氮杂糖衍生物、乙酰肝素酶抑制剂、其制备方法、含有该衍生物的组合物及其应用的制作方法
专利名称：氮杂糖衍生物、乙酰肝素酶抑制剂、其制备方法、含有该衍生物的组合物及其应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及氮杂糖衍生物、乙酰肝素酶抑制剂、其制备方法、含有该衍生物的组合物及其在治疗方面的应用。
乙酰肝素酶是一种内葡糖苷酸酶类型的酶，其底物是肝素/硫酸乙酰肝素(HS)族多糖。已知乙酰肝素有I型和II型(McKenzie等人，Biochem.Biophys.Res.Commun.，(2000)，276卷，p.1170-1177)。此类酶专门对在D-葡糖醛酸型多糖单元和D-葡糖胺型单体单元之间的β-1→4型键进行水解，释放出大约10～20个糖单元的HS片段(Pikas，D.S.等人，J.Biol.Chem.，(1998)，273卷，p.18770-18777)。乙酰肝素酶以同样的方式使含有硫酸乙酰肝素的蛋白多糖的多糖链降解(乙酰肝素蛋白多糖缩写为HSPGs)(Vlodavsky和Friedmann，J.Clin.Invest.，(2001)，108卷，p.341-347)。HSPGs由在其上面通过共价键连接着线形HS链的中心蛋白质构成(Kjellen等人，Annu.Rev.Biochem.，(1991)，卷60，p.443-475)。HSPGs是一种泛蛋白的大分子。与HS一样，HSPGs存在在许多种细胞的表面和细胞外基质中(细胞外基质缩写为ECM)(Kjellen等人同上文献(1991)；Bernfield等人，Annu.Rev.Biochem.，(1999)，卷68，p.729-777；David等人，FASEB J.，(1993)，卷7，p.1023-1030；Lozzo等人，Annu.Rev.Biochem.，(1998)，卷67，p.609-652)。ECM构成脊椎动物和无脊椎动物结缔组织的主要部分，占据了细胞外的空间。它还包围着器官并在内皮，特别是在毛细血管的周围(Wight等人，Arteriosclerosis，(1989)，卷9，p.1-20)，起着保持和保护器官和内皮壁垒的作用(McKenzie等人，Biochem.J，2003，卷373，p.423-435)。ECM也是涉及到各种细胞机理，特别是细胞分化和修复的关键调制剂(Folkman等人，Adv.Exp.Med.Biol.，(1992)，卷313，p.355-364)。
在先有技术中曾经叙述过化合物乙酰肝素的抑制剂。比如在国际专利申请WO 02/0600374中叙述了苯并-1，3-唑衍生物、国际专利申请WO 03/074516涉及了邻苯二甲酰亚胺羧酸和苯并唑、国际专利申请WO 04/013132叙述了呋喃噻唑衍生物，还有国际专利申请WO04/046123叙述了苯并唑衍生物、苯并噻唑和苯并咪唑。
在Takahashi等人，Chem.Lett.，(1994)，卷11，p.2119；Takahashi等人，Tetrahedron，(2001)，卷57，p.6915-6926中叙述了在5位上用氮原子取代氧原子的短链(两个链节)氮杂糖衍生物的合成方法。但是没有鉴别其在生体内的活性。
具有如下通式单一链节的氮杂糖， 已经被叙述过(美国专利6,583,158、Ichikawa等人，J.Amer.Chem.Soc.，(1998)，卷120，p.3007)。
寻找和开发出具有良好生体外和生体内活性的产品的需求总是存在的。
现已意外地发现，合成的氮杂糖衍生物作为乙酰肝素酶抑制剂具有良好的活性。因此，本发明涉及新型的氮杂糖衍生物，即乙酰肝素酶抑制剂。这些新型的化合物具有良好的乙酰肝素酶抑制活性。
本发明的目的涉及用如下通式(I)表示的化合物，该化合物呈游离形式或与可药用碱或酸形成的盐形式，以及呈溶剂化物或水合物的形式 其中R表示氢原子、羟基、基团-OSO3-、基团-O-(C1～C5)烷基或基团-O-芳烷基；Z表示基团COO-或羟基X表示羟基或通式A的糖单元
其中-R1表示可以将A连接到氮杂糖单元或者其它糖单元上的氧原子，-R2表示基团-NH2、基团-NHCO(C1～C5)烷基、基团-NHCO-芳基、基团-NHSO3-、羟基、基团-O-(C1～C5)烷基、基团-O-芳烷基或基团-OSO3-，-R3表示羟基、基团-OSO3-、基团-O-(C1～C5)烷基或基团-O-芳烷基，-R4表示羟基、基团-OSO3-、基团-O-(C1～C5)烷基、基团-O-芳烷基或通式B的糖单元 其中-R6表示能够将B连接到另外的通式A的糖单元上的氧原子，-R7和R8具有如前面所定义的R3同样的定义，-R9表示羟基、基团-OSO3-、基团-O-(C1～C5)烷基、基团-O-芳烷基或如上所述通式A的糖单元，-R5具有与前面所定义的R3同样的定义；Y表示氢原子、基团(C1～C5)烷基或通式D的糖单元
其中-R10、R12和R13分别具有与前面所定义的R5、R3和R2同样的定义，-R11表示·能够将D接枝在氮杂糖单元上的基团(C1～C3)亚烷基，或者·能够将D接枝在另外的糖单元上的氧原子，-R14表示基团-O-(C1～C5)烷基或基团-O-E，其中E表示如下通式的基团 其中-R15表示基团-O-(C1～C5)烷基、基团-O-芳烷基或通式D的糖单元，其中R11表示氧原子，-R16和R17具有如前面所定义的R3同样的定义，然而，是在X和R每一个都表示羟基，Y不表示氢原子的条件下，以及由通式(I)的化合物包含的糖单元数为1～10。
按照其一个优选的形式，本发明涉及通式(I)的化合物，该化合物呈游离形式或与可药用碱或酸形成的盐形式，以及呈溶剂化物或水合物的形式
其中R表示羟基；Z表示基团COO-或羟基；X表示羟基或通式A的糖单元 其中-R1表示氧原子，-R2表示基团-NHCOCH3、基团-NHSO3-、基团-OSO3-，-R3表示羟基或基团-O-(C1～C5)烷基，-R4表示羟基、基团-O-芳烷基或通式B的糖单元 其中-R6表示氧原子，-R7表示基团-OSO3-，-R8表示羟基、基团-O-(C1～C5)烷基或基团-O-芳烷基，-R9表示基团-OSO3-、基团-O-芳烷基、基团-O-(C1～C5)烷基或如上所定义通式A的糖单元，-R5表示基团-OSO3-，Y表示氢原子或通式D的糖单元
其中-R10具有与前面所定义的R5同样的定义，-R12表示羟基或基团-OSO3-，-R13表示基团-NHSO3-，-R11表示与氮杂糖单元相连接的亚甲基或与E相连接的氧原子，-R14表示基团-O-CH3或基团-O-E，其中E表示如下通式的基团 其中-R15表示单元D，其中R11表示能够将E连接到D上的氧原子，-R16表示基团-OSO3-，-R17表示羟基，条件是由通式(I)的化合物包含的糖单元数为2～10。
特别优选的一类化合物是式中Y是氢原子的通式I的化合物。
本发明包括了呈其酸的形式或其任何一种可药用盐形式的氮杂糖衍生物。在酸的形式中，官能团-COO-和-SO3-分别呈-COOH和-SO3H的形式。
按照其特别优选的方面，本发明涉及如下的化合物·(2，4-二-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠(idopyranosyluronate de sodium))-(1-4)-(2-乙酰胺基-2-脱氧-6-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-乙酰胺基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-羟基-4-氧哌啶-3-羧酸钠(3S，4R，5R))(化合物20#)。
·(2，4-二-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-N-磺酸钠基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-N-磺酸钠基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-羟基-4-氧哌啶-3-羧酸钠(3S，4R，5R))(化合物27#)。
·(3-O-甲基-2，4-二-O-磺酸钠基-α-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(3-O-甲基-2，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-O-甲基-2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(3-O-甲基-2，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-羟基-4-氧哌啶-3-羧酸钠(3S，4R，5R))(化合物47#)。
·(2，4-二-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-羟基-4-氧哌啶-3-羧酸钠(3S，4R，5R))(化合物69#)。
·(4-O-丙基-2-O-磺酸钠基-α-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)(5-羟基-4-氧哌啶-3-羧酸钠(3S，4R，5R))(化合物74#)。
·(2，4-二-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-乙酰胺基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-乙酰胺基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-羟基-5-羟甲基-4-氧哌啶(3S，4R，5R))(化合物123#)。
·(4-O-苯基丙基-二-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-乙酰胺基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-乙酰胺基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-羟基-4-氧哌啶-3-羧酸钠(3S，4R，5R))(化合物124#)。
在本发明的框架内-(C1～C5)烷基表示线形或分支的可含有1～5个碳原子的饱和脂族基团。作为例子可以举出比如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基等，--O-芳烷基表示如上所定义的烷基，但被本身可携带取代基的芳族基团取代。作为例子可以举出比如p-甲氧基苄基、苯甲基、苯乙基、苯丙基等，-(C1～C3)亚烷基表示含有1～3个碳原子的二价烷基。
所谓本发明氮杂糖衍生物的可药用盐，指的是一种氮杂糖衍生物，其中一个或几个-COO-和/或-SO3-官能团以离子形式与可药用的阳离子相连接。按照本发明优选的盐是其中阳离子选自碱金属阳离子，或者更优选其中的阳离子是Na+或K+的盐。
原则上，按照本发明的化合物制备方法使用如前面的文献中所报道来制备并特别考虑到保护基团的正交性(orthogonalité)来选择的单糖、二糖或低聚糖基的合成单体。特别要参考EP 300099、EP 529715、EP 621282和EP 649854以及C.van Boeckel、M.Petitou，Angew.Chem.Int.Ed.Engl.，(1993)，卷32，p.1671-1690。然后将这些合成单体彼此偶联，提供出与按照本发明化合物相应的被保护化合物。然后使用本领域技术人员所熟知的方法将这些相应的被保护化合物转化为按照本发明的化合物。
按照本发明的化合物还含有氮杂糖链节(即取代的哌啶)，合成此种化合物要求制备带有保护基团的此链节前体，这些保护基团要与后面与单糖、二糖和低聚糖的偶合相容。氮杂糖前体的制备方法在文献中已经叙述。特别可参考《作为糖苷酶抑制剂的亚胺基糖》，AEStütz，Wiley-VCH，1999。
当得到了用来组合此链所必需的合成单体时，将这样的合成单体彼此进行偶合。在进行所述的偶合反应时，在其异头碳上被活化的“供体”合成单体与具有至少一个自由羟基的“受体”合成单体反应。
本发明涉及通式(I)化合物的制备方法，其特征在于，在第一步当中，制备所需化合物(I)完全被保护的相应化合物，在第二步中，引入带负电的基团(羧酸根、磺酸根)以及自由羟基和/或将它们解保护。
按照本领域技术人员公知的反应，特别是使用合成糖苷的方法(G.J.Boons，Tetrahedron，(1996)，卷52，p.1095-1121；WO 98/03554和WO 99/36443)进行此前体的合成，按照该方法，糖苷键的低聚糖供体与糖苷键低聚糖受体反应，得到另一种低聚糖，其长度等于反应的两个化合物之和。重复进行此程序，直至得到所需的通式(I)化合物。所需的最终化合物的结构决定了在各个合成步骤中使用的化合物的性质，根据在现有技术中公知的规律来控制其立体化学和区域选择性。
一般按照如下反应，通过链接由其完全被保护的聚糖前体得到本发明的化合物-释放和取代该官能团，然后将其转化为N-和/或O-磺酸根。
-释放其它官能团，必要时比如通过还原胺化反应将这些片段彼此组合。
可在此方法的不同阶段进行羧酸官能团的释放。
可使用合成糖苷和有机化学的本领域技术人员公知的各种策略自然地制备本发明的化合物。
如上所述的方法是本发明优选的方法。但是，通式(I)化合物也可用在比如《单糖，其化学及其在天然产物中的作用》，P.M.Collins和R.J.Ferrier，J.Wiley & sons，1995和在G.J.Boons，Tetrahedron，(1996)，卷52，p.1095-1121中所述的糖化学公知的其它方法制备。
在制备化合物(I)的方法中使用的保护基团是在糖化学中通常使用的，比如在《有机合成中的保护基团》，TW Greene，PGM Wuts，John Wiley & sons，New-York，1999中提到的。
例如，这些保护基团优选自乙酰基、卤代甲基、苯甲酰基、乙酰丙酸基(lévulinyle)、苄基、取代的苄基、任选取代的三苯甲基、氨基甲酸酯、四氢吡喃基、烯丙基、戊烯基、叔丁基二甲基甲硅烷基(tBDMS)或三甲基甲硅烷基乙基。
活化基团是在糖化学中通常使用的，是按照比如G.J.Boons，Tetrahedron，(1996)，卷52，p.1095-1121中叙述的。这样的活化基团选自比如亚氨酸根、硫代糖苷、戊烯基糖苷、黄原酸根、亚磷酸根或卤化物。
如上所述的方法能够得到呈盐形式的本发明化合物。为了得到相应的酸，要使呈盐形式的本发明化合物与呈酸形式的阳离子交换树脂相接触。
然后用碱中和呈酸形式的本发明化合物，以得到所需的盐。为了制备通式(I)化合物的盐，可使用各种无机碱或有机碱，与通式(I)化合物一起给出了可药用盐。优选使用氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钙或氢氧化镁作为碱。通式(I)化合物的钠盐和钙盐是优选的盐。
按照本发明的化合物是生物化学和药物学的研究对象。下面的非限制性的测试说明本发明。
定义如下的术语PET聚对苯二甲酸乙二醇酯AM乙酰氧甲基DMEM被Dulbecco改进的Eagle介质EDTA乙二胺四乙酸Tris三(羟甲基)氨基甲烷AT抗凝血酶素IIInkatnanokatal＝酶的测量单位(由生产者给出)，表示单位时间催化的底物量。
1.在酶系统中评价乙酰肝素酶抑制剂的活性(确定本发明化合物的CI50)通过其降解合成戊聚糖(fondaparinux)的能力来显示出乙酰肝素酶的活性。通过其抗因子Xa活性来测定合成戊聚糖的浓度。
A.材料和方法乙酰肝素酶是Sanofi-Synthélabo(法国Labège)的产品。
Xa因子定量试剂由Chromogénix公司(法国Montpellier)销售。
将固定浓度的乙酰肝素酶与浓度逐渐增加的本发明化合物，即乙酰肝素酶抑制剂混合(不同的稀释度从1nM到10μM)(对于每一批，预备实验能够确定使添加0.45μg/mL合成戊聚糖降解所足够的酶活性)。在37℃下5min之后，将混合物置于合成戊聚糖存在下，在37℃下经过1h。在5min内加热到95℃终止反应。最后通过加入Xa因子及其特异性色源底物测量残留的合成戊聚糖浓度(Ref.S2222)。
按照如下的操作程序制造不同混合物a)反应混合物将50μL醋酸钠缓冲液(0.2M，pH值4.2)与50μL合成戊聚糖(0.45μg/mL)以及59μL的乙酰肝素酶混合。在37℃下培养1h，然后在95℃下培养5min。然后将100L此混合物与50μL的50mM Tris、175mM的NaCl和75mM的EDTA(pH值14)混合。如此使pH值从4.2变为7。
按照如下的方法测定合成戊聚糖抗Xa因子活性b)定量合成戊聚糖的抗因子Xa活性将100μL在步骤a)中得到的溶液与100μL的AT(0.5μ/mL)混合。在37℃下保持2min，然后加入100μL Xa因子(7nkat/mL)。在37℃下保持2min，然后加入100μL色源底物(RefS2222)(1mM)。在37℃下保持2min，然后加入100μL醋酸(50％)。
读出在405nm的光密度读数。
测定相对于没有抑制剂的对照组抑制百分比。
抑制百分比曲线得以计算出CI50。
B.结果按照本发明的化合物，其CI50为10nm～10μM。
比如，27#化合物的CI50为11±4nm(平均值±两次实验的SD)。
2.乙酰肝素酶抑制剂对肿瘤细胞HT1080发作的效果在生体外测定通式(I)化合物即乙酰肝素酶抑制剂对肿瘤细胞HT1080的效果。
A.材料和方法a)细胞培养在涂有胶原(Becton Dickinson 75cm2；Ref.354523)的烧瓶中，在含有5％的胎牛血清、谷氨酰胺(2mM)(RefGIBCO 25030-024)、丙酮酸钠(1mM)(RefGIBCO 11360-039)和非必要氨基酸(1X)(RefGIBCO 11140-035)的DMEM(RefGIBCO 11960-044)介质中培养人纤维肉瘤组织细胞，HT 1080(ATCC CCL-121)，直至50～80％融合。
b)细胞发作测试在24穴平板(Ref351158)上在Becton Dickinson falcon HTSFluoroblok多穴插入系统套件上进行HT1080发作的测试。
这些测量室给细胞提供能够评价其在生体外发作性能的条件。
该套件包括与培养插入件相连的平板，该插入件上包括了具有许多8μm小孔的膜片PET，在膜片上有一层均匀的Matrigel基质(BectonDickinson；Ref354230)。
Matrigel是一种从EHS肿瘤(Engelbreth-Holm-Swarm)提取的可溶性基底膜，由于其组成在其固化时形成与基底膜相应的结构。
Matrigel层使膜片上的孔闭合，如此就阻塞了未发作的细胞通过膜片迁移。反之，发作的细胞(肿瘤的或非肿瘤的)将能够移动并侵入Matrigel层，然后通过膜片迁移。
通过用钙素AM(分子探针C-3100)标记进行细胞迁移的定量。借助于Perkin Elmer Wallac VICTOR3测定发射的荧光信号，此信号直接与侵入Matrigel凝胶的细胞数相关。与所研究的产品进行的同样实验中进行的对照组相(在0％和5％的胎牛血清存在下的响应)比较，就能够确定在此产品存在下对细胞发作抑制的百分比。
B.结果一系列独立的测定(2～4个实施方案)使得能够显示出在1nM～10μM的浓度下，按照本发明的化合物平均抑制细胞发作的百分比为8～60％。
比如，一系列四次独立测定能够显示出10μM的20#化合物平均抑制细胞发作百分比为40.3±8.3％(平均值±偏差型)。
再有，20#化合物具有依存于细胞发作的定量效果。
实际上-在0.3μM的浓度下，20#化合物抑制细胞发作为26±3％，-在1μM的浓度下，20#化合物抑制细胞发作为53±11％。
此结果表明随着20#化合物剂量的增加对细胞发作的抑制效果也增加。
因此，按照本发明的通式(I)化合物对于乙酰肝素酶具有良好的亲合性，具有乙酰肝素酶抑制剂的作用。
对动物和人都显示出乙酰肝素酶分泌的增加，癌的进展是相关的(Goldschmit等人，PNAS，(2002)，卷99(15)，p.10031-10036)。比如在具有肿瘤转移的动物血清中(Vlodavsky等人，Isr.J.Med.Sci.，(1988)，卷24(9-10)，p.464-470)或者在发生了转移的罹患癌症的病人尿中(Vlodavsky等人，Curr.Biol.，(1997)，卷7(1)，p.43-51)都检出了高水平的乙酰肝素酶。对肿瘤进行的活组织检查显示出同样的相关性(Vlodavsky等人，Isr.J.Med.Sci，卷24(9-10)，p.464-470)。因此，在乙酰肝素酶分泌增加和肿瘤细胞潜在转移性之间存在有相关性(Vlodavsky等人，Invasion Matastasis，(1994)，卷14，p.290-302；Nature Medicine，(1999)，卷5，p.793-802)。
由肿瘤细胞分泌的乙酰肝素酶，使构成ECM主要部分的HSPGs和HS降解。如此被穿孔的ECM允许肿瘤细胞通过并转移，还使新形成的血管蔓延(血管生成)。(Suzanne A.Eccles，Nat.Med.，(1999)，卷5(7)，p.793-809)。血管生成是由原先存在的血管或者通过骨髓细胞迁移和分化产生新的毛细血管的过程。如此在形成肿瘤新血管的过程中，同时会观察到内皮细胞不受控制地增生和成血管细胞从骨髓中迁移。
如此，对于旨在抑制癌细胞侵入和转移以及血管形成过程的治疗，乙酰肝素酶就成为合理的目标。所谓“癌”(即肿瘤)，指的是存在于皮肤中，但也特别存在于器官壁中的上皮细胞的各种恶性生长，以及显现出转移的肿瘤细胞，比如黑色素瘤、间皮瘤、淋巴瘤、白血病、纤维肉瘤、横纹肌肉瘤、肥大细胞瘤、，但也包括触及组织比如结肠、直肠、前列腺、肺、乳腺、胰腺、小肠、肾、卵巢、子宫、子宫颈、膀胱、肝和胃的肿瘤。肿瘤会浸润相邻的组织并扩展(转移)到其它较远的器官，比如肺、大脑或骨。因此，具有抑制乙酰肝素酶活性的化合物，比如本发明的化合物可用来治疗这些癌症(Fang J.等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，(2000)，卷97(8)，p.3884-3889；Kondraganti等人，Cancer Res.，(2000)，卷60(24)，p.6851-6855)，特别是结肠直肠癌、前列腺癌、肺癌、乳腺癌、胰腺癌、肾癌、膀胱癌和卵巢癌。
已经鉴别出受体p75，即神经营养蛋白族(NT)分子受体，是在大脑中转移现象的代表性标记物。还发现分泌NT涉及到乙酰肝素酶分泌增加(Marchetti D.等人，J.Cell.Biochem.，(2004)，卷91(1)，p.206-215)。因此，具有抑制乙酰肝素酶活性的化合物，比如本发明的化合物就能够通过抑制受体p75活化作用来减少在中枢神经系统的转移(Marchetti D.等人，Pathol.Oncol.Res.，(2003)，卷9(3)，p.147-158和Epub，(2003)，Review；Walch ET等人，Int.J.Cancer，(1999)，卷82(1)，p.112-120；Menter DG等人，Invasion Metastasis，(1994-95)，卷14(1-6)，p.372-384；Marchetti等人，Int.J.Cancer，(1993)，卷55(4)，p.692-699)。
乙酰肝素酶对ECM的HSPGs的活性似乎也与炎性反应和自身免疫的启动相关(Vlodavsky等人，Invasion Metastasis，(1994)，卷4，p.290-302；Goldschmit等人，Med.Sci.，(2002)，卷99(15)，p.10031-10036)。血小板、粒细胞、淋巴细胞B和T、巨噬细胞和肥大细胞与ECM的相互作用与乙酰肝素酶导致的HS降解有关(Vlodavsky等人，Invasion Metastasis，(1992)，卷12，p.112-127)。如本发明化合物之类的化合物具有抑制乙酰肝素酶的活性，因此可用来治疗炎性疾病，特别是慢性的炎性疾病，比如类风湿性关节炎或IBD(炎性肠疾病)，包括两种形式的慢性肠炎UC(溃疡性结肠炎)和Crohn氏病即自身免疫性疾病。
其它的研究使人认为，乙酰肝素酶可在治疗心血管疾病中起作用(Journal of Pharmacological Sciences，(2004)，卷94，补编1，p.160P，print；和日本药物学会第77届年会会议资料，大阪，日本，2004，3月8-10日；和Miller，Heather Ann，Diss.Abstr.Int.，(1984)，B2003，卷64(5)；Dermir等人，Clin.Appl.Thromb.Hemost.，(2001)，卷7(2)，p.131-140)，比如血管成形术后再狭窄、与糖尿病血管并发症有关的疾病，比如糖尿病性视网膜病、动脉粥样硬化(Atherosclerosis，(1999)，卷145，p.97-106；J.Clin.Invest.，(1997)，卷100，p.867-874)，或者血栓栓塞和动脉血栓形成病。因此，按照本发明的化合物，即乙酰肝素酶抑制剂可对这些疾病进行选择性治疗。
另外，对于涉及到肾的过滤和再吸收功能可能改变的某些肾功能不全的情况，乙酰肝素酶是已知的(FASEB J，(2004)，卷18，p.252-263)。因此，按照本发明的化合物，即乙酰肝素酶抑制剂可对这些疾病进行选择性治疗。
ECM的HSPGs似乎是通过对生长因子，特别是FGFs(成纤维细胞生长因子)的调节起着细胞生长和活化的主要调节剂的作用(Bashkin等人，Biochemistry，(1989)，卷28，p.1737-1743)。因此，乙酰肝素酶成为治疗涉及到FGFs的疾病的合理的目标。
一般说来，在刺激癌细胞生长失控现象当中，借助于自分泌、旁分泌都明显涉及到FGFs。再有，FGFs引发肿瘤的血管生成，这对肿瘤的生长和对转移现象同时起到占优势的作用。
血管生成是从原来存在的血管或者通过骨髓细胞的迁移和分化产生新的毛细血管的过程。因此在肿瘤的新血管生成过程中，同时观察到表皮细胞不受控制地增生和成血管细胞从骨髓中迁移出的现象。在生体外和生体内都发现，许多生长因子，特别是FGF-1或a-FGF以及FGF-2或b-FGF都刺激了表皮的增生。
比如在前列腺细胞的生长和修复当中，a-FGF和b-FGF起着重大的作用(Doll JA等人，Prostate，(2001)，卷305，p.49-293)。
许多著作证实，在人的乳腺肿瘤线中(特别是MCF7)和在肿瘤的活体检查中同时存在着a-FGF和b-FGF及其受体FGFRs。
神经胶质瘤在生体内和在生体外都产生a-FGF和b-FGF，并在其表面上具有不同的FGFs受体。
最近有文献报道了在白血病和淋巴瘤中原血管形成剂和特别是FGFs的潜在作用(Thomas DA等人，Acta Haematol，(2001)，卷207，p.106-190)。
在由骨髓生成血管和在CML(慢性骨髓单核细胞白血病)中存在着“超髓外疾病”之间存在着相关。
血管平滑肌细胞增生和迁移对动脉的初期肥大有促进作用，在动脉粥样硬化和在血管成形术和动脉内膜切除术后再狭窄起着至关重要的作用。在生体内的研究表明，在由“气囊损害”造成颈动脉损伤后，局部产生了a-FGF和b-FGF。
由于糖尿病造成的血管障碍，其特征在于血管反应性和血流的改变、渗透性过高、极端的增生响应和基质蛋白质沉积增加。更准确说，a-FGF和b-FGF存在于具有糖尿病视网膜病的病人前视网膜中，在不明的毛细管膜中和在罹患增生性视网膜病病人的玻璃体液中。
风湿性关节炎(RA)是一种病因不明的慢性病。当其侵袭到多个器官时，最严重形式的RA就是渐进性的关节滑膜炎症，能够导致关节破坏。血管形成似乎严重地影响此病的进展。比如在滑膜组织和在罹患RA病人的关节液中检出了a-FGF和b-FGF，这表明此生长因子介入了此疾病的起病和/或进展。在老鼠AIA(辅药诱发关节炎模型)模型中，已经证实b-FGF的过度表达增加了此病的严重性，此时中和抗b-FGF的抗体阻断了RA的进展(Yamashita等人，J.Immunol.，(2002)，卷57，p.168-450；Manabe等人，Rheumatol，(1999)，卷20，p.38-714)。
血管形成和炎症也都是重要的现象，此现象介入了涉及到骨性关节炎过程，这种疾病导致了与疼痛有关的关节损坏。血管形成在软骨细胞肥大和导致关节改变的骨化当中也可起着作用(Bonnet CS，Rheumatology，(1)7-162005)。
IBD(肠道炎症)包括两种形式的慢性肠炎UC(溃疡性结肠炎)和Crohn氏病(CD，局限性回肠炎)。IBD的特征是免疫功能障碍，表现为不适当地产生免疫细胞素，这就导致形成局部的微血管系统。这样的免疫源血管形成结果是由于血管收缩导致的肠局部缺血。对这种疾病的病人测定出b-FGF的循环和局部的比率都很大。(Kanazawa等人，American Journal of Gastroenterology，(2001)，卷28，p.96-822；Thorn等人，Scandinavian Journal of Gastroenterology，(2000)，卷12，p.35-408)。
因此，具有抑制乙酰肝素酶活性的化合物，比如本发明的化合物可用于治疗与FGFs和/或其受体失调有关的疾病。
由于其毒性很小，由于其药物学和生理学的性能，本发明的化合物在治疗各种具有很大形成血管程度的肿瘤(肺癌、乳腺癌、前列腺癌、食道癌)或诱发转移的肿瘤(结肠癌、胃癌、黑色素瘤)以及对自分泌的a-FGF或b-FGF敏感的肿瘤以及最后在淋巴瘤和白血病类的疾病当中找到了应用。此类化合物可选择单独治疗，或者与适当的化疗或放疗一起治疗，或者与抗血管形成的治疗一起治疗。按照本发明的化合物还在治疗心血管疾病，比如动脉粥样硬化、在治疗与放置血管内植入体和/或主动脉-冠状动脉搭桥后出现的并发症有关的疾病时进行血管成形术后再狭窄方面或在糖尿病血管并发症比如糖尿病性视网膜病方面找到其应用。按照本发明的化合物还在治疗慢性炎症比如类风湿性关节炎或IBD方面找到其应用。
按照本发明的化合物还在治疗黄斑变性方面找到其应用。成年人视力损失的主要特征是，新血管形成和由此造成的出血，这引起眼球的重大功能障碍，表现为早发性失明。最近涉及到眼新血管形成现象的机理研究证实了在这样的疾病早涉及到原血管形成因子。
按照本发明的化合物还可以与一种或多种抗癌治疗同时使用，比如外科治疗、放疗或与阻断血管形成的化合物同时使用。比如按照本发明的化合物可以单独使用，也可以与其它活性成分同时使用，比如与顺氯氨铂、环磷酰胺、甲氨蝶呤、5-氟尿嘧啶、太平洋紫杉醇、多烯紫杉醇、长春新碱、长春碱、去甲长春花碱、阿霉素、它莫西芬、托瑞米芬、甲地孕酮、阿那曲唑、戈舍瑞林、卡培它宾和雷洛昔芬或者具有抗血管形成活性的分子一起使用来治疗癌症。
按照本发明的另一方面，其目的是一种药物组合物，该组合物含有呈游离形式或与可药用碱或酸形成的盐的形式的通式(I)化合物作为活性成分，按照本发明任选与一种或几种惰性和适当的赋形剂一起使用。
所述赋形剂可按照药物的形式和所需的给药形式口服、舌下、皮下、肌肉内、血管内、透皮、透粘膜、局部还是直肠给药来加以选择。
在每一个单剂中，活性成分的含量要适合于设想的每日剂量，以得到所需的预防或治疗效果。每个单剂可含有0.1～100mg，优选0.5～50mg的活性成分。
本发明的药物组合物可用于口服、舌下、皮下、肌肉内、血管内、气管内、局部、鼻内、透皮、直肠、眼内、阴道给药。给药的单剂形式可以是比如片剂、胶囊、颗粒、粉末、口服或注射的溶液或悬浮液，透皮的贴剂、笔式注射器、栓剂等。为了局部给药可设计成软膏、乳脂、洗剂、洗眼剂、凝胶、喷雾剂、油剂等。
按照使用的盖仑剂型，所述单剂形的剂量要能够每kg体重每日给药1～100mg活性成分。
为了制造片剂，加入微粉碎或未微粉碎的活性成分、可包括如乳糖、微晶纤维素、淀粉的稀释剂的药物载体和作为胶粘剂(聚乙烯基吡咯烷酮、羟丙基甲基纤维素等)、如白碳黑的流动剂、如硬脂酸镁、硬脂酸、三山萮酸甘油酯、硬脂基富马酸钠的润滑剂等成形助剂。也可以添加湿润剂或表面活性剂，比如月桂基硫酸钠。
制造的技术可以是直接模压、干法造粒、湿法造粒或加热熔融。
片剂可以是没有糖衣的或带有糖衣的，比如用蔗糖或者用各种聚合物或其它适当的材料。由于聚合物基质或在糖衣中使用的特殊聚合物，使得能够快速释放、延迟释放或者延续释放活性成分。
为了制造胶囊，将活性成分与干、液体或半固体的药物载体混合(简单混合、干法造粒或湿法造粒或者加热熔融)。
胶囊可以是硬胶囊或者是软胶囊，有或者没有具有快速、延续或延迟释放(比如勇于肠道型)的薄膜。
呈糖浆或醑剂形式的组合物或者用于滴状给药的组合物，可与活性成分一起含有甜味剂、优选是无热量的甜味剂、作为灭菌剂的对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、调味剂和着色剂。
能够分散在水中的粉末和颗粒可含有与分散剂或润湿剂一起混合的活性成分，在此分散剂是比如聚乙烯基吡咯烷酮，甚至于混合有甜味剂和滋味矫正剂。
为了进行直肠给药，则求助于使用在直肠温度下熔化的胶粘剂比如可可脂或聚乙二醇制造的锭剂。
为了进行肠道外给药，使用了水悬浮液、等渗盐水溶液或含有可药用分散剂和/或润湿剂比如聚乙二醇或聚丁二醇的可注射灭菌溶液。
活性成分还可以任选与一种或几种支持体或添加剂，或者与聚合物基质或与环化糊精一起配合成微胶囊的形式(透皮贴剂，具有延续释放的形式)。
按照本发明局部给药的组合物含有与皮肤相容的介质。它特别具有水溶液、醇溶液或含水醇溶液、凝胶、具有乳脂或凝胶外观的油包水型或水包油型乳液、微乳液、气溶胶以及含有离子型脂类和/或非离子型脂类的泡状分散液的形式。这些盖仑形式是按照相关领域中常用的方法制备的。
活性成分还可以任选与一种或几种支持体或添加剂，或者与聚合物基质或与环化糊精一起配合成微胶囊的形式(透皮贴剂，具有延续释放的形式)。
按照本发明局部给药的组合物含有与皮肤相容的介质。它特别具有水溶液、醇溶液或含水醇溶液、凝胶、具有乳脂或凝胶外观的油包水型或水包油型乳液、微乳液、气溶胶以及含有离子型脂类和/或非离子型脂类的泡状分散液的形式。这些盖仑形式是按照相关领域中常用的方法制备的。
下面给出非限定性的例子，说明按照本发明化合物的制备方法。
在下文中使用的缩写词是Ac＝乙酰基All＝烯丙基Bn＝苄基Me＝甲基Ph＝苯基PMB＝(4-甲氧基)苄基PMBBr＝(3-溴-4-甲氧基)苄基Z＝苯甲酰氧羰基CCM＝薄层色谱下面的实施例说明按照本发明的化合物的制备方法，但对其没有限制。在实施这些不同的实施例的制备方法之前，在下面先叙述在得到本发明化合物或在其它的制备当中使用的化合物的制备方法(制备例)。
对于下面的制备例和实施例，使用了如下的实验方法方法1在酸中进行伯醇氧化，然后转化为苄酯在待氧化的化合物(1mol eq.)在四氢呋喃(THF)溶液中(3.5L/mol)加入TEMPO(0.02mol eq.)和碳酸氢钠饱和水溶液(4L/mol)。在冷却到0℃之后，在20min内滴加Bromodan(2mol eq.)。在磁力搅拌3h之后，浓缩反应混合物，并重复汽化二甲基甲酰胺(DMF)(4.95L/mol)使残渣干燥。将如此得到的粗化合物原样用于下面的步骤中。
在环境温度下，用苄基溴(10mol eq.)和碳酸氢钾(5mol eq.)处理前面的化合物在二甲基甲酰胺中的溶液(13.1L/mol)(1～15h)。浓缩反应混合物，然后将残渣溶解于乙酸乙酯(35L/mol)中，用水洗涤，用硫酸钠干燥并浓缩。柱色谱给出是所需的苄酯。
方法2由三氟乙酸叔丁基二甲基甲硅烷基酯催化的与亚氨酸酯偶合在-20℃和在氩气下，在4的分子筛存在下，向亚氨酸酯和糖基受体在二氯甲烷/乙醚混合物中的溶液里加入三氟乙酸叔丁基二甲基甲硅烷基酯溶液(0.1M，每mol亚氨酸酯0.15mol)。在10～45min之后(CCM)，加入固体碳酸氢钠。过滤溶液，用水洗涤并干燥，蒸发至干。
方法3酯皂化的方法在-5℃下，在待皂化化合物在四氢呋喃的溶液(160L/mol)中相继加入30％的双氧水(H2O2)(7.16L/mol)和0.7N的氢氧化锂水溶液(每mol酯加入2.3mol)。在-5℃下搅拌1h之后，在0℃温度下放置反应介质4h，然后在环境温度下搅拌直至酯被消耗掉。此时任选在LH-20的柱子上提纯反应粗产物。
方法4磺化在待磺化(sulfater)化合物在二甲基甲酰胺中的溶液里(90L/mol)加入三乙胺/三氧化硫络合物(每个羟基5mol)。在55℃下12～22h之后，在0℃下加入甲醇或碳酸氢钠水溶液，在环境温度下搅拌0.5～24h之后，借助于LH-20柱子或两根Sephadex-25柱子(用0.2M的氯化钠水溶液，然后用水洗脱)提纯反应介质。在真空下浓缩含有产物的级分，得到所需化合物。
方法5苄基醚和/或苄基酯氢解在氢气气氛下(3～15bar)，在5％或10％的碳载钯(相当于0.7～3倍化合物的质量)存在下，将该化合物在冰醋酸/水/叔丁醇混合物中的溶液搅拌6～16h(CCM)。过滤以后使溶液在SephadexG-25柱子顶部沉积，用0.2M的氯化钠洗脱。浓缩含有产物的级分，使用同样的柱子用水洗脱进行脱盐。在冻干之后得到最终化合物。
下面叙述用来得到按照本发明化合物的制备例。
制备例1合成5-(苯甲氧基)-4-羟基哌啶-1，3-二羧酸二苄酯(3S，4R，5R)(6#化合物) 步骤1.a制备1-苄基-3-(苯甲氧基)-5-(羟甲基)-哌啶-4-醇(3R，4R，5R)(2#化合物)在T.M.Jespersen和M.Bols，Tetrahedron(1994)50(47)，13449-13460和在美国专利5,844,102中叙述了化合物1的合成方法。在WO98/50359中叙述了化合物2的合成方法。
在化合物1(10.8g，42.8mmol)在甲醇(590mL)的溶液中相继加入氰基硼氢化钠(5.38g，2mol eq.)，然后在-10℃加入醋酸(7.4mL，3mol eq.)和苄胺(5.1mL，1.1eq.)在甲醇(100mL)中的溶液。在恢复到环境温度之后，在2h内将反应混合物升温到50℃。在恢复到环境温度之后，添加2％的(85mL)碳酸氢钠溶液。在真空下浓缩掉甲醇，然后用二氯甲烷稀释残渣，用水洗涤有机相，然后用氯化钠水溶液洗涤，用硫酸钠干燥，然后在真空下浓缩。不经提纯将残余物直接用于下面的步骤中。
步骤1.b制备[4-(乙酰氧基)-1-苄基-5-(苯甲氧基)-3-基]乙酸甲酯(3R，4R，5R)(3#化合物)
在0℃和在氩气下，在步骤1.a中得到的粗化合物2(10.8g)在二氯甲烷(345mL)中的溶液里相继加入三乙胺(13.5mL，2.25mol eq)、4-(二甲基氨基)吡啶(DMAP)(7.84g，1.5mol eq)和醋酸酐(61mL，15mol eq)。在10min中将温度维持在0℃，然后在环境温度下放置反应介质16h。在真空下浓缩反应混合物，在二氧化硅凝胶上提纯残渣，得到化合物3(7.65g，43％，两步)。
RMN1H(CDCl3)δ7.36-7.18(m，10H，Ar)，4.60-4.42(dd，2H，OCH2Ph)，2.02，1.99(2s，6H，2CH3CO)。
步骤1.c制备4-(乙酰氧基)-3-(乙酰氧基甲基)-5-(苯甲氧基)哌啶-1-羧酸苄基酯(3R，4R，5R)(4#化合物)在氩气和-10℃下，在步骤1.b中得到的化合物3(2.31g，5.6mmol)在四氢呋喃(28mL)中的溶液里加入苯甲酰氧羰基氯(2.4mL，3moleq)，然后在环境温度下搅拌反应介质18h。在真空下浓缩反应混合物，用二氧化硅凝胶提纯残渣(1∶9乙醚-二异丙基醚洗脱)，得到化合物4(2.14g，84％)。
质谱(ESI)m/z 478.3[(M+Na)+]。
步骤1.d制备3-(苯甲氧基)-4-羟基-5-(羟甲基)哌啶-1-羧酸苄酯(3R，4R，5R)(5#化合物)在0℃下，在步骤1.c中得到的化合物4(1.9g，4.2mmol)在二烷(25mL)中的溶液里加入0.84M的一水合氢氧化锂溶液(25mL，5mol eq)。在0℃下保持反应介质5min，然后在环境温度下放置30min。在用盐酸(HCl，3N)中和后，在二氯甲烷中稀释反应介质，用水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。在二氧化硅凝胶上提纯残渣(3∶1的乙酸乙酯-环己烷洗脱)，得到化合物5(1.59g，90％)。
质谱(ESI)m/z 394.4[(M+Na)+]。
步骤1.e制备5-(苯甲氧基)-4-羟基哌啶-1，3-二羧酸二苄酯(3S，4R，5R)(6#化合物)按照方法1处理在步骤1.d中得到的化合物5(3.18g，8.6mmol)，得到化合物6(2.92g，71％)。
质谱(ESI)m/z 476.5[(M+Na)+]制备例2合成(2，4-二-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α，β-D-吡喃葡糖三氯乙酰亚氨酸酯)(11#化合物) 步骤2.a制备(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(1，6-脱水-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-β-D-吡喃葡糖)(8#化合物)按照方法1处理与在Y.Ichikawa等人，Tetrohedron Lett.(1986)27(5)611-614中所述的2’-O-苯甲酰基化合物同样的方法制备的呈2’-O-乙酰基形式的化合物7，在二氧化硅凝胶上提纯之后(用3∶7的乙酸乙酯-环己烷洗脱)得到化合物8(16.4g，77％)。
质谱(ESI)m/z 698.3[(M+Na)+]步骤2.b制备(2，4-二-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(1，6-二-O-乙酰基-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α，β-D-吡喃葡糖)(9#化合物)在0℃下，在步骤2.a中得到的化合物8(3.74g，5.54mmol)在醋酸酐(52mL，100mol eq)中的溶液里加入三氟乙酸(TFA)(4.7mL，1.1mol eq)。在恢复到环境温度之后，搅拌反应混合物16h，然后浓缩，与甲苯一起蒸发，在二氧化硅凝胶上提纯(用4∶1的甲苯-乙酸乙酯洗脱)，得到化合物9(4.33g，95％)。
质谱(ESI)m/z 842.2[(M+Na)+]步骤2.c制备(2，4-二-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)(6-O-乙酰基-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α，β-D-吡喃葡糖)(10#化合物)在0℃下，在步骤2.b中得到的化合物9(4.3g，5.24mmol)在乙醚(210mL)中的溶液里加入苄胺(BnNH2)(22mL，38mol eq)。在环境温度下搅拌4.5h之后，用1N的HCl酸化介质，然后用乙酸乙酯萃取，用硫酸钠干燥，浓缩并在二氧化硅凝胶上提纯(用35∶65的乙酸乙酯-环己烷洗脱)，得到化合物10(3.4g，83％)。
质谱(ESI)m/z 800.2[(M+Na)+]步骤2.d制备(2，4-二-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α，β-D-吡喃葡糖三氯乙酰亚胺酸酯)(11#化合物)在氩气下，在步骤2.c中得到的化合物10(3.38g，4.35mmol)在二氯甲烷(82mL)中的溶液里加入碳酸铯(Cs2CO3)(2.26g，1.6moleq)，然后加入三氯乙睛(CCl3CN)(1.74mL，5.0mol eq)。在搅拌1.5h之后，过滤反应混合物，然后进行浓缩。在二氧化硅凝胶上提纯残渣(用3∶7的乙酸乙酯-环己烷洗脱)，得到化合物11(2.96g，74％)。
RMN1H(CDCl3)δ6.43(d，H-1αGlcI)，5.64(d，H-1βGlcI)，5.17(d，IdoUAII)。
制备例3合成(3-O-苄基-2，4-二-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-乙酰胺基-3-O-苄基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-O-苄基-2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-乙酰胺基-3-O-苄基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1-羧酸苄酯-3-羧酸钠(3S，4R，5R)(19#化合物)
步骤3.a制备(2，4-二O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(1，6-脱水-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-β-D-吡喃葡糖)(12#化合物)按照方法2处理在步骤2.d中得到的化合物11(455mg，0.50mmol)和在步骤2.a中得到的化合物8(675mg，1mmol)，在提纯之后提供化合物12(385mg，54％)。
质谱(ESI)m/z 1457.6[(M+Na)+]。
步骤3.b制备(2，4-二-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(1，6-二-O-乙酰基-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α，β-D-吡喃葡糖)(13#化合物)如合成化合物9(步骤2.b)处理在步骤3.a中得到的化合物12(365mg，0.254mmol)，在二氧化硅凝胶上提纯(用1∶1的乙醚-二异丙基醚洗脱)之后得到化合物13(376mg，97％)。
质谱(ESI)m/z 1560.7[(M+Na)+]步骤3.c制备(2，4-二-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α，β-D-吡喃葡糖)(14#化合物)如合成化合物10(步骤2.c)处理在步骤3.b中得到的化合物13(364mg，0.237mmol)，在二氧化硅凝胶上提纯(用7∶3的乙醚-二异丙基醚洗脱)之后得到化合物14(310mg，87％)。
质谱(ESI)m/z 1518.8[(M+Na)+]。
步骤3.d合成(2，4-二-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α，β-D-吡喃葡糖三氯乙酰亚氨酸酯(15#化合物)如合成化合物11(步骤2.d)处理在步骤3.c中得到的化合物14(279mg，0.187mmol)，在二氧化硅凝胶上提纯(用1∶1的乙醚-二异丙基醚洗脱)之后得到化合物15(230mg，75％)。
质谱(ESI)m/z 1660.6[(M+Na)+]。
步骤3.e合成(2，4-二-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1，3-二羧酸二苄酯(3S，4R，5R))(16#化合物)按照方法2处理在步骤3.d中得到的化合物15(217mg，0.133mmol)和在步骤1.e中得到的化合物6(126mg，0.264mmol)，在提纯之后得到化合物16(168mg，66％)。
质谱(ESI)m/z 1976.0[(M+Na)+]。
步骤3.f合成(2，4-二-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-乙酰胺基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-乙酰胺基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1，3-二羧酸二苄酯(3S，4R，5R))(17#化合物)将在步骤3.e中得到的化合物16(138.5mg，70.9μmol)溶解于吡啶(1.16mL)中，然后在0℃下加入硫代乙酸(1.14mL，225mol eq)。在环境温度下搅拌反应介质14h，然后浓缩并在二氧化硅凝胶上提纯(用3∶2的环己烷-乙酸乙酯洗脱)，得到化合物17(118mg，84％)。
质谱(ESI)m/z 2007.7[(M+Na)+]。
步骤3.g合成(3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸)-(1-4)-(2-乙酰胺基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸)-(1-4)-(2-乙酰胺基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-3-羧酸-1-羧酸苄酯(3S，4R，5R))(18#化合物)
按照方法3处理在步骤3.f中得到的化合物17(101mg，50.9μmol)，然后用6N的盐酸酸化反应介质(pH值等于1)，用二氯甲烷萃取。用5％的亚硫酸钠(Na2SO3)洗涤有机相，然后用水洗涤。在干燥之后过滤并浓缩，粗的残渣被用于下一步。
质谱(ESI)m/z 1505.6[(M+H)+]。
步骤3.h合成(3-O-苄基-2，4-二-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-乙酰胺基-3-O-苄基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-O-苄基-2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-乙酰胺基-3-O-苄基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-3-羧酸苄酯-3-羧酸钠(3S，4R，5R))(19#化合物)按照方法4处理在步骤3.g中得到的粗化合物18，提供化合物19(50mg，54％(两步))。
质谱(ESI)m/z 2014[(M-3Na+3H)-]。
制备例4合成(3-O-苄基-2，4-二-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(3-O-苄基-2-脱氧-2-N-磺酸钠基-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-O-苄基-2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(3-O-苄基-2-脱氧-2-N-磺酸钠基-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1-羧酸苄酯-3-羧酸钠(3S，4R，5R))(26#化合物)
步骤4.a制备(3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸)-(1-4)-(2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸)-(1-4)-(2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1-羧酸苄酯-3-羧酸钠(3S，4R，5R))(24#化合物)按照方法3处理在步骤3.e中得到的化合物16(175mg，89.6μmol)，然后用6N盐酸酸化反应介质(pH值2)。此时在SephadexLH-20柱子上提纯混合物(用1∶1二氯甲烷-乙醇洗脱)，得到化合物24(100mg，76％)。
质谱(ESI)m/z 1474.1[(M+H)+]。
步骤4.b制备(3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸)-(1-4)-(2-氨基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸)-(1-4)-(2-氨基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1-羧酸苄酯-3-羧酸(3S，4R，5R))(25#化合物)在步骤4.a中得到的化合物24(35mg)在1∶1甲醇-四氢呋喃混合物(1mL)的溶液里加入10％的按照在H.Sajiki等人，J.Org.Chem.(1998)，卷63，p.7990-7992)中所述方法制备的Pd/C/乙二胺络合物(107mg)。此时在氢气压力下(3bar)和在环境温度下放置此介质16h。在过滤和浓缩之后，在同样的条件下使粗反应物进行反应，然后在二氧化硅凝胶上提纯(用6∶2∶0.6∶1的乙酸乙酯-吡啶-醋酸-水洗脱)，得到化合物25(12mg，44％)。
质谱(ESI)m/z 1421.4[(M+H)+]。
步骤4.c制备(3-O-苄基-2，4-二-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(3-O-苄基-2-脱氧-2-N-磺酸钠基-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-O-苄基-2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(3-O-苄基-2-脱氧-2-N-磺酸钠基-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1-羧酸苄酯-3-羧酸钠(3S，4R，5R))(26#化合物)按照方法4处理在步骤4.b中得到的化合物25(8.5mg，5.98μmol)，得到化合物26(7mg，56％)。
质谱(ESI)m/z 2133.8[(M-H)-]。
制备例5合成(2-O-乙酰基-4-O-乙酰丙酰基-3-O-甲基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-O-(3-溴-4-甲氧基)苄基-3-O-甲基-α，β-D-吡喃葡糖三氯乙酰亚氨酸酯)(40#化合物)
步骤5.a制备1，6-脱水-4-O-(四氢呋喃-2-基)-2-O-(4-甲氧基)苄基-β-D-吡喃葡糖(29#化合物)在40℃下，在化合物28(41g，180mmol)(按照H.Paulsen和W.Stenzel，Chem.Ber.(1978)111，2348-57制备)在对甲氧基苄醇(25mL，1.1mol eq)中的溶液里加入钠(1.37g，0.33mol eq)。然后在20min将反应混合物升温到110℃，然后加入0℃的甲醇(20mL)在环境温度下保持搅拌16h。在浓缩之后，在二氧化硅凝胶上提纯(用3∶7的乙酸乙酯-二异丙基醚洗脱)，得到化合物29(20.1g，31％)。
质谱(ESI)m/z 384.2[(M+Na)+]。
步骤5.b制备1，6-脱水-4-O-(四氢呋喃-2-基)-2-O-(4-甲氧基)苄基-3-O-甲基-β-D-吡喃葡糖(30#化合物)在0℃和在氩气气氛下，在步骤5.a中得到的化合物29(13.1g，35.8mmol)在二甲基甲酰胺(107mL)中的溶液里相继加入甲基碘(2.67mL)和氢化钠(2.68g)。在恢复到环境温度之后，将反应混合物搅拌16h，然后加入0℃的甲醇，用乙酸乙酯萃取介质，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到化合物30将其直接用于下一步。
质谱(ESI)m/z 403.3[(M+Na)+]。
步骤5.c制备1，6-脱水-2-O-(4-甲氧基)苄基-3-O-甲基-β-D-吡喃葡糖(31#化合物)在步骤5.b中得到的粗化合物30在甲醇(143mL)中的溶液里加入0.25M的樟脑磺酸(CSA)甲醇溶液(1mol eq)。在磁性搅拌30min之后，用二氯甲烷稀释介质，然后用水和用2％的碳酸氢钠水溶液洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。在二氧化硅凝胶上提纯(用3∶7的乙酸乙酯-环己烷洗脱)得到化合物31(9.0g，85％)。
质谱(ESI)m/z 319.1[(M+Na)+]。
步骤5.d制备乙基2-O-乙酰基-4，6-O-亚异丙基-3-O-甲基-1-硫代-α，β-L-艾杜吡喃糖苷(33#化合物)在0℃下和在氩气气氛下，在粗化合物32(1.99g，7.1mmol)(按照P.Duchaussoy等人，Carbohydr.Res.(1999)，317，63-84制备)在二氯甲烷中的溶液里相继加入三乙胺(2.2mL)、DMAP(173mg)和醋酸酐(1.34mL)。保持0℃的温度下10min，然后在环境温度下放置反应介质16h。此时反应混合物真空浓缩，在二氧化硅凝胶上提纯残渣(用1∶1的乙醚-环己烷洗脱)提供出化合物33(2.1g，92％)。
质谱(ESI)m/z 343.3[(M+Na)+]。
步骤5.e制备(2-O-乙酰基-4，6-O-亚异丙基-3-O-甲基-α-L-艾杜吡喃糖基)-(1-4)-(1，6-脱水-2-O-(4-甲氧基)苄基-3-O-甲基-β-D-吡喃葡糖)(34α#化合物)和(2-O-乙酰基-4，6-O-亚异丙基-3-O-甲基-β-L-艾杜吡喃糖基)-(1-4)-(1，6-脱水-2-O-(4-甲氧基)苄基-3-O-甲基-α-D-吡喃葡糖)(34β#化合物)在-20℃下，在氩气气氛下，在4分子筛(2.89g)存在下向在步骤5.d中得到的化合物33(1.86g，5.79mmol)和在步骤5.c中得到的化合物31(1.46g，4.94mmol)在甲苯中的混合物中加入N-碘琥珀酰胺(1.38g)和三氟甲磺酸(63.5μL)在1∶1的二氯甲烷-二烷混合物(16.5mL)中的溶液。在搅拌45min之后，在反应介质中加入固体碳酸氢钠，在过滤之后，用二氯甲烷稀释此混合物，用10％的硫代硫酸钠(Na2S2O3)水溶液和饱和氯化钠水溶液洗涤。在干燥和浓缩之后，将残渣直接用于下一步。
质谱(ESI)m/z 577.4[(M+Na)+]。
步骤5.f制备(2-O-乙酰基-3-O-甲基-α-L-艾杜吡喃糖基)-(1-4)-(1，6-脱水-2-O-(4-甲氧基)苄基-3-O-甲基-β-D-吡喃葡糖)(35α#化合物)和(2-O-乙酰基-3-O-甲基-β-α-L-艾杜吡喃糖基)-(1-4)-(1，6-脱水-2-O-(4-甲氧基)苄基-3-O-甲基-α-D-吡喃葡糖)(35β#化合物)向在步骤5.e中得到的化合物34α和化合物34β的混合物在1，2-二氯乙烷(12mL)中的溶液里加入70％的醋酸(55mL)。在60温度下加热此混合物50min，然后在真空下浓缩，并在二氧化硅凝胶上提纯得到的残渣(用3∶2的甲苯-丙酮洗脱)得到化合物35α(1.56g，61％，两步)和化合物35β(0.36g，14％，两步)。
质谱(ESI)m/z 537.5[(M+Na)+]。
步骤5.g制备(2-O-乙酰基-3-O-甲基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(1，6-脱水-2-O-(3-溴-4-甲氧基)苄基-3-O-甲基-β-D-吡喃葡糖)(36#化合物)按照方法1处理在步骤5.f中得到的化合物35α(0.975g，1.89mmol)，在二氧化硅凝胶上提纯(用1∶1的乙酸乙酯-环己烷洗脱)之后，得到化合物36(1.09g，83％)RMN1H(CDCl3)δ7.54-6.86(m，8H，Ar)。
步骤5.h制备(2-O-乙酰基-4-O-乙酰丙酰基-3-O-甲基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(1，6-脱水-2-O-(3-溴-4-甲氧基)苄基-3-O-甲基-β-D-吡喃葡糖)(37#化合物)在氩气气氛下，向在步骤5.g中得到的化合物36(1.09g，1.56mmol)在二烷(35mL)中的溶液里相继加入DMAP(43mg，0.2mol eq)、1-(3-二甲基氨丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(EDCl)(0.675g，2mol eq)和乙酰丙酸(0.361mL，2mol eq)，在搅拌16h之后，相继用10％的硫酸氢钾溶液、水、2％的碳酸氢钠溶液进行洗涤反应混合物，然后用硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到残渣，将其在二氧化硅凝胶上提纯(用2∶3的乙酸乙酯-二氯甲烷洗脱)，得到化合物37(1.07g，86％)。
质谱(ESI)m/z 819.4[(M+Na)+]。
步骤5.i制备(2-O-乙酰基-4-乙酰丙酰基-3-O-甲基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(1，6-二-O-乙酰基-2-O-(3-溴-4-甲氧基)苄基-3-O-甲基-α，β-D-吡喃葡糖)(38#化合物)如合成化合物9(步骤2.b)处理在步骤5.h中得到的化合物37(1.07g，1.34mmol)，在二氧化硅凝胶上提纯(用2∶3的乙酸乙酯-二氯甲烷洗脱)之后，得到化合物38(1.04g，87％)。
质谱(ESI)m/z 921.4[(M+Na)+]。
步骤5.j制备(2-O-乙酰基-4-乙酰丙酰基-3-O-甲基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-O-(3-溴-4-甲氧基)苄基-3-O-甲基-α，β-D-吡喃葡糖)(39#化合物)如合成化合物10(步骤2.c)处理在步骤5.i中得到的化合物38(1.04g，1.16mmol)，在二氧化硅凝胶上提纯(用1∶1的乙酸乙酯-二氯甲烷洗脱)之后，得到化合物39(740mg，74％)。
质谱(ESI)m/z 877.3[(M+Na)+]。
步骤5.k制备(2-O-乙酰基-4-O-乙酰丙酰基-3-O-甲基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-O-(3-溴-4-甲氧基)苄基-3-O-甲基-α，β-D-吡喃葡糖三氯乙酰亚氨酸酯)(40#化合物)如合成化合物11处理在步骤5.j中得到的化合物39(740mg，860μmol)，在二氧化硅凝胶上提纯(用3∶7的乙酸乙酯-二氯甲烷洗脱)之后，得到化合物40(714g，83％)。
RMN1H(CDCl3)δ6.39(d，H-1αGlcI)，5.76(d，H-1βGlcII)。
制备例6合成(3-O-甲基-2，4-二-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(3-O-甲基-2，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-O-甲基-2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(3-O-甲基-2，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1-羧酸苄酯-3-羧酸钠(3R，4R，5R))(46#化合物) 步骤6.a制备(2-O-乙酰基-4-O-乙酰丙酰基-3-O-甲基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-O-(3-溴-4-甲氧基)苄基-3-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1，3-二羧酸二苄酯(3S，4R，5R))(41#化合物)
按照方法2处理在步骤5.k中得到的化合物40(94mg，0.094mmol，1.0mol eq)和在步骤1.e中得到的化合物6(111mg，0.234mmol，2.5moleq)的混合物，在SephadexLH-20柱子，然后在二氧化硅凝胶上提纯(用9∶1的二氯甲烷-乙酸乙酯洗脱)之后，得到化合物41(62mg，50％)。
质谱(ESI)m/z 1336.5[(M+Na)+]。
步骤6.b制备(2-O-乙酰基-3-O-甲基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-O-(3-溴-4-甲氧基)苄基-3-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1，3-二羧酸二苄酯(3S，4R，5R))(42#化合物)向在步骤6.a中得到的化合物41(60mg，45.7μmol)在1∶2的甲苯/乙醇混合物(9mL)中的溶液里加入乙酸肼(21mg，10mol eq)。在磁性搅拌3h之后，在真空下浓缩该混合物并用二氯甲烷稀释残渣，用2％的碳酸氢钠水溶液和水洗涤，用硫酸钠干燥有机相，过滤然后浓缩。在二氧化硅凝胶上提纯残渣(用3∶2的乙酸乙酯-环己烷洗脱)，得到化合物42(48mg，88％)。
质谱(ESI)m/z 1238.5[(M+Na)+]。
步骤6.c制备(2-O-乙酰基-4-O-乙酰丙酰基-3-O-甲基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-O-(3-溴-4-甲氧基)苄基-3-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-乙酰基-3-O-甲基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-O-(3-溴-4-甲氧基)苄基-3-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1，3-二羧酸二苄酯(3S，4R，5R))(43#化合物)按照方法2处理在步骤5.k中得到的化合物40(197.7mg，197.7μmol，1.14mol eq)和在步骤6.b中得到的化合物42(210.5mg，173.2μmol，1.0mol eq)，在SephadexLH-20柱子和在二氧化硅凝胶上提纯(用1∶1的甲苯-丙酮洗脱)之后得到化合物43(176mg，50％)。
质谱(ESI)m/z 2075.0[(M+Na)+]。
步骤6.d制备(2-O-乙酰基-4-O-乙酰丙酰基-3-O-甲基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-3-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-乙酰基-3-甲基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-3-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1，3-二羧酸二苄酯(3S，4R，5R))(44#化合物)在0℃下和在氩气气氛下向在步骤6.c中得到的化合物43(69mg，33.6μmol)在乙睛(3mL)中的溶液里加入四氯化锆(ZrCl4)(39mg，5mol eq)。在环境温度下搅拌45min之后，在真空下浓缩该混合物，用乙酸乙酯稀释残渣，用水洗涤，在干燥之后过滤和浓缩，在二氧化硅凝胶上提纯残渣(用3∶7的丙酮-甲苯洗脱)，得到化合物44(52mg，89％)。
质谱(ESI)m/z 1676.7[(M+Na)+]。
步骤6.e制备(3-O-甲基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸)-(1-4)-(3-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-O-甲基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸)-(1-4)-(3-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1-羧酸苄酯-3-羧酸(3S，4R，5R))(45#化合物)按照方法3处理在步骤6.d中得到的化合物44(18mg，11μmol)，在提纯之后得到化合物45(5.8mg，47％)，其羧酸基团可部分酯化。
质谱(ESI)m/z 1118.4[(M+H)+]。
步骤6.f制备(3-O-甲基-2，4-二-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(3-O-甲基-2，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-O-甲基-2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(3-O-甲基-2，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1-羧酸苄酯-3-羧酸钠(3R，4R，5R))(46#化合物)按照方法4处理在步骤6.e中得到的化合物45(7mg，6.26μmol)，在提纯之后得到化合物46(10mg，77％)，其羧酸基团可部分酯化。
质谱(ESI)m/z 1897.0[(M+Na-H)+]。
制备例7合成(2-O-乙酰基-4-O-乙酰丙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-O-(4-甲氧基)苄基-3-O-苄基α，β-D-吡喃葡糖)三氯乙酰亚氨酸酯(57#化合物) 步骤7.a制备1，6-脱水-4-O-(四氢呋喃-2-基)-2-O-(4-甲氧基)苄基-3-O-苄基-β-D-吡喃葡糖(48#化合物)在0℃下向在步骤5.a中得到的化合物29(19.96g，54.5mmol)在DMF(300mL)中的溶液里加入苄基溴(5.1mL)，然后加入氢化钠(4.6g)。在添加结束时，在环境温度下放置该混合物16h，然后在0℃下加入甲醇(18mL)，在环境温度下搅拌1h之后，用乙酸乙酯(600mL)稀释该介质，用水洗涤(300mL)，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。在快速色谱上提纯残渣(用5∶95的乙酸乙酯-二异丙基醚洗脱)，得到化合物48(20.6g，83％)。
质谱(ESI)m/z 479.3[(M+Na)+]。
步骤7.b制备1，6-脱水-2-O-(4-甲氧基)苄基-3-O-苄基-β-D-吡喃葡糖(49#化合物)如合成化合物31(步骤5.c)那样处理在步骤7.a中得到的化合物48(20.6g，45.2mmol)，在二氧化硅凝胶上提纯(用3∶7的乙酸乙酯-环己烷洗脱)之后，得到化合物49(14.4g，86％)。
质谱(ESI)m/z 395.4[(M+Na)+]。
步骤7.c制备(2-O-乙酰基-4，6-亚异丙基-3-O-苄基-α，β-L-吡喃葡糖基)-(1-4)-(1，6-脱水-2-O-(4-甲氧基)苄基-3-O-苄基-β-D-吡喃葡糖)(51#化合物)如在合成化合物34(步骤5.e)中使化合物50(按照C.Tabeur等人对于2-O-苯甲氧基衍生物在Carbohydr.Res.(1996)，281，253-276中所述的方法制备)(16.91g，42.6mmol)和化合物49(14.44g，38.8mmol)反应，在二氧化硅上提纯(用15∶85的乙酸乙酯-二异丙基醚洗脱)之后，得到化合物51(17.05g，62％，56％的α-L)。
质谱(ESI)m/z 729.3[(M+Na)+]。
步骤7.d制备(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-吡喃葡糖基)-(1-4)-(1，6-脱水-2-O-(4-甲氧基)苄基-3-O-苄基-β-D-吡喃葡糖)(52#化合物)如对化合物35(步骤5.f)那样处理在步骤5.c中得到的化合物51(12.38g，17.51mmol)，在二氧化硅上提纯(用4∶1的甲苯-丙酮洗脱)之后，得到化合物52(10.85g，93％)。
质谱(ESI)m/z 689.3[(M+Na)+]。
步骤7.e制备(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(1，6-脱水-2-O-(4-甲氧基)苄基-3-O-苄基-β-D-吡喃葡糖)(53#化合物)按照方法1处理在步骤7.d中得到的化合物52(10.85g，16.27mmol)，在二氧化硅上提纯(用3∶7的丙酮-环己烷洗脱)之后，得到化合物53(8.44g，61％)。
质谱(ESI)m/z 793.3[(M+Na)+]。
步骤7.f制备(2-O-乙酰基-3-O-苄基-4-O-乙酰丙酰基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(1，6-脱水-2-O-(4-甲氧基)苄基-3-O-苄基-β-D-吡喃葡糖)(54#化合物)如合成化合物37(步骤5.h)那样处理化合物53(3.2g，3.77mmol)，在二氧化硅上提纯(用1∶4的丙酮-甲苯洗脱)之后，得到化合物54(3.17g，89％)。
质谱(ESI)m/z 891.3[(M+Na)+]。
步骤7.g制备(2-O-乙酰基-4-O-乙酰丙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(1，6-二-O-乙酰基-2-O-(4-甲氧基)苄基-3-O-苄基-α，β-D-吡喃葡糖)(55#化合物)如合成化合物9，但是在0℃经过1h那样，处理在步骤7.f中得到的化合物54(1.45g，1.53mmol)，在二氧化硅上提纯(用85∶15的甲苯-丙酮洗脱)之后，得到化合物55(1.25g，78％)。
质谱(ESI)m/z 993.3[(M+Na)+]。
步骤7.h制备(2-O-乙酰基-4-O-乙酰丙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-O-(4-甲氧基)苄基-3-O-苄基-α，β-D-吡喃葡糖)(56#化合物)如合成化合物10(步骤2.c)那样处理在步骤7.g中得到的化合物55，在二氧化硅上提纯(用25∶75的乙醚-二氯甲烷洗脱)之后，得到化合物56(429mg，56％)。
质谱(ESI)m/z 951.3[(M+Na)+]。
步骤7.i制备(2-O-乙酰基-4-O-乙酰丙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-O-(4-甲氧基)苄基-3-苄基α，β-D-吡喃葡糖)三氯乙酰亚氨酸酯(57#化合物)如对合成化合物11(步骤2.d)那样处理在步骤7.h中得到的化合物56(429mg，426μmol)，在二氧化硅上提纯(用1∶1的乙酸乙酯-环己烷洗脱)之后，得到衍生物57(396mg，80％)。
RMN1H(CDCl3)δ6.45(d，H-1α)，5.89(d，H-1β)。
制备例8制备(2-O-乙酰基-4-O-烯丙基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-O-(4-甲氧基)苄基-3-O-苄基-α，β-D-吡喃葡糖)三氯乙酰亚氨酸酯(62#化合物) 步骤8.a制备(2-O-乙酰基-4-O-烯丙氧羰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(1，6-脱水-2-O-(4-甲氧基)苄基-3-O-苄基-β-D-吡喃葡糖)(58#化合物)在0℃和氩气气氛下，向在步骤7.e中得到的化合物53(0.800g，0.9414mmol)在THF(9.4mL)中的溶液里加入吡啶(759μL，9.41mmol)、DMAP(115mg，0.94mmol)和氯甲酸烯丙酯(995μL，9.41mmol)在THF(2.35mL)中的溶液。保持搅拌过夜，然后用乙酸乙酯稀释反应混合物，用10％的硫酸氢钾、2％的碳酸氢钠和水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。用快速色谱提纯残渣(用1∶9的丙酮-甲苯洗脱)，得到化合物58(0.809g，92％)。
质谱(ESI)m/z 877.3[(M+Na)+]。
步骤8.b制备(2-O-乙酰基-4-O-烯丙基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(1，6-脱水-2-O-(4-甲氧基)苄基-3-O-苄基-β-D-吡喃葡糖)(59#化合物)在氩气气氛下，在步骤8.a中得到的化合物58(0.805g，0.862mmol)在THF(6mL)中的溶液里相继加入二醋酸钯(3.9mg，0.017mmol)和三苯基膦(22.6mg，0.086mmol)。在15min中升温至90℃，然后在真空下浓缩介质，在二氧化硅上提纯(用15∶85的丙酮-甲苯洗脱)，得到化合物59(0.587g，66％)。
质谱(ESI)m/z 833.4[(M+Na)+]。
步骤8.c制备(2-O-乙酰基-4-O-烯丙基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(1，6-二-O-乙酰基-2-O-(4-甲氧基)苄基-3-O-苄基-α，β-D-吡喃葡糖)(60#化合物)如合成化合物55(步骤7.g)那样处理在步骤8.b中得到的化合物59(0.587g，0.660mmol)，在二氧化硅上提纯(用9∶1的丙酮-甲苯洗脱)之后得到化合物60(0.37g，57％)。
质谱(ESI)m/z 936.4[(M+Na)+]。
步骤8.d制备(2-O-乙酰基-4-O-烯丙基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-O-(4-甲氧基)苄基-3-O-苄基-α，β-D-吡喃葡糖)(61#化合物)如合成化合物10(步骤2.c)那样处理在步骤8.c中得到的化合物60，在二氧化硅上提纯(用2∶3的环己烷-丙酮洗脱)之后得到化合物61(240mg，70％)。
质谱(ESI)m/z 893.4[(M+Na)+]。
步骤8.e制备(2-O-乙酰基-4-O-烯丙基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-O-(4-甲氧基)苄基-3-O-苄基-α，β-D-吡喃葡糖)三氯乙酰亚氨酸酯(62#化合物)如合成化合物11(步骤2.d)那样处理在步骤8.d中得到的化合物61(234mg，246μmol)，在二氧化硅上提纯(用86∶14的丙酮-甲苯洗脱)之后得到衍生物62(249mg，93％)。
RMN1H(CDCl3)δ6.40(d，H-1α)，5.81(d，H-1β)。
制备例9和10的合成可示意性地表示如下
制备例9合成(3-O-苄基-2，4-二-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(3-O-苄基-2，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-O-苄基-2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(3-O-苄基-2，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1-羧酸苄酯-3-羧酸钠(3S，4R，5R))(68#化合物)步骤9.a制备(2-O-乙酰基-4-O-乙酰丙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-O-(4-甲氧基)苄基-3-O-苄基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1，3-二羧酸二苄酯(3S，4R，5R))(63#化合物)按照方法2处理在步骤7.i中得到的化合物57(396mg，0.34mmol)和在步骤1.e中得到的化合物6(405mg，0.85mmol)，在提纯之后得到化合物63(369mg，73％)。
RMN1H(CDCl3)δ5.29(d，H-1GlcII)，5.13(d，H-1IdoUAIII)。
步骤9.b制备(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-O-(4-甲氧基)苄基-3-O-苄基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1，3-二羧酸二苄酯(3S，4R，5R))(64#化合物)如合成化合物42(步骤6.b)那样处理在步骤9.a中得到的化合物63(372mg，0.254mmol)，在二氧化硅上提纯(用2∶3的乙酸乙酯-环己烷洗脱)之后，得到化合物64(301mg，87％)。
RMN1H(CDCl3)δ5.29(d，H-1GlcII)，5.10(d，H-1IdoUAIII)，3.97(dd，H-4IdoUAIII)。
步骤9.c制备(2-O-乙酰基-4-O-乙酰丙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-O-(4-甲氧基)苄基-3-O-苄基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-乙酰基-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-O-(4-甲氧基)苄基-3-O-苄基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1，3-二羧酸二苄酯(3S，4R，5R))(65#化合物)按照方法2处理在步骤7.i中得到的化合物57(124mg，0.108mmol)和在步骤9.b中得到的化合物64(150mg，0.110mmol)，在提纯之后得到化合物65(90mg，35％)。
RMN1H(CDCl3)δ5.28(d，H-1GlcII)，5.16(d，H-1IdoUAIII)，5.13(d，H-1IdoUAV)，4.74(d，H-1GlcIV)。
步骤9.d制备(2-O-乙酰基-4-O-乙酰丙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-3-O-苄基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-乙酰基-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-3-O-苄基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1，3-二羧酸二苄酯(3S，4R，5R))(66#化合物)如对合成化合物44(步骤6.d)那样处理在步骤9.c中得到的化合物65(45mg，0.19mmol)，在二氧化硅上提纯(用3∶2的乙酸乙酯-环己烷洗脱)之后，得到化合物66(34mg，91％)。
质谱(ESI)m/z 1982.0[(M+Na)+]。
步骤9.e制备(3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸)-(1-4)-(3-O-苄基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸)-(1-4)-(3-O-苄基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1-羧酸苄酯-3-羧酸(3S，4R，5R))(67#化合物)按照方法3处理在步骤9.d中得到的化合物66(25mg，12.8μmol)。用6N盐酸酸化反应混合物(pH值2)，然后沉积在9∶1的DMF/水混合物平衡过的LH-20柱子(100mL)上。然后浓缩含有产物的级分并用二氧化硅提纯(用7∶3的二氯甲烷-甲醇洗脱)，得到化合物67(10.4mg，59％)，其羧酸基团可部分酯化。
质谱(ESI)m/z 1422.7[(M+H)+]。
步骤9.f制备(3-O-苄基-2，4-二-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(3-O-苄基-2，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-O-苄基-2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(3-O-苄基-2，6-二-O-磺酸钠基-α-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1-羧酸苄酯-3-羧酸钠(3S，4R，5R))(68#化合物)按照方法4处理在步骤9.e中得到的化合物67(10.4mg，9μmol)，得到化合物68，将其直接用于下一步。
制备例10合成(4-O-烯丙基-3-O-苄基-2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(3-O-苄基-2，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-O-苄基-2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(3-O-苄基-2，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1-羧酸苄酯-3-羧酸钠(3S，4R，5R)(73#化合物)步骤10.g制备(2-O-乙酰基-4-O-烯丙基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-O-(4-甲氧基)苄基-3-O-苄基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-O-(4-甲氧基)苄基-3-O-苄基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1，3-二羧酸二苄酯(3S，4R，5R))(70#化合物)按照方法2处理在步骤8.e中得到的化合物62(244mg，0.223mmol)和在步骤9.b中得到的化合物64(138mg，0.101mmol)，在提纯之后得到化合物70(100mg，43％)。
RMN1H(CDCl3)δ5.28(d，H-1GlcII)，5.25(d，H-1IdoUAV)，5.16(d，H-1IdoUAIII)，4.72(d，H-1GIcIV)。
步骤10.h制备(2-O-乙酰基-4-O-烯丙基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-3-O-苄基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-3-O-苄基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1，3-二羧酸二苄酯(3S，4R，5R))(71#化合物)如合成化合物44(步骤6.d)那样处理在步骤10.g中得到的化合物70(92mg，40.0μmol)，在二氧化硅上提纯(用17∶83的丙酮-甲苯洗脱)之后得到化合物71(44mg，59％)。
质谱(ESI)m/z 1924.0[(M+Na)+]。
步骤10.i制备(4-O-烯丙基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸)-(1-4)-(3-O-苄基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸)-(1-4)-(3-O-苄基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1-羧酸苄酯-3-羧酸(3S，4R，5R))(72#化合物)按照方法3处理在步骤10.h中得到的化合物71(41mg，21.6μmol)。将反应混合物沉积在1∶1的二氯甲烷-乙醇混合物中平衡过的LH-20柱子(210mL)上。然后浓缩并在二氧化硅上提纯含有产物的级分得到化合物72(30.3mg，96％)，羧酸基团可被部分酯化。
质谱(ESI)m/z 1462.4[(M+H)+]。
步骤10.j制备(4-O-烯丙基-3-O-苄基-2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(3-O-苄基-2，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-O-苄基-2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(3-O-苄基-2，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1-羧酸苄酯-3-羧酸钠(3S，4R，5R))(73#化合物)按照方法4处理在步骤10.i中得到的化合物72(10.0mg，6.44μmol)得到化合物73，将其直接用于下一步。
制备例11合成甲基(2-N-磺酸钠基-2，4-二脱氧-4-甲酰基-3，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-N-磺酸钠基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖苷)(89#化合物)
步骤11.a制备1，62，3-二-脱水-4-脱氧-4-(丙-1-烯-1-基)-β-D-吡喃甘露糖(76#化合物)在氩气气氛下，向环氧化合物75(1.2g，7.14mmol)(按照AG Kelly和JS Roberts，J.Chem.Soc.，Chem.Commun.，(1980)，卷288制备)在乙醇(56.5mL)中的溶液里加入单水合三氯化铑(202mg，0.15moleq)。在75℃下搅拌1h25之后，将反应介质倒入250mL冰水中，然后搅拌5min，用乙醚萃取产物，用硫酸钠干燥并浓缩。然后在二氧化硅上提纯(用45∶55的二异丙基醚-环己烷洗脱)残渣，将含有化合物76的级分部分浓缩(化合物76是挥发性的)。
RMN1H(CDCl3)δ3.42(dd，H-2)，3.00(dd，H-3)，2.64(dd，H-4)。
步骤11.b制备1，6-脱水-2-叠氮-2，4-二脱氧-4-(丙-1-烯-1-基)-β-D-吡喃葡糖(77#化合物)将在步骤11.a中得到的化合物76溶解于二甲基甲酰胺-水(40mL，4∶1)的混合物中，然后加入氮化钠(7.0g)，将该混合物回流10.5h。然后用乙酸乙酯萃取反应介质，用水，然后用饱和氯化钠水溶液洗涤，用硫酸钠干燥，浓缩并在二氧化硅凝胶上提纯，得到化合物77(674mg，48％)。
RMN1H(CDCl3)δ5.8-5.6(m，2H，CH＝CH)。
步骤11.c制备1，3，6-三-O-乙酰基-2-叠氮-2，4-二脱氧-4-(丙-1-烯-1-基)-α，β-D-吡喃葡糖(78#化合物)如合成化合物9(步骤2.b)那样处理在步骤11.b中得到的化合物77(3.5g，16.57mmol)，在提纯之后得到化合物78(5.88g，100％)。
质谱(ESI)m/z 378[(M+Na)+]。
步骤11.d制备3，6-二-O-乙酰基-2-叠氮-2，4-二脱氧-4-(丙-1-烯-1-基)-α，β-D-吡喃葡糖(79#化合物)在0℃下向在步骤11.c中得到的化合物78(5.88g，16.5mmol)在四氢呋喃(140mL)中的溶液里加入乙醇胺(4.0mL，4mol eq)。在+4℃16h以后，用乙酸乙酯稀释介质，用1N的盐酸酸化，用水洗涤，用硫酸钠干燥，浓缩，在提纯之后得到化合物79(4.66g，90％)。
质谱(ESI)m/z 336[(M+Na)+]。
步骤11.e制备3，6-二-O-乙酰基-2-叠氮-2，4-二脱氧-4-(丙-1-烯-1-基)-α，β-D-吡喃葡糖三氯乙酰亚氨酸酯(80#化合物)在氩气气氛下，向在步骤11.d中得到的化合物79(4.66g，14.9mmol)在二氯甲烷(285mL)中的溶液里加入碳酸钾(3.34g，1.6moleq)，然后加入三氯乙睛(7.6mL，5mol eq)。在磁性搅拌17h以后，过滤反应混合物，在二氧化硅上提纯，得到化合物80(5.65g，83％)。
RMN1H(CDCl3)δ8.77(s，N(异构体α))，5.70(dd，H-3)，2.64(d，H-1β)。
步骤11.f制备甲基(3，6-二-O-乙酰基-2-叠氮-2，4-二脱氧-4-(丙-1-烯-1-基)-α，β-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸甲酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-3-O-苄基-2-苄氧羰基氨基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖苷)(82#化合物)按照方法2使在步骤11.e中得到的化合物80(5.65g，12.3mmol)和化合物81(按照J.C.Jacquinet等人，Carbohydr.Res.130(1084)，221-241制备)(11.54g，1.2mol eq)反应，在提纯之后得到化合物82(9.39g，71％)。
质谱(ESI)m/z 1077.5[(M+H)+]。
步骤11.g制备甲基(3，6-二-O-乙酰基-2-叠氯-2，4-二脱氧-4-(1，2-二羟基丙基)-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸甲酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-3-O-苄基-2-苄氧羰基氨基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖苷)(83#化合物)向在步骤11.f中得到的化合物82(513mg，0.476mmol)在1∶1的四氢呋喃-二氯甲烷混合物(8mL)中的溶液里加入N-甲基吗啉N-氧化物(NMO)(1.11g，20mol eq)和四氧化锇(OsO4)的4％水溶液(8.35mL，1mol eq)。在环境温度下搅拌3天之后加入1∶1的二氯甲烷-水的混合物以及37.5％的亚硫酸氢钠(NaHSO3)，再保持搅拌30min。用二氯甲烷萃取反应混合物，在二氧化硅上提纯，在上述条件下使含有原料的级分反应，直至完全被消耗掉。在提纯之后最终得到化合物83(293mg，66％)。
质谱(ESI)m/z 1111.4[(M+H)+]。
步骤11.h制备甲基(3，6-二-O-乙酰基-2-叠氮-2，4-二脱氧-4-(5-甲基-2-苯基-1，3-二氧戊环-4-基)-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸甲酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-3-O-苄基-2-苄氧羰基氨基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖苷)(84#化合物)在氩气气氛下，向在步骤11.g中得到的化合物83(518mg，0.466mmol)在乙睛中的溶液里加入CSA(21.6mg，0.2mol eq)和亚苄基二甲基乙缩醛(160μL，2.3mol eq)。在搅拌1h30之后，用三乙胺中和介质，浓缩至干，然后在二氧化硅上提纯，得到化合物84(454mg，74％)。
质谱(ESI)m/z 1199.5[(M+H)+]。
步骤11.i制备甲基(2-叠氮-2，4-二脱氧-4-(5-甲基-2-苯基-1，3-二氧戊环-4-基)-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸)-(1-4)-(3-O-苄基-2-苄氧羰基氨基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖苷)(85#化合物)按照方法3处理在步骤11.h中得到的化合物84(215mg，0.18mmol)。在环境温度下磁性搅拌16h以后，用甲醇(12.5mL)稀释介质，然后在0℃下加入4N的碳酸钠(soude)水溶液(11.5mL)。在0℃下搅拌该混合物4h，用6N的盐酸酸化(pH值5)，然后用二氯甲烷萃取，用5％的亚硫酸钠洗涤，最后用饱和氯化钠水溶液洗涤。在干燥和浓缩之后，是二氧化硅上提纯残渣，得到化合物85(157mg，86％)。
质谱(ESI)m/z 1017.3[(M+H)+]。
步骤11.j制备甲基(2-叠氮-2，4-二脱氧-4-(5-甲基-2-苯基-1，3-二氧戊环-4-基)-3，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-O-苄基-2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(3-O-苄基-2-苄氧羰基氨基-2-脱氧-6-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖苷)(86#化合物)按照方法4处理在步骤11.i中得到的化合物85(160mg，0.157mmol)，得到化合物86(215mg，95％)。
质谱(ESI)m/z 689.1[(M+H-3Na)2-]。
步骤11.k制备甲基(2-氨基-2，4-二脱氧-4-(1，2-二羟基丙基)-3，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-氨基-2-脱氧-6-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖苷)(87#化合物)除了醋酸以外，按照方法5处理在步骤11.j中得到的化合物86(210mg，0.145mmol)，得到化合物87(108mg，73％)。如果需要，进行多次反应，直至用质谱检测完全没有苄基的质子。
质谱(ESI)m/z 996.1[(M+H-Na)-]。
步骤11.l制备甲基(2-N-磺酸钠基-2，4-二脱氧-4-(1，2-二羟基丙基)-3，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-N-磺酸钠基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖苷)(88#化合物)在0℃下，向在步骤11.k中得到的化合物87(106mg，0.104mmol)在水(7mL)中的溶液里加入吡啶·SO3络合物(662mg，4.16mmol)，同时用1N的碳酸钠保持pH值为9.3。然后将温度恢复到环境温度，保持pH值9.3搅拌反应介质16h，然后在用0.2M的氯化钠溶液平衡的SephadexG-25柱子上提纯。在合并含有所需产物的级分并浓缩之后，在同样的SephadexG-25的柱子上用水洗脱提纯残渣，得到化合物88(116mg，91％)。
质谱(ESI)m/z 1199.8[(M+H-Na)-]。
步骤11.m制备甲基(2-N-磺酸钠基-2，4-二脱氧-4-甲酰基-3，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-N-磺酸钠基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖苷)(89#化合物)在步骤11.l中得到的化合物88(115mg，94μmol)在水(1.9mL)中的溶液里加入高碘酸钠(22.1mg，1.1mol eq)。在磁性搅拌1h之后，在用水平衡的SephadexG-15凝胶柱子上提纯反应混合物，得到化合物89(107mg，96％)。
制备例12合成(2-乙酰胺基-3，4-二-O-苄基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1-羧酸苄酯-3-羧酸钠(3S，4R，5R)(97#化合物) 步骤12.a制备(6-O-乙酰基-2-叠氮-3，4-二-O-苄基-2-脱氧-6-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1，3-二羧酸二苄酯(3S，4R，5R))(94#化合物)按照方法2处理化合物93(按照R.Verduyn等人，Recl.Trav.Chim.Pays-Bas，109(1990)，12，591)(361mg，0.631mmol)和在步骤1.e中得到的化合物6(200mg，0.421mmol)，在提纯之后得到化合物94(224mg，60％)。
质谱(ESI)m/z 885.4[(M+H)+]。
步骤12.b制备(6-O-乙酰基-2-乙酰胺基-3，4-二-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1，3-二羧酸二苄酯(3S，4R，5R))(95#化合物)如合成化合物17(步骤3.f)那样处理在步骤12.a中得到的化合物94(56.3mg，63.6μmol)，得到化合物95(54.5mg，95％)。
质谱(ESI)m/z 901.2[(M+H)+]。
步骤12.c制备(2-乙酰胺基-3，4-二-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1-羧酸苄酯-3-羧酸(3S，4R，5R))(96#化合物)按照方法3处理在步骤12.b中得到的化合物95(101mg，50.9μmol)，粗残渣用于下一步。
步骤12.d制备(2-乙酰胺基-3，4-二-O-苄基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1-羧酸苄酯-3-羧酸钠(3S，4R，5R))(97#化合物)按照方法4处理在步骤12.c中得到的粗化合物96，得到化合物97(35mg，88％(两步))，羧酸官能团可部分酯化。
质谱(ESI)m/z 847.2[(M-H)-]。
制备例13合成3-(苯甲氧基)-5-[(苯甲氧基)甲基]-4-羟基哌啶-1-羧酸苄酯(3R，4R，5R)(100#化合物) 步骤13.a制备8-(苯甲氧基)-2-苯基四氢-4H-[1，3]二英基[5，4-c]吡啶-6(5H)羧酸苄酯(4aR，8R，8aR)(99#化合物)向化合物5(250mg，0.67mmol)在乙睛(13.4mL)中的溶液里加入樟脑磺酸(31mg，0.2mol eq)，然后加入苯甲醛二甲基乙缩醛(0.23mL，2.3mol eq)。在环境温度下搅拌1h之后，用三乙胺中和反应介质，浓缩并在二氧化硅凝胶上提纯(用15∶85的乙酸乙酯-环己烷洗脱)，得到化合物99(281mg，91％)。
质谱(ESI)m/z 482.2[(M+Na)+]。
步骤13.b制备3-(苯甲氧基)-5-[(苯甲氧基)甲基]-4-羟基哌啶-1-羧酸苄酯(3R，4R，5R)(100#化合物)在0℃和氩气气氛下，向在步骤13.a中得到的化合物99(141mg，0.31mmol)在二氯甲烷(1.2mL)中的溶液里相继加入三乙基硅烷(0.20mL，4mol eq)、三氟乙酸(0.09mL，4mol eq)和三氟乙酸酐(3μL，0.07mol eq)。在0℃下保持温度5min，然后将反应介质在环境温度下放置3.5h。用碳酸氢钠水溶液、水中和反应混合物，用硫酸钠干燥有机相，过滤并在真空下浓缩。在二氧化硅凝胶上提纯残渣，得到化合物100(76mg，54％)。
质谱(ESI)m/z 462.3[(M+H)+]。
制备例14合成(3-O-苄基-2，4-二-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-乙酰胺基-3-O-苄基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-O-苄基-2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-乙酰胺基-3-O-苄基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-(苯甲氧基)-5-[(苯甲氧基)甲基]-4-氧哌啶-1-羧酸苄酯(3R，4R，5R))(104#化合物) 步骤14.a制备(2，4-二-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(3-(苯甲氧基)-5-[(苯甲氧基)甲基]-4-氧哌啶-1-羧酸苄酯(3R，4R，5R))(101#化合物)按照方法2处理化合物15(123mg，0.075mmol)和化合物100(69mg，0.149mmol)，在提纯之后得到化合物101(117mg，80％)。α/β之比为55/45。
质谱(ESI)m/z 1962[(M+Na)+]。
步骤14.b制备(2，4-二-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-乙酰胺基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-乙酰胺基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-(苯甲氧基)-5-[(苯甲氧基)甲基]-4-氧哌啶-1-羧酸苄酯(3R，4R，5R))(102#化合物)将化合物101(117mg，60μmol)溶解于吡啶(1mL)，然后在0℃下加入硫代乙酸(1mL，225mol eq)。在环境温度下搅拌反应介质17h，然后浓缩并在二氧化硅凝胶上提纯(用4∶96的乙醇-甲苯洗脱)，得到化合物102(50mg，42％)。
质谱(ESI)m/z 1971.9[(M+H)+]。
步骤14.c制备3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸-(1-4)-(2-乙酰胺基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸)-(1-4)-(2-乙酰胺基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-(苯甲氧基)-5-[(苯甲氧基)甲基]-4-氧哌啶-1-羧酸苄酯(3R，4R，5R))(103#化合物)按照方法3处理化合物102(50mg，25μmol)得到衍生物103。质谱(ESI)m/z 1581.7[(M+H)+]。
步骤14.d制备(3-O-苄基-2，4-二-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-乙酰胺基-3-O-苄基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-O-苄基-2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-乙酰胺基-3-O-苄基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-(苯甲氧基)-5-[(苯甲氧基)甲基]-4-氧哌啶-1-羧酸苄酯(3R，4R，5R))(104#化合物)按照方法4处理化合物103，得到化合物104(43mg，80％，(两步))。
质谱(ESI)m/z 2134.3[(M-Na)-]。
制备例15合成(2-O-乙酰基-3-O-苄基-4-O-苯基丙基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α，β-D-吡喃葡糖)三氯乙酰亚氨酸苄酯(114#化合物)
步骤15.a制备(4，6-O-亚异丙基-3-O-苄基-2-O-(4-甲氧基)苄基-α-L-吡喃葡糖基)-(1-4)-(1，6-脱水-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-β-D-吡喃葡糖)(106#化合物)在0℃和氩气气氛下，向化合物105(63.2g，111mmol)(按照C.A.A.van Boeckel等人，J.Carbohydrate Chemistry(1985)4(3)，293-321制备)在DMF(455mL)中的溶液里加入NaH(6.93g，1.3mol eq)，然后加入对甲氧基苄基氯(24mL，1.6mol eq)。在磁性搅拌2h之后加入甲醇(9mL)，在真空下浓缩反应介质，用乙酸乙酯稀释粗反应介质，用水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。在二氧化硅上提纯得到的残渣(用15∶85的乙酸乙酯-环己烷洗脱)，得到化合物106。
质谱(ESI)m/z 707.3[(M+NH4)+]。
步骤15.b制备(3-O-苄基-2-O-(4-甲氧基)苄基-α-L-艾杜吡喃糖基)-(1-4)-(1，6-脱水-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-β-D-吡喃葡糖)(107#化合物)将在前面的步骤中得到的化合物106放入80％的醋酸水溶液中。在磁性搅拌15h以后，用冰冷却反应混合物，用二氯甲烷稀释并用碳酸氢钠中和。用硫酸钠干燥有机相，过滤并浓缩。在二氧化硅上提纯(用3∶7的乙酸乙酯-环己烷洗脱)残渣，得到化合物107(63.2g，88％，两步)。
质谱(ESI)m/z 672.3[(M+Na)+]。
步骤15.c制备(3-O-苄基-6-O-叔丁基二甲基甲硅烷基-2-O-(4-甲氧基)苄基-α-L-艾杜吡喃糖基)-(1-4)-(1，6-脱水-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-β-D-吡喃葡糖)(108#化合物)将化合物107(64.2g)溶解于二氯甲烷(200mL)中。在0℃和氩气气氛下，相继加入三乙胺(30.3mL，2.2mol eq)、4-二甲基氨基吡啶(1.21g，0.1mol eq)和叔丁基二甲基甲硅烷氯(17.04g，1.1mol eq)。在磁性搅拌4h之后，再加入10％的叔丁基二甲基甲硅烷氯，在1h之后，用二氯甲烷稀释反应介质，用水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。在二氧化硅上提纯得到的残渣(用15∶85的乙酸乙酯-环己烷洗脱)得到化合物108。
质谱(ESI)m/z 786.3[(M+Na)+]。
步骤15.d制备(3-O-苄基-6-O-叔丁基二甲基甲硅氯基-2-O-(4-甲氧基)苄基-4-O-苯基丙基-α-L-艾杜吡喃糖基)-(1-4)-(1，6-脱水-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-β-D-吡喃葡糖)(109#化合物)在0℃和氩气气氛下，向化合物108在二甲基甲酰胺(485mL)中的溶液里加入苯基丙基溴(74mL，5mol eq)，然后加入NaH(7g，1.5moleq)。在磁性搅拌5.5h之后加入甲醇(50mL)，在真空下浓缩反应介质，用乙酸乙酯稀释粗反应物，用水洗涤和用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。在二氧化硅上提纯得到的残渣(用15∶85的乙酸乙酯-环己烷洗脱)，得到化合物109(49.3g，58％，两步)。
质谱(ESI)m/z 904.3[(M+Na)+]。
步骤15.e-f制备(2-O-乙酰基-3-O-苄基-6-O-叔丁基二甲基甲硅烷基-4-O-苯基丙基-α-L-吡喃葡糖基)-(1-4)-(1，6-脱水-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-β-D-吡喃葡糖)(110#化合物)向化合物109(49.3g，55.9mmol)在二氯甲烷(2.2L)中的溶液里加入水(112mL)，然后在0℃下加入DDQ(19.3g，1.5mol eq)。在0℃下搅拌3h以后，加入碳酸氢钠溶液。用硫酸钠干燥有机相，过滤并浓缩。将得到的残渣溶解于吡啶(335mL)中，然后加入醋酸酐(28mL)和4-二甲基氨基吡啶(682mg)。在磁性搅拌16h之后，在真空下浓缩反应混合物，在二氧化硅上提纯得到的残渣(用15∶85的乙酸乙酯-环己烷洗脱)得到化合物110(34.4g，77％，两步)。
质谱(ESI)m/z 826.4[(M+Na)+]。
步骤15.g-h制备(2-O-乙酰基-3-O-苄基-4-O-苯基丙基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(1，6-脱水-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-β-D-吡喃葡糖)(111#化合物)在0℃下向化合物110(25.17g，31.3mmol)在丙酮(1.46L)中的溶液里加入3.5M的含有铬酸酐(10g)的硫酸水溶液(45mL)。在0℃下磁性搅拌3h之后，用二氯甲烷稀释反应介质，用水洗涤，干燥、过滤并浓缩得到粗反应产物并将其直接用于下一步。将在前面得到的残渣溶解于二甲基甲酰胺(230mL)中，加入碳酸氢钾(16.7g，5mol eq)以及苄基溴(39.8mL，10mol eq)。在环境温度下搅拌反应混合物16h，然后用乙酸乙酯稀释，用水洗涤，干燥，过滤，浓缩并在二氧化硅上提纯(用1∶4的乙酸乙酯-甲苯洗脱)，得到化合物111(22.6g，91％，两步)。
质谱(ESI)m/z 811.3[(M+NH4)+]。
步骤15.i制备(2-O-乙酰基-3-O-苄基-4-O-苯基丙基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(1，6-二-O-乙酰基-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α，β-D-吡喃葡糖)(112#化合物)
在0℃下向化合物111(1.11g，1.39mmol)在醋酸酐(13.2mL，100moleq)中的溶液里加入三氟乙酸(TFA)(1.14mL，11mol eq)。在恢复到环境温度以后，搅拌反应混合物3.5h，然后浓缩，与甲苯共蒸发，并在二氧化硅凝胶上提纯(用85∶15的甲苯-乙酸乙酯洗脱)，得到化合物112(1.15g，93％)。
质谱(ESI)m/z 918.3[(M+Na)+]。
步骤15.j制备(2-O-乙酰基-3-O-苄基-4-O-苯基丙基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α，β-D-吡喃葡糖)(113#化合物)在0℃下向化合物112(1.13g，1.26mmol)在乙醚(51mL)中的溶液里加入苄胺(BnNH2)(5.25mL，38mol eq)。在环境温度下搅拌5h15之后，用1N的盐酸酸化介质，然后用乙醚萃取，用硫酸钠干燥，浓缩并在二氧化硅凝胶上提纯(用35∶65的乙酸乙酯-环己烷洗脱)，得到化合物113(0.97g，90％)。
质谱(ESI)m/z 854.3[(M+H)+]。
步骤15.k制备(2-O-乙酰基-3-O-苄基-4-O-苯基丙基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α，β-D-吡喃葡糖)三氯乙酰亚氨酸苄酯(114#化合物)在氩气气氛下向化合物113(0.95g，1.12mmol)在二氯甲烷(21.2mL)中的溶液里加入碳酸铯(Cs2CO3)(0.583g，1.6mol eq)然后加入三氯乙睛(CCl3CN)(0.56mL，5.0mol eq)。搅拌35分钟后，过滤反应混合物，然后浓缩。在二氧化硅凝胶上提纯残渣(用25∶75的乙酸乙酯-环己烷洗脱)，得到化合物114(995mg，90％)。
质谱(ESI)m/z 1021.5[(M+Na)+]。
制备例16合成(3-O-苄基-4-O-苯基丙基-2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(2-乙酰胺基-3-O-苄基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-O-苄基-2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(2-乙酰胺基-3-O-苄基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1，3-二羧酸二苄酯(3S，4R，5R))(122#化合物)
步骤16.a制备(2-O-乙酰基-3-O-苄基-4-O-苯基丙基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(1，6-脱水-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-β-D-吡喃葡糖)(115#化合物)按照方法2处理化合物114(990mg，0.99mmol)和化合物8(1.15g，1.7mmol)，在提纯之后得到化合物115(623mg，42％)。
质谱(ESI)m/z 1533.8[(M+Na)+]。
步骤16.b制备(2-O-乙酰基-3-O-苄基-4-O-苯基丙基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(1，6-二-O-乙酰基-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α，β-D-吡喃葡糖)(116#化合物)如在合成化合物112那样处理化合物115(590mg，0.39mmol)，在二氧化硅凝胶上提纯(用7∶3的环己烷-乙酸乙酯洗脱)之后得到化合物116(609mg，97％)。
质谱(ESI)m/z 1636.2[(M+Na)+]。
步骤16.c制备(2-O-乙酰基-3-O-苄基-4-O-苯基丙基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α，β-D-吡喃葡糖)(117#化合物)如合成化合物113那样处理化合物116(592mg，0.367mmol)，在二氧化硅凝胶上提纯(用65∶35的环己烷-乙酸乙酯洗脱)之后得到化合物117(530mg，92％)。
质谱(ESI)m/z 1593.9[(M+Na)+]。
步骤16.d制备(2-O-乙酰基-3-O-苄基-4-O-苯基丙基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α，β-D-吡喃葡糖)三氯乙酰亚氨酸酯(118#化合物)如合成化合物114那样处理化合物117(511mg，0.325mmol)，在二氧化硅凝胶上提纯(用7∶3的环己烷-乙酸乙酯洗脱)之后得到化合物118(495mg，89％)。
对于C85H90Cl13N7O25计算的元素分析是C59.49；H5.29；N5.71；实际的分析是C59.49；H5.50；N5.48。
步骤16.e制备(2-O-乙酰基-3-O-苄基-4-O-苯基丙基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1，3-二羧酸二苄酯(3S，4R，5R))(119#化合物)按照方法2处理化合物118(479mg，0.279mmol)和化合物6(255mg，0.536mmol)，在提纯之后得到化合物119(375mg，66％)。对于C111H117N7O30计算的元素分析是C59.49；H5.29；N5.71；实际的分析是C59.49；H5.50；N5.48。
步骤16.f制备(2-O-乙酰基-3-O-苄基-4-O-苯基丙基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-乙酰胺基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-乙酰胺基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1，3-二羧酸二苄酯(3S，4R，5R))(120#化合物)将化合物119(180mg，88.7μmol)溶解于吡啶(1.4mL)中，然后在0℃下加入硫代乙酸(1.4mL，225mol eq)。在环境温度下搅拌反应介质17h，然后浓缩并在二氧化硅凝胶上提纯(用4∶1的甲苯-丙酮洗脱)，得到化合物120(153mg，84％)。
质谱(ESI)m/z 2084.8[(M+Na)+]。
步骤16.g制备(3-O-苄基-4-O-苯基丙基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(2-乙酰胺基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(2-乙酰胺基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1，3-二羧酸二苄酯(3S，4R，5R))(121#化合物)按照方法3处理化合物120(190mg，93.6μmol)。
将得到的多元醇溶解于二甲基甲酰胺(4.4mL)中，在0℃下加入碳酸氢钾(85mg，10mol eq)和苄基溴(202μL，20mol eq)。在环境温度下搅拌反应混合物16h，然后在LH-20柱子上提纯。
在二氧化硅凝胶上提纯(用2∶3的乙酸乙酯-环己烷洗脱)，得到化合物121(108mg，62％，(两步))。
质谱(ESI)m/z 1884.2[(M+Na)+]。
步骤16.h制备(3-O-苄基-4-O-苯基丙基-2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(2-乙酰胺基-3-O-苄基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-O-苄基-2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(2-乙酰胺基-3-O-苄基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1，3-二羧酸二苄酯(3S，4R，5R))(122#化合物)按照方法4处理化合物121(41mg，21.6μmol)，得到化合物122(49mg，99％)。
质谱(ESI)m/z 2301.0[(M-H)-]。
下面的实施例用来说明本发明化合物的制备方法，但并不对其构成限制，核磁共振波谱符合得到的化合物的结构。
实施例1合成(2，4-二-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-乙酰胺基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-乙酰胺基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(羟基)-4-氧哌啶-3-羧酸钠(3S，4R，5R))(20#化合物) 按照方法5处理制备例3的化合物19(50mg，24.02μmol)，得到化合物20(26mg，72％)。
RMN1H(D2O)δ5.23(d，H-1GlcII)，5.13(d，H-1 IdoUAIII)，5.10(d，H-1 IdoUAV)，5.09(d，H-1GlcIV)，3.62，3.04，2.64，2.47(4m，4H，H-2，H-2′，H-6，H-6′pipI)。
实施例2合成(2-乙酰胺基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(羟基)-4-氧哌啶-3-羧酸钠(3S，4R，5R))(21#化合物) 按照方法5处理制备例12的化合物97，得到化合物21。
RMN1H(D2O)δ5.21(d，H-1GlcII)，3.40，3.40，3.40，3.10(4m，4H，H-2，H-2′，H-6，H-6′pipI)。
实施例3合成(2，4-二-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-乙酰胺基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(羟基)-4-氧哌啶-3-羧酸钠(3S，4R，5R))(22#化合物) 以同样的方法制备化合物22。
RMN1H(D2O)δ5.19(d，H-1GlcII)，5.15(d，H-1 IdoUAIII)，3.27，3.23，3.09，2.89(4m，4H，H-2，H-2′，H-6，H-6′pipI)。
实施例4(2-乙酰胺基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-乙酰胺基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(羟基)-4-氧哌啶-3-羧酸钠(3S，4R，5R))(23#化合物) 以同样的方法制备化合物23。
RMN1H(D2O)δ5.26(d，H-1GlcII)，5.14(d，H-1 IdoUAIII)，5.09(d，H-1 GlcIV)。
实施例5合成(2，4-二-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-N-磺酸钠基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-N-磺酸钠基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(羟基)-4-氧哌啶-3-羧酸钠(3S，4R，5R))(27#化合物) 按照方法5处理制备例4的化合物26(7.0mg，3.28μmol)得到化合物27(2.9mg，55％)。
RMN1H(D2O)δ5.53(d，H-1GlcII)，5.44(d，H-1GlcIV)，5.23(d，H-1 IdoUAIII)，5.21(d，H-1 IdoUAV)，3.09，3.07，2.58，2.44(4m，4H，H-2，H-2′，H-6，H-6′pipI)。
实施例6合成(3-O-甲基-2，4-二-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(3-O-甲基-2，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-O-甲基-2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(3-O-甲基-2，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(羟基)-4-氧哌啶-3-羧酸钠(3S，4R，5R))(47#化合物)
按照方法5处理制备例6的化合物46，在提纯之后得到化合物47(5mg，57％)。
质谱(ESI)m/z 1650.9[(M-Na+H)-]。
实施例7合成(2，4-二-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(羟基)-4-氧哌啶-3-羧酸钠(3S，4R，5R))(69#化合物) 按照方法5处理制备例9的化合物68得到化合物69(3.8mg，25％，两步)。
RMN1H(D2O)δ5.62(d，H-1 GlcIV)，5.52(d，H-1GlcII)，5.21(d，H-1 IdoUAV)，4.99(d，H-1 IdoUAIII)。
实施例8合成(4-O-丙基-2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(羟基)-4-氧哌啶-3-羧酸钠(3S，4R，5R))(74#化合物)
按照方法5处理制备例10的粗化合物73得到化合物74(6.0mg，62％，两步)。
RMN1H(D2O)δ5.68(d，H-1 GlcIV)，5.55(d，H-1 GlcII)，5.21(d，H-1 IdoUAV)，5.18(d，H-1 IdoUAIII)。
实施例9合成甲基(2，4-二-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-乙酰胺基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-羟基-4-氧哌啶-1-基-3-羧酸钠(3S，4R，5R))-(1-4)-(2-N-磺酸钠基-2，4-二脱氧-4-甲基-3，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-N-磺酸钠基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖苷)(90#化合物) 在0℃下向制备例11的化合物89(24mg，26.9μmol)和实施例3的化合物22(61mg，1.9mol eq)在磷酸盐缓冲液(pH 7)中的溶液里加入氰基硼氢化钠(4.4mg，2.4mol eq)。在0℃下搅拌8h之后，将反应介质在环境温度下放置16h，然后相继在SephadexG-25凝胶上用0.2M的氯化钠洗脱，然后在同样的SephadexG-25柱子上用水洗脱进行提纯，得到化合物90(17mg，31％)。
质谱(ESI)m/z 2029.3[(M+H-Na)-]。
实施例10合成甲基(2，4-二-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-乙酰胺基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-羟基-4-氧哌啶-1-基-3-羧酸钠(3S，4R，5R))-(1-4)-(2-N-磺酸钠基-2，4-二脱氧-4-甲基-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-N-磺酸钠基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖苷)(91#化合物) 以同样的方法制备化合物91。
质谱(ESI)m/z 1927.1[(M+H-Na)-]。
实施例11合成甲基(5-羟基-4-氧哌啶-1-基-3-羧酸钠(3S，4R，5R))-(1-4)-(2-N-磺酸钠基-2，4-二脱氧-4-甲基-3，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-N-磺酸钠基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖苷)(92#化合物)
以同样的方法制备化合物92。
质谱(ESI)m/z 1321.1[(M+H-Na)-]。
实施例12制备(2-乙酰胺基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-羟基-4-氧哌啶-1-甲基-3-羧酸钠(3S，4R，5R))(98#化合物) 按照方法5在氢气流中在3∶1∶1的甲醇-醋酸-水的混合物中处理制备例12的化合物97(20mg，21.3μmol)得到化合物98(6.0mg，57％)。
质谱(ESI)m/z 456.8[(M-H)-]。
实施例13合成(2，4-二-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-乙酰胺基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-乙酰胺基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(羟基)-3-羟甲基-4-氧哌啶(3R，4R，5R))(123#化合物) 按照方法5处理化合物104(41mg，19μmol)得到化合物123。
RMN1H(D2O)δ5.28(d，H-1 GlcII)，5.20(d，H-1 IdoUAIII)，5.17(d，H-1 IdoUAV)，5.15(d，H-1GlcIV)，3.21，3.19，2.68，2.59(4m，4H，H-2，H-2′，H-6，H-6′pipI)。
实施例14合成(4-O-苯基丙基-2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-乙酰胺基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-乙酰胺基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(羟基)-4-氧哌啶-3-羧酸钠(3S，4R，5R))(124#化合物) 按照方法5处理化合物122得到化合物124。
RMN1H(D2O)δ5.28(d，H-1GlcII)，5.21(d，H-1 IdoUAV)，5.16(d，H-1 IdoUAIII)，5.16(d，H-1 GlcIV)，3.23，3.20，2.93，2.75(4m，4H，H-2，H-2′，H-6，H-6′pipI)。
权利要求
1.如下通式(I)的化合物，该化合物呈游离形式或与可药用碱或酸形成的盐形式，以及呈溶剂化物或水合物的形式 其中R表示氢原子、羟基、基团-OSO3-、基团-O-(C1～C5)烷基或基团-O-芳烷基；Z表示基团COO-或羟基X表示羟基或通式A的糖单元 其中—R1表示可以将A连接到氮杂糖单元或者其它糖单元上的氧原子，—R2表示基团-NH2、基团-NHCO(C1～C5)烷基、基团-NHCO-芳基、基团-NHSO3-、羟基、基团-O-(C1～C5)烷基、基团-O-芳烷基或基团-OSO3-，—R3表示羟基、基团-OSO3-、基团-O-(C1～C5)烷基或基团-O-芳烷基，—R4表示羟基、基团-OSO3-、基团-O-(C1～C5)烷基、基团-O-芳烷基或通式B的糖单元 其中—R6表示能够将B连接到另外的通式A的糖单元上的氧原子，—R7和R8具有如前面所定义的R3同样的定义，—R9表示羟基、基团-OSO3-、基团-O-(C1～C5)烷基、基团-O-芳烷基或如上所述通式A的糖单元，—R5具有与前面所定义的R3同样的定义；Y表示氢原子、基团(C1～C5)烷基或通式D的糖单元 其中—R10、R12和R13分别具有与前面所定义的R5、R3和R2同样的定义，—R11表示·能够将D接枝在氮杂糖单元上的基团(C1～C3)亚烷基，或者·能够将D接枝在另外的糖单元上的氧原子，—R14表示基团-O-(C1～C5)烷基或式-O-E，其中E表示如下通式的基团 其中—R15表示基团-O-(C1～C5)烷基、基团-O-芳烷基或通式D的糖单元，其中R11表示氧原子，—R16和R17具有如前面所定义的R3同样的定义，然而，是在X和R每一个都表示羟基，Y不表示氢原子的条件下，以及由通式(I)的化合物包含的糖单元数为1～10。
2.按照权利要求1的通式(I)的化合物，该化合物呈游离形式或与可药用碱或酸形成的盐形式，以及呈溶剂化物或水合物的形式 其中R表示氢原子、羟基、基团-OSO3-、基团-O-(C1～C5)烷基或基团-O-芳烷基；Z表示基团COO-或羟基；X表示羟基或通式A的糖单元 其中—R1表示氧原子，—R2表示基团-NHCOCH3、基团-NHSO3-、基团-OSO3-，—R3表示羟基或基团-O-(C1～C5)烷基，—R4表示羟基、基团-O-芳烷基或通式B的糖单元 其中—R6表示氧原子，—R7表示基团-OSO3-，—R8表示羟基、基团-O-(C1～C5)烷基或基团-O-芳烷基，—R9表示基团-OSO3-、基团-O-芳烷基、基团-O-(C1～C5)烷基或如上所定义通式A的糖单元，—R5表示基团-OSO3-，Y表示氢原子或通式D的糖单元 其中—R10具有与前面所定义的R5同样的定义，—R12表示羟基或基团-OSO3-，—R13表示基团-NHSO3-，—R11表示与氮杂糖单元相连接的亚甲基或与E相连接的氧原子，—R14表示基团-OCH3或式-O-E，其中E表示如下通式的基团 其中—R15表示单元D，其中R11表示能够将E连接到D上的氧原子，—R16表示基团-OSO3-，—R17表示羟基，条件是由通式(I)的化合物包含的糖单元数为2～10。
3.按照权利要求1或2中任何一项的通式(I)化合物，其中Y是氢原子，Z是基团COO-。
4.按照权利要求1～3中任何一项的化合物，这些化合物选自·(2，4-二-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-乙酰胺基-2-脱氧-6-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-乙酰胺基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-羟基-4-氧哌啶-3-羧酸钠(3S，4R，5R))，·(2，4-二-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-N-磺酸钠基-2-脱氧-6-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-N-磺酸钠基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-羟基-4-氧哌啶-3-羧酸钠(3S，4R，5R))，·(3-O-甲基-2，4-二-O-磺酸钠基-α-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(3-O-甲基-2，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-O-甲基-2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(3-O-甲基-2，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-羟基-4-氧哌啶-3-羧酸钠)(3S，4R，5R))，·(2，4-二-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-羟基-4-氧哌啶-3-羧酸钠(3S，4R，5R))，·(4-O-丙基-2-O-磺酸钠基-α-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-羟基-4-氧哌啶-3-羧酸钠(3S，4R，5R))，·(2，4-二-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-乙酰胺基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-乙酰胺基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-羟基-5-羟甲基-4-氧哌啶(3S，4R，5R))，·(4-O-苯基丙基-二-O-磺酸钠基-α-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-乙酰胺基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-乙酰胺基-2-脱氧-6-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-羟基-4-氧哌啶-3-羧酸钠(3S，4R，5R))。
5.含有按照权利要求1～4中任何一项的通式(I)化合物作为活性成分的药物组合物，该组合物任选同时含有一种或几种适当的惰性赋形剂。
6.按照权利要求5的药物组合物，该组合物用来治疗涉及乙酰肝素酶的疾病。
7.按照权利要求5的药物组合物，该组合物用来治疗具有重大血管形成程度的肿瘤，比如肺癌、乳腺癌、前列腺癌、食道癌、引起转移的癌，比如结肠癌和胃癌、黑色素瘤、神经胶质瘤、淋巴瘤或白血病。
8.按照权利要求5的药物组合物，该组合物用来治疗心血管疾病，比如动脉粥样硬化，进行血管成形术后再狭窄，与放置血管内植入体和/或主动脉-冠状动脉搭桥或其它血移植后出现的并发症或心脏过度生长或糖尿病的血管并发症比如糖尿病性视网膜病有关的疾病。
9.按照权利要求5的药物组合物，该组合物用来治疗慢性炎症疾病，比如类风湿性关节炎或IBD。
10.按照权利要求5的药物组合物，该组合物用来治疗黄斑变性。
全文摘要
本发明涉及呈游离形式或与碱或酸形成的可药用盐以及溶剂化物或水合物形式的抑制乙酰肝素酶的通式(I)化合物，其中R表示氢原子、羟基、基团－OSO
文档编号A61P35/00GK1956991SQ200580016503
公开日2007年5月2日 申请日期2005年7月20日 优先权日2004年7月23日
发明者P·A·德里格茨, M·珀蒂托 申请人:赛诺菲-安万特
技术领域：
本发明涉及氮杂糖衍生物、乙酰肝素酶抑制剂、其制备方法、含有该衍生物的组合物及其在治疗方面的应用。
乙酰肝素酶是一种内葡糖苷酸酶类型的酶，其底物是肝素/硫酸乙酰肝素(HS)族多糖。已知乙酰肝素有I型和II型(McKenzie等人，Biochem.Biophys.Res.Commun.，(2000)，276卷，p.1170-1177)。此类酶专门对在D-葡糖醛酸型多糖单元和D-葡糖胺型单体单元之间的β-1→4型键进行水解，释放出大约10～20个糖单元的HS片段(Pikas，D.S.等人，J.Biol.Chem.，(1998)，273卷，p.18770-18777)。乙酰肝素酶以同样的方式使含有硫酸乙酰肝素的蛋白多糖的多糖链降解(乙酰肝素蛋白多糖缩写为HSPGs)(Vlodavsky和Friedmann，J.Clin.Invest.，(2001)，108卷，p.341-347)。HSPGs由在其上面通过共价键连接着线形HS链的中心蛋白质构成(Kjellen等人，Annu.Rev.Biochem.，(1991)，卷60，p.443-475)。HSPGs是一种泛蛋白的大分子。与HS一样，HSPGs存在在许多种细胞的表面和细胞外基质中(细胞外基质缩写为ECM)(Kjellen等人同上文献(1991)；Bernfield等人，Annu.Rev.Biochem.，(1999)，卷68，p.729-777；David等人，FASEB J.，(1993)，卷7，p.1023-1030；Lozzo等人，Annu.Rev.Biochem.，(1998)，卷67，p.609-652)。ECM构成脊椎动物和无脊椎动物结缔组织的主要部分，占据了细胞外的空间。它还包围着器官并在内皮，特别是在毛细血管的周围(Wight等人，Arteriosclerosis，(1989)，卷9，p.1-20)，起着保持和保护器官和内皮壁垒的作用(McKenzie等人，Biochem.J，2003，卷373，p.423-435)。ECM也是涉及到各种细胞机理，特别是细胞分化和修复的关键调制剂(Folkman等人，Adv.Exp.Med.Biol.，(1992)，卷313，p.355-364)。
在先有技术中曾经叙述过化合物乙酰肝素的抑制剂。比如在国际专利申请WO 02/0600374中叙述了苯并-1，3-唑衍生物、国际专利申请WO 03/074516涉及了邻苯二甲酰亚胺羧酸和苯并唑、国际专利申请WO 04/013132叙述了呋喃噻唑衍生物，还有国际专利申请WO04/046123叙述了苯并唑衍生物、苯并噻唑和苯并咪唑。
在Takahashi等人，Chem.Lett.，(1994)，卷11，p.2119；Takahashi等人，Tetrahedron，(2001)，卷57，p.6915-6926中叙述了在5位上用氮原子取代氧原子的短链(两个链节)氮杂糖衍生物的合成方法。但是没有鉴别其在生体内的活性。
具有如下通式单一链节的氮杂糖， 已经被叙述过(美国专利6,583,158、Ichikawa等人，J.Amer.Chem.Soc.，(1998)，卷120，p.3007)。
寻找和开发出具有良好生体外和生体内活性的产品的需求总是存在的。
现已意外地发现，合成的氮杂糖衍生物作为乙酰肝素酶抑制剂具有良好的活性。因此，本发明涉及新型的氮杂糖衍生物，即乙酰肝素酶抑制剂。这些新型的化合物具有良好的乙酰肝素酶抑制活性。
本发明的目的涉及用如下通式(I)表示的化合物，该化合物呈游离形式或与可药用碱或酸形成的盐形式，以及呈溶剂化物或水合物的形式 其中R表示氢原子、羟基、基团-OSO3-、基团-O-(C1～C5)烷基或基团-O-芳烷基；Z表示基团COO-或羟基X表示羟基或通式A的糖单元
其中-R1表示可以将A连接到氮杂糖单元或者其它糖单元上的氧原子，-R2表示基团-NH2、基团-NHCO(C1～C5)烷基、基团-NHCO-芳基、基团-NHSO3-、羟基、基团-O-(C1～C5)烷基、基团-O-芳烷基或基团-OSO3-，-R3表示羟基、基团-OSO3-、基团-O-(C1～C5)烷基或基团-O-芳烷基，-R4表示羟基、基团-OSO3-、基团-O-(C1～C5)烷基、基团-O-芳烷基或通式B的糖单元 其中-R6表示能够将B连接到另外的通式A的糖单元上的氧原子，-R7和R8具有如前面所定义的R3同样的定义，-R9表示羟基、基团-OSO3-、基团-O-(C1～C5)烷基、基团-O-芳烷基或如上所述通式A的糖单元，-R5具有与前面所定义的R3同样的定义；Y表示氢原子、基团(C1～C5)烷基或通式D的糖单元
其中-R10、R12和R13分别具有与前面所定义的R5、R3和R2同样的定义，-R11表示·能够将D接枝在氮杂糖单元上的基团(C1～C3)亚烷基，或者·能够将D接枝在另外的糖单元上的氧原子，-R14表示基团-O-(C1～C5)烷基或基团-O-E，其中E表示如下通式的基团 其中-R15表示基团-O-(C1～C5)烷基、基团-O-芳烷基或通式D的糖单元，其中R11表示氧原子，-R16和R17具有如前面所定义的R3同样的定义，然而，是在X和R每一个都表示羟基，Y不表示氢原子的条件下，以及由通式(I)的化合物包含的糖单元数为1～10。
按照其一个优选的形式，本发明涉及通式(I)的化合物，该化合物呈游离形式或与可药用碱或酸形成的盐形式，以及呈溶剂化物或水合物的形式
其中R表示羟基；Z表示基团COO-或羟基；X表示羟基或通式A的糖单元 其中-R1表示氧原子，-R2表示基团-NHCOCH3、基团-NHSO3-、基团-OSO3-，-R3表示羟基或基团-O-(C1～C5)烷基，-R4表示羟基、基团-O-芳烷基或通式B的糖单元 其中-R6表示氧原子，-R7表示基团-OSO3-，-R8表示羟基、基团-O-(C1～C5)烷基或基团-O-芳烷基，-R9表示基团-OSO3-、基团-O-芳烷基、基团-O-(C1～C5)烷基或如上所定义通式A的糖单元，-R5表示基团-OSO3-，Y表示氢原子或通式D的糖单元
其中-R10具有与前面所定义的R5同样的定义，-R12表示羟基或基团-OSO3-，-R13表示基团-NHSO3-，-R11表示与氮杂糖单元相连接的亚甲基或与E相连接的氧原子，-R14表示基团-O-CH3或基团-O-E，其中E表示如下通式的基团 其中-R15表示单元D，其中R11表示能够将E连接到D上的氧原子，-R16表示基团-OSO3-，-R17表示羟基，条件是由通式(I)的化合物包含的糖单元数为2～10。
特别优选的一类化合物是式中Y是氢原子的通式I的化合物。
本发明包括了呈其酸的形式或其任何一种可药用盐形式的氮杂糖衍生物。在酸的形式中，官能团-COO-和-SO3-分别呈-COOH和-SO3H的形式。
按照其特别优选的方面，本发明涉及如下的化合物·(2，4-二-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠(idopyranosyluronate de sodium))-(1-4)-(2-乙酰胺基-2-脱氧-6-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-乙酰胺基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-羟基-4-氧哌啶-3-羧酸钠(3S，4R，5R))(化合物20#)。
·(2，4-二-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-N-磺酸钠基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-N-磺酸钠基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-羟基-4-氧哌啶-3-羧酸钠(3S，4R，5R))(化合物27#)。
·(3-O-甲基-2，4-二-O-磺酸钠基-α-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(3-O-甲基-2，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-O-甲基-2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(3-O-甲基-2，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-羟基-4-氧哌啶-3-羧酸钠(3S，4R，5R))(化合物47#)。
·(2，4-二-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-羟基-4-氧哌啶-3-羧酸钠(3S，4R，5R))(化合物69#)。
·(4-O-丙基-2-O-磺酸钠基-α-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)(5-羟基-4-氧哌啶-3-羧酸钠(3S，4R，5R))(化合物74#)。
·(2，4-二-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-乙酰胺基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-乙酰胺基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-羟基-5-羟甲基-4-氧哌啶(3S，4R，5R))(化合物123#)。
·(4-O-苯基丙基-二-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-乙酰胺基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-乙酰胺基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-羟基-4-氧哌啶-3-羧酸钠(3S，4R，5R))(化合物124#)。
在本发明的框架内-(C1～C5)烷基表示线形或分支的可含有1～5个碳原子的饱和脂族基团。作为例子可以举出比如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基等，--O-芳烷基表示如上所定义的烷基，但被本身可携带取代基的芳族基团取代。作为例子可以举出比如p-甲氧基苄基、苯甲基、苯乙基、苯丙基等，-(C1～C3)亚烷基表示含有1～3个碳原子的二价烷基。
所谓本发明氮杂糖衍生物的可药用盐，指的是一种氮杂糖衍生物，其中一个或几个-COO-和/或-SO3-官能团以离子形式与可药用的阳离子相连接。按照本发明优选的盐是其中阳离子选自碱金属阳离子，或者更优选其中的阳离子是Na+或K+的盐。
原则上，按照本发明的化合物制备方法使用如前面的文献中所报道来制备并特别考虑到保护基团的正交性(orthogonalité)来选择的单糖、二糖或低聚糖基的合成单体。特别要参考EP 300099、EP 529715、EP 621282和EP 649854以及C.van Boeckel、M.Petitou，Angew.Chem.Int.Ed.Engl.，(1993)，卷32，p.1671-1690。然后将这些合成单体彼此偶联，提供出与按照本发明化合物相应的被保护化合物。然后使用本领域技术人员所熟知的方法将这些相应的被保护化合物转化为按照本发明的化合物。
按照本发明的化合物还含有氮杂糖链节(即取代的哌啶)，合成此种化合物要求制备带有保护基团的此链节前体，这些保护基团要与后面与单糖、二糖和低聚糖的偶合相容。氮杂糖前体的制备方法在文献中已经叙述。特别可参考《作为糖苷酶抑制剂的亚胺基糖》，AEStütz，Wiley-VCH，1999。
当得到了用来组合此链所必需的合成单体时，将这样的合成单体彼此进行偶合。在进行所述的偶合反应时，在其异头碳上被活化的“供体”合成单体与具有至少一个自由羟基的“受体”合成单体反应。
本发明涉及通式(I)化合物的制备方法，其特征在于，在第一步当中，制备所需化合物(I)完全被保护的相应化合物，在第二步中，引入带负电的基团(羧酸根、磺酸根)以及自由羟基和/或将它们解保护。
按照本领域技术人员公知的反应，特别是使用合成糖苷的方法(G.J.Boons，Tetrahedron，(1996)，卷52，p.1095-1121；WO 98/03554和WO 99/36443)进行此前体的合成，按照该方法，糖苷键的低聚糖供体与糖苷键低聚糖受体反应，得到另一种低聚糖，其长度等于反应的两个化合物之和。重复进行此程序，直至得到所需的通式(I)化合物。所需的最终化合物的结构决定了在各个合成步骤中使用的化合物的性质，根据在现有技术中公知的规律来控制其立体化学和区域选择性。
一般按照如下反应，通过链接由其完全被保护的聚糖前体得到本发明的化合物-释放和取代该官能团，然后将其转化为N-和/或O-磺酸根。
-释放其它官能团，必要时比如通过还原胺化反应将这些片段彼此组合。
可在此方法的不同阶段进行羧酸官能团的释放。
可使用合成糖苷和有机化学的本领域技术人员公知的各种策略自然地制备本发明的化合物。
如上所述的方法是本发明优选的方法。但是，通式(I)化合物也可用在比如《单糖，其化学及其在天然产物中的作用》，P.M.Collins和R.J.Ferrier，J.Wiley & sons，1995和在G.J.Boons，Tetrahedron，(1996)，卷52，p.1095-1121中所述的糖化学公知的其它方法制备。
在制备化合物(I)的方法中使用的保护基团是在糖化学中通常使用的，比如在《有机合成中的保护基团》，TW Greene，PGM Wuts，John Wiley & sons，New-York，1999中提到的。
例如，这些保护基团优选自乙酰基、卤代甲基、苯甲酰基、乙酰丙酸基(lévulinyle)、苄基、取代的苄基、任选取代的三苯甲基、氨基甲酸酯、四氢吡喃基、烯丙基、戊烯基、叔丁基二甲基甲硅烷基(tBDMS)或三甲基甲硅烷基乙基。
活化基团是在糖化学中通常使用的，是按照比如G.J.Boons，Tetrahedron，(1996)，卷52，p.1095-1121中叙述的。这样的活化基团选自比如亚氨酸根、硫代糖苷、戊烯基糖苷、黄原酸根、亚磷酸根或卤化物。
如上所述的方法能够得到呈盐形式的本发明化合物。为了得到相应的酸，要使呈盐形式的本发明化合物与呈酸形式的阳离子交换树脂相接触。
然后用碱中和呈酸形式的本发明化合物，以得到所需的盐。为了制备通式(I)化合物的盐，可使用各种无机碱或有机碱，与通式(I)化合物一起给出了可药用盐。优选使用氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钙或氢氧化镁作为碱。通式(I)化合物的钠盐和钙盐是优选的盐。
按照本发明的化合物是生物化学和药物学的研究对象。下面的非限制性的测试说明本发明。
定义如下的术语PET聚对苯二甲酸乙二醇酯AM乙酰氧甲基DMEM被Dulbecco改进的Eagle介质EDTA乙二胺四乙酸Tris三(羟甲基)氨基甲烷AT抗凝血酶素IIInkatnanokatal＝酶的测量单位(由生产者给出)，表示单位时间催化的底物量。
1.在酶系统中评价乙酰肝素酶抑制剂的活性(确定本发明化合物的CI50)通过其降解合成戊聚糖(fondaparinux)的能力来显示出乙酰肝素酶的活性。通过其抗因子Xa活性来测定合成戊聚糖的浓度。
A.材料和方法乙酰肝素酶是Sanofi-Synthélabo(法国Labège)的产品。
Xa因子定量试剂由Chromogénix公司(法国Montpellier)销售。
将固定浓度的乙酰肝素酶与浓度逐渐增加的本发明化合物，即乙酰肝素酶抑制剂混合(不同的稀释度从1nM到10μM)(对于每一批，预备实验能够确定使添加0.45μg/mL合成戊聚糖降解所足够的酶活性)。在37℃下5min之后，将混合物置于合成戊聚糖存在下，在37℃下经过1h。在5min内加热到95℃终止反应。最后通过加入Xa因子及其特异性色源底物测量残留的合成戊聚糖浓度(Ref.S2222)。
按照如下的操作程序制造不同混合物a)反应混合物将50μL醋酸钠缓冲液(0.2M，pH值4.2)与50μL合成戊聚糖(0.45μg/mL)以及59μL的乙酰肝素酶混合。在37℃下培养1h，然后在95℃下培养5min。然后将100L此混合物与50μL的50mM Tris、175mM的NaCl和75mM的EDTA(pH值14)混合。如此使pH值从4.2变为7。
按照如下的方法测定合成戊聚糖抗Xa因子活性b)定量合成戊聚糖的抗因子Xa活性将100μL在步骤a)中得到的溶液与100μL的AT(0.5μ/mL)混合。在37℃下保持2min，然后加入100μL Xa因子(7nkat/mL)。在37℃下保持2min，然后加入100μL色源底物(RefS2222)(1mM)。在37℃下保持2min，然后加入100μL醋酸(50％)。
读出在405nm的光密度读数。
测定相对于没有抑制剂的对照组抑制百分比。
抑制百分比曲线得以计算出CI50。
B.结果按照本发明的化合物，其CI50为10nm～10μM。
比如，27#化合物的CI50为11±4nm(平均值±两次实验的SD)。
2.乙酰肝素酶抑制剂对肿瘤细胞HT1080发作的效果在生体外测定通式(I)化合物即乙酰肝素酶抑制剂对肿瘤细胞HT1080的效果。
A.材料和方法a)细胞培养在涂有胶原(Becton Dickinson 75cm2；Ref.354523)的烧瓶中，在含有5％的胎牛血清、谷氨酰胺(2mM)(RefGIBCO 25030-024)、丙酮酸钠(1mM)(RefGIBCO 11360-039)和非必要氨基酸(1X)(RefGIBCO 11140-035)的DMEM(RefGIBCO 11960-044)介质中培养人纤维肉瘤组织细胞，HT 1080(ATCC CCL-121)，直至50～80％融合。
b)细胞发作测试在24穴平板(Ref351158)上在Becton Dickinson falcon HTSFluoroblok多穴插入系统套件上进行HT1080发作的测试。
这些测量室给细胞提供能够评价其在生体外发作性能的条件。
该套件包括与培养插入件相连的平板，该插入件上包括了具有许多8μm小孔的膜片PET，在膜片上有一层均匀的Matrigel基质(BectonDickinson；Ref354230)。
Matrigel是一种从EHS肿瘤(Engelbreth-Holm-Swarm)提取的可溶性基底膜，由于其组成在其固化时形成与基底膜相应的结构。
Matrigel层使膜片上的孔闭合，如此就阻塞了未发作的细胞通过膜片迁移。反之，发作的细胞(肿瘤的或非肿瘤的)将能够移动并侵入Matrigel层，然后通过膜片迁移。
通过用钙素AM(分子探针C-3100)标记进行细胞迁移的定量。借助于Perkin Elmer Wallac VICTOR3测定发射的荧光信号，此信号直接与侵入Matrigel凝胶的细胞数相关。与所研究的产品进行的同样实验中进行的对照组相(在0％和5％的胎牛血清存在下的响应)比较，就能够确定在此产品存在下对细胞发作抑制的百分比。
B.结果一系列独立的测定(2～4个实施方案)使得能够显示出在1nM～10μM的浓度下，按照本发明的化合物平均抑制细胞发作的百分比为8～60％。
比如，一系列四次独立测定能够显示出10μM的20#化合物平均抑制细胞发作百分比为40.3±8.3％(平均值±偏差型)。
再有，20#化合物具有依存于细胞发作的定量效果。
实际上-在0.3μM的浓度下，20#化合物抑制细胞发作为26±3％，-在1μM的浓度下，20#化合物抑制细胞发作为53±11％。
此结果表明随着20#化合物剂量的增加对细胞发作的抑制效果也增加。
因此，按照本发明的通式(I)化合物对于乙酰肝素酶具有良好的亲合性，具有乙酰肝素酶抑制剂的作用。
对动物和人都显示出乙酰肝素酶分泌的增加，癌的进展是相关的(Goldschmit等人，PNAS，(2002)，卷99(15)，p.10031-10036)。比如在具有肿瘤转移的动物血清中(Vlodavsky等人，Isr.J.Med.Sci.，(1988)，卷24(9-10)，p.464-470)或者在发生了转移的罹患癌症的病人尿中(Vlodavsky等人，Curr.Biol.，(1997)，卷7(1)，p.43-51)都检出了高水平的乙酰肝素酶。对肿瘤进行的活组织检查显示出同样的相关性(Vlodavsky等人，Isr.J.Med.Sci，卷24(9-10)，p.464-470)。因此，在乙酰肝素酶分泌增加和肿瘤细胞潜在转移性之间存在有相关性(Vlodavsky等人，Invasion Matastasis，(1994)，卷14，p.290-302；Nature Medicine，(1999)，卷5，p.793-802)。
由肿瘤细胞分泌的乙酰肝素酶，使构成ECM主要部分的HSPGs和HS降解。如此被穿孔的ECM允许肿瘤细胞通过并转移，还使新形成的血管蔓延(血管生成)。(Suzanne A.Eccles，Nat.Med.，(1999)，卷5(7)，p.793-809)。血管生成是由原先存在的血管或者通过骨髓细胞迁移和分化产生新的毛细血管的过程。如此在形成肿瘤新血管的过程中，同时会观察到内皮细胞不受控制地增生和成血管细胞从骨髓中迁移。
如此，对于旨在抑制癌细胞侵入和转移以及血管形成过程的治疗，乙酰肝素酶就成为合理的目标。所谓“癌”(即肿瘤)，指的是存在于皮肤中，但也特别存在于器官壁中的上皮细胞的各种恶性生长，以及显现出转移的肿瘤细胞，比如黑色素瘤、间皮瘤、淋巴瘤、白血病、纤维肉瘤、横纹肌肉瘤、肥大细胞瘤、，但也包括触及组织比如结肠、直肠、前列腺、肺、乳腺、胰腺、小肠、肾、卵巢、子宫、子宫颈、膀胱、肝和胃的肿瘤。肿瘤会浸润相邻的组织并扩展(转移)到其它较远的器官，比如肺、大脑或骨。因此，具有抑制乙酰肝素酶活性的化合物，比如本发明的化合物可用来治疗这些癌症(Fang J.等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，(2000)，卷97(8)，p.3884-3889；Kondraganti等人，Cancer Res.，(2000)，卷60(24)，p.6851-6855)，特别是结肠直肠癌、前列腺癌、肺癌、乳腺癌、胰腺癌、肾癌、膀胱癌和卵巢癌。
已经鉴别出受体p75，即神经营养蛋白族(NT)分子受体，是在大脑中转移现象的代表性标记物。还发现分泌NT涉及到乙酰肝素酶分泌增加(Marchetti D.等人，J.Cell.Biochem.，(2004)，卷91(1)，p.206-215)。因此，具有抑制乙酰肝素酶活性的化合物，比如本发明的化合物就能够通过抑制受体p75活化作用来减少在中枢神经系统的转移(Marchetti D.等人，Pathol.Oncol.Res.，(2003)，卷9(3)，p.147-158和Epub，(2003)，Review；Walch ET等人，Int.J.Cancer，(1999)，卷82(1)，p.112-120；Menter DG等人，Invasion Metastasis，(1994-95)，卷14(1-6)，p.372-384；Marchetti等人，Int.J.Cancer，(1993)，卷55(4)，p.692-699)。
乙酰肝素酶对ECM的HSPGs的活性似乎也与炎性反应和自身免疫的启动相关(Vlodavsky等人，Invasion Metastasis，(1994)，卷4，p.290-302；Goldschmit等人，Med.Sci.，(2002)，卷99(15)，p.10031-10036)。血小板、粒细胞、淋巴细胞B和T、巨噬细胞和肥大细胞与ECM的相互作用与乙酰肝素酶导致的HS降解有关(Vlodavsky等人，Invasion Metastasis，(1992)，卷12，p.112-127)。如本发明化合物之类的化合物具有抑制乙酰肝素酶的活性，因此可用来治疗炎性疾病，特别是慢性的炎性疾病，比如类风湿性关节炎或IBD(炎性肠疾病)，包括两种形式的慢性肠炎UC(溃疡性结肠炎)和Crohn氏病即自身免疫性疾病。
其它的研究使人认为，乙酰肝素酶可在治疗心血管疾病中起作用(Journal of Pharmacological Sciences，(2004)，卷94，补编1，p.160P，print；和日本药物学会第77届年会会议资料，大阪，日本，2004，3月8-10日；和Miller，Heather Ann，Diss.Abstr.Int.，(1984)，B2003，卷64(5)；Dermir等人，Clin.Appl.Thromb.Hemost.，(2001)，卷7(2)，p.131-140)，比如血管成形术后再狭窄、与糖尿病血管并发症有关的疾病，比如糖尿病性视网膜病、动脉粥样硬化(Atherosclerosis，(1999)，卷145，p.97-106；J.Clin.Invest.，(1997)，卷100，p.867-874)，或者血栓栓塞和动脉血栓形成病。因此，按照本发明的化合物，即乙酰肝素酶抑制剂可对这些疾病进行选择性治疗。
另外，对于涉及到肾的过滤和再吸收功能可能改变的某些肾功能不全的情况，乙酰肝素酶是已知的(FASEB J，(2004)，卷18，p.252-263)。因此，按照本发明的化合物，即乙酰肝素酶抑制剂可对这些疾病进行选择性治疗。
ECM的HSPGs似乎是通过对生长因子，特别是FGFs(成纤维细胞生长因子)的调节起着细胞生长和活化的主要调节剂的作用(Bashkin等人，Biochemistry，(1989)，卷28，p.1737-1743)。因此，乙酰肝素酶成为治疗涉及到FGFs的疾病的合理的目标。
一般说来，在刺激癌细胞生长失控现象当中，借助于自分泌、旁分泌都明显涉及到FGFs。再有，FGFs引发肿瘤的血管生成，这对肿瘤的生长和对转移现象同时起到占优势的作用。
血管生成是从原来存在的血管或者通过骨髓细胞的迁移和分化产生新的毛细血管的过程。因此在肿瘤的新血管生成过程中，同时观察到表皮细胞不受控制地增生和成血管细胞从骨髓中迁移出的现象。在生体外和生体内都发现，许多生长因子，特别是FGF-1或a-FGF以及FGF-2或b-FGF都刺激了表皮的增生。
比如在前列腺细胞的生长和修复当中，a-FGF和b-FGF起着重大的作用(Doll JA等人，Prostate，(2001)，卷305，p.49-293)。
许多著作证实，在人的乳腺肿瘤线中(特别是MCF7)和在肿瘤的活体检查中同时存在着a-FGF和b-FGF及其受体FGFRs。
神经胶质瘤在生体内和在生体外都产生a-FGF和b-FGF，并在其表面上具有不同的FGFs受体。
最近有文献报道了在白血病和淋巴瘤中原血管形成剂和特别是FGFs的潜在作用(Thomas DA等人，Acta Haematol，(2001)，卷207，p.106-190)。
在由骨髓生成血管和在CML(慢性骨髓单核细胞白血病)中存在着“超髓外疾病”之间存在着相关。
血管平滑肌细胞增生和迁移对动脉的初期肥大有促进作用，在动脉粥样硬化和在血管成形术和动脉内膜切除术后再狭窄起着至关重要的作用。在生体内的研究表明，在由“气囊损害”造成颈动脉损伤后，局部产生了a-FGF和b-FGF。
由于糖尿病造成的血管障碍，其特征在于血管反应性和血流的改变、渗透性过高、极端的增生响应和基质蛋白质沉积增加。更准确说，a-FGF和b-FGF存在于具有糖尿病视网膜病的病人前视网膜中，在不明的毛细管膜中和在罹患增生性视网膜病病人的玻璃体液中。
风湿性关节炎(RA)是一种病因不明的慢性病。当其侵袭到多个器官时，最严重形式的RA就是渐进性的关节滑膜炎症，能够导致关节破坏。血管形成似乎严重地影响此病的进展。比如在滑膜组织和在罹患RA病人的关节液中检出了a-FGF和b-FGF，这表明此生长因子介入了此疾病的起病和/或进展。在老鼠AIA(辅药诱发关节炎模型)模型中，已经证实b-FGF的过度表达增加了此病的严重性，此时中和抗b-FGF的抗体阻断了RA的进展(Yamashita等人，J.Immunol.，(2002)，卷57，p.168-450；Manabe等人，Rheumatol，(1999)，卷20，p.38-714)。
血管形成和炎症也都是重要的现象，此现象介入了涉及到骨性关节炎过程，这种疾病导致了与疼痛有关的关节损坏。血管形成在软骨细胞肥大和导致关节改变的骨化当中也可起着作用(Bonnet CS，Rheumatology，(1)7-162005)。
IBD(肠道炎症)包括两种形式的慢性肠炎UC(溃疡性结肠炎)和Crohn氏病(CD，局限性回肠炎)。IBD的特征是免疫功能障碍，表现为不适当地产生免疫细胞素，这就导致形成局部的微血管系统。这样的免疫源血管形成结果是由于血管收缩导致的肠局部缺血。对这种疾病的病人测定出b-FGF的循环和局部的比率都很大。(Kanazawa等人，American Journal of Gastroenterology，(2001)，卷28，p.96-822；Thorn等人，Scandinavian Journal of Gastroenterology，(2000)，卷12，p.35-408)。
因此，具有抑制乙酰肝素酶活性的化合物，比如本发明的化合物可用于治疗与FGFs和/或其受体失调有关的疾病。
由于其毒性很小，由于其药物学和生理学的性能，本发明的化合物在治疗各种具有很大形成血管程度的肿瘤(肺癌、乳腺癌、前列腺癌、食道癌)或诱发转移的肿瘤(结肠癌、胃癌、黑色素瘤)以及对自分泌的a-FGF或b-FGF敏感的肿瘤以及最后在淋巴瘤和白血病类的疾病当中找到了应用。此类化合物可选择单独治疗，或者与适当的化疗或放疗一起治疗，或者与抗血管形成的治疗一起治疗。按照本发明的化合物还在治疗心血管疾病，比如动脉粥样硬化、在治疗与放置血管内植入体和/或主动脉-冠状动脉搭桥后出现的并发症有关的疾病时进行血管成形术后再狭窄方面或在糖尿病血管并发症比如糖尿病性视网膜病方面找到其应用。按照本发明的化合物还在治疗慢性炎症比如类风湿性关节炎或IBD方面找到其应用。
按照本发明的化合物还在治疗黄斑变性方面找到其应用。成年人视力损失的主要特征是，新血管形成和由此造成的出血，这引起眼球的重大功能障碍，表现为早发性失明。最近涉及到眼新血管形成现象的机理研究证实了在这样的疾病早涉及到原血管形成因子。
按照本发明的化合物还可以与一种或多种抗癌治疗同时使用，比如外科治疗、放疗或与阻断血管形成的化合物同时使用。比如按照本发明的化合物可以单独使用，也可以与其它活性成分同时使用，比如与顺氯氨铂、环磷酰胺、甲氨蝶呤、5-氟尿嘧啶、太平洋紫杉醇、多烯紫杉醇、长春新碱、长春碱、去甲长春花碱、阿霉素、它莫西芬、托瑞米芬、甲地孕酮、阿那曲唑、戈舍瑞林、卡培它宾和雷洛昔芬或者具有抗血管形成活性的分子一起使用来治疗癌症。
按照本发明的另一方面，其目的是一种药物组合物，该组合物含有呈游离形式或与可药用碱或酸形成的盐的形式的通式(I)化合物作为活性成分，按照本发明任选与一种或几种惰性和适当的赋形剂一起使用。
所述赋形剂可按照药物的形式和所需的给药形式口服、舌下、皮下、肌肉内、血管内、透皮、透粘膜、局部还是直肠给药来加以选择。
在每一个单剂中，活性成分的含量要适合于设想的每日剂量，以得到所需的预防或治疗效果。每个单剂可含有0.1～100mg，优选0.5～50mg的活性成分。
本发明的药物组合物可用于口服、舌下、皮下、肌肉内、血管内、气管内、局部、鼻内、透皮、直肠、眼内、阴道给药。给药的单剂形式可以是比如片剂、胶囊、颗粒、粉末、口服或注射的溶液或悬浮液，透皮的贴剂、笔式注射器、栓剂等。为了局部给药可设计成软膏、乳脂、洗剂、洗眼剂、凝胶、喷雾剂、油剂等。
按照使用的盖仑剂型，所述单剂形的剂量要能够每kg体重每日给药1～100mg活性成分。
为了制造片剂，加入微粉碎或未微粉碎的活性成分、可包括如乳糖、微晶纤维素、淀粉的稀释剂的药物载体和作为胶粘剂(聚乙烯基吡咯烷酮、羟丙基甲基纤维素等)、如白碳黑的流动剂、如硬脂酸镁、硬脂酸、三山萮酸甘油酯、硬脂基富马酸钠的润滑剂等成形助剂。也可以添加湿润剂或表面活性剂，比如月桂基硫酸钠。
制造的技术可以是直接模压、干法造粒、湿法造粒或加热熔融。
片剂可以是没有糖衣的或带有糖衣的，比如用蔗糖或者用各种聚合物或其它适当的材料。由于聚合物基质或在糖衣中使用的特殊聚合物，使得能够快速释放、延迟释放或者延续释放活性成分。
为了制造胶囊，将活性成分与干、液体或半固体的药物载体混合(简单混合、干法造粒或湿法造粒或者加热熔融)。
胶囊可以是硬胶囊或者是软胶囊，有或者没有具有快速、延续或延迟释放(比如勇于肠道型)的薄膜。
呈糖浆或醑剂形式的组合物或者用于滴状给药的组合物，可与活性成分一起含有甜味剂、优选是无热量的甜味剂、作为灭菌剂的对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、调味剂和着色剂。
能够分散在水中的粉末和颗粒可含有与分散剂或润湿剂一起混合的活性成分，在此分散剂是比如聚乙烯基吡咯烷酮，甚至于混合有甜味剂和滋味矫正剂。
为了进行直肠给药，则求助于使用在直肠温度下熔化的胶粘剂比如可可脂或聚乙二醇制造的锭剂。
为了进行肠道外给药，使用了水悬浮液、等渗盐水溶液或含有可药用分散剂和/或润湿剂比如聚乙二醇或聚丁二醇的可注射灭菌溶液。
活性成分还可以任选与一种或几种支持体或添加剂，或者与聚合物基质或与环化糊精一起配合成微胶囊的形式(透皮贴剂，具有延续释放的形式)。
按照本发明局部给药的组合物含有与皮肤相容的介质。它特别具有水溶液、醇溶液或含水醇溶液、凝胶、具有乳脂或凝胶外观的油包水型或水包油型乳液、微乳液、气溶胶以及含有离子型脂类和/或非离子型脂类的泡状分散液的形式。这些盖仑形式是按照相关领域中常用的方法制备的。
活性成分还可以任选与一种或几种支持体或添加剂，或者与聚合物基质或与环化糊精一起配合成微胶囊的形式(透皮贴剂，具有延续释放的形式)。
按照本发明局部给药的组合物含有与皮肤相容的介质。它特别具有水溶液、醇溶液或含水醇溶液、凝胶、具有乳脂或凝胶外观的油包水型或水包油型乳液、微乳液、气溶胶以及含有离子型脂类和/或非离子型脂类的泡状分散液的形式。这些盖仑形式是按照相关领域中常用的方法制备的。
下面给出非限定性的例子，说明按照本发明化合物的制备方法。
在下文中使用的缩写词是Ac＝乙酰基All＝烯丙基Bn＝苄基Me＝甲基Ph＝苯基PMB＝(4-甲氧基)苄基PMBBr＝(3-溴-4-甲氧基)苄基Z＝苯甲酰氧羰基CCM＝薄层色谱下面的实施例说明按照本发明的化合物的制备方法，但对其没有限制。在实施这些不同的实施例的制备方法之前，在下面先叙述在得到本发明化合物或在其它的制备当中使用的化合物的制备方法(制备例)。
对于下面的制备例和实施例，使用了如下的实验方法方法1在酸中进行伯醇氧化，然后转化为苄酯在待氧化的化合物(1mol eq.)在四氢呋喃(THF)溶液中(3.5L/mol)加入TEMPO(0.02mol eq.)和碳酸氢钠饱和水溶液(4L/mol)。在冷却到0℃之后，在20min内滴加Bromodan(2mol eq.)。在磁力搅拌3h之后，浓缩反应混合物，并重复汽化二甲基甲酰胺(DMF)(4.95L/mol)使残渣干燥。将如此得到的粗化合物原样用于下面的步骤中。
在环境温度下，用苄基溴(10mol eq.)和碳酸氢钾(5mol eq.)处理前面的化合物在二甲基甲酰胺中的溶液(13.1L/mol)(1～15h)。浓缩反应混合物，然后将残渣溶解于乙酸乙酯(35L/mol)中，用水洗涤，用硫酸钠干燥并浓缩。柱色谱给出是所需的苄酯。
方法2由三氟乙酸叔丁基二甲基甲硅烷基酯催化的与亚氨酸酯偶合在-20℃和在氩气下，在4的分子筛存在下，向亚氨酸酯和糖基受体在二氯甲烷/乙醚混合物中的溶液里加入三氟乙酸叔丁基二甲基甲硅烷基酯溶液(0.1M，每mol亚氨酸酯0.15mol)。在10～45min之后(CCM)，加入固体碳酸氢钠。过滤溶液，用水洗涤并干燥，蒸发至干。
方法3酯皂化的方法在-5℃下，在待皂化化合物在四氢呋喃的溶液(160L/mol)中相继加入30％的双氧水(H2O2)(7.16L/mol)和0.7N的氢氧化锂水溶液(每mol酯加入2.3mol)。在-5℃下搅拌1h之后，在0℃温度下放置反应介质4h，然后在环境温度下搅拌直至酯被消耗掉。此时任选在LH-20的柱子上提纯反应粗产物。
方法4磺化在待磺化(sulfater)化合物在二甲基甲酰胺中的溶液里(90L/mol)加入三乙胺/三氧化硫络合物(每个羟基5mol)。在55℃下12～22h之后，在0℃下加入甲醇或碳酸氢钠水溶液，在环境温度下搅拌0.5～24h之后，借助于LH-20柱子或两根Sephadex-25柱子(用0.2M的氯化钠水溶液，然后用水洗脱)提纯反应介质。在真空下浓缩含有产物的级分，得到所需化合物。
方法5苄基醚和/或苄基酯氢解在氢气气氛下(3～15bar)，在5％或10％的碳载钯(相当于0.7～3倍化合物的质量)存在下，将该化合物在冰醋酸/水/叔丁醇混合物中的溶液搅拌6～16h(CCM)。过滤以后使溶液在SephadexG-25柱子顶部沉积，用0.2M的氯化钠洗脱。浓缩含有产物的级分，使用同样的柱子用水洗脱进行脱盐。在冻干之后得到最终化合物。
下面叙述用来得到按照本发明化合物的制备例。
制备例1合成5-(苯甲氧基)-4-羟基哌啶-1，3-二羧酸二苄酯(3S，4R，5R)(6#化合物) 步骤1.a制备1-苄基-3-(苯甲氧基)-5-(羟甲基)-哌啶-4-醇(3R，4R，5R)(2#化合物)在T.M.Jespersen和M.Bols，Tetrahedron(1994)50(47)，13449-13460和在美国专利5,844,102中叙述了化合物1的合成方法。在WO98/50359中叙述了化合物2的合成方法。
在化合物1(10.8g，42.8mmol)在甲醇(590mL)的溶液中相继加入氰基硼氢化钠(5.38g，2mol eq.)，然后在-10℃加入醋酸(7.4mL，3mol eq.)和苄胺(5.1mL，1.1eq.)在甲醇(100mL)中的溶液。在恢复到环境温度之后，在2h内将反应混合物升温到50℃。在恢复到环境温度之后，添加2％的(85mL)碳酸氢钠溶液。在真空下浓缩掉甲醇，然后用二氯甲烷稀释残渣，用水洗涤有机相，然后用氯化钠水溶液洗涤，用硫酸钠干燥，然后在真空下浓缩。不经提纯将残余物直接用于下面的步骤中。
步骤1.b制备[4-(乙酰氧基)-1-苄基-5-(苯甲氧基)-3-基]乙酸甲酯(3R，4R，5R)(3#化合物)
在0℃和在氩气下，在步骤1.a中得到的粗化合物2(10.8g)在二氯甲烷(345mL)中的溶液里相继加入三乙胺(13.5mL，2.25mol eq)、4-(二甲基氨基)吡啶(DMAP)(7.84g，1.5mol eq)和醋酸酐(61mL，15mol eq)。在10min中将温度维持在0℃，然后在环境温度下放置反应介质16h。在真空下浓缩反应混合物，在二氧化硅凝胶上提纯残渣，得到化合物3(7.65g，43％，两步)。
RMN1H(CDCl3)δ7.36-7.18(m，10H，Ar)，4.60-4.42(dd，2H，OCH2Ph)，2.02，1.99(2s，6H，2CH3CO)。
步骤1.c制备4-(乙酰氧基)-3-(乙酰氧基甲基)-5-(苯甲氧基)哌啶-1-羧酸苄基酯(3R，4R，5R)(4#化合物)在氩气和-10℃下，在步骤1.b中得到的化合物3(2.31g，5.6mmol)在四氢呋喃(28mL)中的溶液里加入苯甲酰氧羰基氯(2.4mL，3moleq)，然后在环境温度下搅拌反应介质18h。在真空下浓缩反应混合物，用二氧化硅凝胶提纯残渣(1∶9乙醚-二异丙基醚洗脱)，得到化合物4(2.14g，84％)。
质谱(ESI)m/z 478.3[(M+Na)+]。
步骤1.d制备3-(苯甲氧基)-4-羟基-5-(羟甲基)哌啶-1-羧酸苄酯(3R，4R，5R)(5#化合物)在0℃下，在步骤1.c中得到的化合物4(1.9g，4.2mmol)在二烷(25mL)中的溶液里加入0.84M的一水合氢氧化锂溶液(25mL，5mol eq)。在0℃下保持反应介质5min，然后在环境温度下放置30min。在用盐酸(HCl，3N)中和后，在二氯甲烷中稀释反应介质，用水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。在二氧化硅凝胶上提纯残渣(3∶1的乙酸乙酯-环己烷洗脱)，得到化合物5(1.59g，90％)。
质谱(ESI)m/z 394.4[(M+Na)+]。
步骤1.e制备5-(苯甲氧基)-4-羟基哌啶-1，3-二羧酸二苄酯(3S，4R，5R)(6#化合物)按照方法1处理在步骤1.d中得到的化合物5(3.18g，8.6mmol)，得到化合物6(2.92g，71％)。
质谱(ESI)m/z 476.5[(M+Na)+]制备例2合成(2，4-二-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α，β-D-吡喃葡糖三氯乙酰亚氨酸酯)(11#化合物) 步骤2.a制备(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(1，6-脱水-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-β-D-吡喃葡糖)(8#化合物)按照方法1处理与在Y.Ichikawa等人，Tetrohedron Lett.(1986)27(5)611-614中所述的2’-O-苯甲酰基化合物同样的方法制备的呈2’-O-乙酰基形式的化合物7，在二氧化硅凝胶上提纯之后(用3∶7的乙酸乙酯-环己烷洗脱)得到化合物8(16.4g，77％)。
质谱(ESI)m/z 698.3[(M+Na)+]步骤2.b制备(2，4-二-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(1，6-二-O-乙酰基-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α，β-D-吡喃葡糖)(9#化合物)在0℃下，在步骤2.a中得到的化合物8(3.74g，5.54mmol)在醋酸酐(52mL，100mol eq)中的溶液里加入三氟乙酸(TFA)(4.7mL，1.1mol eq)。在恢复到环境温度之后，搅拌反应混合物16h，然后浓缩，与甲苯一起蒸发，在二氧化硅凝胶上提纯(用4∶1的甲苯-乙酸乙酯洗脱)，得到化合物9(4.33g，95％)。
质谱(ESI)m/z 842.2[(M+Na)+]步骤2.c制备(2，4-二-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)(6-O-乙酰基-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α，β-D-吡喃葡糖)(10#化合物)在0℃下，在步骤2.b中得到的化合物9(4.3g，5.24mmol)在乙醚(210mL)中的溶液里加入苄胺(BnNH2)(22mL，38mol eq)。在环境温度下搅拌4.5h之后，用1N的HCl酸化介质，然后用乙酸乙酯萃取，用硫酸钠干燥，浓缩并在二氧化硅凝胶上提纯(用35∶65的乙酸乙酯-环己烷洗脱)，得到化合物10(3.4g，83％)。
质谱(ESI)m/z 800.2[(M+Na)+]步骤2.d制备(2，4-二-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α，β-D-吡喃葡糖三氯乙酰亚胺酸酯)(11#化合物)在氩气下，在步骤2.c中得到的化合物10(3.38g，4.35mmol)在二氯甲烷(82mL)中的溶液里加入碳酸铯(Cs2CO3)(2.26g，1.6moleq)，然后加入三氯乙睛(CCl3CN)(1.74mL，5.0mol eq)。在搅拌1.5h之后，过滤反应混合物，然后进行浓缩。在二氧化硅凝胶上提纯残渣(用3∶7的乙酸乙酯-环己烷洗脱)，得到化合物11(2.96g，74％)。
RMN1H(CDCl3)δ6.43(d，H-1αGlcI)，5.64(d，H-1βGlcI)，5.17(d，IdoUAII)。
制备例3合成(3-O-苄基-2，4-二-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-乙酰胺基-3-O-苄基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-O-苄基-2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-乙酰胺基-3-O-苄基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1-羧酸苄酯-3-羧酸钠(3S，4R，5R)(19#化合物)
步骤3.a制备(2，4-二O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(1，6-脱水-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-β-D-吡喃葡糖)(12#化合物)按照方法2处理在步骤2.d中得到的化合物11(455mg，0.50mmol)和在步骤2.a中得到的化合物8(675mg，1mmol)，在提纯之后提供化合物12(385mg，54％)。
质谱(ESI)m/z 1457.6[(M+Na)+]。
步骤3.b制备(2，4-二-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(1，6-二-O-乙酰基-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α，β-D-吡喃葡糖)(13#化合物)如合成化合物9(步骤2.b)处理在步骤3.a中得到的化合物12(365mg，0.254mmol)，在二氧化硅凝胶上提纯(用1∶1的乙醚-二异丙基醚洗脱)之后得到化合物13(376mg，97％)。
质谱(ESI)m/z 1560.7[(M+Na)+]步骤3.c制备(2，4-二-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α，β-D-吡喃葡糖)(14#化合物)如合成化合物10(步骤2.c)处理在步骤3.b中得到的化合物13(364mg，0.237mmol)，在二氧化硅凝胶上提纯(用7∶3的乙醚-二异丙基醚洗脱)之后得到化合物14(310mg，87％)。
质谱(ESI)m/z 1518.8[(M+Na)+]。
步骤3.d合成(2，4-二-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α，β-D-吡喃葡糖三氯乙酰亚氨酸酯(15#化合物)如合成化合物11(步骤2.d)处理在步骤3.c中得到的化合物14(279mg，0.187mmol)，在二氧化硅凝胶上提纯(用1∶1的乙醚-二异丙基醚洗脱)之后得到化合物15(230mg，75％)。
质谱(ESI)m/z 1660.6[(M+Na)+]。
步骤3.e合成(2，4-二-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1，3-二羧酸二苄酯(3S，4R，5R))(16#化合物)按照方法2处理在步骤3.d中得到的化合物15(217mg，0.133mmol)和在步骤1.e中得到的化合物6(126mg，0.264mmol)，在提纯之后得到化合物16(168mg，66％)。
质谱(ESI)m/z 1976.0[(M+Na)+]。
步骤3.f合成(2，4-二-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-乙酰胺基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-乙酰胺基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1，3-二羧酸二苄酯(3S，4R，5R))(17#化合物)将在步骤3.e中得到的化合物16(138.5mg，70.9μmol)溶解于吡啶(1.16mL)中，然后在0℃下加入硫代乙酸(1.14mL，225mol eq)。在环境温度下搅拌反应介质14h，然后浓缩并在二氧化硅凝胶上提纯(用3∶2的环己烷-乙酸乙酯洗脱)，得到化合物17(118mg，84％)。
质谱(ESI)m/z 2007.7[(M+Na)+]。
步骤3.g合成(3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸)-(1-4)-(2-乙酰胺基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸)-(1-4)-(2-乙酰胺基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-3-羧酸-1-羧酸苄酯(3S，4R，5R))(18#化合物)
按照方法3处理在步骤3.f中得到的化合物17(101mg，50.9μmol)，然后用6N的盐酸酸化反应介质(pH值等于1)，用二氯甲烷萃取。用5％的亚硫酸钠(Na2SO3)洗涤有机相，然后用水洗涤。在干燥之后过滤并浓缩，粗的残渣被用于下一步。
质谱(ESI)m/z 1505.6[(M+H)+]。
步骤3.h合成(3-O-苄基-2，4-二-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-乙酰胺基-3-O-苄基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-O-苄基-2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-乙酰胺基-3-O-苄基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-3-羧酸苄酯-3-羧酸钠(3S，4R，5R))(19#化合物)按照方法4处理在步骤3.g中得到的粗化合物18，提供化合物19(50mg，54％(两步))。
质谱(ESI)m/z 2014[(M-3Na+3H)-]。
制备例4合成(3-O-苄基-2，4-二-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(3-O-苄基-2-脱氧-2-N-磺酸钠基-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-O-苄基-2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(3-O-苄基-2-脱氧-2-N-磺酸钠基-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1-羧酸苄酯-3-羧酸钠(3S，4R，5R))(26#化合物)
步骤4.a制备(3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸)-(1-4)-(2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸)-(1-4)-(2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1-羧酸苄酯-3-羧酸钠(3S，4R，5R))(24#化合物)按照方法3处理在步骤3.e中得到的化合物16(175mg，89.6μmol)，然后用6N盐酸酸化反应介质(pH值2)。此时在SephadexLH-20柱子上提纯混合物(用1∶1二氯甲烷-乙醇洗脱)，得到化合物24(100mg，76％)。
质谱(ESI)m/z 1474.1[(M+H)+]。
步骤4.b制备(3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸)-(1-4)-(2-氨基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸)-(1-4)-(2-氨基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1-羧酸苄酯-3-羧酸(3S，4R，5R))(25#化合物)在步骤4.a中得到的化合物24(35mg)在1∶1甲醇-四氢呋喃混合物(1mL)的溶液里加入10％的按照在H.Sajiki等人，J.Org.Chem.(1998)，卷63，p.7990-7992)中所述方法制备的Pd/C/乙二胺络合物(107mg)。此时在氢气压力下(3bar)和在环境温度下放置此介质16h。在过滤和浓缩之后，在同样的条件下使粗反应物进行反应，然后在二氧化硅凝胶上提纯(用6∶2∶0.6∶1的乙酸乙酯-吡啶-醋酸-水洗脱)，得到化合物25(12mg，44％)。
质谱(ESI)m/z 1421.4[(M+H)+]。
步骤4.c制备(3-O-苄基-2，4-二-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(3-O-苄基-2-脱氧-2-N-磺酸钠基-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-O-苄基-2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(3-O-苄基-2-脱氧-2-N-磺酸钠基-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1-羧酸苄酯-3-羧酸钠(3S，4R，5R))(26#化合物)按照方法4处理在步骤4.b中得到的化合物25(8.5mg，5.98μmol)，得到化合物26(7mg，56％)。
质谱(ESI)m/z 2133.8[(M-H)-]。
制备例5合成(2-O-乙酰基-4-O-乙酰丙酰基-3-O-甲基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-O-(3-溴-4-甲氧基)苄基-3-O-甲基-α，β-D-吡喃葡糖三氯乙酰亚氨酸酯)(40#化合物)
步骤5.a制备1，6-脱水-4-O-(四氢呋喃-2-基)-2-O-(4-甲氧基)苄基-β-D-吡喃葡糖(29#化合物)在40℃下，在化合物28(41g，180mmol)(按照H.Paulsen和W.Stenzel，Chem.Ber.(1978)111，2348-57制备)在对甲氧基苄醇(25mL，1.1mol eq)中的溶液里加入钠(1.37g，0.33mol eq)。然后在20min将反应混合物升温到110℃，然后加入0℃的甲醇(20mL)在环境温度下保持搅拌16h。在浓缩之后，在二氧化硅凝胶上提纯(用3∶7的乙酸乙酯-二异丙基醚洗脱)，得到化合物29(20.1g，31％)。
质谱(ESI)m/z 384.2[(M+Na)+]。
步骤5.b制备1，6-脱水-4-O-(四氢呋喃-2-基)-2-O-(4-甲氧基)苄基-3-O-甲基-β-D-吡喃葡糖(30#化合物)在0℃和在氩气气氛下，在步骤5.a中得到的化合物29(13.1g，35.8mmol)在二甲基甲酰胺(107mL)中的溶液里相继加入甲基碘(2.67mL)和氢化钠(2.68g)。在恢复到环境温度之后，将反应混合物搅拌16h，然后加入0℃的甲醇，用乙酸乙酯萃取介质，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到化合物30将其直接用于下一步。
质谱(ESI)m/z 403.3[(M+Na)+]。
步骤5.c制备1，6-脱水-2-O-(4-甲氧基)苄基-3-O-甲基-β-D-吡喃葡糖(31#化合物)在步骤5.b中得到的粗化合物30在甲醇(143mL)中的溶液里加入0.25M的樟脑磺酸(CSA)甲醇溶液(1mol eq)。在磁性搅拌30min之后，用二氯甲烷稀释介质，然后用水和用2％的碳酸氢钠水溶液洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。在二氧化硅凝胶上提纯(用3∶7的乙酸乙酯-环己烷洗脱)得到化合物31(9.0g，85％)。
质谱(ESI)m/z 319.1[(M+Na)+]。
步骤5.d制备乙基2-O-乙酰基-4，6-O-亚异丙基-3-O-甲基-1-硫代-α，β-L-艾杜吡喃糖苷(33#化合物)在0℃下和在氩气气氛下，在粗化合物32(1.99g，7.1mmol)(按照P.Duchaussoy等人，Carbohydr.Res.(1999)，317，63-84制备)在二氯甲烷中的溶液里相继加入三乙胺(2.2mL)、DMAP(173mg)和醋酸酐(1.34mL)。保持0℃的温度下10min，然后在环境温度下放置反应介质16h。此时反应混合物真空浓缩，在二氧化硅凝胶上提纯残渣(用1∶1的乙醚-环己烷洗脱)提供出化合物33(2.1g，92％)。
质谱(ESI)m/z 343.3[(M+Na)+]。
步骤5.e制备(2-O-乙酰基-4，6-O-亚异丙基-3-O-甲基-α-L-艾杜吡喃糖基)-(1-4)-(1，6-脱水-2-O-(4-甲氧基)苄基-3-O-甲基-β-D-吡喃葡糖)(34α#化合物)和(2-O-乙酰基-4，6-O-亚异丙基-3-O-甲基-β-L-艾杜吡喃糖基)-(1-4)-(1，6-脱水-2-O-(4-甲氧基)苄基-3-O-甲基-α-D-吡喃葡糖)(34β#化合物)在-20℃下，在氩气气氛下，在4分子筛(2.89g)存在下向在步骤5.d中得到的化合物33(1.86g，5.79mmol)和在步骤5.c中得到的化合物31(1.46g，4.94mmol)在甲苯中的混合物中加入N-碘琥珀酰胺(1.38g)和三氟甲磺酸(63.5μL)在1∶1的二氯甲烷-二烷混合物(16.5mL)中的溶液。在搅拌45min之后，在反应介质中加入固体碳酸氢钠，在过滤之后，用二氯甲烷稀释此混合物，用10％的硫代硫酸钠(Na2S2O3)水溶液和饱和氯化钠水溶液洗涤。在干燥和浓缩之后，将残渣直接用于下一步。
质谱(ESI)m/z 577.4[(M+Na)+]。
步骤5.f制备(2-O-乙酰基-3-O-甲基-α-L-艾杜吡喃糖基)-(1-4)-(1，6-脱水-2-O-(4-甲氧基)苄基-3-O-甲基-β-D-吡喃葡糖)(35α#化合物)和(2-O-乙酰基-3-O-甲基-β-α-L-艾杜吡喃糖基)-(1-4)-(1，6-脱水-2-O-(4-甲氧基)苄基-3-O-甲基-α-D-吡喃葡糖)(35β#化合物)向在步骤5.e中得到的化合物34α和化合物34β的混合物在1，2-二氯乙烷(12mL)中的溶液里加入70％的醋酸(55mL)。在60温度下加热此混合物50min，然后在真空下浓缩，并在二氧化硅凝胶上提纯得到的残渣(用3∶2的甲苯-丙酮洗脱)得到化合物35α(1.56g，61％，两步)和化合物35β(0.36g，14％，两步)。
质谱(ESI)m/z 537.5[(M+Na)+]。
步骤5.g制备(2-O-乙酰基-3-O-甲基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(1，6-脱水-2-O-(3-溴-4-甲氧基)苄基-3-O-甲基-β-D-吡喃葡糖)(36#化合物)按照方法1处理在步骤5.f中得到的化合物35α(0.975g，1.89mmol)，在二氧化硅凝胶上提纯(用1∶1的乙酸乙酯-环己烷洗脱)之后，得到化合物36(1.09g，83％)RMN1H(CDCl3)δ7.54-6.86(m，8H，Ar)。
步骤5.h制备(2-O-乙酰基-4-O-乙酰丙酰基-3-O-甲基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(1，6-脱水-2-O-(3-溴-4-甲氧基)苄基-3-O-甲基-β-D-吡喃葡糖)(37#化合物)在氩气气氛下，向在步骤5.g中得到的化合物36(1.09g，1.56mmol)在二烷(35mL)中的溶液里相继加入DMAP(43mg，0.2mol eq)、1-(3-二甲基氨丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(EDCl)(0.675g，2mol eq)和乙酰丙酸(0.361mL，2mol eq)，在搅拌16h之后，相继用10％的硫酸氢钾溶液、水、2％的碳酸氢钠溶液进行洗涤反应混合物，然后用硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到残渣，将其在二氧化硅凝胶上提纯(用2∶3的乙酸乙酯-二氯甲烷洗脱)，得到化合物37(1.07g，86％)。
质谱(ESI)m/z 819.4[(M+Na)+]。
步骤5.i制备(2-O-乙酰基-4-乙酰丙酰基-3-O-甲基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(1，6-二-O-乙酰基-2-O-(3-溴-4-甲氧基)苄基-3-O-甲基-α，β-D-吡喃葡糖)(38#化合物)如合成化合物9(步骤2.b)处理在步骤5.h中得到的化合物37(1.07g，1.34mmol)，在二氧化硅凝胶上提纯(用2∶3的乙酸乙酯-二氯甲烷洗脱)之后，得到化合物38(1.04g，87％)。
质谱(ESI)m/z 921.4[(M+Na)+]。
步骤5.j制备(2-O-乙酰基-4-乙酰丙酰基-3-O-甲基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-O-(3-溴-4-甲氧基)苄基-3-O-甲基-α，β-D-吡喃葡糖)(39#化合物)如合成化合物10(步骤2.c)处理在步骤5.i中得到的化合物38(1.04g，1.16mmol)，在二氧化硅凝胶上提纯(用1∶1的乙酸乙酯-二氯甲烷洗脱)之后，得到化合物39(740mg，74％)。
质谱(ESI)m/z 877.3[(M+Na)+]。
步骤5.k制备(2-O-乙酰基-4-O-乙酰丙酰基-3-O-甲基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-O-(3-溴-4-甲氧基)苄基-3-O-甲基-α，β-D-吡喃葡糖三氯乙酰亚氨酸酯)(40#化合物)如合成化合物11处理在步骤5.j中得到的化合物39(740mg，860μmol)，在二氧化硅凝胶上提纯(用3∶7的乙酸乙酯-二氯甲烷洗脱)之后，得到化合物40(714g，83％)。
RMN1H(CDCl3)δ6.39(d，H-1αGlcI)，5.76(d，H-1βGlcII)。
制备例6合成(3-O-甲基-2，4-二-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(3-O-甲基-2，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-O-甲基-2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(3-O-甲基-2，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1-羧酸苄酯-3-羧酸钠(3R，4R，5R))(46#化合物) 步骤6.a制备(2-O-乙酰基-4-O-乙酰丙酰基-3-O-甲基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-O-(3-溴-4-甲氧基)苄基-3-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1，3-二羧酸二苄酯(3S，4R，5R))(41#化合物)
按照方法2处理在步骤5.k中得到的化合物40(94mg，0.094mmol，1.0mol eq)和在步骤1.e中得到的化合物6(111mg，0.234mmol，2.5moleq)的混合物，在SephadexLH-20柱子，然后在二氧化硅凝胶上提纯(用9∶1的二氯甲烷-乙酸乙酯洗脱)之后，得到化合物41(62mg，50％)。
质谱(ESI)m/z 1336.5[(M+Na)+]。
步骤6.b制备(2-O-乙酰基-3-O-甲基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-O-(3-溴-4-甲氧基)苄基-3-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1，3-二羧酸二苄酯(3S，4R，5R))(42#化合物)向在步骤6.a中得到的化合物41(60mg，45.7μmol)在1∶2的甲苯/乙醇混合物(9mL)中的溶液里加入乙酸肼(21mg，10mol eq)。在磁性搅拌3h之后，在真空下浓缩该混合物并用二氯甲烷稀释残渣，用2％的碳酸氢钠水溶液和水洗涤，用硫酸钠干燥有机相，过滤然后浓缩。在二氧化硅凝胶上提纯残渣(用3∶2的乙酸乙酯-环己烷洗脱)，得到化合物42(48mg，88％)。
质谱(ESI)m/z 1238.5[(M+Na)+]。
步骤6.c制备(2-O-乙酰基-4-O-乙酰丙酰基-3-O-甲基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-O-(3-溴-4-甲氧基)苄基-3-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-乙酰基-3-O-甲基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-O-(3-溴-4-甲氧基)苄基-3-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1，3-二羧酸二苄酯(3S，4R，5R))(43#化合物)按照方法2处理在步骤5.k中得到的化合物40(197.7mg，197.7μmol，1.14mol eq)和在步骤6.b中得到的化合物42(210.5mg，173.2μmol，1.0mol eq)，在SephadexLH-20柱子和在二氧化硅凝胶上提纯(用1∶1的甲苯-丙酮洗脱)之后得到化合物43(176mg，50％)。
质谱(ESI)m/z 2075.0[(M+Na)+]。
步骤6.d制备(2-O-乙酰基-4-O-乙酰丙酰基-3-O-甲基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-3-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-乙酰基-3-甲基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-3-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1，3-二羧酸二苄酯(3S，4R，5R))(44#化合物)在0℃下和在氩气气氛下向在步骤6.c中得到的化合物43(69mg，33.6μmol)在乙睛(3mL)中的溶液里加入四氯化锆(ZrCl4)(39mg，5mol eq)。在环境温度下搅拌45min之后，在真空下浓缩该混合物，用乙酸乙酯稀释残渣，用水洗涤，在干燥之后过滤和浓缩，在二氧化硅凝胶上提纯残渣(用3∶7的丙酮-甲苯洗脱)，得到化合物44(52mg，89％)。
质谱(ESI)m/z 1676.7[(M+Na)+]。
步骤6.e制备(3-O-甲基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸)-(1-4)-(3-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-O-甲基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸)-(1-4)-(3-O-甲基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1-羧酸苄酯-3-羧酸(3S，4R，5R))(45#化合物)按照方法3处理在步骤6.d中得到的化合物44(18mg，11μmol)，在提纯之后得到化合物45(5.8mg，47％)，其羧酸基团可部分酯化。
质谱(ESI)m/z 1118.4[(M+H)+]。
步骤6.f制备(3-O-甲基-2，4-二-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(3-O-甲基-2，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-O-甲基-2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(3-O-甲基-2，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1-羧酸苄酯-3-羧酸钠(3R，4R，5R))(46#化合物)按照方法4处理在步骤6.e中得到的化合物45(7mg，6.26μmol)，在提纯之后得到化合物46(10mg，77％)，其羧酸基团可部分酯化。
质谱(ESI)m/z 1897.0[(M+Na-H)+]。
制备例7合成(2-O-乙酰基-4-O-乙酰丙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-O-(4-甲氧基)苄基-3-O-苄基α，β-D-吡喃葡糖)三氯乙酰亚氨酸酯(57#化合物) 步骤7.a制备1，6-脱水-4-O-(四氢呋喃-2-基)-2-O-(4-甲氧基)苄基-3-O-苄基-β-D-吡喃葡糖(48#化合物)在0℃下向在步骤5.a中得到的化合物29(19.96g，54.5mmol)在DMF(300mL)中的溶液里加入苄基溴(5.1mL)，然后加入氢化钠(4.6g)。在添加结束时，在环境温度下放置该混合物16h，然后在0℃下加入甲醇(18mL)，在环境温度下搅拌1h之后，用乙酸乙酯(600mL)稀释该介质，用水洗涤(300mL)，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。在快速色谱上提纯残渣(用5∶95的乙酸乙酯-二异丙基醚洗脱)，得到化合物48(20.6g，83％)。
质谱(ESI)m/z 479.3[(M+Na)+]。
步骤7.b制备1，6-脱水-2-O-(4-甲氧基)苄基-3-O-苄基-β-D-吡喃葡糖(49#化合物)如合成化合物31(步骤5.c)那样处理在步骤7.a中得到的化合物48(20.6g，45.2mmol)，在二氧化硅凝胶上提纯(用3∶7的乙酸乙酯-环己烷洗脱)之后，得到化合物49(14.4g，86％)。
质谱(ESI)m/z 395.4[(M+Na)+]。
步骤7.c制备(2-O-乙酰基-4，6-亚异丙基-3-O-苄基-α，β-L-吡喃葡糖基)-(1-4)-(1，6-脱水-2-O-(4-甲氧基)苄基-3-O-苄基-β-D-吡喃葡糖)(51#化合物)如在合成化合物34(步骤5.e)中使化合物50(按照C.Tabeur等人对于2-O-苯甲氧基衍生物在Carbohydr.Res.(1996)，281，253-276中所述的方法制备)(16.91g，42.6mmol)和化合物49(14.44g，38.8mmol)反应，在二氧化硅上提纯(用15∶85的乙酸乙酯-二异丙基醚洗脱)之后，得到化合物51(17.05g，62％，56％的α-L)。
质谱(ESI)m/z 729.3[(M+Na)+]。
步骤7.d制备(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-吡喃葡糖基)-(1-4)-(1，6-脱水-2-O-(4-甲氧基)苄基-3-O-苄基-β-D-吡喃葡糖)(52#化合物)如对化合物35(步骤5.f)那样处理在步骤5.c中得到的化合物51(12.38g，17.51mmol)，在二氧化硅上提纯(用4∶1的甲苯-丙酮洗脱)之后，得到化合物52(10.85g，93％)。
质谱(ESI)m/z 689.3[(M+Na)+]。
步骤7.e制备(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(1，6-脱水-2-O-(4-甲氧基)苄基-3-O-苄基-β-D-吡喃葡糖)(53#化合物)按照方法1处理在步骤7.d中得到的化合物52(10.85g，16.27mmol)，在二氧化硅上提纯(用3∶7的丙酮-环己烷洗脱)之后，得到化合物53(8.44g，61％)。
质谱(ESI)m/z 793.3[(M+Na)+]。
步骤7.f制备(2-O-乙酰基-3-O-苄基-4-O-乙酰丙酰基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(1，6-脱水-2-O-(4-甲氧基)苄基-3-O-苄基-β-D-吡喃葡糖)(54#化合物)如合成化合物37(步骤5.h)那样处理化合物53(3.2g，3.77mmol)，在二氧化硅上提纯(用1∶4的丙酮-甲苯洗脱)之后，得到化合物54(3.17g，89％)。
质谱(ESI)m/z 891.3[(M+Na)+]。
步骤7.g制备(2-O-乙酰基-4-O-乙酰丙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(1，6-二-O-乙酰基-2-O-(4-甲氧基)苄基-3-O-苄基-α，β-D-吡喃葡糖)(55#化合物)如合成化合物9，但是在0℃经过1h那样，处理在步骤7.f中得到的化合物54(1.45g，1.53mmol)，在二氧化硅上提纯(用85∶15的甲苯-丙酮洗脱)之后，得到化合物55(1.25g，78％)。
质谱(ESI)m/z 993.3[(M+Na)+]。
步骤7.h制备(2-O-乙酰基-4-O-乙酰丙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-O-(4-甲氧基)苄基-3-O-苄基-α，β-D-吡喃葡糖)(56#化合物)如合成化合物10(步骤2.c)那样处理在步骤7.g中得到的化合物55，在二氧化硅上提纯(用25∶75的乙醚-二氯甲烷洗脱)之后，得到化合物56(429mg，56％)。
质谱(ESI)m/z 951.3[(M+Na)+]。
步骤7.i制备(2-O-乙酰基-4-O-乙酰丙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-O-(4-甲氧基)苄基-3-苄基α，β-D-吡喃葡糖)三氯乙酰亚氨酸酯(57#化合物)如对合成化合物11(步骤2.d)那样处理在步骤7.h中得到的化合物56(429mg，426μmol)，在二氧化硅上提纯(用1∶1的乙酸乙酯-环己烷洗脱)之后，得到衍生物57(396mg，80％)。
RMN1H(CDCl3)δ6.45(d，H-1α)，5.89(d，H-1β)。
制备例8制备(2-O-乙酰基-4-O-烯丙基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-O-(4-甲氧基)苄基-3-O-苄基-α，β-D-吡喃葡糖)三氯乙酰亚氨酸酯(62#化合物) 步骤8.a制备(2-O-乙酰基-4-O-烯丙氧羰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(1，6-脱水-2-O-(4-甲氧基)苄基-3-O-苄基-β-D-吡喃葡糖)(58#化合物)在0℃和氩气气氛下，向在步骤7.e中得到的化合物53(0.800g，0.9414mmol)在THF(9.4mL)中的溶液里加入吡啶(759μL，9.41mmol)、DMAP(115mg，0.94mmol)和氯甲酸烯丙酯(995μL，9.41mmol)在THF(2.35mL)中的溶液。保持搅拌过夜，然后用乙酸乙酯稀释反应混合物，用10％的硫酸氢钾、2％的碳酸氢钠和水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。用快速色谱提纯残渣(用1∶9的丙酮-甲苯洗脱)，得到化合物58(0.809g，92％)。
质谱(ESI)m/z 877.3[(M+Na)+]。
步骤8.b制备(2-O-乙酰基-4-O-烯丙基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(1，6-脱水-2-O-(4-甲氧基)苄基-3-O-苄基-β-D-吡喃葡糖)(59#化合物)在氩气气氛下，在步骤8.a中得到的化合物58(0.805g，0.862mmol)在THF(6mL)中的溶液里相继加入二醋酸钯(3.9mg，0.017mmol)和三苯基膦(22.6mg，0.086mmol)。在15min中升温至90℃，然后在真空下浓缩介质，在二氧化硅上提纯(用15∶85的丙酮-甲苯洗脱)，得到化合物59(0.587g，66％)。
质谱(ESI)m/z 833.4[(M+Na)+]。
步骤8.c制备(2-O-乙酰基-4-O-烯丙基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(1，6-二-O-乙酰基-2-O-(4-甲氧基)苄基-3-O-苄基-α，β-D-吡喃葡糖)(60#化合物)如合成化合物55(步骤7.g)那样处理在步骤8.b中得到的化合物59(0.587g，0.660mmol)，在二氧化硅上提纯(用9∶1的丙酮-甲苯洗脱)之后得到化合物60(0.37g，57％)。
质谱(ESI)m/z 936.4[(M+Na)+]。
步骤8.d制备(2-O-乙酰基-4-O-烯丙基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-O-(4-甲氧基)苄基-3-O-苄基-α，β-D-吡喃葡糖)(61#化合物)如合成化合物10(步骤2.c)那样处理在步骤8.c中得到的化合物60，在二氧化硅上提纯(用2∶3的环己烷-丙酮洗脱)之后得到化合物61(240mg，70％)。
质谱(ESI)m/z 893.4[(M+Na)+]。
步骤8.e制备(2-O-乙酰基-4-O-烯丙基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-O-(4-甲氧基)苄基-3-O-苄基-α，β-D-吡喃葡糖)三氯乙酰亚氨酸酯(62#化合物)如合成化合物11(步骤2.d)那样处理在步骤8.d中得到的化合物61(234mg，246μmol)，在二氧化硅上提纯(用86∶14的丙酮-甲苯洗脱)之后得到衍生物62(249mg，93％)。
RMN1H(CDCl3)δ6.40(d，H-1α)，5.81(d，H-1β)。
制备例9和10的合成可示意性地表示如下
制备例9合成(3-O-苄基-2，4-二-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(3-O-苄基-2，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-O-苄基-2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(3-O-苄基-2，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1-羧酸苄酯-3-羧酸钠(3S，4R，5R))(68#化合物)步骤9.a制备(2-O-乙酰基-4-O-乙酰丙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-O-(4-甲氧基)苄基-3-O-苄基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1，3-二羧酸二苄酯(3S，4R，5R))(63#化合物)按照方法2处理在步骤7.i中得到的化合物57(396mg，0.34mmol)和在步骤1.e中得到的化合物6(405mg，0.85mmol)，在提纯之后得到化合物63(369mg，73％)。
RMN1H(CDCl3)δ5.29(d，H-1GlcII)，5.13(d，H-1IdoUAIII)。
步骤9.b制备(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-O-(4-甲氧基)苄基-3-O-苄基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1，3-二羧酸二苄酯(3S，4R，5R))(64#化合物)如合成化合物42(步骤6.b)那样处理在步骤9.a中得到的化合物63(372mg，0.254mmol)，在二氧化硅上提纯(用2∶3的乙酸乙酯-环己烷洗脱)之后，得到化合物64(301mg，87％)。
RMN1H(CDCl3)δ5.29(d，H-1GlcII)，5.10(d，H-1IdoUAIII)，3.97(dd，H-4IdoUAIII)。
步骤9.c制备(2-O-乙酰基-4-O-乙酰丙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-O-(4-甲氧基)苄基-3-O-苄基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-乙酰基-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-O-(4-甲氧基)苄基-3-O-苄基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1，3-二羧酸二苄酯(3S，4R，5R))(65#化合物)按照方法2处理在步骤7.i中得到的化合物57(124mg，0.108mmol)和在步骤9.b中得到的化合物64(150mg，0.110mmol)，在提纯之后得到化合物65(90mg，35％)。
RMN1H(CDCl3)δ5.28(d，H-1GlcII)，5.16(d，H-1IdoUAIII)，5.13(d，H-1IdoUAV)，4.74(d，H-1GlcIV)。
步骤9.d制备(2-O-乙酰基-4-O-乙酰丙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-3-O-苄基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-乙酰基-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-3-O-苄基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1，3-二羧酸二苄酯(3S，4R，5R))(66#化合物)如对合成化合物44(步骤6.d)那样处理在步骤9.c中得到的化合物65(45mg，0.19mmol)，在二氧化硅上提纯(用3∶2的乙酸乙酯-环己烷洗脱)之后，得到化合物66(34mg，91％)。
质谱(ESI)m/z 1982.0[(M+Na)+]。
步骤9.e制备(3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸)-(1-4)-(3-O-苄基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸)-(1-4)-(3-O-苄基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1-羧酸苄酯-3-羧酸(3S，4R，5R))(67#化合物)按照方法3处理在步骤9.d中得到的化合物66(25mg，12.8μmol)。用6N盐酸酸化反应混合物(pH值2)，然后沉积在9∶1的DMF/水混合物平衡过的LH-20柱子(100mL)上。然后浓缩含有产物的级分并用二氧化硅提纯(用7∶3的二氯甲烷-甲醇洗脱)，得到化合物67(10.4mg，59％)，其羧酸基团可部分酯化。
质谱(ESI)m/z 1422.7[(M+H)+]。
步骤9.f制备(3-O-苄基-2，4-二-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(3-O-苄基-2，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-O-苄基-2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(3-O-苄基-2，6-二-O-磺酸钠基-α-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1-羧酸苄酯-3-羧酸钠(3S，4R，5R))(68#化合物)按照方法4处理在步骤9.e中得到的化合物67(10.4mg，9μmol)，得到化合物68，将其直接用于下一步。
制备例10合成(4-O-烯丙基-3-O-苄基-2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(3-O-苄基-2，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-O-苄基-2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(3-O-苄基-2，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1-羧酸苄酯-3-羧酸钠(3S，4R，5R)(73#化合物)步骤10.g制备(2-O-乙酰基-4-O-烯丙基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-O-(4-甲氧基)苄基-3-O-苄基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-O-(4-甲氧基)苄基-3-O-苄基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1，3-二羧酸二苄酯(3S，4R，5R))(70#化合物)按照方法2处理在步骤8.e中得到的化合物62(244mg，0.223mmol)和在步骤9.b中得到的化合物64(138mg，0.101mmol)，在提纯之后得到化合物70(100mg，43％)。
RMN1H(CDCl3)δ5.28(d，H-1GlcII)，5.25(d，H-1IdoUAV)，5.16(d，H-1IdoUAIII)，4.72(d，H-1GIcIV)。
步骤10.h制备(2-O-乙酰基-4-O-烯丙基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-3-O-苄基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-3-O-苄基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1，3-二羧酸二苄酯(3S，4R，5R))(71#化合物)如合成化合物44(步骤6.d)那样处理在步骤10.g中得到的化合物70(92mg，40.0μmol)，在二氧化硅上提纯(用17∶83的丙酮-甲苯洗脱)之后得到化合物71(44mg，59％)。
质谱(ESI)m/z 1924.0[(M+Na)+]。
步骤10.i制备(4-O-烯丙基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸)-(1-4)-(3-O-苄基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸)-(1-4)-(3-O-苄基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1-羧酸苄酯-3-羧酸(3S，4R，5R))(72#化合物)按照方法3处理在步骤10.h中得到的化合物71(41mg，21.6μmol)。将反应混合物沉积在1∶1的二氯甲烷-乙醇混合物中平衡过的LH-20柱子(210mL)上。然后浓缩并在二氧化硅上提纯含有产物的级分得到化合物72(30.3mg，96％)，羧酸基团可被部分酯化。
质谱(ESI)m/z 1462.4[(M+H)+]。
步骤10.j制备(4-O-烯丙基-3-O-苄基-2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(3-O-苄基-2，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-O-苄基-2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(3-O-苄基-2，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1-羧酸苄酯-3-羧酸钠(3S，4R，5R))(73#化合物)按照方法4处理在步骤10.i中得到的化合物72(10.0mg，6.44μmol)得到化合物73，将其直接用于下一步。
制备例11合成甲基(2-N-磺酸钠基-2，4-二脱氧-4-甲酰基-3，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-N-磺酸钠基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖苷)(89#化合物)
步骤11.a制备1，62，3-二-脱水-4-脱氧-4-(丙-1-烯-1-基)-β-D-吡喃甘露糖(76#化合物)在氩气气氛下，向环氧化合物75(1.2g，7.14mmol)(按照AG Kelly和JS Roberts，J.Chem.Soc.，Chem.Commun.，(1980)，卷288制备)在乙醇(56.5mL)中的溶液里加入单水合三氯化铑(202mg，0.15moleq)。在75℃下搅拌1h25之后，将反应介质倒入250mL冰水中，然后搅拌5min，用乙醚萃取产物，用硫酸钠干燥并浓缩。然后在二氧化硅上提纯(用45∶55的二异丙基醚-环己烷洗脱)残渣，将含有化合物76的级分部分浓缩(化合物76是挥发性的)。
RMN1H(CDCl3)δ3.42(dd，H-2)，3.00(dd，H-3)，2.64(dd，H-4)。
步骤11.b制备1，6-脱水-2-叠氮-2，4-二脱氧-4-(丙-1-烯-1-基)-β-D-吡喃葡糖(77#化合物)将在步骤11.a中得到的化合物76溶解于二甲基甲酰胺-水(40mL，4∶1)的混合物中，然后加入氮化钠(7.0g)，将该混合物回流10.5h。然后用乙酸乙酯萃取反应介质，用水，然后用饱和氯化钠水溶液洗涤，用硫酸钠干燥，浓缩并在二氧化硅凝胶上提纯，得到化合物77(674mg，48％)。
RMN1H(CDCl3)δ5.8-5.6(m，2H，CH＝CH)。
步骤11.c制备1，3，6-三-O-乙酰基-2-叠氮-2，4-二脱氧-4-(丙-1-烯-1-基)-α，β-D-吡喃葡糖(78#化合物)如合成化合物9(步骤2.b)那样处理在步骤11.b中得到的化合物77(3.5g，16.57mmol)，在提纯之后得到化合物78(5.88g，100％)。
质谱(ESI)m/z 378[(M+Na)+]。
步骤11.d制备3，6-二-O-乙酰基-2-叠氮-2，4-二脱氧-4-(丙-1-烯-1-基)-α，β-D-吡喃葡糖(79#化合物)在0℃下向在步骤11.c中得到的化合物78(5.88g，16.5mmol)在四氢呋喃(140mL)中的溶液里加入乙醇胺(4.0mL，4mol eq)。在+4℃16h以后，用乙酸乙酯稀释介质，用1N的盐酸酸化，用水洗涤，用硫酸钠干燥，浓缩，在提纯之后得到化合物79(4.66g，90％)。
质谱(ESI)m/z 336[(M+Na)+]。
步骤11.e制备3，6-二-O-乙酰基-2-叠氮-2，4-二脱氧-4-(丙-1-烯-1-基)-α，β-D-吡喃葡糖三氯乙酰亚氨酸酯(80#化合物)在氩气气氛下，向在步骤11.d中得到的化合物79(4.66g，14.9mmol)在二氯甲烷(285mL)中的溶液里加入碳酸钾(3.34g，1.6moleq)，然后加入三氯乙睛(7.6mL，5mol eq)。在磁性搅拌17h以后，过滤反应混合物，在二氧化硅上提纯，得到化合物80(5.65g，83％)。
RMN1H(CDCl3)δ8.77(s，N(异构体α))，5.70(dd，H-3)，2.64(d，H-1β)。
步骤11.f制备甲基(3，6-二-O-乙酰基-2-叠氮-2，4-二脱氧-4-(丙-1-烯-1-基)-α，β-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸甲酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-3-O-苄基-2-苄氧羰基氨基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖苷)(82#化合物)按照方法2使在步骤11.e中得到的化合物80(5.65g，12.3mmol)和化合物81(按照J.C.Jacquinet等人，Carbohydr.Res.130(1084)，221-241制备)(11.54g，1.2mol eq)反应，在提纯之后得到化合物82(9.39g，71％)。
质谱(ESI)m/z 1077.5[(M+H)+]。
步骤11.g制备甲基(3，6-二-O-乙酰基-2-叠氯-2，4-二脱氧-4-(1，2-二羟基丙基)-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸甲酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-3-O-苄基-2-苄氧羰基氨基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖苷)(83#化合物)向在步骤11.f中得到的化合物82(513mg，0.476mmol)在1∶1的四氢呋喃-二氯甲烷混合物(8mL)中的溶液里加入N-甲基吗啉N-氧化物(NMO)(1.11g，20mol eq)和四氧化锇(OsO4)的4％水溶液(8.35mL，1mol eq)。在环境温度下搅拌3天之后加入1∶1的二氯甲烷-水的混合物以及37.5％的亚硫酸氢钠(NaHSO3)，再保持搅拌30min。用二氯甲烷萃取反应混合物，在二氧化硅上提纯，在上述条件下使含有原料的级分反应，直至完全被消耗掉。在提纯之后最终得到化合物83(293mg，66％)。
质谱(ESI)m/z 1111.4[(M+H)+]。
步骤11.h制备甲基(3，6-二-O-乙酰基-2-叠氮-2，4-二脱氧-4-(5-甲基-2-苯基-1，3-二氧戊环-4-基)-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸甲酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-3-O-苄基-2-苄氧羰基氨基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖苷)(84#化合物)在氩气气氛下，向在步骤11.g中得到的化合物83(518mg，0.466mmol)在乙睛中的溶液里加入CSA(21.6mg，0.2mol eq)和亚苄基二甲基乙缩醛(160μL，2.3mol eq)。在搅拌1h30之后，用三乙胺中和介质，浓缩至干，然后在二氧化硅上提纯，得到化合物84(454mg，74％)。
质谱(ESI)m/z 1199.5[(M+H)+]。
步骤11.i制备甲基(2-叠氮-2，4-二脱氧-4-(5-甲基-2-苯基-1，3-二氧戊环-4-基)-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸)-(1-4)-(3-O-苄基-2-苄氧羰基氨基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖苷)(85#化合物)按照方法3处理在步骤11.h中得到的化合物84(215mg，0.18mmol)。在环境温度下磁性搅拌16h以后，用甲醇(12.5mL)稀释介质，然后在0℃下加入4N的碳酸钠(soude)水溶液(11.5mL)。在0℃下搅拌该混合物4h，用6N的盐酸酸化(pH值5)，然后用二氯甲烷萃取，用5％的亚硫酸钠洗涤，最后用饱和氯化钠水溶液洗涤。在干燥和浓缩之后，是二氧化硅上提纯残渣，得到化合物85(157mg，86％)。
质谱(ESI)m/z 1017.3[(M+H)+]。
步骤11.j制备甲基(2-叠氮-2，4-二脱氧-4-(5-甲基-2-苯基-1，3-二氧戊环-4-基)-3，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-O-苄基-2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(3-O-苄基-2-苄氧羰基氨基-2-脱氧-6-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖苷)(86#化合物)按照方法4处理在步骤11.i中得到的化合物85(160mg，0.157mmol)，得到化合物86(215mg，95％)。
质谱(ESI)m/z 689.1[(M+H-3Na)2-]。
步骤11.k制备甲基(2-氨基-2，4-二脱氧-4-(1，2-二羟基丙基)-3，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-氨基-2-脱氧-6-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖苷)(87#化合物)除了醋酸以外，按照方法5处理在步骤11.j中得到的化合物86(210mg，0.145mmol)，得到化合物87(108mg，73％)。如果需要，进行多次反应，直至用质谱检测完全没有苄基的质子。
质谱(ESI)m/z 996.1[(M+H-Na)-]。
步骤11.l制备甲基(2-N-磺酸钠基-2，4-二脱氧-4-(1，2-二羟基丙基)-3，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-N-磺酸钠基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖苷)(88#化合物)在0℃下，向在步骤11.k中得到的化合物87(106mg，0.104mmol)在水(7mL)中的溶液里加入吡啶·SO3络合物(662mg，4.16mmol)，同时用1N的碳酸钠保持pH值为9.3。然后将温度恢复到环境温度，保持pH值9.3搅拌反应介质16h，然后在用0.2M的氯化钠溶液平衡的SephadexG-25柱子上提纯。在合并含有所需产物的级分并浓缩之后，在同样的SephadexG-25的柱子上用水洗脱提纯残渣，得到化合物88(116mg，91％)。
质谱(ESI)m/z 1199.8[(M+H-Na)-]。
步骤11.m制备甲基(2-N-磺酸钠基-2，4-二脱氧-4-甲酰基-3，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-N-磺酸钠基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖苷)(89#化合物)在步骤11.l中得到的化合物88(115mg，94μmol)在水(1.9mL)中的溶液里加入高碘酸钠(22.1mg，1.1mol eq)。在磁性搅拌1h之后，在用水平衡的SephadexG-15凝胶柱子上提纯反应混合物，得到化合物89(107mg，96％)。
制备例12合成(2-乙酰胺基-3，4-二-O-苄基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1-羧酸苄酯-3-羧酸钠(3S，4R，5R)(97#化合物) 步骤12.a制备(6-O-乙酰基-2-叠氮-3，4-二-O-苄基-2-脱氧-6-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1，3-二羧酸二苄酯(3S，4R，5R))(94#化合物)按照方法2处理化合物93(按照R.Verduyn等人，Recl.Trav.Chim.Pays-Bas，109(1990)，12，591)(361mg，0.631mmol)和在步骤1.e中得到的化合物6(200mg，0.421mmol)，在提纯之后得到化合物94(224mg，60％)。
质谱(ESI)m/z 885.4[(M+H)+]。
步骤12.b制备(6-O-乙酰基-2-乙酰胺基-3，4-二-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1，3-二羧酸二苄酯(3S，4R，5R))(95#化合物)如合成化合物17(步骤3.f)那样处理在步骤12.a中得到的化合物94(56.3mg，63.6μmol)，得到化合物95(54.5mg，95％)。
质谱(ESI)m/z 901.2[(M+H)+]。
步骤12.c制备(2-乙酰胺基-3，4-二-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1-羧酸苄酯-3-羧酸(3S，4R，5R))(96#化合物)按照方法3处理在步骤12.b中得到的化合物95(101mg，50.9μmol)，粗残渣用于下一步。
步骤12.d制备(2-乙酰胺基-3，4-二-O-苄基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1-羧酸苄酯-3-羧酸钠(3S，4R，5R))(97#化合物)按照方法4处理在步骤12.c中得到的粗化合物96，得到化合物97(35mg，88％(两步))，羧酸官能团可部分酯化。
质谱(ESI)m/z 847.2[(M-H)-]。
制备例13合成3-(苯甲氧基)-5-[(苯甲氧基)甲基]-4-羟基哌啶-1-羧酸苄酯(3R，4R，5R)(100#化合物) 步骤13.a制备8-(苯甲氧基)-2-苯基四氢-4H-[1，3]二英基[5，4-c]吡啶-6(5H)羧酸苄酯(4aR，8R，8aR)(99#化合物)向化合物5(250mg，0.67mmol)在乙睛(13.4mL)中的溶液里加入樟脑磺酸(31mg，0.2mol eq)，然后加入苯甲醛二甲基乙缩醛(0.23mL，2.3mol eq)。在环境温度下搅拌1h之后，用三乙胺中和反应介质，浓缩并在二氧化硅凝胶上提纯(用15∶85的乙酸乙酯-环己烷洗脱)，得到化合物99(281mg，91％)。
质谱(ESI)m/z 482.2[(M+Na)+]。
步骤13.b制备3-(苯甲氧基)-5-[(苯甲氧基)甲基]-4-羟基哌啶-1-羧酸苄酯(3R，4R，5R)(100#化合物)在0℃和氩气气氛下，向在步骤13.a中得到的化合物99(141mg，0.31mmol)在二氯甲烷(1.2mL)中的溶液里相继加入三乙基硅烷(0.20mL，4mol eq)、三氟乙酸(0.09mL，4mol eq)和三氟乙酸酐(3μL，0.07mol eq)。在0℃下保持温度5min，然后将反应介质在环境温度下放置3.5h。用碳酸氢钠水溶液、水中和反应混合物，用硫酸钠干燥有机相，过滤并在真空下浓缩。在二氧化硅凝胶上提纯残渣，得到化合物100(76mg，54％)。
质谱(ESI)m/z 462.3[(M+H)+]。
制备例14合成(3-O-苄基-2，4-二-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-乙酰胺基-3-O-苄基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-O-苄基-2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-乙酰胺基-3-O-苄基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-(苯甲氧基)-5-[(苯甲氧基)甲基]-4-氧哌啶-1-羧酸苄酯(3R，4R，5R))(104#化合物) 步骤14.a制备(2，4-二-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(3-(苯甲氧基)-5-[(苯甲氧基)甲基]-4-氧哌啶-1-羧酸苄酯(3R，4R，5R))(101#化合物)按照方法2处理化合物15(123mg，0.075mmol)和化合物100(69mg，0.149mmol)，在提纯之后得到化合物101(117mg，80％)。α/β之比为55/45。
质谱(ESI)m/z 1962[(M+Na)+]。
步骤14.b制备(2，4-二-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-乙酰胺基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-乙酰胺基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-(苯甲氧基)-5-[(苯甲氧基)甲基]-4-氧哌啶-1-羧酸苄酯(3R，4R，5R))(102#化合物)将化合物101(117mg，60μmol)溶解于吡啶(1mL)，然后在0℃下加入硫代乙酸(1mL，225mol eq)。在环境温度下搅拌反应介质17h，然后浓缩并在二氧化硅凝胶上提纯(用4∶96的乙醇-甲苯洗脱)，得到化合物102(50mg，42％)。
质谱(ESI)m/z 1971.9[(M+H)+]。
步骤14.c制备3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸-(1-4)-(2-乙酰胺基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸)-(1-4)-(2-乙酰胺基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-(苯甲氧基)-5-[(苯甲氧基)甲基]-4-氧哌啶-1-羧酸苄酯(3R，4R，5R))(103#化合物)按照方法3处理化合物102(50mg，25μmol)得到衍生物103。质谱(ESI)m/z 1581.7[(M+H)+]。
步骤14.d制备(3-O-苄基-2，4-二-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-乙酰胺基-3-O-苄基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-O-苄基-2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-乙酰胺基-3-O-苄基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-(苯甲氧基)-5-[(苯甲氧基)甲基]-4-氧哌啶-1-羧酸苄酯(3R，4R，5R))(104#化合物)按照方法4处理化合物103，得到化合物104(43mg，80％，(两步))。
质谱(ESI)m/z 2134.3[(M-Na)-]。
制备例15合成(2-O-乙酰基-3-O-苄基-4-O-苯基丙基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α，β-D-吡喃葡糖)三氯乙酰亚氨酸苄酯(114#化合物)
步骤15.a制备(4，6-O-亚异丙基-3-O-苄基-2-O-(4-甲氧基)苄基-α-L-吡喃葡糖基)-(1-4)-(1，6-脱水-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-β-D-吡喃葡糖)(106#化合物)在0℃和氩气气氛下，向化合物105(63.2g，111mmol)(按照C.A.A.van Boeckel等人，J.Carbohydrate Chemistry(1985)4(3)，293-321制备)在DMF(455mL)中的溶液里加入NaH(6.93g，1.3mol eq)，然后加入对甲氧基苄基氯(24mL，1.6mol eq)。在磁性搅拌2h之后加入甲醇(9mL)，在真空下浓缩反应介质，用乙酸乙酯稀释粗反应介质，用水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。在二氧化硅上提纯得到的残渣(用15∶85的乙酸乙酯-环己烷洗脱)，得到化合物106。
质谱(ESI)m/z 707.3[(M+NH4)+]。
步骤15.b制备(3-O-苄基-2-O-(4-甲氧基)苄基-α-L-艾杜吡喃糖基)-(1-4)-(1，6-脱水-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-β-D-吡喃葡糖)(107#化合物)将在前面的步骤中得到的化合物106放入80％的醋酸水溶液中。在磁性搅拌15h以后，用冰冷却反应混合物，用二氯甲烷稀释并用碳酸氢钠中和。用硫酸钠干燥有机相，过滤并浓缩。在二氧化硅上提纯(用3∶7的乙酸乙酯-环己烷洗脱)残渣，得到化合物107(63.2g，88％，两步)。
质谱(ESI)m/z 672.3[(M+Na)+]。
步骤15.c制备(3-O-苄基-6-O-叔丁基二甲基甲硅烷基-2-O-(4-甲氧基)苄基-α-L-艾杜吡喃糖基)-(1-4)-(1，6-脱水-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-β-D-吡喃葡糖)(108#化合物)将化合物107(64.2g)溶解于二氯甲烷(200mL)中。在0℃和氩气气氛下，相继加入三乙胺(30.3mL，2.2mol eq)、4-二甲基氨基吡啶(1.21g，0.1mol eq)和叔丁基二甲基甲硅烷氯(17.04g，1.1mol eq)。在磁性搅拌4h之后，再加入10％的叔丁基二甲基甲硅烷氯，在1h之后，用二氯甲烷稀释反应介质，用水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。在二氧化硅上提纯得到的残渣(用15∶85的乙酸乙酯-环己烷洗脱)得到化合物108。
质谱(ESI)m/z 786.3[(M+Na)+]。
步骤15.d制备(3-O-苄基-6-O-叔丁基二甲基甲硅氯基-2-O-(4-甲氧基)苄基-4-O-苯基丙基-α-L-艾杜吡喃糖基)-(1-4)-(1，6-脱水-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-β-D-吡喃葡糖)(109#化合物)在0℃和氩气气氛下，向化合物108在二甲基甲酰胺(485mL)中的溶液里加入苯基丙基溴(74mL，5mol eq)，然后加入NaH(7g，1.5moleq)。在磁性搅拌5.5h之后加入甲醇(50mL)，在真空下浓缩反应介质，用乙酸乙酯稀释粗反应物，用水洗涤和用硫酸钠干燥，过滤并浓缩。在二氧化硅上提纯得到的残渣(用15∶85的乙酸乙酯-环己烷洗脱)，得到化合物109(49.3g，58％，两步)。
质谱(ESI)m/z 904.3[(M+Na)+]。
步骤15.e-f制备(2-O-乙酰基-3-O-苄基-6-O-叔丁基二甲基甲硅烷基-4-O-苯基丙基-α-L-吡喃葡糖基)-(1-4)-(1，6-脱水-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-β-D-吡喃葡糖)(110#化合物)向化合物109(49.3g，55.9mmol)在二氯甲烷(2.2L)中的溶液里加入水(112mL)，然后在0℃下加入DDQ(19.3g，1.5mol eq)。在0℃下搅拌3h以后，加入碳酸氢钠溶液。用硫酸钠干燥有机相，过滤并浓缩。将得到的残渣溶解于吡啶(335mL)中，然后加入醋酸酐(28mL)和4-二甲基氨基吡啶(682mg)。在磁性搅拌16h之后，在真空下浓缩反应混合物，在二氧化硅上提纯得到的残渣(用15∶85的乙酸乙酯-环己烷洗脱)得到化合物110(34.4g，77％，两步)。
质谱(ESI)m/z 826.4[(M+Na)+]。
步骤15.g-h制备(2-O-乙酰基-3-O-苄基-4-O-苯基丙基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(1，6-脱水-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-β-D-吡喃葡糖)(111#化合物)在0℃下向化合物110(25.17g，31.3mmol)在丙酮(1.46L)中的溶液里加入3.5M的含有铬酸酐(10g)的硫酸水溶液(45mL)。在0℃下磁性搅拌3h之后，用二氯甲烷稀释反应介质，用水洗涤，干燥、过滤并浓缩得到粗反应产物并将其直接用于下一步。将在前面得到的残渣溶解于二甲基甲酰胺(230mL)中，加入碳酸氢钾(16.7g，5mol eq)以及苄基溴(39.8mL，10mol eq)。在环境温度下搅拌反应混合物16h，然后用乙酸乙酯稀释，用水洗涤，干燥，过滤，浓缩并在二氧化硅上提纯(用1∶4的乙酸乙酯-甲苯洗脱)，得到化合物111(22.6g，91％，两步)。
质谱(ESI)m/z 811.3[(M+NH4)+]。
步骤15.i制备(2-O-乙酰基-3-O-苄基-4-O-苯基丙基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(1，6-二-O-乙酰基-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α，β-D-吡喃葡糖)(112#化合物)
在0℃下向化合物111(1.11g，1.39mmol)在醋酸酐(13.2mL，100moleq)中的溶液里加入三氟乙酸(TFA)(1.14mL，11mol eq)。在恢复到环境温度以后，搅拌反应混合物3.5h，然后浓缩，与甲苯共蒸发，并在二氧化硅凝胶上提纯(用85∶15的甲苯-乙酸乙酯洗脱)，得到化合物112(1.15g，93％)。
质谱(ESI)m/z 918.3[(M+Na)+]。
步骤15.j制备(2-O-乙酰基-3-O-苄基-4-O-苯基丙基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α，β-D-吡喃葡糖)(113#化合物)在0℃下向化合物112(1.13g，1.26mmol)在乙醚(51mL)中的溶液里加入苄胺(BnNH2)(5.25mL，38mol eq)。在环境温度下搅拌5h15之后，用1N的盐酸酸化介质，然后用乙醚萃取，用硫酸钠干燥，浓缩并在二氧化硅凝胶上提纯(用35∶65的乙酸乙酯-环己烷洗脱)，得到化合物113(0.97g，90％)。
质谱(ESI)m/z 854.3[(M+H)+]。
步骤15.k制备(2-O-乙酰基-3-O-苄基-4-O-苯基丙基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α，β-D-吡喃葡糖)三氯乙酰亚氨酸苄酯(114#化合物)在氩气气氛下向化合物113(0.95g，1.12mmol)在二氯甲烷(21.2mL)中的溶液里加入碳酸铯(Cs2CO3)(0.583g，1.6mol eq)然后加入三氯乙睛(CCl3CN)(0.56mL，5.0mol eq)。搅拌35分钟后，过滤反应混合物，然后浓缩。在二氧化硅凝胶上提纯残渣(用25∶75的乙酸乙酯-环己烷洗脱)，得到化合物114(995mg，90％)。
质谱(ESI)m/z 1021.5[(M+Na)+]。
制备例16合成(3-O-苄基-4-O-苯基丙基-2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(2-乙酰胺基-3-O-苄基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-O-苄基-2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(2-乙酰胺基-3-O-苄基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1，3-二羧酸二苄酯(3S，4R，5R))(122#化合物)
步骤16.a制备(2-O-乙酰基-3-O-苄基-4-O-苯基丙基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(1，6-脱水-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-β-D-吡喃葡糖)(115#化合物)按照方法2处理化合物114(990mg，0.99mmol)和化合物8(1.15g，1.7mmol)，在提纯之后得到化合物115(623mg，42％)。
质谱(ESI)m/z 1533.8[(M+Na)+]。
步骤16.b制备(2-O-乙酰基-3-O-苄基-4-O-苯基丙基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(1，6-二-O-乙酰基-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α，β-D-吡喃葡糖)(116#化合物)如在合成化合物112那样处理化合物115(590mg，0.39mmol)，在二氧化硅凝胶上提纯(用7∶3的环己烷-乙酸乙酯洗脱)之后得到化合物116(609mg，97％)。
质谱(ESI)m/z 1636.2[(M+Na)+]。
步骤16.c制备(2-O-乙酰基-3-O-苄基-4-O-苯基丙基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α，β-D-吡喃葡糖)(117#化合物)如合成化合物113那样处理化合物116(592mg，0.367mmol)，在二氧化硅凝胶上提纯(用65∶35的环己烷-乙酸乙酯洗脱)之后得到化合物117(530mg，92％)。
质谱(ESI)m/z 1593.9[(M+Na)+]。
步骤16.d制备(2-O-乙酰基-3-O-苄基-4-O-苯基丙基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α，β-D-吡喃葡糖)三氯乙酰亚氨酸酯(118#化合物)如合成化合物114那样处理化合物117(511mg，0.325mmol)，在二氧化硅凝胶上提纯(用7∶3的环己烷-乙酸乙酯洗脱)之后得到化合物118(495mg，89％)。
对于C85H90Cl13N7O25计算的元素分析是C59.49；H5.29；N5.71；实际的分析是C59.49；H5.50；N5.48。
步骤16.e制备(2-O-乙酰基-3-O-苄基-4-O-苯基丙基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-叠氮-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1，3-二羧酸二苄酯(3S，4R，5R))(119#化合物)按照方法2处理化合物118(479mg，0.279mmol)和化合物6(255mg，0.536mmol)，在提纯之后得到化合物119(375mg，66％)。对于C111H117N7O30计算的元素分析是C59.49；H5.29；N5.71；实际的分析是C59.49；H5.50；N5.48。
步骤16.f制备(2-O-乙酰基-3-O-苄基-4-O-苯基丙基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-乙酰胺基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-乙酰基-3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(6-O-乙酰基-2-乙酰胺基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1，3-二羧酸二苄酯(3S，4R，5R))(120#化合物)将化合物119(180mg，88.7μmol)溶解于吡啶(1.4mL)中，然后在0℃下加入硫代乙酸(1.4mL，225mol eq)。在环境温度下搅拌反应介质17h，然后浓缩并在二氧化硅凝胶上提纯(用4∶1的甲苯-丙酮洗脱)，得到化合物120(153mg，84％)。
质谱(ESI)m/z 2084.8[(M+Na)+]。
步骤16.g制备(3-O-苄基-4-O-苯基丙基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(2-乙酰胺基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-O-苄基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(2-乙酰胺基-3-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1，3-二羧酸二苄酯(3S，4R，5R))(121#化合物)按照方法3处理化合物120(190mg，93.6μmol)。
将得到的多元醇溶解于二甲基甲酰胺(4.4mL)中，在0℃下加入碳酸氢钾(85mg，10mol eq)和苄基溴(202μL，20mol eq)。在环境温度下搅拌反应混合物16h，然后在LH-20柱子上提纯。
在二氧化硅凝胶上提纯(用2∶3的乙酸乙酯-环己烷洗脱)，得到化合物121(108mg，62％，(两步))。
质谱(ESI)m/z 1884.2[(M+Na)+]。
步骤16.h制备(3-O-苄基-4-O-苯基丙基-2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(2-乙酰胺基-3-O-苄基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-O-苄基-2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸苄酯)-(1-4)-(2-乙酰胺基-3-O-苄基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(苯甲氧基)-4-氧哌啶-1，3-二羧酸二苄酯(3S，4R，5R))(122#化合物)按照方法4处理化合物121(41mg，21.6μmol)，得到化合物122(49mg，99％)。
质谱(ESI)m/z 2301.0[(M-H)-]。
下面的实施例用来说明本发明化合物的制备方法，但并不对其构成限制，核磁共振波谱符合得到的化合物的结构。
实施例1合成(2，4-二-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-乙酰胺基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-乙酰胺基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(羟基)-4-氧哌啶-3-羧酸钠(3S，4R，5R))(20#化合物) 按照方法5处理制备例3的化合物19(50mg，24.02μmol)，得到化合物20(26mg，72％)。
RMN1H(D2O)δ5.23(d，H-1GlcII)，5.13(d，H-1 IdoUAIII)，5.10(d，H-1 IdoUAV)，5.09(d，H-1GlcIV)，3.62，3.04，2.64，2.47(4m，4H，H-2，H-2′，H-6，H-6′pipI)。
实施例2合成(2-乙酰胺基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(羟基)-4-氧哌啶-3-羧酸钠(3S，4R，5R))(21#化合物) 按照方法5处理制备例12的化合物97，得到化合物21。
RMN1H(D2O)δ5.21(d，H-1GlcII)，3.40，3.40，3.40，3.10(4m，4H，H-2，H-2′，H-6，H-6′pipI)。
实施例3合成(2，4-二-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-乙酰胺基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(羟基)-4-氧哌啶-3-羧酸钠(3S，4R，5R))(22#化合物) 以同样的方法制备化合物22。
RMN1H(D2O)δ5.19(d，H-1GlcII)，5.15(d，H-1 IdoUAIII)，3.27，3.23，3.09，2.89(4m，4H，H-2，H-2′，H-6，H-6′pipI)。
实施例4(2-乙酰胺基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-乙酰胺基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(羟基)-4-氧哌啶-3-羧酸钠(3S，4R，5R))(23#化合物) 以同样的方法制备化合物23。
RMN1H(D2O)δ5.26(d，H-1GlcII)，5.14(d，H-1 IdoUAIII)，5.09(d，H-1 GlcIV)。
实施例5合成(2，4-二-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-N-磺酸钠基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-N-磺酸钠基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(羟基)-4-氧哌啶-3-羧酸钠(3S，4R，5R))(27#化合物) 按照方法5处理制备例4的化合物26(7.0mg，3.28μmol)得到化合物27(2.9mg，55％)。
RMN1H(D2O)δ5.53(d，H-1GlcII)，5.44(d，H-1GlcIV)，5.23(d，H-1 IdoUAIII)，5.21(d，H-1 IdoUAV)，3.09，3.07，2.58，2.44(4m，4H，H-2，H-2′，H-6，H-6′pipI)。
实施例6合成(3-O-甲基-2，4-二-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(3-O-甲基-2，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-O-甲基-2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(3-O-甲基-2，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(羟基)-4-氧哌啶-3-羧酸钠(3S，4R，5R))(47#化合物)
按照方法5处理制备例6的化合物46，在提纯之后得到化合物47(5mg，57％)。
质谱(ESI)m/z 1650.9[(M-Na+H)-]。
实施例7合成(2，4-二-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(羟基)-4-氧哌啶-3-羧酸钠(3S，4R，5R))(69#化合物) 按照方法5处理制备例9的化合物68得到化合物69(3.8mg，25％，两步)。
RMN1H(D2O)δ5.62(d，H-1 GlcIV)，5.52(d，H-1GlcII)，5.21(d，H-1 IdoUAV)，4.99(d，H-1 IdoUAIII)。
实施例8合成(4-O-丙基-2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(羟基)-4-氧哌啶-3-羧酸钠(3S，4R，5R))(74#化合物)
按照方法5处理制备例10的粗化合物73得到化合物74(6.0mg，62％，两步)。
RMN1H(D2O)δ5.68(d，H-1 GlcIV)，5.55(d，H-1 GlcII)，5.21(d，H-1 IdoUAV)，5.18(d，H-1 IdoUAIII)。
实施例9合成甲基(2，4-二-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-乙酰胺基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-羟基-4-氧哌啶-1-基-3-羧酸钠(3S，4R，5R))-(1-4)-(2-N-磺酸钠基-2，4-二脱氧-4-甲基-3，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-N-磺酸钠基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖苷)(90#化合物) 在0℃下向制备例11的化合物89(24mg，26.9μmol)和实施例3的化合物22(61mg，1.9mol eq)在磷酸盐缓冲液(pH 7)中的溶液里加入氰基硼氢化钠(4.4mg，2.4mol eq)。在0℃下搅拌8h之后，将反应介质在环境温度下放置16h，然后相继在SephadexG-25凝胶上用0.2M的氯化钠洗脱，然后在同样的SephadexG-25柱子上用水洗脱进行提纯，得到化合物90(17mg，31％)。
质谱(ESI)m/z 2029.3[(M+H-Na)-]。
实施例10合成甲基(2，4-二-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-乙酰胺基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-羟基-4-氧哌啶-1-基-3-羧酸钠(3S，4R，5R))-(1-4)-(2-N-磺酸钠基-2，4-二脱氧-4-甲基-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-N-磺酸钠基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖苷)(91#化合物) 以同样的方法制备化合物91。
质谱(ESI)m/z 1927.1[(M+H-Na)-]。
实施例11合成甲基(5-羟基-4-氧哌啶-1-基-3-羧酸钠(3S，4R，5R))-(1-4)-(2-N-磺酸钠基-2，4-二脱氧-4-甲基-3，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-N-磺酸钠基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖苷)(92#化合物)
以同样的方法制备化合物92。
质谱(ESI)m/z 1321.1[(M+H-Na)-]。
实施例12制备(2-乙酰胺基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-羟基-4-氧哌啶-1-甲基-3-羧酸钠(3S，4R，5R))(98#化合物) 按照方法5在氢气流中在3∶1∶1的甲醇-醋酸-水的混合物中处理制备例12的化合物97(20mg，21.3μmol)得到化合物98(6.0mg，57％)。
质谱(ESI)m/z 456.8[(M-H)-]。
实施例13合成(2，4-二-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-乙酰胺基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-乙酰胺基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(羟基)-3-羟甲基-4-氧哌啶(3R，4R，5R))(123#化合物) 按照方法5处理化合物104(41mg，19μmol)得到化合物123。
RMN1H(D2O)δ5.28(d，H-1 GlcII)，5.20(d，H-1 IdoUAIII)，5.17(d，H-1 IdoUAV)，5.15(d，H-1GlcIV)，3.21，3.19，2.68，2.59(4m，4H，H-2，H-2′，H-6，H-6′pipI)。
实施例14合成(4-O-苯基丙基-2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-乙酰胺基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-乙酰胺基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-(羟基)-4-氧哌啶-3-羧酸钠(3S，4R，5R))(124#化合物) 按照方法5处理化合物122得到化合物124。
RMN1H(D2O)δ5.28(d，H-1GlcII)，5.21(d，H-1 IdoUAV)，5.16(d，H-1 IdoUAIII)，5.16(d，H-1 GlcIV)，3.23，3.20，2.93，2.75(4m，4H，H-2，H-2′，H-6，H-6′pipI)。
权利要求
1.如下通式(I)的化合物，该化合物呈游离形式或与可药用碱或酸形成的盐形式，以及呈溶剂化物或水合物的形式 其中R表示氢原子、羟基、基团-OSO3-、基团-O-(C1～C5)烷基或基团-O-芳烷基；Z表示基团COO-或羟基X表示羟基或通式A的糖单元 其中—R1表示可以将A连接到氮杂糖单元或者其它糖单元上的氧原子，—R2表示基团-NH2、基团-NHCO(C1～C5)烷基、基团-NHCO-芳基、基团-NHSO3-、羟基、基团-O-(C1～C5)烷基、基团-O-芳烷基或基团-OSO3-，—R3表示羟基、基团-OSO3-、基团-O-(C1～C5)烷基或基团-O-芳烷基，—R4表示羟基、基团-OSO3-、基团-O-(C1～C5)烷基、基团-O-芳烷基或通式B的糖单元 其中—R6表示能够将B连接到另外的通式A的糖单元上的氧原子，—R7和R8具有如前面所定义的R3同样的定义，—R9表示羟基、基团-OSO3-、基团-O-(C1～C5)烷基、基团-O-芳烷基或如上所述通式A的糖单元，—R5具有与前面所定义的R3同样的定义；Y表示氢原子、基团(C1～C5)烷基或通式D的糖单元 其中—R10、R12和R13分别具有与前面所定义的R5、R3和R2同样的定义，—R11表示·能够将D接枝在氮杂糖单元上的基团(C1～C3)亚烷基，或者·能够将D接枝在另外的糖单元上的氧原子，—R14表示基团-O-(C1～C5)烷基或式-O-E，其中E表示如下通式的基团 其中—R15表示基团-O-(C1～C5)烷基、基团-O-芳烷基或通式D的糖单元，其中R11表示氧原子，—R16和R17具有如前面所定义的R3同样的定义，然而，是在X和R每一个都表示羟基，Y不表示氢原子的条件下，以及由通式(I)的化合物包含的糖单元数为1～10。
2.按照权利要求1的通式(I)的化合物，该化合物呈游离形式或与可药用碱或酸形成的盐形式，以及呈溶剂化物或水合物的形式 其中R表示氢原子、羟基、基团-OSO3-、基团-O-(C1～C5)烷基或基团-O-芳烷基；Z表示基团COO-或羟基；X表示羟基或通式A的糖单元 其中—R1表示氧原子，—R2表示基团-NHCOCH3、基团-NHSO3-、基团-OSO3-，—R3表示羟基或基团-O-(C1～C5)烷基，—R4表示羟基、基团-O-芳烷基或通式B的糖单元 其中—R6表示氧原子，—R7表示基团-OSO3-，—R8表示羟基、基团-O-(C1～C5)烷基或基团-O-芳烷基，—R9表示基团-OSO3-、基团-O-芳烷基、基团-O-(C1～C5)烷基或如上所定义通式A的糖单元，—R5表示基团-OSO3-，Y表示氢原子或通式D的糖单元 其中—R10具有与前面所定义的R5同样的定义，—R12表示羟基或基团-OSO3-，—R13表示基团-NHSO3-，—R11表示与氮杂糖单元相连接的亚甲基或与E相连接的氧原子，—R14表示基团-OCH3或式-O-E，其中E表示如下通式的基团 其中—R15表示单元D，其中R11表示能够将E连接到D上的氧原子，—R16表示基团-OSO3-，—R17表示羟基，条件是由通式(I)的化合物包含的糖单元数为2～10。
3.按照权利要求1或2中任何一项的通式(I)化合物，其中Y是氢原子，Z是基团COO-。
4.按照权利要求1～3中任何一项的化合物，这些化合物选自·(2，4-二-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-乙酰胺基-2-脱氧-6-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-乙酰胺基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-羟基-4-氧哌啶-3-羧酸钠(3S，4R，5R))，·(2，4-二-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-N-磺酸钠基-2-脱氧-6-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-N-磺酸钠基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-羟基-4-氧哌啶-3-羧酸钠(3S，4R，5R))，·(3-O-甲基-2，4-二-O-磺酸钠基-α-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(3-O-甲基-2，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-O-甲基-2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(3-O-甲基-2，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-羟基-4-氧哌啶-3-羧酸钠)(3S，4R，5R))，·(2，4-二-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-羟基-4-氧哌啶-3-羧酸钠(3S，4R，5R))，·(4-O-丙基-2-O-磺酸钠基-α-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2，6-二-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-羟基-4-氧哌啶-3-羧酸钠(3S，4R，5R))，·(2，4-二-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-乙酰胺基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-乙酰胺基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(3-羟基-5-羟甲基-4-氧哌啶(3S，4R，5R))，·(4-O-苯基丙基-二-O-磺酸钠基-α-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-乙酰胺基-2-脱氧-6-O-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(2-O-磺酸钠基-α-L-艾杜吡喃糖醛酸钠)-(1-4)-(2-乙酰胺基-2-脱氧-6-磺酸钠基-α-D-吡喃葡糖基)-(1-4)-(5-羟基-4-氧哌啶-3-羧酸钠(3S，4R，5R))。
5.含有按照权利要求1～4中任何一项的通式(I)化合物作为活性成分的药物组合物，该组合物任选同时含有一种或几种适当的惰性赋形剂。
6.按照权利要求5的药物组合物，该组合物用来治疗涉及乙酰肝素酶的疾病。
7.按照权利要求5的药物组合物，该组合物用来治疗具有重大血管形成程度的肿瘤，比如肺癌、乳腺癌、前列腺癌、食道癌、引起转移的癌，比如结肠癌和胃癌、黑色素瘤、神经胶质瘤、淋巴瘤或白血病。
8.按照权利要求5的药物组合物，该组合物用来治疗心血管疾病，比如动脉粥样硬化，进行血管成形术后再狭窄，与放置血管内植入体和/或主动脉-冠状动脉搭桥或其它血移植后出现的并发症或心脏过度生长或糖尿病的血管并发症比如糖尿病性视网膜病有关的疾病。
9.按照权利要求5的药物组合物，该组合物用来治疗慢性炎症疾病，比如类风湿性关节炎或IBD。
10.按照权利要求5的药物组合物，该组合物用来治疗黄斑变性。
全文摘要
本发明涉及呈游离形式或与碱或酸形成的可药用盐以及溶剂化物或水合物形式的抑制乙酰肝素酶的通式(I)化合物，其中R表示氢原子、羟基、基团－OSO
文档编号A61P35/00GK1956991SQ200580016503
公开日2007年5月2日 申请日期2005年7月20日 优先权日2004年7月23日
发明者P·A·德里格茨, M·珀蒂托 申请人:赛诺菲-安万特
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