四氢吡喃基环戊基四氢吡啶并吡啶趋化因子受体活性调节剂的制作方法
专利名称：四氢吡喃基环戊基四氢吡啶并吡啶趋化因子受体活性调节剂的制作方法
背景技术：
趋化因子是具有强力趋化活性的小型(70-120个氨基酸)促炎细胞因子家族。趋化因子是由各种细胞释放的吸引各种细胞如单核细胞、巨噬细胞、T细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞和嗜中性粒细胞到炎症部位的趋化细胞因子(综述参见Schall，Cytokine，3，165-183(1991)和Murphy，Rev.Immun.，12，593-633(1994))。这些分子最初通过四个保守半胱氨酸定义并基于第一半胱氨酸对的排列分为两个亚家族。在CXC-趋化因子家族中，该家族包括IL-8、GROα、NAP-2和IP-10，这两个半胱氨酸被单个氨基酸分开，而在CC-趋化因子家族中，该家族包括RANTES、MCP-1、MCP-2、MCP-3、MIP-1α、MIP-1β和嗜酸性粒细胞活化趋化因子(eotaxin)，这两个残基是相邻的。
α-趋化因子如白细胞介素-8(IL-8)、嗜中性粒细胞活化蛋白-2(NAP-2)和黑素瘤生长刺激活性蛋白(MGSA)主要对嗜中性粒细胞具有趋化性，而β-趋化因子如RANTES、MIP-1α、MIP-1β、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、MCP-2、MCP-3和嗜酸性粒细胞活化趋化因子对巨噬细胞、单核细胞、T细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞具有趋化性(Deng等，Nature，381，661-666(1996))。
趋化因子由各种细胞类型分泌并与白细胞和其它细胞上存在的特异性G蛋白偶联受体(GPCRs)结合(综述参见Horuk，Trends Pharm.Sci.，15，159-165(1994))。这些趋化因子受体形成GPCRs的亚家族，其目前由15个特征化成员和许多孤儿受体构成。与混栖趋化受体如C5a、fMLP、PAF、和LTB4不同，趋化因子受体在白细胞亚群上更具选择性地被表达。因此，特异性趋化因子的产生提供了募集特定白细胞亚群的机制。
与它们的同源配体结合时，趋化因子受体传导胞内信号通过结合的三聚体G蛋白进行，引起胞内钙浓度迅速增加。至少有7种结合或应答β-趋化因子的人趋化因子受体，其具有以下特征形式CCR-1(或″CKR-1″或″CC-CKR-1″)[MIP-1α，MIP-1β，MCP-3，RANTES](Ben-Barruch等，J.Biol. Chem.，270，22123-22128(1995)；Beote等，Cell，72，415-425(1993))；CCR-2A和CCR-2B(或″CKR-2A″/″CKR-2A″或″CC-CKR-2A″/″CC-CKR-2A″)[MCP-1，MCP-2，MCP-3，MCP-4]；CCR-3(或″CKR-3″或″CC-CKR-3″)[嗜酸性粒细胞活化趋化因子、嗜酸性粒细胞活化趋化因子2、RANTES、MCP-2、MCP-3](Rollins等，Blood，90，908-928(1997))；CCR-4(或″CKR-4″或″CC-CKR-4″)[MIP-1α RANTES，MCP-1](Rollins等，Blood，90，908-928(1997))；CCR-5(或″CKR-5″或″CC-CKR-5″)[MIP-1αRANTES、MIP-1β](Sanson等，Biochemistry，35，3362-3367(1996))；和Duffy blood-group抗原[RANTES，MCP-1](Chaudhun等，J.Biol. Chem.，269，7835-7838(1994))。β-趋化因子特别地包括嗜酸性粒细胞活化趋化因子、MIP(″巨噬细胞炎性蛋白)、MCP(″单核细胞趋化蛋白″)和RANTES(″活化调节型，正常的T表达和分泌″)。
趋化因子受体如CCR-1、CCR-2、CCR-2A、CCR-2B、CCR-3、CCR-4、CCR-5、CXCR-3、CXCR-4已经暗示出是炎性和免疫调节性病症和疾病的重要递质，所述病症和疾病包括哮喘、鼻炎和变应性疾病，以及诸如类风湿性关节炎和动脉粥样硬化的自身免疫性病变。在CCR-5基因中缺失32-碱基对的纯合人似乎对类风湿性关节炎较不敏感(Gomez等，Arthritis & Rheumatism，42，989-992(1999))。Kita，H.等，J.Exp.Med.183，2421-2426(1996)提供了嗜酸性粒细胞在变应性炎症中的作用的评论。Lustger，A.D.，New England J.Med.，338(7)，426-445(1998)提供了趋化因子在变应性炎症中的作用的一般综述。
趋化因子亚群是单核细胞和巨噬细胞的有力化学引诱物。这其中得到最充分表征的是MCP-1(单核细胞趋化蛋白-1)，其初级受体为CCR2。MCP-1在各种物种(包括啮齿动物和人)中在各种细胞类型中响应炎症性刺激而产生，并且刺激单核细胞和淋巴细胞亚群中的趋化性。特别地，MCP-1的产生与单核细胞和巨噬细胞在炎症性部位浸润有关。在小鼠中通过同源重组剔除MCP-1或者CCR2可导致响应巯基醋酸酯注射剂和单核细胞增生利斯特氏菌(Listeriamonocytogenes)感染的单核细胞募集的显著变弱(Lu等，J.Exp.Med.，187，601-608(1998)；Kurihara等，J.Exp.Med.，186，1757-1762(1997)；Boring等，J.Clin.Invest.，100，2552-2561(1997)；Kuziel等，Proc.Natl.Acad.Sci.，94，12053-12058(1997))。而且，这些动物表明单核细胞向由血吸虫或者分枝杆菌抗原注射诱导的肉芽肿病灶中的浸润减少(Boring等，J.Clin.Invest.，100，2552-2561(1997)；Warmington等，Am J.Path.，154，1407-1416(1999))。这些数据暗示了MCP-1诱导的CCR2活化在单核细胞向炎症部位募集过程中是举足轻重的，并且拮抗这一活性将对免疫应答产生足够的抑制，从而在免疫炎性和自身免疫性疾病中产生治疗益处。
因此，调节趋化因子受体如CCR-2受体的药剂在所述病症和疾病中将是有用的。
另外，单核细胞向血管壁内炎性病灶的募集是致动脉粥样斑块形成的发病机理的主要因素。MCP-1由内皮细胞和内膜平滑肌细胞在高胆固醇血症条件下在血管壁受到损伤之后产生和分泌。募集到损伤部位的单核细胞渗入血管壁并响应释放的MCP-1分化为泡沫细胞。个别小组目前已经用实验说明在回交于保持多脂饮食的APO-E-/-、LDL-R-/-或Apo B转基因小鼠的MCP-1-/-或CCR2-/-小鼠中的主动脉病灶大小、巨噬细胞含量和坏死变弱(Boring等，Nature，394，894-897(1998)；Gosling等，J.Clin.Invest.，103，773-778(1999))。因此，CCR2拮抗剂可通过削弱动脉壁内的单核细胞募集和分化而抑制动脉粥样硬化病灶形成和病理学进展。
发明内容
本发明进一步涉及式I的化合物 (其中n、R1、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R15、R16、Y和Z如本文中定义的)，其为趋化因子受体活性调节剂并可用于预防或治疗某些炎症性和免疫调节性病症和疾病、变应性疾病、特应性病况(包括过敏性鼻炎、皮炎、结膜炎和哮喘)，以及自身免疫性病变如类风湿性关节炎和动脉粥样硬化。本发明还涉及包括这些化合物的药用组合物，和这些化合物和组合物在预防或治疗其中牵涉趋化因子受体的所述疾病中的应用。
发明的详细说明本发明涉及式I的化合物 其中Y选自-O-、-NR12-、-S-、-SO-、-SO2-和-CR12R12-、-NSO2R14-、-NCOR13-、-CR12COR11-、-CR12OCOR13-和-CO-；Z为C或N；R1选自(a)-SO2R14，(b)-C0-3烷基-S(O)-R14，(c)-C1-6烷基-NR12R12，(d)-N(CH3)-COR13，(e)-N(CH3)-SO2R14，和(f)-SO2NR12R12；R2选自(a)氢，(b)羟基，(c)卤代，
(d)未被取代的或被1-6个独立地选自氟和羟基的取代基取代的C1-3烷基，(e)-NR12R12，(f)-COR11，(g)-CONR12R12，(h)-NR12COR13，(i)-OCONR12R12，(j)-NR12CONR12R12；(k)-杂环，(1)-CN，(m)-NR12-SO2-NR12R12，(n)-NR12-SO2-R12，(o)-SO2-NR12R12，和(p)＝O，当R2通过双键连接于环时；R3选自(a)氢，(b)未被取代的或被1-3个氟取代的C1-3烷基，(c)未被取代的或被1-3个氟取代的-O-C1-3烷基，(d)羟基，(e)氯代，(f)氟代，(g)溴代，(h)苯基，(0杂环，G)当Z为N时，R3为O，和(k)当Z为N时，R3为不存在；R4选自(a)氢，(b)未被取代的或被1-3个氟取代的C1-3烷基，(c)未被取代的或被1-3个氟取代的-O-C1-3烷基，(d)羟基，(e)氯代，
(f)氟代，(g)溴代，(h)苯基，和(i)杂环；R5选自(a)未被取代的或被1-6个氟、羟基、或其两者取代的C1-6烷基，(b)未被取代的或被1-6个氟取代的-O-C1-6烷基，(c)未被取代的或被1-6个氟取代的-CO-C1-6烷基，(d)未被取代的或被1-6个氟取代的-S-C1-6烷基，(e)未被取代的或被一个或多个取代基取代的-吡啶基，取代基独立地选自卤代、三氟甲基、C1-4烷基和COR11，(f)氟代，(g)氯代，(h)溴代，(i)-C4-6环烷基，(j)-O-C4-6环烷基，(k)未被取代的或被一个或多个取代基取代的苯基，取代基独立地选自卤代、三氟甲基、C1-4烷基和COR11，(1)未被取代的或被一个或多个取代基取代的-O-苯基，取代基独立地选自卤代、三氟甲基、C1-4烷基和COR11，(m)未被取代的或被1-6个氟取代的-C3-6环烷基，(n)未被取代的或被1-6个氟取代的-O-C3-6环烷基，(o)-杂环，(p)-CN，和(q)-COR11；R6选自(a)氢，(b)未被取代的或被1-3个氟取代的C1-3烷基，(c)未被取代的或被1-3个氟取代的-O-C1-3烷基，(d)羟基，(e)氯代，(f)氟代，
(g)溴代，(h)苯基，和(i)杂环；R7选自氢和未被取代的或被1-3个取代基取代的C1-6烷基，取代基独立地选自卤代、羟基、-CO2H、-CO2C1-6烷基和-O-C1-3烷基；R8选自(a)氢，(b)未被取代的或被1-6个取代基取代的C1-6烷基，取代基独立地选自氟代、C1-3烷氧基、羟基和-COR11，(c)氟代，(d)未被取代的或被1-3个氟取代的-O-C1-3烷基，(e)C3-6环烷基，(f)-O-C3-6环烷基，(g)羟基，(h)-COR11，和(i)-OCOR13，或者R7和R8一起为C2-4烷基或C0-2烷基-O-C1-3烷基，形成5-7元环；R9选自(a)氢，(b)未被取代的或被1-6个取代基取代的C1-6烷基，取代基独立地选自氟代、C1-3烷氧基、羟基、-COR11，(c)COR11，(d)羟基，和(e)未被取代的或被1-6个取代基取代的-O-C1-6烷基，取代基独立地选自氟、C1-3烷氧基、羟基、-COR11，或者R8和R9一起为C1-4烷基或C0-3烷基-O-C0-3烷基、形成3-6元环；R10选自(a)氢，和(b)未被取代的或被1-6个氟取代的C1-6烷基，(c)氟代，
(d)-O-C3-6环烷基，和(e)未被取代的或被1-6个氟取代的-O-C1-3烷基，或者R8和R10一起为C2-3烷基，形成5-6元环，其中所述C2-3烷基为未被取代的或被1-3个取代基取代，取代基独立地选自卤代、羟基、-COR11、C1-3烷基和C1-3烷氧基；或者R8和R10一起为C1-2烷基-O-C1-2烷基，形成6-8元环，其中所述C1-2烷基-O-C1-2烷基为未被取代的或被1-3个取代基取代，取代基独立地选自卤代、羟基、-COR11、C1-3烷基和C1-3烷氧基；或者R8和R10一起为-O-C1-2烷基-O-，形成6-7元环，其中所述-O-C1-2烷基-O-为未被取代的或被1-3个取代基取代，取代基独立地选自卤代、羟基、-COR11、C1-3烷基和C1-3烷氧基；R11独立地选自羟基、氢、C1-6烷基、-O-C1-6烷基、苄基、苯基和C3-6环烷基，其中所述烷基、苯基、苄基和环烷基为未被取代的或被1-3个取代基取代，取代基独立地选自卤代、羟基、C1-3烷基、C1-3烷氧基、-CO2H、-CO2-C1-6烷基和三氟甲基；R12独立地选自氢、C1-6烷基、苄基、苯基和C3-6环烷基，其中所述烷基、苯基、苄基和环烷基为未被取代的或被1-3个取代基取代，取代基独立地选自卤代、羟基、C1-3烷基、C1-3烷氧基、-CO2H、-CO2-C1-6烷基和三氟甲基；R13独立地选自氢、C1-6烷基、-O-C1-6烷基、苄基、苯基和C3-6环烷基，其中所述烷基、苯基、苄基和环烷基为未被取代的或被1-3个取代基取代，取代基独立地选自卤代、羟基、C1-3烷基、C1-3烷氧基、-CO2H、-CO2-C1-6烷基和三氟甲基；R14独立地选自羟基、C1-6烷基、-O-C1-6烷基、苄基、苯基和C3-6环烷基，其中所述烷基、苯基、苄基和环烷基为未被取代的或被1-3个取代基取代，取代基独立地选自卤代、羟基、C1-3烷基、C1-3烷氧基、-CO2H、-CO2-C1-6烷基和三氟甲基；R15和R16各自为H，或R15和R16一起为-CH2CH(R2)-，形成稠环；n为0、1或2；虚线表示非必要的单键；及其可药用盐及其各自的非对映异构体。
本发明的化合物还包括式Ia的化合物 其中R1、R5、R8、Z和Y如本文中定义的，及其可药用盐及其各自的非对映异构体。
本发明的化合物进一步包括式Ib的化合物 其中R1、R3、R5、R8和Y如本文中定义的，及其可药用盐及其各自的非对映异构体。
本发明的化合物还进一步包括式Ic的化合物 其中R1、R5、R8和Z如本文中定义的，及其可药用盐及其各自的非对映异构体。
本发明的化合物另外包括式Id的化合物
其中R1、R3、R5和R8如本文中定义的，及其可药用盐及其各自的非对映异构体。
本发明的实施方案还包括其中Z为N的那些。在某些实施方案中，当Z为C时，R3为氢、氟、或三氟甲基，当Z为N时，R3为不存在。
本发明的实施方案还包括其中Y为-CH2-或-O-、或其中Y为O的那些。
在某些实施方案中，R1选自-SO2CH3、-SO2NH2、-SOCH3和-SO2NHCH3，特别地其中R1为-SO2CH3。
在本发明的某些实施方案中，R2、R4、R6、R7、R9和/或R10中的一个或多个为氢。
本发明的实施方案还包括，其中R5选自被1-6个氟取代的C1-6烷基、被1-6个氟取代的-O-C1-6烷基、氯代、溴代和苯基，特别地，R5为三氟甲基、三氟甲氧基、氯代、溴代和苯基，的那些。
在本发明的某些实施方案中，R8选自氢、未被取代的或被1-6个氟取代的C1-3烷基、-O-C1-3烷基、氟代和羟基，和特别地，R8为氢、三氟甲基、甲基、甲氧基、乙氧基、乙基、氟代和羟基。
本发明的实施方案还包括其中n为1的那些。
非对映体和对映体的独立合成或它们的色谱分离可如本领域已知的那样通过本文公开方法的适当改进法完成。它们的绝对立体化学可通过结晶产物或结晶中间体的X-射线晶体学进行测定，所述产物或中间体如果必要可使用含有已知绝对构型的不对称中心的试剂进行衍生化。
如本领域技术人员公知的，本文使用的卤代或者卤素包括氯代、氟代、溴代和碘代。
本文使用的“烷基”包括直链、支链和环状的没有双键或三键的碳结构。C1-8烷基中的C1-8表示具有直链或支链结构的具有1、2、3、4、5、6、7或8个碳的基团，因此C1-8烷基具体包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、戊基、己基、庚基和辛基。更广泛地，Ca-b烷基(其中a和b表示整数)表示具有直链或支链结构的具有a到b个碳的基团。C0烷基中的C0是指存在直接的共价键。“环烷基”是其一部分或全部形成具有至少3个原子的环的烷基。
本文使用的“杂环”包括以下基团苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并呋咱基、苯并吡唑基、苯并三唑基、苯并噻吩基、苯并唑基、咔唑基、咔啉基、1，2-二氮杂萘基、呋喃基、咪唑基、二氢吲哚基、吲哚基、吲哚吖嗪基(indolazinyl)、吲唑基、异苯并呋喃基、异吲哚基、异喹啉基、异噻唑基、异唑基、萘吡啶基(naphthpyridinyl)、二唑基、唑基、氧杂环丁烷基、吡喃基、吡嗪基、吡唑基、哒嗪基、吡啶并吡啶基、哒嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、喹喔啉基、四氢吡喃基、四唑基、四唑并吡啶基、噻二唑基、噻唑基、噻吩基、三唑基、氮杂环丁基、1，4-二烷基、六氢氮杂基、哌嗪基、哌啶基、吡咯烷基、吗啉基、硫代吗啉基、二氢苯并咪唑基、二氢苯并呋喃基、二氢苯并噻吩基、二氢苯并唑基、二氢呋喃基、二氢咪唑基、二氢吲哚基、二氢异唑基、二氢异噻唑基、二氢二唑基、二氢唑基、二氢吡嗪基、二氢吡唑基、二氢吡啶基、二氢嘧啶基、二氢吡咯基、二氢喹啉基、二氢四唑基、二氢噻二唑基、二氢噻唑基、二氢噻吩基、二氢三唑基、二氢氮杂环丁基、亚甲二氧基苯甲酰基、四氢呋喃基和四氢噻吩基，及其N-氧化物。
本文使用的“环”是指形成或存在任何类型的环状结构，包括独立式的环、稠环和在已有环上形成的桥。环可为非芳香的或为芳香的。此外，本文中时常公开环状结构的存在或形成，其中多个取代基被定义为“一起”，如“其中R9和R10一起为C1-2烷基-O-C1-2烷基”。在这种情况下，无论是否使用术语“环”，都必定形成环。
本文使用的术语“可药用的”是指在合理的医疗判断范围内、适于接触人和动物的组织而无过度的毒性、刺激性、过敏反应或者其它问题或者并发症，并且与合理的利益/风险比相称的那些化合物、物质、组合物和/或剂型。
本文使用的“可药用盐”是指其中母体化合物经过改性形成其酸的盐或者碱的盐的衍生物。可药用盐的例子包括但不限于碱残基如胺的无机酸盐或有机酸盐；酸残基如羧酸的碱金属盐或有机盐；等。可药用盐包括常规的无毒盐或，例如，从无毒的无机酸或有机酸形成的母体化合物的季铵盐。例如，常规的无毒盐包括得自无机酸如氢氯酸、氢溴酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸、硝酸等的盐；从有机酸如醋酸、丙酸、丁二酸、羟基乙酸、硬脂酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、枸橼酸、抗坏血酸、双羟萘酸、马来酸、羟基马来酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水杨酸、对氨基苯磺酸、2-乙酰氧基苯甲酸、富马酸、甲苯磺酸、甲磺酸、乙烷二磺酸、草酸、羟乙基磺酸等制备的盐。
本发明的可药用盐可从含有碱性或者酸性部分的母体化合物通过常规化学方法制得。通常，这种盐可通过使游离酸或碱形式的这些化合物与化学计量的量的适当的碱或酸在水中或在有机溶剂中或在两者的混合物中反应制备；通常，使用非水介质如醚、乙酸乙酯、乙醇、异丙醇、或者乙腈。适当的盐参见例如Remington′s PharmaceuticalSciences，17th ed.，Mack Publishing Company，Easton，PA，1985，p.1418。
本发明内的具体的化合物包括选自实施例中描述的那些化合物、及其可药用盐和其各自的非对映体的化合物。
主题化合物可用于调节需要这种调节的患者中的趋化因子受体活性的方法中，其包括给药有效量的化合物。
本发明涉及上述化合物作为趋化因子受体活性调节剂的应用。特别地，这些化合物可用作趋化因子受体特别是CCR-2的调节剂。
本发明的化合物作为趋化因子受体活性调节剂的实用性可通过本领域已知的操作法说明，如在Van Riper等，J.Exp.Med.，177，851-856(1993)中公开的趋化因子结合试验，其可容易地进行改变以适于测量CCR-2结合。
在CCR-2结合试验中的受体亲合力通过测量125I-MCP-1对包括单核细胞、THP-1细胞的各种细胞类型上的内源性CCR-2受体的抑制进行测定，或在真核细胞中克隆受体的异源表达后测定。将细胞悬浮在结合缓冲液中(50mM HEPES，pH7.2，5mM MgCl2，1mM CaCl2和0.50％BSA或0.5％人血清)并加到试验化合物或者DMSO和125I-MCP-1，在室温下1小时使其进行结合。然后在GFB过滤器上收集细胞，用25mM含有500mM NaCl的HEPES缓冲液洗涤，定量测定细胞结合的125I-MCP-1。
在趋化性试验中，使用T细胞耗尽的PBMC(单核细胞)进行趋化性，T细胞耗尽的PBMC从静脉全血或leukophoresed血液中分离并通过Ficoll-Hypaque离心纯化，然后通过用神经氨酸酶处理的绵羊红细胞丛生(rosetting)。分离后，细胞用含有0.1毫克/毫升BSA的HBSS洗涤并以1×107细胞/毫升悬浮。细胞在黑暗中用2μM Calcien-AM(Molecular Probes)进行荧光标记，在37℃进行30分钟。标记细胞洗涤两次，并以5×106细胞/毫升悬浮在含有0.1毫克/毫升BSA的具有L-谷氨酰胺(不含酚红)的RPMI 1640中。将在相同介质或单独的介质中稀释的10ng/ml MCP-1(Peprotech)加入到底孔(27μl)中。在用DMSO或者用各种浓度的试验化合物预培养15分钟后，向过滤器的顶侧中加入单核细胞(150,000个细胞)(30μl)。将等浓度的试验化合物或者DMSO加入到底孔中以防止由扩散所致的稀释。在37℃、5％CO2培养60分钟后，除去过滤器，将顶侧用含0.1毫克/毫升BSA的HBSS洗涤以除去没有移动进入过滤器中的细胞。在不存在化学引诱物条件下测定自发性移动(化学运动性)。
特别地，以下实施例中的化合物在上述试验中与CCR-2受体结合的活性的IC50通常小于约1μM。这种结果表明化合物在作为趋化因子受体活性调节剂应用中的固有活性。
哺乳动物趋化因子受体提供了用于干扰或促进哺乳动物如人中的嗜酸性粒细胞和/或白细胞功能的靶标。抑制或者促进趋化因子受体功能的化合物特别用于调节嗜酸性粒细胞和/或白细胞的功能，用于治疗目的。因此，抑制或者促进趋化因子受体功能的化合物将用于治疗、预防、改善或控制各种炎性和免疫调节性病症和疾病、变应性疾病、特应性病况(包括过敏性鼻炎、皮炎、结膜炎和哮喘)以及自身免疫性病变如类风湿性关节炎和动脉粥样硬化、或者降低其风险。
例如，抑制哺乳动物趋化因子受体(如人趋化因子受体)的一种或多种功能的本发明的化合物可被给用以抑制(如减少或者预防)炎症。因此，一种或多种炎性过程如白细胞移动、趋化性、胞吐作用(如酶、组胺的)或者炎症递质释放受到抑制。
除了灵长类动物如人之外，各种其它哺乳动物可根据本发明的方法进行治疗。例如，哺乳动物包括但不限于牛、绵羊、山羊、马、犬、猫、豚鼠、大鼠或其它牛科、羊科、马科、犬科、猫科、啮齿动物或者鼠科动物可进行治疗。然而，可在其它物种如鸟禽(如小鸡)中实践本发明的方法。
可使用本发明的化合物治疗各种与炎症和感染有关的疾病和病况。在某些实施方案中，疾病或者病况是其中白细胞的作用受到抑制或促进从而调节炎性应答的一种疾病或者病况。
可用趋化因子受体功能抑制剂治疗的人或其它物种的疾病或病况包括但不限于炎性或变应性疾病和病况，包括呼吸系统变应性疾病如哮喘，特别是支气管哮喘，过敏性鼻炎，超敏性肺病，超敏性肺炎，嗜酸粒细胞性肺炎(如吕弗勒综合征、慢性嗜酸粒细胞性肺炎)，迟发型超敏反应，间质性肺病(ILD)(如，自发性肺纤维化、或者与类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、强直性脊椎炎、系统性硬化、舍格伦综合征、多肌炎或者皮肌炎有关的ILD)；神经病性疼痛；全身过敏或者超敏反应、药物过敏(如对青霉素、头孢菌素)，昆虫叮刺过敏；自身免疫性疾病，如类风湿性关节炎、银屑病性关节炎、多发性硬化、系统性红斑狼疮、重症肌无力、幼年型糖尿病；肾小球性肾炎、自身免疫性甲状腺炎、贝切特氏病；移植排斥(如在移植中发生的)，包括同种异体移植排斥或者移植物抗宿主病；炎性肠病，如克罗恩氏病和溃疡性结肠炎；脊柱关节病；硬皮病；银屑病(包括T-细胞介导的银屑病)和炎性皮肤病如皮炎、湿疹、特应性皮炎、过敏性接触性皮炎、荨麻疹；脉管炎(如坏死性、皮肤性和超敏反应脉管炎)；嗜酸性肌炎、嗜酸性细胞增多性肌膜炎；具有皮肤或者器官的白细胞浸润的癌症。趋化因子受体功能抑制剂还可用于治疗或预防中风(Hugheset al.，Journal of Cerebral Blood Flow & Metabolism，22308-317，2002；Takami et al.，Journal of Cerebral Blood Flow & Metabolism，22780-784，2002)，肥胖病，II型糖尿病，以及神经病性和炎症性疼痛。其它可进行治疗的其中不受欢迎的炎性应答将受到抑制的疾病或者病况包括但不限于再灌注损伤、动脉粥样硬化、某些血液学恶性肿瘤、细胞因子诱导毒性(如败血症休克、内毒素休克)、多肌炎、皮肤肌炎。
可用趋化因子受体功能调节剂治疗的人或者其它物种的疾病或者病况包括但不限于免疫抑制，如在患有免疫缺陷综合症如AIDS或者其它病毒感染的个体中，经历放疗、化疗、自身免疫性疾病治疗或药物疗法(如皮质类固醇治疗)而这些治疗可引起免疫抑制的个体中；由于受体功能或者其它原因的先天性缺陷的免疫抑制；和传染性疾病诸如寄生虫疾病，包括但不限于蠕虫感染，如线虫(圆蠕虫)、(鞭虫病、蛲虫病、蛔虫病、钩虫病、类圆线虫病、旋毛虫病、丝虫病)、吸虫(片形吸虫)(血吸虫病、华支睾吸虫病)、多节倏虫(cestode)(绦虫)(包虫病、牛肉绦虫病(Taeniasis saginata)、囊尾蚴病)、内脏蠕虫、内脏幼虫偏头痛(如弓蛔虫)、嗜酸细胞性胃肠炎(如，Anisakisp.，Phocanema sp.)和皮肤幼虫偏头痛(Ancylostona braziliense，Ancylostoma caninum)。
另外，如果考虑递送足够的化合物通过诱导趋化因子受体内在化而引起细胞上受体表达消失、或考虑以引起细胞移动方向出错的方式递送化合物，则上述炎症性、变应性和自身免疫性疾病的治疗还可考虑使用趋化因子受体功能的促进剂。
因此本发明的化合物可用于治疗、预防、缓解或控制各种炎性和免疫调节性病症和疾病、变应性病况、特应性病况以及自身免疫性病变、或者降低其风险。在具体方案中，本发明涉及主题化合物用于治疗、预防、改善或控制自身免疫性疾病如类风湿性关节炎或者银屑病性关节炎、或者降低其风险的应用。
在另一方面，本发明可用于评价包括CCR-2的趋化因子受体的推定特异性激动剂或者拮抗剂。因此，本发明涉及这些化合物在制备调节趋化因子受体活性的化合物和进行所述化合物的筛选试验中的应用。例如，本发明的化合物可用于分离受体突变体，其是更强效化合物的优异筛选工具。而且，本发明的化合物可用于确立或者确定其它化合物与趋化因子受体的结合部位，如通过竞争性抑制。本发明的化合物还可用于评价包括CCR-2的趋化因子受体的推定特异性调节剂。如本领域所理解的那样，全面评价上述趋化因子受体的特异性激动剂和拮抗剂由于缺乏具有与这些受体高结合亲合力的非肽基(代谢抗性)化合物的可达性而受到阻碍。因此，本发明的化合物是可出售用于这些目的的商用产品。
本发明进一步涉及生产用于调节人和动物中趋化因子受体活性的药物的方法，包括将本发明的化合物与药学载体或者稀释剂混合。
本发明进一步涉及本发明的化合物在治疗、预防、改善或控制由逆转录病毒特别是疱疹病毒或者人类免疫缺陷病毒(HIV)引起的感染、或者降低其风险和后续病理学病况如AIDS的治疗或发作延迟中的应用。治疗AIDS或者预防或治疗由HIV引起的感染的定义包括但不限于治疗HIV感染的各种状态AIDS、ARC(AIDS相关性综合征)，有症状的和无症状的，和对HIV的实际或潜在的暴露。例如，本发明的化合物可用于治疗被怀疑过去曾经暴露在HIV之下后的HIV感染，例如通过输血、器官移植、体液交换、咬、偶然的针扎、或在手术过程中接触患者血液。
在本发明的另一方面，主题化合物可用在抑制趋化因子与靶细胞的趋化因子受体诸如CCR-2结合的方法中，该方法包括使靶细胞与一定量的有效抑制趋化因子与趋化因子受体结合的化合物接触。
上述方法中治疗的对象是包括希望调节趋化因子受体活性的哺乳动物例如人，无论是雄性的还是雌性的。本文使用的“调节”包括拮抗、激动、部分拮抗、逆向激动和/或部分激动。在本发明的一方面，调节是指拮抗趋化因子受体活性。术语“治疗有效量”是指由研究员、兽医、内科医生或者其它临床医师寻求的将引起组织、系统、动物或者人的生物或医学应答的主题化合物的量。
本文使用的术语“组合物”涵盖包括特定量的特定组分的产品，以及可直接或间接得自特定量的特定组分的组合的任何产品。“可药用的”是指必需与制剂中的其它组分是相容的并且对接受者无害的载体、稀释剂或者赋形剂。
术语“给用”或“给药”化合物可理解为是指对需要治疗的个体提供本发明的化合物。
本文使用的术语“治疗”既是指上述病况的治疗，也是指上述病况的预防或者预防性治疗。
因此，用于治疗、预防、改善或控制炎症性和免疫调节性病症和疾病，包括哮喘和变应性疾病，以及自身免疫性病变如类风湿性关节炎和动脉粥样硬化以及上述那些病变、或者降低其风险的调节趋化因子受体活性的联合治疗通过将CCR-2拮抗剂如本发明的化合物与其它已知用于这些用途的化合物的组合进行说明。
例如，在治疗、预防、改善或控制炎症或者降低其风险时，本发明的化合物可用于与以下药剂联合使用抗炎药或止痛药如鸦片剂激动剂、脂氧合酶抑制剂如5-脂氧合酶抑制剂、环加氧酶抑制剂如环加氧酶-2抑制剂、白细胞介素抑制剂如白细胞介素-1抑制剂、NMDA拮抗剂、一氧化一氮抑制剂或者一氧化一氮合成抑制剂、非甾体抗炎药、或细胞因子抑制性抗炎药，例如使用诸如以下的化合物对乙酰氨基酚、阿司匹林、可待因、embrel、芬太尼、布洛芬、吲哚美辛、酮咯酸、吗啡、萘普生、非那西丁、吡罗昔康、甾体类止痛药、舒芬太尼、苏林酸(sunlindac)、替尼达普等。类似地，本发明的化合物可与以下药剂给用解热镇痛剂；增效剂如咖啡因、H2-拮抗剂、西甲硅油、氢氧化铝或者氢氧化镁；解充血药如脱羟肾上腺素、苯丙醇胺、伪麻黄碱、羟甲唑啉、肾上腺素(ephinephrine)、萘甲唑林、赛洛唑啉、丙己君、或者左脱氧麻黄碱；止咳药如可待因、氢可酮、卡拉美芬、喷托维林、或者右美沙芬；利尿剂；和镇静或者或者非镇静抗组胺剂。
同样地，本发明的化合物可用于与其它可用于治疗/预防/抑制或者改善本发明化合物可用的疾病或病况的药物组合。这些其它药物可通过通常使用的途径或量与本发明的化合物同时或者顺序地给用。当本发明的化合物与一种或多种其它药物同时给用时，可使用除了本发明化合物之外还含有这些其它药物的药物组合物。因此，本发明的药物组合物包括那些除了本发明的化合物之外还包括一种或多种其它活性成分的组合物。
可与CCR2拮抗剂如本发明的CCR2拮抗剂化合物组合的、可以以相同的药物组合物形式给用或单独给用的其它活性成分的例子包括但不限于(a)VLA-4拮抗剂，例如在US 5,510,332，WO95/15973，WO96/01644，WO96/06108，WO96/20216，WO96/22966，WO96/31206，WO96/40781，WO97/03094，WO97/02289，WO98/42656，WO98/53814，WO98/53817，WO98/53818，WO98/54207，和WO98/58902中描述的；(b)甾族化合物如倍氯米松、甲泼尼龙、倍他米松、泼尼松、地塞米松和氢化可的松；(c)免疫抑制剂如环孢菌素、他克莫司、雷帕霉素和其它FK-506型免疫抑制剂；(d)抗组胺剂(H1-组胺拮抗剂)如溴代非尼拉敏、氯苯那敏、右氯苯那敏、曲普利啶、氯马斯汀、苯海拉明、二苯拉林、曲吡那敏、羟嗪、甲地嗪、异丙嗪、阿利马嗪、阿扎他定、赛庚啶、安他唑啉、非尼拉敏、美吡拉敏、阿司咪唑、特非那定、氯雷他定、地氯雷他定、西替利嗪、非索非那定、脱羰乙氧基氯雷他定等；(e)非甾体抗气喘药如β2-激动剂(特布他林、奥西那林、非诺特罗、异他林、沙丁胺醇、比托特罗和吡布特罗)、茶碱、色甘酸二钠、阿托品、异丙托溴铵、白三烯拮抗剂(扎鲁司特、孟鲁司特、普仑司特、伊拉司特、泊比司特、SKB-106，203)，白三烯生物合成抑制剂(齐留通、BAY-1005)；(f)非甾体抗炎药(NSAIDs)如丙酸衍生物(阿明洛芬、苯洛芬、布氯酸、卡洛芬、芬布芬、非诺洛芬、氟洛芬、氟比洛芬、布洛芬、吲哚洛芬、酮洛芬、咪洛芬、萘普生、丙嗪、吡洛芬、普拉洛芬、舒洛芬、噻洛芬酸和硫洛芬)，乙酸衍生物(吲哚美辛、阿西美辛、阿氯芬酸、环氯茚酸、双氯芬酸、芬氯酸、芬克洛酸、芬替酸、呋罗芬酸、异丁芬酸、伊索克酸、oxpinac、舒林酸、硫平酸、托美丁、齐多美辛和佐美酸)、芬那酸衍生物(氟芬那酸、甲氯芬那酸、甲芬那酸、尼氟酸和托芬那酸)、联苯羧酸衍生物(二氟尼柳和氟苯柳)、昔康类(伊索昔康、吡罗昔康、舒多昔康和替诺昔康)、水杨酸类(乙酰水杨酸、柳氮磺胺吡啶)和吡唑啉酮类(阿扎丙宗、bezpiperylon、非普拉宗、莫非布宗、羟布宗、保泰松)；(g)环加氧酶-2(COX-2)抑制剂；(h)IV型磷酸二酯酶(PDE-IV)抑制剂；(i)趋化因子受体特别是CCR-1、CCR-2、CCR-3、CXCR-3和CCR-5的其它拮抗剂；(j)胆固醇降低剂如HMG-CoA还原酶抑制剂(洛伐他汀、辛伐他汀和普伐他汀、氟伐他汀、阿托伐他汀、罗苏伐他汀、及其它他汀类)，多价螯合剂(考来烯胺和考来替泊)、胆固醇吸收抑制剂(依泽替米贝)、烟酸、非诺贝酸衍生物(吉非贝齐、安妥明、非诺贝特和苯扎贝特)和普罗布考；(k)抗糖尿病药物，如胰岛素、磺酰脲类、双胍(二甲双胍)、α-葡糖苷酶抑制剂(阿卡波糖)和格列酮类(曲格列酮和吡格列酮)；(1)干扰素β制剂(干扰素β-1α，干扰素β-1β)；(m)格拉默乙酸盐制剂；(n)CTLA4Ig的制剂；(o)羟氯喹的制剂；(p)Copaxone；(q)p38的抑制剂；(r)TNF抑制剂和多价螯合剂；和(s)其它化合物如5-氨基水杨酸及其前药、抗代谢药如硫唑嘌呤和6-巯基嘌呤和甲氨蝶呤和细胞毒性癌症化疗剂。
本发明化合物与第二活性成分的重量比可不同并根据各自成分的有效剂量而定。通常，可用各自的有效剂量。因此，例如，当本发明的化合物与NSAID组合时，本发明化合物与NSAID的重量比通常为约1000∶1到约1∶1000，或约200∶1到约1∶200。本发明的化合物与其它活性成分的组合通常也处在上述范围内，但是在所有情况下，应当使用每种活性成分的有效剂量。
在这种组合中，本发明的化合物与其它活性剂可分别或联合给用。另外，一种成分可在给药其它一种或多种药物之前、同时或之后给用。
本发明的化合物可通过口、非肠道(如肌肉内、腹膜内、静脉内、ICV、池内注射或输注、皮下注射、或者植入)、通过吸入喷雾、经鼻、阴道、直肠、舌下、或者局部给药途径给药，或者可单独或一起配制在适当的剂量单位制剂中，该剂量单位制剂含有常规的无毒的适合于各自给药途径的可药用载体、佐剂和媒介物。除了治疗恒温动物如大鼠、小鼠、马、牛、绵羊、狗、猫、猴子等等之外，本发明的化合物在人中的使用是有效的。
用于本发明化合物给药的药物组合物可方便地以剂量单元形式存在，并且可通过药学领域公知的任意方法制备。所有方法包括将活性成分与构成一种或多种助剂的载体结合的步骤。通常，药物组合物可通过使活性成分均一地和密切地与液体载体或细粉形式的固体载体或者两者结合，然后如有必要使产品成形为所需制剂而制备。活性主题化合物以足以对疾病的进程或病况产生预期效果的量被引入到药物组合物中。本文使用的术语“组合物”涵盖包括特定量的特定组分的产品，以及可直接或间接得自特定量的特定组分的组合的任何产品。
含有活性成分的药物组合物可为适合口服用途的剂型，如片剂、锭剂、菱形片，水性或油性悬浮液，可分散性粉剂或者颗粒剂，乳液、硬胶囊或软胶囊，或糖浆剂或者酏剂。预计用于口服用途的组合物可根据药物组合物生产领域公知的任何方法制备并且该种组合物可含有一种或多种选自甜味剂、调味剂、着色剂和防腐剂的助剂，以提供药学上美观和适口的制剂。片剂含有与适于生产片剂的无毒的可药用赋形剂混合的活性成分。这些赋形剂可为例如惰性的稀释剂，如碳酸钙、碳酸钠、乳糖、磷酸钙或者磷酸钠；造粒剂和崩解剂，如玉米淀粉或者海藻酸；粘合剂，如淀粉、明胶或者阿拉伯胶；和脱模剂，如硬脂酸镁、硬脂酸或者滑石。片剂可无包衣或可通过已知技术进行包衣，从而延迟在胃肠道内的崩解和吸收，并从而在较长时段内提供持续作用。例如，可使用诸如单硬脂酸甘油酯或者二硬脂酸甘油酯的延时材料。也可通过美国专利4,256,108；4,166,452；和4,265,874所述技术进行包衣形成用于控制释放的渗透性治疗片剂。
口服用制剂也可作为硬明胶胶囊形式存在，其中的活性成分与惰性固体稀释剂如碳酸钙、磷酸钙或者陶土混合；或者作为软明胶胶囊形式存在，其中活性成分与水或者油性介质如花生油、液状石蜡或者橄榄油混合。
水性悬浮液含有与适于生产水性悬浮液的赋形剂混合的活性物质。所述赋形剂为悬浮剂，如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、海藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、黄蓍树胶和阿拉伯树胶；分散剂或润湿剂可为天然存在的磷脂，例如卵磷脂，或者氧化烯与脂肪酸的缩合产物，如聚氧化乙烯硬脂酸酯，或者环氧乙烷与长链脂族醇的缩合产物，如十七亚乙基氧基鲸蜡醇，或环氧乙烷与得自脂肪酸与己糖醇的偏酯的缩合产物如聚氧化乙烯山梨醇单油酸酯，或环氧乙烷与得自脂肪酸与己糖醇酐的偏酯的缩合产物，例如聚乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯。水性悬浮液也可含有一种或多种防腐剂，例如对羟基苯甲酸乙酯或正丙酯、一种或多种着色剂、一种或多种调味剂和一种或多种甜味剂如蔗糖或者糖精。
油性悬浮液可通过将活性成分悬浮在植物油如花生油、橄榄油、芝麻油或者椰子油，或悬浮在矿物油如液状石蜡中制备。油性悬浮液可含有增稠剂例如蜂蜡、硬石蜡或鲸蜡醇。可加入如上述的甜味料，和调味剂以提供适口性的口服制剂。这些组合物可通过加入抗氧化剂如抗坏血酸进行保存。
适于通过加入水制备水性悬浮液的可分散性粉剂和颗粒剂提供与分散剂或润湿剂、悬浮剂和一种或多种防腐剂混合的活性成分。适当的分散剂或润湿剂和悬浮剂的例子如上所述。也可存在另外的赋形剂，例如甜味剂、调味剂和着色剂。
本发明的药物组合物也可为水包油乳液形式。油相可为植物油例如橄榄油或者花生油，或为矿物油例如液状石蜡，或者这些物质的混合物。适当的乳化剂可为天然存在的树胶类，如阿拉伯树胶或者黄蓍树胶，天然存在的磷脂例如大豆磷脂、卵磷脂，以及得自脂肪酸和己糖醇酐的酯或者偏酯，如单油酸脱水山梨醇酯，和所述偏酯与环氧乙烷的缩合产物如聚氧化乙烯单油酸脱水山梨醇酯。乳液还可含有甜味剂和调味剂。
糖浆剂和酏剂可与甜味剂一起进行配制，例如使用甘油、丙二醇、山梨醇或者蔗糖。这种制剂还可含有缓和剂、防腐剂和调味剂以及着色剂。
药物组合物可为无菌注射用水性或油性悬浮液形式。悬浮液可根据本领域已知的那样使用那些上述的适当的分散剂或润湿剂和悬浮剂进行配制。无菌注射用制剂还可为在无毒的非肠道可接受的稀释剂或者溶剂中的无菌注射溶液或悬浮液形式，如作为1，3-丁二醇中的溶液形式。在可使用的可接受的媒介物和溶剂中，特别是水、林格溶液和等渗氯化钠溶液。另外，通常使用无菌的非挥发油类作为溶剂或者悬浮介质。为此可使用任何的刺激性少的非挥发油，包括人造甘油一酸酯或者甘油二酸酯。另外，脂肪酸如油酸可用在注射制剂中。
本发明的化合物还可以直肠给用的栓剂形式给用。这些组合物可通过将药物与适当的在常温下为固体但是在直肠温度下为液体并从而在直肠中熔化以释放药物的无刺激性的赋形剂混合制备。所述物质为可可脂和聚乙二醇。
对于局部应用，可使用含有本发明的化合物的霜剂、膏剂、胶冻剂、溶液或者悬浮液等。(为了这一应用，局部施用将包括嗽口水和漱口剂。)本发明的药物组合物和方法另外包括本文提到的其它治疗活性化合物，它们通常用在上述病理学病况的治疗中。
在治疗、预防、改善或控制需要趋化因子受体调节的病况或者降低其风险时，适当的剂量水平通常为每天每千克患者体重为约0.001到500毫克，以单剂量或多剂量给用。在某些方案中剂量水平为每天约0.001到约400毫克/千克；或者每天约0.01到约300毫克/千克；或者每天约0.1到约250毫克/千克，或者每天约0.5到约100毫克/千克。适当的剂量水平可为每天约0.001到400毫克/千克，每天约0.01到250毫克/千克，每天约0.05到100毫克/千克，或者每天约0.1到50毫克/千克。在该范围内，剂量可为每天0.005到0.05，0.05到0.5，0.5到5，或者5到50毫克/千克。对于口服给药，组合物可以片剂形式提供，该片剂形式含有0.1到1000毫克活性成分，或者1.0到500，或者2.0到500、或者3.0到200、特别是0.1、1、5、10、15、20、25、30、50、75、100、125、150、175、200、250、300、400、500、600、750、800、900和1000毫克活性成分，用于待治疗患者的剂量根据症状进行调整。化合物可根据每天1到4次，或每天1或2次的给药方案给用。
然而，可以理解的是，对于任何特定患者的特定剂量水平和给药频率可以是不同的并且根据包括以下的各种因素而定使用的具体化合物的活性，该化合物的代谢性稳定性和作用时间，年龄，体重，一般健康状况，性别，膳食，给药方式和时间，排泄速率，药物组合，具体病况的严重程度，和经历治疗的对象。
图解在以下图解和实施例中说明用于制备本发明的化合物的几种方法。起始原料为通过已知方法制备，或如本文所述制备。
在图解1A-1D中详述用于制备处在本发明范围内的带有1，1，3-三取代的环戊烷骨架的化合物(I)的主要路线之一。
图解1A 根据这个图解，将市售的纯手性内酰胺1-1氢化并将饱和的1-2在适当的催化剂如N，N-二甲氨基吡啶的存在下用BOC2O处理。然后酰胺键在适当的醇R17-OH的存在下进行碱催化裂解得到相应的酯1-4。除去BOC-保护基，优选使用在非质子溶剂如二氧杂环己烷中的酸例如HCl，得到盐形式的胺1-5。当将胺与二苯甲酮亚胺混合时，形成相应的席夫碱1-6，其可以通过简单的过滤以除去氯化铵而得到纯形式。
使用强碱例如LDA从酯1-6形成的烯醇化物可以与烷基二硫化物R16-S-S-R16反应，图解2B中示出中间体1-7。这些反应产生相应的顺式-(1-7a)和反式-(1-7b-未示出)的非对映异构体，其可以通过适当的色谱法分离。在大多数情况中，可以成功地进行在减活化硅胶上的正相急骤色谱法。
图解1B 然后将期望的顺式非对映异构体1-7a和1-8a用酸例如HCl处理，以帮助亚胺基的水解，并且将得到的氨基适当地保护，如保护为叔丁氧羰基酰胺的形式(图解1C)。然后将存在于中间体1-10a中的酯基裂解。使用的方法取决于酯的性质例如，苄基酯可通过氢解裂解，叔丁基酯在非质子酸性条件下裂解，烷基酯在酸性或碱性条件下水解。然后在DCM中使用适当的偶联剂如EDC或PyBrop使形成的酸与适当的胺(R19R18NH)偶联。然后用酸除去BOC保护基。胺1-13a与适当的四氢吡喃酮进行还原烷基化，得到中间体硫化物，其可以使用适当的氧化剂被氧化为砜(I)或亚砜趋化因子调节剂。
图解1C 作为替代的途径，可以如图解ID所示直接将中间体1-12a转化为亚砜1-15a或砜1-14a。除去BOC保护基并用四氢吡喃酮将得到的胺进行还原烷基化得到趋化因子调节剂(I)。
图解ID 在一些情况中，可以改变上述反应图解的进行顺序，以促进反应或避免不需要的反应产物。
以下是用于制备用于以下实施例的化合物或制备可以代替不可购得的用于以下实施例的化合物的化合物的代表性的方法。
实施例中间体1 步骤A 向4-三氟甲基苯基乙腈(40g，220mmol)在2N NH3/MeOH(400mL)中的溶液中加入阮内镍(～4.0g)。将反应混合物置于par-振荡器中并在50lb压力下摇动过夜。将溶液过滤通过硅藻土并在真空中浓缩，得到期望的胺(38g，95％)。ESI-MS，C9H10F3N，计算值189；实测值190(M+H)。
步骤B 将上述胺(步骤A，中间体1)(38g，200mmol)和DIEA(52mL，300mmol)溶解于DCM(300mL)中。将溶液冷却到0℃，然后缓慢加入TFAA(36mL，250mmol)。将反应混合物在冰浴中搅拌另外的10分钟，然后使其回温到室温。反应在30分钟内完成，将其倾倒在水中并用DCM(2次)提取。有机层用1N HCl和饱和NaCl溶液洗涤，用MgSO4干燥并在真空中浓缩，得到所需的酰胺(56g，98％)。ESI-MS，C11H9F6NO，计算值285；实测值286(M+H)。
步骤C 向酰胺(步骤B，中间体1)(73g，256mmol)和多聚甲醛(11.5g，385mmol)的混合物中加入200mL的乙酸。将反应混合物在室温下搅拌5分钟，然后加入浓硫酸(200mL)。观察到放热反应。在30分钟之后，TLC显示完全转化。将混合物冷却到室温然后倾倒在冰水(2000mL)上并用EtOAc提取(3×500mL)。合并的有机层用水(2次)、饱和NaHCO3和盐水洗涤，用MgSO4干燥，过滤，蒸发并在真空中干燥。得到所需的酰胺(72.7g，96％)，为浅黄色固体。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.22(q，J＝11.67Hz，8.46Hz，1H)，7.11(t，J＝10.53Hz，1H)，7.03(d，J＝11.67Hz，1H)，4.79(d，J＝23.57Hz，2H)，3.91(t，J＝6.18Hz，1H)，3.87(t，J＝5.72 Hz，1H)，2.97(m，2H).
ESI-MS，C12H9F6NO，计算值297；实测值298(M+H)。
步骤D
将酰胺(步骤C，中间体1)(50g，168mmol)溶解于EtOH(200mL)中，然后加入固体K2CO3(50g，360mmol)和H2O(50mL)。将反应混合物回流15小时然后真空浓缩。将浓缩物用H2O(100mL)稀释并用DCM(5次)提取。合并的有机层用MgSO4干燥，过滤，浓缩并在FC(10％[水溶液NH4OH/MeOH1/9]/DCM)上纯化，得到胺(步骤D，中间体1)(30g，89％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.11(d，J＝8.4Hz，1H)，7.01(bd，J＝8.4Hz，1H)，6.89(s，1H)，4.03(s，2H)，3.15(t，J＝6.1Hz，2H)，2.80(t，J＝5.6 HZ，2H)，1.80(s，1H).
ESI-MS，C10H10F3N，计算值201；实测值202(M+H)。
中间体2 中间体2根据J.Am.Chem.Soc，1991，113，2079-2089中所述的方法制备。
实施例1 步骤A
在室温下将含(1S)-(+)-2-氮杂双环[2.2.1]庚-5-烯-3-酮(10.3g，94.4mmol)的EtOAc(200mL)与10％Pd/C(0.5gm)的混合物在氢气囊下氢化。在24小时之后，将反应混合物过滤并蒸发，留下10.4g(100％)的产物，将其包含在250ml甲醇和HCl(12M，6ml)中。将得到的混合物在室温下搅拌，直到反应完成(72小时)。蒸发甲醇，随后在高真空下干燥，得到标题化合物，为灰白色固体(16.0g，96％)。1HNMR(D2O，500MHz)3.70(s，3H)，3.01(m，1H)，2.38(m，1H)，2.16-1.73(m，6H)。
步骤B 在室温下向得自步骤A的中间体(10.2g，56.8mmol)在无水二氯甲烷(200mL)中的悬浮液中加入二苯酮亚胺(10.2g，56.8mmol)并将得到的混合物搅拌24小时。将反应混合物过滤并将滤液蒸发，留下黄色油状物，将其与乙醚(100mL)研磨，过滤并蒸发。重复这个操作两次，以保证产物不含氯化铵杂质。将得到的油状物在真空下彻底地干燥，得到标题化合物(18.03g，＞100％)，其不须进一步的纯化。
1H NMR(CDCl3，500MHz)7.5-7.18(m，10H)，3.75(m，1H)，3.7(s，3H)，2.78(m，1H)，2.26-1.71(m，6H).
步骤C 向火焰干燥的500mL圆底烧瓶中加入无水THF(50mL)。将溶液冷却到-78℃，然后顺序地加入iPr2N(2.63mL，18.8mmol)、2.5MnBuLi(7.5mL，18.8mmol)和席夫碱(步骤B)(5g，16.3mmol)的THF(20mL)溶液。将反应混合物在-78℃搅拌30分钟，然后加入甲基二硫化物(4.4mL，49mmol)。在将反应搅拌另外的一小时之后，将混合物用饱和NH4Cl淬灭，用乙醚提取，用MgSO4干燥并浓缩。粗的产物通过MPLC(10/90 EtOAc/己烷)纯化，得到标题化合物(3.98g，69.0％)。LC-MSC21H24NO2S[M+H+]计算值354.14；实测值354.25。
步骤D 将烷基化的席夫碱(步骤C，实施例1)(3.98g，11.3mmol)溶解于THF(35mL)中然后加入2N HCl(35mL)。将反应混合物搅拌并通过TLC监控。在反应完成后，将混合物真空浓缩以除去THF。用饱和Na2CO3水溶液将水层碱化到pH9.0，并用DCM提取。有机层用MgSO4干燥并加入Boc-酐(3.3g，15mmol)。将反应在室温下搅拌过夜，然后用DCM提取，用MgSO4干燥，并在真空中浓缩。粗产物通过MPLC(35/65，EtOAc/己烷)纯化，得到标题化合物(2.10g，64.4％)。LC-MSC13H24NO4S[M+H+]，计算值290.13；实测值190.1(-Boc)。
步骤E 将酯(步骤D，实施例1)(2.10g，7.27mmol)溶解于MeOH(10mL)和THF(10mL)中然后加入LiOH(1.5g，36.3mmol)的H2O(10mL)溶液。将混合物在60℃加热过夜，然后真空浓缩以除去有机溶剂。水层用己烷洗涤，酸化到pH7-4，并用DCM提取(3次)。将合并的有机层用无水MgSO4干燥并浓缩到干燥。粗产物直接用于下一步。
步骤F
将酸(步骤E，实施例1)(500mg，1.82mmol)、中间体1(366mg，1.82mmol)，和HOAT(250mg，1.82mmol)溶解于DCM(20mL)中，然后加入EDC(525mg，2.73mmol)。将得到的混合物搅拌过夜，然后用饱和NaHCO3、H2O(2次)和盐水洗涤，用MgSO4干燥，并在真空中浓缩。粗产物通过制备板纯化(30/70，EtOAc/己烷)，得到标题化合物(742mg，89.2％)。LC-MSC22H30F3N2O3S[M+H+]计算值459.19；实测值403.15(-叔丁基)。
步骤G 将中间体(步骤F，实施例1)(200mg，0.44mmol)溶解于iPrOH(5mL)中，然后加入过一硫酸氢钾(oxone)(540mg，0.88mmol)的H2O(5mL)溶液。将混合物在室温下搅拌2小时，然后浓缩到干燥。将浓缩物用乙醚稀释，用H2O洗涤(3次)，用无水MgSO4干燥并真空浓缩，得到标题化合物(212mg，99.1％)。LC-MSC22H30F3N2O5S，[M+H+]计算值491.17；实测值391.15(-Boc基团)。
步骤H 将得自步骤G的产物(212mg)溶解于含4M HCl的二氧杂环己烷中并在室温下搅拌2小时，然后在减压下浓缩，得到183mg的所需的盐酸盐。将这个盐(100mg，0.356mmol)与DCM中的DIEA(70μL，0.384mmol)、四氢-4H-吡喃-4-酮(52μL，0.513mmol)、4分子筛和三乙酰氧基硼氢化钠(270mg，1.28mmol)合并。将得到的反应混合物搅拌几天，然后用饱和碳酸氢钠水溶液(3次)洗涤。将合并的水层用DCM反萃取(4次)并将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤，并在减压下浓缩。将两个异构体在制备板上进行拆分(4/95.6/0.4，MeOH/DCM/NH4OH)。LC-MSC22H30F3N2O4S[M+H+]计算值475.18；实测值475.15。
实施例2 步骤A 以上的酰胺以类似于实施例1步骤F中所述的方法制备，不同之处在于将中间体1替换为3，5-二(三氟甲基)苄胺。LC-MSC21H27N2O3S[M+H+]计算值501.16；实测值445.15(缺失叔丁基)。
步骤B 将硫化物(其制备在实施例1步骤A中描述，200mg，0.4mmol)溶解于异丙醇(7mL)中，然后加入过一硫酸氢钾(500mg，0.8mmol)的H2O(7mL)溶液。将混合物在室温下搅拌2小时，然后浓缩到干燥。将浓缩物用乙醚稀释，用H2O洗涤(3次)，用无水MgSO4干燥并真空浓缩，得到207mg(97％)的所需的化合物。LC-MSC21H27F6N2O5S[M+H+]，计算值533.15；实测值433.15(-BOC基团)。
步骤C 这个化合物从前述的砜开始制备，使用在实施例1步骤H中详述的方法，使用得自前述步骤的产物。通过制备TLC将顺式-和反式-异构体分离，较低极性的化合物为顺式异构体。LC-MSC21H27F6N2O4S[M+H+]，计算值517.15；实测值517.15。
实施例3 这个化合物如实施例2中详述的、使用中间体2代替四氢-4H-吡喃-4-酮制备。通过制备TLC分离两对异构体。(MeOHDCMNH4OH/396.70.3)。LC-MSC22H29F6N2O4S[M+H+]计算值531.17；实测值531.25。
实施例4
将实施例3中所述的产物(较大极性的异构体，30mg，0.058mmol)、甲醛(37重量％，在H2O中，15μL，0.17mmol)、TFA、NaCNBH3(20mg，0.29mmol)和MeOH(5mL)的混合物在室温下搅拌过夜，然后真空浓缩并通过制备TLC纯化。(MeOH∶DCM∶NH4OH/4∶95.6∶0.4)，得到实施例4(11mg，35.7％)。LC-MSC23H31F6N2O4S[M+H+]计算值545.18；实测值545.2。
实施例5 这个化合物如实施例1和2中所述制备，不同之处在于在实施例1，步骤C中将甲基二硫化物替换为异丙基二硫化物。LC-MSC23H31F6N2O4S[M+H]+计算值545.18；实测值545.2。
尽管已经参考某些本发明的具体方案描述和举例说明了本发明，本领域的技术人员将会理解，可进行方法和方案的各种修改、变化、改进、置换、删除或补充而不脱离本发明的实质和范围。例如，由于在使用上述本发明化合物治疗任何适应症的哺乳动物的响应性变化而使除了本文以上所述的特定剂量之外的有效剂量是可以应用的。同样地，观察到的特异性药理学应答可根据并取决于选择的特定的活性化合物或是否存在药物载体，以及使用的制剂类型和给药方式而定，并且结果中的这些预期的改变或差异被认为与本发明的目的和实践一致。因此，要指出，本发明通过随后的权利要求范围进行定义，并且将这些权利要求合理广泛地理解。
权利要求
1.式I的化合物 其中Y选自-O-、-NR12-、-S-、-SO-、-SO2-和-CR12R12-、-NSO2R14-、-NCOR13-、-CR12COR11-、-CR12OCOR13-和-CO-；Z为C或N；R1选自(a)-SO2R14，(b)-C0-3烷基-S(O)-R14，(c)-C1-6烷基-NR12R12，(d)-N(CH3)-COR13，(e)-N(CH3)-SO2R14，和(f)-SO2NR12R12；R2选自(a)氢，(b)羟基，(c)卤代，(d)未被取代的或被1-6个独立地选自氟和羟基的取代基取代的C1-3烷基，(e)-NR12R12，(f)-COR11，(g)-CONR12R12，(h)-NR12COR13，(i)-OCONR12R12，(j)-NR12CONR12R12；(k)-杂环，(l)-CN，(m)-NR12-SO2-NR12R12，(n)-NR12-SO2-R12，(o)-SO2-NR12R12，和(p)＝O；R3选自(a)氢，(b)未被取代的或被1-3个氟取代的C1-3烷基，(c)未被取代的或被1-3个氟取代的-O-C1-3烷基，(d)羟基，(e)氯代，(f)氟代，(g)溴代，(h)苯基，(i)杂环，(j)当Z为N时，R3为O，和(k)当Z为N时，R3为不存在；R4选自(a)氢，(b)未被取代的或被1-3个氟取代的C1-3烷基，(c)未被取代的或被1-3个氟取代的-O-C1-3烷基，(d)羟基，(e)氯代，(f)氟代，(g)溴代，(h)苯基，和(i)杂环；R5选自(a)未被取代的或被1-6个氟、羟基、或其两者取代的C1-6烷基，(b)未被取代的或被1-6个氟取代的-O-C1-6烷基，(c)未被取代的或被1-6个氟取代的-CO-C1-6烷基，(d)未被取代的或被1-6个氟取代的-S-C1-6烷基，(e)未被取代的或被一个或多个取代基取代的-吡啶基，取代基独立地选自卤代、三氟甲基、C1-4烷基和COR11，(f)氟代，(g)氯代，(h)溴代，(i)-C4-6环烷基，(j)-O-C4-6环烷基，(k)未被取代的或被一个或多个取代基取代的苯基，取代基独立地选自卤代、三氟甲基、C1-4烷基和COR11，(l)未被取代的或被一个或多个取代基取代的-O-苯基，取代基独立地选自卤代、三氟甲基、C1-4烷基和COR11，(m)未被取代的或被1-6个氟取代的-C3-6环烷基，(n)未被取代的或被1-6个氟取代的-O-C3-6环烷基，(o)-杂环，(p)-CN，和(q)-COR11；R6选自(a)氢，(b)未被取代的或被1-3个氟取代的C1-3烷基，(c)未被取代的或被1-3个氟取代的-O-C1-3烷基，(d)羟基，(e)氯代，(f)氟代，(g)溴代，(h)苯基，和(i)杂环；R7选自氢和未被取代的或被1-3个取代基取代的C1-6烷基，取代基独立地选自卤代、羟基、-CO2H、-CO2C1-6烷基和-O-C1-3烷基；R8选自(a)氢，(b)未被取代的或被1-6个取代基取代的C1-6烷基，取代基独立地选自氟代、C1-3烷氧基、羟基和-COR11，(c)氟代，(d)未被取代的或被1-3个氟取代的-O-C1-3烷基，(e)C3-6环烷基，(f)-O-C3-6环烷基，(g)羟基，(h)-COR11，和(i)-OCOR13，或者R7和R8一起为C2-4烷基或C0-2烷基-O-C1-3烷基，形成5-7元环；R9选自(a)氢，(b)未被取代的或被1-6个取代基取代的C1-6烷基，取代基独立地选自氟代、C1-3烷氧基、羟基、-COR11，(c)COR11，(d)羟基，和(e)未被取代的或被1-6个取代基取代的-O-C1-6烷基，取代基独立地选自氟、C1-3烷氧基、羟基、-COR11，或者R8和R9一起为C1-4烷基或C0-3烷基-O-C0-3烷基、形成3-6元环；R10选自(a)氢，和(b)未被取代的或被1-6个氟取代的C1-6烷基，(c)氟代，(d)-O-C3-6环烷基，和(e)未被取代的或被1-6个氟取代的-O-C1-3烷基，或者R8和R10一起为C2-3烷基，形成5-6元环，其中所述C2-3烷基为未被取代的或被1-3个取代基取代，取代基独立地选自卤代、羟基、-COR11、C1-3烷基和C1-3烷氧基；或者R8和R10一起为C1-2烷基-O-C1-2烷基，形成6-8元环，其中所述C1-2烷基-O-C1-2烷基为未被取代的或被1-3个取代基取代，取代基独立地选自卤代、羟基、-COR11、C1-3烷基和C1-3烷氧基；或者R8和R10一起为-O-C1-2烷基-O-，形成6-7元环，其中所述-O-C1-2烷基-O-为未被取代的或被1-3个取代基取代，取代基独立地选自卤代、羟基、-COR11、C1-3烷基和C1-3烷氧基；R11独立地选自羟基、氢、C1-6烷基、-O-C1-6烷基、苄基、苯基和C3-6环烷基，其中所述烷基、苯基、苄基和环烷基为未被取代的或被1-3个取代基取代，取代基独立地选自卤代、羟基、C1-3烷基、C1-3烷氧基、-CO2H、-CO2-C1-6烷基和三氟甲基；R12独立地选自氢、C1-6烷基、苄基、苯基和C3-6环烷基，其中所述烷基、苯基、苄基和环烷基为未被取代的或被1-3个取代基取代，取代基独立地选自卤代、羟基、C1-3烷基、C1-3烷氧基、-CO2H、-CO2-C1-6烷基和三氟甲基；R13独立地选自氢、C1-6烷基、-O-C1-6烷基、苄基、苯基和C3-6环烷基，其中所述烷基、苯基、苄基和环烷基为未被取代的或被1-3个取代基取代，取代基独立地选自卤代、羟基、C1-3烷基、C1-3烷氧基、-CO2H、-CO2-C1-6烷基和三氟甲基；R14独立地选自羟基、C1-6烷基、-O-C1-6烷基、苄基、苯基和C3-6环烷基，其中所述烷基、苯基、苄基和环烷基为未被取代的或被1-3个取代基取代，取代基独立地选自卤代、羟基、C1-3烷基、C1-3烷氧基、-CO2H、-CO2-C1-6烷基和三氟甲基；R15和R16各自为H，或R15和R16一起为-CH2CH(R2)-，形成稠环；n为0、1或2；虚线表示非必要的单键；及其可药用盐及其各自的非对映异构体。
2.式Ia表示的权利要求1的化合物 及其可药用盐及其各自的非对映异构体。
3.式Ib表示的权利要求1的化合物 及其可药用盐及其各自的非对映异构体。
4.式Ic表示的权利要求1的化合物 及其可药用盐及其各自的非对映异构体。
5.式Id表示的权利要求1的化合物 及其可药用盐及其各自的非对映异构体。
6.权利要求1的化合物，其中当Z为C时，R3为氢、氟代或三氟甲基，且当Z为N时，R3为不存在。
7.权利要求1的化合物，其中Y为-CH2-或-O-。
8.权利要求1的化合物，其中R1选自-SO2CH3、-SO2NH2、-SOCH3和-SO2NHCH3。
9.权利要求1的化合物，其中R5选自被1-6个氟取代的C1-6烷基、被1-6个氟取代的-O-C1-6烷基、氯代、溴代和苯基。
10.权利要求1的化合物，其中R8选自氢、未被取代的或被1-6个氟取代的C1-3烷基、-O-C1-3烷基、氟代和羟基。
11.选自以下的化合物
及其可药用盐及其各自的非对映异构体。
12.一种药用组合物，其包括惰性载体和权利要求1的化合物。
13.权利要求1的化合物在制备可用于治疗炎症性和免疫调节性病症或疾病的药物中的应用。
14.权利要求13的应用，其中所述病症或疾病为类风湿性关节炎。
全文摘要
本发明公开了式I的化合物(其中n、R
文档编号A61K31/47GK1972913SQ200580013054
公开日2007年5月30日 申请日期2005年4月22日 优先权日2004年4月26日
发明者杨立虎, S·G·米尔斯, R·焦 申请人:默克公司
背景技术：
趋化因子是具有强力趋化活性的小型(70-120个氨基酸)促炎细胞因子家族。趋化因子是由各种细胞释放的吸引各种细胞如单核细胞、巨噬细胞、T细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞和嗜中性粒细胞到炎症部位的趋化细胞因子(综述参见Schall，Cytokine，3，165-183(1991)和Murphy，Rev.Immun.，12，593-633(1994))。这些分子最初通过四个保守半胱氨酸定义并基于第一半胱氨酸对的排列分为两个亚家族。在CXC-趋化因子家族中，该家族包括IL-8、GROα、NAP-2和IP-10，这两个半胱氨酸被单个氨基酸分开，而在CC-趋化因子家族中，该家族包括RANTES、MCP-1、MCP-2、MCP-3、MIP-1α、MIP-1β和嗜酸性粒细胞活化趋化因子(eotaxin)，这两个残基是相邻的。
α-趋化因子如白细胞介素-8(IL-8)、嗜中性粒细胞活化蛋白-2(NAP-2)和黑素瘤生长刺激活性蛋白(MGSA)主要对嗜中性粒细胞具有趋化性，而β-趋化因子如RANTES、MIP-1α、MIP-1β、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、MCP-2、MCP-3和嗜酸性粒细胞活化趋化因子对巨噬细胞、单核细胞、T细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞具有趋化性(Deng等，Nature，381，661-666(1996))。
趋化因子由各种细胞类型分泌并与白细胞和其它细胞上存在的特异性G蛋白偶联受体(GPCRs)结合(综述参见Horuk，Trends Pharm.Sci.，15，159-165(1994))。这些趋化因子受体形成GPCRs的亚家族，其目前由15个特征化成员和许多孤儿受体构成。与混栖趋化受体如C5a、fMLP、PAF、和LTB4不同，趋化因子受体在白细胞亚群上更具选择性地被表达。因此，特异性趋化因子的产生提供了募集特定白细胞亚群的机制。
与它们的同源配体结合时，趋化因子受体传导胞内信号通过结合的三聚体G蛋白进行，引起胞内钙浓度迅速增加。至少有7种结合或应答β-趋化因子的人趋化因子受体，其具有以下特征形式CCR-1(或″CKR-1″或″CC-CKR-1″)[MIP-1α，MIP-1β，MCP-3，RANTES](Ben-Barruch等，J.Biol. Chem.，270，22123-22128(1995)；Beote等，Cell，72，415-425(1993))；CCR-2A和CCR-2B(或″CKR-2A″/″CKR-2A″或″CC-CKR-2A″/″CC-CKR-2A″)[MCP-1，MCP-2，MCP-3，MCP-4]；CCR-3(或″CKR-3″或″CC-CKR-3″)[嗜酸性粒细胞活化趋化因子、嗜酸性粒细胞活化趋化因子2、RANTES、MCP-2、MCP-3](Rollins等，Blood，90，908-928(1997))；CCR-4(或″CKR-4″或″CC-CKR-4″)[MIP-1α RANTES，MCP-1](Rollins等，Blood，90，908-928(1997))；CCR-5(或″CKR-5″或″CC-CKR-5″)[MIP-1αRANTES、MIP-1β](Sanson等，Biochemistry，35，3362-3367(1996))；和Duffy blood-group抗原[RANTES，MCP-1](Chaudhun等，J.Biol. Chem.，269，7835-7838(1994))。β-趋化因子特别地包括嗜酸性粒细胞活化趋化因子、MIP(″巨噬细胞炎性蛋白)、MCP(″单核细胞趋化蛋白″)和RANTES(″活化调节型，正常的T表达和分泌″)。
趋化因子受体如CCR-1、CCR-2、CCR-2A、CCR-2B、CCR-3、CCR-4、CCR-5、CXCR-3、CXCR-4已经暗示出是炎性和免疫调节性病症和疾病的重要递质，所述病症和疾病包括哮喘、鼻炎和变应性疾病，以及诸如类风湿性关节炎和动脉粥样硬化的自身免疫性病变。在CCR-5基因中缺失32-碱基对的纯合人似乎对类风湿性关节炎较不敏感(Gomez等，Arthritis & Rheumatism，42，989-992(1999))。Kita，H.等，J.Exp.Med.183，2421-2426(1996)提供了嗜酸性粒细胞在变应性炎症中的作用的评论。Lustger，A.D.，New England J.Med.，338(7)，426-445(1998)提供了趋化因子在变应性炎症中的作用的一般综述。
趋化因子亚群是单核细胞和巨噬细胞的有力化学引诱物。这其中得到最充分表征的是MCP-1(单核细胞趋化蛋白-1)，其初级受体为CCR2。MCP-1在各种物种(包括啮齿动物和人)中在各种细胞类型中响应炎症性刺激而产生，并且刺激单核细胞和淋巴细胞亚群中的趋化性。特别地，MCP-1的产生与单核细胞和巨噬细胞在炎症性部位浸润有关。在小鼠中通过同源重组剔除MCP-1或者CCR2可导致响应巯基醋酸酯注射剂和单核细胞增生利斯特氏菌(Listeriamonocytogenes)感染的单核细胞募集的显著变弱(Lu等，J.Exp.Med.，187，601-608(1998)；Kurihara等，J.Exp.Med.，186，1757-1762(1997)；Boring等，J.Clin.Invest.，100，2552-2561(1997)；Kuziel等，Proc.Natl.Acad.Sci.，94，12053-12058(1997))。而且，这些动物表明单核细胞向由血吸虫或者分枝杆菌抗原注射诱导的肉芽肿病灶中的浸润减少(Boring等，J.Clin.Invest.，100，2552-2561(1997)；Warmington等，Am J.Path.，154，1407-1416(1999))。这些数据暗示了MCP-1诱导的CCR2活化在单核细胞向炎症部位募集过程中是举足轻重的，并且拮抗这一活性将对免疫应答产生足够的抑制，从而在免疫炎性和自身免疫性疾病中产生治疗益处。
因此，调节趋化因子受体如CCR-2受体的药剂在所述病症和疾病中将是有用的。
另外，单核细胞向血管壁内炎性病灶的募集是致动脉粥样斑块形成的发病机理的主要因素。MCP-1由内皮细胞和内膜平滑肌细胞在高胆固醇血症条件下在血管壁受到损伤之后产生和分泌。募集到损伤部位的单核细胞渗入血管壁并响应释放的MCP-1分化为泡沫细胞。个别小组目前已经用实验说明在回交于保持多脂饮食的APO-E-/-、LDL-R-/-或Apo B转基因小鼠的MCP-1-/-或CCR2-/-小鼠中的主动脉病灶大小、巨噬细胞含量和坏死变弱(Boring等，Nature，394，894-897(1998)；Gosling等，J.Clin.Invest.，103，773-778(1999))。因此，CCR2拮抗剂可通过削弱动脉壁内的单核细胞募集和分化而抑制动脉粥样硬化病灶形成和病理学进展。
发明内容
本发明进一步涉及式I的化合物 (其中n、R1、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R15、R16、Y和Z如本文中定义的)，其为趋化因子受体活性调节剂并可用于预防或治疗某些炎症性和免疫调节性病症和疾病、变应性疾病、特应性病况(包括过敏性鼻炎、皮炎、结膜炎和哮喘)，以及自身免疫性病变如类风湿性关节炎和动脉粥样硬化。本发明还涉及包括这些化合物的药用组合物，和这些化合物和组合物在预防或治疗其中牵涉趋化因子受体的所述疾病中的应用。
发明的详细说明本发明涉及式I的化合物 其中Y选自-O-、-NR12-、-S-、-SO-、-SO2-和-CR12R12-、-NSO2R14-、-NCOR13-、-CR12COR11-、-CR12OCOR13-和-CO-；Z为C或N；R1选自(a)-SO2R14，(b)-C0-3烷基-S(O)-R14，(c)-C1-6烷基-NR12R12，(d)-N(CH3)-COR13，(e)-N(CH3)-SO2R14，和(f)-SO2NR12R12；R2选自(a)氢，(b)羟基，(c)卤代，
(d)未被取代的或被1-6个独立地选自氟和羟基的取代基取代的C1-3烷基，(e)-NR12R12，(f)-COR11，(g)-CONR12R12，(h)-NR12COR13，(i)-OCONR12R12，(j)-NR12CONR12R12；(k)-杂环，(1)-CN，(m)-NR12-SO2-NR12R12，(n)-NR12-SO2-R12，(o)-SO2-NR12R12，和(p)＝O，当R2通过双键连接于环时；R3选自(a)氢，(b)未被取代的或被1-3个氟取代的C1-3烷基，(c)未被取代的或被1-3个氟取代的-O-C1-3烷基，(d)羟基，(e)氯代，(f)氟代，(g)溴代，(h)苯基，(0杂环，G)当Z为N时，R3为O，和(k)当Z为N时，R3为不存在；R4选自(a)氢，(b)未被取代的或被1-3个氟取代的C1-3烷基，(c)未被取代的或被1-3个氟取代的-O-C1-3烷基，(d)羟基，(e)氯代，
(f)氟代，(g)溴代，(h)苯基，和(i)杂环；R5选自(a)未被取代的或被1-6个氟、羟基、或其两者取代的C1-6烷基，(b)未被取代的或被1-6个氟取代的-O-C1-6烷基，(c)未被取代的或被1-6个氟取代的-CO-C1-6烷基，(d)未被取代的或被1-6个氟取代的-S-C1-6烷基，(e)未被取代的或被一个或多个取代基取代的-吡啶基，取代基独立地选自卤代、三氟甲基、C1-4烷基和COR11，(f)氟代，(g)氯代，(h)溴代，(i)-C4-6环烷基，(j)-O-C4-6环烷基，(k)未被取代的或被一个或多个取代基取代的苯基，取代基独立地选自卤代、三氟甲基、C1-4烷基和COR11，(1)未被取代的或被一个或多个取代基取代的-O-苯基，取代基独立地选自卤代、三氟甲基、C1-4烷基和COR11，(m)未被取代的或被1-6个氟取代的-C3-6环烷基，(n)未被取代的或被1-6个氟取代的-O-C3-6环烷基，(o)-杂环，(p)-CN，和(q)-COR11；R6选自(a)氢，(b)未被取代的或被1-3个氟取代的C1-3烷基，(c)未被取代的或被1-3个氟取代的-O-C1-3烷基，(d)羟基，(e)氯代，(f)氟代，
(g)溴代，(h)苯基，和(i)杂环；R7选自氢和未被取代的或被1-3个取代基取代的C1-6烷基，取代基独立地选自卤代、羟基、-CO2H、-CO2C1-6烷基和-O-C1-3烷基；R8选自(a)氢，(b)未被取代的或被1-6个取代基取代的C1-6烷基，取代基独立地选自氟代、C1-3烷氧基、羟基和-COR11，(c)氟代，(d)未被取代的或被1-3个氟取代的-O-C1-3烷基，(e)C3-6环烷基，(f)-O-C3-6环烷基，(g)羟基，(h)-COR11，和(i)-OCOR13，或者R7和R8一起为C2-4烷基或C0-2烷基-O-C1-3烷基，形成5-7元环；R9选自(a)氢，(b)未被取代的或被1-6个取代基取代的C1-6烷基，取代基独立地选自氟代、C1-3烷氧基、羟基、-COR11，(c)COR11，(d)羟基，和(e)未被取代的或被1-6个取代基取代的-O-C1-6烷基，取代基独立地选自氟、C1-3烷氧基、羟基、-COR11，或者R8和R9一起为C1-4烷基或C0-3烷基-O-C0-3烷基、形成3-6元环；R10选自(a)氢，和(b)未被取代的或被1-6个氟取代的C1-6烷基，(c)氟代，
(d)-O-C3-6环烷基，和(e)未被取代的或被1-6个氟取代的-O-C1-3烷基，或者R8和R10一起为C2-3烷基，形成5-6元环，其中所述C2-3烷基为未被取代的或被1-3个取代基取代，取代基独立地选自卤代、羟基、-COR11、C1-3烷基和C1-3烷氧基；或者R8和R10一起为C1-2烷基-O-C1-2烷基，形成6-8元环，其中所述C1-2烷基-O-C1-2烷基为未被取代的或被1-3个取代基取代，取代基独立地选自卤代、羟基、-COR11、C1-3烷基和C1-3烷氧基；或者R8和R10一起为-O-C1-2烷基-O-，形成6-7元环，其中所述-O-C1-2烷基-O-为未被取代的或被1-3个取代基取代，取代基独立地选自卤代、羟基、-COR11、C1-3烷基和C1-3烷氧基；R11独立地选自羟基、氢、C1-6烷基、-O-C1-6烷基、苄基、苯基和C3-6环烷基，其中所述烷基、苯基、苄基和环烷基为未被取代的或被1-3个取代基取代，取代基独立地选自卤代、羟基、C1-3烷基、C1-3烷氧基、-CO2H、-CO2-C1-6烷基和三氟甲基；R12独立地选自氢、C1-6烷基、苄基、苯基和C3-6环烷基，其中所述烷基、苯基、苄基和环烷基为未被取代的或被1-3个取代基取代，取代基独立地选自卤代、羟基、C1-3烷基、C1-3烷氧基、-CO2H、-CO2-C1-6烷基和三氟甲基；R13独立地选自氢、C1-6烷基、-O-C1-6烷基、苄基、苯基和C3-6环烷基，其中所述烷基、苯基、苄基和环烷基为未被取代的或被1-3个取代基取代，取代基独立地选自卤代、羟基、C1-3烷基、C1-3烷氧基、-CO2H、-CO2-C1-6烷基和三氟甲基；R14独立地选自羟基、C1-6烷基、-O-C1-6烷基、苄基、苯基和C3-6环烷基，其中所述烷基、苯基、苄基和环烷基为未被取代的或被1-3个取代基取代，取代基独立地选自卤代、羟基、C1-3烷基、C1-3烷氧基、-CO2H、-CO2-C1-6烷基和三氟甲基；R15和R16各自为H，或R15和R16一起为-CH2CH(R2)-，形成稠环；n为0、1或2；虚线表示非必要的单键；及其可药用盐及其各自的非对映异构体。
本发明的化合物还包括式Ia的化合物 其中R1、R5、R8、Z和Y如本文中定义的，及其可药用盐及其各自的非对映异构体。
本发明的化合物进一步包括式Ib的化合物 其中R1、R3、R5、R8和Y如本文中定义的，及其可药用盐及其各自的非对映异构体。
本发明的化合物还进一步包括式Ic的化合物 其中R1、R5、R8和Z如本文中定义的，及其可药用盐及其各自的非对映异构体。
本发明的化合物另外包括式Id的化合物
其中R1、R3、R5和R8如本文中定义的，及其可药用盐及其各自的非对映异构体。
本发明的实施方案还包括其中Z为N的那些。在某些实施方案中，当Z为C时，R3为氢、氟、或三氟甲基，当Z为N时，R3为不存在。
本发明的实施方案还包括其中Y为-CH2-或-O-、或其中Y为O的那些。
在某些实施方案中，R1选自-SO2CH3、-SO2NH2、-SOCH3和-SO2NHCH3，特别地其中R1为-SO2CH3。
在本发明的某些实施方案中，R2、R4、R6、R7、R9和/或R10中的一个或多个为氢。
本发明的实施方案还包括，其中R5选自被1-6个氟取代的C1-6烷基、被1-6个氟取代的-O-C1-6烷基、氯代、溴代和苯基，特别地，R5为三氟甲基、三氟甲氧基、氯代、溴代和苯基，的那些。
在本发明的某些实施方案中，R8选自氢、未被取代的或被1-6个氟取代的C1-3烷基、-O-C1-3烷基、氟代和羟基，和特别地，R8为氢、三氟甲基、甲基、甲氧基、乙氧基、乙基、氟代和羟基。
本发明的实施方案还包括其中n为1的那些。
非对映体和对映体的独立合成或它们的色谱分离可如本领域已知的那样通过本文公开方法的适当改进法完成。它们的绝对立体化学可通过结晶产物或结晶中间体的X-射线晶体学进行测定，所述产物或中间体如果必要可使用含有已知绝对构型的不对称中心的试剂进行衍生化。
如本领域技术人员公知的，本文使用的卤代或者卤素包括氯代、氟代、溴代和碘代。
本文使用的“烷基”包括直链、支链和环状的没有双键或三键的碳结构。C1-8烷基中的C1-8表示具有直链或支链结构的具有1、2、3、4、5、6、7或8个碳的基团，因此C1-8烷基具体包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、戊基、己基、庚基和辛基。更广泛地，Ca-b烷基(其中a和b表示整数)表示具有直链或支链结构的具有a到b个碳的基团。C0烷基中的C0是指存在直接的共价键。“环烷基”是其一部分或全部形成具有至少3个原子的环的烷基。
本文使用的“杂环”包括以下基团苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并呋咱基、苯并吡唑基、苯并三唑基、苯并噻吩基、苯并唑基、咔唑基、咔啉基、1，2-二氮杂萘基、呋喃基、咪唑基、二氢吲哚基、吲哚基、吲哚吖嗪基(indolazinyl)、吲唑基、异苯并呋喃基、异吲哚基、异喹啉基、异噻唑基、异唑基、萘吡啶基(naphthpyridinyl)、二唑基、唑基、氧杂环丁烷基、吡喃基、吡嗪基、吡唑基、哒嗪基、吡啶并吡啶基、哒嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、喹喔啉基、四氢吡喃基、四唑基、四唑并吡啶基、噻二唑基、噻唑基、噻吩基、三唑基、氮杂环丁基、1，4-二烷基、六氢氮杂基、哌嗪基、哌啶基、吡咯烷基、吗啉基、硫代吗啉基、二氢苯并咪唑基、二氢苯并呋喃基、二氢苯并噻吩基、二氢苯并唑基、二氢呋喃基、二氢咪唑基、二氢吲哚基、二氢异唑基、二氢异噻唑基、二氢二唑基、二氢唑基、二氢吡嗪基、二氢吡唑基、二氢吡啶基、二氢嘧啶基、二氢吡咯基、二氢喹啉基、二氢四唑基、二氢噻二唑基、二氢噻唑基、二氢噻吩基、二氢三唑基、二氢氮杂环丁基、亚甲二氧基苯甲酰基、四氢呋喃基和四氢噻吩基，及其N-氧化物。
本文使用的“环”是指形成或存在任何类型的环状结构，包括独立式的环、稠环和在已有环上形成的桥。环可为非芳香的或为芳香的。此外，本文中时常公开环状结构的存在或形成，其中多个取代基被定义为“一起”，如“其中R9和R10一起为C1-2烷基-O-C1-2烷基”。在这种情况下，无论是否使用术语“环”，都必定形成环。
本文使用的术语“可药用的”是指在合理的医疗判断范围内、适于接触人和动物的组织而无过度的毒性、刺激性、过敏反应或者其它问题或者并发症，并且与合理的利益/风险比相称的那些化合物、物质、组合物和/或剂型。
本文使用的“可药用盐”是指其中母体化合物经过改性形成其酸的盐或者碱的盐的衍生物。可药用盐的例子包括但不限于碱残基如胺的无机酸盐或有机酸盐；酸残基如羧酸的碱金属盐或有机盐；等。可药用盐包括常规的无毒盐或，例如，从无毒的无机酸或有机酸形成的母体化合物的季铵盐。例如，常规的无毒盐包括得自无机酸如氢氯酸、氢溴酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸、硝酸等的盐；从有机酸如醋酸、丙酸、丁二酸、羟基乙酸、硬脂酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、枸橼酸、抗坏血酸、双羟萘酸、马来酸、羟基马来酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水杨酸、对氨基苯磺酸、2-乙酰氧基苯甲酸、富马酸、甲苯磺酸、甲磺酸、乙烷二磺酸、草酸、羟乙基磺酸等制备的盐。
本发明的可药用盐可从含有碱性或者酸性部分的母体化合物通过常规化学方法制得。通常，这种盐可通过使游离酸或碱形式的这些化合物与化学计量的量的适当的碱或酸在水中或在有机溶剂中或在两者的混合物中反应制备；通常，使用非水介质如醚、乙酸乙酯、乙醇、异丙醇、或者乙腈。适当的盐参见例如Remington′s PharmaceuticalSciences，17th ed.，Mack Publishing Company，Easton，PA，1985，p.1418。
本发明内的具体的化合物包括选自实施例中描述的那些化合物、及其可药用盐和其各自的非对映体的化合物。
主题化合物可用于调节需要这种调节的患者中的趋化因子受体活性的方法中，其包括给药有效量的化合物。
本发明涉及上述化合物作为趋化因子受体活性调节剂的应用。特别地，这些化合物可用作趋化因子受体特别是CCR-2的调节剂。
本发明的化合物作为趋化因子受体活性调节剂的实用性可通过本领域已知的操作法说明，如在Van Riper等，J.Exp.Med.，177，851-856(1993)中公开的趋化因子结合试验，其可容易地进行改变以适于测量CCR-2结合。
在CCR-2结合试验中的受体亲合力通过测量125I-MCP-1对包括单核细胞、THP-1细胞的各种细胞类型上的内源性CCR-2受体的抑制进行测定，或在真核细胞中克隆受体的异源表达后测定。将细胞悬浮在结合缓冲液中(50mM HEPES，pH7.2，5mM MgCl2，1mM CaCl2和0.50％BSA或0.5％人血清)并加到试验化合物或者DMSO和125I-MCP-1，在室温下1小时使其进行结合。然后在GFB过滤器上收集细胞，用25mM含有500mM NaCl的HEPES缓冲液洗涤，定量测定细胞结合的125I-MCP-1。
在趋化性试验中，使用T细胞耗尽的PBMC(单核细胞)进行趋化性，T细胞耗尽的PBMC从静脉全血或leukophoresed血液中分离并通过Ficoll-Hypaque离心纯化，然后通过用神经氨酸酶处理的绵羊红细胞丛生(rosetting)。分离后，细胞用含有0.1毫克/毫升BSA的HBSS洗涤并以1×107细胞/毫升悬浮。细胞在黑暗中用2μM Calcien-AM(Molecular Probes)进行荧光标记，在37℃进行30分钟。标记细胞洗涤两次，并以5×106细胞/毫升悬浮在含有0.1毫克/毫升BSA的具有L-谷氨酰胺(不含酚红)的RPMI 1640中。将在相同介质或单独的介质中稀释的10ng/ml MCP-1(Peprotech)加入到底孔(27μl)中。在用DMSO或者用各种浓度的试验化合物预培养15分钟后，向过滤器的顶侧中加入单核细胞(150,000个细胞)(30μl)。将等浓度的试验化合物或者DMSO加入到底孔中以防止由扩散所致的稀释。在37℃、5％CO2培养60分钟后，除去过滤器，将顶侧用含0.1毫克/毫升BSA的HBSS洗涤以除去没有移动进入过滤器中的细胞。在不存在化学引诱物条件下测定自发性移动(化学运动性)。
特别地，以下实施例中的化合物在上述试验中与CCR-2受体结合的活性的IC50通常小于约1μM。这种结果表明化合物在作为趋化因子受体活性调节剂应用中的固有活性。
哺乳动物趋化因子受体提供了用于干扰或促进哺乳动物如人中的嗜酸性粒细胞和/或白细胞功能的靶标。抑制或者促进趋化因子受体功能的化合物特别用于调节嗜酸性粒细胞和/或白细胞的功能，用于治疗目的。因此，抑制或者促进趋化因子受体功能的化合物将用于治疗、预防、改善或控制各种炎性和免疫调节性病症和疾病、变应性疾病、特应性病况(包括过敏性鼻炎、皮炎、结膜炎和哮喘)以及自身免疫性病变如类风湿性关节炎和动脉粥样硬化、或者降低其风险。
例如，抑制哺乳动物趋化因子受体(如人趋化因子受体)的一种或多种功能的本发明的化合物可被给用以抑制(如减少或者预防)炎症。因此，一种或多种炎性过程如白细胞移动、趋化性、胞吐作用(如酶、组胺的)或者炎症递质释放受到抑制。
除了灵长类动物如人之外，各种其它哺乳动物可根据本发明的方法进行治疗。例如，哺乳动物包括但不限于牛、绵羊、山羊、马、犬、猫、豚鼠、大鼠或其它牛科、羊科、马科、犬科、猫科、啮齿动物或者鼠科动物可进行治疗。然而，可在其它物种如鸟禽(如小鸡)中实践本发明的方法。
可使用本发明的化合物治疗各种与炎症和感染有关的疾病和病况。在某些实施方案中，疾病或者病况是其中白细胞的作用受到抑制或促进从而调节炎性应答的一种疾病或者病况。
可用趋化因子受体功能抑制剂治疗的人或其它物种的疾病或病况包括但不限于炎性或变应性疾病和病况，包括呼吸系统变应性疾病如哮喘，特别是支气管哮喘，过敏性鼻炎，超敏性肺病，超敏性肺炎，嗜酸粒细胞性肺炎(如吕弗勒综合征、慢性嗜酸粒细胞性肺炎)，迟发型超敏反应，间质性肺病(ILD)(如，自发性肺纤维化、或者与类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、强直性脊椎炎、系统性硬化、舍格伦综合征、多肌炎或者皮肌炎有关的ILD)；神经病性疼痛；全身过敏或者超敏反应、药物过敏(如对青霉素、头孢菌素)，昆虫叮刺过敏；自身免疫性疾病，如类风湿性关节炎、银屑病性关节炎、多发性硬化、系统性红斑狼疮、重症肌无力、幼年型糖尿病；肾小球性肾炎、自身免疫性甲状腺炎、贝切特氏病；移植排斥(如在移植中发生的)，包括同种异体移植排斥或者移植物抗宿主病；炎性肠病，如克罗恩氏病和溃疡性结肠炎；脊柱关节病；硬皮病；银屑病(包括T-细胞介导的银屑病)和炎性皮肤病如皮炎、湿疹、特应性皮炎、过敏性接触性皮炎、荨麻疹；脉管炎(如坏死性、皮肤性和超敏反应脉管炎)；嗜酸性肌炎、嗜酸性细胞增多性肌膜炎；具有皮肤或者器官的白细胞浸润的癌症。趋化因子受体功能抑制剂还可用于治疗或预防中风(Hugheset al.，Journal of Cerebral Blood Flow & Metabolism，22308-317，2002；Takami et al.，Journal of Cerebral Blood Flow & Metabolism，22780-784，2002)，肥胖病，II型糖尿病，以及神经病性和炎症性疼痛。其它可进行治疗的其中不受欢迎的炎性应答将受到抑制的疾病或者病况包括但不限于再灌注损伤、动脉粥样硬化、某些血液学恶性肿瘤、细胞因子诱导毒性(如败血症休克、内毒素休克)、多肌炎、皮肤肌炎。
可用趋化因子受体功能调节剂治疗的人或者其它物种的疾病或者病况包括但不限于免疫抑制，如在患有免疫缺陷综合症如AIDS或者其它病毒感染的个体中，经历放疗、化疗、自身免疫性疾病治疗或药物疗法(如皮质类固醇治疗)而这些治疗可引起免疫抑制的个体中；由于受体功能或者其它原因的先天性缺陷的免疫抑制；和传染性疾病诸如寄生虫疾病，包括但不限于蠕虫感染，如线虫(圆蠕虫)、(鞭虫病、蛲虫病、蛔虫病、钩虫病、类圆线虫病、旋毛虫病、丝虫病)、吸虫(片形吸虫)(血吸虫病、华支睾吸虫病)、多节倏虫(cestode)(绦虫)(包虫病、牛肉绦虫病(Taeniasis saginata)、囊尾蚴病)、内脏蠕虫、内脏幼虫偏头痛(如弓蛔虫)、嗜酸细胞性胃肠炎(如，Anisakisp.，Phocanema sp.)和皮肤幼虫偏头痛(Ancylostona braziliense，Ancylostoma caninum)。
另外，如果考虑递送足够的化合物通过诱导趋化因子受体内在化而引起细胞上受体表达消失、或考虑以引起细胞移动方向出错的方式递送化合物，则上述炎症性、变应性和自身免疫性疾病的治疗还可考虑使用趋化因子受体功能的促进剂。
因此本发明的化合物可用于治疗、预防、缓解或控制各种炎性和免疫调节性病症和疾病、变应性病况、特应性病况以及自身免疫性病变、或者降低其风险。在具体方案中，本发明涉及主题化合物用于治疗、预防、改善或控制自身免疫性疾病如类风湿性关节炎或者银屑病性关节炎、或者降低其风险的应用。
在另一方面，本发明可用于评价包括CCR-2的趋化因子受体的推定特异性激动剂或者拮抗剂。因此，本发明涉及这些化合物在制备调节趋化因子受体活性的化合物和进行所述化合物的筛选试验中的应用。例如，本发明的化合物可用于分离受体突变体，其是更强效化合物的优异筛选工具。而且，本发明的化合物可用于确立或者确定其它化合物与趋化因子受体的结合部位，如通过竞争性抑制。本发明的化合物还可用于评价包括CCR-2的趋化因子受体的推定特异性调节剂。如本领域所理解的那样，全面评价上述趋化因子受体的特异性激动剂和拮抗剂由于缺乏具有与这些受体高结合亲合力的非肽基(代谢抗性)化合物的可达性而受到阻碍。因此，本发明的化合物是可出售用于这些目的的商用产品。
本发明进一步涉及生产用于调节人和动物中趋化因子受体活性的药物的方法，包括将本发明的化合物与药学载体或者稀释剂混合。
本发明进一步涉及本发明的化合物在治疗、预防、改善或控制由逆转录病毒特别是疱疹病毒或者人类免疫缺陷病毒(HIV)引起的感染、或者降低其风险和后续病理学病况如AIDS的治疗或发作延迟中的应用。治疗AIDS或者预防或治疗由HIV引起的感染的定义包括但不限于治疗HIV感染的各种状态AIDS、ARC(AIDS相关性综合征)，有症状的和无症状的，和对HIV的实际或潜在的暴露。例如，本发明的化合物可用于治疗被怀疑过去曾经暴露在HIV之下后的HIV感染，例如通过输血、器官移植、体液交换、咬、偶然的针扎、或在手术过程中接触患者血液。
在本发明的另一方面，主题化合物可用在抑制趋化因子与靶细胞的趋化因子受体诸如CCR-2结合的方法中，该方法包括使靶细胞与一定量的有效抑制趋化因子与趋化因子受体结合的化合物接触。
上述方法中治疗的对象是包括希望调节趋化因子受体活性的哺乳动物例如人，无论是雄性的还是雌性的。本文使用的“调节”包括拮抗、激动、部分拮抗、逆向激动和/或部分激动。在本发明的一方面，调节是指拮抗趋化因子受体活性。术语“治疗有效量”是指由研究员、兽医、内科医生或者其它临床医师寻求的将引起组织、系统、动物或者人的生物或医学应答的主题化合物的量。
本文使用的术语“组合物”涵盖包括特定量的特定组分的产品，以及可直接或间接得自特定量的特定组分的组合的任何产品。“可药用的”是指必需与制剂中的其它组分是相容的并且对接受者无害的载体、稀释剂或者赋形剂。
术语“给用”或“给药”化合物可理解为是指对需要治疗的个体提供本发明的化合物。
本文使用的术语“治疗”既是指上述病况的治疗，也是指上述病况的预防或者预防性治疗。
因此，用于治疗、预防、改善或控制炎症性和免疫调节性病症和疾病，包括哮喘和变应性疾病，以及自身免疫性病变如类风湿性关节炎和动脉粥样硬化以及上述那些病变、或者降低其风险的调节趋化因子受体活性的联合治疗通过将CCR-2拮抗剂如本发明的化合物与其它已知用于这些用途的化合物的组合进行说明。
例如，在治疗、预防、改善或控制炎症或者降低其风险时，本发明的化合物可用于与以下药剂联合使用抗炎药或止痛药如鸦片剂激动剂、脂氧合酶抑制剂如5-脂氧合酶抑制剂、环加氧酶抑制剂如环加氧酶-2抑制剂、白细胞介素抑制剂如白细胞介素-1抑制剂、NMDA拮抗剂、一氧化一氮抑制剂或者一氧化一氮合成抑制剂、非甾体抗炎药、或细胞因子抑制性抗炎药，例如使用诸如以下的化合物对乙酰氨基酚、阿司匹林、可待因、embrel、芬太尼、布洛芬、吲哚美辛、酮咯酸、吗啡、萘普生、非那西丁、吡罗昔康、甾体类止痛药、舒芬太尼、苏林酸(sunlindac)、替尼达普等。类似地，本发明的化合物可与以下药剂给用解热镇痛剂；增效剂如咖啡因、H2-拮抗剂、西甲硅油、氢氧化铝或者氢氧化镁；解充血药如脱羟肾上腺素、苯丙醇胺、伪麻黄碱、羟甲唑啉、肾上腺素(ephinephrine)、萘甲唑林、赛洛唑啉、丙己君、或者左脱氧麻黄碱；止咳药如可待因、氢可酮、卡拉美芬、喷托维林、或者右美沙芬；利尿剂；和镇静或者或者非镇静抗组胺剂。
同样地，本发明的化合物可用于与其它可用于治疗/预防/抑制或者改善本发明化合物可用的疾病或病况的药物组合。这些其它药物可通过通常使用的途径或量与本发明的化合物同时或者顺序地给用。当本发明的化合物与一种或多种其它药物同时给用时，可使用除了本发明化合物之外还含有这些其它药物的药物组合物。因此，本发明的药物组合物包括那些除了本发明的化合物之外还包括一种或多种其它活性成分的组合物。
可与CCR2拮抗剂如本发明的CCR2拮抗剂化合物组合的、可以以相同的药物组合物形式给用或单独给用的其它活性成分的例子包括但不限于(a)VLA-4拮抗剂，例如在US 5,510,332，WO95/15973，WO96/01644，WO96/06108，WO96/20216，WO96/22966，WO96/31206，WO96/40781，WO97/03094，WO97/02289，WO98/42656，WO98/53814，WO98/53817，WO98/53818，WO98/54207，和WO98/58902中描述的；(b)甾族化合物如倍氯米松、甲泼尼龙、倍他米松、泼尼松、地塞米松和氢化可的松；(c)免疫抑制剂如环孢菌素、他克莫司、雷帕霉素和其它FK-506型免疫抑制剂；(d)抗组胺剂(H1-组胺拮抗剂)如溴代非尼拉敏、氯苯那敏、右氯苯那敏、曲普利啶、氯马斯汀、苯海拉明、二苯拉林、曲吡那敏、羟嗪、甲地嗪、异丙嗪、阿利马嗪、阿扎他定、赛庚啶、安他唑啉、非尼拉敏、美吡拉敏、阿司咪唑、特非那定、氯雷他定、地氯雷他定、西替利嗪、非索非那定、脱羰乙氧基氯雷他定等；(e)非甾体抗气喘药如β2-激动剂(特布他林、奥西那林、非诺特罗、异他林、沙丁胺醇、比托特罗和吡布特罗)、茶碱、色甘酸二钠、阿托品、异丙托溴铵、白三烯拮抗剂(扎鲁司特、孟鲁司特、普仑司特、伊拉司特、泊比司特、SKB-106，203)，白三烯生物合成抑制剂(齐留通、BAY-1005)；(f)非甾体抗炎药(NSAIDs)如丙酸衍生物(阿明洛芬、苯洛芬、布氯酸、卡洛芬、芬布芬、非诺洛芬、氟洛芬、氟比洛芬、布洛芬、吲哚洛芬、酮洛芬、咪洛芬、萘普生、丙嗪、吡洛芬、普拉洛芬、舒洛芬、噻洛芬酸和硫洛芬)，乙酸衍生物(吲哚美辛、阿西美辛、阿氯芬酸、环氯茚酸、双氯芬酸、芬氯酸、芬克洛酸、芬替酸、呋罗芬酸、异丁芬酸、伊索克酸、oxpinac、舒林酸、硫平酸、托美丁、齐多美辛和佐美酸)、芬那酸衍生物(氟芬那酸、甲氯芬那酸、甲芬那酸、尼氟酸和托芬那酸)、联苯羧酸衍生物(二氟尼柳和氟苯柳)、昔康类(伊索昔康、吡罗昔康、舒多昔康和替诺昔康)、水杨酸类(乙酰水杨酸、柳氮磺胺吡啶)和吡唑啉酮类(阿扎丙宗、bezpiperylon、非普拉宗、莫非布宗、羟布宗、保泰松)；(g)环加氧酶-2(COX-2)抑制剂；(h)IV型磷酸二酯酶(PDE-IV)抑制剂；(i)趋化因子受体特别是CCR-1、CCR-2、CCR-3、CXCR-3和CCR-5的其它拮抗剂；(j)胆固醇降低剂如HMG-CoA还原酶抑制剂(洛伐他汀、辛伐他汀和普伐他汀、氟伐他汀、阿托伐他汀、罗苏伐他汀、及其它他汀类)，多价螯合剂(考来烯胺和考来替泊)、胆固醇吸收抑制剂(依泽替米贝)、烟酸、非诺贝酸衍生物(吉非贝齐、安妥明、非诺贝特和苯扎贝特)和普罗布考；(k)抗糖尿病药物，如胰岛素、磺酰脲类、双胍(二甲双胍)、α-葡糖苷酶抑制剂(阿卡波糖)和格列酮类(曲格列酮和吡格列酮)；(1)干扰素β制剂(干扰素β-1α，干扰素β-1β)；(m)格拉默乙酸盐制剂；(n)CTLA4Ig的制剂；(o)羟氯喹的制剂；(p)Copaxone；(q)p38的抑制剂；(r)TNF抑制剂和多价螯合剂；和(s)其它化合物如5-氨基水杨酸及其前药、抗代谢药如硫唑嘌呤和6-巯基嘌呤和甲氨蝶呤和细胞毒性癌症化疗剂。
本发明化合物与第二活性成分的重量比可不同并根据各自成分的有效剂量而定。通常，可用各自的有效剂量。因此，例如，当本发明的化合物与NSAID组合时，本发明化合物与NSAID的重量比通常为约1000∶1到约1∶1000，或约200∶1到约1∶200。本发明的化合物与其它活性成分的组合通常也处在上述范围内，但是在所有情况下，应当使用每种活性成分的有效剂量。
在这种组合中，本发明的化合物与其它活性剂可分别或联合给用。另外，一种成分可在给药其它一种或多种药物之前、同时或之后给用。
本发明的化合物可通过口、非肠道(如肌肉内、腹膜内、静脉内、ICV、池内注射或输注、皮下注射、或者植入)、通过吸入喷雾、经鼻、阴道、直肠、舌下、或者局部给药途径给药，或者可单独或一起配制在适当的剂量单位制剂中，该剂量单位制剂含有常规的无毒的适合于各自给药途径的可药用载体、佐剂和媒介物。除了治疗恒温动物如大鼠、小鼠、马、牛、绵羊、狗、猫、猴子等等之外，本发明的化合物在人中的使用是有效的。
用于本发明化合物给药的药物组合物可方便地以剂量单元形式存在，并且可通过药学领域公知的任意方法制备。所有方法包括将活性成分与构成一种或多种助剂的载体结合的步骤。通常，药物组合物可通过使活性成分均一地和密切地与液体载体或细粉形式的固体载体或者两者结合，然后如有必要使产品成形为所需制剂而制备。活性主题化合物以足以对疾病的进程或病况产生预期效果的量被引入到药物组合物中。本文使用的术语“组合物”涵盖包括特定量的特定组分的产品，以及可直接或间接得自特定量的特定组分的组合的任何产品。
含有活性成分的药物组合物可为适合口服用途的剂型，如片剂、锭剂、菱形片，水性或油性悬浮液，可分散性粉剂或者颗粒剂，乳液、硬胶囊或软胶囊，或糖浆剂或者酏剂。预计用于口服用途的组合物可根据药物组合物生产领域公知的任何方法制备并且该种组合物可含有一种或多种选自甜味剂、调味剂、着色剂和防腐剂的助剂，以提供药学上美观和适口的制剂。片剂含有与适于生产片剂的无毒的可药用赋形剂混合的活性成分。这些赋形剂可为例如惰性的稀释剂，如碳酸钙、碳酸钠、乳糖、磷酸钙或者磷酸钠；造粒剂和崩解剂，如玉米淀粉或者海藻酸；粘合剂，如淀粉、明胶或者阿拉伯胶；和脱模剂，如硬脂酸镁、硬脂酸或者滑石。片剂可无包衣或可通过已知技术进行包衣，从而延迟在胃肠道内的崩解和吸收，并从而在较长时段内提供持续作用。例如，可使用诸如单硬脂酸甘油酯或者二硬脂酸甘油酯的延时材料。也可通过美国专利4,256,108；4,166,452；和4,265,874所述技术进行包衣形成用于控制释放的渗透性治疗片剂。
口服用制剂也可作为硬明胶胶囊形式存在，其中的活性成分与惰性固体稀释剂如碳酸钙、磷酸钙或者陶土混合；或者作为软明胶胶囊形式存在，其中活性成分与水或者油性介质如花生油、液状石蜡或者橄榄油混合。
水性悬浮液含有与适于生产水性悬浮液的赋形剂混合的活性物质。所述赋形剂为悬浮剂，如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、海藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、黄蓍树胶和阿拉伯树胶；分散剂或润湿剂可为天然存在的磷脂，例如卵磷脂，或者氧化烯与脂肪酸的缩合产物，如聚氧化乙烯硬脂酸酯，或者环氧乙烷与长链脂族醇的缩合产物，如十七亚乙基氧基鲸蜡醇，或环氧乙烷与得自脂肪酸与己糖醇的偏酯的缩合产物如聚氧化乙烯山梨醇单油酸酯，或环氧乙烷与得自脂肪酸与己糖醇酐的偏酯的缩合产物，例如聚乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯。水性悬浮液也可含有一种或多种防腐剂，例如对羟基苯甲酸乙酯或正丙酯、一种或多种着色剂、一种或多种调味剂和一种或多种甜味剂如蔗糖或者糖精。
油性悬浮液可通过将活性成分悬浮在植物油如花生油、橄榄油、芝麻油或者椰子油，或悬浮在矿物油如液状石蜡中制备。油性悬浮液可含有增稠剂例如蜂蜡、硬石蜡或鲸蜡醇。可加入如上述的甜味料，和调味剂以提供适口性的口服制剂。这些组合物可通过加入抗氧化剂如抗坏血酸进行保存。
适于通过加入水制备水性悬浮液的可分散性粉剂和颗粒剂提供与分散剂或润湿剂、悬浮剂和一种或多种防腐剂混合的活性成分。适当的分散剂或润湿剂和悬浮剂的例子如上所述。也可存在另外的赋形剂，例如甜味剂、调味剂和着色剂。
本发明的药物组合物也可为水包油乳液形式。油相可为植物油例如橄榄油或者花生油，或为矿物油例如液状石蜡，或者这些物质的混合物。适当的乳化剂可为天然存在的树胶类，如阿拉伯树胶或者黄蓍树胶，天然存在的磷脂例如大豆磷脂、卵磷脂，以及得自脂肪酸和己糖醇酐的酯或者偏酯，如单油酸脱水山梨醇酯，和所述偏酯与环氧乙烷的缩合产物如聚氧化乙烯单油酸脱水山梨醇酯。乳液还可含有甜味剂和调味剂。
糖浆剂和酏剂可与甜味剂一起进行配制，例如使用甘油、丙二醇、山梨醇或者蔗糖。这种制剂还可含有缓和剂、防腐剂和调味剂以及着色剂。
药物组合物可为无菌注射用水性或油性悬浮液形式。悬浮液可根据本领域已知的那样使用那些上述的适当的分散剂或润湿剂和悬浮剂进行配制。无菌注射用制剂还可为在无毒的非肠道可接受的稀释剂或者溶剂中的无菌注射溶液或悬浮液形式，如作为1，3-丁二醇中的溶液形式。在可使用的可接受的媒介物和溶剂中，特别是水、林格溶液和等渗氯化钠溶液。另外，通常使用无菌的非挥发油类作为溶剂或者悬浮介质。为此可使用任何的刺激性少的非挥发油，包括人造甘油一酸酯或者甘油二酸酯。另外，脂肪酸如油酸可用在注射制剂中。
本发明的化合物还可以直肠给用的栓剂形式给用。这些组合物可通过将药物与适当的在常温下为固体但是在直肠温度下为液体并从而在直肠中熔化以释放药物的无刺激性的赋形剂混合制备。所述物质为可可脂和聚乙二醇。
对于局部应用，可使用含有本发明的化合物的霜剂、膏剂、胶冻剂、溶液或者悬浮液等。(为了这一应用，局部施用将包括嗽口水和漱口剂。)本发明的药物组合物和方法另外包括本文提到的其它治疗活性化合物，它们通常用在上述病理学病况的治疗中。
在治疗、预防、改善或控制需要趋化因子受体调节的病况或者降低其风险时，适当的剂量水平通常为每天每千克患者体重为约0.001到500毫克，以单剂量或多剂量给用。在某些方案中剂量水平为每天约0.001到约400毫克/千克；或者每天约0.01到约300毫克/千克；或者每天约0.1到约250毫克/千克，或者每天约0.5到约100毫克/千克。适当的剂量水平可为每天约0.001到400毫克/千克，每天约0.01到250毫克/千克，每天约0.05到100毫克/千克，或者每天约0.1到50毫克/千克。在该范围内，剂量可为每天0.005到0.05，0.05到0.5，0.5到5，或者5到50毫克/千克。对于口服给药，组合物可以片剂形式提供，该片剂形式含有0.1到1000毫克活性成分，或者1.0到500，或者2.0到500、或者3.0到200、特别是0.1、1、5、10、15、20、25、30、50、75、100、125、150、175、200、250、300、400、500、600、750、800、900和1000毫克活性成分，用于待治疗患者的剂量根据症状进行调整。化合物可根据每天1到4次，或每天1或2次的给药方案给用。
然而，可以理解的是，对于任何特定患者的特定剂量水平和给药频率可以是不同的并且根据包括以下的各种因素而定使用的具体化合物的活性，该化合物的代谢性稳定性和作用时间，年龄，体重，一般健康状况，性别，膳食，给药方式和时间，排泄速率，药物组合，具体病况的严重程度，和经历治疗的对象。
图解在以下图解和实施例中说明用于制备本发明的化合物的几种方法。起始原料为通过已知方法制备，或如本文所述制备。
在图解1A-1D中详述用于制备处在本发明范围内的带有1，1，3-三取代的环戊烷骨架的化合物(I)的主要路线之一。
图解1A 根据这个图解，将市售的纯手性内酰胺1-1氢化并将饱和的1-2在适当的催化剂如N，N-二甲氨基吡啶的存在下用BOC2O处理。然后酰胺键在适当的醇R17-OH的存在下进行碱催化裂解得到相应的酯1-4。除去BOC-保护基，优选使用在非质子溶剂如二氧杂环己烷中的酸例如HCl，得到盐形式的胺1-5。当将胺与二苯甲酮亚胺混合时，形成相应的席夫碱1-6，其可以通过简单的过滤以除去氯化铵而得到纯形式。
使用强碱例如LDA从酯1-6形成的烯醇化物可以与烷基二硫化物R16-S-S-R16反应，图解2B中示出中间体1-7。这些反应产生相应的顺式-(1-7a)和反式-(1-7b-未示出)的非对映异构体，其可以通过适当的色谱法分离。在大多数情况中，可以成功地进行在减活化硅胶上的正相急骤色谱法。
图解1B 然后将期望的顺式非对映异构体1-7a和1-8a用酸例如HCl处理，以帮助亚胺基的水解，并且将得到的氨基适当地保护，如保护为叔丁氧羰基酰胺的形式(图解1C)。然后将存在于中间体1-10a中的酯基裂解。使用的方法取决于酯的性质例如，苄基酯可通过氢解裂解，叔丁基酯在非质子酸性条件下裂解，烷基酯在酸性或碱性条件下水解。然后在DCM中使用适当的偶联剂如EDC或PyBrop使形成的酸与适当的胺(R19R18NH)偶联。然后用酸除去BOC保护基。胺1-13a与适当的四氢吡喃酮进行还原烷基化，得到中间体硫化物，其可以使用适当的氧化剂被氧化为砜(I)或亚砜趋化因子调节剂。
图解1C 作为替代的途径，可以如图解ID所示直接将中间体1-12a转化为亚砜1-15a或砜1-14a。除去BOC保护基并用四氢吡喃酮将得到的胺进行还原烷基化得到趋化因子调节剂(I)。
图解ID 在一些情况中，可以改变上述反应图解的进行顺序，以促进反应或避免不需要的反应产物。
以下是用于制备用于以下实施例的化合物或制备可以代替不可购得的用于以下实施例的化合物的化合物的代表性的方法。
实施例中间体1 步骤A 向4-三氟甲基苯基乙腈(40g，220mmol)在2N NH3/MeOH(400mL)中的溶液中加入阮内镍(～4.0g)。将反应混合物置于par-振荡器中并在50lb压力下摇动过夜。将溶液过滤通过硅藻土并在真空中浓缩，得到期望的胺(38g，95％)。ESI-MS，C9H10F3N，计算值189；实测值190(M+H)。
步骤B 将上述胺(步骤A，中间体1)(38g，200mmol)和DIEA(52mL，300mmol)溶解于DCM(300mL)中。将溶液冷却到0℃，然后缓慢加入TFAA(36mL，250mmol)。将反应混合物在冰浴中搅拌另外的10分钟，然后使其回温到室温。反应在30分钟内完成，将其倾倒在水中并用DCM(2次)提取。有机层用1N HCl和饱和NaCl溶液洗涤，用MgSO4干燥并在真空中浓缩，得到所需的酰胺(56g，98％)。ESI-MS，C11H9F6NO，计算值285；实测值286(M+H)。
步骤C 向酰胺(步骤B，中间体1)(73g，256mmol)和多聚甲醛(11.5g，385mmol)的混合物中加入200mL的乙酸。将反应混合物在室温下搅拌5分钟，然后加入浓硫酸(200mL)。观察到放热反应。在30分钟之后，TLC显示完全转化。将混合物冷却到室温然后倾倒在冰水(2000mL)上并用EtOAc提取(3×500mL)。合并的有机层用水(2次)、饱和NaHCO3和盐水洗涤，用MgSO4干燥，过滤，蒸发并在真空中干燥。得到所需的酰胺(72.7g，96％)，为浅黄色固体。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.22(q，J＝11.67Hz，8.46Hz，1H)，7.11(t，J＝10.53Hz，1H)，7.03(d，J＝11.67Hz，1H)，4.79(d，J＝23.57Hz，2H)，3.91(t，J＝6.18Hz，1H)，3.87(t，J＝5.72 Hz，1H)，2.97(m，2H).
ESI-MS，C12H9F6NO，计算值297；实测值298(M+H)。
步骤D
将酰胺(步骤C，中间体1)(50g，168mmol)溶解于EtOH(200mL)中，然后加入固体K2CO3(50g，360mmol)和H2O(50mL)。将反应混合物回流15小时然后真空浓缩。将浓缩物用H2O(100mL)稀释并用DCM(5次)提取。合并的有机层用MgSO4干燥，过滤，浓缩并在FC(10％[水溶液NH4OH/MeOH1/9]/DCM)上纯化，得到胺(步骤D，中间体1)(30g，89％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.11(d，J＝8.4Hz，1H)，7.01(bd，J＝8.4Hz，1H)，6.89(s，1H)，4.03(s，2H)，3.15(t，J＝6.1Hz，2H)，2.80(t，J＝5.6 HZ，2H)，1.80(s，1H).
ESI-MS，C10H10F3N，计算值201；实测值202(M+H)。
中间体2 中间体2根据J.Am.Chem.Soc，1991，113，2079-2089中所述的方法制备。
实施例1 步骤A
在室温下将含(1S)-(+)-2-氮杂双环[2.2.1]庚-5-烯-3-酮(10.3g，94.4mmol)的EtOAc(200mL)与10％Pd/C(0.5gm)的混合物在氢气囊下氢化。在24小时之后，将反应混合物过滤并蒸发，留下10.4g(100％)的产物，将其包含在250ml甲醇和HCl(12M，6ml)中。将得到的混合物在室温下搅拌，直到反应完成(72小时)。蒸发甲醇，随后在高真空下干燥，得到标题化合物，为灰白色固体(16.0g，96％)。1HNMR(D2O，500MHz)3.70(s，3H)，3.01(m，1H)，2.38(m，1H)，2.16-1.73(m，6H)。
步骤B 在室温下向得自步骤A的中间体(10.2g，56.8mmol)在无水二氯甲烷(200mL)中的悬浮液中加入二苯酮亚胺(10.2g，56.8mmol)并将得到的混合物搅拌24小时。将反应混合物过滤并将滤液蒸发，留下黄色油状物，将其与乙醚(100mL)研磨，过滤并蒸发。重复这个操作两次，以保证产物不含氯化铵杂质。将得到的油状物在真空下彻底地干燥，得到标题化合物(18.03g，＞100％)，其不须进一步的纯化。
1H NMR(CDCl3，500MHz)7.5-7.18(m，10H)，3.75(m，1H)，3.7(s，3H)，2.78(m，1H)，2.26-1.71(m，6H).
步骤C 向火焰干燥的500mL圆底烧瓶中加入无水THF(50mL)。将溶液冷却到-78℃，然后顺序地加入iPr2N(2.63mL，18.8mmol)、2.5MnBuLi(7.5mL，18.8mmol)和席夫碱(步骤B)(5g，16.3mmol)的THF(20mL)溶液。将反应混合物在-78℃搅拌30分钟，然后加入甲基二硫化物(4.4mL，49mmol)。在将反应搅拌另外的一小时之后，将混合物用饱和NH4Cl淬灭，用乙醚提取，用MgSO4干燥并浓缩。粗的产物通过MPLC(10/90 EtOAc/己烷)纯化，得到标题化合物(3.98g，69.0％)。LC-MSC21H24NO2S[M+H+]计算值354.14；实测值354.25。
步骤D 将烷基化的席夫碱(步骤C，实施例1)(3.98g，11.3mmol)溶解于THF(35mL)中然后加入2N HCl(35mL)。将反应混合物搅拌并通过TLC监控。在反应完成后，将混合物真空浓缩以除去THF。用饱和Na2CO3水溶液将水层碱化到pH9.0，并用DCM提取。有机层用MgSO4干燥并加入Boc-酐(3.3g，15mmol)。将反应在室温下搅拌过夜，然后用DCM提取，用MgSO4干燥，并在真空中浓缩。粗产物通过MPLC(35/65，EtOAc/己烷)纯化，得到标题化合物(2.10g，64.4％)。LC-MSC13H24NO4S[M+H+]，计算值290.13；实测值190.1(-Boc)。
步骤E 将酯(步骤D，实施例1)(2.10g，7.27mmol)溶解于MeOH(10mL)和THF(10mL)中然后加入LiOH(1.5g，36.3mmol)的H2O(10mL)溶液。将混合物在60℃加热过夜，然后真空浓缩以除去有机溶剂。水层用己烷洗涤，酸化到pH7-4，并用DCM提取(3次)。将合并的有机层用无水MgSO4干燥并浓缩到干燥。粗产物直接用于下一步。
步骤F
将酸(步骤E，实施例1)(500mg，1.82mmol)、中间体1(366mg，1.82mmol)，和HOAT(250mg，1.82mmol)溶解于DCM(20mL)中，然后加入EDC(525mg，2.73mmol)。将得到的混合物搅拌过夜，然后用饱和NaHCO3、H2O(2次)和盐水洗涤，用MgSO4干燥，并在真空中浓缩。粗产物通过制备板纯化(30/70，EtOAc/己烷)，得到标题化合物(742mg，89.2％)。LC-MSC22H30F3N2O3S[M+H+]计算值459.19；实测值403.15(-叔丁基)。
步骤G 将中间体(步骤F，实施例1)(200mg，0.44mmol)溶解于iPrOH(5mL)中，然后加入过一硫酸氢钾(oxone)(540mg，0.88mmol)的H2O(5mL)溶液。将混合物在室温下搅拌2小时，然后浓缩到干燥。将浓缩物用乙醚稀释，用H2O洗涤(3次)，用无水MgSO4干燥并真空浓缩，得到标题化合物(212mg，99.1％)。LC-MSC22H30F3N2O5S，[M+H+]计算值491.17；实测值391.15(-Boc基团)。
步骤H 将得自步骤G的产物(212mg)溶解于含4M HCl的二氧杂环己烷中并在室温下搅拌2小时，然后在减压下浓缩，得到183mg的所需的盐酸盐。将这个盐(100mg，0.356mmol)与DCM中的DIEA(70μL，0.384mmol)、四氢-4H-吡喃-4-酮(52μL，0.513mmol)、4分子筛和三乙酰氧基硼氢化钠(270mg，1.28mmol)合并。将得到的反应混合物搅拌几天，然后用饱和碳酸氢钠水溶液(3次)洗涤。将合并的水层用DCM反萃取(4次)并将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤，并在减压下浓缩。将两个异构体在制备板上进行拆分(4/95.6/0.4，MeOH/DCM/NH4OH)。LC-MSC22H30F3N2O4S[M+H+]计算值475.18；实测值475.15。
实施例2 步骤A 以上的酰胺以类似于实施例1步骤F中所述的方法制备，不同之处在于将中间体1替换为3，5-二(三氟甲基)苄胺。LC-MSC21H27N2O3S[M+H+]计算值501.16；实测值445.15(缺失叔丁基)。
步骤B 将硫化物(其制备在实施例1步骤A中描述，200mg，0.4mmol)溶解于异丙醇(7mL)中，然后加入过一硫酸氢钾(500mg，0.8mmol)的H2O(7mL)溶液。将混合物在室温下搅拌2小时，然后浓缩到干燥。将浓缩物用乙醚稀释，用H2O洗涤(3次)，用无水MgSO4干燥并真空浓缩，得到207mg(97％)的所需的化合物。LC-MSC21H27F6N2O5S[M+H+]，计算值533.15；实测值433.15(-BOC基团)。
步骤C 这个化合物从前述的砜开始制备，使用在实施例1步骤H中详述的方法，使用得自前述步骤的产物。通过制备TLC将顺式-和反式-异构体分离，较低极性的化合物为顺式异构体。LC-MSC21H27F6N2O4S[M+H+]，计算值517.15；实测值517.15。
实施例3 这个化合物如实施例2中详述的、使用中间体2代替四氢-4H-吡喃-4-酮制备。通过制备TLC分离两对异构体。(MeOHDCMNH4OH/396.70.3)。LC-MSC22H29F6N2O4S[M+H+]计算值531.17；实测值531.25。
实施例4
将实施例3中所述的产物(较大极性的异构体，30mg，0.058mmol)、甲醛(37重量％，在H2O中，15μL，0.17mmol)、TFA、NaCNBH3(20mg，0.29mmol)和MeOH(5mL)的混合物在室温下搅拌过夜，然后真空浓缩并通过制备TLC纯化。(MeOH∶DCM∶NH4OH/4∶95.6∶0.4)，得到实施例4(11mg，35.7％)。LC-MSC23H31F6N2O4S[M+H+]计算值545.18；实测值545.2。
实施例5 这个化合物如实施例1和2中所述制备，不同之处在于在实施例1，步骤C中将甲基二硫化物替换为异丙基二硫化物。LC-MSC23H31F6N2O4S[M+H]+计算值545.18；实测值545.2。
尽管已经参考某些本发明的具体方案描述和举例说明了本发明，本领域的技术人员将会理解，可进行方法和方案的各种修改、变化、改进、置换、删除或补充而不脱离本发明的实质和范围。例如，由于在使用上述本发明化合物治疗任何适应症的哺乳动物的响应性变化而使除了本文以上所述的特定剂量之外的有效剂量是可以应用的。同样地，观察到的特异性药理学应答可根据并取决于选择的特定的活性化合物或是否存在药物载体，以及使用的制剂类型和给药方式而定，并且结果中的这些预期的改变或差异被认为与本发明的目的和实践一致。因此，要指出，本发明通过随后的权利要求范围进行定义，并且将这些权利要求合理广泛地理解。
权利要求
1.式I的化合物 其中Y选自-O-、-NR12-、-S-、-SO-、-SO2-和-CR12R12-、-NSO2R14-、-NCOR13-、-CR12COR11-、-CR12OCOR13-和-CO-；Z为C或N；R1选自(a)-SO2R14，(b)-C0-3烷基-S(O)-R14，(c)-C1-6烷基-NR12R12，(d)-N(CH3)-COR13，(e)-N(CH3)-SO2R14，和(f)-SO2NR12R12；R2选自(a)氢，(b)羟基，(c)卤代，(d)未被取代的或被1-6个独立地选自氟和羟基的取代基取代的C1-3烷基，(e)-NR12R12，(f)-COR11，(g)-CONR12R12，(h)-NR12COR13，(i)-OCONR12R12，(j)-NR12CONR12R12；(k)-杂环，(l)-CN，(m)-NR12-SO2-NR12R12，(n)-NR12-SO2-R12，(o)-SO2-NR12R12，和(p)＝O；R3选自(a)氢，(b)未被取代的或被1-3个氟取代的C1-3烷基，(c)未被取代的或被1-3个氟取代的-O-C1-3烷基，(d)羟基，(e)氯代，(f)氟代，(g)溴代，(h)苯基，(i)杂环，(j)当Z为N时，R3为O，和(k)当Z为N时，R3为不存在；R4选自(a)氢，(b)未被取代的或被1-3个氟取代的C1-3烷基，(c)未被取代的或被1-3个氟取代的-O-C1-3烷基，(d)羟基，(e)氯代，(f)氟代，(g)溴代，(h)苯基，和(i)杂环；R5选自(a)未被取代的或被1-6个氟、羟基、或其两者取代的C1-6烷基，(b)未被取代的或被1-6个氟取代的-O-C1-6烷基，(c)未被取代的或被1-6个氟取代的-CO-C1-6烷基，(d)未被取代的或被1-6个氟取代的-S-C1-6烷基，(e)未被取代的或被一个或多个取代基取代的-吡啶基，取代基独立地选自卤代、三氟甲基、C1-4烷基和COR11，(f)氟代，(g)氯代，(h)溴代，(i)-C4-6环烷基，(j)-O-C4-6环烷基，(k)未被取代的或被一个或多个取代基取代的苯基，取代基独立地选自卤代、三氟甲基、C1-4烷基和COR11，(l)未被取代的或被一个或多个取代基取代的-O-苯基，取代基独立地选自卤代、三氟甲基、C1-4烷基和COR11，(m)未被取代的或被1-6个氟取代的-C3-6环烷基，(n)未被取代的或被1-6个氟取代的-O-C3-6环烷基，(o)-杂环，(p)-CN，和(q)-COR11；R6选自(a)氢，(b)未被取代的或被1-3个氟取代的C1-3烷基，(c)未被取代的或被1-3个氟取代的-O-C1-3烷基，(d)羟基，(e)氯代，(f)氟代，(g)溴代，(h)苯基，和(i)杂环；R7选自氢和未被取代的或被1-3个取代基取代的C1-6烷基，取代基独立地选自卤代、羟基、-CO2H、-CO2C1-6烷基和-O-C1-3烷基；R8选自(a)氢，(b)未被取代的或被1-6个取代基取代的C1-6烷基，取代基独立地选自氟代、C1-3烷氧基、羟基和-COR11，(c)氟代，(d)未被取代的或被1-3个氟取代的-O-C1-3烷基，(e)C3-6环烷基，(f)-O-C3-6环烷基，(g)羟基，(h)-COR11，和(i)-OCOR13，或者R7和R8一起为C2-4烷基或C0-2烷基-O-C1-3烷基，形成5-7元环；R9选自(a)氢，(b)未被取代的或被1-6个取代基取代的C1-6烷基，取代基独立地选自氟代、C1-3烷氧基、羟基、-COR11，(c)COR11，(d)羟基，和(e)未被取代的或被1-6个取代基取代的-O-C1-6烷基，取代基独立地选自氟、C1-3烷氧基、羟基、-COR11，或者R8和R9一起为C1-4烷基或C0-3烷基-O-C0-3烷基、形成3-6元环；R10选自(a)氢，和(b)未被取代的或被1-6个氟取代的C1-6烷基，(c)氟代，(d)-O-C3-6环烷基，和(e)未被取代的或被1-6个氟取代的-O-C1-3烷基，或者R8和R10一起为C2-3烷基，形成5-6元环，其中所述C2-3烷基为未被取代的或被1-3个取代基取代，取代基独立地选自卤代、羟基、-COR11、C1-3烷基和C1-3烷氧基；或者R8和R10一起为C1-2烷基-O-C1-2烷基，形成6-8元环，其中所述C1-2烷基-O-C1-2烷基为未被取代的或被1-3个取代基取代，取代基独立地选自卤代、羟基、-COR11、C1-3烷基和C1-3烷氧基；或者R8和R10一起为-O-C1-2烷基-O-，形成6-7元环，其中所述-O-C1-2烷基-O-为未被取代的或被1-3个取代基取代，取代基独立地选自卤代、羟基、-COR11、C1-3烷基和C1-3烷氧基；R11独立地选自羟基、氢、C1-6烷基、-O-C1-6烷基、苄基、苯基和C3-6环烷基，其中所述烷基、苯基、苄基和环烷基为未被取代的或被1-3个取代基取代，取代基独立地选自卤代、羟基、C1-3烷基、C1-3烷氧基、-CO2H、-CO2-C1-6烷基和三氟甲基；R12独立地选自氢、C1-6烷基、苄基、苯基和C3-6环烷基，其中所述烷基、苯基、苄基和环烷基为未被取代的或被1-3个取代基取代，取代基独立地选自卤代、羟基、C1-3烷基、C1-3烷氧基、-CO2H、-CO2-C1-6烷基和三氟甲基；R13独立地选自氢、C1-6烷基、-O-C1-6烷基、苄基、苯基和C3-6环烷基，其中所述烷基、苯基、苄基和环烷基为未被取代的或被1-3个取代基取代，取代基独立地选自卤代、羟基、C1-3烷基、C1-3烷氧基、-CO2H、-CO2-C1-6烷基和三氟甲基；R14独立地选自羟基、C1-6烷基、-O-C1-6烷基、苄基、苯基和C3-6环烷基，其中所述烷基、苯基、苄基和环烷基为未被取代的或被1-3个取代基取代，取代基独立地选自卤代、羟基、C1-3烷基、C1-3烷氧基、-CO2H、-CO2-C1-6烷基和三氟甲基；R15和R16各自为H，或R15和R16一起为-CH2CH(R2)-，形成稠环；n为0、1或2；虚线表示非必要的单键；及其可药用盐及其各自的非对映异构体。
2.式Ia表示的权利要求1的化合物 及其可药用盐及其各自的非对映异构体。
3.式Ib表示的权利要求1的化合物 及其可药用盐及其各自的非对映异构体。
4.式Ic表示的权利要求1的化合物 及其可药用盐及其各自的非对映异构体。
5.式Id表示的权利要求1的化合物 及其可药用盐及其各自的非对映异构体。
6.权利要求1的化合物，其中当Z为C时，R3为氢、氟代或三氟甲基，且当Z为N时，R3为不存在。
7.权利要求1的化合物，其中Y为-CH2-或-O-。
8.权利要求1的化合物，其中R1选自-SO2CH3、-SO2NH2、-SOCH3和-SO2NHCH3。
9.权利要求1的化合物，其中R5选自被1-6个氟取代的C1-6烷基、被1-6个氟取代的-O-C1-6烷基、氯代、溴代和苯基。
10.权利要求1的化合物，其中R8选自氢、未被取代的或被1-6个氟取代的C1-3烷基、-O-C1-3烷基、氟代和羟基。
11.选自以下的化合物
及其可药用盐及其各自的非对映异构体。
12.一种药用组合物，其包括惰性载体和权利要求1的化合物。
13.权利要求1的化合物在制备可用于治疗炎症性和免疫调节性病症或疾病的药物中的应用。
14.权利要求13的应用，其中所述病症或疾病为类风湿性关节炎。
全文摘要
本发明公开了式I的化合物(其中n、R
文档编号A61K31/47GK1972913SQ200580013054
公开日2007年5月30日 申请日期2005年4月22日 优先权日2004年4月26日
发明者杨立虎, S·G·米尔斯, R·焦 申请人:默克公司
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