用于治疗糖尿病的杂芳基氨基吡唑衍生物的制作方法
专利名称：用于治疗糖尿病的杂芳基氨基吡唑衍生物的制作方法
技术领域：
本发明涉及杂芳基氨基吡唑化合物、药物组合物和治疗糖尿病及其相关疾病的方法。
背景技术：
糖尿病的特征在于葡萄糖代谢能力削弱，尤其表现为糖尿病患者的血糖水平升高。依据基本缺陷，糖尿病被分成两大类。当患者的胰腺中缺乏产生胰岛素的β-细胞时，就会产生I型糖尿病，即胰岛素依赖型糖尿病(IDDM)。当患者的β细胞功能受损以及胰岛素作用变化时，就会产生II型糖尿病，即非胰岛素依赖型糖尿病(NIDDM)。
目前治疗I型糖尿病患者的方法是注射胰岛素，而大多数II型糖尿病患者都是利用能够刺激β细胞功能或能够增强患者对胰岛素的组织敏感性的药物进行治疗。现有用于治疗II型糖尿病的药物包括α-葡糖苷酶抑制剂、胰岛素增敏剂、胰岛素促分泌素和二甲双胍。
经过一段时间后，几乎有一半的II型糖尿病患者都会对这些药物失去响应。在饮食调节、锻炼及口服药物不足以控制血糖后，才进行胰岛素治疗。胰岛素治疗的缺点是需要进行药物注射，并且可能导致低血糖和体重增加。
由于目前治疗方法存在上述问题，所以需要新的II型糖尿病疗法。尤其需要能保持正常(葡萄糖依赖的)胰岛素分泌的新疗法。这类新药物应该具有下列特征依赖于葡萄糖促进胰岛素分泌(即化合物只在葡萄糖水平升高时才刺激胰岛素分泌)；首次和二次失败率较低；保存胰岛细胞功能。
INS-1细胞是胰岛β细胞胰岛素分泌的模型。在β-巯基乙醇存在下维持时，这些细胞保留原位胰岛β细胞的许多特征。细胞可响应生理上相关的葡萄糖浓度分泌胰岛素，EC50为6mM葡萄糖(Hohmeier等，Diabetes 49424，2002)。这些细胞还响应多种已知的促分泌素分泌胰岛素，所述促分泌素包括能够提高胞内环AMP、除葡萄糖之外的营养成分以及氯化钾的药物。INS-1细胞的这种特征进一步证明，这些细胞保留了许多参与胰岛素分泌响应的信号传导途径，由此适用于鉴定能影响这些途径的化合物。因此，INS-1细胞可作为鉴定工具，用于鉴定在葡萄糖存在下可刺激胰岛素分泌的化合物，而这样的化合物可用于治疗糖尿病及其相关疾病。
发明内容
本发明提供下式(I)的杂芳基氨基吡唑衍生物及其药学上可接受的盐 其中 为选自以下的取代的杂芳族环基
R为H或(C1-C6)烷基；R1为H，任选被苯基取代的(C1-C6)烷基，所述苯基任选被卤素或[三(C1-C4)烷基]甲硅烷基取代，(C3-C6)烯基，(C3-C6)炔基，(C3-C6)环烷基，任选被最多两个选自以下的取代基取代(C1-C3)烷基、CF3和卤素，(C1-C3)卤代烷基，或苯基，任选被最多两个选自以下的取代基取代卤素、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、(C1-C3)卤代烷基、(C1-C3)卤代烷氧基和氰基；R2为H，卤素，(C1-C6)烷基，吡啶基，任选被最多两个选自以下的取代基取代(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、卤素和(C1-C6)烷基，苯基，任选被最多两个选自以下的取代基取代(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、氰基和卤素，嘧啶基，噻吩基，任选被最多两个选自以下的取代基取代(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、氰基和卤素，苯并噻吩基，任选被最多两个选自以下的取代基取代(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、氰基和卤素，或呋喃基，任选被最多两个选自以下的取代基取代(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、氰基和卤素；R3为(C1-C6)烷基，(C3-C6)环烷基，
(C2-C3)卤代烷基，或苯基，任选被最多四个选自以下的取代基取代任选被一个(C1-C4)烷氧基取代的(C1-C6)烷基、卤素、(C1-C3)卤代烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C3)卤代烷氧基、(C1-C6)烷硫基和氰基；R4为任选被一个(C1-C4)烷氧基取代的(C1-C6)烷基，(C1-C6)烷氧基，(C1-C6)烷硫基，(C1-C3)卤代烷基，(C1-C3)卤代烷氧基，或卤素；n＝0、1、2或3；X为CO2R7、CONR5R6或SO2NH2；R5为H、(C1-C6)烷基、任选被卤素取代的苯基、或任选在苯环上被卤素取代的苄基；R6为H或(C1-C6)烷基；或者R5和R6可以与它们所连接的氮原子一起构成哌啶、吗啉、硫代吗啉或哌嗪环，所述哌嗪任选在氮上被(C1-C3)烷基取代；R7为H，(C1-C6)烷基，苄基，任选在芳环上被最多两个选自以下的取代基取代卤素、(C1-C6)烷基、(C1-C3)烷氧基、(C1-C3)卤代烷基、(C1-C3)卤代烷氧基和(C1-C6)烷硫基；苯基，任选被最多两个选自以下的取代基取代(C1-C6)烷基、卤素、(C1-C6)烷氧基、(C1-C3)卤代烷基、(C1-C3)卤代烷氧基和(C1-C6)烷硫基；
前提条件是式(I)化合物不是下列化合物 上文中的术语在本文中具有下列含义术语“卤素”是指F、Br、Cl和I。
术语“(C1-C3)烷基”和“(C1-C6)烷基”分别是指具有约1至约3个碳原子或者约1至约6个碳原子的直链或支链饱和烃基。这类基团包括但不限于甲基、乙基、正丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基、戊基、己基等。
术语“(C3-C6)烯基”指含有双键以及约3至约6个碳原子的直链或支链不饱和烃基。双键可位于链中任何两个有效碳原子之间。这类基团包括但不限于烯丙基、异丙烯基、2-丁烯基、2-乙基-2-丁烯基、1-己烯基等。
术语“(C3-C6)炔基”指含有三键以及约3至约6个碳原子的直链或支链不饱和烃基。三键可位于链中任何两个有效碳原子之间。这类基团包括但不限于炔丙基、2-丁炔基、1-甲基-2-丁炔基、3-己炔基等。
术语“(C3-C6)环烷基”括例如环丙基、环丁基、环戊基和环己基等。
术语“(C1-C4)烷氧基”“(C1-C6)烷氧基”分别是指分别具有约1至约4个碳原子和约1至约6个碳原子的直链或支链饱和烃基，所述基团连接至氧原子。烷氧基取代基通过该氧原子与分子的其余部分相连。这类基团包括但不限于甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、叔丁氧基、戊氧基、己氧基等。
术语“(C1-C3)卤代烷氧基”指在C上被卤素原子取代的(C1-C3)烷氧基。这类基团包括但不限于三氟甲氧基、二氟甲氧基、2，2-二氟乙氧基、2，2，2-三氟乙氧基、2-氯乙氧基、3-氯丙氧基、1-氟-2，2-二氯乙氧基等。
术语“(C1-C3)卤代烷基”和“(C2-C3)卤代烷基”分别是指在C上被卤素原子取代的(C1-C3)烷基和(C2-C3)烷基。这类基团包括但不限于三氟甲基、二氟乙基、1-氟-2，2-二氯乙基、3-氯丙基、4-溴己基等。
术语“[三(C1-C4)烷基甲硅烷基]”是指带有三个(C1-C4)烷基取代基的硅基团，独立地选取各个取代基。上述基团通过硅原子与分子的其余部分相连。这类基团包括但不限于三甲基甲硅烷基、叔丁基-二甲基甲硅烷基等。
术语“(C1-C6)烷硫基”是指具有约1至约6个碳原子的直链或支链饱和烃基，所述基团连接至硫原子。上述烷硫基取代基通过硫原子与分子的其余部分相连。这类基团包括但不限于甲硫基、乙硫基、正丙硫基、异丙硫基等。
术语“任选取代的”是指这样修饰的部分可具有0个到至少所指出的最高数量的取代基。只要在化学上可能并其是化学稳定的，各个取代基可置换所修饰部分中的任何氢原子。在任何部分含有两个以上取代基时，独立于任何其它取代基选取各个取代基，因此各取代基可以是相同或不同的。
在式(I)中，以下杂环基的连接点是标有虚线(---)的键 各个基团上的X基固定在以上基团连接点的邻位。以上基团中的任选的R4(最多n个)可以位于任何有效碳原子上。
新化合物的其它形式本发明化合物还包括它的(a)立体异构体，(b)药学上可接受的盐，(c)互变异构体，(d)被保护的酸和共轭酸和(e)前药。
这些化合物的立体异构体可包括但不限于对映异构体、非对映异构体、外消旋混合物及它们组合。这类立体异构体可通过常规方法制备和分离，利用对映异构体原料反应或者分离本发明化合物的异构体。异构体可包括几何异构体。几何异构体的实例包括但不限于双键的顺式异构体或反式异构体。本发明化合物的其它异构体也是包括在内。异构体可以采用上述抑制剂的纯净形式或者与其它异构体的混合物形式。
本发明化合物的药学上可接受的盐包括用于生成碱金属盐或者用于生成游离酸或游离碱的加成盐的常用盐。盐的性质并不重要，只要是药学上可接受的。合适的药学上可接受的酸加成盐可用无机酸或有机酸制备。这类无机酸的实例有盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硝酸、碳酸、硫酸和磷酸。适宜的有机酸可选自脂族酸、环脂族酸、芳族酸、杂环酸、羧酸和磺酸类有机酸。有机酸和磺酸类有机酸的实例包括但不限于甲酸、乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、葡糖酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、葡糖醛酸、马来酸、富马酸、丙酮酸、天冬氨酸、谷氨酸、苯甲酸、邻氨基苯甲酸、甲磺酸、水杨酸、4-羟基苯甲酸、苯基乙酸、扁桃酸、恩波酸(扑姆酸)、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、泛酸、2-羟基乙磺酸、甲苯磺酸、磺胺酸、环己基氨基磺酸、硬脂酸、藻酸、N-羟基丁酸、水杨酸、半乳糖二酸和半乳糖醛酸及它们的组合。
本发明化合物的互变异构体包括在本发明范围内。由此，例如羰基包括其羟基互变异构体。
被保护的酸包括但不限于酯、羟基氨基衍生物、酰胺和磺酰胺。
本发明包括前药和前药的盐。为了提高母体化合物的性能，前药的制备在本领域是公知的；这类性能包括溶解性、吸收性、生物稳定性和释放时间(参见如“Pharmaceutical Dosage Form and DrugDelivery Systems”(第6版)，Ansel等编辑，Williams & Wilkins，p.27-29，(1995)，通过引用结合到本文)。常用的前药被设计成利用主要的药物生物转化反应，也被认为属于本发明范围内。主要的药物生物转化反应包括N-脱烷基化反应、O-脱烷基化反应、脂族羟基化反应、芳族羟基化反应、N-氧化反应、S-氧化反应、脱氨基反应、水解反应、葡糖醛酸化反应、硫酸化反应和乙酰化反应(参见如Goodman and Gilman′s The Pharmacological Basis of Therapeutics(第9版)，Molinoff等编辑，McGraw-Hill，p11-13，(1996)，通过引用结合到本文)。
在Journal of Organic Chemistry各卷的第一期中有本领域普通有机化学工作者使用的缩写词综合列表；这种列表通常是标题为Standard List of Abbreyiations的表格。所述列表包含的缩写词及本领域普通有机化学工作者使用的所有缩写词通过引用结合到本文。
对于本发明目的而言，化学元素根据Periodic Table of theElements，CAS版，Handbook of Chemistry and Physics，第67版，1986-87鉴定。所述列表包含的缩写词及本领域普通有机化学工作者使用的所有缩写词通过引用结合到本文。
对于本发明目的而言，化学元素根据Periodic Table of theElements，CAS版，Handbook of Chemistry and Physics，第67版，1986-87鉴定。
通用制备方法通常，本发明所用化合物可利用市售或根据常规化学方法合成制备的原料，通过本领域已知的标准技术、已知的类似方法和/或本文介绍的方法制备。下列制备方法用于帮助读者合成本发明化合物。除非另有说明，否则在各反应流程中，R1-R7、X、和 具有上文定义的相同含义。
反应流程A说明了制备式(Ia)化合物[R为H的式(I)化合物]的一般方法。采用Ullmann型条件(例如含乙酸铜(II)的DMF，在封闭管中加热16小时)，使式(III)氨基吡唑与式(IV)的2-氯-、2-溴-、2-碘-或2-三氟甲基磺酸酯基-杂芳基羧酸、羧酸酯或羧酰胺偶合。或者还可以采用Buchwald型条件(例如含碳酸铯、BINAP和钯催化剂(例如Pd2(dba)3或Pd(OAc)2)的无水甲苯，在氩气氛下加热至110℃ 16小时)，式(III)与式(IV)的2-氯、2-溴、2-碘或2-三氟甲基磺酸酯基-杂芳基羧酸酯、羧酰胺或磺酰胺偶合。
反应流程A 反应流程B图示说明式(Id)化合物[X为COOH的式(I)化合物]和式(Ie)化合物[X为CONR5R6的式(I)化合物]的制备方法。通常在温和的碱水溶液中，将式(Ib)酯化合物[X为CO2R7的式(I)，按照反应流程A制备]水解为式(Id)的酸化合物。然后，式(Id)可以与胺R5R6NH反应，转化为式(Ie)的酰胺，任选使用偶合剂(例如HOBT、EDCI和三乙胺)的混合物。或者，式(Ic)的腈化合物[X为CN的式(I)化合物]可以直接在碱水溶液中水解，得到式(If)的伯酰胺化合物[X为CONR5R6且R5和R6为H的式(I)化合物]。
反应流程B 反应流程C说明了制备R2为碘、氯或氟的式(I)化合物的通用方法。式(Ig)化合物[R2为H的式(I)化合物]可以用诸如N-碘代丁二酰亚胺(NIS)或N-氯代丁二酰亚胺(NCS)的试剂碘化或氯化，得到式(Ih)化合物[R2为I或Cl的式(I)化合物]。类似地，将式(Ig)化合物用氟化剂(例如Selectfluor)处理，得到式(Ii)化合物[R2为F的式(I)化合物]。
反应流程C 反应流程D概述了制备X＝SO2NH2的式(I)化合物的通用方法。
式(Ij)的N，N-二苄基磺酰胺化合物通过反应流程A介绍的Buchwald型偶合反应制备，并且可以用硫酸脱苄基化，得到式(Ik)化合物。
反应流程D R为(C1-C6)烷基的式(Im)化合物如下制备在例如反应流程E所示的标准条件下，N-烷基化相应的式(Ia)化合物(R为H)。这些条件包括烷基化剂(例如碘甲烷)和碱(例如氢化钠)，并且此反应在惰性溶剂例如DMF中进行。当X为羧酸酯时，进行标准水解(即NaOH、H2O)，得到R为烷基且X为CO2H的式(I)化合物。
反应流程E (Ia)(I)，当R＝H时R＝(C1-C6)烷基(Im)(I)，当R为(C1-C6)烷基时当X＝CO2烷基时，额外水解步骤得到R为(C1-C6)烷基且X＝CO2H的式(I)化合物中间体的合成中间体可以是市售的，或通过本领域已知的标准方法和/或以下方法之一的类似方法制备。
5-氨基吡唑式(III)的5-氨基吡唑原料可以是市售的，或者可按照下述反应流程F、G或H制备。
在反应流程F中，任选取代的乙腈与适当取代的酯(VI)和碱进行缩合反应，得到氰基酮(VII)。必要时，R1为任选取代的苯基的式(VI)酯可以用相应的式R1-Br溴代化合物制备，例如使其与BuLi和CO2反应，生成式R1-COOH酸，它可被酯化为式(VI)。然后，使式(VII)化合物与式(II)的取代肼或式(V)的取代腙反应，得到所需的氨基吡唑(III)。如果氰基酮(VII)是市售的，则可以省去第一步骤。
反应流程F 在反应流程G中，使式(VIII)的腈与乙腈反应，形成烯氨基腈(IX)，然后与肼(II)或腙反应，生成(IIIa)[R2＝H的式(III)化合物]。
反应流程G 反应流程H说明了通过溴化反应和Suzuki偶合反应引入除氢之外的R2基团，从而使式(IIIa)的氨基吡唑转化为其它的式(III)氨基吡唑。
反应流程H *合适的硼酸酯包括
R2B(OR′)2，其中R′为低级烷基，或两个R′基团可构成环，例如 以及三聚硼酸酯，例如 下文中间体B-I中介绍了氨基吡唑的制备实例。
肼和腙式(II)肼和式(V)腙原料均是市售的，或者在为苯基肼时(R3＝任选取代的苯基)可以按照反应流程I制备，其中将取代的苯胺转化为重氮盐中间体，随后用氯化锡(II)作还原剂将重氮盐还原。
反应流程I Ropt sub＝任选取代基(IIa)，[(II)，R3＝任选取代的苯基]在钯催化剂和碱存在下，用苯基卤或苯基三氟甲磺酸酯和腙(例如二苯甲酮腙)，按照反应流程J制备N-苯基腙。
反应流程J Ropt sub＝任选取代基W＝Cl，Br，I，或OTf在下文中间体A中介绍了芳基肼的制备实例。在中间体B步骤1和中间体C步骤2中介绍了芳基腙的制备实例。
卤代吡啶和卤代嘧啶羧酸和磺酰胺衍生物用于和5-氨基吡唑偶合的卤素吡啶-和卤素嘧啶羧酸衍生物是市售的，或者可通过本领域公知的简单方法制备。吡啶或嘧啶上的其它取代基可以通过标准方法引入，例如反应流程K中用于制备3-氯-6-甲氧基吡啶-2-甲酸甲酯的方法。
反应流程K 下文的中间体J介绍了这类制备方法的一个实例。
反应流程L说明了2-卤素吡啶磺酰胺中间体的制备方法。将2-氯-3-氨基吡啶与亚硝酸钠/酸和磺酰氯反应，转化为2-氯吡啶磺酰氯。然后，将此化合物与二苄基胺反应，得到所需2-氯吡啶3-磺酰胺中间体。按照反应流程A和D介绍的方法，以上化合物可以转化为最终产物。
反应流程L 本发明的具体实施例以下具体实施例用于说明本发明，但决不应该解释为对本发明范围的任何限制。
缩写词当下列缩写词在本发明公开文本中使用时，它们具有以下含义abs 无水Ac 乙酰基AcOH乙酸amu 原子质量单位aq 水溶液BINAP2，2′-双(二苯基膦基)-1，1′-联萘Bn 苄基Boc 叔丁氧基羰基BTMAICl2二氯碘酸苄基三甲基铵Bu 丁基CDCl3 氘氯仿CDI 羰基二咪唑Celite硅藻土过滤剂的品牌，Celite Corporation的注册商标CI-MS化学电离质谱conc 浓的d二重峰DCM 二氯甲烷dd 双重峰的双重峰ddd 双重峰的双重峰的双重峰DMAP 4-(N，N-二甲基)氨基吡啶DMF N，N-二甲基甲酰胺DMSO 二甲亚砜DMSO-d6 二甲亚砜-d6DOWEX66 Dowex氢氧化物，弱碱性阴离子，大孔，25-50目
dppf 1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁EDCI 1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐EI电子轰击电离EI-MS 电子轰击-质谱equiv 当量ES-MS 电喷雾质谱Et乙基Et2O乙醚Et3N三乙胺EtOAc 乙酸乙酯EtOH 乙醇g 克GC-MS 气相色谱-质谱h 小时Hex己烷1H NMR 质子核磁共振HOAT 1-羟基-7-氮杂-苯并三唑HOBT 1-羟基苯并三唑HPLC 高效液相色谱HPLC ES-MS 高效液相色谱-电喷雾质谱KOtBu 叔丁醇钾L 升LC-MS 液相色谱/质谱LDA二异丙基氨基锂m 多重峰M 摩尔ml 毫升m/z质荷比
Me 甲基MeCN乙腈MeOH甲醇mg 毫克MHz 兆赫min 分钟mmol 毫摩尔mol 摩尔mp 熔点MS 质谱N正常NaOAc 乙酸钠NBS N-溴代丁二酰亚胺NCS N-氯代丁二酰亚胺NIS N-碘代丁二酰亚胺NMM 4-甲基吗啉NMR 核磁共振Pd2(dba)3 三(二亚苄基丙酮)合二钯(O)Pd(OAc)2 乙酸钯Pd(PPh3)4 四(三苯基膦)合钯(O)Pd/C 披钯碳Pd(dppf)Cl2 二氯化[1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁]钯(II)Ph 苯基ppm 百万分之一Pr 丙基psi 每平方英寸磅数PTSA 对甲苯磺酸q四重峰
qt 五重峰RfTLC保留因子rt 室温RT 保留时间(HPLC)s 单峰TBAF 四丁基氟化铵TBDMS 叔丁基二甲基甲硅烷基TBDMSCl叔丁基二甲基甲硅烷基氯TBS叔丁基二甲基甲硅烷基TFA三氟乙酸THF四氢呋喃TLC薄层色谱TMS四甲基甲硅烷v/v体积/单位体积vol体积w/w 重量/单位重量通用实验方法用注射器或导管转移对空气和水份敏感的液体和溶液，并穿过橡胶隔片引入到反应容器中。商品级试剂和溶剂没有进行纯化，直接使用。术语“减压浓缩”是指在大约15mm Hg柱下使用Buchi旋转蒸发器。所有温度均报告为未修正的摄氏温度(℃)。薄层色谱(TLC)在EM Science的衬有预涂覆玻璃的硅胶60A F-254 250μm板上进行。在Biotage系统上用32-63微米60A预填充硅胶柱进行柱色谱(快速色谱)处理。用制备型反相HPLC色谱纯化，其中采用Gilson 215系统，通常用YMC Pro-C18 AS-342(150×20mm I.D.)柱。通常，所用的流动相为H2O(A)和MeCN(B)的混合物。水中可以包含或不包含0.1％TFA。典型的梯度为
电子轰击质谱(EI-MS)是通过Hewlett Packard 5989A质谱仪获得，质谱仪配备有Hewlett Packard 5890 Gas Chromatograph，采用J&W DB-5柱(0.25μM涂层；30m×0.25mm)。离子源维持在250℃，在50-800amu，以2秒/次处扫描光谱。
利用下述方式获得高压液相色谱-电喷雾质谱(LC-MS)(A)Hewlett-Packard 1100HPLC，配备有四元泵，设定在254nm的可变波长检测器，YMC pro C-18柱(2×23mm，120A)，电喷雾电离的Finnigan LCQ离子阱质谱仪。根据离子源中离子数量，采用可变离子时间在120-1200amu扫描光谱。洗脱剂为A含0.02％TFA的2％乙腈/水，B含0.018％TFA的2％水/乙腈。梯度洗脱10％至95％B，3.5分钟，流速为1.0ml/min，开始保持0.5分钟，最后在95％B时保持0.5分钟。总的操作时间为6.5分钟。
或者(B)Gilson HPLC系统，配备两个Gilson 306泵，Gilson 215自动取样器，Gilson二极管阵列检测器，YMC pro C-18柱(2×23mm，120A)，及z-spray电喷雾电离的Micromass LCZ单四极质谱仪。在1.5秒种内，在120-800amu扫描光谱。由模拟通道获得ELSD(EvaporativeLight Scattering Detector(蒸发光散射检测器))数据。洗脱液为A含0.02％TFA的2％乙腈/水，B含0.018％TFA的2％水/乙腈。梯度洗脱10％至90％B，3.5分钟，流速1.5ml/min，开始保持0.5分钟，最后在90％B时保持0.5分钟。总的操作时间为4.8分钟。在柱转换和再生中使用另外的切换阀。
在300/400MHz Varian Mercury-plus光谱仪上测定常规一维NMR光谱。将样品溶解在Cambridge Isotope Labs的氘化溶剂中，转移至5mm ID Wilmad NMR管。在293K获得光谱。化学位移记录为ppm，并提及适当的溶剂信号，例如对于1H光谱2.49ppm(DMSO-d6)、1.93ppm(CD3CN)、3.30ppm(CD3OD)、5.32ppm(CD2Cl2)及7.26ppm(CDCl3)；对于13C光谱39.5ppm(DMSO-d6)、1.3ppm(CD3CN)、49.0ppm(CD3OD)、53.8ppm(CD2Cl2)及77.0ppm(CDCl3)。
中间体的合成肼中间体A(2，6-二甲基苯基)肼盐酸盐的制备 在搅拌下，向2，6-二甲基苯胺(5.0g，41.3mmol)和50％HCl水溶液(45ml)的冷溶液(0℃)中，缓慢加入NaNO2(2.85g，41.3mmol)和水(22.5ml)的冷溶液(0℃)。在加入期间严密监测温度，不要超过5℃。加入完毕后，将含重氮盐中间体的鲜橙色溶液在相同温度搅拌20分钟。在0℃、约5分钟内，将SnCl2(11.0g，57.8mmol)和浓HCl(30ml)的混合物加入到反应混合物中。将反应混合物升至室温，搅拌6小时。过滤收集沉淀，用少量冷水洗涤。真空干燥得到标题化合物(白色无定形固体，7.00g，98％)。产物直接用于下一步骤，无需再纯化。ES-MS m/z 137.0(MH+)；HPLC RT(min)1.09。
5-氨基吡唑中间体B3-叔丁基-1-(2-甲氧基-5-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺的制备 步骤1二苯基甲酮(2-甲氧基-5-甲基苯基)腙的制备 在室温、搅拌下，向3-碘-4-甲氧基甲苯(19.84g，80mmol，1当量)、二苯甲酮腙(17.99g，88mmol，1.1当量)、Xantphos(93mg，0.16mmol，0.2mol％)、Pd(OAc)2(36mg，0.16mmol，0.2mol％)和无水甲苯(96ml)的脱气悬浮液中，一次性加入NaOtBu(11.09g，112mmol，1.4当量)。将混合物加热至85℃，搅拌12小时。冷却反应混合物，用200ml EtOAc和100ml水稀释，然后分离各层。分离除去出作为水层的不溶Pd残余物。有机相依次用2×100ml水、盐水洗涤，经硫酸钠干燥。减压浓缩溶液，得到橙黄色固体。将固体在50ml MeOH中研磨，过滤收集，用50ml MeOH洗涤。抽吸干燥，得到标题化合物(黄色固体，24.16g，收率95％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ2.25(s，3H)，3.56(s，3H)，6.53(dd，1H)，6.72(d，1H)，7.30(m，6H)，7.46(d，2H)，7.56(m，1H)，7.62(m，2H)，7.79(s，1H).ES-MS m/z 317.1(MH+)；HPLC RT(min)4.26.
步骤23-叔丁基-1-(2-甲氧基-5-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺的制备 将步骤1的产物(20.0g；63.2mmol；1当量)、4，4-二甲基-3-氧代戊腈(23.75g；189.6mmol；3eq)、对甲苯磺酸一水合物(18.03g；94.8mmol；1.5当量)和无水EtOH(400ml)悬浮液加热至回流，搅拌12小时。反应物颜色变为黄褐色，然后变为绿色。RP-HPLC证实反应完成50-60％。冷却反应物至室温，然后加入100ml 1N HCl。将反应物再加热至回流，搅拌12小时。此后，RP-HPLC显示反应完成。冷却混合物，减压蒸发EtOH。残余物用300ml EtOAc和100ml 1N HCl稀释，分离各层。水层用EtOAc(4×75ml)萃取。合并的有机层和水层通过RP-HPLC分析；发现有机层包含大量产物、PTSA和杂质，而水层仅包含所需产物和少许PTSA。由此，合并的EtOAc层用2N HCl(4×50ml)萃取。再次分析这些合并的酸层和EtOAc层；有机层中不再含有产物，而酸层中存在大量产物。所有合并的酸层再用100ml Et2O洗涤一次，然后加入固体NaHCO3，碱化至pH～8。这样得到粉红色固体，过滤收集，用2×50ml水洗涤。将固体在300ml Et2O中研磨，过滤收集，用100ml Et2O洗涤。真空干燥，得到标题化合物(乳白色固体，13.3g，收率81％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.18(s，9H)，2.25(s，3H)，3.74(s，3H)，4.69(s，2H)，5.25(s，1H)，7.01(m，2H)，7.13(dd，1H).ES-MS m/z 260.2(MH+)；HPLC RT(min)1.47.
中间体C3-叔丁基-1-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺的制备 步骤12-甲氧基-6-甲基苯基三氟甲磺酸酯的制备 在0-5℃冷却下，向2-羟基-3-甲氧基甲苯(17.0g，0.123mol)、三乙胺(19.72ml，0.141mol)和二氯甲烷(425ml)的混合物中，缓慢加入三氟甲磺酸酐(45.13g，0.160mol)。将混合物升至室温，搅拌2小时。TLC(洗脱剂5％EtOAc/己烷)显示原料消失。将反应混合物真空浓缩至干。硅胶色谱纯化(用己烷至10％EtOAc/己烷作洗脱剂)，得到34.37g(99.4％)透明油状2-甲氧基-6-甲基苯基三氟甲磺酸酯。
1H NMR(400MHz，CD2Cl2)δ7.25(t，1H)，6.90(t，2H)，3.90(s，3H)，2.37(s，3H)；GC MS m/z270(M+)；RT(min)8.70.
步骤2二苯基甲酮(2-甲氧基-6-甲基苯基)腙的制备
将2-甲氧基-6-甲基苯基三氟甲磺酸酯(3.0g，0.011mol)、二苯甲酮腙(2.38g，0.012mol)、BINAP(0.691g，0.001mol)、碳酸铯(5.06g，0.016mol)和甲苯(50ml)的混合物用氮脱气。加入乙酸钯(II)(0.075g，0.33mol)，将混合物加热至100℃ 16小时。通过TLC(洗脱剂5％EtOAc/己烷)判断完全反应。冷却混合物至室温，真空浓缩，硅胶色谱纯化(采用己烷至10％EtOAc/己烷梯度)，得到3.40g(97％)二苯基甲酮(2-甲氧基-6-甲基苯基)腙。
1H NMR(400MHz，CD2Cl2)δ7.65(m，2H)，7.55(m，3H)，7.40(m，2H)，7.30(m，3H)，6.85(m，2H)，6.68(m，1H)，3.70(s，3H)，2.67(s，3H)；ES-MS m/z 317.1(MH+)；HPLC RT(min)4.23.
步骤33-叔丁基-1-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺的制备 将二苯基甲酮(2-甲氧基-6-甲基苯基)腙(12.1g，0.038mol)、4，4-二甲基-3-氧代戊腈(8.62g，0.069mol)对甲苯磺酸一水合物(43.65g，0.229mol)和EtOH(217ml)的悬浮液加热至回流16小时。通过TLC(洗脱剂5％EtOAc/己烷)判断反应完成。冷却反应混合物至室温，真空浓缩。将残余物悬浮于水(150ml)，用乙醚(6×100ml)萃取。TLC(洗脱剂15％EtOAc/己烷)监测过量4，4-二甲基-3-氧代戊腈的萃取。水层用固体NaHCO3缓慢碱化至pH～9.0。水层用二氯甲烷(2×200，1×150ml)萃取。有机层用水(150ml)、盐水(100ml)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，然后真空浓缩至干。产物经硅胶色谱纯化(用10-45％EtOAc/己烷梯度作洗脱剂)，得到3.28g(33％)3-叔丁基-1-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺。
1H NMR(400MHz，CD2Cl2)δ7.32(t，1H)，6.92(t，2H)，5.50(s，1H)，3.82(s，3H)，2.02(s，3H)，1.29(s，9H)；ES-MS m/z 260(MH+)；HPLC RT(min)1.46.
中间体D3-(2，2-二甲基丙基)-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]胺的制备 步骤15，5-二甲基-3-氧代己腈的制备 在500ml干燥圆底烧瓶中，将乙腈(6.31，153.6mmol)的THF(50ml)溶液用LiHMDS(156.3ml，1.0M THF溶液)在-78℃处理。在-78℃向此溶液中加入3，3-二甲基丁酸甲酯的THF(50ml)溶液。将溶液升至室温，加入NaHCO3(100ml，饱和溶液)。分离各层，水层用乙醚(3×100ml)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，得到所需产物，将其直接用于下一步骤，无需再纯化。
1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ3.47(s，2H)，2.44(s，2H)，1.03(s，9H).
步骤23-(2，2-二甲基丙基)-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]胺的制备 在5，5-二甲基-3-氧代己腈(1.5g，10.77mmol)(步骤1)和(2-甲基苯基)肼盐酸盐(1.62，10.24mmol)的混合物中加入HCl水溶液(1N，150ml)，使反应混合物回流16小时。将所得溶液冷却至室温，用NaOH水溶液(1N)碱化至pH 8。收集沉淀，在60℃烘箱真空干燥固体，得到1.6g(61％)所需产物1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ7.27-7.38(m，4H)，5.42(s，1H)，3.54(br，s，2H)，2.40(s，2H)，2.12(s，3H)，0.96(s，9H)；ES-MS m/z244.2(MH+)；HPLC RT(min)1.01.
中间体E3-环戊基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺的制备 步骤13-环戊基-3-氧代丙腈的制备 在70℃，向NaH(2.75g，687mmol)的THF(15ml)悬浮液中滴加环戊烷甲酸甲酯(8.00g，62.4mmol)和无水乙腈(3.91ml，74.9mmol)的THF(5ml)溶液。将混合物在70-72℃搅拌16小时，冷却至室温，用乙酸乙酯和HCl水溶液稀释。有机层用水和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。除去溶剂，得到3-环戊基-3-氧代丙腈，将其直接使用无需再纯化。
步骤23-环戊基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺的制备
将(2-甲基苯基)肼盐酸盐(2.00g，14.6mmol)、上一步骤的粗制3-环戊基-3-氧代丙腈(2.32g，～14.6mmol)和甲苯(6ml)的溶液加热至回流16小时。减压除去溶剂，所得残余物经硅胶色谱纯化(用己烷/EtOAc(3∶1，v/v)作为洗脱剂)。减压浓缩，得到浅橙色固体3-环戊基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺(2.19g，62％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ1.58-1.82(m，6H)，2.00-2.16(m，2H)，2.17-2.21(s，3H)，2.93-3.11(m，1H)，3.42-3.58(s，2H)，5.41-5.46(s，1H)，7.20-7.28(m，2H)7.29-7.37(m，2H)；ES-MS m/z 241.9(MH+)；HPLC RT(min)1.69.
中间体F3-叔丁基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺的制备 将4，4-二甲基-3-氧代戊腈(36.7g，0.29mol)、(2-甲基苯基)肼盐酸盐(47.7g，0.29mol)和冰乙酸(7.03g，6.7ml，0.12mol)溶于无水乙醇(585ml)，回流加热18小时。减压除去溶剂后，加入EtOAc和水(各500ml)，然后小心加入碳酸氢钠(42g，0.50mol)。加入己烷(500ml)后，分离出有机相，用盐水(500ml)洗涤，经Na2SO4干燥。混合物通过在烧结玻璃漏斗上的硅胶垫(500g)过滤。硅胶垫用己烷/EtOAc(1∶1，v/v)洗脱，减压浓缩滤液。所得固体与己烷/EtOAc(9∶1，v/v)研磨，过滤，洗涤，真空干燥，得到无色固体产物(61.5g，93％)。
1H NMR(400MHz，CD2Cl2)δ1.29(s，9H)，2.12(s，3H)，3.56(br，2H)，5.48(s，1H)，7.28(m，2H)，7.31(m，2H).
中间体G3-(4-氟苯基)-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺的制备 步骤13-氨基-3-(4-氟苯基)丙烯腈的制备 向4-氟苯甲腈(5.00g，41.3mmol)和乙腈(4.35ml，82.5mmol)的甲苯(100ml)溶液中加入叔丁醇钾(13.9g，124mmol)。将混合物搅拌24小时，然后通过缓慢加入碳酸氢钠水溶液猝灭。所得悬浮液用二氯甲烷(3×50ml)萃取。有机溶液用水洗涤，干燥(Na2SO4)，减压浓缩。将残余物用EtOH/Et2O研磨，得到3-氨基-3-(4-氟苯基)丙烯腈(6.20g，93％，白色固体)1H NMR(300MHz，丙酮-d6)δ4.23(s，1H)，6.20(s，2H)，7.22(ddd，2H)，7.71(m，2H).
步骤23-(4-氟苯基)-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺的制备
向3-氨基-3-(4-氟苯基)丙烯腈(600mg，3.70mmol)的1N HCl(6ml)溶液中加入(2-甲基苯基)肼盐酸盐(558mg，3.51mmol)。将反应物回流16小时，然后冷却至室温。缓慢加入1N氢氧化钠水溶液，从而将所得混合物碱化至pH 12。过滤收集沉淀，然后用EtOH/Et2O重结晶，得到中间体(800mg，81％，浅橙色固体)。
1H NMR(400MHz，CD2Cl2)δ2.20(s，3H)，2.14(br s，2H)，5.91(s，1H)，7.06(t，2H)，7.36(d，4H)，7.75(m，2H).
直接使用此产物无需再纯化。
中间体H3-叔丁基-1-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-4-甲基-1H-吡唑-5-胺的制备 步骤14-溴-3-叔丁基-1-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺的制备 向3-叔丁基-1-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺(2.00g，7.71mmol)(中间体C)的乙酸(15ml)溶液中滴加溴(1170mg，0.38ml，7.33mmol)。在室温下搅拌反应混合物5分钟，然后用水(100ml)稀释，引起固体沉淀。过滤收集固体，然后溶于EtOAc。有机相用饱和NaHCO3和盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤，减压浓缩，得到含少量杂质的产物(2683mg，102％)。ES-MS m/z 338.2(MH+)；HPLC RT(min)3.06。
步骤23-叔丁基-1-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-4-甲基-1H-吡唑-5-胺的制备 向4-溴-3-叔丁基-1-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺(2.6g，7.68mmol)的DMF(15ml)溶液中加入甲基环硼氧烷(6.66ml，46.08mmol)，二氯化[1，1′-双(二苯基膦基)-丁烷]钯(II)(481.97mg，0.80mmol)和碳酸钾(3.3g，23.04mmol)。在155℃搅拌反应混合物18小时。反应物用水(100ml)稀释，用EtOAc(3×25ml)萃取。合并的有机萃取液用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，减压浓缩。残余物经硅胶色谱纯化(90％己烷/EtOAc)，得到产物(1.7g，77％，纯白色固体)。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ1.24(s，9H)，1.96(s，3H)，1.99(s，3H)，3.71(s，3H)，4.25(s，2H)，6.85(d，1H)，6.94(d，1H)，7.23-7.29(m，1H).ES-MS m/z 274.2(MH+)；HPLC RT(min.)1.78.
中间体I4-(4-氟苯基)-3-甲基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺的制备
步骤14-溴-3-甲基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺的制备 向3-甲基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺(7.78g，41.7mmol)的乙酸(90ml)溶液中加入溴(6.64g，41.6mmol)的乙酸(10ml)溶液。搅拌反应混合物30分钟。将水加入到反应混合物中，混合物用冷KOH溶液(1N)碱化。收集白色固体4-溴-3-甲基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺，无需纯化直接用于下一步骤。
步骤24-(4-氟苯基)-3-甲基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺的制备 将4-溴-3-甲基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺(2g，7.52mmol)、4-氟苯基硼酸(2.10g，11.3mmol)和Pd(PPh3)4(434mg，0.38mmol)溶于DMF(20ml)，加入Na2CO3(饱和水溶液，18ml)。将混合物脱气10分钟，然后在110℃加热2小时。将反应混合物稀释，滤出固体。减压浓缩溶剂，残余物经硅胶快速色谱纯化(10-40％乙酸乙酯/己烷)，得到1.2g(90％纯度，51％)标题化合物。
1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ7.25-7.34(m，6H)，7.08(t，2H)，3.62(s，2H)，2.20(s，3H)，2.14(s，3H).
中间体J3-氯-6-甲氧基吡啶-2-甲酸甲酯的制备 步骤13-氯-6-甲氧基吡啶-2-甲酸的制备 向3，6-二氯吡啶-2-甲酸(7.10mmol 1.36g)的二烷(15ml)溶液中滴加甲醇钠(21.31mmol 1.15g)的甲醇溶液。将混合物在85℃搅拌14小时，冷却至室温，用乙酸乙酯和HCl水溶液稀释。有机层用水和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。除去溶剂，得到3-氯-6-甲氧基吡啶-2-甲酸，无需纯化直接用于下一步骤。
步骤23-氯-6-甲氧基吡啶-2-甲酸甲酯的制备 在氩气氛、室温下，将亚硫酰二氯(5ml)加入到3-氯-6-甲氧基吡啶-2-甲酸(7.10mmol，1.30g)中，然后将混合物加热回流2小时。在冷却至室温后，减压除去过量亚硫酰二氯，得到黄色油状酰氯。在0℃、搅拌下缓慢加入无水甲醇，将反应溶液升至室温，搅拌4小时。除去过量甲醇，将残余物用饱和NaHCO3中和，用EtOAc萃取。有机层经MgSO4干燥后蒸发，得到产物白色固体，将其直接使用无需再纯化。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ3.84(s，3H)，3.86(s，3H)，7.05(d，1H)，7.92(d，1H).
本发明的实施例实施例12-{[3-叔丁基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}-6-甲基烟酸的制备 将2-氯-6-甲基烟酸(122mg，0.71mmol)、碳酸钾(108mg，0.78mmol)、3-叔丁基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺(中间体F，163mg，0.71mmol)、乙酸铜(II)(2.6mg，0.014mmol)和DMF(2ml)的混合物在封闭管中加热(150℃)16小时。冷却混合物至室温，通过硅胶垫(用乙酸乙酯作洗脱剂)过滤，浓缩至干，经HPLC纯化(用30％-90％乙腈/水梯度洗脱)。得到182.2mg(70％)所需产物。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ8.14(d，1H)，7.14-7.51(m，4H)，7.01(s，1H)，6.80(d，1H)，2.53(s，3H)，2.10(s，3H)，1.40(s，9H)；ES-MS m/z 365.3(MH+)；HPLC RT(min)3.23.
利用以上实施例1的条件并替代使用适当的原料，类似地制备了实施例11-75和147-150，见下表1。
实施例22-{[3-环戊基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}烟酸的制备 将2-氯烟酸(113mg，0.72mmol)、碳酸钾(199mg，1.44mmol)、3-环戊基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺(174mg，0.72mmol)(中间体E)、乙酸铜(II)(6.5mg，0.04mmol)和DMF(3ml)的混合物在封闭管中加热(150℃)16小时。冷却混合物至室温，通过硅胶垫(乙酸乙酯作为洗脱剂)过滤，浓缩至干，经HPLC纯化(用30％-90％乙腈/水梯度洗脱)，得到59.7mg(23％)所需产物。
1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ10.69(s，1H)，8.36(dd，1H)，8.16(dd，1H)，7.52(d，2H)，7.32-7.41(m，2H)，6.93(dd，1H)，6.82(s，1H)，3.11-3.22(m，1H)，2.19-2.21(m，2H)，1.94(s，3H)，1.65-1.89(m，6H)；ES-MS m/z 363.2(MH+)，HPLC RT(min)3.57.
实施例33-{[1-(5-氟-2-甲基苯基)-3-甲基-4-苯基-1H-吡唑-5-基]氨基}异烟酸的制备 将3-碘异烟酸(180mg，0.72mmol)、碳酸钾(199mg，1.44mmol)、1-(5-氟-2-甲基苯基)-3-甲基-4-苯基-1H-吡唑-5-胺(202mg，0.72mmol，用市售2-苯基乙腈作为腈来源，按照中间体F的相同方法合成)、乙酸铜(II)(6.5mg，0.04mmol)和DMF(1ml)的混合物在封闭管中加热(150℃)16小时。冷却混合物至室温，通过硅胶垫(乙酸乙酯作为洗脱剂)过滤，浓缩至干，经HPLC纯化(用30％-90％乙腈/水梯度洗脱)，得到29.1mg(10％)所需产物。
1H NMR(300MHz，CD3CN)δ9.39(br s，1H)，7.93(s，1H)，7.86-7.90(m，2H)，7.05-7.45(m，8H)，2.38(s，3H)，2.15(s，3H)；ES-MS m/z 403.1(MH+)，HPLC RT(min)2.40.
实施例43-{[3-叔丁基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}吡啶-2-甲酸的制备 将3-溴吡啶-2-甲酸(71mg，0.35mmol)、碳酸钾(53mg，0.39mmol)、3-叔丁基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺(80mg，0.35mmol)(中间体F)、乙酸铜(II)(1.3mg，0.007mmol)和DMF(1ml)的混合物在封闭管中加热(150℃)16小时。冷却混合物至室温，通过硅胶垫(乙酸乙酯作为洗脱剂)过滤。浓缩混合物至干，经HPLC纯化(用30％-90％乙腈/水梯度洗脱)，得到2.8mg(2.3％)所需产物。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ8.11(dd，2H)，7.79(dd，1H)，7.32-7.45(m，4H)，6.45(s，1H)，2.11(s，3H)，1.40(s，9H)；ES-MS m/z 351.0(MH+)，HPLC RT(min)2.46.
实施例55-{[1-(2，5-二甲基苯基)-3-(4-氟苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}-2-(甲硫基)嘧啶-4-甲酸的制备 将5-氯-2-(甲硫基)嘧啶-4-甲酸(89mg，0.44mmol)、碳酸钾(66mg，0.48mmol)、1-(2，5-二甲基苯基)-3-(4-氟苯基)-1H-吡唑-5-胺(123mg，0.44mmol，按照中间体G的类似方法合成)、乙酸铜(II)(1.6mg，0.009mmol)和DMF(1ml)的混合物在封闭管中加热(150℃)16小时。冷却混合物至室温，通过硅胶垫(乙酸乙酯作为洗脱剂)过滤，浓缩至干，经HPLC纯化(用30％-90％乙腈/水梯度洗脱)，得到24.2mg(12.3％)所需产物。
1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ8.95(s，1H)，8.90(s，1H)，7.85(dd，2H)，7.10-7.28(m，5H)，7.62(s，1H)，2.58(s，3H)，2.38(s，3H)，2.14(s，3H)；ES-MS m/z 406.3(MH+-CO2)，HPLC RT(min)4.07.
实施例62-[(3-甲基-1-苯基-1H-吡唑-5-基)氨基]烟酰胺的制备 步骤12-[(3-甲基-1-苯基-1H-吡唑-5-基)氨基]烟酸的制备 向3-甲基-1-苯基-1H-吡唑-5-胺(600mg，3.46mmol)和2-氯烟酸(546mg，3.46mmol)的DMF(6ml)溶液中加入碳酸钾(543mg，3.93mmol)和乙酸铜(II)(18mg)。将混合物在150℃搅拌18小时，然后冷却至室温，用乙酸乙酯(2x)和水稀释。用1N HCl水溶液将溶液调节至pH 2-3。混合物用EtOAc(3×5ml)萃取，然后合并的有机萃取液用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，减压浓缩。残余物经HPLC纯化(20-90％乙腈/水)，得到产物(126mg，18％，灰白色固体)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ2.19(s，3H)，6.62(s，1H)，6.77(m，1H)，7.34(m，1H)，7.45(m，2H)，7.53(m，2H)，8.16(d，1H)，8.22(d，1H)，12.32(s，1H)；ES-MS m/z295.1(MH+)；HPLC RT(min)2.17.
步骤22-[(3-甲基-1-苯基-1H-吡唑-5-基)氨基]烟酰胺的制备 向2-[(3-甲基-1-苯基-1H-吡唑-5-基)氨基]烟酸(40mg，0.14mmol)、EDCI(52mg，0.27mmol)、HOAT(37mg，0.27mmol)、三乙胺(0.06ml，0.41mmol)和二氯甲烷(4ml)的溶液中，加入氨(7N)的甲醇(0.2ml)溶液。在室温下搅拌反应混合物16小时。有机层用水洗涤，经MgSO4干燥，随后减压浓缩。产物经硅胶制备板纯化(1000微米，EtOAc/己烷(2∶1，v/v))，得到产物(白色固体，22mg，55％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ2.2(s，3H)，6.63(s，1H)，6.89(m，1H)，7.38(m，1H)，7.50(m，4H)，7.71(s，1H)，8.15(d，1H)，8.24(s，1H)，8.33(d，1H)，11.56(s，1H)；ES-MS m/z 294.1(MH+)；HPLC RT(min)2.02.
实施例72-{[3-(4-氟苯基)-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}烟酰胺的制备 将2-氯烟酰胺(59mg，0.37mmol)、碳酸钾(57mg，0.41mmol)、3-(4-氟苯基)-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺(100mg，0.37mmol)(中间体G)、乙酸铜(II)(1.4mg，0.007mmol)和DMF(1ml)的混合物在封闭管中加热(150℃)16小时。冷却混合物至室温，通过硅胶垫(乙酸乙酯作为洗脱剂)过滤，浓缩至干，经HPLC纯化(用30％-90％乙腈/水梯度洗脱)，得到20mg(14％)所需产物。
1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ10.88(s，1H)，8.48(dd，1H)，7.89(dd，2H)，7.74(dd，1H)，7.35-7.50(m，4H)，7.28(s，1H)，7.12(t，2H)，6.82(dd，1H)，5.85(br，s，2H)，2.16(s，3H)；ES-MS m/z388.2(MH+)，HPLC RT(min)3.61.
使用以上实施例7的条件并替代使用适当原料，类似地制备了实施例76-94，见下表1。
实施例82-{[3-(2，2-二甲基丙基)-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}烟酸的制备 步骤12-{[3-(2，2-二甲基丙基)-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}烟酸乙酯的制备 向干燥的15ml试管中加入3-(2，2-二甲基丙基)-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]胺(200mg，0.82mmol)(中间体D)、2-氯烟酸乙酯(185mg，0.82mmol)、Pd2(dba)3(37.6mg，0.041mmol)、BINAP(51.2mg，0.082mmol)和Cs2CO3(535.6mg，1.64mmol)。将烧瓶脱气后加入甲苯(2ml)，加热混合物至110℃ 20小时。冷却混合物至室温，通过硅胶垫(乙酸乙酯作为洗脱剂)过滤，浓缩至干，经HPLC纯化(用45％-90％乙腈/水梯度洗脱)，得到275mg(85％)所需产物。
1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ10.04(s，1H)，8.44(dd，1H)，8.21(dd，1H)，7.34-7.48(m，4H)，6.82(dd，1H)，6.75(s，1H)，4.19(q，2H)，2.57(s，2H)，2.12(s，3H)，1.28(t，3H)，1.02(s，9H)；ES-MS m/z 393.3(MH+)；HPLC RT(min)4.33.
步骤22-{[3-(2，2-二甲基丙基)-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}烟酸的制备 向2-{[3-(2，2-二甲基丙基)-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}烟酸乙酯(266mg，0.68mmol)(步骤1)在混合物乙醇(1ml)和THF(1ml)中的溶液加入氢氧化锂一水合物(284mg，6.8mmol)的水(2ml)溶液，将混合物加热至40℃ 1小时。冷却反应混合物至室温，加入0.5N盐酸溶液将溶液pH调节至5，浓缩至干。将粗制产物重新溶于甲醇，经HPLC纯化(用30％-90％乙腈/水梯度洗脱)，得到240mg(97％)所需产物。
1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ10.39(s，1H)，8.43(dd，1H)，8.14(dd，1H)，7.25-7.42(m，4H)，6.81-6.86(m，2H)，2.57(s，2H)，2.05(s，3H)，1.00(s，9H)；ES-MS m/z 365.3(MH+)；HPLCRT(min)3.67.
利用以上实施例8的条件并替代使用适当的原料，类似地制备了实施例85-116和129-146，见下表1。在实施例116的步骤1中采用Pd2(dba)3或Pd(OAc)2，得到相似收率。
实施例92-{[1-(2-氯苯基)-3-(4-氟苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}烟酸的制备 步骤12-{[1-(2-氯苯基)-3-(4-氟苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}烟酸乙酯的制备 向干燥的15ml试管中加入1-(2-氯苯基)-3-(4-氟苯基)-1H-吡唑-5-胺(300mg，1.04mmol，按照中间体G的相同方法合成)、2-氯烟酸乙酯(194mg，1.04mmol)、Pd2(dba)3(48mg，0.05mmol)、BINAP(65mg，0.10mmol)和Cs2CO3(679mg，2.09mmol)。将烧瓶脱气后加入甲苯(4ml)，然后加热混合物至110℃ 20小时。冷却混合物至室温，通过硅胶垫(乙酸乙酯作为洗脱剂)过滤，浓缩至干，经HPLC纯化(用45％-90％乙腈/水梯度洗脱)，得到410mg(90％)所需产物。
1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ10.17(s，1H)，8.46(dd，1H)，8.22(dd，1H)，7.89(dd，2H)，7.48-7.64(m，4H)，7.23(s，1H)，7.12(t，2H)，7.84(dd，1H)，4.24(q，2H)，1.32(t，3H)；ES-MS m/z 437.2(MH+)；HPLC RT(min)4.38.
步骤22-{[1-(2-氯苯基)-3-(4-氟苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}烟酸的制备 向2-{[1-(2-氯苯基)-3-(4-氟苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}烟酸乙酯(410mg，0.94mmol)在混合物乙醇(4ml)和THF(4ml)中的溶液加入氢氧化锂一水合物(115mg，2.74mmol)的水(8ml)溶液，然后加热混合物至40℃ 1小时。冷却反应混合物至室温，加入0.5N盐酸溶液将溶液pH调节至5(混合物变浑浊)。滤出固体，用水再次洗涤。在60℃烘箱真空干燥固体，得到380mg所需产物(99％)。
1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ10.18(s，1H)，8.45(dd，1H)，8.24(dd，1H)，7.87(dd，2H)，7.47-7.62(m，4H)，7.23(s，1H)，7.12(t，2H)，6.85(dd，1H)；ES-MS m/z 351.2(MH+)；HPLC RT(min)2.58.
实施例103-{[3-叔丁基-1-(2，6-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}吡啶-2-甲酸的制备
步骤13-{[(三氟甲基)磺酰基]氧基}吡啶-2-甲酸乙酯的制备 向装有3-羟基吡啶-2-甲酸(25g，179.5mmol)的1L干燥烧瓶中，加入400ml乙醇和100ml甲苯，再加入10ml硫酸。将混合物加热(95℃)回流3天。在冷却至室温后，将混合物浓缩至原体积的1/4，用600ml乙酸乙酯和200ml水稀释。水层用200ml乙酸乙酯萃取，合并的有机层用饱和NaHCO3(3×200ml)、盐水洗涤，经Na2SO4干燥。滤出固体，减压浓缩溶剂，得到21.9g 3-羟基吡啶-2-甲酸乙酯(73％)，无需纯化直接用于下一步骤。将该酯(21.9g，131mmol)溶于吡啶，冷却至-40℃，然后加入三氟甲磺酸酐(48g，170mmol)。反应混合物升至0℃30分钟，然后升至室温再过30分钟。加入水(100ml)猝灭反应物。混合物用乙酸乙酯(3×200ml)萃取，合并的有机层用饱和碳酸氢钠(200ml)、水(200ml)、盐水(200ml)洗涤，经硫酸钠干燥。滤出固体，减压除去溶剂，得到39g(99％)所需产物，无需纯化直接用于下一步骤。
1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ8.73(dd，1H)，7.72(dd，1H)，7.62(dd，1H)，4.46(q，2H)，1.42(t，3H).
步骤23-{[3-叔丁基-1-(2，6-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}吡啶-2-甲酸乙酯的制备 向干燥的100ml烧瓶中加入3-叔丁基-1-(2，5-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺(1.68g，6.9mmol，用中间体A按照中间体F的相同方法合成)、3-{[(三氟甲基)磺酰基]氧基}吡啶-2-甲酸乙酯(1.88g，6.28mmol)(步骤1)、Pd2(dba)3(0.28g，0.31mmol)、BINAP(0.39g，0.63mmol)和Cs2CO3(4.1g，12.5mmol)。将烧瓶脱气后加入甲苯(10ml)，然后加热混合物至110℃ 4小时。冷却混合物至室温，通过硅藻土垫过滤(乙酸乙酯作为洗脱剂)，浓缩至干，经硅胶快速色谱纯化(10-30％乙酸乙酯/己烷)，得到1.4g(57％)所需产物。
1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ9.29(s，1H)，8.19(dd，1H)，7.82(dd，1H)，7.41(dd，1H)，7.31(dd，1H)，7.19(d，2H)，6.18(s，1H)，4.28(q，2H)，2.01(s，6H)，1.39(s，9H)，1.32(t，3H)；ES-MS m/z 393.2(MH+)；HPLC RT(min)3.57.
在此步骤中将Pd2(dba)3用Pd(OAc)2代替后，得到相似的收率。
步骤33-{[3-叔丁基-1-(2，6-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}吡啶-2-甲酸的制备 向3-{[3-叔丁基-1-(2，6-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}吡啶-2-甲酸乙酯(2.10g，5.35mmol)在混合物乙醇(5ml)和THF(5ml)中的溶液加入氢氧化锂一水合物(1.12mg，26.8mmol)的水(10ml)溶液，然后加热混合物至40℃ 1小时。冷却反应混合物至室温，加入0.5N盐酸将溶液pH调节至5，浓缩混合物至干。将粗制混合物重新溶于甲醇，经HPLC纯化(用30％-90％乙腈/水梯度洗脱)，得到1.65g(85％)所需产物。
1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ10.22(br，s，1H)，9.52(s，1H)，8.03(dd，1H)，7.86(dd，1H)，7.50(dd，1H)，7.30(dd，1H)，7.18(d，2H)，2.02(s，6H)，1.37(s，9H)；ES-MS m/z 321.3(MH+)；HPLC RT(min.)2.56.
实施例114-{[3-叔丁基-1-(2，5-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲酸的制备 步骤14-{[3-叔丁基-1-(2，5-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲酸乙酯的制备 向干燥的15ml试管中加入3-叔丁基-1-(2，5-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺(106mg，0.44mmol，按照中间体F的相同方法合成)、4-氯-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲酸乙酯(101mg，0.44mmol)、Pd2(dba)3(20mg，0.022mmol)、BINAP(27mg，0.044mmol)和Cs2CO3(199mg，0.61mmol)。将烧瓶脱气后加入甲苯(2ml)，加热混合物至110℃ 20小时。冷却混合物至室温，通过硅胶垫(乙酸乙酯作为洗脱剂)过滤，浓缩至干，经HPLC纯化(用45％-90％乙腈/水梯度洗脱)，得到81mg(42％)所需产物。
1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ10.23(s，1H)，8.72(s，1H)，7.24(dd，2H)，7.16(s，1H)，6.78(s，1H)，4.20(q，2H)，2.64(s，3H)，2.38(s，3H)，2.04(s，3H)，1.34(s，9H)，1.28(t，3H)；ES-MS m/z 440.2(MH+)；HPLC RT(min)4.66.
步骤24-{[3-叔丁基-1-(2，5-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲酸的制备 向4-{[3-叔丁基-1-(2，5-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲酸乙酯(71mg，0.16mmol)在混合物乙醇(0.5ml)和THF(0.5ml)中的溶液加入氢氧化锂一水合物(68mg，1.6mmol)的水(1ml)溶液，加热混合物至40℃ 1小时。冷却反应混合物至室温，加入0.5N盐酸将溶液pH调节至5，浓缩混合物至干。将粗制混合物重新溶于甲醇，经HPLC纯化(用30％-90％乙腈/水梯度洗脱)，得到66mg(99％)所需产物。
1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ10.50(s，1H)，8.65(s，1H)，7.17(dd，2H)，7.12(s，1H)，6.83(s，1H)，2.68(s，3H)，2.27(s，3H)，1.97(s，3H)，1.35(s，9H)；ES-MS m/z412.2(MH+)；HPLC RT(min)3.94.
实施例123-{[3-叔丁基-1-(2，6-二甲基苯基)-4-氟-1H-吡唑-5-基]氨基}吡啶-2-甲酸的制备 向3-{[3-叔丁基-1-(2，6-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}吡啶-2-甲酸(实施例10，50mg，0.14mmol)的CH3CN(1ml)溶液中，加入[(1-(氯甲基)-4-氟-1，4-二氮阳离子双环[2.2.2]辛烷双(四氟硼酸盐)](SELECTFLUORTM)(48mg，0.14mmol)，在室温下搅拌混合物16小时。浓缩混合物，残余物经HPLC纯化(10％-90％乙腈/水梯度洗脱)，得到22mg(42％)标题化合物。
1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ9.18(s，1H)，8.04(d，1H)，7.50(dd，1H)，7.42(m，1H)，7.28(m，1H)，7.13(m，2H)，2.12(s，6H)，1.40(s，9H).ES-MS m/z 383.1(MH+)；HPLC RT(min)3.21.
实施例133-{[3-叔丁基-1-(2，6-二甲基苯基)-4-碘-1H-吡唑-5-基]氨基}吡啶-2-甲酸的制备 向3-{[3-叔丁基-1-(2，6-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}吡啶-2-甲酸(实施例10，50mg，0.14mmol)在混合物乙酸/二氯甲烷(各1ml)中的溶液加入N-碘代丁二酰亚胺(31mg，0.14mmol)。在室温下搅拌溶液12小时，然后加入水(10ml)。用KOH(1.0M冰冷溶液)将反应混合物碱化至pH 9。水层用二氯甲烷(50ml)萃取，随后，有机相用饱和亚硫酸钠、盐水洗涤，浓缩至干。粗制产物经HPLC纯化，得到所需产物(51mg，75％)。
1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ9.70(s，1H)，9.20(s，1H)，8.04(m，1H)，7.45(m，1H)，7.20(m，2H)，7.10(m，2H)，2.12(s，6H)，1.50(s，9H).ES-MS m/z490.9(MH+)；HPLC RT(min)3.40.
实施例143-{[3-叔丁基-4-氯-1-(2，6-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}吡啶-2-甲酸的制备 向3-{[3-叔丁基-1-(2，6-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}吡啶-2-甲酸(实施例10，50mg，0.14mmol)在混合物乙酸/二氯甲烷(各1ml)中的溶液加入N-氯代丁二酰亚胺(18mg，0.14mmol)。在室温下搅拌溶液12小时，然后加入水(10ml)。用KOH(1.0M冰冷溶液)将反应混合物碱化至pH 9。水层用二氯甲烷(50ml)萃取，随后有机相用饱和亚硫酸钠、盐水洗涤，浓缩至干。粗制产物经HPLC纯化，得到所需产物(42mg，76％)。
1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ10.45(s，1H)，9.30(s，1H)，8.04(d，1H)，7.50(m，1H)，7.25(m，2H)，7.15(m，2H)，2.02(s，6H)，1.43(s，9H).ES-MS m/z 399.0(MH+)；HPLC RT(min)3.33.
实施例152-{[3-(1，1-二甲基丙基)-1-(3-氟-2-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}-N，N-二甲基烟酰胺的制备 向2-{[3-(1，1-二甲基丙基)-1-(3-氟-2-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}烟酸(实施例140，按照实施例8的类似方法制备，50mg，0.13mmol)的CH3CN(1ml)溶液中，加入1滴二甲基甲酰胺，再加入乙二酰氯(9μl，0.13mmol)。在室温下搅拌混合物1小时，然后加入甲胺(16μl 40％的水溶液，0.25mmol)。在室温下再次搅拌混合物1小时，浓缩至干。将残余物溶于甲醇(1ml)，通过octyl固相萃取管过滤，经HPLC纯化(10％-90％乙腈/水梯度洗脱)得到33mg(70％)所需产物。
1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ8.30(d，1H)，8.23(s，1H)，7.50(d，1H)，7.15-7.30(m，3H)，6.80(t，1H)，6.60(s，1H)，3.77(s，3H)，2.95(br s，6H)，1.70(q，2H)，1.32(s，6H)，0.85(t，3H).ES-MS m/z 426.2(MH+)；HPLC RT(min)3.57.
利用上述实施例15的条件并替代使用适当的原料，类似地制备了实施例151-156，见下表1。
实施例163-[(3-叔丁基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)氨基]吡啶-2-甲酰胺的制备 步骤13-[(3-叔丁基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)氨基]吡啶-2-甲腈的制备 将3-溴吡啶-2-甲腈(150mg，0.98mmol)、3-叔丁基-1-甲基-1H-吡唑-5-胺(179mg，0.98mmol)、碳酸铯(638mg，1.96mmol)、BINAP(98mg，0.16mmol)和Pd2(dba)3(90mg，0.10mmol)的混合物溶于无水甲苯(2ml)，在氮气氛下加热至80℃ 24小时。冷却反应混合物至室温，用乙酸乙酯稀释，过滤后减压浓缩。残余物经硅胶色谱纯化(EtOAc/己烷(1∶9-1∶4，v/v)作为洗脱剂)。得到黄色油状产物(145mg，58％)。ES-MSm/z 256.1(MH+)；HPLC RT(min)2.37。
步骤23-[(3-叔丁基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)氨基]吡啶-2-甲酰胺的制备 向3-[(3-叔丁基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)氨基]吡啶-2-甲腈(100mg，0.39mmol)的MeOH(1ml)溶液中，加入KOH水溶液(3M，1ml)，在40℃搅拌混合物48小时。减压除去有机溶剂，水层用1N HCl水溶液酸化至pH 1-2。混合物用乙酸乙酯(3x)萃取。减压除去溶剂后，粗制残余物经制备型HPLC纯化(用20％-90％乙腈/水梯度洗脱)，得到油状标题产物(6.2mg，6％)。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δ1.35(s，9H)，3.72(s，3H)，6.80(s，1H)，7.39-7.42(m，2H)，8.08-8.11(m，1H).ES-MS m/z 274.1(MH+)，HPLC RT(min)1.47.
采用以上制备实施例1-16的方法，并且用适当的中间体作原料，类似地制备了本发明的其它化合物。这些化合物列于下表1中。
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本文所用各种术语的定义如下。
当介绍本发明要素或其优选实施方案时，“所述”是指一个或多个该要素。术语“包含”、“包括”和“具有”是指除了所列要素之外，还可以为其它要素。
本文所用术语“患者”包括哺乳动物(如人和动物)。
术语“治疗”包括任何过程、作用、应用、疗法等，其中给予包括人的患者医疗救助，从而直接或间接改善患者的病症，或者减缓患者病症或疾病的发展。
术语“联合治疗”是指给予两种以上治疗药物以治疗糖尿病病症和/或疾病。这样的给药包括以基本上同时的方式联合给予两种以上的治疗药物，例如采用包含固定比例活性成分的单一胶囊，或者采用多个独立的胶囊，每一种抑制剂包含于独立的胶囊。另外，这样的给药包括以序贯方式使用各类治疗药物。
术语“治疗有效”是指所给予的各种药物剂量能够改善糖尿病病症或疾病的严重程度，同时避免或最小化与所实施的治疗相关的副作用。
术语“药学上可接受的”是指主题项适合在药品中使用。
本发明化合物可用于治疗糖尿病，包括I型和II型糖尿病(非胰岛素依赖型糖尿病)。这种治疗还可延缓糖尿病的发作和糖尿病并发症。本发明化合物可用于预防糖耐量减低患者发展为II型糖尿病。可以利用本发明方法中本发明化合物治疗或预防的其它疾病或病症包括青少年成熟期突发型糖尿病(MODY)(Herman等，Diabetes 4340，1994)；成人隐性自身免疫性糖尿病(LADA)(Zimmet等，DiabetesMed.11299，1994)；糖耐量减低(IGT)(Expert Committee onClassification of Diabetes Mellitus，Diabetes Care 22(增刊1)S5，1999)；空腹血糖异常(IFG)(Charles等，Diabetes 40796，1991)；妊娠糖尿病(Metzger，Diabetes，40197，1991)；以及X代谢综合症(metabolic syndrome X)。
本发明化合物也可有效用于治疗例如肥胖症、动脉粥样硬化疾病、高血脂、高胆固醇血症、低HDL水平、高血压、心血管疾病(包括动脉粥样硬化、冠心病、冠状动脉疾病和高血压)、脑血管疾病和外周血管疾病。
本发明化合物也可用于治疗涉及例如以下情况的生理疾病产生脂质累积细胞的细胞分化、调节胰岛素敏感性以及血糖水平，它们涉及例如异常的胰腺β细胞功能、胰岛素分泌瘤和/或由于抗胰岛素的自身抗体、抗胰岛素受体的自身抗体或刺激胰腺β细胞的自身抗体引起的自身免疫性低血糖症；导致形成动脉粥样硬化斑的巨噬细胞分化；炎症反应；致癌作用；增生；脂肪细胞基因表达；脂肪细胞分化；胰腺β细胞量减少；胰岛素分泌；对胰岛素的组织敏感性；脂肉瘤细胞生长；多囊卵巢疾病；持续无排卵；雄激素过多；孕酮生成；类固醇生成；细胞的氧化还原电势和氧化应激；一氧化氮合酶(NOS)生成；γ-谷氨酰转肽酶、过氧化氢酶、血浆甘油三酯、HDL和LDL胆固醇水平增高等。
本发明化合物也在本发明方法中用于治疗糖尿病继发性病因(Expert Committee on Classification of Diabetes Mellitus，Diabetes Care22(增刊1)S5，1999)。这类继发性病因包括糖皮质激素过量、生长激素过量、嗜铬细胞瘤和药物引起的糖尿病。可能诱发糖尿病的药物包括但不限于pyriminil、烟酸、糖皮质激素、苯妥英、甲状腺激素、β肾上腺素能药、α干扰素以及治疗HIV感染的药物。
在治疗糖尿病及其相关疾病中，本发明化合物可单独使用，或者与其它本领域技术人员已知的疗法和/或化合物联合使用。或者，可在联合治疗中部分或全部使用本文介绍的的方法和化合物。
本发明化合物也可与治疗糖尿病的其它已知药物联合给予，所述药物包括PPAR激动剂、磺酰脲类药物、非磺酰脲类促分泌素、α葡糖苷酶抑制剂、胰岛素增敏剂、胰岛素促分泌素、降低肝脏葡萄糖输出的化合物、胰岛素和减肥药。这类药物可在给予本发明化合物之前、同时或之后给予。胰岛素包括长效或短效形式以及胰岛素制剂。PPAR激动剂包括任何PPAR亚型或它们的组合。例如PPAR激动剂可包括PPAR-α、PPAR-γ、PPAR-δ或者任意两种或三种PPAR亚型的组合。PPAR激动剂包括如罗格列酮、曲格列酮和吡格列酮。磺酰脲类药物包括如格列本脲、格列美脲、氯磺丙脲、甲苯磺丁脲和格列吡嗪。当与本发明化合物一起给药时，可用于治疗糖尿病的α-葡糖苷酶抑制剂包括阿卡波糖、米格列醇和伏格列波糖。可用于治疗糖尿病的胰岛素增敏剂包括PPAR-γ激动剂，例如格列酮类(例如曲格列酮、吡格列酮、恩格列酮、MCC-555、罗格列酮等)；双胍类，例如二甲双胍和苯乙双胍；蛋白酪氨酸磷酸酶-1B(PTP-1B)抑制剂；二肽基肽酶IV(DPP-IV)抑制剂；噻唑烷二酮类和非噻唑烷二酮类。当与本发明化合物一起给药时，可用于治疗糖尿病的降低肝脏葡萄糖输出的化合物包括二甲双胍，例如格华止和格华止XR。当与本发明化合物一起给药时，可用于治疗糖尿病的胰岛素促分泌素包括磺酰脲类和非磺酰脲类药物GLP-1、GIP、分泌素、那格列奈、美格列奈、瑞格列奈、格列本脲、格列美脲、氯磺丙脲、格列吡嗪。GLP-1包括半衰期比天然GLP-1长的GLP-1衍生物，例如脂肪酸衍生的GLP-1和毒蜥外泌素(exendin)。在本发明的一个实施方案中，本发明化合物可与胰岛素促分泌素联合使用，从而增强胰腺β细胞对胰岛素促分泌素的敏感性。
在本发明方法中，本发明化合物还可与减肥药联合使用。减肥药包括β-3激动剂、CB-1拮抗剂、神经肽Y5抑制剂、食欲抑郁剂(例如西布曲明(Meridia))和脂酶抑制剂(例如奥利司他(Xenical))。
在本发明方法中，本发明化合物也可与常用于糖尿病患者脂质障碍的药物联合使用。这类药物包括但不限于HMG-CoA还原酶抑制剂、烟酸、烟酸、降血脂药(例如甾烷醇(stanol)酯；甾烯醇(stenol)苷类，例如替奎安；氮杂环丁酮类，例如依泽替米贝)、ACAT抑制剂(例如阿伐麦布)、胆汁酸螯合剂、胆汁酸重摄取抑制剂、微粒体甘油三酯转运抑制剂和贝酸衍生物。HMG-CoA还原酶抑制剂包括例如洛伐他汀、辛伐他汀、普伐他汀、氟伐他汀、阿托伐他汀、利伐他汀(rivastatin)、伊伐他汀、西立伐他汀和ZD-4522。贝酸衍生物包括例如氯贝特、非诺贝特、苯扎贝特、环丙贝特、苄氯贝特(beclofibrate)、依托贝特和吉非贝齐。螯合剂包括例如考来烯胺、考来替泊以及交联葡聚糖的二烷基氨基烷基衍生物。
本发明化合物也可与抗高血压药联合使用，例如β-阻断剂和ACE抑制剂。与本发明化合物联合使用的其它抗高血压药的实例包括钙通道阻断剂(L型和T型；例如地尔硫、维拉帕米、硝苯地平、氨氯地平和mybefradil)、利尿药(例如氯噻嗪、氢氯噻嗪、氟甲噻嗪、氢氟甲噻嗪、苄氟噻嗪、甲基氯噻嗪、三氯甲噻嗪、泊利噻嗪、苄噻嗪、ethacrynic acid tricrynafen、氯噻酮、呋塞米、musolimine、布美他尼、氨苯蝶啶(triamtrenene)、阿米洛利、螺内酯)、肾素抑制剂、ACE抑制剂(例如卡托普利、佐芬普利、福辛普利、依那普利、施瑞普利(ceranopril)、西拉普利(cilazopril)、地拉普利、喷托普利、喹那普利、雷米普利、赖诺普利)、AT-1受体拮抗剂(例如氯沙坦、厄贝沙坦、缬沙坦)、ET受体拮抗剂(例如西他生坦、atrsentan、中性内肽酶(NEP)抑制剂、血管肽酶抑制剂(NEP-ACE双重抑制剂)(例如奥马曲拉和gemopatrilat)和硝酸盐。
这类联合治疗可以给予两种以上药物的任意组合(例如本发明化合物与胰岛素增敏剂和减肥药)。这类联合治疗可以给予上述的药物组合物形式。
根据测定哺乳动物的上述确定疾病治疗功效的公知方法，并将其测试结果与治疗这些疾病的已知药物的测试结果进行比较，很容易确定本发明化合物治疗各种适应症的有效剂量。治疗一种上述疾病所需的活性成分(例如化合物)剂量可以根据例如以下因素在很宽范围内变化所用的具体化合物和剂量单位、给药方式、治疗周期、所治疗患者的年龄和性别以及所治疗疾病的性质和程度。
活性成分的给药总量一般在约0.0001mg/kg体重/天至约200mg/kg体重/天，优选约0.01mg/kg体重/天至约200mg/kg体重/天。单位剂量可含约0.05mg至约1500mg活性成分，可每天给予一次或多次。通过注射(包括静脉内、肌内、皮下和胃肠外注射)以及使用滴注技术的日给药剂量可以为约0.01mg/kg至约200mg/kg。每日直肠剂量方案可以为0.01mg/kg至200mg/kg总体重。透皮给药需要维持的日剂量为0.01mg/kg至200mg/kg。
当然，每个患者的具体初始剂量方案和持续剂量方案必须根据临床医生确定的病症性质和严重程度、所用具体化合物的活性、患者年龄、患者饮食、给药时间、给药途径、药物排泄速率、药物组合等而变化。本领域的技术人员可利用常规的治疗测试，确定所需的治疗方式和本发明化合物的给药次数。
通过对需要治疗的患者给予适当配制的药物组合物，本发明化合物可用于实现所需的药理效果。对于本发明目的而言，患者是需要治疗特定病症或疾病的哺乳动物，包括人。因此，本发明包括含有药学上可接受的载体和治疗有效量的化合物的药物组合物。药学上可接受的载体是指在与活性成分有效活性相容的浓度下(这样载体的任何副作用均不会损害活性成分的有益作用)，对患者相对无毒和无害的任何载体。化合物的治疗有效量是指产生疗效或对所治疗特定病症产生影响的剂量。采用任何有效的常规剂量单元形式(包括例如立即释放制剂和定时释放制剂)，可将本发明化合物与药学上可接受的载体一起通过口服、胃肠外、局部等途径给药。
对于口服给药，化合物可以配制为固体或液体制剂，例如胶囊剂、丸剂、片剂、锭剂、糖锭、熔化物、散剂、溶液剂、混悬剂或乳剂，它们可根据本领域生产药物组合物的已知方法制备。固体单元剂型可以是一般的硬质明胶胶囊剂或软质明胶胶囊剂，其中包含表面活性剂、润滑剂和惰性填料(例如乳糖、蔗糖、磷酸钙和玉米淀粉)。
在另一实施方案中，本发明化合物可以用常规片剂基(例如乳糖、蔗糖和玉米淀粉)以及下述助剂制备片剂粘合剂，例如阿拉伯胶、玉米淀粉或明胶；崩解剂，用于在给药后帮助于崩解和溶解片剂，例如马铃薯淀粉、海藻酸、玉米淀粉和瓜尔胶；润滑剂，用来改善片剂成粒的流动性并预防片剂原料粘附在制片冲模和冲头表面，例如滑石粉、硬脂酸、硬脂酸镁、硬脂酸钙或硬脂酸锌；染料；着色剂；以及矫味剂，用来改善片剂外观并使其更易被患者接受。用于口服液体剂型的合适赋形剂包括稀释剂，例如水和醇(例如乙醇、苯甲醇和聚乙二醇)，可添加或不添加药学上可接受的表面活性剂、悬浮剂或乳化剂。各种其它材料可以用于包衣或者在其它方面改善剂量单位的物理形式。例如片剂、丸剂或胶囊剂可以包被虫胶、食糖或者以上二者。
可分散的散剂和颗粒剂适用于制备水性混悬剂。它们可提供与分散剂或湿润剂、悬浮剂及一种或多种防腐剂相混合的活性成分。适宜的分散剂或湿润剂和悬浮剂的实例已在上文中给出。还可使用其它赋形剂，例如上述甜味剂、矫味剂和着色剂。
本发明药物组合物也可以为水包油乳剂。油相可以是植物油，例如液体石蜡或植物油混合物。合适的乳化剂可以是(1)天然树胶，例如阿拉伯胶和西黄蓍胶，(2)天然磷脂，例如大豆和卵磷脂，(3)由脂肪酸和己糖醇酐衍生的酯或偏酯，例如山梨糖醇酐单油酸酯，(4)所述偏酯与环氧乙烷的缩合产物，例如聚氧乙烯山梨糖醇酐单油酸酯。乳剂还可以包含甜味剂和矫味剂。
油性混悬剂的制备可将活性成分悬浮于植物油，例如花生油、橄榄油、芝麻油或椰子油；或者悬浮于矿物油，例如液体石蜡。油性混悬剂可包含增稠剂，例如蜂蜡、固体石蜡或鲸蜡醇。混悬剂还可包含一种或多种防腐剂，例如对羟基苯甲酸乙酯或对羟基苯甲酸正丙酯；一种或多种着色剂；一种或多种矫味剂；以及一种或多种甜味剂，例如蔗糖或糖精。
糖浆剂或酏剂可用甜味剂配制，例如丙三醇、丙二醇、山梨醇或蔗糖。这类制剂还可包含缓和剂、防腐剂、矫味剂和着色剂本发明化合物还可以胃肠外(即皮下、静脉内、肌内或腹膜内)给药，注射剂量的化合物加入生理上可接受的稀释剂以及药用载体，所述载体可以是无菌的液体或液体混合物，例如水、盐水、葡萄糖水溶液及相关的糖溶液；醇；二元醇；甘油缩酮；醚；油；脂肪酸；脂肪酸酯或甘油酯；或乙酰化脂肪酸甘油酯；并且添加或不添加药学上可接受的表面活性剂、悬浮剂或乳化剂以及其它药用辅料。
本发明胃肠外组合物的溶液中通常包含约0.5％至约25％(重量)活性成分。还可使用有益的防腐剂和缓冲剂。为了最小化或消除对注射部位的刺激，这类组合物可包含亲水-亲油平衡(HLB)为约12至约17的非离子表面活性剂。在这类制剂中，表面活性剂含量为约5％至约15％(重量)。表面活性剂可以是具有上述HLB的单个组分，也可以是具有所需HLB的两种以上组分的混合物。
药物组合物可以为无菌注射水性混悬剂形式。这类混悬剂可利用适宜分散剂或湿润剂和悬浮剂按照已知的方法配制，所述分散剂或湿润剂可以是天然磷脂、环氧烷与脂肪酸的缩合产物、环氧乙烷与长链脂肪醇的缩合产物、环氧乙烷与由脂肪酸和己糖醇衍生的偏酯的缩合产物、或环氧乙烷与由脂肪酸和己糖醇酐衍生的偏酯的缩合产物。
无菌注射制剂也可以是胃肠外可接受的无毒稀释剂或溶剂中的无菌注射溶液剂或混悬剂。可使用的稀释剂和溶剂包括例如水、林格(Ringer)溶液和等渗氯化钠溶液。另外，无菌不挥发油类通常用作溶剂或悬浮介质。用于此目的时，可使用任何温和的不挥发油类，包括合成的甘油单酯或甘油二酯。此外，脂肪酸(例如油酸)可用于制备注射剂。
本发明组合物也可以栓剂形式直肠给药。这些组合物可如下制备将药物(例如化合物)与合适的无刺激赋形剂混合，所述赋形剂在常温度下为固体，而在直肠温度下为液体，因此，将在直肠中融化而释放出药物。这类材料包括例如可可油和聚乙二醇。
在本发明方法中使用的另一种制剂采用透皮给药装置(“贴剂”)。这类透皮贴剂可用于连续或非连续浸入控制量的本发明化合物。给予药物的透皮贴剂的制造和使用在本领域是公知的(参见美国专利5,023,252，通过引用结合到本文)。这类贴剂可制成连续、脉动或按需给予药物。
可能需要通过机械输送装置将药物组合物给予患者。制造和使用用于给予药物的机械输送装置在本领域中是公知的。例如，对大脑直接给药的直接给药技术通常涉及将药物输送导管置入患者的脑室系统，从而避开血脑屏障。美国专利US 5,011,472(通过引用结合到本文)介绍了一种这样的植入输送系统，它用于将药物输送至身体特定解剖学部位。
必要时，本发明组合物还可包含其它常规的药学上可接受的配合成分，通常称为载体或稀释剂。可加入抗氧化剂(例如抗坏血酸)或其它合适的防腐剂，以保存本发明任何组合物。可以采用制备适当剂型的组合物的常规方法。
本发明化合物可以单独给予，或者与一种或多种其它药物联合给予，前提是这种联合给药不会引起不可接受的副作用。例如，本发明化合物可与已知的减肥药、已知的抗糖尿病或其它适应症的药物以及它们的混合物或组合物联合应用。
本发明化合物也可在研究和诊断中以游离碱或组合物形式应用，或用作分析参考标准等。因此，本发明包括含惰性载体和有效量的本文介绍方法鉴定的化合物或者其盐或酯的组合物。惰性载体是指不与所携带化合物相互作用并且为所携带化合物提供载体、输送工具、增量和示踪材料等的任何材料。化合物的有效量是指能够产生疗效或者对进行的特定过程产生影响的剂量。
适合皮下、静脉内、肌内等给药的制剂以及合适的药用载体可通过本领域公知的方法制备，用于配制和给药的技术是本领域公知的(参见例如Remington′s Pharmaceutical Sciences，Mack PublishingCo.，Easton，Pa.，第20版，2000)。
对本领域普通技术人员显而易见的是，根据本文阐述，可以对本发明作出不偏离原有精神或范围的改变和改进。
生物学评价为了更好地理解本发明，给出了下列实施例。这些实施例仅用于示例说明，而不应解释为对本发明范围的任何限制。上文提及的所有出版物均通过引用全部结合到本文。
通过本领域公知的体外、离体和体内测定法可证明本发明化合物活性。例如为了证明某个药物治疗糖尿病及其相关疾病(例如X综合症、糖耐量减低、空腹血糖异常和高胰岛素血症)的功效，可采用下述测定法。
体外测定法由INS-1细胞分泌胰岛素从X-射线诱导的大鼠胰岛瘤分离出INS-1细胞(Asfari等，Endocrinology 130167，1992)。在Biocoat Collagenl Cellware 96孔板中，以每孔30,000个细胞接种INS-1细胞，孵育4-5天。将细胞用调节至3mM葡萄糖的完全培养基(RPMI 1640，10％胎牛血清，100μg/ml青霉素/链霉素，0.5mM丙酮酸钠，10mM HEPES以及50μMβ-巯基乙醇)处理2天。处理两天后，用含3mM葡萄糖的Krebs-RingerBicarbonate-HEPES(KRBH)洗涤细胞。然后在相同缓冲液中孵育细胞30分钟。加入所需浓度葡萄糖和化合物后再孵育细胞2小时。收集上清液。
为了测定所分泌的胰岛素量，将上清液与抗胰岛素抗体和示踪量125I-胰岛素的磷酸缓冲盐溶液(含0.5％牛血清白蛋白)混合。加入A蛋白包被的SPA(闪烁亲近测定)珠。将各板孵育5-20小时，在闪烁计数器中计数，从而测出胰岛素水平。将特定浓度下的化合物活性表达成相对于对照的刺激胰岛素分泌倍数。
由分散的大鼠胰岛细胞分泌胰岛素按照下述方法，测定了大量本发明化合物介导的分散大鼠胰岛细胞的胰岛素分泌。从雄性Sprague-Dawley大鼠(200-250g)分离出Langerhans胰岛，用胶原酶消化。将胰岛细胞用胰蛋白酶处理分散，接种到V型底的96孔板中，沉淀。将细胞在加有或不加本发明化合物的培养基中培养过夜。吸出培养基，在37℃下，用含3mM葡萄糖的Krebs-Ringer-HEPES缓冲液预孵育细胞30分钟。除去预孵育的缓冲液，在本发明化合物存在或不存在下，用含适当葡萄糖浓度(例如8mM)的Krebs-Ringer-HEPES缓冲液在37℃孵育适当时间。在部分研究中，还包括适当浓度的GLP-1或毛喉素。取出部分上清液，通过SPA测量其胰岛素含量。结果表示为“相对对照的倍数”(FOC)。
在该测定中，由分散的大鼠胰岛细胞分泌胰岛素的增加定义为至少1.4倍的增加。
体内测定化合物对大鼠腹膜内葡萄糖耐量的影响大鼠在经口管饲后，测量本发明化合物的体内活性。对禁食过夜的大鼠给予口服剂量的溶媒对照或化合物。3小时后，测量基础血糖水平，腹膜内给予大鼠2g/kg葡萄糖。15分钟、30分钟和60分钟后再测定血糖水平。在IPGTT(腹膜内葡萄糖耐量测试)后，本发明代表性化合物相对于溶媒显著地降低了血糖水平。
对心血管参数影响的测量方法还评价心血管参数(例如心率和血压)。SHR大鼠每天口服一次溶媒或试验化合物，持续两周。按照Grinsell等(Am.J.Hypertens.，13370-375，2000)介绍的尾套法(tail-cuff method)，测量血压和心率。按照Shen等(J.Pharmacol.Exp.Therap.，2781435-1443，1996)介绍的方法，监测猴子的血压和心率。
甘油三酯水平的测量方法给hApoAl小鼠(Jackson Laboratories，Bar Harbor，ME)放血(从眼静脉或尾静脉)，根据相同的平均血清甘油三酯水平分组。每天口服(结合药学上可接受的赋形剂，管饲)一次试验化合物，持续8天。然后给小鼠再次从眼静脉或尾静脉放血，测量血清甘油三酯水平。在所有情况下，都使用Technicon Axon Autoanalyzer(BayerCorporation，Tarrytown，NY)测量甘油三酯水平。
HDL-胆固醇水平的测量方法为了测量血浆HDL-胆固醇水平，给hApoAl小鼠放血，根据相同的平均血浆HDL-胆固醇水平分组。小鼠每天口服一次溶媒或试验化合物，持续7天，然后在第8天再次放血。用Synchron Clinical System(CX4)(Beckman Coulter，Fullerton，CA)分析血浆中的HDL-胆固醇。
总胆固醇、HDL-胆固醇、甘油三酯和葡萄糖水平的测量方法在另一种体内测定法中，给肥胖猴子放血，然后每天口服一次溶媒或试验化合物，持续4周，然后再次放血。用Synchron ClinicalSystem(CX4)(Beckman Coulter，Fullerton，CA)分析血清中的总胆固醇、HDL-胆固醇、甘油三酯和葡萄糖。按照Oliver等(Proc.Natl.Acad.Sci.，USA 985306-5311，2001)介绍的方法，用NMR光谱进行脂蛋白亚型分析。
上述说明书中提及的所有出版物和专利通过引用结合到本文。本发明组合物和方法的不偏离本发明范围和精神的各种改进和改变，对本领域技术人员是显而易见的。尽管结合具体的实施方案介绍了本发明，但应当理解的是，本发明要求保护的范围不应仅仅限于这些具体的实施方案。实际上，实施本发明的上述方式的各种变化如果对于分子生物学或相关领域的技术人员显而易见的，那么这些变化都属于所附权利要求范围。仅利用常规实验方法，本领域技术人员就能够识别或确定许多与本发明所述具体实施方案等同的方案。这样的等同实施方案也包括在所附权利要求范围内。
权利要求
1.一种下式(I)的杂芳基氨基吡唑衍生物及其药学上可接受的盐 其中 为选自以下的取代的杂芳族环基 R为H或(C1-C6)烷基；R1为H，任选被苯基取代的(C1-C6)烷基，所述苯基任选被卤素或[三(C1-C4)烷基]甲硅烷基取代，(C3-C6)烯基，(C3-C6)炔基，(C3-C6)环烷基，任选被最多两个选自以下的取代基取代(C1-C3)烷基、CF3和卤素，(C1-C3)卤代烷基，或苯基，任选被最多两个选自以下的取代基取代卤素、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、(C1-C3)卤代烷基、(C1-C3)卤代烷氧基和氰基；R2为H，卤素，(C1-C6)烷基，吡啶基，任选被最多两个选自以下的取代基取代(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、卤素和(C1-C6)烷基，苯基，任选被最多两个选自以下的取代基取代(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、氰基和卤素，嘧啶基，噻吩基，任选被最多两个选自以下的取代基取代(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、氰基和卤素，苯并噻吩基，任选被最多两个选自以下的取代基取代(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、氰基和卤素，或呋喃基，任选被最多两个选自以下的取代基取代(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、氰基和卤素；R3为(C1-C6)烷基，(C3-C6)环烷基，(C2-C3)卤代烷基，或苯基，任选被最多四个选自以下的取代基取代任选被一个(C1-C4)烷氧基取代的(C1-C6)烷基、卤素、(C1-C3)卤代烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C3)卤代烷氧基、(C1-C6)烷硫基和氰基；R4为任选被一个(C1-C4)烷氧基取代的(C1-C6)烷基，(C1-C6)烷氧基，(C1-C6)烷硫基，(C1-C3)卤代烷基，(C1-C3)卤代烷氧基，或卤素；n＝0、1、2或3；X为CO2R7、CONR5R6或SO2NH2；R5为H、(C1-C6)烷基、任选被卤素取代的苯基、或任选在苯环上被卤素取代的苄基；R6为H或(C1-C6)烷基；或者R5和R6可以与它们所连接的氮原子一起构成哌啶、吗啉、硫代吗啉或哌嗪环，所述哌嗪任选在氮上被(C1-C3)烷基取代；R7为H，(C1-C6)烷基，苄基，任选在芳环上被最多两个选自以下的取代基取代卤素、(C1-C6)烷基、(C1-C3)烷氧基、(C1-C3)卤代烷基、(C1-C3)卤代烷氧基和(C1-C6)烷硫基；苯基，任选被最多两个选自以下的取代基取代(C1-C6)烷基、卤素、(C1-C6)烷氧基、(C1-C3)卤代烷基、(C1-C3)卤代烷氧基和(C1-C6)烷硫基；前提条件是式(I)化合物不是下列化合物
2.权利要求1的化合物及其药物可接受的盐，其中 为选自以下的取代的杂芳族环基 R为H或(C1-C6)烷基；R1为H，任选被苯基取代的(C1-C6)烷基，所述苯基任选被卤素或[三(C1-C4)烷基]甲硅烷基取代，(C3-C6)烯基，(C3-C6)炔基，(C3-C6)环烷基，任选被最多两个选自以下的取代基取代(C1-C3)烷基、CF3和卤素，(C1-C3)卤代烷基，或苯基，任选被最多两个选自以下的取代基取代卤素、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、(C1-C3)卤代烷基、(C1-C3)卤代烷氧基和氰基；R2为H，卤素，(C1-C6)烷基，吡啶基，任选被最多两个选自以下的取代基取代(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、卤素和(C1-C6)烷基，苯基，任选被最多两个选自以下的取代基取代(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、氰基和卤素，嘧啶基，噻吩基，任选被最多两个选自以下的取代基取代(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、氰基和卤素，苯并噻吩基，任选被最多两个选自以下的取代基取代(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、氰基和卤素，或呋喃基，任选被最多两个选自以下的取代基取代(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、氰基和卤素；R3为(C1-C6)烷基，(C3-C6)环烷基，(C2-C3)卤代烷基，或苯基，任选被最多四个选自以下的取代基取代任选被一个(C1-C4)烷氧基取代的(C1-C6)烷基、卤素、(C1-C3)卤代烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C3)卤代烷氧基、(C1-C6)烷硫基和氰基；R4为任选被一个(C1-C4)烷氧基取代的(C1-C6)烷基，(C1-C6)烷氧基，(C1-C6)烷硫基，(C1-C3)卤代烷基，(C1-C3)卤代烷氧基，或卤素；n＝0、1、2或3；X为CO2R7、CONR5R6或SO2NH2；R5为H、(C1-C6)烷基、任选被卤素取代的苯基、或任选在苯环上被卤素取代的苄基；R6为H或(C1-C6)烷基；或者R5和R6可以与它们所连接的氮原子一起构成哌啶、吗啉、硫代吗啉或哌嗪环，所述哌嗪任选在氮上被(C1-C3)烷基取代；R7为H，(C1-C6)烷基，苄基，任选在芳环上被最多两个选自以下的取代基取代卤素、(C1-C6)烷基、(C1-C3)烷氧基、(C1-C3)卤代烷基、(C1-C3)卤代烷氧基和(C1-C6)烷硫基；苯基，任选被最多两个选自以下的取代基取代(C1-C6)烷基、卤素、(C1-C6)烷氧基、(C1-C3)卤代烷基、(C1-C3)卤代烷氧基和(C1-C6)烷硫基。
3.权利要求1的化合物及药学上可接受的盐，其中 为选自以下的取代的杂芳族环基 R为H或(C1-C6)烷基；R1为H，任选被苯基取代的(C1-C6)烷基，所述苯基任选被卤素或[三(C1-C4)烷基]甲硅烷基取代，(C3-C6)环烷基，任选被最多两个选自以下的取代基取代(C1-C3)烷基、CF3和卤素，(C1-C3)卤代烷基，或苯基，任选被最多两个选自以下的取代基取代卤素、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、(C1-C3)卤代烷基、(C1-C3)卤代烷氧基和氰基；R2为H，卤素，(C1-C6)烷基，吡啶基，任选被最多两个选自以下的取代基取代(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、卤素和(C1-C6)烷基，苯基，任选被最多两个选自以下的取代基取代(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、氰基和卤素，嘧啶基；R3为(C1-C6)烷基，(C3-C6)环烷基，(C2-C3)卤代烷基，或苯基，任选被最多四个选自以下的取代基取代任选被一个(C1-C4)烷氧基取代的(C1-C6)烷基、卤素、(C1-C3)卤代烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C3)卤代烷氧基、(C1-C6)烷硫基和氰基；R4为任选被一个(C1-C4)烷氧基取代的(C1-C6)烷基，(C1-C6)烷氧基，(C1-C6)烷硫基，(C1-C3)卤代烷基，(C1-C3)卤代烷氧基，或卤素；n＝0、1或2；X为CO2R7或CONR5R6；R5为H或(C1-C6)烷基；R6为H或(C1-C6)烷基；或者R5和R6可以与它们所连接的氮原子一起构成哌啶、吗啉、硫代吗啉或哌嗪环，所述哌嗪任选在氮上被(C1-C3)烷基取代；R7为H或(C1-C6)烷基。
4.权利要求1的化合物及药学上可接受的盐，其中 为选自以下的取代的杂芳族环基 R为H或(C1-C6)烷基；R1为H，任选被苯基取代的(C1-C6)烷基，所述苯基任选被卤素或[三(C1-C4)烷基]甲硅烷基取代，(C3-C6)环烷基，任选被最多两个选自以下的取代基取代(C1-C3)烷基、CF3和卤素，(C1-C3)卤代烷基，或苯基，任选被最多两个选自以下的取代基取代卤素、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、(C1-C3)卤代烷基、(C1-C3)卤代烷氧基和氰基；R2为H，卤素，(C1-C6)烷基，苯基，任选被最多两个选自以下的取代基取代(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、氰基和卤素；R3为(C1-C6)烷基，(C3-C6)环烷基，(C2-C3)卤代烷基，或苯基，任选被最多四个选自以下的取代基取代任选被一个(C1-C4)烷氧基取代的(C1-C6)烷基、卤素、(C1-C3)卤代烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C3)卤代烷氧基、(C1-C6)烷硫基和氰基；R4为任选被一个(C1-C4)烷氧基取代的(C1-C6)烷基，(C1-C6)烷氧基，(C1-C6)烷硫基，(C1-C3)卤代烷基，(C1-C3)卤代烷氧基，或卤素；n＝0、1或2；X为CO2R7或CONR5R6；R5为H或(C1-C6)烷基；R6为H或(C1-C6)烷基；R7为H或(C1-C6)烷基。
5.权利要求1的化合物及药学上可接受的盐，其中 为选自以下的取代的杂芳族环基 R为H或(C1-C6)烷基；R1为H，任选被苯基取代的(C1-C6)烷基，所述苯基任选被卤素或[三(C1-C4)烷基]甲硅烷基取代，(C3-C6)环烷基，任选被最多两个选自以下的取代基取代(C1-C3)烷基、CF3和卤素，(C1-C3)卤代烷基，或，苯基，任选被最多两个选自以下的取代基取代卤素、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、(C1-C3)卤代烷基、(C1-C3)卤代烷氧基和氰基；R2为H，卤素，(C1-C6)烷基，苯基，任选被最多两个选自以下的取代基取代(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、氰基和卤素；R3为(C1-C6)烷基，(C3-C6)环烷基，(C2-C3)卤代烷基，或苯基，任选被最多四个选自以下的取代基取代任选被一个(C1-C4)烷氧基取代的(C1-C6)烷基、卤素、(C1-C3)卤代烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C3)卤代烷氧基、(C1-C6)烷硫基和氰基；R4为任选被一个(C1-C4)烷氧基取代的(C1-C6)烷基，(C1-C6)烷氧基，(C1-C6)烷硫基，(C1-C3)卤代烷基，(C1-C3)卤代烷氧基，或卤素；n＝0、1或2；X为CO2R7或CONR5R6；R5为H或(C1-C6)烷基；R6为H或(C1-C6)烷基；R7为H或(C1-C6)烷基。
6.权利要求1的化合物，其选自下列化合物(1)2-{[3-叔丁基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}-6-甲基烟酸；(2)2-{[3-环戊基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}烟酸；(3)3-{[3-叔丁基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}吡啶-2-甲酸；(4)2-{[3-(2，2-二甲基丙基)-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}烟酸；(5)2-{[1-(2-氯苯基)-3-(4-氟苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}烟酸；(6)3-{[3-叔丁基-1-(2，6-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}吡啶-2-甲酸；(7)2-{[3-叔丁基-1-(5-氟-2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}烟酸；(8)2-{[3-叔丁基-1-(2，5-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}烟酸；(9)2-{[3-叔丁基-1-(5-氟-2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}-6-甲基烟酸；(10)2-{[3-叔丁基-1-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}-6-甲基烟酸；(11)2-{[3-叔丁基-1-(2，5-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}-6-甲基烟酸；(12)2-{[3-叔丁基-1-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}-5-氟烟酸；(13)2-{[3-叔丁基-1-(2，6-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}-5-氟烟酸；(14)2-{[3-叔丁基-1-(5-氟-2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}-5-氟烟酸；(15)2-{[3-叔丁基-1-(2，5-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}-5-氟烟酸；(16)2-{[3-叔丁基-1-(2，5-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}-5-氟烟酸；(17)2-{[3-环己基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}烟酸；(18)2-{[1-(5-氟-2-甲基苯基)-3-(4-氟苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}烟酸；(19)2-{[1-(2-甲基苯基)-3-苯基-1H-吡唑-5-基]氨基}烟酸；(20)2-{[3-(4-氟苯基)-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}烟酸；(21)2-{[1-(2，5-二甲基苯基)-3-(4-氟苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}烟酸；(22)2-{[1-(2，5-二甲基苯基)-3-苯基-1H-吡唑-5-基]氨基}烟酸；(23)2-{[3-(4-氟苯基)-1-(2-甲氧基-5-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}烟酸；(24)2-{[3-(4-氟苯基)-1-(5-甲氧基-2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}烟酸；(25)2-{[1-(2，5-二甲基苯基)-3-苯基-1H-吡唑-5-基]氨基}-6-甲基烟酸；(26)2-{[1-(2，5-二甲基苯基)-3-(4-氟苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}-6-甲基烟酸；(27)2-{[3-(4-氟苯基)-1-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}-6-甲基烟酸；(28)2-{[3-(1，1-二甲基丙基)-1-(3-甲氧基-2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}烟酸；(29)2-{[3-(1，1-二甲基丙基)-1-(5-氟-2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}烟酸；(30)2-{[3-叔丁基-1-(2-氯苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}烟酸；(31)2-{[3-叔丁基-1-(2，6-二甲基苯基-1H-吡唑-5-基]氨基}烟酸；(32)2-{[3-叔丁基-1-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}烟酸；和(33)3-{[3-叔丁基-1-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸。
7.一种药物组合物，该药物组合物包含有效量的权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体。
8.一种药物组合物，该药物组合物包含治疗有效量的权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体和一种或多种药物。
9.权利要求14的药物组合物，其中所述药物选自PPAR配体、胰岛素促分泌素、磺酰脲类药物、α-葡糖苷酶抑制剂、胰岛素增敏剂、降低肝脏葡萄糖输出的化合物、胰岛素、胰岛素衍生物、双胍类、蛋白酪氨酸磷酸酶-1B、二肽基肽酶IV、11β-HSD抑制剂、减肥药、HMG-CoA还原酶抑制剂、烟酸、降血脂药、ACAT抑制剂、胆汁酸螯合剂、胆汁酸重摄取抑制剂、微粒体甘油三酯转运抑制剂、贝酸衍生物、β阻断剂、ACE抑制剂、钙通道阻断剂、利尿药、肾素抑制剂、AT-1受体拮抗剂、ET受体拮抗剂、中性内肽酶抑制剂、血管肽酶抑制剂和硝酸盐。
10.一种治疗糖尿病的方法，该方法包括对需要治疗的患者给予治疗有效量的权利要求1的化合物或权利要求7的药物组合物的步骤。
11.权利要求10的方法，其中所述糖尿病选自I型糖尿病、II型糖尿病、青少年成熟期突发型糖尿病、成人隐性自身免疫性糖尿病和妊娠糖尿病。
12.一种治疗X综合症的方法，该方法包括对需要治疗的患者给予治疗有效量的权利要求1的化合物或权利要求7的药物组合物的步骤。
13.一种治疗糖尿病相关疾病的方法，该方法包括对需要治疗的患者给予治疗有效量的权利要求1的化合物或权利要求7的药物组合物的步骤。
14.权利要求13的方法，其中所述糖尿病相关疾病选自高血糖症、高胰岛素血症、糖耐量减低、空腹血糖异常、血脂异常、高甘油三酯血症和胰岛素抵抗。
15.一种治疗或预防糖尿病继发性病因的方法，该方法包括对需要治疗的患者给予治疗有效量的权利要求1的化合物或权利要求7的药物组合物的步骤。
16.权利要求15的方法，其中所述继发性病因选自糖皮质激素过量、生长激素过量、嗜铬细胞瘤和药物引起的糖尿病。
17.一种治疗糖尿病的方法，该方法包括对需要治疗的患者给予治疗有效量的权利要求1的化合物以及一种或多种药物的步骤。
18.权利要求17的方法，其中所述药物选自PPAR激动剂、磺酰脲类药物、非磺酰脲类促分泌素、α-葡糖苷酶抑制剂、胰岛素增敏剂、胰岛素促分泌素、降低肝脏葡萄糖输出的化合物、胰岛素和减肥药。
19.权利要求18的方法，其中所述糖尿病选自I型糖尿病、II型糖尿病、青少年成熟期突发型糖尿病、成人隐性自身免疫性糖尿病和妊娠糖尿病。
20.一种治疗X综合症的方法，该方法包括对需要治疗的患者给予治疗有效量的权利要求1的化合物以及一种或多种药物的步骤。
21.权利要求20的方法，其中所述药物选自PPAR激动剂、磺酰脲类药物、非磺酰脲类促分泌素、α-葡糖苷酶抑制剂、胰岛素增敏剂、胰岛素促分泌素、降低肝脏葡萄糖输出的化合物、胰岛素和减肥药。
22.一种治疗糖尿病相关疾病的方法，该方法包括对需要治疗的患者给予治疗有效量的权利要求1的化合物以及一种或多种药物的步骤。
23.权利要求22的方法，其中所述糖尿病相关疾病选自高血糖症、高胰岛素血症、糖耐量减低、空腹血糖异常、血脂异常、高甘油三酯血症和胰岛素抵抗。
24.权利要求23的方法，其中所述药物选自PPAR激动剂、磺酰脲类药物、非磺酰脲类促分泌素、α-葡糖苷酶抑制剂、胰岛素增敏剂、胰岛素促分泌素、降低肝脏葡萄糖输出的化合物、胰岛素和减肥药。
25.一种治疗或预防糖尿病继发性病因的方法，该方法包括对需要治疗的患者给予治疗有效量的权利要求1的化合物以及一种或多种药物的步骤。
26.权利要求25的方法，其中所述药物选自PPAR激动剂、磺酰脲类药物、非磺酰脲类促分泌素、α-葡糖苷酶抑制剂、胰岛素增敏剂、胰岛素促分泌素、降低肝脏葡萄糖输出的化合物、胰岛素和减肥药。
27.一种治疗糖尿病、X综合症、糖尿病相关疾病或糖尿病继发性病因的方法，该方法包括对需要治疗的患者给予治疗有效量的权利要求1的化合物以及一种或多种药物的步骤，所述药物选自HMG-CoA还原酶抑制剂、烟酸、降血脂药、ACAT抑制剂、胆汁酸螯合剂、胆汁酸重摄取抑制剂、微粒体甘油三酯转运抑制剂、贝酸衍生物、β阻断剂、ACE抑制剂、钙通道阻断剂、利尿药、肾素抑制剂、AT-1受体拮抗剂、ET受体拮抗剂、中性内肽酶抑制剂、血管肽酶抑制剂和硝酸盐。
28.权利要求27的方法，其中所述糖尿病相关疾病选自高血糖症、高胰岛素血症、糖耐量减低、空腹血糖异常、血脂异常、高甘油三酯血症和胰岛素抵抗。
29.权利要求17-28中任一项的方法，其中权利要求1的化合物与一种或多种药物以单一药物制剂形式给药。
30.一种治疗心血管疾病的方法，该方法包括对需要治疗的患者给予治疗有效量的权利要求1的多肽或权利要求7的药物组合物的步骤。
31.权利要求30的方法，其中所述心血管疾病选自动脉粥样硬化、冠心病、冠状动脉疾病和高血压。
32.一种治疗肥胖症的方法，该方法包括对需要治疗的患者给予治疗有效量的权利要求1的化合物或权利要求7的药物组合物的步骤。
33.一种刺激有需要的患者的胰岛素分泌的方法，该方法包括对所述患者给予权利要求1的化合物或权利要求7的药物组合物。
34.权利要求1的化合物，用于治疗和/或预防糖尿病和糖尿病相关疾病。
35.一种药物，包含至少一种权利要求1的化合物和至少一种药学上可接受、药用安全的载体或赋形剂。
36.权利要求1的化合物在制备用于治疗和/或预防糖尿病和糖尿病相关疾病的药物中的用途。
37.权利要求35的药物，用于治疗和/或预防糖尿病。
全文摘要
本发明涉及杂芳基氨基吡唑化合物、药物组合物以及治疗糖尿病和相关疾病的方法。
文档编号A61K31/4155GK1946715SQ200580012855
公开日2007年4月11日 申请日期2005年2月24日 优先权日2004年2月27日
发明者J·鲁多尔夫, P·维肯斯, 庄智媛, 陈利冰, S·马努森, A·奥拉格, 漆宁 申请人:拜尔药品公司
技术领域：
本发明涉及杂芳基氨基吡唑化合物、药物组合物和治疗糖尿病及其相关疾病的方法。
背景技术：
糖尿病的特征在于葡萄糖代谢能力削弱，尤其表现为糖尿病患者的血糖水平升高。依据基本缺陷，糖尿病被分成两大类。当患者的胰腺中缺乏产生胰岛素的β-细胞时，就会产生I型糖尿病，即胰岛素依赖型糖尿病(IDDM)。当患者的β细胞功能受损以及胰岛素作用变化时，就会产生II型糖尿病，即非胰岛素依赖型糖尿病(NIDDM)。
目前治疗I型糖尿病患者的方法是注射胰岛素，而大多数II型糖尿病患者都是利用能够刺激β细胞功能或能够增强患者对胰岛素的组织敏感性的药物进行治疗。现有用于治疗II型糖尿病的药物包括α-葡糖苷酶抑制剂、胰岛素增敏剂、胰岛素促分泌素和二甲双胍。
经过一段时间后，几乎有一半的II型糖尿病患者都会对这些药物失去响应。在饮食调节、锻炼及口服药物不足以控制血糖后，才进行胰岛素治疗。胰岛素治疗的缺点是需要进行药物注射，并且可能导致低血糖和体重增加。
由于目前治疗方法存在上述问题，所以需要新的II型糖尿病疗法。尤其需要能保持正常(葡萄糖依赖的)胰岛素分泌的新疗法。这类新药物应该具有下列特征依赖于葡萄糖促进胰岛素分泌(即化合物只在葡萄糖水平升高时才刺激胰岛素分泌)；首次和二次失败率较低；保存胰岛细胞功能。
INS-1细胞是胰岛β细胞胰岛素分泌的模型。在β-巯基乙醇存在下维持时，这些细胞保留原位胰岛β细胞的许多特征。细胞可响应生理上相关的葡萄糖浓度分泌胰岛素，EC50为6mM葡萄糖(Hohmeier等，Diabetes 49424，2002)。这些细胞还响应多种已知的促分泌素分泌胰岛素，所述促分泌素包括能够提高胞内环AMP、除葡萄糖之外的营养成分以及氯化钾的药物。INS-1细胞的这种特征进一步证明，这些细胞保留了许多参与胰岛素分泌响应的信号传导途径，由此适用于鉴定能影响这些途径的化合物。因此，INS-1细胞可作为鉴定工具，用于鉴定在葡萄糖存在下可刺激胰岛素分泌的化合物，而这样的化合物可用于治疗糖尿病及其相关疾病。
发明内容
本发明提供下式(I)的杂芳基氨基吡唑衍生物及其药学上可接受的盐 其中 为选自以下的取代的杂芳族环基
R为H或(C1-C6)烷基；R1为H，任选被苯基取代的(C1-C6)烷基，所述苯基任选被卤素或[三(C1-C4)烷基]甲硅烷基取代，(C3-C6)烯基，(C3-C6)炔基，(C3-C6)环烷基，任选被最多两个选自以下的取代基取代(C1-C3)烷基、CF3和卤素，(C1-C3)卤代烷基，或苯基，任选被最多两个选自以下的取代基取代卤素、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、(C1-C3)卤代烷基、(C1-C3)卤代烷氧基和氰基；R2为H，卤素，(C1-C6)烷基，吡啶基，任选被最多两个选自以下的取代基取代(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、卤素和(C1-C6)烷基，苯基，任选被最多两个选自以下的取代基取代(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、氰基和卤素，嘧啶基，噻吩基，任选被最多两个选自以下的取代基取代(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、氰基和卤素，苯并噻吩基，任选被最多两个选自以下的取代基取代(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、氰基和卤素，或呋喃基，任选被最多两个选自以下的取代基取代(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、氰基和卤素；R3为(C1-C6)烷基，(C3-C6)环烷基，
(C2-C3)卤代烷基，或苯基，任选被最多四个选自以下的取代基取代任选被一个(C1-C4)烷氧基取代的(C1-C6)烷基、卤素、(C1-C3)卤代烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C3)卤代烷氧基、(C1-C6)烷硫基和氰基；R4为任选被一个(C1-C4)烷氧基取代的(C1-C6)烷基，(C1-C6)烷氧基，(C1-C6)烷硫基，(C1-C3)卤代烷基，(C1-C3)卤代烷氧基，或卤素；n＝0、1、2或3；X为CO2R7、CONR5R6或SO2NH2；R5为H、(C1-C6)烷基、任选被卤素取代的苯基、或任选在苯环上被卤素取代的苄基；R6为H或(C1-C6)烷基；或者R5和R6可以与它们所连接的氮原子一起构成哌啶、吗啉、硫代吗啉或哌嗪环，所述哌嗪任选在氮上被(C1-C3)烷基取代；R7为H，(C1-C6)烷基，苄基，任选在芳环上被最多两个选自以下的取代基取代卤素、(C1-C6)烷基、(C1-C3)烷氧基、(C1-C3)卤代烷基、(C1-C3)卤代烷氧基和(C1-C6)烷硫基；苯基，任选被最多两个选自以下的取代基取代(C1-C6)烷基、卤素、(C1-C6)烷氧基、(C1-C3)卤代烷基、(C1-C3)卤代烷氧基和(C1-C6)烷硫基；
前提条件是式(I)化合物不是下列化合物 上文中的术语在本文中具有下列含义术语“卤素”是指F、Br、Cl和I。
术语“(C1-C3)烷基”和“(C1-C6)烷基”分别是指具有约1至约3个碳原子或者约1至约6个碳原子的直链或支链饱和烃基。这类基团包括但不限于甲基、乙基、正丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基、戊基、己基等。
术语“(C3-C6)烯基”指含有双键以及约3至约6个碳原子的直链或支链不饱和烃基。双键可位于链中任何两个有效碳原子之间。这类基团包括但不限于烯丙基、异丙烯基、2-丁烯基、2-乙基-2-丁烯基、1-己烯基等。
术语“(C3-C6)炔基”指含有三键以及约3至约6个碳原子的直链或支链不饱和烃基。三键可位于链中任何两个有效碳原子之间。这类基团包括但不限于炔丙基、2-丁炔基、1-甲基-2-丁炔基、3-己炔基等。
术语“(C3-C6)环烷基”括例如环丙基、环丁基、环戊基和环己基等。
术语“(C1-C4)烷氧基”“(C1-C6)烷氧基”分别是指分别具有约1至约4个碳原子和约1至约6个碳原子的直链或支链饱和烃基，所述基团连接至氧原子。烷氧基取代基通过该氧原子与分子的其余部分相连。这类基团包括但不限于甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、叔丁氧基、戊氧基、己氧基等。
术语“(C1-C3)卤代烷氧基”指在C上被卤素原子取代的(C1-C3)烷氧基。这类基团包括但不限于三氟甲氧基、二氟甲氧基、2，2-二氟乙氧基、2，2，2-三氟乙氧基、2-氯乙氧基、3-氯丙氧基、1-氟-2，2-二氯乙氧基等。
术语“(C1-C3)卤代烷基”和“(C2-C3)卤代烷基”分别是指在C上被卤素原子取代的(C1-C3)烷基和(C2-C3)烷基。这类基团包括但不限于三氟甲基、二氟乙基、1-氟-2，2-二氯乙基、3-氯丙基、4-溴己基等。
术语“[三(C1-C4)烷基甲硅烷基]”是指带有三个(C1-C4)烷基取代基的硅基团，独立地选取各个取代基。上述基团通过硅原子与分子的其余部分相连。这类基团包括但不限于三甲基甲硅烷基、叔丁基-二甲基甲硅烷基等。
术语“(C1-C6)烷硫基”是指具有约1至约6个碳原子的直链或支链饱和烃基，所述基团连接至硫原子。上述烷硫基取代基通过硫原子与分子的其余部分相连。这类基团包括但不限于甲硫基、乙硫基、正丙硫基、异丙硫基等。
术语“任选取代的”是指这样修饰的部分可具有0个到至少所指出的最高数量的取代基。只要在化学上可能并其是化学稳定的，各个取代基可置换所修饰部分中的任何氢原子。在任何部分含有两个以上取代基时，独立于任何其它取代基选取各个取代基，因此各取代基可以是相同或不同的。
在式(I)中，以下杂环基的连接点是标有虚线(---)的键 各个基团上的X基固定在以上基团连接点的邻位。以上基团中的任选的R4(最多n个)可以位于任何有效碳原子上。
新化合物的其它形式本发明化合物还包括它的(a)立体异构体，(b)药学上可接受的盐，(c)互变异构体，(d)被保护的酸和共轭酸和(e)前药。
这些化合物的立体异构体可包括但不限于对映异构体、非对映异构体、外消旋混合物及它们组合。这类立体异构体可通过常规方法制备和分离，利用对映异构体原料反应或者分离本发明化合物的异构体。异构体可包括几何异构体。几何异构体的实例包括但不限于双键的顺式异构体或反式异构体。本发明化合物的其它异构体也是包括在内。异构体可以采用上述抑制剂的纯净形式或者与其它异构体的混合物形式。
本发明化合物的药学上可接受的盐包括用于生成碱金属盐或者用于生成游离酸或游离碱的加成盐的常用盐。盐的性质并不重要，只要是药学上可接受的。合适的药学上可接受的酸加成盐可用无机酸或有机酸制备。这类无机酸的实例有盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硝酸、碳酸、硫酸和磷酸。适宜的有机酸可选自脂族酸、环脂族酸、芳族酸、杂环酸、羧酸和磺酸类有机酸。有机酸和磺酸类有机酸的实例包括但不限于甲酸、乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、葡糖酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、葡糖醛酸、马来酸、富马酸、丙酮酸、天冬氨酸、谷氨酸、苯甲酸、邻氨基苯甲酸、甲磺酸、水杨酸、4-羟基苯甲酸、苯基乙酸、扁桃酸、恩波酸(扑姆酸)、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、泛酸、2-羟基乙磺酸、甲苯磺酸、磺胺酸、环己基氨基磺酸、硬脂酸、藻酸、N-羟基丁酸、水杨酸、半乳糖二酸和半乳糖醛酸及它们的组合。
本发明化合物的互变异构体包括在本发明范围内。由此，例如羰基包括其羟基互变异构体。
被保护的酸包括但不限于酯、羟基氨基衍生物、酰胺和磺酰胺。
本发明包括前药和前药的盐。为了提高母体化合物的性能，前药的制备在本领域是公知的；这类性能包括溶解性、吸收性、生物稳定性和释放时间(参见如“Pharmaceutical Dosage Form and DrugDelivery Systems”(第6版)，Ansel等编辑，Williams & Wilkins，p.27-29，(1995)，通过引用结合到本文)。常用的前药被设计成利用主要的药物生物转化反应，也被认为属于本发明范围内。主要的药物生物转化反应包括N-脱烷基化反应、O-脱烷基化反应、脂族羟基化反应、芳族羟基化反应、N-氧化反应、S-氧化反应、脱氨基反应、水解反应、葡糖醛酸化反应、硫酸化反应和乙酰化反应(参见如Goodman and Gilman′s The Pharmacological Basis of Therapeutics(第9版)，Molinoff等编辑，McGraw-Hill，p11-13，(1996)，通过引用结合到本文)。
在Journal of Organic Chemistry各卷的第一期中有本领域普通有机化学工作者使用的缩写词综合列表；这种列表通常是标题为Standard List of Abbreyiations的表格。所述列表包含的缩写词及本领域普通有机化学工作者使用的所有缩写词通过引用结合到本文。
对于本发明目的而言，化学元素根据Periodic Table of theElements，CAS版，Handbook of Chemistry and Physics，第67版，1986-87鉴定。所述列表包含的缩写词及本领域普通有机化学工作者使用的所有缩写词通过引用结合到本文。
对于本发明目的而言，化学元素根据Periodic Table of theElements，CAS版，Handbook of Chemistry and Physics，第67版，1986-87鉴定。
通用制备方法通常，本发明所用化合物可利用市售或根据常规化学方法合成制备的原料，通过本领域已知的标准技术、已知的类似方法和/或本文介绍的方法制备。下列制备方法用于帮助读者合成本发明化合物。除非另有说明，否则在各反应流程中，R1-R7、X、和 具有上文定义的相同含义。
反应流程A说明了制备式(Ia)化合物[R为H的式(I)化合物]的一般方法。采用Ullmann型条件(例如含乙酸铜(II)的DMF，在封闭管中加热16小时)，使式(III)氨基吡唑与式(IV)的2-氯-、2-溴-、2-碘-或2-三氟甲基磺酸酯基-杂芳基羧酸、羧酸酯或羧酰胺偶合。或者还可以采用Buchwald型条件(例如含碳酸铯、BINAP和钯催化剂(例如Pd2(dba)3或Pd(OAc)2)的无水甲苯，在氩气氛下加热至110℃ 16小时)，式(III)与式(IV)的2-氯、2-溴、2-碘或2-三氟甲基磺酸酯基-杂芳基羧酸酯、羧酰胺或磺酰胺偶合。
反应流程A 反应流程B图示说明式(Id)化合物[X为COOH的式(I)化合物]和式(Ie)化合物[X为CONR5R6的式(I)化合物]的制备方法。通常在温和的碱水溶液中，将式(Ib)酯化合物[X为CO2R7的式(I)，按照反应流程A制备]水解为式(Id)的酸化合物。然后，式(Id)可以与胺R5R6NH反应，转化为式(Ie)的酰胺，任选使用偶合剂(例如HOBT、EDCI和三乙胺)的混合物。或者，式(Ic)的腈化合物[X为CN的式(I)化合物]可以直接在碱水溶液中水解，得到式(If)的伯酰胺化合物[X为CONR5R6且R5和R6为H的式(I)化合物]。
反应流程B 反应流程C说明了制备R2为碘、氯或氟的式(I)化合物的通用方法。式(Ig)化合物[R2为H的式(I)化合物]可以用诸如N-碘代丁二酰亚胺(NIS)或N-氯代丁二酰亚胺(NCS)的试剂碘化或氯化，得到式(Ih)化合物[R2为I或Cl的式(I)化合物]。类似地，将式(Ig)化合物用氟化剂(例如Selectfluor)处理，得到式(Ii)化合物[R2为F的式(I)化合物]。
反应流程C 反应流程D概述了制备X＝SO2NH2的式(I)化合物的通用方法。
式(Ij)的N，N-二苄基磺酰胺化合物通过反应流程A介绍的Buchwald型偶合反应制备，并且可以用硫酸脱苄基化，得到式(Ik)化合物。
反应流程D R为(C1-C6)烷基的式(Im)化合物如下制备在例如反应流程E所示的标准条件下，N-烷基化相应的式(Ia)化合物(R为H)。这些条件包括烷基化剂(例如碘甲烷)和碱(例如氢化钠)，并且此反应在惰性溶剂例如DMF中进行。当X为羧酸酯时，进行标准水解(即NaOH、H2O)，得到R为烷基且X为CO2H的式(I)化合物。
反应流程E (Ia)(I)，当R＝H时R＝(C1-C6)烷基(Im)(I)，当R为(C1-C6)烷基时当X＝CO2烷基时，额外水解步骤得到R为(C1-C6)烷基且X＝CO2H的式(I)化合物中间体的合成中间体可以是市售的，或通过本领域已知的标准方法和/或以下方法之一的类似方法制备。
5-氨基吡唑式(III)的5-氨基吡唑原料可以是市售的，或者可按照下述反应流程F、G或H制备。
在反应流程F中，任选取代的乙腈与适当取代的酯(VI)和碱进行缩合反应，得到氰基酮(VII)。必要时，R1为任选取代的苯基的式(VI)酯可以用相应的式R1-Br溴代化合物制备，例如使其与BuLi和CO2反应，生成式R1-COOH酸，它可被酯化为式(VI)。然后，使式(VII)化合物与式(II)的取代肼或式(V)的取代腙反应，得到所需的氨基吡唑(III)。如果氰基酮(VII)是市售的，则可以省去第一步骤。
反应流程F 在反应流程G中，使式(VIII)的腈与乙腈反应，形成烯氨基腈(IX)，然后与肼(II)或腙反应，生成(IIIa)[R2＝H的式(III)化合物]。
反应流程G 反应流程H说明了通过溴化反应和Suzuki偶合反应引入除氢之外的R2基团，从而使式(IIIa)的氨基吡唑转化为其它的式(III)氨基吡唑。
反应流程H *合适的硼酸酯包括
R2B(OR′)2，其中R′为低级烷基，或两个R′基团可构成环，例如 以及三聚硼酸酯，例如 下文中间体B-I中介绍了氨基吡唑的制备实例。
肼和腙式(II)肼和式(V)腙原料均是市售的，或者在为苯基肼时(R3＝任选取代的苯基)可以按照反应流程I制备，其中将取代的苯胺转化为重氮盐中间体，随后用氯化锡(II)作还原剂将重氮盐还原。
反应流程I Ropt sub＝任选取代基(IIa)，[(II)，R3＝任选取代的苯基]在钯催化剂和碱存在下，用苯基卤或苯基三氟甲磺酸酯和腙(例如二苯甲酮腙)，按照反应流程J制备N-苯基腙。
反应流程J Ropt sub＝任选取代基W＝Cl，Br，I，或OTf在下文中间体A中介绍了芳基肼的制备实例。在中间体B步骤1和中间体C步骤2中介绍了芳基腙的制备实例。
卤代吡啶和卤代嘧啶羧酸和磺酰胺衍生物用于和5-氨基吡唑偶合的卤素吡啶-和卤素嘧啶羧酸衍生物是市售的，或者可通过本领域公知的简单方法制备。吡啶或嘧啶上的其它取代基可以通过标准方法引入，例如反应流程K中用于制备3-氯-6-甲氧基吡啶-2-甲酸甲酯的方法。
反应流程K 下文的中间体J介绍了这类制备方法的一个实例。
反应流程L说明了2-卤素吡啶磺酰胺中间体的制备方法。将2-氯-3-氨基吡啶与亚硝酸钠/酸和磺酰氯反应，转化为2-氯吡啶磺酰氯。然后，将此化合物与二苄基胺反应，得到所需2-氯吡啶3-磺酰胺中间体。按照反应流程A和D介绍的方法，以上化合物可以转化为最终产物。
反应流程L 本发明的具体实施例以下具体实施例用于说明本发明，但决不应该解释为对本发明范围的任何限制。
缩写词当下列缩写词在本发明公开文本中使用时，它们具有以下含义abs 无水Ac 乙酰基AcOH乙酸amu 原子质量单位aq 水溶液BINAP2，2′-双(二苯基膦基)-1，1′-联萘Bn 苄基Boc 叔丁氧基羰基BTMAICl2二氯碘酸苄基三甲基铵Bu 丁基CDCl3 氘氯仿CDI 羰基二咪唑Celite硅藻土过滤剂的品牌，Celite Corporation的注册商标CI-MS化学电离质谱conc 浓的d二重峰DCM 二氯甲烷dd 双重峰的双重峰ddd 双重峰的双重峰的双重峰DMAP 4-(N，N-二甲基)氨基吡啶DMF N，N-二甲基甲酰胺DMSO 二甲亚砜DMSO-d6 二甲亚砜-d6DOWEX66 Dowex氢氧化物，弱碱性阴离子，大孔，25-50目
dppf 1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁EDCI 1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐EI电子轰击电离EI-MS 电子轰击-质谱equiv 当量ES-MS 电喷雾质谱Et乙基Et2O乙醚Et3N三乙胺EtOAc 乙酸乙酯EtOH 乙醇g 克GC-MS 气相色谱-质谱h 小时Hex己烷1H NMR 质子核磁共振HOAT 1-羟基-7-氮杂-苯并三唑HOBT 1-羟基苯并三唑HPLC 高效液相色谱HPLC ES-MS 高效液相色谱-电喷雾质谱KOtBu 叔丁醇钾L 升LC-MS 液相色谱/质谱LDA二异丙基氨基锂m 多重峰M 摩尔ml 毫升m/z质荷比
Me 甲基MeCN乙腈MeOH甲醇mg 毫克MHz 兆赫min 分钟mmol 毫摩尔mol 摩尔mp 熔点MS 质谱N正常NaOAc 乙酸钠NBS N-溴代丁二酰亚胺NCS N-氯代丁二酰亚胺NIS N-碘代丁二酰亚胺NMM 4-甲基吗啉NMR 核磁共振Pd2(dba)3 三(二亚苄基丙酮)合二钯(O)Pd(OAc)2 乙酸钯Pd(PPh3)4 四(三苯基膦)合钯(O)Pd/C 披钯碳Pd(dppf)Cl2 二氯化[1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁]钯(II)Ph 苯基ppm 百万分之一Pr 丙基psi 每平方英寸磅数PTSA 对甲苯磺酸q四重峰
qt 五重峰RfTLC保留因子rt 室温RT 保留时间(HPLC)s 单峰TBAF 四丁基氟化铵TBDMS 叔丁基二甲基甲硅烷基TBDMSCl叔丁基二甲基甲硅烷基氯TBS叔丁基二甲基甲硅烷基TFA三氟乙酸THF四氢呋喃TLC薄层色谱TMS四甲基甲硅烷v/v体积/单位体积vol体积w/w 重量/单位重量通用实验方法用注射器或导管转移对空气和水份敏感的液体和溶液，并穿过橡胶隔片引入到反应容器中。商品级试剂和溶剂没有进行纯化，直接使用。术语“减压浓缩”是指在大约15mm Hg柱下使用Buchi旋转蒸发器。所有温度均报告为未修正的摄氏温度(℃)。薄层色谱(TLC)在EM Science的衬有预涂覆玻璃的硅胶60A F-254 250μm板上进行。在Biotage系统上用32-63微米60A预填充硅胶柱进行柱色谱(快速色谱)处理。用制备型反相HPLC色谱纯化，其中采用Gilson 215系统，通常用YMC Pro-C18 AS-342(150×20mm I.D.)柱。通常，所用的流动相为H2O(A)和MeCN(B)的混合物。水中可以包含或不包含0.1％TFA。典型的梯度为
电子轰击质谱(EI-MS)是通过Hewlett Packard 5989A质谱仪获得，质谱仪配备有Hewlett Packard 5890 Gas Chromatograph，采用J&W DB-5柱(0.25μM涂层；30m×0.25mm)。离子源维持在250℃，在50-800amu，以2秒/次处扫描光谱。
利用下述方式获得高压液相色谱-电喷雾质谱(LC-MS)(A)Hewlett-Packard 1100HPLC，配备有四元泵，设定在254nm的可变波长检测器，YMC pro C-18柱(2×23mm，120A)，电喷雾电离的Finnigan LCQ离子阱质谱仪。根据离子源中离子数量，采用可变离子时间在120-1200amu扫描光谱。洗脱剂为A含0.02％TFA的2％乙腈/水，B含0.018％TFA的2％水/乙腈。梯度洗脱10％至95％B，3.5分钟，流速为1.0ml/min，开始保持0.5分钟，最后在95％B时保持0.5分钟。总的操作时间为6.5分钟。
或者(B)Gilson HPLC系统，配备两个Gilson 306泵，Gilson 215自动取样器，Gilson二极管阵列检测器，YMC pro C-18柱(2×23mm，120A)，及z-spray电喷雾电离的Micromass LCZ单四极质谱仪。在1.5秒种内，在120-800amu扫描光谱。由模拟通道获得ELSD(EvaporativeLight Scattering Detector(蒸发光散射检测器))数据。洗脱液为A含0.02％TFA的2％乙腈/水，B含0.018％TFA的2％水/乙腈。梯度洗脱10％至90％B，3.5分钟，流速1.5ml/min，开始保持0.5分钟，最后在90％B时保持0.5分钟。总的操作时间为4.8分钟。在柱转换和再生中使用另外的切换阀。
在300/400MHz Varian Mercury-plus光谱仪上测定常规一维NMR光谱。将样品溶解在Cambridge Isotope Labs的氘化溶剂中，转移至5mm ID Wilmad NMR管。在293K获得光谱。化学位移记录为ppm，并提及适当的溶剂信号，例如对于1H光谱2.49ppm(DMSO-d6)、1.93ppm(CD3CN)、3.30ppm(CD3OD)、5.32ppm(CD2Cl2)及7.26ppm(CDCl3)；对于13C光谱39.5ppm(DMSO-d6)、1.3ppm(CD3CN)、49.0ppm(CD3OD)、53.8ppm(CD2Cl2)及77.0ppm(CDCl3)。
中间体的合成肼中间体A(2，6-二甲基苯基)肼盐酸盐的制备 在搅拌下，向2，6-二甲基苯胺(5.0g，41.3mmol)和50％HCl水溶液(45ml)的冷溶液(0℃)中，缓慢加入NaNO2(2.85g，41.3mmol)和水(22.5ml)的冷溶液(0℃)。在加入期间严密监测温度，不要超过5℃。加入完毕后，将含重氮盐中间体的鲜橙色溶液在相同温度搅拌20分钟。在0℃、约5分钟内，将SnCl2(11.0g，57.8mmol)和浓HCl(30ml)的混合物加入到反应混合物中。将反应混合物升至室温，搅拌6小时。过滤收集沉淀，用少量冷水洗涤。真空干燥得到标题化合物(白色无定形固体，7.00g，98％)。产物直接用于下一步骤，无需再纯化。ES-MS m/z 137.0(MH+)；HPLC RT(min)1.09。
5-氨基吡唑中间体B3-叔丁基-1-(2-甲氧基-5-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺的制备 步骤1二苯基甲酮(2-甲氧基-5-甲基苯基)腙的制备 在室温、搅拌下，向3-碘-4-甲氧基甲苯(19.84g，80mmol，1当量)、二苯甲酮腙(17.99g，88mmol，1.1当量)、Xantphos(93mg，0.16mmol，0.2mol％)、Pd(OAc)2(36mg，0.16mmol，0.2mol％)和无水甲苯(96ml)的脱气悬浮液中，一次性加入NaOtBu(11.09g，112mmol，1.4当量)。将混合物加热至85℃，搅拌12小时。冷却反应混合物，用200ml EtOAc和100ml水稀释，然后分离各层。分离除去出作为水层的不溶Pd残余物。有机相依次用2×100ml水、盐水洗涤，经硫酸钠干燥。减压浓缩溶液，得到橙黄色固体。将固体在50ml MeOH中研磨，过滤收集，用50ml MeOH洗涤。抽吸干燥，得到标题化合物(黄色固体，24.16g，收率95％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ2.25(s，3H)，3.56(s，3H)，6.53(dd，1H)，6.72(d，1H)，7.30(m，6H)，7.46(d，2H)，7.56(m，1H)，7.62(m，2H)，7.79(s，1H).ES-MS m/z 317.1(MH+)；HPLC RT(min)4.26.
步骤23-叔丁基-1-(2-甲氧基-5-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺的制备 将步骤1的产物(20.0g；63.2mmol；1当量)、4，4-二甲基-3-氧代戊腈(23.75g；189.6mmol；3eq)、对甲苯磺酸一水合物(18.03g；94.8mmol；1.5当量)和无水EtOH(400ml)悬浮液加热至回流，搅拌12小时。反应物颜色变为黄褐色，然后变为绿色。RP-HPLC证实反应完成50-60％。冷却反应物至室温，然后加入100ml 1N HCl。将反应物再加热至回流，搅拌12小时。此后，RP-HPLC显示反应完成。冷却混合物，减压蒸发EtOH。残余物用300ml EtOAc和100ml 1N HCl稀释，分离各层。水层用EtOAc(4×75ml)萃取。合并的有机层和水层通过RP-HPLC分析；发现有机层包含大量产物、PTSA和杂质，而水层仅包含所需产物和少许PTSA。由此，合并的EtOAc层用2N HCl(4×50ml)萃取。再次分析这些合并的酸层和EtOAc层；有机层中不再含有产物，而酸层中存在大量产物。所有合并的酸层再用100ml Et2O洗涤一次，然后加入固体NaHCO3，碱化至pH～8。这样得到粉红色固体，过滤收集，用2×50ml水洗涤。将固体在300ml Et2O中研磨，过滤收集，用100ml Et2O洗涤。真空干燥，得到标题化合物(乳白色固体，13.3g，收率81％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.18(s，9H)，2.25(s，3H)，3.74(s，3H)，4.69(s，2H)，5.25(s，1H)，7.01(m，2H)，7.13(dd，1H).ES-MS m/z 260.2(MH+)；HPLC RT(min)1.47.
中间体C3-叔丁基-1-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺的制备 步骤12-甲氧基-6-甲基苯基三氟甲磺酸酯的制备 在0-5℃冷却下，向2-羟基-3-甲氧基甲苯(17.0g，0.123mol)、三乙胺(19.72ml，0.141mol)和二氯甲烷(425ml)的混合物中，缓慢加入三氟甲磺酸酐(45.13g，0.160mol)。将混合物升至室温，搅拌2小时。TLC(洗脱剂5％EtOAc/己烷)显示原料消失。将反应混合物真空浓缩至干。硅胶色谱纯化(用己烷至10％EtOAc/己烷作洗脱剂)，得到34.37g(99.4％)透明油状2-甲氧基-6-甲基苯基三氟甲磺酸酯。
1H NMR(400MHz，CD2Cl2)δ7.25(t，1H)，6.90(t，2H)，3.90(s，3H)，2.37(s，3H)；GC MS m/z270(M+)；RT(min)8.70.
步骤2二苯基甲酮(2-甲氧基-6-甲基苯基)腙的制备
将2-甲氧基-6-甲基苯基三氟甲磺酸酯(3.0g，0.011mol)、二苯甲酮腙(2.38g，0.012mol)、BINAP(0.691g，0.001mol)、碳酸铯(5.06g，0.016mol)和甲苯(50ml)的混合物用氮脱气。加入乙酸钯(II)(0.075g，0.33mol)，将混合物加热至100℃ 16小时。通过TLC(洗脱剂5％EtOAc/己烷)判断完全反应。冷却混合物至室温，真空浓缩，硅胶色谱纯化(采用己烷至10％EtOAc/己烷梯度)，得到3.40g(97％)二苯基甲酮(2-甲氧基-6-甲基苯基)腙。
1H NMR(400MHz，CD2Cl2)δ7.65(m，2H)，7.55(m，3H)，7.40(m，2H)，7.30(m，3H)，6.85(m，2H)，6.68(m，1H)，3.70(s，3H)，2.67(s，3H)；ES-MS m/z 317.1(MH+)；HPLC RT(min)4.23.
步骤33-叔丁基-1-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺的制备 将二苯基甲酮(2-甲氧基-6-甲基苯基)腙(12.1g，0.038mol)、4，4-二甲基-3-氧代戊腈(8.62g，0.069mol)对甲苯磺酸一水合物(43.65g，0.229mol)和EtOH(217ml)的悬浮液加热至回流16小时。通过TLC(洗脱剂5％EtOAc/己烷)判断反应完成。冷却反应混合物至室温，真空浓缩。将残余物悬浮于水(150ml)，用乙醚(6×100ml)萃取。TLC(洗脱剂15％EtOAc/己烷)监测过量4，4-二甲基-3-氧代戊腈的萃取。水层用固体NaHCO3缓慢碱化至pH～9.0。水层用二氯甲烷(2×200，1×150ml)萃取。有机层用水(150ml)、盐水(100ml)洗涤，经硫酸钠干燥，过滤，然后真空浓缩至干。产物经硅胶色谱纯化(用10-45％EtOAc/己烷梯度作洗脱剂)，得到3.28g(33％)3-叔丁基-1-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺。
1H NMR(400MHz，CD2Cl2)δ7.32(t，1H)，6.92(t，2H)，5.50(s，1H)，3.82(s，3H)，2.02(s，3H)，1.29(s，9H)；ES-MS m/z 260(MH+)；HPLC RT(min)1.46.
中间体D3-(2，2-二甲基丙基)-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]胺的制备 步骤15，5-二甲基-3-氧代己腈的制备 在500ml干燥圆底烧瓶中，将乙腈(6.31，153.6mmol)的THF(50ml)溶液用LiHMDS(156.3ml，1.0M THF溶液)在-78℃处理。在-78℃向此溶液中加入3，3-二甲基丁酸甲酯的THF(50ml)溶液。将溶液升至室温，加入NaHCO3(100ml，饱和溶液)。分离各层，水层用乙醚(3×100ml)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，得到所需产物，将其直接用于下一步骤，无需再纯化。
1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ3.47(s，2H)，2.44(s，2H)，1.03(s，9H).
步骤23-(2，2-二甲基丙基)-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]胺的制备 在5，5-二甲基-3-氧代己腈(1.5g，10.77mmol)(步骤1)和(2-甲基苯基)肼盐酸盐(1.62，10.24mmol)的混合物中加入HCl水溶液(1N，150ml)，使反应混合物回流16小时。将所得溶液冷却至室温，用NaOH水溶液(1N)碱化至pH 8。收集沉淀，在60℃烘箱真空干燥固体，得到1.6g(61％)所需产物1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ7.27-7.38(m，4H)，5.42(s，1H)，3.54(br，s，2H)，2.40(s，2H)，2.12(s，3H)，0.96(s，9H)；ES-MS m/z244.2(MH+)；HPLC RT(min)1.01.
中间体E3-环戊基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺的制备 步骤13-环戊基-3-氧代丙腈的制备 在70℃，向NaH(2.75g，687mmol)的THF(15ml)悬浮液中滴加环戊烷甲酸甲酯(8.00g，62.4mmol)和无水乙腈(3.91ml，74.9mmol)的THF(5ml)溶液。将混合物在70-72℃搅拌16小时，冷却至室温，用乙酸乙酯和HCl水溶液稀释。有机层用水和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。除去溶剂，得到3-环戊基-3-氧代丙腈，将其直接使用无需再纯化。
步骤23-环戊基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺的制备
将(2-甲基苯基)肼盐酸盐(2.00g，14.6mmol)、上一步骤的粗制3-环戊基-3-氧代丙腈(2.32g，～14.6mmol)和甲苯(6ml)的溶液加热至回流16小时。减压除去溶剂，所得残余物经硅胶色谱纯化(用己烷/EtOAc(3∶1，v/v)作为洗脱剂)。减压浓缩，得到浅橙色固体3-环戊基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺(2.19g，62％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ1.58-1.82(m，6H)，2.00-2.16(m，2H)，2.17-2.21(s，3H)，2.93-3.11(m，1H)，3.42-3.58(s，2H)，5.41-5.46(s，1H)，7.20-7.28(m，2H)7.29-7.37(m，2H)；ES-MS m/z 241.9(MH+)；HPLC RT(min)1.69.
中间体F3-叔丁基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺的制备 将4，4-二甲基-3-氧代戊腈(36.7g，0.29mol)、(2-甲基苯基)肼盐酸盐(47.7g，0.29mol)和冰乙酸(7.03g，6.7ml，0.12mol)溶于无水乙醇(585ml)，回流加热18小时。减压除去溶剂后，加入EtOAc和水(各500ml)，然后小心加入碳酸氢钠(42g，0.50mol)。加入己烷(500ml)后，分离出有机相，用盐水(500ml)洗涤，经Na2SO4干燥。混合物通过在烧结玻璃漏斗上的硅胶垫(500g)过滤。硅胶垫用己烷/EtOAc(1∶1，v/v)洗脱，减压浓缩滤液。所得固体与己烷/EtOAc(9∶1，v/v)研磨，过滤，洗涤，真空干燥，得到无色固体产物(61.5g，93％)。
1H NMR(400MHz，CD2Cl2)δ1.29(s，9H)，2.12(s，3H)，3.56(br，2H)，5.48(s，1H)，7.28(m，2H)，7.31(m，2H).
中间体G3-(4-氟苯基)-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺的制备 步骤13-氨基-3-(4-氟苯基)丙烯腈的制备 向4-氟苯甲腈(5.00g，41.3mmol)和乙腈(4.35ml，82.5mmol)的甲苯(100ml)溶液中加入叔丁醇钾(13.9g，124mmol)。将混合物搅拌24小时，然后通过缓慢加入碳酸氢钠水溶液猝灭。所得悬浮液用二氯甲烷(3×50ml)萃取。有机溶液用水洗涤，干燥(Na2SO4)，减压浓缩。将残余物用EtOH/Et2O研磨，得到3-氨基-3-(4-氟苯基)丙烯腈(6.20g，93％，白色固体)1H NMR(300MHz，丙酮-d6)δ4.23(s，1H)，6.20(s，2H)，7.22(ddd，2H)，7.71(m，2H).
步骤23-(4-氟苯基)-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺的制备
向3-氨基-3-(4-氟苯基)丙烯腈(600mg，3.70mmol)的1N HCl(6ml)溶液中加入(2-甲基苯基)肼盐酸盐(558mg，3.51mmol)。将反应物回流16小时，然后冷却至室温。缓慢加入1N氢氧化钠水溶液，从而将所得混合物碱化至pH 12。过滤收集沉淀，然后用EtOH/Et2O重结晶，得到中间体(800mg，81％，浅橙色固体)。
1H NMR(400MHz，CD2Cl2)δ2.20(s，3H)，2.14(br s，2H)，5.91(s，1H)，7.06(t，2H)，7.36(d，4H)，7.75(m，2H).
直接使用此产物无需再纯化。
中间体H3-叔丁基-1-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-4-甲基-1H-吡唑-5-胺的制备 步骤14-溴-3-叔丁基-1-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺的制备 向3-叔丁基-1-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺(2.00g，7.71mmol)(中间体C)的乙酸(15ml)溶液中滴加溴(1170mg，0.38ml，7.33mmol)。在室温下搅拌反应混合物5分钟，然后用水(100ml)稀释，引起固体沉淀。过滤收集固体，然后溶于EtOAc。有机相用饱和NaHCO3和盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤，减压浓缩，得到含少量杂质的产物(2683mg，102％)。ES-MS m/z 338.2(MH+)；HPLC RT(min)3.06。
步骤23-叔丁基-1-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-4-甲基-1H-吡唑-5-胺的制备 向4-溴-3-叔丁基-1-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺(2.6g，7.68mmol)的DMF(15ml)溶液中加入甲基环硼氧烷(6.66ml，46.08mmol)，二氯化[1，1′-双(二苯基膦基)-丁烷]钯(II)(481.97mg，0.80mmol)和碳酸钾(3.3g，23.04mmol)。在155℃搅拌反应混合物18小时。反应物用水(100ml)稀释，用EtOAc(3×25ml)萃取。合并的有机萃取液用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)，减压浓缩。残余物经硅胶色谱纯化(90％己烷/EtOAc)，得到产物(1.7g，77％，纯白色固体)。
1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ1.24(s，9H)，1.96(s，3H)，1.99(s，3H)，3.71(s，3H)，4.25(s，2H)，6.85(d，1H)，6.94(d，1H)，7.23-7.29(m，1H).ES-MS m/z 274.2(MH+)；HPLC RT(min.)1.78.
中间体I4-(4-氟苯基)-3-甲基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺的制备
步骤14-溴-3-甲基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺的制备 向3-甲基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺(7.78g，41.7mmol)的乙酸(90ml)溶液中加入溴(6.64g，41.6mmol)的乙酸(10ml)溶液。搅拌反应混合物30分钟。将水加入到反应混合物中，混合物用冷KOH溶液(1N)碱化。收集白色固体4-溴-3-甲基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺，无需纯化直接用于下一步骤。
步骤24-(4-氟苯基)-3-甲基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺的制备 将4-溴-3-甲基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺(2g，7.52mmol)、4-氟苯基硼酸(2.10g，11.3mmol)和Pd(PPh3)4(434mg，0.38mmol)溶于DMF(20ml)，加入Na2CO3(饱和水溶液，18ml)。将混合物脱气10分钟，然后在110℃加热2小时。将反应混合物稀释，滤出固体。减压浓缩溶剂，残余物经硅胶快速色谱纯化(10-40％乙酸乙酯/己烷)，得到1.2g(90％纯度，51％)标题化合物。
1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ7.25-7.34(m，6H)，7.08(t，2H)，3.62(s，2H)，2.20(s，3H)，2.14(s，3H).
中间体J3-氯-6-甲氧基吡啶-2-甲酸甲酯的制备 步骤13-氯-6-甲氧基吡啶-2-甲酸的制备 向3，6-二氯吡啶-2-甲酸(7.10mmol 1.36g)的二烷(15ml)溶液中滴加甲醇钠(21.31mmol 1.15g)的甲醇溶液。将混合物在85℃搅拌14小时，冷却至室温，用乙酸乙酯和HCl水溶液稀释。有机层用水和盐水洗涤，干燥(MgSO4)。除去溶剂，得到3-氯-6-甲氧基吡啶-2-甲酸，无需纯化直接用于下一步骤。
步骤23-氯-6-甲氧基吡啶-2-甲酸甲酯的制备 在氩气氛、室温下，将亚硫酰二氯(5ml)加入到3-氯-6-甲氧基吡啶-2-甲酸(7.10mmol，1.30g)中，然后将混合物加热回流2小时。在冷却至室温后，减压除去过量亚硫酰二氯，得到黄色油状酰氯。在0℃、搅拌下缓慢加入无水甲醇，将反应溶液升至室温，搅拌4小时。除去过量甲醇，将残余物用饱和NaHCO3中和，用EtOAc萃取。有机层经MgSO4干燥后蒸发，得到产物白色固体，将其直接使用无需再纯化。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ3.84(s，3H)，3.86(s，3H)，7.05(d，1H)，7.92(d，1H).
本发明的实施例实施例12-{[3-叔丁基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}-6-甲基烟酸的制备 将2-氯-6-甲基烟酸(122mg，0.71mmol)、碳酸钾(108mg，0.78mmol)、3-叔丁基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺(中间体F，163mg，0.71mmol)、乙酸铜(II)(2.6mg，0.014mmol)和DMF(2ml)的混合物在封闭管中加热(150℃)16小时。冷却混合物至室温，通过硅胶垫(用乙酸乙酯作洗脱剂)过滤，浓缩至干，经HPLC纯化(用30％-90％乙腈/水梯度洗脱)。得到182.2mg(70％)所需产物。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ8.14(d，1H)，7.14-7.51(m，4H)，7.01(s，1H)，6.80(d，1H)，2.53(s，3H)，2.10(s，3H)，1.40(s，9H)；ES-MS m/z 365.3(MH+)；HPLC RT(min)3.23.
利用以上实施例1的条件并替代使用适当的原料，类似地制备了实施例11-75和147-150，见下表1。
实施例22-{[3-环戊基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}烟酸的制备 将2-氯烟酸(113mg，0.72mmol)、碳酸钾(199mg，1.44mmol)、3-环戊基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺(174mg，0.72mmol)(中间体E)、乙酸铜(II)(6.5mg，0.04mmol)和DMF(3ml)的混合物在封闭管中加热(150℃)16小时。冷却混合物至室温，通过硅胶垫(乙酸乙酯作为洗脱剂)过滤，浓缩至干，经HPLC纯化(用30％-90％乙腈/水梯度洗脱)，得到59.7mg(23％)所需产物。
1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ10.69(s，1H)，8.36(dd，1H)，8.16(dd，1H)，7.52(d，2H)，7.32-7.41(m，2H)，6.93(dd，1H)，6.82(s，1H)，3.11-3.22(m，1H)，2.19-2.21(m，2H)，1.94(s，3H)，1.65-1.89(m，6H)；ES-MS m/z 363.2(MH+)，HPLC RT(min)3.57.
实施例33-{[1-(5-氟-2-甲基苯基)-3-甲基-4-苯基-1H-吡唑-5-基]氨基}异烟酸的制备 将3-碘异烟酸(180mg，0.72mmol)、碳酸钾(199mg，1.44mmol)、1-(5-氟-2-甲基苯基)-3-甲基-4-苯基-1H-吡唑-5-胺(202mg，0.72mmol，用市售2-苯基乙腈作为腈来源，按照中间体F的相同方法合成)、乙酸铜(II)(6.5mg，0.04mmol)和DMF(1ml)的混合物在封闭管中加热(150℃)16小时。冷却混合物至室温，通过硅胶垫(乙酸乙酯作为洗脱剂)过滤，浓缩至干，经HPLC纯化(用30％-90％乙腈/水梯度洗脱)，得到29.1mg(10％)所需产物。
1H NMR(300MHz，CD3CN)δ9.39(br s，1H)，7.93(s，1H)，7.86-7.90(m，2H)，7.05-7.45(m，8H)，2.38(s，3H)，2.15(s，3H)；ES-MS m/z 403.1(MH+)，HPLC RT(min)2.40.
实施例43-{[3-叔丁基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}吡啶-2-甲酸的制备 将3-溴吡啶-2-甲酸(71mg，0.35mmol)、碳酸钾(53mg，0.39mmol)、3-叔丁基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺(80mg，0.35mmol)(中间体F)、乙酸铜(II)(1.3mg，0.007mmol)和DMF(1ml)的混合物在封闭管中加热(150℃)16小时。冷却混合物至室温，通过硅胶垫(乙酸乙酯作为洗脱剂)过滤。浓缩混合物至干，经HPLC纯化(用30％-90％乙腈/水梯度洗脱)，得到2.8mg(2.3％)所需产物。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ8.11(dd，2H)，7.79(dd，1H)，7.32-7.45(m，4H)，6.45(s，1H)，2.11(s，3H)，1.40(s，9H)；ES-MS m/z 351.0(MH+)，HPLC RT(min)2.46.
实施例55-{[1-(2，5-二甲基苯基)-3-(4-氟苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}-2-(甲硫基)嘧啶-4-甲酸的制备 将5-氯-2-(甲硫基)嘧啶-4-甲酸(89mg，0.44mmol)、碳酸钾(66mg，0.48mmol)、1-(2，5-二甲基苯基)-3-(4-氟苯基)-1H-吡唑-5-胺(123mg，0.44mmol，按照中间体G的类似方法合成)、乙酸铜(II)(1.6mg，0.009mmol)和DMF(1ml)的混合物在封闭管中加热(150℃)16小时。冷却混合物至室温，通过硅胶垫(乙酸乙酯作为洗脱剂)过滤，浓缩至干，经HPLC纯化(用30％-90％乙腈/水梯度洗脱)，得到24.2mg(12.3％)所需产物。
1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ8.95(s，1H)，8.90(s，1H)，7.85(dd，2H)，7.10-7.28(m，5H)，7.62(s，1H)，2.58(s，3H)，2.38(s，3H)，2.14(s，3H)；ES-MS m/z 406.3(MH+-CO2)，HPLC RT(min)4.07.
实施例62-[(3-甲基-1-苯基-1H-吡唑-5-基)氨基]烟酰胺的制备 步骤12-[(3-甲基-1-苯基-1H-吡唑-5-基)氨基]烟酸的制备 向3-甲基-1-苯基-1H-吡唑-5-胺(600mg，3.46mmol)和2-氯烟酸(546mg，3.46mmol)的DMF(6ml)溶液中加入碳酸钾(543mg，3.93mmol)和乙酸铜(II)(18mg)。将混合物在150℃搅拌18小时，然后冷却至室温，用乙酸乙酯(2x)和水稀释。用1N HCl水溶液将溶液调节至pH 2-3。混合物用EtOAc(3×5ml)萃取，然后合并的有机萃取液用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，减压浓缩。残余物经HPLC纯化(20-90％乙腈/水)，得到产物(126mg，18％，灰白色固体)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ2.19(s，3H)，6.62(s，1H)，6.77(m，1H)，7.34(m，1H)，7.45(m，2H)，7.53(m，2H)，8.16(d，1H)，8.22(d，1H)，12.32(s，1H)；ES-MS m/z295.1(MH+)；HPLC RT(min)2.17.
步骤22-[(3-甲基-1-苯基-1H-吡唑-5-基)氨基]烟酰胺的制备 向2-[(3-甲基-1-苯基-1H-吡唑-5-基)氨基]烟酸(40mg，0.14mmol)、EDCI(52mg，0.27mmol)、HOAT(37mg，0.27mmol)、三乙胺(0.06ml，0.41mmol)和二氯甲烷(4ml)的溶液中，加入氨(7N)的甲醇(0.2ml)溶液。在室温下搅拌反应混合物16小时。有机层用水洗涤，经MgSO4干燥，随后减压浓缩。产物经硅胶制备板纯化(1000微米，EtOAc/己烷(2∶1，v/v))，得到产物(白色固体，22mg，55％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ2.2(s，3H)，6.63(s，1H)，6.89(m，1H)，7.38(m，1H)，7.50(m，4H)，7.71(s，1H)，8.15(d，1H)，8.24(s，1H)，8.33(d，1H)，11.56(s，1H)；ES-MS m/z 294.1(MH+)；HPLC RT(min)2.02.
实施例72-{[3-(4-氟苯基)-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}烟酰胺的制备 将2-氯烟酰胺(59mg，0.37mmol)、碳酸钾(57mg，0.41mmol)、3-(4-氟苯基)-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺(100mg，0.37mmol)(中间体G)、乙酸铜(II)(1.4mg，0.007mmol)和DMF(1ml)的混合物在封闭管中加热(150℃)16小时。冷却混合物至室温，通过硅胶垫(乙酸乙酯作为洗脱剂)过滤，浓缩至干，经HPLC纯化(用30％-90％乙腈/水梯度洗脱)，得到20mg(14％)所需产物。
1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ10.88(s，1H)，8.48(dd，1H)，7.89(dd，2H)，7.74(dd，1H)，7.35-7.50(m，4H)，7.28(s，1H)，7.12(t，2H)，6.82(dd，1H)，5.85(br，s，2H)，2.16(s，3H)；ES-MS m/z388.2(MH+)，HPLC RT(min)3.61.
使用以上实施例7的条件并替代使用适当原料，类似地制备了实施例76-94，见下表1。
实施例82-{[3-(2，2-二甲基丙基)-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}烟酸的制备 步骤12-{[3-(2，2-二甲基丙基)-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}烟酸乙酯的制备 向干燥的15ml试管中加入3-(2，2-二甲基丙基)-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]胺(200mg，0.82mmol)(中间体D)、2-氯烟酸乙酯(185mg，0.82mmol)、Pd2(dba)3(37.6mg，0.041mmol)、BINAP(51.2mg，0.082mmol)和Cs2CO3(535.6mg，1.64mmol)。将烧瓶脱气后加入甲苯(2ml)，加热混合物至110℃ 20小时。冷却混合物至室温，通过硅胶垫(乙酸乙酯作为洗脱剂)过滤，浓缩至干，经HPLC纯化(用45％-90％乙腈/水梯度洗脱)，得到275mg(85％)所需产物。
1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ10.04(s，1H)，8.44(dd，1H)，8.21(dd，1H)，7.34-7.48(m，4H)，6.82(dd，1H)，6.75(s，1H)，4.19(q，2H)，2.57(s，2H)，2.12(s，3H)，1.28(t，3H)，1.02(s，9H)；ES-MS m/z 393.3(MH+)；HPLC RT(min)4.33.
步骤22-{[3-(2，2-二甲基丙基)-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}烟酸的制备 向2-{[3-(2，2-二甲基丙基)-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}烟酸乙酯(266mg，0.68mmol)(步骤1)在混合物乙醇(1ml)和THF(1ml)中的溶液加入氢氧化锂一水合物(284mg，6.8mmol)的水(2ml)溶液，将混合物加热至40℃ 1小时。冷却反应混合物至室温，加入0.5N盐酸溶液将溶液pH调节至5，浓缩至干。将粗制产物重新溶于甲醇，经HPLC纯化(用30％-90％乙腈/水梯度洗脱)，得到240mg(97％)所需产物。
1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ10.39(s，1H)，8.43(dd，1H)，8.14(dd，1H)，7.25-7.42(m，4H)，6.81-6.86(m，2H)，2.57(s，2H)，2.05(s，3H)，1.00(s，9H)；ES-MS m/z 365.3(MH+)；HPLCRT(min)3.67.
利用以上实施例8的条件并替代使用适当的原料，类似地制备了实施例85-116和129-146，见下表1。在实施例116的步骤1中采用Pd2(dba)3或Pd(OAc)2，得到相似收率。
实施例92-{[1-(2-氯苯基)-3-(4-氟苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}烟酸的制备 步骤12-{[1-(2-氯苯基)-3-(4-氟苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}烟酸乙酯的制备 向干燥的15ml试管中加入1-(2-氯苯基)-3-(4-氟苯基)-1H-吡唑-5-胺(300mg，1.04mmol，按照中间体G的相同方法合成)、2-氯烟酸乙酯(194mg，1.04mmol)、Pd2(dba)3(48mg，0.05mmol)、BINAP(65mg，0.10mmol)和Cs2CO3(679mg，2.09mmol)。将烧瓶脱气后加入甲苯(4ml)，然后加热混合物至110℃ 20小时。冷却混合物至室温，通过硅胶垫(乙酸乙酯作为洗脱剂)过滤，浓缩至干，经HPLC纯化(用45％-90％乙腈/水梯度洗脱)，得到410mg(90％)所需产物。
1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ10.17(s，1H)，8.46(dd，1H)，8.22(dd，1H)，7.89(dd，2H)，7.48-7.64(m，4H)，7.23(s，1H)，7.12(t，2H)，7.84(dd，1H)，4.24(q，2H)，1.32(t，3H)；ES-MS m/z 437.2(MH+)；HPLC RT(min)4.38.
步骤22-{[1-(2-氯苯基)-3-(4-氟苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}烟酸的制备 向2-{[1-(2-氯苯基)-3-(4-氟苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}烟酸乙酯(410mg，0.94mmol)在混合物乙醇(4ml)和THF(4ml)中的溶液加入氢氧化锂一水合物(115mg，2.74mmol)的水(8ml)溶液，然后加热混合物至40℃ 1小时。冷却反应混合物至室温，加入0.5N盐酸溶液将溶液pH调节至5(混合物变浑浊)。滤出固体，用水再次洗涤。在60℃烘箱真空干燥固体，得到380mg所需产物(99％)。
1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ10.18(s，1H)，8.45(dd，1H)，8.24(dd，1H)，7.87(dd，2H)，7.47-7.62(m，4H)，7.23(s，1H)，7.12(t，2H)，6.85(dd，1H)；ES-MS m/z 351.2(MH+)；HPLC RT(min)2.58.
实施例103-{[3-叔丁基-1-(2，6-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}吡啶-2-甲酸的制备
步骤13-{[(三氟甲基)磺酰基]氧基}吡啶-2-甲酸乙酯的制备 向装有3-羟基吡啶-2-甲酸(25g，179.5mmol)的1L干燥烧瓶中，加入400ml乙醇和100ml甲苯，再加入10ml硫酸。将混合物加热(95℃)回流3天。在冷却至室温后，将混合物浓缩至原体积的1/4，用600ml乙酸乙酯和200ml水稀释。水层用200ml乙酸乙酯萃取，合并的有机层用饱和NaHCO3(3×200ml)、盐水洗涤，经Na2SO4干燥。滤出固体，减压浓缩溶剂，得到21.9g 3-羟基吡啶-2-甲酸乙酯(73％)，无需纯化直接用于下一步骤。将该酯(21.9g，131mmol)溶于吡啶，冷却至-40℃，然后加入三氟甲磺酸酐(48g，170mmol)。反应混合物升至0℃30分钟，然后升至室温再过30分钟。加入水(100ml)猝灭反应物。混合物用乙酸乙酯(3×200ml)萃取，合并的有机层用饱和碳酸氢钠(200ml)、水(200ml)、盐水(200ml)洗涤，经硫酸钠干燥。滤出固体，减压除去溶剂，得到39g(99％)所需产物，无需纯化直接用于下一步骤。
1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ8.73(dd，1H)，7.72(dd，1H)，7.62(dd，1H)，4.46(q，2H)，1.42(t，3H).
步骤23-{[3-叔丁基-1-(2，6-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}吡啶-2-甲酸乙酯的制备 向干燥的100ml烧瓶中加入3-叔丁基-1-(2，5-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺(1.68g，6.9mmol，用中间体A按照中间体F的相同方法合成)、3-{[(三氟甲基)磺酰基]氧基}吡啶-2-甲酸乙酯(1.88g，6.28mmol)(步骤1)、Pd2(dba)3(0.28g，0.31mmol)、BINAP(0.39g，0.63mmol)和Cs2CO3(4.1g，12.5mmol)。将烧瓶脱气后加入甲苯(10ml)，然后加热混合物至110℃ 4小时。冷却混合物至室温，通过硅藻土垫过滤(乙酸乙酯作为洗脱剂)，浓缩至干，经硅胶快速色谱纯化(10-30％乙酸乙酯/己烷)，得到1.4g(57％)所需产物。
1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ9.29(s，1H)，8.19(dd，1H)，7.82(dd，1H)，7.41(dd，1H)，7.31(dd，1H)，7.19(d，2H)，6.18(s，1H)，4.28(q，2H)，2.01(s，6H)，1.39(s，9H)，1.32(t，3H)；ES-MS m/z 393.2(MH+)；HPLC RT(min)3.57.
在此步骤中将Pd2(dba)3用Pd(OAc)2代替后，得到相似的收率。
步骤33-{[3-叔丁基-1-(2，6-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}吡啶-2-甲酸的制备 向3-{[3-叔丁基-1-(2，6-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}吡啶-2-甲酸乙酯(2.10g，5.35mmol)在混合物乙醇(5ml)和THF(5ml)中的溶液加入氢氧化锂一水合物(1.12mg，26.8mmol)的水(10ml)溶液，然后加热混合物至40℃ 1小时。冷却反应混合物至室温，加入0.5N盐酸将溶液pH调节至5，浓缩混合物至干。将粗制混合物重新溶于甲醇，经HPLC纯化(用30％-90％乙腈/水梯度洗脱)，得到1.65g(85％)所需产物。
1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ10.22(br，s，1H)，9.52(s，1H)，8.03(dd，1H)，7.86(dd，1H)，7.50(dd，1H)，7.30(dd，1H)，7.18(d，2H)，2.02(s，6H)，1.37(s，9H)；ES-MS m/z 321.3(MH+)；HPLC RT(min.)2.56.
实施例114-{[3-叔丁基-1-(2，5-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲酸的制备 步骤14-{[3-叔丁基-1-(2，5-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲酸乙酯的制备 向干燥的15ml试管中加入3-叔丁基-1-(2，5-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-胺(106mg，0.44mmol，按照中间体F的相同方法合成)、4-氯-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲酸乙酯(101mg，0.44mmol)、Pd2(dba)3(20mg，0.022mmol)、BINAP(27mg，0.044mmol)和Cs2CO3(199mg，0.61mmol)。将烧瓶脱气后加入甲苯(2ml)，加热混合物至110℃ 20小时。冷却混合物至室温，通过硅胶垫(乙酸乙酯作为洗脱剂)过滤，浓缩至干，经HPLC纯化(用45％-90％乙腈/水梯度洗脱)，得到81mg(42％)所需产物。
1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ10.23(s，1H)，8.72(s，1H)，7.24(dd，2H)，7.16(s，1H)，6.78(s，1H)，4.20(q，2H)，2.64(s，3H)，2.38(s，3H)，2.04(s，3H)，1.34(s，9H)，1.28(t，3H)；ES-MS m/z 440.2(MH+)；HPLC RT(min)4.66.
步骤24-{[3-叔丁基-1-(2，5-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲酸的制备 向4-{[3-叔丁基-1-(2，5-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}-2-(甲硫基)嘧啶-5-甲酸乙酯(71mg，0.16mmol)在混合物乙醇(0.5ml)和THF(0.5ml)中的溶液加入氢氧化锂一水合物(68mg，1.6mmol)的水(1ml)溶液，加热混合物至40℃ 1小时。冷却反应混合物至室温，加入0.5N盐酸将溶液pH调节至5，浓缩混合物至干。将粗制混合物重新溶于甲醇，经HPLC纯化(用30％-90％乙腈/水梯度洗脱)，得到66mg(99％)所需产物。
1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ10.50(s，1H)，8.65(s，1H)，7.17(dd，2H)，7.12(s，1H)，6.83(s，1H)，2.68(s，3H)，2.27(s，3H)，1.97(s，3H)，1.35(s，9H)；ES-MS m/z412.2(MH+)；HPLC RT(min)3.94.
实施例123-{[3-叔丁基-1-(2，6-二甲基苯基)-4-氟-1H-吡唑-5-基]氨基}吡啶-2-甲酸的制备 向3-{[3-叔丁基-1-(2，6-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}吡啶-2-甲酸(实施例10，50mg，0.14mmol)的CH3CN(1ml)溶液中，加入[(1-(氯甲基)-4-氟-1，4-二氮阳离子双环[2.2.2]辛烷双(四氟硼酸盐)](SELECTFLUORTM)(48mg，0.14mmol)，在室温下搅拌混合物16小时。浓缩混合物，残余物经HPLC纯化(10％-90％乙腈/水梯度洗脱)，得到22mg(42％)标题化合物。
1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ9.18(s，1H)，8.04(d，1H)，7.50(dd，1H)，7.42(m，1H)，7.28(m，1H)，7.13(m，2H)，2.12(s，6H)，1.40(s，9H).ES-MS m/z 383.1(MH+)；HPLC RT(min)3.21.
实施例133-{[3-叔丁基-1-(2，6-二甲基苯基)-4-碘-1H-吡唑-5-基]氨基}吡啶-2-甲酸的制备 向3-{[3-叔丁基-1-(2，6-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}吡啶-2-甲酸(实施例10，50mg，0.14mmol)在混合物乙酸/二氯甲烷(各1ml)中的溶液加入N-碘代丁二酰亚胺(31mg，0.14mmol)。在室温下搅拌溶液12小时，然后加入水(10ml)。用KOH(1.0M冰冷溶液)将反应混合物碱化至pH 9。水层用二氯甲烷(50ml)萃取，随后，有机相用饱和亚硫酸钠、盐水洗涤，浓缩至干。粗制产物经HPLC纯化，得到所需产物(51mg，75％)。
1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ9.70(s，1H)，9.20(s，1H)，8.04(m，1H)，7.45(m，1H)，7.20(m，2H)，7.10(m，2H)，2.12(s，6H)，1.50(s，9H).ES-MS m/z490.9(MH+)；HPLC RT(min)3.40.
实施例143-{[3-叔丁基-4-氯-1-(2，6-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}吡啶-2-甲酸的制备 向3-{[3-叔丁基-1-(2，6-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}吡啶-2-甲酸(实施例10，50mg，0.14mmol)在混合物乙酸/二氯甲烷(各1ml)中的溶液加入N-氯代丁二酰亚胺(18mg，0.14mmol)。在室温下搅拌溶液12小时，然后加入水(10ml)。用KOH(1.0M冰冷溶液)将反应混合物碱化至pH 9。水层用二氯甲烷(50ml)萃取，随后有机相用饱和亚硫酸钠、盐水洗涤，浓缩至干。粗制产物经HPLC纯化，得到所需产物(42mg，76％)。
1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ10.45(s，1H)，9.30(s，1H)，8.04(d，1H)，7.50(m，1H)，7.25(m，2H)，7.15(m，2H)，2.02(s，6H)，1.43(s，9H).ES-MS m/z 399.0(MH+)；HPLC RT(min)3.33.
实施例152-{[3-(1，1-二甲基丙基)-1-(3-氟-2-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}-N，N-二甲基烟酰胺的制备 向2-{[3-(1，1-二甲基丙基)-1-(3-氟-2-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}烟酸(实施例140，按照实施例8的类似方法制备，50mg，0.13mmol)的CH3CN(1ml)溶液中，加入1滴二甲基甲酰胺，再加入乙二酰氯(9μl，0.13mmol)。在室温下搅拌混合物1小时，然后加入甲胺(16μl 40％的水溶液，0.25mmol)。在室温下再次搅拌混合物1小时，浓缩至干。将残余物溶于甲醇(1ml)，通过octyl固相萃取管过滤，经HPLC纯化(10％-90％乙腈/水梯度洗脱)得到33mg(70％)所需产物。
1H NMR(300MHz，CD2Cl2)δ8.30(d，1H)，8.23(s，1H)，7.50(d，1H)，7.15-7.30(m，3H)，6.80(t，1H)，6.60(s，1H)，3.77(s，3H)，2.95(br s，6H)，1.70(q，2H)，1.32(s，6H)，0.85(t，3H).ES-MS m/z 426.2(MH+)；HPLC RT(min)3.57.
利用上述实施例15的条件并替代使用适当的原料，类似地制备了实施例151-156，见下表1。
实施例163-[(3-叔丁基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)氨基]吡啶-2-甲酰胺的制备 步骤13-[(3-叔丁基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)氨基]吡啶-2-甲腈的制备 将3-溴吡啶-2-甲腈(150mg，0.98mmol)、3-叔丁基-1-甲基-1H-吡唑-5-胺(179mg，0.98mmol)、碳酸铯(638mg，1.96mmol)、BINAP(98mg，0.16mmol)和Pd2(dba)3(90mg，0.10mmol)的混合物溶于无水甲苯(2ml)，在氮气氛下加热至80℃ 24小时。冷却反应混合物至室温，用乙酸乙酯稀释，过滤后减压浓缩。残余物经硅胶色谱纯化(EtOAc/己烷(1∶9-1∶4，v/v)作为洗脱剂)。得到黄色油状产物(145mg，58％)。ES-MSm/z 256.1(MH+)；HPLC RT(min)2.37。
步骤23-[(3-叔丁基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)氨基]吡啶-2-甲酰胺的制备 向3-[(3-叔丁基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)氨基]吡啶-2-甲腈(100mg，0.39mmol)的MeOH(1ml)溶液中，加入KOH水溶液(3M，1ml)，在40℃搅拌混合物48小时。减压除去有机溶剂，水层用1N HCl水溶液酸化至pH 1-2。混合物用乙酸乙酯(3x)萃取。减压除去溶剂后，粗制残余物经制备型HPLC纯化(用20％-90％乙腈/水梯度洗脱)，得到油状标题产物(6.2mg，6％)。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δ1.35(s，9H)，3.72(s，3H)，6.80(s，1H)，7.39-7.42(m，2H)，8.08-8.11(m，1H).ES-MS m/z 274.1(MH+)，HPLC RT(min)1.47.
采用以上制备实施例1-16的方法，并且用适当的中间体作原料，类似地制备了本发明的其它化合物。这些化合物列于下表1中。
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本文所用各种术语的定义如下。
当介绍本发明要素或其优选实施方案时，“所述”是指一个或多个该要素。术语“包含”、“包括”和“具有”是指除了所列要素之外，还可以为其它要素。
本文所用术语“患者”包括哺乳动物(如人和动物)。
术语“治疗”包括任何过程、作用、应用、疗法等，其中给予包括人的患者医疗救助，从而直接或间接改善患者的病症，或者减缓患者病症或疾病的发展。
术语“联合治疗”是指给予两种以上治疗药物以治疗糖尿病病症和/或疾病。这样的给药包括以基本上同时的方式联合给予两种以上的治疗药物，例如采用包含固定比例活性成分的单一胶囊，或者采用多个独立的胶囊，每一种抑制剂包含于独立的胶囊。另外，这样的给药包括以序贯方式使用各类治疗药物。
术语“治疗有效”是指所给予的各种药物剂量能够改善糖尿病病症或疾病的严重程度，同时避免或最小化与所实施的治疗相关的副作用。
术语“药学上可接受的”是指主题项适合在药品中使用。
本发明化合物可用于治疗糖尿病，包括I型和II型糖尿病(非胰岛素依赖型糖尿病)。这种治疗还可延缓糖尿病的发作和糖尿病并发症。本发明化合物可用于预防糖耐量减低患者发展为II型糖尿病。可以利用本发明方法中本发明化合物治疗或预防的其它疾病或病症包括青少年成熟期突发型糖尿病(MODY)(Herman等，Diabetes 4340，1994)；成人隐性自身免疫性糖尿病(LADA)(Zimmet等，DiabetesMed.11299，1994)；糖耐量减低(IGT)(Expert Committee onClassification of Diabetes Mellitus，Diabetes Care 22(增刊1)S5，1999)；空腹血糖异常(IFG)(Charles等，Diabetes 40796，1991)；妊娠糖尿病(Metzger，Diabetes，40197，1991)；以及X代谢综合症(metabolic syndrome X)。
本发明化合物也可有效用于治疗例如肥胖症、动脉粥样硬化疾病、高血脂、高胆固醇血症、低HDL水平、高血压、心血管疾病(包括动脉粥样硬化、冠心病、冠状动脉疾病和高血压)、脑血管疾病和外周血管疾病。
本发明化合物也可用于治疗涉及例如以下情况的生理疾病产生脂质累积细胞的细胞分化、调节胰岛素敏感性以及血糖水平，它们涉及例如异常的胰腺β细胞功能、胰岛素分泌瘤和/或由于抗胰岛素的自身抗体、抗胰岛素受体的自身抗体或刺激胰腺β细胞的自身抗体引起的自身免疫性低血糖症；导致形成动脉粥样硬化斑的巨噬细胞分化；炎症反应；致癌作用；增生；脂肪细胞基因表达；脂肪细胞分化；胰腺β细胞量减少；胰岛素分泌；对胰岛素的组织敏感性；脂肉瘤细胞生长；多囊卵巢疾病；持续无排卵；雄激素过多；孕酮生成；类固醇生成；细胞的氧化还原电势和氧化应激；一氧化氮合酶(NOS)生成；γ-谷氨酰转肽酶、过氧化氢酶、血浆甘油三酯、HDL和LDL胆固醇水平增高等。
本发明化合物也在本发明方法中用于治疗糖尿病继发性病因(Expert Committee on Classification of Diabetes Mellitus，Diabetes Care22(增刊1)S5，1999)。这类继发性病因包括糖皮质激素过量、生长激素过量、嗜铬细胞瘤和药物引起的糖尿病。可能诱发糖尿病的药物包括但不限于pyriminil、烟酸、糖皮质激素、苯妥英、甲状腺激素、β肾上腺素能药、α干扰素以及治疗HIV感染的药物。
在治疗糖尿病及其相关疾病中，本发明化合物可单独使用，或者与其它本领域技术人员已知的疗法和/或化合物联合使用。或者，可在联合治疗中部分或全部使用本文介绍的的方法和化合物。
本发明化合物也可与治疗糖尿病的其它已知药物联合给予，所述药物包括PPAR激动剂、磺酰脲类药物、非磺酰脲类促分泌素、α葡糖苷酶抑制剂、胰岛素增敏剂、胰岛素促分泌素、降低肝脏葡萄糖输出的化合物、胰岛素和减肥药。这类药物可在给予本发明化合物之前、同时或之后给予。胰岛素包括长效或短效形式以及胰岛素制剂。PPAR激动剂包括任何PPAR亚型或它们的组合。例如PPAR激动剂可包括PPAR-α、PPAR-γ、PPAR-δ或者任意两种或三种PPAR亚型的组合。PPAR激动剂包括如罗格列酮、曲格列酮和吡格列酮。磺酰脲类药物包括如格列本脲、格列美脲、氯磺丙脲、甲苯磺丁脲和格列吡嗪。当与本发明化合物一起给药时，可用于治疗糖尿病的α-葡糖苷酶抑制剂包括阿卡波糖、米格列醇和伏格列波糖。可用于治疗糖尿病的胰岛素增敏剂包括PPAR-γ激动剂，例如格列酮类(例如曲格列酮、吡格列酮、恩格列酮、MCC-555、罗格列酮等)；双胍类，例如二甲双胍和苯乙双胍；蛋白酪氨酸磷酸酶-1B(PTP-1B)抑制剂；二肽基肽酶IV(DPP-IV)抑制剂；噻唑烷二酮类和非噻唑烷二酮类。当与本发明化合物一起给药时，可用于治疗糖尿病的降低肝脏葡萄糖输出的化合物包括二甲双胍，例如格华止和格华止XR。当与本发明化合物一起给药时，可用于治疗糖尿病的胰岛素促分泌素包括磺酰脲类和非磺酰脲类药物GLP-1、GIP、分泌素、那格列奈、美格列奈、瑞格列奈、格列本脲、格列美脲、氯磺丙脲、格列吡嗪。GLP-1包括半衰期比天然GLP-1长的GLP-1衍生物，例如脂肪酸衍生的GLP-1和毒蜥外泌素(exendin)。在本发明的一个实施方案中，本发明化合物可与胰岛素促分泌素联合使用，从而增强胰腺β细胞对胰岛素促分泌素的敏感性。
在本发明方法中，本发明化合物还可与减肥药联合使用。减肥药包括β-3激动剂、CB-1拮抗剂、神经肽Y5抑制剂、食欲抑郁剂(例如西布曲明(Meridia))和脂酶抑制剂(例如奥利司他(Xenical))。
在本发明方法中，本发明化合物也可与常用于糖尿病患者脂质障碍的药物联合使用。这类药物包括但不限于HMG-CoA还原酶抑制剂、烟酸、烟酸、降血脂药(例如甾烷醇(stanol)酯；甾烯醇(stenol)苷类，例如替奎安；氮杂环丁酮类，例如依泽替米贝)、ACAT抑制剂(例如阿伐麦布)、胆汁酸螯合剂、胆汁酸重摄取抑制剂、微粒体甘油三酯转运抑制剂和贝酸衍生物。HMG-CoA还原酶抑制剂包括例如洛伐他汀、辛伐他汀、普伐他汀、氟伐他汀、阿托伐他汀、利伐他汀(rivastatin)、伊伐他汀、西立伐他汀和ZD-4522。贝酸衍生物包括例如氯贝特、非诺贝特、苯扎贝特、环丙贝特、苄氯贝特(beclofibrate)、依托贝特和吉非贝齐。螯合剂包括例如考来烯胺、考来替泊以及交联葡聚糖的二烷基氨基烷基衍生物。
本发明化合物也可与抗高血压药联合使用，例如β-阻断剂和ACE抑制剂。与本发明化合物联合使用的其它抗高血压药的实例包括钙通道阻断剂(L型和T型；例如地尔硫、维拉帕米、硝苯地平、氨氯地平和mybefradil)、利尿药(例如氯噻嗪、氢氯噻嗪、氟甲噻嗪、氢氟甲噻嗪、苄氟噻嗪、甲基氯噻嗪、三氯甲噻嗪、泊利噻嗪、苄噻嗪、ethacrynic acid tricrynafen、氯噻酮、呋塞米、musolimine、布美他尼、氨苯蝶啶(triamtrenene)、阿米洛利、螺内酯)、肾素抑制剂、ACE抑制剂(例如卡托普利、佐芬普利、福辛普利、依那普利、施瑞普利(ceranopril)、西拉普利(cilazopril)、地拉普利、喷托普利、喹那普利、雷米普利、赖诺普利)、AT-1受体拮抗剂(例如氯沙坦、厄贝沙坦、缬沙坦)、ET受体拮抗剂(例如西他生坦、atrsentan、中性内肽酶(NEP)抑制剂、血管肽酶抑制剂(NEP-ACE双重抑制剂)(例如奥马曲拉和gemopatrilat)和硝酸盐。
这类联合治疗可以给予两种以上药物的任意组合(例如本发明化合物与胰岛素增敏剂和减肥药)。这类联合治疗可以给予上述的药物组合物形式。
根据测定哺乳动物的上述确定疾病治疗功效的公知方法，并将其测试结果与治疗这些疾病的已知药物的测试结果进行比较，很容易确定本发明化合物治疗各种适应症的有效剂量。治疗一种上述疾病所需的活性成分(例如化合物)剂量可以根据例如以下因素在很宽范围内变化所用的具体化合物和剂量单位、给药方式、治疗周期、所治疗患者的年龄和性别以及所治疗疾病的性质和程度。
活性成分的给药总量一般在约0.0001mg/kg体重/天至约200mg/kg体重/天，优选约0.01mg/kg体重/天至约200mg/kg体重/天。单位剂量可含约0.05mg至约1500mg活性成分，可每天给予一次或多次。通过注射(包括静脉内、肌内、皮下和胃肠外注射)以及使用滴注技术的日给药剂量可以为约0.01mg/kg至约200mg/kg。每日直肠剂量方案可以为0.01mg/kg至200mg/kg总体重。透皮给药需要维持的日剂量为0.01mg/kg至200mg/kg。
当然，每个患者的具体初始剂量方案和持续剂量方案必须根据临床医生确定的病症性质和严重程度、所用具体化合物的活性、患者年龄、患者饮食、给药时间、给药途径、药物排泄速率、药物组合等而变化。本领域的技术人员可利用常规的治疗测试，确定所需的治疗方式和本发明化合物的给药次数。
通过对需要治疗的患者给予适当配制的药物组合物，本发明化合物可用于实现所需的药理效果。对于本发明目的而言，患者是需要治疗特定病症或疾病的哺乳动物，包括人。因此，本发明包括含有药学上可接受的载体和治疗有效量的化合物的药物组合物。药学上可接受的载体是指在与活性成分有效活性相容的浓度下(这样载体的任何副作用均不会损害活性成分的有益作用)，对患者相对无毒和无害的任何载体。化合物的治疗有效量是指产生疗效或对所治疗特定病症产生影响的剂量。采用任何有效的常规剂量单元形式(包括例如立即释放制剂和定时释放制剂)，可将本发明化合物与药学上可接受的载体一起通过口服、胃肠外、局部等途径给药。
对于口服给药，化合物可以配制为固体或液体制剂，例如胶囊剂、丸剂、片剂、锭剂、糖锭、熔化物、散剂、溶液剂、混悬剂或乳剂，它们可根据本领域生产药物组合物的已知方法制备。固体单元剂型可以是一般的硬质明胶胶囊剂或软质明胶胶囊剂，其中包含表面活性剂、润滑剂和惰性填料(例如乳糖、蔗糖、磷酸钙和玉米淀粉)。
在另一实施方案中，本发明化合物可以用常规片剂基(例如乳糖、蔗糖和玉米淀粉)以及下述助剂制备片剂粘合剂，例如阿拉伯胶、玉米淀粉或明胶；崩解剂，用于在给药后帮助于崩解和溶解片剂，例如马铃薯淀粉、海藻酸、玉米淀粉和瓜尔胶；润滑剂，用来改善片剂成粒的流动性并预防片剂原料粘附在制片冲模和冲头表面，例如滑石粉、硬脂酸、硬脂酸镁、硬脂酸钙或硬脂酸锌；染料；着色剂；以及矫味剂，用来改善片剂外观并使其更易被患者接受。用于口服液体剂型的合适赋形剂包括稀释剂，例如水和醇(例如乙醇、苯甲醇和聚乙二醇)，可添加或不添加药学上可接受的表面活性剂、悬浮剂或乳化剂。各种其它材料可以用于包衣或者在其它方面改善剂量单位的物理形式。例如片剂、丸剂或胶囊剂可以包被虫胶、食糖或者以上二者。
可分散的散剂和颗粒剂适用于制备水性混悬剂。它们可提供与分散剂或湿润剂、悬浮剂及一种或多种防腐剂相混合的活性成分。适宜的分散剂或湿润剂和悬浮剂的实例已在上文中给出。还可使用其它赋形剂，例如上述甜味剂、矫味剂和着色剂。
本发明药物组合物也可以为水包油乳剂。油相可以是植物油，例如液体石蜡或植物油混合物。合适的乳化剂可以是(1)天然树胶，例如阿拉伯胶和西黄蓍胶，(2)天然磷脂，例如大豆和卵磷脂，(3)由脂肪酸和己糖醇酐衍生的酯或偏酯，例如山梨糖醇酐单油酸酯，(4)所述偏酯与环氧乙烷的缩合产物，例如聚氧乙烯山梨糖醇酐单油酸酯。乳剂还可以包含甜味剂和矫味剂。
油性混悬剂的制备可将活性成分悬浮于植物油，例如花生油、橄榄油、芝麻油或椰子油；或者悬浮于矿物油，例如液体石蜡。油性混悬剂可包含增稠剂，例如蜂蜡、固体石蜡或鲸蜡醇。混悬剂还可包含一种或多种防腐剂，例如对羟基苯甲酸乙酯或对羟基苯甲酸正丙酯；一种或多种着色剂；一种或多种矫味剂；以及一种或多种甜味剂，例如蔗糖或糖精。
糖浆剂或酏剂可用甜味剂配制，例如丙三醇、丙二醇、山梨醇或蔗糖。这类制剂还可包含缓和剂、防腐剂、矫味剂和着色剂本发明化合物还可以胃肠外(即皮下、静脉内、肌内或腹膜内)给药，注射剂量的化合物加入生理上可接受的稀释剂以及药用载体，所述载体可以是无菌的液体或液体混合物，例如水、盐水、葡萄糖水溶液及相关的糖溶液；醇；二元醇；甘油缩酮；醚；油；脂肪酸；脂肪酸酯或甘油酯；或乙酰化脂肪酸甘油酯；并且添加或不添加药学上可接受的表面活性剂、悬浮剂或乳化剂以及其它药用辅料。
本发明胃肠外组合物的溶液中通常包含约0.5％至约25％(重量)活性成分。还可使用有益的防腐剂和缓冲剂。为了最小化或消除对注射部位的刺激，这类组合物可包含亲水-亲油平衡(HLB)为约12至约17的非离子表面活性剂。在这类制剂中，表面活性剂含量为约5％至约15％(重量)。表面活性剂可以是具有上述HLB的单个组分，也可以是具有所需HLB的两种以上组分的混合物。
药物组合物可以为无菌注射水性混悬剂形式。这类混悬剂可利用适宜分散剂或湿润剂和悬浮剂按照已知的方法配制，所述分散剂或湿润剂可以是天然磷脂、环氧烷与脂肪酸的缩合产物、环氧乙烷与长链脂肪醇的缩合产物、环氧乙烷与由脂肪酸和己糖醇衍生的偏酯的缩合产物、或环氧乙烷与由脂肪酸和己糖醇酐衍生的偏酯的缩合产物。
无菌注射制剂也可以是胃肠外可接受的无毒稀释剂或溶剂中的无菌注射溶液剂或混悬剂。可使用的稀释剂和溶剂包括例如水、林格(Ringer)溶液和等渗氯化钠溶液。另外，无菌不挥发油类通常用作溶剂或悬浮介质。用于此目的时，可使用任何温和的不挥发油类，包括合成的甘油单酯或甘油二酯。此外，脂肪酸(例如油酸)可用于制备注射剂。
本发明组合物也可以栓剂形式直肠给药。这些组合物可如下制备将药物(例如化合物)与合适的无刺激赋形剂混合，所述赋形剂在常温度下为固体，而在直肠温度下为液体，因此，将在直肠中融化而释放出药物。这类材料包括例如可可油和聚乙二醇。
在本发明方法中使用的另一种制剂采用透皮给药装置(“贴剂”)。这类透皮贴剂可用于连续或非连续浸入控制量的本发明化合物。给予药物的透皮贴剂的制造和使用在本领域是公知的(参见美国专利5,023,252，通过引用结合到本文)。这类贴剂可制成连续、脉动或按需给予药物。
可能需要通过机械输送装置将药物组合物给予患者。制造和使用用于给予药物的机械输送装置在本领域中是公知的。例如，对大脑直接给药的直接给药技术通常涉及将药物输送导管置入患者的脑室系统，从而避开血脑屏障。美国专利US 5,011,472(通过引用结合到本文)介绍了一种这样的植入输送系统，它用于将药物输送至身体特定解剖学部位。
必要时，本发明组合物还可包含其它常规的药学上可接受的配合成分，通常称为载体或稀释剂。可加入抗氧化剂(例如抗坏血酸)或其它合适的防腐剂，以保存本发明任何组合物。可以采用制备适当剂型的组合物的常规方法。
本发明化合物可以单独给予，或者与一种或多种其它药物联合给予，前提是这种联合给药不会引起不可接受的副作用。例如，本发明化合物可与已知的减肥药、已知的抗糖尿病或其它适应症的药物以及它们的混合物或组合物联合应用。
本发明化合物也可在研究和诊断中以游离碱或组合物形式应用，或用作分析参考标准等。因此，本发明包括含惰性载体和有效量的本文介绍方法鉴定的化合物或者其盐或酯的组合物。惰性载体是指不与所携带化合物相互作用并且为所携带化合物提供载体、输送工具、增量和示踪材料等的任何材料。化合物的有效量是指能够产生疗效或者对进行的特定过程产生影响的剂量。
适合皮下、静脉内、肌内等给药的制剂以及合适的药用载体可通过本领域公知的方法制备，用于配制和给药的技术是本领域公知的(参见例如Remington′s Pharmaceutical Sciences，Mack PublishingCo.，Easton，Pa.，第20版，2000)。
对本领域普通技术人员显而易见的是，根据本文阐述，可以对本发明作出不偏离原有精神或范围的改变和改进。
生物学评价为了更好地理解本发明，给出了下列实施例。这些实施例仅用于示例说明，而不应解释为对本发明范围的任何限制。上文提及的所有出版物均通过引用全部结合到本文。
通过本领域公知的体外、离体和体内测定法可证明本发明化合物活性。例如为了证明某个药物治疗糖尿病及其相关疾病(例如X综合症、糖耐量减低、空腹血糖异常和高胰岛素血症)的功效，可采用下述测定法。
体外测定法由INS-1细胞分泌胰岛素从X-射线诱导的大鼠胰岛瘤分离出INS-1细胞(Asfari等，Endocrinology 130167，1992)。在Biocoat Collagenl Cellware 96孔板中，以每孔30,000个细胞接种INS-1细胞，孵育4-5天。将细胞用调节至3mM葡萄糖的完全培养基(RPMI 1640，10％胎牛血清，100μg/ml青霉素/链霉素，0.5mM丙酮酸钠，10mM HEPES以及50μMβ-巯基乙醇)处理2天。处理两天后，用含3mM葡萄糖的Krebs-RingerBicarbonate-HEPES(KRBH)洗涤细胞。然后在相同缓冲液中孵育细胞30分钟。加入所需浓度葡萄糖和化合物后再孵育细胞2小时。收集上清液。
为了测定所分泌的胰岛素量，将上清液与抗胰岛素抗体和示踪量125I-胰岛素的磷酸缓冲盐溶液(含0.5％牛血清白蛋白)混合。加入A蛋白包被的SPA(闪烁亲近测定)珠。将各板孵育5-20小时，在闪烁计数器中计数，从而测出胰岛素水平。将特定浓度下的化合物活性表达成相对于对照的刺激胰岛素分泌倍数。
由分散的大鼠胰岛细胞分泌胰岛素按照下述方法，测定了大量本发明化合物介导的分散大鼠胰岛细胞的胰岛素分泌。从雄性Sprague-Dawley大鼠(200-250g)分离出Langerhans胰岛，用胶原酶消化。将胰岛细胞用胰蛋白酶处理分散，接种到V型底的96孔板中，沉淀。将细胞在加有或不加本发明化合物的培养基中培养过夜。吸出培养基，在37℃下，用含3mM葡萄糖的Krebs-Ringer-HEPES缓冲液预孵育细胞30分钟。除去预孵育的缓冲液，在本发明化合物存在或不存在下，用含适当葡萄糖浓度(例如8mM)的Krebs-Ringer-HEPES缓冲液在37℃孵育适当时间。在部分研究中，还包括适当浓度的GLP-1或毛喉素。取出部分上清液，通过SPA测量其胰岛素含量。结果表示为“相对对照的倍数”(FOC)。
在该测定中，由分散的大鼠胰岛细胞分泌胰岛素的增加定义为至少1.4倍的增加。
体内测定化合物对大鼠腹膜内葡萄糖耐量的影响大鼠在经口管饲后，测量本发明化合物的体内活性。对禁食过夜的大鼠给予口服剂量的溶媒对照或化合物。3小时后，测量基础血糖水平，腹膜内给予大鼠2g/kg葡萄糖。15分钟、30分钟和60分钟后再测定血糖水平。在IPGTT(腹膜内葡萄糖耐量测试)后，本发明代表性化合物相对于溶媒显著地降低了血糖水平。
对心血管参数影响的测量方法还评价心血管参数(例如心率和血压)。SHR大鼠每天口服一次溶媒或试验化合物，持续两周。按照Grinsell等(Am.J.Hypertens.，13370-375，2000)介绍的尾套法(tail-cuff method)，测量血压和心率。按照Shen等(J.Pharmacol.Exp.Therap.，2781435-1443，1996)介绍的方法，监测猴子的血压和心率。
甘油三酯水平的测量方法给hApoAl小鼠(Jackson Laboratories，Bar Harbor，ME)放血(从眼静脉或尾静脉)，根据相同的平均血清甘油三酯水平分组。每天口服(结合药学上可接受的赋形剂，管饲)一次试验化合物，持续8天。然后给小鼠再次从眼静脉或尾静脉放血，测量血清甘油三酯水平。在所有情况下，都使用Technicon Axon Autoanalyzer(BayerCorporation，Tarrytown，NY)测量甘油三酯水平。
HDL-胆固醇水平的测量方法为了测量血浆HDL-胆固醇水平，给hApoAl小鼠放血，根据相同的平均血浆HDL-胆固醇水平分组。小鼠每天口服一次溶媒或试验化合物，持续7天，然后在第8天再次放血。用Synchron Clinical System(CX4)(Beckman Coulter，Fullerton，CA)分析血浆中的HDL-胆固醇。
总胆固醇、HDL-胆固醇、甘油三酯和葡萄糖水平的测量方法在另一种体内测定法中，给肥胖猴子放血，然后每天口服一次溶媒或试验化合物，持续4周，然后再次放血。用Synchron ClinicalSystem(CX4)(Beckman Coulter，Fullerton，CA)分析血清中的总胆固醇、HDL-胆固醇、甘油三酯和葡萄糖。按照Oliver等(Proc.Natl.Acad.Sci.，USA 985306-5311，2001)介绍的方法，用NMR光谱进行脂蛋白亚型分析。
上述说明书中提及的所有出版物和专利通过引用结合到本文。本发明组合物和方法的不偏离本发明范围和精神的各种改进和改变，对本领域技术人员是显而易见的。尽管结合具体的实施方案介绍了本发明，但应当理解的是，本发明要求保护的范围不应仅仅限于这些具体的实施方案。实际上，实施本发明的上述方式的各种变化如果对于分子生物学或相关领域的技术人员显而易见的，那么这些变化都属于所附权利要求范围。仅利用常规实验方法，本领域技术人员就能够识别或确定许多与本发明所述具体实施方案等同的方案。这样的等同实施方案也包括在所附权利要求范围内。
权利要求
1.一种下式(I)的杂芳基氨基吡唑衍生物及其药学上可接受的盐 其中 为选自以下的取代的杂芳族环基 R为H或(C1-C6)烷基；R1为H，任选被苯基取代的(C1-C6)烷基，所述苯基任选被卤素或[三(C1-C4)烷基]甲硅烷基取代，(C3-C6)烯基，(C3-C6)炔基，(C3-C6)环烷基，任选被最多两个选自以下的取代基取代(C1-C3)烷基、CF3和卤素，(C1-C3)卤代烷基，或苯基，任选被最多两个选自以下的取代基取代卤素、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、(C1-C3)卤代烷基、(C1-C3)卤代烷氧基和氰基；R2为H，卤素，(C1-C6)烷基，吡啶基，任选被最多两个选自以下的取代基取代(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、卤素和(C1-C6)烷基，苯基，任选被最多两个选自以下的取代基取代(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、氰基和卤素，嘧啶基，噻吩基，任选被最多两个选自以下的取代基取代(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、氰基和卤素，苯并噻吩基，任选被最多两个选自以下的取代基取代(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、氰基和卤素，或呋喃基，任选被最多两个选自以下的取代基取代(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、氰基和卤素；R3为(C1-C6)烷基，(C3-C6)环烷基，(C2-C3)卤代烷基，或苯基，任选被最多四个选自以下的取代基取代任选被一个(C1-C4)烷氧基取代的(C1-C6)烷基、卤素、(C1-C3)卤代烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C3)卤代烷氧基、(C1-C6)烷硫基和氰基；R4为任选被一个(C1-C4)烷氧基取代的(C1-C6)烷基，(C1-C6)烷氧基，(C1-C6)烷硫基，(C1-C3)卤代烷基，(C1-C3)卤代烷氧基，或卤素；n＝0、1、2或3；X为CO2R7、CONR5R6或SO2NH2；R5为H、(C1-C6)烷基、任选被卤素取代的苯基、或任选在苯环上被卤素取代的苄基；R6为H或(C1-C6)烷基；或者R5和R6可以与它们所连接的氮原子一起构成哌啶、吗啉、硫代吗啉或哌嗪环，所述哌嗪任选在氮上被(C1-C3)烷基取代；R7为H，(C1-C6)烷基，苄基，任选在芳环上被最多两个选自以下的取代基取代卤素、(C1-C6)烷基、(C1-C3)烷氧基、(C1-C3)卤代烷基、(C1-C3)卤代烷氧基和(C1-C6)烷硫基；苯基，任选被最多两个选自以下的取代基取代(C1-C6)烷基、卤素、(C1-C6)烷氧基、(C1-C3)卤代烷基、(C1-C3)卤代烷氧基和(C1-C6)烷硫基；前提条件是式(I)化合物不是下列化合物
2.权利要求1的化合物及其药物可接受的盐，其中 为选自以下的取代的杂芳族环基 R为H或(C1-C6)烷基；R1为H，任选被苯基取代的(C1-C6)烷基，所述苯基任选被卤素或[三(C1-C4)烷基]甲硅烷基取代，(C3-C6)烯基，(C3-C6)炔基，(C3-C6)环烷基，任选被最多两个选自以下的取代基取代(C1-C3)烷基、CF3和卤素，(C1-C3)卤代烷基，或苯基，任选被最多两个选自以下的取代基取代卤素、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、(C1-C3)卤代烷基、(C1-C3)卤代烷氧基和氰基；R2为H，卤素，(C1-C6)烷基，吡啶基，任选被最多两个选自以下的取代基取代(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、卤素和(C1-C6)烷基，苯基，任选被最多两个选自以下的取代基取代(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、氰基和卤素，嘧啶基，噻吩基，任选被最多两个选自以下的取代基取代(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、氰基和卤素，苯并噻吩基，任选被最多两个选自以下的取代基取代(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、氰基和卤素，或呋喃基，任选被最多两个选自以下的取代基取代(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、氰基和卤素；R3为(C1-C6)烷基，(C3-C6)环烷基，(C2-C3)卤代烷基，或苯基，任选被最多四个选自以下的取代基取代任选被一个(C1-C4)烷氧基取代的(C1-C6)烷基、卤素、(C1-C3)卤代烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C3)卤代烷氧基、(C1-C6)烷硫基和氰基；R4为任选被一个(C1-C4)烷氧基取代的(C1-C6)烷基，(C1-C6)烷氧基，(C1-C6)烷硫基，(C1-C3)卤代烷基，(C1-C3)卤代烷氧基，或卤素；n＝0、1、2或3；X为CO2R7、CONR5R6或SO2NH2；R5为H、(C1-C6)烷基、任选被卤素取代的苯基、或任选在苯环上被卤素取代的苄基；R6为H或(C1-C6)烷基；或者R5和R6可以与它们所连接的氮原子一起构成哌啶、吗啉、硫代吗啉或哌嗪环，所述哌嗪任选在氮上被(C1-C3)烷基取代；R7为H，(C1-C6)烷基，苄基，任选在芳环上被最多两个选自以下的取代基取代卤素、(C1-C6)烷基、(C1-C3)烷氧基、(C1-C3)卤代烷基、(C1-C3)卤代烷氧基和(C1-C6)烷硫基；苯基，任选被最多两个选自以下的取代基取代(C1-C6)烷基、卤素、(C1-C6)烷氧基、(C1-C3)卤代烷基、(C1-C3)卤代烷氧基和(C1-C6)烷硫基。
3.权利要求1的化合物及药学上可接受的盐，其中 为选自以下的取代的杂芳族环基 R为H或(C1-C6)烷基；R1为H，任选被苯基取代的(C1-C6)烷基，所述苯基任选被卤素或[三(C1-C4)烷基]甲硅烷基取代，(C3-C6)环烷基，任选被最多两个选自以下的取代基取代(C1-C3)烷基、CF3和卤素，(C1-C3)卤代烷基，或苯基，任选被最多两个选自以下的取代基取代卤素、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、(C1-C3)卤代烷基、(C1-C3)卤代烷氧基和氰基；R2为H，卤素，(C1-C6)烷基，吡啶基，任选被最多两个选自以下的取代基取代(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、卤素和(C1-C6)烷基，苯基，任选被最多两个选自以下的取代基取代(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、氰基和卤素，嘧啶基；R3为(C1-C6)烷基，(C3-C6)环烷基，(C2-C3)卤代烷基，或苯基，任选被最多四个选自以下的取代基取代任选被一个(C1-C4)烷氧基取代的(C1-C6)烷基、卤素、(C1-C3)卤代烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C3)卤代烷氧基、(C1-C6)烷硫基和氰基；R4为任选被一个(C1-C4)烷氧基取代的(C1-C6)烷基，(C1-C6)烷氧基，(C1-C6)烷硫基，(C1-C3)卤代烷基，(C1-C3)卤代烷氧基，或卤素；n＝0、1或2；X为CO2R7或CONR5R6；R5为H或(C1-C6)烷基；R6为H或(C1-C6)烷基；或者R5和R6可以与它们所连接的氮原子一起构成哌啶、吗啉、硫代吗啉或哌嗪环，所述哌嗪任选在氮上被(C1-C3)烷基取代；R7为H或(C1-C6)烷基。
4.权利要求1的化合物及药学上可接受的盐，其中 为选自以下的取代的杂芳族环基 R为H或(C1-C6)烷基；R1为H，任选被苯基取代的(C1-C6)烷基，所述苯基任选被卤素或[三(C1-C4)烷基]甲硅烷基取代，(C3-C6)环烷基，任选被最多两个选自以下的取代基取代(C1-C3)烷基、CF3和卤素，(C1-C3)卤代烷基，或苯基，任选被最多两个选自以下的取代基取代卤素、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、(C1-C3)卤代烷基、(C1-C3)卤代烷氧基和氰基；R2为H，卤素，(C1-C6)烷基，苯基，任选被最多两个选自以下的取代基取代(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、氰基和卤素；R3为(C1-C6)烷基，(C3-C6)环烷基，(C2-C3)卤代烷基，或苯基，任选被最多四个选自以下的取代基取代任选被一个(C1-C4)烷氧基取代的(C1-C6)烷基、卤素、(C1-C3)卤代烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C3)卤代烷氧基、(C1-C6)烷硫基和氰基；R4为任选被一个(C1-C4)烷氧基取代的(C1-C6)烷基，(C1-C6)烷氧基，(C1-C6)烷硫基，(C1-C3)卤代烷基，(C1-C3)卤代烷氧基，或卤素；n＝0、1或2；X为CO2R7或CONR5R6；R5为H或(C1-C6)烷基；R6为H或(C1-C6)烷基；R7为H或(C1-C6)烷基。
5.权利要求1的化合物及药学上可接受的盐，其中 为选自以下的取代的杂芳族环基 R为H或(C1-C6)烷基；R1为H，任选被苯基取代的(C1-C6)烷基，所述苯基任选被卤素或[三(C1-C4)烷基]甲硅烷基取代，(C3-C6)环烷基，任选被最多两个选自以下的取代基取代(C1-C3)烷基、CF3和卤素，(C1-C3)卤代烷基，或，苯基，任选被最多两个选自以下的取代基取代卤素、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、(C1-C3)卤代烷基、(C1-C3)卤代烷氧基和氰基；R2为H，卤素，(C1-C6)烷基，苯基，任选被最多两个选自以下的取代基取代(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、氰基和卤素；R3为(C1-C6)烷基，(C3-C6)环烷基，(C2-C3)卤代烷基，或苯基，任选被最多四个选自以下的取代基取代任选被一个(C1-C4)烷氧基取代的(C1-C6)烷基、卤素、(C1-C3)卤代烷基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C3)卤代烷氧基、(C1-C6)烷硫基和氰基；R4为任选被一个(C1-C4)烷氧基取代的(C1-C6)烷基，(C1-C6)烷氧基，(C1-C6)烷硫基，(C1-C3)卤代烷基，(C1-C3)卤代烷氧基，或卤素；n＝0、1或2；X为CO2R7或CONR5R6；R5为H或(C1-C6)烷基；R6为H或(C1-C6)烷基；R7为H或(C1-C6)烷基。
6.权利要求1的化合物，其选自下列化合物(1)2-{[3-叔丁基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}-6-甲基烟酸；(2)2-{[3-环戊基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}烟酸；(3)3-{[3-叔丁基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}吡啶-2-甲酸；(4)2-{[3-(2，2-二甲基丙基)-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}烟酸；(5)2-{[1-(2-氯苯基)-3-(4-氟苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}烟酸；(6)3-{[3-叔丁基-1-(2，6-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}吡啶-2-甲酸；(7)2-{[3-叔丁基-1-(5-氟-2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}烟酸；(8)2-{[3-叔丁基-1-(2，5-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}烟酸；(9)2-{[3-叔丁基-1-(5-氟-2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}-6-甲基烟酸；(10)2-{[3-叔丁基-1-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}-6-甲基烟酸；(11)2-{[3-叔丁基-1-(2，5-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}-6-甲基烟酸；(12)2-{[3-叔丁基-1-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}-5-氟烟酸；(13)2-{[3-叔丁基-1-(2，6-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}-5-氟烟酸；(14)2-{[3-叔丁基-1-(5-氟-2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}-5-氟烟酸；(15)2-{[3-叔丁基-1-(2，5-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}-5-氟烟酸；(16)2-{[3-叔丁基-1-(2，5-二甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}-5-氟烟酸；(17)2-{[3-环己基-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}烟酸；(18)2-{[1-(5-氟-2-甲基苯基)-3-(4-氟苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}烟酸；(19)2-{[1-(2-甲基苯基)-3-苯基-1H-吡唑-5-基]氨基}烟酸；(20)2-{[3-(4-氟苯基)-1-(2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}烟酸；(21)2-{[1-(2，5-二甲基苯基)-3-(4-氟苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}烟酸；(22)2-{[1-(2，5-二甲基苯基)-3-苯基-1H-吡唑-5-基]氨基}烟酸；(23)2-{[3-(4-氟苯基)-1-(2-甲氧基-5-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}烟酸；(24)2-{[3-(4-氟苯基)-1-(5-甲氧基-2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}烟酸；(25)2-{[1-(2，5-二甲基苯基)-3-苯基-1H-吡唑-5-基]氨基}-6-甲基烟酸；(26)2-{[1-(2，5-二甲基苯基)-3-(4-氟苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}-6-甲基烟酸；(27)2-{[3-(4-氟苯基)-1-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}-6-甲基烟酸；(28)2-{[3-(1，1-二甲基丙基)-1-(3-甲氧基-2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}烟酸；(29)2-{[3-(1，1-二甲基丙基)-1-(5-氟-2-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}烟酸；(30)2-{[3-叔丁基-1-(2-氯苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}烟酸；(31)2-{[3-叔丁基-1-(2，6-二甲基苯基-1H-吡唑-5-基]氨基}烟酸；(32)2-{[3-叔丁基-1-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}烟酸；和(33)3-{[3-叔丁基-1-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-1H-吡唑-5-基]氨基}-5-(三氟甲基)吡啶-2-甲酸。
7.一种药物组合物，该药物组合物包含有效量的权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体。
8.一种药物组合物，该药物组合物包含治疗有效量的权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体和一种或多种药物。
9.权利要求14的药物组合物，其中所述药物选自PPAR配体、胰岛素促分泌素、磺酰脲类药物、α-葡糖苷酶抑制剂、胰岛素增敏剂、降低肝脏葡萄糖输出的化合物、胰岛素、胰岛素衍生物、双胍类、蛋白酪氨酸磷酸酶-1B、二肽基肽酶IV、11β-HSD抑制剂、减肥药、HMG-CoA还原酶抑制剂、烟酸、降血脂药、ACAT抑制剂、胆汁酸螯合剂、胆汁酸重摄取抑制剂、微粒体甘油三酯转运抑制剂、贝酸衍生物、β阻断剂、ACE抑制剂、钙通道阻断剂、利尿药、肾素抑制剂、AT-1受体拮抗剂、ET受体拮抗剂、中性内肽酶抑制剂、血管肽酶抑制剂和硝酸盐。
10.一种治疗糖尿病的方法，该方法包括对需要治疗的患者给予治疗有效量的权利要求1的化合物或权利要求7的药物组合物的步骤。
11.权利要求10的方法，其中所述糖尿病选自I型糖尿病、II型糖尿病、青少年成熟期突发型糖尿病、成人隐性自身免疫性糖尿病和妊娠糖尿病。
12.一种治疗X综合症的方法，该方法包括对需要治疗的患者给予治疗有效量的权利要求1的化合物或权利要求7的药物组合物的步骤。
13.一种治疗糖尿病相关疾病的方法，该方法包括对需要治疗的患者给予治疗有效量的权利要求1的化合物或权利要求7的药物组合物的步骤。
14.权利要求13的方法，其中所述糖尿病相关疾病选自高血糖症、高胰岛素血症、糖耐量减低、空腹血糖异常、血脂异常、高甘油三酯血症和胰岛素抵抗。
15.一种治疗或预防糖尿病继发性病因的方法，该方法包括对需要治疗的患者给予治疗有效量的权利要求1的化合物或权利要求7的药物组合物的步骤。
16.权利要求15的方法，其中所述继发性病因选自糖皮质激素过量、生长激素过量、嗜铬细胞瘤和药物引起的糖尿病。
17.一种治疗糖尿病的方法，该方法包括对需要治疗的患者给予治疗有效量的权利要求1的化合物以及一种或多种药物的步骤。
18.权利要求17的方法，其中所述药物选自PPAR激动剂、磺酰脲类药物、非磺酰脲类促分泌素、α-葡糖苷酶抑制剂、胰岛素增敏剂、胰岛素促分泌素、降低肝脏葡萄糖输出的化合物、胰岛素和减肥药。
19.权利要求18的方法，其中所述糖尿病选自I型糖尿病、II型糖尿病、青少年成熟期突发型糖尿病、成人隐性自身免疫性糖尿病和妊娠糖尿病。
20.一种治疗X综合症的方法，该方法包括对需要治疗的患者给予治疗有效量的权利要求1的化合物以及一种或多种药物的步骤。
21.权利要求20的方法，其中所述药物选自PPAR激动剂、磺酰脲类药物、非磺酰脲类促分泌素、α-葡糖苷酶抑制剂、胰岛素增敏剂、胰岛素促分泌素、降低肝脏葡萄糖输出的化合物、胰岛素和减肥药。
22.一种治疗糖尿病相关疾病的方法，该方法包括对需要治疗的患者给予治疗有效量的权利要求1的化合物以及一种或多种药物的步骤。
23.权利要求22的方法，其中所述糖尿病相关疾病选自高血糖症、高胰岛素血症、糖耐量减低、空腹血糖异常、血脂异常、高甘油三酯血症和胰岛素抵抗。
24.权利要求23的方法，其中所述药物选自PPAR激动剂、磺酰脲类药物、非磺酰脲类促分泌素、α-葡糖苷酶抑制剂、胰岛素增敏剂、胰岛素促分泌素、降低肝脏葡萄糖输出的化合物、胰岛素和减肥药。
25.一种治疗或预防糖尿病继发性病因的方法，该方法包括对需要治疗的患者给予治疗有效量的权利要求1的化合物以及一种或多种药物的步骤。
26.权利要求25的方法，其中所述药物选自PPAR激动剂、磺酰脲类药物、非磺酰脲类促分泌素、α-葡糖苷酶抑制剂、胰岛素增敏剂、胰岛素促分泌素、降低肝脏葡萄糖输出的化合物、胰岛素和减肥药。
27.一种治疗糖尿病、X综合症、糖尿病相关疾病或糖尿病继发性病因的方法，该方法包括对需要治疗的患者给予治疗有效量的权利要求1的化合物以及一种或多种药物的步骤，所述药物选自HMG-CoA还原酶抑制剂、烟酸、降血脂药、ACAT抑制剂、胆汁酸螯合剂、胆汁酸重摄取抑制剂、微粒体甘油三酯转运抑制剂、贝酸衍生物、β阻断剂、ACE抑制剂、钙通道阻断剂、利尿药、肾素抑制剂、AT-1受体拮抗剂、ET受体拮抗剂、中性内肽酶抑制剂、血管肽酶抑制剂和硝酸盐。
28.权利要求27的方法，其中所述糖尿病相关疾病选自高血糖症、高胰岛素血症、糖耐量减低、空腹血糖异常、血脂异常、高甘油三酯血症和胰岛素抵抗。
29.权利要求17-28中任一项的方法，其中权利要求1的化合物与一种或多种药物以单一药物制剂形式给药。
30.一种治疗心血管疾病的方法，该方法包括对需要治疗的患者给予治疗有效量的权利要求1的多肽或权利要求7的药物组合物的步骤。
31.权利要求30的方法，其中所述心血管疾病选自动脉粥样硬化、冠心病、冠状动脉疾病和高血压。
32.一种治疗肥胖症的方法，该方法包括对需要治疗的患者给予治疗有效量的权利要求1的化合物或权利要求7的药物组合物的步骤。
33.一种刺激有需要的患者的胰岛素分泌的方法，该方法包括对所述患者给予权利要求1的化合物或权利要求7的药物组合物。
34.权利要求1的化合物，用于治疗和/或预防糖尿病和糖尿病相关疾病。
35.一种药物，包含至少一种权利要求1的化合物和至少一种药学上可接受、药用安全的载体或赋形剂。
36.权利要求1的化合物在制备用于治疗和/或预防糖尿病和糖尿病相关疾病的药物中的用途。
37.权利要求35的药物，用于治疗和/或预防糖尿病。
全文摘要
本发明涉及杂芳基氨基吡唑化合物、药物组合物以及治疗糖尿病和相关疾病的方法。
文档编号A61K31/4155GK1946715SQ200580012855
公开日2007年4月11日 申请日期2005年2月24日 优先权日2004年2月27日
发明者J·鲁多尔夫, P·维肯斯, 庄智媛, 陈利冰, S·马努森, A·奥拉格, 漆宁 申请人:拜尔药品公司
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