一种3-取代丙-2-烯-1-酮类化合物及其应用
一种3-取代丙-2-烯-1-酮类化合物及其应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及医药技术领域，具体地说，是一种3-取代丙-2-烯-1-酮类化合物及其 协同氟康唑制备抗肿瘤药物组合物中的应用。
【背景技术】
[0002] 真菌病，即由真菌引起的疾病。作为一类广泛存在于自然界中的真核生物，真菌可 感染人体的不同部位。从临床的致病情况上看，真菌病可分为浅部真菌病和深部真菌病两 大类。抗生素滥用等诸多的问题导致细菌和真菌间正常的菌丛共生关系遭到一定的破坏； 其次在临床应用器官移植手术也越来越多的在临床开展，术后当中免疫抑制剂的使用影响 了机体正常的免疫功能，使人体对真菌的抵抗力降低以上问题令深部脏器的真菌感染发病 率越来越高，也越发严重。白色念珠菌是真菌感染的主要病因，但是近年随着来抗真菌药物 的大量使用，真菌对药物的耐药性逐渐增加。对氟康唑有耐药作用的菌株通常会对其他唑 类药物产生交叉耐药作用，使得对于治疗白念珠菌的感染方面的临床药物选择十分困难。 因此，寻找抗真菌药物耐药逆转剂，提高真菌对药物的敏感性，与现有药物产生协同的抗真 菌作用，是一种提高目前现有药物的治疗效果的重要方法。现有技术中，查尔酮是3-取代 丙-2-烯-1-酮类化合物种的一种，也是存在于植物中的一类天然结构，有文献报道了该类 化合物的抗肿瘤等作用，但尚未见报道该类化合物具有协同抗真菌的作用。
【发明内容】
[0003] 本发明的第一个目的是针对现有技术中的不足，提供一种具有协同作用抗耐药真 菌的药物组合物。
[0004] 本发明的第二个目的是，提供一种3-取代丙-2-烯-1-酮类抗耐药真菌化合物。
[0005] 本发明的第三个目的是，提供如上所述3-取代丙-2-烯-1-酮类抗真菌化合物的用 途。
[0006] 为实现上述目的，本发明采取的技术方案是：
[0007] -种具有协同作用抗耐药真菌的药物组合物，包括氮唑类抗真菌药物、3-取代丙-2_烯-1-酮类化合物或其在药学上可接受的盐或水合物，所述的3-取代丙-2-烯-1-酮类化 合物的结构如式I所示；
[0009] 所述仏选自苯基、羟基取代苯基、甲氧基取代苯基、二甲氨基取代苯基、卤代苯基、 呋喃基、亚甲二氧基取代苯基，羟甲基取代呋喃基、噻吩基或吡啶基；
[0010] 所述R2选自氢、羟基、甲氧基、氨基、氯或氟；
[0011] 所述R3选自氢或溴；
[0012]所述R4选自氢、羟基或甲氧基；
[0013]所述R5选自氢或溴；
[0014] 所述R6选自羟基、甲氧基、氢、氨基或卤素。
[0015] 优选地，
[0016] 所述仏选自苯基、羟基取代苯基、甲氧基取代苯基、二甲氨基取代苯基、卤代苯基、 呋喃基、亚甲二氧基取代苯基，羟甲基取代呋喃基、噻吩基或吡啶基；
[0017] 所述办选自氢或羟基；
[0018]所述R3选自氢或溴；
[0019] 所述R4选自氢、羟基或甲氧基；
[0020] 所述R5选自氢或溴；
[0021] 所述R6选自羟基、甲氧基、氢、氨基、氟或氯。
[0022] 优选地，
[0023] 所述Ri选自亚甲二氧基取代苯基、羟甲基取代呋喃基、噻吩基或吡啶基；
[0024] 所述办选自氢或羟基；
[0025] 所述R3选自氢或溴；
[0026] 所述R4选自羟基或甲氧基；
[0027]所述R5选自氢或溴；
[0028]所述R6选自甲氧基、氨基、氟或氯。
[0029] 优选地，所述3-取代丙-2-烯-1-酮类化合物为：
[0030] 化合物（D 羟基-6-甲氧基苯基)-3-(5-羟甲基呋喃-2-基)丙-2-烯-1- 酮；
[0031] 化合物(2): (E)-1-(2-羟基-4-甲氧基苯基)-3-苯基丙-2-烯-1-酮；
[0032] 化合物(3) 羟基-6-甲氧基苯基)-3-(噻吩-2-基)丙-2-烯-1-酮；
[0033] 化合物(4): ^)4-(3,5-二溴-2,4-二羟基苯基)-3_苯基丙-2-烯-1-酮；
[0034] 化合物(5): (E)-1-(2-羟基-6-甲氧基苯基)-3-(3,4-亚甲二氧基苯基）丙-2-烯- 1-酮；
[0035] 化合物(6):(Ε)-1-(2-羟基苯基)-3-(4-溴苯基)丙-2-烯-1-酮；
[0036] 化合物(7) 羟基苯基)-3-(5-轻甲基呋喃-2-基)丙-2-烯-1-酮；
[0037] 化合物(8):^)4-(2-氟苯基)-3-(4-二甲氨基苯基)丙-2-烯-1-酮；
[0038] 化合物(9):(幻-卜^，4-二羟基苯基)-3-(4-羟基苯基)丙-2-烯-1-酮；
[0039] 化合物羟基-6-甲氧基苯基)-3-(呋喃-2-基)丙-2-烯-1-酮；
[0040] 化合物羟基-6-甲氧基苯基)-3-(吡啶-3-基)丙-2-烯-1-酮；
[0041 ] 化合物（12): (E)-1-(2_羟基苯基)-3-(4-氟苯基)丙-2-烯-1-酮；
[0042] 化合物（13):(Ε)-1-(2-羟基苯基)-3-(3,4-亚甲二氧基苯基)丙-2-烯-1-酮；
[0043] 化合物（14):(Ε)-1-(2-氯苯基)-3-(3,4_亚甲二氧基苯基)丙-2-烯-1-酮;或
[0044] 化合物氨基苯基)-3-(3，4_二甲氧基苯基)丙-2-烯-1-酮。
[0045] 优选地，所述3-取代丙-2-烯-1-酮类化合物为：
[0046] 化合物（1):(Ε)-1-(2-羟基-6-甲氧基苯基)-3-(5-羟甲基呋喃-2-基)丙-2-烯-1- 酮；
[0047] 化合物(2):(Ε)-1-(2-羟基-4-甲氧基苯基)-3-苯基丙-2-烯-1-酮；
[0048] 化合物(3) 羟基-6-甲氧基苯基)-3-(噻吩-2-基)丙-2-烯-1-酮；
[0049] 化合物(4): ^)4-(3,5-二溴-2,4-二羟基苯基)-3_苯基丙-2-烯-1-酮；
[0050] 化合物(7): (E) -1 -(2-羟基苯基)-3-( 5-轻甲基呋喃-2-基)丙-2-烯-1 -酮；
[0051] 化合物(8) 氟苯基)-3-(4-二甲氨基苯基)丙-2-烯-1-酮；
[0052] 化合物(9):(幻-卜^，4-二羟基苯基)-3-(4-羟基苯基)丙-2-烯-1-酮；
[0053] 化合物（10): (E)-1-(2-羟基-6-甲氧基苯基)-3-(呋喃-2-基)丙-2-烯-1-酮；
[0054] 化合物羟基-6-甲氧基苯基)-3-(吡啶-3-基)丙-2-烯-1-酮。
[0055] 优选地，所述氮唑类抗真菌药物选自：氟康唑、酮康唑、硫康唑、伊曲康唑或沃利康 唑中的一种或多种。
[0056] 优选地，所述氮唑类抗真菌药物为氟康唑。
[0057]本发明还提供一种抗耐药真菌的药物组合物，包含治疗有效量的一种或多种如上 任一所述的具有协同作用抗耐药真菌的药物组合物、及药学上可接受的赋形剂、载体或稀 释剂。
[0058]为实现上述第二个目的，本发明采取的技术方案是：
[0059] -种3-取代丙-2-烯-1-酮类抗耐药真菌化合物，其特征在于，所述的3-取代丙-2-烯-1-酮类抗耐药真菌化合物为：
[0060] 化合物（D 羟基-6-甲氧基苯基)-3-(5-羟甲基呋喃-2-基)丙-2-烯-1- 酮；
[0061 ] 化合物(2): (E)-1-(2_羟基-4-甲氧基苯基)-3_苯基丙-2-烯-1-酮；
[0062] 化合物(3) 羟基-6-甲氧基苯基)-3-(噻吩-2-基)丙-2-烯-1-酮；
[0063] 化合物羟基-6-甲氧基苯基)-3-(呋喃-2-基)丙-2-烯-1-酮；
[0064] 化合物羟基-6-甲氧基苯基)-3-(吡啶-3-基)丙-2-烯-1-酮。
[0065]为实现上述第三个目的，本发明采取的技术方案是：
[0066]如上任一所述3-取代丙-2-烯-1-酮类化合物与氮唑类药物在制备抗耐药真菌药 物中的应用。
[0067] 优选地，所述氮唑类抗真菌药物选自：氟康唑、酮康唑、硫康唑、伊曲康唑或沃利康 唑中的一种或多种。
[0068] 优选地，所述氮唑类抗真菌药物为氟康唑。
[0069]本发明优点在于：
[0070] 本发明公开了一类具有通式I结构的3-取代丙-2-烯-1-酮类化合物及其在制备抗 真菌和协同抗真菌药物中的应用，试验结果表明该类化合物可以与氮唑类抗真菌药物共同 使用，可提高耐药菌对氮唑类药物的敏感性，实现逆转耐药作用，产生协同抗真菌作用。
【具体实施方式】
[0071] 下面结合【具体实施方式】，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发 明而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明公开的内容之后，本领域技术 人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限 定的范围。
[0072] 在某个具体实施例中，式（I)化合物按照药学上可接受的酸合成盐(一种药学上可 接受的盐)来制备，通过化合物的自由碱形式与药学上可接受的无机或有机酸反应，包括但 不限于无机酸，如盐酸，氢溴酸，硫酸，硝酸，磷酸，偏磷酸等;有机酸如乙酸，丙酸，己酸，环 戊基丙酸，乙醇酸，丙酮酸，乳酸，丙二酸，丁二酸，羟基丁二酸，马来酸，反丁烯二酸，对甲苯 磺酸，酒石酸，三氟乙酸，枸橼酸，苯甲酸，3-(4-羟苯甲酰基)苯甲酸，肉桂酸，扁桃酸，芳磺 酸，甲磺酸，乙磺酸，12-乙二磺酸，2-羟基乙磺酸，苯磺酸，2-萘磺酸，4-甲基双环-[2.2.2] 辛-2-烯-1-羧酸，葡庚糖酸，4，4 亚甲基双-(3-羟基-2-烯-1 -羧酸），3-苯基丙酸，三甲基 乙酸，叔丁基乙酸，硫酸十二烷基酯，葡糖酸，谷氨酸，羟萘甲酸，水杨酸，硬脂酸和己二烯二 酸。
[0073] "药学上可接受"这里指一种物质，如载体或稀释液，不会使化合物的生物活性或 性质消失，且相对无毒，如，给予个体某物质，不会引起不想要的生物影响或以有害的方式 与任何其含有的组分相互作用。
[0074] 术语"药学上可接受的盐"指一种化合物的存在形式，该形式不会引起对给药有机 体的重要的刺激，且不会使化合物的生物活性和性质消失。在某些具体方面，药学上可接受 的盐是通过式(I)化合物与酸反应获得，如盐酸，氢溴酸，硫酸，硝酸，磷酸，甲磺酸，乙磺酸， 对甲苯磺酸，水杨酸等。药学上可接受的盐也可通过式 （I)化合物与碱反应形成盐，如铵盐； 碱金属盐，如钠或钾盐;碱土金属盐，如钙或镁盐;有机碱盐，如二环己基胺，N-甲基-D-葡糖 胺，三(羟甲基）甲胺;氨基酸盐，如精氨酸，赖氨酸等。
[0075] 在某些具体实施例中，式(I)化合物被制备为前药。"前药"是指一个试剂在体内转 化为原型药。前药通常是有用的，因为在某种情况下，它们可能比原型药容易给药。他们可 以，例如，通过口服给药而被生物利用，但原型药不行。前药也可以在药学组分上改善原型 药的溶解性。例如，没有限制，前药为式（I)化合物，在水溶性不利于通过细胞膜的情况下， 前药作为酯给药使通过细胞膜更容易，然后通过代谢水解成羧酸，活性实体一旦进入到细 胞中，水溶性就十分有利。更进一步的例子，前药可以是一个短肽(聚氨基酸)连接到一个酸 基团，肽被代谢后展现出活性片段。
[0076]前药通常是药的前体，接下来的给药和吸收被转化为活性物质，或通过一些过程 变为活性更强的种类，如通过代谢途径转化。一些前药具有的化学基团使其活性较低和/或 对比原型药的溶解性或一些其它性质。一旦前药的化学基团被去除和/或对其修饰，得到活 性药。前药通常是有用的，在某些情况下，它们比原型药容易给药。在某种具体实施例中，本 文所述的前药化合物通过口服给药而可以生物利用，但原型药不行。而且，在某些具体实施 例中，本文所述的前药也可以在药学组分上改善原型药的溶解性。
[0077] 术语
[0078]如果无另外说明，用于本发明申请，包括说明书和权利要求书中的术语，定义如 下。必须注意，在说明书和所附的权利要求书中，如果文中无另外清楚指示，单数形式"一 个"包括复数意义。如果无另外说明，使用质谱、核磁、HPLC、蛋白化学、生物化学、重组DNA技 术和药理的常规方法。在本申请中，如果无另外说明，使用"或"或"和"指"和/或"。
[0079]术语"卤素"或"卤化物"指氟，氯，溴或碘。
[0080]术语"键"或"单键"指两个原子间或两个片断间（当通过键来连接的原子被认为是 大结构的一部分时）的化学键。一方面，当本文所述的基团是一个键时，缺少参考基团，允许 在剩余的确定基团间形成一个键。
[0081] 术语"元环"包括任何环状结构。术语"元"意为表示构成环的骨架原子的数量。这 样，如，环己基，吡啶基，吡喃基等是六元环，环戊基，吡咯基，呋喃基和噻吩基是五元环。
[0082] 在某个具体实施例中，所述化合物以溶剂化形式存在，药学上可接受的溶剂如水， 乙醇等。在其它具体实施例中，所述化合物以非溶剂化形式存在。
[0083]特定药学及医学术语
[0084]术语"可接受的"，如本文所用，指一个处方组分或活性成分对一般治疗目标的健 康没有过分的有害影响。
[0085]术语"真菌(fungus;fungi(复)"，如本文所用，指一类单细胞或多细胞微生物。不 含叶绿素，大都能形成硬的多糖细胞壁。属于真核生物，包括真菌门和黏菌门等。
[0086] 本文所用术语"抗真菌药物"指能抑制或杀灭真菌的药物。包括传统的抗真菌外用 药抗生素和合成药。抗真菌外用药包括但不限于水杨酸、雷琐辛、碘剂、硫黄等;抗生素包括 但不限于灰黄霉素、制霉菌素、两性霉素 B等;合成药包括但不限于咪唑类药物、氟胞嘧啶、 丙烯胺衍生物等。本发明中优选咪唑类药物，包括但不限于氟康唑、克霉唑、益康唑、咪康 唑、硫康唑、酮康唑等。
[0087] 术语"耐药真菌"，如本文所用，指真菌因其固有的抗药能力、自然选择或药物选择 作用下使真菌的抗药能力加强，对抗菌药物敏感性下降，表现为运用液滴稀释法测定的最 低抑菌浓度(MIC8〇)>64μg/ml的菌株，属于高度耐药菌;MIC8Q值介于16-32μg/ml的菌株，属 于中介耐药;MICso值小于8μg/ml的菌株，属于敏感菌株。
[0088] 如本文所用的术语"抗耐药真菌"，指抑制或杀灭耐药真菌的作用。
[0089] 术语"联合给药"或其类似术语，如本文所用，指将几种所选的治疗药物给一个病 人用药，以相同或不同的给药方式在相同或不同的时间给药。
[0090] 术语"协同"、"协同作用"或"增效"，如本文所用，指对原本存在抑制或杀灭真菌的 药物在合用另一种药物时能够增强原来药物抑制或杀灭真菌作用能力的作用，表观上表现 为原来药物的MIC值下降。
[0091] 术语"受试者"或"病人"包括哺乳动物和非哺乳动物。哺乳动物包括但不限于，哺 乳类:人、非人灵长类如猩猩、猿及猴类;农业动物如牛、马、山羊、绵羊、猪;家畜如兔、狗;实 验动物包括啮齿类，如大鼠、小鼠及豚鼠等。非哺乳类动物包括但不限于，鸟、鱼等。在一优 选例中，所选哺乳动物是人。
[0092] 术语"治疗"、"治疗过程"或"疗法"如本文所用，包括缓和、抑制或改善疾病的症状 或状况;抑制并发症的产生;改善或预防潜在代谢综合症;抑制疾病或症状的产生，如控制 疾病或情况的发展；减轻疾病或症状;使疾病或症状减退;减轻由疾病或症状引起的并发 症，或预防或治疗由疾病或症状引起的征兆。
[0093] 如本文所用，某一化合物或药物组合物，给药后，可以使某一疾病、症状或情况得 到改善，尤指其严重度得到改善，延迟发病，减缓病情进展，或减少病情持续时间。无论固定 给药或临时给药、持续给药或断续给药，可以归因于或与给药有关的情况。
[0094]治疗用途
[0095]式I化合物可协同抗真菌药物抵抗耐药真菌。另一方面，式I化合物被用于治疗真 菌感染引起的疾病。一方面，本文更进一步地提供了一种或多种式I化合物在制备治疗真菌 引起的疾病的药物或方法中的用途。另一方面，本文更进一步地提供了一种或多种式I化合 物在制备抗耐药真菌的药物中的用途。
[0096] -方面，真菌引起的疾病包括但不限于各种真菌性脑炎、真菌性败血症等系统性 真菌感染和头癣、皮肤癣、毛囊炎、脑膜炎等浅表性真菌感染。
[0097] 另一方面，涉及所述的式（I)化合物或其药学上可接受的盐用于制备制剂，这些制 剂中包括式I化合物和一种或多种抗真菌药物，可用于提高抗真菌药物抵抗耐药真菌的作 用。
[0098] 本发明中化合物用于制备制剂，包括:直接使用化合物或在制备过程中获得的任 一成分使用；用于体外筛选实验中，用来筛选验证用于抵抗上文所述的耐药真菌的种类或 是程度。
[0099] 给药途径：
[0100] 适合的给药途径包括但不限于，口服、静脉注射、直肠、气雾剂、非肠道给药、眼部 给药、肺部给药、经皮给药、阴道给药、耳道给药、鼻腔给药及局部给药。此外，仅作举例说 明，肠道外给药，包括肌肉注射、皮下注射、静脉注射、髓内注射、心室注射、腹膜内注射、淋 巴管内注射、及鼻内注射。
[0101] 在一方面，此处描述的化合物给药方式是局部的而不是全身性的给药方式，例如， 直接将化合物注射至器官，通常用于长效制剂或缓释制剂。在特定的具体实施例中，长效制 剂通过植入给药(例如皮下或肌肉）或通过肌肉注射。此外，在另一具体化实施例中，药物通 过靶向药物给药系统来给药。例如，由器官特异性抗体包裹的脂质体。在这种具体实施例 中，所述脂质体被选择性的导向特定器官并吸收。在其它实施例中，本发明中的化合物以快 速释放，延迟释放或通过中间体释放的途径给药。
[0102] 下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明 而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条 件或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则所有的百分数、比率、比例、或份数按 重量计。
[0103] 本发明中的重量体积百分比中的单位是本领域技术人员所熟知的，例如是指在 1 〇〇毫升的溶液中溶质的重量。
[0104] 除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意 义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本发明方法中。文中 所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用。
[0105] 所示本发明化合物9可以从但不限于从百灵威化学，厉鼎生物科技等公司购得，其 余化合物为本实验室合成化合物。
[0106] 实施例KEX-U-羟基-6-甲氧基苯基)-3-(5-羟甲基呋喃-2-基)丙-2-烯-1-酮 的制备(1)
[0108] 取2_羟基_6_甲氧基基苯乙酬50〇11^(3.〇1]1111〇1)，5-轻甲基咲喃甲酸60〇11^ (3.6mmol)加入到15ml乙醇中，然后加入30%Na0H水溶液，于室温下搅拌反应24~48h后， TLC，反应基本完全后，将反应液倒入冰水中，过滤，固体用水洗涤3次，烘干后闪柱分离，得 到化合物（l)，312mg，产率为38%。
[0109] 1H-NMR:3.95(3H,s,-0CH3),4.69(2H,s,-CH2-)；6.43(2H,m,Ar-H)；6.60(lH,dd,Ji = 8.4Hz j2 = 0.9Hz,Ar-H)；6.66(lH,d ,J = 3.3Hz,Ar-H)；7.38(2H,m,Ar-H)；7.57(lH,d ,J = 15.3Hz,a-H)；7.74(lH,d ,J = 15.3Hz,β-Η)； 13.18( lH,s,-OH) 〇M+ = 275.2〇
[0110] 实施例2(^4-(2-羟基-4-甲氧基苯基)-3-苯基丙-2-烯-i-酮的制备(2)
[0112] 以2-羟基-4-甲氧基苯乙酮和苯甲醛为原料，参照化合物1的合成方法。
[0113] ^-NMRiS.STCSH.s.-OCHs) ,6.49( lH,s) ,6.52( lH,d ,J = 2.4, Ar-H), 7.43(3H,m, Ar-H) ,7.67( lH,d,J= 15.3Hz, Ar-H), 7.65(2H,m,Ar-H) ,7.84(lH,d,J = 9.3Hz) ,7.90( 1H, d，J = 15.3Hz)，13.43(lH，s，-OH).M+ = 255.2。
[0114] 实施例3(^4-(2-羟基-6-甲氧基苯基)-3-(噻吩-2-基)丙-2-烯-1-酮的制备(3)
[0116] 以2-羟基-6-甲氧基苯乙酮和噻吩甲醛为原料，参照化合物1的合成方法。
[0117] 1H-NMR:3.07(3H,s,-0CH3),6.43(lH,dd ,Ji = 1.2 j2 = 8.4,Ar-H),6.61(lH,dd ,Ji = 0.9 J2 = 8.1, Ar-H), 7.10( lH,m, Ar-H), 7.35(2H,m, Ar-H), 7.41( lH,m, Ar-H), 7.71( 1H, d ,J = 15.3),7.75(lH,d ,J = 15.3),13.18(lH,s,-OH)〇M+ = 261. 2〇
[0118] 实施例4(^4-(3,5-二溴-2,4-二羟基苯基)-3-苯基丙-2-烯-1-酮的制备(4)
[0120] 以2,4_二羟基-3,5-二溴苯乙酮为原料与苯甲醛反应，参照化合物1的合成方法。
[0121] 1H-NMR:6.53(lH,s,-OH),7.46(lH,s),7.47(2H,m),7.51(2H,d ,J=15.6Hz),7.69 (2H,m),7.98(2H,d ,J = 15.6Hz),14.10(lH,s,-OH)〇M+ = 398.9
[0122] 实施例5(^4-(2-羟基-6-甲氧基苯基)-3-(3,4-亚甲二氧基苯基)丙-2-烯-1-酮 的制备(5)
[0124] 以2-羟基-6-甲氧基苯乙酮和3,4_亚甲二氧基苯甲醛为原料，参照化合物1的合成 方法。
[0125] 4-^^:3.96(311,8,-0013),6.04(211,8,-00120-),6.43(111,(1,1 = 8.41^),6.62 (lH,d,J = 8.4Hz) ,6.85(lH,d,J = 7.8Hz),7.12(lH,d,J= 10.2Hz),7.34(lH,d,J = 8.4Hz), 7.71(lH,d ,J = 15.2Hz),7.78(lH,d ,J = 15.2Hz),13.18(H,s,-OH)〇M+ = 299.3〇
[0126] 实施例6(^4-(2-羟基苯基)-3-(4-溴苯基)丙-2-烯-1-酮的制备(6)
[0128] 以2-羟基苯乙酮和对溴苯甲醛为原料，参照化合物1的合成方法。
[0129] = = = 7.8,Ar-H),7.53(2H,d ,J = 8.4,Ar-H),7.58(2H,d ,J = 8.4,Ar-H),7.65(lH,d ,J=15.6,Ar-H) ,7.85(lH,d,J=15.6,Ar-H),7.91(lH,dd,Ji = 7.8 j2=1.2,Ar-H),12.73(lH,s,-OH).M+ = 317.18。
[0130] 实施例7(^4-(2-羟基苯基)-3-(5-轻甲基呋喃-2-基)丙-2-烯-1-酮的制备(7)
[0132] 以2-羟基苯乙酮和羟甲基呋喃甲醛为原料，参照化合物1的合成方法。
[0133] 1H-NMR:4.72(2H,s,-CH2-)；6.46(lH,d ,J = 3.3Hz, Ar-H)； 6.74( lH,d,J = 3.3Hz, Ar-H)；6.96(lH,q,Ji = 8.1Hzj2 = 1.2Hz,Ar-H)；7.03(lH,ddJi = 8.1Hzj2 = 1.2Hz,Ar-H)；7.50(lH,t Ji = 8.1Hz,J2=1.2Hz, Ar-H)； 7.56( lH,d,J= 15.0Hz, Ar-H)； 7.66( lH,d,J = 15.0Hz，Ar-H) ;7.95(1H,dd, Ji = 8.1Hz J2 = 1.2Hz，Ar-H) ;12.92(lH，s,-OH)。矿=244.8。
[0134] 实施例氟苯基)-3-(4-二甲氨基苯基)丙-2-烯-1-酮的制备(8)
[0136] 以2-氟苯乙酮和对二甲氨基苯甲醛为原料，参照化合物1的合成方法。
[0137] 1H-NMR:3.05(6H,s,-N(CH3)2) ,6.68(2H,d,J = 9.0,Ar-H),7.15(lH,d,J=15.6, Ar-H) ,7.18(2H,m, Ar-H) ,7.47( lH,m, Ar-H) ,7.52(2H,d,J = 9.0, Ar-H), 7.70( lH,d,J = 15.6,Ar-H,7.78(lH,m,Ar-H)〇M+ = 270.7
[0138] 实施例9(^4-(2-羟基-6-甲氧基苯基）-3-(呋喃-2-基）丙-2-烯-1-酮的制备 (10)
[0140] 以2-羟基-6-甲氧基苯乙酮和呋喃甲醛为原料，参照化合物1的合成方法。
[0141] 匪R:3.95(3H，s，-0CH3)，6.42(lH，d，J = 8.1，Ar-H)，6.52(lH，m，Ar-H)，6.20 (lH,dd ,Ji = 0.9 ,J2 = 8.4,Ar-H) ,6.71 (lH,d ,J = 3.6 ,Ar-H), 7.36( lH,m,Ar-H), 7.53( 1H, s),7.60(lH,d ,J = 15.3Hz),7.76(lH,d ,J = 15.3Hz),13.22(lH,s,-OH).M+ = 245.3〇
[0142] 实施例羟基-6-甲氧基苯基)-3-(吡啶-3-基）丙-2-烯-1-酮的制备 (11)
[0144] 以2-羟基-6-甲氧基苯乙酮和3-吡啶甲醛为原料，参照化合物1的合成方法。
[0145] H-NMR:3.96(3H，s，-0CH3)，6.44(lH，dd，J = 8.4，Ar-H) ,6.63(lH，dd，Ji = 0.9，j2 = 8.4,Ar-H) ,7.36(lH,m,Ar-H) ,7.40(lH,d,J = 8.4,Ar-H) ,7.76(lH,d,J= 15.3Hz,Ar-H), 7.89(lH,m,Ar-H),7.90(lH,d ,J= 15.3Hz), 7.76( lH,d,J= 15.2Hz), 8.62( lH,d,J = 3.6Hz, Ar-H),8.87(lH,s,Ar-H),13.02(lH,s,-OH).[M+H]+=256.2〇
[0146] 实施例羟基苯基)-3-(4-氟苯基)丙-2-烯-1-酮的制备（12)
[0148] 以2-羟基-苯乙酮和4-氟甲醛为原料，参照化合物1的合成方法。
[0149] 咕-匪1?(60010^，0)(：13,3，？？111):6.95(1!1，^ = 8.4，八『-!〇，7.03(lH，dd，Ji = 8.4， J2 = l .2, Ar-H) ,7.13(2H,d,J = 8.4, Ar-H) ,7.51( lH,t,J = 8.4, Ar-H) ,7.58( lH,d,J = 15.6,Ar-H),7.66(2H,d ,J = 8.4,H-2,6),7.89(lH,d ,J=15.6,Ar-H),7.91(lH,dd ,J = 8.4, J = 1.2,H-6),12.77(lH,s,-OH).ESI-MS m/z 243.58[M+H] + 〇
[0150] 实施例12(E)-1-(2-羟基苯基)-3-(3,4-亚甲二氧基苯基）丙-2-烯-1-酮的制备 (13)
[0152] 以2-羟基-苯乙酮和3,4_亚甲二氧基苯甲醛为原料，参照化合物1的合成方法。
[0153] 1H-Mffi(300MHz，CDCl3，ppm，J/Hz):6.06(2H，s，-0CH20-)，6.87(lH，d，J = 8.1，Ar- H) ,6.95(lH，t，J = 8.1，Ar-H)，7.03(lH，dd，Ji = 8.1，J2 = 0.9，Ar-H H-3)，7.17(lH，dd，Ji = 8.1 ,J2 = 1.5,Ar-H) ,7.20(lH,d,J= 1.5,Ar-H) ,7.50(lH,d,J= 15.3,Ar-H),7.51(lH,t,J = 8.1,Ar-H),7.87(lH,d ,J= 15.3,Ar-H), 7.92( lH,dd,Ji = 8.1j2 = 1.5, Ar-H), 12.92( 1H, s,-〇H).ESI-MS m/z 269.56[M+H]+〇
[0154] 实施例13(E)-1-(2-氯苯基)-3-(3,4-亚甲二氧基苯基)丙-2-烯-1-酮的制备（14)
[0156] 以2-氯苯乙酮和3,4_亚甲二氧基苯甲醛为原料，参照化合物1的合成方法。
[0157] iH-Mfl^eOOMHz.CDChJjpmJ/Hzhe.OSUH.srOafeO-he.SSaHJ:?』， Ar-H) ,6.96(lH,d,J = 15.6,Ar-H),7.02(lH,dd,Ji = 7.8,J2 = 1.2,Ar-H) ,7.09(lH,d,J = 1.2，Ar-H)，7.35(lH，t，J = 7.8，Ar-H)，7.37(lH，d，J=15.6，Ar-H)，7.40(lH，t，J = 7.8，Ar-H),7.46(2H,d,J = 7.8,Ar-H).ESI-MS m/z 287.56[M+H] + 〇
[0158] 实施例氨基苯基)-3-(3,4-二甲氧基苯基)丙-2-烯-1-酮的制备（15)
[0160]以邻氨基苯乙酮和3,4_二甲氧基苯甲醛为原料，参照化合物1的合成方法。
[0161] H-NMR(300MHz，CDCl3，S，ppm，J/Hz):3.92(3H，s，-0CH3)，3.95(3H，s，-0CH 3)，6.33 (2H,br. s,-NH2), 6.70(2H,m, Ar-H), 6.89( 1H, d,J = 8.1, Ar-H), 7.14( lH,d,J= 1.8, Ar-H), 7.21(lH,dd Ji = 8.1J2 = 1.8,Ar-H),7.28(lH,m,Ar-H) ,7.48(lH,d,J=15.6,Ar-H) ,7.70 (lH，dJ = 15.6，Ar-H)，7.87(lH，dd，Ji = 8.1j2 = 1.2，Ar-H).ESI-MS m/z 282.5[M-H] -〇
[0162] 实施例15:应用棋盘式稀释法体外药敏实验测试式I化合物协同氟康唑抗耐药真 菌作用
[0163] -、应用棋盘式稀释法体外药敏实验测试本发明化合物协同氟康唑抗耐药真菌作 用
[0164] 本实施中所用菌种为临床分离得到的耐药白色念珠菌103菌。所有实验用菌均于 沙堡葡萄糖琼脂培养基(SDA)划板活化，于30°C培养2周后，分别挑取单克隆再次划板活化， 取第二次所得单克隆置SDA斜面，于30°C培养2周后在4°C下保存。培养液为RPMI 1640液体 培养液，均按照标准方法进行培养前处理。抗真菌药物氟康唑注射液由大连辉瑞药业有限 公司提供；二甲亚砜（DMS0)购置于中国医药集团上海化学试剂公司。所用的仪器有 Multiskan MK3型酶标检测仪(芬兰Labsystems);隔水式电热恒温培养箱(上海跃进医疗器 械厂）；MJX型智能菌酶培养箱（宁波江南仪器厂）；THZ-82A台式恒温振荡器(上海跃进医疗 器械厂）；SW-CT-IF型超净化工作台（苏州安泰空气技术有限公司）；倒置显微镜(Amersham Pharmacia);微量加样器(芬兰Finnpette) ;96孔细胞培养板(丹麦Nunclon公司）。
[0165] 1实验步骤 [0166] 1.1真菌悬液的配置
[0167] 实验前，用接种圈从4°C保存的SDA培养基上挑取耐药白色念珠菌103菌、100菌、 J28菌、953菌少量，接种至lml YEH)培养液，于30°C，200rpm振荡培养，活化16h，使真菌处于 指数生长期后期。取该菌液至lml YEH)培养液中，用上述方法再次活化，16h后，用血细胞计 数板计数，以RPMI 1640培养液调整菌液浓度至1 X 103-5 X 103CFU/ml。
[0168] 1.2药敏反应板的制备
[0169] 取无菌96孔板，于每排1号孔加 RPMI 1640液体培养基100μΙ作空白对照;3-12号孔 各加新鲜配制的菌液1〇〇μ1; 2号孔加菌液160μ1和受试化合物溶液40μ1; 12号孔不含药物， 只加菌液100μΙ作阳性生长对照。2-11号孔进行倍比稀释，使各孔的最终药物浓度分别为 64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25和0.125以 8/!111，各孔中0130含量均低于1%。每次配制药敏板 的同时均制备一块质控菌药敏板(质控菌:根据NCCLS Μ27-Α方案的建议，我们采用近平滑 念珠菌ATCC18062为质控菌，每次配制药敏板的同时均制备一块质控菌药敏板，其MIC参考 值如下:氟康唑(FCZ) :MIC8q值0.25-1.0μg/ml; AmB:MIC值0.5-2.0μg/ml。每次试验以此菌株 为参照菌株，只有当其MIC8Q值界于上述范围时，方认为试验操作准确可靠。如同时试验菌株 生长良好，则可认为试验成功，结果可接受。各药敏板于30°C恒温箱培养。
[0170] 1.3体外药敏实验方法的选取
[0171 ]选择棋盘式微量稀释法对本发明的化合物协同氟康唑体外抗耐药真菌活性进行 评价。棋盘式微量稀释法是体外药敏实验的延伸，即合用的两种药物于96孔板上以二维棋 盘的纵(A至H)横(2至11)两方向分别进行二倍的倍比稀释。例如化合物1与一种抗真菌药物 氟康唑合用后，使得氟康唑的终浓度为128、64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25和0.125μg/ml，化 合物1的终浓度为64、32、16、8、4、2、lμg/ml。实验所用试剂、药物、实验操作步骤同上述体外 药敏实验。
[0172] 1.4评价标准
[0173] 部分抑菌浓度指数（fractional inhibitory concentration index，FICI)是评 价联合用药的两药相互作用方式的主要参数。抑菌浓度分数(FIC)，分别为每一种药物联合 抑菌时所需最低抑菌浓度(MIC)与单用时MIC的比值.而FIC指数(FICI)则等于两种药物FIC 之和。当MIC值高于检测最高限时以最高限浓度的两倍值用以计算FICI。很多文献报道当 FICI < 0.5时两药的相互作用确定为协同作用，且FIC指数越小，协同作用越强;0.5〈FICI < 1时两药的相互作用确定为相加作用；1〈FICI < 4时为无关作用；当FICIM时两药产生拮抗 作用。本次试验选用目前国外期刊采用的最新标准：当FICIS 0.5时，两药的相互作用确定 为协同作用;〇. 5〈FICI < 4时为无关作用；当FICIM时两药产生拮抗作用。
[0174] 1.5测试结果
[0175] 结果见表1，从表中可以看到，本发明的化合物对氟康唑产生耐药的白色念珠菌 103菌有明显的协同作用。
[0176] 表1本发明化合物结构及其与氟康唑协同抗耐药真菌FICI值
[0177]
[0179] [a]MIC8Q值[yg/mL]为式I中化合物与氟康唑8.0yg ml/1联合用药的MIC8〇值。
[0180] 以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人 员，在不脱离本发明方法的前提下，还可以做出若干改进和补充，这些改进和补充也应视为 本发明的保护范围。
【主权项】
1. 一种具有协同作用抗耐药真菌的药物组合物，其特征在于，包括氮挫类抗真菌药物、 3-取代丙-2-締-1-酬类化合物或其在药学上可接受的盐或水合物，所述的3-取代丙-2-締-1-酬类化合物的结构如式I所示；所述Ri选自苯基、径基取代苯基、甲氧基取代苯基、二甲氨基取代苯基、面代苯基、巧喃 基、亚甲二氧基取代苯基，径甲基取代巧喃基、嚷吩基或化晚基； 所述化选自氨、径基、甲氧基、氨基、氯或氣； 所述化选自氨或漠； 所述R4选自氨、径基或甲氧基； 所述化选自氨或漠； 所述Rs选自径基、甲氧基、氨、氨基或面素。2. 根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于， 所述Ri选自苯基、径基取代苯基、甲氧基取代苯基、二甲氨基取代苯基、面代苯基、巧喃 基、亚甲二氧基取代苯基，径甲基取代巧喃基、嚷吩基或化晚基； 所述R2选自氨或径基； 所述化选自氨或漠； 所述R4选自氨、径基或甲氧基； 所述化选自氨或漠； 所述Rs选自径基、甲氧基、氨、氨基、氣或氯。3. 根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于， 所述化选自亚甲二氧基取代苯基、径甲基取代巧喃基、嚷吩基或化晚基； 所述R2选自氨或径基； 所述化选自氨或漠； 所述R4选自径基或甲氧基； 所述化选自氨或漠； 所述Rs选自甲氧基、氨基、氣或氯。4. 根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述的3-取代丙-2-締-1-酬类化合 物为： 化合物（1):巧)-1-(2-?基-6-甲氧基苯基)-3-巧-径甲基巧喃-2-基)丙-2-締-1-酬； 化合物(2):巧)-1-(2-?基-4-甲氧基苯基)-3-苯基丙-2-締-1-酬； 化合物(3):巧)-1-(2-?基-6-甲氧基苯基)-3-(嚷吩-2-基)丙-2-締-1-酬； 化合物(4):巧)-1-(3,5-二漠-2,4-二径基苯基)-3-苯基丙-2-締-1-酬； 化合物巧）：巧)-1-(2-?基-6-甲氧基苯基)-3-(3,4-亚甲二氧基苯基)丙-2-締-1-酬； 化合物(6):巧)-1-(2-?基苯基)-3-(4-漠苯基)丙-2-締-1-酬； 化合物(7):巧)-1-(2-?基苯基)-3-巧-径甲基巧喃-2-基)丙-2-締-1-酬； 化合物(8):巧)-1-(2-氣苯基)-3-(4-二甲氨基苯基)丙-2-締-I-酬； 化合物(9):巧)-1-(2,4-二径基苯基)-3-(4-?基苯基)丙-2-締-1-酬； 化合物（1〇):巧)-1-(2-径基-6-甲氧基苯基)-3-(巧喃-2-基)丙-2-締-1-酬； 化合物（11):巧)-1-(2-径基-6-甲氧基苯基)-3-(化晚-3-基)丙-2-締-1-酬； 化合物（12):巧)-1-(2-径基苯基)-3-(4-氣苯基)丙-2-締-1-酬； 化合物（13):巧)-1-(2-径基苯基)-3-(3,4-亚甲二氧基苯基)丙-2-締-1-酬； 化合物（14): (E)-I-U-氯苯基)-3-(3,4-亚甲二氧基苯基)丙-2-締-1-酬;或 化合物（15): (E)-1-(2-氨基苯基)-3-(3,4-二甲氧基苯基)丙-2-締-1-酬。5. 根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述的3-取代丙-2-締-1-酬类化合 物为： 化合物（1):巧)-1-(2-?基-6-甲氧基苯基)-3-巧-径甲基巧喃-2-基)丙-2-締-1-酬； 化合物(2):巧)-1-(2-?基-4-甲氧基苯基)-3-苯基丙-2-締-1-酬； 化合物(3):巧)-1-(2-?基-6-甲氧基苯基)-3-(嚷吩-2-基)丙-2-締-1-酬； 化合物(4):巧)-1-(3,5-二漠-2,4-二径基苯基)-3-苯基丙-2-締-1-酬； 化合物巧）：巧)-1-(2-?基-6-甲氧基苯基)-3-(3,4-亚甲二氧基苯基)丙-2-締-1-酬； 化合物(6):巧)-1-(2-?基苯基)-3-(4-漠苯基)丙-2-締-1-酬； 化合物(7):巧)-1-(2-?基苯基)-3-巧-径甲基巧喃-2-基)丙-2-締-1-酬； 化合物(8):巧)-1-(2-氣苯基)-3-(4-二甲氨基苯基)丙-2-締-1-酬； 化合物(9):巧)-1-(2,4-二径基苯基)-3-(4-?基苯基)丙-2-締-1-酬； 化合物（1〇):巧)-1-(2-径基-6-甲氧基苯基)-3-(巧喃-2-基)丙-2-締-1-酬； 化合物（11):巧)-1-(2-径基-6-甲氧基苯基)-3-(化晚-3-基)丙-2-締-1-酬。6. 根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述氮挫类抗真菌药物选自：氣康 挫、酬康挫、硫康挫、伊曲康挫或沃利康挫中的一种或多种。7. -种抗耐药真菌的药物组合物，其特征在于，包含治疗有效量的一种或多种权利要 求1-6任一所述的药物组合物及其药学上可接受的赋形剂、载体或稀释剂。8. 权利要求1-6任一所述的3-取代丙-2-締-1-酬类化合物与氮挫类药物在制备抗耐药 真菌药物中的应用。9. 根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述的氮挫类药物选自：氣康挫、酬康挫、 硫康挫、伊曲康挫或沃利康挫中的一种或多种。10. -种3-取代丙-2-締-1-酬类抗耐药真菌化合物，其特征在于，所述的3-取代丙-2-締-1-酬类抗耐药真菌化合物为： 化合物（1):巧)-1-(2-?基-6-甲氧基苯基)-3-巧-径甲基巧喃-2-基)丙-2-締-1-酬； 化合物(2):巧)-1-(2-?基-4-甲氧基苯基)-3-苯基丙-2-締-1-酬； 化合物(3):巧)-1-(2-?基-6-甲氧基苯基)-3-(嚷吩-2-基)丙-2-締-1-酬； 化合物（1〇):巧)-1-(2-径基-6-甲氧基苯基)-3-(巧喃-2-基)丙-2-締-1-酬； 化合物（11):巧)-1-(2-径基-6-甲氧基苯基)-3-(化晚-3-基)丙-2-締-1-酬。
【专利摘要】本发明涉及医药技术领域，具体公开了一类具有通式I结构的3-取代丙-2-烯-1-酮类化合物及其在制备抗真菌和协同抗真菌药物中的应用。该类化合物可以与氮唑类抗真菌药物共同使用，可提高耐药菌对氮唑类药物的敏感性，实现逆转耐药作用，产生协同抗真菌作用。
【IPC分类】A61K31/4406, A61K31/12, C07C49/835, C07D333/22, A61K31/341, C07C225/22, C07D307/46, C07C49/84, A61K31/136, A61K31/381, A61P31/10, C07D317/54, A61K31/36, C07D213/50
【公开号】CN105503788
【申请号】CN201610059112
【发明人】金永生, 刘守炜, 董怀怀, 刘思宇, 王元花, 赵菲, 姜远英
【申请人】中国人民解放军第二军医大学
【公开日】2016年4月20日
【申请日】2016年1月28日
【技术领域】
[0001] 本发明涉及医药技术领域，具体地说，是一种3-取代丙-2-烯-1-酮类化合物及其 协同氟康唑制备抗肿瘤药物组合物中的应用。
【背景技术】
[0002] 真菌病，即由真菌引起的疾病。作为一类广泛存在于自然界中的真核生物，真菌可 感染人体的不同部位。从临床的致病情况上看，真菌病可分为浅部真菌病和深部真菌病两 大类。抗生素滥用等诸多的问题导致细菌和真菌间正常的菌丛共生关系遭到一定的破坏； 其次在临床应用器官移植手术也越来越多的在临床开展，术后当中免疫抑制剂的使用影响 了机体正常的免疫功能，使人体对真菌的抵抗力降低以上问题令深部脏器的真菌感染发病 率越来越高，也越发严重。白色念珠菌是真菌感染的主要病因，但是近年随着来抗真菌药物 的大量使用，真菌对药物的耐药性逐渐增加。对氟康唑有耐药作用的菌株通常会对其他唑 类药物产生交叉耐药作用，使得对于治疗白念珠菌的感染方面的临床药物选择十分困难。 因此，寻找抗真菌药物耐药逆转剂，提高真菌对药物的敏感性，与现有药物产生协同的抗真 菌作用，是一种提高目前现有药物的治疗效果的重要方法。现有技术中，查尔酮是3-取代 丙-2-烯-1-酮类化合物种的一种，也是存在于植物中的一类天然结构，有文献报道了该类 化合物的抗肿瘤等作用，但尚未见报道该类化合物具有协同抗真菌的作用。
【发明内容】
[0003] 本发明的第一个目的是针对现有技术中的不足，提供一种具有协同作用抗耐药真 菌的药物组合物。
[0004] 本发明的第二个目的是，提供一种3-取代丙-2-烯-1-酮类抗耐药真菌化合物。
[0005] 本发明的第三个目的是，提供如上所述3-取代丙-2-烯-1-酮类抗真菌化合物的用 途。
[0006] 为实现上述目的，本发明采取的技术方案是：
[0007] -种具有协同作用抗耐药真菌的药物组合物，包括氮唑类抗真菌药物、3-取代丙-2_烯-1-酮类化合物或其在药学上可接受的盐或水合物，所述的3-取代丙-2-烯-1-酮类化 合物的结构如式I所示；
[0009] 所述仏选自苯基、羟基取代苯基、甲氧基取代苯基、二甲氨基取代苯基、卤代苯基、 呋喃基、亚甲二氧基取代苯基，羟甲基取代呋喃基、噻吩基或吡啶基；
[0010] 所述R2选自氢、羟基、甲氧基、氨基、氯或氟；
[0011] 所述R3选自氢或溴；
[0012]所述R4选自氢、羟基或甲氧基；
[0013]所述R5选自氢或溴；
[0014] 所述R6选自羟基、甲氧基、氢、氨基或卤素。
[0015] 优选地，
[0016] 所述仏选自苯基、羟基取代苯基、甲氧基取代苯基、二甲氨基取代苯基、卤代苯基、 呋喃基、亚甲二氧基取代苯基，羟甲基取代呋喃基、噻吩基或吡啶基；
[0017] 所述办选自氢或羟基；
[0018]所述R3选自氢或溴；
[0019] 所述R4选自氢、羟基或甲氧基；
[0020] 所述R5选自氢或溴；
[0021] 所述R6选自羟基、甲氧基、氢、氨基、氟或氯。
[0022] 优选地，
[0023] 所述Ri选自亚甲二氧基取代苯基、羟甲基取代呋喃基、噻吩基或吡啶基；
[0024] 所述办选自氢或羟基；
[0025] 所述R3选自氢或溴；
[0026] 所述R4选自羟基或甲氧基；
[0027]所述R5选自氢或溴；
[0028]所述R6选自甲氧基、氨基、氟或氯。
[0029] 优选地，所述3-取代丙-2-烯-1-酮类化合物为：
[0030] 化合物（D 羟基-6-甲氧基苯基)-3-(5-羟甲基呋喃-2-基)丙-2-烯-1- 酮；
[0031] 化合物(2): (E)-1-(2-羟基-4-甲氧基苯基)-3-苯基丙-2-烯-1-酮；
[0032] 化合物(3) 羟基-6-甲氧基苯基)-3-(噻吩-2-基)丙-2-烯-1-酮；
[0033] 化合物(4): ^)4-(3,5-二溴-2,4-二羟基苯基)-3_苯基丙-2-烯-1-酮；
[0034] 化合物(5): (E)-1-(2-羟基-6-甲氧基苯基)-3-(3,4-亚甲二氧基苯基）丙-2-烯- 1-酮；
[0035] 化合物(6):(Ε)-1-(2-羟基苯基)-3-(4-溴苯基)丙-2-烯-1-酮；
[0036] 化合物(7) 羟基苯基)-3-(5-轻甲基呋喃-2-基)丙-2-烯-1-酮；
[0037] 化合物(8):^)4-(2-氟苯基)-3-(4-二甲氨基苯基)丙-2-烯-1-酮；
[0038] 化合物(9):(幻-卜^，4-二羟基苯基)-3-(4-羟基苯基)丙-2-烯-1-酮；
[0039] 化合物羟基-6-甲氧基苯基)-3-(呋喃-2-基)丙-2-烯-1-酮；
[0040] 化合物羟基-6-甲氧基苯基)-3-(吡啶-3-基)丙-2-烯-1-酮；
[0041 ] 化合物（12): (E)-1-(2_羟基苯基)-3-(4-氟苯基)丙-2-烯-1-酮；
[0042] 化合物（13):(Ε)-1-(2-羟基苯基)-3-(3,4-亚甲二氧基苯基)丙-2-烯-1-酮；
[0043] 化合物（14):(Ε)-1-(2-氯苯基)-3-(3,4_亚甲二氧基苯基)丙-2-烯-1-酮;或
[0044] 化合物氨基苯基)-3-(3，4_二甲氧基苯基)丙-2-烯-1-酮。
[0045] 优选地，所述3-取代丙-2-烯-1-酮类化合物为：
[0046] 化合物（1):(Ε)-1-(2-羟基-6-甲氧基苯基)-3-(5-羟甲基呋喃-2-基)丙-2-烯-1- 酮；
[0047] 化合物(2):(Ε)-1-(2-羟基-4-甲氧基苯基)-3-苯基丙-2-烯-1-酮；
[0048] 化合物(3) 羟基-6-甲氧基苯基)-3-(噻吩-2-基)丙-2-烯-1-酮；
[0049] 化合物(4): ^)4-(3,5-二溴-2,4-二羟基苯基)-3_苯基丙-2-烯-1-酮；
[0050] 化合物(7): (E) -1 -(2-羟基苯基)-3-( 5-轻甲基呋喃-2-基)丙-2-烯-1 -酮；
[0051] 化合物(8) 氟苯基)-3-(4-二甲氨基苯基)丙-2-烯-1-酮；
[0052] 化合物(9):(幻-卜^，4-二羟基苯基)-3-(4-羟基苯基)丙-2-烯-1-酮；
[0053] 化合物（10): (E)-1-(2-羟基-6-甲氧基苯基)-3-(呋喃-2-基)丙-2-烯-1-酮；
[0054] 化合物羟基-6-甲氧基苯基)-3-(吡啶-3-基)丙-2-烯-1-酮。
[0055] 优选地，所述氮唑类抗真菌药物选自：氟康唑、酮康唑、硫康唑、伊曲康唑或沃利康 唑中的一种或多种。
[0056] 优选地，所述氮唑类抗真菌药物为氟康唑。
[0057]本发明还提供一种抗耐药真菌的药物组合物，包含治疗有效量的一种或多种如上 任一所述的具有协同作用抗耐药真菌的药物组合物、及药学上可接受的赋形剂、载体或稀 释剂。
[0058]为实现上述第二个目的，本发明采取的技术方案是：
[0059] -种3-取代丙-2-烯-1-酮类抗耐药真菌化合物，其特征在于，所述的3-取代丙-2-烯-1-酮类抗耐药真菌化合物为：
[0060] 化合物（D 羟基-6-甲氧基苯基)-3-(5-羟甲基呋喃-2-基)丙-2-烯-1- 酮；
[0061 ] 化合物(2): (E)-1-(2_羟基-4-甲氧基苯基)-3_苯基丙-2-烯-1-酮；
[0062] 化合物(3) 羟基-6-甲氧基苯基)-3-(噻吩-2-基)丙-2-烯-1-酮；
[0063] 化合物羟基-6-甲氧基苯基)-3-(呋喃-2-基)丙-2-烯-1-酮；
[0064] 化合物羟基-6-甲氧基苯基)-3-(吡啶-3-基)丙-2-烯-1-酮。
[0065]为实现上述第三个目的，本发明采取的技术方案是：
[0066]如上任一所述3-取代丙-2-烯-1-酮类化合物与氮唑类药物在制备抗耐药真菌药 物中的应用。
[0067] 优选地，所述氮唑类抗真菌药物选自：氟康唑、酮康唑、硫康唑、伊曲康唑或沃利康 唑中的一种或多种。
[0068] 优选地，所述氮唑类抗真菌药物为氟康唑。
[0069]本发明优点在于：
[0070] 本发明公开了一类具有通式I结构的3-取代丙-2-烯-1-酮类化合物及其在制备抗 真菌和协同抗真菌药物中的应用，试验结果表明该类化合物可以与氮唑类抗真菌药物共同 使用，可提高耐药菌对氮唑类药物的敏感性，实现逆转耐药作用，产生协同抗真菌作用。
【具体实施方式】
[0071] 下面结合【具体实施方式】，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发 明而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明公开的内容之后，本领域技术 人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限 定的范围。
[0072] 在某个具体实施例中，式（I)化合物按照药学上可接受的酸合成盐(一种药学上可 接受的盐)来制备，通过化合物的自由碱形式与药学上可接受的无机或有机酸反应，包括但 不限于无机酸，如盐酸，氢溴酸，硫酸，硝酸，磷酸，偏磷酸等;有机酸如乙酸，丙酸，己酸，环 戊基丙酸，乙醇酸，丙酮酸，乳酸，丙二酸，丁二酸，羟基丁二酸，马来酸，反丁烯二酸，对甲苯 磺酸，酒石酸，三氟乙酸，枸橼酸，苯甲酸，3-(4-羟苯甲酰基)苯甲酸，肉桂酸，扁桃酸，芳磺 酸，甲磺酸，乙磺酸，12-乙二磺酸，2-羟基乙磺酸，苯磺酸，2-萘磺酸，4-甲基双环-[2.2.2] 辛-2-烯-1-羧酸，葡庚糖酸，4，4 亚甲基双-(3-羟基-2-烯-1 -羧酸），3-苯基丙酸，三甲基 乙酸，叔丁基乙酸，硫酸十二烷基酯，葡糖酸，谷氨酸，羟萘甲酸，水杨酸，硬脂酸和己二烯二 酸。
[0073] "药学上可接受"这里指一种物质，如载体或稀释液，不会使化合物的生物活性或 性质消失，且相对无毒，如，给予个体某物质，不会引起不想要的生物影响或以有害的方式 与任何其含有的组分相互作用。
[0074] 术语"药学上可接受的盐"指一种化合物的存在形式，该形式不会引起对给药有机 体的重要的刺激，且不会使化合物的生物活性和性质消失。在某些具体方面，药学上可接受 的盐是通过式(I)化合物与酸反应获得，如盐酸，氢溴酸，硫酸，硝酸，磷酸，甲磺酸，乙磺酸， 对甲苯磺酸，水杨酸等。药学上可接受的盐也可通过式 （I)化合物与碱反应形成盐，如铵盐； 碱金属盐，如钠或钾盐;碱土金属盐，如钙或镁盐;有机碱盐，如二环己基胺，N-甲基-D-葡糖 胺，三(羟甲基）甲胺;氨基酸盐，如精氨酸，赖氨酸等。
[0075] 在某些具体实施例中，式(I)化合物被制备为前药。"前药"是指一个试剂在体内转 化为原型药。前药通常是有用的，因为在某种情况下，它们可能比原型药容易给药。他们可 以，例如，通过口服给药而被生物利用，但原型药不行。前药也可以在药学组分上改善原型 药的溶解性。例如，没有限制，前药为式（I)化合物，在水溶性不利于通过细胞膜的情况下， 前药作为酯给药使通过细胞膜更容易，然后通过代谢水解成羧酸，活性实体一旦进入到细 胞中，水溶性就十分有利。更进一步的例子，前药可以是一个短肽(聚氨基酸)连接到一个酸 基团，肽被代谢后展现出活性片段。
[0076]前药通常是药的前体，接下来的给药和吸收被转化为活性物质，或通过一些过程 变为活性更强的种类，如通过代谢途径转化。一些前药具有的化学基团使其活性较低和/或 对比原型药的溶解性或一些其它性质。一旦前药的化学基团被去除和/或对其修饰，得到活 性药。前药通常是有用的，在某些情况下，它们比原型药容易给药。在某种具体实施例中，本 文所述的前药化合物通过口服给药而可以生物利用，但原型药不行。而且，在某些具体实施 例中，本文所述的前药也可以在药学组分上改善原型药的溶解性。
[0077] 术语
[0078]如果无另外说明，用于本发明申请，包括说明书和权利要求书中的术语，定义如 下。必须注意，在说明书和所附的权利要求书中，如果文中无另外清楚指示，单数形式"一 个"包括复数意义。如果无另外说明，使用质谱、核磁、HPLC、蛋白化学、生物化学、重组DNA技 术和药理的常规方法。在本申请中，如果无另外说明，使用"或"或"和"指"和/或"。
[0079]术语"卤素"或"卤化物"指氟，氯，溴或碘。
[0080]术语"键"或"单键"指两个原子间或两个片断间（当通过键来连接的原子被认为是 大结构的一部分时）的化学键。一方面，当本文所述的基团是一个键时，缺少参考基团，允许 在剩余的确定基团间形成一个键。
[0081] 术语"元环"包括任何环状结构。术语"元"意为表示构成环的骨架原子的数量。这 样，如，环己基，吡啶基，吡喃基等是六元环，环戊基，吡咯基，呋喃基和噻吩基是五元环。
[0082] 在某个具体实施例中，所述化合物以溶剂化形式存在，药学上可接受的溶剂如水， 乙醇等。在其它具体实施例中，所述化合物以非溶剂化形式存在。
[0083]特定药学及医学术语
[0084]术语"可接受的"，如本文所用，指一个处方组分或活性成分对一般治疗目标的健 康没有过分的有害影响。
[0085]术语"真菌(fungus;fungi(复)"，如本文所用，指一类单细胞或多细胞微生物。不 含叶绿素，大都能形成硬的多糖细胞壁。属于真核生物，包括真菌门和黏菌门等。
[0086] 本文所用术语"抗真菌药物"指能抑制或杀灭真菌的药物。包括传统的抗真菌外用 药抗生素和合成药。抗真菌外用药包括但不限于水杨酸、雷琐辛、碘剂、硫黄等;抗生素包括 但不限于灰黄霉素、制霉菌素、两性霉素 B等;合成药包括但不限于咪唑类药物、氟胞嘧啶、 丙烯胺衍生物等。本发明中优选咪唑类药物，包括但不限于氟康唑、克霉唑、益康唑、咪康 唑、硫康唑、酮康唑等。
[0087] 术语"耐药真菌"，如本文所用，指真菌因其固有的抗药能力、自然选择或药物选择 作用下使真菌的抗药能力加强，对抗菌药物敏感性下降，表现为运用液滴稀释法测定的最 低抑菌浓度(MIC8〇)>64μg/ml的菌株，属于高度耐药菌;MIC8Q值介于16-32μg/ml的菌株，属 于中介耐药;MICso值小于8μg/ml的菌株，属于敏感菌株。
[0088] 如本文所用的术语"抗耐药真菌"，指抑制或杀灭耐药真菌的作用。
[0089] 术语"联合给药"或其类似术语，如本文所用，指将几种所选的治疗药物给一个病 人用药，以相同或不同的给药方式在相同或不同的时间给药。
[0090] 术语"协同"、"协同作用"或"增效"，如本文所用，指对原本存在抑制或杀灭真菌的 药物在合用另一种药物时能够增强原来药物抑制或杀灭真菌作用能力的作用，表观上表现 为原来药物的MIC值下降。
[0091] 术语"受试者"或"病人"包括哺乳动物和非哺乳动物。哺乳动物包括但不限于，哺 乳类:人、非人灵长类如猩猩、猿及猴类;农业动物如牛、马、山羊、绵羊、猪;家畜如兔、狗;实 验动物包括啮齿类，如大鼠、小鼠及豚鼠等。非哺乳类动物包括但不限于，鸟、鱼等。在一优 选例中，所选哺乳动物是人。
[0092] 术语"治疗"、"治疗过程"或"疗法"如本文所用，包括缓和、抑制或改善疾病的症状 或状况;抑制并发症的产生;改善或预防潜在代谢综合症;抑制疾病或症状的产生，如控制 疾病或情况的发展；减轻疾病或症状;使疾病或症状减退;减轻由疾病或症状引起的并发 症，或预防或治疗由疾病或症状引起的征兆。
[0093] 如本文所用，某一化合物或药物组合物，给药后，可以使某一疾病、症状或情况得 到改善，尤指其严重度得到改善，延迟发病，减缓病情进展，或减少病情持续时间。无论固定 给药或临时给药、持续给药或断续给药，可以归因于或与给药有关的情况。
[0094]治疗用途
[0095]式I化合物可协同抗真菌药物抵抗耐药真菌。另一方面，式I化合物被用于治疗真 菌感染引起的疾病。一方面，本文更进一步地提供了一种或多种式I化合物在制备治疗真菌 引起的疾病的药物或方法中的用途。另一方面，本文更进一步地提供了一种或多种式I化合 物在制备抗耐药真菌的药物中的用途。
[0096] -方面，真菌引起的疾病包括但不限于各种真菌性脑炎、真菌性败血症等系统性 真菌感染和头癣、皮肤癣、毛囊炎、脑膜炎等浅表性真菌感染。
[0097] 另一方面，涉及所述的式（I)化合物或其药学上可接受的盐用于制备制剂，这些制 剂中包括式I化合物和一种或多种抗真菌药物，可用于提高抗真菌药物抵抗耐药真菌的作 用。
[0098] 本发明中化合物用于制备制剂，包括:直接使用化合物或在制备过程中获得的任 一成分使用；用于体外筛选实验中，用来筛选验证用于抵抗上文所述的耐药真菌的种类或 是程度。
[0099] 给药途径：
[0100] 适合的给药途径包括但不限于，口服、静脉注射、直肠、气雾剂、非肠道给药、眼部 给药、肺部给药、经皮给药、阴道给药、耳道给药、鼻腔给药及局部给药。此外，仅作举例说 明，肠道外给药，包括肌肉注射、皮下注射、静脉注射、髓内注射、心室注射、腹膜内注射、淋 巴管内注射、及鼻内注射。
[0101] 在一方面，此处描述的化合物给药方式是局部的而不是全身性的给药方式，例如， 直接将化合物注射至器官，通常用于长效制剂或缓释制剂。在特定的具体实施例中，长效制 剂通过植入给药(例如皮下或肌肉）或通过肌肉注射。此外，在另一具体化实施例中，药物通 过靶向药物给药系统来给药。例如，由器官特异性抗体包裹的脂质体。在这种具体实施例 中，所述脂质体被选择性的导向特定器官并吸收。在其它实施例中，本发明中的化合物以快 速释放，延迟释放或通过中间体释放的途径给药。
[0102] 下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明 而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条 件或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则所有的百分数、比率、比例、或份数按 重量计。
[0103] 本发明中的重量体积百分比中的单位是本领域技术人员所熟知的，例如是指在 1 〇〇毫升的溶液中溶质的重量。
[0104] 除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意 义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本发明方法中。文中 所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用。
[0105] 所示本发明化合物9可以从但不限于从百灵威化学，厉鼎生物科技等公司购得，其 余化合物为本实验室合成化合物。
[0106] 实施例KEX-U-羟基-6-甲氧基苯基)-3-(5-羟甲基呋喃-2-基)丙-2-烯-1-酮 的制备(1)
[0108] 取2_羟基_6_甲氧基基苯乙酬50〇11^(3.〇1]1111〇1)，5-轻甲基咲喃甲酸60〇11^ (3.6mmol)加入到15ml乙醇中，然后加入30%Na0H水溶液，于室温下搅拌反应24~48h后， TLC，反应基本完全后，将反应液倒入冰水中，过滤，固体用水洗涤3次，烘干后闪柱分离，得 到化合物（l)，312mg，产率为38%。
[0109] 1H-NMR:3.95(3H,s,-0CH3),4.69(2H,s,-CH2-)；6.43(2H,m,Ar-H)；6.60(lH,dd,Ji = 8.4Hz j2 = 0.9Hz,Ar-H)；6.66(lH,d ,J = 3.3Hz,Ar-H)；7.38(2H,m,Ar-H)；7.57(lH,d ,J = 15.3Hz,a-H)；7.74(lH,d ,J = 15.3Hz,β-Η)； 13.18( lH,s,-OH) 〇M+ = 275.2〇
[0110] 实施例2(^4-(2-羟基-4-甲氧基苯基)-3-苯基丙-2-烯-i-酮的制备(2)
[0112] 以2-羟基-4-甲氧基苯乙酮和苯甲醛为原料，参照化合物1的合成方法。
[0113] ^-NMRiS.STCSH.s.-OCHs) ,6.49( lH,s) ,6.52( lH,d ,J = 2.4, Ar-H), 7.43(3H,m, Ar-H) ,7.67( lH,d,J= 15.3Hz, Ar-H), 7.65(2H,m,Ar-H) ,7.84(lH,d,J = 9.3Hz) ,7.90( 1H, d，J = 15.3Hz)，13.43(lH，s，-OH).M+ = 255.2。
[0114] 实施例3(^4-(2-羟基-6-甲氧基苯基)-3-(噻吩-2-基)丙-2-烯-1-酮的制备(3)
[0116] 以2-羟基-6-甲氧基苯乙酮和噻吩甲醛为原料，参照化合物1的合成方法。
[0117] 1H-NMR:3.07(3H,s,-0CH3),6.43(lH,dd ,Ji = 1.2 j2 = 8.4,Ar-H),6.61(lH,dd ,Ji = 0.9 J2 = 8.1, Ar-H), 7.10( lH,m, Ar-H), 7.35(2H,m, Ar-H), 7.41( lH,m, Ar-H), 7.71( 1H, d ,J = 15.3),7.75(lH,d ,J = 15.3),13.18(lH,s,-OH)〇M+ = 261. 2〇
[0118] 实施例4(^4-(3,5-二溴-2,4-二羟基苯基)-3-苯基丙-2-烯-1-酮的制备(4)
[0120] 以2,4_二羟基-3,5-二溴苯乙酮为原料与苯甲醛反应，参照化合物1的合成方法。
[0121] 1H-NMR:6.53(lH,s,-OH),7.46(lH,s),7.47(2H,m),7.51(2H,d ,J=15.6Hz),7.69 (2H,m),7.98(2H,d ,J = 15.6Hz),14.10(lH,s,-OH)〇M+ = 398.9
[0122] 实施例5(^4-(2-羟基-6-甲氧基苯基)-3-(3,4-亚甲二氧基苯基)丙-2-烯-1-酮 的制备(5)
[0124] 以2-羟基-6-甲氧基苯乙酮和3,4_亚甲二氧基苯甲醛为原料，参照化合物1的合成 方法。
[0125] 4-^^:3.96(311,8,-0013),6.04(211,8,-00120-),6.43(111,(1,1 = 8.41^),6.62 (lH,d,J = 8.4Hz) ,6.85(lH,d,J = 7.8Hz),7.12(lH,d,J= 10.2Hz),7.34(lH,d,J = 8.4Hz), 7.71(lH,d ,J = 15.2Hz),7.78(lH,d ,J = 15.2Hz),13.18(H,s,-OH)〇M+ = 299.3〇
[0126] 实施例6(^4-(2-羟基苯基)-3-(4-溴苯基)丙-2-烯-1-酮的制备(6)
[0128] 以2-羟基苯乙酮和对溴苯甲醛为原料，参照化合物1的合成方法。
[0129] = = = 7.8,Ar-H),7.53(2H,d ,J = 8.4,Ar-H),7.58(2H,d ,J = 8.4,Ar-H),7.65(lH,d ,J=15.6,Ar-H) ,7.85(lH,d,J=15.6,Ar-H),7.91(lH,dd,Ji = 7.8 j2=1.2,Ar-H),12.73(lH,s,-OH).M+ = 317.18。
[0130] 实施例7(^4-(2-羟基苯基)-3-(5-轻甲基呋喃-2-基)丙-2-烯-1-酮的制备(7)
[0132] 以2-羟基苯乙酮和羟甲基呋喃甲醛为原料，参照化合物1的合成方法。
[0133] 1H-NMR:4.72(2H,s,-CH2-)；6.46(lH,d ,J = 3.3Hz, Ar-H)； 6.74( lH,d,J = 3.3Hz, Ar-H)；6.96(lH,q,Ji = 8.1Hzj2 = 1.2Hz,Ar-H)；7.03(lH,ddJi = 8.1Hzj2 = 1.2Hz,Ar-H)；7.50(lH,t Ji = 8.1Hz,J2=1.2Hz, Ar-H)； 7.56( lH,d,J= 15.0Hz, Ar-H)； 7.66( lH,d,J = 15.0Hz，Ar-H) ;7.95(1H,dd, Ji = 8.1Hz J2 = 1.2Hz，Ar-H) ;12.92(lH，s,-OH)。矿=244.8。
[0134] 实施例氟苯基)-3-(4-二甲氨基苯基)丙-2-烯-1-酮的制备(8)
[0136] 以2-氟苯乙酮和对二甲氨基苯甲醛为原料，参照化合物1的合成方法。
[0137] 1H-NMR:3.05(6H,s,-N(CH3)2) ,6.68(2H,d,J = 9.0,Ar-H),7.15(lH,d,J=15.6, Ar-H) ,7.18(2H,m, Ar-H) ,7.47( lH,m, Ar-H) ,7.52(2H,d,J = 9.0, Ar-H), 7.70( lH,d,J = 15.6,Ar-H,7.78(lH,m,Ar-H)〇M+ = 270.7
[0138] 实施例9(^4-(2-羟基-6-甲氧基苯基）-3-(呋喃-2-基）丙-2-烯-1-酮的制备 (10)
[0140] 以2-羟基-6-甲氧基苯乙酮和呋喃甲醛为原料，参照化合物1的合成方法。
[0141] 匪R:3.95(3H，s，-0CH3)，6.42(lH，d，J = 8.1，Ar-H)，6.52(lH，m，Ar-H)，6.20 (lH,dd ,Ji = 0.9 ,J2 = 8.4,Ar-H) ,6.71 (lH,d ,J = 3.6 ,Ar-H), 7.36( lH,m,Ar-H), 7.53( 1H, s),7.60(lH,d ,J = 15.3Hz),7.76(lH,d ,J = 15.3Hz),13.22(lH,s,-OH).M+ = 245.3〇
[0142] 实施例羟基-6-甲氧基苯基)-3-(吡啶-3-基）丙-2-烯-1-酮的制备 (11)
[0144] 以2-羟基-6-甲氧基苯乙酮和3-吡啶甲醛为原料，参照化合物1的合成方法。
[0145] H-NMR:3.96(3H，s，-0CH3)，6.44(lH，dd，J = 8.4，Ar-H) ,6.63(lH，dd，Ji = 0.9，j2 = 8.4,Ar-H) ,7.36(lH,m,Ar-H) ,7.40(lH,d,J = 8.4,Ar-H) ,7.76(lH,d,J= 15.3Hz,Ar-H), 7.89(lH,m,Ar-H),7.90(lH,d ,J= 15.3Hz), 7.76( lH,d,J= 15.2Hz), 8.62( lH,d,J = 3.6Hz, Ar-H),8.87(lH,s,Ar-H),13.02(lH,s,-OH).[M+H]+=256.2〇
[0146] 实施例羟基苯基)-3-(4-氟苯基)丙-2-烯-1-酮的制备（12)
[0148] 以2-羟基-苯乙酮和4-氟甲醛为原料，参照化合物1的合成方法。
[0149] 咕-匪1?(60010^，0)(：13,3，？？111):6.95(1!1，^ = 8.4，八『-!〇，7.03(lH，dd，Ji = 8.4， J2 = l .2, Ar-H) ,7.13(2H,d,J = 8.4, Ar-H) ,7.51( lH,t,J = 8.4, Ar-H) ,7.58( lH,d,J = 15.6,Ar-H),7.66(2H,d ,J = 8.4,H-2,6),7.89(lH,d ,J=15.6,Ar-H),7.91(lH,dd ,J = 8.4, J = 1.2,H-6),12.77(lH,s,-OH).ESI-MS m/z 243.58[M+H] + 〇
[0150] 实施例12(E)-1-(2-羟基苯基)-3-(3,4-亚甲二氧基苯基）丙-2-烯-1-酮的制备 (13)
[0152] 以2-羟基-苯乙酮和3,4_亚甲二氧基苯甲醛为原料，参照化合物1的合成方法。
[0153] 1H-Mffi(300MHz，CDCl3，ppm，J/Hz):6.06(2H，s，-0CH20-)，6.87(lH，d，J = 8.1，Ar- H) ,6.95(lH，t，J = 8.1，Ar-H)，7.03(lH，dd，Ji = 8.1，J2 = 0.9，Ar-H H-3)，7.17(lH，dd，Ji = 8.1 ,J2 = 1.5,Ar-H) ,7.20(lH,d,J= 1.5,Ar-H) ,7.50(lH,d,J= 15.3,Ar-H),7.51(lH,t,J = 8.1,Ar-H),7.87(lH,d ,J= 15.3,Ar-H), 7.92( lH,dd,Ji = 8.1j2 = 1.5, Ar-H), 12.92( 1H, s,-〇H).ESI-MS m/z 269.56[M+H]+〇
[0154] 实施例13(E)-1-(2-氯苯基)-3-(3,4-亚甲二氧基苯基)丙-2-烯-1-酮的制备（14)
[0156] 以2-氯苯乙酮和3,4_亚甲二氧基苯甲醛为原料，参照化合物1的合成方法。
[0157] iH-Mfl^eOOMHz.CDChJjpmJ/Hzhe.OSUH.srOafeO-he.SSaHJ:?』， Ar-H) ,6.96(lH,d,J = 15.6,Ar-H),7.02(lH,dd,Ji = 7.8,J2 = 1.2,Ar-H) ,7.09(lH,d,J = 1.2，Ar-H)，7.35(lH，t，J = 7.8，Ar-H)，7.37(lH，d，J=15.6，Ar-H)，7.40(lH，t，J = 7.8，Ar-H),7.46(2H,d,J = 7.8,Ar-H).ESI-MS m/z 287.56[M+H] + 〇
[0158] 实施例氨基苯基)-3-(3,4-二甲氧基苯基)丙-2-烯-1-酮的制备（15)
[0160]以邻氨基苯乙酮和3,4_二甲氧基苯甲醛为原料，参照化合物1的合成方法。
[0161] H-NMR(300MHz，CDCl3，S，ppm，J/Hz):3.92(3H，s，-0CH3)，3.95(3H，s，-0CH 3)，6.33 (2H,br. s,-NH2), 6.70(2H,m, Ar-H), 6.89( 1H, d,J = 8.1, Ar-H), 7.14( lH,d,J= 1.8, Ar-H), 7.21(lH,dd Ji = 8.1J2 = 1.8,Ar-H),7.28(lH,m,Ar-H) ,7.48(lH,d,J=15.6,Ar-H) ,7.70 (lH，dJ = 15.6，Ar-H)，7.87(lH，dd，Ji = 8.1j2 = 1.2，Ar-H).ESI-MS m/z 282.5[M-H] -〇
[0162] 实施例15:应用棋盘式稀释法体外药敏实验测试式I化合物协同氟康唑抗耐药真 菌作用
[0163] -、应用棋盘式稀释法体外药敏实验测试本发明化合物协同氟康唑抗耐药真菌作 用
[0164] 本实施中所用菌种为临床分离得到的耐药白色念珠菌103菌。所有实验用菌均于 沙堡葡萄糖琼脂培养基(SDA)划板活化，于30°C培养2周后，分别挑取单克隆再次划板活化， 取第二次所得单克隆置SDA斜面，于30°C培养2周后在4°C下保存。培养液为RPMI 1640液体 培养液，均按照标准方法进行培养前处理。抗真菌药物氟康唑注射液由大连辉瑞药业有限 公司提供；二甲亚砜（DMS0)购置于中国医药集团上海化学试剂公司。所用的仪器有 Multiskan MK3型酶标检测仪(芬兰Labsystems);隔水式电热恒温培养箱(上海跃进医疗器 械厂）；MJX型智能菌酶培养箱（宁波江南仪器厂）；THZ-82A台式恒温振荡器(上海跃进医疗 器械厂）；SW-CT-IF型超净化工作台（苏州安泰空气技术有限公司）；倒置显微镜(Amersham Pharmacia);微量加样器(芬兰Finnpette) ;96孔细胞培养板(丹麦Nunclon公司）。
[0165] 1实验步骤 [0166] 1.1真菌悬液的配置
[0167] 实验前，用接种圈从4°C保存的SDA培养基上挑取耐药白色念珠菌103菌、100菌、 J28菌、953菌少量，接种至lml YEH)培养液，于30°C，200rpm振荡培养，活化16h，使真菌处于 指数生长期后期。取该菌液至lml YEH)培养液中，用上述方法再次活化，16h后，用血细胞计 数板计数，以RPMI 1640培养液调整菌液浓度至1 X 103-5 X 103CFU/ml。
[0168] 1.2药敏反应板的制备
[0169] 取无菌96孔板，于每排1号孔加 RPMI 1640液体培养基100μΙ作空白对照;3-12号孔 各加新鲜配制的菌液1〇〇μ1; 2号孔加菌液160μ1和受试化合物溶液40μ1; 12号孔不含药物， 只加菌液100μΙ作阳性生长对照。2-11号孔进行倍比稀释，使各孔的最终药物浓度分别为 64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25和0.125以 8/!111，各孔中0130含量均低于1%。每次配制药敏板 的同时均制备一块质控菌药敏板(质控菌:根据NCCLS Μ27-Α方案的建议，我们采用近平滑 念珠菌ATCC18062为质控菌，每次配制药敏板的同时均制备一块质控菌药敏板，其MIC参考 值如下:氟康唑(FCZ) :MIC8q值0.25-1.0μg/ml; AmB:MIC值0.5-2.0μg/ml。每次试验以此菌株 为参照菌株，只有当其MIC8Q值界于上述范围时，方认为试验操作准确可靠。如同时试验菌株 生长良好，则可认为试验成功，结果可接受。各药敏板于30°C恒温箱培养。
[0170] 1.3体外药敏实验方法的选取
[0171 ]选择棋盘式微量稀释法对本发明的化合物协同氟康唑体外抗耐药真菌活性进行 评价。棋盘式微量稀释法是体外药敏实验的延伸，即合用的两种药物于96孔板上以二维棋 盘的纵(A至H)横(2至11)两方向分别进行二倍的倍比稀释。例如化合物1与一种抗真菌药物 氟康唑合用后，使得氟康唑的终浓度为128、64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25和0.125μg/ml，化 合物1的终浓度为64、32、16、8、4、2、lμg/ml。实验所用试剂、药物、实验操作步骤同上述体外 药敏实验。
[0172] 1.4评价标准
[0173] 部分抑菌浓度指数（fractional inhibitory concentration index，FICI)是评 价联合用药的两药相互作用方式的主要参数。抑菌浓度分数(FIC)，分别为每一种药物联合 抑菌时所需最低抑菌浓度(MIC)与单用时MIC的比值.而FIC指数(FICI)则等于两种药物FIC 之和。当MIC值高于检测最高限时以最高限浓度的两倍值用以计算FICI。很多文献报道当 FICI < 0.5时两药的相互作用确定为协同作用，且FIC指数越小，协同作用越强;0.5〈FICI < 1时两药的相互作用确定为相加作用；1〈FICI < 4时为无关作用；当FICIM时两药产生拮抗 作用。本次试验选用目前国外期刊采用的最新标准：当FICIS 0.5时，两药的相互作用确定 为协同作用;〇. 5〈FICI < 4时为无关作用；当FICIM时两药产生拮抗作用。
[0174] 1.5测试结果
[0175] 结果见表1，从表中可以看到，本发明的化合物对氟康唑产生耐药的白色念珠菌 103菌有明显的协同作用。
[0176] 表1本发明化合物结构及其与氟康唑协同抗耐药真菌FICI值
[0177]
[0179] [a]MIC8Q值[yg/mL]为式I中化合物与氟康唑8.0yg ml/1联合用药的MIC8〇值。
[0180] 以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人 员，在不脱离本发明方法的前提下，还可以做出若干改进和补充，这些改进和补充也应视为 本发明的保护范围。
【主权项】
1. 一种具有协同作用抗耐药真菌的药物组合物，其特征在于，包括氮挫类抗真菌药物、 3-取代丙-2-締-1-酬类化合物或其在药学上可接受的盐或水合物，所述的3-取代丙-2-締-1-酬类化合物的结构如式I所示；所述Ri选自苯基、径基取代苯基、甲氧基取代苯基、二甲氨基取代苯基、面代苯基、巧喃 基、亚甲二氧基取代苯基，径甲基取代巧喃基、嚷吩基或化晚基； 所述化选自氨、径基、甲氧基、氨基、氯或氣； 所述化选自氨或漠； 所述R4选自氨、径基或甲氧基； 所述化选自氨或漠； 所述Rs选自径基、甲氧基、氨、氨基或面素。2. 根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于， 所述Ri选自苯基、径基取代苯基、甲氧基取代苯基、二甲氨基取代苯基、面代苯基、巧喃 基、亚甲二氧基取代苯基，径甲基取代巧喃基、嚷吩基或化晚基； 所述R2选自氨或径基； 所述化选自氨或漠； 所述R4选自氨、径基或甲氧基； 所述化选自氨或漠； 所述Rs选自径基、甲氧基、氨、氨基、氣或氯。3. 根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于， 所述化选自亚甲二氧基取代苯基、径甲基取代巧喃基、嚷吩基或化晚基； 所述R2选自氨或径基； 所述化选自氨或漠； 所述R4选自径基或甲氧基； 所述化选自氨或漠； 所述Rs选自甲氧基、氨基、氣或氯。4. 根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述的3-取代丙-2-締-1-酬类化合 物为： 化合物（1):巧)-1-(2-?基-6-甲氧基苯基)-3-巧-径甲基巧喃-2-基)丙-2-締-1-酬； 化合物(2):巧)-1-(2-?基-4-甲氧基苯基)-3-苯基丙-2-締-1-酬； 化合物(3):巧)-1-(2-?基-6-甲氧基苯基)-3-(嚷吩-2-基)丙-2-締-1-酬； 化合物(4):巧)-1-(3,5-二漠-2,4-二径基苯基)-3-苯基丙-2-締-1-酬； 化合物巧）：巧)-1-(2-?基-6-甲氧基苯基)-3-(3,4-亚甲二氧基苯基)丙-2-締-1-酬； 化合物(6):巧)-1-(2-?基苯基)-3-(4-漠苯基)丙-2-締-1-酬； 化合物(7):巧)-1-(2-?基苯基)-3-巧-径甲基巧喃-2-基)丙-2-締-1-酬； 化合物(8):巧)-1-(2-氣苯基)-3-(4-二甲氨基苯基)丙-2-締-I-酬； 化合物(9):巧)-1-(2,4-二径基苯基)-3-(4-?基苯基)丙-2-締-1-酬； 化合物（1〇):巧)-1-(2-径基-6-甲氧基苯基)-3-(巧喃-2-基)丙-2-締-1-酬； 化合物（11):巧)-1-(2-径基-6-甲氧基苯基)-3-(化晚-3-基)丙-2-締-1-酬； 化合物（12):巧)-1-(2-径基苯基)-3-(4-氣苯基)丙-2-締-1-酬； 化合物（13):巧)-1-(2-径基苯基)-3-(3,4-亚甲二氧基苯基)丙-2-締-1-酬； 化合物（14): (E)-I-U-氯苯基)-3-(3,4-亚甲二氧基苯基)丙-2-締-1-酬;或 化合物（15): (E)-1-(2-氨基苯基)-3-(3,4-二甲氧基苯基)丙-2-締-1-酬。5. 根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述的3-取代丙-2-締-1-酬类化合 物为： 化合物（1):巧)-1-(2-?基-6-甲氧基苯基)-3-巧-径甲基巧喃-2-基)丙-2-締-1-酬； 化合物(2):巧)-1-(2-?基-4-甲氧基苯基)-3-苯基丙-2-締-1-酬； 化合物(3):巧)-1-(2-?基-6-甲氧基苯基)-3-(嚷吩-2-基)丙-2-締-1-酬； 化合物(4):巧)-1-(3,5-二漠-2,4-二径基苯基)-3-苯基丙-2-締-1-酬； 化合物巧）：巧)-1-(2-?基-6-甲氧基苯基)-3-(3,4-亚甲二氧基苯基)丙-2-締-1-酬； 化合物(6):巧)-1-(2-?基苯基)-3-(4-漠苯基)丙-2-締-1-酬； 化合物(7):巧)-1-(2-?基苯基)-3-巧-径甲基巧喃-2-基)丙-2-締-1-酬； 化合物(8):巧)-1-(2-氣苯基)-3-(4-二甲氨基苯基)丙-2-締-1-酬； 化合物(9):巧)-1-(2,4-二径基苯基)-3-(4-?基苯基)丙-2-締-1-酬； 化合物（1〇):巧)-1-(2-径基-6-甲氧基苯基)-3-(巧喃-2-基)丙-2-締-1-酬； 化合物（11):巧)-1-(2-径基-6-甲氧基苯基)-3-(化晚-3-基)丙-2-締-1-酬。6. 根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述氮挫类抗真菌药物选自：氣康 挫、酬康挫、硫康挫、伊曲康挫或沃利康挫中的一种或多种。7. -种抗耐药真菌的药物组合物，其特征在于，包含治疗有效量的一种或多种权利要 求1-6任一所述的药物组合物及其药学上可接受的赋形剂、载体或稀释剂。8. 权利要求1-6任一所述的3-取代丙-2-締-1-酬类化合物与氮挫类药物在制备抗耐药 真菌药物中的应用。9. 根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述的氮挫类药物选自：氣康挫、酬康挫、 硫康挫、伊曲康挫或沃利康挫中的一种或多种。10. -种3-取代丙-2-締-1-酬类抗耐药真菌化合物，其特征在于，所述的3-取代丙-2-締-1-酬类抗耐药真菌化合物为： 化合物（1):巧)-1-(2-?基-6-甲氧基苯基)-3-巧-径甲基巧喃-2-基)丙-2-締-1-酬； 化合物(2):巧)-1-(2-?基-4-甲氧基苯基)-3-苯基丙-2-締-1-酬； 化合物(3):巧)-1-(2-?基-6-甲氧基苯基)-3-(嚷吩-2-基)丙-2-締-1-酬； 化合物（1〇):巧)-1-(2-径基-6-甲氧基苯基)-3-(巧喃-2-基)丙-2-締-1-酬； 化合物（11):巧)-1-(2-径基-6-甲氧基苯基)-3-(化晚-3-基)丙-2-締-1-酬。
【专利摘要】本发明涉及医药技术领域，具体公开了一类具有通式I结构的3-取代丙-2-烯-1-酮类化合物及其在制备抗真菌和协同抗真菌药物中的应用。该类化合物可以与氮唑类抗真菌药物共同使用，可提高耐药菌对氮唑类药物的敏感性，实现逆转耐药作用，产生协同抗真菌作用。
【IPC分类】A61K31/4406, A61K31/12, C07C49/835, C07D333/22, A61K31/341, C07C225/22, C07D307/46, C07C49/84, A61K31/136, A61K31/381, A61P31/10, C07D317/54, A61K31/36, C07D213/50
【公开号】CN105503788
【申请号】CN201610059112
【发明人】金永生, 刘守炜, 董怀怀, 刘思宇, 王元花, 赵菲, 姜远英
【申请人】中国人民解放军第二军医大学
【公开日】2016年4月20日
【申请日】2016年1月28日
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