一种腹可安片的质量控制方法

专利名称：：一种腹可安片的质量控制方法
技术领域：
：本发明涉及一种腹可安片的质量控制方法。
背景技术：
：腹可安片是一种用于治疗急性胃肠炎、消化不良引起的腹痛、腹泻、呕吐的中药，该产品收载于《卫生部药品标准》中药成方制剂第十一册。腹可安片由扭肚藤、火炭母、车前草、救必应、石榴皮制成，处方中，火炭母、扭肚藤、救必应均为地方习用药材，收载于广东省中药材标准(第一册)，标准号分别为粤D/WS-029-2003、粤D/WS-056-2003、粤D/WS-092-2003;车前草、石榴皮均收载于2005年版《中国药典》一部。原质量标准简单，难以有效控制成品的质量。
发明内容本发明的目的是为了提供一种能对腹可安片成品的质量进行有效控制的腹可安片的质量控制方法。为实现上述目的，本发明采取了以下的技术方案一种腹可安片的质量控制方法，所述质量控制方法采用以下鉴别和含量测定中的一种或几种(1)以体积比为14-16:1-3:0.5-1.5的甲苯-乙酸乙酯-甲酸为展开剂，采用薄层色谱法鉴别救必应；(2)以体积比为4-8:2-6:0.5-1.5的甲苯-甲酸乙酯-甲酸为展开剂，采用薄层色谱法鉴别石榴皮和火炭母；(3)以体积比为4-6:3-5:0.4-0.6的甲苯-甲酸乙酯-甲酸为展开剂，采用薄层色谱法鉴别扭肚藤；(4)采用高效液相色谱法测定救必应的有效成分紫丁香苷的含量。所述质量控制方法采用以下鉴别和含量测定中的一种或几种(1)救必应的鉴别方法取腹可安片成品10片，除去包衣，研细，加乙酸乙酯25-35ml，超声处理25-35分钟，滤过，滤液挥干，残渣加甲醇0.8-1.2ml使溶解，作为供试品溶液；另取救必应对照药材0.5g，加乙酸乙酯15-25ml，同法制成对照药材溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各lOpl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为15:2:1的甲苯-乙酸乙酯-甲酸为展开剂，展开，展距12cm，取出，晾干，喷以8%-12%硫酸乙醇溶液，在105。C加热至斑点显色清晰，日光下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(2)石榴皮和火炭母的鉴别方法取(l)项下的供试品溶液作为供试品溶液；另取没食子酸对照品，加甲醇制成每lml含0.4-0.6mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液15^1、对照品溶液5pl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为6:4:1的甲苯-甲酸乙酯-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以4%-6%三氯化铁乙醇溶液，日光下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(3)扭肚藤的鉴别方法取(l)项下的供试品溶液作为供试品溶液；另取扭肚藤对照药材0.5g，加乙酸乙酯15-25ml，超声处理25-35分钟，滤过，滤液挥干，残渣加甲醇0.8-1.2ml使溶解，制成对照药材溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10pl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为5:4:0.5的甲苯-甲酸乙酯-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以0.8-1.2%三氯化铝乙醇溶液，置波长为365nm的紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。(4)照中国药典2005年版一部附录VID高效液相色谱法测定腹可安片成品中救必应的有效成分紫丁香苷的含量以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以体积比为15:85的乙腈-水为流动相，检测波长为265nm，理论板数按紫丁香苷峰计算应不低于2500;取本品20片，糖衣片除去糖衣，精密称定，研细，取1.0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入80%甲醇25ml，密塞，称定重量，超声处理25-35分钟，取出，放冷，再称定重量，用80%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；取紫丁香苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每lml含50吗的溶液，即得对照品溶液；分别精密吸取供试品溶液与对照品溶液各10W，注入液相色谱仪，测定，即得；按照腹可安片成品计算，每片含救必应以紫丁香苷计，不少于设定值为合格。成品每片含救必应以紫丁香苷(C17H2409)计，设定值为0.03mg。上述质量控制方法并不需要按照先后顺序进行，而且同时还可以进行常规检测，如形状的观察。该成品还应符合中国药典2005年版一部附录ID片剂项下有关的各项规定。符合以上条件的腹可安片成品为合格。本发明在原有质量标准的基础上增加了救必应、扭肚藤、石榴皮的薄层色谱鉴别及救必应中紫丁香苷含量测定，本发明提高了腹可安片的质量标准，具有较强的专属性与良好的重现性，有利于实现对腹可安片成品的质量的有效控制。具体实施例方式下面结合实施例详细说明本发明。实施例1:本实施例质量控制方法选用广州中一药业有限公司生产的腹可安片(批号J01001等十批)为材料。该腹可安片的质量控制方法包括以下鉴别和含量测定方法A、鉴别(1)取本品10片，除去包衣，研细，加乙酸乙酯30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液挥干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液。另取救必应对照药材(广州市药检所标本室提供)0.5g，加乙酸乙酯20ml，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各10^1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(15:2:1)为展开剂，展开，展距12cm，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰，日光下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(2)取(1)项下的供试品溶液作为供试品溶液。另取没食子酸对照品(中检所:0831-9501)，加甲醇制成每lml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液15pl、对照品溶液5pl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-甲酸乙酯-甲酸(6:4:1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%三氯化铁乙醇溶液，日光下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(3)取(1)项下的供试品溶液作为供试品溶液。另取扭肚藤对照药材(广州市药检所标本室提供)0.5g，加乙酸乙酯20ml，超声处理30分钟，滤过，滤液挥干，残渣加甲醇lml使溶解，制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各l(Hil，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-甲酸乙酯-甲酸(5:4:0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1%三氯化铝乙醇溶液，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。B、含量测定本发明的腹可安片的质量控制方法，还包括选取处方救必应药材中紫丁香苷为含量测定指标，采用HPLC法测定本品紫丁香苷的含量。照中国药典2005年版一部附录VID高效液相色谱法对腹可安片成品中救必应药材中的紫丁香苷进行了测定，测定步骤包括(1)色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅垸键合硅胶为填充剂(色谱柱DiamonsilC18(200X4.6mm，5iim)，柱编号8022889;柱温40。C);以乙腈(色谱纯)-水(超纯水)=15:85为流动相，流速为1.0ml/min;检测波长为265nm。理论板数按紫丁香苷峰计算应不低于2500。(2)对照品溶液的制备取紫丁香苷对照品(批号111574-200201，供含量测定用，中国药品生物制品检定所提供)适量，精密称定，加甲醇制成每lml含50吗的溶液，即得。(3)供试品溶液的制备取本品20片，糖衣片除去糖衣，精密称定，研细，取1.0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入80。/。甲醇25ml，密塞，称定重量，超声处理(功率250W，频率50kHz)30分钟，取出，放冷，再称定重量，用80%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。(4)测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各lOpl，注入液相色谱仪，测定，即得。按照腹可安片成品计算，每片含救必应以紫丁香苷计，不少于设定值为合格。上述质量控制方法并不需要按照先后顺序进行，而且同时还可以进行常规检测，如形状的观察。该成品还应符合中国药典2005年版一部附录ID片剂项下有关的各项规定。符合以上条件的腹可安片成品为合格。以下对救必应药材中紫丁香苷含量测定的方法学进行考察-在该实施例中，所用仪器为岛津LC-20AT高效液相色谱仪；SPD-M20A检测器；LC-Solution色谱工作站。所用试剂中，乙腈为色谱纯；水为超纯水；其它试剂均为分析纯。1.检测波长取紫丁香苷对照品溶液，在190400nm波长范围进行扫描，结果显示紫丁香苷在220nm和265nm波长处有最大吸收，考虑到220nm波长处测定的干扰因素较多，故选择检测波长为265nm。2.色谱条件与系统适用性试验色谱柱DiamonsilC18(200x4.6薩，5,)，柱编号8022889;柱温40°C;流动相乙腈-水(15:85)，流速1.0ml/min;检测波长为265nm。理论板数按紫丁香苷峰计算，结果见表l。考虑到不同色谱柱的差异，将理论板数定为应不低于2500。供试品色谱中紫丁香苷峰与相邻峰分离度大于1.5，符合《中国药典》2005年版一部附录的有关要求。表l不同色谱柱的比较<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>3.峰纯度检查分别吸取对照品和供试品溶液，按本发明救必应中紫丁香苷含量测定项(以下简称[含量测定])下的色谱条件试验，用DAD检测器在190mn400nm波长范围对紫丁香苷色谱峰进行扫描，验证其单一性，结果显示供试品色谱中紫丁香苷峰的紫外光谱扫描图与紫丁香苷对照品紫外光谱扫描图一致，通过峰纯度曲线计算其峰纯度为98.99%。4.专属性取救必应阴性样品(广州中一药业有限公司提供)约l.Og，精密称定，按[含量测定]下供试品溶液的制备方法制备救必应阴性对照溶液。精密吸取紫丁香苷对照品溶液、供试品溶液和救必应阴性对照溶液，分别注入液相色谱仪，按含量测定项下方法测定，结果救必应阴性对照溶液色谱图中，在与紫丁香苷对照品色谱峰相应的位置上，未见有色谱峰，说明处方中的其他药味对测定无干扰。5.耐用性试验5.1提取溶剂的选择取同一批腹可安片样品(批号:L07075)，按[含量测定]项下方法分别比较甲醇、80%甲醇、50%甲醇和30。/。甲醇各25ml超声处理30分钟的提取效果，结果见表2。结果显示除了以甲醇为溶剂提取含量较低外，其他三种溶剂提取效果基本一致，以80%甲醇为溶剂提取杂质相对少，且容易过滤，故选择以80。/。甲醇为提取溶剂。表2不同提取溶剂的比较<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>5.2提取方法的选择取同一批腹可安片样品(批号L07075),以80。/。甲醇25ml为提取溶剂，分别比较加热回流1小时和超声处理30分钟的提取效果，结果见表3。结果显示两种方法提取效果差别不大，超声提取操作简便，故选用超声提取方法。表3不同提取方法的比较<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>5.3提取时间的选择取同一批腹可安片样品(批号L07075),以80。/。甲醇25ml为提取溶剂，分别比较超声15、30和45分钟的提取效果，结果见表4。结果显示上述不同超声提取时间对提取效果影响不大，为保证提取完全，选择超声提取30分钟。表4提取时间的选择<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>0.99260.7761.00200.782450.78l观40.7885.4稳定性考察取同一份供试品溶液(批号L07075),在室温放置0、2、4、8、12、24小时后分别进样，依法测定，结果见表5。紫丁香苷平均含量为0.803mg/片，RSD为0.9%(n=6)，表明供试品溶液在24小时内测定结果基本稳定。表5稳定性试验结果时间(小时)02481224含量(mg/片)0.8020.8160.8020.7940.8010.8025.5色谱柱的考察分别选用不同品牌的色谱柱，按[含量测定]项下方法测定同一供试品溶液(批号L07075)，结果见表l。紫丁香苷的平均含量为0.78mg/片，RSD为2.7。/。(n=3)，结果显示所选用的三种色谱柱均能达到系统适用性的要求。6，线性考察分别精密吸取紫丁香苷对照品溶液(浓度为0.117mg/ml)1^1、3^1、5^1、1(^1、15^1、20|il，注入液相色谱仪，依法测定。以峰面积积分值A为纵坐标，以进样量C(ng)为横坐标，绘制标准曲线(见表6)，得线性方程A=2X106C+64866，r=0.999，结果表明紫丁香苷在0.U72.34吗范围内与其峰面积线性关系良好。表6线性考察结果编号进样量(ug)平均峰面积(A)10.11725847720.35182882130.585139161741.1727754931.755402664162.3451957757.重复性试验取腹可安片同一批号(批号L07075)样品细粉约l.Og，精密称取6份，按[含量测定]项下方法制备供试品溶液，依法测定，结果见表7。紫丁香苷平均含量为0.802mg/片，RSD为0.5%(n=6)。表7重复性试验结果<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>8.准确度(以加样回收率表示)取已知含量(批号L07075，含量为0.802mg/片，即2.38mg/g)的样品粉末约0.5g，精密称取共6份，置具塞锥形瓶中，分别精密加入80%甲醇15ml和紫丁香苷对照品溶液(0.117mg/ml)10ml，称定重量，按[含量测定]项下方法制备供试品溶液，依法测定，计算回收率，结果见表8。紫丁香苷平均回收率为103.1%，RSD为1.1%(n=6)。表8加样回收试验结果取样量样品含量对照品加入量测得总量回收率<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>9.样品含量测定取收集的样品共10批，按[含量测定]项下方法制备供试品溶液，依法测定，计算供试品中紫丁香苷的含量，结果见表9。表9样品含量测定结果<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>权利要求1.一种腹可安片的质量控制方法，其特征在于所述质量控制方法采用以下鉴别和含量测定中的一种或几种(1)以体积比为14-16∶1-3∶0.5-1.5的甲苯-乙酸乙酯-甲酸为展开剂，采用薄层色谱法鉴别救必应；(2)以体积比为4-8∶2-6∶0.5-1.5的甲苯-甲酸乙酯-甲酸为展开剂，采用薄层色谱法鉴别石榴皮和火炭母；(3)以体积比为4-6∶3-5∶0.4-0.6的甲苯-甲酸乙酯-甲酸为展开剂，采用薄层色谱法鉴别扭肚藤；(4)采用高效液相色谱法测定救必应的有效成分紫丁香苷的含量。2.根据权利要求1所述的腹可安片的质量控制方法，其特征在于所述质量控制方法采用以下鉴别和含量测定中的一种或几种(1)救必应的鉴别方法取腹可安片成品10片，除去包衣，研细，加乙酸乙酯25-35ml，超声处理25-35分钟，滤过，滤液挥干，残渣加甲醇0.8-1.2ml使溶解，作为供试品溶液；另取救必应对照药材0.5g，加乙酸乙酯15-25ml，同法制成对照药材溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10^1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为15:2:1的甲苯-乙酸乙酯-甲酸为展开剂，展开，展距12cm，取出，晾干，喷以8%-12%硫酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰，日光下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(2)石榴皮和火炭母的鉴别方法取(l)项下的供试品溶液作为供试品溶液；另取没食子酸对照品，加甲醇制成每lml含0.4-0.6mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取供试品溶液15^1、对照品溶液5pl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为6:4:1的甲苯-甲酸乙酯-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以4%-6%三氯化铁乙醇溶液，日光下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(3)扭肚藤的鉴别方法取(l)项下的供试品溶液作为供试品溶液；另取扭肚藤对照药材0.5g，加乙酸乙酯15-25ml，超声处理25-35分钟，滤过，滤液挥千，残渣加甲醇0.8-1.2ml使溶解，制成对照药材溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10pl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为5:4:0.5的甲苯-甲酸乙酯-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以0.8-1.2%三氯化铝乙醇溶液，置波长为365nm的紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。(4)照中国药典2005年版一部附录VID高效液相色谱法测定腹可安片成品中救必应的有效成分紫丁香苷的含量以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以体积比为15:85的乙腈-水为流动相，检测波长为265nm，理论板数按紫丁香苷峰计算应不低于2500;取本品20片，糖衣片除去糖衣，精密称定，研细，取1.0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入80%甲醇25ml，密塞，称定重量，超声处理25-35分钟，取出，放冷，再称定重量，用80%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；取紫丁香苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每lml含50昭的溶液，即得对照品溶液；分别精密吸取供试品溶液与对照品溶液各10pl，注入液相色谱仪，测定，即得；按照腹可安片成品计算，每片含救必应以紫丁香苷计，不少于设定值为合格。3.根据权利要求2所述的腹可安片的质量控制方法，其特征在于按照腹可安片成品计算，每片腹可安片含救必应以紫丁香苷计，设定值为0.03mg。全文摘要本发明公开了一种腹可安片的质量控制方法，在原有质量标准的基础上增加了救必应、扭肚藤、石榴皮的薄层色谱鉴别及救必应中紫丁香苷含量测定，本发明提高了腹可安片的质量标准，具有较强的专属性与良好的重现性，有利于实现对腹可安片成品的质量的有效控制。文档编号A61K36/704GK101653483SQ20091019248公开日2010年2月24日申请日期2009年9月18日优先权日2009年9月18日发明者伍丽萍,何艺兰,晶孙,程艳阳,谢友莲,邱文珍,黎炳华申请人:广州中一药业有限公司