一种含有人参皂苷的药物组合物的制作方法
一种含有人参皂苷的药物组合物的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于医药技术领域，具体涉及一种含有人参皂苷的药物组合物。
【背景技术】
[0002] 癌症是常见病、多发病，对人们生命和健康有着严重威胁，对国民经济建设的影响 也是巨大的。全世界和我国的癌症发病率在逐年明显增加。我国每年新患癌症约160万人、 死于癌症者约130万人。现在我国癌症死亡的水平，全国每1分钟就有2个人死于癌症，每 天将有2800多人被癌症夺走生命，1年将相当于一个有百万人口的城市被毁灭。在美国，每 年癌症治疗费用830亿美元，占全国医疗费用的14%。几乎每个人都感受到癌症的威胁。 因为全世界每年因癌症死亡的人数高达630万人，而我国每年因癌症死亡的人数已达130 万人，并且癌症病人每年以3%的速度递增，相当于每200个家庭中就有1个家庭受到癌症 的威胁。
[0003] 目前，人人"谈癌色变"，如何预防和治疗癌症是一个世界性的难题。临床上虽然有 很大抗癌药物，但没有一种药物能完全预防和治愈癌症。人参皂苷-Rh2和-Rg3是日本学 者北川勋于1980年首先制备出，并确定其分子式。随后日本、中国、韩国、德国、美国等国家 学者也不同程度地开展了对其研宄。人参皂苷-Rh2和-Rg3是从红参（栽培人参经晒干或 烘干再蒸制而成）中微量提取的，其提取率仅为〇. 001 %和〇. 003%，因其含量太低，生产工 艺复杂，导致生产成本较高。人参皂苷-Rh2和-Rg3具有显著的抗肿瘤和提高肌体免疫功 能的活性，适合早、中、晚期肿瘤患者及免疫低下预防肿瘤发生人群服用。临床实验证实其 具有较好的抑制肺癌、肝癌、胃癌、肠癌、乳腺癌等癌细胞生长，明显改善临床症状、提高生 存质量、预防和治疗癌症、改善心脏血管功能、抗血小板凝集、保护脑神经细胞、提高机体免 疫力。直接服用具有预防癌症以及治疗癌症的功效，适用于急、重、晚期癌症患者，体质较虚 弱，服用可提高自身免疫功能，增强抗瘤能力，减轻化疗后毒副作用。人参皂苷rg3与其它 抗癌药物联合应用，其抗癌和提高肌体免疫功能方面具有更好的功效。临床上使用的参一 胶囊有效成分即为人参皂苷rg3,主要用于治疗癌症和癌症的辅助治疗。人参皂苷Rh2没有 单独成药，以其为主要成分的今辛胶囊作为保健食品销售，主要用于提高机体免疫功能和 癌症的治疗及辅助治疗。三七皂苷ftl的药理活性报道较少。
[0004] 通过药理学实验，人参皂苷_Rh2和-Rg3及三七皂苷ftl的组合物抗癌活性和增 强机体免疫功能活性均比单独使用人参皂苷-Rh2和-Rg3强，说明二者组合具有协同的药 理作用，这一发现对预防和治疗癌症的药物及保健品开发方面具有积极意义。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是提供一种新的药物组合物，该组合物包括人参皂苷Rg3、人参皂苷 Rh2和三七皂苷ftl，通过广泛而深入的研宄，发明人发现三者在一定重量比进行组方具有 协同的药理作用，具有优异的药理药效作用，在节省资源、具有更好的药效作用的基础上， 有效成分组合物具有更好的安全性。
[0006] 本发明具体通过以下技术方案实现：
[0007] -种含有人参皂苷的药物组合物，按重量百分含量包括活性成分人参皂苷Rg3 20%~70%、人参皂苷Rh2 10%~40%、三七皂苷ftl 20%~50%。
[0008] 优选的，一种含有人参皂苷的药物组合物，按重量百分含量包括活性成分人参皂 苷Rg3 30%~50%、人参皂苷Rh2 20%~30%、三七皂苷ftl 30%~40%。
[0009] 最优选的，一种含有人参皂苷的药物组合物，按重量百分含量包括活性成分人参 皂苷Rg3 40%、人参皂苷Rh2 25%、三七皂苷ftl 35%。
[0010] 本发明组合物可以按需要加工成任何口服和注射上可接受的剂型，本发明组合物 口服剂可制成片剂、糖衣片剂、薄膜衣片剂、肠溶衣片剂、胶囊剂、汤剂、口服液、口含剂、颗 粒剂、冲剂、丸剂、散剂、丹剂；注射用制剂可制成冻干粉针、静脉乳剂、注射剂、输液。口服制 剂优选为片剂、胶囊剂、颗粒剂；注射用制剂优选为冻干粉针、静脉乳剂、注射剂。
[0011] 本发明组合物其配制可由通常的本领域技术人员所公知的加工方法制备，即将活 性组分与液体溶剂或固体载体混合后，再加入填充剂、粘合剂、润湿剂、崩解剂、吸收促进 剂、溶剂、表面活性剂、香味剂、防腐剂、润滑剂、甜味剂或色素中的一种或几种。
[0012] 本发明还提供了所述组合物在预防和治疗癌症及抗癌辅助药物及提高机体免疫 力的药品或保健品中的应用。
[0013] 本发明的有益效果为：本发明组合物经试验证明可有效抑制肿瘤细胞B16和 H印G2,半数抑制浓度IC50均在40 μ g/ml以下，同时可刺激淋巴细胞增殖，增强机体免疫应 答功能，有实验数据可知小剂量组合物均没有刺激淋巴细胞分泌IL-2和IFN- γ的能力，大 剂量组合物有明显刺激刺激淋巴细胞分泌IL-2和IFN-γ。
【具体实施方式】
[0014] 下面结合实施例对本发明做进一步的说明，以下所述，仅是对本发明的较佳实施 例而已，并非对本发明做其他形式的限制，任何熟悉本专业的技术人员可能利用上述揭示 的技术内容加以变更为同等变化的等效实施例。凡是未脱离本发明方案内容，依据本发明 的技术实质对以下实施例所做的任何简单修改或等同变化，均落在本发明的保护范围内。
[0015] 实施例1注射液的制备
[0016] 称取精氨酸50g、等质量的水，搅拌均匀，加入人参皂苷Rg3 100g、人参皂苷Rh2 62g、三七皂苷ftl 88g，加热至50°C，搅拌溶解，用含9%盐酸的水溶液调pH值至4. 6,加 水至全量，搅拌均匀；再加入配液量0.1 % (g/ml)的活性炭，搅拌25分钟，粗滤脱炭；过 0. 22 μ m滤膜，得精滤液；灌封，每瓶装量2mL ;118°C热压灭菌18分钟，检验，包装，入库。
[0017] 实施例2片剂的制备
[0018] 1)将人参皂苷Rg3 16g、人参皂苷Rh2 10g、三七皂苷ftl 14g混合后搅拌均匀，得 粉末状固体；
[0019] 2)将步骤⑴所得的粉末与乳糖60g、羧甲基淀粉钠3g和微粉硅胶4. 5g混合均 匀，加入精氨酸60g制成适宜软材，20目筛制粒；
[0020] 3)羧甲基淀粉钠5. 5g和微粉硅胶2. Ig与步骤⑵所得的干颗粒混勾，压片，得片 剂。
[0021] 实施例3胶囊剂制备
[0022] 称取人参皂苷Rg3 16g、人参皂苷Rh2 10g、三七皂苷ftl 14g，加入淀粉274g，混 匀，过筛，用乙醇水溶液作为粘合剂，制成适宜软材，18目筛制粒，60°C烘箱干燥5小时，16 目筛整粒，加入2g硬脂酸镁，混匀，制得胶囊剂。
[0023] 下面结合具体的实验说明本发明组合物的在抗肿瘤方面的应用。
[0024] 实验动物：昆明小鼠购买自昆明医学院实验动物中心。
[0025] 细胞：B16黑色素瘤细胞（B16melanoma cell)和人肝癌细胞（HepG2)细胞从美国 典型细胞库（ATCC，Hanassas，VA，USA)购买获取。
[0026] 培养基：细胞培养用DMEM液培养（FBS ;HyCl〇ne，Logan，UT，USA)，培养液添加 10 % 胎牛血清（FBS ;HyClone，Logan, UT，USA)，0· 03 % L -谷氨酰胺，100U/L 青酶素， 10〇11^/1链霉素，5%恥0)2调口!1至6.8-7.0。
[0027] 样品：实验组1 :人参皂苷Rg3 30 %，人参皂苷Rh2 40 %，三七皂苷ft 1 30 %;实验 组2:人参皂苷Rg3 50 %，人参皂苷Rh2 25 %，三七皂苷ftl 25 %;实验组3:人参皂苷Rg3 70%，人参皂苷Rh2 15%，三七皂苷ftl 15%。组合物用20 μ 1二甲基亚砜（DMSO)溶解，用 于配置不同浓度的DMEM细胞培养基。紫杉醇（TAX :Paclitaxel)和顺铂（PH) :Cisplatin) 购自 Sigma Chemical 公司（St. Louis, MO)。
[0028] 设备：仪器：酶标仪 Bio-RAD 680 (USA) ;C02 培养箱 Thermo Forma 3310(美国）； 倒置生物显微镜XD-101型（南京）等。
[0029] 实施例4对肿瘤细胞的生长抑制评价
[0030] 原代培养的正常昆明鼠肾细胞，B16细胞以及!fepG2细胞以细胞密度为IXlO4/ ml接种于96孔板中培养24小时后，把普通DMEM培养基换为含有终浓度为0 μ g， 25 μ g，50 μ g，75 μ g，100 μ g不同组化合的DMEM培养基，每个浓度设3个孔，并在24小 时之后用MTT法检测细胞的活性，细胞抑制活性用抑制浓度IC 5tl(median inhibitory concentration)表示。抑制浓度（IC5tl)为细胞活性抑制率为50%时的药物浓度，计算方法 为1。5〇= (A细胞对醒_A供试样品组）/A细胞对照组-A空白组）X 100%。
[0031] MTT法：根据Mosmann建立的MTT法检测药物的细胞毒性（Y. Nakajima，Y. Saton，M. Katsumata，K. Tsujiyama，Y. Ida，and J. Shojij Phytochemistry 1994, 36, 119-127)。具体方法是：向吸去上清的细胞孔中加入0. 4mg/mL MTT，0.1 mL/孔， 37°C 5% CO2培养4h，去上清，每孔加入0.1 mL二甲基亚砜（DMS0)，孵育10min，在酶标仪上 测定溶液在570nm下的吸光度值。
[0032] 表1对肿瘤细胞的半数抑制浓度IC50 ( μ g/mL)
[0033]
【主权项】
1. 一种含有人参皂苷的药物组合物，其特征在于按重量百分含量包括活性成分人参皂 苷Rg320%~70%、人参皂苷Rh210%~40%、三七皂苷ftl20%~50%。
2. 根据权利要求1所述的一种含有人参皂苷的药物组合物，其特征在于按重量百分含 量包括活性成分人参皂苷Rg330 %~50 %、人参皂苷Rh220 %~30 %、三七皂苷ft130 %~ 40%〇
3. 根据权利要求2所述的一种含有人参皂苷的药物组合物，其特征在于按重量百分含 量包括活性成分人参皂苷Rg340%、人参皂苷Rh225%、三七皂苷ftl35%。
4. 权利要求1~3中任一项所述的组合物在制备抗癌辅助药物中的应用。
5. 权利要求1~3中任一项所述的组合物在制备提高机体免疫力的药品或保健品中的 应用。
【专利摘要】本发明公开了一种含有人参皂苷的药物组合物，按重量百分含量包括活性成分人参皂苷Rg3 20％～70％、人参皂苷Rh2 10％～40％、三七皂苷ft1 20％～50％。同时还提供了组合物在预防和治疗癌症及抗癌辅助药物及提高机体免疫力的药品或保健品中的应用。本发明组合物可有效抑制肿瘤细胞，刺激淋巴细胞增殖，具有优异的药理药效作用，在节省资源、具有更好的药效作用的基础上，有效成分组合物具有更好的安全性。
【IPC分类】A61P37-04, A23L1-29, A61P35-00, A61K31-704
【公开号】CN104814972
【申请号】CN201510181848
【发明人】沈勇, 罗杰, 邓毅, 吴亚敏, 卢文静, 苏瑞
【申请人】云南普优生物科技有限公司
【公开日】2015年8月5日
【申请日】2015年4月16日
【技术领域】
[0001] 本发明属于医药技术领域，具体涉及一种含有人参皂苷的药物组合物。
【背景技术】
[0002] 癌症是常见病、多发病，对人们生命和健康有着严重威胁，对国民经济建设的影响 也是巨大的。全世界和我国的癌症发病率在逐年明显增加。我国每年新患癌症约160万人、 死于癌症者约130万人。现在我国癌症死亡的水平，全国每1分钟就有2个人死于癌症，每 天将有2800多人被癌症夺走生命，1年将相当于一个有百万人口的城市被毁灭。在美国，每 年癌症治疗费用830亿美元，占全国医疗费用的14%。几乎每个人都感受到癌症的威胁。 因为全世界每年因癌症死亡的人数高达630万人，而我国每年因癌症死亡的人数已达130 万人，并且癌症病人每年以3%的速度递增，相当于每200个家庭中就有1个家庭受到癌症 的威胁。
[0003] 目前，人人"谈癌色变"，如何预防和治疗癌症是一个世界性的难题。临床上虽然有 很大抗癌药物，但没有一种药物能完全预防和治愈癌症。人参皂苷-Rh2和-Rg3是日本学 者北川勋于1980年首先制备出，并确定其分子式。随后日本、中国、韩国、德国、美国等国家 学者也不同程度地开展了对其研宄。人参皂苷-Rh2和-Rg3是从红参（栽培人参经晒干或 烘干再蒸制而成）中微量提取的，其提取率仅为〇. 001 %和〇. 003%，因其含量太低，生产工 艺复杂，导致生产成本较高。人参皂苷-Rh2和-Rg3具有显著的抗肿瘤和提高肌体免疫功 能的活性，适合早、中、晚期肿瘤患者及免疫低下预防肿瘤发生人群服用。临床实验证实其 具有较好的抑制肺癌、肝癌、胃癌、肠癌、乳腺癌等癌细胞生长，明显改善临床症状、提高生 存质量、预防和治疗癌症、改善心脏血管功能、抗血小板凝集、保护脑神经细胞、提高机体免 疫力。直接服用具有预防癌症以及治疗癌症的功效，适用于急、重、晚期癌症患者，体质较虚 弱，服用可提高自身免疫功能，增强抗瘤能力，减轻化疗后毒副作用。人参皂苷rg3与其它 抗癌药物联合应用，其抗癌和提高肌体免疫功能方面具有更好的功效。临床上使用的参一 胶囊有效成分即为人参皂苷rg3,主要用于治疗癌症和癌症的辅助治疗。人参皂苷Rh2没有 单独成药，以其为主要成分的今辛胶囊作为保健食品销售，主要用于提高机体免疫功能和 癌症的治疗及辅助治疗。三七皂苷ftl的药理活性报道较少。
[0004] 通过药理学实验，人参皂苷_Rh2和-Rg3及三七皂苷ftl的组合物抗癌活性和增 强机体免疫功能活性均比单独使用人参皂苷-Rh2和-Rg3强，说明二者组合具有协同的药 理作用，这一发现对预防和治疗癌症的药物及保健品开发方面具有积极意义。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是提供一种新的药物组合物，该组合物包括人参皂苷Rg3、人参皂苷 Rh2和三七皂苷ftl，通过广泛而深入的研宄，发明人发现三者在一定重量比进行组方具有 协同的药理作用，具有优异的药理药效作用，在节省资源、具有更好的药效作用的基础上， 有效成分组合物具有更好的安全性。
[0006] 本发明具体通过以下技术方案实现：
[0007] -种含有人参皂苷的药物组合物，按重量百分含量包括活性成分人参皂苷Rg3 20%~70%、人参皂苷Rh2 10%~40%、三七皂苷ftl 20%~50%。
[0008] 优选的，一种含有人参皂苷的药物组合物，按重量百分含量包括活性成分人参皂 苷Rg3 30%~50%、人参皂苷Rh2 20%~30%、三七皂苷ftl 30%~40%。
[0009] 最优选的，一种含有人参皂苷的药物组合物，按重量百分含量包括活性成分人参 皂苷Rg3 40%、人参皂苷Rh2 25%、三七皂苷ftl 35%。
[0010] 本发明组合物可以按需要加工成任何口服和注射上可接受的剂型，本发明组合物 口服剂可制成片剂、糖衣片剂、薄膜衣片剂、肠溶衣片剂、胶囊剂、汤剂、口服液、口含剂、颗 粒剂、冲剂、丸剂、散剂、丹剂；注射用制剂可制成冻干粉针、静脉乳剂、注射剂、输液。口服制 剂优选为片剂、胶囊剂、颗粒剂；注射用制剂优选为冻干粉针、静脉乳剂、注射剂。
[0011] 本发明组合物其配制可由通常的本领域技术人员所公知的加工方法制备，即将活 性组分与液体溶剂或固体载体混合后，再加入填充剂、粘合剂、润湿剂、崩解剂、吸收促进 剂、溶剂、表面活性剂、香味剂、防腐剂、润滑剂、甜味剂或色素中的一种或几种。
[0012] 本发明还提供了所述组合物在预防和治疗癌症及抗癌辅助药物及提高机体免疫 力的药品或保健品中的应用。
[0013] 本发明的有益效果为：本发明组合物经试验证明可有效抑制肿瘤细胞B16和 H印G2,半数抑制浓度IC50均在40 μ g/ml以下，同时可刺激淋巴细胞增殖，增强机体免疫应 答功能，有实验数据可知小剂量组合物均没有刺激淋巴细胞分泌IL-2和IFN- γ的能力，大 剂量组合物有明显刺激刺激淋巴细胞分泌IL-2和IFN-γ。
【具体实施方式】
[0014] 下面结合实施例对本发明做进一步的说明，以下所述，仅是对本发明的较佳实施 例而已，并非对本发明做其他形式的限制，任何熟悉本专业的技术人员可能利用上述揭示 的技术内容加以变更为同等变化的等效实施例。凡是未脱离本发明方案内容，依据本发明 的技术实质对以下实施例所做的任何简单修改或等同变化，均落在本发明的保护范围内。
[0015] 实施例1注射液的制备
[0016] 称取精氨酸50g、等质量的水，搅拌均匀，加入人参皂苷Rg3 100g、人参皂苷Rh2 62g、三七皂苷ftl 88g，加热至50°C，搅拌溶解，用含9%盐酸的水溶液调pH值至4. 6,加 水至全量，搅拌均匀；再加入配液量0.1 % (g/ml)的活性炭，搅拌25分钟，粗滤脱炭；过 0. 22 μ m滤膜，得精滤液；灌封，每瓶装量2mL ;118°C热压灭菌18分钟，检验，包装，入库。
[0017] 实施例2片剂的制备
[0018] 1)将人参皂苷Rg3 16g、人参皂苷Rh2 10g、三七皂苷ftl 14g混合后搅拌均匀，得 粉末状固体；
[0019] 2)将步骤⑴所得的粉末与乳糖60g、羧甲基淀粉钠3g和微粉硅胶4. 5g混合均 匀，加入精氨酸60g制成适宜软材，20目筛制粒；
[0020] 3)羧甲基淀粉钠5. 5g和微粉硅胶2. Ig与步骤⑵所得的干颗粒混勾，压片，得片 剂。
[0021] 实施例3胶囊剂制备
[0022] 称取人参皂苷Rg3 16g、人参皂苷Rh2 10g、三七皂苷ftl 14g，加入淀粉274g，混 匀，过筛，用乙醇水溶液作为粘合剂，制成适宜软材，18目筛制粒，60°C烘箱干燥5小时，16 目筛整粒，加入2g硬脂酸镁，混匀，制得胶囊剂。
[0023] 下面结合具体的实验说明本发明组合物的在抗肿瘤方面的应用。
[0024] 实验动物：昆明小鼠购买自昆明医学院实验动物中心。
[0025] 细胞：B16黑色素瘤细胞（B16melanoma cell)和人肝癌细胞（HepG2)细胞从美国 典型细胞库（ATCC，Hanassas，VA，USA)购买获取。
[0026] 培养基：细胞培养用DMEM液培养（FBS ;HyCl〇ne，Logan，UT，USA)，培养液添加 10 % 胎牛血清（FBS ;HyClone，Logan, UT，USA)，0· 03 % L -谷氨酰胺，100U/L 青酶素， 10〇11^/1链霉素，5%恥0)2调口!1至6.8-7.0。
[0027] 样品：实验组1 :人参皂苷Rg3 30 %，人参皂苷Rh2 40 %，三七皂苷ft 1 30 %;实验 组2:人参皂苷Rg3 50 %，人参皂苷Rh2 25 %，三七皂苷ftl 25 %;实验组3:人参皂苷Rg3 70%，人参皂苷Rh2 15%，三七皂苷ftl 15%。组合物用20 μ 1二甲基亚砜（DMSO)溶解，用 于配置不同浓度的DMEM细胞培养基。紫杉醇（TAX :Paclitaxel)和顺铂（PH) :Cisplatin) 购自 Sigma Chemical 公司（St. Louis, MO)。
[0028] 设备：仪器：酶标仪 Bio-RAD 680 (USA) ;C02 培养箱 Thermo Forma 3310(美国）； 倒置生物显微镜XD-101型（南京）等。
[0029] 实施例4对肿瘤细胞的生长抑制评价
[0030] 原代培养的正常昆明鼠肾细胞，B16细胞以及!fepG2细胞以细胞密度为IXlO4/ ml接种于96孔板中培养24小时后，把普通DMEM培养基换为含有终浓度为0 μ g， 25 μ g，50 μ g，75 μ g，100 μ g不同组化合的DMEM培养基，每个浓度设3个孔，并在24小 时之后用MTT法检测细胞的活性，细胞抑制活性用抑制浓度IC 5tl(median inhibitory concentration)表示。抑制浓度（IC5tl)为细胞活性抑制率为50%时的药物浓度，计算方法 为1。5〇= (A细胞对醒_A供试样品组）/A细胞对照组-A空白组）X 100%。
[0031] MTT法：根据Mosmann建立的MTT法检测药物的细胞毒性（Y. Nakajima，Y. Saton，M. Katsumata，K. Tsujiyama，Y. Ida，and J. Shojij Phytochemistry 1994, 36, 119-127)。具体方法是：向吸去上清的细胞孔中加入0. 4mg/mL MTT，0.1 mL/孔， 37°C 5% CO2培养4h，去上清，每孔加入0.1 mL二甲基亚砜（DMS0)，孵育10min，在酶标仪上 测定溶液在570nm下的吸光度值。
[0032] 表1对肿瘤细胞的半数抑制浓度IC50 ( μ g/mL)
[0033]
【主权项】
1. 一种含有人参皂苷的药物组合物，其特征在于按重量百分含量包括活性成分人参皂 苷Rg320%~70%、人参皂苷Rh210%~40%、三七皂苷ftl20%~50%。
2. 根据权利要求1所述的一种含有人参皂苷的药物组合物，其特征在于按重量百分含 量包括活性成分人参皂苷Rg330 %~50 %、人参皂苷Rh220 %~30 %、三七皂苷ft130 %~ 40%〇
3. 根据权利要求2所述的一种含有人参皂苷的药物组合物，其特征在于按重量百分含 量包括活性成分人参皂苷Rg340%、人参皂苷Rh225%、三七皂苷ftl35%。
4. 权利要求1~3中任一项所述的组合物在制备抗癌辅助药物中的应用。
5. 权利要求1~3中任一项所述的组合物在制备提高机体免疫力的药品或保健品中的 应用。
【专利摘要】本发明公开了一种含有人参皂苷的药物组合物，按重量百分含量包括活性成分人参皂苷Rg3 20％～70％、人参皂苷Rh2 10％～40％、三七皂苷ft1 20％～50％。同时还提供了组合物在预防和治疗癌症及抗癌辅助药物及提高机体免疫力的药品或保健品中的应用。本发明组合物可有效抑制肿瘤细胞，刺激淋巴细胞增殖，具有优异的药理药效作用，在节省资源、具有更好的药效作用的基础上，有效成分组合物具有更好的安全性。
【IPC分类】A61P37-04, A23L1-29, A61P35-00, A61K31-704
【公开号】CN104814972
【申请号】CN201510181848
【发明人】沈勇, 罗杰, 邓毅, 吴亚敏, 卢文静, 苏瑞
【申请人】云南普优生物科技有限公司
【公开日】2015年8月5日
【申请日】2015年4月16日
最新回复(0)