一种桂枝茯苓制剂的制备工艺和质量控制方法
一种桂枝茯苓制剂的制备工艺和质量控制方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种桂枝茯苓制剂的制备工艺和质量控制方法。
【背景技术】
[0002] 桂枝茯苓丸始载于汉代张仲景所著《金匮要略》中的名方，收于妇女妊娠病脉症并 治第二十，善治妇人宿有癥块，妊娠胎病，漏下不止，及淤血所致痛经闭经，癥结痞块，是著 名的活血化瘀方剂。桂枝茯苓丸由桂枝、茯苓、芍药、桃仁和丹皮组成，方中以桂枝为主药温 通血脉；茯苓健脾渗湿，扶正养胎；芍药养血和营；桃仁、丹皮消瘀血、破癥积，祛瘀生新；合 而为方，使攻坚而不伤正，消瘀而不伤阴，是活血化瘀，散结消，治疗妇科癥瘕的有效方剂。 近年来广泛用于治疗妇科子宫肌瘤、卵巢囊肿、子宫内膜异位症、陈旧性宫外孕、盆腔淤血 综合症、人工流产后恶露不尽、不孕滑胎等妇科常见病或多发病，临床效果良好。
[0003] 《金匮要略》中桂枝茯苓丸处方的制剂和服用方法为，取桂枝、茯苓、牡丹>、桃 仁 <去皮尖m芍药各等分。右五味，末之，炼蜜和丸，如兔屎大，每日食前服一丸，不知，加至三 丸。
[0004] 《中国药典》2010年版一部共收载两个桂枝茯苳制剂剂型，一为"桂枝茯苳丸"，处 方：桂枝、茯苓、牡丹皮、赤芍、桃仁各l〇〇g。一为"桂枝茯苓胶囊"，处方：桂枝、茯苓、牡丹 皮、白芍、桃仁各100g。除此之外，我国已经有40余个厂家生产"桂枝茯苓制剂"，涉及十多 个新剂型，影响范围广泛。
[0005] 《中国药典》2005年版和2010年版中均收载了"桂枝茯苓丸"，该制剂是采用传 统的塑制法制备的蜜丸制剂。该制剂以药材粉末入药，蜂密为粘合剂和成型剂，制备成蜜 丸，具有生产步骤多（药材净选，粉碎、炼蜜、和陀、制丸、塑料盒包装、挂蜡密封等工艺）、 生产周期长、辅料用量大、菌检指标难于控制、挥发性成分容易损失、贮存过程中容易吸 潮、易发霉或生虫，在使用过程中具有服用量大、服用携带不方便，且制剂崩解速度慢，药 效缓慢。为此人们对桂枝茯苓丸进行了大量的制剂工艺研宄，制备了多种制剂剂型，从很 大程度上解决了上述丸剂剂型的缺点，并对多种制剂工艺和剂型申请了国家专利。如申 请号为03121130. 5的发明涉及用桂枝茯苓丸的配方制成的中药片剂及其制备工艺，其 特点是提取桂枝茯苓组方中的有效物质后，加辅料干膏粉和微晶纤维素制成。申请号为 200510060814. 5的专利涉及一种桂枝茯苓滴丸及其制备方法，是由桂枝茯苓处方经过提 取后，加上基质滴制成的。申请号为200410069115. 2的专利公开了一种桂枝茯苓口腔崩 解片及其制备方法，其特征在于它是由中药桂枝、茯苓、牡丹皮、赤芍、桃仁中提取的有效部 位和药用辅料组成。申请号为200410041212. 0的专利公开了一种治疗妇科血瘀症疾病的 药物的制备方法，它以中草药桂枝、茯苓、牡丹皮、白芍和桃仁为原料，其特征在于，其步骤 是分别制取桂枝桃仁浸膏、茯苓浸膏、牡丹皮白芍浸膏、肉桂油环糊精包合物、丹皮酚 β -环糊精包合物，加入常规药用辅料制成。申请号为200710166287. 5的专利公开了一种 桂枝茯苓制剂的制备方法。用水提取药物，结合现代的浓缩、制粒工艺，可以制备成颗粒剂、 片剂、胶囊、散剂、滴丸剂等制剂形式。申请号为200810150311. 0的发明涉及一种桂枝茯 苓组合物，该组合物是用如下方法制备的：取等量的过10~24目筛的桂枝、茯苓、桃仁、赤 芍、牡丹皮五味药；桂枝、牡丹皮、赤芍、桃仁四味药进行混合萃取，收集萃取物，备用；将以 上药渣与茯苓混合进行醇提后再进行水提，合并滤液，浓缩得浸膏；此浸膏与上述萃取物合 并，混匀加工制成制剂。申请号为200510111422. 7的发明公开了一种桂枝茯苓溶液型固 体分散物，组分和重量含量包括：桂枝茯苓提取物5~40 %，增溶剂5~40 %，载体20~ 90 %。申请号为 200410004560. (K200410100866. 6、200410056834· (K200410100867. 0、 200410080321. 3、200510070657. 6等发明均公开了一种桂枝茯苓软胶囊及其制备方法。其 核心是将桂枝茯苓丸中的药物经过提取后与辅料混匀后制成软胶囊内容物，再制备成软胶 囊。申请号为200410040500. 4和200510200475. 6的发明同样是将桂枝茯苓丸经过提取制 备成分散片、软胶囊剂、微丸或滴丸等制剂。申请号为200610200120. 1的发明提供了一种 桂枝茯苓泡腾片及制备方法和质量控制方法。以上发明均是针对传统丸剂的缺点进行的研 宄，具有体积小、易携带、制剂稳定、易于服用等优点。
[0006] 但是，上述专利并没有充分考虑到中药复方治疗疾病的作用机理与有效成分间的 相互关系，研宄表明：桂枝茯苓制剂的临床疗效是处方中的多种有效成分共同作用的结果， 其中就包含有桂枝中的桂皮醛、2-甲氧基桂皮醛、桂皮酸、桂皮醇、香豆素及原儿茶酸等化 合物；丹皮中的丹皮酚、芍药甙、芍药苷元、丹皮甙、丹皮原甙、丹皮新甙、6-羟基香豆素等 化合物；桃仁的苦杏仁苷、野樱苷、脂肪酸甘油脂、蛋白质等成分；芍药中的芍药苷，羟基芍 药苷、芍药内酯苷，苯甲酰羟基芍药苷，苯甲酰芍药苷、芍药花苷、氧化芍药苷、芍药苷元，芍 药新苷、没食子酰芍药苷；茯苓中含有的三萜类成分，如羊毛留-8-烯型三萜；羊毛留_7， 9(11)-二烯型三萜；3,4_开环-羊毛甾_7,9(11)二烯型三萜以及多糖类成分。因此，如 果将桂枝茯苓方进行提取，随着提取方法和溶剂的不同，会造成相应有效成分的损失和减 少，相应的临床疗效就会明显降低。如日本学者濑户隆子通过桂枝茯苓丸中10种指标成分 (肉桂醛、肉桂酸、三油酸甘油醋、苦杏仁苷、茯苓酸、苯甲酸、苟药苷、没食子酰芍药苷、五没 食子酰葡萄糖及丹皮酚）进行定量，探讨了桂枝茯苓不同制剂剂型因制剂工艺的差异导致 有效成分的差异以及提取物制备过程中成分的变化。研宄结果表明：在煎剂中苦杏仁苷、芍 药苷及苯甲酸含量明显高于颗粒剂；而丹皮酚及肉桂醛等精油成分只有30%~40% ;而具 有抗凝血作用的三油酸甘油酯以及具有镇吐、抗炎作用的茯苓酸在煎剂中未被检出。因此， 认为煎剂与生药粉末的成分存在明显差异。进一步研宄表明：采用喷雾干燥法制备的浸膏， 则几乎不含丹皮酚及肉桂醛；苦杏仁苷及五没食子酰葡萄糖的相对含量分别减少至1/2和 1/3,其他成分亦有所减少。由于制剂中有效成分数量和含量的巨大差异，导致在临床上疗 效的明显不同，日本学者研宄认为：桂枝茯苓丸剂改善外周循环作用优于煎剂的作用，寺泽 等用桂枝茯苓丸煎剂及传统方法制备的丸剂治疗雷诺现象与手指屈曲受限时，仅丸剂有显 著效果。
[0007] 在对丸剂和煎剂中主要化学成分进行定量测定，结果发现丸剂中桂皮醛的含量是 煎剂的2倍，而芍药苷的含量丸剂是煎剂的6倍。在蜜丸与其他剂型比较后发现，蜜丸与空 气的接触面积减到最小，可以防止桃仁等所含的脂肪酸类物质在空气中氧化，可抑制肉桂 醛等挥发性成分的散逸，防止因潮湿而酶解。因此，与其他剂型相比，改善微循环服用蜜丸 效果最好。
[0008] 我们也比较了在我国已经上市的桂枝茯苓胶囊和桂枝茯苓丸中桂皮酸、桂皮醛、 丹皮酚的含量，结果表明：以每次服用量中3个成分的含量计算，蜜丸中桂皮酸的含量是胶 囊剂的4. 94倍，桂皮醛含量是胶囊剂的9. 48倍，丹皮酚的含量是胶囊剂的6. 23倍。说明 胶囊剂中有效成分含量明显低于蜜丸制剂，会严重地影响到制剂的临床疗效。
[0009]由于桂枝茯苓方的临床疗效作用机理仍不清楚，构效关系以及成分间相互作用的 机理仍不明确，因此，无根据的随意对原制剂进行工艺研宄、改变剂型都会严重地影响到药 物的有效性，是不可取的。
[0010]由于桂枝茯苓的传统蜜丸是以蜂蜜为黏合剂，采用塑制法制备成的大蜜丸制剂。 该制剂在生产过程中存在着生产步骤多（药材净选，粉碎、炼蜜、和陀、制丸、塑料盒包装、 挂蜡密封等工艺）、生产周期长、辅料用量大、菌检指标难于控制、挥发性成分容易损失；在 使用过程中具有服用量大、服用携带不方便；贮存过程中容易吸潮、发霉或生虫等问题。采 用水丸制备方法，可以有效减少服用剂量，但是水丸的制备方法是采用工艺流程为：原料的 准备一起模一泛制成型一盖面一干燥一选丸一包衣一打光一质量检查一包装。由于采用的 泛制成型的工艺，具有机械化程度低、工作劳动强度大、工艺过程长、卫生学指标难于控制、 崩解时限长、丸重差异难于控制、尾料多等问题，因此严重影响到该制剂的临床应用。在蜜 丸剂型中作为粘合剂的蜂蜜约占蜜丸重量的一半左右，因此我们在综合去除蜂蜜这一古老 粘合剂的基础上，采用现代粘合剂，并加入适量的高效崩解剂，摒弃水丸中传统泛制法的工 艺，采用现代压制法工艺成型，既有效地减少了药物的服用剂量、又有效的提高了制剂的崩 解时限、缩短生产周期、制剂丸重差异小，减少细菌的污染，同时采用薄膜包衣工艺以提高 制剂的稳定性。实践证明该生产工艺具有生产步骤少、生产周期短、生产机械化程度高、制 剂质量稳定、患者服用剂量小、服用方便等优点。为蜜丸的剂型改造提供了新的途径。
【发明内容】
[0011] 本发明的目的就是提供一种新的制备桂枝茯苓丸的方法和质量控制方法。本发 明在深入研宄了现有桂枝茯苓制剂的化学成分、作用机理、构效关系以及目前桂枝茯苓制 剂剂型存在的问题，提出了新的制剂技术，同时深入研宄了桂枝茯苓中有效成分的含量测 定方法，提出了系统的质量控制方法。本发明提供的制剂剂型，具有生产步骤少、生产周期 短、生产机械化程度高、制剂质量稳定、有效成分含量高、崩解迅速、生物利用度高、服用剂 量小、服用方便、菌检符合规定等优点。
[0012] 本发明桂枝茯苓制剂的制备方法的特点是全面保存桂枝茯苓中的有效成分，减少 有效成分的损失，因此本发明并不改变桂枝茯苓方的组成，即桂枝茯苓方中各药材（桂枝、 茯苓、桃仁、芍药及牡丹皮）的重量比为1 : 1 : 1 : 1 : 1。所述桂枝为樟科植物肉桂 Cinnamomum cassia Presl的干燥嫩枝或树皮，据考证唐代以前本草中所述的桂枝应为樟 科植物肉桂Cinnamomum cassia Presl的干燥树皮，唐代后本草中桂枝逐步演变成樟科植 物肉桂C. cassia Presl的干燥嫩枝，因此本发明的桂枝应包含了《中国药典》2005年版中 收载的"肉桂"和"桂枝"。所述茯苓为多孔茵科真菌茯苓Poria cocos (Schw.) Wolf的干 燥菌核。所述牡丹皮为毛莨科植物牡丹组Sect. Paeonia中的牡丹Paeonia suffrutico Andr.、四川牡丹P.szechuanica Fang.、野牡丹P.delavayi Franch.及其变种的干燥根 皮。所述苟药为毛莨科植物苟药组Sect. Paeonia中的苟药Paeonia lactiflora Pall·， 美_苟药 P.mairei L6vl.，白花苟药 Ρ· sterniana Fletcher.，草苟药 P.obovata Maxim.， 新疆苟药 P.sinjiangensis K.Y.Pang·，窄叶苟药 P.anomala Linn.和川苟药 P.veitchii Lynch.及其变种的干燥根。所述桃仁为蔷薇科植物桃Prunus persica(L.)Batsch或山桃 P. davidiana(Carr. )Franch.的干燥成熟种子。
[0013] 本发明具体制备工艺包括以下步骤，（1)取桂枝、茯苓、牡丹皮、芍药、桃仁药材，分 别拣去杂质和非药用部分，清洁，干燥，称量配齐。（2)取桂枝、茯苓、牡丹皮、赤芍、桃仁药 材，分别粉碎成粉末或混合粉碎成粉末，过筛，混合均匀，备用。（3)取上述药材粉末，加粘合 剂混合制成合适的软材，制粒，干燥，整粒，备用。（4)取制备好的颗粒，加入崩解剂和润滑剂 混合均匀，置压片机上，压制成球形丸子。（5)取步骤（4)压制成的药丸，包薄膜衣。
[0014] 进一步，所述桂枝为樟科植物肉桂Cinnamomum cassia Presl的干燥嫩枝或树皮， 即《中国药典》2005年版收载的"桂枝"和"肉桂"，优选桂枝。
[0015] 进一步，所述牡丹皮为毛莨科植物牡丹组Sect. Paeonia中的牡丹Paeonia suffrutico Andr.、四川牡丹P. szechuanica Fang.，野牡丹P. delavayi Franch.及其变种 的干燥根皮。优选牡丹的干燥根皮。
[0016] 进一步，所述苟药为毛莨科植物苟药组Sect. Paeonia中的苟药Paeonia lactiflora Pali.，美_苟药 P.mairei L6vl.，白花苟药 P. sterniana Fletcher.，草苟药 P.obovata Maxim·，新疆苟药 P.sinjiangensis K.Y.Pang·，窄叶苟药 P.anomala Linn.和 川芍药P.veitchii Lynch.及其变种的干燥根。优选芍药和川芍药的根皮。
[0017] 进一步，制备工艺步骤（2)所述的粉碎，也可将苦杏仁与芍药混合后粉碎，可以避 免苦杏仁粉碎和过筛的困难。
[0018] 进一步，制备工艺步骤（2)所述的粉末，为药学上所述粉末，包括本领域熟知的细 粉（粉末粒径< 180 μ m±7. 6 μ m)、最细粉（粉末粒径< 150 μ m±6. 6 μ m)、极细粉（粉末 粒径< 90 μm±4. 6 μm)或超微粉（粉末粒径< 25 μm)。优选最细粉、极细粉、超微粉；更 优选极细粉、超微粉。
[0019] 进一步，制备工艺步骤（3)所述的粘合剂为药学上可接受的载体，为本领域熟知 用于制备上述制剂的常用粘合剂，例如淀粉、变性淀粉、预凝胶淀粉、糊精、白糊精、麦芽糖 糊精；液体葡萄糖、菌核葡聚糖、葡萄糖、葡聚糖、蜂蜜、蔗糖、球形蔗糖、可压糖、糖果糖；桃 胶、麦芽糖醇、角叉菜胶、罗望子胶、果葡糖浆、转化糖、果糖、刺梧桐胶、明胶、黄原胶、愈创 木胶、槐豆胶；海藻酸、海藻酸钠、海藻酸钾、海藻酸铵、海藻酸钙；普鲁兰多糖、泊洛沙姆； 乙基甲基纤维素、乙基纤维素、粉状纤维素、羟乙基甲基纤维索、羟乙基纤维素、羟丙甲基纤 维素、羟丙基纤维素、微晶纤维素、蔗渣再生物、羧甲基纤维素钠、羧甲基纤维素钙；聚丙烯 酸钠、聚丙烯酸、聚维酮、乙烯吡咯烷酮-醋酸乙烯酯共聚物、磷酸淀粉钠等。也可选用桂枝 茯苓处方中茯苓作为粘合剂。优选淀粉、预凝胶淀粉、变性淀粉、糊精、明胶、角叉菜胶、桃 胶、黄原胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、羟乙基纤维物、聚 维酮、茯苓；更优选为预凝胶淀 粉、变性淀粉、糊精、黄原胶、羧甲基纤维素钠、羟乙基纤维素、聚维酮、茯苓。
[0020] 进一步，制备工艺步骤（4)中所述的崩解剂为药学上可接受的载体，为本领域熟 知用于制备上述制剂的常用崩解剂，例如变性淀粉、淀粉、淀粉甘醇酸钠、淀粉乙醇酸钠、预 凝胶淀粉、羧甲基淀粉钠、羟丙基淀粉、甲基纤维素、低取代羟丙基纤维素、羟乙基甲基纤维 素、微晶纤维素、粉状纤维素、羧甲基纤维素、羧甲基纤维素钙、甘氨酸、交联羧甲基纤维素 钠、交联聚维酮、刺梧桐胶、海藻酸、海藻酸钠、氧化硅、胶体二氧化硅、硅酸镁铝、微生物藻 酸盐、聚乙烯氧化偶氮酮、蔗糖脂肪酸酯、蔗糖单月桂酸酯、蔗糖单棕榈酸酯。优选淀粉、羧 甲基淀粉、羟丙基淀粉、交联聚维酮、低取代羟丙基纤维素、微晶纤维素。
[0021] 进一步，制备工艺步骤（4)中所述的润滑剂为药学上可接受的载体，为本领域熟 知用于制备上述制剂的常用润滑剂，例如二氧化硅、二十烷基硫酸钠、十二烷基硫酸镁、 十八烷基富马酸钠、虫白蜡、环聚二甲基硅氧烷、氢氧化铝、亮氨酸、脂肪酸聚甘油酯、胶性 二氧化硅、硅酸、硅酸钙、硅酸铝、硅酸铝钙、硅酸镁、硬脂酸钠、硬肥皂、硬脂酸钠、硬脂酸 钴、硬脂酸锌、硬脂酸镁、滑石粉、棕榈酸钠、聚乙二醇、蔗糖脂肪酸酯、蔗糖单月桂酸酯、蔗 糖单棕榈酸酯、磷酸钙。优选硬脂酸镁、滑石粉、聚乙二醇、二氧化硅。
[0022] 进一步，制备工艺步骤（5)中压制成的药丸，根据外观的需要，可以进行增圆工 艺，即，将压制好的药丸置泛丸锅中边翻滚边分次加入2~15%药物粉末，进行增圆，以达 到药丸圆整、丸面光洁。
[0023] 进一步，制备工艺步骤（5)所述的包衣材料为药学上可接受的载体，为本领域熟 知用于制备上述制剂的常用包薄膜衣材料，例如纤维素衍生物类、聚乙二醇类、丙烯酸及 甲基丙烯酸酯共聚物类、聚乙烯缩乙醛二乙胺乙酯及其它成膜材料。其中纤维素衍生物 类有羟丙基甲基纤维素（HPMC)、乙基纤维素（EC)、羟丙基纤维素（HPC)、甲基羟乙基纤维 素（MHEC)、甲基纤维素（MC)、羧甲基纤维素钠（CMC-N a)等。聚乙二醇类（PEG)分子量为 4000~8000。丙烯酸树脂类，如：丙烯酸树脂II、III，丙烯酸II号树脂，HPMC与丙烯酸 树脂II号混合物，胃溶丙烯酸树脂IV号，HPMC和丙烯酸树脂IV号混合物。丙烯酸及甲 基丙烯酸酯共聚物，聚乙烯醇缩乙醛二乙胺乙酯（AEA)，欧巴代以及天然高分子材料玉米朊 (zein)，合成的高分子材料聚乙烯吡咯烷酮（聚维酮、PVP)，聚乙烯-乙烯吡啶共聚体等薄 膜衣材料。
[0024] 本发明还提供了桂枝茯苓丸中有效成分的质量控制方法。即采用高效液相色谱法 对桂枝茯苓丸中桂皮醛、桂皮酸、丹皮酚、芍药苷、苦杏仁苷进行了含量测定。为有效控制桂 枝茯苓丸的控制方法提供了科学依据。具体方法是：
[0025] 1.桂枝茯苓丸中桂皮酸、桂皮醛和丹皮酚的含量测定：用十八烷基硅烷键合硅胶 为填充剂；乙腈-磷酸溶液为流动相；检测波长为200~400nm。取桂枝茯苓丸，除去包衣， 研成粉末，精密称取〇. lg，置IOml量瓶中，加50 %甲醇适量，超声提取30分钟，取出，放至 室温，补足溶剂至刻线，摇匀，用0. 45 μ m的微孔滤膜滤过，滤液作为供试品溶液。另精密称 取肉桂酸对照品、桂皮醛对照品、丹皮酚对照品，加50%甲醇溶解并制备成含每ml溶液含 桂皮酸10 μ g、桂皮醛50 μ g、丹皮酚100 μ g的溶液，做为对照品溶液。分别精密吸取供试 品溶液、对照品溶液各10 μ 1，在上述色谱条件下注入液相色谱仪，测定，即得。见附图1，2， 3,4〇
[0026] 进一步，乙腈-磷酸溶液组成的流动相中磷酸的浓度为0. 001~5%，优化浓度为 0. 01~1%，更优条件为0. 1~0. 5% ;检测波长为200~400nm，优化检测波长为250~ 350nm，更优条件为270~300nm，最优条件为桂皮酸检测波长270nm，桂皮醛和丹皮酚检测 波长280~290nm。
[0027] 2.桂枝茯苓丸中芍药苷含量测定：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-磷 酸流动相；检测波长为230nm ;柱温为20~50°C。取桂枝茯苓丸细粉I. 5g，精密称定，置 25ml具塞锥形瓶中，精密加入75%乙醇25ml，称重，超声30min，放冷，再称重，用75%乙醇 补足减失的重量，离心，取上清液IOml置热水浴中蒸干，精密加入2ml水溶解，过固相萃取 柱，用甲醇洗脱，收集洗脱液置IOml容量瓶中，定容。过0. 45 μ m微孔滤膜，收集续滤液即 得供试品溶液。精密称定芍药苷对照品，加甲醇溶解并制备成每ml含0. 5mg的溶液，即为 对照品溶液。分别精密吸取供试品溶液、对照品溶液各10 μ 1，在上述色谱条件下注入液相 色谱仪，测定，即得。见附图5,6。
[0028] 进一步，甲醇-磷酸组成的流动相中磷酸的浓度为0.001~5%，优化浓度为 0. 01~1 %，更优条件为0. 1~0. 5 % ;柱温为20~50 °C，优化温度为30~40 °C，更优温 度为30°C ;固相萃取柱为分析上常用的，包括反相固相萃取柱、硅胶正相固相萃取柱，氧化 铝固相萃取柱，大孔吸附树脂固相萃取柱，活性碳固相萃取柱，硅藻土固相萃取柱等。优化 固相萃取柱为反相固相萃取柱，硅胶正相固相萃取柱，氧化铝固相萃取柱，大孔吸附树脂固 相萃取柱。更优化固相萃取柱为反相固相萃取柱，氧化铝固相萃取柱，大孔吸附树脂固相萃 取柱。最优化固相萃取柱为氧化铝固相萃取柱。
[0029] 3.桂枝茯苓丸中苦杏仁苷含量测定：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相 为甲醇-乙腈-磷酸溶液系统；检测波长为200~250nm ;柱温为20~40°C。取桂枝茯苳 丸细粉3g，精密称定，置50ml具塞锥形瓶中，精密加入80%甲醇50ml，称重，放置一夜，称 重，用80%甲醇补足减失的重量，超声30min，放冷，再称重，用80%甲醇补足减失的重量， 离心，取上清液IOml置热水浴中蒸干，精密加入2ml水溶解，上固相萃取柱，用50%甲醇洗 脱，收集洗脱液置IOml容量瓶中，定容。过0. 45 μ m微孔滤膜，收集续滤液即得供试品溶液。 精密称定苦杏仁苷对照品，加甲醇制备成每ml含Img的溶液，即得对照品溶液。分别精密 吸取供试品溶液、对照品溶液各10 μ 1，在上述色谱条件下注入液相色谱仪，测定，即得。见 附图7,8。
[0030] 进一步，甲醇-乙腈-磷酸组成的流动相中磷酸的浓度为0. 001~5%，优化浓度 为0. 01~1 %，更优条件为0. 1~0. 5% ;柱温为20~50°C，优化温度为30~40°C，更优 温度为30°C ;固相萃取柱为分析上常用的，包括反相固相萃取柱、硅胶正相固相萃取柱，氧 化铝固相萃取柱，大孔吸附树脂固相萃取柱，活性碳固相萃取柱，硅藻土固相萃取柱等。优 化固相萃取柱为反相固相萃取柱，硅胶正相固相萃取柱，氧化铝固相萃取柱，大孔吸附树脂 固相萃取柱。更优化固相萃取柱为反相固相萃取柱，氧化铝固相萃取柱，大孔吸附树脂固相 萃取柱。最优化固相萃取柱为氧化铝固相萃取柱。
[0031] 采用本发明制备的桂枝茯苓丸具有具有生产步骤少、生产周期短、生产机械化程 度高、制剂质量稳 定、患者服用剂量小、服用方便、患者乐于接受等优点。采用本发明制备的 桂枝茯苓丸可以很好的保留制剂中的有效成分，为中药蜜丸的剂型改造提供了新的途径。
【具体实施方式】
[0032] 以下通过实施例来进一步描述本发明，应该理解的是，这些实施例仅用于例证的 目的，决不限制本发明的范围。
[0033] 实施例1.桂枝茯苓丸的制备
[0034] 1.处方：桂枝60g茯苳60g苟药60g牡丹皮60g桃仁60g
[0035] 2.制法：以上五味，桂枝、茯苓、牡丹皮分别粉碎成极细粉，过筛，混匀，备用；芍 药、桃仁混合粉碎成极细粉，过筛，备用；将上述粉末混合均匀，加5%淀粉浆湿法制粒，置 50°C烘箱中干燥，整粒，加入总重量10%乳糖和0. 3%硬脂酸镁混合均匀，压制成1000丸， 包薄膜衣，即得。
[0036] 3.性状：本品为粉红色薄膜衣丸剂，丸芯为浅褐白色，气特异，味甜。
[0037] 4.规格：0· 3g/ 丸。
[0038] 5.按上述生产工艺制备了三批样品，生产工艺和理化性质如下表
[0039] 3批生产工艺结果
[0040]
【主权项】
1. 一种桂枝茯苓丸的新的制备方法。其特征在于不同于塑制法、泛制法或滴制法等传 统丸剂制备方法不同，采用压制方法进行制备。 (1) 处方为：桂枝60g茯苳60g牡丹皮60g苟药60g桃仁60g (2) 取桂枝、茯苓、牡丹皮、芍药、桃仁药材，分别拣去杂质和非药用部分，清洁，干燥，称 量配齐。 (3) 取桂枝、茯苓、牡丹皮、赤芍、桃仁药材，分别粉碎成粉末或混合粉碎成粉末，过筛， 混合均匀，备用。 (4) 取上述药材粉末，加粘合剂混合制成合适的软材，制粒，干燥，整粒，备用。 (5) 取制备好的颗粒，加入崩解剂和润滑剂混合均匀，置压片机上，压制成球形丸子。 (6)取步骤（5)压制成的药丸，包薄膜衣。
2.权利要求1所述的桂枝为樟科植物肉桂Cinnamomum cassia Presl的干燥嫩枝或树 皮。 3?权利要求1所述的牡丹皮毛莨科植物牡丹组Sect. Paeonia中的牡丹Paeonia suffrutico Andr?、四川牡丹P. szechuanica Fang.，野牡丹P. delavayi Franch?及其变种 的干燥根皮。优选牡丹的干燥根皮。 4?权利要求1所述的芍药毛莨科植物芍药组Sect. Paeonia中的芍药Paeonia lactoflora Pali.，美_苟药P.mairei L6vl?，白花苟药P. sterniana Fletcher.，草苟药 P.obovata Maxim?，新疆苟药P.sinjiangensis K.Y.Pang?，窄叶苟药P.anomala Linn?和 川芍药P.veitchii Lynch.及其变种的干燥根。优选芍药和川芍药的根皮。
5. 权利要求1所述的粉末，为药学领域熟知的粉末，包括细粉（粉末粒径 < 180ym+7. 6ym)、最细粉（粉末粒径< 150ym±6. 6ym)、极细粉（粉末粒径 < 90ym± 4. 6ym)或超微粉（粉末粒径< 25ym)。优选最细粉、极细粉、超微粉；更优选 极细粉、超微粉。
6. 权利要求1所述的桂枝茯苓丸，其特征在于为药学领域熟知的常用粘合剂，也可选 用桂枝茯苓处方中茯苓作为粘合剂。更优选为预凝胶淀粉、变性淀粉、糊精、黄原胶、羧甲基 纤维素钠、羟乙基纤维素、聚维酮、茯苓。
7. 权利要求1所述的桂枝茯苓丸，其特征在于崩解剂为药学领域熟知的常用崩解剂， 优选淀粉、羧甲基淀粉、羟丙基淀粉、交联聚维酮、低取代羟丙基纤维素、微晶纤维素。
8. 权利要求1~6所述的桂枝茯苓丸的含量控制方法，其特征在于该方法中桂皮酸、桂 皮醛和丹皮酚的含量测定方法为：采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-磷酸溶液 为流动相；检测波长为200~400nm。供试品溶液的制备：取桂枝茯苓丸，除去包衣，研成粉 末，精密称取0.lg，置IOml量瓶中，加50%甲醇适量，超声提取30分钟，取出，放至室温，补 足溶剂至刻线，摇匀，用〇. 45ym的微孔滤膜滤过，即得。对照品溶液的制备：另精密称取肉 桂酸对照品、桂皮醛对照品、丹皮酚对照品，加50%甲醇溶解并制备成含每ml溶液含桂皮 酸10Ug、桂皮醛50yg、丹皮酚100yg的溶液，即得。测定法：分别精密吸取供试品溶液、 对照品溶液各10U1，在上述色谱条件下注入液相色谱仪，测定，即得。
9. 权利要求1~6所述的桂枝茯苓丸的含量控制方法，其特征在于该方法中芍药苷的 含量测定方法为：采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-磷酸流动相；检测波长为 230nm;柱温为20~50°C。供试品溶液的制备：取桂枝茯苓丸细粉I. 5g，精密称定，置25ml 具塞锥形瓶中，精密加入75 %乙醇25ml，称重，超声30min，放冷，再称重，用75 %乙醇补足 减失的重量，离心，取上清液IOml置热水浴中蒸干，精密加入2ml水溶解，过固相萃取柱，用 甲醇洗脱，收集洗脱液置IOml容量瓶中，定容。过0. 45ym微孔滤膜，收集续滤液即得供试 品溶液。对照品溶液的制备：精密称定芍药苷对照品，加甲醇溶解并制备成每ml含0. 5mg 的溶液，即为对照品溶液。测定法：分别精密吸取供试品溶液、对照品溶液各10U1，在上述 色谱条件下注入液相色谱仪，测定，即得。
10.权利要求1~6所述的桂枝茯苓丸的含量控制方法，其特征在于该方法中苦杏仁苷 的含量测定方法为：采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相为甲醇-乙腈-磷酸溶 液系统；检测波长为200~250nm;柱温为20~40°C。供试品溶液的制备：取桂枝茯苓丸细 粉3g，精密称定，置50ml具塞锥形瓶中，精密加入80%甲醇50ml，称重，放置一夜，称重，用 80%甲醇补足减失的重量，超声30min，放冷，再称重，用80%甲醇补足减失的重量，离心， 取上清液IOml置热水浴中蒸干，精密加入2ml水溶解，上固相萃取柱，用50%甲醇洗脱，收 集洗脱液置IOml容量瓶中，定容。过0.45um微孔滤膜，收集续滤液即得供试品溶液。对 照品溶液的制备：精密称定苦杏仁苷对照品，加甲醇制备成每ml含Img的溶液，即得对照品 溶液。测定法：分别精密吸取供试品溶液、对照品溶液各10U1，在上述色谱条件下注入液 相色谱仪，测定，即得。
【专利摘要】本发明提供了一种桂枝茯苓丸新的制备方法和质量控制方法。具有生产步骤少、生产周期短、生产机械化程度高、制剂质量稳定、有效成分含量高、崩解迅速、生物利用度高、服用剂量小、服用方便等优点。本发明还提供了桂枝茯苓丸中桂皮醛、桂皮酸、丹皮酚、芍药苷、苦杏仁苷的质量控制方法。
【IPC分类】A61P15-06, A61P35-00, A61P15-08, G01N30-36, A61P15-00, A61K36-736
【公开号】CN104815025
【申请号】CN201510266656
【发明人】陈世忠, 金洁
【申请人】陈世忠
【公开日】2015年8月5日
【申请日】2015年5月25日
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种桂枝茯苓制剂的制备工艺和质量控制方法。
【背景技术】
[0002] 桂枝茯苓丸始载于汉代张仲景所著《金匮要略》中的名方，收于妇女妊娠病脉症并 治第二十，善治妇人宿有癥块，妊娠胎病，漏下不止，及淤血所致痛经闭经，癥结痞块，是著 名的活血化瘀方剂。桂枝茯苓丸由桂枝、茯苓、芍药、桃仁和丹皮组成，方中以桂枝为主药温 通血脉；茯苓健脾渗湿，扶正养胎；芍药养血和营；桃仁、丹皮消瘀血、破癥积，祛瘀生新；合 而为方，使攻坚而不伤正，消瘀而不伤阴，是活血化瘀，散结消，治疗妇科癥瘕的有效方剂。 近年来广泛用于治疗妇科子宫肌瘤、卵巢囊肿、子宫内膜异位症、陈旧性宫外孕、盆腔淤血 综合症、人工流产后恶露不尽、不孕滑胎等妇科常见病或多发病，临床效果良好。
[0003] 《金匮要略》中桂枝茯苓丸处方的制剂和服用方法为，取桂枝、茯苓、牡丹>、桃 仁 <去皮尖m芍药各等分。右五味，末之，炼蜜和丸，如兔屎大，每日食前服一丸，不知，加至三 丸。
[0004] 《中国药典》2010年版一部共收载两个桂枝茯苳制剂剂型，一为"桂枝茯苳丸"，处 方：桂枝、茯苓、牡丹皮、赤芍、桃仁各l〇〇g。一为"桂枝茯苓胶囊"，处方：桂枝、茯苓、牡丹 皮、白芍、桃仁各100g。除此之外，我国已经有40余个厂家生产"桂枝茯苓制剂"，涉及十多 个新剂型，影响范围广泛。
[0005] 《中国药典》2005年版和2010年版中均收载了"桂枝茯苓丸"，该制剂是采用传 统的塑制法制备的蜜丸制剂。该制剂以药材粉末入药，蜂密为粘合剂和成型剂，制备成蜜 丸，具有生产步骤多（药材净选，粉碎、炼蜜、和陀、制丸、塑料盒包装、挂蜡密封等工艺）、 生产周期长、辅料用量大、菌检指标难于控制、挥发性成分容易损失、贮存过程中容易吸 潮、易发霉或生虫，在使用过程中具有服用量大、服用携带不方便，且制剂崩解速度慢，药 效缓慢。为此人们对桂枝茯苓丸进行了大量的制剂工艺研宄，制备了多种制剂剂型，从很 大程度上解决了上述丸剂剂型的缺点，并对多种制剂工艺和剂型申请了国家专利。如申 请号为03121130. 5的发明涉及用桂枝茯苓丸的配方制成的中药片剂及其制备工艺，其 特点是提取桂枝茯苓组方中的有效物质后，加辅料干膏粉和微晶纤维素制成。申请号为 200510060814. 5的专利涉及一种桂枝茯苓滴丸及其制备方法，是由桂枝茯苓处方经过提 取后，加上基质滴制成的。申请号为200410069115. 2的专利公开了一种桂枝茯苓口腔崩 解片及其制备方法，其特征在于它是由中药桂枝、茯苓、牡丹皮、赤芍、桃仁中提取的有效部 位和药用辅料组成。申请号为200410041212. 0的专利公开了一种治疗妇科血瘀症疾病的 药物的制备方法，它以中草药桂枝、茯苓、牡丹皮、白芍和桃仁为原料，其特征在于，其步骤 是分别制取桂枝桃仁浸膏、茯苓浸膏、牡丹皮白芍浸膏、肉桂油环糊精包合物、丹皮酚 β -环糊精包合物，加入常规药用辅料制成。申请号为200710166287. 5的专利公开了一种 桂枝茯苓制剂的制备方法。用水提取药物，结合现代的浓缩、制粒工艺，可以制备成颗粒剂、 片剂、胶囊、散剂、滴丸剂等制剂形式。申请号为200810150311. 0的发明涉及一种桂枝茯 苓组合物，该组合物是用如下方法制备的：取等量的过10~24目筛的桂枝、茯苓、桃仁、赤 芍、牡丹皮五味药；桂枝、牡丹皮、赤芍、桃仁四味药进行混合萃取，收集萃取物，备用；将以 上药渣与茯苓混合进行醇提后再进行水提，合并滤液，浓缩得浸膏；此浸膏与上述萃取物合 并，混匀加工制成制剂。申请号为200510111422. 7的发明公开了一种桂枝茯苓溶液型固 体分散物，组分和重量含量包括：桂枝茯苓提取物5~40 %，增溶剂5~40 %，载体20~ 90 %。申请号为 200410004560. (K200410100866. 6、200410056834· (K200410100867. 0、 200410080321. 3、200510070657. 6等发明均公开了一种桂枝茯苓软胶囊及其制备方法。其 核心是将桂枝茯苓丸中的药物经过提取后与辅料混匀后制成软胶囊内容物，再制备成软胶 囊。申请号为200410040500. 4和200510200475. 6的发明同样是将桂枝茯苓丸经过提取制 备成分散片、软胶囊剂、微丸或滴丸等制剂。申请号为200610200120. 1的发明提供了一种 桂枝茯苓泡腾片及制备方法和质量控制方法。以上发明均是针对传统丸剂的缺点进行的研 宄，具有体积小、易携带、制剂稳定、易于服用等优点。
[0006] 但是，上述专利并没有充分考虑到中药复方治疗疾病的作用机理与有效成分间的 相互关系，研宄表明：桂枝茯苓制剂的临床疗效是处方中的多种有效成分共同作用的结果， 其中就包含有桂枝中的桂皮醛、2-甲氧基桂皮醛、桂皮酸、桂皮醇、香豆素及原儿茶酸等化 合物；丹皮中的丹皮酚、芍药甙、芍药苷元、丹皮甙、丹皮原甙、丹皮新甙、6-羟基香豆素等 化合物；桃仁的苦杏仁苷、野樱苷、脂肪酸甘油脂、蛋白质等成分；芍药中的芍药苷，羟基芍 药苷、芍药内酯苷，苯甲酰羟基芍药苷，苯甲酰芍药苷、芍药花苷、氧化芍药苷、芍药苷元，芍 药新苷、没食子酰芍药苷；茯苓中含有的三萜类成分，如羊毛留-8-烯型三萜；羊毛留_7， 9(11)-二烯型三萜；3,4_开环-羊毛甾_7,9(11)二烯型三萜以及多糖类成分。因此，如 果将桂枝茯苓方进行提取，随着提取方法和溶剂的不同，会造成相应有效成分的损失和减 少，相应的临床疗效就会明显降低。如日本学者濑户隆子通过桂枝茯苓丸中10种指标成分 (肉桂醛、肉桂酸、三油酸甘油醋、苦杏仁苷、茯苓酸、苯甲酸、苟药苷、没食子酰芍药苷、五没 食子酰葡萄糖及丹皮酚）进行定量，探讨了桂枝茯苓不同制剂剂型因制剂工艺的差异导致 有效成分的差异以及提取物制备过程中成分的变化。研宄结果表明：在煎剂中苦杏仁苷、芍 药苷及苯甲酸含量明显高于颗粒剂；而丹皮酚及肉桂醛等精油成分只有30%~40% ;而具 有抗凝血作用的三油酸甘油酯以及具有镇吐、抗炎作用的茯苓酸在煎剂中未被检出。因此， 认为煎剂与生药粉末的成分存在明显差异。进一步研宄表明：采用喷雾干燥法制备的浸膏， 则几乎不含丹皮酚及肉桂醛；苦杏仁苷及五没食子酰葡萄糖的相对含量分别减少至1/2和 1/3,其他成分亦有所减少。由于制剂中有效成分数量和含量的巨大差异，导致在临床上疗 效的明显不同，日本学者研宄认为：桂枝茯苓丸剂改善外周循环作用优于煎剂的作用，寺泽 等用桂枝茯苓丸煎剂及传统方法制备的丸剂治疗雷诺现象与手指屈曲受限时，仅丸剂有显 著效果。
[0007] 在对丸剂和煎剂中主要化学成分进行定量测定，结果发现丸剂中桂皮醛的含量是 煎剂的2倍，而芍药苷的含量丸剂是煎剂的6倍。在蜜丸与其他剂型比较后发现，蜜丸与空 气的接触面积减到最小，可以防止桃仁等所含的脂肪酸类物质在空气中氧化，可抑制肉桂 醛等挥发性成分的散逸，防止因潮湿而酶解。因此，与其他剂型相比，改善微循环服用蜜丸 效果最好。
[0008] 我们也比较了在我国已经上市的桂枝茯苓胶囊和桂枝茯苓丸中桂皮酸、桂皮醛、 丹皮酚的含量，结果表明：以每次服用量中3个成分的含量计算，蜜丸中桂皮酸的含量是胶 囊剂的4. 94倍，桂皮醛含量是胶囊剂的9. 48倍，丹皮酚的含量是胶囊剂的6. 23倍。说明 胶囊剂中有效成分含量明显低于蜜丸制剂，会严重地影响到制剂的临床疗效。
[0009]由于桂枝茯苓方的临床疗效作用机理仍不清楚，构效关系以及成分间相互作用的 机理仍不明确，因此，无根据的随意对原制剂进行工艺研宄、改变剂型都会严重地影响到药 物的有效性，是不可取的。
[0010]由于桂枝茯苓的传统蜜丸是以蜂蜜为黏合剂，采用塑制法制备成的大蜜丸制剂。 该制剂在生产过程中存在着生产步骤多（药材净选，粉碎、炼蜜、和陀、制丸、塑料盒包装、 挂蜡密封等工艺）、生产周期长、辅料用量大、菌检指标难于控制、挥发性成分容易损失；在 使用过程中具有服用量大、服用携带不方便；贮存过程中容易吸潮、发霉或生虫等问题。采 用水丸制备方法，可以有效减少服用剂量，但是水丸的制备方法是采用工艺流程为：原料的 准备一起模一泛制成型一盖面一干燥一选丸一包衣一打光一质量检查一包装。由于采用的 泛制成型的工艺，具有机械化程度低、工作劳动强度大、工艺过程长、卫生学指标难于控制、 崩解时限长、丸重差异难于控制、尾料多等问题，因此严重影响到该制剂的临床应用。在蜜 丸剂型中作为粘合剂的蜂蜜约占蜜丸重量的一半左右，因此我们在综合去除蜂蜜这一古老 粘合剂的基础上，采用现代粘合剂，并加入适量的高效崩解剂，摒弃水丸中传统泛制法的工 艺，采用现代压制法工艺成型，既有效地减少了药物的服用剂量、又有效的提高了制剂的崩 解时限、缩短生产周期、制剂丸重差异小，减少细菌的污染，同时采用薄膜包衣工艺以提高 制剂的稳定性。实践证明该生产工艺具有生产步骤少、生产周期短、生产机械化程度高、制 剂质量稳定、患者服用剂量小、服用方便等优点。为蜜丸的剂型改造提供了新的途径。
【发明内容】
[0011] 本发明的目的就是提供一种新的制备桂枝茯苓丸的方法和质量控制方法。本发 明在深入研宄了现有桂枝茯苓制剂的化学成分、作用机理、构效关系以及目前桂枝茯苓制 剂剂型存在的问题，提出了新的制剂技术，同时深入研宄了桂枝茯苓中有效成分的含量测 定方法，提出了系统的质量控制方法。本发明提供的制剂剂型，具有生产步骤少、生产周期 短、生产机械化程度高、制剂质量稳定、有效成分含量高、崩解迅速、生物利用度高、服用剂 量小、服用方便、菌检符合规定等优点。
[0012] 本发明桂枝茯苓制剂的制备方法的特点是全面保存桂枝茯苓中的有效成分，减少 有效成分的损失，因此本发明并不改变桂枝茯苓方的组成，即桂枝茯苓方中各药材（桂枝、 茯苓、桃仁、芍药及牡丹皮）的重量比为1 : 1 : 1 : 1 : 1。所述桂枝为樟科植物肉桂 Cinnamomum cassia Presl的干燥嫩枝或树皮，据考证唐代以前本草中所述的桂枝应为樟 科植物肉桂Cinnamomum cassia Presl的干燥树皮，唐代后本草中桂枝逐步演变成樟科植 物肉桂C. cassia Presl的干燥嫩枝，因此本发明的桂枝应包含了《中国药典》2005年版中 收载的"肉桂"和"桂枝"。所述茯苓为多孔茵科真菌茯苓Poria cocos (Schw.) Wolf的干 燥菌核。所述牡丹皮为毛莨科植物牡丹组Sect. Paeonia中的牡丹Paeonia suffrutico Andr.、四川牡丹P.szechuanica Fang.、野牡丹P.delavayi Franch.及其变种的干燥根 皮。所述苟药为毛莨科植物苟药组Sect. Paeonia中的苟药Paeonia lactiflora Pall·， 美_苟药 P.mairei L6vl.，白花苟药 Ρ· sterniana Fletcher.，草苟药 P.obovata Maxim.， 新疆苟药 P.sinjiangensis K.Y.Pang·，窄叶苟药 P.anomala Linn.和川苟药 P.veitchii Lynch.及其变种的干燥根。所述桃仁为蔷薇科植物桃Prunus persica(L.)Batsch或山桃 P. davidiana(Carr. )Franch.的干燥成熟种子。
[0013] 本发明具体制备工艺包括以下步骤，（1)取桂枝、茯苓、牡丹皮、芍药、桃仁药材，分 别拣去杂质和非药用部分，清洁，干燥，称量配齐。（2)取桂枝、茯苓、牡丹皮、赤芍、桃仁药 材，分别粉碎成粉末或混合粉碎成粉末，过筛，混合均匀，备用。（3)取上述药材粉末，加粘合 剂混合制成合适的软材，制粒，干燥，整粒，备用。（4)取制备好的颗粒，加入崩解剂和润滑剂 混合均匀，置压片机上，压制成球形丸子。（5)取步骤（4)压制成的药丸，包薄膜衣。
[0014] 进一步，所述桂枝为樟科植物肉桂Cinnamomum cassia Presl的干燥嫩枝或树皮， 即《中国药典》2005年版收载的"桂枝"和"肉桂"，优选桂枝。
[0015] 进一步，所述牡丹皮为毛莨科植物牡丹组Sect. Paeonia中的牡丹Paeonia suffrutico Andr.、四川牡丹P. szechuanica Fang.，野牡丹P. delavayi Franch.及其变种 的干燥根皮。优选牡丹的干燥根皮。
[0016] 进一步，所述苟药为毛莨科植物苟药组Sect. Paeonia中的苟药Paeonia lactiflora Pali.，美_苟药 P.mairei L6vl.，白花苟药 P. sterniana Fletcher.，草苟药 P.obovata Maxim·，新疆苟药 P.sinjiangensis K.Y.Pang·，窄叶苟药 P.anomala Linn.和 川芍药P.veitchii Lynch.及其变种的干燥根。优选芍药和川芍药的根皮。
[0017] 进一步，制备工艺步骤（2)所述的粉碎，也可将苦杏仁与芍药混合后粉碎，可以避 免苦杏仁粉碎和过筛的困难。
[0018] 进一步，制备工艺步骤（2)所述的粉末，为药学上所述粉末，包括本领域熟知的细 粉（粉末粒径< 180 μ m±7. 6 μ m)、最细粉（粉末粒径< 150 μ m±6. 6 μ m)、极细粉（粉末 粒径< 90 μm±4. 6 μm)或超微粉（粉末粒径< 25 μm)。优选最细粉、极细粉、超微粉；更 优选极细粉、超微粉。
[0019] 进一步，制备工艺步骤（3)所述的粘合剂为药学上可接受的载体，为本领域熟知 用于制备上述制剂的常用粘合剂，例如淀粉、变性淀粉、预凝胶淀粉、糊精、白糊精、麦芽糖 糊精；液体葡萄糖、菌核葡聚糖、葡萄糖、葡聚糖、蜂蜜、蔗糖、球形蔗糖、可压糖、糖果糖；桃 胶、麦芽糖醇、角叉菜胶、罗望子胶、果葡糖浆、转化糖、果糖、刺梧桐胶、明胶、黄原胶、愈创 木胶、槐豆胶；海藻酸、海藻酸钠、海藻酸钾、海藻酸铵、海藻酸钙；普鲁兰多糖、泊洛沙姆； 乙基甲基纤维素、乙基纤维素、粉状纤维素、羟乙基甲基纤维索、羟乙基纤维素、羟丙甲基纤 维素、羟丙基纤维素、微晶纤维素、蔗渣再生物、羧甲基纤维素钠、羧甲基纤维素钙；聚丙烯 酸钠、聚丙烯酸、聚维酮、乙烯吡咯烷酮-醋酸乙烯酯共聚物、磷酸淀粉钠等。也可选用桂枝 茯苓处方中茯苓作为粘合剂。优选淀粉、预凝胶淀粉、变性淀粉、糊精、明胶、角叉菜胶、桃 胶、黄原胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、羟乙基纤维物、聚 维酮、茯苓；更优选为预凝胶淀 粉、变性淀粉、糊精、黄原胶、羧甲基纤维素钠、羟乙基纤维素、聚维酮、茯苓。
[0020] 进一步，制备工艺步骤（4)中所述的崩解剂为药学上可接受的载体，为本领域熟 知用于制备上述制剂的常用崩解剂，例如变性淀粉、淀粉、淀粉甘醇酸钠、淀粉乙醇酸钠、预 凝胶淀粉、羧甲基淀粉钠、羟丙基淀粉、甲基纤维素、低取代羟丙基纤维素、羟乙基甲基纤维 素、微晶纤维素、粉状纤维素、羧甲基纤维素、羧甲基纤维素钙、甘氨酸、交联羧甲基纤维素 钠、交联聚维酮、刺梧桐胶、海藻酸、海藻酸钠、氧化硅、胶体二氧化硅、硅酸镁铝、微生物藻 酸盐、聚乙烯氧化偶氮酮、蔗糖脂肪酸酯、蔗糖单月桂酸酯、蔗糖单棕榈酸酯。优选淀粉、羧 甲基淀粉、羟丙基淀粉、交联聚维酮、低取代羟丙基纤维素、微晶纤维素。
[0021] 进一步，制备工艺步骤（4)中所述的润滑剂为药学上可接受的载体，为本领域熟 知用于制备上述制剂的常用润滑剂，例如二氧化硅、二十烷基硫酸钠、十二烷基硫酸镁、 十八烷基富马酸钠、虫白蜡、环聚二甲基硅氧烷、氢氧化铝、亮氨酸、脂肪酸聚甘油酯、胶性 二氧化硅、硅酸、硅酸钙、硅酸铝、硅酸铝钙、硅酸镁、硬脂酸钠、硬肥皂、硬脂酸钠、硬脂酸 钴、硬脂酸锌、硬脂酸镁、滑石粉、棕榈酸钠、聚乙二醇、蔗糖脂肪酸酯、蔗糖单月桂酸酯、蔗 糖单棕榈酸酯、磷酸钙。优选硬脂酸镁、滑石粉、聚乙二醇、二氧化硅。
[0022] 进一步，制备工艺步骤（5)中压制成的药丸，根据外观的需要，可以进行增圆工 艺，即，将压制好的药丸置泛丸锅中边翻滚边分次加入2~15%药物粉末，进行增圆，以达 到药丸圆整、丸面光洁。
[0023] 进一步，制备工艺步骤（5)所述的包衣材料为药学上可接受的载体，为本领域熟 知用于制备上述制剂的常用包薄膜衣材料，例如纤维素衍生物类、聚乙二醇类、丙烯酸及 甲基丙烯酸酯共聚物类、聚乙烯缩乙醛二乙胺乙酯及其它成膜材料。其中纤维素衍生物 类有羟丙基甲基纤维素（HPMC)、乙基纤维素（EC)、羟丙基纤维素（HPC)、甲基羟乙基纤维 素（MHEC)、甲基纤维素（MC)、羧甲基纤维素钠（CMC-N a)等。聚乙二醇类（PEG)分子量为 4000~8000。丙烯酸树脂类，如：丙烯酸树脂II、III，丙烯酸II号树脂，HPMC与丙烯酸 树脂II号混合物，胃溶丙烯酸树脂IV号，HPMC和丙烯酸树脂IV号混合物。丙烯酸及甲 基丙烯酸酯共聚物，聚乙烯醇缩乙醛二乙胺乙酯（AEA)，欧巴代以及天然高分子材料玉米朊 (zein)，合成的高分子材料聚乙烯吡咯烷酮（聚维酮、PVP)，聚乙烯-乙烯吡啶共聚体等薄 膜衣材料。
[0024] 本发明还提供了桂枝茯苓丸中有效成分的质量控制方法。即采用高效液相色谱法 对桂枝茯苓丸中桂皮醛、桂皮酸、丹皮酚、芍药苷、苦杏仁苷进行了含量测定。为有效控制桂 枝茯苓丸的控制方法提供了科学依据。具体方法是：
[0025] 1.桂枝茯苓丸中桂皮酸、桂皮醛和丹皮酚的含量测定：用十八烷基硅烷键合硅胶 为填充剂；乙腈-磷酸溶液为流动相；检测波长为200~400nm。取桂枝茯苓丸，除去包衣， 研成粉末，精密称取〇. lg，置IOml量瓶中，加50 %甲醇适量，超声提取30分钟，取出，放至 室温，补足溶剂至刻线，摇匀，用0. 45 μ m的微孔滤膜滤过，滤液作为供试品溶液。另精密称 取肉桂酸对照品、桂皮醛对照品、丹皮酚对照品，加50%甲醇溶解并制备成含每ml溶液含 桂皮酸10 μ g、桂皮醛50 μ g、丹皮酚100 μ g的溶液，做为对照品溶液。分别精密吸取供试 品溶液、对照品溶液各10 μ 1，在上述色谱条件下注入液相色谱仪，测定，即得。见附图1，2， 3,4〇
[0026] 进一步，乙腈-磷酸溶液组成的流动相中磷酸的浓度为0. 001~5%，优化浓度为 0. 01~1%，更优条件为0. 1~0. 5% ;检测波长为200~400nm，优化检测波长为250~ 350nm，更优条件为270~300nm，最优条件为桂皮酸检测波长270nm，桂皮醛和丹皮酚检测 波长280~290nm。
[0027] 2.桂枝茯苓丸中芍药苷含量测定：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-磷 酸流动相；检测波长为230nm ;柱温为20~50°C。取桂枝茯苓丸细粉I. 5g，精密称定，置 25ml具塞锥形瓶中，精密加入75%乙醇25ml，称重，超声30min，放冷，再称重，用75%乙醇 补足减失的重量，离心，取上清液IOml置热水浴中蒸干，精密加入2ml水溶解，过固相萃取 柱，用甲醇洗脱，收集洗脱液置IOml容量瓶中，定容。过0. 45 μ m微孔滤膜，收集续滤液即 得供试品溶液。精密称定芍药苷对照品，加甲醇溶解并制备成每ml含0. 5mg的溶液，即为 对照品溶液。分别精密吸取供试品溶液、对照品溶液各10 μ 1，在上述色谱条件下注入液相 色谱仪，测定，即得。见附图5,6。
[0028] 进一步，甲醇-磷酸组成的流动相中磷酸的浓度为0.001~5%，优化浓度为 0. 01~1 %，更优条件为0. 1~0. 5 % ;柱温为20~50 °C，优化温度为30~40 °C，更优温 度为30°C ;固相萃取柱为分析上常用的，包括反相固相萃取柱、硅胶正相固相萃取柱，氧化 铝固相萃取柱，大孔吸附树脂固相萃取柱，活性碳固相萃取柱，硅藻土固相萃取柱等。优化 固相萃取柱为反相固相萃取柱，硅胶正相固相萃取柱，氧化铝固相萃取柱，大孔吸附树脂固 相萃取柱。更优化固相萃取柱为反相固相萃取柱，氧化铝固相萃取柱，大孔吸附树脂固相萃 取柱。最优化固相萃取柱为氧化铝固相萃取柱。
[0029] 3.桂枝茯苓丸中苦杏仁苷含量测定：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相 为甲醇-乙腈-磷酸溶液系统；检测波长为200~250nm ;柱温为20~40°C。取桂枝茯苳 丸细粉3g，精密称定，置50ml具塞锥形瓶中，精密加入80%甲醇50ml，称重，放置一夜，称 重，用80%甲醇补足减失的重量，超声30min，放冷，再称重，用80%甲醇补足减失的重量， 离心，取上清液IOml置热水浴中蒸干，精密加入2ml水溶解，上固相萃取柱，用50%甲醇洗 脱，收集洗脱液置IOml容量瓶中，定容。过0. 45 μ m微孔滤膜，收集续滤液即得供试品溶液。 精密称定苦杏仁苷对照品，加甲醇制备成每ml含Img的溶液，即得对照品溶液。分别精密 吸取供试品溶液、对照品溶液各10 μ 1，在上述色谱条件下注入液相色谱仪，测定，即得。见 附图7,8。
[0030] 进一步，甲醇-乙腈-磷酸组成的流动相中磷酸的浓度为0. 001~5%，优化浓度 为0. 01~1 %，更优条件为0. 1~0. 5% ;柱温为20~50°C，优化温度为30~40°C，更优 温度为30°C ;固相萃取柱为分析上常用的，包括反相固相萃取柱、硅胶正相固相萃取柱，氧 化铝固相萃取柱，大孔吸附树脂固相萃取柱，活性碳固相萃取柱，硅藻土固相萃取柱等。优 化固相萃取柱为反相固相萃取柱，硅胶正相固相萃取柱，氧化铝固相萃取柱，大孔吸附树脂 固相萃取柱。更优化固相萃取柱为反相固相萃取柱，氧化铝固相萃取柱，大孔吸附树脂固相 萃取柱。最优化固相萃取柱为氧化铝固相萃取柱。
[0031] 采用本发明制备的桂枝茯苓丸具有具有生产步骤少、生产周期短、生产机械化程 度高、制剂质量稳 定、患者服用剂量小、服用方便、患者乐于接受等优点。采用本发明制备的 桂枝茯苓丸可以很好的保留制剂中的有效成分，为中药蜜丸的剂型改造提供了新的途径。
【具体实施方式】
[0032] 以下通过实施例来进一步描述本发明，应该理解的是，这些实施例仅用于例证的 目的，决不限制本发明的范围。
[0033] 实施例1.桂枝茯苓丸的制备
[0034] 1.处方：桂枝60g茯苳60g苟药60g牡丹皮60g桃仁60g
[0035] 2.制法：以上五味，桂枝、茯苓、牡丹皮分别粉碎成极细粉，过筛，混匀，备用；芍 药、桃仁混合粉碎成极细粉，过筛，备用；将上述粉末混合均匀，加5%淀粉浆湿法制粒，置 50°C烘箱中干燥，整粒，加入总重量10%乳糖和0. 3%硬脂酸镁混合均匀，压制成1000丸， 包薄膜衣，即得。
[0036] 3.性状：本品为粉红色薄膜衣丸剂，丸芯为浅褐白色，气特异，味甜。
[0037] 4.规格：0· 3g/ 丸。
[0038] 5.按上述生产工艺制备了三批样品，生产工艺和理化性质如下表
[0039] 3批生产工艺结果
[0040]
【主权项】
1. 一种桂枝茯苓丸的新的制备方法。其特征在于不同于塑制法、泛制法或滴制法等传 统丸剂制备方法不同，采用压制方法进行制备。 (1) 处方为：桂枝60g茯苳60g牡丹皮60g苟药60g桃仁60g (2) 取桂枝、茯苓、牡丹皮、芍药、桃仁药材，分别拣去杂质和非药用部分，清洁，干燥，称 量配齐。 (3) 取桂枝、茯苓、牡丹皮、赤芍、桃仁药材，分别粉碎成粉末或混合粉碎成粉末，过筛， 混合均匀，备用。 (4) 取上述药材粉末，加粘合剂混合制成合适的软材，制粒，干燥，整粒，备用。 (5) 取制备好的颗粒，加入崩解剂和润滑剂混合均匀，置压片机上，压制成球形丸子。 (6)取步骤（5)压制成的药丸，包薄膜衣。
2.权利要求1所述的桂枝为樟科植物肉桂Cinnamomum cassia Presl的干燥嫩枝或树 皮。 3?权利要求1所述的牡丹皮毛莨科植物牡丹组Sect. Paeonia中的牡丹Paeonia suffrutico Andr?、四川牡丹P. szechuanica Fang.，野牡丹P. delavayi Franch?及其变种 的干燥根皮。优选牡丹的干燥根皮。 4?权利要求1所述的芍药毛莨科植物芍药组Sect. Paeonia中的芍药Paeonia lactoflora Pali.，美_苟药P.mairei L6vl?，白花苟药P. sterniana Fletcher.，草苟药 P.obovata Maxim?，新疆苟药P.sinjiangensis K.Y.Pang?，窄叶苟药P.anomala Linn?和 川芍药P.veitchii Lynch.及其变种的干燥根。优选芍药和川芍药的根皮。
5. 权利要求1所述的粉末，为药学领域熟知的粉末，包括细粉（粉末粒径 < 180ym+7. 6ym)、最细粉（粉末粒径< 150ym±6. 6ym)、极细粉（粉末粒径 < 90ym± 4. 6ym)或超微粉（粉末粒径< 25ym)。优选最细粉、极细粉、超微粉；更优选 极细粉、超微粉。
6. 权利要求1所述的桂枝茯苓丸，其特征在于为药学领域熟知的常用粘合剂，也可选 用桂枝茯苓处方中茯苓作为粘合剂。更优选为预凝胶淀粉、变性淀粉、糊精、黄原胶、羧甲基 纤维素钠、羟乙基纤维素、聚维酮、茯苓。
7. 权利要求1所述的桂枝茯苓丸，其特征在于崩解剂为药学领域熟知的常用崩解剂， 优选淀粉、羧甲基淀粉、羟丙基淀粉、交联聚维酮、低取代羟丙基纤维素、微晶纤维素。
8. 权利要求1~6所述的桂枝茯苓丸的含量控制方法，其特征在于该方法中桂皮酸、桂 皮醛和丹皮酚的含量测定方法为：采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-磷酸溶液 为流动相；检测波长为200~400nm。供试品溶液的制备：取桂枝茯苓丸，除去包衣，研成粉 末，精密称取0.lg，置IOml量瓶中，加50%甲醇适量，超声提取30分钟，取出，放至室温，补 足溶剂至刻线，摇匀，用〇. 45ym的微孔滤膜滤过，即得。对照品溶液的制备：另精密称取肉 桂酸对照品、桂皮醛对照品、丹皮酚对照品，加50%甲醇溶解并制备成含每ml溶液含桂皮 酸10Ug、桂皮醛50yg、丹皮酚100yg的溶液，即得。测定法：分别精密吸取供试品溶液、 对照品溶液各10U1，在上述色谱条件下注入液相色谱仪，测定，即得。
9. 权利要求1~6所述的桂枝茯苓丸的含量控制方法，其特征在于该方法中芍药苷的 含量测定方法为：采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-磷酸流动相；检测波长为 230nm;柱温为20~50°C。供试品溶液的制备：取桂枝茯苓丸细粉I. 5g，精密称定，置25ml 具塞锥形瓶中，精密加入75 %乙醇25ml，称重，超声30min，放冷，再称重，用75 %乙醇补足 减失的重量，离心，取上清液IOml置热水浴中蒸干，精密加入2ml水溶解，过固相萃取柱，用 甲醇洗脱，收集洗脱液置IOml容量瓶中，定容。过0. 45ym微孔滤膜，收集续滤液即得供试 品溶液。对照品溶液的制备：精密称定芍药苷对照品，加甲醇溶解并制备成每ml含0. 5mg 的溶液，即为对照品溶液。测定法：分别精密吸取供试品溶液、对照品溶液各10U1，在上述 色谱条件下注入液相色谱仪，测定，即得。
10.权利要求1~6所述的桂枝茯苓丸的含量控制方法，其特征在于该方法中苦杏仁苷 的含量测定方法为：采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相为甲醇-乙腈-磷酸溶 液系统；检测波长为200~250nm;柱温为20~40°C。供试品溶液的制备：取桂枝茯苓丸细 粉3g，精密称定，置50ml具塞锥形瓶中，精密加入80%甲醇50ml，称重，放置一夜，称重，用 80%甲醇补足减失的重量，超声30min，放冷，再称重，用80%甲醇补足减失的重量，离心， 取上清液IOml置热水浴中蒸干，精密加入2ml水溶解，上固相萃取柱，用50%甲醇洗脱，收 集洗脱液置IOml容量瓶中，定容。过0.45um微孔滤膜，收集续滤液即得供试品溶液。对 照品溶液的制备：精密称定苦杏仁苷对照品，加甲醇制备成每ml含Img的溶液，即得对照品 溶液。测定法：分别精密吸取供试品溶液、对照品溶液各10U1，在上述色谱条件下注入液 相色谱仪，测定，即得。
【专利摘要】本发明提供了一种桂枝茯苓丸新的制备方法和质量控制方法。具有生产步骤少、生产周期短、生产机械化程度高、制剂质量稳定、有效成分含量高、崩解迅速、生物利用度高、服用剂量小、服用方便等优点。本发明还提供了桂枝茯苓丸中桂皮醛、桂皮酸、丹皮酚、芍药苷、苦杏仁苷的质量控制方法。
【IPC分类】A61P15-06, A61P35-00, A61P15-08, G01N30-36, A61P15-00, A61K36-736
【公开号】CN104815025
【申请号】CN201510266656
【发明人】陈世忠, 金洁
【申请人】陈世忠
【公开日】2015年8月5日
【申请日】2015年5月25日
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