲基-3-氟苯甲酰基、4-甲基苯甲酰基和3，4-二甲基苯甲酰基。
一实施方案中，A3选自4-甲基-3-氟苯基、4-甲基苯基和3，4-二甲基苯基。
在一优选的实施方案中，R4选自3-(苄基氨基)丙基；3-(环丁基氨基)丙基；3-(环己基甲基氨基)丙基；3-(二乙基氨基)丙基；3-(异丙基氨基)丙基；3-[(3-三氟甲基吡啶-6-基)氨基]丙基；3-氨基丙基；
2-氨基乙基；哌啶-3-基甲基；和吡咯烷-3-基甲基。
在其它实施方案中，R4是3-氨基丙基。
一些实施方案中，R5是亚烷基-A1，且A1是芳基。再在其它实施方案中，R5是苄基。
优选地，R5选自苄基；2-甲基苄基；3，5-二氟苄基；3-乙酰氨基苄基；3-氟苄基；3-羟基苄基；4-氯苄基；4-二氟苄基；和4-甲基苄基。
在式I、II和III的化合物中，优选地，R6选自氢；氟；氯；甲基；溴；乙基；乙烯基；甲氧基；苯基；乙炔基；和-CF3。
在式II的化合物中，优选的实施方案包括，m是1，n是1，R11是异丙基，p是3，R12和R13是氢，A2是苯基，且A3是被C1-C4烷基和/或卤素取代的芳基。
In式II的化合物I，优选的实施方案包括，A2是苯基，A3芳基被C1-C4烷基和/或卤素取代，p是3，且R12和R13是氢。
本发明的取代的喹啉衍生物的例子如下表1所示。
表1
本发明范围内的具体化合物的例子如下N-(3-氨基丙基)-N-[1-(3-苄基喹啉-2-基)-2-甲基丙基]-3-氟-4-甲基苯甲酰胺；N-(3-氨基丙基)-N-[1-(3-苄基喹啉-2-基)-2-甲基丙基]-4-甲基苯甲酰胺；N-(3-氨基丙基)-N-[1-(3-苄基喹啉-2-基)-2-甲基丙基]-3，4-二甲基苯甲酰胺；N-(3-氨基丙基)-N-[1-(3-苄基-7-氯喹啉-2-基)-2-甲基丙基]-4-甲基苯甲酰胺；N-(3-氨基丙基)-N-[1-(3-苄基-7-氯喹啉-2-基)-2-甲基丙基]-3-氟-4-甲基苯甲酰胺；和其药学上可接受的盐、酯和前药。
本发明的方法和组合物还提供了含有式I、II和/或III的化合物(包括其混合物)和药学上可接受的赋形剂或运载体的组合物。
另一方面，本发明提供了治疗患有至少部分由KSP介导的疾病的哺乳动物患者的方法。因此，本发明提供了治疗需要这种治疗的哺乳动物患者的方法，所述方法包括单独给予或与其它抗癌药联合给予该患者治疗有效量的式I、II和/或III的化合物(包括其混合物)。
发明详述定义如上所述，本发明涉及新的取代的喹啉化合物。
应理解，这里使用的术语仅是为了描述特定实施方案而不是要限制本发明的范围。必需注意的是，除非文中有明确说明，单数形式“一个”、“一种”和“这种”在说明书和权利要求书中包括其复数形式。在该说明书和其后的权利要求书中所提及术语的定义如下除非另有定义，“烷基”指含有1-5个碳原子、更优选为1-3个碳原子的单价饱和脂肪烃基。该术语的例子有甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、正戊基等。
“取代的烷基”指含有1-3个、优选1-2个选自以下的取代基的烷基烷氧基、取代的烷氧基、酰基、酰氨基、酰氧基、氨基、取代的氨基、氨基酰基、芳基、取代的芳基、芳氧基、取代的芳氧基、氰基、卤素、羟基、硝基、羧基、羧基酯、环烷基、取代的环烷基、螺环烷基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环基和取代的杂环基。
“亚烷基”指优选含有1-5个、更优选1-3个碳原子的直链或支链二价饱和脂肪烃基。该术语的例子有亚甲基(-CH2-)，亚乙基(-CH2CH2-)，正亚丙基(-CH2CH2CH2-)，异亚丙基(-CH2CH(CH3)-)等。
除非另有定义，“烷氧基”指基团“烷基-O-”，例如，其包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、叔丁氧基、仲丁氧基、正戊氧基等。
“取代的烷氧基”指基团“取代的烷基-O-”。
“酰基”指基团H-C(O)-、烷基-C(O)-、取代的烷基-C(O)-、烯基-C(O)-、取代的烯基-C(O)-、炔基-C(O)-、取代的炔基-C(O)-环烷基-C(O)-、取代的环烷基-C(O)-、芳基-C(O)-、取代的芳基-C(O)-、杂芳基-C(O)-、取代的杂芳基-C(O)-、杂环基-C(O)-和取代的杂环基-C(O)-，其中，烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、环烷基、取代的环烷基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环基和取代的杂环基如本文所定义。
“氨基酰基”指基团-C(O)NR10R10，其中各R10独立选自氢、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、芳基、取代的芳基、环烷基、取代的环烷基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环基、取代的杂环基，且其中各R10与氮原子一起形成杂环基或取代的杂环基环，其中的烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、环烷基、取代的环烷基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环基和取代的杂环基如本文所定义。
“酰氧基”指基团烷基-C(O)O-、取代的烷基-C(O)O-、烯基-C(O)O-、取代的烯基-C(O)O-、炔基-C(O)O-、取代的炔基-C(O)O-、芳基-C(O)O-、取代的芳基-C(O)O-、环烷基-C(O)O-、取代的环烷基-C(O)O-、杂芳基-C(O)O-、取代的杂芳基-C(O)O-、杂环基-C(O)O-、和取代的杂环基-C(O)O-，其中的烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、环烷基、取代的环烷基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环基和取代的杂环基如本文所定义。
“烯基”指含有2-6个碳原子、优选2-4个碳原子并含有至少1个、优选1-2个烯基不饱和位点的烯基。这种基团的例子有乙烯基、烯丙基、丁-3-烯-1-基等。
“取代的烯基”指含有1-3个取代基、优选1-2个取代基的烯基，所述取代基选自烷氧基、取代的烷氧基、酰基、酰氨基、酰氧基、氨基、取代的氨基、氨基酰基、芳基、取代的芳基、芳氧基、取代的芳氧基、氰基、卤素、羟基、硝基、羧基、羧基酯、环烷基、取代的环烷基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环基和取代的杂环基，条件是任何羟基取代基都不连接到乙烯基(不饱和的)碳原子上。
“炔基”指含有2-6个碳原子、优选2-3个碳原子并含有至少1个、优选1-2个炔基不饱和位点的炔基。
“取代的炔基”指含有1-3个取代基、优选1-2个取代基的炔基，所述取代基选自烷氧基、取代的烷氧基、酰基、酰氨基、酰氧基、氨基、取代的氨基、氨基酰基、芳基、取代的芳基、芳氧基、取代的芳氧基、氰基、卤素、羟基、硝基、羧基、羧基酯、环烷基、取代的环烷基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环基和取代的杂环基。
“氨基”指基团-NH2。
“氰基”指基团-CN。
“取代的氨基”指基团-NR14R15，其中R14和R15独立选自氢、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、芳基、取代的芳基、环烷基、取代的环烷基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环基、取代的杂环基，且R14和R15可与氮原子结合在一起形成杂环基或取代的杂环基，前提是R14和R15都不是氢。当R14是氢，R15是烷基时，取代的氨基在文中有时被称为烷基氨基。当R14和R15都是烷基时，取代的氨基在文中有时被称为二烷基氨基。当提及单取代的氨基时是指R14或R15之一是氢，但不都是氢。当提及双取代的氨基时是指R14或R15都不是氢。
“酰氨基”指基团-NR16C(O)烷基、-NR16C(O)取代的烷基、-NR16C(O)环烷基、-NR16C(O)取代的环烷基、-NR16C(O)烯基、-NR16C(O)取代的烯基、-NR16C(O)炔基、-NR16C(O)取代的炔基、-NR16C(O)芳基、-NR16C(O)取代的芳基、-NR16C(O)杂芳基、-NR16C(O)取代的杂芳基、-NR16C(O)杂环基和-NR16C(O)取代的杂环基，其中R16是氢或烷基，且其中的烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、环烷基、取代的环烷基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环基和取代的杂环基如本文所定义。
“硝基”指基团-NO2。
“芳基”或“Ar”指含有单环(如苯基)或多个稠环(如萘基或蒽基)的6-14个碳原子的一价芳族碳环基团，其中的稠环可以是或不是芳族的(例如，2-苯并唑啉酮，2H-1，4-苯并嗪-3(4H)-酮-7-基等)，只要连接点位于芳族碳原子即可。优选的芳基包括苯基和萘基。
“取代的芳基”指被1-3个取代基、优选1-2个取代基取代的芳基，所述取代基选自羟基、酰基、酰氨基、酰氧基、烷基、取代的烷基、烷氧基、取代的烷氧基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、氨基、取代的氨基、氨基酰基、芳基、取代的芳基、芳氧基、取代的芳氧基、羧基、羧基酯、氰基、硫醇、烷基硫代、取代的烷基硫代、芳基硫代、取代的芳基硫代、杂芳基硫代、取代的杂芳基硫代、环烷基硫代、取代的环烷基硫代、杂环基硫代、取代的杂环基硫代、环烷基、取代的环烷基、环烷氧基、取代的环烷氧基、卤素、硝基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环基、取代的杂环基、杂芳氧基、取代的杂芳氧基、杂环氧基、取代的杂环氧基、氨基磺酰基(NH2-SO2-)和取代的氨基磺酰基。
“芳氧基”指基团芳基-O-，其包括，例如，苯氧基、萘氧基等。
“取代的芳氧基”指取代的芳基-O-基团。
“羧基”指-COOH或其盐。
“羧基酯”指基团-C(O)O-烷基、-C(O)O-取代的烷基、-C(O)O-芳基和-C(O)O-取代的芳基，其中的烷基、取代的烷基、芳基和取代的芳基如本文所定义。
“环烷基”指含有单个或多个环的3-10个碳原子的环烷基，包括例如金刚烷基、环丙基、环丁基、环戊基、环辛基等。
“螺环烷基”指含有具有螺连接点(由一个原子形成的连接点，该原子是环的唯一共用成员)的环烷基环的3-10个碳原子的环状基团，其例子如下
“取代的环烷基”和“取代的环烯基”指含有1-5个取代基的环烷基或环烯基，所述取代基选自氧代(＝O)、硫代(＝S)、烷基、取代的烷基、烷氧基、取代的烷氧基、酰基、酰氨基、酰氧基、氨基、取代的氨基、氨基酰基、芳基、取代的芳基、芳氧基、取代的芳氧基、氰基、卤素、羟基、硝基、羧基、羧基酯、环烷基、取代的环烷基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环基和取代的杂环基。
“环烷氧基”指-O-环烷基。
“取代的环烷氧基”指-O-取代的环烷基。
“卤素”指氟、氯、溴和碘，优选氟或氯。
“羟基”指基团-OH。
“杂芳基”指含有1-10个碳原子并在环内有1-4个选自氧、氮和硫的杂原子的芳基。这种杂芳基可以含有单环(例如，吡啶基或呋喃基)或多个稠环(例如，吲哚嗪基或苯并噻吩基)，其中的稠环可以是或不是芳族的和/或含有一个杂原子，只要其连接点通过芳族杂芳基的原子即可。优选的杂芳基包括吡啶基、吡咯基、吲哚基、苯硫基和呋喃基。
“取代的杂芳基”指被1-3个取代基取代的杂芳基，所述取代基选自与取代的芳基所定义的相同的取代基。
“杂芳氧基”指基团-O-杂芳基，“取代的杂芳氧基”指基团-O-取代的杂芳基。
“杂环”或“杂环基”或“杂环烷基”或“杂环基”指含有单环或多个稠环的有1-10个碳原子并在环内含有1-4个选自氮、硫或氧的杂原子的饱和或不饱和基团，其中，稠环系统内的一个或多个环可以是环烷基、芳基或杂芳基，只要其连接点通过杂环基环即可。
“取代的杂环”或“取代的杂环烷基”或“取代的杂环基”指被1-3个与取代的环烷基所定义的相同的取代基取代的杂环基。
杂环基和杂芳基的例子包括但不限于氮杂环丁烷、吡咯、咪唑、吡唑、吡啶、吡嗪、嘧啶、哒嗪、吲哚嗪、异吲哚、吲哚、二氢吲哚、吲唑、嘌呤、喹嗪、异喹啉、喹啉、酞嗪、萘基吡啶、喹喔啉、喹唑啉、噌啉、蝶啶、咔唑、咔啉、菲啶、吖啶、菲咯啉、异噻唑、吩嗪、异唑、吩嗪、吩噻嗪、咪唑烷、咪唑啉、哌啶、哌嗪、二氢吲哚、邻苯二甲酰亚胺、1，2，3，4-四氢-异喹啉、4，5，6，7-四氢苯并[b]噻吩、噻唑、噻唑烷、噻吩、苯并[b]噻吩、吗啉基、硫代吗啉基(也称为硫吗啉基)、哌啶基、吡咯烷、四氢呋喃基等。
“硫醇”指基团-SH。
“烷基硫代”或“烷基硫醚”或“硫代烷氧基”指基团-S-烷基。
“取代的烷基硫代”或“取代的烷基硫醚”或“取代的硫代烷氧基”指基团-S-取代的烷基。
“芳基硫代”指基团-S-芳基，其中的芳基如上文所定义。
“取代的芳基硫代”指基团-S-取代的芳基，其中的取代的芳基如上文所定义。
“杂芳基硫代”指基团-S-杂芳基，其中的杂芳基如上文所定义。
“取代的杂芳基硫代”指基团-S-取代的杂芳基，其中的取代的杂芳基硫代如上文所定义。
“杂环基硫代”指基团-S-杂环基和“取代的杂环基硫代”指基团-S-取代的杂环基，其中的杂环基和取代的杂环基。
“杂环氧基”指基团杂环基-O-，“取代的杂环基-O-”指基团取代的杂环基-O-，其中的杂环基和取代的杂环基如上文所定义。
“环烷基硫代”指基团-S-环烷基，“取代的环烷基硫代”指基团-S-取代的环烷基，其中的环烷基和取代的环烷基如上文所定义。
“芳基烷基”指被芳基取代的烷基，其中的烷基和芳基如上文定义。该基团也可称为-亚烷基-芳基。
“杂芳基烷基”指被杂芳基取代的烷基，其中的烷基和杂芳基如上文定义。该基团也可称为-亚烷基-杂芳基。
“环烷基烷基”指被环烷基取代的烷基，其中的烷基和环烷基如上文定义。
“生物活性”在这里指在至少一种实施例3所列试验中测得的抑制浓度。
术语“药学上可接受的盐”在这里指式I、II和/或III的化合物的无毒的酸盐或碱土金属盐。这些盐可在式I、II和/或III的化合物最终的分离和纯化步骤中原位制备，或使碱或酸官能团分别与合适的有机或无机酸或碱单独反应。代表性的盐包括但不限于乙酸盐、乙二酸盐、藻酸盐、柠檬酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、硫酸氢盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、二葡糖酸盐、环戊烷丙酸盐、十二烷基硫酸盐、乙磺酸盐、葡庚糖酸盐、甘油磷酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、延胡索酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、2-羟基乙磺酸盐、乳酸盐、马来酸盐、甲磺酸盐、烟酸盐、2-萘磺酸盐、草酸盐、双羟萘酸盐、果胶盐(pectinate)、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、苦味酸盐、特戊酸盐、丙酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、对甲苯磺酸盐和十一烷酸盐。同时，碱性含氮基团可被以下试剂季铵化，如烷基卤化物，例如甲基、乙基、丙基和丁基氯化物、溴化物和碘化物；二烷基硫酸盐，如二甲基、二乙基、二丁基和二戊基硫酸盐；长链卤化物，如癸基、月桂基、肉豆寇基和硬脂基氯化物、溴化物和碘化物；芳烷基卤化物，如苄基和苯乙基溴化物，等等。从而可获得水溶性或油溶性、或水或油可分散的产品。
可用来形成药学上可接受的酸加成盐的酸的例子包括无机酸，如盐酸、硫酸和磷酸，以及有机酸，如草酸、马来酸、甲磺酸、琥珀酸和柠檬酸。
碱加成盐可在式I、II和/或III的化合物最终的分离和纯化步骤中原位制备，或使羧酸部分与合适的碱(如药学上可接受的金属阳离子的氢氧化物、碳酸盐或碳酸氢盐)或与氨或有机伯、仲、叔胺反应来单独制备。药学上可接受的盐包括，但不限于，基于碱金属或碱土金属的阳离子，如钠、锂、钾、钙、镁、铝盐等，以及无毒的铵、季铵和胺阳离子，包括，但不限于，铵、四甲基铵、四乙基铵、甲胺、二甲胺、三甲胺、三乙胺、乙胺等。用来形成碱加成盐的其它代表性的有机胺包括二乙胺、乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、哌嗪等。
术语“药学上可接受的酯”在这里指可在体内水解的酯，并包括那些在人体内崩解以释放亲本化合物或其盐的酯。合适的酯基团包括，例如，衍生自药学上可接受的脂肪族羧酸，尤其是链烷酸，链烯酸、环烷酸和二元烷酸的那些，其中各烷基或烯基部分宜含有不超过6个碳原子。特定的酯的代表性的例子包括但不限于甲酸酯、乙酸酯、丙酸酯、丁酸酯、丙烯酸酯和琥珀酸乙酯。
术语“药学上可接受的前药”在这里是指本发明化合物的前药，根据严格的医药标准，这些前药适合与人和低等动物的组织接触使用，不具有毒性、刺激性、过敏性反应，等等，有合理的利益/风险比，且对于它们的与其用途是有效的，并且，如果可能的话，还包括本发明化合物的两性离子形式。术语″前药″是指在体内迅速转化(如通过在血液中水解)形成具有上述通式的母体化合物的化合物。关于前药的详细叙述提供在T.Higuchi和V.Stella，“作为新型输递系统的前药”(Pro-drugs as NovelDelivery Systems)，A.C.S.Symposium Series第14卷，以及Edward B.Roche编写的“药物设计中的生物可逆运载体”(Bioreversible Carriers in Drug Design)，AmericanPharmaceutical Association，Pergamon Press，1987，这两种文献都本纳入本文作为参考。
“抗癌药”或“治疗癌症的药剂”在这里指一些药剂，它包括，例如，诱导凋亡的药剂；多核苷酸(例如，核酶)；多肽(例如，酶)；药物；生物模拟物；生物碱类；烷基化剂；抗肿瘤抗生素；抗代谢物；激素；铂化合物；与抗癌药、毒素和/或放射性核素偶联的单克隆抗体；生物应答修饰剂(例如干扰素和白细胞介素等)；过继免疫治疗药；造血生长因子；诱导肿瘤细胞分化的试剂(例如，全反式视黄酸等)；基因治疗剂；反义治疗剂和核苷；肿瘤疫苗；血管发生抑制剂等。精通本领域的技术人员还熟知许多其它试剂。
应理解，在上面定义的所有取代基中，不包括用取代基进一步取代其自身得到的聚合物(例如，具有取代的芳基作为取代基的取代的芳基，即其自身被取代的芳基取代，等等)。此时，这种取代基的最大取代数是3。这就是说，上面的每个定义都是有限制的，例如，取代的芳基仅限于-取代的芳基-(取代的芳基)-取代的芳基。
类似地，应理解上述定义不包括不允许的取代模式(例如，被5个氟基取代的甲基，或者烯式或炔式不饱和的α羟基)。这种不允许的取代模式是熟练技术人员熟知的。
由于化合物中存在一个或多个不对称或手性中心，本发明的化合物可具有立体异构现象。本发明考虑了各种立体异构体及其混合物。本发明的某些化合物含有不对称取代的碳原子。这种不对称取代的碳原子可使本发明的化合物含有在特定的不对称取代的碳原子上的立体异构体的混合物或单个的立体异构体。其结果是，本发明包括外消旋混合物、非对映体的混合物以及本发明化合物的单个非对映体。术语“S”和“R”构型在这里是通过IUPAC 1974“基础立体化学E部分的推荐”(RECOMMENDATIONS FORSECTIONE，FUNDAMENTALSTEREOCHEMISTRY)，Pure Appl.Chem.4513-30，1976定义的。所需对映体可通过手性合成采用本领域熟知的方法从市售的手性原料获得，或者可采用已知技术从对映体混合物分离所需对映体而获得。
本发明的化合物也可具有几何异构现象。几何异构体包括具有烯基或炔基部分的本发明化合物的顺式和反式形式。本发明包括单独的几何异构体和立体异构体以及它们的混合物。
化合物的制备本发明的化合物可用以下常规方法和过程从容易获得的原料制备。应该理解，这里给出的是常规或优选的加工条件(即反应温度、时间、反应物的摩尔比、溶剂、压力)，除非另有说明也可采用其它加工条件。根据所使用的聚体反应物或溶剂，最佳反应条件是可变的，但这种条件可由精通本领域的技术人员通过常规优化过程确定。
此外，精通本领域的技术人员显然应该知道，可能需要常规的保护基以防止某些官能团发生不需要的反应。各种官能团的合适保护基以及合适的保护和去保护条件是本领域熟知的。例如，T.W.Greene和P.G.M.Wuts的《有机合成保护基》(ProtectingGroups in Organic Synthesis，第二版，Wiley，New York，1991)一书及其中列出的参考资料中描述了许多保护基。
通过以下合成方案能更好地理解本发明的化合物，这些方案例举了合成本发明化合物的方法。除非另有说明，以下实施例中所用的试剂可通过商业获得，并且可购自诸如Sigma-Aldrich Company，Inc.(Milwaukee，WI，USA)的供应商。
本发明的化合物可按照下述方案1合成。
方案1 R1、R4、R5、R6、m和A如上文定义。
各PG独立表示氨基保护基，如邻苯二酰胺。
具体地说，在方案1中，在甲乙酮、丙酮等合适的惰性溶剂中将适当取代的氯喹啉衍生物1a与过量碘化钠(通常约2-20当量，优选约10当量)混合。然后加入过量氢碘酸。一实施方案中，所得混合物先在约50-80℃加热，并优选回流约2-12小时，然后将反应在室温维持约12-24小时。反应基本结束后可通过常规方法如沉淀、过滤、蒸发、结晶、层析等回收并任选纯化所得碘代喹啉衍生物1b。或者，化合物1b无需纯化和/或分离便可直接用于下面的步骤。
然后边搅拌边将碘代喹啉衍生物1b溶于合适溶剂，如四氢呋喃、甘醇二甲醚等，同时维持溶液温度在约-50至约-80℃。在此温度继续搅拌约0.1-1小时，然后在此溶液中加入过量(例如3当量)有机氯化镁(化合物1c)。化合物1c的加入在较长时间如1小时进行。然后在反应混合物中加入与有机氯化镁相对应的醛化合物1c’并使所得混合物在约1小时内温热至室温。所得醇1d可通过常规方法如沉淀、过滤、蒸发、结晶、层析等回收。或者，化合物1d无需纯化和/或分离可直接用于下面的步骤。
使醇1d与过量的(例如约3当量)合适的胺保护基如邻苯二甲酰亚胺反应制备保护的胺1e。然后在反应物中加入过量三苯基膦和重氮基二羧酸二异丙酯(DIAD)并将反应维持在约-20至约10℃。使反应物温热至室温并使其继续反应直到基本完成，这通常要2-24小时。然后通过常规方法如沉淀、过滤、蒸发、结晶、层析等回收并任选纯化所得保护的胺1e。或者，化合物1e无需纯化和/或分离可直接用于下面的步骤。
然后通过常规技术除去保护基以提供胺1f，然后通过常规方法如沉淀、过滤、蒸发、结晶、层析等将其回收并任选纯化。或者，化合物1f无需纯化和/或分离可直接用于下面的步骤。
使胺1f在常规的还原性氨化条件下与醛1g反应得到取代的胺1h，然后通过常规方法如沉淀、过滤、蒸发、结晶、层析等将其回收并任选纯化。或者，化合物1h无需纯化和/或分离可直接用于下面的步骤。
然后在常规酰胺化条件下使取代的胺1h与酰氯1i反应。可通过常规方法除去所得酰胺产物1j上残留的任何保护基，并可通过常规方法如沉淀、过滤、蒸发、结晶、层析等回收和纯化产物。
喹啉化合物1a可通过商业获得或者可如下面的方案2所示从适当取代的苯胺化合物制备，其中，仅出于举例的目的，m是1且R6是氯。
方案2 R5和R6如上文定义具体地说，在方案2中，在常规条件下用略过量(约10％)的3-取代的丙酰氯2b将市售苯胺(化合物2a)酰胺化以得到酰胺2c，然后通过常规方法如沉淀、过滤、蒸发、结晶、层析等将其回收和纯化。然后将过量的三氯氧化磷(phosphorousoxytrichloride)和1-2当量二甲基甲酰胺(DMF)搅拌约1小时，同时将反应物维持在约-20至约10℃的温度下。然后边搅拌边加入酰胺2c并使反应物回复室温，然后加热至约60至约90℃并继续反应直到反应基本结束，这通常需要2-24小时。
然后通过常规方法如沉淀、过滤、蒸发、结晶、层析等回收并任选纯化所得保护的喹啉2d。或者，化合物2d无需纯化和/或分离可直接用于下面的步骤。
药物制剂当用作药物时，本发明的化合物通常以药物组合物的形式给予。这些化合物可通过各种途径给予，其中包括口服、肠胃外、透皮、局部、直肠和鼻内。这些化合物作为可注射组合物和口服组合物都是有效的。这种组合物可以用制药领域熟知的方法制备，并含有至少一种活性化合物。
本发明还包括药物组合物，所述药物组合物含有一种或多种上述本发明的化合物作为活性成分，并含有药学上可接受的运载体。在制造本发明的组合物时，通常将活性成分与赋形剂混合、用赋形剂稀释或者包装入胶囊、小袋、纸或其它容器形式的运载体内。所用赋形剂通常是适合给予人类对象或者其它哺乳动物的赋形剂。当赋形剂作为稀释剂时，它可以是作为活性成分的载体、运载体或介质的固体、半固体或液体物质。因此，所述组合物可以是片剂、丸剂、粉末、锭剂、小袋、扁囊剂、酏剂、悬浮剂、乳剂、溶液剂、糖浆剂、气雾剂(作为固体或在液体介质中)、含有例如最多10重量％活性化合物的软膏剂、软和硬明胶胶囊、栓剂、无菌可注射溶液和无菌封装粉末。
在制剂的制备中，可能需要研磨活性化合物以提供合适的粒度，然后再与其它成分混合。如果活性化合物基本不溶，则通常将其研磨到粒度小于200目。如果活性化合物基本是水溶性的，则通常研磨到能使其基本均匀分布在制剂中的粒度，例如约40目。
合适赋形剂的一些例子包括乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、淀粉、阿拉伯胶、磷酸钙、藻酸盐、黄蓍胶、明胶、硅酸钙、微晶纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、纤维素、无菌水、糖浆和甲基纤维素。所述制剂还可含有润滑剂如滑石，硬脂酸镁和矿物油、湿润剂、乳化剂和悬浮剂、防腐剂如苯甲酸甲酯和羟苯甲酸丙酯、甜味剂和调味剂。可采用本领域一致的方法将本发明的组合物制成在给予患者后立即、持续或延迟释放活性成分的形式。
药物组合物及其单位剂型中活性组分即本发明化合物的量可根据具体用途、具体化合物的功效以及所需浓度而变化或调节。
组合物宜被制成单位剂型，各剂量中含有约1-500mg，通常约5-100mg，有时为约10-30mg活性成分。术语“单位剂型”指适合作为人类对象和其它哺乳动物一次剂量的物理离散单位，各单位含有经计算能产生所需疗效的预定量的化学物质以及合适的药物赋形剂。优选地，上述本发明化合物的用量不超过约20重量％药物组合物，更优选不超过约15重量％，余量为药物惰性运载体。
活性化合物在较宽剂量范围内有效并且通常以药物或治疗有效量给予。然而应该理解，实际给予的化合物的量将由医生根据有关情况而确定，其中包括要治疗的症状、要治疗症状的严重性、选择的给药途径、实际给予的化合物、个体患者的年龄、体重和反应、患者症状的严重性等。
在治疗或遏制温血动物体内的癌症的治疗应用中，所述化合物或其药物组合物可通过任何合适途径给予，如经口、局部、透皮和/或肠胃外给予，其剂量应达到并维持在接受治疗的动物中将产生治疗效果的活性组分的浓度(即，量)或血液水平。活性组分的这种治疗有效剂量(即有效剂量)通常为每千克体重约5微克至约50毫克，更优选每天每千克体重约1.0-50毫克。
为制造片剂等固体组合物，将主要活性成分与药物赋形剂混合以形成含有本发明化合物均匀混合物的固体预制组合物。当称这些预制组合物为均匀时是指活性成分均匀分散在整个组合物中从而容易将组合物再分成相同有效的单位剂型，如片剂、丸剂和胶囊。然后将这种固体预制剂再分成上述类型的单位剂型，其中含有例如约0.1-500mg本发明的活性成分。
本发明的片剂或丸剂可被包衣或复合以提供能持续起作用的剂型。例如，片剂或丸剂可包含内部剂量组分和外部剂量组分，后者作为前者的外壳。可通过在胃中抗崩解并允许内部组分完整通过十二指肠或延迟释放的肠衣层分离这两种组分。许多材料可用作这种肠衣层或包衣，这种材料包括多种聚合酸以及聚合酸与虫胶、鲸蜡醇和乙酸纤维素等物质的混合物。
可在其中掺入本发明组合物供口服或注射给药的液体形式包括水性溶液、适当调味的糖浆、水性或油性悬液，和含有食用油如玉米油、棉籽油、芝麻油、椰子油或花生油以及酏剂和类似药物载体的调味乳剂。
供吸入或吹入的组合物包括含在药学上可接受的水性或有机溶剂或其混合物中的溶液和悬液，还包括粉末。所述液体或固体组合物可含有如上所述的合适的药学上可接受的赋形剂。优选该组合物通过口或鼻呼吸道给予以产生局部或全身效果。含在优选的药学上可接受的溶剂内的组合物可用惰性气体雾化。可从雾化装置直接吸入雾化的溶液或者可将雾化装置连接到面罩或间歇式正压呼吸机上。优选从以适当方式输送制剂的装置经口或经鼻给予溶液、悬液或粉末组合物。
以下制剂实施例例举了本发明的代表性药物组合物。
制剂实施例1制备了含以下成分的硬明胶胶囊成分含量(mg/胶囊)活性成分30.0淀粉305.0硬脂酸镁5.0将上述成分混合并填入硬明胶胶囊，填入量为340mg。
制剂实施例2用以下成分制备片剂制剂成分含量(mg/片)活性成分25.0微晶纤维素 200.0
胶体二氧化硅 10.0硬脂酸5.0将各组分混合并压制形成片剂，每片重240mg。
制剂实施例3制备了含以下组分的干粉吸入制剂成分 重量％活性成分 5乳糖 95将活性成分与乳糖混合，并将混合物加入干粉吸入器。
制剂实施例4如下制备每片含有30mg活性成分的片剂成分 含量(mg/片)活性成分 30.0mg淀粉 45.0mg微晶纤维素 35.0mg聚乙烯吡咯烷酮 4.0mg(用无菌水制成10％的溶液)羧甲基淀粉钠 4.5mg硬脂酸镁 0.5mg滑石 1.0mg总计 120mg将活性成分、淀粉和纤维素通过20目美国标准筛(U.S.sieve)，并充分混合。所得粉末与聚乙烯吡咯烷酮溶液混合，然后使其通过16目美国标准筛。如此制得的颗粒在50-60℃干燥并通过16目美国标准筛。使羧甲基淀粉钠、硬脂酸镁和滑石先通过30目美国标准筛，然后加入颗粒中，混合后用压片机压制以形成每片重120mg的药片。
制剂实施例5如下制备每颗含40mg药物的胶囊成分含量(mg/胶囊)活性成分40.0mg淀粉109.0mg硬脂酸镁1.0mg总计150.0mg
将活性成分、淀粉和硬脂酸镁混合，通过20目美国标准筛，并填入硬明胶胶囊，填入量为150mg。
制剂实施例6如下制备每个含25mg活性成分的栓剂成分含量活性成分25mg饱和脂肪酸甘油酯至2000mg将活性成分通过60目美国标准筛并悬浮于用最小需要热预先熔化的饱和脂肪酸甘油酯。然后将混合物倒入标称容量为2.0克的栓剂模并使其冷却。
制剂实施例7如下制备每5.0ml含50mg药物的悬液成分含量活性成分50.0mg黄原胶 4.0mg羧甲基纤维素钠(11％)50.0mg微晶纤维素(89％)蔗糖1.75g苯甲酸钠10.0mg调味料和色素适量纯水至5.0ml将活性成分、蔗糖和黄原胶混合，通过10目美国标准筛，然后与预先制备的微晶纤维素和羧甲基纤维素钠的水溶液混合。边搅拌边加入用一些水稀释的苯甲酸钠、调味料和色素。然后加入足量的水至所需体积。
制剂实施例8成分含量(mg/胶囊)活性成分15.0mg淀粉407.0mg硬脂酸镁3.0mg总计425.0mg将活性成分、淀粉和硬脂酸镁混合，通过20目美国标准筛，填入硬明胶胶囊，填入量为425.0mg。
制剂实施例9
可如下制备皮下制剂成分含量活性成分5.0mg玉米油 1.0ml制剂实施例10可如下制备局部制剂成分含量活性成分1-10g乳化蜡 30g液体石蜡20g白凡士林至100g将白凡士林加热至熔化。加入液体石蜡和乳化蜡并搅拌直至溶解。加入活性成分并继续搅拌直到其分散。然后使混合物冷却直到其成为固体。
制剂实施例11可如下制备静脉内制剂成分含量活性成分250mg等渗盐水1000ml用于本发明方法的其它优选制剂采用了透皮输递装置(“贴剂”)。这种透皮贴可用来以受控量连续或不连续输注本发明的化合物。运送药剂的透皮贴的结构和用途是本领域熟知的。见，例如，美国专利5023252，该专利被纳入本文作为参考。这种贴剂可被制成连续、脉动或按需递送药剂。
通常希望或需要将药物组合物直接或间接送入大脑。直接技术通常涉及将送药导管置入宿主的心室系统以便绕过血脑屏障。一种用于将生物因子运送到身体特定解剖区域的此类可植入送药系统描述于美国专利5011472，该专利被纳入本文作为参考。
间接技术通常是优选的，这种技术通常涉及通过将亲水药物转变成脂溶性药物而制成使药效潜伏化的组合物。潜伏化通常是通过封闭药物上存在的羟基、羰基、硫酸盐和伯胺基以使药物的脂溶性更强和能够通过血脑屏障而实现的。或者，可通过动脉内灌输能暂时打开血脑屏障的高渗溶液来增强亲水药物的递送。
在《雷明顿药物科学》(Remington′s Pharmaceutical Sciences，Mace PublishingCompany，Philadelphia，PA，第17版，1985)中能找到可用于本发明的其它合适制剂。
剂量和给药如上所述，这里所述的化合物适合用于上述各种药物递送系统。此外，为延长所施用化合物的体内血清半衰期，可将化合物包入胶囊、装入脂质体腔、制备成胶体，或者采用能延长化合物半衰期的其它常规技术。可用来制备脂质体的各种方法描述于，例如，Szoka等的美国专利4235871、4501728和4837028中，这些专利纳入本文作为参考。
本发明的化合物可用来抑制KSP驱动蛋白的活性。一方面，至少部分由KSP介导的疾病是细胞增生性疾病。术语“细胞增生性疾病”或“细胞增殖疾病”指包括例如癌症、肿瘤、增生、再狭窄、心脏肥大、免疫疾病和炎症在内的疾病。本发明提供了治疗需要这种治疗的人或动物对象的方法，该方法包括单独给予或与其它抗癌药联合给予所述对象治疗有效量的式I-III的化合物。
本发明的化合物被用于体外或体内抑制癌细胞生长。术语“癌”指癌症，其中包括，例如，肺和支气管癌；前列腺癌；乳腺癌；胰腺癌；结肠和直肠癌；甲状腺癌；胃癌；肝和肝内胆管癌；肾和肾盂癌；膀胱癌；子宫体癌；宫颈癌；卵巢癌；多发性骨髓瘤；食道癌；急性骨髓性白血病；慢性骨髓性白血病；淋巴细胞性白血病；髓细胞性白血病；脑癌；口腔和咽癌；喉癌；小肠癌；非霍奇金淋巴瘤；黑色素瘤；和绒毛结肠腺瘤。
癌还包括选自癌瘤、腺癌和肉瘤的肿瘤或新生物。
此外，癌的类型可选自生长的实体瘤/恶性肿瘤、粘液性癌和圆形细胞癌、局部发展的肿瘤、人软组织癌、癌症转移、鳞状细胞癌、食管鳞状细胞癌，口腔癌，皮肤T细胞淋巴瘤，霍奇金淋巴瘤，非霍奇金淋巴瘤，肾上腺皮质癌，ACTH造成的肿瘤，非小细胞癌、乳腺癌、胃肠癌、泌尿道癌，女性生殖道的恶性肿瘤、男性生殖道的恶性肿瘤、肾癌，脑癌、骨癌、皮肤癌、甲状腺癌、视网膜母细胞瘤、成神经细胞瘤、腹水、恶性肿瘤性胸腔积液、间皮瘤、维尔姆斯肿瘤、胆囊癌、滋养层细胞瘤、血管外皮细胞瘤和卡波西肉瘤。
本发明的化合物或组合物可通过合适途径如口服、静脉内、腹膜内、透皮、局部、直肠或鼻内给予哺乳动物。
哺乳动物包括，例如，人和其它灵长类，宠物或伙伴动物如狗和猫，实验动物如大鼠、小鼠和兔，以及农场动物如马、猪、羊和牛。
肿瘤或新生物包括增殖不受控且正在进行的组织细胞的生长。这种生长中的一些是良性的，但其它被称为“恶性的”并且会导致器官死亡。恶性新生物或“癌”不同于良性生长，它们除了显示出侵略性的细胞增殖还会侵入周围组织和转移。此外，恶性新生物的特征在于，相比其它组织和周围组织它们显示出分化(较多的“去分化”)和组构化极大受损。这种特性被称为“退行”。
需要的话可对具有所需生化活性的化合物进行修饰以提供所需特性，如改进的药理学特性(例如，体内稳定性、生物利用度)，或者能在诊断应用中被检测的能力。可用多种方法测定稳定性，如在与肽酶或者人血浆或血清培育期间测量化合物的半衰期。
出于诊断的目的，可在化合物上连接多种标记，这些标记可直接或间接提供可检测信号。因此可用不同方法修饰本发明的化合物和/或组合物以满足不同的最终目的，同时保留其生物活性。此外，可引入不同反应性位点以连接颗粒、固体物质、大分子等。
标记的化合物可用于各种体内或体外用途。可采用许多标记，如放射性核素(例如，发射γ射线的放射性同位素如锝-99或铟-111)、荧光剂(例如，荧光素)、酶、酶底物、酶辅因子、酶抑制剂、化学发光化合物、生物发光化合物等。本领域的一般技术人员将了解用来结合复合物的其它合适标记或者将能够通过常规实验得知。可用本领域的一般技术人员熟知的标准技术实现这些标记的结合。
本发明的药物组合物适用于多种药物递送系统。适用于本发明的制剂可在《雷明顿药物科学》(Mace Publishing Company，Philadelphia，PA，第17版，1985)中找到。
给予患者的量将取决于将给予的药物、给药目的(如预防或治疗)、患者的状态、给药方式等。在治疗性应用中，给予已经患病的患者的组合物的量足以治愈或者至少部分抑制疾病及其并发症的发展或症状。足以实现这种目的的量被称为“治疗有效剂量”。有效实现这种用途的量将取决于要治疗的疾病症状，并由临床医生根据诸如疾病、病症或症状的严重性、患者的年龄、体重和一般状况等的因素判断。
给予患者的化合物通常为上述药物组合物形式。可通过常规灭菌技术或者可通过无菌过滤将这些组合物灭菌。所得水溶液可被封装以供使用或者被冻干，冻干的制品需在给药前与无菌水性运载体混合。化合物制品的pH通常为3-11，更优选约5-9，最优选约7-8。应理解，使用某些上述赋形剂、运载体或稳定剂将导致形成药物的盐。
本发明化合物和/或组合物的治疗剂量将根据，例如，治疗的特定用途、化合物的给药方式、患者的健康和症状、以及处方医生的判断而改变。例如，在口服给药时，剂量将通常为每天每千克体重约5微克至约50毫克，优选每天每千克体重约1毫克至约10毫克。或者，在静脉给药时，剂量将通常为每千克体重约5微克至约50毫克，优选每千克体重约500微克至约5000微克。考虑的其它给药途径包括但不限于鼻内、透皮、吸入、皮下和肌肉内。可根据体外或动物模型测试系统得到的剂量反应曲线推出有效剂量。
总之，本发明的化合物和/或组合物将通过任何可接受的类似用途药物的给药方式以治疗有效量给予。这种化合物的毒性和治疗功效可在细胞培养物或实验动物中通过标准药物规则确定，例如，可测定LD50(半数致死量)和ED50(半数治疗有效量)。毒性和疗效的剂量比为治疗指数，它可表示为LD50/ED50。治疗指数大的化合物是优选的。
获自细胞培养物试验和动物研究的数据可用于阐明用于人类的剂量范围。这种化合物的剂量宜在循环浓度范围之内，包括ED50，且毒性很小或没有毒性。根据所用剂量和采用的给药途径，剂量可在该范围内变化。对于用于本发明方法的任何化合物和/或组合物，可根据细胞培养物试验初步估计治疗有效剂量。可在动物模型中制订剂量以获得循环血浆浓度范围，其中包括在细胞培养物中测定的IC50(测试化合物的半数抑制浓度)。这种信息可用来更精确地确定人类的有效剂量。例如，可通过高效液相色谱确定血浆水平。
提供以下合成和生物实施例是为了阐述本发明而不是要以任何方式限制本发明的范围。
实施例参考以下实施例，用本文所述的方法或其它本领域熟知的其它方法合成了本发明的化合物。
化合物和/或中间体通过高效液相色谱(HPLC)定性，使用带有2690 SeparationModule的Waters Millenium色谱系统(Milford，马萨诸塞州)。分析柱是Alltima C-18反向柱，4.6×250mm，购自Alltech(Deerfield，伊利诺斯州)。采用梯度洗脱，通常从5％乙腈/95％水开始，用40分钟到达100％乙腈。所有溶剂含有0.1％三氟乙酸(TFA)。化合物通过紫外光(UV)检测，在220或254nm吸收。HPLC溶剂来自Burdickand Jackson(Muskegan，密歇根州)或Fisher Scientific(匹兹堡，宾西法尼亚州)。一些情况下，纯度通过薄层层析(TLC)测定，使用玻璃或塑料背衬的硅胶板，如Baker-FlexSilica Gel 1B2-F软板。TLC结果在紫外光下是容易通过肉眼检测的，或者可使用熟知的碘蒸气或其它各种染色技术。
在两台LCMS装置之一上进行质谱分析Waters System(Alliance HT HPLC和Micromass ZQ质谱仪；柱Eclipse XDB-C18，2.1×50mm；溶剂系统5-95％(或35-95％或65-95％或95-95％)乙腈水溶液，含有0.05％TFA；流速0.8mL/min；分子量范围500-1500；锥电压(cone voltage)20V；柱温40℃)或Hewlett Packard System(1100系列HPLC；柱Eclipse XDB-C18，2.1×50mm；溶剂系统1-95％乙腈水溶液，含有0.05％TFA；流速0.4mL/min；分子量范围150-850；锥电压50V；柱温30℃)。所有质量以质子化的母离子记录。
GCMS分析在Hewlett Packard装置(HP6890系列气相色谱，带有Mass SelectiveDetector 5973；加样体积1μL；最初柱温50℃；最终柱温250℃；运行时间20分钟；气体流速1mL/min；柱5％苯基甲基硅氧烷，型号HP 190915-443，尺寸30.0m×25m×0.25m)上进行。
核磁共振(NMR)分析用Varian 300Mhz NMR(Palo Alto，加州)进行。光谱参考是TMS或溶剂的已知化学位移。一些化合物样品在较高温度(例如75℃)下运行以促进增加样品溶解度。
本发明一些化合物的纯度通过元素分析(Desert Analytics，图森，亚利桑那州)判断。
在Laboratory Devices Mel-Temp装置(Holliston，马萨诸塞州)上测定熔点。
制备型分离使用Flash 40色谱装置和KP-Sil，60A(Biotage，Charlottesville，弗吉尼亚州)，或通过急骤柱层析，用硅胶(230-400目)填装，或通过HPLC，用C-18反相柱。Flash 40 Biotage系统和急骤柱层析通常使用的溶剂是二氯甲烷、甲醇、乙酸乙酯、己烷、丙酮、羟胺水溶液和三乙胺。反相HPLC常用的溶剂是变化浓度的乙腈和水，其中含有0.1％三氟乙酸。
除非另有说明，所述温度均为摄氏度。同时，在实施例及其它地方使用了以下缩写，其含义如下μg＝微克μl＝微升μM＝微摩尔浓度aq＝含水DCM＝二氯甲烷DIAD＝重氮基二羧酸二异丙酯DIEA＝二异丙基乙胺DMAP＝二甲基氨基吡啶
DMF＝二甲基甲酰胺DMSO＝二甲亚砜eq.＝当量g＝克h＝小时HPLC＝高效液相色谱kg＝千克L＝升M＝摩尔mg＝毫克min＝分ml＝毫升mM＝毫摩尔浓度mmol＝毫摩尔mol＝摩尔N＝正构nm＝纳米PTFE＝聚四氟乙烯rt＝室温THF＝四氢呋喃实施例1N-(3-氨基丙基)-N-[1-(3-苄基喹啉-2-基)-2-甲基丙基]-3-氟-4-甲基苯甲酰胺(表1的化合物1)步骤1.3-苄基-2-碘代喹啉 用这里所述方法或用本领域已知的常规方法制备喹啉10。在甲乙酮(40ml)中的喹啉10(1eq.，5g)和碘化钠(10eq.，29.5g)的溶液中加入氢碘酸(过量，20ml)。反应物在80℃回流8小时，然后室温搅拌过夜。蒸发溶剂并将残余物溶于乙酸乙酯。有机层用饱和碳酸氢钠、饱和氯化钠、硫代硫酸钠溶液洗涤，用硫酸镁和炭干燥，通过硅藻土过滤，并浓缩。棕色油状物通过急骤层析纯化，得到7.5克标题产物11，其为绿棕色油状物，将其储存于0℃。
步骤2.1-(3-苄基喹啉-2-基)-2-甲基丙-1-醇 在-78℃的3-苄基-2-碘代喹啉11(1eq.，1.45g)的无水四氢呋喃(20ml)溶液中加入异丙基氯化镁(3eq.，6.3ml)。1小时后溶液的颜色从绿色变为橙色。加入异丁醛12(3eq.，1.15ml)并使反应混合物回复室温，并再搅拌1小时。加入乙酸乙酯。有机层用饱和碳酸氢钠、饱和氯化钠洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并浓缩。粗物质通过急骤层析纯化，得到150毫克1-(3-苄基喹啉-2-基)-2-甲基丙-1-醇13。
步骤3.2-[1-(3-苄基喹啉-2-基)-2-甲基丙基]-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮 在0℃的1-(3-苄基喹啉-2-基)-2-甲基丙-1-醇(102mg，1eq.)的无水四氢呋喃(3ml)溶液中加入邻苯二甲酰亚胺(154mg，3eq)、三苯基膦(138mg，1.5eq.)和DIAD(1.5eq.，104μl)。使反应物回复室温并搅拌过夜。蒸发溶剂。将残余物溶于乙酸乙酯。有机层用饱和碳酸氢钠、饱和氯化钠洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并浓缩。所得物质通过急骤层析纯化，得到91毫克2-[1-(3-苄基喹啉-2-基)-2-甲基丙基]-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮14，其为黄色油状物。
步骤4.1-(3-苄基喹啉-2-基)-2-甲基丙-1-胺
在1-(3-苄基喹啉-2-基)-2-甲基丙-1-胺(91mg，1eq.)的乙醇(2ml)溶液中加入肼(10μl，1.5eq)。反应物在室温搅拌1小时但只检测到极少产物。在40℃加热3小时，检测到27％的原料。加入更多的肼(10μl，1.5eq)并将反应混合物再搅拌半小时。通过PTFE滤器滤出沉淀，并用大量CH2Cl2洗涤。浓缩滤液，粗产物通过急骤层析纯化，得到31毫克1-(3-苄基喹啉-2-基)-2-甲基丙-1-胺15，其为澄清油状物。
步骤5.2-(3-{[1-(3-苄基喹啉-2-基)-2-甲基丙基]氨基}丙基)-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮 在1-(3-苄基喹啉-2-基)-2-甲基丙-1-胺(31mg，1eq.)的CH2Cl2(3ml)溶液中加入醛16(0.8eq.，17mg)、三乙酰氧基硼氢化钠和乙酸。反应混合物于室温搅拌3小时。加水，然后用乙酸乙酯萃取含水层。有机层用饱和碳酸氢钠、饱和氯化钠洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到46毫克2-(3-{[1-(3-苄基喹啉-2-基)-2-甲基丙基]氨基}丙基)-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮17。
步骤6.N-[1-(3-苄基喹啉-2-基)-2-甲基丙基]-3-氟-N-[3-(1，3-二氧代-1，3-二氢-2H-异吲哚-2-基)丙基]-4-甲基苯甲酰胺
在2-(3-{[1-(3-苄基喹啉-2-基)-2-甲基丙基]氨基}丙基)-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮17(15mg，1eq.)的CH2Cl2(1ml)溶液中加入3-氟-4-甲基苯甲酰氯18(11mg，2eq.)。苯甲酰氯18用本领域已知的常规方法制备。然后加入三乙胺(18μl，4eq.)。反应混合物在室温搅拌过夜。加水以淬灭反应。有机层用饱和碳酸氢钠、饱和氯化钠洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到19毫克N-[1-(3-苄基喹啉-2-基)-2-甲基丙基]-3-氟-N-[3-(1，3-二氧代-1，3-二氢-2H-异吲哚-2-基)丙基]-4-甲基苯甲酰胺19。
步骤7.N-(3-氨基丙基)-N-[1-(3-苄基喹啉-2-基)-2-甲基丙基]-3-氯-4-甲基苯甲酰胺 在N-[1-(3-苄基喹啉-2-基)-2-甲基丙基]-3-氟-N-[3-(1，3-二氧代-1，3-二氢-2H-异吲哚-2-基)丙基]-4-甲基苯甲酰胺19(19mg，1eq)的乙醇(1ml)溶液中加入肼(3μl，3eq)。反应物室温搅拌2小时，然后在40℃再加热1小时。沉淀通过PTFE膜过滤并用CH2Cl2洗涤。将滤液浓缩并通过急骤层析纯化，得到2毫克N-(3-氨基丙基)-N-[1-(3-苄基喹啉-2-基)-2-甲基丙基]-3-氟-4-甲基苯甲酰胺2，其为白色固体。
实施例2N-(3-氨基丙基)-N-[1-(3-苄基-7-氯喹啉-2-基)-2-甲基丙基]-4-甲基苯甲酰胺(表1的化合物4)
N-(3-氨基丙基)-N-[1-(3-苄基-7-氯喹啉-2-基)-2-甲基丙基]-4-甲基苯甲酰胺4按以下步骤合成，然后采用与实施例1的步骤3-7类似的过程，用1-(3-苄基-7-氯喹啉-2-基)-2-甲基丙-1-醇代替实施例1步骤3的1-(3-苄基喹啉-2-基)-2-甲基丙-1-醇开始。
步骤1.N-(3-氯苯基)-3-苯基丙酰胺 0℃下，在无水DCM(150ml)中3-氯苯胺(8.3ml，78.4mmol)、DMAP(1.0g，7.8mmol)和吡啶(6.9ml，86.2mmol)的混合物中加入3-苯基丙酰氯(12.8ml，86.2mmol)。使混合物回复室温并在氮气下搅拌过夜。在反应混合物中加入过量DCM。有机层用1N HCl(3×)、饱和NaHCO3(3×)、盐水洗涤，用MgSO4干燥，并在真空下除去溶剂，得到21.6克N-(3-氯苯基)-3-苯基丙酰胺21，其为桃色粗制固体。
步骤2.3-苄基-2，7-二氯喹啉 0℃下，在POCl3(28.7ml，308mmol)中逐滴加入DMF(4.5ml，57.8mmol)。溶液在0℃搅拌1小时。加入N-(3-氯苯基)-3-苯基丙酰胺(10g，38.5mmol)。使反应混合物回复室温，然后在75℃加热18小时。将热的反应混合物倒入500mL冰中并用乙酸乙酯(3X)萃取。合并的有机层用NaHCO3、盐水洗涤，用MgSO4干燥，过滤，并在真空下除去溶剂。粗产物用ISCO纯化系统纯化，用乙酸乙酯(0-100％)的己烷溶液作为洗脱溶剂，得到8.1g(28.1mmol，73％)3-苄基-2，7-二氯喹啉22，其为白色固体。
步骤3.3-苄基-7-氯-2-碘代-喹啉 将30mL甲乙酮中的3-苄基-2，7-二氯喹啉(3.0g，10.4mmol)和碘化钠(15.6g，104mmol)的混合物加热至80℃。在其中加入氢碘酸(1.13ml，13.2mmol)。反应混合物在80℃加热1.5小时，然后冷却至室温。反应用水淬灭。在反应混合物中加入过量乙酸乙酯，有机层用饱和NaHCO3、饱和NA2S2O3、盐水洗涤，用MgSO4干燥，过滤，并在真空下除去溶剂，得到3.9克(10.3mmol，99％)3-苄基-7-氯-2-碘代-喹啉23，其为棕褐色固体。
步骤4.3-苄基-7-氯喹啉-2-醛(carbaldehyde) 在-78℃下，在15mL无水THF中的3-苄基-7-氯-2-碘代-喹啉(1.5g，3.95mmol)溶液中加入异丙基氯化镁(5.93ml，11.85mmol)。-78℃下搅拌30分钟后加入DMF(1.53ml，19.8mmol)。使反应混合物在2小时内缓慢回复室温。然后用饱和NH4Cl淬灭，并用乙酸乙酯(3×)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用MgSO4干燥，并在真空下除去溶剂，得到1.23克3-苄基-7-氯喹啉-2-醛24，其为棕色油状物。
步骤5.1-(3-苄基-7-氯喹啉-2-基)-2-甲基丙-1-醇
在-78℃下，在3-苄基-7-氯喹啉-2-醛(1.23g，4.4mmol)的无水DCM(12ml)溶液中加入异丙基氯化镁(6.6m，13.2mmol)。使所得溶液在1小时内回复室温。反应混合物然后用饱和NH4Cl淬灭并用DCM(3×)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用MgSO4干燥，并在真空下除去溶剂。用ISCO纯化系统对粗产物进行急骤柱层析。在己烷中用乙酸乙酯(0-100％)梯度洗脱得到1-(3-苄基-7-氯喹啉-2-基)-2-甲基丙-1-醇25(0.44g，1.3mmol，30％)，其为红色油状物。
用上述实施例和方法中描述的方法制备下表中的化合物。合成中使用的原料是精通本领域的技术人员已知的，并可通过商业获得或者可用已知方法制备。化合物采用ACD/Name Batch Version 5.04(Advanced Chemistry Development Inc.；Toronto，Ontario；www.acdlabs.com)命名。
实施例3确定KSP活性的测定法该实施例提供了确定KSP体外活性的代表性体外测定法。纯化的牛脑微管购自Cytoskeleton Inc(Denver，Colorado，USA)。人KSP的驱动结构域(Eg 5，KNSL1)被克隆、表达、并纯化至纯度大于95％。Biomol Green购自Affinity Research ProductsLtd.(Matford Court，Exeter，Devon，英国)。微管和KSP驱动蛋白(即KSP驱动结构域)用测定缓冲液(20mM Tris-HCl(pH 7.5)，1mM MgCl2，10mM DTT和0.25mg/mLBSA)稀释至浓度为35μg/mL(微管)和45nM(KSP)。微管/KSP混合物然后在37℃孵育10分钟以促进KSP与微管结合。
测定平板(384孔板)的每个孔中含有1.25μL溶于DMSO的抑制剂或测试化合物(对照仅含DMSO)，在其中加入25μL ATP溶液(ATP用测定缓冲液稀释至浓度为300μM)和25μL上述微管/KSP溶液。平板在室温下孵育1小时。孵育后在每个孔中加入65μL Biomol Green(一种检测无机磷释放的基于孔雀绿的染料)。再将平板孵育5-10分钟，然后在630nm用Victor II平板阅读测定吸光度。630nm吸光度的量对应于样品中KSP活性的量。然后基于每种浓度下630nm吸光度的降低，用Excel的XLFit或GraphPad Software Inc的Prism数据分析软件通过非线性回归计算每种抑制剂或测试化合物的IC50。
通过实施例3测得的IC50可知，优选的本发明化合物的生物活性小于约1mM，优选实施方案的生物活性小于约25μM，特别优选的实施方案的生物活性小于约1000nM，最优选的实施方案的生物活性小于约100nM。
权利要求
1.式I的化合物或其药学上可接受的盐、酯或前药 其中m是0-3的整数；R1选自酰氨基、羧基酯和任选被羟基或卤素取代的C1-C5烷基；R2是氢或C1-C5烷基；R3是-C(＝X)-A，其中A选自芳基、杂芳基、杂环基和环烷基，所有这些基团都可任选被1-4个选自以下的取代基取代C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、卤素、羟基和硝基，且X是氧或硫；R4是-亚烷基-杂环基或-亚烷基-NR7R8，其中的亚烷基是C1-C4直链亚烷基；R7和R8独立选自氢、C1-C4烷基、芳基烷基、杂芳基烷基、环烷基和环烷基烷基；R5选自L-A1，其中的A1选自芳基、杂芳基、杂环基和环烷基，所有这些基团都可任选被1-4个选自以下的取代基取代C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、卤素、羟基和硝基，且其中的L选自氧，-NR9，其中R9是氢或烷基，-S(O)q-，其中q是0、1或2，和任选被羟基、卤素或酰氨基取代的C1-C5亚烷基；和R6选自C1-C5烷基、C2-C5烯基、C2-C5炔基、-CF3、C1-C5烷氧基、卤素和羟基。
2.如权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐、酯和前药，其特征在于，所述化合物用式II表示 其中A2和A3独立选自芳基、杂芳基、杂环基和环烷基，所有这些基团都可任选被1-4个选自以下的取代基取代C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、卤素、羟基和硝基；各R6独立选自C1-C5烷基、C2-C5烯基、C2-C5炔基、-CF3、C1-C5烷氧基、卤素和羟基；R11是C2-C3烷基；R12和R13独立选自氢、C1-C4烷基、芳基烷基、杂芳基烷基、环烷基和环烷基烷基；m是0-2的整数；n是1-3的整数；和p是1-4的整数。
3.如权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐、酯和前药，其特征在于，所述化合物用式III表示 其中A2和A3独立选自芳基、杂芳基、杂环基和环烷基，所有这些基团都可任选被1-4个选自以下的取代基取代C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、卤素、羟基和硝基；R12和R13独立选自氢、C1-C4烷基、芳基烷基、杂芳基烷基、环烷基和环烷基烷基；p是1-4的整数。
4.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，R1是C1-C5烷基。
5.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，R1是异丙基或叔丁基。
6.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，R2是氢或甲基。
7.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，X是氧。
8.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，A是芳基。
9.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，A是苯基或萘基。
10.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，A是杂芳基。
11.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，A选自吡啶基、咪唑基、呋喃基、吡唑基和噻唑基。
12.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，A是环烷基。
13.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，A是环己基。
14.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，A被1-4个选自以下的取代基取代氯、甲基、溴、氟、硝基、-CF3、甲氧基和叔丁基。
15.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，-C(O)-A选自(2-氯-6-甲基吡啶-4-基)羰基；(5-甲基咪唑-4-基)羰基；(萘-2-基)羰基；(吡啶-3-基)羰基；(吡啶-4-基)羰基；3，4-二氟苯甲酰基；3，4-二甲基苯甲酰基；3，5-二甲基吡唑-3-基羰基；2-(3-氨基丙酰胺基)-4-甲基苯甲酰基；2，4-二氟苯甲酰基；2，6-二氟苯甲酰基；2-氯苯甲酰基；2-氯吡啶-3-基羰基；2-氯吡啶-5-基羰基；2-氟苯甲酰基；2-甲氧基苯甲酰基；3，4-二氯苯甲酰基；3-氯苯甲酰基；3-氟-4-甲基苯甲酰基；4-溴苯甲酰基；4-氯苯甲酰基；4-羟基苯甲酰基；4-甲氧基苯甲酰基；4-甲基-3-氟苯甲酰基；4-甲基苯甲酰基；4-硝基苯甲酰基；4-叔丁基苯甲酰基；4-三氟甲基苯甲酰基；苯甲酰基；环己基羰基；呋喃-3-基羰基；吡啶-2-基羰基；和噻唑-4-基羰基。
16.如权利要求15所述的化合物，其特征在于，-C(O)-A选自4-甲基-3-氟苯甲酰基、4-甲基苯甲酰基和3，4-二甲基苯甲酰基。
17.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，R4选自3-(苄基氨基)丙基；3-(环丁基氨基)丙基；3-(环己基甲基氨基)丙基；3-(二乙基氨基)丙基；3-(异丙基氨基)丙基；3-[(3-三氟甲基吡啶-6-基)氨基]丙基；3-氨基丙基；2-氨基乙基；哌啶-3-基甲基；和吡咯烷-3-基甲基。
18.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，R4是3-氨基丙基。
19.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，R5是亚烷基-A1，A1是芳基。
20.如权利要求19所述的化合物，其特征在于，R5选自苄基；2-甲基苄基；3，5-二氟苄基；3-乙酰氨基苄基；3-氟苄基；3-羟基苄基；4-氯苄基；4-二氟苄基；和4-甲基苄基。
21.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，R6选自氢、氟、氯、甲基、溴、乙基、乙烯基、甲氧基、苯基、乙炔基和-CF3。
22.如权利要求2所述的化合物，其特征在于，m是1，n是1。
23.如权利要求2所述的化合物，其特征在于，R11是异丙基。
24.如权利要求2所述的化合物，其特征在于，p是3。
25.如权利要求2所述的化合物，其特征在于，R12和R13是氢。
26.如权利要求2所述的化合物，其特征在于，A2是苯基。
27.如权利要求3所述的化合物，其特征在于，A2是苯基。
28.如权利要求3所述的化合物，其特征在于，p是3。
29.如权利要求3所述的化合物，其特征在于，R12和R13是氢。
30.选自以下的化合物，以及它们的药学上可接受的盐、酯和前药N-(3-氨基丙基)-N-[1-(3-苄基喹啉-2-基)-2-甲基丙基]-3-氟-4-甲基苯甲酰胺；N-(3-氨基丙基)-N-[1-(3-苄基喹啉-2-基)-2-甲基丙基]-4-甲基苯甲酰胺；N-(3-氨基丙基)-N-[1-(3-苄基喹啉-2-基)-2-甲基丙基]-3，4-二甲基苯甲酰胺；N-(3-氨基丙基)-N-[1-(3-苄基-7-氯喹啉-2-基)-2-甲基丙基]-4-甲基苯甲酰胺；N-(3-氨基丙基)-N-[1-(3-苄基-7-氯喹啉-2-基)-2-甲基丙基]-3-氟-4-甲基苯甲酰胺。
31.一种药物组合物，所述组合物含有治疗有效量的权利要求1所述的化合物和药学上可接受的运载体。
32.如权利要求31所述的组合物，还含有至少一种其它治疗癌症的药剂。
33.如权利要求31所述的组合物，其特征在于，所述其它治疗癌症的药剂选自伊立替康、托泊替康、吉西他滨、伊马替尼、曲妥单抗、5-氟尿嘧啶、亚叶酸、卡铂、顺铂、多西他赛、紫杉醇、特扎西他滨(tezacitabine)、环磷酰胺、长春花生物碱、蒽环类抗生素、利妥昔单抗和曲妥单抗。
34.一种用于哺乳动物治疗至少部分由KSP介导的疾病的方法，所述方法包括给予需要这种治疗的哺乳动物治疗有效量的如权利要求31所述组合物。
35.如权利要求34所述的方法，其特征在于，所述疾病是细胞增生性疾病。
36.如权利要求35所述的方法，其特征在于，所述细胞增生性疾病是癌症。
37.如权利要求36所述的方法，其特征在于，所述癌症选自肺和支气管癌；前列腺癌；乳腺癌；胰腺癌；结肠和直肠癌；甲状腺癌；胃癌；肝和肝内胆管癌；肾和肾盂癌；膀胱癌；子宫体癌；宫颈癌；卵巢癌；多发性骨髓瘤；食道癌；急性骨髓性白血病；慢性骨髓性白血病；淋巴细胞性白血病；髓细胞性白血病；脑癌；口腔和咽癌；喉癌；小肠癌；非霍奇金淋巴瘤；黑色素瘤；和绒毛结肠腺瘤。
38.如权利要求34所述的方法，还包括给予所述哺乳动物患者一种治疗癌症的其它药剂。
39.如权利要求38所述的方法，其特征在于，治疗癌症的其它药剂选自伊立替康、托泊替康、吉西他滨、伊马替尼、曲妥单抗、5-氟尿嘧啶、亚叶酸、卡铂、顺铂、多西他赛、紫杉醇、特扎西他滨、环磷酰胺、长春花生物碱、蒽环类抗生素、利妥昔单抗和曲妥单抗。
40.权利要求31所述组合物在制造用于治疗癌症的药物中的应用。
全文摘要
本发明涉及新的取代的喹啉化合物及其药学上可接受的盐、酯或前药，这种新化合物与药学上可接受的运载体的组合物，以及这种新化合物作为驱动蛋白纺锤体蛋白抑制剂的应用。本发明的化合物具有以下通式(I)。
文档编号A61K31/4709GK1956960SQ200580016440
公开日2007年5月2日 申请日期2005年5月19日 优先权日2004年5月21日
发明者王为波, R·康斯坦丁, L·M·拉格尼顿, K·贝尔 申请人:希龙公司
根据35 U.S.C.§119(e)的规定，本申请要求2004年5月21日提交的美国临时申请序列号No.60/573,120的优先权，该申请全文纳入本文作为参考。
背景技术：
发明领域本发明涉及取代的喹啉化合物及其药学上可接受的盐、酯或前药，涉及这些化合物与药学上可接受的运载体的组合物，并涉及这些化合物的用途。
技术现状驱动蛋白是利用腺苷三磷酸结合微管和产生机械力的驱动蛋白。驱动蛋白以具有约350个氨基酸残基的驱动结构域(motor domain)为特征。已知一些驱动蛋白驱动结构域的晶体结构。
目前已经鉴定了约100种驱动蛋白相关蛋白(KRP)。驱动蛋白参与多种细胞生物过程，其中包括运输细胞器和小泡和维持内质网。一些KRP与有丝分裂纺锤体的微管或直接与染色体相互作用，并似乎在细胞周期的有丝分裂阶段发挥关键作用。这些有丝分裂KRP在癌症治疗的进展中倍受关注。
驱动蛋白纺锤体蛋白(KSP)(也称为Eg5、HsEg5、KNSL1或KIFII)是几种定位于有丝分裂纺锤体并已知是两极有丝分裂纺锤体形成和/或发挥作用所需的驱动蛋白样驱动蛋白中的一种。
在1995年，用抗KSP C末端的抗体除去KSP显示能阻止有单星状微管排列的有丝分裂中的Hela细胞(Blangy等，Cell 831159-1169，1995)。被认为是KSP同系物的bimC和cut7基因的突变造成构巢曲霉(Aspergillus nidulans)(Enos，A.P.和N.R.Morris，Cell 601019-1027，1990)和粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)(Hagan，I.和M.Yanagida，Nature 347563-566，1990)中心体分离失败。用能在蛋白质水平降低KSP表达的ATRA(全反式视黄酸)或用反义寡核苷酸除去KSP显示能显著抑制DAN-G胰腺癌细胞生长，这说明KSP可能参与全反式视黄酸的抗增殖作用(Kaiser，A.等，J.Biol.Chem.274，18925-18931，1999)。有趣的是，非洲爪蟾(Xenopuslaevis)Aurora相关蛋白激酶pEg2显示关联并磷酸化XlEg5(Giet，R.等，J.Biol.Chem.27415005-15013，1999)。在癌症药物开发中尤其感兴趣的是Aurora相关激酶的潜在底物。例如，在结肠癌患者中Aurora 1和2激酶在蛋白质和RNA水平过表达且其基因被扩增。
第一种细胞可渗透的KSP小分子抑制剂“单星素”显示可阻止具有单极纺锤体的细胞，但不会像常规化疗剂如紫杉烷和长春花生物碱那样影响微管聚合(Mayer，T.U.等，Science 286971-974，1999)。在基于表型的筛选中单星素被鉴定为抑制剂，这说明这种化合物可引导抗癌药的发展。这种抑制作用被认为不会竞争三磷酸腺苷且能迅速逆转(DeBonis，S.等，Biochemistry 42338-349，2003；Kapoor，T.M.等，J.Cell Biol.150975-988，2000)。
就改进化学疗法的重要性而言，需要有在体内有效抑制KSP和KSP相关蛋白的KSP抑制剂。
发明概述本发明的化合物本发明涉及用式I表示的取代的喹啉化合物 其中m是0-3的整数；R1选自酰氨基、羧基酯和任选被羟基或卤素取代的C1-C5烷基；R2是氢或C1-C5烷基；R3是-C(＝X)-A，其中A选自芳基、杂芳基、杂环基和环烷基，所有这些基团都可任选被1-4个选自以下的取代基取代C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、卤素、羟基和硝基，且X是氧或硫；R4是-亚烷基-杂环基或-亚烷基-NR7R8，其中的亚烷基是C1-C4直链亚烷基；R7和R8独立选自氢、C1-C4烷基、芳基烷基、杂芳基烷基、环烷基和环烷基烷基；
R5选自L-A1，其中的A选自芳基、杂芳基、杂环基和环烷基，所有这些基团都可任选被1-4个选自以下的取代基取代C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、卤素、羟基和硝基，且其中的L选自氧，-NR9，其中R9是氢或烷基，-S(O)q-，其中q是0、1或2，和任选被羟基、卤素或酰氨基取代的C1-C5亚烷基；和R6选自C1-C5烷基、C2-C5烯基、C2-C5炔基、-CF3、C1-C5烷氧基、卤素和羟基；或其药学上可接受的盐、酯或前药。
在另一优选实施方案中，本发明的化合物用式II表示 其中A2和A3独立选自芳基、杂芳基、杂环基和环烷基，所有这些基团都可任选被1-4个选自以下的取代基取代C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、卤素、羟基和硝基；各R6独立选自C1-C5烷基、C2-C5烯基、C2-C5炔基、-CF3、C1-C5烷氧基、卤素和羟基；R11是C2-C3烷基；R12和R13独立选自氢、C1-C4烷基、芳基烷基、杂芳基烷基、环烷基和环烷基烷基；m是0-3的整数；n是1-3的整数；和p是1-4的整数；或其药学上可接受的盐、酯和前药。
再在一优选实施方案中，本发明的化合物用式III表示
其中A2和A3独立选自芳基、杂芳基、杂环基和环烷基，所有这些基团都可任选被1-4个选自以下的取代基取代C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、卤素、羟基和硝基；R12和R13独立选自氢、C1-C4烷基、芳基烷基、杂芳基烷基、环烷基和环烷基烷基；p是1-4的整数；或其药学上可接受的盐、酯和前药。
优选实施方案在式I的化合物中，优选地，R1是C1-C5烷基，且更优选R1是异丙基或叔丁基。
在式I的化合物中，优选R2是氢或甲基。
在式I的化合物中，优选X是氧。在式I、II和III的化合物中，优选A是芳基，且更优选A是苯基或萘基。在其它式I、II和III的化合物中，优选A是杂芳基，且更优选A选自吡啶基、咪唑基、呋喃基、吡唑基和噻唑基。再在其它式I、II和III的化合物中，优选A是环烷基，且更优选A是环己基。
优选地，A被1-4个选自以下的取代基取代氯、甲基、溴、氟、硝基、-CF3、甲氧基和叔丁基。
再优选地，-C(O)-A选自(2-氯-6-甲基吡啶-4-基)羰基；(5-甲基咪唑-4-基)羰基；(萘-2-基)羰基；(吡啶-3-基)羰基；(吡啶-4-基)羰基；3，4-二氟苯甲酰基；3，4-二甲基苯甲酰基；3，5-二甲基吡唑-3-基羰基；2-(3-氨基丙酰胺(propanamido))-4-甲基苯甲酰基；2，4-二氟苯甲酰基；2，6-二氟苯甲酰基；2-氯苯甲酰基；2-氯吡啶-3-基羰基；
2-氯吡啶-5-基羰基；2-氟苯甲酰基；2-甲氧基苯甲酰基；3，4-二氯苯甲酰基；3-氯苯甲酰基；3-氟-4-甲基苯甲酰基；4-溴苯甲酰基；4-氯苯甲酰基；4-羟基苯甲酰基；4-甲氧基苯甲酰基；4-甲基-3-氟苯甲酰基；4-甲基苯甲酰基；4-硝基苯甲酰基；4-叔丁基苯甲酰基；4-三氟甲基苯甲酰基；苯甲酰基；环己基羰基；呋喃-3-基羰基；吡啶-2-基羰基；和噻唑-4-基羰基。
最优选地，-C(O)-A选自4-甲基-3-氟苯甲酰基、4-甲基苯甲酰基和3，4-二甲基苯甲酰基。
一实施方案中，A3选自4-甲基-3-氟苯基、4-甲基苯基和3，4-二甲基苯基。
在一优选的实施方案中，R4选自3-(苄基氨基)丙基；3-(环丁基氨基)丙基；3-(环己基甲基氨基)丙基；3-(二乙基氨基)丙基；3-(异丙基氨基)丙基；3-[(3-三氟甲基吡啶-6-基)氨基]丙基；3-氨基丙基；
2-氨基乙基；哌啶-3-基甲基；和吡咯烷-3-基甲基。
在其它实施方案中，R4是3-氨基丙基。
一些实施方案中，R5是亚烷基-A1，且A1是芳基。再在其它实施方案中，R5是苄基。
优选地，R5选自苄基；2-甲基苄基；3，5-二氟苄基；3-乙酰氨基苄基；3-氟苄基；3-羟基苄基；4-氯苄基；4-二氟苄基；和4-甲基苄基。
在式I、II和III的化合物中，优选地，R6选自氢；氟；氯；甲基；溴；乙基；乙烯基；甲氧基；苯基；乙炔基；和-CF3。
在式II的化合物中，优选的实施方案包括，m是1，n是1，R11是异丙基，p是3，R12和R13是氢，A2是苯基，且A3是被C1-C4烷基和/或卤素取代的芳基。
In式II的化合物I，优选的实施方案包括，A2是苯基，A3芳基被C1-C4烷基和/或卤素取代，p是3，且R12和R13是氢。
本发明的取代的喹啉衍生物的例子如下表1所示。
表1
本发明范围内的具体化合物的例子如下N-(3-氨基丙基)-N-[1-(3-苄基喹啉-2-基)-2-甲基丙基]-3-氟-4-甲基苯甲酰胺；N-(3-氨基丙基)-N-[1-(3-苄基喹啉-2-基)-2-甲基丙基]-4-甲基苯甲酰胺；N-(3-氨基丙基)-N-[1-(3-苄基喹啉-2-基)-2-甲基丙基]-3，4-二甲基苯甲酰胺；N-(3-氨基丙基)-N-[1-(3-苄基-7-氯喹啉-2-基)-2-甲基丙基]-4-甲基苯甲酰胺；N-(3-氨基丙基)-N-[1-(3-苄基-7-氯喹啉-2-基)-2-甲基丙基]-3-氟-4-甲基苯甲酰胺；和其药学上可接受的盐、酯和前药。
本发明的方法和组合物还提供了含有式I、II和/或III的化合物(包括其混合物)和药学上可接受的赋形剂或运载体的组合物。
另一方面，本发明提供了治疗患有至少部分由KSP介导的疾病的哺乳动物患者的方法。因此，本发明提供了治疗需要这种治疗的哺乳动物患者的方法，所述方法包括单独给予或与其它抗癌药联合给予该患者治疗有效量的式I、II和/或III的化合物(包括其混合物)。
发明详述定义如上所述，本发明涉及新的取代的喹啉化合物。
应理解，这里使用的术语仅是为了描述特定实施方案而不是要限制本发明的范围。必需注意的是，除非文中有明确说明，单数形式“一个”、“一种”和“这种”在说明书和权利要求书中包括其复数形式。在该说明书和其后的权利要求书中所提及术语的定义如下除非另有定义，“烷基”指含有1-5个碳原子、更优选为1-3个碳原子的单价饱和脂肪烃基。该术语的例子有甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、正戊基等。
“取代的烷基”指含有1-3个、优选1-2个选自以下的取代基的烷基烷氧基、取代的烷氧基、酰基、酰氨基、酰氧基、氨基、取代的氨基、氨基酰基、芳基、取代的芳基、芳氧基、取代的芳氧基、氰基、卤素、羟基、硝基、羧基、羧基酯、环烷基、取代的环烷基、螺环烷基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环基和取代的杂环基。
“亚烷基”指优选含有1-5个、更优选1-3个碳原子的直链或支链二价饱和脂肪烃基。该术语的例子有亚甲基(-CH2-)，亚乙基(-CH2CH2-)，正亚丙基(-CH2CH2CH2-)，异亚丙基(-CH2CH(CH3)-)等。
除非另有定义，“烷氧基”指基团“烷基-O-”，例如，其包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、叔丁氧基、仲丁氧基、正戊氧基等。
“取代的烷氧基”指基团“取代的烷基-O-”。
“酰基”指基团H-C(O)-、烷基-C(O)-、取代的烷基-C(O)-、烯基-C(O)-、取代的烯基-C(O)-、炔基-C(O)-、取代的炔基-C(O)-环烷基-C(O)-、取代的环烷基-C(O)-、芳基-C(O)-、取代的芳基-C(O)-、杂芳基-C(O)-、取代的杂芳基-C(O)-、杂环基-C(O)-和取代的杂环基-C(O)-，其中，烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、环烷基、取代的环烷基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环基和取代的杂环基如本文所定义。
“氨基酰基”指基团-C(O)NR10R10，其中各R10独立选自氢、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、芳基、取代的芳基、环烷基、取代的环烷基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环基、取代的杂环基，且其中各R10与氮原子一起形成杂环基或取代的杂环基环，其中的烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、环烷基、取代的环烷基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环基和取代的杂环基如本文所定义。
“酰氧基”指基团烷基-C(O)O-、取代的烷基-C(O)O-、烯基-C(O)O-、取代的烯基-C(O)O-、炔基-C(O)O-、取代的炔基-C(O)O-、芳基-C(O)O-、取代的芳基-C(O)O-、环烷基-C(O)O-、取代的环烷基-C(O)O-、杂芳基-C(O)O-、取代的杂芳基-C(O)O-、杂环基-C(O)O-、和取代的杂环基-C(O)O-，其中的烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、环烷基、取代的环烷基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环基和取代的杂环基如本文所定义。
“烯基”指含有2-6个碳原子、优选2-4个碳原子并含有至少1个、优选1-2个烯基不饱和位点的烯基。这种基团的例子有乙烯基、烯丙基、丁-3-烯-1-基等。
“取代的烯基”指含有1-3个取代基、优选1-2个取代基的烯基，所述取代基选自烷氧基、取代的烷氧基、酰基、酰氨基、酰氧基、氨基、取代的氨基、氨基酰基、芳基、取代的芳基、芳氧基、取代的芳氧基、氰基、卤素、羟基、硝基、羧基、羧基酯、环烷基、取代的环烷基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环基和取代的杂环基，条件是任何羟基取代基都不连接到乙烯基(不饱和的)碳原子上。
“炔基”指含有2-6个碳原子、优选2-3个碳原子并含有至少1个、优选1-2个炔基不饱和位点的炔基。
“取代的炔基”指含有1-3个取代基、优选1-2个取代基的炔基，所述取代基选自烷氧基、取代的烷氧基、酰基、酰氨基、酰氧基、氨基、取代的氨基、氨基酰基、芳基、取代的芳基、芳氧基、取代的芳氧基、氰基、卤素、羟基、硝基、羧基、羧基酯、环烷基、取代的环烷基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环基和取代的杂环基。
“氨基”指基团-NH2。
“氰基”指基团-CN。
“取代的氨基”指基团-NR14R15，其中R14和R15独立选自氢、烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、芳基、取代的芳基、环烷基、取代的环烷基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环基、取代的杂环基，且R14和R15可与氮原子结合在一起形成杂环基或取代的杂环基，前提是R14和R15都不是氢。当R14是氢，R15是烷基时，取代的氨基在文中有时被称为烷基氨基。当R14和R15都是烷基时，取代的氨基在文中有时被称为二烷基氨基。当提及单取代的氨基时是指R14或R15之一是氢，但不都是氢。当提及双取代的氨基时是指R14或R15都不是氢。
“酰氨基”指基团-NR16C(O)烷基、-NR16C(O)取代的烷基、-NR16C(O)环烷基、-NR16C(O)取代的环烷基、-NR16C(O)烯基、-NR16C(O)取代的烯基、-NR16C(O)炔基、-NR16C(O)取代的炔基、-NR16C(O)芳基、-NR16C(O)取代的芳基、-NR16C(O)杂芳基、-NR16C(O)取代的杂芳基、-NR16C(O)杂环基和-NR16C(O)取代的杂环基，其中R16是氢或烷基，且其中的烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、环烷基、取代的环烷基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环基和取代的杂环基如本文所定义。
“硝基”指基团-NO2。
“芳基”或“Ar”指含有单环(如苯基)或多个稠环(如萘基或蒽基)的6-14个碳原子的一价芳族碳环基团，其中的稠环可以是或不是芳族的(例如，2-苯并唑啉酮，2H-1，4-苯并嗪-3(4H)-酮-7-基等)，只要连接点位于芳族碳原子即可。优选的芳基包括苯基和萘基。
“取代的芳基”指被1-3个取代基、优选1-2个取代基取代的芳基，所述取代基选自羟基、酰基、酰氨基、酰氧基、烷基、取代的烷基、烷氧基、取代的烷氧基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、氨基、取代的氨基、氨基酰基、芳基、取代的芳基、芳氧基、取代的芳氧基、羧基、羧基酯、氰基、硫醇、烷基硫代、取代的烷基硫代、芳基硫代、取代的芳基硫代、杂芳基硫代、取代的杂芳基硫代、环烷基硫代、取代的环烷基硫代、杂环基硫代、取代的杂环基硫代、环烷基、取代的环烷基、环烷氧基、取代的环烷氧基、卤素、硝基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环基、取代的杂环基、杂芳氧基、取代的杂芳氧基、杂环氧基、取代的杂环氧基、氨基磺酰基(NH2-SO2-)和取代的氨基磺酰基。
“芳氧基”指基团芳基-O-，其包括，例如，苯氧基、萘氧基等。
“取代的芳氧基”指取代的芳基-O-基团。
“羧基”指-COOH或其盐。
“羧基酯”指基团-C(O)O-烷基、-C(O)O-取代的烷基、-C(O)O-芳基和-C(O)O-取代的芳基，其中的烷基、取代的烷基、芳基和取代的芳基如本文所定义。
“环烷基”指含有单个或多个环的3-10个碳原子的环烷基，包括例如金刚烷基、环丙基、环丁基、环戊基、环辛基等。
“螺环烷基”指含有具有螺连接点(由一个原子形成的连接点，该原子是环的唯一共用成员)的环烷基环的3-10个碳原子的环状基团，其例子如下
“取代的环烷基”和“取代的环烯基”指含有1-5个取代基的环烷基或环烯基，所述取代基选自氧代(＝O)、硫代(＝S)、烷基、取代的烷基、烷氧基、取代的烷氧基、酰基、酰氨基、酰氧基、氨基、取代的氨基、氨基酰基、芳基、取代的芳基、芳氧基、取代的芳氧基、氰基、卤素、羟基、硝基、羧基、羧基酯、环烷基、取代的环烷基、杂芳基、取代的杂芳基、杂环基和取代的杂环基。
“环烷氧基”指-O-环烷基。
“取代的环烷氧基”指-O-取代的环烷基。
“卤素”指氟、氯、溴和碘，优选氟或氯。
“羟基”指基团-OH。
“杂芳基”指含有1-10个碳原子并在环内有1-4个选自氧、氮和硫的杂原子的芳基。这种杂芳基可以含有单环(例如，吡啶基或呋喃基)或多个稠环(例如，吲哚嗪基或苯并噻吩基)，其中的稠环可以是或不是芳族的和/或含有一个杂原子，只要其连接点通过芳族杂芳基的原子即可。优选的杂芳基包括吡啶基、吡咯基、吲哚基、苯硫基和呋喃基。
“取代的杂芳基”指被1-3个取代基取代的杂芳基，所述取代基选自与取代的芳基所定义的相同的取代基。
“杂芳氧基”指基团-O-杂芳基，“取代的杂芳氧基”指基团-O-取代的杂芳基。
“杂环”或“杂环基”或“杂环烷基”或“杂环基”指含有单环或多个稠环的有1-10个碳原子并在环内含有1-4个选自氮、硫或氧的杂原子的饱和或不饱和基团，其中，稠环系统内的一个或多个环可以是环烷基、芳基或杂芳基，只要其连接点通过杂环基环即可。
“取代的杂环”或“取代的杂环烷基”或“取代的杂环基”指被1-3个与取代的环烷基所定义的相同的取代基取代的杂环基。
杂环基和杂芳基的例子包括但不限于氮杂环丁烷、吡咯、咪唑、吡唑、吡啶、吡嗪、嘧啶、哒嗪、吲哚嗪、异吲哚、吲哚、二氢吲哚、吲唑、嘌呤、喹嗪、异喹啉、喹啉、酞嗪、萘基吡啶、喹喔啉、喹唑啉、噌啉、蝶啶、咔唑、咔啉、菲啶、吖啶、菲咯啉、异噻唑、吩嗪、异唑、吩嗪、吩噻嗪、咪唑烷、咪唑啉、哌啶、哌嗪、二氢吲哚、邻苯二甲酰亚胺、1，2，3，4-四氢-异喹啉、4，5，6，7-四氢苯并[b]噻吩、噻唑、噻唑烷、噻吩、苯并[b]噻吩、吗啉基、硫代吗啉基(也称为硫吗啉基)、哌啶基、吡咯烷、四氢呋喃基等。
“硫醇”指基团-SH。
“烷基硫代”或“烷基硫醚”或“硫代烷氧基”指基团-S-烷基。
“取代的烷基硫代”或“取代的烷基硫醚”或“取代的硫代烷氧基”指基团-S-取代的烷基。
“芳基硫代”指基团-S-芳基，其中的芳基如上文所定义。
“取代的芳基硫代”指基团-S-取代的芳基，其中的取代的芳基如上文所定义。
“杂芳基硫代”指基团-S-杂芳基，其中的杂芳基如上文所定义。
“取代的杂芳基硫代”指基团-S-取代的杂芳基，其中的取代的杂芳基硫代如上文所定义。
“杂环基硫代”指基团-S-杂环基和“取代的杂环基硫代”指基团-S-取代的杂环基，其中的杂环基和取代的杂环基。
“杂环氧基”指基团杂环基-O-，“取代的杂环基-O-”指基团取代的杂环基-O-，其中的杂环基和取代的杂环基如上文所定义。
“环烷基硫代”指基团-S-环烷基，“取代的环烷基硫代”指基团-S-取代的环烷基，其中的环烷基和取代的环烷基如上文所定义。
“芳基烷基”指被芳基取代的烷基，其中的烷基和芳基如上文定义。该基团也可称为-亚烷基-芳基。
“杂芳基烷基”指被杂芳基取代的烷基，其中的烷基和杂芳基如上文定义。该基团也可称为-亚烷基-杂芳基。
“环烷基烷基”指被环烷基取代的烷基，其中的烷基和环烷基如上文定义。
“生物活性”在这里指在至少一种实施例3所列试验中测得的抑制浓度。
术语“药学上可接受的盐”在这里指式I、II和/或III的化合物的无毒的酸盐或碱土金属盐。这些盐可在式I、II和/或III的化合物最终的分离和纯化步骤中原位制备，或使碱或酸官能团分别与合适的有机或无机酸或碱单独反应。代表性的盐包括但不限于乙酸盐、乙二酸盐、藻酸盐、柠檬酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、硫酸氢盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、二葡糖酸盐、环戊烷丙酸盐、十二烷基硫酸盐、乙磺酸盐、葡庚糖酸盐、甘油磷酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、延胡索酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、2-羟基乙磺酸盐、乳酸盐、马来酸盐、甲磺酸盐、烟酸盐、2-萘磺酸盐、草酸盐、双羟萘酸盐、果胶盐(pectinate)、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、苦味酸盐、特戊酸盐、丙酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、对甲苯磺酸盐和十一烷酸盐。同时，碱性含氮基团可被以下试剂季铵化，如烷基卤化物，例如甲基、乙基、丙基和丁基氯化物、溴化物和碘化物；二烷基硫酸盐，如二甲基、二乙基、二丁基和二戊基硫酸盐；长链卤化物，如癸基、月桂基、肉豆寇基和硬脂基氯化物、溴化物和碘化物；芳烷基卤化物，如苄基和苯乙基溴化物，等等。从而可获得水溶性或油溶性、或水或油可分散的产品。
可用来形成药学上可接受的酸加成盐的酸的例子包括无机酸，如盐酸、硫酸和磷酸，以及有机酸，如草酸、马来酸、甲磺酸、琥珀酸和柠檬酸。
碱加成盐可在式I、II和/或III的化合物最终的分离和纯化步骤中原位制备，或使羧酸部分与合适的碱(如药学上可接受的金属阳离子的氢氧化物、碳酸盐或碳酸氢盐)或与氨或有机伯、仲、叔胺反应来单独制备。药学上可接受的盐包括，但不限于，基于碱金属或碱土金属的阳离子，如钠、锂、钾、钙、镁、铝盐等，以及无毒的铵、季铵和胺阳离子，包括，但不限于，铵、四甲基铵、四乙基铵、甲胺、二甲胺、三甲胺、三乙胺、乙胺等。用来形成碱加成盐的其它代表性的有机胺包括二乙胺、乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、哌嗪等。
术语“药学上可接受的酯”在这里指可在体内水解的酯，并包括那些在人体内崩解以释放亲本化合物或其盐的酯。合适的酯基团包括，例如，衍生自药学上可接受的脂肪族羧酸，尤其是链烷酸，链烯酸、环烷酸和二元烷酸的那些，其中各烷基或烯基部分宜含有不超过6个碳原子。特定的酯的代表性的例子包括但不限于甲酸酯、乙酸酯、丙酸酯、丁酸酯、丙烯酸酯和琥珀酸乙酯。
术语“药学上可接受的前药”在这里是指本发明化合物的前药，根据严格的医药标准，这些前药适合与人和低等动物的组织接触使用，不具有毒性、刺激性、过敏性反应，等等，有合理的利益/风险比，且对于它们的与其用途是有效的，并且，如果可能的话，还包括本发明化合物的两性离子形式。术语″前药″是指在体内迅速转化(如通过在血液中水解)形成具有上述通式的母体化合物的化合物。关于前药的详细叙述提供在T.Higuchi和V.Stella，“作为新型输递系统的前药”(Pro-drugs as NovelDelivery Systems)，A.C.S.Symposium Series第14卷，以及Edward B.Roche编写的“药物设计中的生物可逆运载体”(Bioreversible Carriers in Drug Design)，AmericanPharmaceutical Association，Pergamon Press，1987，这两种文献都本纳入本文作为参考。
“抗癌药”或“治疗癌症的药剂”在这里指一些药剂，它包括，例如，诱导凋亡的药剂；多核苷酸(例如，核酶)；多肽(例如，酶)；药物；生物模拟物；生物碱类；烷基化剂；抗肿瘤抗生素；抗代谢物；激素；铂化合物；与抗癌药、毒素和/或放射性核素偶联的单克隆抗体；生物应答修饰剂(例如干扰素和白细胞介素等)；过继免疫治疗药；造血生长因子；诱导肿瘤细胞分化的试剂(例如，全反式视黄酸等)；基因治疗剂；反义治疗剂和核苷；肿瘤疫苗；血管发生抑制剂等。精通本领域的技术人员还熟知许多其它试剂。
应理解，在上面定义的所有取代基中，不包括用取代基进一步取代其自身得到的聚合物(例如，具有取代的芳基作为取代基的取代的芳基，即其自身被取代的芳基取代，等等)。此时，这种取代基的最大取代数是3。这就是说，上面的每个定义都是有限制的，例如，取代的芳基仅限于-取代的芳基-(取代的芳基)-取代的芳基。
类似地，应理解上述定义不包括不允许的取代模式(例如，被5个氟基取代的甲基，或者烯式或炔式不饱和的α羟基)。这种不允许的取代模式是熟练技术人员熟知的。
由于化合物中存在一个或多个不对称或手性中心，本发明的化合物可具有立体异构现象。本发明考虑了各种立体异构体及其混合物。本发明的某些化合物含有不对称取代的碳原子。这种不对称取代的碳原子可使本发明的化合物含有在特定的不对称取代的碳原子上的立体异构体的混合物或单个的立体异构体。其结果是，本发明包括外消旋混合物、非对映体的混合物以及本发明化合物的单个非对映体。术语“S”和“R”构型在这里是通过IUPAC 1974“基础立体化学E部分的推荐”(RECOMMENDATIONS FORSECTIONE，FUNDAMENTALSTEREOCHEMISTRY)，Pure Appl.Chem.4513-30，1976定义的。所需对映体可通过手性合成采用本领域熟知的方法从市售的手性原料获得，或者可采用已知技术从对映体混合物分离所需对映体而获得。
本发明的化合物也可具有几何异构现象。几何异构体包括具有烯基或炔基部分的本发明化合物的顺式和反式形式。本发明包括单独的几何异构体和立体异构体以及它们的混合物。
化合物的制备本发明的化合物可用以下常规方法和过程从容易获得的原料制备。应该理解，这里给出的是常规或优选的加工条件(即反应温度、时间、反应物的摩尔比、溶剂、压力)，除非另有说明也可采用其它加工条件。根据所使用的聚体反应物或溶剂，最佳反应条件是可变的，但这种条件可由精通本领域的技术人员通过常规优化过程确定。
此外，精通本领域的技术人员显然应该知道，可能需要常规的保护基以防止某些官能团发生不需要的反应。各种官能团的合适保护基以及合适的保护和去保护条件是本领域熟知的。例如，T.W.Greene和P.G.M.Wuts的《有机合成保护基》(ProtectingGroups in Organic Synthesis，第二版，Wiley，New York，1991)一书及其中列出的参考资料中描述了许多保护基。
通过以下合成方案能更好地理解本发明的化合物，这些方案例举了合成本发明化合物的方法。除非另有说明，以下实施例中所用的试剂可通过商业获得，并且可购自诸如Sigma-Aldrich Company，Inc.(Milwaukee，WI，USA)的供应商。
本发明的化合物可按照下述方案1合成。
方案1 R1、R4、R5、R6、m和A如上文定义。
各PG独立表示氨基保护基，如邻苯二酰胺。
具体地说，在方案1中，在甲乙酮、丙酮等合适的惰性溶剂中将适当取代的氯喹啉衍生物1a与过量碘化钠(通常约2-20当量，优选约10当量)混合。然后加入过量氢碘酸。一实施方案中，所得混合物先在约50-80℃加热，并优选回流约2-12小时，然后将反应在室温维持约12-24小时。反应基本结束后可通过常规方法如沉淀、过滤、蒸发、结晶、层析等回收并任选纯化所得碘代喹啉衍生物1b。或者，化合物1b无需纯化和/或分离便可直接用于下面的步骤。
然后边搅拌边将碘代喹啉衍生物1b溶于合适溶剂，如四氢呋喃、甘醇二甲醚等，同时维持溶液温度在约-50至约-80℃。在此温度继续搅拌约0.1-1小时，然后在此溶液中加入过量(例如3当量)有机氯化镁(化合物1c)。化合物1c的加入在较长时间如1小时进行。然后在反应混合物中加入与有机氯化镁相对应的醛化合物1c’并使所得混合物在约1小时内温热至室温。所得醇1d可通过常规方法如沉淀、过滤、蒸发、结晶、层析等回收。或者，化合物1d无需纯化和/或分离可直接用于下面的步骤。
使醇1d与过量的(例如约3当量)合适的胺保护基如邻苯二甲酰亚胺反应制备保护的胺1e。然后在反应物中加入过量三苯基膦和重氮基二羧酸二异丙酯(DIAD)并将反应维持在约-20至约10℃。使反应物温热至室温并使其继续反应直到基本完成，这通常要2-24小时。然后通过常规方法如沉淀、过滤、蒸发、结晶、层析等回收并任选纯化所得保护的胺1e。或者，化合物1e无需纯化和/或分离可直接用于下面的步骤。
然后通过常规技术除去保护基以提供胺1f，然后通过常规方法如沉淀、过滤、蒸发、结晶、层析等将其回收并任选纯化。或者，化合物1f无需纯化和/或分离可直接用于下面的步骤。
使胺1f在常规的还原性氨化条件下与醛1g反应得到取代的胺1h，然后通过常规方法如沉淀、过滤、蒸发、结晶、层析等将其回收并任选纯化。或者，化合物1h无需纯化和/或分离可直接用于下面的步骤。
然后在常规酰胺化条件下使取代的胺1h与酰氯1i反应。可通过常规方法除去所得酰胺产物1j上残留的任何保护基，并可通过常规方法如沉淀、过滤、蒸发、结晶、层析等回收和纯化产物。
喹啉化合物1a可通过商业获得或者可如下面的方案2所示从适当取代的苯胺化合物制备，其中，仅出于举例的目的，m是1且R6是氯。
方案2 R5和R6如上文定义具体地说，在方案2中，在常规条件下用略过量(约10％)的3-取代的丙酰氯2b将市售苯胺(化合物2a)酰胺化以得到酰胺2c，然后通过常规方法如沉淀、过滤、蒸发、结晶、层析等将其回收和纯化。然后将过量的三氯氧化磷(phosphorousoxytrichloride)和1-2当量二甲基甲酰胺(DMF)搅拌约1小时，同时将反应物维持在约-20至约10℃的温度下。然后边搅拌边加入酰胺2c并使反应物回复室温，然后加热至约60至约90℃并继续反应直到反应基本结束，这通常需要2-24小时。
然后通过常规方法如沉淀、过滤、蒸发、结晶、层析等回收并任选纯化所得保护的喹啉2d。或者，化合物2d无需纯化和/或分离可直接用于下面的步骤。
药物制剂当用作药物时，本发明的化合物通常以药物组合物的形式给予。这些化合物可通过各种途径给予，其中包括口服、肠胃外、透皮、局部、直肠和鼻内。这些化合物作为可注射组合物和口服组合物都是有效的。这种组合物可以用制药领域熟知的方法制备，并含有至少一种活性化合物。
本发明还包括药物组合物，所述药物组合物含有一种或多种上述本发明的化合物作为活性成分，并含有药学上可接受的运载体。在制造本发明的组合物时，通常将活性成分与赋形剂混合、用赋形剂稀释或者包装入胶囊、小袋、纸或其它容器形式的运载体内。所用赋形剂通常是适合给予人类对象或者其它哺乳动物的赋形剂。当赋形剂作为稀释剂时，它可以是作为活性成分的载体、运载体或介质的固体、半固体或液体物质。因此，所述组合物可以是片剂、丸剂、粉末、锭剂、小袋、扁囊剂、酏剂、悬浮剂、乳剂、溶液剂、糖浆剂、气雾剂(作为固体或在液体介质中)、含有例如最多10重量％活性化合物的软膏剂、软和硬明胶胶囊、栓剂、无菌可注射溶液和无菌封装粉末。
在制剂的制备中，可能需要研磨活性化合物以提供合适的粒度，然后再与其它成分混合。如果活性化合物基本不溶，则通常将其研磨到粒度小于200目。如果活性化合物基本是水溶性的，则通常研磨到能使其基本均匀分布在制剂中的粒度，例如约40目。
合适赋形剂的一些例子包括乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、淀粉、阿拉伯胶、磷酸钙、藻酸盐、黄蓍胶、明胶、硅酸钙、微晶纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、纤维素、无菌水、糖浆和甲基纤维素。所述制剂还可含有润滑剂如滑石，硬脂酸镁和矿物油、湿润剂、乳化剂和悬浮剂、防腐剂如苯甲酸甲酯和羟苯甲酸丙酯、甜味剂和调味剂。可采用本领域一致的方法将本发明的组合物制成在给予患者后立即、持续或延迟释放活性成分的形式。
药物组合物及其单位剂型中活性组分即本发明化合物的量可根据具体用途、具体化合物的功效以及所需浓度而变化或调节。
组合物宜被制成单位剂型，各剂量中含有约1-500mg，通常约5-100mg，有时为约10-30mg活性成分。术语“单位剂型”指适合作为人类对象和其它哺乳动物一次剂量的物理离散单位，各单位含有经计算能产生所需疗效的预定量的化学物质以及合适的药物赋形剂。优选地，上述本发明化合物的用量不超过约20重量％药物组合物，更优选不超过约15重量％，余量为药物惰性运载体。
活性化合物在较宽剂量范围内有效并且通常以药物或治疗有效量给予。然而应该理解，实际给予的化合物的量将由医生根据有关情况而确定，其中包括要治疗的症状、要治疗症状的严重性、选择的给药途径、实际给予的化合物、个体患者的年龄、体重和反应、患者症状的严重性等。
在治疗或遏制温血动物体内的癌症的治疗应用中，所述化合物或其药物组合物可通过任何合适途径给予，如经口、局部、透皮和/或肠胃外给予，其剂量应达到并维持在接受治疗的动物中将产生治疗效果的活性组分的浓度(即，量)或血液水平。活性组分的这种治疗有效剂量(即有效剂量)通常为每千克体重约5微克至约50毫克，更优选每天每千克体重约1.0-50毫克。
为制造片剂等固体组合物，将主要活性成分与药物赋形剂混合以形成含有本发明化合物均匀混合物的固体预制组合物。当称这些预制组合物为均匀时是指活性成分均匀分散在整个组合物中从而容易将组合物再分成相同有效的单位剂型，如片剂、丸剂和胶囊。然后将这种固体预制剂再分成上述类型的单位剂型，其中含有例如约0.1-500mg本发明的活性成分。
本发明的片剂或丸剂可被包衣或复合以提供能持续起作用的剂型。例如，片剂或丸剂可包含内部剂量组分和外部剂量组分，后者作为前者的外壳。可通过在胃中抗崩解并允许内部组分完整通过十二指肠或延迟释放的肠衣层分离这两种组分。许多材料可用作这种肠衣层或包衣，这种材料包括多种聚合酸以及聚合酸与虫胶、鲸蜡醇和乙酸纤维素等物质的混合物。
可在其中掺入本发明组合物供口服或注射给药的液体形式包括水性溶液、适当调味的糖浆、水性或油性悬液，和含有食用油如玉米油、棉籽油、芝麻油、椰子油或花生油以及酏剂和类似药物载体的调味乳剂。
供吸入或吹入的组合物包括含在药学上可接受的水性或有机溶剂或其混合物中的溶液和悬液，还包括粉末。所述液体或固体组合物可含有如上所述的合适的药学上可接受的赋形剂。优选该组合物通过口或鼻呼吸道给予以产生局部或全身效果。含在优选的药学上可接受的溶剂内的组合物可用惰性气体雾化。可从雾化装置直接吸入雾化的溶液或者可将雾化装置连接到面罩或间歇式正压呼吸机上。优选从以适当方式输送制剂的装置经口或经鼻给予溶液、悬液或粉末组合物。
以下制剂实施例例举了本发明的代表性药物组合物。
制剂实施例1制备了含以下成分的硬明胶胶囊成分含量(mg/胶囊)活性成分30.0淀粉305.0硬脂酸镁5.0将上述成分混合并填入硬明胶胶囊，填入量为340mg。
制剂实施例2用以下成分制备片剂制剂成分含量(mg/片)活性成分25.0微晶纤维素 200.0
胶体二氧化硅 10.0硬脂酸5.0将各组分混合并压制形成片剂，每片重240mg。
制剂实施例3制备了含以下组分的干粉吸入制剂成分 重量％活性成分 5乳糖 95将活性成分与乳糖混合，并将混合物加入干粉吸入器。
制剂实施例4如下制备每片含有30mg活性成分的片剂成分 含量(mg/片)活性成分 30.0mg淀粉 45.0mg微晶纤维素 35.0mg聚乙烯吡咯烷酮 4.0mg(用无菌水制成10％的溶液)羧甲基淀粉钠 4.5mg硬脂酸镁 0.5mg滑石 1.0mg总计 120mg将活性成分、淀粉和纤维素通过20目美国标准筛(U.S.sieve)，并充分混合。所得粉末与聚乙烯吡咯烷酮溶液混合，然后使其通过16目美国标准筛。如此制得的颗粒在50-60℃干燥并通过16目美国标准筛。使羧甲基淀粉钠、硬脂酸镁和滑石先通过30目美国标准筛，然后加入颗粒中，混合后用压片机压制以形成每片重120mg的药片。
制剂实施例5如下制备每颗含40mg药物的胶囊成分含量(mg/胶囊)活性成分40.0mg淀粉109.0mg硬脂酸镁1.0mg总计150.0mg
将活性成分、淀粉和硬脂酸镁混合，通过20目美国标准筛，并填入硬明胶胶囊，填入量为150mg。
制剂实施例6如下制备每个含25mg活性成分的栓剂成分含量活性成分25mg饱和脂肪酸甘油酯至2000mg将活性成分通过60目美国标准筛并悬浮于用最小需要热预先熔化的饱和脂肪酸甘油酯。然后将混合物倒入标称容量为2.0克的栓剂模并使其冷却。
制剂实施例7如下制备每5.0ml含50mg药物的悬液成分含量活性成分50.0mg黄原胶 4.0mg羧甲基纤维素钠(11％)50.0mg微晶纤维素(89％)蔗糖1.75g苯甲酸钠10.0mg调味料和色素适量纯水至5.0ml将活性成分、蔗糖和黄原胶混合，通过10目美国标准筛，然后与预先制备的微晶纤维素和羧甲基纤维素钠的水溶液混合。边搅拌边加入用一些水稀释的苯甲酸钠、调味料和色素。然后加入足量的水至所需体积。
制剂实施例8成分含量(mg/胶囊)活性成分15.0mg淀粉407.0mg硬脂酸镁3.0mg总计425.0mg将活性成分、淀粉和硬脂酸镁混合，通过20目美国标准筛，填入硬明胶胶囊，填入量为425.0mg。
制剂实施例9
可如下制备皮下制剂成分含量活性成分5.0mg玉米油 1.0ml制剂实施例10可如下制备局部制剂成分含量活性成分1-10g乳化蜡 30g液体石蜡20g白凡士林至100g将白凡士林加热至熔化。加入液体石蜡和乳化蜡并搅拌直至溶解。加入活性成分并继续搅拌直到其分散。然后使混合物冷却直到其成为固体。
制剂实施例11可如下制备静脉内制剂成分含量活性成分250mg等渗盐水1000ml用于本发明方法的其它优选制剂采用了透皮输递装置(“贴剂”)。这种透皮贴可用来以受控量连续或不连续输注本发明的化合物。运送药剂的透皮贴的结构和用途是本领域熟知的。见，例如，美国专利5023252，该专利被纳入本文作为参考。这种贴剂可被制成连续、脉动或按需递送药剂。
通常希望或需要将药物组合物直接或间接送入大脑。直接技术通常涉及将送药导管置入宿主的心室系统以便绕过血脑屏障。一种用于将生物因子运送到身体特定解剖区域的此类可植入送药系统描述于美国专利5011472，该专利被纳入本文作为参考。
间接技术通常是优选的，这种技术通常涉及通过将亲水药物转变成脂溶性药物而制成使药效潜伏化的组合物。潜伏化通常是通过封闭药物上存在的羟基、羰基、硫酸盐和伯胺基以使药物的脂溶性更强和能够通过血脑屏障而实现的。或者，可通过动脉内灌输能暂时打开血脑屏障的高渗溶液来增强亲水药物的递送。
在《雷明顿药物科学》(Remington′s Pharmaceutical Sciences，Mace PublishingCompany，Philadelphia，PA，第17版，1985)中能找到可用于本发明的其它合适制剂。
剂量和给药如上所述，这里所述的化合物适合用于上述各种药物递送系统。此外，为延长所施用化合物的体内血清半衰期，可将化合物包入胶囊、装入脂质体腔、制备成胶体，或者采用能延长化合物半衰期的其它常规技术。可用来制备脂质体的各种方法描述于，例如，Szoka等的美国专利4235871、4501728和4837028中，这些专利纳入本文作为参考。
本发明的化合物可用来抑制KSP驱动蛋白的活性。一方面，至少部分由KSP介导的疾病是细胞增生性疾病。术语“细胞增生性疾病”或“细胞增殖疾病”指包括例如癌症、肿瘤、增生、再狭窄、心脏肥大、免疫疾病和炎症在内的疾病。本发明提供了治疗需要这种治疗的人或动物对象的方法，该方法包括单独给予或与其它抗癌药联合给予所述对象治疗有效量的式I-III的化合物。
本发明的化合物被用于体外或体内抑制癌细胞生长。术语“癌”指癌症，其中包括，例如，肺和支气管癌；前列腺癌；乳腺癌；胰腺癌；结肠和直肠癌；甲状腺癌；胃癌；肝和肝内胆管癌；肾和肾盂癌；膀胱癌；子宫体癌；宫颈癌；卵巢癌；多发性骨髓瘤；食道癌；急性骨髓性白血病；慢性骨髓性白血病；淋巴细胞性白血病；髓细胞性白血病；脑癌；口腔和咽癌；喉癌；小肠癌；非霍奇金淋巴瘤；黑色素瘤；和绒毛结肠腺瘤。
癌还包括选自癌瘤、腺癌和肉瘤的肿瘤或新生物。
此外，癌的类型可选自生长的实体瘤/恶性肿瘤、粘液性癌和圆形细胞癌、局部发展的肿瘤、人软组织癌、癌症转移、鳞状细胞癌、食管鳞状细胞癌，口腔癌，皮肤T细胞淋巴瘤，霍奇金淋巴瘤，非霍奇金淋巴瘤，肾上腺皮质癌，ACTH造成的肿瘤，非小细胞癌、乳腺癌、胃肠癌、泌尿道癌，女性生殖道的恶性肿瘤、男性生殖道的恶性肿瘤、肾癌，脑癌、骨癌、皮肤癌、甲状腺癌、视网膜母细胞瘤、成神经细胞瘤、腹水、恶性肿瘤性胸腔积液、间皮瘤、维尔姆斯肿瘤、胆囊癌、滋养层细胞瘤、血管外皮细胞瘤和卡波西肉瘤。
本发明的化合物或组合物可通过合适途径如口服、静脉内、腹膜内、透皮、局部、直肠或鼻内给予哺乳动物。
哺乳动物包括，例如，人和其它灵长类，宠物或伙伴动物如狗和猫，实验动物如大鼠、小鼠和兔，以及农场动物如马、猪、羊和牛。
肿瘤或新生物包括增殖不受控且正在进行的组织细胞的生长。这种生长中的一些是良性的，但其它被称为“恶性的”并且会导致器官死亡。恶性新生物或“癌”不同于良性生长，它们除了显示出侵略性的细胞增殖还会侵入周围组织和转移。此外，恶性新生物的特征在于，相比其它组织和周围组织它们显示出分化(较多的“去分化”)和组构化极大受损。这种特性被称为“退行”。
需要的话可对具有所需生化活性的化合物进行修饰以提供所需特性，如改进的药理学特性(例如，体内稳定性、生物利用度)，或者能在诊断应用中被检测的能力。可用多种方法测定稳定性，如在与肽酶或者人血浆或血清培育期间测量化合物的半衰期。
出于诊断的目的，可在化合物上连接多种标记，这些标记可直接或间接提供可检测信号。因此可用不同方法修饰本发明的化合物和/或组合物以满足不同的最终目的，同时保留其生物活性。此外，可引入不同反应性位点以连接颗粒、固体物质、大分子等。
标记的化合物可用于各种体内或体外用途。可采用许多标记，如放射性核素(例如，发射γ射线的放射性同位素如锝-99或铟-111)、荧光剂(例如，荧光素)、酶、酶底物、酶辅因子、酶抑制剂、化学发光化合物、生物发光化合物等。本领域的一般技术人员将了解用来结合复合物的其它合适标记或者将能够通过常规实验得知。可用本领域的一般技术人员熟知的标准技术实现这些标记的结合。
本发明的药物组合物适用于多种药物递送系统。适用于本发明的制剂可在《雷明顿药物科学》(Mace Publishing Company，Philadelphia，PA，第17版，1985)中找到。
给予患者的量将取决于将给予的药物、给药目的(如预防或治疗)、患者的状态、给药方式等。在治疗性应用中，给予已经患病的患者的组合物的量足以治愈或者至少部分抑制疾病及其并发症的发展或症状。足以实现这种目的的量被称为“治疗有效剂量”。有效实现这种用途的量将取决于要治疗的疾病症状，并由临床医生根据诸如疾病、病症或症状的严重性、患者的年龄、体重和一般状况等的因素判断。
给予患者的化合物通常为上述药物组合物形式。可通过常规灭菌技术或者可通过无菌过滤将这些组合物灭菌。所得水溶液可被封装以供使用或者被冻干，冻干的制品需在给药前与无菌水性运载体混合。化合物制品的pH通常为3-11，更优选约5-9，最优选约7-8。应理解，使用某些上述赋形剂、运载体或稳定剂将导致形成药物的盐。
本发明化合物和/或组合物的治疗剂量将根据，例如，治疗的特定用途、化合物的给药方式、患者的健康和症状、以及处方医生的判断而改变。例如，在口服给药时，剂量将通常为每天每千克体重约5微克至约50毫克，优选每天每千克体重约1毫克至约10毫克。或者，在静脉给药时，剂量将通常为每千克体重约5微克至约50毫克，优选每千克体重约500微克至约5000微克。考虑的其它给药途径包括但不限于鼻内、透皮、吸入、皮下和肌肉内。可根据体外或动物模型测试系统得到的剂量反应曲线推出有效剂量。
总之，本发明的化合物和/或组合物将通过任何可接受的类似用途药物的给药方式以治疗有效量给予。这种化合物的毒性和治疗功效可在细胞培养物或实验动物中通过标准药物规则确定，例如，可测定LD50(半数致死量)和ED50(半数治疗有效量)。毒性和疗效的剂量比为治疗指数，它可表示为LD50/ED50。治疗指数大的化合物是优选的。
获自细胞培养物试验和动物研究的数据可用于阐明用于人类的剂量范围。这种化合物的剂量宜在循环浓度范围之内，包括ED50，且毒性很小或没有毒性。根据所用剂量和采用的给药途径，剂量可在该范围内变化。对于用于本发明方法的任何化合物和/或组合物，可根据细胞培养物试验初步估计治疗有效剂量。可在动物模型中制订剂量以获得循环血浆浓度范围，其中包括在细胞培养物中测定的IC50(测试化合物的半数抑制浓度)。这种信息可用来更精确地确定人类的有效剂量。例如，可通过高效液相色谱确定血浆水平。
提供以下合成和生物实施例是为了阐述本发明而不是要以任何方式限制本发明的范围。
实施例参考以下实施例，用本文所述的方法或其它本领域熟知的其它方法合成了本发明的化合物。
化合物和/或中间体通过高效液相色谱(HPLC)定性，使用带有2690 SeparationModule的Waters Millenium色谱系统(Milford，马萨诸塞州)。分析柱是Alltima C-18反向柱，4.6×250mm，购自Alltech(Deerfield，伊利诺斯州)。采用梯度洗脱，通常从5％乙腈/95％水开始，用40分钟到达100％乙腈。所有溶剂含有0.1％三氟乙酸(TFA)。化合物通过紫外光(UV)检测，在220或254nm吸收。HPLC溶剂来自Burdickand Jackson(Muskegan，密歇根州)或Fisher Scientific(匹兹堡，宾西法尼亚州)。一些情况下，纯度通过薄层层析(TLC)测定，使用玻璃或塑料背衬的硅胶板，如Baker-FlexSilica Gel 1B2-F软板。TLC结果在紫外光下是容易通过肉眼检测的，或者可使用熟知的碘蒸气或其它各种染色技术。
在两台LCMS装置之一上进行质谱分析Waters System(Alliance HT HPLC和Micromass ZQ质谱仪；柱Eclipse XDB-C18，2.1×50mm；溶剂系统5-95％(或35-95％或65-95％或95-95％)乙腈水溶液，含有0.05％TFA；流速0.8mL/min；分子量范围500-1500；锥电压(cone voltage)20V；柱温40℃)或Hewlett Packard System(1100系列HPLC；柱Eclipse XDB-C18，2.1×50mm；溶剂系统1-95％乙腈水溶液，含有0.05％TFA；流速0.4mL/min；分子量范围150-850；锥电压50V；柱温30℃)。所有质量以质子化的母离子记录。
GCMS分析在Hewlett Packard装置(HP6890系列气相色谱，带有Mass SelectiveDetector 5973；加样体积1μL；最初柱温50℃；最终柱温250℃；运行时间20分钟；气体流速1mL/min；柱5％苯基甲基硅氧烷，型号HP 190915-443，尺寸30.0m×25m×0.25m)上进行。
核磁共振(NMR)分析用Varian 300Mhz NMR(Palo Alto，加州)进行。光谱参考是TMS或溶剂的已知化学位移。一些化合物样品在较高温度(例如75℃)下运行以促进增加样品溶解度。
本发明一些化合物的纯度通过元素分析(Desert Analytics，图森，亚利桑那州)判断。
在Laboratory Devices Mel-Temp装置(Holliston，马萨诸塞州)上测定熔点。
制备型分离使用Flash 40色谱装置和KP-Sil，60A(Biotage，Charlottesville，弗吉尼亚州)，或通过急骤柱层析，用硅胶(230-400目)填装，或通过HPLC，用C-18反相柱。Flash 40 Biotage系统和急骤柱层析通常使用的溶剂是二氯甲烷、甲醇、乙酸乙酯、己烷、丙酮、羟胺水溶液和三乙胺。反相HPLC常用的溶剂是变化浓度的乙腈和水，其中含有0.1％三氟乙酸。
除非另有说明，所述温度均为摄氏度。同时，在实施例及其它地方使用了以下缩写，其含义如下μg＝微克μl＝微升μM＝微摩尔浓度aq＝含水DCM＝二氯甲烷DIAD＝重氮基二羧酸二异丙酯DIEA＝二异丙基乙胺DMAP＝二甲基氨基吡啶
DMF＝二甲基甲酰胺DMSO＝二甲亚砜eq.＝当量g＝克h＝小时HPLC＝高效液相色谱kg＝千克L＝升M＝摩尔mg＝毫克min＝分ml＝毫升mM＝毫摩尔浓度mmol＝毫摩尔mol＝摩尔N＝正构nm＝纳米PTFE＝聚四氟乙烯rt＝室温THF＝四氢呋喃实施例1N-(3-氨基丙基)-N-[1-(3-苄基喹啉-2-基)-2-甲基丙基]-3-氟-4-甲基苯甲酰胺(表1的化合物1)步骤1.3-苄基-2-碘代喹啉 用这里所述方法或用本领域已知的常规方法制备喹啉10。在甲乙酮(40ml)中的喹啉10(1eq.，5g)和碘化钠(10eq.，29.5g)的溶液中加入氢碘酸(过量，20ml)。反应物在80℃回流8小时，然后室温搅拌过夜。蒸发溶剂并将残余物溶于乙酸乙酯。有机层用饱和碳酸氢钠、饱和氯化钠、硫代硫酸钠溶液洗涤，用硫酸镁和炭干燥，通过硅藻土过滤，并浓缩。棕色油状物通过急骤层析纯化，得到7.5克标题产物11，其为绿棕色油状物，将其储存于0℃。
步骤2.1-(3-苄基喹啉-2-基)-2-甲基丙-1-醇 在-78℃的3-苄基-2-碘代喹啉11(1eq.，1.45g)的无水四氢呋喃(20ml)溶液中加入异丙基氯化镁(3eq.，6.3ml)。1小时后溶液的颜色从绿色变为橙色。加入异丁醛12(3eq.，1.15ml)并使反应混合物回复室温，并再搅拌1小时。加入乙酸乙酯。有机层用饱和碳酸氢钠、饱和氯化钠洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并浓缩。粗物质通过急骤层析纯化，得到150毫克1-(3-苄基喹啉-2-基)-2-甲基丙-1-醇13。
步骤3.2-[1-(3-苄基喹啉-2-基)-2-甲基丙基]-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮 在0℃的1-(3-苄基喹啉-2-基)-2-甲基丙-1-醇(102mg，1eq.)的无水四氢呋喃(3ml)溶液中加入邻苯二甲酰亚胺(154mg，3eq)、三苯基膦(138mg，1.5eq.)和DIAD(1.5eq.，104μl)。使反应物回复室温并搅拌过夜。蒸发溶剂。将残余物溶于乙酸乙酯。有机层用饱和碳酸氢钠、饱和氯化钠洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并浓缩。所得物质通过急骤层析纯化，得到91毫克2-[1-(3-苄基喹啉-2-基)-2-甲基丙基]-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮14，其为黄色油状物。
步骤4.1-(3-苄基喹啉-2-基)-2-甲基丙-1-胺
在1-(3-苄基喹啉-2-基)-2-甲基丙-1-胺(91mg，1eq.)的乙醇(2ml)溶液中加入肼(10μl，1.5eq)。反应物在室温搅拌1小时但只检测到极少产物。在40℃加热3小时，检测到27％的原料。加入更多的肼(10μl，1.5eq)并将反应混合物再搅拌半小时。通过PTFE滤器滤出沉淀，并用大量CH2Cl2洗涤。浓缩滤液，粗产物通过急骤层析纯化，得到31毫克1-(3-苄基喹啉-2-基)-2-甲基丙-1-胺15，其为澄清油状物。
步骤5.2-(3-{[1-(3-苄基喹啉-2-基)-2-甲基丙基]氨基}丙基)-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮 在1-(3-苄基喹啉-2-基)-2-甲基丙-1-胺(31mg，1eq.)的CH2Cl2(3ml)溶液中加入醛16(0.8eq.，17mg)、三乙酰氧基硼氢化钠和乙酸。反应混合物于室温搅拌3小时。加水，然后用乙酸乙酯萃取含水层。有机层用饱和碳酸氢钠、饱和氯化钠洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到46毫克2-(3-{[1-(3-苄基喹啉-2-基)-2-甲基丙基]氨基}丙基)-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮17。
步骤6.N-[1-(3-苄基喹啉-2-基)-2-甲基丙基]-3-氟-N-[3-(1，3-二氧代-1，3-二氢-2H-异吲哚-2-基)丙基]-4-甲基苯甲酰胺
在2-(3-{[1-(3-苄基喹啉-2-基)-2-甲基丙基]氨基}丙基)-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮17(15mg，1eq.)的CH2Cl2(1ml)溶液中加入3-氟-4-甲基苯甲酰氯18(11mg，2eq.)。苯甲酰氯18用本领域已知的常规方法制备。然后加入三乙胺(18μl，4eq.)。反应混合物在室温搅拌过夜。加水以淬灭反应。有机层用饱和碳酸氢钠、饱和氯化钠洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到19毫克N-[1-(3-苄基喹啉-2-基)-2-甲基丙基]-3-氟-N-[3-(1，3-二氧代-1，3-二氢-2H-异吲哚-2-基)丙基]-4-甲基苯甲酰胺19。
步骤7.N-(3-氨基丙基)-N-[1-(3-苄基喹啉-2-基)-2-甲基丙基]-3-氯-4-甲基苯甲酰胺 在N-[1-(3-苄基喹啉-2-基)-2-甲基丙基]-3-氟-N-[3-(1，3-二氧代-1，3-二氢-2H-异吲哚-2-基)丙基]-4-甲基苯甲酰胺19(19mg，1eq)的乙醇(1ml)溶液中加入肼(3μl，3eq)。反应物室温搅拌2小时，然后在40℃再加热1小时。沉淀通过PTFE膜过滤并用CH2Cl2洗涤。将滤液浓缩并通过急骤层析纯化，得到2毫克N-(3-氨基丙基)-N-[1-(3-苄基喹啉-2-基)-2-甲基丙基]-3-氟-4-甲基苯甲酰胺2，其为白色固体。
实施例2N-(3-氨基丙基)-N-[1-(3-苄基-7-氯喹啉-2-基)-2-甲基丙基]-4-甲基苯甲酰胺(表1的化合物4)
N-(3-氨基丙基)-N-[1-(3-苄基-7-氯喹啉-2-基)-2-甲基丙基]-4-甲基苯甲酰胺4按以下步骤合成，然后采用与实施例1的步骤3-7类似的过程，用1-(3-苄基-7-氯喹啉-2-基)-2-甲基丙-1-醇代替实施例1步骤3的1-(3-苄基喹啉-2-基)-2-甲基丙-1-醇开始。
步骤1.N-(3-氯苯基)-3-苯基丙酰胺 0℃下，在无水DCM(150ml)中3-氯苯胺(8.3ml，78.4mmol)、DMAP(1.0g，7.8mmol)和吡啶(6.9ml，86.2mmol)的混合物中加入3-苯基丙酰氯(12.8ml，86.2mmol)。使混合物回复室温并在氮气下搅拌过夜。在反应混合物中加入过量DCM。有机层用1N HCl(3×)、饱和NaHCO3(3×)、盐水洗涤，用MgSO4干燥，并在真空下除去溶剂，得到21.6克N-(3-氯苯基)-3-苯基丙酰胺21，其为桃色粗制固体。
步骤2.3-苄基-2，7-二氯喹啉 0℃下，在POCl3(28.7ml，308mmol)中逐滴加入DMF(4.5ml，57.8mmol)。溶液在0℃搅拌1小时。加入N-(3-氯苯基)-3-苯基丙酰胺(10g，38.5mmol)。使反应混合物回复室温，然后在75℃加热18小时。将热的反应混合物倒入500mL冰中并用乙酸乙酯(3X)萃取。合并的有机层用NaHCO3、盐水洗涤，用MgSO4干燥，过滤，并在真空下除去溶剂。粗产物用ISCO纯化系统纯化，用乙酸乙酯(0-100％)的己烷溶液作为洗脱溶剂，得到8.1g(28.1mmol，73％)3-苄基-2，7-二氯喹啉22，其为白色固体。
步骤3.3-苄基-7-氯-2-碘代-喹啉 将30mL甲乙酮中的3-苄基-2，7-二氯喹啉(3.0g，10.4mmol)和碘化钠(15.6g，104mmol)的混合物加热至80℃。在其中加入氢碘酸(1.13ml，13.2mmol)。反应混合物在80℃加热1.5小时，然后冷却至室温。反应用水淬灭。在反应混合物中加入过量乙酸乙酯，有机层用饱和NaHCO3、饱和NA2S2O3、盐水洗涤，用MgSO4干燥，过滤，并在真空下除去溶剂，得到3.9克(10.3mmol，99％)3-苄基-7-氯-2-碘代-喹啉23，其为棕褐色固体。
步骤4.3-苄基-7-氯喹啉-2-醛(carbaldehyde) 在-78℃下，在15mL无水THF中的3-苄基-7-氯-2-碘代-喹啉(1.5g，3.95mmol)溶液中加入异丙基氯化镁(5.93ml，11.85mmol)。-78℃下搅拌30分钟后加入DMF(1.53ml，19.8mmol)。使反应混合物在2小时内缓慢回复室温。然后用饱和NH4Cl淬灭，并用乙酸乙酯(3×)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用MgSO4干燥，并在真空下除去溶剂，得到1.23克3-苄基-7-氯喹啉-2-醛24，其为棕色油状物。
步骤5.1-(3-苄基-7-氯喹啉-2-基)-2-甲基丙-1-醇
在-78℃下，在3-苄基-7-氯喹啉-2-醛(1.23g，4.4mmol)的无水DCM(12ml)溶液中加入异丙基氯化镁(6.6m，13.2mmol)。使所得溶液在1小时内回复室温。反应混合物然后用饱和NH4Cl淬灭并用DCM(3×)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用MgSO4干燥，并在真空下除去溶剂。用ISCO纯化系统对粗产物进行急骤柱层析。在己烷中用乙酸乙酯(0-100％)梯度洗脱得到1-(3-苄基-7-氯喹啉-2-基)-2-甲基丙-1-醇25(0.44g，1.3mmol，30％)，其为红色油状物。
用上述实施例和方法中描述的方法制备下表中的化合物。合成中使用的原料是精通本领域的技术人员已知的，并可通过商业获得或者可用已知方法制备。化合物采用ACD/Name Batch Version 5.04(Advanced Chemistry Development Inc.；Toronto，Ontario；www.acdlabs.com)命名。
实施例3确定KSP活性的测定法该实施例提供了确定KSP体外活性的代表性体外测定法。纯化的牛脑微管购自Cytoskeleton Inc(Denver，Colorado，USA)。人KSP的驱动结构域(Eg 5，KNSL1)被克隆、表达、并纯化至纯度大于95％。Biomol Green购自Affinity Research ProductsLtd.(Matford Court，Exeter，Devon，英国)。微管和KSP驱动蛋白(即KSP驱动结构域)用测定缓冲液(20mM Tris-HCl(pH 7.5)，1mM MgCl2，10mM DTT和0.25mg/mLBSA)稀释至浓度为35μg/mL(微管)和45nM(KSP)。微管/KSP混合物然后在37℃孵育10分钟以促进KSP与微管结合。
测定平板(384孔板)的每个孔中含有1.25μL溶于DMSO的抑制剂或测试化合物(对照仅含DMSO)，在其中加入25μL ATP溶液(ATP用测定缓冲液稀释至浓度为300μM)和25μL上述微管/KSP溶液。平板在室温下孵育1小时。孵育后在每个孔中加入65μL Biomol Green(一种检测无机磷释放的基于孔雀绿的染料)。再将平板孵育5-10分钟，然后在630nm用Victor II平板阅读测定吸光度。630nm吸光度的量对应于样品中KSP活性的量。然后基于每种浓度下630nm吸光度的降低，用Excel的XLFit或GraphPad Software Inc的Prism数据分析软件通过非线性回归计算每种抑制剂或测试化合物的IC50。
通过实施例3测得的IC50可知，优选的本发明化合物的生物活性小于约1mM，优选实施方案的生物活性小于约25μM，特别优选的实施方案的生物活性小于约1000nM，最优选的实施方案的生物活性小于约100nM。
权利要求
1.式I的化合物或其药学上可接受的盐、酯或前药 其中m是0-3的整数；R1选自酰氨基、羧基酯和任选被羟基或卤素取代的C1-C5烷基；R2是氢或C1-C5烷基；R3是-C(＝X)-A，其中A选自芳基、杂芳基、杂环基和环烷基，所有这些基团都可任选被1-4个选自以下的取代基取代C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、卤素、羟基和硝基，且X是氧或硫；R4是-亚烷基-杂环基或-亚烷基-NR7R8，其中的亚烷基是C1-C4直链亚烷基；R7和R8独立选自氢、C1-C4烷基、芳基烷基、杂芳基烷基、环烷基和环烷基烷基；R5选自L-A1，其中的A1选自芳基、杂芳基、杂环基和环烷基，所有这些基团都可任选被1-4个选自以下的取代基取代C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、卤素、羟基和硝基，且其中的L选自氧，-NR9，其中R9是氢或烷基，-S(O)q-，其中q是0、1或2，和任选被羟基、卤素或酰氨基取代的C1-C5亚烷基；和R6选自C1-C5烷基、C2-C5烯基、C2-C5炔基、-CF3、C1-C5烷氧基、卤素和羟基。
2.如权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐、酯和前药，其特征在于，所述化合物用式II表示 其中A2和A3独立选自芳基、杂芳基、杂环基和环烷基，所有这些基团都可任选被1-4个选自以下的取代基取代C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、卤素、羟基和硝基；各R6独立选自C1-C5烷基、C2-C5烯基、C2-C5炔基、-CF3、C1-C5烷氧基、卤素和羟基；R11是C2-C3烷基；R12和R13独立选自氢、C1-C4烷基、芳基烷基、杂芳基烷基、环烷基和环烷基烷基；m是0-2的整数；n是1-3的整数；和p是1-4的整数。
3.如权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐、酯和前药，其特征在于，所述化合物用式III表示 其中A2和A3独立选自芳基、杂芳基、杂环基和环烷基，所有这些基团都可任选被1-4个选自以下的取代基取代C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、卤素、羟基和硝基；R12和R13独立选自氢、C1-C4烷基、芳基烷基、杂芳基烷基、环烷基和环烷基烷基；p是1-4的整数。
4.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，R1是C1-C5烷基。
5.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，R1是异丙基或叔丁基。
6.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，R2是氢或甲基。
7.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，X是氧。
8.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，A是芳基。
9.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，A是苯基或萘基。
10.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，A是杂芳基。
11.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，A选自吡啶基、咪唑基、呋喃基、吡唑基和噻唑基。
12.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，A是环烷基。
13.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，A是环己基。
14.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，A被1-4个选自以下的取代基取代氯、甲基、溴、氟、硝基、-CF3、甲氧基和叔丁基。
15.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，-C(O)-A选自(2-氯-6-甲基吡啶-4-基)羰基；(5-甲基咪唑-4-基)羰基；(萘-2-基)羰基；(吡啶-3-基)羰基；(吡啶-4-基)羰基；3，4-二氟苯甲酰基；3，4-二甲基苯甲酰基；3，5-二甲基吡唑-3-基羰基；2-(3-氨基丙酰胺基)-4-甲基苯甲酰基；2，4-二氟苯甲酰基；2，6-二氟苯甲酰基；2-氯苯甲酰基；2-氯吡啶-3-基羰基；2-氯吡啶-5-基羰基；2-氟苯甲酰基；2-甲氧基苯甲酰基；3，4-二氯苯甲酰基；3-氯苯甲酰基；3-氟-4-甲基苯甲酰基；4-溴苯甲酰基；4-氯苯甲酰基；4-羟基苯甲酰基；4-甲氧基苯甲酰基；4-甲基-3-氟苯甲酰基；4-甲基苯甲酰基；4-硝基苯甲酰基；4-叔丁基苯甲酰基；4-三氟甲基苯甲酰基；苯甲酰基；环己基羰基；呋喃-3-基羰基；吡啶-2-基羰基；和噻唑-4-基羰基。
16.如权利要求15所述的化合物，其特征在于，-C(O)-A选自4-甲基-3-氟苯甲酰基、4-甲基苯甲酰基和3，4-二甲基苯甲酰基。
17.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，R4选自3-(苄基氨基)丙基；3-(环丁基氨基)丙基；3-(环己基甲基氨基)丙基；3-(二乙基氨基)丙基；3-(异丙基氨基)丙基；3-[(3-三氟甲基吡啶-6-基)氨基]丙基；3-氨基丙基；2-氨基乙基；哌啶-3-基甲基；和吡咯烷-3-基甲基。
18.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，R4是3-氨基丙基。
19.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，R5是亚烷基-A1，A1是芳基。
20.如权利要求19所述的化合物，其特征在于，R5选自苄基；2-甲基苄基；3，5-二氟苄基；3-乙酰氨基苄基；3-氟苄基；3-羟基苄基；4-氯苄基；4-二氟苄基；和4-甲基苄基。
21.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，R6选自氢、氟、氯、甲基、溴、乙基、乙烯基、甲氧基、苯基、乙炔基和-CF3。
22.如权利要求2所述的化合物，其特征在于，m是1，n是1。
23.如权利要求2所述的化合物，其特征在于，R11是异丙基。
24.如权利要求2所述的化合物，其特征在于，p是3。
25.如权利要求2所述的化合物，其特征在于，R12和R13是氢。
26.如权利要求2所述的化合物，其特征在于，A2是苯基。
27.如权利要求3所述的化合物，其特征在于，A2是苯基。
28.如权利要求3所述的化合物，其特征在于，p是3。
29.如权利要求3所述的化合物，其特征在于，R12和R13是氢。
30.选自以下的化合物，以及它们的药学上可接受的盐、酯和前药N-(3-氨基丙基)-N-[1-(3-苄基喹啉-2-基)-2-甲基丙基]-3-氟-4-甲基苯甲酰胺；N-(3-氨基丙基)-N-[1-(3-苄基喹啉-2-基)-2-甲基丙基]-4-甲基苯甲酰胺；N-(3-氨基丙基)-N-[1-(3-苄基喹啉-2-基)-2-甲基丙基]-3，4-二甲基苯甲酰胺；N-(3-氨基丙基)-N-[1-(3-苄基-7-氯喹啉-2-基)-2-甲基丙基]-4-甲基苯甲酰胺；N-(3-氨基丙基)-N-[1-(3-苄基-7-氯喹啉-2-基)-2-甲基丙基]-3-氟-4-甲基苯甲酰胺。
31.一种药物组合物，所述组合物含有治疗有效量的权利要求1所述的化合物和药学上可接受的运载体。
32.如权利要求31所述的组合物，还含有至少一种其它治疗癌症的药剂。
33.如权利要求31所述的组合物，其特征在于，所述其它治疗癌症的药剂选自伊立替康、托泊替康、吉西他滨、伊马替尼、曲妥单抗、5-氟尿嘧啶、亚叶酸、卡铂、顺铂、多西他赛、紫杉醇、特扎西他滨(tezacitabine)、环磷酰胺、长春花生物碱、蒽环类抗生素、利妥昔单抗和曲妥单抗。
34.一种用于哺乳动物治疗至少部分由KSP介导的疾病的方法，所述方法包括给予需要这种治疗的哺乳动物治疗有效量的如权利要求31所述组合物。
35.如权利要求34所述的方法，其特征在于，所述疾病是细胞增生性疾病。
36.如权利要求35所述的方法，其特征在于，所述细胞增生性疾病是癌症。
37.如权利要求36所述的方法，其特征在于，所述癌症选自肺和支气管癌；前列腺癌；乳腺癌；胰腺癌；结肠和直肠癌；甲状腺癌；胃癌；肝和肝内胆管癌；肾和肾盂癌；膀胱癌；子宫体癌；宫颈癌；卵巢癌；多发性骨髓瘤；食道癌；急性骨髓性白血病；慢性骨髓性白血病；淋巴细胞性白血病；髓细胞性白血病；脑癌；口腔和咽癌；喉癌；小肠癌；非霍奇金淋巴瘤；黑色素瘤；和绒毛结肠腺瘤。
38.如权利要求34所述的方法，还包括给予所述哺乳动物患者一种治疗癌症的其它药剂。
39.如权利要求38所述的方法，其特征在于，治疗癌症的其它药剂选自伊立替康、托泊替康、吉西他滨、伊马替尼、曲妥单抗、5-氟尿嘧啶、亚叶酸、卡铂、顺铂、多西他赛、紫杉醇、特扎西他滨、环磷酰胺、长春花生物碱、蒽环类抗生素、利妥昔单抗和曲妥单抗。
40.权利要求31所述组合物在制造用于治疗癌症的药物中的应用。
全文摘要
本发明涉及新的取代的喹啉化合物及其药学上可接受的盐、酯或前药，这种新化合物与药学上可接受的运载体的组合物，以及这种新化合物作为驱动蛋白纺锤体蛋白抑制剂的应用。本发明的化合物具有以下通式(I)。
文档编号A61K31/4709GK1956960SQ200580016440
公开日2007年5月2日 申请日期2005年5月19日 优先权日2004年5月21日
发明者王为波, R·康斯坦丁, L·M·拉格尼顿, K·贝尔 申请人:希龙公司
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