一种治疗心脑血管病的药物组合物的制作方法

专利名称：：一种治疗心脑血管病的药物组合物的制作方法
技术领域：
：本发明涉及药物组合物领域，具体涉及一种治疗心脑血管病的药物组合物。
背景技术：
：心脑血管病是指由于脑血管破裂出血或形成血栓而引起的以脑缺血性损伤症状为主要临床表现的疾病，又称脑血管意外或脑卒中，俗称为脑中风。该病常见于中年以上人群的急性发作，其中70%80%的病人是由于脑动脉硬化等原因使脑动脉管腔狭窄，血流减少或完全阻塞，脑部血液循环障碍，脑组织受损而引生的一系列症状(如缺血性脑血管病)，严重者可发生意识障碍和肢体瘫痪，是目前造成人类死亡和残疾的主要疾病。血栓的形成主要有三大要因，即血管壁、血流及血液的病理改变，临床上动脉血栓几乎均是在动脉硬化或动脉粥样硬化的基础上形成的。血液中存在凝固与抗凝固成分，纤溶与抑纤溶成分，当其出现失衡，就会造成已形成的血栓不溶解，持续存在。另外，心血管系统疾病及高血糖、高血脂症均会导致血液粘度增高，加大血流阻力使血流缓慢，极易形成血栓。血栓形成导致血管栓塞，以致脑梗塞、心肌梗塞、冠心病、心绞痛等。针对心脑血管病的形成原因，现有的治疗方法主要为溶栓疗法及脑保护治疗法，但血栓溶解，恢复组织器官血流的同时，将会不同程度的发生再灌注损伤，导致更严重的后果。而目前常用的西药制剂主要是抗凝制剂(以阿斯匹林为代表)和促纤溶制剂(如各种纤溶酶，尿激酶，t-PA等)，中药制剂虽然对心脑血管系统疾病有一定的疗效，但仅对新鲜血栓有较好的疗效，对陈旧性血栓尤其伴有后遗症者，疗效并不是很理想，并且均无法较好的解决溶栓同时所产生的再灌注损伤。银杏叶为银杏科植物银杏Ginkgobiloba的叶，性味苦、涩、平，主要功能为活血化淤、通络活络。银杏叶提取物被广泛用于治疗心脑血管疾病及其后遗症等。现代药理学研究证明，银杏叶提取物具有改善微循环及代谢，清除自由基和抗氧化作用，抗血小板活化因子，抗感染等作用。银杏内酯B(ginkgolideB，GB)是银杏叶提取物的主要活性成分之一，是一类强特异性的血小板活化因子(PAF)拮抗剂，通过抑制PAF功能而抑制缺血所导致的各类异常炎性反应及栓塞形成，抑制自由基的释出，从而保护脊髓组织免受损伤。另外，研究表明，GB可能具有类似生长因子的作用，促进神经细胞的自然生长，并且在许多病理情况下还能减轻神经细胞的损伤和凋亡，发挥明显的神经保护作用。可见，银杏内酯B既能控制炎症又可促进神经再生。三七[Panaxnotoginseng(Burk.)F.H.Chen]始载于《本草纲目》，其主要有效成分为三七总皂苷，具有散瘀止血，消肿定痛的功效，可用于治疗咯血、吐血、衄血、便血、崩漏、外伤出血、胸腹剌痛、跌肿痛等。随着现代医药学研究的发展，发现三七不仅具有良好的止血、活血化瘀、通脉活络双向药理作用，还具有明显的补血作用，能促进血液中红细胞、白细胞、血小板等各类血液细胞分裂生长，增加数目，保持正常水平的作用，同时具有抗血栓、保护心肌和防止脑组织损伤以及扩血管、增加脑及冠脉血流量、降血脂、降血压、镇痛、抗炎、清除自由基等多种药理作用。阿司匹林(Aspirin)又名乙酰水杨酸，是常用的历史悠久的非甾体类抗炎药，具有解热镇痛，消炎抗风湿和抗血小板凝集作用，早期临床用于头痛、风湿热、风湿性关节炎、和痛风症，后来临床上拓展成用于心脑血管病一级预防的抗血小板药物，同时对于心肌梗死和缺血性血管病的二级预防也有效。一般小剂量的阿司匹林可用于预防心脑血管病和短暂性缺血性疾病的发作，如脑血栓、冠心病、心肌梗死等。
发明内容本发明提供了一种治疗心脑血管病的药物组合物，利用银杏叶提取物、三七提取物和阿司匹林三者的协同作用，能有效改善脑梗塞、心肌梗塞后的心脑血管循环，扩张心脑血管，增加心脑血流量，同时能有效改善微循环，减轻脑梗塞，心肌梗塞后缺血再灌注引起的损伤。—种治疗心脑血管病的药物组合物，由以下重量百分比的原料组成银杏叶提取物0.1%99.8%、三七提取物0.1%99.8%和阿司匹林0.1%99.8%。为了达到更好地治疗效果，优选所述的治疗心脑血管病的药物组合物优选由以下重量百分比的原料组成银杏叶提取物15%35%、三七提取物15%35%和阿司匹林30%70%;进一步优选由以下重量百分比的原料组成银杏叶提取物15%、三七提取物15%和阿司匹林70%，或者由以下重量百分比的原料组成银杏叶提取物33.0%、三七提取物34.0%和阿司匹林33.0%，或者由以下重量百分比的原料组成银杏叶提取物26%、三七提取物26%和阿司匹林48%。所述的银杏叶提取物中总黄酮的重量百分含量为24%90%，白果总内酯的重量百分含量6%50%，总银杏酸重量含量小于10卯m。所述的银杏叶提取物可采用市售产品，也可自行制备，其制备方法可参照2005版《中华人民共和国药典》中的记载，具体包括步骤取银杏叶粉碎后用乙醇提取，提取液回收乙醇并浓縮后加于大孔吸附树脂柱上，依次用水和乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，回收乙醇，干燥，即得银杏叶提取物。所述的三七提取物中三七总皂甙的重量百分含量为55%90%。所述的三七提取物可采用市售产品，也可自行制备，其制备方法，包括步骤取三七粉碎，用乙醇提取，提取液回收乙醇后加水，冷藏24小时，滤过，滤液加于用乙醇浸泡处理好的大孔吸附树脂柱上，依次用水和乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，回收乙醇，干燥，即得三七提取物。所述的治疗心脑血管病的药物组合物可以按照现有技术制备成片剂、胶囊剂、滴丸剂、颗粒剂、栓剂等现有药物剂型中的任何一种剂型。所述的阿司匹林符合《中华人民共和国药典》中阿司匹林的质量标准即可。本发明具有如下有益效果与现有的治疗心脑血管病的药物相比，本发明的药物组合物利用银杏叶提取物、三七提取物和阿司匹林三者的协同作用，具体来讲，是将银杏叶中的总黄酮、白果总内酯等成分，三七中的三七总皂甙等成分加阿司匹林能充分发挥中药复方多途径，多靶点的协同作用，能有效改善脑梗塞、心肌梗塞后心脑血管循环，扩张心脑血管，增加心脑血流量，同时能有效改善微循环，减轻脑梗塞，心肌梗塞后缺血再灌注引起的更严重的损伤。经试验发现，在服用剂量下降一倍的情况下，本发明的药物组合物比单用同剂量银杏叶提取物、单用同剂量三七提取物、单用同剂量阿司匹林、单用同剂量银杏叶提取物加三七提取物、单用同剂量银杏叶提取物加阿司匹林或单用同剂量三七提取物加阿司匹林对脑缺血脑梗塞的治疗效果均有很大提高，可见，将银杏叶提取物、三七提取物和阿司匹林配伍合用有很好的协同作用，疗效得到显著提高。另外，本发明的药物组合物在增强疗效的同时，服用剂量大大减少，降低了药物的毒性，增加了用药的安全性。具体实施例方式实施例16取干燥的银杏叶粉碎后用乙醇提取，提取液回收乙醇并浓縮后加于用乙醇浸泡处理过的大孔吸附树脂柱上，依次用水和乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，回收乙醇，干燥，即得银杏叶提取物。经检测，银杏叶提取物中总黄酮的重量百分含量为26%，白果总内酯的重量百分含量6.5%，总银杏酸的重量百分含量为5ppm。取三七粉碎，加乙醇，回流提取3次，每次2小时，提取液回收乙醇至无乙醇味，加水至每毫升相当于2克原药材，冷藏24小时，滤过，滤液加于已用乙醇浸泡处理好的大孔吸附树脂柱上，处理过程为用乙醇浸泡48小时，装柱，用乙醇洗脱至洗脱液加5倍量水不出现混浊。依次用水和乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，回收乙醇，干燥，即得三七提取物。经检测，三七总皂甙的重量百分含量为58%。将上述银杏叶提取物、三七提取物和阿司匹林按表1中的配比混合均匀后即得治疗心脑血管病的药物组合物。表1<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>银杏叶提取物、三七提取物和阿司匹林配伍对大鼠脑缺血再灌注保护作用的实验研究根据脑中风中药新药药效学研究指南原则的要求，需要进行与功能主治有关的主要药效学试验以大鼠大脑局灶性脑缺血损伤再灌注模型，确定银杏叶提取物、三七提取物和阿司匹林组分的最佳配伍剂量，证明其对心脑血管病的治疗协同作用。1.材料1.l试验动物SD大鼠，清洁级，雄性，体重240士20g，由浙江省实验动物中心提供，合格证号SCXK(浙)2008-0033。1.2药品与试剂1号组银杏叶提取物，按SD大鼠的服用剂量分为30.0mg/kg、15.0mg/kg，2个剂量组；2号组三七提取物，按SD大鼠的服用剂量分为30.0mg/kg、15.0mg/kg，2个剂量组；3号组阿司匹林，按SD大鼠的服用剂量分为15.0mg/kg、7.5mg/kg，2个剂量组；4号组银杏叶提取物和三七提取物(重量比为1:1)的混合物，按SD大鼠的服用剂量设置15mg/kg，1个剂量组；5号组银杏叶提取物和阿司匹林(重量比为l:1)的混合物，按SD大鼠的服用剂量设置15mg/kg，1个剂量组；6号组三七提取物和阿司匹林(重量比为l:1)的混合物，按SD大鼠的服用剂量设置15mg/kg，1个剂量组；实施例1组取实施例1制备的药物组合物，按SD大鼠的服用剂量设置15mg/kg1个剂量组；实施例2组取实施例2制备的药物组合物，按SD大鼠的服用剂量设置15mg/kg1个剂量组；实施例3组取实施例3制备的药物组合物，按SD大鼠的服用剂量设置15mg/kg1个剂量组。红四氮唑(TTC)，华东师范大学化工厂生产，批号20081217;K2HP04，成都东金化学试剂有限公司生产，批号20070615;水合氯醛，国药集团化学试剂有限公司生产，批号T20070919;甲醛，衢州巨化试剂有限公司生产，批号20080401;碘伏消毒液，南昌健宝防疫用品厂生产，批号20080908。超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)试剂盒均由南京建成生物工程研究所提供，批号分别为20090924，20090924。1.3实验仪器HZ-9212S恒温振荡器，太仓市科教器材厂产品；PB1501-L型电子天平，梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司产品；AL104型电子天平，梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司产品。2.试验方法参照新药药理学研究方法(吕秋军主编，化学工业出版社，2007，239-240)和常用医药研究动物模型(苗明三、朱飞鹏主编，人民卫生出版社，2007，111-112)。2.1分组与给药将SD大鼠随机分为14组，每组10只即假手术组，模型组，1号组30mg/kg组、1号组15mg/kg，2号组30mg/kg、2号组15mg/kg，3号组15mg/kg、3号组7.5mg/kg，4号组，5号组，6号组，实施例1组，实施例2组及实施例3组。灌胃给药，每日一次，给药3次后lh造模，造模后再给药一次，假手术组与模型组给予等容量的蒸馏水。62.2大脑中动脉缺血再灌模型(MCA0)的制备大鼠腹腔注射10%的水合氯醛溶液进行麻醉(350mg/kg)，仰卧固定，分离右侧颈总动脉(CCA)、颈内动脉(ICA)及颈外动脉(ECA)，结扎ECA与CCA，用动脉夹夹闭ICA远心端后，迅速于距ECA与ICA分叉处约0.5cm的颈总动脉处作一切口，插入一端加热成光滑球形的尼龙线，插入深度为18±0.5mm，实现大脑中动脉阻塞导致脑缺血。结扎入口处，尼龙线外留约lcm，缝合皮肤，2小时后轻轻提拉所留线头至略有阻力以实现大脑中动脉再灌注，即为脑缺血再灌模型(MCAO)组，简称模型组。假手术组除了只结扎右侧CCA，其余操作均同模型组。2.3神经功能评分(即神经症状分值)于术后6h对大鼠行为障碍进行评分0分代表无神经功能缺失，活动正常；1分代表不能完全伸展左侧前爪；2分代表爬行时出现左侧转圈(追尾征)；3分代表行走时身体向右侧到；4分代表不能行走，意识丧失。2.4脑缺血梗死面积测定于术后24h断头取脑，去掉嗅球、小脑和低位脑干后，取手术侧大脑，在fC冠状切为5片，并迅速将脑片置于TTC染液中，37t:避光温孵30分钟，取出后置于10%甲醛液中避光保存24h。经染色后非梗死区为玫瑰红色，梗死区为白色。将白色组织仔细挖下称重，以梗死组织重量占全脑重量的百分比作为脑梗死范围，计算公式如下脑梗死范围(％)-(、g)x画全脑篁重(g)2.5血清S0D、MDA测定术后24小时大鼠麻醉腹主动脉取血，3500r/min离心10min后，取上清30yL，按SOD测定试剂盒说明测定血清SOD活力。取上清0.lmL，按MDA测定试剂盒说明测定血清MDA含量。3.统计数据采用SPSS统计软件进行分析，用；±s表示，组间比较用t检验进行显著性检验。4.结果4.1对脑缺血再灌模型(MCAO)大鼠脑梗死范围及神经症状的影响术后6h，假手术组未见行为异常改变，MCAO模型组大鼠在术后6h，出现偏瘫样症状，主要表现为出现同侧霍纳综合(Horner)征、自发瘫痪侧旋转、提起尾巴对侧前肢无力屈曲、反抗力减弱等。给药各组术后6h其神经症状与模型组比较差异显著，均有不同程度的改善，其中3号30.Omg/kg组(P<0.01)、3号15.Omg/kg组、实施例1组、实施例2组及实施例3组(P<0.05)与模型组比较差异显著，各组症状结果见表2。术后24h，模型组大鼠脑组织梗塞灶(即脑梗死范围)可达全脑重量的19.1%，与模型组相比，1号组30mg/kg、实施例1组，实施例2组及实施例3组对降低大鼠脑梗塞程度有非常显著性差异(P<0.01)，1号组15mg/kg;3号组15.0mg/kg、7.5mg/kg;5号组、6号组对大鼠脑梗塞程度减轻具有显著性差异(P<0.05)，结果见表2。表2对MCAO大鼠脑梗死范围及神经症状的影响G±s)<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>注与模型组比较，**表示P<0.01，*表示P<0.05。结论从表2可看出，实施例1组、实施例2组和实施例3组的大鼠在服用剂量较小的前提下脑梗死范围明显较小，相比其它各组，其大鼠梗塞程度减轻的效果最为理想，且与模型组相比均具有显著差异(P<0.01)。同时，从实施例1组、实施例2组和实施例3组大鼠的神经症状分值也可以看出，本发明的药物组合物对于减轻心脑血管病症状有很好的效果。4.2对脑缺血再灌模型(MCA0)大鼠血清S0D活力及MDA含量的影响模型组血清SOD活力与假手术组比较其活性明显降低(P<0.05)，其他各给药剂量组与模型组比较SOD活力明显升高(P〈0.01或P〈0.05)。本次试验模型组大鼠血清MDA含量与假手术组比较无明显差异，其他各给药组除4号组外与模型组比较无明显差异，结果见表3。_表3对MCA0大鼠血清S0D活力及MDA含量的影响G±s)<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>注与模型组比较，**表示P<0.01，*表示P<0.05。5.结论上述试验结果表明本发明的药物组合物，在服用剂量减小一倍的情况下，比单用同剂量银杏叶提取物、单用同剂量三七提取物、单用同剂量阿司匹林、单用同剂量银杏叶提取物加三七提取物、单用同剂量银杏叶提取物加阿司匹林或单用同剂量三七提取物加阿司匹林对减轻脑缺血再灌模型(MCA0)大鼠神经症状损伤，减少脑梗死面积范围，提高血清S0D活力，对脑缺血有更好的保护作用。由此可见，将银杏叶提取物、三七提取物和阿司匹林配伍合用有很好的协同作用，对脑缺血脑梗塞的治疗效果均有显著提高。另外，本发明的药物组合物在增强疗效的同时，服用剂量大大减少，降低了药物的毒性，增加了用药的安全性。权利要求一种治疗心脑血管病的药物组合物，其特征在于，由以下重量百分比的原料组成银杏叶提取物0.1％～99.8％、三七提取物0.1％～99.8％和阿司匹林0.1％～99.8％。2.根据权利要求1所述的治疗心脑血管病的药物组合物，其特征在于，由以下重量百分比的原料组成银杏叶提取物15%35%、三七提取物15%35%和阿司匹林30%70%。3.根据权利要求2所述的治疗心脑血管病的药物组合物，其特征在于，由以下重量百分比的原料组成银杏叶提取物15%、三七提取物15%和阿司匹林70%。4.根据权利要求2所述的治疗心脑血管病的药物组合物，其特征在于，由以下重量百分比的原料组成银杏叶提取物33.0%、三七提取物34.0%和阿司匹林33.0%。5.根据权利要求2所述的治疗心脑血管病的药物组合物，其特征在于，由以下重量百分比的原料组成银杏叶提取物26%、三七提取物26%和阿司匹林48%。6.根据权利要求15任一项所述的治疗心脑血管病的药物组合物，其特征在于，所述的银杏叶提取物中总黄酮的重量百分含量为24%90%，白果总内酯的重量百分含量6%50%，总银杏酸重量含量小于10卯m。7.根据权利要求15任一项所述的治疗心脑血管病的药物组合物，其特征在于，所述的三七提取物中三七总皂甙的重量百分含量为55%90%。8.根据权利要求15任一项所述的治疗心脑血管病的药物组合物，其特征在于，所述的三七提取物由三七粉碎后用乙醇提取，提取液回收乙醇并浓縮后加于大孔吸附树脂柱上，依次用水和乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，回收乙醇后干燥制得。9.根据权利要求15任一项所述的治疗心脑血管病的药物组合物，其特征在于，所述的银杏叶提取物由银杏叶粉碎后用乙醇提取，提取液回收乙醇并浓縮后加于大孔吸附树脂柱上，依次用水和乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，回收乙醇后干燥制得。10.根据权利要求15任一项所述的治疗心脑血管病的药物组合物，其特征在于，所述的药物组合物制成片剂、胶囊剂、滴丸剂、颗粒剂、栓剂中的任何一种剂型。全文摘要本发明公开了一种治疗心脑血管病的药物组合物，由以下重量百分比的原料组成银杏叶提取物0.1％～99.8％、三七提取物0.1％～99.8％和阿司匹林0.1％～99.8％。该药物组合物利用银杏叶提取物、三七提取物和阿司匹林三者的协同作用，能有效改善脑梗塞、心肌梗塞后心脑血管循环，扩张心脑血管，增加心脑血流量，同时能有效改善微循环，减轻脑梗塞，心肌梗塞后缺血再灌注引起的损伤。文档编号A61K36/258GK101708204SQ20091015398公开日2010年5月19日申请日期2009年11月30日优先权日2009年11月30日发明者蔡钟钦申请人:浙江省中医药研究院