龙葵萃取物在降低体脂肪、体重及治疗肥胖性肝炎中的用图
【技术领域】
[0001] 本发明是关于一种使用龙葵萃取物用于降低体脂肪、体重及治疗肥胖性脂肪肝病 的用途。
【背景技术】
[0002] 根据台湾肝病防治学术基金会调查,发现脂肪肝已是台湾国人普遍的肝脏问题, 其罹患比率高达40%。脂肪肝虽然不会对生命造成立即危害,不过却是健康的一个重要警 讯,若未实时治疗可能进而造成肝硬化、肝癌。调查亦显示,酗酒、肥胖及高血脂控制等都是 造成脂肪肝的危险因子,体重过重者,有76. 3%有脂肪肝。此外脂肪肝罹患率亦和肥胖具显 著相关性。
[0003] 肝病基金会曾经对九千个上班族做超音波检查,发现罹患脂肪肝的比例高达 43%,男性上班族更达49%。另有研究指出,台湾成人脂肪肝盛行率超过三成,每三至四个 成人就有一人有脂肪肝,远高于过去被视为"国病"的B型肝炎和C型肝炎。脂肪肝已经成 为台湾人最普遍的肝病。
[0004] 在临床上所谓的"脂肪肝"是指肝脏内所屯积的脂肪(主要为三酸甘油脂)的重量 超过全肝脏重量的百分之五,或是在肝组织切片中超果百分之十以上的肝细胞呈现脂肪空 泡变性的现象而谓之;而轻度脂肪肝是含脂肪变性的肝细胞少于33%,中度为介于33-66% 之间而重度则占66%。
[0005] 肥胖性脂肪肝病,从单纯脂肪肝、脂肪肝炎、脂肪纤维化到脂肪肝硬化都包含在 内。而病程中的脂肪变性及其所衍生成NASH的真正致病机转目前尚不明确,但近年来大量 的临床实验及动物实验研究所得的假说,得知以氧压力、胰岛素抗性以及脂质过氧化作用 (lipid peroxidation)导致肝脏发生弥漫性脂肪浸润、炎症反应、坏死、凋亡、再生损害以 及肝星状细胞活化等一系列病理连锁性免疫攻击反应。
[0006] 龙葵(Solanum nigrum)全草含甾类生物碱;爺边碱(澳洲爺边碱 Solamargine[C45H73015N])、爺解碱(澳洲爺碱 Solasonine[C45H73016N])、爺微碱 (Solavilline [C5tlH81O2tlN])、爺达碱(Solasodamine [C51H82O2tlN])、醣苷类、醣蛋白、多酚及阜 苷。龙葵在台湾民间俗称黑甜仔菜,属野生植物,为农田杂草,民间有取其幼苗,嫩叶炒熟当 菜食用,也有取其成熟的果实食用。龙葵在医疗上的功能,具有防止自由基所造成的DNA伤 害、保肝作用、保护肝脏免于四氯化碳诱导的肝损伤、诱导氮氧化物的产生。关于龙葵萃取 物的研究包含在TPA所刺激的乳癌细胞MCF-7中,能抑制细胞内转录因子NF-κ B和AP-I 与DNA结核的活性;在墨西哥的传统医学中已被视为镇定神经的药物;具有抑制小鼠肉瘤 S-180的活性;抑制乳癌细胞MCF-7的生长及诱导细胞凋亡;另外中国大陆亦有多项医学功 能的报导,包含用于肺癌、膀胱癌治疗、辅助肿瘤治疗及抑制肠癌乙烯转移酵素活性。
【发明内容】
[0007] 本发明是利用一种包含龙葵萃取物及其活性成分的组合物与高脂肪饲料合并喂 食小鼠10周,结果证实该组合物具有潜力发展为健康食品以降低高脂肪诱导的体重,体脂 肪及肥胖性肝炎。
[0008] 因此,本发明是一种组合物在制备降低体脂肪或降低体重的医药组合物中的用 途,其中该组合物包括:一龙葵萃取物;在一较佳实施例中,该医药组合物进一步用于治疗 及预防肥胖性肝炎,而该龙葵萃取物为龙葵叶水萃物,其食用萃取物的有效剂量为每日总 食量干重的〇. 5%~2% ;而该龙葵萃取物进一步包含选自由酚酸、类黄酮及多酚所组成的群 组的活性成分。
[0009] 在一具体实施例中,该组合物可由榨取法、萃取法或蒸馏法所获得;在一较佳实施 例中,本发明的龙葵萃取物是将龙葵叶干燥磨碎后,经溶解、过滤、离心及冷冻干燥方式获 得。
[0010] 在一具体实施例中,该组合物可降低肝功能指标,其中该肝功能指标包含丙胺酸 转氨酶、天冬氨酸氨基转移酶、碱性磷酸酶,另一方面,该组合物更具有降低脂质过氧化作 用、抗氧化或抑制发炎反应的功效。
[0011] 在一具体实施例中,该组合物可增加血清中高密度脂蛋白胆固醇、减少血清中低 密度胆固醇或降低血清中或肝脏中三酸甘油脂及总胆固醇含量,另一方面,该组合物具有 抑制因高脂肪所诱导的肝脏脂肪堆积及发炎蛋白的功效。
[0012] 在一具体实施例中,该组合物可包括一医药上可接受的载剂,在另一具体实施例 中,该组合物可用于制备药品、膳食补充物、食品、保健食品。
[0013] 本文中所使用的术语"医药上可接受的载剂"意指为了药物制造过程的需要、便 于药物剂量调配,或不同投药剂型等需求,根据习知医药组合技术将医药组合物与医药可 接受载剂混合,合适的医药可接受载剂为本领域技术人员所熟知,其中该载剂可有广范 的形式。某些医药可接受载剂的处方可见于由美国医药协会及英国医药协会(American Pharmaceutical Association and the Pharmaceutical Society of Great Britain)所出 版的医药赋形剂手册(The Hand Book of Pharmaceutical Excipients)中。举例而言,淀 齐?、胶囊、凝胶、溶液或悬浮液亦可包含下述成分:医药可接受赋形剂或载剂,其为无毒性、 惰性固体或半固体、稀释剂、封装物质(encapsulating material)、凝胶基剂或任何形式的 配方佐剂,例如:微晶纤维素 (Microcrystalline cellulose)、葡萄糖、脱脂奶粉、淀粉、娃 石、无水磷酸氢钙、磷酸镁、硬脂酸、硬脂酸镁,或人工香料等物质。
[0014] 本文中的用语"一"或"一种"是用以叙述本发明的组件及成分。此术语仅为了叙 述方便及给予本发明的基本观念。此叙述应被理解为包括一种或至少一种,且除非明显地 另有所指,表示单数时亦包括复数。
[0015] 本文中的用语"或"其意同"和/或"。
[0016] 为了让本发明的上述和其他目的、特征、和优点能更明显易懂,下文特举较佳实施 例,并配合所附图示,作详细说明如下。
【附图说明】
[0017] 图1显示HPLC分析龙葵萃取物的多酚类组成比例;高效液相色谱的九种标准多 酚色谱图;1:没食子酸(Gallic acid), 2:原儿茶酸(Protocatechuic acid), 3:儿茶素 (Catechin),4:没食子儿茶素没食子酸酯(Gallocatechin gallates),5:咖啡酸(Caffeic acid),6.表儿茶酌·(Epicatechin),7.对-香豆酸(P-counaric acid),8.芦丁(Rutin), 12:槲皮素(Quercetin),13:柚皮素(Naringenin)。
[0018]
图2显示喂食SWE的高脂肪老鼠的体重有明显下降的表现;此数据是从每组12 只C57BL/6小鼠的平均值+标准偏差;每组(不同符号代表:Control、HFD、HFD+0. 5%SWE、 HFD+1%SWE和HFD+2%SWE)平均值有显著的差别(p〈0. 05),#p〈0. 05HFD和对照组别有显著 差异;*p〈0. 05SWE和HFD组别有显著差异。
[0019] 图3显示SWE显著的降低高脂肪老鼠的肾周边脂肪、睾丸脂肪和体脂肪;#p〈0. 05 和HFD组别有显著差异;*p〈0. 05和对照组别有显著差异。
[0020] 图4显示SWE降低高脂肪诱导肥胖的小鼠肝脏及脂肪的重量;数据显示每组12只 C57BL/6小鼠的平均值+标准偏差;#p〈0. 05使用Student' s t检定和对照组别比较有显 著差异;*P〈〇. 05由ANOVA统计和HFD组别比较后有显著差异。
[0021] 图5显示SWE减少高脂肪诱导肥胖的小鼠的肝脂肪空泡;利用肝脏切片以苏木紫 &伊红染色;肝脏切片光显微图片分别为(A)Control、(B)HFD组、(C)HFD+0. 5%SWE组、(D) HFD+1%SWE组、(E)HFD+2%SWE组;(400X倍)黑色箭头指向白色肝脂肪空泡。
[0022] 图6显示SWE减少肥胖小鼠发炎蛋白表现量;肝脏切片光显微图片分别为(A) Control、(B) HFD 组、(C) HFD+0. 5%SWE 组、(D) HFD+1%SWE 组、(E) HFD+2%SWE 组;(400X 倍)图 6A为IL-6在肝脏过度表现量的结果;图6B为TNF- α在肝脏过度表现量的结果;黑色箭头 在图6Α代表1L-6表现位置而在图6Β代表TNF- α表现位置;白色箭头为发炎反应表现位 置。
[0023] 图7显示利用HFD诱导脂质过氧化作用及抑制抗氧化酵素,经SWE处理后有增加 抗氧化酵素的趋势;图六ABCD分别使用不同检测仪器如下:(A)MDA检测组、(B)超氧化物 岐化酶(SOD)检测、(C)过氧化氢酶(Catalase)活性检测、(D)麸胱甘肽过氧化酶(GSH-Px) 检测;数据显示每组12只C57BL/6小鼠的平均值+标准偏差;#p〈0. 05使用Student' s t 检定和对照组别比较有显著差异;*P〈〇. 05由ANOVA统计和HFD组别比较后有显著差异。
[0024] 图8显示SWE增加 AMPK磷酸化及降低TG合成的蛋白质表现量;蛋白质由西方墨 点法侦测;数据显示每组12只C57BL/6小鼠的平均值+标准偏差;#p〈0. 05使用Student's t检定和对照组别比较有显著差异;*p〈0. 05由ANOVA统计和HFD组别比较后有显著差异。
[0025] 图9显示SWE治疗降低胆固醇合成之蛋白质。蛋白质由西方墨点法侦测。数据显 示每组12只C57BL/6小鼠之平均值+标准偏差。#,p〈0. 05使用Student's t检定和对照 组别比较有显著差异;*P〈〇. 05由ANOVA统计和OA诱导组别比较后有显著差异。
[0026] 图10显示SWE可以增加 CPT-I及PPAR-α表现量;#ρ〈〇· 05使用Student's t检 定和对照组别比较有显著差异;*P〈〇. 05由ANOVA统计和OA诱导组别比较后有显著差异。
【具体实施方式】
[0027] 以下将以图示及详细说明清楚说明本发明的精神,如熟悉此技术人员在了解本发 明的实施例后,当可由本发明所教示的技术,加以改变及修饰,其并不脱离本发明的精神与 范围。
[0028] 实施例1
[0029] 龙葵(S. nigrum Linn.)为爺科爺属一年生草本植物,收集于台湾中部苗栗山区, 龙葵水萃取物(SWE)的制备方法为先将龙葵洗净并浸泡于水中30分钟后加热至100°C,连 续加热40分钟。将所得到的水萃取液过滤并浓缩,放置于水浴槽中加热90°C直到成为乳 状,随后放置烘箱中以70°C干燥。
[0030] SWE总多酚含量分析
[0031] 取没食子酸(gallic acid) (5mg/mL)以甲醇溶解后,分别制成不同浓度 (50, 100, 250, 500 μ g/mL)的标准品,各取20 μ L的不同浓度的标准品以二次水补体积至 I. 6mL,接着加入 2Ν Folin-Ciocalteu 酚试剂 100 μ L 后,再加入 20%Na2C03300 μ L 后混合 均匀,在40°C下反应40分钟,以725nm测吸光值,同时处理丨组以二次水代替标准品同样进 行加试剂与加热步骤的组别进行归零,以吸光值为结果绘制标准曲线。取20 μ L待测样品 (浓度为lmg/mL)以相同的方式进行处理,依回归方程式计算SWE中总多酚类的含量。
[0032] 如表1所示为SWE的主要成分。
[0033] 表1SWE的组成份
[0034]
【主权项】
1. 一种组合物在制备降低体脂肪或降低体重的医药组合物中的用途,其中该组合物包 括:龙葵萃取物。
2. 如权利要求1所述的用途,其中该医药组合物进一步用于治疗或预防肥胖性肝炎。
3. 如权利要求1所述的用途,其中该龙葵萃取物为龙葵叶水萃取物。
4. 如权利要求1所述的用途,其中该医药组合物中龙葵萃取物的重量百分比为 0? 5%-2%。
5. 如权利要求1所述的用途,其中该龙葵萃取物还包含选自多酚所组成的群组的活性 成分。
6. 如权利要求1所述的用途,所述组合物降低血液中丙氨酸转氨酶或天冬氨酸氨基转 移酶。
7. 如权利要求1所述的用途,所述组合物具有降低脂质、过氧化作用、抗氧化或抑制发 炎反应。
8. 如权利要求1所述的用途,所述组合物增加血清中高密度脂蛋白胆固醇、减少血清 中低密度胆固醇、降低血清中或肝脏中三酸甘油脂及总胆固醇含量。
9. 如权利要求1所述的用途,其中该医药组合物还包括一医药上可接受的载体。
10. 如权利要求1所述的用途,所述组合物用于制备药品、膳食补充物、食品或保健食 品。
【专利摘要】本发明提供一种包含龙葵萃取物的组合物在降低体重和降低体脂肪中的用途,其中该组合物进一步用于治疗或预防肥胖性肝炎。
【IPC分类】A61P3-06, A61P3-04, A61P1-16, A61K127-00, A61P39-06, A61P29-00, A23L1-30, A61K36-81
【公开号】CN104815058
【申请号】CN201410044103
【发明人】王朝钟
【申请人】中山医学大学
【公开日】2015年8月5日
【申请日】2014年1月30日